JP2003055245A - 皮膚化粧料および飲食品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 天然物の中から抗炎症作用、抗酸化作用また
は抗老化作用を有するものを見いだし、それを配合した
皮膚化粧料および飲食品を提供することを目的とする。 【解決手段】 Choerospondias属に属する植物からの抽
出物を皮膚化粧料および飲食品に配合する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は植物からの抽出物を
有効成分とする抗炎症剤、抗酸化剤および抗老化剤、並
びに植物からの抽出物を配合した皮膚化粧料および飲食
品に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】炎症性の疾患、例えば接触性皮膚炎（か
ぶれ）、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種
皮膚疾患等の原因や発症機構は多種多様であるが、その
原因としてヒアルロニダーゼ、サイクリックAMPホスホ
ジエステラーゼによる血小板凝集およびヒスタミン遊離
が知られている。

【０００３】血小板凝集は、アラキドン酸カスケードの
ホスホリパーゼA2の活性化を招き、それにより放出され
たロイコトリエンB4やプロスタグランジンE2等が炎症反
応を引き起こす。このため、血小板の凝集を阻害・抑制
する物質によりアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・
治療する試みがなされており、そのような血小板凝集阻
害物質として、アスピリン、チクロピジン、スルフィピ
ラゾン等が用いられてきた。しかしながら、これらの物
質はいずれも副作用があり、安全性の点で問題となって
いた。

【０００４】また、血小板の凝集は血小板中のサイクリ
ックAMPの濃度と関係があり、サイクリックAMPホスホジ
エステラーゼによってサイクリックAMPが分解されてサ
イクリックAMPの濃度が低下すると、血小板は凝集しや
すくなる。従って、サイクリックAMPホスホジエステラ
ーゼの作用を抑制してサイクリックAMP濃度の低下を防
止すれば、血小板凝集を防止できるものと考えられる。

【０００５】一方、近年、特に生体成分を酸化させる要
因として、活性酸素が注目されており、その生体への悪
影響が問題となっている。活性酸素は、生体細胞内のエ
ネルギー代謝過程で生じるものであり、スーパーオキサ
イド（即ち酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキ
シドアニオン（・O₂-）、過酸化水素（H₂O₂）、一重項
酸素（^１O₂）、ヒドロキシラジカル（・OH）等がある。
これら活性酸素は食細胞の殺菌機構にとって必須であり
ウイルスや癌細胞の除去に重要な働きを果たしている
が、活性酸素の過剰な生成は生体内の膜や組織を構成す
る生体内分子を攻撃し、各種疾患を誘発する。例えば、
活性酸素は、コラーゲン等の生体組織を分解、変性ある
いは架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える
過酸化脂質を生成したりすると考えられており、活性酸
素によって引き起こされるこれらの障害が、皮膚のしわ
形成や皮膚の弾力性低下等の老化の原因になるものと考
えられている。

【０００６】皮膚のしわ形成や皮膚の弾力性低下等の老
化の原因としては、活性酸素以外にも種々の原因が考え
られる。すなわち、皮膚の真皮・表皮は、表皮細胞、線
維芽細胞およびこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支
持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックス
によって構成されており、若い皮膚においてはこれらの
皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことにより水分保
持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張り
や艶があってみずみずしい状態に維持される。ところ
が、紫外線、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、あ
る種の外的因子の影響があったり加齢が進んだりする
と、細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチ
ンは分解・変質を引き起こし、またコラーゲンは産生量
が減少すると共に架橋による弾性低下を起こす。その結
果、皮膚は保湿機能や弾力性が低下し、角質は異常剥離
を始めるから、肌は張りや艶を失い、荒れ、シワ、くす
み等の老化症状を呈するようになる。

【０００７】また、加齢を伴う皮膚老化の一因は、女性
ホルモンの一種であるエストロゲンの分泌が減退するこ
とにある。すなわち、エストロゲンは成人女性の健康維
持に深く関わっていて、その分泌不足は種々の内科的疾
患を招く他、肌の過敏症、弾力性低下、潤いの減少等、
好ましくない肌の変化の原因となることが知られてい
る。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】炎症反応を阻害・抑制
し、炎症性疾患を予防・治療するには、その原因となる
ヒアルロニダーゼの活性化、サイクリックAMPホスホジ
エステラーゼによるサイクリックAMPの分解、ヒスタミ
ン遊離、活性酸素や生体内ラジカルの発生等を阻害・抑
制することが有用であると考えられる。

【０００９】また、活性酸素や生体内ラジカルの発生の
阻害・抑制により、過酸化脂質の生成の抑制等を通じて
皮膚のしわの形成や弾力性低下等の皮膚の老化を予防・
治療できるものと考えられる。

【００１０】さらに、コラーゲン産生の促進やコラゲナ
ーゼ、エラスターゼ活性の阻害を通じた細胞外マトリッ
クスのコントロールあるいは加齢によるエストロゲン分
泌減退を補うことにより、皮膚のしわの形成や弾力性低
下等の皮膚の老化を予防・治療できるものと考えられ
る。

【００１１】そこで、本発明は、第一に、天然物の中か
らヒアルロニダーゼ阻害作用、サイクリックAMPホスホ
ジエステラーゼ阻害作用またはヒスタミン遊離阻害作用
を有するものを見いだし、それを有効成分とした抗炎症
剤を提供することを目的とする。

【００１２】また、本発明は、第二に、天然物の中から
活性酸素消去作用またはラジカル消去作用を有するもの
を見いだし、それを有効成分とした抗酸化剤を提供する
ことを目的とする。

【００１３】さらに、本発明は、第三に、天然物の中か
らコラーゲン産生促進作用、エストロゲン様作用、コラ
ゲナーゼ阻害作用またはエラスターゼ阻害作用を有する
ものを見いだし、それを有効成分とした抗老化剤を提供
することを目的とする。

【００１４】さらに、本発明は、第四に、天然物の中か
ら抗炎症作用、抗酸化作用または抗老化作用を有するも
のを見いだし、それを配合した皮膚化粧料を提供するこ
とを目的とする。

【００１５】さらに、本発明は、第五に、天然物の中か
ら抗炎症作用、抗酸化作用または抗老化作用を有するも
のを見いだし、それを配合した飲食品を提供することを
目的とする。

【００１６】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明の抗炎症剤、抗酸化剤または抗老化剤は、Ch
oerospondias属に属する植物からの抽出物を有効成分と
して含有することを特徴とする。

【００１７】本発明の抗炎症剤において、前記抽出物が
ヒアルロニダーゼ阻害作用、サイクリックAMPホスホジ
エステラーゼ阻害作用およびヒスタミン遊離阻害作用か
らなる群より選ばれる１種または２種以上の作用を有す
ることが好ましい。また、本発明の抗酸化剤において、
前記抽出物が活性酸素消去作用および／またはラジカル
消去作用を有することが好ましい。また、本発明の抗老
化剤において、前記抽出物がコラーゲン産生促進作用、
エストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用およびエラ
スターゼ阻害作用からなる群より選ばれる１種または２
種以上の作用を有することが好ましい。

【００１８】また、本発明の皮膚化粧料または飲食品
は、Choerospondias属に属する植物からの抽出物を配合
したことを特徴とする。

【００１９】

【発明の実施の形態】以下、本発明について詳細に説明
する。本発明において、「Choerospondias属に属する植
物からの抽出物」には、Choerospondias属に属する植物
を抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液も
しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、ま
たはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれもが含ま
れる。

【００２０】抽出原料として用いる植物は、Choerospon
dias属に属する限り特に限定されるものではなく、例え
ば、南酸棗（Choerospondias axillaris (Roxb.) Burtt
etHill）等を抽出原料として用いることができる。こ
れらのうち特に南酸棗を抽出原料として用いることが好
ましい。南酸棗は、ウルシ科に属する落葉高木であっ
て、中国南部等に分布している。葉は奇数羽状複葉で、
小葉は７〜１９枚、卵状披針形か披針形である。なお、
南酸棗の樹皮には解毒・収斂・鎮痛・止血作用があるこ
とが知られていたが、その葉が抗炎症作用、抗酸化作用
および抗老化作用を有することはこれまで知られていな
かった。

【００２１】また、抽出原料として用いる植物の構成部
位は特に限定されるものではなく、例えば、葉部、果
実、果核等の構成部位を抽出原料として用いることがで
きる。これらのうち特に葉部を抽出原料として用いるこ
とが好ましい。

【００２２】Choerospondias属に属する植物からの抽出
物に含有される抗炎症物質、抗酸化物質または抗老化物
質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に用いられ
ている抽出方法によって、Choerospondias属に属する植
物から抗炎症作用、抗酸化作用または抗老化作用を有す
る抽出物を得ることができる。例えば、抽出原料を乾燥
した後、そのまま、または粗砕機を用いて粉砕し、抽出
溶媒による抽出に供することにより得ることができる。
この際、抽出原料の乾燥は天日で行ってもよいし、通常
使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、Choero
spondias属に属する植物は、ヘキサン、ベンゼン等の非
極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料
として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことによ
り、Choerospondias属に属する植物からの極性溶媒によ
る抽出処理を効率よく行うことができる。

【００２３】抽出溶媒としては、水若しくは親水性有機
溶媒またはこれらの混合液を室温または溶媒の沸点以下
の温度で用いることが好ましい。

【００２４】抽出溶媒として使用し得る水としては、純
水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡
水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。
水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ
過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。
従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水に
は、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸
緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。

【００２５】抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒
としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピル
アルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５
の低級アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の
低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロ
ピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価
アルコールなどが挙げられる。

【００２６】水と親水性有機溶媒との混合液を抽出溶媒
として使用する場合には、低級アルコールの場合は水１
０重量部に対して１〜９０重量部、低級脂肪族ケトンの
場合は水１０重量部に対して１〜４０重量部、多価アル
コールの場合は水１０重量部に対して１０〜９０重量部
添加することが好ましい。

【００２７】本発明において抗炎症作用、抗酸化作用ま
たは抗老化作用を有する抽出物を得るにあたり特殊な抽
出方法を採用する必要はなく、室温または還流加熱下
で、任意の装置を用いて抽出することができる。

【００２８】具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽に
抽出原料を投入し、必要に応じて時々攪拌しながら、３
０分から２時間静置して可溶性成分を溶出した後、ろ過
して固形物を除去し、得られた抽出液から抽出溶媒を留
去し、乾燥することにより抽出物が得られる。抽出溶媒
量は通常、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）であり、
抽出条件は、抽出溶媒として水を用いた場合には、通常
５０〜９５℃で１〜４時間程度である。また、抽出溶媒
として水とエタノールとの混合溶媒を用いた場合には、
通常４０〜８０℃で３０分〜４時間程度である。

【００２９】得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若し
くは濃縮液、該抽出液の乾燥物、またはこれらの粗精製
物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃
縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。

【００３０】得られた抽出液はそのままでも抗炎症剤、
抗酸化剤または抗老化剤として使用することができる
が、濃縮液またはその乾燥物としたものの方が利用しや
すい。Choerospondias属に属する植物からの抽出物の製
剤化は常法に従って行うことができる。製剤化する場
合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、
シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリア
ーその他任意の助剤を添加することができ、Choerospon
dias属に属する植物からの抽出物を粉末状、顆粒状、錠
剤状等、任意の剤形に製剤化することができる。

【００３１】また、Choerospondias属に属する植物から
の抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性
の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製
を行うことも可能であるが、化粧料や飲食品などに添加
する場合には大量に使用するものではないから、未精製
のままでも実用上支障はない。精製は具体的には、活性
炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって
行うことができる。

【００３２】以上のようにして得られるChoerospondias
属に属する植物からの抽出物は、抗炎症作用、抗酸化作
用または抗老化作用を有しており、それぞれの作用を利
用して抗炎症剤、抗酸化剤または抗老化剤として使用す
ることができる。

【００３３】ここで、Choerospondias属に属する植物か
らの抽出物の抗炎症作用は、例えば、ヒアルロニダーゼ
阻害作用、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ阻害
作用およびヒスタミン遊離阻害作用からなる群より選ば
れる１種または２種以上の作用に基づいて発揮される。
但し、Choerospondias属に属する植物からの抽出物の抗
炎症作用は、上記作用に基づいて発揮される抗炎症作用
に限定されるわけではない。なお、Choerospondias属に
属する植物からの抽出物は、ヒアルロニダーゼ阻害作
用、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ阻害作用ま
たはヒスタミン遊離阻害作用を有しているので、ヒアル
ロニダーゼ阻害剤、サイクリックAMPホスホジエステラ
ーゼ阻害剤またはヒスタミン遊離阻害剤の有効成分とし
て利用することもできる。

【００３４】また、Choerospondias属に属する植物から
の抽出物の抗酸化作用は、例えば、活性酸素消去作用及
び／又はラジカル消去作用に基づいて発揮される。但
し、Choerospondias属に属する植物からの抽出物の抗酸
化作用は、上記作用に基づいて発揮される抗酸化作用に
限定されるわけではない。ここで、「活性酸素」には、
スーパーオキサイド、過酸化水素、ヒドロキシラジカ
ル、一重項酸素等が含まれる。また、「ラジカル」と
は、不対電子を１つまたはそれ以上有する分子または原
子を意味し、スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカ
ル、ＤＰＰＨ等が含まれる。なお、Choerospondias属に
属する植物からの抽出物は、活性酸素消去作用またはラ
ジカル消去作用を有しているので、活性酸素消去剤また
はラジカル消去剤の有効成分として利用することもでき
る。

【００３５】また、Choerospondias属に属する植物から
の抽出物の抗老化作用は、例えば、コラーゲン産生促進
作用、エストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用およ
びエラスターゼ阻害作用からなる群より選ばれる１種ま
たは２種以上の作用に基づいて発揮される。但し、Choe
rospondias属に属する植物からの抽出物の抗老化作用
は、上記作用に基づいて発揮される抗老化作用に限定さ
れるわけではない。なお、Choerospondias属に属する植
物からの抽出物は、コラーゲン産生促進作用、エストロ
ゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用またはエラスターゼ
阻害作用を有しているので、コラーゲン産生促進剤、エ
ストロゲン様作用剤、コラゲナーゼ阻害剤またはエラス
ターゼ阻害剤の有効成分として利用することもできる。

【００３６】Choerospondias属に属する植物からの抽出
物は、炎症性疾患の予防・改善や皮膚の老化の防止・改
善に有用である共に、皮膚に適用した場合の使用感と安
全性に優れているため、皮膚化粧料に配合するのに好適
である。皮膚化粧料には、本発明の抗炎症剤、抗酸化剤
または抗老化剤のいずれか１種を配合してもよいし、２
種以上を組み合わせて配合してもよい。

【００３７】Choerospondias属に属する植物からの抽出
物を配合し得る皮膚化粧料は特に限定されないが、その
具体例としては、軟膏、クリーム、乳液、ローション、
パック、入浴剤等が挙げられる。

【００３８】本発明の皮膚化粧料におけるChoerospondi
as属に属する植物からの抽出物の配合量は、皮膚化粧料
の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整すること
ができるが、好適な配合率は標準的な抽出物に換算して
約０．００５〜１０重量％である。

【００３９】本発明の皮膚化粧料には、Choerospondias
属に属する植物からの抽出物の抗炎症作用、抗酸化作用
および抗老化作用の妨げにならない限り、その皮膚化粧
料の製造に通常使用される各種主剤および助剤、その他
任意の助剤を使用することができる。本発明の皮膚化粧
料は、炎症性疾患の予防・治療および皮膚の老化防止・
改善に関し、Choerospondias属に属する植物からの抽出
物のみが主剤となるものに限られるわけではない。

【００４０】Choerospondias属に属する植物からの抽出
物と共に皮膚化粧料構成成分として利用可能なものの具
体例としては、グリセリン、コラーゲン、ヒアルロン酸
およびその塩、コンドロイチン酸およびその塩、キチ
ン、キトサン等の保湿剤；パラジメチルアミノ安息香酸
アミル等の紫外線吸収剤；グリセロリン脂質、スフィン
ゴリン脂質等の複合脂質；β−カロチン、油溶性甘草エ
キス、リコカルコンＡ、バイカリン、バイカレインその
他の活性酸素消去作用を有する物質；アズレン、グリチ
ルリチン酸およびその塩類、グリチルレチン酸およびそ
の誘導体、酸化亜鉛等の抗炎症作用物質；リボフラビ
ン、トコフェロール、アスコルビン酸、葉酸等のビタミ
ンおよびその誘導体類；ホホバ油、ラノリン、流動パラ
フィン、スクワラン、イソステアリルアルコール等の油
性成分；ステアリル硫酸ナトリウム、セシル硫酸ジエタ
ノールアミン、ステアリン酸グリセリン等の界面活性
剤；エリソルビン酸ナトリウム等の酸化防止剤；エチル
パラベン等の防腐剤；オウバク抽出物、カミツレ抽出
物、カンゾウ根抽出物、ローズマリー抽出物、マロニエ
抽出物等の植物性抽出物、コレステロール類；植物ステ
ロール類；リポプロテイン類；ビフィズス菌培養物、乳
酸菌培養物、酵母抽出物、ブクリョウ抽出物等の微生物
由来成分；褐藻抽出物、紅藻抽出物等の藻類抽出物；γ
−オリザノール等の血行促進剤；硫黄等の抗脂漏剤；香
料；アルコール；カルボキシポリマー等の増粘剤；チタ
ンイエロー、ベニバナその他の着色料等が挙げられる。

【００４１】Choerospondias属に属する植物からの抽出
物は、消化管で消化されるようなものではないことが確
認されているので、任意の飲食品や栄養補助食品に配合
するのに好適である。その場合の配合量は、添加対象飲
食品の一般的な摂取量を考慮して成人１日当たりの抽出
物摂取量が約１〜１０００ｍｇになるようにするのが適
当である

【００４２】Choerospondias属に属する植物からの抽出
物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体
例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲
料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液および
調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベ
ット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょ
うざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；
飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレー
ト、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャ
ム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、
ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等
の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネ
ーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシン
グ等の油脂および油脂加工食品；ソース、たれ等の調味
料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物などが挙げ
られる。

【００４３】以上説明した本発明の抗炎症剤、抗酸化
剤、抗老化剤、皮膚化粧料並びに飲食品は、ヒトに対し
て好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果
が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用すること
もできる。

【００４４】

【実施例】以下、製造例、試験例および配合例を示して
本発明を具体的に説明するが、本発明は、下記の各例に
何ら限定されるものではない。

【００４５】〔製造例１〕南酸棗（Choerospondias axi
llaris (Roxb.) Burtt et Hill）の葉の乾燥物を細切り
したもの２００ｇに水、５０％エタノール（水とエタノ
ールとの重量比１：１）、エタノール２０００ｍＬを加
え、還流抽出器で８０℃、２時間加熱抽出し、熱時濾過
した。残渣についてさらに同様の抽出処理を行った。得
られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、さらに乾燥し
て各部位の抽出物を得た。抽出物の収率は表１のとおり
であった。

【００４６】

【００４７】〔試験例１〕ヒアルロニダーゼ阻害試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りヒアルロニダーゼ阻害作用を試験した。

【００４８】ヒアルロニダーゼ溶液（４００ユニット／
ｍＬ，ｐＨ３．５酢酸緩衝液）０．１ｍＬと試料溶液
０．２ｍＬを混合し、３７℃で２０分間インキュベーシ
ョンした後、活性化剤溶液(２．５ｍＭ−ＣａＣｌ_２)
０．２ｍＬを加え、３７℃で２０分間インキュベーショ
ンして酵素を活性化した。ヒアルロン酸カリウム緩衝液
０．５ｍＬを加え、３７℃で４０分間インキュベーショ
ンした後、０．４Ｎ水酸化ナトリウム０．２ｍｌを加え
ると共に氷冷して反応を停止させた。次いで０．８Ｍホ
ウ酸溶液（ｐＨ９．１）０．２ｍＬを加え、沸騰浴中で
３分間加熱後、直ちに２０分間氷冷した。ｐ−ＤＡＢＡ
試薬（ｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド１０ｇを１
０Ｎ塩酸１２．５ｍＬと酢酸８７．５ｍＬの混合液に溶
解し、酢酸で１０倍に希釈したもの）６．０ｍＬを加え
て３７℃で２０分間インキュベーションしたことによ
り、上記酵素反応で遊離したＮ−アセチルグルコサミン
を発色させ、波長５８５ｎｍの吸光度を測定した。この
とき測定した吸光度を以下「酵素添加, 試料溶液添加時
の吸光度」という。

【００４９】同様の操作と吸光度測定を、酵素を添加せ
ずに行った。このとき測定した吸光度を以下「酵素無添
加, 試料溶液添加時の吸光度」という。

【００５０】また、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加
した場合についても同様の測定を行った。このとき測定
した吸光度を以下「酵素添加, 試料溶液無添加時の吸光
度」という。

【００５１】また、酵素を添加せず、さらに試料溶液を
添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定
を行った。このとき測定した吸光度を以下「酵素無添
加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。そして、次式
によりヒアルロニダーゼ阻害率（％）を求めた。

【００５２】ヒアルロニダーゼ阻害率（％）＝{１−
（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）}×１００

【００５３】上記式中、「Ａ」は「酵素添加, 試料溶液
添加時の吸光度」、「Ｂ」は「酵素無添加, 試料溶液添
加時の吸光度」、「Ｃ」は「酵素添加, 試料溶液無添加
時の吸光度」、「Ｄ」は「酵素無添加, 試料溶液無添加
時の吸光度」を表す。

【００５４】試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率
の測定を行い、阻害率が５０％になる試料濃度ＩＣ_５０
(ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ)を内挿法により求めた。その結果
を表２に示す。

【００５５】 ［表２］試料NO. 抽 出 物 ＩＣ _５０ （ｐｐｍ） １ 水抽出物 １４５ ２ ５０％エタノール抽出物 １３４ ３ エタノール抽出物 １５４

【００５６】表２に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がヒアルロニダーゼ阻
害作用を有することが確認された。また、このヒアルロ
ニダーゼ阻害作用の程度は、抽出物の濃度によって調節
できることが確認された。

【００５７】〔試験例２〕サイクリックＡＭＰホスホジ
エステラーゼ阻害試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を
試験した。

【００５８】５ｍＭの塩化マグネシウムを含有するトリ
ス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）０．２ｍＬに胎児血清アル
プミン溶液０．１ｍＬおよびサイクリックＡＭＰホスホ
ジエステラーゼ溶液０．１ｍＬを加え、さらに試料溶液
０．０５ｍＬを加え、３７℃で５分間プレインキュベー
ションした。次いでサイクリックＡＭＰ溶液０．０５ｍ
Ｌを加え、３７℃で６０分間インキュベーションした。
沸騰浴中で３分間煮沸して反応を停止させ、４℃で３
５００ｒｐｍ遠心分離し、上清中の反応基質・５′−Ａ
ＭＰを高速液体クロマトグラフィーにより定量した。試
料溶液を添加せずに同様の酵素反応と反応基質の分析を
行い、試料無添加時の反応基質量に対する試料添加時の
反応基質量の比率より、試料のサイクリックＡＭＰホス
ホジエステラーゼ阻害率（％）を求めた。

【００５９】試料溶液の試料濃度を段階的に減少させて
上記の測定を繰り返し、サイクリックＡＭＰホスホジエ
ステラーゼの活性を５０％阻害する試料濃度ＩＣ
_５０(ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ)を内挿法により求めた。その
結果を表３に示す。

【００６０】 ［表３］試料NO. 抽 出 物 ＩＣ _５０ （ｐｐｍ） １ 水抽出物 １２１ ２ ５０％エタノール抽出物 １０３ ３ エタノール抽出物 １０２

【００６１】表３に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がサイクリックＡＭＰ
ホスホジエステラーゼ阻害作用を有することが確認され
た。また、このサイクリックＡＭＰホスホジエステラー
ゼ阻害作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できる
ことが確認された。

【００６２】〔試験例３〕ヒスタミン遊離抑制試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りヒスタミン遊離抑制作用を試験した。なお、下記の試
験法は、細胞内のヒスタミンが遊離されると同時にヘキ
ソサミニダーゼも遊離されることを利用して、ヘキソサ
ミニダーゼ遊離を指標にヒスタミン遊離抑制作用を評価
する試験法である。

【００６３】２５ｃｍ^２の培養フラスコに入れた培地
（１５％ＦＢＳ添加Ｓ−ＭＥＭ培地；以下同じ）にＲＢ
Ｌ−２Ｈ３細胞１．０×１０^６個を播種し、３７℃、５
％ＣＯ _２−９５％ａｉｒの下で４日間培養した。次いで
トリプシン処理し、遠心分離（８００ｒｐｍ，４分間）
して細胞を集めた。得られた細胞を４．０×１０^５ｃｅ
ｌｌ／ｍＬで培地に懸濁し、そこにマウスモノクロナー
ル抗ジニトロフェニル基ＩｇＥ（ＤＮＰ−Ｓｐｅｃｉｆ
ｉｃ ＩｇＥ）を０．５μｇ／ｍＬの濃度で添加した。
この細胞浮遊液を９６穴プレートの１穴に付き１００μ
Ｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ａｉｒの下
で２４時間培養した。培養終了後、各穴中の培地を除去
し、シラガニアン緩衝液で２回洗浄した。次に上記緩衝
液３０μＬおよび試料溶液１０μＬを加え、３７℃で１
０分間インキュベーションした。次にジニトロフェニル
化ウシ血清アルブミン（ＤＮＰ−ＢＳＡ）１０μＬを加
え、更に３７℃で１５分間インキュベーションした。そ
の後、氷冷下で上清１０μＬを新たな９６穴プレートに
移し替え、これに１ｍｍｏｌ／Ｌ ｐ−ニトロフェニル
−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミド溶液１０μＬを
加え、３７℃で１時間インキュベーションした。反応終
了後、０．１ｍｏｌ／Ｌ Ｎａ_２ＣＯ_３−Ｎａ _２ＨＣＯ
_３溶液２５０μＬを加え、マイクロプレートリーダーに
て６５０ｎｍを対照に４１５ｎｍにおける吸光度測定を
行った（このとき測定した吸光度をＡとする）。

【００６４】また、試料溶液の代りにシラガニアン緩衝
液を添加した細胞上清についても同様の処理と吸光度測
定を行った（このとき測定した吸光度をＢとする）。

【００６５】また、細胞上清と０．１ｍｏｌ／Ｌ Ｎａ
_２ＣＯ_３−Ｎａ_２ＨＣＯ_３溶液を同様の処理で反応させ
たものについても吸光度測定を行った（このとき測定し
た吸光度をＣとする）。

【００６６】また、同様の処理と吸光度測定をＤＮＰ−
ＢＳＡのかわりにシラガニアン緩衝液を加えたものにつ
いても行った(このとき測定した吸光度をＤとする)。そ
して、次式によりへキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）
を求めた。

【００６７】遊離抑制率（％）＝〔１−｛（Ａ−Ｃ−
Ｄ）／（Ｂ−Ｄ）｝〕×１００

【００６８】試料濃度を段階的に減少させて上記遊離抑
制率の測定を行い、ヘキソサミニダーゼの遊離を５０％
阻害する試料濃度(ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ)を内挿法により
求めた。その結果を表４に示す。

【００６９】 ［表４］試料NO. 抽 出 物 ５０％阻害試料濃度（ｐｐｍ） １ 水抽出物 １８９ ２ ５０％エタノール抽出物 １３６ ３ エタノール抽出物 １１２

【００７０】表４に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がヒスタミン遊離抑制
作用を有することが確認された。また、このヒスタミン
遊離抑制作用の程度は、抽出物の濃度によって調節でき
ることが確認された。

【００７１】〔試験例４〕スーパーオキサイド消去試験
（ＮＢＴ法） 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りスーパーオキサイド消去作用を試験した。

【００７２】３ｍＭキサンチン、０．０５Ｍ Ｎａ₂ＣＯ
₃緩衝液（ｐＨ１０．２）、３ｍＭＥＤＴＡ、ＢＳＡ溶
液、および０．７５ｍＭ ＮＢＴ各０．１ｍＬを試験管
にとり、これに試料溶液０．１ｍＬを添加し、２５℃で
１０分間放置した。次いでキサンチンオキシダーゼ溶液
を加えて素早く攪拌し、２５℃で２０分間静置した。そ
の後６ｍＭ塩化銅０．１ｍＬを加えて反応を停止させ、
波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。このとき測
定した吸光度を「酵素溶液添加, 試料溶液添加時の吸光
度」という。

【００７３】また、同様の操作と吸光度の測定を、酵素
溶液を添加せずに行った。このとき測定した吸光度を
「酵素溶液無添加, 試料溶液添加時の吸光度」という。

【００７４】また、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加
した場合についても同様の測定を行った。このとき測定
した吸光度を「酵素溶液添加, 試料溶液無添加時の吸光
度」という。

【００７５】また、酵素溶液を添加せず、さらに試料溶
液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の
測定を行った。このとき測定した吸光度を「酵素溶液無
添加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。そして、次
式によりスーパーオキサイド消去率（％）を求めた。

【００７６】消去率（％）＝｛１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−
Ｄ）｝×１００

【００７７】上記式中、「Ａ」は「酵素溶液添加, 試料
溶液添加時の吸光度」、「Ｂ」は「酵素溶液無添加, 試
料溶液添加時の吸光度」、「Ｃ」は「酵素溶液添加, 試
料溶液無添加時の吸光度」、「Ｄ」は「酵素溶液無添
加, 試料溶液無添加時の吸光度」を表す。

【００７８】試料濃度を段階的に減少させて上記消去率
の測定を行い、スーパーオキサイドの消去率が５０％に
なる試料濃度（ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ）を内挿法により求
めた。その結果を表５に示す。

【００７９】 ［表５］試料NO. 抽 出 物 ５０％消去試料濃度（ｐｐｍ） １ 水抽出物 １０．５ ２ ５０％エタノール抽出物 ５．６ ３ エタノール抽出物 ５．３

【００８０】表５に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がスーパーオキサイド
消去作用を有することが確認された。また、このスーパ
ーオキサイド消去作用の程度は、抽出物の濃度によって
調節できることが確認された。

【００８１】〔試験例５〕一重項酸素消去試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
り一重項酸素消去作用を試験した。

【００８２】透明ガラス瓶（１０ｍＬ容）中で２％赤血
球懸濁液５ｍＬ、試料溶液を所定濃度で含むｐＨ７．４
の等張リン酸緩衝液５ｍＬ、および光増感剤（１０ｍＭ
ヘマトポルフイリン−２０ｍＭ水酸化ナトリウム溶液）
０．０１ｍＬを混合した。得られた溶液をメリーゴーラ
ンド上、７．５Ｗハロゲンランプで３５分間均一に照射
して一重項酸素（^１Ｏ₂）を発生させ、赤血球の溶血を
生じさせた。この反応溶液１ｍＬを採取し、等張リン酸
緩衝液２ｍＬを加えて混合後、４℃、３０００ｒｐｍで
５分間遠心分離を行った。次いで上清を採取し、波長５
４０ｎｍの吸光度を測定した。別に、赤血球を一部溶血
させた上記反応溶液１ｍＬをとり、これに蒸留水２ｍＬ
を加えて完全に溶血させたものをコントロールとし、同
様に吸光度測定を行った。測定された吸光度より次式に
より一重項酸素消去率を求めた。

【００８３】 一重項酸素消去率（％）＝（1−Ｂ／Ａ）×１００

【００８４】上記式中、「Ａ」は「コントロールの吸光
度」、「Ｂ」は「反応溶液上清の吸光度」を表す。試料
濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、一
重項酸素の消去率が５０％になる試料濃度（ｐｐｍ；μ
ｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。その結果を表６に示
す。

【００８５】 ［表６］試料NO. 抽 出 物 ５０％消去試料濃度（ｐｐｍ） １ 水抽出物 １６７ ２ ５０％エタノール抽出物 １４０ ３ エタノール抽出物 １２５

【００８６】表６に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物が一重項酸素消去作用
を有することが確認された。また、この一重項酸素消去
作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できることが
確認された。

【００８７】〔試験例６〕ＤＰＰＨに対するラジカル消
去試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
り非常に安定なラジカルであるＤＰＰＨを使用してラジ
カル消去作用を試験した。

【００８８】１．５×１０^−４Ｍ ＤＰＰＨエタノール
溶液３ｍＬに試料溶液３ｍＬを加え、直ちに容器を密栓
して振り混ぜ、３０分間静置した。その後、波長５２０
ｎｍの吸光度を測定した。コントロールとして、試料溶
液の代わりに試料溶液を溶解した溶媒を用いて同様に操
作し、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。また、ブラ
ンクとして、エタノールに試料溶液３ｍＬを加えたのち
直ちに波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。測定された
各吸光度より、次式によりラジカル消去率（％）を算出
した。

【００８９】 ラジカル消去率（％）＝{１−（Ｂ−Ｃ）／Ａ}×１００

【００９０】上記式中、「Ａ」は「コントロールの吸光
度」、「Ｂ」は「試料溶液を添加した場合の吸光度」、
「Ｃ」は「ブランクの吸光度」を表す。

【００９１】試料濃度を段階的に減少させて上記消去率
の測定を行い、ＤＰＰＨラジカルの消去率が５０％にな
る試料濃度（ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ）を内挿法により求め
た。その結果を表７に示す。

【００９２】 ［表７］試料NO. 抽 出 物 ５０％消去試料濃度（ｐｐｍ） １ 水抽出物 ５．２ ２ ５０％エタノール抽出物 ３．６ ３ エタノール抽出物 ２．８

【００９３】表７に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がＤＰＰＨラジカル消
去作用を有することが確認された。また、このＤＰＰＨ
ラジカル消去作用の程度は、抽出物の濃度によって調節
できることが確認された。

【００９４】〔試験例７〕コラーゲン産生促進作用の試
験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りコラーゲン産生促進作用を試験した。

【００９５】Ｗｅｂｓｔｅｒらの方法（Ａｎａｌ．Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．,Ｖｏｌ.９６,２２０,１９７９）に準拠し
て試験を行った。ヒトの線維芽細胞を２４穴プレートに
播種し、３７℃、５％ＣＯ₂−９５％ａｉｒの下にて、
試料添加培地（試料濃度：２００ｐｐｍ）で数日間培養
した後、β−アミノプロピオニトリルと［³Ｈ］−プロ
リンとを添加し、更に２４時間培養した。当該培養液全
体にペプシン／酢酸溶液を加えて４℃下で１６時間消化
し、次いでこの消化液にキャリアーを加えて０．７ｍｏ
ｌ／Ｌ食塩水溶液で沈殿させ、更に中性条件下で再溶解
させて、４．２ｍｏｌ／Ｌ食塩水溶液で再沈殿させた。
得られた沈殿物を２０％エタノールで洗浄した後、その
沈殿物の放射活性を測定した。そして、コラーゲン産生
促進率（％）を、試料無添加時の放射活性を１００％と
して算出した。その結果を表８に示す。

【００９６】 ［表８］試料NO. 抽 出 物 コラーゲン産生促進率（％） １ 水抽出物 １１７ ２ ５０％エタノール抽出物 １２５ ３ エタノール抽出物 １３２

【００９７】表８に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がコラーゲン産生促進
作用を有することが確認された。また、このコラーゲン
産生促進作用の程度は、抽出物の濃度によって調節でき
ることが確認された。

【００９８】〔試験例８〕エストロゲン様試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りエストロゲン様作用を試験した。

【００９９】エストロゲン依存性細胞の増殖に対する影
響を調べるＴｈｏｍａｓらの方法（Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃ
ｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．２８Ａ，５９５−６０２，
１９９２）に準拠して試験を行った。ヒト乳ガン由来の
ＭＣＦ−７細胞を７５ｃｍ^２フラスコでコンフルエント
様になるまで培養し、トリプシン処理により、このＭＣ
Ｆ−７細胞を集め、１０％ＦＢＳ（活性炭処理済み）、
１％ＮＥＡＡおよび１ｍＭピルビン酸ナトリウムを含み
フェノールレッドを含まないＭＥＭ培地（以下、「ＭＥ
Ｍ培地」と略す）を用いて、３×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｍ
Ｌに調製した。調製したＭＣＦ−７細胞を２４穴プレー
トに０．９ｍＬずつ播種し、これを定着させるために３
７℃、５％ＣＯ _２−９５％ａｉｒの下で培養した。６時
間後（０日日）、ＭＥＭ培地で終濃度の１０倍の濃度
（３１．２５ｐｐｍ）に調製した試料溶液１００μＬを
上記プレートに添加し、培養を続けた。培養開始から６
日目、培地を０．９７ｍｍｏｌ／ＬＭＴＴを含むＭＥＭ
培地に交換し、２時間培養後、培地をイソプロパノール
に交換して細胞内に生成したブルーホルマザンを抽出し
た。溶出したブルーホルマザンを含有するイソプロパノ
ールについて、ブルーホルマザンの吸収極大点がある５
７０ｎｍの吸光度を測定した。

【０１００】なお、付着細胞の影響を補正するため、同
時に６５０ｎｍの吸光度も測定し、両吸光度の差をもっ
てブルーホルマザンの生成量に比例する値とした（下記
の計算式における吸光度はこの補正済み吸光度であ
る）。

【０１０１】陽性対照としては、０．０２ｐｐｍエチニ
ルエストラジオールを使用した。エストロゲン様作用
（エストロゲン依存性増殖作用）の強さは、試料無添加
時の吸光度を１００％として次式により算出した。

【０１０２】 エストロゲン様作用（％）＝Ａ／Ｂ×１００

【０１０３】上記式中、「Ａ」は「試料添加の場合の吸
光度」、「Ｂ」は「試料無添加の場合の吸光度」を表
す。試験結果を表９に示す。

【０１０４】 ［表９］試料NO. 抽 出 物 エストロゲン様作用率（％） １ 水抽出物 １１０ ２ ５０％エタノール抽出物 １１４ ３ エタノール抽出物 １３２

【０１０５】表９に示す結果から、Choerospondias属に
属する南酸棗の葉部からの抽出物がエストロゲン様作用
を有することが確認された。また、このエストロゲン様
作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できることが
確認された。

【０１０６】〔試験例９〕コラゲナーゼ阻害試験 製造例１による抽出物について、下記の試験法によりコ
ラゲナーゼ阻害作用を試験した。

【０１０７】試料溶液（溶媒：トリス塩酸緩衝液）５０
μＬ、コラゲナーゼ溶液５０μＬおよび基質溶液４００
μＬを混合し、３７℃で３０分間インキュベーションし
た。次いで２５ｍＭクエン酸溶液１ｍＬで反応を停止
し、酢酸エチル５ｍＬで抽出した。得られた抽出液につ
いて、波長３２０ｎｍの吸光度（対照液：酢酸エチル）
を測定した。このとき測定した吸光度を「酵素添加, 試
料溶液添加時の吸光度」という。なお、コラゲナーゼ溶
液はシグマ社のコラゲナーゼＴｙｐｅＩＶ ５ｍｇを緩
衝液１ｍＬに溶解させ、使用時に５０倍に希釈したもの
を使用した。基質溶液には、２０ｎｍｏｌ／Ｌの塩化カ
ルシウムを含有するトリス塩酸緩衝液にＢＡＣＨＥＭ
Ｆｅｎｉｃｈｅｍｉｋａｌｉｅｎ ＡＧ社Ｐｚ−ペプチ
ドを濃度が０．５ｍｏｌ／Ｌになるように溶解して使用
した。

【０１０８】また、上記と同様の酵素反応と吸光度測定
を、試料溶液の代わりに試料溶液と等量の緩衝液を添加
して行った。このとき測定した吸光度を「酵素添加, 試
料溶液無添加時の吸光度」という。

【０１０９】また、上記と同様の酵素反応と吸光度測定
を、コラゲナーゼ溶液の代わりに緩衝液を添加して行っ
た。このとき測定した吸光度を「酵素無添加, 試料溶液
添加時の吸光度」という。

【０１１０】また、上記と同様の酵素反応と吸光度測定
を、試料溶液の代わりに試料溶液と等量の緩衝液を添加
するとともに、コラゲナーゼ溶液の代わりに緩衝液を添
加して行った。このとき測定した吸光度を「酵素無添
加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。そして、次式
によりコラゲナーゼ阻害率（％）を算出した。

【０１１１】コラゲナーゼ阻害率（％）＝{１−（Ａ−
Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）}×１００

【０１１２】上記式中、「Ａ」は「酵素添加, 試料溶液
添加時の吸光度」、「Ｂ」は「酵素無添加, 試料溶液添
加時の吸光度」、「Ｃ」は「酵素添加, 試料溶液無添加
時の吸光度」、「Ｄ」は「酵素無添加, 試料溶液無添加
時の吸光度」を表す。

【０１１３】試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率
の測定を行い、コラゲナーゼの活性を５０％阻害する試
料濃度(ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ)を内挿法により求めた。そ
の結果を表１０に示す。

【０１１４】 ［表１０］試料NO. 抽 出 物 ５０％阻害試料濃度（ｐｐｍ） １ 水抽出物 ９２．１ ２ ５０％エタノール抽出物 ８７．９ ３ エタノール抽出物 ９１．１

【０１１５】表１０に示す結果から、Choerospondias属
に属する南酸棗の葉部からの抽出物がコラゲナーゼ阻害
作用を有することが確認された。また、このコラゲナー
ゼ阻害作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できる
ことが確認された。

【０１１６】〔試験例１０〕エラスターゼ阻害試験 製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によ
りエラスターゼ阻害作用を試験した。

【０１１７】９６穴プレートを用意し、１穴に対して試
料溶液（溶媒：ＤＭＳＯ＋水）５０μＬおよびエラスタ
ーゼ溶液５０μＬを添加し、さらに基質溶液１００μＬ
を添加し混合した。２５℃で１５分間インキュベーショ
ンさせた後、波長４１５ｎｍの吸光度を測定した。この
とき測定した吸光度を「酵素添加, 試料溶液添加時の吸
光度」という。なお、エラスターゼ溶液はシグマ社・エ
ラスターゼＴｙｐｅIII ５ｍｇをｐＨ８の０．２ｍｏｌ
／Ｌトリス塩酸緩衝液１ｍＬに溶解し使用時に２５０倍
に希釈したものを使用した。基質溶液として、シグマ社
のＮ−ＳＵＣＣＩＮＹＬ−ＡＬＡ−ＡＬＡ−ＡＬＡ−ｐ
−ＮＩＴＲＯＡＮＩＬＩＤＥをＤＭＳＯに溶解した濃度
４５．１４ｍｇ／ｍＬの溶液を上記トリス塩酸緩衝液で
１００倍に希釈して使用した。

【０１１８】上記と同様の酵素反応と吸光度測定を、試
料溶液の代わりに試料溶液と等量の溶媒のみを添加して
行った。このとき測定した吸光度を「酵素添加, 試料溶
液無添加時の吸光度」という。

【０１１９】また、上記と同様の酵素反応と吸光度測定
を、エラスターゼ溶液の代わりに緩衝液を添加して同じ
操作と測定を行った。このとき測定した吸光度を「酵素
無添加, 試料溶液添加時の吸光度」という。

【０１２０】また、上記と同様の酵素反応と吸光度測定
を、試料溶液の代わりに試料溶液と等量の溶媒のみを添
加するとともに、エラスターゼ溶液の代わりに緩衝液を
添加して同じ操作と測定を行った。このとき測定した吸
光度を「酵素無添加, 試料溶液無添加時の吸光度」とい
う。そして、次式によりエラスターゼ阻害率（％）を求
めた。

【０１２１】エラスターゼ阻害率（％）＝{１−（Ａ−
Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）}×１００

【０１２２】上記式中、「Ａ」は「酵素添加, 試料溶液
添加時の吸光度」、「Ｂ」は「酵素無添加, 試料溶液添
加時の吸光度」、「Ｃ」は「酵素添加, 試料溶液無添加
時の吸光度」、「Ｄ」は「酵素無添加, 試料溶液無添加
時の吸光度」を表す。

【０１２３】試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率
の測定を行い、エラスターゼの活性を５０％阻害する試
料濃度(ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ)を内挿法により求めた。そ
の結果を表１１に示す。

【０１２４】 ［表１１］試料NO. 抽 出 物 ５０％阻害試料濃度（ｐｐｍ） １ 水抽出物 ９３．６ ２ ５０％エタノール抽出物 ８４．９ ３ エタノール抽出物 ８３．３

【０１２５】表１１に示す結果から、Choerospondias属
に属する南酸棗の葉部からの抽出物がエラスターゼ阻害
作用を有することが確認された。また、このエラスター
ゼ阻害作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できる
ことが確認された。

【０１２６】〔試験例１１〕製造例１で得られた５０％
エタノール抽出物を含有するローション状の塗布液ａお
よび５０％エタノール抽出物を含有しないほかは塗布液
ａと同じ組成の塗布液ｂ（対照）を調製し、それらにつ
いてカミソリ負け防止効果を試験した。なお、カミソリ
負けはひげ等の毛を剃った後、皮膚が赤くなりヒリヒリ
痛んだり、腫れて熱を持ったり痒くなったりする症状で
あり、カミソリでひげ等の毛を剃った後の皮膚に細かい
切り傷ができ、そこから細菌が感染して炎症が起こるこ
とによって生じる症状である。

【０１２７】各塗布液の組成は以下の表１２のとおりで
ある。なお、塗布液ａおよび塗布液ｂともに全量を１０
０mlとした。

【０１２８】 ［表１２］ 塗布液ａ 塗布液ｂ 南酸棗葉抽出物 １．０ｇ 無し 1,3-ブチレングリコール ５．０ｇ ５．０ｇ グリセリン １．０ｇ １．０ｇ エタノール ６．０ｇ ６．０ｇ 非イオン性界面活性剤 ０．５ｇ ０．５ｇ 精製水 残部 残部

【０１２９】カミソリ負けする男性被験者２０名を１０
名ずつ２群に分け、１群に塗布液ａを、他の群に塗布液
ｂを、ひげ剃り直後の皮膚に塗布し、以下の判定基準で
カミソリ負け改善効果を評価した。

【０１３０】カミソリ負けが消失した場合には「著効あ
り」、カミソリ負けが弱くなった場合には「有効」、カ
ミソリ負けがやや弱くなった場合には「やや有効」、カ
ミソリ負けに変化が認められない場合には「無効」と判
定し、「無効」と判定した被験者が２０％未満である場
合には「Ａ」、２０％以上５０％未満である場合には
「Ｂ」、５０％以上８０％未満である場合には「Ｃ」、
８０％以上である場合には「Ｄ」と評価した。

【０１３１】その結果、塗布液ａのカミソリ負け防止効
果は「Ａ」と評価され、塗布液ｂのカミソリ負け防止効
果は「Ｄ」と評価された。なお、カミソリ負け防止効果
についての判定と同時に、肌に対する刺激（ヒリヒリ
感）の程度について感想を求めたところ、全ての被験者
が両塗布液とも刺激を感じないと答えた。

【０１３２】この結果によって、Choerospondias属に属
する南酸棗の葉部からの抽出物がカミソリ負け防止作
用、すなわち抗炎症作用を有することが確認された。

【０１３３】〔試験例１２〕製造例１で得られた５０％
エタノール抽出物を配合した乳液（以下「実施例乳液」
という。）を常法に従って調整した。実施例乳液の組成
を以下に示す。

【０１３４】 南酸棗葉５０％エタノール抽出物（製造例１） １．０ｇ セチルアルコール ０．５ｇ ミツロウ ２．０ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（10E.0） １．０ｇ モノステアリン酸グリセリル １．０ｇ ヒアルロン酸 ０．１ｇ プロピレングリコール ５．０ｇ エタノール ３．０ｇ パラオキシ安息香酸メチル ０．３ｇ 香料 ０．０３ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【０１３５】実施例乳液と、南酸棗の葉抽出物を含まな
いほかは実施例乳液と同じ組成の比較例乳液について、
下記の評価試験を行った。 被験者：２２〜４０歳の女性多数の中から、皮溝・皮丘
が消え、広範囲の角質がめくれているか（表１３に示す
評点が１）、または皮溝・皮丘が不鮮明で角質が部分的
にめくれており（表１３に示す評点が２）、肌荒れと判
定された者１９名、普通肌と判定された者１名の合計２
０名を選抜して被験者とした。

【０１３６】塗布試験：各被験者に、顔の右半分には実
施例乳液を、左半分には比較例乳液を、朝夕各1回、３
０日間塗布させた。

【０１３７】[判定１：肌荒れ改善効果]塗布試験終了
後、シルフロ（FLEXICL DEVELOPMENTS LTD製）によるレ
プリカ法を用いて顔のレプリカをとり、５０倍の顕微鏡
で皮紋の状態および角質剥離状態を観察し、表１３に示
す評価基準で肌の状態を判定した。判定結果を表１４に
示す。

【０１３８】 ［表１３］ 評点 評価 １ 皮溝・皮丘が消え、広範囲の角質がめくれている。（肌荒れ状態） ２ 皮溝・皮丘が不鮮明。角質が部分的にめくれている。（肌荒れ状態） ３ 皮溝・皮丘が認められるが平坦である。（普通肌） ４ 皮溝・皮丘が鮮明である。（比較的美しい肌） ５ 皮溝・皮丘がきわめて鮮明で整っている。（美しい肌）

【０１３９】 ［表１４］評点 試験開始前 実施例乳液塗布部 比較例乳液塗布部 １ １０名 ０名 ９名 ２ ９名 ０名 ８名 ３ １名 ５名 １名 ４ ０名 １２名 ２名 ５ ０名 ３名 ０名

【０１４０】表１４に示されるように、実施例乳液を塗
布した領域は、比較例乳液を塗布した領域に比べて顕著
に肌荒れ（皮膚の老化）が改善された。

【０１４１】[判定２・官能評価]使用感と肌への効果に
ついて、実施例乳液と比較例乳液とを比較した場合の優
劣を被験者全員に質問した。回答の集計結果を表１５に
示す。

【０１４２】 ［表１５］ 評 価 項 目 実施例乳液が良い 比較例乳液が良い 優劣なし 肌えのなじみ １５名 ３名 ２名 しっとり感 １８名 １名 １名 肌えののび １５名 ２名 ３名 肌荒れ改善の満足感 １６名 １名 ３名 肌色改善の満足感 １４名 ２名 ４名 シワの数と深さの改善 １８名 １名 １名

【０１４３】表１５に示される結果より、官能評価によ
っても上記判定１と同様の効果と優れた使用感が確認さ
れた。

【０１４４】判定１および２の結果より、Choerospondi
as属に属する南酸棗の葉部からの抽出物を配合した皮膚
化粧料が皮膚の老化防止・改善作用（肌荒れ改善作用）
を有するとともに、皮膚に適用した場合の使用感と安全
性に優れていることが確認された。

【０１４５】〔配合例１〕下記の組成の乳液を常法によ
り製造した。 南酸棗の葉抽出物（製造実施例１） １ｇ ホホバオイル ４ｇ オリーブオイル ２ｇ スクワラン ２ｇ セタノール ２ｇ モノステアリン酸グリセリル ２ｇ ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.0） ２．５ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0） ２ｇ 黄杞エキス ０．１g イチョウ葉エキス ０．１ｇ コンキオリン ０．１ｇ オウバクエキス ０．１ｇ カミツレエキス ０．１ｇ 1,3-ブチレングリコール ３ｇ パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ 香料 ０．０５ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【０１４６】〔配合例２〕下記組成の化粧水を常法によ
り製造した。 南酸棗の葉抽出物（製造実施例１） ２ｇ グリセリン ３ｇ 1,3-ブチレングリコール ３ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0） ０．５ｇ パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ クエン酸 ０．１ｇ クエン酸ソーダ ０．１ｇ 油溶性甘草エキス ０．１ｇ 海藻エキス ０．１ｇ キシロビオースミクスチャー ０．５ｇ クジンエキス ０．１ｇ 香料 ０．０５ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【０１４７】〔配合例３〕下記組成のクリームを常法に
より製造した。 南酸棗の葉抽出物（製造実施例１） １ｇ 流動パラフィン ５ｇ サラシミツロウ ４ｇ セタノール ３ｇ スクワラン １０ｇ ラノリン ２ｇ ステアリン酸 １ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0） １．５ｇ モノステアリン酸グリセリル ３ｇ 1,3-ブチレングリコール ６ｇ 酵母抽出液 ０．１ｇ シソ抽出液 ０．１ｇ ジユ抽出液 ０．１ｇ シナノキ抽出液 ０．１ｇ パラオキシ安息香酸メチル １．５ｇ 香料 ０．１ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【０１４８】〔配合例４〕下記組成のパックを常法によ
り製造した。 南酸棗の葉抽出物（製造実施例１） ５ｇ ポリビニルアルコール １５ｇ ポリエチレングリコール ３ｇ プロピレングリコール ７ｇ エタノール １０ｇ セージ抽出液 ０．１ｇ トウキ抽出液 ０．１ｇ ニンジン抽出液 ０．１ｇ パラオキシ安息香酸エチル ０．０５ｇ 香料 ０．０５ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【０１４９】〔配合例５〕下記の混合物を打錠して,錠
剤状栄養補助食品を製造した。 南酸棗の葉抽出物（製造実施例１） ５０重量部 粉糖（ショ糖） １７８重量部 ソルビット １０重量部 グリセリン脂肪酸エステル １２重量部

【０１５０】〔配合例６〕下記の混合物を顆粒状に形成
して栄養補助食品を製造した。 南酸棗の葉抽出物（製造実施例１） ３４重量部 ビートオリゴ糖 １０００重量部 ビタミンＣ １６７重量部 ステビア抽出物 １０重量部

【０１５１】

【発明の効果】本発明によれば、抗炎症剤、抗酸化剤ま
たは抗老化剤が提供される。また、本発明によれば、抗
炎症作用、抗酸化作用または抗老化作用を有する皮膚化
粧料および飲食品が提供される。本発明の抗炎症剤によ
れば、ヒアルロニダーゼの活性化、サイクリックAMPホ
スホジエステラーゼによるサイクリックAMPの分解、ヒ
スタミン遊離、活性酸素や生体内ラジカルの発生等が関
与する炎症を効果的に予防または改善することができ
る。また、本発明の抗酸化剤によれば、活性酸素消去作
用や生体内ラジカル消去作用による生体成分の酸化の防
止を通じて、皮膚のしわの形成や弾力性低下等の老化現
象を効果的に予防・治療することができる。さらに、本
発明の抗老化剤によれば、コラーゲン産生促進作用、エ
ストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用またはエラス
ターゼ阻害作用を通じて、皮膚のしわの形成や弾力性低
下等の老化現象を効果的に予防・治療することができ
る。本発明の抗炎症剤、抗酸化剤および抗老化剤は、皮
膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているので皮
膚化粧料に配合するのに好適なものである。また、本発
明の皮膚化粧料および飲食品は、皮膚の老化を防止およ
び／または改善するのに有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 7/50 Ａ６１Ｋ 7/50 45/00 45/00 Ａ６１Ｐ 17/16 Ａ６１Ｐ 17/16 29/00 29/00 39/06 39/06 (72)発明者 岸田 直子 広島県尾道市向東町14703−10 丸善製薬 株式会社内 (72)発明者 川嶋 善仁 広島県尾道市向東町14703−10 丸善製薬 株式会社内 Ｆターム(参考） 4B018 LE01 LE02 MD61 ME06 ME10 ME14 MF01 MF08 4C083 AA032 AA082 AA111 AA112 AA122 AC022 AC072 AC102 AC122 AC182 AC242 AC302 AC422 AC442 AC482 AD042 AD112 AD212 AD332 AD512 BB04 BB41 CC04 CC05 CC07 CC25 DD22 DD23 DD31 DD41 EE10 EE12 EE13 FF01 4C084 AA01 AA02 AA03 AA16 BA44 CA13 MA02 MA22 MA23 MA28 MA32 MA35 MA36 MA37 MA41 MA43 MA52 MA63 NA06 NA14 ZA892 ZB112 ZB222 ZC112 ZC202 ZC372 ZC412 4C088 AB21 AC04 AC05 BA09 BA10 BA11 BA37 MA17 MA22 MA28 MA32 MA35 MA36 MA37 MA41 MA43 MA52 MA55 MA63 NA06 NA14 ZA89 ZB22 ZC11 ZC20 ZC37 ZC41

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 Choerospondias属に属する植物からの抽
   出物を有効成分として含有することを特徴とする抗炎症
   剤。
2. 【請求項２】 前記抽出物がヒアルロニダーゼ阻害作
   用、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ阻害作用お
   よびヒスタミン遊離阻害作用からなる群より選ばれる１
   種または２種以上の作用を有することを特徴とする請求
   項１記載の抗炎症剤。
3. 【請求項３】 Choerospondias属に属する植物からの抽
   出物を有効成分として含有することを特徴とする抗酸化
   剤。
4. 【請求項４】 前記抽出物が活性酸素消去作用および／
   またはラジカル消去作用を有することを特徴とする請求
   項３記載の抗酸化剤。
5. 【請求項５】 Choerospondias属に属する植物からの抽
   出物を有効成分として含有することを特徴とする抗老化
   剤。
6. 【請求項６】 前記抽出物がコラーゲン産生促進作用、
   エストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用およびエラ
   スターゼ阻害作用からなる群より選ばれる１種または２
   種以上の作用を有することを特徴とする請求項５記載の
   抗老化剤。
7. 【請求項７】 Choerospondias属に属する植物からの抽
   出物を配合したことを特徴とする皮膚化粧料。
8. 【請求項８】 Choerospondias属に属する植物からの
   抽出物を配合したことを特徴とする飲食品。