JP2003040781A - 飲食物および医薬品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規制癌剤を提供すること 【解決手段】 ヘスペリジン配糖体を含有する癌抑制剤
が提供される。この癌抑制剤によれば、ヒトを含む哺乳
動物の悪性腫瘍を日常経口的に摂取でき、かつ、副作用
がなく、迅速に改善治療することができる。この癌抑制
剤は、大腸癌、口腔癌、食道癌、および胃癌などに有効
である。この癌抑制剤は、フラボノイド化合物（例え
ば、ディオスミン、ルテオリン、またはケルセチン）の
ひとつまたは複数と組み合わされて、癌抑制剤組成物が
提供される。またこの癌抑制剤は、飲食物に含まれても
よい。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は癌抑制剤（制癌剤ま
たは抗癌剤ともいう）に関する。この癌抑制剤は、発癌
を予防、または、治療するために、飲食物、または、医
薬品として利用される。

【０００２】

【従来の技術】天然にはさまざまな生理活性を持ったフ
ラボノイド化合物が数多く知られている。しかしなが
ら、その多くのものは、ｉｎ ｖｉｖｏでの生理活性が
確認されていなかったり、たとえｉｎ ｖｉｖｏで生理
活性が確認されていても難溶性であるため、食品素材と
しては充分には利用されていないのが現状である。

【０００３】みかんなど柑橘類に含まれるヘスペリジン
もそのひとつで、古くからビタミンＰとして血圧を下げ
る作用が知られている（神谷真太郎、新ビタミン学、
（日本ビタミン学会）１９６９、ｐ４３９）。近年で
は、抗アレルギー作用（松田英秋ｅｔ ａｌ．；薬学雑
誌、１１１、１９３−１９８（１９９１）、 Ｊ．
Ａ．Ｄａ Ｓｉｌｖａ Ｅｍｉｍ ｅｔ ａｌ．；
Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ４６，
１１８−７１２（１９９４） ）、ＬＤＬ−コレステ
ロールを減少させ血中コレステロール値を改善する作用
（Ｍ． Ｔ． Ｍｏｎｆｏｒｔｅ ｅｔ ａｌ．； Ｉ
ｌ Ｆａｒｍａｃｏ， ５０， ５９５−５９９（１９
９５））、抗癌作用（Ｔ． Ｔａｎａｋａ， ｅｔ ａ
ｌ．； Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ５４，
４６５３−４６５９（１９９４）、Ｔ．Ｔａｎａｋａ，
ｅｔ ａｌ．； Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，
５７， ２４６−２５２（１９９７）Ｔ． Ｔａｎａ
ｋａ， ｅｔ ａｌ．； Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉ
ｓ， １８， ７６１−７６９（１９９７）、Ｔ． Ｔ
ａｎａｋａ， ｅｔ ａｌ．； Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ
ｅｓｉｓ， １８， ９５７−９６５（１９９７））な
どの生理作用も報告され、さらには、前駆脂肪細胞の分
化を促進することが明らかになり、糖尿病などの症状を
改善する作用も期待されているが、食品用途にはほとん
ど利用されていない。

【０００４】ここで、ヘスペリジンが有効な抗癌作用を
示すためには、比較的多量のヘスペリジンを投与する必
要があった。多量のヘスペリジンを投与すると、ヘスペ
リジンが難溶性であるため、例えば、血管内あるいは腹
腔内で不溶化または結晶化し、生体に危害を及ぼすとい
う欠点があった。また、ヘスペリジンを飲食物に用いる
場合には、難溶性であるため、消化管内で不溶化または
結晶化し、吸収されずそのまま排出されるという欠点が
あった。

【０００５】また、ヘスペリジンを飲食物に用いる場合
には、溶解性が悪いという欠点があった。さらに、ヘス
ペリジンは独特の臭い（薬品的な臭い）を有するという
特徴がある。このため、一般的に、ヘスペリジンを食品
に添加すると、ヘスペリジンの独特の臭いにより、食品
の味または風味が低下しやすい。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、前記課題を
解決することを目的とする。具体的には、日常経口的に
摂取でき、かつ、副作用がなく悪性腫瘍に対し有効な癌
抑制剤（発癌抑制剤）を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、以下の
抑制剤、組成物および飲食物が提供される。

【０００８】（１） ヘスペリジン配糖体を含有する、
癌発生抑制剤。

【０００９】（２） 抑制される癌が大腸癌である、上
記項１に記載の抑制剤。

【００１０】（３） 抑制される癌が口腔癌である、上
記項１に記載の抑制剤。

【００１１】（４） 抑制される癌が食道癌である、上
記項１に記載の抑制剤。

【００１２】（５） 抑制される癌が胃癌である、上記
項１に記載の抑制剤。

【００１３】（６） ヘスペリジン配糖体と、フラボノ
イド化合物の１種または複数種とを含む、癌抑制剤組成
物であって、該フラボノイド化合物が、ヘスペリジン配
糖体ではない、組成物。

【００１４】（７） 前記フラボノイド化合物が、ヘス
ペリジン、ディオスミン、ルテオリン、またはケルセチ
ンである、癌抑制剤組成物。

【００１５】（８） 抑制される癌が大腸癌である、上
記項６または７に記載の組成物。

【００１６】（９） 抑制される癌が口腔癌である、上
記項６または７に記載の組成物。

【００１７】（１０） 抑制される癌が食道癌である、
上記項６または７に記載の組成物。

【００１８】（１１） 抑制される癌が胃癌である、上
記項６または７に記載の組成物。

【００１９】（１２） 上記項１〜５のいずれか１項に
記載の抑制剤を含有する制癌用飲食物。

【００２０】（１３） 制癌作用を有するフラボノイド
化合物の配糖体を含有する、癌抑制剤。

【００２１】（１４） 前記制癌作用を有するフラボノ
イド化合物が、ヘスペリジン、ディオスミン、ルテオリ
ン、またはケルセチンである、上記項１３の癌抑制剤。

【００２２】

【発明の実施の形態】本発明の出願者は鋭意研究の結
果、フラボノイド化合物の配糖体、例えば、ヘスペリジ
ンに糖が結合したヘスペリジン配糖体（α−グリコシル
ヘスペリジンとも称する）を生体に投与することによ
り、癌の発生が著しく減少することを見出した。つま
り、フラボノイド化合物の配糖体（例えば、ヘスペリジ
ン配糖体）単独、または、フラボノイド化合物の配糖体
とフラボノイド化合物（例えば、ヘスペリジン）とを共
存させたものを生体に投与することにより、発癌を抑制
する生理活性を発揮できることを初めて明らかにした。

【００２３】したがって、充分な生理活性が得られなか
ったフラボノイド化合物（例えば、ヘスペリジン）も顕
著な効果が期待でき、しかも投与量を大幅に減じ、生体
にかかる負担を減らすことができるようになった。

【００２４】上述したように、ヘスペリジンは難溶性で
あるため、血管内あるいは腹腔内で不溶化または結晶化
し易い。血管内あるいは腹腔内で不溶化または結晶化す
ると、それが異物として認識され、生体において不要な
免疫反応が起こる可能性がある。これが炎症性サイトカ
インを活性化すれば、アレルギーや免疫疾患などきわめ
て重要な問題を引き起こすことになる。経口的であれ、
経皮的であれ、または注射であれ、一般に不溶なもの、
過剰量のものを生体に導入することは慎まねばならな
い。健康の維持向上を考えれば、生体にとって、必要な
ものを必要なときに必要な量だけ供給することが最善で
あることは自明である。従って、本発明により、投与量
を減少させることができるという効果は、極めて重要な
意義を有する。

【００２５】本発明の効果はヘスペリジンの場合に顕著
であるが、ヘスペリジン以外のフラボノイド化合物であ
っても発癌抑制作用を有するものであれば、それを配糖
化したものは同様の効果を発揮する。

【００２６】例えば、ディオスミンは単独およびヘスペ
リジンとの混合物が口腔癌、食道癌、大腸癌などを抑制
することも報告されており（Ｔ． Ｔａｎａｋａ， ｅ
ｔａｌ．； Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ５
７， ２４６−２５２（１９９７）Ｔ． Ｔａｎａｋ
ａ， ｅｔ ａｌ．； Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉ
ｓ， １８， ７６１−７６９（１９９７）、Ｔ． Ｔ
ａｎａｋａ， ｅｔ ａｌ．； Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ
ｅｓｉｓ， １８， ９５７−９６５（１９９７））、
同様の効果を期待できる。さらに、ケルセチン、ルテオ
リンなども発癌抑制作用が報告されており、同様の効果
を期待できる。

【００２７】上記のように、ディオスミンをヘスペリジ
ンと組み合わせることにより発癌抑制効果が得られるこ
とが明らかとなっているので、フラボノイド化合物の配
糖体との組み合わせにより相加的あるいは相乗的な効果
が得られることが期待できる。

【００２８】そして、それらを応用した飲食物、医薬品
を開発し、本発明を完成することができた。

【００２９】以下、この発明について詳細に述べる。

【００３０】配糖体作成のための糖転移反応は通常の条
件で行なうことができる。例えば、糖転移反応のために
用いる酵素は糖転移酵素であれば、いずれのものでも利
用できる。つまり、サイクロデキストリン合成酵素、ア
ミラーゼなどを用いて反応を行なうことができ、ヘスペ
リジン配糖体を得ることができる（Ｔ． Ｋｏｍｅｔａ
ｎｉ， ｅｔ ａｌ， Ｂｉｏｓｃｉ． Ｂｉｏｔｅｃ
ｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．， ５８， ５１７−５２０
（１９９４）． Ｔ． Ｋｏｍｅｔａｎｉ， ｅｔ ａ
ｌ， Ｂｉｏｓｃｉ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ．， ５８，１９９０−１９９４（１９９４）．
Ｔ． Ｋｏｍｅｔａｎｉ， ｅｔ ａｌ， Ｂｉｏｓｃ
ｉ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．， ６０，
６４５−６４９（１９９６）．）。また、この時、酵
素の起源などは問わない。これに加えて、有機化学的な
反応や植物組織培養を用いて、ヘスペリジンを配糖化す
ることも可能である（Ｅ． Ｌｅｗｉｎｓｏｈｎ， ｅ
ｔ ａｌ．， Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２
５， ２５３１−２５３５（１９８６））。

【００３１】ヘスペリジン以外のフラボノイド化合物の
配糖体も、公知の方法で調製することができ、またはヘ
スペリジンと同様の配糖化方法で調製することができ
る。例えば、上述したヘスペリジンの代わりにディオス
ミンを用いることにより、ディオスミンの配糖体を得る
ことができる。

【００３２】本明細書中においてヘスペリジン配糖体と
は、例えば特開平７−１０７９７２によって調製される
ヘスペリジンにブドウ糖が１から２０個程度ついた配糖
体をいう。本明細書中においてフラボノイド化合物の配
糖体とは、同様に、フラボノイドにブドウ糖が１から２
０個程度ついた配糖体をいう。なお、本明細書中におい
て用語「ヘスペリジン」は、ヘスペリジンの配糖体を含
まない。さらに、本明細書中において、第１の成分とし
てフラボノイド化合物（例えば、ヘスペリジン）の配糖
体を含有し、さらに第２の成分としてフラボノイド化合
物（例えば、ヘスペリジン）を含む組成物に言及する場
合、当該第２の成分の「フラボノイド化合物」は、第１
の成分であるフラボノイド化合物（例えば、ヘスペリジ
ン）の配糖体を含まない。

【００３３】ヘスペリジン配糖体は、例えば、以下のよ
うな条件で調製される。

【００３４】糖供与体として可溶性澱粉を５重量％、及
び受容体としてヘスペリジンを０．５重量％含有するｐ
Ｈ９．５の基質溶液に、例えばＡｌｋａｌｏｐｈｉｌｉ
ｃＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． Ａ２−５ａ（産業技術総
合研究所特許生物寄託センター受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−
１３８６４）の生産するアルカリ耐性のサイクロデキス
トリングルカノトランスフェラーゼ（以下「ＣＧＴａｓ
ｅ」という）すなわち１，４−α−Ｄ−Ｇｌｕｃａｎ：
４−α−Ｄ−（１，４−ｇｌｕｃａｎｏ）−ｔｒａｎｓ
ｆｅｒａｓｅ（Ｅ．Ｃ． ２．４．１．１９）を２ユニ
ット／ｍｌとなるように加えて、４０度で反応を開始さ
せた。１６時間の反応後、１００度で１０分間の加熱等
により、反応を停止させた。ここでは、ヘスペリジンの
溶解性を上げるために、ｐＨ９．５というアルカリ性領
域で反応を行っているが、この方法以外に、ヘスペリジ
ンの溶解性を上げて生産性を高める方法として、β−サ
イクロデキストリン（以下β−ＣＤという）を反応液中
に添加し、β−ＣＤとヘスペリジンを包接させる方法、
メチルセルロース等の増粘多糖類を添加して、ヘスペリ
ジンを可溶化させる方法などがある。またこれらの方法
を組み合わせる事により、ヘスペリジンの溶解度を高め
る事ができる。酵素反応を行った液は、凍結乾燥、噴霧
乾燥等の操作により粉末化でき、このように調製された
ヘスペリジン配糖体は、反応液に添加したヘスペリジン
の７０〜８０％が配糖化されている。したがって、ヘス
ペリジン配糖体としての純度は、添加する酵素量、糖供
与体及び受容体濃度等で変わってくるが、通常２〜５０
％程度であり、未反応のヘスペリジン及びデキストリン
を含んでいる。このようにして生成されたヘスペリジン
配糖体は、通常、ヘスペリジン１分子にグルコースが１
から２０程度結合した配糖体の混合物である。ヘスペリ
ジン配糖体は、ヘスペリジン１分子にグルコースが１か
ら１５個程度結合していることが好ましい。より好まし
くは１〜１０個である。

【００３５】このようにした試料は、そのままヘスペリ
ジン配糖体として使用してもよく、また必要に応じて、
疎水性樹脂等を用いたカラムクロマトグラフィーによ
り、精製を行ってもよい。

【００３６】例えば、可溶性澱粉１〜１０重量％、ヘス
ペリジン１〜１０重量％、メチルセルロース０．１〜１
％を含むｐＨ７〜１２の溶液に、アルカリ耐性のＣＧＴ
ａｓｅを添加し、３５〜４５℃で１０〜２４時間酵素反
応を行う。反応終了後、加熱処理を行うことにより、酵
素反応を停止させる。このようにした反応液から、クロ
マトグラフィーにより、未反応のデキストリンおよびメ
チルセルロースを除去する。その後、乾燥することによ
り、粉末試料が得られる。

【００３７】本発明で用いるヘスペリジン配糖体とヘス
ペリジンとの混合物において、ヘスペリジン配糖体の含
有量は混合物全体に対して１０重量％以上、好ましくは
２０重量％以上、より好ましくは５０重量％以上であ
る。上限は特になく、１００重量％であってもよい。９
０重量％以下であってもよく、８０重量％以下であって
もよい。

【００３８】試料の色調は通常、粉末でわずかに黄色を
帯びており、ほとんど無味無臭である。また通常のヘス
ペリジン配糖体は、ｐＨ３〜１３の間で安定である。加
熱に対しては通常、中性では１２０℃、１５分間安定で
ある。

【００３９】ヘスペリジン配糖体の消化性は以下のよう
に評価することができる。消化酵素として、例えば、ラ
ットの小腸のアセトンパウダーから蒸留水で抽出した酵
素液を用いる。ヘスペリジン配糖体の試料（例えば、ヘ
スペリジンモノグルコサイドとヘスペリジンジグルコサ
イドの混合物）を蒸留水に溶解する。酵素液にヘスペリ
ジン配糖体溶液を加え、インキュベートし、経時的にＨ
ＰＬＣで分析する。ヘスペリジンまたはヘスペリジン配
糖体の消失を観察することにより消化性が評価され得
る。このようにヘスペリジン配糖体溶液にラット小腸由
来の酵素を作用させて容易にヘスペリジンに分解されれ
ば、ヘスペリジン配糖体は、ヘスペリジンと同様非常に
安全性の高い物質であることが確認される。従って短時
間で分解されてＨＰＬＣのピークが消失することが好ま
しい。本発明者らが行なった実験結果によると、通常、
３〜５時間以内に加水分解されることが明らかとなっ
た。

【００４０】一般にヘスペリジン配糖体は無毒性である
ことが知られている。ラットに対する急性毒性試験で死
亡例は皆無である。生化学血液検査および病理組織学的
検査においても異常が認められていない。例えば、ヘス
ペリジン配糖体のＬＤ５０は通常２０００ｍｇ／Ｋｇラ
ット前後であり、また、変異原性は通常認められない。

【００４１】本発明に用いるフラボノイド化合物の配糖
体（例えば、ヘスペリジン配糖体）は、モノグルコサイ
ドであっても、ダイグルコサイドであっても良い。さら
には、モノグルコサイドとオリゴグルコサイドの混合物
でも同様の効果を発揮する。加えて、この配糖体にヘス
ペリジンやそのアグリコンであるヘスペレチンが共存し
ても良い。

【００４２】さらに、ヘスペリジン配糖体に発癌抑制作
用を有する他のフラボノイド化合物を共存させることも
可能である。ヘスペリジン配糖体の共存により難溶性の
フラボノイド化合物であっても可溶化されることがわか
っているので、そのフラボノイド化合物単独で使用する
時より高い効果が期待できる。

【００４３】フラボノイド化合物の配糖体（例えば、ヘ
スペリジン配糖体）は、そのまま溶液、粉末顆粒、錠
剤、乳剤、ゼリー状など任意の形態で単独投与、また
は、他の飲食物に混合して飲食することもできる。ヘス
ペリジン配糖体は、上述のように、熱安定性やｐＨ安定
性が高いので、例えば、和菓子、洋菓子、氷菓、飲料、
スプレッド、ペースト、調味料、漬物、ビン缶詰、畜肉
加工品、魚肉・水産加工品、乳・卵加工品、野菜加工
品、果実加工品、穀類加工品など、広い範囲に利用する
ことができる。

【００４４】フラボノイド化合物の配糖体（例えば、ヘ
スペリジン配糖体）の投与量は、有効な制癌効果を得ら
れる量であれば特に限定されない。

【００４５】投与量は、対象となる疾患の種類、程度に
より異なるが、１〜５００００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で
用いるのが好ましく、１０〜５０００ｍｇ／ｋｇ／日の
範囲で用いるのがより好ましく、２０〜２０００ｍｇ／
ｋｇ／日の範囲がさらに好ましく、５０〜１０００ｍｇ
／ｋｇ／日の範囲が特に好ましい。飲料として常用する
場合には、０．０１〜１．０重量％溶液とすることが好
ましく、０．０５〜０．５重量％がより好ましい。溶液
の摂取量は、１０ｍｌ〜５０００ｍｌ／日が好ましく、
１００ｍｌ〜５００ｍｌ／日がより好ましい。食品とす
る場合には、食品中のフラボノイド配糖体含有量を０．
０１〜１．０重量％とすることが好ましく、０．０５〜
０．５重量％がより好ましい。フラボノイド化合物の配
糖体含有食品の摂取量は、１０ｍｇ〜５０００ｍｇ／日
が好ましく、１００ｍｇ〜５００ｍｇ／日がより好まし
い。

【００４６】

【実施例】（製造例）以下に、ヘスペリジン配糖体の製
造例を示す。

【００４７】可溶性澱粉５重量％、ヘスペリジン３重量
％、メチルセルロース０．５％を含むｐＨ９．５の溶液
に、アルカリ耐性のＣＧＴａｓｅを２ｕ／ｍｌの濃度に
なるように添加し、４０℃で１６時間酵素反応を行っ
た。反応終了後、１００℃で１０分間加熱処理を行うこ
とにより、酵素反応を停止させた。このようにした反応
液から、アンバーライトＸＡＤ−１６樹脂を用いたカラ
ムクロマトグラフィーにより、未反応のデキストリン及
びメチルセルロースを除去した後、噴霧乾燥をおこなっ
た。この粉末試料には、約２０％の未反応のヘスペリジ
ンが含まれており、ヘスペリジン配糖体としての純度は
約８０％であった。

【００４８】試料の色調は粉末でわずかに黄色を帯びて
いるが、ほとんど無味無臭であった。またｐＨ３〜１３
の間で安定であった。加熱に対しては中性では１２０
℃、１５分間安定であった。

【００４９】ヘスペリジン配糖体の消化性をテストし
た。消化酵素としては、ラットの小腸のアセトンパウダ
ー（Ｓｉｇｍａ社製）１００ｍｇから、酵素を１ｍｌの
蒸留水で抽出し、抽出液の遠心上清を酵素液とした。試
験を行ったヘスペリジン配糖体はヘスペリジンモノグル
コサイドとヘスペリジンジグルコサイドがほぼ１：１の
比で含まれる混合物を２０ｍｇ／ｍｌで蒸留水に溶解し
たものを用いた。このようにした酵素液５０μｌにヘス
ペリジン配糖体溶液５０μｌを加え、３７度でインキュ
ベートし、経時的にＨＰＬＣで分析した。その結果、ヘ
スペリジンモノグルコサイドは１時間で、ヘスペリジン
ジグルコサイドは４時間で完全に分解され消失した。

【００５０】このようにヘスペリジン配糖体溶液にラッ
ト小腸由来の酵素を作用させたところ、容易にヘスペリ
ジンに分解されたため、ヘスペリジン配糖体は、ヘスペ
リジンと同様非常に安全性の高い物質であると考えられ
る。

【００５１】生化学血液検査および病理組織学的検査に
おいても異常が認められなかった。ヘスペリジン配糖体
のＬＤ５０は２０００ｍｇ／Ｋｇラットであり、また、
変異原性は認められなかった。

【００５２】このようにして得られたヘスペリジン配糖
体混合物粉末試料を、以下の実施例におけるヘスペリジ
ン配糖体の試料として用いた。

【００５３】次に、本願の実施例を記載する。

【００５４】（実施例１）４週齢のオスのＦ３４４ラッ
ト（体重、約３００ｇ）を湿度５０±１０％、室温２３
±２℃、１２時間の明暗サイクルで飼育した。飲料水と
基本食（ＣＥ−２；日本クレア社製）は自由に摂食させ
た。ＣＥ−２の組成は、炭水化物４５．５％、蛋白質２
４．８％、脂肪４．６％、灰分７．２％、セルロース
４．２％、ミネラル３．９％、ビタミン混合物１％、水
分８．８％であり、本試験に用いたフラボノイド類は全
く含んでいない。

【００５５】１週間の予備飼育の後、発癌を起こすアゾ
キシメタン（ＡＯＭ）２０ｍｇ／Ｋｇ ｂｏｄｙ ｗｅ
ｉｇｈｔをラットに１週間毎に２回腹腔内に注射した。
コントロール区は基本食を与えて４週間飼育した。ヘス
ペリジン配糖体投与区Ａは、０．０５％ヘスペリジン配
糖体を添加した飲料水を、ＡＯＭ投与１週間前からＡＯ
Ｍ投与２週間後まで与え、その後は基本食を与えて計４
週間飼育した。また、ヘスペリジン配糖体投与区Ｂは、
０．１％ヘスペリジン配糖体を添加した飲料水をヘスペ
リジン配糖体投与区Ａと同様に与え４週間飼育した。ヘ
スペリジン配糖体投与区Ｃは、１％ヘスペリジン配糖体
を添加した飲料水をヘスペリジン配糖体投与区Ａと同様
に与え４週間飼育した。これに加えて、基本食と飲料水
のみを与えた対照区Ａ、基本食と１％ヘスペリジン配糖
体を添加した飲料水のみを与えた対照区Ｂ（共にＡＯＭ
を与えなかった）も設定した。

【００５６】本試験中に各試験区間で摂食量、体重に有
意差は観察されなかった。また、解剖時の臓器重量にも
有意差はなかった。

【００５７】４週間後に麻酔下で解剖し、大腸を摘出し
て発生している前癌症状を観察した。その結果を表１に
示した。

【００５８】

【表１】 ＡＣＦ；ａｂｅｒｒｅｎｔ ｃｒｙｐｔ ｆｏｃｉ異型
腺窩巣、 ｃｏｌｏｎ；大腸、 ＡＯＭ；アゾキシメタン、 Ｈｓｐ−Ｇｎ；ヘスペリジン配糖体、 Ｎｏｎｅ；無添加 コントロール区でのＡＣＦ発生数を１００とすると、ヘ
スペリジン配糖体投与区はいずれもＡＣＦ数が半減し、
発癌抑制効果を示した。なお、対照区Ａ、ＢともにＡＣ
Ｆの発生は観察されなかった。

【００５９】（実施例２）実施例１と同様にＦ３４４ラ
ットを用い、ヘスペリジンの投与効果について検証し
た。

【００６０】１週間の予備飼育の後、発癌を起こすアゾ
キシメタン（ＡＯＭ）２０ｍｇ／Ｋｇ ｂｏｄｙ ｗｅ
ｉｇｈｔをラットに１週間毎に２回腹腔内に注射した。
コントロール区は基本食を与えて４週間飼育した。ヘス
ペリジン投与区Ａは、０．０５％ヘスペリジンを添加し
た基本食を、ＡＯＭ投与１週間前から投与１週間後まで
与え、その後は基本食を与えて計４週間飼育した。ま
た、ヘスペリジン投与区Ｂは、０．１％ヘスペリジンを
添加した基本食をヘスペリジン投与区Ａと同様に与え４
週間飼育した。ヘスペリジン投与区Ｃは、１％ヘスペリ
ジンを添加した基本食をヘスペリジン投与区Ａと同様に
与え４週間飼育した。これに加えて、基本食と引用水の
みを与えた対照区Ａ、基本食と１％ヘスペリジンを添加
した飲料水のみを与えた対照区Ｂ（共にＡＯＭを与えな
かった）も設定した。

【００６１】本試験中に各試験区間で摂食量、体重に有
意差は観察されなかった。また、解剖時の臓器重量にも
有意差はなかった。

【００６２】４週間後に麻酔下で解剖し、大腸を摘出し
て、発生している前癌症状を観察した。その結果を表２
に示した。

【００６３】

【表２】 Ｈｓｐ：ヘスペリジン コントロール区でのＡＣＦ発生数を１００とすると、ヘ
スペリジン投与区Ｃ（１％添加区）はＡＣＦ数が半減
し、発癌抑制効果を示したが、ヘスペリジン投与区Ｂ
（０．１％添加区）では、効果が低くなり、ヘスペリジ
ン投与区Ａ（０．０５％添加区）では、ほとんど効果が
見られなかった。

【００６４】実施例１と２を比較すると、ヘスペリジン
配糖体は、ヘスペリジンよりも低濃度で発癌抑制効果を
示していることが明らかである。

【００６５】（実施例３）口腔癌予防に関する実験は、
発癌剤として４−ニトロキノリン １−オキサイド（４
ＮＱＯ）を用いて行った。４週齢のオスのＦ３４４ラッ
ト（体重、約３００ｇ）を湿度５０±１０％、室温２３
±２℃、１２時間の明暗サイクルで飼育した。飲料水と
基本食（ＣＥ−２；日本クレア社製）は自由に摂食させ
た。ＣＥ−２の組成は、炭水化物４５．５％、蛋白質２
４．８％、脂肪４．６％、灰分７．２％、セルロース
４．２％、ミネラル３．９％、ビタミン混合物１％、水
分８．８％で、本試験に用いたフラボノイド類は全く含
んでいない。

【００６６】１週間の予備飼育の後、コントロール区は
基本食に加えて、発癌を起こす４ＮＱＯを２０ｍｇ／Ｋ
ｇ ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔを飲料水に添加してラット
に９週間摂取させた。ヘスペリジン配糖体投与区Ａは、
コントロール区と同様に４ＮＱＯを与えた後に１週間基
本食のみを摂取させ、その後、基本食に加えて０．１％
ヘスペリジン配糖体を添加した飲料水を２９週間摂取さ
せた。また、ヘスペリジン配糖体投与区Ｂは、ヘスペリ
ジン配糖体投与区Ａと同様の処理を行ったが、ヘスペリ
ジン配糖体の添加量は１％とした。これらに加えて、基
本食と飲料水のみを与えた対照区Ａ、基本食に１％ヘス
ペリジン配糖体を添加した飲料水を与えた対照区Ｂ（共
に４ＮＱＯを与えなかった）も設定した。

【００６７】本試験中に各試験区間で摂食量、体重に有
意差は観察されなかった。また、解剖時の臓器重量にも
有意差はなかった。

【００６８】２９週間後に麻酔下で解剖し、口腔内で発
生している癌症状を観察した。その結果を表３に示し
た。

【００６９】

【表３】 ４ＮＱＯ；４−ニトロキノリン １−オキサイド、 Ｈｓｐ−Ｇｎ；ヘスペリジン配糖体、Ｎｏｎｅ；無添加 （ ）；発生率（発生個体数／実験個体数） Ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ（Ｐａｐｉｌｌａｒｙ）；過形
成；（乳頭状）組織などの増殖（腫瘍性増殖に移行す
る）。 Ｄｙｓｐｌａｓｉａ；異形成；持続性のある上皮の変化
（腫瘍性増殖に移行する）。 Ｔｕｍｏｒ；腫瘍 コントロール区でのＨｙｐｅｒｐｌａｓｉａ（Ｐａｐｉ
ｌｌａｒｙ）、Ｐｙｓｐｌａｓｉａ、Ｔｕｍｏｒの発生
数は全体の８１％、８８％、１００％であったが、ヘス
ペリジン配糖体投与区ではいずれも発生率がほぼ半減
し、癌抑制効果を示した。なお、対照区Ａ、Ｂともに腫
瘍の発生は観察されなかった。

【００７０】（実施例４Ａ）食道癌予防に関する実験
は、実施例１の発癌剤（アゾキシメタン）に換えてＮ−
メチル−Ｎ−アミルニトロサミン１２．５ｍｇ／Ｋｇ
ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔをＦ３４４ラットに腹腔内注射
した以外は、同様の実験を行った。その結果、良好な発
癌抑制効果が確認された。

【００７１】（実施例４Ｂ）食道癌予防に関する実験
は、実施例２の発癌剤（アゾキシメタン）に換えてＮ−
メチル−Ｎ−アミルニトロサミン１２．５ｍｇ／Ｋｇ
ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔをＦ３４４ラットに腹腔内注射
した以外は、同様の実験を行った。

【００７２】実施例４Ａと４Ｂの結果を比較すると、ヘ
スペリジン配糖体は、ヘスペリジンよりも低濃度で発癌
抑制効果を示していることが明らかとなった。

【００７３】（実施例５Ａ）胃癌予防に関する実験は、
実施例１の発癌剤（アゾキシメタン）に換えてＮ−メチ
ル−Ｎ−アミルニトロサミン１２．５ｍｇ／Ｋｇ ｂｏ
ｄｙ ｗｅｉｇｈｔをＦ３４４ラットに腹腔内注射し、
同様の実験を行った。その結果、その結果、良好な発癌
抑制効果が確認された。

【００７４】（実施例５Ｂ）胃癌予防に関する実験は、
実施例２の発癌剤（アゾキシメタン）に換えてＮ−メチ
ル−Ｎ−アミルニトロサミン１２．５ｍｇ／Ｋｇ ｂｏ
ｄｙ ｗｅｉｇｈｔをＦ３４４ラットに腹腔内注射し、
同様の実験を行った。

【００７５】実施例５Ａと５Ｂの結果を比較すると、ヘ
スペリジン配糖体は、ヘスペリジンよりも低濃度で発癌
抑制効果を示していることが明らかとなった。

【００７６】（実施例６Ａ）オレンジジュースにヘスペ
リジン配糖体を０．１％添加したジュースを作成した。
オレンジジュースは通常の搾汁、殺菌、充填工程を経て
作成した。味、香りにほとんど影響のないオレンジジュ
ースを作ることができた。

【００７７】一般的に、オレンジジュースに０．１％程
度のヘスペリジンを添加すると味および香りが低下す
る。ヘスペリジンは独特の臭い（薬品的な臭い）を有す
るためである。しかし、本実施例では、ヘスペリジン配
糖体を０．１％添加してもヘスペリジンを添加した場合
のような欠点のないジュースが得られた。

【００７８】（実施例６Ｂ）凍結された濃縮ジュースを
還元し、これに０．２％ヘスペリジン配糖体を添加して
ジュースを作成した。味、香りにほとんど影響のないオ
レンジジュースを作ることができた。

【００７９】一般的に、オレンジジュースに０．２％程
度のヘスペリジンを添加すると味および香りが低下す
る。ヘスペリジンは独特の臭い（薬品的な臭い）を有す
るためである。しかし、本実施例では、ヘスペリジン配
糖体を０．２％添加してもヘスペリジンを添加した場合
のような欠点のないジュースが得られた。

【００８０】実施例６Ａのジュースと実施例６Ｂのジュ
ースとを比較した。ヘスペリジン配糖体の添加量が多く
なれば、ややマイルドなジュースになる傾向があった。

【００８１】（実施例６Ｃ）凍結された濃縮オレンジジ
ュースを還元し、これに０．０７５％ヘスペリジン配糖
体を添加してジュースを作成した。味、香りにほとんど
影響がなく、苦味および酸味がまろやかなオレンジジュ
ースを作ることができた。

【００８２】（実施例６Ｄ）凍結された濃縮グレープフ
ルーツジュースを還元し、これに０．０７５％ヘスペリ
ジン配糖体を添加してジュースを作成した。味、香りに
ほとんど影響がなく、苦味および酸味がまろやかなグレ
ープフルーツジュースを作ることができた。

【００８３】（実施例７Ａ）グラニュー糖７０部、水飴
３０部、水２０部、酸味料１部、香料および着色料を適
量配合したキャンディを作成した。グラニュー糖は水に
完全溶解しながら１１０℃まで加熱し、水飴を加えて１
２５℃まで温度を上げた。さらに、１４５℃で煮詰めた
後、冷却板上に流し、酸味料、続いて、香料および着色
料、０．２部のヘスペリジン配糖体を混合し、キャンデ
ィとして成形した。ヘスペリジン配糖体を添加しても
味、香りにほとんど影響のないキャンディを作ることが
できた。

【００８４】一般的に、キャンディに０．２部程度のヘ
スペリジンを添加すると味および香りが低下する。ヘス
ペリジンは独特の臭い（薬品的な臭い）を有するためで
ある。しかし、本実施例では、ヘスペリジン配糖体を
０．２部添加してもヘスペリジンを添加した場合のよう
な欠点のないキャンディが得られた。

【００８５】（実施例７Ｂ）ヘスペリジン配糖体の添加
量を０．５部に変更した以外は実施例７Ａと同様にキャ
ンディを作成した。ヘスペリジン配糖体を添加しても
味、香りにほとんど影響のないキャンディを作ることが
できた。

【００８６】一般的に、キャンディに０．２部程度のヘ
スペリジンを添加すると味および香りが低下する。しか
し、本実施例では、ヘスペリジン配糖体を０．５部添加
してもヘスペリジンを添加した場合のような欠点のない
キャンディが得られた。

【００８７】実施例７Ａのキャンディと実施例７Ｂのキ
ャンディを比較した。ヘスペリジン配糖体の添加量が多
くなれば、ややマイルドな味になる傾向があった。

【００８８】（実施例７Ｃ）ヘスペリジン配糖体の添加
量をさらに変更した以外は、実施例７Ａと同様にキャン
ディを作成した。その結果、ヘスペリジン配糖体の添加
量が多くなるにつれて、ややマイルドな味になる傾向が
確認された。

【００８９】（実施例８）全卵３００部、薄力粉２００
部、砂糖２００部、食用油脂８０部、乳化油脂３０部、
食塩０．６部、ベーキングパウダー４部、ヘスペリジン
配糖体０．５部を常法により混合し、その生地を生地比
重０．５０に調整した。これを１８０℃３０分焼成して
ヘスペリジン配糖体含有スポンジケーキを作成した。ヘ
スペリジン配糖体を添加しても味、香りにほとんど影響
のないケーキを作ることができた。

【００９０】一般的に、スポンジケーキに上記ヘスペリ
ジン配糖体配合量と同量のヘスペリジンを添加すると味
および香りが低下する。しかし、本実施例では、ヘスペ
リジン配糖体を添加してもヘスペリジンを添加した場合
のような欠点のないケーキが得られた。

【００９１】（実施例９）サラダ油７５部、酢２５部、
食塩１部、香辛料適量を１０００ｒｐｍでよく攪拌し、
通常のフレンチドレッシングを得た。一方、この配合に
０．３部のヘスペリジン配糖体を添加し、ヘスペリジン
配糖体配合のフレンチドレッシングを得た。野菜サラダ
にかけて食したところ、ヘスペリジン配糖体を含有しな
いドレッシングと同等の食味、食感が得られた。

【００９２】一般的に、ドレッシングに上記ヘスペリジ
ン配糖体配合量と同量のヘスペリジンを添加すると、ド
レッシングをサラダにかけて食するときの食味および食
感が低下する。しかし、本実施例では、ヘスペリジン配
糖体を添加してもヘスペリジンを添加した場合のような
欠点のないドレッシングが得られた。

【００９３】（実施例１０）卵黄５個、卵４個、グラニ
ュー糖１５０ｇ、牛乳７００ｇの配合で、常法に従いプ
リンを調製した。これにヘスペリジン配糖体を２ｇ配合
したヘスペリジン配糖体配合プリンも調製した。

【００９４】パネラー１５名について調べた結果、ヘス
ペリジン配糖体を添加したプリンも通常のプリンと同等
の食味が得られた。

【００９５】一般的に、プリンに上記ヘスペリジン配糖
体配合量と同量のヘスペリジンを添加すると、食味が低
下する。しかし、本実施例では、ヘスペリジン配糖体を
添加してもヘスペリジンを添加した場合のような欠点の
ないドレッシングが得られた。

【００９６】上記食品に関する実施例６〜実施例１０の
結果からも理解されるように、ヘスペリジン配糖体には
味質の改善作用（苦味、渋味、青臭味などの低減化）が
あるため、添加された食品は、嫌味のないマイルドな風
味になる。例えば、果汁１００％のオレンジジュースや
グレープフルーツジュースでは、０．０７５％程度のヘ
スペリジン配糖体の添加で苦味や酸味のまろやかなジュ
ースとなる。その他の食品においても、通常、０．０３
〜０．１％程度の添加で味質がマイルドになる。

【００９７】他方、ヘスペリジンは独特の臭い（薬品的
な臭い）を有するという特徴がある。このため、その食
品の持つ味や風味の強さによるが、一般的に、ヘスペリ
ジンを食品に０．１％程度以上添加すると、ヘスペリジ
ンの独特の臭いにより、食品の味または風味が低下して
しまう。

【００９８】本発明によれば、そのような欠点が解消さ
れ、味または風味の良好な食品が得られる。

【００９９】

【発明の効果】本発明によれば、上述したように、ヘス
ペリジン配糖体を含む癌抑制剤または飲食物が提供され
る。ヘスペリジン配糖体単独、または、ヘスペリジンと
ヘスペリジン配糖体とを共存させて可溶化したものを経
口投与した場合には、少量の投与量で発癌抑制効果が発
揮される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ２３Ｌ 2/52 Ａ６１Ｋ 31/353 ４Ｂ０４７ Ａ６１Ｋ 31/353 Ａ６１Ｐ 35/00 ４Ｃ０８６ Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ２３Ｌ 1/24 Ａ // Ａ２３Ｌ 1/24 2/02 Ｂ 2/02 2/00 Ｆ (72)発明者 田中 卓二 石川県金沢市諸江町９街区10−303 Ｆターム(参考） 4B014 GB06 GK12 GL03 4B017 LC03 LG02 LK06 LL09 4B018 LB01 LB08 LB09 MD07 MD42 ME08 MF02 4B025 LB18 LG21 LK07 4B032 DB06 DK05 DL20 4B047 LB09 LE03 LG05 4C086 AA01 AA02 BA08 EA11 MA01 MA02 MA04 NA14 ZB26

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ヘスペリジン配糖体を含有する、癌抑制
   剤。
2. 【請求項２】 抑制される癌が大腸癌である、請求項１
   に記載の抑制剤。
3. 【請求項３】 抑制される癌が口腔癌である、請求項１
   に記載の抑制剤。
4. 【請求項４】 抑制される癌が食道癌である、請求項１
   に記載の抑制剤。
5. 【請求項５】 抑制される癌が胃癌である、請求項１に
   記載の抑制剤。
6. 【請求項６】 ヘスペリジン配糖体と、フラボノイド化
   合物の１種または複数種とを含む、癌抑制剤組成物であ
   って、該フラボノイド化合物が、ヘスペリジン配糖体で
   はない、組成物。
7. 【請求項７】 前記フラボノイド化合物が、ヘスペリジ
   ン、ディオスミン、ルテオリン、またはケルセチンであ
   る、請求項６に記載の組成物。
8. 【請求項８】 抑制される癌が大腸癌である、請求項６
   または７に記載の組成物。
9. 【請求項９】 抑制される癌が口腔癌である、請求項６
   または７に記載の組成物。
10. 【請求項１０】 抑制される癌が食道癌である、請求項
    ６または７に記載の組成物。
11. 【請求項１１】 抑制される癌が胃癌である、請求項６
    または７に記載の組成物。
12. 【請求項１２】 請求項１〜５のいずれか１項に記載の
    抑制剤を含有する制癌用飲食物。
13. 【請求項１３】 制癌作用を有するフラボノイド化合物
    の配糖体を含有する、癌抑制剤。
14. 【請求項１４】 前記制癌作用を有するフラボノイド化
    合物が、ヘスペリジン、ディオスミン、ルテオリン、ま
    たはケルセチンである、請求項１３の癌抑制剤。