JP2004043513A - 経口投与のための脂質プロドラッグ - Google Patents

Abstract

【課題】　投与される製薬化合物の経口によるバイオアベイラビリティおよび／または組織内のレベルを向上させ、また、化合物の代謝的クリアランスを低減し、かつ化合物の生理学的半減期を伸ばすこと。
【解決手段】　リン脂質化合物に共有結合されたタキソールまたは置換タキソールを含む、抗新生物プロドラッグであって、前記リン脂質化合物は、ホスファチジルグリセロール、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｏ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、および１−Ｓ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸からなる群より選択され、前記置換タキソール化合物は、タキソール側鎖のβ−アミノ基に親油性の置換基を有するタキソール化合物からなる群より選択される。
【選択図】　　　　なし

Description

　本出願はドラッグデリバリーの方法に関する。本出願は特に、薬剤の経口によるバイオアベイラビリティ（生物学的利用能）を助長するための方法に関する。

　経口ルートは、薬剤投与の最も古い方法であり、最も安全であり、最も簡便でかつ経済的である。経口的に投与された薬剤は、口腔の粘膜を介して、または胃および腸の内壁を介して吸収することができ、しかしながら、その吸収速度は、上皮膜リポイドのバリアを介して薬剤が透過する能力に依存している。たとえば、アルコール、すなわち脂質可溶性で非イオン性の化合物は、胃の粘膜を横切り拡散によって血液の流れの中に速やかに吸収される。弱い酸も胃の内壁を介してよく吸収される一方、弱い塩基は、主に腸内で吸収される。イオン化されているかまたは脂質不溶性の薬剤、たとえば、第四級アンモニウム化合物およびストレプトマイシンは、消化管においてあまり吸収されず、注射によって投与されなければならない。薬剤の注射にはいくつかの不利な点がある。感染を防止するため厳密な無菌状態が維持されなければならず、意図しない血管内への注入が起こるかもしれず、注射を痛みを伴なうことがあり、患者にとって厄介なものである。非経口投与はまたより高くつく。

　正常な環境下において、そのままの食物脂質、主としてトリグリセリドおよびジグリセリドリン脂質は、腸の粘膜を介して速やかには吸収されない。リン脂質は、消化管において生理学的にホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジル−イノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、およびホスファチジン酸として存在する。脂質吸収のための通常の生理学的メカニズムは、膵臓の酵素ホスホリパーゼＡ２のｓｎ−２アシルエステル結合への加水分解作用を介してｓｎ−２アシル基が除去されることによりリン脂質のホスファチジル形からリゾリン脂質へ転換することを必要とする。そして、脂質のリン脂質次いでリゾリン脂質への変換は、吸収のための通常のメカニズムおよび脂質の消化管からの輸送を提供し、１日当たり数グラムのリン脂質の摂取をもたらす。

　その化学構造のゆえに、腸を介して吸収されない薬剤を経口的に生物利用可能なプロドラッグの形態に転換することは、治療上有利なことであり、したがってそれらの薬剤の非経口投与による不便さおよび高価さを取除くことになるであろう。
米国特許第５，２２３，２６３号 米国特許第５，１９４，６５４号

　本発明は、投与される製薬化合物の経口によるバイオアベイラビリティおよび／または組織内のレベルを向上させ、また、化合物の代謝的クリアランスを低減し、かつ化合物の生理学的半減期を伸ばすことを目的とする。

　本発明は、リン脂質化合物に共有結合されたタキソールまたは置換タキソールを含む、抗新生物プロドラッグを提供する。

　好ましくは、前記リン脂質化合物は、ホスファチジルグリセロール、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｏ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホス
ファチジン酸、１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、および１−Ｓ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸からなる群より選択される。

　好ましくは、前記置換タキソール化合物は、タキソール側鎖のβ−アミノ基に親油性の置換基を有するタキソール化合物からなる群より選択される。

　好ましくは、前記親油性の置換基が、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸からなる群より選択される。

　本発明はまた、タキソール関連化合物のリン脂質誘導体であって、（ａ）次式のタキソール側鎮

または

を、次式のアリルアルコール基において共有結合するタキソール側鎖を備え、

式中、Ｒ¹およびＲ²は、同じであるか、もしくは異なり、かつ、直鎖または枝分かれ鎖の、飽和または不飽和の炭素原子数８−１８のアシル基もしくはアルキル基であり、または、Ｒ²はベンジルもしくはＯＨであり、Ｒ³は、タキソール、タキソテン（ｔａｘｏｔｅｎｅ）、バッカチンＩＩＩ、または１０−デアセチルバッカチンＩＩＩであり、Ｒ⁴は、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸であり、かつ、ｎは０−１０である、タキソール関連化合物のリン脂質誘導体を提供する。

　好ましくは、Ｒ¹が、エーテル結合したアルキル基であり、Ｒ²はＯＨであり、かつ、Ｒ⁴がベンゾイルである。

　好ましくは、Ｒ¹が１−Ｏ−オクタデシルである。

　本発明はまた、リン脂質に結合され、かつ、以下の構造を有するタキソール側鎖を提供する。ここで、

式中、Ｒ¹およびＲ²は、同じであるかもしくは異なり、かつ、直鎖もしくは枝分かれ鎖の、飽和または不飽和の炭素原子数８−１８のアシル基もしくはアルキル基であり、または、Ｒ²はベンジルまたはＨとすることができ、Ｒ³は、任意の加水分解可能なエステル基、たとえば、メチル、エチル、またはピバロイルであり、Ｒ⁴は、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸であり、かつ、ｎは０−１０である。

　本発明はまた、タキソールまたは置換タキソール化合物の脂質誘導体を合成する方法であって、（ａ）タキソール側鎖のプロパン酸基をエステル化によって保護し、リン脂質を
タキソール側鎖のアミノアルコールまたはヒドロキシカルボン酸基にリン酸基を介して共有結合し、それにより前記側鎖の脂質誘導体を形成するステップと、（ｂ）前記プロパン酸基から保護基を除去するステップと、（ｃ）前記タキソール側鎖の前記脂質誘導体を、前記プロパン酸基を介して、バッカチンＩＩＩまたは１０−デアセチルバッカチンのアリルアルコール基に結合させるステップと、を含む、方法を提供する。

　本発明はまた、タキソールまたはタキソール関連化合物のリン脂質誘導体を合成する方法であって、（ａ）アシルまたはアルキル置換−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸およびβ−アミノ−α−ヒドロキシ−ベンゼンプロパン酸エステルを与えるステップと、（ｂ）前記ホスファチジン酸のリン酸基と前記ベンゼンプロパン酸エステルのα−ヒドロキシル基との間の共有結合を介して、前記グリセロ−３−リン酸と前記ベンゼンプロパン酸エステルとを結合させるステップと、（ｃ）加水分解により（ｂ）の脂質誘導体のベンゼンプロパン酸エステル基を脱エステル化するステップと、（ｄ）（ｃ）の脂質誘導体を、前記誘導体のプロパン酸基とタキソール環骨格の１３−ＯＨ基との縮合によって、タキソールの関連基に結合させるステップと、を含む、方法を提供する。

　好ましくは、前記アシルまたはアルキル置換グリセロ−３−リン酸が、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸である。

　好ましくは、前記１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸は１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸である。

　本発明により、投与される製薬化合物の経口によるバイオアベイラビリティおよび／または組織内のレベルは向上し、また、化合物の代謝的クリアランスが低減され、かつ化合物の生理学的半減期が延びる。

　本発明に従って、経口ルートを介して利用できないかまたは利用可能性が乏しい薬剤または他の製薬上の化合物を、経口的に利用可能な形に変える方法が提供され、この方法は、該製薬化合物の脂質誘導体を調製するステップを備える。

　該脂質誘導体は、ホスフェートエステルを直接的に介するか、またはリンカー分子を介するかのいずれかで薬剤の官能基と共有結合する１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート基、１−Ｏ−アシル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート基、１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート基、または１−Ｓ−アシル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート基を含む。それにより、投与される製薬化合物の経口によるバイオアベイラビリティおよび／または組織内のレベルは向上する。

　薬剤の１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート誘導体を含む好ましい脂質プロドラッグは、式［Ｉ］の構造を有する。本発明の方法の特に好ましい具体例において、製薬化合物は、共有結合のため利用できるカルボキシル、ヒドロキシルまたはアミノ基を有する抗癌ヌクレオシドであり、たとえば、９−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン（ａｒａ−Ｃ）、５−フルオロウリジン、６−メルカプトプリンリボシド、９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン（ａｒａ−Ａ）、２’−アラフルオロ−２−クロロデオキシアデノシンまたは５−アミノ−４−イミダゾールカルボキサミドリボヌクレオシド（ＡＩＣＡ−リボシド）である。他の好ましい具体例において、製薬化合物は、治療ペプチド、もしくは３から３５アミノ酸残基の模擬ペプチド（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ）またはそれらの類似体である。本発明のこの局面における具体例において、製薬化合物は、ｎ−ムラミルトリペプチドまたはエナルキレン（ｅｎａｌｋｉｒｅｎ）である。さら
なる具体例において、Ｄは、ペニシリンおよびセファロスポリンクラスの抗生物質からなる群から選択され、たとえば、Ｄは、ペニシリンＧ、セファゾリン（ｃｅｆａｚｏｌｉｎ）、セフタジジム（ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ）、セフトリアキソン（ｃｅｆｔｒｉａｘｏｎｅ）、およびピペラシリン（ｐｉｐｅｒａｃｉｌｌｉｎ）からなる群から選択される。

　本発明の他の局面に従って、経口的に投与される製薬化合物の薬物動態学的特性を高める方法が提供され、この方法は、該製薬化合物の脂質誘導体を調製するステップを備える。該脂質誘導体は、ホスフェートエステルを直接的に介するかまたはリンカー分子を介するかのいずれかで、化合物の官能基に共有結合する１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート、１−Ｏ−アシル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート、１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート、または１−Ｓ−アシル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスフェート基を含む。それにより、化合物の代謝的クリアランスが低減され、かつ化合物の生理学的半減期が延びる。本発明のこの局面におる具体例において、製薬化合物は、３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）または３’−アジド−３’−アシクログアノシン（ＡＣＧ）である。

　本発明のさらなる局面において、抗新生物（抗腫瘍）プロドラッグが提供される。該プロドラッグは、リン脂質化合物と共有結合するタキソール（ｔａｘｏｌ）または置換されたタキソール（ｔａｘｏｌ）化合物を含む。好ましい具体例において、タキソールプロドラッグは、ホスファチジルグリセロール、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｏ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸および１−Ｓ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸からなる群から選択されるリン脂質化合物を含有する。本発明のこの局面における好ましい具体例において、該タキソール化合物は、タキソール側鎖のβ−アミノ基において親油性の置換基を有するタキソール類似体である。

　これらの親油性置換基は、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチドまたはアミノ酸からなる群から選択することができる。タキソール類似体の側鎖は、さらに、脂肪族Ｃ１−１０炭化水素基を親油性を増加させるため含むことができる。

　本発明の他の局面に従って、ここに開示されるような、リン脂質に結合しかつ式ＩＩの構造を有するタキソール側鎖を提供することができる。

　本発明のさらなる局面に従って、タキソールの脂質誘導体または置換タキソール化合物を合成する方法が提供され、この方法は、（ａ）タキソール側鎖のプロパン酸基をエステル化により保護して、タキソール側鎖のアミノアルコールまたはヒドロキシカルボン酸基にホスフェート基を介してリン脂質を共有結合し、前記側鎖の脂質誘導体を形成するステップと、（ｂ）前記プロピオン酸基から保護基を除去するステップと、（ｃ）タキソール側鎖の脂質誘導体を、プロピオン酸基を介してバッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎ）ＩＩＩまたは１０−デアセチルバッカチン（ｄｅａｃｅｔｙｌ　ｂａｃｃａｔｉｎ）のアリルアルコール基に結合するステップとを備える。

　本発明のこの局面の他の具体例において、タキソールまたはタキソール関連化合物のリン脂質誘導体を合成する方法が提供され、この方法は、（ａ）アシルまたはアルキル置換されたｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートおよびβ−アミノ−α−ヒドロキシ−ベンゼンプロパネートエステルを提供するステップと、（ｂ）ホスファチジン酸のホスフェート基とベンゼンプロパネートエステルのα−ヒドロキシル基との間の共有結合を介してグリセロ−３−ホスフェートとベンゼンプロパネートエステルとを結合するステップと、（ｃ）加水分解により（ｂ）の脂質誘導体のベンゼンプロパネートエステル基を脱エステル化するステップと、（ｄ）該誘導体のプロパン酸基とタキソール環骨格の１３−ＯＨ基との縮
合により（ｃ）の脂質誘導体をタキソールに関連する基に結合するステップとを備える。

　開示される方法のいずれかにおける好ましい具体例において、アシルまたはアルキル置換グリセロ−３ホスフェートは１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートである。特に好ましい具体例において、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートは１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートである。

　図１から６は、経口的に投与された薬剤の１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート誘導体の薬物動態学を示すものであり、１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−Ｐ−ＡＺＴ［^３Ｈ］（バチル−Ｐ−ＡＺＴ−［^３Ｈ］）を経口投与することにより処置された動物およびフリーのＡＺＴを腹腔内投与することにより処置された動物の特定の組織における３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）の濃度をグラフにより比較している。

　本発明は、いくつかのクラスの薬剤の経口ルートによる輸送および吸収を、それらの薬剤を脂質プロドラッグに転換することにより促進するための方法を提供する。経口的にバイオアベイラビリティの乏しい多くの薬剤を、リン脂質誘導体に転換することにより、特にアルキル基がエーテル結合を介してグリセロール成分の１位に結合するモノグリセリドリン脂質誘導体に転換することにより、経口投与に適したものにすることができる。この戦略は、ホスフェート基に共有結合することのできる化学基またはホスフェート基に共有結合することのできる結合基に共有結合することのできる化学基を有する任意の薬剤に通常適用可能である。

　ここに開示されるように、利用可能なヒドロキシル、スルフヒドリル、カルボキシルまたはアミン基を有する薬剤は、いずれかの戦略により、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートのホスフェート基、または１−Ｏ−アシル、１−チオエーテル、および１−チオエステル類似体に共有結合させ、薬剤の経口吸収を向上させることができる。結合基は、必要な共有結合特性を有する多官能分子、たとえばヒドロキシル化されたカルボン酸またはポリペプチドである。

　本発明のリン脂質誘導体のモノグリセリドにおけるアルキル基は、２〜２４個の炭素を有する直鎖、枝分かれまたは環状炭化水素鎖とすることができ、また飽和もしくは６個までの二重結合を有する不飽和とすることができる。アルキル基は８〜２０の炭素原子を有することが好ましい。１４〜１８の炭素原子を有するアルキル基は最も好ましい。アルキル基は、エーテルまたはビニルエーテル結合によりグリセロール成分に結合する。

　本発明の方法に使用される好ましい脂質誘導体は、次の式のものである。

　式中、Ｒは、置換されているかまたは置換されていない、飽和または不飽和の、直鎖、枝分かれ鎖、もしくは環状のＣ_１−２４アルキル基であり、エーテル結合においてグリセロール成分に共有結合するものであり、ｎ＝０〜２であり、Ｌは、式Ｘ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｙの結合分子であって、そこにおいてＸおよびＹがヒドロキシル、スルフヒドリル、カルボキシルおよびアミン基から独立して選択される官能基であり、かつｎ＝１〜２４のものであるか、またはＬは存在しないものであり、かつＤは、ヒドロキシル、スルフヒドリル、カルボキシル、またはアミノ基からなる群から選択される官能基を有する治療用化合物である。

　特許文献１および特許文献２は、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート成分を有する脂質プロドラッグを開示する。結合基は、ヒドロキシル、スルフヒドリル、カルボキシル、およびアミノ基を含む多官能基を有するいくつかの分子の任意のものとすることができる。リンカーとしての使用に特に適するものは、次のものである。

　（１）一般構造ＨＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ_２を有し、ｎ＝１〜２４、好ましくはｎ＝２または３のアミノアルコールで、有効な薬剤の部分である候補となる薬剤または化学的に修飾された薬剤のカルボキシル基において挿入に適するもの。モノグリセリドホスホリルエタノールアミンは、天然に存在するリン脂質であり、それは、アミノアルコールタイプのリンカーを組込んでいる。また、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−ホスホリルエタノールアミンは、本発明の脂質プロドラッグを調製するため、利用可能なカルボキシル基を有する薬剤に共有結合することができる。

　（２）一般構造ＨＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−ＣＯＯＨ（ｎ＝１〜１２）を有し、候補となる有効な薬剤のアミノ基において挿入に適するヒドロキシアルキルカルボン酸。ヒドロキシ脂肪酸、β−ヒドロキシ酪酸、ならびにセリンおよびヒドロキシプロリンのようなヒドロキシアミノ酸などの天然に存在する分子を有利に使用してもよい。

　本発明は、ここに記載するような結合に適した化学構造を有する任意の薬剤について有用性、効力、生物学的半減期、細胞膜を横切る輸送および経口的なバイオアベイラビリティを向上させるための手段を提供する。本発明の方法は、生物学的利用能に乏しくかつさもなくば非経口的に投与しなければならない薬剤に有利に適用することができる。

　経口ルートにより効果的に投与することのできる治療クラスの薬剤の種々の例は、たとえば、次のものの１−Ｏ−アルキル−、１−Ｏ−アシル−、１−Ｓ−アルキル−（チオエーテル）、または１−Ｓ−アシル−（チオエステル）リン脂質誘導体を含む。

　（ａ）ヌクレオシド類似体を含む抗癌剤、たとえば、９−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン（以下、シトシンアラビノシドまたはａｒａ−Ｃとする）、９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン（以下、アデニンアラビノシドまたはａｒａ−Ａとする）、５−フルオロウリジン、６−メルカプトプリンリボシド、または２’−ａｒａ−フルオロ−２−クロロデオキシアデノシン。

　（ｂ）抗ウイルスヌクレオシド、特に特許文献１に開示されるそれらの抗ウイルスヌクレオシドの１−Ｏ−アルキルリン脂質誘導体。

　（ｃ）治療ペプチドもしくは模擬ペプチド、または酵素阻害剤であるペプチドで、Ｄ−アミノ酸、Ｌ−アミノ酸またはアミノ酸類似体を含み、約３５までのアミノ酸、好ましくは６以下のアミノ酸を含むもの、またはそれらの類似体、特に脂質誘導体。この種の好ましい具体例において、デスモプレッシン（ｄｅｓｍｏｐｒｅｓｓｉｎ）、ｎ−ムラミルトリペプチド、またはエナルキレン（ｅｎａｌｋｉｒｅｎ）の１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グ
リセロ−３−ホスフェート誘導体が合成されかつ経口的に投与される。

　（ｄ）抗生物質、特にペニシリンＧ、セファゾリン、セフタジジム、セフトリアキソンまたはピペラシリンを含むペニシリンおよびセファロスポリン系の抗生物質。

　（ｅ）ホスホノ酸化合物、特にホスホノ蟻酸およびホスホノ酢酸ならびに特許文献２に開示されるヌクレオシドホスホネートの１−Ｏ−アルキルリン脂質誘導体。

　（ｆ）ＡＩＣＡ−リボシド（５−アミノ−４−イミダゾールカルボキサミドリボヌクレオシド）、虚血性心臓病の治療のため、関節炎、自己免疫疾患、乾癬および他の炎症性の症状の治療において使用される薬剤であり、溶液において経口投与された場合あまり利用されない（＜５％）もの（Ｄｉｘｏｎ，Ｒ．ｅｔ　ａｌ．，１９９１）。このタイプの他の薬剤は、５−アミノ−（１−β−Ｄ−リボフラノシル）イミダゾールカルボキサミドまたは１−β−Ｄ−リボフラノシル１，２，４−トリアゾールカルボキサミドであり、これらは喘息およびじんましん、湿疹を含むアレルギーの治療、レッシュ−ナイハン症候群を含む自己免疫疾患、ならびに制限された血液流に関連する心臓疾患のため使用される。

　（ｇ）非ステロイド抗炎症化合物、特にこれらの化合物の１−Ｏ−アルキル脂質誘導体。

　治療のクラスに従う本発明の方法のための好ましい薬剤の候補を表１に列挙する。

　本発明および薬剤の経口投与のための関連する方法における化合物の重要な局面において、１−Ｏ−アルキル−、１−Ｏ−アシル−、１−Ｓ−アルキル−、および１−Ｓ−アシル−グリセロ−ホスフェート誘導体は、経口投与のための代謝転換を必要としない。これらの脂質プロドラッグは、この点において、代謝プロセスが予めリゾリン脂質に転換する
ことを必要とするホスファチジル誘導体と異なっている。さらに、１−Ｏ−アルキル誘導体のグリセロール成分の１位においてアルキル基は、アルキル基をグリセロール構造に結合するエーテル結合のため、腸内のリゾホスホリパーゼによって分解することができない。この代謝特性は、消化による分解を抑制し、かつ小腸において膜輸送を受ける他のリゾリン脂質とともに無傷の１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート薬剤結合体の腸内吸収を促進する。１−Ｏ−アシルおよび対応するチオエーテルならびにチオエステル類似体もまた実質的に吸収されてもよいが、その特性の必要とする用途においてそれほど好ましくない。

　脂質成分の薬剤候補への結合。

　本発明の化合物は、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート、またはそれらの１−Ｏ−アシル、１−チオエーテル、もしくは１−チオエステル類似体を薬剤に結合する合成方法、または１−Ｏ−アルキルモノグリセリドまたはそれらの１−Ｏ−アシル、１−チオエーテルもしくは１−チオエステル類似体を薬剤のホスホリル化された官能基に結合する合成方法に従って形成される。

　１−Ｏ−アルキルグリセロール成分または上述した任意の他の類似体と薬剤とは、グリセロール構造のｓｎ−３位においてモノ、ジ、またはトリホスフェート基を介して共有結合することができる。１−Ｏ−アルキルグリセロールと薬剤とが結合基を介して結合されるとき、リンカー分子は、その末端のホスフェート、たとえば１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートのホスフェートに共有結合される。いずれの場合においても、候補となる薬剤は利用可能な官能基を有する。

　反応は、典型的には、２５℃〜６０℃の温度で、好ましくは３０℃〜５０℃の温度において、２〜２５時間、好ましくは８〜１０時間の間行なわれる。Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）が、計量された分量、通常０．５〜３時間、好ましくは０．７５〜１．５時間にわたって添加される。

　反応混合物は、水の添加によって進められ、かつトルエンおよびエタノールの継続的な添加により共沸混合物とされる。得られた粗生成物は、イオン交換およびシリカクロマトグラフィーにより精製され、所望の純度で所望の化合物をもたらす。

　本発明のプロセスは、好ましくは液相において行なわれる。トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＩＰＳ）またはＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のいずれかの添加において、反応混合物は３０℃〜６０℃の温度に加熱される。ＴＩＰＳまたはＤＣＣのいずれかが当量（または化学量論的な量以上）存在することにより、反応の進行は妨げられない。

　反応混合物の温度は、その沸点まで上げることができる。反応熱は、反応容器の外部からの冷却または冷却された還流冷却器の手段により取除くことができる。

　反応のための適切な溶媒は、アミンまたはその誘導体である。好ましい溶媒は、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミンなどの第三級アミン、またはピリジンもしくはピコリンのような複素環アミンを含む。

　本発明の１−Ｏ−アルキル類似体、たとえば１−Ｏ−オクタデジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート誘導体、または他の任意の１−Ｏ−アシルもしくは１−Ｓ−アシルもしくは１−Ｓ−アルキル類似体は、当該技術において知られている任意の有機合成法、たとえば例２（化合物ＩＩａ）に記載されるような、バチルアルコールとａｒａ−Ｃモノホス
フェートのような薬剤の候補のモノホスフェートとの縮合により製造することができる。他の方法では、ＤＣＣまたはＴＰＳのような縮合剤の存在下で、バチルアルコールのモノホスフェートを候補の薬剤に結合する（例５）。

　さらに異なる方法において、１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートは、バチルアルコールの２位における水酸基をベンジルエーテルとして保護しながらａｒａ−Ｃと縮合された。続いて、ルイス酸が脱ベンジル化を触媒し、経口的に生物利用可能なバチル−Ｐ−ａｒａ−Ｃが得られた（例５）。

　タキソール関連化合物の脂質プロドラッグ誘導体。

　タキソールの脂質誘導体は、例１３〜１６に示すように、タキソール側鎖のアミノアルコールおよびヒドロキシカルボン酸ユニットをホスファチジン酸、好ましくは１−Ｏ−アルキルグリセロホスフェートに共有結合する方法に従って調製される。脂質誘導化された側鎖は、次に、バッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎ）ＩＩＩまたは１０−デアセチルバッカチンＩＩＩとしてのアリルアルコールにおいて、タキソールの環構造に結合される。側鎖は、親油性を高めるため、脂肪族基（ＣＨ_２）_ｎの挿入により誘導化することができる。

　一般的な方法に従って、置換されたβ−アミノ−α−ヒドロキシ−ベンゼンプロパノエートは、ＤＣＣのような縮合剤の存在下で、ホスファチジルグリセロールまたは１−Ｏ−アルキル−もしくは１−Ｏ−アシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸に共有結合し、次式の化合物を与える。

　式中、Ｒ^１およびＲ^２は、同じか異なっており、かつ直鎖または枝分かれした、飽和または不飽和のＣ_８−Ｃ_１８アシルまたはアルキル基であり、またＲ^２はベンジルまたはＨとすることができ、Ｒ^３は、任意の加水分解可能なエステル基、たとえばメチル、エチルまたはピバロイルであり、Ｒ^４は、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸であり、かつｎは０〜１０である。

　他の具体例において、Ｒ^１およびＲ^２は、チオエステルまたはチオエーテル結合によりグリセロール基に結合する。

　好ましい具体例において、Ｒ^１は、エーテル結合されるバチル基であり、かつＲ^２およびＲ^４はベンジルであり、かつ１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートは、β−（ベンゾイルアミノ）−α−ヒドロキシベンゼンプロパノエートエステルと縮合しタキソール側鎖の脂質誘導体を形成する。プロパノエートエステルは、次いで加水分解され、経口的に生物利用可能なタキソール化合物を形成すべく、次の式を有
するバッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎ）ＩＩＩまたは１０−デアセチルバッカチンと結合できるプロパン酸を生じる。

　本発明の脂質誘導体を調製するに当たり使用するための脂肪酸、脂肪アルコール、グリセリドおよびリン脂質を含む脂質は、市販の業者（Ａｖａｎｔｉ　Ｐｏｌａｒ　Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．，Ｐｅｌｈａｍ，Ａｌａｂａｍａ；またはＧｅｎｚｙｍｅ　Ｃｏｒｐ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）から購入してもよく、また公知の方法によって合成してもよい。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロール（バチルアルコール）は、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓから入手可能であり、またバチルアルコールの２−ベンジル誘導体はＢａｃｈｅｍ，Ｉｎｃ．，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから入手可能である。本発明のプロドラッグの調製に有用な他のリゾホスファチジン酸は、Ｇｅｎｚｙｍｅ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓから入手可能である。これらの脂質が共有結合されるべき薬剤は、製薬会社から購入することができる。

　結合反応を進めるため、反応物からわずかな水もすべて取除くことが重要である。したがって、脂質はまず、真空下での溶媒の蒸発またはＰ_２Ｏ_５を用いた真空下でのいずれかにより凍結乾燥される。反応はまた、たとえばアルゴンのような不活性ガスの下で行なわれる。

　合成反応は、適当な溶媒を用いる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて追跡される。ＴＬＣによる決定において反応が完了したとき、生成物は有機溶媒によって抽出され、脂質の分離に適した担体（たとえばケイ酸）上でのクロマトグラフィーにより精製される。

　１−Ｏ−アルキルグリセロールホスフェートプロドラッグの効力および効能。

　本発明の脂質誘導プロドラッグ、好ましくは１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートプロドラッグは、誘導化していない薬剤に比べて有利な薬理学的特性を有する。

　本発明の脂質プロドラッグの効果は、インビトロおよびインビボの両方において行なわ
れた試験で証明された。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−３’−デオキシ，３’−アジドチミジン（ＡＺＴ）が、経口吸収の研究において用いられた。この化合物は、グリセロールの１位において、１８炭素のアルキルエーテルを有し、グリセロールの２の位置においてヒドロキシルはオープンであり、かつ３の位置はホスホジエステル結合により３’−デオキシ，３’−アジドチミジン（ＡＺＴ）−５’モノホスフェートに結合している。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ＡＺＴは、吸収のためいかなる代謝転換も必要とせず、胃腸管の領域から直接吸収されることが明らかである。それは、グリセロールの１位におけるエーテル結合のため、消化管においてリゾホスホリパーゼによる脱アシル化を受けない。その代謝は、知られていないが、該化合物は、細胞内の酵素およびホスホジエステラーゼにより代謝され３’−デオキシ，３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）またはＡＺＴ−ＭＰを細胞の中で放出するという仮説が立てられる。

　ＡＺＴ−モノホスフェートのバチルアルコール誘導体は、例１２に記載されるように、薬物動態学試験において経口的バイオアベイラビリティに対しインビボで評価され、その結果は図１〜１４に示される。結果を解釈するため、フリーのＡＺＴは経口的に利用可能であるが、しかしその生理学的半減期は約３０〜６０分間と極めて短いことを理解すべきである。この研究において、経口投与の後のバチル−誘導ＡＺＴプロドラッグの組織におけるレベルは、時間について積分された組織における投薬量レベルとしての曲線下の面積（ＡＵＣ）を記録することにより、腹腔内投与後のフリーのＡＺＴのレベルと比較された。顕著に、脂質プロドラッグの経口投与後におけるプラズマでのＡＺＴのＡＵＣは、腹腔内投与されたフリーのＡＺＴのそれよりも１．３８倍大きく、プラズマにおいてより長い時間薬剤のレベルを保持することにおいて本発明の新規な投与方法が考えられる利点を明らかに有することが示された。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−［^３Ｈ］ＡＺＴは、プラズマにおいて脂質の抽出および薄層クロマトグラフィーにより検出された。フリーの［^３Ｈ］ＡＺＴの顕著な量は、経口投与の後１２時間までは見出されなかった。

　例１５に示されるようなインビボの研究は１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート薬剤誘導体が誘導化していない薬剤と同じ薬理学的効果を有することを示している。それはさらに、バチル−Ｐ誘導体を用いた経口投与がＡＺＴのより便利でかつ効果的な投与を可能にすることを示している。１−Ｏ−バチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ＡＺＴは、ラウシャーネズミ白血病ウイルス（ＲＬＶ）で感染したマウスの治療において、フリーのＡＺＴと比較された。ＲＬＶはネズミのレトロウイルスであり、ＲＬＶに感染したマウスは、インビボでレトロウイルスにより誘発される疾患に対する抗ＡＩＤＳ剤の候補の治療効果を評価するためのモデル系として有用である。ＲＬＶは脾臓細胞に感染し、感染した動物は、広範な脾腫を有する。効果的な抗腫瘍剤は、脾腫を阻害し、器官重量の減少は、ウイルスの排除と相関関係を有する（Ｒｕｐｒｅｃｈｔ，Ｒ．，ｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ　３２３：４６７−４６９（１９８６））。ＡＺＴは生理学的半減期が短いため、ＡＺＴ治療の最も効果的な態様は、連続的な経口投与を必要とするであろう。投与を最大にする最も身近な実際的な方法は、飲料水においてＡＺＴを摂取することである。感染したマウスにおける脾腫の阻害によって測定されるように（図１５）、１日１回の胃管栄養による養生法でのバチル−Ｐ−ＡＺＴの経口投与は、匹敵する投薬量においてフリーのＡＺＴを実質的に連続的に投与するのと同様に効果的であることが示された。

　インビトロにおける研究では、１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ＡＺＴは、ＨＩＶに感染したＨＴ４−６Ｃ細胞において、０．４〜１．１μＭの範囲のＩＣ５０を有した。ｓｎ−３異性体およびラセミ化合物の抗ＨＩＶ活性は同じであった。

　脂質誘導体の治療用途。

　ヒトを含む哺乳動物に対する１−Ｏ−アルキルグリセロールホスフェートプロドラッグの投薬量は、治療される症状の範囲および重度、ならびに投与される化合物の活性に応じて変えることができる。脂質プロドラッグの投薬量は、特定の場合において適切な投与量を選択するに際し患者の体重、一般的な健康状態、代謝、年齢および薬剤への応答に影響を与える他の要因に注目しなければならないことを念頭において、有効薬剤の推薦される投与量を参考にして決定される。ほとんどの商業的に入手可能な治療薬の投薬量レベル、ならびに臨床研究が行なわれている多くの薬剤の投薬量レベルは、よく確立されている。たとえば、５−アミノ−４−イミダゾールカルボキサミドリボヌクレオシド（ＡＩＣＡ−リボシド）の投薬量は、０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１５〜２００ｍｇ／ｋｇ／日であることが報告されている。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−Ｐ−ＡＺＴの投薬量は、たとえば、約１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ／日とすることができる。

　経口摂取のための製剤は、粉末化された有効成分の錠剤、カプセル剤、丸剤、アンプル剤の形態とすることができ、また油性もしくは水溶性の懸濁物または溶液とすることができる。錠剤または他の液体でない経口組成物は、使用する薬剤を口に合うかまたは心地よいものとするため、製薬組成物を製造するための当該技術において知られている許容される補助剤、賦形剤、希釈剤、香料または香味料を含んでもよい。したがって、製剤は、ラクトースまたは炭酸カルシウムのような希釈剤、ゼラチンまたは澱粉のような結合剤、甘味剤、香味剤、着色剤または防腐剤からなる群から選択される１つまたはそれ以上の薬剤を、口に合う調製物を提供するため含有することができる。さらに、そのような経口調合剤は、腸内における分解および吸収をさらに遅らせるため公知の技術によりコーティングしてもよい。

　水溶性の懸濁物は、メチルセルロースなどの分散剤、およびレシチンまたは長鎖脂肪アルコールなどの薬理学的に許容される補助剤と混合して有効成分を含んでもよい。水溶性の懸濁物はまた、工業規格に従って、防腐剤、着色剤、香味剤および甘味剤を含んでもよい。

　調合剤は、さらにアルコルビン酸またはトコフェロールなどの抗酸化剤、およびヒドロキシ安息香酸エステルなどの防腐剤を含んでもよい。

　本発明は、次の例を用いることによって詳細に説明されるが、記載される化学反応は、本発明の脂質プロドラッグの調製に対して一般的な適用という観点から開示されるものである。時には、反応は、本発明の開示される範囲内に含まれる化合物のそれぞれに対して記載されるように適用されないかもしれない。このようなことが起こり得る化合物は、当業者により容易に気がつくであろう。そのようなすべての場合において、それぞれの反応は、当業者において知られる通常の変更、たとえば妨害基の適切な保護、代わりの通常の試薬に変更すること、または反応条件の決まった変更により、うまく行なうことができる。代替的にここに開示される反応または他の通常の方法は、本発明の対応する化合物の調製に適用できるであろう。すべての予備的な方法において、すべての出発物質は知られており、また公知の出発物質から容易に調製することができる。すべての温度は、補正していない摂氏温度として示され、また特に示されない限り、すべての部および百分率は重量によるものである。

　（例１）
　結合プロセスに用いられる脂質成分の調製。

　１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸の合成（１
）
　１−オクタデシル−２−ベンジルグリセロール（バッケム社、バーゼル、スイス；Ｂａｃｈｅｍ，Ｉｎｃ．，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、以下ＯＢＧと記す、の激しく攪拌させている溶液に、ピリジン、トリエチルアミン、およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合物を加えた。温度を−５℃〜５℃に保ちながら純粋なオキシ塩化リン、ＰＯＣｌ３　を滴下した。反応混合物は、９０分間、４℃の温度下で攪拌した。沈澱したトリエチルアミン塩酸塩をろ過し、残留物を少なくとも２回トルエンで処理し（２×１０ｍｌ）、そして、その溶媒を、減圧下で除去した。生じた油は、メタノール性水酸化アンモニウムを注意深く加えることにより、アンモニウム塩に変換した。収率は５５％であり、目的化合物は、白色から淡黄色にかけての固体であった。

　Ｎ−トリフェニルメチルエタノールアミン（２）。

　エタノールアミン、トリフェニルメチルクロリド、およびピリジンの混合物を１５時間還流した。冷却された反応物にゆっくりと水を加え、ろ過によって沈澱を集めた。粗生成物は、エタノールと水の１：１混合物から再結晶した。

　Ｎ−トリフェニルメチル−Ｏ−（１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホリル）−エタノールアミン。

　化合物１，２，およびトリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリドの混合物を、ピリジン中で２５℃の温度下で、２４時間攪拌した。所望の化合物を反応混合物から抽出し、かつ、当業者にはよく知られている方法で、トリフェニルメチル基を除去した。

　（例２）
　１−Ｏ−アルキルグリセロールのリン酸化された薬剤誘導体とのカップリング。

　Ｉ．バチル−Ｐ−アシクロビル（Ｂａｔｙｌ−Ｐ−ＡＣＶ）の合成
　Ｉａ　ＡＣＶモノホスフェートおよびバチルアルコールからの合成
　アシクロビル（ａｃｙｃｌｏｖｉｒ）は、オキシ塩化リン、ＰＯＣｌ_３の付加によってリン酸化した。０℃で１〜２時間放置した後、アシクロビルを、ホスホリルジクロリドとして、エーテルを用いて抽出した。その二塩化物の水溶液に、ｐＨを約９〜１０にするため、２Ｎ　ＮａＯＨ溶液を加え、その化合物を二ナトリウム塩の形に変化させた。ダウエックス　　５０（Ｄｏｗｅｘ５０）を用いてのクロマトグラフィーによって、その二ナトリウム塩をアシクロビルモノホスフェートに変換した。アシクロビールモノホスフェートの、トリブチルアミン塩またはトリオクチルアミン塩のようなその塩のピリジン溶液を、バチルアルコールで、またそれに続いてトリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＩＰＳ）で、４５℃の温度下で、２８時間処理した。暗い色をした溶液を、水、その後トルエンで処理し、かつ、その処理した溶液を、減圧下で濃縮した。粗生成物は、イオン交換クロマトグラフィーによって精製し、その後、シリカカラムクロマトグラフィーによって、所望の化合物である、白い、クロロホルムに可溶の粉末を、純度＞９５％、収率５０％で得た。

　ＩＩ．Ｂａｔｙｌ−ｐ−ａｒａ−Ｃの合成。

　ＩＩａ：　ａｒａ−Ｃモノホスフェートおよびバチルアルコールからの調製
　シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ）−５’−モノホスフェート（シグマ、セント・ルイス、ミズーリー州（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ））、バチルアルコール、およびトリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＩＰＳ）のピリジン溶液を、４５℃の温度下で、２５時間攪拌しておいた。反応混合物に水、その後、トルエ
ンを加え、かつ、減圧下で溶媒を除去した。粗生成物をシリカゲルを固定相としたクロマトグラフィーにかけ、所望の化合物を得た。

　ＩＩｂ：　１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−グリセロール（ＯＢＧ）からの調製
　別の方法として、例１（そこではＯＢＧはａｒａ−Ｃ−モノホスフェートとカップリングを行なうために利用されることができる）における化合物１の調製において記述されたように、ｂａｔｙｌ−Ｐ−ａｒａ−Ｃは、ＯＢＧを出発物質として調製することができる。

　ＩＩｃ：　１−Ｏ−ステアロイルグリセロールからの調製
　ａｒａ−Ｃ−モノホスフェート、１−Ｏ−ステアロイルグリセロール、およびトリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＩＰＳ）のピリジン溶液を、４５℃の温度下で、２５時間にわたって攪拌した。水、その後にトルエンを反応混合物に加え、そして、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をシリカクロマトグラフィーによって精製し、所望の純度の、所望の化合物を得た。

　（例３）
　フリーなカルボキシル基を有する薬剤のモノグリセリドホスホリルエタノールアミンのアミノ基とのカップリング　セファゾリンのバチル誘導体の調製。

　１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（１ｍｍｏｌ）、およびセファゾリン（１．２ｍｍｏｌ、３［［（５−メチル−１．３．４−チアジアゾール−２−イル）−チオ］−８−オキソ−７［［（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）アセチル］アミノ］５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］オクト−２−エン−２−カルボン酸）をピリジンに溶解し、続いて、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（３ｍｍｏｌ、ＤＣＣ）を溶解した。反応混合物を、１０℃で２４時間攪拌した。冷却した水を加えることにより、反応を停止させ、そして、溶媒を蒸発させ、生成物を分取薄層クロマトグラフィーによって精製した。

　上記の方法を用いて、以下の化合物を同様に１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−ホスホエタノールアミンと結合させた。
３ａ：　セフタジジム｛１−［［７−［［（２−アミノ−４−チアゾリル）［１−カルボキシ−１−メチルエチオキシ）イミノ］アセチル］アミノ］−２−カルボキシ−８−オキソ−５−チア−１−アザビシクロ［４．２．０］］オクト−２−エン−３−イル］メチル］ピリジニウムヒドロキシド｝，
３ｂ：　セフチアキソン｛７−［［２−アミノ−４−チアゾリル）（メトキシイミノ）アセチル］アミノ］８−オキソ−３−［［１，２，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−５，６−ジオキソ−１，２，４−トリアジン−３−イ
ル）チオ］メチル］−５−チア−１−アザビジクロ［４．２．０］オクト−２−エン−２−カルボン酸｝；および
３ｃ：　ピペラシリン｛［［［［（４−エチル−２，３−ジオキソ−１−ピペラジニル）カルボニル］アミノ］フェニルアセチル］アミノ］−３，３−ジメチル−７−オキソ−４−チア−１−アザビジクロ［３．２．０］ヘプタン−２−カルボン酸｝。

　（例４）
　フリーなアミノ基を含有する薬剤とモノグリセリドホスフェートとの脂肪鎖リンカーを介するカップリング。

　セファゾリンの１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロホスフェート誘導体の調製
４ａ：　ヒドロキシカルボン酸リンカー
　ヒドロキシ酪酸のナトリウム塩（０．５ｍｏｌ，アルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ））をメタノールに溶解させ、酸をそのメチルエステルに変化させるために乾燥ＨＣｌを通した。
メタノールを蒸発させ、乾燥メチルエステル結合化合物を、カップリング試薬としてＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を用いて、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸とカップリングさせた。生成物に対し、０．５Ｎメタノール性水酸化ナトリウムを用いて、塩基触媒によるメタノリシスを行ない、フリーな酸誘導体を、たとえばセフタジジムのメチルエステルまたは、上記のようなスルフメタジンのようなフリーなアミノ基を含有するさまざまな薬剤とカップリングさせた。保護基であるエステル基は、塩基で処理することにより薬剤より除去した。
４ｂ：　ジヒドロキシリンカー
　別の実施例において、リンカーのカルボン酸基は、フリーな酸の部分を有するフリーな薬剤と結合させるために、（１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸とカップリングさせた後）アルコール基へと還元した。

　（例５）
　１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホリル　Ａｒａ−Ｃ（３）および１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホリル　Ａｒａ−Ｃ（４）。

　（Ｂａｔｙｌ−Ｐ−Ａｒａ−Ｃ）
５ａ：　１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸（１）およびａｒａ−Ｃのピリジン溶液を、４０℃の温度下で、２４時間、ＴＩＰＳを用いて処理した。反応を水の添加により停止させ、減圧下で溶媒を除去した。粗生成物をクロマトグラフィーで精製することにより、（３）を得た。そして、一般的な方法を用いた化合物３の脱ベンジル化により、所望の化合物４を得た。
５ｂ：　化合物３および４の別の調製法には、溶媒としてピリジン、カップリング試薬としてＴＩＰＳを用いる、ＯＢＧとａｒａ−Ｃモノホスフェートのカップリングが含まれる。化合物３の精製および脱ベンジル化は、一般的な方法を用いてなされ、化合物４が得られた。
５ｃ：　２’−アラ−フルオロ−２−クロロデオキシアデノシン
５ｄ：　５−フルオロウリジン
５ｅ：　６−メルカプトプリンリボシド
５ｆ：　３’−チア−ジデオキシシチジン
５ｇ：　３’−チア−５−フルオロ−ジデオキシシチジン。

　（例６）
　バチル−Ｐ−５−アミノ−４−イミダゾール　カルボキシイミド　リボヌクレオシド（Ｂａｔｙｌ−Ｐ−ＡＩＣＡ　Ｒｉｂｏｓｉｄｅ）。

　ＴＩＰＳを含有する、１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸（１）およびＡＩＣＡリボシドのピリジン溶液を、４０℃の温度下で２４時間反応させた。水を加えて反応を停止させ、かつ、減圧下で溶媒を蒸発させた。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し、かつ、一般的な方法を用いて脱ベンジル化し、ｂａｔｙｌ−Ｐ−ＡＩＣＡ−ｒｉｂｏｓｉｄｅを得た。

　他の方法として、ＴＩＰＳが共存するバチルアルコールおよびＡＩＣＡ−リボシドモノホスフェートのピリジン溶液を、５０℃の温度下で２５時間にわたって攪拌した。その反応によっても、前記のとおり、ｂａｔｙｌ−Ｐ−ＡＩＣＡ　ｒｉｂｏｓｉｄｅが得られた。

　（例７）
　１−Ｏ−オクタデシル−グリセロ−ｒａｃ−３−ホスホ−５’−（３’−デオキシ，３’−アジド）チミジンの合成。

　乾燥させた１−Ｏ−オクタデシル−ｒａｃ−３−グリセロール（バチルアルコール，２５０ｍｇ）、３’−アジド−３’−デオキシチミジン一リン酸ナトリウム塩（０．７２５ｇｍ）、および、２，４，６，−トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＰＳ，１．２１９ｇｍ）を、乾燥ピリジン中で混合し、かつ、窒素雰囲気下で一晩攪拌した。クロロホルム（５０ｍｌ）を加え、かつ、反応混合物を、冷０．２ＮＨＣｌおよび０．２Ｎ重炭酸ナトリウムで２度洗浄した。有機相は、ロータリーエバポレータを用いて真空中で除去し、かつ、生成物は、−２０℃で、クロロホルム／アセトン（１２：８　体積比）から結晶化した。

　化合物の最終的な精製は、クロロホルム／メタノール／濃アンモニア／水（７０／３０／１／１　体積比）を展開溶媒とし、シリカゲルＧの５００ミクロンの層を用いた分取薄層クロマトグラフィーによって行なった。

　（例８）
　バチル−ホスホノホルメートの合成。

　０．９グラムのラセミ体のバチルアルコール（１−Ｏ−オクタデシル−２，３−グリセロール，シグマケミカル，セントルイス，ミズーリー州（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、２．６グラムのトリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＰＳ，アルドリッチ，ミルウォーキー，ウィスコンシン州（Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ））および０．１６グラムのホスホノホルメート、酸型、を１５ｍｌの乾燥ピリジン中、室温、窒素雰囲気下において反応させた。反応は、半時間おきに、薄層クロマトグラフィーによって追跡し、約２４時間で完了したと判断した。１０ｍｌのクロロホルム／メタノール／水（１／２／０．８　体積比）を加えることにより、反応を停止させた。さらに、２ｍｌのクロロホルムおよび２ｍｌの水を加えることにより、有機相（下相）を分離した。有機相を真空中で蒸発させ除去し、かつ、生成物は白い粉末として得られた。粗生成物を少量のクロロホルム／メタノール（１／１　体積比）に溶解し、０．５ｍｍのクロロホルム／メタノール／濃アンモニア／水（７０／３０／１／１）の層を用いた分取薄層クロマトグラフィーにかけた。２つの、ホスホノホルメート（ＰＦＡ）を含有したスポットが見え、そこを切取り、かつ、クロロホルム／メタノール／水で抽出した。その２つの化合物は、それぞれ、ｂａｔｙｌ−ＰＦＡトップおよびボトムと呼ばれる。

　（例９）
　１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロホスファチジン酸のペプチド内のアミノ基とのカップリング。

　上記例１で調製された１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸を、クロロホルム：メタノール（２：１（ｖ／ｖ）；２００ｍｌ）および冷１ＮＨＣｌ（５０ｍｌ）によって分画した。水層は、クロロホルム：メタノール（２：１（ｖ／ｖ）；１００ｍｌ）によって再抽出した。合わせた有機相は、蒸発させ、かつ真空下でＰ_２Ｏ_５によって乾燥させた。

　生成したフリーのホスファチジン酸を、ＤＭＦ（２ｍｌ）およびピリジン（２ｍｌ）の混合物に溶解させ、かつ、その溶液に、フリーのアミノ基を有する適当なペプチド（１ｍ
ｍｏｌ）を、さらに、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ；アルドリッチ　ケミカル，ミルウォーキー　ウィスコンシン州，（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ．Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ　ＷＩ，ＭＷ（分子量）：２０６，６２０ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物は、室温で２４時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、かつ、クロロホルム中のメタノールの０から５０％の直線勾配を利用したシリカゲルカラム（２．５×５０ｃｍ）を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物を精製した。ＴＬＣおよびＨＰＬＣによって、所望の生成物が含有されているとされたフラクションを集め、溶媒を蒸発させた。必要な場合、生成物は、分取ＨＰＬＣまたは結晶化によって、さらに精製した。その化合物の脱ベンジル化により、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホルアミデートを得た。

　（例１０）
　コハク酸を結合基として用いた１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−３−ホスホエタノールアミンの治療ペプチドのアミノ基とのカップリング。

　１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−３−ホスファチジン酸およびエタノールアミンをピリジン中でＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドを用いて処理し、かつ、その混合物を、室温で２４時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、かつ、生成物は、クロマトグラフィーによって精製した。所望の化合物を含有するフラクションを溜めておき、溶媒を蒸発させた。次に、１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−３−ホスホエタノールアミンを無水コハク酸で処理し、１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−３−ホスホエタノールアミンのヘミスクシネートを得た。そのヘミスクシネートのフリーのカルボキル基を、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤［Ｄ−Ｐｈｅ］−［Ｄ−α−ナフチルアラニン］−ピペコリン酸−［α−ＯＨ−Ｌｅｕ］−Ｖａｌアミド（ＶＳＴ　７１４０）、またはＶＳＴ　７１９４もしくはレニン阻害剤、エナルキレン（ｅｎａｌｋｉｒｅｎ　（Ａ６４６６２））のようなペプチドのＮ−末端アミノ基と結合させた。

　ＤＰＰＥ−コハク酸の調製
　脂質のリンカー物質である１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｏ−（Ｎ−スクシニル）−エタノールアミン（ＤＰＰＥ−Ｓｕｃ）を、１当量の１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ；アバンティ・ポーラー・リピッズ，バーミングハム，アラバマ州（Ａｖａｎｔｉ　Ｐｏｌａａｒ　Ｌｉｐｉｄｓ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａｂａｍａ））および１当量のトリエチルアミンを３当量の無水コハク酸（シグマケミカル，セントルイス，ミズーリー州（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）とともにクロロホルム中で反応させることによって調製した。反応物は、室温で乾燥窒素雰囲気下、１６時間攪拌した。反応が完了した時点で、生成物質は、１００％のクロロホルムからクロロホルム中１５％メタノールへの溶媒の勾配を利用したシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。

　脂質−ペプチド誘導体
　ＶＳＴ−７１７２と命名された脂質誘導ポリペプチドＨＩＶプロテアーゼ阻害剤を、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の１当量のＤＰＰＥ−Ｓｕｃと、ジクロロメタン中のＮ末端にフリーのアミノ基を含む１当量のＶＳＴ−７１４０ペプチドおよび３当量のＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）とを反応させることによって調製した。反応物は、室温で乾燥した条件下、２４時間攪拌し、その後、生成物をクロロホルム中のメタノールを増加させる溶媒の勾配を利用したシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。

　ｉＢＯＣ−［Ｌ−Ｐｈｅ］−［Ｏ−β−Ｎａｌ］−［α−ＯＨ−Ｌｅｕ］−Ｖａｌ−Ｃ
ＯＯＨ（ＶＳＴ７１９４）からＣ−末端で誘導されたＨＩＶプロテアーゼ阻害剤ＶＳＴ−７１９６を、ＤＭＦ中の１当量のＤＰＰＥおよび７１９４ペプチドとそれぞれ２当量のＤＣＣおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールとを反応させることにより調製した。反応物は、乾燥条件下、室温で１６時間攪拌し、そして、目標とする化合物を、１０００μｍの２０×２０ｃｍのシリカゲルＧＦプレート（Ａｎａｌｔｅｃｈ　Ｉｎｃ．（Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ））において、８５：１０：５のクロロホルム：メタノール：酢酸を溶媒系に用いた分取薄層クロマトグラフィーによって精製した。

　精製した脂質誘導体は、その後、ＨＰＬＣ、アミノ酸分析、高速原子衝突質量分析法および、ガスクロマトグラフィーの脂肪酸示性分析によって同定した。

　（例１１）
　１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−ホスファチジン酸とペプチドの水酸基とのカップリング。

　上記のように調製された１−Ｏ−アルキル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸（１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍｌ）およびピリジン（２ｍｌ）中に溶解させ、その溶液に、フリーの水酸基（１ｍｍｏｌ）を有する適当なペプチド、その後ＤＣＣ（６２０ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を加えた。反応が行なわれ、その後、生成物は、例１に記載したように単離した。

　ホスファチジン酸のペプチドのヒドロキシル基との縮合も、カップリング試薬としてＤＣＣの代わりに、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＰＳ−Ｃｌ；アルドリッチ・ケミカル社、ミルウォーキー、ウィスコンシン州（Ａｌｄｒｉｃｈ
　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ）；ＭＷ（分子量）：３０２．８６；７５８ｍｇ，２．５ｍｍｏｌ）を用いて都合よく行なった。脱ベンジル化は、例９のように行なった。

　（例１２）
　フリーのカルボキシル基を含むペプチドとモノアルキルホスホリルエタノールアミンのアミノ基とのカップリング。

　適当なペプチド（１ｍｍｏｌ）および１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（１ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍｌ）中に溶解させ、さらに、ＤＣＣ（３ｍｍｏｌ）、続いて１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ；アルドリッチ・ケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ．，ＨＯＢｔ，ＭＷ（分子量）：１５３；４５０ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物は、室温で２４時間攪拌し、生成物は、例１に記載したように、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、続いて例１のように脱ベンジル化を行なった。

　（例１３）
　タキソール側鎖の脂質誘導体の合成。

　β−（ベンゾイルアミノ）−α−（（１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸エステル（１）の合成。

　ジエチルエーテル、テトラヒドロフランのようなエーテル性溶媒、または、ジクロロメタンあるいはクロロホルムのようなハロゲン化溶媒中の、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロホスファチジン酸（０．５ｍｏｌ，ゲンザイム（Ｇｅｎｚｙｍｅ））のような１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロリン酸およびβ−（ベンゾイルアミノ）−α−ヒドロ
キシベンゼンプロパン酸エステルの溶液に、ＤＣＣをそのままあるいは溶液として加え、そして４℃の温度下で、２−２５時間攪拌した。反応混合物に、水を加え、そして、減圧下で溶媒を除去した。粗生成物をシリカゲルでのクロマトグラフィーによって処理することにより、所望の化合物を得た。

　β−（ベンゾイルアミノ）−α−（（１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸エステル（２）の合成。

　１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸（０．１ｍｏｌ）、およびβ−（ベンゾイルアミノ）−α−ヒドロキシベンゼンプロパン酸エステルのピリジンまたはクロロホルム溶液を、ＤＣＣ（０．４ｍｏｌ）存在下で４℃の温度下にて６時間攪拌した。反応混合物に水を加え、内容物をクロロホルムで抽出した。溶媒を、減圧下で除去し、そして、粗生成物をクロマトグラフィーによって精製することにより、ベンゼンプロパン酸エステルを得た。

　（例１４）
　β−アミノ置換タキソール側鎖の合成。

　β−アミノ−α−（１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸エステルの合成
　１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸（０．１ｍｏｌ）およびβ−アミノ−α−ヒドロキシ−ベンゼンプロパン酸エステル（０．１ｍｏｌ）のクロロホルムまたはピリジン溶液にＤＣＣ（０．４ｍｏｌ）を加え、そして、４℃の温度下で５時間攪拌させた。反応混合物に水を加え、内容物をクロロホルムまたは他のハロゲン化溶媒を用いて抽出した。溶媒は、減圧下で除去され、そして、粗生成物をクロマトグラフィーにより精製することにより、バチルベンジルホスファチジン酸の置換エタノールアミンを得た。

　（例１５）
　脂質誘導タキソール側鎖のプロパン酸エステルの加水分解。

　β−（ベンゾイルアミノ）−α−（（１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸（３）の合成
　化合物（１）からのプロパン酸エステル（０．１ｍｏｌ）を、メタノール中ナトリウムメトキシドを用い、または、メタノール中炭酸ナトリウムを用い、５℃の温度下で、４時間にわたって加水分解することにより所望の化合物が得られ、それは、バッカチンＩＩＩまたは、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩとすぐにでもカップリングできるものである。

　β−（ベンゾイルアミノ）−α−（１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸の合成。

　２（０．１ｍｏｌ）のメタノール溶液にナトリウムメトキシドのメタノール溶液を加え、その混合溶液を、５℃の温度下で４時間にわたって攪拌した。反応混合物を中和し、そして、その結果として生じた溶液を減圧下で濃縮することにより、粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィーによる精製により、バッカチンＩＩＩまたは、１０−デアセチルバッカチンとカップリングさせるのに適当な、所望の化合物を得た。

　（例１６）
　タキソール側鎖の脂質誘導体とバッカチンとのカップリング。

　Ａ．ホスホエタノールアミン側鎖の脂質誘導体の１０−デアセチルバッカチンＩＩＩとのカップリング
　β−（ベンゾイルアミノ）−α−（１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸（例１５）（０．１ｍｏｌ）および１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ（０．１ｍｏｌ）のクロロホルム溶液にＤＣＣ（０．４ｍｏｌ）を加え、２５℃の温度下で、７時間にわたって攪拌した。反応混合液に水を加え、そして、内容物をクロロホルムを用いて抽出した。有機層を分離し、水相をクロロホルムを用いて抽出した。合わせた有機層を、減圧下で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィーによって精製することにより、タキソールの１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン誘導体を得た。

　Ｂ．バチルベンジルホスホエタノールアミン側鎖の１０−デアセチルバッカチンＩＩＩとのカップリング。

　β−（ベンゾイルアミノ）−α−（１−Ｏ−オクタデシル−２−ベンジル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ）−ベンゼンプロパン酸（０．１ｍｏｌ）、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ（０．１ｍｏｌ）のクロロホルム溶液に、ＤＣＣ（０．４ｍｏｌ）を加え、室温で１０時間にわたって攪拌した。反応混合物に水を加え、そして、内容物をクロロホルムを用いて抽出した。そして、有機層を分離し、水相をクロロホルムを用いて抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィーによって精製することにより、タキソールのバチルベンジルホスホエタノールアミン誘導体を得た。

　前述の合成において、プロトン核磁気共鳴スペクトル（ｐｒｏｔｏｎ　ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ）がゼネラルエレクトリックＱＥ−３００スペクトロメータ（Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｅｌｅｃｔｒｉｃ　ＱＥ−３００　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ）で、内部標準物質としてテトラメチルシランを用いて得られた（記号（ｋｅｙ）：ｓ＝一重項（ｓｉｎｇｌｅｔ），ｄ＝二重項（ｄｏｕｂｌｅｔ），ｔ＝三重項（ｔｒｉｐｌｅｔ），ｑ＝四重項（ｑｕａｒｔｅｔ），ｄｄ＝二重項の二重項（ｄｏｕｂｌｅｔ　ｏｆ　ｄｏｕｂｌｅｔｓ），ｂ＝ブロードのピーク（ｂｒｏａｄ））。ＵＶスペクトルは、分光高度計Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＵＶ−１６０を用いて記録した。高速原子衝突質量分析法によるスペクトルは、ミネソタ大学のマス・スペクトロメトリ・サービス・ラボラトリ（Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　Ｓｅｒｖｉｃｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ）で測定した。元素分析は、テネシー州のノクスビレのガルブレイス研究所（Ｇａｌｂｒａｉｔｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，Ｔｎ）、および、ニューヨークのシュワルツコフ微量分析研究所（Ｓｃｈｗａｒｚｋｏｐｆ　Ｍｉｃｒｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎ．Ｙ．）で測定した。融点は、フィッシャー−ジョーンズ融解装置（Ｆｉｓｈｅｒ−Ｊｏｈｎｓ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ａｐｐａｒａｔｕｓ）を用いて得た。カラムクロマトグラフィーは、メルクシリカゲル６０（７０−２３０メッシュ）（Ｍｅｒｃｋ　ｓｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　６０　（７０−２３０ｍｅｓｈ））を用いて行なった。Ｒｆ値は、メルク社（Ｍｅｒｃｋ）のＨＰＴＬＣ、キーゼルゲル６０をプレコートしたプレート（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６０　ｐｒｅ−ｃｏａｔｅｄ
　ｐｌａｔｅｓ）の１０×１０ｃｍの大きさのものを用いて得た。

　無水ピリジン、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリド（ＴＰＳ）、および３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）は、ウィスコンシン州ミルウォーキーのアルドリッチ・ケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，　ＷＩ）より購入した。ジミリストイルホスファチジン酸、二ナトリウム塩はアバンティ（Ａｖａｎｔｉ）より購入し、バチルアルコールは、ミズーリー州セントルイスのシグマケミカル（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉ
ｓｓｏｕｒｉ）より入手し、そして、１−Ｏ−オクタデシル，２−ベンジルグリセロールは、ペンシルバニア州フィラデルフィアのバッケムバイオサイエンス社（Ｂａｃｈｅｍ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ｉｎｃ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）より入手した。

　（例１７）
　１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ＡＺＴ−３　Ｈの経口投与（Ｏｒａｌ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）。

　８μｍｏｌの１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ＡＺＴ−^３Ｈ（ｓｐｅｃ．ａｃｔ．５８９０　ＤＰＭ／ｎｍｏｌｅ）および９６．７μｍｏｌの卵ホスファチジルコリン（ＰＣ）を２５０ｍＭの酢酸緩衝溶液（ｐＨ５．５）１．０ｍ１中に懸濁させた。試料を５５℃で１時間音波処理した。薬剤の濃度は、最終の音波処理物（ｆｉｎａｌ　ｓｏｎｉｃａｔｅ）をカウントすることにより決定した。１０ｍｇ　ＡＺＴ／ｋｇ体重に対する０．１ｍｌシーベルト（線量当量：ｄｏｓｅｓ　ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）が、給餌チューブ（ｆｅｅｄｉｎｇ　ｔｕｂｅ）を用いてマウスに経口的に与えられた。

　指示された時間の後、マウスを検体とし、血液および組織を集めた。２匹のマウスから、眼窩の血液を用いて血漿を集め、かつ、３匹目のマウスを血液と器官のために検体とした。血漿は、以下のように処理した。組織を除去し、生理食塩水溶液中ですすぎ、水分を吸い取らせて乾燥させ、かつ、さらに先の処理のためにシンチレーションバイアル（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ　ｖｉａｌｓ）中に置いた。肝臓試料に対しては、ポリトロン（Ｐｏｌｙｔｒｏｎ）を用いてのホモジナイゼーションの前に、蒸留水を３ｍｌ加えた。０．５ｍｌを可溶化および計数（ｃｏｕｎｔｉｎｇ）のためにとり出した。他のすべての試料に蒸留水を０．５ｍｌ与えた。３ｍｌのＴＳ−２組織可溶化剤（ＲＰＩインターナショナル（ＲＰＩ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ））を、すべての試料に加え、５０℃で４８時間保温した。１２０μｌの酢酸を用いて、溶液を中和し、１７．５ｍｌのリキフロール（Ｌｉｑｕｉｆｌｏｒ　登録商標）カウンティングカクテル（ｃｏｕｎｔｉｎｇ　ｃｏｃｋｔａｉｌ）（エヌ・イー・エヌ／デュポン（ＮＥＮ／Ｄｕｐｏｎｔ））を加え、計数を行なった。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−Ｐ−ＡＺＴおよび代謝産物の組織含有量は、比活性に基づいて決定した。結果は、組織のｇｍまたは血漿のｍｌ当たりのＡＺＴのｎｍｏｌで表わした。測定された時間にわたる薬剤保持は、各組織について、曲線より下の領域（ＡＵＣ：ａｒｅａ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｕｒｖｅ）を積分することにより決定した。結果は、後述または図１〜１４にグラフで示す。

　ａ．血漿レベル
　血漿の試料は、フォルチ，Ｊ．（Ｆｏｌｃｈ，Ｊ．）らの方法
（ＪＢＣ，１９５７年）により抽出し、シリカの薄層において脂質のクロマトグラフィーを行ない、ラジオスキャナを用いてスキャンした。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−Ｐ−ＡＺＴ−^３Ｈおよび^３Ｈ−ＡＺＴ参照標準のスポットを同定し、かつ、放射能を測定した。経口投与した１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−Ｐ−ＡＺＴ−^３Ｈの初期の血漿レベルは、図１および表１のように、１時間で７ｎｍｏｌ／ｍｌであった。２４時間、血漿レベル＞１ｎｍｏｌ／ｍｌが観測され、かつ、１２時間と２４時間の間では、最終レベルの３．０ｎｍｏｌ／ｍｌ（３μＭ）に向けて、わずかな上昇が見られた。ラーダー（Ｌａｒｄｅｒ）らのサイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）第２４３巻、第１７３１〜３４頁（１９８９年）の方法により測定されるように、ＬＡＶに感染したＨＴ４−６Ｃの細胞において、１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−Ｐ−ＡＺＴのＩＣ５０は０．４から１．１μＭの範囲であった。

　薬剤の有効性も、測定期間中に積分された投薬量（曲線より下の領域、すなわちＡＵＣ
）を計算することにより決定した。ＡＵＣを決定し、フリーなＡＺＴのそれと比較した。１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−Ｐ−ＡＺＴ／ＡＺＴのＡＵＣの比は１．３８であり、優れたリポヌクレオチドの消化管の吸収を示している。

　ｂ．胃、十二指腸、および空腸
　胃におけるバチル−Ｐ−ＡＺＴ（ｂＰＡＺＴ）のレベルは、６時間で７５ｎｍｏｌ／ｍｌのピークに達し、２４時間では２６ｎｍｏｌ／ｇｍまで減少した（図２）。十二指腸における薬剤レベルも、６時間で２８ｎｍｏｌ／ｇｍのピークに達し、その後変化した（図３）。空腸におけるｂＰＡＺＴレベルは、１時間で最も高く、５ｎｍｏｌ／ｇｍまで減少し、その後徐々に増加し、２４時間で１２ｎｍｏｌまで増加した（図４）。

　ｃ．肝臓、脾臓およびリンパ節
　これらの組織において、ｂＰＡＺＴレベルは、１時間で５．５〜１０ｎｍｏｌ／ｇｍの範囲で最大になった。組織レベルは、その後徐々に減少し、２４時間では、２．５
（脾臓，図５）、および４．３ｎｍｏｌ／ｇｍ（肝臓，図６およびリンパ節，図７）となった。

　ｄ．腎臓、皮膚、骨格筋および心筋
　腎臓におけるｂＰＡＺＴレベル（図８）は、１時間で最大値（１５ｎｍｏｌ／ｇｍ）を取り、２４時間で３．６ｎｍｏｌ／ｇｍまで減少した（図９）。同様のｂＰＡＺＴプロファイルが、骨格筋（図１０）および心筋（図１１）においても見られた。

　ｅ．肺および副腎
　肺におけるｂＰＡＺＴレベルは、１および３時間で最高となり、図１２に示すように１．４ｎｍｏｌ／ｇｍであった。６から２４時間までは薬剤レベルは１．４から２．４ｎｍｏｌ／ｇｍまでの範囲であった。副腎のレベルは変化しやすいものであった（図１３）。

　ｆ．脳
　脳でのｐＰＡＺＴ−３　Ｈのレベルは、６時間で最大となり、図１４に示すように１．４ｎｍｏｌ／ｇｍであった。
６時間での血漿レベルは、３．１４ｎｍｏｌ／ｍｌであり、脳の血漿のバックグラウンドにおいて測定される物質とは考えられないぐらいであった。２４時間での脳のｂＰＡＺＴレベルは、１．１ｎｍｏｌ／ｇｍ（３．０ｎｍｏｌ／ｍｌ　血漿中）という意義深い値で持続した。

　ｇ．尿および糞
　６時間で、尿中ではｂＰＡＺＴ−３　Ｈの投与された用量の４０±１６％が回収され、そして糞中では、投与された用量の０．４１±０．１１％が回収された。

　結論：経口１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホＡＺＴ−^３Ｈ−１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホＡＺＴ（ｂＡＺＴ）の経口投与に従うＡＺＴの血漿および組織のレベルは、フリーのＡＺＴを用いた場合の上記のレベルよりもかなり高い。ｂＰＡＺＴを用いて１．５〜５ｎｍｏｌ／ｇｍという組織のレベルを、２４時間で検出した。これは、フリーのＡＺＴの腹腔内投与において得られる組織レベルに都合よく匹敵する。

　（例１８）
　単投与（Ｓｉｎｇｌｅ−Ｄｏｓｅ　）１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホＡＺＴ。

　ＡＺＴの連続的経口投与と比較した経口投与
　ラウシャー白血病ウイルスに感染したマウスの処置：
　メスＢＡＬＢ／Ｃマウスを、０日目に、ラウシャー白血病ウイルス複合体（ＲＬＶ）の１×１０４　プラーク形成ユニット（ＰＦＵ）だけ感染させた。対照動物には生理食塩水を注射した。

　２日目から、図１５に示すように感染したマウス群を、約１．０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙから１５．０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの投与量のＡＺＴを、２１日間、飲用水の中にＡＺＴを入れて与えるか、または１日に１回、ｂａｔｌｙ−ＰＡＺＴを用いて胃管栄養で与えることによって処置した。接種後２３日目で、いずれの処置のプロトコルにおいてもマウスを検体とし、動物の脾臓の重さを測定した。脾臓の重さの平均値は、ウイルス感染の相対レベルを示すが、２つのプロトコルにおけるそれぞれの投薬量レベルに対して、図１５の棒グラフで表されている。一回の経口投与により与えられた日々のｂａｔｙｌ−Ｐ−ＡＺＴの有効投薬量（ＥＤ５０）は、飲用水での経口投与より与えられたＡＺＴに匹敵した。

　経口的に生物学的利用能のない薬剤について経口経路を介してより効果的に薬剤を配達する同様な結果を得るため、例２−１１において、治療薬の他の１−Ｏ−アルキルグリセロールリン酸誘導体が代用され得ることが前述より明らかである。本発明は、発明の化合物におけるいかなる特定の薬剤または治療薬の使用にも限定されるものではなく、発明の有益な結果は、むしろ、それら薬剤または治療薬の１−Ｏ−アシル−、１−Ｏ−アルキル−、１−Ｓ−アシル−、または１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロリン酸プロドラッグの合成からもたらされることを強調すべきである。

　したがって、特定の薬剤または試薬が現在周知であるかどうか、または未来においてそうなるかどうかにかかわらず、ここで意図する脂質プロドラッグを形成する方法は、当業者に明らかなように、確立された化学技術に基づくものであり、かつ、それゆえに、これらの化合物は前述の開示により広い範囲で可能である。そして、本発明における合成法が、適当な構造を有する本質的にすべての薬剤からの化合物の合成に広く適用できること、および発明の実施において用いられる脂質プロドラッグの形を与えることによって改善される有効性は、再度強調されるべきである。

プラズマにおけるＡＺＴのレベルの比較を示すグラフである。 胃、十二指腸および空腸におけるＡＺＴのレベルを比較するグラフである。 胃、十二指腸および空腸におけるＡＺＴのレベルを比較するグラフである。 胃、十二指腸および空腸におけるＡＺＴのレベルを比較するグラフである。 肝臓、脾臓およびリンパ節におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 肝臓、脾臓およびリンパ節におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 肝臓、脾臓およびリンパ節におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 腎臓、皮膚、骨格および心筋の組織におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 腎臓、皮膚、骨格および心筋の組織におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 腎臓、皮膚、骨格および心筋の組織におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 腎臓、皮膚、骨格および心筋の組織におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 肺および副腎におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 肺および副腎におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 脳におけるＡＺＴの比較レベルを示すグラフである。 ラウシャー（Ｒａｕｓｃｈｅｒ）白血病ウイルスに感染したマウスにおいて毎日１回の経口投与の後の脾臓の重量に対するバチル−Ｐ−ＡＺＴの作用を示すグラフである。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗新生物（抗腫瘍）剤であるアクチノマイシンＤであり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗新生物（抗腫瘍）剤であるダウノマイシン（ｄａｕｎｏｍｙｃｉｎ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗新生物（抗腫瘍）剤であるエトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗新生物（抗腫瘍）剤であるタキソール（ｔａｘｏｌ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗新生物（抗腫瘍）剤であるシスプラチンであり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗感染剤であるカナマイシンＡであり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗感染剤であるネオマイシンＢあり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗感染剤であるアンホテリシンＢであり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な抗ウイルス剤であり、（ａ）５−Ｆ−３’−チア−２’，３’−ジデオキシシチジン、（ｂ）ホスカルネット（ｆｏｓｃａｒｎｅｔ）、（ｃ）ガンシクロビル（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な治療ペプチドであるデスモプレッシン（ｄｅｓｍｏｐｒｅｓｓｉｎ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な治療ペプチドであるゴセレリン（ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な治療ペプチドであるムラミルジペプチドおよび（ｄ）エナルキレン（ｅｎａｌｋｉｒｅｎ）であり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な他の治療用途を有する薬剤であるモルヒネであり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。 本発明の方法に従って利用可能な官能基に脂質成分を結合することにより経口的に生物利用可能なプロドラッグを調製することのできるいくつかのクラスの化学構造を示すものであって、典型的な他の治療用途を有する薬剤であるシクロスポリンであり、ここで、利用可能な基はボックスで囲まれており、点線のボックスは弱酸である。

Claims (12)

1. 　リン脂質化合物に共有結合されたタキソールまたは置換タキソールを含む、抗新生物プロドラッグ。
2. 　前記リン脂質化合物は、ホスファチジルグリセロール、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｏ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、１−Ｓ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸、および１−Ｓ−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジン酸からなる群より選択される、請求項１に記載のタキソールプロドラッグ。
3. 　前記置換タキソール化合物は、タキソール側鎖のβ−アミノ基に親油性の置換基を有するタキソール化合物からなる群より選択される、請求項１または２に記載のタキソールプロドラツグ。
4. 　前記親油性の置換基が、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸からなる群より選択される、請求項３に記載のタキソールプロドラッグ。
5. 　タキソール関連化合物のリン脂質誘導体であって、（ａ）次式のタキソール側鎮
   

   

   または
   

   

   を、次式のアリルアルコール基において共有結合するタキソール側鎖を備え、
   

   

   式中、Ｒ^１およびＲ^２は、同じであるか、もしくは異なり、かつ、直鎖または枝分かれ鎖の、飽和または不飽和の炭素原子数８−１８のアシル基もしくはアルキル基であり、または、Ｒ^２はベンジルもしくはＯＨであり、Ｒ^３は、タキソール、タキソテン（ｔａｘｏｔｅｎｅ）、バッカチンＩＩＩ、または１０−デアセチルバッカチンＩＩＩであり、Ｒ^４は、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸であり、かつ、ｎは０−１０である、タキソール関連化合物のリン脂質誘導体。
6. 　Ｒ^１が、エーテル結合したアルキル基であり、Ｒ^２はＯＨであり、かつ、Ｒ^４がベンゾイルである、請求項５に記載の化合物。
7. 　Ｒ^１が１−Ｏ−オクタデシルである、請求項５に記載の化合物。
8. 　リン脂質に結合され、かつ、以下の構造を有するタキソール側鎖。
   

   

   式中、Ｒ^１およびＲ^２は、同じであるかもしくは異なり、かつ、直鎖もしくは枝分かれ鎖の、飽和または不飽和の炭素原子数８−１８のアシル基もしくはアルキル基であり、または、Ｒ^２はベンジルまたはＨとすることができ、Ｒ^３は、任意の加水分解可能なエステル基、たとえば、メチル、エチル、またはピバロイルであり、Ｒ^４は、ベンゾイル、ピバロイル、アセテート、ペプチド、またはアミノ酸であり、かつ、ｎは０−１０である。
9. 　タキソールまたは置換タキソール化合物の脂質誘導体を合成する方法であって、（ａ）タキソール側鎖のプロパン酸基をエステル化によって保護し、リン脂質をタキソール側鎖のアミノアルコールまたはヒドロキシカルボン酸基にリン酸基を介して共有結合し、それにより前記側鎖の脂質誘導体を形成するステップと、（ｂ）前記プロパン酸基から保護基を除去するステップと、（ｃ）前記タキソール側鎖の前記脂質誘導体を、前記プロパン酸基を介して、バッカチンＩＩＩまたは１０−デアセチルバッカチンのアリルアルコール基
   に結合させるステップと、を含む、方法。
10. 　タキソールまたはタキソール関連化合物のリン脂質誘導体を合成する方法であって、（ａ）アシルまたはアルキル置換−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸およびβ−アミノ−α−ヒドロキシ−ベンゼンプロパン酸エステルを与えるステップと、（ｂ）前記ホスファチジン酸のリン酸基と前記ベンゼンプロパン酸エステルのα−ヒドロキシル基との間の共有結合を介して、前記グリセロ−３−リン酸と前記ベンゼンプロパン酸エステルとを結合させるステップと、（ｃ）加水分解により（ｂ）の脂質誘導体のベンゼンプロパン酸エステル基を脱エステル化するステップと、（ｄ）（ｃ）の脂質誘導体を、前記誘導体のプロパン酸基とタキソール環骨格の１３−ＯＨ基との縮合によって、タキソールの関連基に結合させるステップと、を含む、方法。
11. 　前記アシルまたはアルキル置換グリセロ−３−リン酸が、１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸である、請求項９または１０に記載の方法。
12. 　前記１−Ｏ−アルキル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸は１−Ｏ−オクタデシル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸である、請求項９または１０に記載の方法。

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