WO2017047706A1 - 血糖値上昇抑制剤及びこれを含んでなる経口組成物 - Google Patents

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WO2017047706A1
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glucose
branched
glucan mixture
glucan
blood
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PCT/JP2016/077303
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剛 定清
有希 石田
光 渡邊
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株式会社林原
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Definitions

  • the present invention relates to a blood sugar level increase inhibitor, and in particular, to a blood sugar level increase inhibitor that suppresses an increase in blood sugar level after ingesting a monosaccharide, and an oral composition containing the same.
  • diabetes is likely to occur when a high blood glucose level is maintained, and in particular, it is important for prevention of diabetes to suppress an increase in blood glucose level immediately after taking food, so-called postprandial blood glucose level. is there.
  • isomerized sugar a mixture of glucose and fructose obtained by isomerizing glucose, which is a kind of monosaccharide, has been widely used as a sweetener in various foods and drinks, and in particular, relatively large amounts for soft drinks and the like. Therefore, there are many opportunities to ingest monosaccharides through ingestion of beverages regardless of whether or not they are conscious.
  • Monosaccharides such as glucose and fructose are easily absorbed when ingested, leading to an increase in blood sugar level. Therefore, suppressing the increase in blood sugar level after ingesting foods and drinks containing these monosaccharides from the viewpoint of preventing diabetes It is also important.
  • Patent Document 1 discloses that ⁇ -1,3-1,4-glucan obtained from barley endosperm or the like suppresses an increase in blood glucose level during glucose load.
  • Non-Patent Document 1 ⁇ -1,3-1,4-glucan is a human who exhibits abnormal glucose tolerance and is difficult to lower blood glucose level, ie, a so-called “human in the borderline of diabetes”
  • Patent Document 2 discloses that when a rat is fed with high-purity D-psicose together with glucose, an increase in blood glucose level is suppressed.
  • D-psicose itself has a sweet taste, when used in combination with a monosaccharide having a sweet taste, D-psicose can be used without any problem without affecting the taste.
  • an indigestible dextrin (non-patent document 2), which is a kind of water-soluble dietary fiber obtained by processing a heated roasted dextrin after adding a small amount of an inorganic acid, is itself In addition to its low sweetness, it has the effect of suppressing postprandial blood glucose levels and mildly secreting insulin, so it is blended and used in many foods and drinks. As reported in Non-Patent Documents 3 and 4, it does not show an inhibitory effect on the increase in blood glucose level after monosaccharide intake.
  • the present invention is not limited to “humans in the borderline of diabetes”, and has an effect of suppressing an increase in blood glucose level of humans after ingesting monosaccharides. It is an object of the present invention to provide a blood sugar level increase inhibitor that can be easily and safely ingested, and an oral composition comprising the same.
  • the branched ⁇ -glucan mixture which has a branched structure of 1 degree or more and generates isomaltose by digestion with isomaltodextranase, not only suppresses the increase in postprandial blood glucose level, but also It has been found that the increase in blood glucose level is also suppressed.
  • Such knowledge is completely unexpected. This is because the branched ⁇ -glucan mixture is a glucose polymer having a branch, and is a starch-derived mixture similar to indigestible dextrin in that it exhibits water-soluble dietary fiber properties. This is because, similarly to the indigestible dextrin reported in No.
  • the present invention solves the above-mentioned problems by providing an agent for suppressing an increase in blood glucose level after ingestion of a monosaccharide, comprising a branched ⁇ -glucan mixture having the following characteristics (A) to (C) as an active ingredient: It is.
  • Isomaltose is produced by isomalt dextranase digestion.
  • the branched ⁇ -glucan mixture having the above characteristics is not only a safe edible material with no side effects, but also has a low sweetness or tastelessness, and suppresses an increase in human blood glucose level when taken with a monosaccharide. Has an effect. Therefore, the branched ⁇ -glucan mixture having the above characteristics (A) to (C) is extremely useful as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor after taking a monosaccharide.
  • this invention solves said subject by providing the oral composition which comprises a monosaccharide with the said blood glucose level raise inhibitor.
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention itself has low sweetness or tastelessness, it can be used in a wide range and can suppress the blood sugar level rise after ingestion of monosaccharides as well as “humans in the borderline of diabetes”.
  • the oral composition of the present invention contains the blood sugar level increase inhibitor of the present invention, by taking this, the increase in blood sugar level after ingesting monosaccharides can be effectively suppressed easily and safely. can do.
  • FIG. It is a figure which shows the outline
  • the present invention relates to a blood sugar level increase inhibitor comprising a branched ⁇ -glucan mixture having the following characteristics (A) to (C) as an active ingredient.
  • A glucose as a constituent sugar
  • B Linked to a non-reducing terminal glucose residue located at one end of a linear glucan having a degree of glucose polymerization of 3 or more linked via an ⁇ -1,4 bond via a bond other than an ⁇ -1,4 bond.
  • Isomaltose is produced by isomalt dextranase digestion.
  • a blood sugar level increase inhibitor means an agent that suppresses an increase in blood sugar level after human monosaccharide intake.
  • ingestion means that a human takes in a body, and includes both ingestion by an oral route and ingestion by a tube route.
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention is preferably taken at the same time as or after the monosaccharide.
  • the blood glucose level elevation inhibitor of the present invention contains the above branched ⁇ -glucan mixture (hereinafter referred to as “the present branched ⁇ -glucan mixture”) as an active ingredient.
  • the branched ⁇ -glucan mixture can be obtained by various production methods as described later, and the obtained branched ⁇ -glucan mixture usually has a number of branched ⁇ -having various branched structures and glucose polymerization degrees (molecular weights). -In the form of a mixture of glucans, it is impossible to isolate and quantify each branched ⁇ -glucan with the current technology.
  • each branched ⁇ -glucan that is, the binding mode and order of binding of glucose residues as the constituent units cannot be determined for each branched ⁇ -glucan molecule
  • the structure can be characterized as a whole mixture by various physical, chemical or enzymatic techniques commonly used in the art.
  • the structure of the present branched ⁇ -glucan mixture is characterized by the characteristics (A) to (C) as a whole. That is, this branched ⁇ -glucan mixture is a glucan having glucose as a constituent sugar (feature (A)) and is connected to one end of a linear glucan having a glucose polymerization degree of 3 or more linked via ⁇ -1,4 bonds. It has a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more linked to a non-reducing terminal glucose residue located through a bond other than an ⁇ -1,4 bond (feature (B)).
  • non-reducing terminal glucose residue in the feature (B) means a glucose residue located at the terminal that does not exhibit reducing property among the glucan chains linked through ⁇ -1,4 bonds.
  • the “bond other than ⁇ -1,4 bond” literally means a bond other than ⁇ -1,4 bond.
  • this branched ⁇ -glucan mixture produces isomaltose by digestion with isomalt dextranase (feature (C)).
  • the digestion with isomaltodextranase in the feature (C) means that isomaltdextranase is allowed to act on the branched ⁇ -glucan mixture to cause hydrolysis.
  • Isomalt dextranase is an enzyme to which the enzyme number (EC) 3.2.1.94 is assigned, and ⁇ -1,2, ⁇ -1 adjacent to the reducing end of the isomaltose structure in ⁇ -glucan. , 3, ⁇ -1,4, and ⁇ -1,6 linkages, the enzyme has the characteristic of hydrolyzing.
  • isomalt dextranase from Arthrobacter globiformis eg, Sawai et al., Agricultural and Biological Chemistry, Vol. 52, No. 2, No. 2) Pp. 495-501 (1988)).
  • the ratio of isomaltose per solid in the digest produced by isomalt-dextranase digestion is the isomaltose structure that can be hydrolyzed with isomalt-dextranase in the structure of the branched ⁇ -glucan constituting the branched ⁇ -glucan mixture
  • the structure of the branched ⁇ -glucan mixture as a whole can be characterized by an enzymatic method.
  • isomaltose is digested with isomalt-dextranase, so that isomaltose is usually 5% by mass or more and 70% by mass or less, preferably 10% by mass or more and 60% by mass or less, Preferably, those produced by 20% by mass or more and 50% by mass or less are preferably used because they are considered to be superior in the effect of suppressing the increase in blood glucose level after ingesting monosaccharides.
  • the branched ⁇ -glucan mixture has an inhibitory effect on the increase in blood glucose level after ingestion of monosaccharides.
  • This branched ⁇ -glucan mixture generates isomaltose by digestion with isomaltdextranase. It is thought that having the That is, a branched ⁇ -glucan mixture having an isomaltose production amount of less than 5% by mass in digestion with isomaltodextranase has structural characteristics similar to maltodextrin having a small branched structure, and conversely, isomaltdextranase.
  • a branched ⁇ -glucan mixture having an isomaltose production amount of more than 70% by mass in digestion has a structural feature close to that of dextran, which is a glucose polymer linked by ⁇ -1,6 bonds.
  • dextran which is a glucose polymer linked by ⁇ -1,6 bonds.
  • the present branched ⁇ -glucan mixture it has the feature (D) that the water-soluble dietary fiber content determined by high performance liquid chromatography (enzyme-HPLC method) is 40% by mass or more. Are listed.
  • “High-performance liquid chromatographic method (enzyme-HPLC method)” (hereinafter simply referred to as “enzyme-HPLC method”) for determining water-soluble dietary fiber content is the nutrition labeling standard of the Ministry of Health and Welfare Notification No. 146 in May 1996. , "Methods for analysis of nutritional components, etc. (methods listed in the first column of the first column of the nutrition labeling standard)", the method described in "Food fiber”, the outline of which is described below. It is as follows.
  • a sample for gel filtration chromatography is prepared by decomposing the sample by a series of enzyme treatments with heat-stable ⁇ -amylase, protease, and glucoamylase, and removing proteins, organic acids, and inorganic salts from the treatment solution with an ion exchange resin. Prepare the solution. Next, it is subjected to gel filtration chromatography, and the peak areas of undigested glucan and glucose in the chromatogram are obtained. The respective peak areas and glucose in the sample solution obtained separately by the glucose oxidase method by a conventional method are obtained. The amount is used to calculate the water soluble dietary fiber content of the sample.
  • water-soluble dietary fiber content means the water-soluble dietary fiber content determined by the “enzyme-HPLC method” unless otherwise specified.
  • the water-soluble dietary fiber content indicates the content of ⁇ -amylase and ⁇ -glucan that is not decomposed by glucoamylase, and the feature (D) shows that the structure of the branched ⁇ -glucan mixture as a whole is expressed by an enzymatic method. It is one of the indices that characterize.
  • the structural feature that isomaltose is generated by digestion of isomaltdextranase is deeply involved in the effect of suppressing the increase in blood glucose level after monosaccharide intake by the branched ⁇ -glucan mixture. It is conceivable that this characteristic structural part is, of course, the higher the water-soluble dietary fiber content of the branched ⁇ -glucan mixture, in other words, the branched ⁇ that is not degraded by ⁇ -amylase and glucoamylase. -It is considered that the higher the content of glucan, the more it reaches the small intestine without being digested, and it shows an inhibitory effect on the increase in blood glucose level.
  • a higher water-soluble dietary fiber content is preferable, and a suitable water-soluble dietary fiber content is usually 40% by mass or more. However, it is more preferably 60% by mass or more, and further preferably 75% by mass or more. There is no particular upper limit on the suitable water-soluble dietary fiber content, and the higher the technically possible value, the better, and preferably 100% by mass or less or less than 100% by mass.
  • a more preferable embodiment of the present branched ⁇ -glucan mixture is a branched ⁇ -glucan mixture having the following features (E) and (F), which can be determined by methylation analysis.
  • E the ratio of ⁇ -1,4 linked glucose residues to ⁇ -1,6 linked glucose residues is in the range of 1: 0.6 to 1: 4;
  • F The sum of ⁇ -1,4-bonded glucose residues and ⁇ -1,6-bonded glucose residues accounts for 55% or more of all glucose residues.
  • methylation analysis is a generally used method for determining the binding mode of monosaccharides constituting a polysaccharide or oligosaccharide (Ciucanu et al., Carbohydrate). -Research (Carbohydrate Research), Vol. 131, No. 2, pp. 209-217 (1984)).
  • methylation analysis is applied to analysis of glucose binding mode in glucan, first, all free hydroxyl groups in glucose residues constituting glucan are methylated, and then fully methylated glucan is hydrolyzed.
  • methylated glucose obtained by hydrolysis is reduced to form methylated glucitol from which the anomeric form has been eliminated, and further, a free hydroxyl group in this methylated glucitol is acetylated to give partially methylated glucitol acetate (note that , “Partially methylated glucitol acetate” is sometimes simply referred to as “partially methylated product”).
  • Partially methylated glucitol acetate is sometimes simply referred to as “partially methylated product”.
  • the abundance ratio of glucose residues having different binding modes in the glucan that is, the abundance ratio of each glucoside bond can be determined from the peak area%.
  • “Ratio” for partially methylated product means “ratio” of peak area in gas chromatogram of methylation analysis
  • “%” for partially methylated product means “area%” in gas chromatogram of methylated analysis.
  • the “ ⁇ -1,4-bonded glucose residue” in the above (E) and (F) means the glucose residue bonded to other glucose residues only through the hydroxyl groups bonded to the 1st and 4th carbon atoms. It is detected as 2,3,6-trimethyl-1,4,5-triacetylglucitol in methylation analysis.
  • the “ ⁇ -1,6-bonded glucose residue” in the above (E) and (F) is bonded to other glucose residues only through the hydroxyl groups bonded to the 1st and 6th carbon atoms. It is a glucose residue and is detected as 2,3,4-trimethyl-1,5,6-triacetylglucitol in methylation analysis.
  • Ratio of ⁇ -1,4-bonded glucose residue and ⁇ -1,6-bonded glucose residue obtained by methylation analysis, and ⁇ -1,4-bonded glucose residue and ⁇ -1,6 bond The ratio of the glucose residues to the total glucose residues can be used as one of the indicators for characterizing the structure of the branched ⁇ -glucan mixture as a whole by chemical methods.
  • the ratio of ⁇ -1,4-bonded glucose residues to ⁇ -1,6-bonded glucose residues is in the range of 1: 0.6 to 1: 4” 2,3,6-trimethyl-1,4,5-triacetylglucitol and 2,3,4-trimethyl-1,5,6 detected when the branched ⁇ -glucan mixture is subjected to methylation analysis Means that the ratio of triacetylglucitol is in the range of 1: 0.6 to 1: 4.
  • the present branched ⁇ -glucan mixture corresponds to an “ ⁇ -1,6-linked glucose residue” that is not usually present in starch in a preferred embodiment.
  • ⁇ -1,4 binding and ⁇ it preferably has ⁇ -1,3 bonds and ⁇ -1,3,6 bonds.
  • ⁇ -1,3,6 bond means “residue of glucose that is bonded to other glucose ( ⁇ -1,3,6 bond) at three positions of hydroxyl groups at the 1-position, 3-position and 6-position”. Means "group”.
  • ⁇ -1,3 bonds and ⁇ -1,3,6 bonds are contained in an arbitrary ratio in the bond. It is preferable that -1,3 bonded glucose residues are 0.5% or more and less than 10% of all glucose residues. In the branched ⁇ -glucan mixture, ⁇ -1,3,6-linked glucose residues are preferably 0.5% or more of the total glucose residues.
  • ⁇ -1,3-linked glucose residues are 0.5% or more and less than 10% of all glucose residues.
  • 2,4 , 6-trimethyl-1,3,5-triacetylglucitol can be confirmed by the presence of 0.5% to less than 10% of the partially methylated glucitol acetate.
  • the fact that “the ⁇ -1,3,6-linked glucose residues are 0.5% or more of the total glucose residues” means that the branched ⁇ -glucan mixture is 2,4- This can be confirmed by the presence of dimethyl-1,3,5,6-tetraacetylglucitol in an amount of 0.5% to less than 10% of the partially methylated glucitol acetate.
  • This branched ⁇ -glucan mixture can also be characterized by the weight average molecular weight (Mw) and the value (Mw / Mn) obtained by dividing the weight average molecular weight (Mw) by the number average molecular weight (Mn).
  • the weight average molecular weight (Mw) and the number average molecular weight (Mn) can be determined using, for example, size exclusion chromatography.
  • the average glucose polymerization degree of the branched ⁇ -glucan constituting the branched ⁇ -glucan mixture can be calculated based on the weight average molecular weight (Mw), the branched ⁇ -glucan mixture is characterized by the average glucose polymerization degree. It can also be attached.
  • the average glucose polymerization degree can be determined by subtracting 18 from the weight average molecular weight (Mw) and dividing the result by 162, which is the amount of glucose residue.
  • the branched ⁇ -glucan mixture used as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor preferably has an average glucose polymerization of usually 8 to 500, preferably 15 to 400, more preferably 20 to 300.
  • the branched ⁇ -glucan mixture exhibits the same properties as ordinary glucan in that the viscosity increases as the average glucose polymerization degree increases, and the viscosity decreases as the average glucose polymerization degree decreases. Therefore, according to the embodiment of the blood glucose level elevation inhibitor of the present invention, the present branched ⁇ -glucan mixture having an average glucose polymerization degree suitable for the required viscosity can be appropriately selected and used.
  • Mw / Mn which is a value obtained by dividing the weight average molecular weight (Mw) by the number average molecular weight (Mn), is a variation in the degree of glucose polymerization of the branched ⁇ -glucan molecules constituting the branched ⁇ -glucan mixture that is closer to 1 Means small.
  • the present branched ⁇ -glucan mixture used as an active ingredient of a blood glucose level increase inhibitor can be used without any problem as long as Mw / Mn is usually 20 or less, but preferably 10 or less, more preferably 5 or less. Is preferred. When it is desired to provide a branched ⁇ -glucan mixture having a specific glucose polymerization degree, it is preferable that Mw / Mn is closer to 1 and that the variation in glucose polymerization degree is small.
  • the present branched ⁇ -glucan mixture may be produced by any method as long as it has the characteristics (A) to (C).
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more linked to a non-reducing terminal glucose residue of a linear glucan having a glucose polymerization degree of 3 or more linked through an ⁇ -1,4 bond via an ⁇ -1,6 bond A branched ⁇ -glucan mixture obtained by allowing an enzyme having an action of introducing sucrose to act on starch can be suitably used in the practice of the present invention.
  • WO2008 / 136331 examples thereof include branched ⁇ -glucan mixtures obtained by allowing ⁇ -glucosyltransferase disclosed in the pamphlet to act on starch.
  • an amylase such as maltotetraose-producing amylase (EC 3.2.1.60) or a starch debranching enzyme such as isoamylase (EC 3.2.1.68) is used.
  • the branched ⁇ -glucan mixture can be reduced in molecular weight, so that the molecular weight, glucose polymerization degree, etc. can be adjusted to a desired range.
  • the degree of polymerization disclosed in cyclomaltodextrin glucanotransferase (EC 2.4.1.19), starch branching enzyme (EC 2.4.1.18), and JP-A No. 2014-054221.
  • the branched ⁇ -glucan constituting this branched ⁇ -glucan mixture is obtained by using two or more ⁇ -1,4 glucans together with an enzyme having an activity of transferring ⁇ -1,6 to an internal glucose residue of starch. Furthermore, it can be highly branched to increase the water-soluble dietary fiber content of the branched ⁇ -glucan mixture.
  • the branched ⁇ -glucan mixture thus obtained can be further treated with a saccharide hydrolase such as glucoamylase to further increase the water-soluble dietary fiber content, thereby producing a branched ⁇ -glucan mixture.
  • a saccharide hydrolase such as glucoamylase
  • the reducing power of the branched ⁇ -glucan mixture may be reduced by, for example, and it is optional to obtain a branched ⁇ -glucan mixture having a desired molecular weight by performing fractionation by size exclusion chromatography or the like. It is.
  • the amount of the branched ⁇ -glucan mixture contained in the blood sugar level increase inhibitor of the present invention is particularly limited as long as it exerts the intended blood glucose level increase suppressing action when taken at the same time as or in parallel with the monosaccharide.
  • the branched ⁇ -glucan mixture may be contained in an amount of 1 to 100% by mass, preferably 3 to 100% by mass, more preferably 5 to 100% by mass.
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention includes, as necessary, water, minerals, flavoring agents, stabilizers, excipients, extenders, pH adjusters and the like.
  • One or more selected components may be appropriately blended and used in a proportion of 0.01 to 50% by mass, preferably 0.1 to 40% by mass.
  • the blood sugar level increase inhibitor of the present invention may be ingested in an amount that exerts the action effect of the blood sugar level increase inhibitor, and the intake amount is not particularly limited.
  • the present branched ⁇ -glucan mixture as an active ingredient The intake is usually in the range of 0.5 to 100 g, preferably in the range of 1 to 50 g, more preferably in the range of 1.5 to 10 g, still more preferably in the range of 3 to 8 g per adult (60 kg body weight).
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention may be taken as it is or after being dissolved in a beverage such as water, tea or coffee, or added to a food or beverage.
  • the intake amount of the present branched ⁇ -glucan mixture as an active ingredient is in the range of 0.5 to 30% by mass, more preferably in the range of 5 to 15% by mass with respect to the total intake amount of monosaccharides.
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention may be taken before and after the intake of food or beverage.
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention is powder, granule, granule, liquid, paste, cream, tablet, capsule, caplet, soft capsule, tablet, rod, plate, block, pill , Solid, gel, jelly, gummy, wafer, biscuit, bowl, chewable, syrup, stick, etc.
  • the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention prevents or improves not only pharmaceutical products and quasi-drugs but also lifestyle-related diseases such as foods for specified health use, functional labeling foods, dietary supplements, and health foods. Can be added to foods and beverages taken for the purpose.
  • foods and drinks to be blended include carbonated drinks, milk drinks, jelly drinks, sports drinks, vinegar drinks, soy milk drinks, iron-containing drinks, lactic acid bacteria drinks, green tea, tea, cocoa, coffee and other drinks, cooked rice, rice cake , Bread, noodles, soup, miso soup, yogurt and other foods, soft candy, hard candy, gummy, jelly, cookies, soft cookies, rice crackers, hail, fried, fertilizer, potatoes, bracken, manju, squid, potatoes, Yokan, water yokan, brocade, jelly, pectin jelly, castella, biscuits, crackers, pie, pudding, butter cream, custard cream, cream puff, waffle, sponge cake, hot cake, muffin, donut, chocolate, ganache, cereal bar, Chewing gum, caramel, nougat, flower Toast, peanut paste, fruit paste, jam, marmalade and other confectionery, ice cream, sorbet, gelato and other confectionery, as well as soy sauce, powdered soy sauce, miso, powdered mis
  • the blood glucose level elevation inhibitor of the present invention is a solution, syrup, tube feeding, tablet, capsule, troche, sublingual, granule, powder for preventing or improving (treating) lifestyle-related diseases. It can also be incorporated into drugs in the form of powders, emulsions, sprays and the like. Furthermore, the blood sugar level elevation inhibitor of the present invention can also be blended in pet food, feed, and feed consumed by animals other than humans.
  • the blood sugar level increase inhibitor of the present invention containing the present branched ⁇ -glucan mixture is not only used as a blood sugar level increase inhibitor as it is, but also in addition to the blood sugar level increase inhibitor of the present invention, in addition, a monosaccharide is added. Thus, it can be used as an oral composition. Since the oral composition of the present invention contains a blood sugar level increase inhibitor, even if a monosaccharide is contained in the oral composition, the blood sugar level after ingestion can be suppressed, so the blood sugar level is concerned about rising. Even humans have the advantage that they can be ingested without worrying about monosaccharides.
  • the monosaccharides used in the oral composition of the present invention include monosaccharides having an action of increasing blood sugar levels after ingestion of monosaccharides in humans, and particularly monosaccharides mixed in foods and drinks such as glucose.
  • the blood glucose level increase inhibitory effect of the blood glucose level increase inhibitor of the present invention is more preferably exhibited, which is preferable.
  • the blood sugar level increase inhibitor of the present invention may be blended in an amount that exerts the action effect as a blood sugar level increase inhibitor, and the blending amount is not particularly limited.
  • the total amount of monosaccharides contained in the oral composition is blended so that the branched ⁇ -glucan mixture as an active ingredient is in the range of 0.5 to 30% by mass, more preferably in the range of 5 to 15% by mass. Is preferred.
  • the branched ⁇ -glucan mixture as an active ingredient is usually in the range of 0.5 to 100 g, preferably 1 to 50 g, more preferably 1.5 to 10 g per adult (60 kg body weight). It is suitable to be formulated so that it can be taken in the range, more preferably in the range of 3 to 8 g.
  • the oral composition of the present invention further includes water, saline, sweeteners, proteins, peptides, polyphenols, minerals, antibacterial substances, enzymes, indigestible polysaccharides, coloring agents, and flavoring agents. , Paste, stabilizer, excipient, bulking agent, pH adjuster, etc., or 0.01 to 50% by weight, preferably 0. It can mix
  • the oral composition of the present invention is powder, granular, granule, liquid, paste, cream, tablet, capsule, caplet, soft capsule, tablet, rod, plate, block, pill,
  • a suitable form such as solid, gel, jelly, gummy, wafer, biscuit, bowl, chewable, syrup, and stick can be used.
  • the oral composition of the present invention can be administered to the stomach or gastrointestinal tract by a parenteral administration method such as tube administration, if necessary.
  • a concentrated crude enzyme solution of ⁇ -glucosyltransferase derived from FERM BP-10771) was added in an amount of 11.1 units per gram of the solid, and further allowed to act at 50 ° C. and pH 6.0 for 68 hours.
  • the reaction solution is kept at 80 ° C. for 60 minutes, then cooled and filtered, and the filtrate obtained is decolorized with activated carbon, purified by desalting with H-type and OH-type ion resins, and concentrated.
  • the branched ⁇ -glucan mixture produced by spray drying was used in Experiment 1 below.
  • the obtained branched ⁇ -glucan mixture was added to the isomaltdextranase digestion test method, ⁇ -glucosidase and glucoamylase digestion test method described in paragraphs 0079 and 0080 of International Publication No. WO2008 / 136331, paragraph 0076.
  • the following characteristics (a) to (c) were obtained.
  • the branched ⁇ -glucan mixture had the following feature (d) in addition to the above features, and From the results of analysis by the methylation analysis method, it was found that the following characteristics (e) to (h) were obtained.
  • the ⁇ -1,3-linked glucose residues were 2.1% of the total glucose residues.
  • the ⁇ -1,3,6-linked glucose residues were 5.6% of the total glucose residues.
  • the branched ⁇ -glucan mixture used in this experiment is a non-reducing terminal glucose residue of a linear glucan having a glucose polymerization degree of 3 or more and having glucose as a constituent sugar and linked via ⁇ -1,4 bonds.
  • (A) to (C) are characterized by having a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more linked to each other via bonds other than ⁇ -1,4 bonds, and generating isomaltose by digestion with isomaltodextranase. It was what had.
  • the branched ⁇ -glucan mixture used in this experiment is characterized by producing isomaltose in an amount of 5% by mass or more and 70% by mass or less per digested solid by digestion with isomalt dextranase, and has a water-soluble dietary fiber content.
  • the feature of the above (D) that it is 40% by mass or more, and the ratio of ⁇ -1,4-bonded glucose residue to ⁇ -1,6-bonded glucose residue is 1: 0.6 to 1: 4 (E) and (F), wherein the total of ⁇ -1,4-bonded glucose residues and ⁇ -1,6-bonded glucose residues occupies 55% or more of all glucose residues. It met.
  • ⁇ -1,3 bonded glucose residues are in the range of 0.5% to less than 10% of all glucose residues, and ⁇ -1,3,6 bonded glucose residues are present.
  • the group was in the range of 0.5% or more of the total glucose residues.
  • ⁇ Experiment 1 glucose tolerance test> Control samples consisting of glucose only to 13 healthy male and female subjects whose fasting blood glucose level (blood glucose level before ingestion) is approximately 80-110 mg / dL, excluding those with a history of abnormal glucose metabolism such as diabetes An aqueous solution in which 50 g (see Table 1) was dissolved in water to make 200 mL was given and consumed within 5 minutes. Blood was collected from the subject's fingertips six times before ingestion and 30, 45, 60, 90, and 120 minutes after ingestion, and the test paper “Accu Check Aviva Trip F” (sold by Roche Diagnostics Inc.) and self-blood sugar The blood glucose level was measured using a measuring instrument “Accu Check Aviva Nano” (sold by Roche Diagnostics Inc.). As glucose, commercially available powdered glucose (trade name “Fuji Crister”, sold by Kato Chemical Co., Ltd.) was used.
  • test sample 55 g test sample (see Table 1) containing a branched ⁇ -glucan mixture with glucose was dissolved in water to control the 13 subjects.
  • the sample was ingested in the same manner as in the sample intake, and after ingestion, blood was collected in the same manner, and the change in blood glucose level was measured.
  • indigestible dextrin which is widely used as a water-soluble dietary fiber material in this field, does not exhibit an inhibitory effect on the increase in blood glucose level after intake of glucose and fructose, which are monosaccharides.
  • This branched ⁇ -glucan mixture and indigestible dextrin are branched glucose polymers, they are common in that they are starch-derived mixtures having water-soluble dietary fiber properties.
  • the difference in the effect on the increase in blood glucose level is an extremely interesting finding that overturns the conventional common sense, and this branched ⁇ -glucan mixture is effective at least in suppressing glucose uptake in the living body. The effect is considered to be clearly different from that of indigestible dextrin.
  • This branched ⁇ -glucan mixture contains a monosaccharide, which has been conventionally concerned about an increase in blood glucose level, because it has the effect of suppressing an increase in blood glucose level after ingesting glucose, which is a monosaccharide.
  • a monosaccharide which has been conventionally concerned about an increase in blood glucose level, because it has the effect of suppressing an increase in blood glucose level after ingesting glucose, which is a monosaccharide.
  • various foods and drinks containing monosaccharides such as glucose, fructose, and isomerized sugar as sweeteners
  • the increase in blood glucose level after ingestion can be suppressed by incorporating this branched ⁇ -glucan mixture. I can expect to do it.
  • this branched ⁇ -glucan mixture is used, the range of foods and drinks that can be ingested without fear of an increase in blood glucose level can be expanded.
  • This branched ⁇ -glucan mixture can be used as a blood glucose level increase inhibitor. In the
  • ⁇ Experiment 2 Mechanism of inhibitory action of blood glucose level increase after monosaccharide intake by branched ⁇ -glucan mixture-Test using rat inverted small intestine->
  • the effect on glucose absorption in the small intestine was examined using the rat inverted small intestine.
  • the indigestible dextrin a commercially available indigestible dextrin (trade name “Fibersol 2”, sold by Matsutani Chemical Co., Ltd.) was used. .
  • the amount of the target substance in the test solution absorbed from the small intestinal mucosa and transferred to the serosa inside the sac is measured to evaluate the absorption.
  • the primary reason for reversing the intestinal tract to leave the mucosa side is that the epithelial cells require a large amount of oxygen, which makes it easy to replenish.
  • glucose absorption by the small intestine was measured over time in vitro.
  • ⁇ Experiment 2-1 Preparation of rat inverted small intestine> Wistar rats (male, 7 weeks old, sold by Clea Japan Co., Ltd.) were purchased, bred and acclimatized with a standard diet for 1-3 weeks. Next, the rats were fasted for 4 hours, and then opened under a midline incision under somnopentyl anesthesia, and the small intestine was collected. A partial small intestine having a length of about 8 cm from a site of about 16 cm to 24 cm toward the lower side (ileum side) from the ligament-like structure tied to the wall (rear abdominal wall) was cut out and used for the test.
  • a plastic 20 mL syringe barrel (symbol d in FIG. 2) is used as a container, a small gas exhaust hole (symbol b in FIG. 2) is provided in the upper portion of the syringe barrel d, and a gas reflux tube is provided at the lower end of the syringe barrel d. (Symbol h in FIG. 2) is attached.
  • a hole in the center of the rubber plug (symbol a in FIG. 2), a plastic 1 mL chip (symbol c in FIG.
  • KRB buffer Krebs-Ringer bicarbonate buffer
  • Control group glucose only (180 mg / dL, 10 mM); Branched ⁇ -glucan mixture addition group: Branched ⁇ -glucan mixture (60 mg / dL) added to glucose (180 mg / dL, 10 mM); Indigestible dextrin added group: Added indigestible dextrin (60 mg / dL) to glucose (180 mg / dL, 10 mM); (2) 20 mL (symbol g in FIG. 2) of any of the above three kinds of test sample solutions is injected into a plastic 20 mL syringe (symbol d in FIG.
  • Table 3 shows the results of measuring the glucose concentration on the serosa side over time in a glucose absorption test using the inverted small intestine.
  • the serous glucose concentration was 31.5 ⁇ 10.9 mg / dL, 96. It reached 2 ⁇ 17.8 mg / dL, 155.2 ⁇ 23.0 mg / dL, 202.8 ⁇ 27.5 mg / dL, the glucose concentration increased over time, and the inverted small intestine absorbed glucose on the mucosa side , It was found that it was transferred to the serosa side.
  • the glucose concentration on the serosa side was 13.3 ⁇ 6.6 mg / dL, 40.4 ⁇ at 30 minutes, 60 minutes, 90 minutes, and 120 minutes, respectively.
  • the amount of buffer solution in the inverted small intestine after incubation for 120 minutes is not necessarily constant for each test, so the total glucose amount on the inverted small intestinal serosa side is calculated by multiplying the serous buffer volume at the end of the test by the glucose concentration. did.
  • the total glucose levels in the inverted small intestine of the control group, the branched ⁇ -glucan mixture addition group, and the indigestible dextrin addition group were 1.15 ⁇ 0.27 mg, 0.47 ⁇ 0.34 mg, and 0, respectively.
  • the amount of glucose absorbed was significantly less in the branched ⁇ -glucan mixture addition group than in the control group.
  • the hardly digestible dextrin added group and the control group were not significantly different.
  • the branched ⁇ -glucan mixture addition group had significantly less glucose absorption at 90 to 120 minutes after sugar loading than the control (glucose only) group and the indigestible dextrin addition group.
  • the indigestible dextrin added group was not much different from the control group. From the above results, it was determined that the branched ⁇ -glucan mixture has an absorption inhibitory action on glucose in the small intestine, while the hardly digestible dextrin has no glucose absorption inhibitory action.
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more linked to a non-reducing terminal glucose residue of a linear glucan having a glucose polymerization degree of 3 or more via a bond other than an ⁇ -1,4 bond, and isomaltdextran It has a structural feature that produces isomaltose by digestion, and more preferably has a structural feature that produces isomaltose by not less than 5% by mass and 70% by mass or less per digestive solid by digestion with isomalt-dextranase. It is presumed that this is necessary in order to exert its function.
  • the branched ⁇ -glucan mixture with isomaltose production amount less than 5% by mass in the digestion with isomaltodextranase has a small effect on glucose uptake in the small intestine because it has a structure close to maltodextrin with little branching structure. Is done.
  • a branched ⁇ -glucan mixture with an isomaltose production amount of more than 70% by mass in isomalt-dextranase digestion has a structure close to that of dextran, which is a glucose polymer linked by ⁇ -1,6 bonds. Since it becomes monotonous, it is estimated that the influence on glucose uptake in the small intestine is reduced.
  • those having a water-soluble dietary fiber content of 40% by mass or more determined by high performance liquid chromatography are more preferable because they themselves are difficult to digest and absorb in the small intestine. It is estimated to be.
  • indigestible dextrin did not inhibit glucose uptake in the small intestine. Although the indigestible dextrin has an inhibitory effect on the increase in blood glucose level after ingestion of saccharides higher than disaccharides, it does not exhibit an inhibitory effect on the increase in blood glucose level after ingestion of monosaccharides It is presumed that the indigestible dextrin inhibits glucose uptake in conjunction with the disaccharide-degrading enzyme.
  • a branched ⁇ -glucan mixture powder was prepared according to the method described in Example 5 of the pamphlet of International Publication No. WO2008 / 136331.
  • the obtained branched ⁇ -glucan mixture powder had the following characteristics (a) to (g).
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more (C) Isomaltose is digested to produce 35% by mass of isomaltose per digest solids, (D) the water-soluble dietary fiber content is 80.8% by mass, (E) the ratio of ⁇ -1,4 linked glucose residues to ⁇ -1,6 linked glucose residues is 1: 2.2; (F) the sum of ⁇ -1,4 linked glucose residues and ⁇ -1,6 linked glucose residues is 72.9% of the total glucose residues; (G) Average glucose polymerization degree is 31 and Mw / Mn is 2.0.
  • This product can be used as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor.
  • This product is usually in the range of about 0.5 to about 100 g per adult (60 kg body weight) and can be taken as it is or dissolved in water, tea, coffee or other beverages, or food. Or what is necessary is just to add and ingest in a drink. Of course, this product may be taken before and after the intake of food or beverage.
  • the product itself is tasteless, has no off-flavor, is stable for over a year without moisture absorption or discoloration even at room temperature.
  • branched ⁇ -glucan mixture solution having a solid content of 30% by mass is prepared, and then spray-dried according to a conventional method to branch ⁇ -glucan.
  • a mixture powder was obtained.
  • the obtained branched ⁇ -glucan mixture powder had the following characteristics (a) to (g).
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more (C) Isomaltose is digested to produce 27.2% by mass of isomaltose per digest solids, (D) the water-soluble dietary fiber content is 41.8% by mass, (E) the ratio of ⁇ -1,4 linked glucose residues to ⁇ -1,6 linked glucose residues is 1: 0.6; (F) the sum of ⁇ -1,4 linked glucose residues and ⁇ -1,6 linked glucose residues is 83.0% of the total glucose residues; (G) The average degree of glucose polymerization is 405, and Mw / Mn is 16.2.
  • This product can be used as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor.
  • This product is usually in the range of about 0.5 to about 100 g per adult (60 kg body weight) and can be taken as it is or dissolved in water, tea, coffee or other beverages, or food. Or what is necessary is just to add and ingest in a drink. Of course, this product may be taken before and after the intake of food or beverage.
  • the product itself is tasteless, has no off-flavor, is stable for over a year without moisture absorption or discoloration even at room temperature.
  • a branched ⁇ -glucan mixture powder was prepared according to the method described in Example 6 of International Publication No. WO2008 / 136331.
  • the obtained branched ⁇ -glucan mixture powder had the characteristics (a) to (g).
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more (C) Isomaltose is digested to produce 40.6% by mass of isomaltose per digest of solid, (D) the water-soluble dietary fiber content is 77.0% by mass, (E) the ratio of ⁇ -1,4 linked glucose residues to ⁇ -1,6 linked glucose residues is 1: 4; (F) the sum of ⁇ -1,4 linked glucose residues and ⁇ -1,6 linked glucose residues is 67.9% of the total glucose residues; (G) The average degree of polymerization of glucose is 18, and Mw / Mn is 2.0.
  • This product can be used as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor.
  • This product is usually in the range of about 0.5 to about 100 g per adult (60 kg body weight) and can be taken as it is or dissolved in water, tea, coffee or other beverages, or food. Or what is necessary is just to add and ingest in a drink. Of course, this product may be taken before and after the intake of food or beverage.
  • the product itself is tasteless, has no off-flavor, is stable for over a year without moisture absorption or discoloration even at room temperature.
  • ⁇ Antiglycemic inhibitor> A branched ⁇ -glucan mixture powder according to the method described in Example 5 of International Publication No. WO2008 / 136331 except that 2 units of maltotetraose-producing amylase per gram of solid was added to the corn starch liquor. was prepared.
  • the obtained branched ⁇ -glucan mixture powder had the characteristics (a) to (g).
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more (C) Isomaltose is digested to produce 41.9% by weight of isomaltose per solid of the digested product, (D) the water-soluble dietary fiber content is 69.1% by weight, (E) the ratio of ⁇ -1,4 linked glucose residues to ⁇ -1,6 linked glucose residues is 1: 2.4; (F) the sum of ⁇ -1,4 linked glucose residues and ⁇ -1,6 linked glucose residues is 64.2% of the total glucose residues; (G) Average glucose polymerization degree is 13 and Mw / Mn is 2.0.
  • This product can be used as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor.
  • This product is usually in the range of about 0.5 to about 100 g per adult (60 kg body weight) and can be taken as it is or dissolved in water, tea, coffee or other beverages, or food. Or what is necessary is just to add and ingest in a drink. Of course, this product may be taken before and after the intake of food or beverage.
  • the product itself is tasteless, has no off-flavor, is stable for over a year without moisture absorption or discoloration even at room temperature.
  • ⁇ Antiglycemic inhibitor> Amiloglucosidase (glucoamylase) was allowed to act on the branched ⁇ -glucan mixture obtained by the method described in Example 1, and components that were not decomposed were fractionated using gel filtration chromatography. Thereafter, it was purified and spray-dried according to a conventional method to prepare a branched ⁇ -glucan mixture powder.
  • the obtained branched ⁇ -glucan mixture had the characteristics (a) to (g).
  • a branched structure having a glucose polymerization degree of 1 or more (C) Isomaltose is produced by digestion with isomaltodextranase to produce 21% by mass of isomaltose per solid of the digested product, (D) the water-soluble dietary fiber content is 94.4% by mass, (E) the ratio of ⁇ -1,4 linked glucose residues to ⁇ -1,6 linked glucose residues is 1: 1.9; (F) the sum of ⁇ -1,4 linked glucose residues and ⁇ -1,6 linked glucose residues is 64% of the total glucose residues; (G) Glucose polymerization degree is 22 and Mw / Mn is 1.7.
  • This product can be used as an active ingredient of a blood sugar level increase inhibitor.
  • This product is usually in the range of about 0.5 to about 100 g per adult (60 kg body weight) and can be taken as it is or dissolved in water, tea, coffee or other beverages, or food. Or what is necessary is just to add and ingest in a drink. Of course, this product may be taken before and after the intake of food or beverage.
  • the product itself is tasteless, has no off-flavor, is stable for over a year without moisture absorption or discoloration even at room temperature.
  • This product is a powdered juice that contains monosaccharides but contains a branched ⁇ -glucan mixture as a blood glucose level increase inhibitor, and can suppress an increase in blood glucose level when ingested.
  • this product has no off-flavors and off-flavors, and has high commercial value as a juice.
  • ⁇ Oral composition (custard cream)> 100 parts by mass of corn starch, 30 parts by mass of the branched ⁇ -glucan mixture powder obtained by the method described in Example 4, 70 parts by mass of hydrous crystals of trehalose, 40 parts by mass of glucose, and 1 part by mass of sodium chloride were mixed thoroughly.
  • This product is a custard cream containing monosaccharides, disaccharides and polysaccharides.
  • This product is a custard cream that contains monosaccharides, disaccharides, and polysaccharides but contains a branched ⁇ -glucan mixture as an inhibitor of blood glucose level rise, so it can suppress the increase in blood glucose level when ingested. . Moreover, this product is a high-quality custard cream having a smooth luster, good flavor, and high quality.
  • a granulation adjustment liquid is sprayed little by little from the tip of the nozzle where the granulation powder is mixed in the apparatus to granulate, and nitrogen gas is added to the aluminum bag so that it becomes 5.15 g per pack or 10.3 g per pack. Filled.
  • This product is a dietary supplement containing monosaccharides.
  • This product is a dietary supplement that contains a monosaccharide but contains a branched ⁇ -glucan mixture as a blood glucose level increase inhibitor, and can suppress an increase in blood glucose level when ingested.
  • this product has no off-flavors and off-flavors and has high commercial value as a dietary supplement.
  • a sensory evaluation was conducted by 10 men and women in their 20s and 50s, and it was found that they had the effect of masking the bitterness and astringency unique to polyphenols contained in tea beverages. Furthermore, it was found that the black tea beverages A, B and C of the present invention suppressed the cream-down phenomenon (a phenomenon of becoming cloudy when the tea was gradually cooled) even when stored at room temperature.
  • This product is a tea beverage containing monosaccharides. Although this product contains a monosaccharide, it contains a branched ⁇ -glucan mixture as a blood glucose level increase inhibitor, so it is a tea beverage that can suppress an increase in blood glucose level when ingested. In addition, this product has no off-flavor and off-flavor, and has a high commercial value as a tea beverage.
  • the present branched ⁇ -glucan mixture itself, which is an active ingredient, has low sweetness or tastelessness.
  • the range is wide, and it is possible to obtain an advantage that an increase in blood glucose level after ingestion of monosaccharides can be suppressed without being limited to “a human in a diabetic border region”.
  • the oral composition of this invention contains the blood glucose level rise inhibitor of this invention with a monosaccharide, even if it ingests, it has the advantage that it is not necessary to worry about a raise of a blood glucose level. .
  • the present invention is a truly significant invention that makes a great contribution to the world.
  • FIG. ⁇ Mean value of increase in blood glucose level when a control sample consisting of glucose alone is taken ( ⁇ blood glucose)
  • ⁇ Average increase in blood glucose level when taking a test sample containing a branched ⁇ -glucan mixture with glucose ( ⁇ blood glucose)
  • a Rubber stopper b: Small hole for exhaust
  • c Plastic 1 mL chip with cut tip
  • d Plastic 20 mL syringe barrel
  • e Inverted small intestine
  • f Serosa buffer solution
  • g Mucosal buffer solution
  • h 95% O 2 -5% CO 2 gas reflux tube

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Abstract

健康なヒトを含め血糖値が気になるヒトが、日常的に手軽かつ安全に、しかも持続的に摂取できる単糖類摂取後の血糖値上昇抑制剤及びこれを含んでなる経口組成物を提供することを課題とし、（Ａ）グルコースを構成糖とし、（Ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、（Ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する分岐α－グルカン混合物を含有する血糖値上昇抑制剤、及び単糖類とともに前記血糖値上昇抑制剤とを含んでなる経口組成物を提供することによって解決する。

Description

血糖値上昇抑制剤及びこれを含んでなる経口組成物
　本発明は、血糖値上昇抑制剤に関し、詳細には、単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制する血糖値上昇抑制剤、及び、これを含んでなる経口組成物に関する。
　先進国においては、糖尿病の増加が大きな社会問題となっており、その予防が大きな課題となっている。糖尿病を予防又は改善するためには、食事量のコントロール、ウォーキングやジョギングなどの有酸素運動をすることが推奨されているが、これらを適切な指導の下に長期間、日常的に行うことは困難である。
　一般に、血糖値が高い状態が維持されると糖尿病になり易いと言われており、特に、食物を摂取した直後の血糖値、いわゆる食後血糖値の上昇を抑制することは、糖尿病予防に重要である。しかしながら、近年、単糖類の一種であるグルコースを異性化して得られる異性化糖（グルコースとフルクトースの混合物）が甘味料として各種飲食物に汎用されるようになり、とりわけ清涼飲料などに比較的多量に用いられていることから、意識するしないに関わらず、飲料の摂取を介して単糖類を摂取する機会が多くなっている。グルコースやフルクトースなどの単糖類は、摂取すると容易に吸収され血糖値の上昇を招くので、これら単糖類を含んだ飲食物を摂取した後の血糖値上昇を抑制することは糖尿病を予防する観点からも重要である。
　このような状況下、簡便に単糖類摂取後の血糖値の上昇を制御する方法として、単糖類とともに摂取すると血糖値の上昇を抑える物質を利用する方法が提案されている。例えば、特許文献１には、大麦胚乳などから得られるβ－１，３－１，４－グルカンがグルコース負荷時の血糖値上昇を抑制することが開示されている。しかしながら、非特許文献１に報告されているとおり、β－１，３－１，４－グルカンは、耐糖能異常を呈し、血糖値が低下し難いヒト、いわゆる「糖尿病境界領域のヒト」の場合でしかグルコース負荷時の血糖値上昇抑制効果を奏さないという限界がある。また、特許文献２には、グルコースとともに高純度のＤ－プシコースをラットに摂取させると、血糖値上昇が抑制されることが開示されている。しかしながら、Ｄ－プシコースはそれ自体が甘味を有するため、甘味を有する単糖と組合せて用いる場合には、呈味に影響を与えず支障なく利用できる一方、無味であることが望まれる服用剤や無糖の茶飲料、ニアウォターなどに配合するには不適であり、血糖値上昇抑制効果のある甘味のない飲料として、単糖類を含有する飲食物を摂取する前後に利用する態様には応用できない点で、利用範囲に限界がある。
　一方、難消化性デキストリン、すなわち少量の無機酸を添加した後、加熱した焙焼デキストリンを加工して得られる水溶性食物繊維の一種である難消化性デキストリン（非特許文献２）は、それ自体が低甘味である上に、食後血糖値の上昇を抑制し、インスリンの分泌を穏やかにする効果を有しているので、多くの飲食品に配合、利用されているが、当該難消化性デキストリンは、非特許文献３及び４に報告されているとおり、単糖類摂取後の血糖値の上昇に対しては抑制効果を示さない。
　このように、異性化糖などの単糖類が甘味料として各種飲料に多用される状況下にあるにもかかわらず、現在のところ、「糖尿病境界領域のヒト」だけでなくその他のヒトも含め、ヒトが異性化糖などの単糖類を摂取した後の血糖値の上昇を抑制する効果を有し、それ自体が低甘味ないし無味であるとともに、日常的に手軽かつ安全に、しかも継続的に摂取できる血糖値上昇抑制剤は、本発明者らが知る限り、未だ報告されていない。
特開２００９－２６３６５５号公報 特開２００５－２１３２２７号公報
第８回大麦食品シンポジウム、２０１２年１０月２３日 「澱粉化学」、第３７巻、第２号、第１０７－１１４頁（１９９０） 若林ら、日本栄養・食糧学会誌、第４６巻、第２号、第１３１－１３７頁（１９９３） 若林ら、日本食物繊維研究会誌、第３巻、第１号、第１３－１９頁（１９９９）
　本発明は、「糖尿病境界領域のヒト」に限らず、単糖類摂取後のヒトの血糖値の上昇を抑制する効果を有し、それ自体が低甘味ないし無味で利用範囲が広く、日常的に手軽かつ安全に継続摂取できる血糖値上昇抑制剤と、これを含んでなる経口組成物を提供することを課題とする。
　上記課題を解決すべく鋭意研究努力を重ねた結果、本発明者らは、本出願人が、先に国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットにおいて開示した分岐α－グルカン混合物、具体的には、グルコースを構成糖とし、α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、イソマルトデキストラナーゼ消化によりイソマルトースを生成する分岐α－グルカン混合物が、意外にも、食後血糖値の上昇を抑制するだけでなく、単糖類摂取後の血糖値の上昇をも抑制することを見出した。斯かる知見は全く意外な知見である。何故なら、上記分岐α－グルカン混合物は、分岐を有するグルコースの重合体であり、水溶性食物繊維性を示す点で難消化性デキストリンと類似した澱粉由来の混合物であるので、非特許文献３及び４に報告されている難消化性デキストリンと同様に、単糖類摂取後の血糖値上昇には抑制効果を示さないと信じられていたからである。ところが、本発明者らが実験によって確認したところによれば、上記分岐α－グルカン混合物は、これをヒトが摂取すると、「糖尿病境界領域のヒト」に限らず、単糖類摂取後の血糖値の上昇が顕著に抑制された。この新たな知見に基づき、本発明者らは、それ自体が低甘味ないし無味で利用範囲が広く、「糖尿病境界領域のヒト」に限らず効果のある、単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制する血糖値上昇抑制剤とこれを含む経口組成物を確立し、本発明を完成した。
　すなわち、本発明は、下記（Ａ）乃至（Ｃ）の特徴を有する分岐α－グルカン混合物を有効成分とする単糖類摂取後の血糖値上昇抑制剤を提供することによって上記の課題を解決するものである。
（Ａ）グルコースを構成糖とし、
（Ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（Ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する。
　上記特徴を有する分岐α－グルカン混合物は、副作用の心配がない安全な可食性素材であるだけでなく、低甘味ないし無味であり、単糖類とともに摂取した場合、ヒトの血糖値の上昇を抑制する作用を有している。したがって、上記特徴（Ａ）乃至（Ｃ）を有する分岐α－グルカン混合物は単糖類摂取後の血糖値上昇抑制剤の有効成分として極めて有用である。
　さらに、本発明は、上記血糖値上昇抑制剤とともに単糖類を含んでなる経口組成物を提供することによって上記の課題を解決するものである。
　本発明の血糖値上昇抑制剤は、それ自体が低甘味ないし無味であるため、利用範囲が広く、「糖尿病境界領域のヒト」に限らず単糖類摂取後の血糖値上昇を抑制できる。また、本発明の経口組成物は、本発明の血糖値上昇抑制剤を含んでいるので、これを摂取することによって、簡便かつ安全に単糖類を摂取後の血糖値の上昇を効果的に抑制することができる。
被験者に、グルコースのみからなる対照試料を摂取させた場合と、グルコースとともに分岐α－グルカン混合物を含有する被験試料を摂取させた場合の、被験者における血糖値の増分の平均値の経時変化を示した図である。 反転小腸を用いたグルコース吸収試験のため作製した装置の概要を示す図である。
　本発明は、下記（Ａ）乃至（Ｃ）の特徴を有する分岐α－グルカン混合物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤に係る発明である。
（Ａ）グルコースを構成糖とし、
（Ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（Ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する。
　本明細書でいう血糖値上昇抑制剤とはヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制する剤を意味する。
　なお、本明細書でいう摂取とは、ヒトが体内に取り入れることをいい、経口経路による摂取及び経管経路による摂取の両方を含む。
　本発明の血糖値上昇抑制剤は、単糖類と同時又は相前後して摂取するのが望ましい。
　本発明の血糖値上昇抑制剤は、有効成分として前記分岐α－グルカン混合物（以下、「本分岐α－グルカン混合物」という。）を含有してなるものである。本分岐α－グルカン混合物は、後述のとおり種々の製造方法により得ることができ、得られる本分岐α－グルカン混合物は、通常、様々な分岐構造並びにグルコース重合度（分子量）を有する多数の分岐α－グルカンの混合物の形態にあり、現行の技術では、一つ一つの分岐α－グルカンの単離や定量を行うことは不可能である。このため、個々の分岐α－グルカンの構造、すなわち、構成単位であるグルコース残基の結合様式及び結合順序を分岐α－グルカンの分子ごとに決定することはできないものの、本分岐α－グルカン混合物の構造は、斯界で一般に用いられる種々の物理的手法、化学的手法又は酵素的手法により、混合物全体として特徴付けることができる。
　具体的には、本分岐α－グルカン混合物の構造は、混合物全体として、上記（Ａ）乃至（Ｃ）の特徴によって特徴付けられる。すなわち、本分岐α－グルカン混合物は、グルコースを構成糖とするグルカン（特徴（Ａ））であり、α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有している（特徴（Ｂ））。なお、特徴（Ｂ）でいう「非還元末端グルコース残基」とは、α－１，４結合を介して連結したグルカン鎖のうち、還元性を示さない末端に位置するグルコース残基を意味し、「α－１，４結合以外の結合」とは、文字どおりα－１，４結合以外の結合を意味する。
　さらに、本分岐α－グルカン混合物は、イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する（特徴（Ｃ））。特徴（Ｃ）でいうイソマルトデキストラナーゼ消化とは、本分岐α－グルカン混合物にイソマルトデキストラナーゼを作用させ、加水分解することを意味する。イソマルトデキストラナーゼは、酵素番号（ＥＣ）３．２．１．９４が付与される酵素であり、α－グルカンにおけるイソマルトース構造の還元末端側に隣接するα－１，２、α－１，３、α－１，４、及びα－１，６結合のいずれの結合様式であっても加水分解する特徴を有する酵素である。好適には、アルスロバクター・グロビホルミス由来のイソマルトデキストラナーゼ（例えば、サワイ（Ｓａｗａｉ）ら、アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第５２巻、第２号、第４９５頁－５０１頁（１９８８）参照）が用いられる。
　イソマルトデキストラナーゼ消化により生成する消化物の固形物当たりのイソマルトースの割合は、分岐α－グルカン混合物を構成する分岐α－グルカンの構造におけるイソマルトデキストラナーゼで加水分解され得るイソマルトース構造の割合を示すものであり、特徴（Ｃ）によって、本分岐α－グルカン混合物の構造を、混合物全体として、酵素的手法によって特徴付けることができる。
　本分岐α－グルカン混合物は、イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり、通常、５質量％以上７０質量％以下、好ましくは、１０質量％以上６０質量％以下、より好ましくは２０質量％以上５０質量％以下生成するものが、単糖類摂取後の血糖値上昇抑制効果により優れていると考えられることから好適に用いられる。
　すなわち、後述するとおり、本分岐α－グルカン混合物による単糖類摂取後の血糖値の上昇抑制効果には、本分岐α－グルカン混合物がイソマルトデキストラナーゼ消化によりイソマルトースを生成するという構造的特徴を有していることが深く関与していると考えられる。すなわち、イソマルトデキストラナーゼ消化におけるイソマルトース生成量が５質量％未満の分岐α－グルカン混合物は、分岐構造の少ないマルトデキストリンに近い構造的特徴を有するものとなり、逆に、イソマルトデキストラナーゼ消化におけるイソマルトース生成量が７０質量％超の分岐α－グルカン混合物はα－１，６結合で連なったグルコースポリマーであるデキストランに近い構造的特徴を有するものとなって、上述した特徴（Ｂ）で規定される分岐構造が少なくなるため、いずれの場合も単糖類摂取後の血糖値の上昇抑制に関与すると考えられる構造的特徴が薄れ、イソマルトデキストラナーゼ消化によるイソマルトースの量には好適範囲が存在する。
　また、本分岐α－グルカン混合物のより好適な一態様としては、高速液体クロマトグラフ（酵素－ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量が４０質量％以上であるという特徴（Ｄ）を有しているものが挙げられる。
　水溶性食物繊維含量を求める「高速液体クロマトグラフ法（酵素－ＨＰＬＣ法）」（以下、単に「酵素－ＨＰＬＣ法」という。）とは、平成８年５月厚生省告示第１４６号の栄養表示基準、「栄養成分等の分析方法等（栄養表示基準別表第１の第３欄に掲げる方法）」における第８項、「食物繊維」に記載されている方法であり、その概略を説明すると以下のとおりである。すなわち、試料を熱安定α－アミラーゼ、プロテアーゼ及びグルコアミラーゼによる一連の酵素処理により分解処理し、イオン交換樹脂により処理液から蛋白質、有機酸、無機塩類を除去することによりゲル濾過クロマトグラフィー用の試料溶液を調製する。次いで、ゲル濾過クロマトグラフィーに供し、クロマトグラムにおける、未消化グルカンとグルコースのピーク面積を求め、それぞれのピーク面積と、別途、常法により、グルコース・オキシダーゼ法により求めておいた試料溶液中のグルコース量を用いて、試料の水溶性食物繊維含量を算出する。なお、本明細書を通じて「水溶性食物繊維含量」とは、特に説明がない限り、前記「酵素－ＨＰＬＣ法」で求めた水溶性食物繊維含量を意味する。
　水溶性食物繊維含量は、α－アミラーゼ及びグルコアミラーゼによって分解されないα－グルカンの含量を示すものであり、特徴（Ｄ）は、本分岐α－グルカン混合物の構造を、混合物全体として、酵素的手法により特徴付ける指標の一つである。
　なお、上述したとおり、本分岐α－グルカン混合物による単糖類摂取後の血糖値の上昇抑制効果には、イソマルトデキストラナーゼ消化によりイソマルトースを生成するという構造的特徴が深く関与していると考えられるところ、この特徴的な構造部分は、当然のことながら、本分岐α－グルカン混合物の水溶性食物繊維含量が高まれば高まるほど、換言すれば、α－アミラーゼ及びグルコアミラーゼで分解されない分岐α－グルカンの含量が多いほど、より多く、消化されずに小腸に到達し、血糖値の上昇抑制作用を示すと考えられる。したがって、本発明の血糖値上昇抑制剤の有効成分である本分岐α－グルカン混合物としては、水溶性食物繊維含量が高いものほど好ましく、好適な水溶性食物繊維含量は、通常、４０質量％以上であるが、６０質量％以上のものがより好ましく、さらに好ましくは７５質量％以上である。好適な水溶性食物繊維含量の上限は特になく、技術的に可能な限り高いほどよく、好ましくは１００質量％以下又は１００質量％未満である。
　さらに、本分岐α－グルカン混合物のより好適な一態様としては、下記特徴（Ｅ）及び（Ｆ）を有する分岐α－グルカン混合物であり、当該特徴はメチル化分析によって求めることができる。
（Ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：０．６乃至１：４の範囲にあり、
（Ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の５５％以上を占める。
　メチル化分析とは、周知のとおり、多糖又はオリゴ糖において、これを構成する単糖の結合様式を決定する方法として一般的に汎用されている方法である（シューカヌ（Ｃｉｕｃａｎｕ）ら、カーボハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第１３１巻、第２号、第２０９－２１７頁（１９８４））。メチル化分析をグルカンにおけるグルコースの結合様式の分析に適用する場合、まず、グルカンを構成するグルコース残基における全ての遊離の水酸基をメチル化し、次いで、完全メチル化したグルカンを加水分解する。次いで、加水分解により得られたメチル化グルコースを還元してアノマー型を消去したメチル化グルシトールとし、更に、このメチル化グルシトールにおける遊離の水酸基をアセチル化することにより部分メチル化グルシトールアセテート（なお、「部分メチル化グルシトールアセテート」を単に「部分メチル化物」と総称する場合がある。）を得る。得られる部分メチル化物を、ガスクロマトグラフィーで分析することにより、グルカンにおいて結合様式がそれぞれ異なるグルコース残基に由来する各種部分メチル化物は、ガスクロマトグラムにおける全ての部分メチル化物のピーク面積に占めるピーク面積の百分率（％）で表すことができる。そして、このピーク面積％から当該グルカンにおける結合様式の異なるグルコース残基の存在比、すなわち、各グルコシド結合の存在比率を決定することができる。部分メチル化物についての「比」は、メチル化分析のガスクロマトグラムにおけるピーク面積の「比」を意味し、部分メチル化物についての「％」はメチル化分析のガスクロマトグラムにおける「面積％」を意味するものとする。
　上記（Ｅ）及び（Ｆ）における「α－１，４結合したグルコース残基」とは、１位及び４位の炭素原子に結合した水酸基のみを介して他のグルコース残基に結合したグルコース残基であり、メチル化分析において、２，３，６－トリメチル－１，４，５－トリアセチルグルシトールとして検出される。また、上記（Ｅ）及び（Ｆ）における「α－１，６結合したグルコース残基」とは、１位及び６位の炭素原子に結合した水酸基のみを介して他のグルコース残基に結合したグルコース残基であり、メチル化分析において、２，３，４－トリメチル－１，５，６－トリアセチルグルシトールとして検出される。
　メチル化分析により得られる、α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比率、及び、α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の全グルコース残基に対する割合は、本分岐α－グルカン混合物の構造を、混合物全体として、化学的手法によって特徴付ける指標の一つとして用いることができる。
　上記（Ｅ）の「α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：０．６乃至１：４の範囲にある」との規定は、本分岐α－グルカン混合物をメチル化分析に供したとき、検出される２，３，６－トリメチル－１，４，５－トリアセチルグルシトールと２，３，４－トリメチル－１，５，６－トリアセチルグルシトールの比が１：０．６乃至１：４の範囲にあることを意味する。また、上記（Ｆ）の「α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の５５％以上を占める」との規定は、本分岐α－グルカン混合物が、メチル化分析において、２，３，６－トリメチル－１，４，５－トリアセチルグルシトールと２，３，４－トリメチル－１，５，６－トリアセチルグルシトールとの合計が部分メチル化グルシトールアセテートの５５％以上を占めることを意味する。通常、澱粉は１位と６位でのみ結合したグルコース残基を有しておらず、かつα－１，４結合したグルコース残基が全グルコース残基中の大半を占めていることから、上記（Ｅ）及び（Ｆ）の要件は本分岐α－グルカン混合物が澱粉とは全く異なる構造を有することを意味するものである。
　上記（Ｅ）及び（Ｆ）の特徴で規定されるとおり、本分岐α－グルカン混合物は、好ましい一態様において、通常、澱粉には存在しない「α－１，６結合したグルコース残基」を相当程度有するものであるが、高い血糖値上昇抑制効果を必要とする場合には、より複雑な分岐構造を有するものの方が高い血糖値上昇抑制効果を期待できるため、α－１，４結合及びα－１，６結合に加えてα－１，３結合及びα－１，３，６結合を有するのが好ましい。ここで、「α－１，３，６結合」とは、「１位、３位及び６位の水酸基の３箇所で他のグルコースと結合した（α－１，３，６結合した）グルコース残基」を意味する。本分岐α－グルカン混合物は、より複雑な分岐構造を有するために結合中にα－１，３結合及びα－１，３，６結合が任意の割合で含まれていればよく、例えば、α－１，３結合したグルコース残基が全グルコース残基の０．５％以上１０％未満であることが好ましい。また、本分岐α－グルカン混合物は、α－１，３，６結合したグルコース残基が全グルコース残基の０．５％以上であることが好ましい。
　上記「α－１，３結合したグルコース残基が全グルコース残基の０．５％以上１０％未満である」ことは、本分岐α－グルカン混合物をメチル化分析に供したとき、２，４，６－トリメチル－１，３，５－トリアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上１０％未満存在することによって確認することができる。また、上記「α－１，３，６結合したグルコース残基が全グルコース残基の０．５％以上である」ことは、本分岐α－グルカン混合物が、メチル化分析において、２，４－ジメチル－１，３，５，６－テトラアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上１０％未満存在することによって確認することができる。
　本分岐α－グルカン混合物は、重量平均分子量（Ｍｗ）、及び、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）によっても特徴づけることができる。重量平均分子量（Ｍｗ）及び数平均分子量（Ｍｎ）は、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー等を用いて求めることができる。また、重量平均分子量（Ｍｗ）に基づいて本分岐α－グルカン混合物を構成する分岐α－グルカンの平均グルコース重合度を算出することができるため、本分岐α－グルカン混合物は平均グルコース重合度で特徴づけることもできる。平均グルコース重合度は、重量平均分子量（Ｍｗ）から１８を減じ、グルコース残基量である１６２で除して求めることができる。血糖値上昇抑制剤の有効成分として用いる本分岐α－グルカン混合物は、その平均グルコース重合が、通常、８乃至５００、好ましくは１５乃至４００、より好ましくは２０乃至３００のものが好適である。なお、分岐α－グルカン混合物は、平均グルコース重合度が大きいほど粘度が増し、平均グルコース重合度が小さいほど粘度が小さくなる点で、通常のグルカンと同様の性質を示す。そのため、本発明の血糖値上昇抑制剤の実施態様に応じ、要求される粘度に適合する平均グルコース重合度を有する本分岐α－グルカン混合物を適宜選択して用いることができる。
　重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値であるＭｗ／Ｍｎは、１に近いものほど構成する分岐α－グルカン混合物を構成する分岐α－グルカン分子のグルコース重合度のばらつきが小さいことを意味する。血糖値上昇抑制剤の有効成分として用いる本分岐α－グルカン混合物は、Ｍｗ／Ｍｎが、通常、２０以下のものであれば問題なく使用できるものの、好ましくは１０以下、より好ましくは５以下のものが好適である。なお、特定のグルコース重合度の分岐α－グルカン混合物の提供が求められる場合には、Ｍｗ／Ｍｎが１により近く、グルコース重合度のばらつきが小さいものほど好ましい。
　本分岐α－グルカン混合物は、上記（Ａ）乃至（Ｃ）の特徴を有する限り、如何なる方法で製造されたものであっても良い。例えば、α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの非還元末端グルコース残基にα－１，６結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を導入する作用を有する酵素を澱粉質に作用させて得られる分岐α－グルカン混合物は、本発明の実施において好適に利用することができ、より好適な一例としては、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットにおいて開示されているα－グルコシル転移酵素を澱粉質に作用させて得られる分岐α－グルカン混合物が挙げられる。また、前記α－グルコシル転移酵素に加え、マルトテトラオース生成アミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．６０）などのアミラーゼや、イソアミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．６８）などの澱粉枝切り酵素を併用すれば、本分岐α－グルカン混合物を低分子化することができるので、分子量、グルコース重合度などを所望の範囲に調整することができる。さらには、シクロマルトデキストリングルカノトランスフェラーゼ（ＥＣ　２．４．１．１９）や、澱粉枝作り酵素（ＥＣ　２．４．１．１８）、特開２０１４－０５４２２１号公報に開示されている重合度２以上のα－１，４グルカンを澱粉質の内部のグルコース残基にα－１，６転移する活性を有する酵素を併用することにより、本分岐α－グルカン混合物を構成する分岐α－グルカンをさらに高度に分岐させ、本分岐α－グルカン混合物の水溶性食物繊維含量を高めることもできる。かくして得られる分岐α－グルカン混合物に、さらにグルコアミラーゼ等の糖質加水分解酵素を作用させ、さらに水溶性食物繊維含量を高めた分岐α－グルカン混合物とすることも随意であり、グリコシルトレハロース生成酵素（ＥＣ　５．４．９９．１５）を作用させることにより分岐α－グルカン混合物を構成する分岐α－グルカンの還元末端にトレハロース構造を導入したり、水素添加により分岐α－グルカンの還元末端を還元するなどして分岐α－グルカン混合物の還元力を低下させてもよく、また、サイズ排除クロマトグラフィー等による分画を行なうことにより、所望の分子量を有する分岐α－グルカン混合物を取得することも随意である。
　本発明の血糖値上昇抑制剤に含有される本分岐α－グルカン混合物の量は、単糖類と同時又は相前後して摂取されたときに所期の血糖値上昇抑制作用を発揮する限り、特に限定はないが、本分岐α－グルカン混合物を１乃至１００質量％、好ましくは、３乃至１００質量％、より好ましくは５乃至１００質量％の範囲で含有していれば良い。また、本発明の血糖値上昇抑制剤は、本分岐α－グルカン混合物に加えて、必要に応じて、水、ミネラル、着香料、安定化剤、賦形剤、増量剤、ｐＨ調整剤などから選ばれる１種又は２種以上の成分を、０．０１乃至５０質量％、好ましくは、０．１乃至４０質量％の割合で適宜配合して利用することもできる。
　本発明の血糖値上昇抑制剤は、血糖値上昇抑制剤の作用効果を発揮する量摂取すればよく、摂取量に特段の制限はないが、例えば、有効成分である本分岐α－グルカン混合物の摂取量が、通常、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、０．５乃至１００ｇの範囲、好ましくは１乃至５０ｇの範囲、より好ましくは１．５乃至１０ｇの範囲、さらに好ましくは３乃至８ｇの範囲となるように、本発明の血糖値上昇抑制剤を、そのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、食品又は飲料に添加して摂取すればよい。もしくは、有効成分である本分岐α－グルカン混合物の摂取量が、単糖類の総摂取量に対し０．５乃至３０質量％の範囲、より好ましくは５乃至１５質量％の範囲となるように、本発明の血糖値上昇抑制剤を摂取してもよい。なお、本発明の血糖値上昇抑制剤を食品又は飲料の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。
　本発明の血糖値上昇抑制剤は、粉末状、粒状、顆粒状、液状、ペースト状、クリーム状、タブレット状、カプセル状、カプレット状、ソフトカプセル状、錠剤状、棒状、板状、ブロック状、丸薬状、固形状、ゲル状、ゼリー状、グミ状、ウエハース状、ビスケット状、飴状、チュアブル状、シロップ状、スティック状などの適宜の形態とすることができる。また、本発明の血糖値上昇抑制剤は、医薬品や医薬部外品だけでなく、特定保健用食品、機能性表示食品、栄養補助食品、又は健康食品などの生活習慣病を予防又は改善することを目的に摂取される飲食品に配合することができる。配合される飲食品の具体例としては、炭酸飲料、乳飲料、ゼリー飲料、スポーツドリンク、酢飲料、豆乳飲料、鉄含有飲料、乳酸菌飲料、緑茶、紅茶、ココア、コーヒーなどの飲料、米飯、粥、パン、麺類、スープ、味噌汁、ヨーグルトなどの食品、ソフトキャンディー、ハードキャンディ、グミ、ゼリー、クッキー、ソフトクッキー、せんべい、あられ、おこし、求肥、餅類、わらび餅、まんじゅう、ういろう、餡類、羊羹、水羊羹、錦玉、ゼリー、ペクチンゼリー、カステラ、ビスケット、クラッカー、パイ、プリン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、ワッフル、スポンジケーキ、ホットケーキ、マフィン、ドーナツ、チョコレート、ガナッシュ、シリアルバー、チューインガム、キャラメル、ヌガー、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト、ジャム、マーマレードなどの菓子、アイスクリーム、シャーベット、ジェラートなどの氷菓、更には、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、フリカケ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素、天つゆ、麺つゆ、ソース、トマトソース、ケチャップ、焼き肉のタレ、焼き鳥のタレ、から揚げ粉、天ぷら粉、カレールウ、シチューの素、スープの素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガー、コーヒーシュガーなどの各種調味料や調理加工品があげられる。さらに、本発明の血糖値上昇抑制剤は、生活習慣病を予防又は改善（治療）するための液剤、シロップ剤、経管栄養剤、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、舌下剤、顆粒剤、散剤、粉剤、乳剤、噴霧剤などの形態にある薬剤に配合することもできる。さらに、本発明の血糖値上昇抑制剤は、ヒト以外の動物が摂取するペットフードや飼料、餌料に配合することもできる。
　また、本分岐α－グルカン混合物を含有する本発明の血糖値上昇抑制剤は、そのまま血糖値上昇抑制剤としてだけでなく、本発明の血糖値上昇抑制剤に加えて、さらに、単糖類を添加して、経口組成物として用いることができる。本発明の経口組成物は、血糖値上昇抑制剤を含んでいるため経口組成物中に単糖類を含んでいても摂取後の血糖値の上昇を抑制できるので、血糖値の上昇が気に掛かるヒトであっても、単糖類が含まれていることを気にせずに摂取することができるという利点を有している。
　因みに、本発明の経口組成物に用いられる単糖類としては、ヒトにおいて単糖類摂取後の血糖値を上昇させる作用を有する単糖が挙げられ、特に飲食物に配合される単糖、例えば、グルコース、フルクトース、ガラクトースからなる群より選ばれる１種以上、中でも、グルコース、フルクトース、及びグルコースとフルクトースの混合物である異性化糖、特に、グルコースを血糖値上昇抑制剤とともに本発明の経口組成物に配合する場合には、本発明の血糖値上昇抑制剤による血糖値上昇抑制効果がより好適に発揮されるので好ましい。
　本発明の経口組成物には、本発明の血糖値上昇抑制剤を、血糖値上昇抑制剤としての作用効果が発揮される量配合すればよく、配合量に特段の制限はないが、例えば、経口組成物に含有させる単糖類の総量に対し、有効成分としての本分岐α－グルカン混合物が、０．５乃至３０質量％の範囲、より好ましくは５乃至１５質量％の範囲となるよう配合するのが好ましい。なお、有効成分としての本分岐α－グルカン混合物は、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、通常、０．５乃至１００ｇの範囲、好ましくは１乃至５０ｇの範囲、より好ましくは１．５乃至１０ｇの範囲、さらに好ましくは３乃至８ｇの範囲で摂取できるように配合されているのが好適である。
　本発明の経口組成物には、上記成分に加えて、さらに、水、食塩水、甘味料、蛋白質、ペプチド、ポリフェノール、ミネラル、抗菌物質、酵素、難消化性の多糖類、着色料、着香料、糊料、安定化剤、賦形剤、増量剤、ｐＨ調整剤などから選ばれる１種又は２種以上を経口組成物の総量に対して０．０１乃至５０質量％、好ましくは、０．１乃至４０質量％の割合で適宜配合することができる。
　本発明の経口組成物は、粉末状、粒状、顆粒状、液状、ペースト状、クリーム状、タブレット状、カプセル状、カプレット状、ソフトカプセル状、錠剤状、棒状、板状、ブロック状、丸薬状、固形状、ゲル状、ゼリー状、グミ状、ウエハース状、ビスケット状、飴状、チュアブル状、シロップ状、スティック状などの適宜の形態とすることができる。
　本発明の経口組成物は、必要に応じて、経管投与などの非経口的投与方法により胃又は消化管へ投与することもできる。
　以下、実験に基づいて本発明をより詳細に説明する。
　以下の実験１では、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実施例５記載の方法に従い製造した分岐α－グルカン混合物を使用した。すなわち、前記実施例５記載の方法に順じて、２７．１質量％トウモロコシ澱粉液化液（加水分解率３．６％）に、最終濃度０．３質量％となるように亜硫酸水素ナトリウムを、また最終濃度１ｍＭとなるように塩化カルシウムを加えた後、５０℃に冷却し、これに、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実施例１に記載された方法で調製したバチルス・サーキュランス　ＰＰ７１０（ＦＥＲＭ　ＢＰ－１０７７１）由来のα－グルコシル転移酵素の濃縮粗酵素液を固形物１グラム当たり１１．１単位加え、さらに、５０℃、ｐＨ６．０で６８時間作用させた。その反応液を８０℃で６０分間保った後、冷却し、濾過して得られる濾液を常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮、噴霧乾燥して製造した分岐α－グルカン混合物を以下の実験１に使用した。なお、得られた分岐α－グルカン混合物を、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの段落００７９、００８０に記載されたイソマルトデキストラナーゼ消化試験法、α－グルコシダーゼ及びグルコアミラーゼ消化試験法、段落００７６乃至００７８に記載されたメチル化分析法により分析したところ、以下の（ａ）乃至（ｃ）の特徴を有していた。
（ａ）グルコースを構成糖とし、
（ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり３５質量％生成した。
　また、得られた分岐α－グルカン混合物を前記酵素－ＨＰＬＣ法により分析したところ、前記分岐α－グルカン混合物は、上記特徴に加えて、下記（ｄ）の特徴を有しており、さらには、上記メチル化分析法による分析結果から、下記（ｅ）乃至（ｈ）の特徴を有することが判明した。
（ｄ）水溶性食物繊維含量が８２．９質量％であり、
（ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：２．１であり、
（ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の７３．８％であった。
（ｇ）α－１，３結合したグルコース残基が全グルコース残基の２．１％であった。
（ｈ）α－１，３，６結合したグルコース残基が全グルコース残基の５．６％であった。
　さらに、当該分岐α－グルカン混合物を、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの段落００８１に記載されたゲル濾過ＨＰＬＣによる分子量分布分析にしたところ、その重量平均分子量（Ｍｗ）は５，０００ダルトン（平均グルコース重合度に換算すると約３０）、Ｍｗ／Ｍｎは２．１であった。
　上記のとおり、本実験で使用した分岐α－グルカン混合物は、グルコースを構成糖とし、α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、イソマルトデキストラナーゼ消化によりイソマルトースを生成するという前記（Ａ）乃至（Ｃ）の特徴を有するものであった。また、本実験で使用した分岐α－グルカン混合物は、イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり５質量％以上７０質量％以下生成するという特徴、水溶性食物繊維含量が４０質量％以上であるという前記（Ｄ）の特徴、及び、α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：０．６乃至１：４の範囲にあり、α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の５５％以上を占めるという前記（Ｅ）、（Ｆ）の特徴を満たすものであった。
　さらに、前記分岐α－グルカン混合物は、α－１，３結合したグルコース残基が全グルコース残基の０．５％以上１０％未満の範囲にあり、α－１，３，６結合したグルコース残基が全グルコース残基の０．５％以上の範囲にあるものであった。
　以下の実験では、グルコース摂取時における血糖値への分岐α－グルカン混合物の影響を調べるために、グルコース負荷試験を実施した。
＜実験１：グルコース負荷試験＞
　糖尿病などのグルコース代謝能異常の経歴のある者は除外した空腹時血糖値（摂取前の血糖値）がおおよそ８０～１１０ｍｇ/ｄＬである健康な男女１３人の被験者に、グルコースのみからなる対照試料５０ｇ（表１を参照）を水に溶解し２００ｍＬにした水溶液を与え、５分以内に摂取させた。摂取前、摂取後３０、４５、６０、９０、１２０分の計６回、被験者の指先から採血し、試験紙『アキュチェックアビバストリップ　Ｆ』（ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社販売）と自己血糖測定器『アキュチェックアビバ　ナノ』（ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社販売）とを用いて血糖値を測定した。なお、グルコースとしては、市販の粉末グルコース（商品名『フジクリスター』、加藤化学株式会社販売）を用いた。
　次いで、上記試験から一週間以上経過した後、上記１３人の被験者に対し、グルコースとともに分岐α－グルカン混合物を含有する被験試料５５ｇ（表１を参照）を水に溶解し２００ｍＬとした水溶液を対照試料摂取の場合と同様に摂取させ、摂取後、同様に採血し、血糖値の変化を測定した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　上記被験者１３人の対照試料摂取時と被験試料摂取時について、それぞれ、摂取前、摂取後３０、４５、６０、９０、１２０分における血糖値の増分の平均値を摂取後経過時間に対してプロットしたグラフを作成し、図1に示した。また、血糖値の増分の平均値の曲線下面積（ＡＵＣ）を試料ごとに算出し、表２に示した。さらに、分岐α－グルカン混合物摂取の影響は、被験試料摂取時のＡＵＣを対照試料摂取時のＡＵＣで除して得られるＡＵＣ比率により評価し、結果を表２に併記した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　図１に見られるとおり、対照試料摂取時（図１の符号○）と比べ、被験試料摂取時（図１の符号●）では血糖値の増分の上昇が抑制された。また、表２に見られるとおり、対照試料摂取時のＡＵＣが９９．０であったのに対し、被験試料摂取時のＡＵＣは８６．６と低く、ＡＵＣ比率は８７．４％であった。この結果から、分岐α－グルカン混合物は、単糖であるグルコースとともに摂取させると、グルコースのみを摂取させた場合に比べ、血糖値の上昇を顕著に抑制することが確認された。
　因みに、本分岐α－グルカン混合物が、澱粉部分分解物（マルトデキストリン）とともに摂取した場合に血糖値の上昇を抑制することは、本出願人と同じ出願人による国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットに開示されている。上記実験結果は、分岐α－グルカン混合物が、澱粉部分分解物を摂取した場合のみならず、単糖類を摂取した場合においても血糖値の上昇を抑制することを示すものである。
　一方、前述したとおり、斯界で水溶性食物繊維素材として汎用されている難消化性デキストリンについては、単糖であるグルコース及び果糖の摂取後の血糖値の上昇に対しては抑制効果を示さないことが報告されている（非特許文献３及び４を参照）。本分岐α－グルカン混合物と難消化性デキストリンとは、分岐を有するグルコースの重合体であり、水溶性食物繊維性を有する澱粉由来の混合物である点で共通するにもかかわらず、グルコース摂取後の血糖値の上昇に対して及ぼす影響が異なることは、従来の技術常識を覆す極めて興味深い知見であり、本分岐α‐グルカン混合物は、少なくとも生体におけるグルコースの取り込みを顕著に抑制する点で、その作用効果は難消化性デキストリンとは明らかに相違しているものと考えられる。
　本分岐α－グルカン混合物は、単糖であるグルコース摂取後の血糖値の上昇を抑制する作用効果を奏することから、従来から血糖値の上昇を招くことが懸念されていた、単糖類を含有する飲食物、例えば、甘味料としてグルコース、フルクトース、異性化糖などの単糖類を含有する各種飲食物であっても、本分岐α－グルカン混合物を配合すれば、摂取後の血糖値の上昇を抑制できることが期待できる。本分岐α－グルカン混合物を用いれば、血糖値上昇の懸念なく摂取できる飲食物の範囲を拡大することができ、本分岐α－グルカン混合物は、血糖値上昇抑制剤として、単糖類を含有する飲食物の分野、とりわけ飲料分野において、現在汎用されている難消化性デキストリンよりも、より有利に利用することができる。
　以下の実験２では、本分岐α－グルカン混合物による単糖摂取後の血糖値抑制作用のメカニズムを解明する一手段として、本分岐α－グルカン混合物が小腸におけるグルコース吸収に及ぼす影響を、ラット反転小腸を用いた試験により検証し、併せて行った難消化性デキストリンについての結果と比較した。
＜実験２：分岐α－グルカン混合物による単糖類摂取後の血糖値上昇抑制作用のメカニズム　－ラット反転小腸を用いた試験－＞
　ヒトにおける本分岐α－グルカン混合物の血糖値上昇抑制作用のメカニズムを検証するため、ラット反転小腸を用いて、小腸でのグルコース吸収に与える影響を検討した。本分岐α－グルカン混合物としては実験１で用いたと同じ標品を用い、難消化性デキストリンとしては市販の難消化性デキストリン（商品名『ファイバーソル２』、松谷化学工業株式会社販売）を用いた。
　因みに、反転小腸を用いる試験（例えば、土屋正彦ら　ラット反転小腸のブドウ糖吸収に関する研究：経時的観察法の開発　日本消化器病学会雑誌，第８０巻、１１３８－１１４３頁（１９８３年）を参照）とは、腸管の特定部分の透過機構を研究するため、その部分を摘出して反転し、両端を結紮、サック状にして物質の透過を検討する方法であり、サックの中に、例えば緩衝液を入れ、対象物質（本実験ではグルコース）を含有する試験液中で９５％Ｏ２－５％ＣＯ２ガスを通じながらサックをインキュベートする。当該試験液中の対象物質が小腸粘膜から吸収され、サック内側の漿膜側に移行した量を測定し、吸収を評価する。腸管を反転して粘膜側を外にするのは、上皮細胞が多量の酸素を要求するため、その補給を容易にするのが第一の理由とされている。本実験では、ｉｎ　ｖｉｔｒｏにおいて小腸によるグルコースの吸収を経時的に測定した。
＜実験２－１：ラット反転小腸の調製＞
　Ｗｉｓｔａｒラット（雄、７週齢、日本クレア株式会社販売）を購入し、１～３週間は標準飼料を与えて飼育し馴化させた。次いで、当該ラットを４時間絶食させた後、ソムノペンチル麻酔下に正中切開にて開腹して小腸を採取し、採取したラット小腸のトライツ（Ｔｒｅｉｔｚ）靭帯（小腸の途中にあり、小腸を背中側の壁（後腹壁）に繋ぎ止めている靭帯様の構造）より下部側（回腸側）に向かって約１６ｃｍから２４ｃｍの部位までの長さ約８ｃｍの部分小腸を切り出し、試験に用いた。
＜実験２－２：反転小腸を用いたグルコース吸収試験＞
　ラット反転小腸を用いたグルコース吸収試験は、図２に示す試験装置を作製し、下記の手順にしたがって実施した。
＜試験装置＞
　以下、試験装置の概要について、図２に基づき説明する。プラスチック製２０ｍＬ容注射筒（図２の符号ｄ）を容器として用い、注射筒ｄの上部にガス排気用小孔（図２の符号ｂ）を設け、注射筒ｄの下端にはガス還流用チューブ（図２の符号ｈ）を装着する。ゴム栓（図２の符号ａ）の中央部に孔をあけ、先を切断したプラスチック製１ｍＬチップ（図２の符号ｃ）を差し込み、当該チップｃの先には一端を結紮した反転小腸（図２の符号ｅ）を装着し結紮する。これを注射筒ｄの上端から差し込み、試験装置とする。
＜試験手順＞
（１）グルコースのみ、グルコースと分岐α－グルカン混合物、又は、グルコースと難消化性デキストリンをクレブス－リンゲル重炭酸緩衝液（ｐＨ７．４）（以下、「ＫＲＢ緩衝液」と略称する。）にそれぞれ溶解し、下記３種の被験サンプル溶液を調製した。
　　対照群：グルコースのみ（１８０ｍｇ／ｄＬ，１０ｍＭ）；
　　分岐α－グルカン混合物添加群：グルコース（１８０ｍｇ／ｄＬ，１０ｍＭ）に分岐α－グルカン混合物（６０ｍｇ／ｄＬ）を添加；
　　難消化性デキストリン添加群：グルコース（１８０ｍｇ／ｄＬ，１０ｍＭ）に難消化性デキストリン（６０ｍｇ／ｄＬ）を添加；
（２）プラスチック製２０ｍＬ容注射筒（図２の符号ｄ）に、上記３種の被験サンプル溶液のいずれかを２０ｍＬ（図２の符号ｇ）注入し、３７℃の恒温水槽に入れてガス還流用チューブ（図２の符号ｈ）から、９５％Ｏ２－５％ＣＯ２ガスを通気し、ガス還流を行う。
（３）実験２－１で取得したラット小腸の内部を、９５％Ｏ２－５％ＣＯ２ガスを通気した冷ＫＲＢ緩衝液で洗浄する。
（４）図示しない反転用棒を腸管の近位端に少し挿入し、反転用棒を小腸内に押し入れながら反転させ、反転小腸とする。
（５）反転用棒から外した反転小腸（図２の符号ｅ）に、先を切断したプラスチック製１ｍＬチップ（図２の符号ｃ）を挿入・結紮することにより装着し、近位端から約５ｃｍのところを結紮する。
（６）反転小腸ｅを装着したチップｃを注射筒ｄの内部にセットし、マイクロピペットでチップｃの上部より反転小腸漿膜側（反転小腸ｃの内側）にＫＲＢ緩衝液０．５ｍＬ（図２の符号ｆ）を注入する。この時点で実験（インキュベーション）開始とした。なお、試験前及び試験中ともに、粘膜側（反転小腸ｃの外側）の被験サンプル溶液ｇには９５％Ｏ２－５％ＣＯ２ガスを通気させた。
（７）粘膜側、漿膜側ともにインキュベート０、３０、６０、９０、１２０分の時点で溶液各５μＬをマイクロピペットでサンプリングし、グルコース定量キット（商品名『グルコースＣＩＩテストワコー』、和光純薬工業株式会社販売）を用いてグルコースを定量した。
（８）各被験サンプル群ともそれぞれ６回試験し、データの検定は、Ｔｕｋｅｙ－Ｋｒａｍｅｒ法にて行い比較した。危険率０．０５未満で「有意差あり」とした。
　反転小腸を用いたグルコース吸収試験において、漿膜側のグルコース濃度を経時的に測定した結果を表３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　表３に示すとおり、対照群（グルコースのみ）では、漿膜側のグルコース濃度が試験開始３０分、６０分、９０分、１２０分の時点で、それぞれ３１．５±１０．９ｍｇ／ｄＬ、９６．２±１７．８ｍｇ／ｄＬ、１５５．２±２３．０ｍｇ／ｄＬ、２０２．８±２７．５ｍｇ／ｄＬに達し、時間の経過とともにグルコース濃度が上昇し、反転小腸が粘膜側のグルコースを吸収し、漿膜側に移行させていることが分かった。一方、分岐α－グルカン混合物添加群では、漿膜側のグルコース濃度が、試験開始３０分、６０分、９０分、１２０分の時点で、それぞれ１３．３±６．６ｍｇ／ｄＬ、４０．４±２６．５ｍｇ／ｄＬ、７１．７±４０．６ｍｇ／ｄＬ、１０２．７±５８．３ｍｇ／ｄＬと、各時間において対照群よりも顕著に低い値を示した。また、難消化性デキストリン添加群は、対照群とは大差ない結果を示した。以上の結果から、分岐α－グルカン混合物が小腸粘膜におけるグルコース吸収を抑制する作用を有するのに対し、難消化性デキストリンは吸収抑制作用を有さないことが分かった。
　また、１２０分インキュベートした後の反転小腸内の緩衝液量は試験毎に必ずしも一定ではないため、試験終了時の漿膜側緩衝液量にグルコース濃度を乗じて反転小腸漿膜側の全グルコース量を算出した。対照群、分岐α－グルカン混合物添加群、及び、難消化性デキストリン添加群の反転小腸内の全グルコース量は、それぞれ、１．１５±０．２７ｍｇ、０．４７±０．３４ｍｇ、及び、０．９３±０．３３ｍｇであり、表３に示したグルコース濃度の場合と同様に、分岐α－グルカン混合物添加群では、対照群に比べ吸収したグルコース量が有意に少なかった。一方、吸収した全グルコース量においても難消化性デキストリン添加群と対照群とは大差なかった。
　上記結果から明らかなとおり、分岐α－グルカン混合物添加群は対照（グルコースのみ）群及び難消化性デキストリン添加群に比べて、糖負荷後９０乃至１２０分においてグルコースの吸収量が有意に少なかった。一方で、難消化性デキストリン添加群は対照群と大差なかった。以上の結果から、分岐α－グルカン混合物は、小腸におけるグルコースの吸収抑制作用を有し、一方、難消化性デキストリンはグルコースの吸収抑制作用を有さないと判断された。因みに、難消化性デキストリンが、反転小腸を用いたグルコース吸収試験において吸収抑制作用を示さないことは、文献（若林茂、「難消化性デキストリンの耐糖能に及ぼす影響」、日内分泌会誌、第６８巻、６２３－６３５頁（１９９２年））にも報告されている。
　実験２の結果から、本分岐α－グルカン混合物が小腸におけるグルコースの取り込みを抑制していることが判明した。このことから、本分岐α－グルカン混合物によるヒトのグルコース摂取時における血糖値上昇抑制は、小腸におけるグルコースの吸収抑制によるものであることが確認された。本実験により、難消化性デキストリンが生体における単糖類摂取時に血糖値上昇抑制作用を示さないのに対し、本分岐α－グルカン混合物が血糖値上昇抑制作用を示す一因が、小腸におけるグルコース吸収に及ぼす作用の違いにあることが明らかとなった。
　本分岐α－グルカン混合物が、どのように作用し小腸におけるグルコースの血液への取り込みを抑制しているのかは不明であるが、本分岐α－グルカン混合物の、α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、イソマルトデキストラナーゼ消化によりイソマルトースを生成する構造的特徴を有すること、より好ましくはイソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり５質量％以上７０質量％以下生成する構造的特徴を有することがその機能を発揮する上で必要であると推定される。
　なお、イソマルトデキストラナーゼ消化におけるイソマルトース生成量が５質量％未満の分岐α－グルカン混合物は、分岐構造の少ないマルトデキストリンに近い構造であるため小腸におけるグルコースの取り込みへの影響が小さいと推定される。一方、イソマルトデキストラナーゼ消化におけるイソマルトース生成量が７０質量％超の分岐α－グルカン混合物は、α－１，６結合で連なったグルコースポリマーであるデキストランに近い構造となり、逆に分岐構造が単調になるため小腸におけるグルコースの取り込みへの影響が小さくなると推定される。また、本分岐α－グルカン混合物のうち高速液体クロマトグラフ法（酵素－ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量が４０質量％以上であるものはそれ自体が小腸で消化吸収され難いためより好ましいと推定される。
　一方、難消化性デキストリンが、小腸におけるグルコースの取り込みを抑制することはなかった。難消化性デキストリンが二糖類以上の糖質摂取後の血糖値の上昇に対して抑制効果を示すにもかかわらず、単糖類摂取後の血糖値の上昇に対しては抑制効果を示さない作用機序としては、難消化性デキストリンは二糖類分解酵素と連動したグルコースの取り込みを阻害しているためだと推定される。
　以下、本発明を実施例に基づいてより詳細に説明する。しかしながら、本発明は、これら実施例によりなんら限定されるものではない。
＜血糖値上昇抑制剤＞
　国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実施例５に記載された方法に従い、分岐α－グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α－グルカン混合物粉末は、以下の（ａ）乃至（ｇ）の特徴を有していた。
（ａ）グルコースを構成糖とし、
（ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり３５質量％生成し、
（ｄ）水溶性食物繊維含量が８０．８質量％であり、
（ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：２．２であり、
（ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の７２．９％であり、
（ｇ）平均グルコース重合度が３１であり、Ｍｗ／Ｍｎが２．０である。
　本品は、血糖値上昇抑制剤の有効成分として利用できる。また、本品を摂取することにより、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制することが可能である。本品は、通常、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、食品又は飲料に添加して摂取すればよい。本品を食品又は飲料の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、それ自体が無味であり、異臭がなく、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。
＜血糖値上昇抑制剤＞
　国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実験２－２に記載された方法に従い、固形分濃度３０質量％の分岐α－グルカン混合物溶液を調製し、その後、常法に従って噴霧乾燥して分岐α－グルカン混合物粉末を得た。なお、得られた分岐α－グルカン混合物粉末は、以下の（ａ）乃至（ｇ）の特徴を有していた。
（ａ）グルコースを構成糖とし、
（ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり２７．２質量％生成し、
（ｄ）水溶性食物繊維含量が４１．８質量％であり、
（ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：０．６であり、
（ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の８３．０％であり、
（ｇ）平均グルコース重合度が４０５であり、Ｍｗ／Ｍｎが１６．２である。
　本品は、血糖値上昇抑制剤の有効成分として利用できる。また、本品を摂取することにより、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制することが可能である。本品は、通常、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、食品又は飲料に添加して摂取すればよい。本品を食品又は飲料の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、それ自体が無味であり、異臭がなく、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。
＜血糖値上昇抑制剤＞
　国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実施例６に記載された方法に従い、分岐α－グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α－グルカン混合物粉末は、（ａ）乃至（ｇ）の特徴を有していた。
（ａ）グルコースを構成糖とし、
（ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり４０．６質量％生成し、
（ｄ）水溶性食物繊維含量が７７．０質量％であり、
（ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：４であり、
（ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の６７．９％であり、
（ｇ）平均グルコース重合度が１８であり、Ｍｗ／Ｍｎが２．０である。
　本品は、血糖値上昇抑制剤の有効成分として利用できる。また、本品を摂取することにより、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制することが可能である。本品は、通常、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、食品又は飲料に添加して摂取すればよい。本品を食品又は飲料の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、それ自体が無味であり、異臭がなく、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。
＜血糖値上昇抑制剤＞
　トウモロコシ澱粉液化液に、さらにマルトテトラオース生成アミラーゼを固形物１グラム当たり２単位添加した以外は、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実施例５に記載された方法に従い、分岐α－グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α－グルカン混合物粉末は、（ａ）乃至（ｇ）の特徴を有していた。
（ａ）グルコースを構成糖とし、
（ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり４１．９質量％生成し、
（ｄ）水溶性食物繊維含量が６９．１質量％であり、
（ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：２．４であり、
（ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の６４．２％であり、
（ｇ）平均グルコース重合度が１３であり、Ｍｗ／Ｍｎが２．０である。
　本品は、血糖値上昇抑制剤の有効成分として利用できる。また、本品を摂取することにより、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制することが可能である。本品は、通常、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、食品又は飲料に添加して摂取すればよい。本品を食品又は飲料の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、それ自体が無味であり、異臭がなく、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。
＜血糖値上昇抑制剤＞
　実施例１に記載された方法で得られた分岐α－グルカン混合物にアミログルコシダーゼ（グルコアミラーゼ）を作用させ、分解されなかった成分をゲル濾過クロマトグラフィーを用いて分取した。その後、常法に従って精製及び噴霧乾燥して分岐α－グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α－グルカン混合物は、（ａ）乃至（ｇ）の特徴を有していた。
（ａ）グルコースを構成糖とし、
（ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり２１質量％生成し、
（ｄ）水溶性食物繊維含量が９４．４質量％であり、
（ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：１．９であり、
（ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の６４％であり、
（ｇ）グルコース重合度が２２であり、Ｍｗ／Ｍｎが１．７である。
　本品は、血糖値上昇抑制剤の有効成分として利用できる。また、本品を摂取することにより、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制することが可能である。本品は、通常、成人（体重６０ｋｇ）1回当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、食品又は飲料に添加して摂取すればよい。本品を食品又は飲料の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、それ自体が無味であり、異臭がなく、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。
＜経口組成物（粉末ジュース）＞
　噴霧乾燥により製造したオレンジ果汁粉末３３質量部に対して、実施例５に記載された方法で得られた分岐α－グルカン混合物粉末１０質量部、グルコース２０質量部、無水結晶マルチトール２０質量部、無水クエン酸０．６５質量部、リンゴ酸０．１質量部、２－Ｏ－α－グルコシル－Ｌ－アスコルビン酸０．２質量部、クエン酸ソーダ０．１質量部、及び粉末香料の適量をよく混合攪拌し、粉砕し微粉末にして、これを流動層造粒機に仕込み、排風温度４０℃とし、これに実施例１の方法で得た分岐α－グルカン粉末を水に溶解して得た溶液をバインダーとして適量スプレーし、３０分間造粒し、計量し、包装して製品を得た。本品は、単糖類を含む果汁含有率約３０％の粉末ジュースである。本品は、単糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α－グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できる粉末ジュースである。また、本品は、異味、異臭がなく、ジュースとして商品価値の高いものである。
＜経口組成物（カスタードクリーム）＞
　コーンスターチ１００質量部、実施例４に記載された方法で得られた分岐α－グルカン混合物粉末３０質量部、トレハロース含水結晶７０質量部、グルコース４０質量部、および食塩１質量部を充分に混合し、鶏卵２８０質量部を加えて攪拌し、これに沸騰した牛乳１、０００質量部を徐々に加え、更に火にかけて攪拌を続け、コーンスターチが完全に糊化して全体が半透明になった時に火を止め、これを冷却して適量のバニラ香料を加え、計量、充填、包装して製品を得た。本品は単糖類、二糖類、多糖類を含むカスタードクリームである。本品は、単糖類、二糖類、多糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α－グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できるカスタードクリームである。また、本品は、なめらかな光沢を有し、風味良好で、高品質のカスタードクリームである。
＜経口組成物（栄養補助食品）＞
　グルコース２４７ｇ、実施例３に記載された方法で得られた分岐α－グルカン混合物粉末２１７ｇ、ピロリン酸鉄懸濁液（太陽化学社製商品名サンアクティブＦｅＭ）８g、ビタミンプレミックス１５g、アスコルビン酸ナトリウム３ｇ、亜鉛酵母０.５ｇ、クロム酵母０.３ｇ、スクラロース０.２ｇを造粒原末として造粒装置に投入した。一方、造粒調整用水１００ｍＬ中にコーヒー抽出粉末１５ｇ、硫酸マグネシウム１０ｇを溶解させた。造粒原末を装置内で混合させているところに造粒調整液をノズルの先から少しずつ噴霧して顆粒化し、１パック５.１５gもしくは１パック１０.３ｇとなるようアルミ袋に窒素ガス充填した。本品は単糖類を含む栄養補助食品である。本品は、単糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α－グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できる栄養補助食品である。また、本品は、異味、異臭がなく、栄養補助食品として商品価値の高いものである。
＜経口組成物（紅茶飲料）＞
　実施例１に記載された方法で得られた分岐α－グルカン混合物粉末を用いて、本発明の経口組成物である紅茶を製造した。茶葉１５ｇに対して沸騰水１Ｌを加え、茶葉を濾過して紅茶抽出液１Ｌを得た。紅茶抽出液１Ｌに異性化糖を６０ｇ加え、さらに分岐α－グルカン混合物を重量比で２％、３％、４％添加した紅茶を、それぞれ本発明の紅茶飲料Ａ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α－グルカン混合物を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た紅茶飲料を、対照とした。２０～５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、紅茶飲料に含有するポリフェノール特有の苦みや渋みをマスキングする効果があることが分かった。さらに、本発明の紅茶飲料Ａ、Ｂ、Ｃは、室温に保存しても、対照と比較してクリームダウン現象（紅茶を徐々に冷やすと白く濁る現象）が抑制されることが分かった。
　本品は単糖類を含む紅茶飲料である。本品は、単糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α－グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できる紅茶飲料である。また、本品は、異味、異臭がなく、紅茶飲料として商品価値の高いものである。
　以上説明したとおり、本分岐α－グルカン混合物を有効成分とする本発明の血糖値上昇抑制剤によれば、有効成分である本分岐α－グルカン混合物それ自体が低甘味ないし無味であるため、利用範囲が広く、「糖尿病境界領域のヒト」に限らず単糖類摂取後の血糖値上昇を抑制できるという利点が得られる。また、本発明の経口組成物は、単糖類とともに本発明の血糖値上昇抑制剤を含んでいるため、これを摂取しても血糖値の上昇を懸念する必要がないという利点を有している。本発明は、斯界に多大の貢献をする、誠に意義のある発明である。
図１において、
○：グルコースのみからなる対照試料を摂取した際の血糖値の増分の平均値（Δ血糖）
●：グルコースとともに分岐α－グルカン混合物を含有する被験試料を摂取した際の血糖値の増分の平均値（Δ血糖）
図２において、
ａ：ゴム栓
ｂ：排気用小孔
ｃ：先を切断したプラスチック製１ｍＬチップ
ｄ：プラスチック製２０ｍＬ容注射筒
ｅ：反転小腸
ｆ：漿膜側緩衝液
ｇ：粘膜側緩衝液
ｈ：９５％Ｏ２－５％ＣＯ２ガス還流用チューブ

Claims (7)

  1. 　下記（Ａ）乃至（Ｃ）の特徴を有する分岐α－グルカン混合物を有効成分とする、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制する血糖値上昇抑制剤：
    （Ａ）グルコースを構成糖とし、
    （Ｂ）α－１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα－１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
    （Ｃ）イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する。
  2. 　前記分岐α－グルカン混合物が、イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり５質量％以上７０質量％以下生成する分岐α－グルカン混合物であることを特徴とする請求項１記載の血糖値上昇抑制剤。
  3. 　前記分岐α－グルカン混合物が、下記（Ｄ）の特徴を有する分岐α－グルカン混合物である請求項１又は２記載の血糖値上昇抑制剤：
    （Ｄ）高速液体クロマトグラフ法（酵素－ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量が４０質量％以上である。
  4. 　前記分岐α－グルカン混合物が、下記（Ｅ）及び（Ｆ）の特徴を有する分岐α－グルカン混合物である請求項１乃至３のいずれかに記載の血糖値上昇抑制剤：
    （Ｅ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基の比が１：０．６乃至１：４の範囲にある；及び
    （Ｆ）α－１，４結合したグルコース残基とα－１，６結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の５５％以上を占める。
  5. 　前記分岐α－グルカン混合物の平均グルコース重合度が、８乃至５００であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載の血糖値上昇抑制剤。
  6. 　請求項１乃至５のいずれかに記載の血糖値上昇抑制剤と、単糖類を含有することを特徴とする経口組成物。
  7. 　単糖類が、グルコース及びフルクトースからなる群より選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする請求項６記載の経口組成物。
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