KR102542032B1 - 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102542032B1
KR102542032B1 KR1020220184228A KR20220184228A KR102542032B1 KR 102542032 B1 KR102542032 B1 KR 102542032B1 KR 1020220184228 A KR1020220184228 A KR 1020220184228A KR 20220184228 A KR20220184228 A KR 20220184228A KR 102542032 B1 KR102542032 B1 KR 102542032B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cosmetic composition
extract
skin
cherry tree
yoshino cherry
Prior art date
Application number
KR1020220184228A
Other languages
English (en)
Inventor
심현우
최원영
이정노
박성민
Original Assignee
주식회사 코씨드바이오팜
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 코씨드바이오팜 filed Critical 주식회사 코씨드바이오팜
Priority to KR1020220184228A priority Critical patent/KR102542032B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102542032B1 publication Critical patent/KR102542032B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/005Preparations for sensitive skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/008Preparations for oily skin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 벚나무 에탄올 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 모공 수축, 피지 분비 억제, 자극 완화 및 피부 가려움증 개선에 뛰어난 효과를 발휘한다.

Description

왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 {Cosmetic Composition for Skin Improvement with Prunus yedoensis Extract as Active Ingredient}
본 발명은 왕벚나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 왕벚나무 추출물을 함유하는 모공 수축, 피지 분비 억제, 피부 자극 완화 및 피부 가려움증 개선에 효과적인 화장료 조성물에 관한 것이다.
모공은 피지선에서 생산되는 피지(sebum)를 운반하는 모낭관(pilosebaceous)에 연결되어 있는 좁은 관으로, 미세한 털이 자라나는 구멍이다. 조직학적으로 털피지샘 또는 아포크린샘의 개구부를 뜻하며 피지 및 땀 배출, 유수분막을 형성하여 피부장벽 형성, 수분 증발 억제, 외부 미생물 및 유해 물질 방어작용 및 살균 작용 등을 수행한다.
모공은 수많은 내적·외적 요인들에 의해 영향을 받게 되는데, 대표적으로 피지의 과잉 분비, 피부의 노화, 모공 속 노폐물의 축적 등이 있다. 피지선이 과도하게 활성화되면, 피지의 양이 늘어나면서 모공이 늘어나게 되는 원인이 되며, 피지 분비는 유전적으로 피지샘의 크기가 크거나 피지의 생성 및 분비에 관여하는 안드로겐 호르몬에 의해 영향을 받게 된다.
과량 분비된 안드로겐 호르몬은 비정상적인 피지 분비를 유도하고 피지가 피부 위에서 산화되어 각질이 제때 탈락하지 못하게 된다. 두꺼워진 모낭 벽의 각질층은 모공을 막아 피지가 배출되지 못하게 됨으로써 모공 속에 피지와 각질의 혼합물이 화이트헤드, 블랙헤드 등의 면포나 구진 등의 염증을 유발하기도 한다. 이 외에도 성별, 나이, 스트레스, 여드름, 잘못된 식습관 및 생활 습관 등이 모공 확장의 원인이 될 수 있다.
여드름은 피지선을 따라 얼굴, 등, 가슴 등 신체 여러 부위에 발생되는 만성피부 질환으로 큐티박테리움 아크네스(Cutibacterium acnes, C. acnes)의 증식에 의한 염증 유발, 남성호르몬에 의한 피지 분비의 증가, 유전적 요인 및 환경적 요인 등 다양한 원인에 의해 발생한다. 여드름은 특히 호르몬 분비가 왕성한 사춘기에 많이 발생하여 면포, 구진, 농포 등의 변병이 생기는 것을 특징으로 하며, 20대 초중반 이후 호르몬 분비가 감소하는 시기 여드름이 줄어들거나 사라지지만 현재 스트레스, 잘못된 식습관 등 여러 원인에 의해 성인 여드름이 증가하고 있다.
민감성 피부는 외부의 자극이나 알레르기성 물질 등 환경 변화에 정상 피부와 비교하여 더 민감하게 반응하여 자극반응이나 피부염이 잘 발생하는 피부를 말한다. 민감성 피부의 원인은 매우 다양하고 복합적인데, 유전적 요인에 의해 선천적으로 예민한 피부를 가지고 있거나, 유해 물질이나 스트레스, 기후, 계절변화, 작업환경과 같은 외부적 요인에 의해서 발생되게 되고, 홍반, 피부 건조, 따가움, 가려움증, 화끈거림 및 염증 등의 증상이 나타난다.
민감성 피부를 유발하는 원인으로는 크게 신경학적 과도한 반응, 면역 반응의 증가 및 피부 장벽의 손상으로 나누어진다. 민감성 피부 환자의 경우 정상 피부와 비교하여 신경 감각을 전달하는 신호가 과도하게 활성화되어 작은 자극에도 과도하게 신경학적 반응을 유발한다고 알려져 있다. 최근 외부 자극에 의해 통증 및 다양한 감각을 전달하는 일시적 자극 수용체인 TRP (transient receptor potential) 채널의 활성화 억제를 통해 민감성 피부를 개선할 수 있다는 연구가 보고되고 있다.
TRP 채널은 비선택적인 양이온 채널로 각종 화학적, 물리적 및 외부 자극에 의한 감각 조절을 담당한다. TRP 채널 중에서 캡사이신 수용체로 알려진 TRPV1 (transient receptor potential vanilloid type 1)은 화끈거리는 열 통각 유발 외에 외부 자극에 대해 반응하여 스스로를 보호하는 역할을 한다. TRPV1이 과도하게 활성화될 경우 열감, 가려움과 같은 소양감이 증가하여 피부에 민감함이 유발된다.
민감성 피부의 가장 흔한 증상인 가려움증은 긁고 싶어 하는 불쾌감을 유발하는 피부의 상태를 일컫는 것으로 접촉, 온도변화, 스트레스 등의 외부 자극이나 화학적, 물리적 및 유해 자극으로도 유발될 수 있다. 가려움증의 신호전달과정에는 단백질분해효소-활성화 수용체(proteinase-activated receptor, PAR)가 중요한 역할을 한다는 것이 밝혀졌다. PAR-2는 비만세포, 각질 형성세포 및 신경세포에 존재하는 G-단백질 결합수용체로, PAR-2의 발현이 증가되고 활성화될 경우 세포 내의 IκB kinase 및 nuclear factor kappa B의 기전을 활성화시켜 염증 반응 및 가려움증을 유발한다.
한편, 확장된 모공을 개선시키기 위해 화장품, 팩 및 피부과 시술 등의 다양한 방법이 이용되고 있으며, 여드름 치료를 위해서는 일반적으로 경미한 경우에 피부에 도포하는 항생제를 처방 하나, 심한 경우, 경구 항생제, 코르티코스테로이드, 이소트레티노 등의 약물을 처방하고 있다. 또한, 민감한 피부 개선을 위해 스테로이드와 같은 항생제, 항 히스타민제 등이 사용되고 있는 상황이다. 이런 약물의 경우 안전성 및 부작용에 대한 우려가 대두되고 있고, 현대사회의 피부 미용에 대한 관심 증가에 따라 모공 케어, 여드름 개선 및 민감한 피부 개선에 대한 안전하고 부작용이 적은 천연물을 이용한 개발에 관심이 높아지고 있다.
대한민국 특허공개번호 제10-2022-0093477호(공개일자 2022.07.05.)에는, 왕벚나무 꽃 생물전환추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물이 기재되어 있다. 대한민국 특허등록번호 제10-2111648호(등록일자 2020.05.11.)에는, 왕벚나무 잎 생물전환추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 피부미백용 화장료 조성물이 기재되어 있다. 대한민국 특허등록번호 제10-2348698호(등록일자 2022.01.04.)에는, 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물이 기재되어 있다. 대한민국 특허등록번호 제10-2127282호(등록일자 2020.06.22.)에는, 왕벚나무 생물전환 추출물을 포함하는 항염용 조성물이 기재되어 있다.
본 발명은 인체에 무해하고 안전성이 우수하며 모공 수축, 피지 분비 억제, 자극 완화 및 가려움증 개선에 효과적인 천연물 소재의 화장료 조성물을 개발하여 제공하고자 한다.
본 발명은 왕벚나무(Prunus yedoensis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 모공 수축용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 피부 모공 수축용 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부 모공 수축용 및 피지 분비 억제용일 수 있다.
본 발명은 왕벚나무(Prunus yedoensis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 자극 완화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 피부 자극 완화용 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부 자극 완화용 및 피부 자극 완화를 통한 피부 가려움증 개선용일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 왕벚나무 추출물은, 일 예로 왕벚나무의 꽃, 잎, 열매, 줄기 및 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상의 부위에서 에서 얻은 추출물일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 모공 수축, 피지 분비 억제, 자극 완화 및 피부 가려움증 개선에 뛰어난 효과를 발휘한다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 천연물 소재를 이용하여 인체에 무해하며, 안전성이 우수하다.
도 1은 왕벚나무 추출물이 세포에 미치는 독성을 측정한 결과이다.
도 2는 왕벚나무 추출물의 단백질 응집 증가 효과를 확인한 결과이다.
도 3은 왕벚나무 추출물의 PPAR-γ 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 4는 왕벚나무 추출물의 SREBP-1 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 5는 왕벚나무 추출물의 TRPV1 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 6는 왕벚나무 추출물의 PAR-2 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
본 발명은 왕벚나무(Prunus yedoensis) 추출물을 함유하는 피부 모공 수축, 피지 분비 억제, 자극 완화 및 피부 가려움증 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
왕벚나무(Prunus yedoensis)는 높이 15m에 달하는 쌍떡잎식물로 이판화군 장미목 장미과의 낙엽교목이다. 전국적으로 관상수 및 가로수로 많이 식재되어 있는 낙엽활엽교목이다. 어긋나게 달리는 잎은 도란형으로 끝이 길게 뾰족하고 가장자리에 겹톱니가 있다. 표면에는 털이 없고 뒷면 맥 위와 잎자루에 털이 있다. 꽃은 4월에 잎보다 먼저 피고 3~6개가 산형(傘形)차례로 달리고, 작은 꽃자루에 털이 있다. 꽃봉오리는 분홍색이 돌고 활짝 피면 흰색이다. 꽃대는 꽃받침과 더불어 털이 있고 꽃잎은 끝이 오목하며 암술대에 퍼진털이 있다. 열매는 핵과(核果)로 둥글고 6~7월에 적홍색에서 자흑색으로 익는다.
본 발명에서는 왕벚나무의 꽃, 잎, 열매, 줄기 또는 뿌리에서 얻은 추출물을 사용할 수 있다.
본 발명은 단백질 응집, PPAR-γ 발현 억제, SREBP-1 발현 억제, TRPV1 발현 억제 및 PAR-2 발현 억제 효과가 우수한 왕벚나무 에탄올 추출물을 이용하여 모공 수축, 피지 분비 억제,피부 자극 완화 및 피부 가려움증 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
한편, 피부 모공 수축(수렴작용) 효과는 체내 조직의 단백질을 침전 및 응고시켜, 조직이나 혈관을 수축시키는 작용으로 주로 수렴제인 단백질 응고 작용을 하는 물질에 의해 모공을 수축시킬 수 있다.
한편, 여드름은 주로 모낭의 염증을 유발하는 호르몬, 피지 생성, C.acnes 균 간의 상호 작용에 의하여 발생하는데, 그 중 피지(지질)는 피부의 진피층에 위치하는데, 모낭에 붙어 있는 피지선에서 피지를 생성한다. 정상적인 경우 피지(지질)는 외부 유해균의 피부 침입을 막아주고 유, 수분 밸런스를 맞춰주는 피부 보호 역할을 한다. 그런데, 호르몬 불균형, 수면 부족, 스트레스 등에 의해 피지가 과도하게 생성될 경우 모공에 피지가 응고되거나 죽은 피부 세포, 여드름균 등이 모여 모낭을 막아 생성된 피지가 모공 밖으로 배출이 차단되게 되면 염증이 유발되고 C.acnes 균이 활성화되어 결국 여드름이 발생하게 된다.
또한, 피지선은 주로 얼굴, 앞가슴, 등, 목 등에 주로 분포하며 피지선에 존재하는 피지선 세포에서 피지(지질)가 생성되어 모공을 통해 분비된다. 지질 합성은 SREBP-1(sterol regulatory element-binding protein 1), PPARs (peroxisome proliferator-activated receptors) 및 FAS (fatty acid synthase) 등의 전사인자에 의해 조절된다. SREBP-1은 콜레스테롤, 지방산 및 인지질의 합성을 조절하는 전사인자이고, PPAR는 -α, -β/δ, -γ의 3가지 유형이 존재하며 그 중에서 PPAR-γ는 피지선 세포의 증식과 지질 생성을 촉진하는 전사인자이다. 이러한 전사인자의 조절은 피지 생성을 억제함으로써 여드름 증상의 개선 및 치료에 중요한 역할을 하는 것으로 보고되어 있다.
한편, 민감성 피부는 정상적인 피부와 비교하여 신경학적 감각이 과도하게 활성화되어 있는 경우가 많고, 작은 자극에도 과하게 면역반응이 유도되어 홍반, 열감, 가려움증, 따가움 등과 같은 증상이 유발된다. 최근 외부 자극에 대한 감각을 조절하는 일시적인 감각 수용체인 TRPV1 채널이 피부 민감성을 조절하는데 중요한 역할을 하는 것이 보고 되어 있으며, 단백질분해효소-활성화 수용체(proteinase-activated receptor, PAR)인 PAR-2의 조절이 가려움증 완화에 도움을 줄 수 있는 것이 밝혀졌다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어, 상기 추출물은, 바람직하게 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법 중 선택되는 어느 하나의 추출법을 통해 추출하는 것이 좋다. 이때, 상기 용매 추출법은, 바람직하게 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 또는 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 추출용매를 이용하는 것이 좋다. 다만, 바람직하게는 용매로 에탄올 수용액 (소위 '에탄올')을 사용하는 것이 좋다.
또한, 본 발명에 있어, 상기 왕벚나무 추출물은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~30.0중량%가 함유되는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 화장료 조성물 전체 중량에 대해서 0.01~10중량% 함유되는 것이 좋다. 왕벚나무 추출물의 함량이 0.001중량% 미만인 경우에는 피부 모공 수축, 피지 분비 억제, 피부 자극 완화 및 피부 가려움증 개선 효과가 미미하고, 30.0중량% 초과할 경우 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과가 나타나지 않을 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 본 발명의 왕벚나무 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명의 구성을 하기 실시예 및 실험예를 통해 구체적으로 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리 범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[실시예 1: 왕벚나무( Prunus yedoensis ) 추출물의 제조]
음건한 왕벚나무(Prunus yedoensis) 100g을 분쇄하여, 이 분쇄물에 70% 에탄올 500 ㎖를 첨가한 다음 60℃ 온도에서 24 시간 동안 추출하였다. 이후, 상기 추출물을 400 메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 여과지 No.2(Whatman)로 재여과하였다. 그 후, 감압 농축하여 '왕벚나무 추출물'을 제조하였다.
[실험예 1: 세포 생존율 측정]
본 실험에서는 상기 실시예 1의 왕벚나무 추출물이 세포에 미치는 독성을 측정하고자 하였다. MTT(3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyl tetrazolium bromide) 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하였다.
인간각질형성세포(HaCaT, keratinocyte) 및 인간피지선세포(Sebocyte)를 96웰 플레이트에 8×104 cells/ml의 농도로 분주하여, 37℃, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 배양 배지를 제거하고, 상기 실시예 1에서 수득한 추출물을 10 - 100 ㎍/㎖의 농도로 계열 희석하여 24 시간 동안 배양하였다. 그 후, 5 ㎎/㎖로 녹인 MTT 시약을 20 ㎕ 넣고, 37℃, 5% CO2 조건에서 2 시간 동안 반응시켰다. 배지를 완전히 제거한 뒤, 생성된 포르마잔(formazan)을 DMSO 100 ㎕를 넣어 완전히 녹아준 뒤, 550 nm에서 흡광도를 측정하였다.
Sample HaCaT 세포생존율 (%) Sebocyte 세포생존율 (%)
Untreated 100 100
실시예 1 (㎍/㎖)
(왕벚나무 추출물 )
1 99.95 99.89
3 101.65 100.01
10 100.71 101.64
30 100.65 101.37
100 101.27 100.95
실험 결과, 도 1 및 표 1에서 보는 바와 같이, 왕벚나무 추출물은 인간각질형성세포 및 인간피지선세포에서 100 ㎍/㎖의 농도까지 세포독성을 보이지 않았다.
[실험예 2: 알부민 응집법을 이용한 모공 수축 효과 확인]
알부민을 이용하여 모공 수축 효과 실험을 진행하였다. 양성 대조군으로는 tannic acid를 사용하였다.
0.3% 알부민을 0.05 M 구연산 완충용액(pH 4.5)에 용해시킨 후, 0.3% 알부민 100 ㎕에 계열희석한 시료를 50 ㎕씩 혼합하였다. 대조군은 알부민 대신 구연산 완충용액을 첨가하였고 양성대조군으로는 tannic acid를 첨가하였다. 상온에서 5 분 동안 반응시키고 650 nm에서 흡광도를 측정하였고 대조군을 대비하여 백분율로 나타내었다(표 2). 흡광도의 값이 증가할수록 알부민 단백질 응집율 (모공 수축 효과)이 높다는 것을 나타낸다.
Sample 단백질 응집율(%)
Tannic acid (500 μM) 370.92
실시예 1 (㎍/㎖)
(왕벚나무 추출물)
100 3.95
300 82.66
1000 111.85
실험 결과, 도 2 및 표 2에서 보는 바와 같이, 양성대조군인 tannic acid는 대조군과 비교하여 370.92% 단백질이 응집되었고, 왕벚나무 추출물은 300 ㎍/㎖의 농도부터 82.66%로 유의적으로 단백질 응집율이 증가하여 1000 ㎍/㎖ 농도에서 최대 111.85%의 높은 단백질이 응집 효과를 나타내었다.
[실험예 3 : 왕벚나무( Prunus yedoensis ) 추출물의 PPAR-γ 발현 억제 효과]
본 실험예에서는 왕벚나무 추출물의 피지 생성 억제 효과를 확인하기 위해 인간피지선세포를 이용하여 피지 조절 인자인 PPAR-γ에 대한 영향을 확인하였다.
인간피지선세포를 6 well plate에 3 x 105 cell/well로 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 피지 생성을 촉진하기 위해 자극제로 linoleic acid를 200 μM의 농도로 처리하고 왕벚나무 추출물 (실시예 1)을 농도별로 희석하여 처리하였다.
24 시간 동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 반응시킨 후 단백질을 분리하였다. 상층액을 제거하고 1 x PBS로 한번 세척한 후 scraper로 긁어 세포를 수집하였다. Cell lysis buffer를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA assay로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동 시켰다. 겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 1 x TTBS 용액으로 3 회 세척하고 1차 항체를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1 x TTBS로 3 회 세척하고 ECL 용액을 반응시켜 Chemi Doc 기기로 밴드를 검출하였다. Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 PPAR-γ의 발현 억제율(%)을 계산하였다(표 3).
Sample PPAR-γ 발현 억제율(%)
실시예 1 (㎍/㎖)
(왕벚나무 추출물)
10 18.68
30 45.17
100 67.62
실험 결과, 도 3 및 표 3에서 보는 바와 같이, 왕벚나무 추출물은 농도의존적으로 PPAR-γ의 발현을 억제하였다. 10 ㎍/㎖의 농도부터 18.68%로 유의적인 억제율을 보였으며 100 ㎍/㎖의 농도에서 최대 67.62%의 높은 PPAR-γ의 발현 억제 효과를 나타내었다.
[실험예 4 : 왕벚나무( Prunus yedoensis ) 추출물의 SREBP-1 발현 억제 효과]
본 실험예에서는 왕벚나무 추출물의 피지 생성 억제 효과를 확인하기 위해 인간피지선세포를 이용하여 피지 조절 인자인 SREBP-1 에 대한 영향을 확인하였다.
인간피지선세포를 6 well plate에 3 x 105 cell/well로 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 피지 생성을 촉진하기 위해 자극제로 linoleic acid를 200 μM의 농도로 처리하고 왕벚나무 추출물 (실시예 1)을 농도별로 희석하여 처리하였다.
24 시간 동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 반응시킨 후 단백질을 분리하였다. 상층액을 제거하고 1 x PBS로 한번 세척한 후 scraper로 긁어 세포를 수집하였다. Cell lysis buffer를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA assay로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동 시켰다. 겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 1 x TTBS 용액으로 3 회 세척하고 1차 항체를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1 x TTBS로 3 회 세척하고 ECL용액을 반응시켜 Chemi Doc 기기로 밴드를 검출하였다. Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 SREBP-1의 발현 억제율(%)을 계산하였다(표 4).
Sample SREBP-1 발현 억제율(%)
실시예 1 (㎍/㎖)
(왕벚나무 추출물)
10 26.65
30 36.44
100 67.51
실험 결과, 도 4 및 표 4에서 보는 바와 같이, 왕벚나무 추출물은 농도의존적으로 SREBP-1의 발현을 억제하였다. 10 ㎍/㎖의 농도부터 26.65%로 유의적인 억제율을 보였으며, 100 ㎍/㎖의 농도에서 최대 67.51%의 높은 SREBP-1의 발현 억제 효과를 나타내었다.
[실험예 5 : 왕벚나무( Prunus yedoensis ) 추출물의 TRPV1 발현 억제 효과]
본 실험예에서는 왕벚나무 추출물의 자극 완화 효과를 확인하기 위해 인간각질형성세포를 이용하여 자극 수용체인 TRPV1 에 대한 영향을 확인하였다.
인간각질형성세포를 12 well plate에 3 x 105 cell/well로 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 이후, 상기 실시예 1에서 제조한 왕벚나무 추출물을 10, 30, 100 ㎍/㎖ 농도로 희석하여 각각 처리하였고, TRPV1의 발현을 위하여 열처리를 하여 자극을 가하였다.
6 시간 동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 반응시킨 후 단백질을 분리하였다. 상층액을 제거하고 1 x PBS로 한번 세척한 후 scraper로 긁어 세포를 수집하였다. Cell lysis buffer를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA assay로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동 시켰다. 겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 1 x TTBS 용액으로 3 회 세척하고 1차 항체를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1 x TTBS로 3 회 세척하고 ECL용액을 반응시켜 Chemi Doc 기기로 밴드를 검출하였다. Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 TRPV1의 발현 억제율(%)을 계산하였다(표 5).
Sample TRPV1 발현 억제율(%)
실시예 1 (㎍/㎖)
(왕벚나무 추출물)
10 30.78
30 45.58
100 74.09
실험 결과, 도 5 및 표 5에서 보는 바와 같이, 왕벚나무 추출물은 농도의존적으로 TRPV1의 발현을 억제하였다. 10 ㎍/㎖의 농도부터 30.78%로 유의적인 억제율을 보였으며 100 ㎍/㎖의 농도에서 최대 74.09%의 높은 TRPV1의 발현 억제 효과를 나타내었다.
[실험예 6 : 왕벚나무( Prunus yedoensis ) 추출물의 PAR-2 발현 억제 효과]
본 실험예에서는 왕벚나무 추출물의 자극 완화 효과를 확인하기 위해 인간각질형성세포를 이용하여 자극 수용체인 PAR-2 에 대한 영향을 확인하였다.
인간각질형성세포를 12 well plate에 3 x 105 cell/well로 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 이후, 상기 실시예 1에서 제조한 왕벚나무 추출물을 10, 30, 100 ㎍/㎖ 농도로 희석하여 각각 처리하였고, PAR-2의 발현을 위하여 열처리를 하여 자극을 가하였다.
6 시간 동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 반응시킨 후 단백질을 분리하였다. 상층액을 제거하고 1 x PBS로 한번 세척한 후 scraper로 긁어 세포를 수집하였다. Cell lysis buffer를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA assay로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동 시켰다. 겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 1 x TTBS 용액으로 3 회 세척하고 1차 항체를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1 x TTBS로 3 회 세척하고 ECL용액을 반응시켜 Chemi Doc 기기로 밴드를 검출하였다. Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 PAR-2의 발현 억제율(%)을 계산하였다(표 6).
Sample PAR-2 발현 억제율(%)
실시예 1 (㎍/㎖)
(왕벚나무 추출물)
10 20.63
30 26.61
100 79.98
실험 결과, 도 6 및 표 6에서 보는 바와 같이, 왕벚나무 추출물은 농도의존적으로 PAR-2의 발현을 억제하였다. 10 ㎍/㎖의 농도부터 20.63%로 유의적인 억제율을 보였으며 100 ㎍/㎖의 농도에서 최대 79.98%의 높은 PAR-2의 발현 억제 효과를 나타내었다.
이를 통해 왕벚나무추출물은 단백질 응집 증가, 피지 생성 조절인자인 PPAR-γ 및 SREBP-1의 발현 억제 및 자극 수용체인 TRPV1, PAR-2의 발현 억제를 통해서우수한 모공 수축, 피지 분비 억제, 자극 완화 및 가려움증 개선 효과를 나타냄을 확인하였다.

Claims (5)

  1. 왕벚나무(Prunus yedoensis) 추출물을 유효성분으로 함유하며,
    상기 왕벚나무 추출물은 단백질 응고 작용 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 피부 모공 수축용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피지 분비 억제 효과를 더욱 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 자극 완화 효과를 더욱 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 자극 완화를 통한 피부 가려움증 개선 효과를 더욱 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 선택되는 어느 하나의 항에 있어서,
    상기 왕벚나무 추출물은,
    왕벚나무의 꽃, 잎, 열매, 줄기 및 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상의 부위에서 에서 얻은 추출물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
KR1020220184228A 2022-12-26 2022-12-26 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 KR102542032B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220184228A KR102542032B1 (ko) 2022-12-26 2022-12-26 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220184228A KR102542032B1 (ko) 2022-12-26 2022-12-26 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102542032B1 true KR102542032B1 (ko) 2023-06-13

Family

ID=86762552

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220184228A KR102542032B1 (ko) 2022-12-26 2022-12-26 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102542032B1 (ko)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102111648B1 (ko) 2019-08-21 2020-05-15 주식회사 인투바이오 왕벚나무 잎 생물전환추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 피부미백용 화장료 조성물
KR102127282B1 (ko) 2019-10-01 2020-06-29 선문대학교 산학협력단 왕벚나무 생물전환 추출물을 포함하는 항염용 조성물
KR102348698B1 (ko) 2019-08-22 2022-01-06 재단법인 남원시화장품산업지원센터 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물
KR20220093477A (ko) 2020-12-28 2022-07-05 주식회사 인투바이오 왕벚나무 꽃 생물전환추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물
KR20220094565A (ko) * 2020-12-29 2022-07-06 제주대학교 산학협력단 올벚나무 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102111648B1 (ko) 2019-08-21 2020-05-15 주식회사 인투바이오 왕벚나무 잎 생물전환추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 피부미백용 화장료 조성물
KR102348698B1 (ko) 2019-08-22 2022-01-06 재단법인 남원시화장품산업지원센터 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물
KR102127282B1 (ko) 2019-10-01 2020-06-29 선문대학교 산학협력단 왕벚나무 생물전환 추출물을 포함하는 항염용 조성물
KR20220093477A (ko) 2020-12-28 2022-07-05 주식회사 인투바이오 왕벚나무 꽃 생물전환추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물
KR20220094565A (ko) * 2020-12-29 2022-07-06 제주대학교 산학협력단 올벚나무 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20200085897A1 (en) Extract of Aerial Parts of Maca Rich in Polyphenols and Composition Comprising Same
KR101393007B1 (ko) 람부탄 및 리치 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부노화방지용 및 피부주름 개선용 화장료 조성물
US11484559B2 (en) Kapok tree flower extract, and cosmetic, pharmaceutical or dermatological compositions containing same
KR102171133B1 (ko) 병풀 추출물 및 개양귀비 추출물을 포함하는 피부 외용제 조성물
KR20140012456A (ko) 아케비아 사포닌-디를 포함하는 피부 상태 개선용 조성물
CN110072516B (zh) 包含作为有效成分的中药材提取物的化妆料组合物
KR102400179B1 (ko) 인진쑥 추출물 및 올리브 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 항산화, 미백 및 항염증용 화장료 조성물
KR100638053B1 (ko) 소루쟁이 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화용화장료 조성물
KR102226179B1 (ko) 항노화 화장료 조성물
KR102523138B1 (ko) 모람 추출물을 유효성분으로 함유하는 민감성 피부 개선 및 피지 분비 억제용 화장료 조성물
KR101781545B1 (ko) 참다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물
KR102073945B1 (ko) 갯괴불주머니 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 가려움증 개선 및 보습용 화장료 조성물
KR102031288B1 (ko) 양배추 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR102542032B1 (ko) 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물
KR102386120B1 (ko) 밀크씨슬 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물
KR101776692B1 (ko) 구골나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물
KR102350141B1 (ko) 마치현, 애엽 및 홍경천의 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보호 및 피부자극 완화용 화장료 조성물
KR102290424B1 (ko) 영실 추출물 또는 이의 분리화합물을 함유하는 피부 미생물 조절용 화장료 조성물
KR101702621B1 (ko) 꽃잔디 추출물을 포함하는 항염증제
KR20160061601A (ko) 모로헤이야, 은행잎 및 클로렐라 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 약학조성물
KR100946584B1 (ko) 지실 추출물 및 블루로터스 추출물을 함유하는 수렴 및 피부 자극 완화용 화장료 조성물
KR20080017679A (ko) 대황 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화용화장료 조성물
KR102389900B1 (ko) 눈개승마 추출물을 유효성분으로 함유하는 민감성 피부 개선용 화장료 조성물
KR102502443B1 (ko) 달맞이꽃의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 튼살 예방, 개선, 또는 치료를 위한 조성물
KR102543922B1 (ko) 말오줌때 추출물을 유효성분으로 포함하는 튼살 예방, 개선, 또는 치료를 위한 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant