KR101951782B1 - 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 녹차를 열수 추출하고 누룩균으로 액체 배양함으로써 우수한 티로시나아제 저해 효과를 나타내는 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물{Cosmetic composition for whitening containing green tea extract}
본 발명은 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 녹차를 열수 추출하고 누룩균으로 액체 배양함으로써 우수한 티로시나아제 저해 효과를 나타내는 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부색은 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께, 및 카로티노이드 및 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무와 같은 여러 요인들에 의해 결정되며 그 중 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소가 가장 중요하다. 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비 및 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인이 영향을 미친다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 가지고 있지만 멜라닌이 과잉생산됨으로써 기미 또는 주근깨 등을 형성할 뿐 아니라 피부노화를 촉진하며 피부암 유발에도 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다.
기미, 주근깨 또는 색소침착 등과 같은 피부색소 이상침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서 이전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합 사용하여 왔는데, 이들은 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합시 제형 및 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.
이에, 본 발명자들은 효과적인 티로시나아제 억제 효과를 나타내는 물질에 대한 연구를 거듭한 결과, 녹차를 열수 추출하고 누룩균으로 액체 배양하여 제조한 녹차 추출물이 높은 티로시나아제 저해 효과를 보임을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 우수한 티로시나아제 저해 효과를 나타내는 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 누룩균으로 발효시킨 녹차추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 녹차 추출물은 녹차를 열수 추출하고 누룩균을 이용하여 액체 배양함으로써 멜라닌 세포 생성에 중요한 역할을 하는 티로시나아제의 활성을 효과적으로 억제할 수 있으며, 궁극적으로는 우수한 피부 미백 효과를 나타낸다.
도 1은 본 발명에 따른 누룩균을 이용한 액체 열수 추출 방법에 의한 녹차 추출물의 제조 공정도이다.
도 2는 균류에 따른 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 녹차 추출 조건 및 누룩균의 발효 조건에 따른 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타낸 그래프이다.
본 발명은 누룩균으로 발효시킨 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명에서 사용하는 녹차 추출물은 다음의 단계를 포함하는 방법으로 제조할 수 있다.
1) 녹차를 열수 추출하는 단계;
2) 상기 열수 추출물을 자연 냉각하는 단계; 및
3) 냉각된 추출물을 누룩균으로 발효하는 단계.
상기 1) 단계의 누룩균을 이용한 액체 열수 추출 방법은 도 1에 도식화하여 나타내었다.
상기 1) 단계의 열수 추출은 60 내지 90℃, 가장 바람직하게는 80℃에서 실시된다. 이는 60℃ 미만이면 추출 효율이 떨어지고, 90℃ 초과이면 추출물이 불안정해지기 때문에 바람직하지 않다.
상기 3) 단계에서 누룩균은 생균수를 기준으로 원료차의 g당 105~107 생균수로 투입하였으며, 최종 산물에서는 106 이내로 검출된다. 투입되는 누룩균의 생균수가 105 미만이면 발효가 일어나지 않고, 107 초과이면 다른 잡균의 오염이 생겨 바람직하지 않다.
본 발명에 따른 녹차를 열수 추출하고 누룩균으로 액체 배양한 추출물은 통상적인 녹차 추출물과 비교하여 우수한 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내고, 이로써 우수한 피부 미백 효과를 나타낸다.
본 발명은 상기에 따라 제조된 녹차 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명에서 유효성분으로 사용되는 녹차를 열수 추출하고 누룩균으로 액체 배양한 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 40중량%로 함유된다. 이는 0.1중량% 미만이면 피부 미백 효과가 미미하고, 40중량%를 초과하더라도 함량의 증가에 따른 효과의 증가가 별로 없기 때문에 바람직하지 않다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않고, 예를 들어 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 젤, 파우더, 립스틱, 메이크업 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 겔, 패취, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징 크림, 클렌징 워터, 비누 또는 분무제 등과 같은 제형을 들 수 있다.
이하, 실시예 및 시험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.
[참고예 1] 발효 녹차의 제조
효모(사카로마이세스 세레비지애, Saccharomyces cerevisiae), 고초균(바실러스 서브틸리스, Bacillus subtilis), 유산균(락토바실러스 델브루에키이 서브스피시즈 불가리쿠스, Lactobacillus delbrueckii spp. Bulgaricus), 누룩균(아스퍼질러스 오리재, Aspergillus oryzae)을 각각 이용하여 균 발효 녹차를 제조하였다.
우선, 녹차 200g을 이온수 2l에 넣고 80℃에서 3시간 동안 열수 추출한 후, 자연 냉각하고 락트산을 이용하여 pH를 3.5로 보정하였다. 액체 열수 추출물을 각각의 균으로 배양하였다.
진동 배양기에서 각 균별 배양 조건은 다음과 같다. 사카로마이세스 세레비지애는 감자 녹말 0.4% 및 덱스트로오스 2% 배지에서 25℃로 72시간, 바실러스 서브틸리스는 덱스트로오스 2%, 펩톤 0.5% 및 쇠고기 추출물 0.2% 배지에서 35℃로 48시간, 락토바실러스 델브루에키이 서브스피시즈 불가리쿠스는 덱스트로오스 2%, 펩톤 1%, 쇠고기 추출물 1% 및 효모 추출물 0.5% 배지에서 30℃로 48시간, 아스퍼질러스 오리재는 수크로오스 5% 및 효모 추출물 0.75%의 배지에서 30℃로 96시간 동안 각각 배양하였다.
배양된 각각의 균주들을 회수하여 1차로 원심분리기에서 균주와 배지를 분리하였다. 0.8~1.0% 농도의 생리 식염수를 이용하여 균주를 2~4회 세척해 준 다음, 설탕 0.05~22.0%, 과당 0.005~10.0%의 농도로 혼합한 후, 120℃에서 15분간 고온 가압 멸균하고 상온에서 25℃까지 냉각시킨 발효액에 넣었다.
[시험예 1] 발효 균류에 따른 티로시나아제 활성 저해 효과
상기 발효 녹차들을 이용하여 티로시나아제 활성 저해 효과를 반니 등의 방법(A. Vanni, Annali Di Chimica, 80, p35, 1990)을 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 0.1M 포타슘 포스페이트 완충액(pH 6.8) 1.0㎖, 0.3mg/㎖ 티로신 수용액 1.0㎖, 1250유니트/㎖ 티로시나아제 0.1㎖를 혼합한 후 시료 용액을 농도별로 각각 0.2㎖ 첨가하여 37℃에서 10분간 효소 반응을 진행시켰으며, 반응용액의 흡광도를 480nm에서 측정하고, 그 결과는 도 2에 나타내었다.
도 2로부터 효모, 고초균, 유산균 발효 녹차는 발효 전 녹차와 동일하게 티로시나아제 저해 활성이 없었던 반면, 누룩균을 25ppm으로 처리한 실험군에서는 티로시나아제 활성이 저해됨을 확인할 수 있었다.
[실시예 1] 누룩균 액체 열수 추출물의 제조
녹차 200g을 이온수 2l에 넣고 80℃에서 3시간 동안 열수 추출한 후, 자연 냉각하고 락트산을 이용하여 pH를 3.5로 보정하였다. 별도로 수크로오즈 22.5% 및 효모 추출물 1%를 혼합한 배지에서 락트산을 이용하여 pH를 3.0으로 보정하고 121℃에서 1시간 동안 멸균한 후, 이에 액체 열수 추출물을 150㎖씩 첨가하면서 누룩균을 접종하고 30℃로 발효하였다. 수득한 발효액을 10분 동안 소니케이션(sonication)하고 셀라이트(celite)로 여과하여 50㎖ 팔콘 튜브에 보관 및 냉동하여 누룩균 액체 열수 추출물을 제조하였다.
[비교예 1] 누룩균 고체 알코올 추출물의 제조
녹차 200g을 70% 에탄올 2l에 넣고 상온에서 3시간 동안 알코올 추출한 후, 동결 건조하였다. 별도로 수크로오즈 22.5% 및 효모 추출물 1%를 혼합한 배지에서 락트산을 이용하여 pH를 3.0으로 보정하고 121℃에서 1시간 동안 멸균한 후, 이에 고체 알코올 추출물을 10g씩 첨가하면서 누룩균을 접종하고 30℃로 발효하였다. 수득한 발효액을 10분 동안 소니케이션(sonication)하고 셀라이트(celite)로 여과하여 50㎖ 팔콘 튜브에 보관 및 냉동하여 누룩균 고체 알코올 추출물을 제조하였다.
[비교예 2] 누룩균 고체 열수 추출물의 제조
녹차 200g을 이온수 2l에 넣고 80℃에서 3시간 동안 열수 추출한 후, 동결 건조하였다. 별도로 수크로오즈 22.5% 및 효모 추출물 1%를 혼합한 배지에서 락트산을 이용하여 pH를 3.0으로 보정하고 121℃에서 1시간 동안 멸균한 후, 이에 고체 열수 추출물을 10g씩 첨가하면서 누룩균을 접종하고 30℃로 발효하였다. 수득한 발효액을 10분 동안 소니케이션(sonication)하고 셀라이트(celite)로 여과하여 50㎖ 팔콘 튜브에 보관 및 냉동하여 누룩균 고체 열수 추출물을 제조하였다.
[비교예 3] 누룩균 액체 알코올 추출물의 제조
녹차 200g을 70% 에탄올 2l에 넣고 상온에서 3시간 동안 알코올 추출한 후, 자연 냉각하고 락트산을 이용하여 pH를 3.5로 보정하였다. 별도로 수크로오즈 22.5% 및 효모 추출물 1%를 혼합한 배지에서 락트산을 이용하여 pH를 3.0으로 보정하고 121℃에서 1시간 동안 멸균한 후, 이에 액체 알코올 추출물을 150㎖씩 첨가하면서 누룩균을 접종하고 30℃로 발효하였다. 수득한 발효액을 10분 동안 소니케이션(sonication)하고 셀라이트(celite)로 여과하여 50㎖ 팔콘 튜브에 보관 및 냉동하여 누룩균 액체 알코올 추출물을 제조하였다.
[비교예 4] 발효전 녹차 추출물의 제조
건조한 녹차잎 200g에 70% 에탄올 2l을 넣고, 3회 환류 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 발효전 녹차 추출물을 제조하였다.
[시험예 2] 누룩균의 발효 조건 및 녹차 추출 조건에 따른 티로시나아제 활성 저해 효과
상기 실시예 1 및 비교예 1~4를 이용하여 시험예 1과 동일한 방법으로 각각의 시료의 티로시나아제 활성 저해 효과를 시험하였다. 그 결과는 도 3에 나타내었다.
도 3으로부터 알 수 있듯이, 녹차를 열수 추출한 열수 추출물을 누룩균으로 액체 배양 발효시킨 녹차 추출물은 농도가 증가함에 비례하여 우수한 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 반면, 고체 알코올 추출, 고체 열수 추출 또는 액체 알코올 추출한 비교예 1~3 및 발효 과정을 거치지 않은 일반 녹차 추출물인 비교예 4는 티로시나아제 활성의 저해 효과가 거의 나타나지 않았다
[제형예 1] 영양화장수(밀크로션)의 제조
성분명 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
히알루론산 추출물 5.0
베타 글루칸 7.0
카보머 0.1
누룩균을 이용한 녹차 추출물 2.0
카프릴릭 카프릭 트리글리세리드 8.0
스쿠알렌 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
세테아릴 알코올 1.0
방부제, 향, 색소 적량
트리에탄올 아민 0.1
[제형예 2] 영양크림의 제조
성분명 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
유동파라핀 7.0
베타 글루칸 7.0
카보머 0.1
누룩균을 이용한 녹차 추출물 2.0
카프릴릭 카프릭 트리글리세리드 3.0
스쿠알렌 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
폴리솔베이트 1.2
방부제, 향, 색소 적량
트리에탄올 아민 0.1
[제형예 3] 마사지 크림의 제조
성분명 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 45.0
베타 글루칸 7.0
카보머 0.1
누룩균을 이용한 녹차 추출물 2.0
카프릴릭 카프릭 트리글리세리드 3.0
밀랍 4.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
세스퀴 올레인산 소르비탄 0.9
바세린 3.0
방부제, 향, 색소 적량
트리에탄올 아민 0.1
[제형예 4] 연고의 제조
성분명 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 15.0
베타 글루칸 7.0
카보머 0.1
누룩균을 이용한 녹차 추출물 2.0
카프릴릭 카프릭 트리글리세리드 3.0
스쿠알렌 1.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
스테아릴 알코올 1.0
방부제, 향, 색소 적량
밀랍 4.0

Claims (5)

  1. 녹차의 액체 열수 추출물을 누룩균으로 액상 발효시킨 녹차 추출물을 유효성분으로 함유하며,
    상기 누룩균은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)인, 미백용 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서, 상기 누룩균은 생균수를 기준으로 원료차의 g당 105~107 생균수로 투입되는 미백용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 유효성분인, 녹차의 액체 열수 추출물을 누룩균으로 액상 발효시킨 녹차 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.1~40중량%의 양으로 함유되는 미백용 화장료 조성물.
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