JP5441976B2 - 抗炎症剤 - Google Patents
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Description
活性酸素は、生体細胞内のエネルギー代謝過程で生じるものであり、スーパーオキサイド(即ち酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキシドアニオン(・O2−)、過酸化水素(H2O2)、一重項酸素(1O2)、ヒドロキシラジカル(・OH)等がある。これら活性酸素は食細胞の殺菌機構にとって必須でありウイルスや癌細胞の除去に重要な働きを果たしているが、活性酸素の過剰な生成は生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、各種疾患を誘発する。例えば、活性酸素は、コラーゲン等の生体組織を分解、変性あるいは架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成したりすると考えられており、活性酸素によって引き起こされるこれらの障害が、皮膚のしわ形成や皮膚の弾力性低下等の老化の原因になるものと考えられている。
すなわち、皮膚の真皮・表皮は、表皮細胞、線維芽細胞およびこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックスによって構成されており、若い皮膚においてはこれらの皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。ところが、紫外線、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり加齢が進んだりすると、細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチンは分解・変質を引き起こし、またコラーゲンは産生量が減少すると共に架橋による弾性低下を起こす。その結果、皮膚は保湿機能や弾力性が低下し、角質は異常剥離を始めるから、肌は張りや艶を失い、荒れ、シワ、くすみ等の老化症状を呈するようになる。
本発明の抗炎症剤によれば、ヒアルロニダーゼの活性化、サイクリックAMPホスホジエステラーゼによるサイクリックAMPの分解、ヒスタミン遊離、活性酸素や生体内ラジカルの発生等が関与する炎症を効果的に予防または改善することができる。また、本発明の抗酸化剤によれば、活性酸素消去作用や生体内ラジカル消去作用による生体成分の酸化の防止を通じて、皮膚のしわの形成や弾力性低下等の老化現象を効果的に予防・治療することができる。さらに、本発明の抗老化剤によれば、コラーゲン産生促進作用、エストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用またはエラスターゼ阻害作用を通じて、皮膚のしわの形成や弾力性低下等の老化現象を効果的に予防・治療することができる。
本発明の抗炎症剤、抗酸化剤および抗老化剤は、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているので皮膚化粧料に配合するのに好適なものである。
また、本発明の皮膚化粧料および飲食品は、皮膚の老化を防止および/または改善するのに有用である。
本発明において、「コエロスポンディアス(Choerospondias)属に属する植物からの抽出物」には、コエロスポンディアス(Choerospondias)属に属する植物を抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、またはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれもが含まれる。
南酸棗(Choerospondias axillaris (Roxb.) Burtt et Hill)の葉の乾燥物を細切りしたもの200gに水、50%エタノール(水とエタノールとの重量比1:1)、エタノール2000mLを加え、還流抽出器で80℃、2時間加熱抽出し、熱時濾過した。残渣についてさらに同様の抽出処理を行った。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、さらに乾燥して各部位の抽出物を得た。抽出物の収率は表1のとおりであった。
試料NO. 抽 出 溶 媒 抽出率(%)
1 水 29.8
2 50%エタノール 32.0
3 エタノール 31.5
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりヒアルロニダーゼ阻害作用を試験した。
そして、次式によりヒアルロニダーゼ阻害率(%)を求めた。
試料NO. 抽 出 物 IC 50 (ppm)
1 水抽出物 145
2 50%エタノール抽出物 134
3 エタノール抽出物 154
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりサイクリックAMPホスホジエステラーゼ阻害作用を試験した。
試料NO. 抽 出 物 IC 50 (ppm)
1 水抽出物 121
2 50%エタノール抽出物 103
3 エタノール抽出物 102
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりヒスタミン遊離抑制作用を試験した。なお、下記の試験法は、細胞内のヒスタミンが遊離されると同時にヘキソサミニダーゼも遊離されることを利用して、ヘキソサミニダーゼ遊離を指標にヒスタミン遊離抑制作用を評価する試験法である。
そして、次式によりへキソサミニダーゼ遊離抑制率(%)を求めた。
試料NO. 抽 出 物 50%阻害試料濃度(ppm)
1 水抽出物 189
2 50%エタノール抽出物 136
3 エタノール抽出物 112
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりスーパーオキサイド消去作用を試験した。
そして、次式によりスーパーオキサイド消去率(%)を求めた。
試料NO. 抽 出 物 50%消去試料濃度(ppm)
1 水抽出物 10.5
2 50%エタノール抽出物 5.6
3 エタノール抽出物 5.3
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法により一重項酸素消去作用を試験した。
試料濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、一重項酸素の消去率が50%になる試料濃度(ppm;μg/mL)を内挿法により求めた。その結果を表6に示す。
試料NO. 抽 出 物 50%消去試料濃度(ppm)
1 水抽出物 167
2 50%エタノール抽出物 140
3 エタノール抽出物 125
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法により非常に安定なラジカルであるDPPHを使用してラジカル消去作用を試験した。
試料NO. 抽 出 物 50%消去試料濃度(ppm)
1 水抽出物 5.2
2 50%エタノール抽出物 3.6
3 エタノール抽出物 2.8
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりコラーゲン産生促進作用を試験した。
ヒトの線維芽細胞を24穴プレートに播種し、37℃、5%CO2−95%airの下にて、試料添加培地(試料濃度:200ppm)で数日間培養した後、β−アミノプロピオニトリルと[3H]−プロリンとを添加し、更に24時間培養した。当該培養液全体にペプシン/酢酸溶液を加えて4℃下で16時間消化し、次いでこの消化液にキャリアーを加えて0.7mol/L食塩水溶液で沈殿させ、更に中性条件下で再溶解させて、4.2mol/L食塩水溶液で再沈殿させた。得られた沈殿物を20%エタノールで洗浄した後、その沈殿物の放射活性を測定した。そして、コラーゲン産生促進率(%)を、試料無添加時の放射活性を100%として算出した。その結果を表8に示す。
試料NO. 抽 出 物 コラーゲン産生促進率(%)
1 水抽出物 117
2 50%エタノール抽出物 125
3 エタノール抽出物 132
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりエストロゲン様作用を試験した。
ヒト乳ガン由来のMCF−7細胞を75cm2フラスコでコンフルエント様になるまで培養し、トリプシン処理により、このMCF−7細胞を集め、10%FBS(活性炭処理済み)、1%NEAAおよび1mMピルビン酸ナトリウムを含みフェノールレッドを含まないMEM培地(以下、「MEM培地」と略す)を用いて、3×104cells/mLに調製した。調製したMCF−7細胞を24穴プレートに0.9mLずつ播種し、これを定着させるために37℃、5%CO2−95%airの下で培養した。6時間後(0日日)、MEM培地で終濃度の10倍の濃度(31.25ppm)に調製した試料溶液100μLを上記プレートに添加し、培養を続けた。培養開始から6日目、培地を0.97mmol/L MTTを含むMEM培地に交換し、2時間培養後、培地をイソプロパノールに交換して細胞内に生成したブルーホルマザンを抽出した。溶出したブルーホルマザンを含有するイソプロパノールについて、ブルーホルマザンの吸収極大点がある570nmの吸光度を測定した。
試験結果を表9に示す。
試料NO. 抽 出 物 エストロゲン様作用率(%)
1 水抽出物 110
2 50%エタノール抽出物 114
3 エタノール抽出物 132
製造例1による抽出物について、下記の試験法によりコラゲナーゼ阻害作用を試験した。
そして、次式によりコラゲナーゼ阻害率(%)を算出した。
試料NO. 抽 出 物 50%阻害試料濃度(ppm)
1 水抽出物 92.1
2 50%エタノール抽出物 87.9
3 エタノール抽出物 91.1
製造例1で得られた抽出物について、下記の試験法によりエラスターゼ阻害作用を試験した。
そして、次式によりエラスターゼ阻害率(%)を求めた。
試料NO. 抽 出 物 50%阻害試料濃度(ppm)
1 水抽出物 93.6
2 50%エタノール抽出物 84.9
3 エタノール抽出物 83.3
製造例1で得られた50%エタノール抽出物を含有するローション状の塗布液aおよび50%エタノール抽出物を含有しないほかは塗布液aと同じ組成の塗布液b(対照)を調製し、それらについてカミソリ負け防止効果を試験した。なお、カミソリ負けはひげ等の毛を剃った後、皮膚が赤くなりヒリヒリ痛んだり、腫れて熱を持ったり痒くなったりする症状であり、カミソリでひげ等の毛を剃った後の皮膚に細かい切り傷ができ、そこから細菌が感染して炎症が起こることによって生じる症状である。
塗布液a 塗布液b
南酸棗葉抽出物 1.0g 無し
1,3-ブチレングリコール 5.0g 5.0g
グリセリン 1.0g 1.0g
エタノール 6.0g 6.0g
非イオン性界面活性剤 0.5g 0.5g
精製水 残部 残部
製造例1で得られた50%エタノール抽出物を配合した乳液(以下「実施例乳液」という。)を常法に従って調整した。実施例乳液の組成を以下に示す。
セチルアルコール 0.5g
ミツロウ 2.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(10E.0) 1.0g
モノステアリン酸グリセリル 1.0g
ヒアルロン酸 0.1g
プロピレングリコール 5.0g
エタノール 3.0g
パラオキシ安息香酸メチル 0.3g
香料 0.03g
精製水 残部(全量を100gとする)
被験者:22〜40歳の女性多数の中から、皮溝・皮丘が消え、広範囲の角質がめくれているか(表13に示す評点が1)、または皮溝・皮丘が不鮮明で角質が部分的にめくれており(表13に示す評点が2)、肌荒れと判定された者19名、普通肌と判定された者1名の合計20名を選抜して被験者とした。
塗布試験終了後、シルフロ(FLEXICL DEVELOPMENTS LTD製)によるレプリカ法を用いて顔のレプリカをとり、50倍の顕微鏡で皮紋の状態および角質剥離状態を観察し、表13に示す評価基準で肌の状態を判定した。判定結果を表14に示す。
評点 評価
1 皮溝・皮丘が消え、広範囲の角質がめくれている。(肌荒れ状態)
2 皮溝・皮丘が不鮮明。角質が部分的にめくれている。(肌荒れ状態)
3 皮溝・皮丘が認められるが平坦である。(普通肌)
4 皮溝・皮丘が鮮明である。(比較的美しい肌)
5 皮溝・皮丘がきわめて鮮明で整っている。(美しい肌)
評点 試験開始前 実施例乳液塗布部 比較例乳液塗布部
1 10名 0名 9名
2 9名 0名 8名
3 1名 5名 1名
4 0名 12名 2名
5 0名 3名 0名
使用感と肌への効果について、実施例乳液と比較例乳液とを比較した場合の優劣を被験者全員に質問した。回答の集計結果を表15に示す。
評 価 項 目 実施例乳液が良い 比較例乳液が良い 優劣なし
肌えのなじみ 15名 3名 2名
しっとり感 18名 1名 1名
肌えののび 15名 2名 3名
肌荒れ改善の満足感 16名 1名 3名
肌色改善の満足感 14名 2名 4名
シワの数と深さの改善 18名 1名 1名
下記の組成の乳液を常法により製造した。
南酸棗の葉抽出物(製造実施例1) 1g
ホホバオイル 4g
オリーブオイル 2g
スクワラン 2g
セタノール 2g
モノステアリン酸グリセリル 2g
ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.0) 2.5g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 2g
黄杞エキス 0.1g
イチョウ葉エキス 0.1g
コンキオリン 0.1g
オウバクエキス 0.1g
カミツレエキス 0.1g
1,3-ブチレングリコール 3g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
香料 0.05g
精製水 残部(全量を100gとする)
下記組成の化粧水を常法により製造した。
南酸棗の葉抽出物(製造実施例1) 2g
グリセリン 3g
1,3-ブチレングリコール 3g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 0.5g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
クエン酸 0.1g
クエン酸ソーダ 0.1g
油溶性甘草エキス 0.1g
海藻エキス 0.1g
キシロビオースミクスチャー 0.5g
クジンエキス 0.1g
香料 0.05g
精製水 残部(全量を100gとする)
下記組成のクリームを常法により製造した。
南酸棗の葉抽出物(製造実施例1) 1g
流動パラフィン 5g
サラシミツロウ 4g
セタノール 3g
スクワラン 10g
ラノリン 2g
ステアリン酸 1g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 1.5g
モノステアリン酸グリセリル 3g
1,3-ブチレングリコール 6g
酵母抽出液 0.1g
シソ抽出液 0.1g
ジユ抽出液 0.1g
シナノキ抽出液 0.1g
パラオキシ安息香酸メチル 1.5g
香料 0.1g
精製水 残部(全量を100gとする)
下記組成のパックを常法により製造した。
南酸棗の葉抽出物(製造実施例1) 5g
ポリビニルアルコール 15g
ポリエチレングリコール 3g
プロピレングリコール 7g
エタノール 10g
セージ抽出液 0.1g
トウキ抽出液 0.1g
ニンジン抽出液 0.1g
パラオキシ安息香酸エチル 0.05g
香料 0.05g
精製水 残部(全量を100gとする)
下記の混合物を打錠して,錠剤状栄養補助食品を製造した。
南酸棗の葉抽出物(製造実施例1) 50重量部
粉糖(ショ糖) 178重量部
ソルビット 10重量部
グリセリン脂肪酸エステル 12重量部
下記の混合物を顆粒状に形成して栄養補助食品を製造した。
南酸棗の葉抽出物(製造実施例1) 34重量部
ビートオリゴ糖 1000重量部
ビタミンC 167重量部
ステビア抽出物 10重量部
Claims (2)
- コエロスポンディアス(Choerospondias)属に属する植物の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗アレルギー性炎症剤。
- 前記抽出物がヒアルロニダーゼ阻害作用、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ阻害作用およびヒスタミン遊離阻害作用からなる群より選ばれる1種または2種以上の作用を有することを特徴とする請求項1記載の抗アレルギー性炎症剤。
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