JP2007176810A

JP2007176810A - 美白用皮膚外用組成物

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Publication number: JP2007176810A
Application number: JP2005374032A
Authority: JP
Inventors: Satoshi Yomoda; 敏与茂田; Keiko Hayashi; 恵子林; Kaori Ishii; 香織石井; Keiko Nakajima; 慶子中島; Akiko Ono; 晶子大野; Hiromi Matsumoto; 裕美松本
Original assignee: Kanebo Seiyaku Ltd
Current assignee: Kracie Pharma Ltd
Priority date: 2005-12-27
Filing date: 2005-12-27
Publication date: 2007-07-12

Abstract

【課題】本発明は、皮膚メラノサイトやケラチノサイトから分泌されるＰＯＭＣの発現を抑制することにより、紫外線色素沈着や老人性色素斑部位のようにＰＯＭＣ発現が増加しているしみや、ストレスにより増悪するようなしみに対する治療に有効な美白用皮膚外用組成物を提供することを目的とする。
【解決手段】パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを有効成分として含有する美白用皮膚外用組成物は、皮膚メラノサイトやケラチノサイトから分泌されるプロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）の発現を抑制することにより、優れたしみに対する治療効果を示し、さらに、アスコルビン酸、ビタミンＥ、カンゾウ抽出物、トラネキサム酸やシステインなどの美白成分を組合せることにより、一層その効果が増強される。

Description

本発明は、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用組成物に関する。

美容上の観点から、しみやそばかすなど色素沈着に悩んでいる人が多い。
一般に「しみ」といわれているものには雀卵斑、肝斑、老人性色素斑や炎症後の色素沈着が含まれる。このような色素沈着は、紫外線照射、酸化的刺激、ホルモン異常、遺伝的要素などに大きく影響を受けていると言われており、その中でも紫外線照射の影響が最も大きいと考えられている。皮膚表面上で紫外線を受けると、組織内でフリーラジカル（活性酸素）が発生し、この活性酸素によって、細胞損傷や炎症が惹起されると、炎症系のケミカル・メディエーターを介して、色素沈着が惹起される。

このような色素沈着に関与するホルモンとしては、メラノサイト刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）や副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）などがあり、色素沈着を誘発することが知られている。

また、色素沈着を引き起こす原因としてストレスも無視できない。ストレスにより、メラノサイト刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）や副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）などメラノサイトを活性化してメラニン生成を促進するホルモンの分泌が促進され、色素沈着を誘発あるいは増強することが知られている。そのため、ストレス環境下で紫外線を浴びることは、色素沈着が顕著に強くなり、難治性のしみなどの色素沈着が生じやすくなる。

これらα−ＭＳＨ及びＡＣＴＨは同じ前駆体であるプロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）から生成され、ＰＯＭＣは皮膚のケラチノサイトやメラノサイトでも産生されていることが明らかにされており、ＰＯＭＣは切断されて、メラノサイトの活性化作用を有するＡＣＴＨやα−ＭＳＨが生成される。

そして、このようなＰＯＭＣのｍＲＮＡ発現量が、紫外線色素沈着や老人性色素斑部位で、正常部位と比較して増加していることが示されている（非特許文献１及び２参照）。さらにストレスを受けると皮膚でのＰＯＭＣのｍＲＮＡ発現量が増加していることが示されている（非特許文献３参照）。

一方、色素沈着の生成は本来、生体防御反応の一つと考えられている。すなわち、皮膚表面細胞上で遺伝情報であるＤＮＡを紫外線照射などから防御するために、表皮細胞に存在する色素細胞（メラノサイト）内のメラノソームと呼ばれるメラニン生成顆粒においてメラニン色素が産生される。このようにして生成したメラニン色素が隣接する細胞に拡散し、表皮細胞のケラチノサイトに蓄積され、皮膚の新陳代謝によりケラチノサイトは通常角質層となり、やがて皮膚から剥がれ落ちると考えられているが、必要以上に過剰にメラニン色素が産生された場合には、表皮内や真皮層に沈着して、その結果、しみとなって残存すると考えられている。

従来より、
このようなしみを防止することを目的として種々の方法が検討されてきた。

その一つとしては、紫外線照射などにより生じたフリーラジカルを消去し、またメラニン色素産生に関与する酵素のチロシナーゼを阻害することでメラニン色素産生自体を抑制
する方法が挙げられる。

上記作用を有する化合物としては、抗酸化作用のあるビタミンＣやビタミンＥが挙げられ、古くから内服や皮膚外用で用いられてきた。
また、上記以外のビタミンと色素沈着に関連する事項としては以下の内容が知られている。

まず、内服では、パントテン酸カルシウムが単独では紫外線照射後の色素沈着に対して効果がないが、ビタミンＣとの併用で色素沈着防止効果があることが知られている（例えば、非特許文献４参照。）。

また、リボフラビンはグルタチオン還元酵素の補酵素として重要であり、過酸化脂質の生成を抑制すること、またフリーラジカル捕捉剤として作用する可能性があること（例えば、非特許文献５参照。）、さらにリボフラビンを局所注射後に紫外線照射することが青色母斑の治療に有効であることが知られている（例えば、非特許文献６参照。）。

さらに、リボフラビン、塩酸ピリドキシン、ニコチン酸アミド及びパントテン酸カルシウムからなる群から選ばれる３種以上を組合せたビタミンＢ混合組成物の内服により、ＡＣＴＨの過剰分泌を抑えることにより色素沈着を防止するので、色素沈着が悪化するストレス環境下においても優れた美白効果があることが明らかになっている（特許文献１参照）。

一方、皮膚外用での作用として、ニコチン酸アミドが色素細胞から表皮細胞へのメラニンの転送を阻害することにより色素沈着を防止することが知られている（例えば、非特許文献７参照。）。

上記のビタミン類以外では皮膚外用の美白剤が主に用いられている。具体的には、メラニン色素産生自体を抑制するハイドロキノン誘導体（例えば、特許文献２参照。）、チロシナーゼ阻害による美白効果を期待したエラグ酸（例えば、非特許文献８参照。）、コウジ酸（例えば、特許文献３、４参照。）、アルブチン（例えば、特許文献５参照。）などが既に提案されている。これらは、高濃度になると紫外線防御に必要な正常なメラニン色素産生自体も抑制するので必ずしも好ましくはない。

しかしながら、皮膚細胞由来のＰＯＭＣ発現が亢進しているような色素沈着に対して、以上のような活性酸素の消去やチロシナーゼ阻害でメラニンを制御するだけでは、十分な効果が得られず、中断すると再発することが多い。また、ビタミンＢ混合組成物は内服で消化管から吸収されることにより、脳下垂体からのＡＣＴＨの分泌を抑えることでメラノサイトの活性化を抑えるものであり、しみ部位に皮膚外用で使用しても、脳下垂体を介したＡＣＴＨの調整は期待されるものではない。

特開２００４−２１７６２９号公報特開昭６３−２４６３１１号公報特公昭３２−８１００号公報特開平１−２７５５２４号公報特開昭６３−８３１４号公報ＳｕｚｕｋｉＩ．ら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ、１１８巻、７３〜７８頁、２００２年ＭｏｔｏｋａｗａＴ．ら、Ｊ．ＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ、３７巻、１２０〜１２３、２００５年ＦｌｉｎｔＭＳら、Ｓｔｒｅｓｓ、６巻、５９〜６２、２００３年麻生和雄ら、西日皮膚、４２巻、８８５頁、１９８０年食品大百科事典、朝倉書店、２００１年ＫｅｎｊｉＳａｔｏら、Ｊ．ＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ、２３巻、２２頁、２０００年Ｔ．Ｈａｋｏｚａｋｉら、ＢｒｉｔｉｓｈＪ．Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ、１４７巻、２０頁、２００２年立花新一ら、ＦｒａｇｒａｎｃｅＪ、９巻、３７頁、１９９７年

本発明の目的は、皮膚メラノサイトやケラチノサイトから分泌されるＰＯＭＣの発現を抑制することにより、紫外線色素沈着や老人性色素斑部位のようにＰＯＭＣ発現が増加しているしみや、ストレスにより増悪するようなしみに対する治療に有効な美白用皮膚外用組成物を提供するものである。

本発明者らの研究によれば、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドからなる美白用皮膚外用組成物が皮膚細胞のＰＯＭＣ発現を抑制し、しみに対する優れた治療効果を有することを見出し、本発明を完成させた。このＰＯＭＣ発現の抑制作用はビタミンＢ群を組合せることによりある程度の効力を示すが、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドの組合せは、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドのような２種類のビタミンＢ群の組合せ、あるいは塩酸ピリドキシン、ニコチン酸アミド及びリボフラビンのような３種類のビタミンＢ群の組合せと比較して、特に強い効果認められことを見出した。

すなわち、本発明は、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用組成物である。

本発明の本発明は、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用組成物は、皮膚メラノサイトやケラチノサイトから分泌されるＰＯＭＣの発現を抑制することにより、優れたしみに対する治療効果を示し、さらに、アスコルビン酸及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、カンゾウ抽出物、トラネキサム酸及びその誘導体、システイン、アルブチン、胎盤抽出物、グルタチオン、エラグ酸、カミツレ抽出液、グリチルリチン酸及びその誘導体、グリチルレチン酸及びその誘導体、リノール酸からなる群より選択される一種以上を組合せることにより、一層その効果が増強されることが示唆され、紫外線色素沈着や老人性色素斑部位のよ
うにＰＯＭＣ発現が増加しているしみや、ストレスにより増悪するようなしみに対する治療に効果が期待される。

以下、本発明について詳細に説明する。

本発明に用いられるパンテノールは、日本薬局方外医薬品規格２００２、じほう社、４５０−４５１頁に記載のものが挙げられる。

本発明に用いられる塩酸ピリドキシンは、第１４改正日本薬局方解説書（廣川書店）、Ｃ−８６６頁に記載のものが挙げられる。

本発明に用いられるニコチン酸アミドは、第１４改正日本薬局方解説書（廣川書店）、Ｃ−２１８８頁に記載のものが挙げられる。

本発明の美白用皮膚外用組成物は、水、アルコール、１，３−ブチレングリコールなどの溶媒の単独あるいは適宜混合した溶剤に溶解してそのまま使用し得るが、医薬品あるいは化粧品の製造に通常用いられる乳化剤、乳化安定化剤、ゲル化剤、湿潤剤、防腐剤、あるいはその他の添加剤を加えて、常法により容易に各種軟膏、ローション、Ｗ／Ｏ型クリーム、Ｏ／Ｗ型クリーム、液剤等の皮膚外用製剤とすることができる。また、化粧品類の形状として、液体、ペースト状などいろいろな粘度ものが挙げられ、化粧水、ローション、クリーム、ミルク、ゲル、パック、含浸シート、含浸マスク、ミストやスプレーなどとすることができる。

本発明のパンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用組成物における、組合せ各有効成分の配合割合は用いられる種類によっても若干異なるが、パンテノール０．００１〜３０重量部、好ましくは０．０１〜５重量部、塩酸ピリドキシンは０．００００１〜１０重量部、好ましくは０．０００１〜５重量部、ニコチン酸アミドは０．００１〜３０重量部、好ましくは０．０１〜５重量部である。

以下に試験例を挙げて本発明を詳細に説明する。パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドは市販のものを用いた。

以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する。

実施例１（組成物）
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド１ｇ、パンテノール０．３３ｇ、塩酸ピリドキシン０．３３ｇ、ニコチン酸アミド０．３３ｇを取り、精製水を加えて１００ｍＬとした。この液を孔径０．２μｍのフィルターを用いて無菌ろ過し、実施例１の組成物を得た。

実施例２（組成物）
パンテノール０．３３ｇ、塩酸ピリドキシン０．３３ｇ、ニコチン酸アミド０．３３ｇを取り、精製水を加えて１００ｍＬとした。この液を孔径０．２μｍのフィルターを用いて無菌ろ過し、実施例２の組成物を得た。

実施例３（美容液）
（１）エタノール８．０％
（２）パラオキシ安息香酸エステル０．１％
（３）ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル０．４％
（４）ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．８％
（５）メチルシクロポリシロキサン３．０％
（６）メチルフェニルポリシロキサン０．５％
（７）エデト酸二ナトリウム０．０２％
（８）クエン酸０．０５％
（９）クエン酸ナトリウム０．１％
（１０）濃グリセリン６．０％
（１１）ジプロピレングリコール１．０％
（１２）ソルビット液２．０％
（１３）カルボキシビニルポリマー０．６％
（１４）キサンタンガム０．１％
（１５）Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０％
（１６）ニコチン酸アミド１．０％
（１７）パンテノール１．０％
（１８）グリチルリチン酸ジカリウム１．０％
（１９）塩酸ピリドキシン０．１％
（２０）水酸化カリウム０．８％
（２１）精製水残余

（製造方法）
（１）〜（１４）、（１６）〜（１９）、全量が１００％となる精製水を混合したあと、（２０）を加えて中和し、ホモミキサーで均一に分散した後、（１５）の水溶液を加え、さらによく分散して実施例３の美容液を得た。

実施例４（クリーム）
（１）ベヘニルアルコール２．０％
（２）イソステアリン酸１．０％
（３）流動パラフィン４．０％
（４）ミリスチン酸イソセチル２．０％
（５）パルミチン酸セチル２．０％
（６）ミリスチン酸オクチルドデシル２．０％
（７）コレステロール０．４％
（８）水素添加大豆リン脂質０．５％
（９）パラオキシ安息香酸エステル０．２％
（１０）キサンタンガム０．１％
（１１）濃グリセリン３．０％
（１２）１，３−ブチレングリコール２．０％
（１３）ソルビット液５．０％
（１４）ジプロピレングリコール５．０％
（１５）エデト酸二ナトリウム０．１％
（１６）カルボキシビニルポリマー０．３％
（１７）ニコチン酸アミド１．０％
（１８）パンテノール１．０％
（１９）グリチルリチン酸ジカリウム１．０％
（２０）塩酸ピリドキシン０．１％
（２１）Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０％
（２２）水酸化カリウム０．６％
（２３）精製水残余

（製造方法）
油相として（１）〜（９）、水相として（１０）〜（１９）と全量が１００％となる精製水を、それぞれ８０℃まで加熱した後、混合しホモミキサーをかけて乳化する。冷却後（２２）を加えて中和し、（２０）の水溶液と、（２１）の水溶液を加えてさらに均一に分散して実施例４のクリームを得た。

実施例５（含浸シートマスク）
（１）ジプロピレングリコール１５．０％
（２）ポリオキシエチレンメチルグルコシド０．１％
（３）ポリエチレングリコール０．４％
（４）メチルパラベン０．１５％
（５）フェノキシエタノール０．３％
（６）ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル０．１％
（７）ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５％
（８）エデト酸二ナトリウム０．０２％
（９）アクリル酸メタクリル酸アルキル共重合体０．２％
（１０）カルボキシビニルポリマー０．１％
（１１）ポリアクリル酸ナトリウム０．１％
（１２）キサンタンガム０．２％
（１３）水酸化カリウム０．５％
（１４）Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０％
（１５）ニコチン酸アミド１．０％
（１６）パンテノール１．０％
（１７）塩酸ピリドキシン０．１％
（１８）精製水残余

（製造方法）
（１）〜（１２）、（１５）〜（１７）と、全量が１００％となる精製水を加え混合した後（１３）を加えて中和し、ホモミキサーで均一に分散した後、（１４）の水溶液を加え、さらによく分散して含浸用美容液を得た。この美容液を不織布に含浸させ、実施例５の含浸シートマスクを得た。含浸の方法等は公知の手段によることが出来る。また、不織布についても、従来、不織布含浸化粧料に用いられているものを任意に使用することができる。

比較例１（組成物）
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド１ｇを取り、精製水を加えて１００ｍＬとした。この液を孔径０．２μｍのフィルターを用いて無菌ろ過し、比較例１の組成物を得た。

比較例２（組成物）
リン酸リボフラビン０．３３ｇ、塩酸ピリドキシン０．３３ｇ、ニコチン酸アミド０．３３ｇを取り、精製水を加えて１００ｍＬとした。この液を孔径０．２μｍのフィルターを用いて無菌ろ過し、比較例２の組成物を得た。

比較例３（組成物）
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド１ｇ、パンテノール０．５ｇ、ニコチン酸アミド０．５ｇを取り、精製水を加えて１００ｍＬとした。この液を孔径０．２μｍのフィルターを用いて無菌ろ過し、比較例３の組成物を得た。

以下に試験例を挙げて本発明の効果をさらに詳細に説明する。
［試験例］
試験例１紫外線照射後におけるＰＯＭＣ発現抑制試験

（１）試験方法
ア）正常ヒト皮膚３次元モデルＭＥＬ−３００−Ａ（クラボウ社製）をＥＰＩ−１００−ＬＬＭＭ及びＥＰＩ−１００−ＭＮＮ（共にクラボウ社製）を培地として培養し、試験に供した。正常ヒト皮膚３次元モデルを６ウェルプレートに播種し、表１に示した試料を水で２倍希釈したものを５０μＬずつ細胞上部に直接添加してＥＰＩ−１００−ＬＬＭＭ培地で７２時間培養した。その後、ＥＰＩ−１００−ＭＮＮ培地に交換後、紫外線照射し、試料を添加した。この処理を４８時間ごとに計２回実施した。紫外線照射はＦＵＮＡ−ＵＶ−ＬＩＮＫＥＲ−ＦＳ−８００（フナコシ社製）を用いて中波長紫外線を２５ｍＪ照射した。その際、低波長紫外線を除去するＵＶＣカットフィルター（ＳＣＨＯＴＴフィルターＷＧ３２０）を使用した。
イ）培養終了後、細胞をＰＢＳ（−）にて洗浄し、１ｍＬ/ウェルのＩＳＯＧＥＮ（ニッポンジーン社製）を用いて細胞を破砕した。２００μＬ/ウェルのクロロホルムを添加して混和した後、遠心分離操作によって水層を回収し、２−プロパノールによりＲＮＡを沈殿させ、全ＲＮＡを得た。この全ＲＮＡを７０％エタノールで洗浄、風乾後ＤＥＰＣ水に溶解した。
ウ）上記ＲＮＡ５μｇについてＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ^TM２ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を用い、添付プロトコールに従ってＲＴ−ＰＣＲを実施した。このｃＤＮＡをＴａＫａＲａＥｘＴａｑ^TM及び２×ＧＣＢｕｆｆｅｒ１（共にタカラバイオ社製）を使用し、表３に示すプライマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社にて合成）を使用して増幅を行った。ＰＣＲ条件は９４℃２分の後、９５℃４５秒、６２℃３０秒、７２℃２０秒を３０サイクル行い、最後に７２℃７分とした。
エ）反応後、反応産物を１．５％アガロースゲルを用いて電気泳動して分離した。泳動ゲルを臭化エチジウムで染色し、トランスイルミネーターに乗せ、紫外線照射下写真撮影し、増幅したバンドの輝度を測定した。
また上記ｃＤＮＡ増幅サンプル１μＬをＤＮＡ７５００ＬａｂＣｈｉｐ（ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてＤＮＡ量の測定を行った。

電気泳動分画バンドの輝度と７５００ＬａｂＣｈｉｐにおける定量の両者において、ＰＯＭＣ測定値を、どの細胞でも同量が発現すると考えられるＧＡＰＤＨ(ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ)量で除すことにより規格化し、さらにその値を、対照を１００とした相対値で表した。試験は各３回行った。電気泳動写真及びＤＮＡ７５００ＬａｂＣｈｉｐを用いた結果を表1に示す。

（２）試験結果
結果を表３に示す。表３から明らかなように、本発明のパンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを含有する組成物はヒト皮膚細胞由来のＰＯＭＣのｍＲＮＡ発現量を抑制し、本発明の美白用皮膚外用組成物がＰＯＭＣの増加するようなしみに対する治療に有用であることが示された。

試験例２ヒトを対象としたしみに対する治療効果
（１）試験方法
本発明の実施例３の製剤について、皮膚外用による有効性を評価する目的で、しみが気になる成人女性１６名のモニターに１ヶ月連用塗布試験を行った。１ヶ月間毎日朝晩、本剤を顔面全体に使用し、試験開始０日、２週間後、４週間後の顔面皮膚について色彩色差計（ＣＲ−４００コニカミノルタセンシング社製）を用いて、Ｌ値（明度）を測定した。
測定部位は、モニター顔面部のしみのある部位（Ａ）、正常部位（Ｂ）の２ヶ所とし、（Ａ）と（Ｂ）の差である△Ｌ値を算出し、しみ部位と正常部位の明度の差について対応のあるｔ検定により評価した。

（２）試験結果
連用塗布試験の結果を下表、図１及び２に示す。本発明の実施例３の製剤を１ヶ月間使用することで、１ヶ月間の使用で、顔面のしみのある部分及びしみのない部分のいずれにおいても有意なＬ値の増加が認められた。また、両者間の差、すなわちしみの部位と正常部位の明度差（ΔＬ）は有意に減少し（Ｐ＜０．０１）、しみに対する治療効果、すなわちしみが目立たなくなるという有効性が確認された。

試験例２の「各部位のＬ値の変化」グラフ試験例２の「しみ部位と正常部位とのΔＬ値の変化」グラフ

Claims

パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミドを有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用組成物。
さらに、美白成分を含有することを特徴とする請求項１に記載の美白用皮膚外用組成物。
美白成分が、アスコルビン酸及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、カンゾウ抽出物、トラネキサム酸及びその誘導体、システイン、アルブチン、胎盤抽出物、グルタチオン、エラグ酸、カミツレ抽出液、グリチルリチン酸及びその誘導体、グリチルレチン酸及びその誘導体、リノール酸からなる群より選択される一種以上であることを特徴とする請求項２に記載の美白用皮膚外用組成物。
請求項１から３のいずれかに記載の組成物を含有する美白用皮膚外用製剤。
請求項１から３のいずれかに記載の組成物を含有する皮膚細胞由来プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）発現抑制剤。