JP2006213711A - ピノレン酸の使用 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ピノレン酸は、例えば、食物サプリメント、医薬組成物または食品組成物の形態で使用可能である。
【選択図】なし
Description
N20=1〜80、好ましくは5〜45
N35 20未満、好ましくは10未満、最も好ましくは5未満。
i)シス5二重結合を有する少なくとも2重量%の脂肪酸を含むグリセリド材料を水またはグリセロールと、Δ5二重結合および他の脂肪酸を含む脂肪酸間を区別可能である酵素の存在下で反応する工程;
ii)反応混液を、部分的なグリセリドが豊富な成分および脂肪酸が豊富な成分に分ける工程;
iii)場合により、工程ii)の部分的なグリセリドを、適切な酵素の存在下で遊離脂肪酸に転換する工程;
iv)場合により、工程ii)の脂肪酸が豊富な成分を、適切な触媒、例えば、適切な酵素の存在下でのグリセロールとの反応によってトリグリセリドに転換する工程;
v)場合により、工程ii)の部分的グリセリドが豊富な材料を、a)モノグリセリドが豊富である成分、b)ジグリセリドが豊富である成分、およびc)トリグリセリドが豊富である成分に分け、次いで、場合により、部分的グリセリドa)およびb)を、適切な酵素の存在下での脂肪酸との反応によってトリグリセリドに転換する工程。
腸細胞からのCCK放出に対する種々の遊離脂肪酸の効果を測定するために、インビトロ試験を実行した。この研究は、満腹成分としての松果油の遊離脂肪酸、従ってピノレン酸の効果を示した(以下のデータを参照)。
STC1-1細胞株を、5% FCS、2mM グルタミン、100U/ml ペニシリンおよび50μM ストレプトマイシンを補充したRPMI 1640中で、5% CO2、95% 空気雰囲気中で、37℃にて培養した。細胞を、70〜80%コンフルエンシーに達した際に、PBSで細胞層を洗浄することおよびトリプシン-EDTAの溶液でインキュベートすることによって日常的に継代した。75cm2あたり2×106細胞の密度でのプレーティングを、日常的な継代培養のために使用した。
実験の24時間前に、STC1細胞を6ウェル培養プレートに40〜50%コンフルエンシーで播種した。実験の日に、細胞を、0.2%(重量/体積)BSAを含む1ml Krebs-Ringer炭酸水素ナトリウム緩衝液(pH 7.4)(KRBB)中で洗浄した。STC1細胞を2ml KRBB中で15分間プレインキュベートし、その後、試験薬剤とともに、または試験薬剤を伴わずに、2ml量のKRBB中で1時間インキュベートした。インキュベーションの最後に上清を収集し、1000rpmで5分間遠心分離し、そしてすぐにRIAのために-20℃で凍結した。DNA含量を、培養細胞内容物の抽出後に蛍光計によって測定した。
CCK免疫反応性を、抗血清.39A(1/300,000)(CCK-33およびCCK-8と100%、硫酸化されたガストリン-17と12%、非硫酸化ガストリン-17と5%、および非硫酸化CCK-8およびガストリン-34と0.1%未満、交差反応する)を使用して測定した。CCK-8を標準として使用する。Bolton-Hunter(Thr, Nle)-CCK-9を、クロラミン-T法によってヨード125で標識し、逆相HPLCによって精製した。アッセイ緩衝液は0.05Mリン酸ナトリウムpH 7.5であった。1μl〜200μlの上清のアリコートを二連で試験した(0日目)。標識を1日目に加え、チャーコール沈殿を48時間後に実行する。
以下は、本発明に従う充填したゼラチンカプセルの例である。ピノレン酸を含む組成物は、当該分野において周知である方法に従って、ゼラチンカプセルにカプセル化される。得られるカプセル化された製品は500mgのピノレン酸を含み、1つのカプセルが、成体ヒトによって毎日4回摂取可能である。
以下の図面の図は実施例3において引用され、以下のように要約される:
図2は、3gピノレン酸FFA(上のプロット;破線)またはプラセボ(下のプロット;実線)の摂取後のCCK血液レベル(pmol/L)を示し;
図3は、3gピノレン酸FFA(上のプロット;破線)またはプラセボ(下のプロット;実線)の摂取後のGLP1血液レベル(pmol/L)を示し;
図4は、3gピノレン酸FFA(下のプロット;破線)またはプラセボ(上のプロット;実線)の摂取後4時間の間の食欲を示し;
図5は、3gピノレン酸FFA(下のプロット;破線)またはプラセボ(上のプロット;実線)の摂取後4時間の間の予測される食物摂取を示し;
図6は、3gピノレン酸実施例3(ii)TG(上のプロット;破線)またはプラセボ(下のプロット;実線)の摂取後のCCK血液レベル(pmol/L)を示し;
図7は、3gピノレン酸TG(下のプロット;破線)またはプラセボ(上のプロット;実線)の摂取後4時間の間の食欲を示し;そして
図8は、3gピノレン酸TG(下のプロット;破線)またはプラセボ(上のプロット;実線)の摂取後4時間の間の予測される食物摂取を示す。
多数の異なる化合物による相対的CCK放出を、腸細胞から放出されるCCKに対する種々の遊離脂肪酸の効果を測定するため、インビトロ試験において測定した。この研究は、松果油の遊離脂肪酸、従って、満腹成分としてのピノレン酸の効果を示した(以下のデータを参照)。松果油中で高い含量および低い含量で存在する他の脂肪酸(オレイン酸、リノール酸、タキソール酸、シアドン酸、およびジュニペロン酸など)は、高い量のCCKを誘導することができない。27%ピノレン酸を有する組成物は、16%ピノレン酸を有するものよりもわずかに高い量のCCKを誘導する。
腸内分泌腺STC1-1細胞株を、標準培養培地(DMEM)中で、5% CO2、95% 空気雰囲気中で、37℃にて培養した。細胞を、70〜80%コンフルエンシーに達した際に、PBSで細胞層を洗浄することおよびトリプシン-EDTAの溶液でインキュベートすることによって日常的に継代した。75cm2あたり2×106細胞の密度でのプレーティングを、日常的な継代培養のために使用した。
STC1細胞を6ウェル培養プレートに播種し、試験薬剤とともに、または試験薬剤を伴わずに、コントロール培養培地とともに1時間インキュベートした。すべての薬剤を遊離脂肪酸型で100μM濃度で試験した。脂肪酸はエタノールに希釈されたので、エタノールの効果を試験し、これはベースラインCCKレベルを示した。カプリン酸をネガティブコントロール脂肪酸として使用した。なぜなら、カプリン酸はCCKを誘導しないことがすでに知られているからである。ボンベシンの効果をポジティブコントロールとして使用した。インキュベーションの最後に上清を収集し、遠心分離し、そしてすぐにRIAのために-20℃で凍結させた。
CCK放出を、標準的なCCK RIAを使用して測定し、脂肪酸の効果を6倍で測定した。
実施例3(i)および3(ii)のピノレン酸TG組成物およびピノレン酸FFA組成物を、原材料として「粗松果油」を使用して製造する。
ソフトゲルカプセルを、回転ダイ型加工によって製造する。カプセルの外殻のための材料、ゲル、および内容物を、別々に製剤化する。一旦ゲルの塊および内容物の塊が準備されると、ゲルを2つのゼラチンリボンを形成するように薄いフィルムに広げ、次いでそれは、カプセルのサイズおよび形状を決定する2つの別々のダイに対して回転させる。ゼラチンフィルムがダイに適合すると、内容物を、カプセルあたり500mg、750mg、または1000mgのオイルのレベルまで注意深く用量を取り、2つのゼラチンリボン間に注入し、これをその後すぐに、熱および圧力を適用することによってシールする。カプセルは機械から落とされ、次いで熱気の流れの下で乾燥される。
Claims (16)
- 空腹感の減少および/または満腹感の増加による体重管理のための組成物の製造におけるピノレン酸またはその誘導体の使用。
- 前記組成物が、食物サプリメント、医薬組成物、または食品組成物の形態である、請求項1に記載の使用。
- 前記組成物が、遊離脂肪酸、モノ-、ジ-、もしくはトリグリセリド、またはこれらの混合物としてピノレン酸を含む、請求項1または2に記載の使用。
- 前記組成物が、松果油であるかまたは松果油に由来するものである、請求項1から3のいずれか一項に記載の使用。
- 前記誘導体が、α-リノレン酸、γ-リノレン酸、プニカ酸、エレオステアリン酸、およびこれらの塩またはこれらのアルキルエステルから選択される、請求項1に記載の使用。
- 前記アルキルエステルが、モノ-、ジ-、もしくはトリグリセリドまたはこれらの混合物である、請求項5に記載の使用。
- 前記組成物が、リノール酸、オレイン酸、共役リノール酸、共役リノール酸の濃縮異性体混合物、EPA、およびDHA、またはこれらの混合物からなる群から選択される脂肪酸またはその誘導体をさらに含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用。
- 前記脂肪酸またはその誘導体が、遊離脂肪酸、またはモノ-、ジ-、もしくはトリグリセリド、あるいはこれらの混合物として存在する、請求項7に記載の使用。
- 前記組成物が、リノール酸、オレイン酸、トランス酸、および飽和脂肪酸から形成される少なくとも1種のグリセリドをさらに含み、かつ前記組成物が食物組成物である、請求項1に記載の使用。
- 前記グリセリドが、ダイズ油、ヒマワリ油、ナタネ油、および綿実油から選択される液体油;ココアバターおよびココアバター等価物;パーム油およびその画分;酵素的に作製された脂肪;魚油およびその画分;共役リノール酸およびその濃縮異性体混合物;γ-リノール酸およびその濃縮混合物;硬化液体油;およびこれらの混合物から選択される、請求項9に記載の使用。
- 前記組成物が、マーガリン;低脂肪スプレッド;超低脂肪スプレッド;両連続スプレッド;水連続スプレッド;チョコレートなどの菓子製品、菓子のコーティング、または菓子の内容物;アイスクリーム;アイスクリームのコーティング;アイスクリームの含有物;ドレッシング;マヨネーズ;ソース;パン用の油脂;ショートニングまたはチーズ;食事代替食品;ヘルスバー;ミューズリーバー;飲料;乳製品;低炭水化物食品;低カロリー食品;スープ;シリアルおよびミルクセーキからなる群から選択される食品である、請求項1から10のいずれかに記載の使用。
- 前記組成物が、錠剤、丸薬、カプセル、カプレット、顆粒、ビーズ、ペレットおよびマイクロカプセル化粒子を含む多粒子、散剤、エリキシル、シロップ、懸濁液および溶液からなる群から選択される形態の医薬組成物である、請求項1から8のいずれか一項に記載の使用。
- 前記組成物が、ゼラチン、デンプン、加工デンプンおよびデンプン誘導体からなる群から選択されるカプセル化材料を含むソフトゲルまたはハードカプセルの形態の食物サプリメントである、請求項1から8のいずれか一項に記載の使用。
- 前記組成物が、体重の維持および/または体重の減少を助力すること、ならびに/あるいは身体のスリム化および/またはカロリー摂取の減少を支援すること、ならびに/あるいは高カロリー食品の余地を少なくすることによる体重管理のためのものである、請求項1から13のいずれか一項に記載の使用。
- 前記哺乳動物がヒトである、請求項1から14のいずれか一項に記載の使用。
- 哺乳動物におけるコレシストキニン(CKK)の産生を刺激するための組成物の製造における、請求項1から14のいずれか一項に記載の組成物の使用。
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