KR20160137044A - 여드름 환자 치료용 식물추출물의 조성물 - Google Patents

Abstract

여드름 환자의 피부에 생성되는 과잉의 피지 세포를 억제하는 Hedgehog 전사 활성인자의 기능을 억제하는 식물 추출물 화장품 재료의 조성물에 관한 것이다.

Description

여드름 환자 치료용 식물추출물의 조성물 {A composition of plant extract for treating acne patients}

여드름 환자의 피부에 생성되는 과잉의 피지 세포를 억제하는 Hedgehog 전사 활성인자의 기능을 억제하는 식물 추출물 화장품 재료의 조성물에 관한 것이다.

여드름은 지속적인 치료가 요구되는 만성질환으로 증상이 나타나는데 장기간의 연장된 과정을 거치며 재발하거나 대체되는 특징적인 징후를 나타내는 질환이다. 현재 피부 트러블 중에서 피지 분비를 억제하는 가장 효과적인 여드름 치료제로 비타민A 유도체인 13-retinoic 산(isoretinoin)이 사용되고 있으나 여러 심각한 부작용 때문에 미국에서도 그 사용이 제한되고 있어 대체 치료제의 개발이 시급한 실정이다.

체내 실험에서 여러 가지 현상이 환자의 얼굴 여드름 부종성 상처에서 일어나고 있다. 부종성 사이토카인은 해당하는 수용체를 통하여 작동하고 AP-1 같은 전사 활성물질을 활성화 시키는 신호 경로를 증폭시킴으로 가능하다. 이렇게 활성화된 AP-1은 여드름의 생성의 주요 효소인 MMP-9의 유전자의 작동을 유발하여 효소의 생성을 증가시키고, MMP-9 같은 효소는 피부 표피의 단백질을 붕괴시키고 변형시키게 된다. 또 감염된 세균 p. acne가 염증세포의 세포막 수용체를 활성화 시켜 염증 유발에 여향을 주는 과정에 관여하는 안드로젠 합성에 관여하는 효소들의 활성을 조절 할 필요가 있다. 또 이 효소들은 사람의 피지선에서 발현에 영향을 주고, 글루코코티코이드 유도 지질합성의 조절에 관여한다고 알려지고 있어서 여드름의 근본적인 치유의 조절에 필수적인 효소이다.

피지가 굳어지는 이유는 세균 p.acne의 지방산대사와 연관성이 있다. 그래서 p.acne 유전체는 무엇을 만드는가? 사람의 것과 다른 효소는 무엇인가? 피부 표피지질의 구성 성분이나 지질대사 효소를 비교 연구해 볼 필요가 있다. 임상적으로 Spot 처치에서 Ceramide와 여드름과 관련하여 항산화제가 중요하다. 여드름에서는 항산화기능이 감소되고 지질이 산화되어 있지 않나 의심된다. 특정 지방산의 증가로 피지가 고체처럼 뭉치는 현상이 있으며, 특히 여드름 각질에서 linoleic acid가 감소한다. 피부 표피에 가장 많은 지방산 -3는 항염증 효과가 있으나 오히려 -6는 염증기능 활성화에 관여한다. -linolenic acid는 각질층 -3 면역조절체로 기능하고 전사활성인자, 당조절, insulin 조절에 관여한다. 조직의 불포화지방산은 -3 > -6 > -9 순서적으로 선호하고 여드름 피부에는 -3와 -6가 부족한 상태이다. 피부에서 -3는 생선 냄새가 나며 ceramide로 배출하기 때문에 화장품으로 보충해주면 좋다. 피부의 건성 또는 지성은 지질성분의 양뿐만 아니라 어떤 성분의 지질을 보충해야 할지가 중요하다.

체내에서 피부의 각질화에서 hedgehog 신호를 막기도 하고 자극하기도 하는 신호체계를 transgene을 사용하여 피지선세포의 발전에 관여하는 hedgehog 경로의 관여의 가능성을 조사하였다. Hedgehog경로의 방해는 선택적으로 피지세포의 발전(development)을 억제하는 반면에 Hedgehog경로는 피지선의 크기나 수를 놀랍게 증가 시켰다. 정규 장소를 벗어난 피지선은 피지세포 분화의 분자marker를 발현하고 기능적이 되며 그들의 내용물을 모발의 사이로 배출하는 대신 피부표면으로 직접 배출하였다.

그래서 hedgehog경로는 피지세포의 운명을 결정하는 중요한 역할을 하고 여드름 같은 비정상의 피지선의 기능과 관련하여 치료를 위한 가능한 목표가 된다. 머리털 소낭은 그들의 결합을 위해서 Wnt와 Hedgehog의 두 경로를 사용한다. Wnt 신호는 소낭의 초기상태를 조절하고 머리털의 cycling 동안 소낭성장의 재활성에 기여하면, 한편 Hedgehog신호는 보충하는 역할을 가진다. 머리털 소낭의 성장성 팽창에 필수적인 반면에, 소낭의 초기화나 머리털 계통분화에는 필요하지 않다. 연구자들은 피부를 침범하는 각질화 세포에서 hedgehog신호의 방해가 선택적으로 피지세포의 형성을 방해한다. 반대로 비정규적인 hedgehog경로의 활성화는 피지세포의 발전을 증강시킨다.

연구자들이 발견한 사실은 피지세포의 운명의 결정에서 hedgehog신호가 강력한 의미를 가지고 있고 hedgehog경로의 변조는 피지선의 기능을 조절하는데 새로운 수단이 된다. SHH(sonic hedgehog)는 발전하는 모낭의 각질화 세포에서 만들어지고 분비된다. 소낭의 상피와 중장(mesenchyme)에서 신호를 활성화한다. Gli단백질은 hedgehog가족의 전사적인 감음을 중계하는 역할을 한다. 연구결과 상대 원조세포로부터 피지세포의 발전과정에 hedgehog신호가 중요함을 강조하게 되었다. 비록 피지선이 정상적으로 머리털 소낭으로부터 유래되지만 정규장소를 벗어난 hedgehog신호가 머리털 피부표피나 머리 털 없는 피부에서 피지세포의 형성을 인도하는 것으로 보인다. 피지세포의 발전에서 역할에 반해서 SNN은 머리털 계통의 말단 분화에는 필요하지 않다. 이는 Wnt신호경로에 의해서 조절된다. 뿐만 아니라 지배적으로 부정적인 Lef1을 사용한 Wnt목표 유전자를 방해하면 머리털 계통의 분화는 반대하면서 피지세포의 발전을 증강한다.

Hedgehog 경로는 피지선세포의 출생 후의 기능에 역할을 한다. 여드름의 발전에 여러 가지 인자가 기여하지만 중요한 증거로 지질을 만드는 피지선이 병리현상과 질환에 중심적인 역할을 한다. Hedgehog 신호를 방해하면 피지선의 활성을 줄이고 결국에 여드름을 호전시키는 새로운 수단을 준비할 수 있게 될 것이다. 이러한 가능성을 가지고 여드름 치료에 retinoid가 피지세포의 분화를 억제하는데 사용되고 있다. Gli의 전사활성이 배양된 각질화 세포에서 감소되고 있음도 보여주고 있다.

앞으로 여드름 연구의 전망을 보면 여드름은 선천적이고, 적응성 면역체계에 파생되는 문제점을 찾아내어 원래의 상태로 돌려주고, 근본적으로 피지의 생성을 막는 전사활성단계에서 시도되어야 하며, 염증을 완화시키는 방법으로 치료되어야 한다. 따라서 치료의 목표는 그동안 오래 문제되었던 질환이 항상 다시 발생되는 것을 방지하고, 치료 후에는 여드름 흉터, 염증 후의 심한 색소증을 최소화 하는 해결해야 할 과제가 있다.

여드름 치료에는 치료 후에도 얼굴에 심각한 피부손상을 남기고 고농도의 색소침착이나 회귀성을 극복해야 되는 문제점을 안고 있다. 여드름의 병리학적인 원인을 살펴보면, 피지선에 의한 피지 과잉생성, p.acne세균에 의한 여포의 생성, 그리고 케라틴화 과정의 변형과 피부의 부종생성에 의한 중계체의 배출 등의 요인으로 나타나고 있다.

본 발명에서는 여드름 생성기작을 근거로 여드름 증상의 가장 큰 원인이 되는 피지생성을 감소시키는 전사활성 억제제를 탐색하고, 현재 시판되는 치료제와는 달리 치료 후 피부 손상이 최소화 되고 색소 침착이 없으며 또 재발하지 않는 치료효과를 갖는 치료제의 성분을 개발하였다.

본 발명이 해결하고자 하는 기술적 과제는 여드름 환자의 피부 염증 완화용 식물추출물 조성물을 제공하는 것이다.

Hedgehog 전사활성 억제제를 식물 추출물에서 탐색하는 방법은 배양피지세포(SZ95)에서 추출된 mammalian hedgehog의 발현의 정도를 억제하는 식물추출물을 사용했을 때 정상과 비교해서 나타나는 차이를 알아보기 위하여 단백질을 분리하여 western blotting을 통하여 anti IHH항체를 사용하여 확인 하였다.

본 발명은 방풍, 지황, 백선피, 질려자의 추출물에서 유효성분을 포함하는 여드름 완화용 식물추출 조성물을 제공한다.

방풍과 지황은 공지의 방법 즉, 물과 에탄올을 혼합한 용매 등을 이용하여, 식물로부터 유효성분을 추출하는 공지의 수증기증류법 등으로 추출한 것을 사용할 수 있다.

백선피는 공지의 방법 즉, 지황으로부터 공지의 수증기 증류법 등으로 추출한 추출물에서 공지의 유수분리법 등으로 분리한 오일 상 물질을 의미한다.

질려자는 공지의 방법 즉 질려자로부터 수증기증류법등으로 추출한 추출물에서 공지의 유수분분리법 등으로 획득한 오일상의 물질을 의미한다.

본 발명의 여드름 완화용 식물추출 조성물은 총중량에 대하여 목방풍 추출물 10~15%, 지황 추출물 10~15%, 백선피 추출물 10~15%, 질려자 추출물 10~15% 일 수 있다. 상기 중량범위에서 여드름 완화에 효과가 탁월하며 사용자의 만족도가 증가한다.

위 추출물 오일이 포함된 것은 혼합하기 위해 에탄올 등의 용매를 사용할 수 있다.

아토피 피부염 완화에 사용하기 위한 발명의 추출물의 약학적 투여 형태는 외용제에 한정된다. 즉, 주사제나 경구 투여형 제제는 제외된다. 바람직하게는 스프레이제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용제 등을 들 수 있다.

본 발명의 식물추출 조성물은 여드름 증상 완화효과가 뛰어나며, 사용자의 만족도가 크다는 장점을 갖는다.

이하, 본 발명에 대해서 제제예, 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나, 이는 본 발명을 설명하기 위한 것이며, 본 발명이 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.

<제제예 1>

비교제제예 1~4에서 준비된 방풍, 지황, 백선피, 질려자 추출물을 표 1에 기재된 조성으로, 비교제제예 1~4의 연고제 제조 방식으로 연고제를 제조하였다.

구분	방풍	지황	백선피	질려자	바세린
비교제제예 1	5	5	5	5	80
비교제제예 2	7.5	7.5	7.5	7.5	70
비교제제예 3	10	10	10	10	60
비교제제예 4	12.5	12.5	12.5	12.5	50
제제예 1	11	11	11	11	56

<실시예 1> 여드름 완화 효과 확인

여드름 완화 효과 확인시험을 이하의 방법으로 하였다.

성인 여드름 환자 중에서 그 정도가 육안으로 구분되는 환자를 모집하여 얼굴의 단위 면적 당 일정 개수 이상의 여드름이 있는 상태의 환자 총 20명의 사람을 시험대상으로 선정하였으며, 한 군당 5명씩 총 4개 군으로 나누었다. 각각의 군에 대하여, 비교제제예 1 내지 4와 제제예 1의 연고제를 시료로 사용하였다. 피검자 각자에게 연고제를 나누어 주고 매일 저녁 좌측얼굴에는 비교제제예1 우측 얼굴에는 제제예를 도포 후 수면을 취하게 하였다. 경과는 하루, 일주일, 한 달 단위로 피검자의 상태를 파악 하였다. 사용량은 각각 0.1~0.3ml의 양을 도포하도록 하였다. 여드름의 개수가 처음 검사일 대비 30% 이상 줄은 환자 수만 유효하다고 평가하였다.

구분	하루 후 유효인원/피검인원 (비율%)	일주일 후 유효인원/피검인원 (비율%)	한 달 후 유효인원/피검인원 (비율%)
비교제제예 1	0/5 (0%)	0/5 (0%)	0/5 (0%)
비교제제예 2	0/5 (0%)	1/5 (20%)	1/5 (20%)
비교제제예 3	0/5 (0%)	1/5 (20%)	3/5 (60%)
비교제제예 4	0/5 (0%)	1/5 (20%)	2/5 (40%)
제제예 1	0/20 (0%)	5/20 (25%)	13/20 (65%)

상기 표 2에 나타난 시험의 결과는 다음과 같은 사실을 나타낸다. 첫째, 추출물을 적게 포함하는 비교제제예 1, 2는 여드름 완화에 효과가 크지 않음을 나타낸다. 둘째, 시간의 경과는 여드름에 기인하는 증상 완화의 깊은 관련이 있음을 알 수 있다. 마지막으로 방충, 지황, 백선피, 질려자의 추출물의 혼합제제가 여드름 증상 완화에 60% 이상 효과가 있음을 나타내고 있다.

따라서, 본 발명의 조성물의 여드름 완화 효과가 뛰어남을 알 수 있다.

<시험예 1> 피부자극성 확인 인체피부첩포시험

여드름 완화용 식물추출 조성물의 피부자극성의 정도를 확인하기 위해 인체 피부첩포 시험을 하였다. 과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 피검자 20명을 대상으로 하였다. 피검자의 연령 분포는 20-35세이며, 평균 연령은 27세였다.

시험방법은 아래와 같다. 우선 시험부위를 70% 에틸알코올로 닦아낸 뒤 건조시켰다. 실시예 2의 조성물 3종 각각을 종이 디스크에 40씩 묻혀서, 이를 스켄포어 테잎(scanpore tape)으로 등 부위의 피부에 고정시키고, 24시간 후 첩포를 떼어낸 표시펜으로 시험부위를 표시하였다. 그 뒤 4시간 후 결과를 육안으로 판정하였다. 결과는 홍반과 부종의 정도에 따라 수치로 나타내며, 판정기준은 국제접촉피부염 연구위원회 (International Contact Dermatitis Research Group;ICDRG)의 기준에 따랐다.(Wooding et al. 1967; Rietschell, 1982; Fischer & Maibach, 1984; Aberer et al, 1993). (피부반응평가기준: 0점(무반응), 0.5점(희미한 또는 가벼운 홍반), 1점(경계가 뚜력하나 약한 홍반, 부종 및 구진), 2점(뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포), 3점(심한 홍반 및 대수포, 가피형성))

하기 수학식에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하고 그 결과를 표에 나타내었다.

수학식 1

평균 피부 반응도(mean score)=(0점무반응 인원수 + 0.5점해당반응인원수 + 1점해당반응인원수 + 2점해당반응인원수 + 3점해당반응인원수)/최대점수(3)총피검자수(20))100

	평균피부반응도(n=10)
비교제제예 1	33.3
비교제제예 4	0
제제예 1	0

표 3에서 보는 바와 같이 조성물에 추출물을 일정성분 이상 포함하는 제제예1과 비교제제예 4는 피부자극성이 거의 없는 것으로 나타난 반면, 추출물을 적게 포함하는 비교제제예 1의 경우 도포부위의 경계가 확연하게 나타나고 약한 홍반이 관찰되었다. 결과적으로, 조성물에 의한 피부자극을 피하기 위해선 성분이 일정량 이상 포함되어야한다는 사실을 확인하였다.

Claims (2)

1. 방풍, 지황, 백선피, 질려자의 추출물에서 얻은 효소억제제의 제재로 여드름 완화에 효과를 갖는 추출조성물
   
2. 제1항에 있어서 상기 조성물의 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 클렌징, 파운데이션 중에서 선택된 제형을 갖는 식물추출조성물