ES2344017T3 - Uso del acido pinolenico para el tratamiento de la obesidad. - Google Patents
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Abstract
El uso de ácido pinolénico o sal o ésteres del mismo en la fabricación de una composición para el control de peso en un humano por reducción de sentimiento de hambre y/o incrementando la saciedad, donde la composición está en forma de suplemento alimenticio o composición de alimento.
Description
Uso del ácido pinolénico para el tratamiento de
la obesidad.
Esta invención trata de composiciones en forma
de suplemento alimenticio o compuesto alimenticio que podría ser
usado para la gestión de peso, para controlar la toma de alimento y
el apetito y para controlar y/o reducir el peso corporal en
humanos. Los compuestos contienen ácido pinolénico y derivados del
mismo.
La obesidad esta llegando a ser bastante común
en individuos en sociedades desarrolladas. Generalmente una
condición de sobrepeso y obesidad resulta de un desequilibrio en
consumo de energía y utilización. La causa del desequilibrio de
energía para cada individuo puede deberse a una combinación de
múltiples factores como genéticos y medioambientales. La obesidad
puede ser un factor que contribuye en la creciente incidencia de
varias enfermedades incluyendo enfermedad arterial coronaria,
hipertensión, infarto, diabetes y ciertos cánceres.
La reducción de peso es a menudo recomendada
como el primer paso en el recorrido de dicha acción para pacientes
que sufren esta enfermedad de obesidad mencionada. En un intento de
control total del peso corporal, un individuo puede asumir el
control de peso, los objetivos de los cuales pueden cambiar
dependiendo de las necesidades del individuo. Por ejemplo, mientras
que los individuos con obesidad o sobrepeso desearían perder peso,
otros individuos desearían mantener su peso corporal en un nivel
constante. Una vez que la persona ha perdido peso, para mantener el
peso, se requiere que la persona lo prevenga ya que puede recuperar
su peso anteriormente perdido. Los programas más efectivos para la
pérdida de peso típicamente incluyen una reducción de calorías en
la dieta y/o aumentar el gasto de energía. A menudo, mucha gente
asume la experiencia de control de peso aumentando los niveles de
hambre y/o las ansias en alimentos altos en azúcar. Esto puede
llevar a los individuos a alejarse del régimen de control de peso.
Hay, además, una necesidad de desarrollar nuevas y efectivas vías
para soportar el control de peso y ayudar a los individuos a
continuar con su régimen de control de peso. Esto es un objetivo de
la presente invención para proporcionar nuevos medios para
proporcionar este apoyo.
El ácido pinolénico (por ejemplo, 5, 9, 12 C18:3
ácido graso, un ácido graso con 18 átomos de C teniendo tres dobles
enlaces en las posiciones 5, 9 y 12) está presente, por ejemplo, en
aceite de piñón y fracciones del mismo (J Aam Oil Chem Soc 1998,
75, p.45-50). Es sabido que el aceite de piñón, y
además ácido pinolénico, pueden ser aplicados en productos de
alimento, vea por ejemplo,
FR-A-2756465 donde se sabe que se
usa un concentrado con 15% en ácido pinolénico en aditivos en
alimento. La presencia de ácido pinolénico se describe como un
agente que proporciona un efecto hipolipémico a la composición.
WO 98/43513 revela que las limas de uñas pueden
ser revestidas con ácido pinolénico y que esto inhibe la aparición
de infecciones cuando se usan las limas.
De acuerdo con
JP-A-61238729, el aceite de piñón
puede ser usado como agente anticolesterante. Otros documentos
donde los efectos saludables del ácido pinolénico son revelados
incluido en JP-A-61058536, donde la
actividad genérica es muy beneficiosa para la salud humana esta
descrita. Esta actividad saludable no está desarrollado en mayor
detalle. Sugano, Brit J. of Nutr 71 (1994) 775-783,
revela un número de efectos saludables de dietas que contienen
ácido pinolénico. Los efectos de salud mencionados son efectos
hipocolesterolaemicos, efectos en la agregación plaquetaría
inducida por ADP, en producción prostacílica aortica y en presión
sanguínea. EP-A-1088552 describe el
uso de ácido pinolénico como un agente antiinflamatorio.
Matsuo et al, Prostaglandinas,
Leucotrieneas y ácidos grasos fundamentales, (1996), 55(4),
223-229 describe los efectos de ácidos
\gamma-linoleico y pinolénico en parámetros
inmunes en ratas Brown-Norway.
Sin embargo, ninguno de los documentos de la
técnica anterior indican que el ácido pinolénico y demás derivados
podrían ser usados para tratar la prevención de obesidad y/o para el
control de peso.
US 6,429,190, US 2002/0119948 y US 2002/0119915
describen composiciones para extender la saciedad comprendiendo una
fuente de calcio, proteína y un ácido graso de C12 a C18. El ácido
oleico es el ácido graso descrito en los documentos.
WO 02/088159 revela los ésteres activos de
uridina, y combinaciones que comprenden su ácido constituyente y
compuesto de uridina, y su uso en una amplia variedad de
aplicaciones medicas. No hay revelación del uso de ácidos grasos
libres solos, no es simplemente un ejemplo dado para el tratamiento
de la obesidad.
EP-A-1504778,
publicado el 9 de Febrero 2005, describe una bomba implantable para
el tratamiento de la obesidad. La bomba podría contener un ácido
graso pero no hay revelación de ácido pinolénico.
CN-A-1377673
describe el uso de un aceite de piñón para tratamiento de y
enfermedades vasculares cardiacas y cerebrales y adiposidad causada
por hiperlipemia así como la diabetes causada por hiperglicemia.
De acuerdo con la presente invención, se provee
el uso de ácido pinolénico o sales o ésteres según la adjunta
reivindicación 1.
La presente invención proporciona el uso de
ácido pinolénico y sus derivados para la fabricación de compuestos
para el control de peso en humanos reduciendo la sensación de hambre
y/o aumentando la saciedad. Por ello, composiciones de la invención
son adecuadas para tratar o prevenir la obesidad y/o para control
de peso y comprenden ácido pinolénico o un derivado del mismo.
Derivados del ácido pinolénico, los cuales pueden ser usados en la
presente invención incluyen sales de ácido pinolénico y alquil
ésteres.
La invención también contempla el ácido
pinolénico o sus derivados para el tratamiento o prevención de la
obesidad y/o para el control de peso. El ácido pinolénico o sus
derivados podrían ser usados solos o en un compuesto de una
composición la cual comprende otros componentes farmacéuticamente
aceptables y comestibles. Preferibles, la composición comprende de
10 a 60% en peso de ácido linoleico y/o de 52% en peso de ácido
oleico, ya sea libre de ácidos o glicéridos (ejemplo, mono-, di- o
tri-glicéridos. Adicionalmente o alternativamente,
la composición podría comprender de 0.5 a 5% en peso de ácido
taxoleico.
Se ha encontrado sorprendentemente que los
ácidos grasos de aceite de piñón, y demás ácidos pinolénicos,
pueden ser usados para estimular la liberación de colecistokina
(CCK). CCK es un péptido que se libera después del consumo de
alimento. Cuando la alimento es consumida, CCK libera la proteína
(CCKRP) y es liberada en el intestino delgado. CCKRP simula la
liberación CCK desde las células intestinales. La liberación de CCK
genera síntomas de comportamiento asociados con la saciedad. Además,
el incremento de los niveles de CCK puede aumentar los niveles de
IgA en el tracto intestinal y podría ofrecer un incremento de la
protección contra microorganismo invasores.
El control de peso podría comprender una
reducción de la sensación de hambre y/o incrementando la
saciedad.
Las composiciones de la invención están en forma
de suplemento de alimento o composición de alimento. El termino
composición significa que el ácido pinolénico o derivados podrían
estar presentes en uno o más de un componente (por ejemplo como
están presentes en aceite de piñón). El único o más de un componente
podrían estar presentes en una mezcla con ácido pinolénico o
derivados o ellos podrían formar parte del encapsulamiento del
producto (por ejemplo, la cápsula en la cual el ácido pinolénico o
derivado está encapsulado).
Las composiciones de la invención típicamente
comprenden de 0.3 a 100% en peso, preferible de 5 a 80%, más
preferible 10 a 50% en peso (tal como 10 a 30% en peso o 20 a 30% en
peso) de ácido pinolénico o unos de sus derivados. La persona con
destreza apreciará que el porcentaje de ácido pinolénico o sus
derivados en una composición de la invención dependerá de la
naturaleza de la composición. Por ejemplo, el ácido pinolénico o
sus derivados es ideal para representar un mayor porcentaje del peso
total del compuesto farmacéutico o como una suplemento
alimenticioque la composición de la alimento.
Cuando la composición de la invención está en
forma de suplemento de alimento, el ácido pinolénico o sus derivados
o una mezcla que contiene uno de estos compuestos, podrían estar
encapsulados en cápsulas de alimento. Materiales adecuados para la
encapsulación son bien conocidos, por ejemplo gelatina o
glicerol.
El ácido pinolénico usado en la presente
invención podría estar en la forma de ácido graso libre, un derivado
de ácido pinolénico o mezclas del mismo, incluyendo mezclas de
diferentes derivados. Los derivados no son tóxicos y son
comestibles y son sales y ésteres. Sales adecuadas incluyen sales
como sales catiónicas para las alimentos como sales sódicas.
Ésteres adecuados incluyen alquil ésteres teniendo de uno a seis
átomos de carbono. Preferibles ésteres mono-, di- y
tri-glicéridos.
Preferiblemente, las composiciones de la
invención están libres de (o casi libre de por ejemplo contenido
menor que 0.1 mg de) ésteres de uridina, y/o nucleosidos y/o
nucleotidos seleccionados del grupo consistente en uridina,
deoxiuridina, monofosfato de uridina, monofosfato de deoxiuridina
y/o demás sales farmacéuticamente aceptables.
Una fuente adecuada para el ácido pinolénico
usado en la presente invención es aceite de piñón o concentrados
del mismo. Por ejemplo, glicéridos de ácido pinolénico pueden ser
obtenidos del aceite de piñón o concentrados del mismo.
Preferibles, un aceite o concentrado con un contenido de ácido
pinolénico o derivados del mismo más de 15% en peso o mas de 28% en
peso es usado.
Las composiciones de la invención pueden
comprender uno o más de un ácido graso (por ejemplo ácidos
carboxílicos de cadena lineal conteniendo de 12 a 24 átomos de
carbono). Ejemplos de otros ácidos grasos adecuados para el uso de
la presente invención incluyen ácido linoleico, ácido oleico,
taxoleico, juiperonico, sciadonico, ácidos grasos saturados,
conjugados de ácido linoleico (opcionalmente como una mezcla
enriquecida de isomeros) y EPA (eicosapentanoico) y DHA
(docosahexaenoico) (opcionalmente como mezcla enriquecida de
isómeros de EPA y DHA). El enriquecimiento incluye una alteración
de la mezcla del isómero normalmente presente (por ejemplo en un
producto natural), tal que una alteración en la cantidad relativa de
diferentes isómeros. En estas composiciones, el otro ácido graso o
cada uno de los otros ácidos grasos pueden estar independientemente
presente como un ácido graso libre o como derivado del mismo
(incluyendo un mono-, di-, o triglicérido y sales), o como una
mezcla del mismo.
El ácido pinolénico o derivados del mismo están
opcionalmente mezclados con estos ácidos grasos adicionales o
glicéridos antes de ser usados para preparar una composición acorde
a la presente invención. Cuando las composiciones de la invención
contienen uno o mas ácidos grasos y/o glicéridos, además del ácido
pinolénico o sus derivados, el adicional ácido(s) graso y/o
glicéridos son preferentemente seleccionados de aceites líquidos,
tal como aceite de soja, aceite de girasol, aceite de semilla de
colza, aceite de semilla de algodón, mantequilla de cacao y
mantequillas de cacao equivalentes, aceite de palmera y fracciones
del mismo, enzimaticamente hecho de grasas; aceites de pescado y
fracciones del mismo, conjugados de ácido linoleico y mezclas
enriquecidas de isomeros, ácido linolenico gamma y mezclas
enriquecidas de la misma, aceites liquidos normales; y mezclas de
los mismos.
Mezclas que contienen uno o más ácidos
adicionales grasos o glicéridos preferibles que contienen grasas
sólidas moderadas por impulso RMN o grasas no estabilizadas de:
N20 = 1-80, preferible
5-45
N35 menos que 20, preferible menos de 10, más
preferible menos que 5.
Estos valores fueron obtenidos derritiendo la
grasa a 80ºC, enfriando a 0ºC durante 30 minutos, con lo cual la
grasa fue calentada para la medida de la temperatura N y mantener la
temperatura durante 30 minutos antes de la medida de N valor.
Mezclas de ácidos grasos que son usados para
producir las composiciones de la invención preferibles comprenden
desde 1.5 a 60% en peso, preferible de 28 a 60% en peso de ácido
pinolénico, de 10 a 60% en peso de ácido linoleico y de 5 a 52% en
peso de ácido oleico, por ejemplo 25 a 85% peso (linoleico más ácido
oleico), de 0 a 70%, por ejemplo 25 a 65% en peso (trans más ácido
graso saturado). El contenido de los ácidos grasos trans es
preferible menor que 10% en peso. Un ejemplo de mezcla adecuada es
una la cual el contenido en ácido graso saturado trans es menor que
10% en peso.
Alternativamente, las composiciones de la
invención podrían estar libres o parcialmente libres de ácidos
grasos como el ácido pinolénico (por ejemplo podría contener menos
del 1% en peso, más preferible menos que 0.1% en peso, tal que
menos que 0.01% en peso de otros ácidos grasos de C12 a C24).
Las composiciones de la invención podrían
comprender fuentes de calcio y/o magnesio. Además, las composiciones
podrían contener proteínas (incluyendo proteínas hidrolisadas). La
combinación de ácido pinolénico y calcio y/o magnesio y/o proteína
en las composiciones de la presente invención podrían aumentar la
liberación de CCK desde las células intestinales.
En otras fabricaciones, las composiciones de la
invención podrían estar libres o casi libres de iones calcio y/o
proteínas (por ejemplo, cada uno de los compuestos esta presente en
la composiciones en una cantidad inferior a 1% en peso, más
preferible menos de 0.1% en peso, como menor a 0.01% en peso).
Típicamente, las composiciones de la invención
contienen ácido pinolénico y /o derivados del mismo como un
componente activo exclusivo.
Las composiciones de la presente invención
pueden ser usados para ayudar a controlar el peso corporal, por
ejemplo ayudar el mantener el peso corporal en un nivel constante o
ayudar a reducir el peso corporal. En otras palabras, el uso de los
componentes puede hacer adelgazar el cuerpo, por ejemplo, ayudando a
la pérdida de grasas.
El uso de las composiciones de esta invención
puede ayudar a reducir la ingesta de calorías. Esto podría ayudar a
mantener el peso del cuerpo a un nivel constante y/o ayudar a
adelgazar. La reducción en el peso corporal puede aumentar los
niveles de energía.
El uso de las composiciones de la invención
puede reducir el sentimiento de hambre y/o aumentar la saciedad y/o
reducir el deseo por las alimentos altas en calorías, por ejemplo
permitiendo menos espacio en el estómago para alimentos ricos en
calorías. En particular, el uso de las composiciones de la invención
puede aumentar y/o extender la saciedad durante y/o después de una
alimento.
El uso de las composiciones de la invención
puede reducir el sentimiento de hambre durante la dieta y además
incrementar el éxito del ritmo de la dieta.
El consumo de los compuestos de la invención
pueden estimular la liberación de CCK y/o IgA.
El uso de los compuestos de la invención puede
ayudar a reducir el apetito, por ejemplo aumentado la saciedad y su
sentimiento y la plenitud.
También se describe aquí un método de control de
peso. En este método una cantidad efectiva de una compuesto como se
describe arriba, es administrada a un mamífero, por ejemplo a un
humano. Dicha administración necesita ser llevada por un físico o
bajo supervisión médica y puede implicar que el mamífero ingeste la
composición, por ejemplo, en la forma de alimento o como suplemento
alimentario. Preferible, las composiciones de la invención son
administradas (o tomadas) 2 horas a 3 minutos, más preferible 1 hora
a 15 minutos e incluso más preferible de 35 a 25 minutos antes de
comer.
La invención es aplicable a los humanos.
Cuando se produce un producto alimentario, el
ácido pinolénico o sus derivados pueden ser primeramente mezclados
con componentes estructurales para el uso de productos alimentarios.
Sin embargo, esto no es fundamental. Estas mezclas pueden, por
ejemplo, ser aplicadas beneficiosamente en productos de alimento
como compuestos de grasas saludables.
El aceite de piñón puede ser usado en las
composiciones de la invención. Sin embargo, el aceite de piñón puede
contener el 26% del ácido pinolénico, ello podría ser ventajoso (en
particular para el uso de suplemento alimentario y como dosis en
forma de tamaño pequeño) si los concentrados son obtenidos con altos
niveles de ácido pinolénico. Concentrados de ácidos pinolénico o
uno de sus derivados son usados en la presente invención para
preparar un proceso adecuado. Un adecuado proceso es descrito en
EP-A-1088552.
En un proceso adecuado, una hidrólisis
enzimática o glicerosis es desarrollada usando una enzima que puede
discriminar entre ácidos grasos con 5 dobles enlaces y otros ácidos
grasos. Este proceso comprende:
i) reacción de un material glicérido conteniendo
al menos 2% en peso de ácido graso con cis 5 doble enlace con agua
o glicerol en presencia de una encima capaz de discriminar ácidos
grasos conteniendo dobles enlaces delta 5 y otros ácidos
grasos;
ii) dividir la mezcla de reacción en un
componente rico en glicérido y otro componente rico en un ácido
graso;
iii) opcionalmente convertir los glicéridos
parciales del paso ii) para liberar ácidos grasos en presencia de
una encima adecuada
iv) opcionalmente convertir el ácido graso del
paso ii) a triglicéridos por reacción con glicerol en presencia de
una adecuada catálisis por una enzima adecuada;
v) opcionalmente dividir el material parcial
rico en glicérido del paso ii) en los componentes que son a) ricos
en monoglicéridos, b) ricos en diglicéridos y c) ricos en
triglicéridos y entonces opcionalmente convertir los glicéridos
parciales a) y b) en triglicéridos por reacción con ácidos grasos en
presencia de una enzima adecuada.
Es preferible el uso de un material glicérido
con ácido pinolénico con un contenido de 5 a 50%, preferible 10 a
35% en peso en paso i). Ejemplos de tales materiales son aceites
pinolénicos y concentrados del mismo. Este proceso produce un
concentrado que contiene al menos 28% en peso de ácido
pinolénico.
Enzimas adecuadas para su uso en los pasos i),
iii), iv), y v) son las lipasas. Las lipasas adecuadas incluyen
Candida rugosa lipasa; Lipasa QL; Lipasa SL, Lipasa OF;
Rhizopus delemar, lipasa; Rhizopus oryzae lipasa;
Geotrichum candidum B lipasa; y Rhizomucor miehei
lipasa. Enzimas preferibles para el paso step i) son Candida
rugosa lipase and Geotrichum candidum B lipase.
Lipasas adecuadas tambien estan incluidas
Lipozyma IM (uan enzima comercial). La enzima preferible para usarla
en el paso iv) es Lipozyma M (proveniente de Rhizomucor
miehei).
Las composiciones de la invención pueden ser
productos alimenticios. Los productos alimenticios en los cuales el
ácido pinolénico o derivados del mismo o mezclas que contienen estos
compuestos pueden usarse incluyen, pero no están limitados a:
margarinas, untables bajas en grasas, untables muy bajas en grasas,
untables bicontinuas, untables acuosas continuas, productos de
confitería, tales como chocolates, rellenos o cubiertos, helados,
recubrimientos de helados, inclusiones de helados, aliños,
mayonesas, salsas, bollería industrial, manteca, queso, grasas,
barritas energéticas, barritas de muesli, bebidas, productos
lácteos, productos bajos en carbohidratos, productos bajos en
calorías, sopas, cereales y batidos de leche.
La adición de ácido pinolénico o derivados del
mismo o mezclas que contienen al menos uno de los componentes de
productos de alimento pueden tener un efecto positivo en la textura,
dureza, apariencia, reología, olor, impacto del sabor, untabilidad,
microestructura (tamaño de cristal, tamaño de gota), propiedades de
aireación o facilidad de procesamiento de estos productos
alimenticios. El uso de un glicérido de ácido pinolénico es
particularmente ventajoso en este respecto.
Ejemplos de productos que forman la composición
de suplemento alimenticio(los cuales incluyen productos
nutricionales), tal que en forma de un gel débil o cápsula dura
comprendiendo un material de encapsulamiento seleccionado del grupo
que consiste en gelatina, glicerol, almidón, almidón modificado,
derivados del almidón tales como glucosa, sucrosa, lactosa y
fructosa. El material de encapsulamiento puede contener
opcionalmente agentes de polimerización o
cross-linking, estabilizadores, antioxidantes,
agentes absorbentes de luz para proteger rellenos sensibles a la
luz, y preservativos. Preferible, la dosis de ácido pinolénico en
los suplementos de alimento es de 1 mg a 1000 mg (preferentemente
de 100 mg a 750 mg). La cantidad de aceite de piñón que se usa como
forma de dosis es preferible de 100 mg a 2000 mg, por ejemplo de 250
mg a 1500 mg (750 mg), por ejemplo tomandola 4 veces al día.
Las composiciones de la invención podrían
contener otros aditivos como los que hay en ciertos alimentos,
incluidos productos farmacéuticos, pero no limitan a ingredientes
condimentos, agentes colorantes, edulcorantes y emulsionadores.
Los siguientes ejemplos no limitantes muestran
la invención y no limitan el alcance de ninguna manera. En los
ejemplos y las siguientes especificaciones, todos los porcentajes,
partes y proporciones son al menos en peso indicados.
\vskip1.000000\baselineskip
En un proceso in vitro que fue llevado
para la medida del efecto de varios ácidos grasos libres en la
liberación de CCK desde las células del intestino. El estudio mostró
el efecto de los ácidos grasos libres de aceite de piñón y además
ácido pinolénico como un ingrediente saciador (vea los datos
debajo).
La línea celular STCI-1 fue
cultivada a 37ºC en un 5% de CO2, 95% aire atmosférico en RPMI 1640
suplementado con 5% FCS, 2 mM glutamina, 100 U/ml de penicilina y
50 \mum estreptomicina. Las células eran pasadas rutinariamente
al alcanzar una confluencia del 70-80% mediante
lavado de la capas celulares con PBS e incubando en una solución de
tripsina-EDTA. Se usó una densidad de preparación de
cultivo en placas de 2x10^{6} células por 75 cm^{2} para el
subcultivo de rutina.
24 horas antes de los experimentos, las células
STC1 fueron cultivadas en 6 placas de cultivo. Un día del
experimento, las células fueron lavadas en 1 ml de Krebs-
exactamente en una disolución buffer de bicarbonato (pH 7,4)
conteniendo 0.2% (peso/volumen BSA (KRBB). Las células STC1 fueron
pre-incubadas durante 15 min en 2 ml de KRBB, antes
siendo incubadas en una cantidad de 2 ml de KRBB, con o sin los
agentes testados, durante una hora. Al final de la incubación fue
recogido el sobrenadante, centrifugado a 1000 rpm e inmediatamente
enfriado a -20ºC para RIA. El ADN contenido fue medido por
fluorometría después de la extracción del contenido del cultivo
celular.
La inmunoreactividad CCK fue medida usando un
antisuero 39 A (1/300,000) que reacciona un 100% con
CCK-33 y CCK-8, 12% con gastrina
sulfatada-17, 5% con gastrina no
sulfatada-17, y menos que 0.1% con
CCK-8 no sulfatada y gastrina-34.
La CCK-8 es usada como estándar. El
Bolton-Hunter (Thr,
Nle)-CCK-9 fue etiquetado con iodina
25 por el método de T-cloramina y purificado por
una fase inversa de HPLC. El tampón de ensayo era 0.05 M fosfato
sódico de pH 7,5. Las alícuotas de 1 \mul a 200 \mul de
sobrenadante eran testadas en duplicado (día 0). La etiqueta era
añadida al día 1 y el carboncillo precipitado es desarrollado 48 h
después.
La figura 1 es un cuadro mostrando los niveles
de CCK producidos usando ácidos grasos libres (Agls) de los piñones
y otros Agls.
La figura 1 muestra que el aceite de piñón
producían un alto nivel marcado de CCK que otros materiales
testados. Cada ejemplo tenia un nivel de CCK determinado en tres
diferentes concentraciones, las cuales eran 100 \muM, 500 \muM
y 1 mM basado en un peso molecular de AGL de 300 g/mol. Marinol es
un aceite de pescado concentrado de Loders Croklaan BV (Wormerveer,
Holanda) conteniendo EPA y DHA. Clarinol es un producto de Loders
Croklaan BV (Wormerveer, Holanda) conteniendo un 80% de ácido
linoleico conjugado. Los otros ejemplos de AGL están en el rango de
diferentes productos naturales.
\vskip1.000000\baselineskip
El siguiente es un ejemplo de una cápsula de
gelatina en acorde a la invención. Una composición que comprende
ácido pinolénico es encapsulado en cápsula de gelatina acorde a los
métodos bien conocidos. El resultado final del producto encapsulado
contiene 500 mg de ácido pinolénico y una cápsula que puede ser
tomada 4 veces diariamente por un adulto humano.
\vskip1.000000\baselineskip
Las siguientes figuras de los dibujos están
referidos al ejemplo 3 y resumidas como sigue:
Figura 2 muestra los niveles de CCK en sangre
(pmol/L) después de la ingesta de 3 g de ácido pinolénico AGL
(dibujo superior, línea discontinua) o placebo (dibujo inferior;
línea llena);
Figura 3 muestra los niveles de GLP1 en sangre
(pmol/L) después de la ingesta de 3 g de ácido pinolénico AGL
(dibujo superior, línea discontinua) o placebo (dibujo inferior;
línea llena);
Figura 4 muestra el deseo de comer durante 4
horas después de la toma de 3 g de ácido pinolénico AGL (dibujo
inferior, línea discontinua) o placebo (dibujo superior; línea
llena);
La figura muestra la toma de alimento durante 4
horas después de la toma de 3 g de ácido pinolénico AGL (dibujo
inferior, línea discontinua) o placebo (dibujo superior; línea
llena);
Figura 6 muestra los niveles en sangre de CCK
(pmol/L) después de la toma de 3 g de ácido pinolénico del ejemplo
3 (ii) TG (dibujo superior, línea discontinua) o placebo (dibujo
inferior; línea llena);
Figura 7 muestra el deseo de comer durante 4
horas después de la ingesta de 3 g de ácido pinolénico TG (dibujo
inferior, línea discontinua) o placebo (dibujo superior; línea
llena); y
Figura 8 muestra la toma de alimento durante 4
horas después de la ingesta de 3 g de ácido pinolénico TG (dibujo
inferior, línea discontinua) o placebo (dibujo superior; línea
llena).
En las figuras, un asterisco indica una
diferencia significativa.
Dos composiciones que contienen ácido pinolénico
fueron ensayados: Ejemplo 3 (i) una composición que contiene ácido
pinolénico en forma ácido libre graso (AGL); un ejemplo 3 (ii) una
composición que contiene ácido pinolénico en forma de triglicérido
(TG). El análisis de ácido graso metil ester (AGME) de dos
composiciones es como sigue:
Un estudio aleatorio doble ciego, cruzado de un
placebo fue llevado con 18 mujeres con sobrepeso (IMC=
25-30) recibiendo cápsulas de 3 g de composición de
ejemplo 3 (i) AGL, 3 g de composición ejemplo 3 (ii) TG o 3 g
placebo (aceite de oliva) en combinación con un ligero desayuno
bajo en grasas consistente en dos rebanadas de pan blanco y
mermelada. A 0, 30, 60, 90, 120, 180 y 240 minutos fueron tomadas
muestras de sangre para los análisis de CCK, GLP-1,
glucosa, insulina, ácidos grasos libres, y triglicéridos. Los
sentimientos subjetivos de saciedad eran evaluados por escalas
visuales análogas (EVA) para el deseo de comer, y consumo
prospectivo de alimento. Cada sujeto recibió los tres tratamientos
en orden aleatorio dentro de un periodo de 2 semanas con un periodo
de descanso de una semana, según un diseño cuadrado latino.
Las escalas EVA consistían en líneas
horizontales de 150 mm con frases ancladas en cada extremo que
expresaban la sensación máxima positiva o negativa. Los sujetos
dibujaban una línea vertical en el punto de línea horizontal donde
correspondía con su sensación de hambre. Las distancias en las
escalas de EVA eran convertidas en resultados entre 0 y 100.
Las concentraciones de CCK y
GLP-1 fueron medidas en las tomas de sangre usando
kits RIA comerciales y validados para humanos. Los tratamientos
eran evaluados con ANOVA y se consideraba significante con un
P<0.05.
Eventos secundarios (ESs) fueron
monitorizados.
La toma de 3 g de compuesto del ejemplo 3 (i) de
AGL inducía en el pico una liberación de CCK después de 30 minutos
la cual era significativamente mayor que la liberación de CCK en
respuesta al placebo (Figura 2). La liberación de
GLP-1 alcanzó a los 60 minutos después de la toma la
composición del ejemplo 3 (i) AGL y también era significativamente
mayor que el nivel de GLP-1 en respuesta al placebo
(figura 3). Después de un periodo de 4 horas, la cantidad total de
CCK liberada en la corriente de sangre en respuesta a la composición
del ejemplo 3(i) la toma de AGL era 60% más alta y para
niveles de GLP-1 eran de 25% más altas que el
placebo, medidas en las áreas debajo de la curva. La composición de
AGL del ejemplo 3(i) también decreció el "deseo de
comer" y la "posterior toma" resulta durante 4 horas después
de la toma (figuras 4 y 5). Estos resultados eran menores a los 30
minutos después de la composición del AGL del ejemplo 3 (i) y las
diferencias con el placebo eran significantes. La composición de TG
del ejemplo 3(ii) afectaron a las sensaciones de apetito y
la liberación de CCK era similar a la composición de AGL del ejemplo
3(i) (figuras 6 a 8).
En resumen, los datos mostrados de CCK y
GLP-1 muestran una clara y significantes efectos en
el tratamientos. Las composiciones de AGL y TG incrementaron los
niveles de saciedad induciendo las hormonas, CCK y
GLP-1, en sangre dentro de 30-60
minutos y los niveles continuaron altos después de cuatro horas
después de la toma. Además, el deseo de comer y la siguiente toma
eran menores en 30 minutos y da como resultado que después de la
toma de las composiciones de placebo de AGL del ejemplo 3 (i) y TG
del ejemplo 3(ii).
Efectos secundarios o serios efectos secundarios
no fueron informados. Más adelante, los niveles de glucosa en la
sangre, insulina, ácidos grasos libres y niveles de triglicéridos se
midieron de 0-4 horas después de la toma de las
cápsulas determinadas y mostradas en el que los niveles de
triglicéridos y ácidos grasos no eran significativamente diferentes
en cualquier punto entre los grupos. Los niveles de glucosa e
insulina crecieron en ambos grupos debido la toma de azúcar ligera
en el desayuno en el que tomaron todos los sujetos. En todos los
grupos, la respuesta de glucosa e insulina era similar a la indicada
al ejemplo 3 (i) AGL y ejemplo 3(ii) TG totalmente
toleradas.
Sin embargo, los niveles de glucosa no
incrementaron tanto la composición de AGL del ejemplo 3 (i) como la
composición de TG del ejemplo 3(ii) y el placebo y más
gradualmente decrece la composición de AGL del ejemplo 3(i)
y la composición de TG del ejemplo 3 (ii) que el placebo de aceite
de oliva. Como resultado, el nivel de insulina aumentó lentamente y
a continuación decreció rápidamente tras la composición de AGL del
ejemplo 3(i) que después del placebo y después de la
composición de TG del ejemplo 3(ii). Por lo que, la
composición de AGL del ejemplo 3(i) causó cambios más
moderados en los niveles de glucosa e insulina en sangre que el
placebo con composición de TG del ejemplo 3(ii) estando entre
ambos.
\vskip1.000000\baselineskip
La relativa liberación de CCK por un numero de
diferentes componentes fue determinado en vitro y en vitro fue
medido los efectos de varios de los ácidos grasos libres en la
liberación de CCK de las células del intestino. El estudio mostró
el efecto de los ácidos grasos libres del aceite de piñón y del
ácido pinolénico como un ingrediente saciador (vea los datos
debajo). Otros ácidos grasos presentes en alta y baja cantidad en
aceite de piñón (como el ácido oleico, ácido linoleico, ácido
taxoleico, ácido esciadonico y ácido juniperonico) no son capaces
de inducir grandes cantidades de CCK. Un composición con 27% de
ácido pinolénico induce ligeramente a grandes cantidades de CCK una
con 16% de ácido pinolénico.
La línea celular enteroendrocrina
STC1-1 fue cultivada a 37ºC en 5% CO2, 95% aire
atmosférico en medio de cultivo estándar (DMEM). Las células eran
pasadas al alcanzar 70-80% de confluencia mediante
lavado de la capa celular con PBS e incubación con una solución de
tripsina-EDTA. Una densidad de preparación de
cultivo en placas de 2x10^{6} células en 75 cm^{2} se usó para
subcultivo de rutina.
Las células STC1 eran cultivadas en 6 placas de
cultivo e incubas con un control medio, con o sin agentes
testadores, durante 1 hora. Todos los agentes eran testados a una
concentración de 100 \muM en forma de ácido graso libre. Desde
que los ácidos grasos eran diluidos en etanol, el efecto del etanol
era testado e indicado en los niveles de vaselina de CCK. Ácido
caprico era usado como un control negativo de ácido graso, porque
en realidad es sabido que el ácido caprico no induce CCK. Se usaron
efectos de bombesina como control positivo. Al final de la
incubación el sobrenadante era recogido, centrifugado e
inmediatamente enfriado a -20ºC por RIA.
La viabilidad de la célula era chequeada por
análisis microscópico, analizando ADN que era medido por
fluorometría después de la extracción de los contenidos de la
célula y además se midió la liberación de LDH.
La liberación de CCK era medida usando un
estándar RIA CCK y los efectos de los ácidos grasos eran medidos en
6 ocasiones.
La tabla debajo muestra que las muestras con 16%
y 27% de ácido pinolénico respectivamente produjeron 4 veces y 5
veces mayor nivel de CCK que el control negativo de ácido graso,
ácido capricho. Un aceite derivado del Pinus pinea contiene
menos de 1% en ácido pinolénico y es menos capaz de inducir la
liberación de CCK (solo 2 veces en relación al ácido capricho).
Otros ácidos grasos presentes en el aceite de piñón como el ácido
oleico, ácido linoleico, ácido taxoleico y ácido juniperonico y
esciandonico no eran capaces de inducir mayores cantidades de CCK
(sobre 2 veces en relación al ácido capricho). En contraste con
otros ácidos grasos 18:3 como el ácido punicico,
gamma-linolenico, alpha-linoleico, y
ácido alpha eleostearico son buenos inductores de CCK, similar al
ácido pinolénico, pero no es que esos ácidos grasos son medidos en
una pura forma donde el ácido pinolénico era solo testado al 16% y
27% de pureza. 95% puro de CLA (una mezcla 50:50 de isómeros c9, t1
y t10, c12) no era capaz de inducir cantidades altas de CCK
similares a CLA con el ácido pinolénico. Un producto comercial
consistente en una mezcla fraccionada de aceite de palma y aceite de
avena no era tambien muy activo para inducir CCK (2 veces en
relación al ácido
capricho).
capricho).
El ácido pinolénico TG y las composiciones de
AGL pinolénico de los ejemplos 3 (i) y 3 (ii) son producidos usando
el "aceite crudo de piñón" como materia prima.
Los piñónes son aplastados por los proveedores
en una torta de presión en la que se aplica una alta presión y
temperatura. El calor generado durante la prensa es causado por el
aplastamiento de las semillas en la torta de presión, y nunca
alcanza más de 50ºC. El extracto del aceite es filtrado pasando a
través de telas. El producto obtenido es "un crudo de aceite de
piñón".
El aceite crudo es procesado posteriormente para
obtener composiciones de TG y AGL. El proceso consiste en las
siguientes etapas: refino, hidrólisis y destilación.
El paso del refino es un refino físico
consistente en el paso del blanqueo usando tierra de blanqueo para
eliminar los residuos de los contaminantes, seguido de la
deodorización (corriente de stripping). El aceite refinado es la
composición de TG.
\newpage
El aceite de piñón refinado puede ser
hidrolizado usando una lipasa en la comestible para obtener ácidos
grasos libres, glicerol y residuos del aceite no completamente
hidrolizado (di- y tri-glicéridos). Finalmente, la
mezcla hidrolizada es destilada para obtener la composición de
AGL.
\vskip1.000000\baselineskip
Las cápsulas de gel débil son producidas por un
procesamiento recortador rotativo. El material para la cáscara de
las cápsulas, el gel y el relleno son formulados por separado. Una
vez la masa del gel y la masa de relleno estén listos, el gel es
extendido en una película delgada para formar 2 lazos de gelatina
los cuales serán enrollados en dos recortes por separado que
determinaran el tamaño y la forma de las cápsulas. Como las
películas de la gelatina se adaptan a los recortes, el relleno es
cuidadosamente dosificado a niveles de 500 mg, 750 mg o 1000 mg de
aceite por cápsula e inyectable entre dos lazos de gelatina los
cuales son sellados inmediatamente después por aplicación de calor
y presión. Las cápsulas caen desde la máquina y entonces se secan
bajo una corriente de aire caliente.
\vskip1.000000\baselineskip
- \bullet FR 2756465 A
- \bullet US 20020119948 A
- \bullet WO 9843513 A
- \bullet US 20020119915 A
- \bullet JP 61238729 A
- \bullet WO 02088159 A
- \bullet JP 61058536 A
- \bullet EP 1504778 A
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Claims (14)
1. El uso de ácido pinolénico o sal o ésteres
del mismo en la fabricación de una composición para el control de
peso en un humano por reducción de sentimiento de hambre y/o
incrementando la saciedad, donde la composición está en forma de
suplemento alimenticio o composición de alimento.
2. El uso según la reivindicación 1, donde la
composición consiste en una fuente de calcio.
3. El uso según la reivindicación 1 o 2, donde
la composición consiste en ácido pinolénico como ácido graso libre,
un mono-, di- o triglicérido, o mezcla de los mismos.
4. El uso según cualquier de las
reivindicaciones 1 a 3, donde la composición es aceite de piñón o un
derivado del aceite de piñón.
5. El uso reivindicado en la reivindicación 1,
donde los ésteres son alquil ésteres teniendo de 1 a 6 átomos de
carbono o mono-, di- o triglicéridos o mezclas de los mismos.
6. El uso según una cualquiera de las
precedentes reivindicaciones, donde la composición adicional
consiste en ácido graso o derivado del mismo seleccionado del grupo
consistente en ácido linoleico, ácido oleico, ácido conjugado
linoleico, mezclas de isómeros enriquecidos de ácido linoleico
conjugado, EPA y DHA o una mezclas de los mismos.
7. El uso según la reivindicación 6 donde el
ácido graso o derivado del mismo esta presente como un ácido graso
libre, o mono-, di- o triglicérido o una mezcla del mismo.
8. El uso según la reivindicación 1, donde la
composición posterior consiste en al menos un glicérido formado de
ácido linoleico, ácido oleico, ácidos trans y ácidos grasos
saturados y la composición es una composición del alimento.
9. El uso según la reivindicación 8, donde el
glicérido es seleccionado de aceites líquidos de soja, girasol,
semilla de colza, semilla de algodón; manteca de cacao y manteca de
cacao equivalentes, aceite de palmera y fracciones del mismo,
grasas fabricadas enzimaticamente, aceites de pescado y fracciones
del mismo, ácido linoleico conjugado y mezcla enriquecida de
isómeros del mismo, ácido gamma linoleico y meclas enriquecidas del
mismo, aceites líquidos duros, y mezclas del mismo.
10. El uso según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde la composición es un producto de
alimento seleccionado del grupo consistente de: margarinas,
untables bajas en grasas, untables muy bajas en grasas, untables
bicontinuas, untables continuas acuosas, productos de confitería
como chocolates, coberturas y rellenos, helados, coberturas de
helado, inclusiones de helado; secados; mayonesas; salsas, grasas de
pastelería; mantecas y queso; productos de merienda; barritas
energéticas; barritas muesli; bebidas; productos lácteos, productos
bajos en carbohidratos, productos bajos en calorías; sopas; cereales
y batidos.
11. El uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, donde la composición es un suplemento de
alimento en la forma de un gel suave o una cápsula dura que
consiste en un material encapsulado seleccionado del grupo
consistente en gelatina, almidón y derivados de almidón.
12. El uso en según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde la composición para el control
de peso para ayudar a mantener el peso corporal y/o reducir el
peso corporal y/o asistir al adelgazamiento del cuerpo y/o
reduciendo la toma de calorías y/o permitiendo la toma de alimentos
altas en calorías.
13. El ácido pinolénico o sal o ester del mismo
para el uso en el control de peso en un humano por reducción de la
sensación de hambre y/o aumentando la saciedad, donde el ácido
pinolénico, sal o ester está en forma de un suplemento de alimento
o una composición de alimento.
14. El ácido pinolénico o sal o ester del mismo
como se reivindica en la reivindicación 13 donde el uso esta
definido en una de las reivindicaciones de 2 a 12.
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