KR20220094565A - 올벚나무 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물 - Google Patents
올벚나무 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 올벗나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로, 상기 올벗나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물은 피부질환 또는 여드름을 유발하는 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis)과 여드름균(Cutibacterium acnes) 균주에 대해 우수한 항균 효과를 가지며, 올벗나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물이 에리트로마이신 내성을 가진 표피포도상구균 및 여드름균에 대해 항균 효과를 나타내 항균용 조성물, 구체적으로 화장료 조성물로 이용가능하며, 또한, 여드름 개선 또는 치료용 약학 조성물, 건강기능성식품 조성물 및 화장료 조성물로 이용 가능하다.
Description
본 발명은 올벚나무 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다.
대표적인 피부질환인 여드름은 모낭-피지선에서 발생하는 만성 염증성 질환이다. 여드름의 발생 원인은 명확하게 규명되지 않았으며 피로와 스트레스, 유전적인 요인, 호르몬 불균형, 과도한 피지 분비, 피지선의 과각질화, 피부 상재균의 증식 등과 같은 여러 가지 요인들이 복합적인 작용을 일으키는 것으로 알려져 있다. 청소년기에는 안드로겐(Androgen)이라는 남성호르몬의 분비가 활발해지면서 피지선을 자극하고 피지 분비를 촉진시킨다. 이때 모공이 좁아지든지 막히면서 분비된 피지가 모공 밖으로 배출되지 못하면 모공 내로 역류하거나 모공을 막아서 세균의 번식이 일어나게 되며 이는 피부의 염증 및 과각질화를 일으켜 여드름의 원인이 된다.
일반적으로 건강한 피부는 유익균과 유해균이 8:2의 비율로 약산성을 이루어 균형을 유지하고 땀으로 분비되는 면역 항체와 결합하여 피부의 방어 기능을 높여준다. 하지만 피부의 혐기성 상재균 중 하나인 여드름균(Cutibacterium acnes, C. acnes)은 지방 친화성균으로 모낭에서 성장하여 Superoxide anion radical (·O2 -)을 형성하고 유리지방산인 Linoleic acid를 분해하면서 피부의 면역력을 저하시키게 되고 결국 염증 반응을 가속화하여 여드름을 악화시킨다. 호기성 피부 상재균인 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis, S. epidermidis)의 경우 염증의 1차적인 원인은 아니지만 염증 발생 부위를 확장시키면서 모낭 주위의 여드름을 악화시키고 여드름 합병증을 유발한다. 또한, 여드름 병변에서 염증 반응은 주로 사이토카인(Cytokine)에 의해 매개되는데 대표적으로 IL-6, IL-1β 및 TNF-α 등의 전염증성 사이토카인이 분비되어 여드름 염증에 관여하는 것으로 알려져 있다.
현재 여드름 치료 방법으로는 염증 유발의 주된 역할을 하는 여드름균(C. acnes)과 표피포도상구균(S. epidermidis) 등의 균들의 증식 억제 및 염증 치료를 위해 주로 항생제가 사용되고 있다. 흔히 알려진 항생제로는 Benzoyl peroxide, Retinoid, Azelaic acid, Clindamycin, Erythromycin 및 Tetracycline 등이 있으나 과다 사용 시 많은 부작용들을 일으키는 것으로 알려져 있다. Benzoyl peroxide, Retinoid는 피부 자극감, 피부 건조증, 접촉성 피부염 등을 유발하는 문제점이 있고, Clindamycin, Erythromycin 및 Tetracycline의 경우 항생제 내성 발생으로 인해 지속적인 사용이 어려우며 장기간 복용 시 간 독성이 심하여 간 조직의 손상을 일으킬 수 있는 문제점들이 있다. 여드름 치료에는 약물 이외에 물리적인 치료법도 있으나 이 같은 경우 고비용이라는 단점이 있다.
따라서 이러한 합성 물질들을 대체하기 위하여 여드름 피부에 효과적이고 부작용을 최소화할 수 있는 천연물로부터의 유용물질 탐색을 위한 연구가 요구되고 있으며 천연 항균물질에 대한 관심도 급증하고 있는 추세이다. 천연물을 이용한 천연 항균제의 개발은 무한한 가능성을 내재하고 있다고 볼 수 있으며, 단풍나무에서 분리된 Ginnalin, 감귤류의 성분인 Hesperidin, 황백이나 황련 등에서 분리된 Berberine 등이 항균 효과가 있다고 보고되고 있다.
본 발명자는 천연물인 올벚나무 추출물, 특히 상기 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 조성물이 우수한 항균 효과가 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 항균용 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 실시예에 따른 항균성 조성물은 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함한다.
상기 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물은 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 나타낼 수 있다.
상기 올벚나무 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출할 수 있다.
상기 올벚나무 추출물은 에탄올 용매 추출물일 수 있다.
상기 분획물은 상기 올벚나무 추출물을 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, n-헥산(n-Hex), 에틸아세테이트(EtOAc), n-부탄올(n-BuOH) 또는 이들의 혼합용매로 분획하여 제조할 수 있다.
상기 분획물은 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.
본 발명의 다른 실시예에 따른 항균용 화장료 조성물은 항균용 조성물을 유효성분으로 포함한다.
상기 화장료 조성물 총 중량 대비 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 0.0001~10.0 중량%로 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따른 여드름 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물은 항균용 조성물을 유효성분으로 포함한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따른 여드름 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 항균용 조성물을 유효성분으로 포함한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따른 여드름 질환 예방 또는 개선용 화장료 조성물은 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함한다.
본 발명은 올벗나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로, 상기 올벗나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물은 피부질환 또는 여드름을 유발하는 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis)과 여드름균(Cutibacterium acnes) 균주에 대해 우수한 항균 효과를 가지며, 올벗나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물이 에리트로마이신 내성을 가진 표피포도상구균 및 여드름균에 대해 항균 효과를 나타내 항균용 조성물, 구체적으로 화장료 조성물로 이용가능하며, 또한, 여드름 개선 또는 치료용 약학 조성물, 건강기능성식품 조성물 및 화장료 조성물로 이용 가능하다.
도 1은 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물의 표피포도상구균(S. epidermidis) 및 여드름균(C. acnes)에 대한 항균 활성인 clear zone을 나타낸 것이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 첨부한 도면을 참고로 하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본 발명은 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균성 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어 “올벚나무(Prunus pendula for. ascendens)”는 장미과(Rosaceae)에 속하는 낙엽교목으로, 꽃이 잎보다 먼저 핌과 동시에 다른 벚나무보다 일찍 꽃이 피므로 올벚나무라 한다. 높이가 10 m에 달하며 가지가 가늘고 잎과 더불어 잔털이 있으며 꽃은 암술대에는 털이 없으나 꽃받침통의 밑 부분에 털이 있고 산형상으로 달리는 것이 특징이다. 벚나무 속 식물들은 예로부터 항염증 작용, 항고지혈증 및 항암 활성과 같은 생리활성이 있어 민간 요법에 사용되어 왔다. 이러한 올벚나무의 가지 부분을 본 발명에서는 70% 에탄올로 추출하여 추출물 및 극성별 용매 분획물의 항균 효능을 확인하였다. 그 결과, 표피포도상구균(S. epidermidis) 및 여드름균(C. acnes)에서 효과가 우수함을 확인하였다.
본 발명에서 용어, "추출물"은 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
본 발명에서 추출물의 건조는 채취한 식물로부터 유용한 성분들이 파괴되지 않는 범위에서 공지의 방법으로 진행될 수 있고, 예를 들어 음지에서 자연건조의 방법으로 진행될 수 있다. 또한, 파쇄 또는 분쇄는 이후 추출과정에서 식물의 유용한 성분들이 충분하게 추출될 수 있을 정도로 파쇄 또는 분쇄하여 분말화할 수 있다. 상기 건조와 파쇄 또는 분쇄 공정은 필요에 따라서 순서를 뒤바꿔서 진행하거나 반복하여 실시할 수 있다.
본 발명의 추출에 있어서, 상기 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다.
본 발명에서 올벚나무 추출물은 물, 유기용매, 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할 수 있다. 구체적으로 물, 메탄올, 에탄올 및 부탄올 등과 같은 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 수득될 수 있으며, 구체적으로는 에탄올일 수 있다.
본 발명에서 용어 “분획물”은 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 올벚나무 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명의 올벚나무 추출물을 증류수(물)에 현탁한 후, 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올, 에틸아세테이트, 헥산, 부탄 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 분획함으로써 수득할 수 있다.
본 발명의 실시예에서 올벚나무 추출물을 증류수에 현탁한 후 헥산을 첨가하여 헥산 분획물을 수득하고, 상기 헥산 분획물을 제외한 남은 수용층에 에틸아세테이트를 추가하여 에틸아세테이트 분획물을 수득하였으며, 상기 에틸아세테이트 분획물을 제외하고 남은 수용성 성분에 부탄올을 추가하여 부탄올 분획물을 수득하였다. 상기 부탄올 분획물을 제외하고 남은 수용성 성분을 물 분획물로 수득하였다.
본 발명에서 상기 분획물은 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 용매 또는 물 분획물일 수 있다.
본 발명의 실시예에서 올벚나무 추출물은 표피포도상구균(CCARM 3709, 3710)에 대해 항균활성을 가짐을 확인하였다.
또한, 올벚나무 추출물은 여드름균(CCARM 0081, 9009, 9010, 9089)에 대해 항균활성을 확인하였다. 특히 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물은 모든 균주에 대해 항균 효능이 우수함을 확인하였다. 또한 에틸아세테이트 분획물은 에리트로마이신 내성균주(CCARM 3710, CCARM 9009, 9010)에 대해서 우수한 활성을 나타냄을 확인하였다.
따라서 본 발명에서 용어 “항균”은 미생물에 대한 생장 억제 및 저해효과를 가지는 것으로, 구체적으로 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 나타내는 것일 수 있다.
본 발명의 실시예에서 올벚나무 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 에리트로마이신(Erythromycin)에 대한 내성을 가지는 표피포도상구균(CCARM 3710)과 여드름균(CCARM 9009, CCARM 9010)에 대해서 항균활성이 우수함을 확인하였다.
따라서 본 발명의 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)은 에리트로마이신(Erythromycin)에 대해 내성을 가지는 것일 수 있다. 구체적으로 상기 표피포도상구균은 CCARM 3710일 수 있으며, 상기 여드름균은 CCARM 9009 및 CCARM 9010일 수 있다.
또한, 올벚나무 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 추출물 및 다른 용매 분획물과 비교하여 클리어 존의 크기가 가장 크게 측정되었다. 즉, 올벚나무 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 동일 농도 처리시 추출물 및 용매 분획물 중 항균 효과가 가장 우수함을 확인하였다.
따라서 본 발명의 분획물은 구체적으로 에틸아세테이트 또는 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 용매로 분획한 것일 수 있으며, 상기 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 용매는 에탄올일 수 있으며 더욱 구체적으로 에틸아세테이트 용매로 분획한 것 일수 있다.
본 발명의 다른 실시예에 따라 상기 항균용 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 항균에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 화장용 조성물은 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물을 포함하여 항균 효과를 가지며, 구체적으로 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)에 대해 항균 효과를 가진다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 항균용 조성물 이외에 통상적으로 허용되는 성분들을 제한없이 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시테이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물을 전체 화장품 중량의 0.0001 내지 10 중량% 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게는 10 중량% 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따라 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 올벗나무, 추출물, 분획물에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명에서 사용된 용어 “여드름 질환”은 모피지선, 모낭 및 주변조직에서 발생하는 복합적인 염증성 피부질환으로, 면포라는 발진을 특징적 증상으로 한다. 면포는 얼굴, 이마, 콧등에 가장 자주 나타나는 나사 모양의 굳어진 피지 덩어리로, 면포 내부에는 여드름 원인균으로 알려진, 혐기성균인 여드름균(Cutibacterium acnes)이 생장하고, 면포 표면에는 호기성균인 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis)이 생장하며, 생산하는 여러 화학성분이 모낭 및 주위피부에 염증을 일으킨다.
전술한 실시예에서 올벗나무 추출물 또는 이의 분획물이 피부질환 또는 여드름을 유발하는 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)에 대해 항균활성을 가지며 또한, 항생제인 에리트로마이신(Erythromycin) 내성을 가진 균주에 항균활성을 가짐을 확인하였다. 따라서 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물은 여드름 질환 예방 또는 개선할 수 있다.
본 발명의 용어, “예방'이란, 본 발명에 따른 조성물을 개체에 투여하여 여드름의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있고, “개선”은, 본 발명에 따른 조성물을 개체에 투여하여 여드름 증상을 완화 또는 감소시키는 것을 의미한다.
구체적으로 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)의 생장을 억제하여 여드름을 예방 또는 개선하는 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로 항생제 내성 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)에 대해 생장을 억제하여 여드름을 예방 또는 개선시키는 것일 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "건강기능성 식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능성 식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명의 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물은 원료 조성물 중 1 내지 50 중량%, 바람직하게는 5 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능성 식품을 모두 포함한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따른 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 올벗나무, 추출물, 분획물, 여드름 질환, 예방에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, “치료”란, 본 발명의 상기 조성물에 의해 여드름에 의한 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 유효성분 이외의 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이때, 상기 조성물에 포함되는 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량% 내지 99 중량%로, 바람직하게는 0.01 중량% 내지 50 중량%를 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(Witepsol), 마크로골, 트윈(Tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치에 의해 결정될 수 있으며, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따라 올벚나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 올벗나무, 추출물, 분획물, 화장료 조성물에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
따라서 본 발명에서 사용된 용어 “여드름 개선”은 피부상에서 여드름 유발 균주인 표피포도상구균 또는 여드름균의 생육을 저해하거나 감소시켜 여드름의 증상을 완화 또는 개선시키는 것을 의미한다. 구체적으로 에리트로마이신(Erythromycin) 내성 표피포도상구균 균주 또는 에리트로마이신(Erythromycin) 내성 여드름균 균주에 대해 항균 활성을 통해 여드름을 개선시키는 것일 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 보다 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 올벚나무 추출물의 제조
올벚나무 가지는 2017년 9월에 제주생물자원(주)에서 구입하여 사용하였다. 구입한 올벚나무 가지는 동결건조 및 분쇄하여 사용하였다. 올벚나무 가지 931.8 g을 70% 에탄올 10L에 침적하여 실온에서 24시간 동안 침출시켰다. 침출시킨 시료를 감압 여과하여 여액만 취하였으며, 얻어진 여액은 40℃ 이하의 수욕상에서 농축하여 추출물 79.2g (8.5%)을 제조하였다.
<실시예 2> 본 발명의 올벚나무 추출물의 헥산 분획물 제조
실시예 1의 올벚나무 가지 추출물에 극성이 다른 용매인 n-헥산(n-Hex), 에틸아세테이트(EtOAc), n-부탄올(n-BuOH) 및 물(H2O)을 넣고 순차적으로 분획물을 제조하였다. 먼저, 올벚나무 가지 추출물을 물에 현탁한 후 헥산을 첨가하여 헥산 분획물을 분리하였으며, 이를 감압 건조하여 분말 형태로 제조하였다.
<실시예 3> 본 발명의 올벚나무 추출물의 에틸아세테이트 분획물 제조
실시예 2에서 헥산 분획물이 분리되고 남은 수용층에 에틸아세테이트를 첨가하여 에틸아세테이트 분획물을 분리하고, 이를 감압 건조하여 분말 형태로 제조하였다.
<실시예 4> 본 발명의 올벚나무 추출물의 부탄올 분획물 제조
실시예 3에서 에틸아세테이트 분획물을 분리하고 남은 수용층에 부탄올을 첨가하여 부탄올 분획물을 분리하고, 이를 감압 건조하여 분말 형태로 제조하였다.
<실시예 5> 본 발명의 올벚나무 추출물의 물 분획물 제조
실시예 4에서 부탄올 분획물을 분리하고 남은 수용층을 물 분획물로 이용하였으며, 이를 감압 건조하여 분말 형태로 제조하였다
<실시예 6> 올벚나무 가지 추출물이 함유된 화장료 조성물의 제조
통상적인 화장료 조성물에 화장료 조성물 전체중량대비 상기의 실시예 3의 화장료 조성물 5 중량% 첨가하여 사용하였다.
<실험예>
1. 균주 배양
실시예 1 내지 5의 올벚나무 가지 추출물 또는 이의 용매별 분획물의 항균활성을 측정하기 위해 표피포도상구균(S. epidermidis, CCARM 3709, 3710, 3711), 여드름균(C. acnes, CCARM 0081, 9009, 9010, 9089)을 항생제내성균주은행(Culture Collection of Antimicrobial Resistant Microbes)으로부터 분양받아 사용하였다. 표피포도상구균은 TSB(Tryptic soy broth) 배지를 사용하여 37℃에서 하루에 한 번 계대 배양하였고, 여드름균은 GAM(Gifu anaerobic medium) 배지를 사용하여 37℃, 혐기 조건에서 2일에 한 번 계대 배양하였다.
2. 항균활성 측정
실시예 1 내지 5의 올벚나무 가지 추출물 또는 이의 용매별 분획물의 항균 활성을 측정하기 위해 한천 확산법(Paper disc diffusion method)으로 clear zone의 크기를 확인하였다. 표피포도상구균은 1.5 × 106 CFU/mL, 여드름균은 1.0 × 108 CFU/mL로 맞춰준 후, 0.8% Agar를 포함하는 배지에 넣어 하드배지(1.5% Agar) 위에 붓는다. 배지가 굳으면 시료 용액을 포함하는 직경 8 mm paper disc를 올린 후, 표피포도상구균은 37℃에서 24시간 동안 배양하고, 여드름균은 37℃에서 48시간 동안 혐기 배양한 후, 형성된 원형 발육 저지환의 크기를 측정하였다. 대조군으로는 에리트로마이신(Erythromycin)을 사용하였다.
하기의 표 1은 실시예 1 내지 5의 올벚나무 가지 추출물 또는 이의 용매별 분획물의 항균 활성을 나타낸 것이다.
| 항목 | Clear zone (mm) | ||||||
| S. epidermidis | C. acnes | ||||||
| CCARM 3709 |
CCARM 3710 |
CCARM 3711 |
CCARM 0081 |
CCARM 9009 |
CCARM 9010 |
CCARM 9089 |
|
| Extract (실시예 1) |
10.5 | 8.5 | N.A. | 10 | 9.5 | 8.5 | 12 |
| n-Hex (실시예 2) |
N.A. | 8.5 | N.A. | 9.5 | 9 | 10.5 | 10.5 |
| EtOAc(실시예 3) | 11.5 | 11.5 | 10.5 | 16 | 14 | 13 | 16.5 |
| n-BuOH (실시예 4) |
11 | 11 | N.A. | 9 | 8.5 | 8.5 | 10 |
| H2O (실시예 5) |
N.A. | N.A. | N.A. | 9 | N.A. | 8.5 | 9 |
| Erythromycin | 33 | N.A. | 32 | 58 | N.A. | N.A. | 59 |
* disc 크기: 8 mm, 시료 농도: 6 mg, 양성 대조군(Erythromycin): 20 ㎍, N.A. : 활성 없음
상기 표 1 및 도 1을 참조하면, 실시예 1 내지 5는 표피포도상구균(CCARM 3709, 3710, 3711) 및 여드름균(CCARM 0081, 9009, 9010, 9089)에 대해 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있으며, 특히 실시예 3(에틸아세테이트 분획물)은 모든 균주에 대해 항균 효능이 우수한 것을 확인할 수 있다. 또한, 에틸아세테이트 분획물은 에리트로마이신 내성균주(CCARM 3710, CCARM 9009, 9010)에 대해서도 항균 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
3. 최소억제농도(MIC) 및 최소사멸농도(MBC)의 측정
실시예 1 내지 5의 올벚나무 가지 추출물 또는 이의 용매별 분획물의 MIC 및 MBC를 측정하였다.
최소억제농도(Minimum inhibitory concentration, MIC)는 미생물의 성장을 막는 항생물질의 최소농도로 미생물에 대한 MIC값이 낮으면 낮을수록 그 미생물에 대한 감수성이 높다고 할 수 있다. MIC 측정은 액체배지 희석법을 변형하여 사용하였다. 96 well plate에 배지로 희석한 시료 100 μL와 2.0 × 105 CFU/mL의 균액 100 μL를 넣어 표피포도상구균은 37℃에서 24시간 배양하였고, 여드름균은 37℃, 혐기 조건에서 48시간 배양하여 균의 증식이 나타나지 않는 최소농도를 확인하였다.
최소사멸농도(Minimum bactericidal concentration, MBC)는 균이 완전히 죽은 농도를 말한다. MIC 값이 나타난다 해도 그 균은 모두 사멸한 것이 아니며, 시료의 영향으로 균의 성장을 방해하여 균이 자라지 않아 모두 죽은 것처럼 보일 수 있기 때문이다. MIC를 진행한 96 well plate에 loop를 이용하여 시료 배양액을 찍어내서 하드배지에 도말하였고, 표피포도상구균은 37℃에서 24시간 배양하였고, 여드름균은 37℃, 혐기 조건에서 48시간 배양하여 Colony가 형성되지 않는 최소 농도를 확인하였다.
하기의 표 2는 실시예 1 내지 5의 올벚나무 가지 추출물 또는 이의 용매별 분획물의 MIC 및 MBC을 나타낸 것이다.
| 항목 | Extract (실시예 1) |
n-Hex (실시예 2) |
EtOAc (실시예 3) |
n-BuOH (실시예 4) |
H2O (실시예 5) |
||
| S. epidermidis | CCARM 3709 |
MIC | >4000 | 2000 | 2000 | 2000 | 4000 |
| MBC | >4000 | >4000 | 4000 | >4000 | >4000 | ||
| CCARM 3710 |
MIC | >4000 | 2000 | 2000 | 2000 | 4000 | |
| MBC | >4000 | 4000 | 4000 | 4000 | >4000 | ||
| CCARM 3711 |
MIC | >4000 | 2000 | 1000 | 2000 | 4000 | |
| MBC | >4000 | >4000 | 4000 | >4000 | >4000 | ||
| C. acnes | CCARM 0081 |
MIC | >4000 | 4000 | 2000 | 2000 | 2000 |
| MBC | >4000 | >4000 | 4000 | >4000 | >4000 | ||
| CCARM 9009 |
MIC | 2000 | 1000 | 2000 | 2000 | >4000 | |
| MBC | >4000 | >4000 | 4000 | >4000 | >4000 | ||
| CCARM 9010 |
MIC | 2000 | 1000 | 2000 | 4000 | 2000 | |
| MBC | >4000 | >4000 | 4000 | >4000 | >4000 | ||
| CCARM 9089 |
MIC | 4000 | 1000 | 500 | 4000 | 500 | |
| MBC | >4000 | >4000 | 4000 | >4000 | >4000 | ||
* 시료 농도 단위: μg/mL상기 표 2를 참조하면, 항균 효과가 가장 우수한 실시예 3의 모든 균주에 대한 최소억제농도(MIC) 및 최소사멸농도(MBC) 값을 확인할 수 있다.
상기 표 2를 참조하면, 항균 효과가 가장 우수한 실시예 3의 모든 균주에 대한 최소억제농도(MIC) 및 최소사멸농도(MBC) 값을 확인할 수 있다.
Claims (11)
- 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물은 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Cutibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 나타내는 것인 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 올벚나무 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것인 조성물. - 제3항에 있어서,
상기 올벚나무 추출물은 에탄올 용매 추출물인 것인 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 분획물은 상기 올벚나무 추출물을 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, n-헥산(n-Hex), 에틸아세테이트(EtOAc), n-부탄올(n-BuOH) 또는 이들의 혼합용매로 분획하여 제조한 것인 조성물. - 제5항에 있어서,
상기 분획물은 에틸아세테이트 분획물인 것인 조성물. - 제 1항 내지 6항의 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 항균용 화장료 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 화장료 조성물 총 중량 대비 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 0.0001~10.0 중량%로 포함하는 항균용 화장료 조성물. - 제 1항 내지 6항의 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제 1항 내지 6항의 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 올벚나무(Prunus pendula for. ascendens) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
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