KR101034458B1 - 피놀레닌산 고함유 δ5-지방산의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피놀레닌산(pinolenic acid, PLA)을 고함유하는 Δ5-지방산의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 잣오일에 알코올을 첨가하여 혼합하고 리파아제를 첨가한 후 반응기에서 반응시켜 알킬에스테르 형태를 갖는 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산을 제조하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에 따르면, 잣오일로부터 지방산을 제조하는 공정에서 알코올과 함께 리파아제를 사용하는 경우, 특정 리파아제에서 위치 특이성을 나타내어 PLA가 고함유된 Δ5-지방산을 에스테르 형태로 얻을 수 있으며, 이러한 PLA가 고함유된 Δ5-지방산을 이용하여 기능성 식품 및 의약품 등의 제조에 이용될 수 있을 것이다.

피놀레닌산, Δ5-지방산, 잣오일, 에탄올, 리파아제

Description

피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법 {Manufacturing Methods of Δ5 fatty acid comprising high content of pinolenic acids}

본 발명은 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 잣오일에 에탄올을 첨가하여 혼합하고 리파아제를 첨가한 후 반응기에서 효소반응 시켜 알킬에스테르 형태를 갖는 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에 관한 것이다.

잣나무(Pinus Koraiensis)는 우리나라, 만주, 흑룡강 유역, 일본 등에 분포되어 있다. 꽃은 5월에 피며 종자(잣)는 일그러진 삼각형이나 난형으로서 암자갈색을 띄고 길이는 12~18mm, 폭 10mm, 두께 7mm 정도로서 종피를 갖고 있다. 잣은 예로부터 과자류, 감주, 각종 요리 등 한국 고유 식품에 사용되어 왔을 뿐만 아니라 강장, 당뇨병, 중풍, 진통, 천식, 폐결핵 등에 약용으로 쓰이기도 한다.

잣은 일반성분의 조성을 보면 지방질이 70%, 단백질이 15%, 탄수화물이 5%, 회분이 3% 수준으로서 지방질을 다량 함유하고 있다. 따라서 지금까지 잣에 대한 성분 연구도 거의 대부분이 주성분인 지방질에 대한 것이다. 자연계에 존재하는 식물성 유래 지방산들 중 카르복실기로부터 5번째 탄소에 이중결합이 시작되는 지방산 (Δ5-지방산)은 유일하게 잣에만 함유되어 있다. 한편 잣오일(잣기름)은 5번째 위치에 이중결합을 가지고 있는 Δ5-지방산, 영문으로는 Δ5-UPIFA(Unsaturated Polymethylene Interrupted Fatty Acids)를 다량 포함하고 있는데, Δ5-지방산 중, 가장 많이 함유하고 있는 대표적인 지방산은 피놀레닌산(pinolenic acid, 이하 PLA)으로, 이 외에도 5,9-18:2(taxoleic), 5,11-18:2(ephedrenic), 5,11-20:2(keteleeronic), 5,11,14-20:3(sciadonic) acid들이 포함되어 있다. Δ5-지방산이 포함하고 있는 PLA는 대부분(90% 이상)이 잣오일의 sn-3 위치에 결합되어 있다는 사실이 밝혀져 있다(Robert L. Wolff., JAOCS, Vol 74, NO5, 515-523; 1997). 또한, 저밀도 지단백질(LDL cholestrol)을 낮춰주고, 혈전용해 효과를 갖고 있을 뿐만 아니라, 특히 공복감을 억제하고 포만감을 유도하는 작용을 지닌 호르몬으로 알려진 콜레시스토키닌의 분비를 촉진한다는 연구결과가 나와 주목받고 있다.

국내의 잣 관련 특허로는 잣기름으로부터 올레핀계 지방산 농축물의 제조방법, 피놀레닌산 고 함유 지방산 추출물 및 잣기름으로부터의 선택적 추출방법, 피놀레닌산을 함유하는 조성물 및 건강 성분으로서의 그의 용도 등이 있다. 이러한 선행 특허들은 효소적 가수분해를 이용한 공정을 사용한다는 점에서 본 발명과 공통점을 가지고 있으나, 과량의 용매(증류수 등)를 사용하여 sn-1,3 위치의 지방산을 제거하고 지방산 형태의 PLA를 얻어내는 방식 즉 가수분해반응을 기본으로 하여 PLA를 농축하는 방법으로, 본 발명에서의 반응 즉 효소를 이용한 에타놀리시스 또 는 알콜리시스 의하여 지방산 에틸에스테르 형태로 PLA를 농축하는 방법과는 전혀 다른 발명이며, 또 다른 차이점은 선행특허에서 사용되는 가수분해반응은 지방분자의 sn-1,3 위치의 지방산을 가수분해하여 PLA를 농축하는 반면에 본 발명에 사용된 방법(반응)은 PLA가 95%이상 결합되어 있는 sn-3 위치의 지방산에만 집중적으로 반응이 일어나, 고함유 PLA를 효과적으로 농축할 수 있다는 점이다. 본 발명의 또 다른 특징은 반응온도의 경우 15 -25℃정도의 실온에서부터 반응이 쉽게 일어난다는 점과, 고순도의 고함유 PLA 지방산(40%>)을 제조할 경우 반응시간이 60분 이내라는 점이다.

이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 잣오일로부터 지방산을 제조하는 공정에서 알코올과 함께 리파아제를 사용하는 경우, 특정 리파아제에서 위치 특이성을 나타내어 PLA가 고함유된 Δ5-지방산을 에스테르 형태로 얻을 수 있음을 확인하고, 본　발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 주된 목적은 에스테르 형태를 갖는 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 신규한 제조방법을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 방법으로 제조된 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산을 제공하는데 있다.

발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 잣오일에 알코올을 첨가하여 혼합하는 단계 및 상기 혼합액에 리파아제를 첨가한 후 반응기에서 효소반응 시키는 단계를 포함하는 알킬에스테르 형태를 갖는 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에서, 상기 알코올은 지방질의 가알코올분해(alcoholysis)가 가능한 어떤 종류의 알코올을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 에탄올 또는 알코올, 더욱 바람직하게는 에탄올이 적당하며, 상기 잣오일에 대하여 첨가되는 알코올의 중량비는 0.1 내지 10, 바람직하게는 0.1 내지 5가 적당하다.

상기 피놀레닌산(pinolenic acid, 이하 ‘피놀레닌산’ 또는 ‘PLA’)은 잣나무에서 많이 발견되는 불포화지방산으로, EPA 또는 DHA와 같은 다불포화 지방산(polyunsaturated fatty acids)과 같은 활성 기능을 갖는 독특한 성분이다. 피놀 레닌산(5,9,12 C18:3 지방산, 즉 5,9,12 위치에 이중결합을 세개 갖는 탄소 원자수 18의 지방산)은 잣오일(pine nut oil)이나 그의 분획에 약 25중량% 이하의 양으로 존재한다는 것이 잘 알려져 있다(J Am Oil Chem Soc 1998, 75, p.45-50). 그러나 본 발명에서는 이러한 PLA를 대략 20-46 중량%로서, 고농도로 함유하는 농축물(지방산)을 제조하는 방법을 제공한다(표 1~5 참조).

상기 용어 ‘가알코올분해(alcoholysis)’는 지방기질의 공유결합이 알코올 ROH와의 반응에 의해 절단되는 것으로, 그 결과 생성물의 한쪽은 알코올의 H기와 결합하며, 다른 한쪽은 알코올의 OR기와 결합하는 것을 의미한다. 본 발명에서는, 지방기질인 잣오일에 알코올과 리파아제 효소를 함께 존재시켜 가알코올분해 및 효소에 의한 가수분해를 유도하였으며, 그 결과로 알킬에스테르 형태를 갖는 지방산을 얻을 수 있었다.

일반적으로 농축물이 지방산 형태나 에스테르형태 모두 다시 글라세라이드(glyceride)형태로 재결합하여 중성지방 형태로 재합성이 가능하다. 그러나 보통 분자증류를 통하여 분자량 별로 특정 지방산 또는 특정지방산 그룹(group)을 분리하거나 농축할 경우 지방산 보다는 에틸에스테르 형태가 훨씬 유리하다. 예로서 지방산보다 에틸에스테르 형태가 끓는점(boiling point)이 훨씬 낮고 분자증류 시 분획이 지방산보다 원활하기 때문에 에스테르 형태를 사용한다. 따라서 본 발명으로부터 얻어진 고순도 PLA 지방산 에틸에스테르를 분자증류를 통하여 다시 80%-90% 정도의 초고순도로 제조할 경우 훨씬 유리하다. 만약 선행특허(한국특허공개 2001-0050744)와 같이 지방산 형태로 얻어지는 경우, 얻어진 지방산을 보다 높은 PLA 농 축물을 만들기 위하여 분자증류를 사용한다면 다시 에틸에스테르 형태로 전환해야 된다.

본 발명의 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에서, 상기 리파아제는 잣오일과 알코올 혼합액에 대하여 1-30 중량%로 첨가하는 것이 바람직하며, 경제성을 고려하면 1-10 중량%로 첨가하는 것이 더욱 바람직하다.

본 발명의 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에서, 상기 리파아제는 에탄올 또는 메탄올과 같은 극성용매와 같이 존재할 때 지방질을 분해할 수 있는 어떤 리파아제도 사용할 수 있으나, 칸디다 안탁티카(Candida Antarctica), 리조퍼스 델레마(Rhizopus delemar), 뮤코 미에이(Mucor miehei), 써모마이세스 라누기노서스(Thermomyces lanuginosus), 알칼리제네스(Alcaligenes sp.), 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger), 칸디다 실린드라세스(Candida cylindraces), 부콜데리아 세파시아(Burkholderia cepacia), 및 지오트리쿰 칸디둠(Geotricum candidum)으로 구성된 군에서 선택된 미생물 유래 리파아제가 바람직하며, 알코올과 같은 극성 용매가 같이 존재할 경우 95% 이상이 주로 sn-3 위치에 대한 강력한 위치특이성을 나타내는 칸디다 안탁티카 유래 리파아제를 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 또한 상기 리파아제는 액제, 고상제제 및 고정화 제제 등의 형태로 사용될 수 있다.

본 발명에서, 용어 ‘sn-3 위치 특이성’이란 잣오일을 구성하고 있는 중성지질의 sn-1, sn-2, sn-3 중 sn-3에만 선택적으로 효소반응이 일어나는 것을 말하는 것으로, 본 발명의 리파아제는 이러한 위치 특이성이 효소반응 시 알코올의 첨가로 인하여 나타나는 것을 발견하였으며, 특히 본 발명의 실시예에서 사용된 칸디 다 안탁티카 유래 리파아제(Novozyme 435)는 고순도의 PLA가 얻어지는 단계인 초기 2시간 동안은 주로 sn-3 위치에만(95%) 강력한 위치 특이성을 가지는 것을 확인하였다. 특히, 90% 이상의 PLA가 sn-3 위치에 결합한 잣기름의 경우는 본 발명에 의한 강력한 위치 특이성이 PLA를 더욱 용이하면서도 효율적으로 생성하도록 해준다. 이와 대조적으로, 선행특허(한국특허공개 2001-0050744)에서 사용되는 가수분해반응은 전체적으로(초기부터 마지막까지) sn-1,3에 같은 정도로 반응하며, acyl migration이라는 반응 즉, sn-2위치의 지방산이 sn-1, 3으로 이동되는 현상이 빈번히 일어나 효과적이지 못하다.

본 발명의 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에서, 상기 반응은 상온에서 리파아제가 반응할 수 있는 조건은 특별히 한정되지 않으며, 목적으로 하는 지방산의 농도와 수율을 고려하여 적절히 선택할 수 있으나, 바람직하게는 15-40℃에서 5분 내지 24시간 동안 수행하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에서, 상기 반응은 리파아제의 존재 하에서 가알코올분해(alcoholysis)에 의해 알킬에스테르 형태의 피놀레닌산을 생성하는 것을 특징으로 한다. 상기 반응에서 에탄올을 첨가하는 경우 에틸에스테르 형태, 메탄올을 첨가하는 경우 메틸에스테르 형태의 지방산(피놀레닌산)을 얻을 수 있다.

종래의 방법으로 제조된 피놀레닌산 농축물(예를 들어, 한국특허공개 2001-0050744; 피놀레닌산을 함유하는 조성물 및 건강 성분으로서의 그의 용도)은 과량의 용매(증류수)를 사용하여 sn-1,3 위치의 지방산을 제거하고 글리세라이드 형태 의 PLA를 얻어내었지만, 본 발명은 잣기름의 sn-3 위치(PLA의 90% 이상 함유되어 있다고 밝혀진 위치)를 선택적으로 가수분해 시켜 최대한의 피놀레닌산의 농축물을 얻었다. 따라서 최종 얻고자 하는 형태가 본 발명의 경우 다음 재구성 지질 합성을 위한 출발물질(starting materials)로서 에틸에스테르 형태를 추구한 반면, 종래기술에서는 글리세라이드 형태로 얻어졌다는 차이점을 들 수 있다. 이러한 차이점은 가수분해를 이용한 기술이 아니며, PLA 및 Δ5-지방산이 에틸에스테르 형태로 얻어지기 때문에 분리가 매우 용이하다. 또한 본 발명의 에스테르 형태의 지방산은, 새로운 재구성 지질(예를 들면, monoacylglyceride 또는 diacylglyceride 등의 유화제 및 PLA 고함유 triglyceride)을 만드는 데에 이용가능하다.

본 발명의 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에서, 상기 반응 후 생성물을 여과 또는 농축하기 위하여 통상적으로 사용되는 방법들, 예컨대 분별 증류법, 결정화 방법 또는 요소 부가법을 이용하여 잔류 알코올과 반응 후 생성된 물을 제거하는 단계를 더 포함하는 것이 바람직하다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기의 방법에 따라 제조된 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산을 제공한다.

상기 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산은 피놀레닌산을 고농도로 함유할 수 있기 때문에, PLA가 가지는 생리학적 활성들을 포함하고 있다. 예를 들어, PLA는 저농도 지단백질(LDL cholestrol)을 낮춰주고, 혈전용해 효과를 갖고 있을 뿐만 아니라, 특히 공복감을 억제하고 포만감을 유도하는 작용을 지닌 호르몬으로 알려진, 콜레시스토키닌의 분비를 촉진한다고 알려져 있으므로, 본 발명의 피놀레닌산 고함 유 Δ5-지방산은 그 생리학적 활성이 뛰어나 상기 효능을 포함하는 식품, 약제 등의 생산분야에서 사용될 수 있을 것이다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 지방기질을 리파아제로 효소반응시켜 지방산의 제조에 있어서, 효소반응용액에 알코올을 첨가하는 것을 특징으로 하는 지방기질의 sn-3 위치에 대한 효소반응 특이성의 증진방법을 제공한다.

이하, 본 발명의 제조방법을 단계별로 보다 구체적으로 설명한다.

1) 원료 및 추출: 잣을 그라인더(grinder)로 갈아서 n-헥산으로 추출하거나, 직접 압착 또는 압착기(expeller)를 이용하여 잣오일을 추출한다.

2) 알코올리시스(Alcoholysis): 잣오일과 알코올을 중량비로 1:0.1 내지 1:10으로 하고, 총 기질(잣오일 + 알코올)의 1-30 중량%에 해당하는 리파아제를 넣고, 15-40℃에서 50-300rpm의 교반속도로 중탕기(water bath)에서 10-360분간 교반한다.

3) 농축: 농축기를 이용하여 반응액에 남아있는 에탄올과 반응 후 생성된 물을 제거한다(도 1 참조).

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.

실시예 1. 잣오일로부터 에탄올과 리파아제를 이용한 지방산의 제조

잣오일(pine nuts oil, 한국산 잣을 grinder로 간 후, 잣의 약 2배 중량 n-hexane을 넣고 stirring하여 중성 지방 부분을 추출한 후, 용매 부분을 모두 날리고 농축하여 그 액을 pine nuts oil로 사용한다.) 2.72g과 에탄올 0.28g을 반응기에 넣고 혼합 후, 총 기질(잣오일 + 에탄올 혼합액, 총 3.00g)의 5 중량%에 해당하는 리아파제(Novozyme435) 0.15g을 넣고, 25℃에서 300rpm으로 10-360분 동안 중탕기(water bath)에서 교반하여 효소반응 시켰다. 농축기(Model Innova 3100, NJ, USA))를 이용하여 반응액에 남아있는 에탄올과 반응 후 생성된 물을 제거한 후, 에틸에스테르의 양과 지방산의 조성을 분석하였으며, 그 결과를 표 1에 나타내었다.

실시예 2. 잣오일로부터 에탄올과 리파아제를 이용한 지방산의 제조

잣오일 2.38g과 에탄올 0.62g을 반응기에 넣고 혼합 후, 총 기질(잣오일 + 에탄올 혼합액, 총 3.00g)의 5 중량%에 해당하는 효소(Novozyme435) 0.15g을 넣고, 25℃에서 300rpm으로 10-360분 동안 중탕기(water bath)에서 교반하여 효소반응 시켰다. 농축기를 이용하여 반응액에 남아있는 에탄올과 반응 후 생성된 물을 제거한 후, 에틸에스테르의 양과 지방산의 조성을 분석하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.

실시예 3. 잣오일로부터 에탄올과 리파아제를 이용한 지방산의 제조

잣오일 1.97g과 에탄올 1.03g을 반응기에 넣고 혼합 후, 총 기질(잣오일 + 에탄올 혼합액, 총 3.00g)의 5 중량%에 해당하는 효소(Novozyme435) 0.15g을 넣고, 25℃에서 300rpm으로 10-360분 동안 중탕기(water bath)에서 교반하여 효소반응 시켰다. 농축기를 이용하여 반응액에 남아있는 에탄올과 반응 후 생성된 물을 제거한 후, 에틸에스테르의 양과 지방산의 조성을 분석하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다.

실시예 4. 잣오일로부터 에탄올과 리파아제를 이용한 지방산의 제조

잣오일 1.46g과 에탄올 1.54g을 반응기에 넣고 혼합 후, 총 기질(잣오일 + 에탄올 혼합액, 총 3.00g)의 5 중량%에 해당하는 효소(Novozyme435) 0.15g을 넣고, 25℃에서 300rpm으로 10-360분 동안 중탕기(water bath)에서 교반하여 효소반응 시켰다. 농축기를 이용하여 반응액에 남아있는 에탄올과 반응 후 생성된 물을 제거한 후, 에틸에스테르의 양과 지방산의 조성을 분석하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.

실시예 5. 잣오일로부터 에탄올과 리파아제를 이용한 지방산의 제조

잣오일 1.17g과 에탄올 1.83g을 반응기에 넣고 혼합 후, 총 기질(잣오일 + 에탄올 혼합액, 총 3.00g)의 5 중량%에 해당하는 효소(Novozyme435) 0.15g을 넣고, 25℃에서 300rpm으로 10-360분 동안 중탕기(water bath)에서 교반하여 효소반응 시켰다. 농축기를 이용하여 반응액에 남아있는 에탄올과 반응 후 생성된 물을 제거한 후, 에틸에스테르의 양과 지방산의 조성을 분석하였으며, 그 결과를 표 5에 나타 c 내었다.

실시예 6. 반응 후 지방산의 조성 및 회수율 분석

상기 실시예 1~5에서와 같이 수행된 리파아제 촉매 및 가에탄올분해 반응 후, 지방산의 조성 및 회수율을 가스 클로마토그래피(GC)로 분석하였다. GC는 Varian CP-3800, 분석조건은 180도에서 1분간 머무르다가 분당 1.5℃로 210℃까지 올린 후 5분간 머무른다. injector 온도는 240도, detector 온도는 250도이다. 컬럼에서 carrier gas는 분당 1ml로 흐른다. 시료처리는 methylation을 통해서 fatty acid methyl ester 형태로 만들어 분석하였다. 하기 표 1 내지 표 5는 실시예 1~5에 따른 PLA와 Δ5 지방산의 농도 및 회수율(yield)을 나타낸 것으로, 잣오일과 에탄올의 혼합비율(wt/wt)은 각각 1:0.1, 1:0.26, 1:0.52, 1:1.05 및 1:1.56이다. 이 중 표 4에서 Time 50분의 가스 크로마토그램을 도 2에 도시하였다. 도 2로부터, 초기 14.82%의 함량을 보이던 PLA 농도가 39.34%로 상승하였음을 알 수 있다.

[표 1]. 실시예 1에 따른 PLA와 Δ5 지방산의 농도 및 회수율(yield)

[표 2]. 실시예 2에 따른 PLA와 Δ5 지방산의 농도 및 회수율(yield)

[표 3]. 실시예 3에 따른 PLA와 Δ5 지방산의 농도 및 회수율(yield)

[표 4]. 실시예 4에 따른 PLA와 Δ5 지방산의 농도 및 회수율(yield)

[표 5]. 실시예 5에 따른 PLA와 Δ5 지방산의 농도 및 회수율(yield)

표 1 내지 5에서 보면, 위치 특이성을 가지고 있는 효소적 가수분해 및 가알코올분해를 이용하게 되면 잣오일 중 피놀레닌산은 20.60-45.02%를 함유하고 있으므로, 결론적으로 잣오일 내 피놀레닌산은 전체 피놀레닌산의 최대 99.63%까지 수율을 얻을 수 있었다. 이와 같은 반응은 동일한 조건일 때, 에탄올의 비율이 높아짐에 따라 더 적은 시간을 가지고 수율을 높을 수 있었다.

또한 피놀레닌산 외에도 Δ5-지방산으로서, 잣기름에는 5,9-18:2(taxoleic), 5,11-18:2(ephedrenic), 5,11-20:2(keteleeronic), 5,11,14-20:3(sciadonic) acid들이 포함되어 있는데, 이러한 긴 사슬(long-chain) 불포화지방산들 역시 동일한 조건으로 반응시켰을 때, 최대 99.14%의 수율 효과를 얻을 수 있었다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면 잣오일로부터 지방산을 제조하는 공정에서 알코올과 함께 리파아제를 사용하는 경우, PLA가 95%이상 결합되어 있는 sn-3 위치의 지방산에만 집중적으로 반응이 일어나, 고함유 PLA를 효과적으로 농축할 수 있고, 반응온도가 15-25℃정도의 실온에서도 반응이 쉽게 일어나며, 고순도의 고함유 PLA 지방산(40%>)을 제조할 경우에 반응시간이 60분 이내라는 점에서 획기적인 기술이라고 할 수 있다. 따라서 이러한 PLA가 고함유된 Δ5-지방산을 이용하여 기능성 식품 및 의약품 등의 제조에 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 본 발명에 따른 피놀레닌산 고함유 Δ5-지방산의 제조방법에 대한 공정도이다.

도 2는 본 발명의 실시예에 따른 결과로서, A는 출발물질(starting material)로 반응하지 않은 잣오일(pine nuts oil)의 크로마토그램이고, B는 잣오일 1.46g과 에탄올 1.54g을 혼합한 반응액을 25℃에서 50분간, 300rpm으로 반응한 후의 에틸에스테르를 크로마토그램으로 나타낸 것이다.

Claims (10)

1. 잣오일에 알코올을 첨가하여 혼합하는 단계 및 상기 혼합액에 칸디다 안탁티카(Candida Antarctica) 유래 리파아제를 첨가한 후 반응기에서 효소반응시키는 단계를 포함하고, 상기 알코올 첨가에 의해 잣오일의 sn-3 위치에 대한 효소반응 특이성을 증진시키는 것을 특징으로 하는 피놀레닌산 알킬에스테르의 선택적 제조방법.
2. 제 1항에 있어서, 상기 잣오일에 대하여 첨가되는 알코올 중량비는 0.1 내지 10인 것을 특징으로 하는 방법.
3. 제 1항에 있어서, 상기 리파아제는 잣오일과 알코올 혼합액에 대하여 1-30 중량%로 첨가되는 것을 특징으로 하는 방법.
4. 삭제
5. 제 1항에 있어서, 상기 효소반응은 15-40℃에서 5분 내지 24시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
6. 제 1항에 있어서, 상기 효소반응은 리파아제의 존재 하에서 가알코올분해(alcoholysis)에 의해 알킬에스테르 형태의 피놀레닌산을 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
7. 제 1항에 있어서, 상기 알코올은 에탄올이고 가알코올분해에 의해 생성되는 것은 에틸에스테르 형태의 피놀레닌산인 것을 특징으로 하는 방법.
8. 제 1항에 있어서, 상기 반응 후 잔류 에탄올과 생성된 물을 제거하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
9. 제 1항의 방법에 따라 제조된 피놀레닌산 알킬에스테르.
10. 삭제

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