KR102379678B1 - 검정무 발효 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물 - Google Patents
검정무 발효 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 검정무(Raphanus sativus L. var. niger) 발효 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것으로, 상기 검정무 발효 추출물 및 이의 분획물은 피부질환 또는 여드름을 유발하는 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis)과 여드름균(Propionibacterium acnes) 균주에 대해 우수한 항균 효과를 가지며, 검정무 추출물, 이의 분획물이 에리트로마이신 내성을 가진 표피포도상구균 및 여드름균에 대해 항균 효과를 나타내 항균용 조성물, 구체적으로 화장료 조성물로 이용 가능하며, 또한, 여드름 개선 또는 치료용 약학조성물, 건강기능성 식품 조성물 및 화장료 조성물로 이용 가능하다.
Description
본 발명은 검정무 발효 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다.
여드름은 모낭-피지선에서 발생하는 피부질환으로, 피지선에서 피지 분비가 증가하거나 피지선의 모공이 좁아지든지 막혀서 피지가 배출되지 못함에 따라 세균이 증식하여 염증이 생기는 것이다. 사춘기 나이에 분비되기 시작하는 안드로젠은 피지 분비를 촉진시키고, 표피의 과각화를 일으키며, 이로 인해 피지의 분비 증가와 표피 과각화로 모낭-피지선에서 피지가 정체되어 모낭이 막힘에 따라 모낭내부가 여드름균(Propionibacterium acnes, P. acnes)을 비롯한 혐기성 세균이 잘 자랄 수 있는 환경이 된다. 동시에 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis, S. epidermidis)과 같은 다른 세균들이 모낭주위에서 여드름과 여드름 합병증을 일으키는데 역할을 한다.
여드름 원인균인 P. acnes는 피부 내에 존재하는 상재균으로 정상상태에서는 피부면역시스템에 의해 관용된다. 그러나 안드로젠의 과다 분비에 의한 피부지방조성의 불균형 및 P. acnes의 증식으로 인하여 여드름과 같은 피부질환이 발생한다. 여드름 유발균인 P. acnes는 지방분해 효소와 화학주성인자를 분비하여 유리지방산을 만들고 백혈구가 모낭 주위에 모이게 하며, 이들이 모낭벽을 자극한 후, 파괴하여 모낭 내용물이 진피 내로 유출됨으로서 염증반응이 일어난다.
호기성균인 S. epidermidis는 외모낭이나 모낭의 중간에서 성장하며, 원발성 피부질환 및 여드름 증상의 속발성을 악화시키는 원인균이다. 점액 생성능이 항생제로부터 균체를 보호하고 숙주의 면역반응인 식균작용을 막으며 혈구응집능을 억제하고 숙주의 면역계를 손상한다고 알려져 있다.
P. acnes와 S. epidermidis 등의 균들이 염증 반응을 유발하는데 주된 역할을 하게 되므로 염증성 여드름의 치료에 항생제가 주로 사용되고 있다. 현재 여드름 치료제로 쓰이고 있는 약제로는 레티노이드(retinoid), 과산화벤조일(benzoyl peroxide), 클린다마이신(clindamycin), 에리트로마이신(erythromycin), 트리클로산(triclosan) 등과 같이 화장품 응용이 부적합한 의료용 항생제나 화학 합성품들이 대부분이며, 이들은 부작용이 알려져 있다. 레티노이드(retinoid)는 각질을 제거하여 원활한 피지 배출을 유도하며 여드름 균의 증식을 억제하므로 면포성 여드름에 많이 사용되지만, 부작용으로 피부자극(skin irritation)이 보고되고 있다. 염증성 여드름에 효과적인 과산화벤조일(benzoyl peroxide)과 일반 여드름과 농포성 여드름에 효과적인 클린다마이신(clindamycin), 에리트로마이신(erythromycin)은 P. acnes 균주에 대한 유리지방산의 생성을 감소시키는 작용이 있어 사용되고 있으나, 항생제에 대한 내성 발생으로 인하여 지속적인 사용이 어렵고 간독성이 심하며, 칸디다증과 같은 기회감염증이 나타날 수 있다. 또한 트리클로산(triclosan)의 경우 빛에 노출되었을 때 환경호르몬으로 바뀌어 심각한 환경오염을 일으킬 수 있다. 따라서 여드름 피부에 효과적이고 피부에 안전하며 부작용을 최소화 할 수 있는 천연 항균물질에 대한 관심이 급증하고 있는 추세이며, 많은 연구자들이 이러한 여드름 치료제를 개발하려고 노력 중이다.
천연물을 이용한 천연 항균제의 개발은 무한한 가능성을 내재하고 있다고 볼 수 있으며, 단풍나무에서 분리된 진나린(ginnalin), 감귤류의 성분인 헤스페리딘(hesperidin), 황백이나 황련 등에서 분리된 베르베린(berberine) 등이 항균 효과가 있다고 보고되고 있다.
본 발명의 목적은 검정무(Raphanus sativus L. var. niger) 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 검정무(Raphanus sativus L. var. niger)의 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한 일 양태로서, 본 발명은 검정무(Raphanus sativus L. var. niger) 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어“검정무(Raphanus sativus L. var. niger)”는 무의 유색 무 품종 중 하나로 유럽에서는 약용으로 많이 사용되어 온 작물이다. 백무와 달리 겉피가 검정색인 것이 특징이다.
본 발명의 “발효”는 검정무를 유산균을 이용하여 발효시키는 것을 의미한다.
본 발명의 실시예 검정무를 세척 및 절단하여 분쇄하고 멸균한 후 검정무 배지를 제조하였으며, 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 접종하여 검정무를 발효시켰다.
따라서 상기 발효는 검정무를 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균을 접종하여 발효시키는 것일 수 있으며, 상기 유산균은 구체적으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) 균주일 수 있다.
본 발명에서 용어, "추출물"은 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
본 발명에서 추출물의 건조는 채취한 식물로부터 유용한 성분들이 파괴되지 않는 범위에서 공지의 방법으로 진행될 수 있고, 예를 들어 음지에서 자연건조의 방법으로 진행될 수 있다. 또한, 파쇄 또는 분쇄는 이후 추출과정에서 식물의 유용한 성분들이 충분하게 추출될 수 있을 정도로 파쇄 또는 분쇄하여 분말화할 수 있다. 상기 건조와 파쇄 또는 분쇄 공정은 필요에 따라서 순서를 뒤바꿔서 진행하거나 반복하여 실시할 수 있다.
본 발명의 추출에 있어서, 상기 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다.
본 발명에서 검정무 발효 추출물은 물, 유기용매, 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할 수 있다. 구체적으로 물, 메탄올, 에탄올 및 부탄올 등과 같은 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 수득될 수 있다.
본 발명의 실시예에서 검정무 배지로 발효시킨 후 메탄올 용매로 추출하며 검정무 발효 추출물을 제조하였다. 따라서 본 발명에서 상기 알코올은 구체적으로 메탄올일 수 있다.
본 발명에서 용어 “분획물”은 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 검정무 발효 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명의 검정무 발효 추출물을 증류수(물)에 현탁한 후, 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올, 에틸아세테이트, 헥산 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 분획함으로써 수득할 수 있다.
본 발명의 실시예에서 검정무 발효 추출물을 증류수에 현탁한 후 헥산을 첨가하여 헥산 분획물을 수득하고, 상기 헥산 분획물을 제외한 남은 수용층에 에틸아세테이트를 추가하여 에틸아세테이트 분획물을 수득하였으며, 상기 에틸아세테이트 분획물을 제외하고 남은 수용성 성분에 부탄올을 추가하여 부탄올 분획물을 수득하였다. 상기 부탄올 분획물을 제외하고 남은 수용성 성분을 물 분획물로 수득하였다.
본 발명에서 상기 분획물은 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 용매 또는 물 분획물일 수 있다.
본 발명의 실시예에서 검정무 발효 추출물과 검정무 비발효 추출물 모두 에리트로마이신(erythromycin) 내성균주인 표피포도상구균 CCARM 3710에 대해 항균활성을 가짐을 확인하였고, CCARM 3711 균주에 대해서는 검정무 발효 추출물만 항균활성을 가짐을 확인하였다. 또한 CCARM 3710 균주에 대한 클리어 존(clear zone) 비교결과, 검정무 발효 추출물이 비발효 추출물보다 크기가 크게 측정되었는바, 동일 농도로 처리시 검정무 발효 추출물이 비발효 추출물 보다 항균 효과가 우수함을 확인하였다. 즉, 표피포도상구균에 대해 검정무 발효 추출물이 비발효 추출물보다 항균 활성이 우수함을 확인하였다.
여드름균에 대해서는 검정무 발효 추출물 및 비발효 추출물 모두 항균효과가 나타나지 않음을 확인하였고, 비발효 추출물의 각 용매 분획물 역시 여드름균에 대해 항균 효과를 나타내지 않았다. 검정무 발효 추출물의 헥산 분획물 및 물 분획물 역시 여드름균에 대해 항균 효과가 없음을 확인하였다. 반면 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이드 분획물 및 부탄올 분획물은 여드름균에 대해 항균활성을 보임을 확인하였다.
따라서 본 발명에서 용어 “항균”은 미생물에 대한 생장 억제 및 저해효과를 가지는 것으로, 구체적으로 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 나타내는 것일 수 있다.
본 발명의 실시예에서 검정무 발효 추출물의 에틸아세트 분획물 및 부탄올 분획물이 에리트로마이신(erythromycin)에 대한 내성을 가지는 표피포도상구균(CCARM 3710)과 여드름균(CCARM 9009, CCARM 9010)에 대해서 항균활성이 우수함을 확인하였다.
따라서 본 발명의 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)은 에리트로마이신(erythromycin)에 대해 내성을 가지는 것일 수 있다. 구체적으로 상기 표피포도상구균은 CCARM 3710일 수 있으며, 상기 여드름균은 CCARM 9009, CCARM 9010일 수 있다.
또한 본 발명의 실시예에서 비발효 추출물 및 이의 용매 분획물은 여드름균에 대해 항균효과를 나타내지 않았으나, 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물 또는 부탄올 분획물이 여드름균에 대한 항균 효과를 나타냄을 확인하였다. 즉, 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물 및 부탄올 분획물의 표피포도상구균 및 여드름균에 대한 항균 활성이 우수함을 확인하였다.
또한, 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 추출물 및 다른 용매 분획물과 비교하여 클리어 존의 크기가 가장 크게 측정되었다. 즉, 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 동일 농도 처리시 추출물 및 용매 분획물 중 항균 효과가 가장 우수함을 확인하였다.
따라서 본 발명의 분획물은 구체적으로 에틸아세테이트 또는 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 용매로 분획한 것일 수 있으며, 상기 탄소수 1(C1)내지 4(C4)의 알코올 용매는 부탄올일 수 있으며 더욱 구체적으로 에틸아세테이트 용매로 분획한 것 일수 있다.
본 발명의 다른 양태로 상기 항균용 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 항균에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 화장용 조성물은 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물을 포함하여 항균 효과를 가지며, 구체적으로 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대해 항균 효과를 가진다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 항균용 조성물 이외에 통상적으로 허용되는 성분들을 제한없이 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시테이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물을 전체 화장품 중량의 1 내지 20 중량% 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게는 10 중량% 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 양태로 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 질환의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 검정무, 발효, 추출물, 분획물에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명에서 사용된 용어 “여드름 질환”은 모피지선, 모낭 및 주변조직에서 발생하는 복합적인 염증성 피부질환으로, 면포라는 발진을 특징적 증상으로 한다. 면포는 얼굴, 이마, 콧등에 가장 자주 나타나는 나사 모양의 굳어진 피지 덩어리로, 면포 내부에는 여드름 원인균으로 알려진, 혐기성균인 여드름균(Propionibacterium acnes)이 생장하고, 면포 표면에는 호기성균인 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis)이 생장하며, 생산하는 여러 화학성분이 모낭 및 주위피부에 염증을 일으킨다.
전술한 실시예에서 검정무 추출물 또는 이의 분획물이 피부질환 또는 여드름을 유발하는 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대해 항균활성을 가지며 또한, 항생제인 에리트로마이신(erythromycin) 내성을 가진 균주에 항균활성을 가짐을 확인하였다. 따라서 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물은 여드름 질환 예방 또는 개선할 수 있다.
본 발명의 용어, “예방’이란, 본 발명에 따른 조성물을 개체에 투여하여 여드름의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있고, “개선”은, 본 발명에 따른 조성물을 개체에 투여하여 여드름 증상을 완화 또는 감소시키는 것을 의미한다.
구체적으로 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)의 생장을 억제하여 여드름을 예방 또는 개선하는 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로 항생제 내성 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대해 생장을 억제하여 여드름을 예방 또는 개선시키는 것일 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "건강기능성 식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능성 식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명의 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물은 원료 조성물 중 1 내지 50 중량%, 바람직하게는 5 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능성 식품을 모두 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태로 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 검정무, 발효, 추출물, 분획물, 여드름 질환, 예방에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, “치료”란, 본 발명의 상기 조성물에 의해 여드름에 의한 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 유효성분 이외의 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이때, 상기 조성물에 포함되는 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량% 내지 99 중량%로, 바람직하게는 0.01 중량% 내지 50 중량%를 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치에 의해 결정될 수 있으며, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태로 검정무 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 검정무, 발효, 추출물, 분획물, 화장료 조성물에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
따라서 본 발명에서 사용된 용어 “여드름 개선”은 피부상에서 여드름 유발 균주인 표피포도상구균 또는 여드름균의 생육을 저해하거나 감소시켜 여드름의 증상을 완화 또는 개선시키는 것을 의미한다. 구체적으로 에리트로마이신(erythromycin) 내성 표피포도상구균 균주 또는 에리트로마이신(erythromycin) 내성 여드름균 균주에 대해 항균 활성을 통해 여드름을 개선시키는 것일 수 있다.
본 발명은 검정무(Raphanus sativus L. var. niger)의 발효 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로, 상기 검정무(Raphanus sativus L. var. niger)의 발효 추출물 또는 이의 분획물은 피부질환 또는 여드름을 유발하는 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis)과 여드름균(Propionibacterium acnes) 균주에 대해 우수한 항균 효과를 가지며, 검정무(Raphanus sativus L. var. niger)의 발효 추출물 또는 이의 분획물이 에리트로마이신 내성을 가진 표피포도상구균 및 여드름균에 대해 항균 효과를 나타내 항균용 조성물, 구체적으로 화장료 조성물로 이용가능하며, 또한, 여드름 개선 또는 치료용 약학 조성물, 건강기능성식품 조성물 및 화장료 조성물로 이용 가능하다.
도 1은 검정무 발효 추출물 및 용매별 분획물의 표피포도상구균(S. epidermidis) 및 여드름균(P. acnes)에 대한 항균 활성을 분석한 것이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 보다 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 검정무 발효 또는 비발효 분말의 제조
1.1. 검정무 발효분말의 제조
검정무(Raphanus sativus L. var. niger)는 제주 성산일출봉농협으로부터 제공받아 사용하였으며, 세척 후 절단한 검정무를 95℃에서 15분간 1차 멸균한 후 분쇄하여 121℃에서 15분간 2차 멸균하여 검정무 배지를 제조하였다. 제조한 검정무 배지 중량 당 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) 종균 1%를 접종한 후 37℃에서 2일간 배양하였다. 배양 종료 후 95℃에서 15분간 멸균한 다음 동결건조한 후, 분말화하여 발효분말을 제조하였다.
1.2. 비발효 분말의 제조
세척 후 절단한 검정무를 동결건조 및 분말화하여 비발효 분말을 제조하였다.
<실시예2> 추출물 제조
검정무 발효 분말 또는 검정무 비발효 분말 50 g을 메탄올 1 L에 넣고 실온에서 24시간 침출하였다. 여과하여 걸러진 여액을 감압 건조하여 분말 형태인 검정무 발효 및 비발효 추출물을 준비하였다.
<실시예3> 검정무 발효 또는 비발효 추출물의 용매별 분획물의 제조
분말형태의 검정무 발효 및 비발효 추출물에 극성이 다른 용매인 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올, 물을 넣고 순차적으로 분획하여 각 용매별 분획물을 제조하였다.
3.1. 헥산 분획물의 제조
실시예2에서 제조한 검정무 발효 메탄올 추출물 또는 검정무 비발효 메탄올 추출물을 물(증류수)에 녹인 후, 헥산 용매를 첨가하여 헥산 분획물을 분리하였으며, 분리한 헥산 분획물은 감압 건조하여 분말형태로 제조하였다.
3.2. 에틸아세테이트 분획물의 제조
헥산 분획물을 분리하고 남은 잔여층에 에틸아세테이트 용매를 첨가한 후, 에틸아세테이트 분획물을 분리하고 이를 감압 건조하여 분말형태로 제조하였다.
3.3. 부탄올 분획물의 제조
에틸아세테이트 분획물을 분리하고 남은 잔여층에 부탄올 용매를 첨가하여 부탄올 분획물을 분리하고 이를 감압 건조하여 분말형태로 제조하였다.
3.4. 물 분획물의 제조
부탄올 분획물을 분리하고 남은 잔여층을 물 분획물로 사용하였으며, 다른 용매 분획물과 동일하게 감압 건조하여 분말형태로 제조하였다.
<실험예1> 추출물 및 분획물의 항균 활성 분석
1.1 실험방법
검정무 발효 추출물과 이의 분획물 및 비발효 추출물과 이의 분획물의 항균 활성을 측정하였다. 항균 활성 측정을 위해 한천 확산법(paper disc diffusion method)으로 클리어 존(clear zone)의 크기를 확인하였다. 각 균주는 0.5 McFarland standard로 탁도를 조절하여 1.5 × 106 CFU/mL로 맞춰준 후, 0.8% 한천(agar)을 포함하는 배지에 넣어 하드배지(1.5% agar) 위에 붓는다. 배지가 굳으면 시료 용액을 포함하는 직경 8 mm 페이퍼 디스크(paper disc)를 올린 후, 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis, S. epidermidis)은 37℃에서 24시간 동안 배양하고, 여드름균(Propionibacterium acnes, P. acnes)은 37℃에서 48시간 동안 혐기 배양한 후, 형성된 원형 발육 저지환(클리어 존, clear zone)의 크기를 측정하였다. 대조군으로는 에리트로마이신(erythromycin)을 사용하였다. 이때 각 시료는 4 mg으로 처리하였고, 양성 대조군은 20 ㎍을 처리하였다.
1.2. 실험결과
항균 활성 분석결과는 표 1 및 도 1과 같다. 항균 분석에는 표피포도상구균(S. epidermidis) 3종(CCARM 3709, CCARM 3710, CCARM 3711)과 여드름균(P. acnes) 4종(CCARM 0081, CCARM 9009, CCARM 9010, CCARM 9089)을 사용하였다.
항균활성 분석결과 표피포도상구균(S. epidermidis) CCARM 3710 균주와 여드름균(P. acnes) CCARM 9009 균주 및 CCARM 9010 균주는 양성 대조군인 에리트로마이신에 대해 내성을 가지는 균주임을 확인하였다.
검정무 발효 추출물과 비발효 추출물의 비교
검정무 발효 추출물과 검정무 비발효 추출물의 항균 활성 비교 결과, 두 추출물 모두 에리트로마이신 내성균주인 표피포도상구균(S. epidermidis) CCARM 3710에 대해 항균활성을 가짐을 확인하였고, CCARM 3711 균주에 대해서는 검정무 발효 추출물만 항균활성을 가짐을 확인하였다.
또한 CCARM 3710 균주에 대한 클리어 존 비교결과, 검정무 발효 추출물이 비발효 추출물보다 크기가 크게 측정되었는바, 동일 농도로 처리시 검정무 발효 추출물이 비발효 추출물 보다 항균 효과가 우수함을 확인하였다.
즉, 표피포도상구균(S. epidermidis) 균주에 대해 검정무 발효 추출물이 비발효 추출물보다 항균 활성이 우수함을 확인하였다.
반면, 검정무 발효 추출물 및 비발효 추출물 모두 여드름균(P. acnes)에 대해서는 항균효과가 나타나지 않음을 확인하였다.
용매별 분획물의 항균활성 비교
다음으로 발효 추출물 및 비발효 추출물의 용매별 분획물의 항균 활성을 비교하였다. 검정무 발효 추출물 및 비발효 추출물의 헥산 분획물은 표피포도상구균(S. epidermidis)에 대해 항균효과가 나타났으나, 여드름균(P. acnes)에 대해서는 항균활성이 나타나지 않았다. 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 실험에 이용한 균주 7종에서 모두 항균 활성을 나타냈다. 반면 검정무 비발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 여드름균(P. acnes)에 대해서는 항균활성을 나타내지 않았다. 검정무 발효 추출물의 부탄올 분획물은 CCARM 9089 균주를 제외한 6종의 균주에서 항균 활성이 나타났으나, 비발효 추출물의 부탄올 분획은 7종의 균주에서 모두 항균활성이 나타나지 않았다. 발효 추출물 및 비발효 추출물의 물 분획물은 모든 균주에서 항균활성이 나타나지 않았다.
상기 결과를 통해 검정무 발효 추출물 및 이의 분획물이 검정무 비발효 추출물 및 이의 분획물보다 항균 효과가 우수함을 확인하였다.
구체적으로 검정무 발효 추출물의 에틸아세트 분획물 및 부탄올 분획물이 에리스토마이신(Erythromycin)에 대한 내성을 가지는 S. epidermidis(CCARM 3710)과 여드름균(P. acnes, CCARM 9009, CCARM 9010)에 대해서 항균활성이 우수함을 확인하였다. 또한, 비발효 추출물 및 이의 용매 분획물은 여드름균(P. acnes)에 대해 항균효과를 나타내지 않았으나, 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물 또는 부탄올 분획물이 여드름균(P. acnes)에 대한 항균 효과를 나타냈다.
따라서 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물 및 부탄올 분획물이 표피포도상구균(S. epidermidis) 및 여드름균(P. acnes)에 대한 항균 활성이 우수하며, 에리스토마이신 내성 균주에 대해 항균 효과를 가짐을 확인하였다.
또한, 클리어 존의 크기 비교 결과, 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 추출물 및 다른 용매 분획물과 비교하여 클리어 존의 크기가 가장 크게 측정되었다.
즉, 검정무 발효 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 동일 농도 처리시 추출물 및 용매 분획물 중 항균 효과가 가장 우수함을 확인하였다.
Claims (13)
- 검정무(Raphanus sativus L. var. niger) 발효 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 또는 부탄올 분획물을 유효성분으로 포함하고, 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 나타내는 항균용 조성물.
- 삭제
- 제 1항에서,
상기 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 또는 여드름균(Propionibacterium acnes)은 에리트로마이신(erythromycin)에 대해 내성을 가지는 것인 조성물. - 제 1항에서
상기 발효 메탄올 추출물은 검정무를 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균으로 발효하여 추출한 것인 조성물. - 제 4항에서
상기 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균은 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)인 것인 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제 1항 또는 제 3항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 항균용 조성물을 포함하는 항균용 화장료 조성물.
- 제 1항 또는 제 3항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제 1항 또는 제 3항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 항균용 조성물을 유효성분으로 포함하는 여드름 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 검정무(Raphanus sativus L. var. niger) 발효 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 또는 부탄올 분획물을 유효성분으로 포함하는, 여드름 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
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Non-Patent Citations (2)
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| J. Korean Soc. Appl. Biol. Chem. Vol.47, No.1, pp.67-71 (2004.) |
| Korean J. Microbiol. Biotechnol. Vol.41(2), pp.228-235 (2013.) |
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