JP7217089B2 - 血糖値上昇抑制剤及びこれを含んでなる経口組成物 - Google Patents
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Description
(A)グルコースを構成糖とし、
(B)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(C)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する。
(A)グルコースを構成糖とし、
(B)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(C)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する。
(E)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:0.6乃至1:4の範囲にあり、
(F)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の55%以上を占める。
(a)グルコースを構成糖とし、
(b)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(c)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり35質量%生成した。
(d)水溶性食物繊維含量が82.9質量%であり、
(e)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:2.1であり、
(f)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の73.8%であった。
(g)α-1,3結合したグルコース残基が全グルコース残基の2.1%であった。
(h)α-1,3,6結合したグルコース残基が全グルコース残基の5.6%であった。
糖尿病などのグルコース代謝能異常の経歴のある者は除外した空腹時血糖値(摂取前の血糖値)がおおよそ80~110mg/dLである健康な男女13人の被験者に、グルコースのみからなる対照試料50g(表1を参照)を水に溶解し200mLにした水溶液を与え、5分以内に摂取させた。摂取前、摂取後30、45、60、90、120分の計6回、被験者の指先から採血し、試験紙『アキュチェックアビバストリップ F』(ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社販売)と自己血糖測定器『アキュチェックアビバ ナノ』(ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社販売)とを用いて血糖値を測定した。なお、グルコースとしては、市販の粉末グルコース(商品名『フジクリスター』、加藤化学株式会社販売)を用いた。
ヒトにおける本分岐α-グルカン混合物の血糖値上昇抑制作用のメカニズムを検証するため、ラット反転小腸を用いて、小腸でのグルコース吸収に与える影響を検討した。本分岐α-グルカン混合物としては実験1で用いたと同じ標品を用い、難消化性デキストリンとしては市販の難消化性デキストリン(商品名『ファイバーソル2』、松谷化学工業株式会社販売)を用いた。
Wistarラット(雄、7週齢、日本クレア株式会社販売)を購入し、1~3週間は標準飼料を与えて飼育し馴化させた。次いで、当該ラットを4時間絶食させた後、ソムノペンチル麻酔下に正中切開にて開腹して小腸を採取し、採取したラット小腸のトライツ(Treitz)靭帯(小腸の途中にあり、小腸を背中側の壁(後腹壁)に繋ぎ止めている靭帯様の構造)より下部側(回腸側)に向かって約16cmから24cmの部位までの長さ約8cmの部分小腸を切り出し、試験に用いた。
ラット反転小腸を用いたグルコース吸収試験は、図2に示す試験装置を作製し、下記の手順にしたがって実施した。
以下、試験装置の概要について、図2に基づき説明する。プラスチック製20mL容注射筒(図2の符号d)を容器として用い、注射筒dの上部にガス排気用小孔(図2の符号b)を設け、注射筒dの下端にはガス還流用チューブ(図2の符号h)を装着する。ゴム栓(図2の符号a)の中央部に孔をあけ、先を切断したプラスチック製1mLチップ(図2の符号c)を差し込み、当該チップcの先には一端を結紮した反転小腸(図2の符号e)を装着し結紮する。これを注射筒dの上端から差し込み、試験装置とする。
(1)グルコースのみ、グルコースと分岐α-グルカン混合物、又は、グルコースと難消化性デキストリンをクレブス-リンゲル重炭酸緩衝液(pH7.4)(以下、「KRB緩衝液」と略称する。)にそれぞれ溶解し、下記3種の被験サンプル溶液を調製した。
対照群:グルコースのみ(180mg/dL,10mM);
分岐α-グルカン混合物添加群:グルコース(180mg/dL,10mM)に分岐α-グルカン混合物(60mg/dL)を添加;
難消化性デキストリン添加群:グルコース(180mg/dL,10mM)に難消化性デキストリン(60mg/dL)を添加;
(2)プラスチック製20mL容注射筒(図2の符号d)に、上記3種の被験サンプル溶液のいずれかを20mL(図2の符号g)注入し、37℃の恒温水槽に入れてガス還流用チューブ(図2の符号h)から、95%O2-5%CO2ガスを通気し、ガス還流を行う。
(3)実験2-1で取得したラット小腸の内部を、95%O2-5%CO2ガスを通気した冷KRB緩衝液で洗浄する。
(4)図示しない反転用棒を腸管の近位端に少し挿入し、反転用棒を小腸内に押し入れながら反転させ、反転小腸とする。
(5)反転用棒から外した反転小腸(図2の符号e)に、先を切断したプラスチック製1mLチップ(図2の符号c)を挿入・結紮することにより装着し、近位端から約5cmのところを結紮する。
(6)反転小腸eを装着したチップcを注射筒dの内部にセットし、マイクロピペットでチップcの上部より反転小腸漿膜側(反転小腸cの内側)にKRB緩衝液0.5mL(図2の符号f)を注入する。この時点で実験(インキュベーション)開始とした。なお、試験前及び試験中ともに、粘膜側(反転小腸cの外側)の被験サンプル溶液gには95%O2-5%CO2ガスを通気させた。
(7)粘膜側、漿膜側ともにインキュベート0、30、60、90、120分の時点で溶液各5μLをマイクロピペットでサンプリングし、グルコース定量キット(商品名『グルコースCIIテストワコー』、和光純薬工業株式会社販売)を用いてグルコースを定量した。
(8)各被験サンプル群ともそれぞれ6回試験し、データの検定は、Tukey-Kramer法にて行い比較した。危険率0.05未満で「有意差あり」とした。
国際公開第WO2008/136331号パンフレットの実施例5に記載された方法に従い、分岐α-グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α-グルカン混合物粉末は、以下の(a)乃至(g)の特徴を有していた。
(a)グルコースを構成糖とし、
(b)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(c)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり35質量%生成し、
(d)水溶性食物繊維含量が80.8質量%であり、
(e)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:2.2であり、
(f)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の72.9%であり、
(g)平均グルコース重合度が31であり、Mw/Mnが2.0である。
国際公開第WO2008/136331号パンフレットの実験2-2に記載された方法に従い、固形分濃度30質量%の分岐α-グルカン混合物溶液を調製し、その後、常法に従って噴霧乾燥して分岐α-グルカン混合物粉末を得た。なお、得られた分岐α-グルカン混合物粉末は、以下の(a)乃至(g)の特徴を有していた。
(a)グルコースを構成糖とし、
(b)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(c)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり27.2質量%生成し、
(d)水溶性食物繊維含量が41.8質量%であり、
(e)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:0.6であり、
(f)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の83.0%であり、
(g)平均グルコース重合度が405であり、Mw/Mnが16.2である。
国際公開第WO2008/136331号パンフレットの実施例6に記載された方法に従い、分岐α-グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α-グルカン混合物粉末は、(a)乃至(g)の特徴を有していた。
(a)グルコースを構成糖とし、
(b)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(c)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり40.6質量%生成し、
(d)水溶性食物繊維含量が77.0質量%であり、
(e)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:4であり、
(f)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の67.9%であり、
(g)平均グルコース重合度が18であり、Mw/Mnが2.0である。
トウモロコシ澱粉液化液に、さらにマルトテトラオース生成アミラーゼを固形物1グラム当たり2単位添加した以外は、国際公開第WO2008/136331号パンフレットの実施例5に記載された方法に従い、分岐α-グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α-グルカン混合物粉末は、(a)乃至(g)の特徴を有していた。
(a)グルコースを構成糖とし、
(b)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(c)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり41.9質量%生成し、
(d)水溶性食物繊維含量が69.1質量%であり、
(e)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:2.4であり、
(f)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の64.2%であり、
(g)平均グルコース重合度が13であり、Mw/Mnが2.0である。
実施例1に記載された方法で得られた分岐α-グルカン混合物にアミログルコシダーゼ(グルコアミラーゼ)を作用させ、分解されなかった成分をゲル濾過クロマトグラフィーを用いて分取した。その後、常法に従って精製及び噴霧乾燥して分岐α-グルカン混合物粉末を調製した。なお、得られた分岐α-グルカン混合物は、(a)乃至(g)の特徴を有していた。
(a)グルコースを構成糖とし、
(b)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有し、
(c)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり21質量%生成し、
(d)水溶性食物繊維含量が94.4質量%であり、
(e)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:1.9であり、
(f)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の64%であり、
(g)グルコース重合度が22であり、Mw/Mnが1.7である。
噴霧乾燥により製造したオレンジ果汁粉末33質量部に対して、実施例5に記載された方法で得られた分岐α-グルカン混合物粉末10質量部、グルコース20質量部、無水結晶マルチトール20質量部、無水クエン酸0.65質量部、リンゴ酸0.1質量部、2-O-α-グルコシル-L-アスコルビン酸0.2質量部、クエン酸ソーダ0.1質量部、及び粉末香料の適量をよく混合攪拌し、粉砕し微粉末にして、これを流動層造粒機に仕込み、排風温度40℃とし、これに実施例1の方法で得た分岐α-グルカン粉末を水に溶解して得た溶液をバインダーとして適量スプレーし、30分間造粒し、計量し、包装して製品を得た。本品は、単糖類を含む果汁含有率約30%の粉末ジュースである。本品は、単糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α-グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できる粉末ジュースである。また、本品は、異味、異臭がなく、ジュースとして商品価値の高いものである。
コーンスターチ100質量部、実施例4に記載された方法で得られた分岐α-グルカン混合物粉末30質量部、トレハロース含水結晶70質量部、グルコース40質量部、および食塩1質量部を充分に混合し、鶏卵280質量部を加えて攪拌し、これに沸騰した牛乳1、000質量部を徐々に加え、更に火にかけて攪拌を続け、コーンスターチが完全に糊化して全体が半透明になった時に火を止め、これを冷却して適量のバニラ香料を加え、計量、充填、包装して製品を得た。本品は単糖類、二糖類、多糖類を含むカスタードクリームである。本品は、単糖類、二糖類、多糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α-グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できるカスタードクリームである。また、本品は、なめらかな光沢を有し、風味良好で、高品質のカスタードクリームである。
グルコース247g、実施例3に記載された方法で得られた分岐α-グルカン混合物粉末217g、ピロリン酸鉄懸濁液(太陽化学社製商品名サンアクティブFeM)8g、ビタミンプレミックス15g、アスコルビン酸ナトリウム3g、亜鉛酵母0.5g、クロム酵母0.3g、スクラロース0.2gを造粒原末として造粒装置に投入した。一方、造粒調整用水100mL中にコーヒー抽出粉末15g、硫酸マグネシウム10gを溶解させた。造粒原末を装置内で混合させているところに造粒調整液をノズルの先から少しずつ噴霧して顆粒化し、1パック5.15gもしくは1パック10.3gとなるようアルミ袋に窒素ガス充填した。本品は単糖類を含む栄養補助食品である。本品は、単糖類を含んでいるものの血糖値上昇抑制剤として分岐α-グルカン混合物を配合しているので、摂取した場合の血糖値の上昇を抑制できる栄養補助食品である。また、本品は、異味、異臭がなく、栄養補助食品として商品価値の高いものである。
実施例1に記載された方法で得られた分岐α-グルカン混合物粉末を用いて、本発明の経口組成物である紅茶を製造した。茶葉15gに対して沸騰水1Lを加え、茶葉を濾過して紅茶抽出液1Lを得た。紅茶抽出液1Lに異性化糖を60g加え、さらに分岐α-グルカン混合物を重量比で2%、3%、4%添加した紅茶を、それぞれ本発明の紅茶飲料A、B、Cとした。また、分岐α-グルカン混合物を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た紅茶飲料を、対照とした。20~50代の男女10名で官能評価を行ったところ、紅茶飲料に含有するポリフェノール特有の苦みや渋みをマスキングする効果があることが分かった。さらに、本発明の紅茶飲料A、B、Cは、室温に保存しても、対照と比較してクリームダウン現象(紅茶を徐々に冷やすと白く濁る現象)が抑制されることが分かった。
○:グルコースのみからなる対照試料を摂取した際の血糖値の増分の平均値(Δ血糖)
●:グルコースとともに分岐α-グルカン混合物を含有する被験試料を摂取した際の血糖値の増分の平均値(Δ血糖)
図2において、
a:ゴム栓
b:排気用小孔
c:先を切断したプラスチック製1mLチップ
d:プラスチック製20mL容注射筒
e:反転小腸
f:漿膜側緩衝液
g:粘膜側緩衝液
h:95%O2-5%CO2ガス還流用チューブ
Claims (8)
- 下記(A)乃至(C)の特徴を有する分岐α-グルカン混合物を有効成分とする、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制するための血糖値上昇抑制剤:
(A)グルコースを構成糖とする;
(B)α-1,4結合を介して連結したグルコース重合度3以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα-1,4結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度1以上の分岐構造を有する;及び
(C)イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを生成する。 - 前記分岐α-グルカン混合物が、イソマルトデキストラナーゼ消化により、イソマルトースを消化物の固形物当たり5質量%以上70質量%以下生成する分岐α-グルカン混合物であることを特徴とする請求項1記載の血糖値上昇抑制剤。
- 前記分岐α-グルカン混合物が、下記(D)の特徴を有する分岐α-グルカン混合物である請求項1又は2記載の血糖値上昇抑制剤:
(D)高速液体クロマトグラフ法(酵素-HPLC法)により求めた水溶性食物繊維含量が40質量%以上である。 - 前記分岐α-グルカン混合物が、下記(E)及び(F)の特徴を有する分岐α-グルカン混合物である請求項1乃至3のいずれか一項に記載の血糖値上昇抑制剤:
(E)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基の比が1:0.6乃至1:4の範囲にある;及び
(F)α-1,4結合したグルコース残基とα-1,6結合したグルコース残基との合計が全グルコース残基の55%以上を占める。 - 前記分岐α-グルカン混合物の平均グルコース重合度が、8乃至500であることを特徴とする請求項1乃至4のいずれか一項に記載の血糖値上昇抑制剤。
- 請求項1乃至5のいずれか一項に記載の血糖値上昇抑制剤を含有する、ヒトの単糖類摂取後の血糖値の上昇を抑制するための経口組成物。
- さらに、単糖類を含有することを特徴とする請求項6記載の経口組成物。
- 単糖類が、グルコース及び/又はフルクトースであることを特徴とする請求項7記載の経口組成物。
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