JP2002507575A - モリンガ属植物種子の少なくとも1種のタンパク質抽出物の使用及び対応する化粧品及び/又は医薬組成物 - Google Patents
モリンガ属植物種子の少なくとも1種のタンパク質抽出物の使用及び対応する化粧品及び/又は医薬組成物Info
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Abstract
Description
に関し、化粧品、皮膚科学及び/又は医薬用途におけるMoringa属植物種
子の少なくとも1種のタンパク質抽出物の使用と、少なくとも1種の前記抽出物
を含む化粧品及び/又は医薬組成物を目的とする。
a、M.aptera、M.concanensis、M.drouhardi
i、M.hildebrandtii、M.longituba)を含み、Mo
ringa pterygosperma(Moringa oleifera
とも言う)が最もよく知られている。
アフリカ及び南アメリカの熱帯地方の至る所で生育している。長さ30〜50c
mの果実がドラムスティック状にぶら下がっていることから、英名では“dru
mstick tree”と呼ばれ、その緑色の莢果は世界中で野菜として食用
されている。そのため、種子を油の製造に利用することは稀である。
が伝統薬として使用されている。
徴とする。
である。
anensis及びM.drouhardiiの種子油を比較すると、脂肪酸組
成が非常によく似ており、いずれもオレイン酸(71〜78%)と飽和脂肪酸濃
度が非常に高い。
量2.6〜4.7%)。
が良好であるため、古代文明で化粧品及び宗教用香油の調合者に最もよく使用さ
れた油である。
」されている。
って、最近では発展途上国で水処理及び精製の経済的資源として利用できる可能
性からも研究者に注目されている。
性化合物を含有していることが判明した。
ることが分かっている(特に論文“Isolation and charac
terisation of a flocculating protein
from Moringa oleifera lam”,GASSENSC
HMIDT U.,JANY K.D.,TAUSCHE B及びNIEBER
GALL H.R.,Biochimica et biophysica a
cta,1243:477−481,1995 − “Active agen
ts and mechanism of coagulation of t
urbid waters using moringa oleifera”
,NDABIGENGESERE A.,SUBBA NARASIAH K.
及びTALBOT BG.,Water research,29,2:703
−710,1995参照)。
水性緩衝溶媒で抽出した後、カチオン交換クロマトグラフィーにより単離した。
クション(MO1、MO2及びMO3と呼ぶ)に分離する。
(MO2.1、MO2.2及びMO2.3)に分離することができる。
あると思われるが、MO2.3は数種のタンパク質から構成される。
のバンドがタンパク質MO2.1及びMO2.2に観察されるので、これらは二
量体である。
0である。
基)、アルギニン(7残基)及びプロリン(7残基)含量の高い60個のアミノ
酸を含み、末端はピログルタミン酸基によりブロックされている。
ga種子タンパク質抽出物が特殊な新規性質も備えており、良好な耐性に結び付
けられる有益なその皮膚及び皮膚付属器作用によりケア用化粧品及び特に皮膚科
学用途での医薬に直接利用できることを発見した。
又は医薬組成物の製造のための、単独使用又は少なくとも1種の別の活性成分と
併用する活性成分としてのMoringaceae科に属するMoringa属
植物の種子から抽出した少なくとも1種のタンパク質フラクションの使用である
。
電点と凝集能に直接起因する。
分の範囲での利用効果的なキレート化効果が確認された。
oleifera植物の抽出物から構成され、前記タンパク質フラクションは乾
燥抽出物に基づき0.01〜100重量%、好ましくは約45重量%のタンパク
質を含有している。
用して水又は水溶液、特に種々のpHの塩類溶液で抽出される。
くは穀をとった種子の水性抽出物、種々のpHの塩類溶媒抽出物もしくは緩衝溶
媒抽出物又はタンパク質濃縮物又は精製タンパク質又は前記成分の少なくとも2
種の混合物から構成され、7を上回る等電点、好ましくは8〜12の等電点をも
つ。
ニウム等の塩等による沈殿又は有機ポリマーもしくは温度変化による沈殿から構
成される群から選択される抽出方法により得ることが好ましい。
ク質フラクションの獲得を助長できることが確認された。
質フラクションの種々の獲得及び製造方法を例示として非限定的に説明する。
nga oleiferaの核をヘキサン還流下に2回連続抽出して脱脂し、濾
過後、粉末を40℃でオーブン乾燥し、残留含油率2.5%とする。
7.5に維持しながら周囲温度で1時間抽出する。
ビウレット法によるタンパク質濃度21.54g/l(即ち乾燥抽出物に基づく
タンパク質純度45.92%)の黄色い濾液1.77リットルが得られる。
噴霧乾燥物65.72gが得られる。
rose 12HRカラムによるこの抽出物のゲル濾過分析のクロマトグラフィ
ープロフィル(添付図1参照)は面積の52%に相当し且つ7800〜1100
0Daの分子量に対応する主フラクションを示す。このピークには肩が存在する
ので数種の化合物の存在が裏付けられ、分子量範囲はMoringaの凝集性タ
ンパク質のモノマー(6500〜7000Da)と二量体(13000Da)に
ついて文献に記載されている範囲に近似する。
調整する。
15分間5000gで遠心分離する。
lで2回洗浄する。
溶液のpHを連続的に4.5に調整して沈殿を溶解させる(商品名Turaxで
知られる型の装置を使用して分散を助長する)。
、Whatman濾紙No.41を敷いたブフナー漏斗で上清を濾過する。
。
図2参照)、面積の70%に相当し且つ約8800Daの分子量に対応する主フ
ラクションが検出される。
OMETの名称で知られる型のプレスで圧縮抽出し、得られたケーキを粉砕し、
均質粉末を得る。
製造する。
を追加する以外は製造例2に従ってタンパク質をpH11.8で沈殿させる。
.5でなく6とする)。
ットル)を噴霧乾燥し、噴霧乾燥物34.6gを集める(即ち乾燥抽出物に基づ
く噴霧乾燥収率71.5%)。
5%)。
製造する。
.5の蒸留水500mlで30分間平衡化する。
セルロースを集め、pH7.5の水500mlで再び平衡化する。
oleiferaの核ケーキの水性抽出物と接触させる。
つフラクション)をブフナー漏斗で濾去した後、「負荷」セルロースをpH7.
5の蒸留水1リットルで2回洗浄し、その後、ブフナー漏斗で濾過する。
間接触させる。
着し、60g/lNaCl溶媒で溶離したタンパク質のクロマトグラフィープロ
フィルは図3に実線で示す)。
燥抽出物に基づくタンパク質純度67%)をもつ濾液110mlが得られる。
図3参照)、面積の70%に相当し且つ約7100Daの分子量に対応する主フ
ラクションが検出される。
切な手段により脱水することができる。
示す本発明者らによる試験の説明から自明である。
物1、3及び4)の実質効果を非損傷天然人毛とパーマにより損傷した人毛で脱
着試験により評価した。
に基づく。
応)後に抽出液中で分光光度法(Tegliaら,1992)により定量した。
フルオレサミンとの反応は抽出物1ではpH8、抽出物3及び4ではpH6の硼
酸緩衝液中で実施した。
とパーマにより損傷した毛髪(図4B)からなる人毛房に濃度2%で添加した抽
出物1、3及び4の実質効果(脱着による評価)を示す。
評価した。
タンパク質(抽出物1、3及び4)又は対照蒸留水で処理した。
ro皮膚水分補給評価モデルに載せた。
法で加湿し、蒸留水添加から1、2、4、6及び24時間後にコンダクタンス測
定を行った。
3及び4の実質性試験比較結果を図5A及び5Bに要約する(10回の試験の平
均/±SEM/1因子ANOVA/アポステリオリフィッシャー検定)。
0%の誘電コンダクタンス増加を示し、添加後24時間まで水分補給効果を観察
できた。
いるポリビニルピロリドン(皮膜形成剤)1.5%を加えた水溶液の保湿性試験
によりMoringaタンパク質フラクション(抽出物1、3及び4)の実質効
果をヒトでin vivo確認した。
される水分補給を静電容量により30秒おきに2分間測定した。最初のゾーンは
処理せず、次の3ゾーンは1.5%の抽出物1、3又は4と1.5%のKoll
idon 30を加えた水溶液4μl/cm2、最後のゾーンは1.5%のKo
llidon 30のみを加えた水溶液4μl/cm2で予め処理した。
給は無処理又は皮膜形成剤単独を加えた対照ゾーンに比較して抽出物+Koll
idon 30で予め処理した皮膚ゾーンのほうが顕著である。
質効果による保湿活性をもつ。
ト皮膚に対して植物炭等の粒子収集による汚染防止作用も示した。
液0.75mlと薬用植物炭の0.5%水性懸濁液3mlを試験管に加え、蒸留
水0.75mlを同様に同一植物炭水性懸濁液3mlと接触させた場合に比較す
ることによりin vitroで確認された。
底の沈殿と上清の完全に透明な水に分離したが、抽出物を加えなかった試験管で
は炭の黒い水性懸濁液は殆ど変化しなかった。
合物を加えると、浄化プロセスを更に促進するという利点があることも認められ
た。
用植物炭の水性懸濁液は相当の表面汚染を生じ、角質層の表層レベルへの粒子侵
入を伴うことが観察された。
抽出物1の効力も実験評価した。
llidonの混合物4mg/cm2を上腕前内面に塗布した。この処理後に同
一0.5%炭水性懸濁液で皮膚を故意に汚染した。その後、濯ぎ水を再吸収させ
ながら皮膚をこすらずに蒸留水で濯いだ。
けた後、剥がした。
を示すストリッピングと角質層の表層レベルの微細な皮膚凹凸が観察された。
ringa抽出物とKollidonの混合物で予め処理した皮膚(図7B)で
は炭粒子の角質層侵入が非常に少ないが、対照皮膚(図7A)では侵入がかなり
顕著である。
図8B)の顕微鏡画像は炭粒子量の顕著な減少を示しており、抽出物とKoll
idonのこの混合物が濯ぎ操作中に皮膚を著しく有効に洗浄できたことを立証
している。実際に、抽出物で予め処理しなかった皮膚のストリッピング(図8A
)に比較すると、濯ぎ操作により除去されなかった多数の炭粒子がストリッピン
グに付着していた。
を発揮する。 −炭粒子を捕獲し、皮膜形成剤と協働して炭粒子の角質層侵入を阻止する。 −炭粒子を保持することにより、1回の濯ぎ操作で炭粒子を除去し易くする。
用製品、紫外線製品、皺防止健康製品、汚染防止製品)のみならず、ヘアケア及
びヘルス分野(ローション、シャンプー、クリーム、ムース、保護剤、修復剤、
柔軟剤、光保護剤又はパーマ及びカラーリング剤)、爪用製品(クリーム、ロー
ション、マニキュア、モイスチャライザー、皮膜形成剤、保護剤及び修復剤)及
び唇用製品(スティックアプリケーター、口紅、バルサム、モイスチャライザー
、皮膜形成剤)でも利用することができる。
01〜80重量%、好ましくは約2重量%を単独又は少なくとも1種の別の活性
成分と共に含むことを特徴とする皮膚又は皮膚付属器の特に局所用化粧品及び/
又は医薬組成物にも関する。
天然タンパク質)で使用してもよいし、以下の処理: −Moringa属植物から抽出した天然タンパク質の重合、 −微生物又は植物細胞による発酵、 −Moringa属植物から抽出した天然タンパク質の化学的加水分解、 −動物、植物、微生物又は真菌起源のプロテアーゼによる天然タンパク質の酵素
加水分解、 −化学的又は酵素官能化、 −例えば単糖類、配糖体、脂質等の分子又は化合物のグラフトによる化学的修飾
のいずれか1種により修飾又は官能化した形態で使用してもよい。
セル、カイロミクロン、マクロ粒子、ミクロ粒子、ナノ粒子、マクロカプセル、
マイクロカプセル及びナノカプセル等の適当な任意化粧品ビヒクルに組み込むか
又は結合してもよいし、有機ポリマー又は無機キャリヤーに吸着又はグラフトし
てもよい。
皮、特に角質層及び皮膚付属器、即ち皮膚、毛髪及び爪の実質及び水分補給活性
に加え、皮膚、唇及び皮膚付属器(爪及び毛髪)の生理的調節作用、皮膚及び皮
膚付属器(爪及び毛髪)の再生、修復及び水分補給作用、皺防止作用並びに汚染
防止作用(皮膚、唇、毛髪)を特にもつことが確認及び立証された。
fera植物の少なくとも1種の種子タンパク質抽出物を含む種々の化粧品処方
について説明する。
油相から構成される重量組成とすることができる。 油相:コハク酸イソステアリルジグリセリル 3.00 パラフィン油 15.00 Quaternium-18ヘクトライト 0.50 ポリ(PEG-22/ドデシルグリコール) 1.00 水相:硫酸マグネシウム 0.80 ブチレングリコール 4.00 Moringa oleiferaタンパク質抽出物(製造例1) 1.00 蒸留水 9.00 Elestab 4112(Laboratoires Serobiologiques) 0.35 香料 0.30 蒸留水 合計で100.00
し、水相の水も80℃に加熱して防腐剤(Elestab 4112)を溶かし
た後、タービン撹拌下に水相を油相に注入し、撹拌下に徐々に冷却した後、約5
0℃でMoringaタンパク質抽出物母水溶液、次いで香料を加え、最後に完
全に冷却するまで撹拌することからなる。
から構成される重量組成とすることができる。 油相:Ceteareth 25 2.00 Ceteareth 6(及び)ステアリルアルコール 1.00 セチルアルコール 4.00 ステアリン酸グリセロール 4.00 ペトロラタム 5.00 カプリル酸/カプリン酸トリグリセリド 5.00 水相:グリセリン 10.00 Moringa oleiferaタンパク質(製造例2) 1.50 蒸留水 8.50 Elestab 4112(Laboratoires Serobiologiques) 0.40 香料 0.30 蒸留水 合計で100.00
水相も80℃に加熱してElestab 4112を溶かし、別にMoring
a oleiferaタンパク質抽出物母溶液を調製し、タービン撹拌下に油相
を水相に注入した後、約50℃でMoringa抽出物母溶液を加え、最後に冷
却するまで撹拌することからなる。
ば下記のような水相と油相から構成される重量組成とすることができる。 油相:ステアリン酸グリセロール 14.00 オクチルドデカノール 6.00 アジピン酸ジブチル 6.00 Ceteareth 12 1.50 Ceteareth 20 1.50 水相:PVP 0.50 グリセリン 4.00 Elestab 388(Laboratoires Serobiologiques) 2.00 Moringaタンパク質抽出物(抽出物2) 1.00 蒸留水 9.00 香料 0.20 蒸留水 合計で100.00
に油相を80℃に加熱し、水相も80℃に加熱してElestab 388とP
VPを溶かし、80℃でタービン撹拌下に油相を水相に注入した後、撹拌下に徐
々に冷却した後、約50℃でMoringaタンパク質母分散液を加え、最後に
冷却するまで撹拌することからなる。
品は例えば下記のような重量組成とすることができる。 製造例4により製造したMoringaタンパク質 0.50 蒸留水 9.50 ヒドロキシエチルセルロース 0.50 Elestab 305(Laboratoires Serobiologiques) 0.50 香料 0.10 Cremophor RH40 0.30 蒸留水 合計で100.00
方法は主に約50℃に加熱した水にElestab 505とヒドロキシエチル
セルロースを溶かし、香料とCremophor RHを分散した後、混合物を
周囲温度にし、Moringaタンパク質を溶かし、最後に濾過することからな
る。
内で特に種々の成分の組成や、等価技術の置き換えによる変更が可能である。
す。 図4Bはパーマにより損傷した毛髪に対する製造例1、3及び4の抽出物の実
質効果を示す。
定によるin vitro皮膚水分補給評価の結果を示す。 図5Bは対照に対する製造例1、3及び4の抽出物の誘電コンダクタンス増加
率を示す。
た製造例1、3及び4の抽出物の保湿能を示す。
皮膚の100倍顕微鏡写真である。
皮膚の100倍顕微鏡写真である。
Claims (18)
- 【請求項1】 皮膚、唇及び/又は皮膚付属器の局所用化粧品及び/又は医
薬組成物の製造のための、単独使用又は少なくとも1種の別の活性成分と併用す
る活性成分としてのMoringaceae科に属するMoringa属植物の
種子から抽出した少なくとも1種のタンパク質フラクションの使用。 - 【請求項2】 タンパク質フラクションがMoringa oleifer
a植物の抽出物から構成されることを特徴とする請求項1に記載の使用。 - 【請求項3】 タンパク質フラクションが場合により超音波発生器を使用し
て水又は水溶液、特に種々のpHの塩類溶液で抽出されることを特徴とする請求
項1又は2に記載の使用。 - 【請求項4】 タンパク質フラクションが部分的もしくは完全に脱脂した殻
つきもしくは穀をとった種子の水性もしくは緩衝溶媒抽出物又はタンパク質濃縮
物又は精製タンパク質又は前記成分の少なくとも2種の混合物から構成されるこ
とを特徴とする請求項1から3のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項5】 タンパク質フラクションが乾燥抽出物に基づき0.01〜1
00重量%、好ましくは約45重量%のタンパク質を含有していることを特徴と
する請求項1から4のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項6】 タンパク質フラクションが7を上回る等電点、好ましくは8
〜12の等電点をもつ少なくとも1種のタンパク質化合物を含むことを特徴とす
る請求項1から5のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項7】 タンパク質フラクションがpH8〜12の等電点沈殿により
得られることを特徴とする請求項1から6のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項8】 タンパク質フラクションがイオン交換クロマトグラフィーに
より得られることを特徴とする請求項1から6のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項9】 タンパク質フラクションがアフィニティークロマトグラフィ
ー、ゲル濾過、限外濾過、溶媒、硫酸アンモニウム等の塩等による沈殿又は有機
ポリマーもしくは温度変化による沈殿から構成される群から選択される製造方法
により得られることを特徴とする請求項1から6のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項10】 タンパク質フラクションが天然タンパク質から構成される
ことを特徴とする請求項1から9のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項11】 タンパク質フラクションが天然タンパク質から製造した化
学的又は酵素水解物から構成されることを特徴とする請求項1から9のいずれか
一項に記載の使用。 - 【請求項12】 タンパク質フラクションがMoringa属植物から抽出
した天然タンパク質の重合又は微生物もしくは植物細胞発酵により得られること
を特徴とする請求項1から9のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項13】 タンパク質フラクションが例えば単糖類、配糖体、脂質等
の化合物のグラフトにより化学的に修飾されていることを特徴とする請求項1か
ら9のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項14】 タンパク質フラクションが例えば皮膜形成剤、リポソーム
、シクロデキストリン、ミセル、カイロミクロン、マクロ粒子、ミクロ粒子、ナ
ノ粒子、マクロカプセル、マイクロカプセル又はナノカプセル等の適当な化粧品
ビヒクルに組み込まれているか又は結合されていることを特徴とする請求項1か
ら13のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項15】 タンパク質フラクションが有機ポリマー又は無機キャリヤ
ーに吸着又はグラフトされていることを特徴とする請求項1から13のいずれか
一項に記載の使用。 - 【請求項16】 抽出タンパク質フラクションが皮膚、唇及び皮膚付属器、
特に表皮、特に角質層及び皮膚付属器、即ち皮膚、唇及び爪の実質及び水分補給
活性をもつことを特徴とする請求項1から13のいずれか一項に記載の使用。 - 【請求項17】 抽出タンパク質フラクションが皮膚、唇及び皮膚付属器の
生理的調節作用、皮膚、唇及び皮膚付属器の再生、修復及び水分補給作用、皺防
止作用並びに汚染防止作用をもつことを特徴とする請求項1から13のいずれか
一項に記載の使用。 - 【請求項18】 活性成分として請求項1から17のいずれか一項に記載の
1種以上のタンパク質フラクション0.01〜80重量%、好ましくは約2重量
%を単独又は少なくとも1種の別の活性成分と共に含むことを特徴とする皮膚又
は皮膚付属器の特に局所用化粧品及び/又は皮膚医薬組成物。
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