JP2006039048A - 顕微鏡装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、レーザビームを複数のレンズやミラーで構成される第1の光学系を通じて2次元に走査して被写体の観察領域へ照射し、その反射光から生成された高解像度の共焦点画像(共焦点データ)と、第1の光学系の一部を共有する第2の光学系を通して結像され、撮像素子により撮像した、共焦点画像よりも低解像度の被写体画像(画像データ)とを得て、低解像度の被写体画像内に高解像度の観察領域を嵌め込んだ観察画像を生成する顕微鏡装置である。
【選択図】 図1
Description
前記被写体画像生成部による前記被写体画像内で指定した観察領域に前記共焦点画像生成部による共焦点画像を嵌め込む画像処理部と、を具備する顕微鏡装置を提供する。
図1は、本発明の第1の実施形態に係る顕微鏡装置の構成図である。
本実施形態は、レーザビームを複数のレンズやミラーで構成される第1の光学系(共焦点顕微鏡光学系)を通じて2次元に走査して試料(被写体)へ照射し、その試料からの光、例えば反射光から生成された高い解像度の共焦点画像(共焦点画像データ)と、第1の光学系の一部を共有する第2の光学系(顕微鏡光学系)を通してCCD等の撮像素子により撮像した、共焦点画像よりも低い解像度の被写体画像(画像データ)と、を得る顕微鏡装置である。
始めに、共焦点画像を得るための第1の光学系の構成をレーザビームの光路に沿って説明する。
第1の光学系は、レーザビーム2を照射するレーザ光源1と、レーザビーム2の照射を遮光するシャッタ23と、レーザビーム2を入射方向に応じて透過若しくは反射させるビームスプリッタ3と、レーザビーム2を所定方向(X軸方向)に走査するように反射するガルバノメータミラー4と、瞳伝送レンズ5,6と、前記所定方向と直交する方向(Y軸方向)にレーザビーム2を走査するように反射して、レーザビーム2を2次元的に走査(以下、2次元走査ビームと称する)させるガルバノメータミラー7と、瞳投影レンズ8と、結像レンズ9と、ビームスプリッタ18及び対物レンズ10と、を具備して構成される。
前述した被写体画像を得るための第2の光学系の構成についても同様にレーザビームの光路に沿って説明する。
まず、第2の光学系による試料11の解像度の低い被写体画像を撮像する。
光源22を駆動し、コントローラ16の制御部16bによりシャッタ24を開状態とし、シャッタ23を閉状態とする。
この2次元走査ビーム(レーザビーム2)は、瞳投影レンズ8、結像レンズ9、ビームスプリッタ18を介して対物レンズ10によりレーザスポットとして集光し、このレーザスポットで試料11の指定された観察領域上をX−Yの2次元方向に走査させる。
図3に示す変形例は、図1に示した第1の実施形態の構成に、試料11と対物レンズ10とを相対的に移動させる移動ステージ機構41や対物レンズ移動機構42を設けた構成である。
これらの3つの画像51a,51b,51cのうち、図5(a)は一番浅い深さ位置(例えば、表面)で取得した1枚目の画像51aを示し、図5(b)はさらに深い位置で取得した2枚目の画像51bを示し、図5(c)は、一番深い位置で取得した3枚目の画像51cをそれぞれ示している。
これらの画像51a,51b,51cは、それぞれ同じ位置に前述した共焦点画像53a,53b,53cを含んでいる。これらの共焦点画像53a,53b,53cは、光軸方向に対して焦点深度が浅いため、焦点位置以外の検出ビーム12は、共焦点用検出器15には届かず、画像として検出されることはない。
本実施形態の構成部位について、前述した第1の実施形態と同等の部位には同じ参照符号を付してその詳細な説明は省略する。
この第2の実施形態では、出射されるレーザビーム62の波長域が赤外線領域のレーザ光源61と、光源22とシャッタ24との間に可視光と赤外光の切り換え機能を有する波長域選択フィルタ25とが配設されている。
次に、第2の実施形態における変形例について説明する。
前述した第2の実施形態で説明した赤外光レーザビームにより共焦点画像データを取得する時には、その赤外光レーザビームは目に見えないため、試料11上のどの部分を走査しているかは確認できない。
本実施形態は、図9(a)に示すように、詳細に見たい観察画像71の画像領域72が1枚の観察可能範囲を超えている場合で、その他が例えば、図9(b)に示すような画像領域であった場合には、図9(c)に示すように、それらの画像を貼り合わせて1枚の合成画像(観察画像)を作成しようとしたものである。
本実施形態の構成部位について、前述した第1の実施形態と同等の部位には同じ参照符号を付してその詳細な説明は省略する。
本実施形態は、低い解像度の被写体画像をカメラではなく、共焦点用検出器15と同じ検出器83を用いた構成である。
この被写体画像(非共焦点画像)に共焦点画像を合成することにより、所望する箇所が高い解像度になっている合成画像(観察画像)を得ることができる。
Claims (5)
- 試料に光を照射し該試料からの光に基づく観察画像を生成する顕微鏡装置であって、
前記観察画像内で所望する観察領域を高い解像度にて画像を取得する第1の光学系と、
前記観察画像内の領域を前記第1の画像生成部の解像度よりも低い解像度にて画像を取得する第2の光学系と、
前記第2の光学系による前記観察画像内の領域に前記第1の光学系による高い解像度の画像を嵌め込む画像処理部と、
を具備することを特徴とする顕微鏡装置。 - 前記顕微鏡装置において、
対物レンズと前記試料を載置するステージとを光軸方向で相対的に移動可能なZ移動機構と、
前記対物レンズ又は前記ステージの位置をZ座標データとして検出するZ位置検出部と、
前記Z位置検出部により検出されたZ座標データに基づき、複数の観察画像を重ね合わせた3次元の合成画像を生成する3次元画像合成部と、
を備え、
前記対物レンズ又は前記ステージを光軸方向で移動させつつ、
前記Z座標データに基づき連続的に作成された観察画像同士を重ね合わせて1つの観察画像を作成することを特徴とする請求項1記載の顕微鏡装置。 - 前記顕微鏡装置において、
前記試料を載置し、光軸と直交するXY方向に移動可能なXY移動ステージと、
前記XY移動ステージの位置をXY座標データとして検出するXY位置検出部と、
前記XY位置検出部により検出されたXY座標データに基づき、複数の観察画像を2次元的に連結合成する2次元画像合成処理部と、
を備え、
前記XY座標データに基づき連続的に作成された観察画像同士を連結して1つの観察画像を作成することを特徴とする請求項1又は2記載の顕微鏡装置。 - 試料に光を照射し該試料からの光に基づく観察画像を作成する顕微鏡装置であって、
前記試料へ光を照射し、前記観察画像内に観察される前記試料に存在する部位を略位置及び略大きさが直視可能な解像度の被写体画像を生成するための光学系及び撮像装置からなる被写体画像生成部と、
前記被写体画像生成部により生成された被写体画像内で所望する観察領域を指定し、その指定された前記観察領域内にレーザビームを走査照射して高い解像度の共焦点画像を得る共焦点レーザ顕微鏡からなる共焦点画像生成部と、
前記被写体画像生成部による前記被写体画像内で指定した観察領域に前記共焦点画像生成部による共焦点画像を嵌め込む画像処理部と、
を具備することを特徴とする顕微鏡装置。 - 前記顕微鏡装置において、
前記共焦点レーザ顕微鏡に設けられ、前記試料に赤外領域のレーザビームを照射するレーザ光源と、
前記被写体画像生成部に設けられた前記試料に光を照射する光源の前方の光路上に設けられた該光の通過する波長域を可視光域と赤外光域とのいずれかを選択する波長域選択フィルタと、
対物レンズと前記試料を載置するステージとを、光軸方向で相対的に移動可能なZ移動機構と、
をさらに具備し、
前記試料の表面の観察画像に加えて、該試料の深さ方向に少なくとも1つ以上の内部観察画像を作成することを特徴とする請求項4記載の顕微鏡装置。
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