DE2723908A1

DE2723908A1 - Pharmazeutische und kosmetische praeparate auf der grundlage von elastin

Info

Publication number: DE2723908A1
Application number: DE19772723908
Authority: DE
Inventors: Spaeter Genannt Werden Wird
Original assignee: INVENTIONS ET D APPLIC INVAP
Current assignee: INVENTIONS ET D APPLIC INVAP
Priority date: 1976-06-02
Filing date: 1977-05-26
Publication date: 1977-12-15
Also published as: DE2723908B2; CH613618A5; FR2353282B1; GB1578066A; FR2353282A1; BE855287A

Description

PATE N T AN WAI TE

TER MEER - MÜLLER - STEINMEISTER

D-UOOO MUnchon 22 D-48OO Bielefeld

Triftstrußu 4 2. Siekerwall 7

26. Ma/ 1977

JTM 102 34
tM/th

ETABLISSEMENT D'INVENTIONS ET D'APPLICATIONS (INVAP), Vaduz, Liechtenstein

Pharmazeutische und kosmetische Präparate auf der Grundlage von Elastin.

709ΒΒΠ/09ΠΒ

Il M MLLN · MtJl I I H · :·Η INMI I: i I I M

ETABLISSEMENT D'INVENTIONS ET D'APPLICATIONS (INVAP)

Case JTM 10234

Beschreibung

Die vorliegende Erfindung betrifft Zubereitungen oder Präparate auf der Grundlage von Elastin, die für therapeutische und kosmetische Zwecke geeignet sind.

Elastin ist ein faseriges Protein, das man in höheren Organismen, wie Säugern, findet und das insbesondere in großen Mengen in großen Bändern (ligament large) von Rindern und in der Wandung der großen Gefäße (beispielsweise der Aorta) vorliegt. Man findet es auch in der Haut und in dem elastischen Knorpelmaterial.

Für den erfindungsgemäßen Einsatzzweck kann man das Elastin ausgehend von irgendwelchen dieser Organe und von irgendwelchen Tieren, die elastinreiche Gewebe besitzen, herstellen, wobei man insbesondere von den großen Bändern oder dem großen Band von Rindern oder von der Aorta von Rindern, Pferden oder Schweinen ausgeht. Man kann das Elastin mit Hilfe verschiedener Methoden gewinnen, deren einfachste darin besteht, daß man das Organ durch mehrfaches Waschen mit Butanol, Aceton, Alkohol oder anderen geeigneten Lösungsmitteln entfettet und dann die extrahierbaren Substanzen mit

wäßrigen Puffern, wie NaCl-, CaCl₂- oder MgCl₂-Lösungen mit einer Konzentration im Bereich von etwa 1 Mol/l extrahiert, wobei die Anwendung von 3 bis 5 Extraktionsvorgängen während 24 Stunden unter Bewegung und Zerklei- nerung des Materials in einer Kühlkammer bei einer Temperatur von +4⁰C notwendig sind. Anschließend können

709850/0908

N MbER ■ MUl-LLN ■ S I LINMEISTLR INVAP

die von Elastin verschiedenen Proteine extrahiert werden, entweder durch Behandeln mit einer O,O1m Natriumhydroxidlösung während 4 5 Minuten bei 100°C oder durch die Anwendung von spezifischen proteolytisehen Enzymen, die Elastin nicht angreifen, wie beispielsweise Kollagenase und Trypsin. Das nach diesen Behandlungen unlöslich zurückbleibende Produkt ist faseriges Elastin, das über seine Aminosäurenzusammensetzung, seinen hohen Desmosin- und Isodesmosin-Gehalt und durch seine physiologisch-chemischen oder biochemischen Eigenschaften, beispielsweise der Empfindlichkeit auf die Einwirkung von Elastasen etc., gekennzeichnet werden kann. Faseriges Elastin besteht im wesentlichen aus Proteinmolekülen mit hohem Molekulargewicht (»50 00O), das einen hohen Vernetzungsgrad aufweist und in sämtlichen Lösungsmitteln praktisch unlöslich ist. Das Material kann mit äthanolischer Kaliumhydroxidlösung oder mit anderen geeigneten Lösungsmitteln unter Bildung von löslichen Produkten mit einem geringeren Molekulargewicht von etwa 500 bis 60 000 hydrolysiert werden.

Die Aminosäurenzusammensetzung des Elastins ist genetisch bestimmt und hängt im wesentlichen von der Art des Organismus ab, aus dem das Elastin gewonnen worden 5 ist. Für eine gegebene Art ist die Zusammensetzung konstant. Sie ist insbesondere gekennzeichnet durch das

,, ,_BUn. Hydroxyprolin •_ _Λ

Verhältnis: <⁰'¹ '

das darauf hinweist, daß das Präparat nicht mit Kollagen verunreinigt ist, und durch die Anwesenheit von Brückenaminosäuren oder vernetzenden Aminosäuren in einem Verhältnis:

Desmosin + Isodesmosin 4 Lysin

— °'⁶'

das den Vernetzungsgrad des Elastins widerspiegelt (siehe B.Comte und L.Robert, Bull.Soc.Chim.Biol. 50,

709850/0908

I I < Ml I I < · MUI I I I i ■ : . I I INMI CiIIN I NVAl¹

Nr. 7 bis 8 (1968) 1349 bis 1351).

Das erfindungsgemäß verwendbare Elastin ist ferner durch seine Empfindlichkeit gegen Pankreas-Elastase gekennzeichnet. Bei 37°C und bei einem pH-Wert von 7,9 genügen 15 Minuten, um mindestens 98% des faserigen Elastins mit der Elastase in Lösung zu bringen, die in einem Verhältnis von 1:100 eingesetzt wird.

Das in der oben beschriebenen Weise gereinigte faserige Elastin wird anschließend mit Lösungsmitteln, wie Aceton, Butanol, Chloroform und/oder Methanol, entfettet und bis auf einen Feuchtigkeitsgehalt getrocknet, der nicht weniger als etwa 10 bis 20% betragen darf, da das Elastin in Abwesenheit von Wasser seine spezifischen Eigenschaften, wie seine Elastizität, verliert.

In diesem Trocknungszustand kann das Elastin sehr fein vermählen werden zu Teilchengrößen oder Porositätsgraden, die von der Verwendung des Materials in faserigem Zustand abhängen (beispielsweise mikronisiertes oder feinstvermahlenes faseriges Elastin) . Diese Anwendungsgebiete sind Suspensionen in dispergierenden Lösungsmitteln, die als Adsorbentien für Lipidsubstanzen verwendet werden können. Aufgrund seines stark hydrophoben Verhaltens, das heißt seines hohen Gehaltes an apolaren, lipophilen Aminosäuren kann das Elastin in der Tat in verschiedenen wäßrig-organischen Lösungsmitteln dispergiert und als Adsorbens für Lipidsubstanzen eingesetzt werden.

In dieser Form können Suspensionen von faserigem Elastin entweder zur Herstellung von flüssigen Seifen oder zur Herstellung von Präparaten zum Deodorieren oder Reinigen der Haut verwendet werden, da das Elastin einerseits die Ausscheidungen der schweißbildenden Drüsen und

709850/0908

I M Ml I K ■ MUI I I N ■:. I I INMI I: » I I K INVAl'

andererseits Substanzen zu adsorbieren vermag, die auf der Haut abgeschieden sind, wie kosmetische Produkte, verschiedene Salben sowie Staub und Verunreinigungen, die in dem Schweiß emulgiert werden können.

Als Lösungsmittel zum gleichmäßigen Dispergieren von

faserigem Elastin kann man nicht-ionische Detergentien oder oberflächenaktive Materialien, wie die Polysorbate (Sorbimacrogol, Tween) oder äthoxylierte Alkylphenole (Tritonprodukte oder Nonidet P) in einer Konzentration 10 von 0,01 bis 1% in Puffern, wie Tromethamin (Trometamol) bzw. Tris-Puffer) oder irgendwelchen anderen geeigneten wäßrig-organischen Puffern, verwenden.

Das faserige Elastin kann auch in organisch-alkoholischen Lösungsmitteln dispergiert werden, beispielsweise 15 tert.-Butanol-Wasser-Mischungen, Äthylenglykol und

Propylenglykol, Äthanol-Wasser-Mischungen etc. PoIyäthylenglykole, Polyvinylpyrrolidole und andere Verdickungsmittel, beispielsweise Dextran, sind ebenfalls mit Elastin-Suspensionen verträglich.

20 Das Elastin kann auch in Form der daraus gebildeten löslichen Peptide verwendet werden.

Zu diesem Zweck unterzieht man das faserige Elastin einem schonenden Abbau mit entweder Elastasen, beispielsweise Pankreas-Elastase, oder Lösungsmitteln wie Kaliumhydroxid

in wäßrig-organischem Medium, beispielsweise einer

1m Kaliumhydroxidlösung in 80%igem Äthanol. Zur Unterstützung der Auflösung des Elastins in Gegenwart einer Kaliumhydroxidlösung mit einer Konzentration von 1 Mol/l oder einer anderen geeigneten Konzentration kann man

auch andere Lösungsmittel verwenden, beispielsweise
Fettsäuren oder quartäre Ammoniumverbindungen sowie

709850/0908

MH Mil. U · MUI I I H ■ ί·»Η INMLIMM H INVAP

tert.-Buranol, Aceton, Polyäthylenglykol oder Propylenglykol. Durch eine entsprechende Auswahl der Konzentration der Kaliumhydroxidlösung und des Lösungsmittels kann man die Größe der herzustellenden Peptide beeinflussen.

Erfindungsgemäß sind Peptide mit höherem Molekulargewicht (10 000 bos 60 000 und insbesondere im Bereich von 10 000 bis 20 000) für Seifen, Zahnputzmittel und Cremes bevorzugt, während man Peptide mit geringerem Molekulargewicht (im Bereich von 500 bis 10 000 und insbesondere im Bereich von 1000 bis 5000) für Lotionen, Shampoos, kosmetische Milchprodukte und Schaumbäder bevorzugt, wenngleich es sich versteht, daß man erfindungsgemäß auch eine Mischung dieser beiden Peptidarten an-

15 wenden kann.

Die in dieser Weise aus Elastin gewonnenen Peptide können anschließend als Pulver in gefriergetrockneter Form oder in Form einer stabilisierten Lösung gelagert werden, beispielsweise in einer 20%igen Lösung von Propylenglykol in einem wäßrigen Puffer mit neutralem pH-Wert, der als Konservierungsmittel Äthanol oder andere Lösungsmittel oder Produkte, die ein Bakterienwachstum zu verhindern vermögen (Formaldehyd, Thiomersal (Mercurothiolsäure) etc. ) oder Antibiotika enthalten.

Die in dieser Weise erhaltenen Elastin-Peptide besitzen die folgenden Eigenschaften: Sie sind in wäßrigem Medium und auch in organischen Medien, wie Propanol, Butanol, Äthanol, löslich und können in wäßrig-organische Lösungsmittel eingearbeitet werden. Sie besitzen die Fähigkeit, durch geringfügiges Erhitzen koazerviert zu werden, wodurch eine durchscheinende Schutzhaut gebildet wird. Diese Eigenschaft kann beispielsweise zum Schutz von

709850/0908

I N Ml I H Mill I I U · ' .1 I INMI-Ui I I N INVAl*

Hautverletzungen ausgenützt werden.

Die folgenden Beispiele verdeutlichen die Herstellung von Elastinen, die erfindungsgemäß verwendet werden können.

Beispiel 1

Herstellung von Peptiden mit einem hohen Molekulargewicht von 10 000 bis 60 OOO.

Zur Herstellung dieser Materialien kann man eine 0,1m Kaliumhydroxidlösung in einer Mischung aus 30% tert.-Butanol, 50% Methanol und 20% Wasser verwenden. Man

rührt 1 g faseriges Elastin während 24 Stunden bei 37⁰C in 1 1 dieser Lösung. Dann dekantiert man und gibt frische Lösung zu. Man wiederholt diesen Vorgang, bis sich das gesamte Pulver gelöst hat. Anschließend ver-

15 dampft man die flüchtigen Lösungsmittel im Rotations verdampfer und dialysiert die Peptidlösung gegen ein geeignetes Lösungsmittel, das das Einführen der Peptide in das gewünschte Trägermaterial ermöglicht, beispielsweise gegen eine Propylenglykol-Wasser-Mischung.

20 Man erhält 0,6 g Peptide, die sich in tert.-Butanol lösen, jedoch mit 1m NaCl ausgefällt werden können.

Beispiel 2

Herstellung von Peptiden mit einem geringen Molekulargewicht von 500 bis 10 OOO.

25 Zu diesem Zweck benützt man eine 1m Kaliumhydroxidlösung in 80%igem Äthanol und rührt 1 g faseriges Elastin bei 37°C in 1 1 dieses Lösungsmittels, bis sich das Material vollständig gelöst hat, was im allgemeinen im Verlaufe von weniger als 1 Stunde erfolgt. Dann gibt man zur

709850/0908

HUMItU Ml IH I U · : > 11 INMI I:. 11 I V I NVAl'

Neutralisation des Kaliumhydroxids Perchlorsäure zu, läßt über Nacht in der Kühlkammer stehen und zentrifugiert dann. Die überstehende Lösung wird eingedampft, und zwar entweder bis zur Trockene oder bis zum Vertreiben des Äthanols, worauf man das Material ohne vorhergehende Dialyse direkt in das zu verwendende Lösungsmittel einarbeitet, um keine Peptide mit geringem Molekulargewicht zu verlieren.

Man erhält 0,8 g Peptide, die durch eine Dialysemembran oder durch ein Millipor-Filter dringen und von einer mit Dextran (Sephadex G5O) beschickten Säule zurückgehalten werden.

Beispiel 3

Herstellung von Elastin-Peptiden mit einem Molekulargewicht von 5000 bis 50 000 unter Verwendung von Elastase.

Als Elastase verwendet man einen elastasereichen Pankreas-Extrakt, beispielsweise ein Pankreaspulver, das pro Milligramm eine Elastase-Einheit enthält. Man suspendiert 1 g faseriges Elastin in einem Liter eines 0,1m Bicarbonatpuffers mit einem pH-Wert von 8,8 und versetzt diese Suspension mit 100 mg Pankreaspulver (wobei eine Einheit 1 μg kristalliner Pankreas-Elastase vom Schwein entspricht) . Dann rührt man bei einer Temperatur von 37°C bis zur Auflösung des Materials, bringt den pH-Wert durch Zugabe von 1m Essigsäure auf einen Wert von etwa 4 bis 5 und dialysiert das Material gegen den Puffer, in dem man das Elastin in die gewünschten Produkte einarbeiten will, beispielsweise gegen eine 50%ige Propylenglykol-

30 mischung.

709850/0908

MLI.N · MUt LI N · ί.ΙΙ INMl.I« I I H INVAP

Man erhalt 0,7 g Peptide, die nach dem Auflösen bei O⁰C und dem Erhitzen auf etwa 40 bis 4 5°C mit einem 0,1m Acetatpuffer mit einem pH-Wert von 4,5 koazerviert werden.

Beispiel 4

Verfahren zur beschleunigten Herstellung von lipophilem, konditioniertem Elastin.

Für diese Herstellung verwendet man die großen Bänder (ligaments larges) von Rindern. Das Gewebe wird ohne vorheriges Entfetten bei der Temperatur der Kühlkammer in

10 kleine Stücke zerschnitten, worauf man 100 g des frischen Gewebes in 1 1 einer Lösung einer kationischen Detergens, beispielsweise einer 5%igen Lösung von Cetylpyridiniumchlorid (50 g/l), suspendiert. Man erhitzt das Gewebe während 120 Minuten zum Sieden und behandelt es dann wäh-

rend 60 Minuten im Autoklaven (bei einer Tempetatur von 110°C). Anschließend dekantiert man die überstehende Lösung ab und wiederholt die Maßnahmen ein zweites Mal. Die vereinigten überstehenden Lösungen enthalten von Elastin-Proteinen verschiedene Proteine. Der Geweberückstand enthält das gereinigte Elastin. Man wäscht dann insbesondere mit Aceton oder führt eine Gefriertrocknung durch und bringt aus Gründen der Konservierung auf einen Feuchtigkeitsgehalt von etwa 20%. Zur Auflösung dieses gereinigten Elastins versetzt man pro 100 g getrockneten

25 Elastins mit 100 cm³ Triglycerid (Triolein, Trilinolein, Tripalmitin) oder anderen Mono-, Dl~ oder Tri-Estern von Glycerin mit jenen Fettsäuren, die man in das Elastinpräparat einzuführen wünscht. Zu dieser Mischung gibt man 1 1 einer 1m wäßrig-organischen Kaliumhydroxidlösung

(80%iges wäßriges Äthanol , 50% tert.-Butanol + 50%

Propylenglykol, oder irgendeine andere Mischung von organischen Lösungsmitteln, die für die Konditionierung oder Formulierung der Elastin-Peptide geeignet ist). Man rührt die Suspension gleichmäßig bei 37⁰C (oder einer niedrigeren

709850/0908

MLLK · MULLl U · .'S 11 INMI IH 11 N INVAP

oder höheren Temperatur, wenn man das Inlösunggehen des Elastins verlangsamen oder beschleunigen will). Nachdem man eine homogene Lösung erhalten hat, neutralisiert man entweder mit Essigsäure oder mit Perchlorsäure und entfernt die überschüssigen Salze entweder dadurch, daß man das Material über eine mit Kationenaustauschern, beispielsweise Cholestyraminharz (Dowex 5O), gefüllte Säule oder über eine mit Dextran (Sephadex G25 oder Sephadex der lipophilen Reihe LH) gefüllte GeIfiltrationssäule führt oder indem man das Material im Fall der Anwendung von Perchlorsäure zentrifugiert. In dieser Weise erhält man ein lösliches Elastin, das mit Fettsäuren gesättigt ist, da die Triglyceride und Elastin gleichzeitig hydrolysiert werden. Ausgehend von 100 g des Gewebes erhält man etwa 30 g Elastin. Dieses Verfahren kann gewünschtenfalls modifiziert werden, beispielsweise in der Art, daß man nur eine partielle Hydrolyse des Elastins ohne dessen vollständige Auflösung durchführt, so daß man Elastinpräparate erhält, die an Lipiden und unlöslichen Materialien gesättigt sind. Hierzu genügt es, die Kaliumhydroxidkonzentration, die Hydrolysetemperatur oder die Einwirkungsdauer des Kaliumhydroxids zu vermindern.

Da Elastin gleichzeitig hydrophob und hydrophil ist, kann es als biologisches Reinigungsmittel mit sehr schonender Wirkung betrachtet werden und kann zur Ausnützung dieses Effektes in kosmetische Flüssigkeiten, Pomaden und Salben eingearbeitet werden.Das Material ist mit verschiedenartigen Wirkstoffen, ob sie nun hydrophil oder lipophil sind, verträglich und kann mit Vorteil in Form von Mischungen mit solchen Substanzen eingesetzt werden. Weiterhin besitzt faseriges Elastin besondere Adsorptionseigenschaften, wodurch es in der Lage ist, wasserlösliche oder fettlösliche Fettkörper zu adsorbieren und zu entfernen. Das lösliche Elastin dringt als Folge seiner Verträglichkeit mit lipidartigen und wäßrigen Lösungsmitteln

709850/0908

Il H KH LU NUJl MU- '.Il INMI P₁II K INVAP

Al

gut in die Haut ein.

Aufgrund dieser Eigenschaften wurden von der Anmelderin pharmakologische Untersuchungen durchgeführt, die die therapeutische und insbesondere derrnatopharmazeutische Nutzbarkeit des Elastins erkennen lassen.

1. Toxizität

a) Augenverträglichkeit

Die Augenverträglichkeit wurde am Kaninchen untersucht. Hierzu wurde 0,1 ml einer 5%igen Lösung von löslichem Elastin unter das untere Lid getropft.

Es konnte weder unmittelbar nach der Behandlung noch im Verlaufe von 8 Tagen nach der Behandlung irgendeine Reizung des Auges festgestellt werden.

b) Hautverträglichkeit

15 Die Hautverträglichkeit wurde an der von Haaren befreiten Haut von weißen Ratten untersucht. Hierbei wurden zwei Cremes auf der Grundlage von in Wasser emulgiertem Monodistearat von Propylenglykol verwendet, von welchen Cremes die eine 10% faseriges Elastin und die andere 5%

20 lösliches Elastin enthielten. Es wurden jeweils 0,5 g die ser Cremes täglich auf die vorbereiteten Hautoberflachen aufgetragen, wobei die Behandlung während 4 Wochen durchgeführt wurde. Die Bewertung erfolgte im Vergleich zu Ratten, denen unter gleichen Bedingungen lediglich die

Salbengrundlage appliziert wurde.

Für keine der beiden Cremes konnte irgendein Anzeichen einer primären Reizung oder Oberflächenaggressivität festgestellt werden.

709850/0908

TER MEER ■ MÜLLER · STEINME'STER INVAP

13

Die histolocjische Untersuchung von nach Beendigung der Behandlung entnommenen Hautproben hat keinerlei Anzeichen einer Entzündung oder einer Reizung der behandelten Haut erkennen lassen. Vielmehr haben bestimmte Anfärbungen (mit Orcein-piro-indigo-carmin und Mallory-Heidenhain) gezeigt, daß mehr Material, das die Färbung des Elastins annimmt, in der Lederhaut der behandelten Hautprober. enthalten ist, was darauf hinweist, daß das in den verwendeten Präparaten vorhandene Elastin in der Lage ist, in die Haut der Ratten einzudringen.

2. Pharmakologische Untersuchungen

Es wurde die pharmakologische Wirkung der beiden Cremes, von denen die eine 5% lösliches Elastin und die andere 10% faseriges Elastin enthielten, einerseits an der nicht mit einem einschnitt versehenen Haut und andererseits an Hautnarbengewebe untersucht. Diese Untersuchungen wurden an Ratten durchgeführt, denen man in der von Haaren befreiten Haut der Körperseite einen Schnitt in einer Länge von 3 bis 4 cm zugefügt hat, der anschliessend mit Klammern verschlossen wurde. Die mit Einschnitten und die nicht mit Einschnitten versehenen Hautbereiche wurden während 4 Wochen durch tägliches Auftragen einer der beiden Cremes oder einer Kontrollcreme, die lediglich die Salbengrundlage umfaßte, behandelt. Nach Beendigung der Behandlung wurden Proben der Haut und des N'arbengewebes zur morphologischen und biochemischen Untersuchung entnommen.

709850/0908

Ill, ι.Ii I Ii 1.I₁ I I I H · , I I Il IMI ι .11 H

a) Morphologische Untersuchung

Die an den Narbengeweben erzielten Ergebnisse sind unabhängig von der Art der eingesetzten Creme gleich mit jenen Ergebnissen, die man an der nicht mit einem Einschnitt versehenen Haut erzielt, das heißt das Material, das in der Weise wie Elastin angefärbt werden kann, ist in der Lederhaut der mit Elastin behandelten Narbengewebe in größeren Mengen vorhanden, während das Kollagen in der Lederhaut der Ratten überwiegt, die lediglich mit der Salbengrundlage behandelt worden sind.

Andererseits ist das Bindegewebe in dem Narbengewebe der behandelten Tiere wesentlich dichter als in dem der Kontrolltiere, obwohl die Vernarbung in beiden Fällen beendet ist.

b) Biochemische Untersuchung

Es wurden Proben des Narbengewebes in Gegenwart von

1 4

C -Prolin inkubiert und dann mit verschiedenen Lösungsmitteln extrahiert, um die vier Makromoleküle der Bindehaut zu trennen, nämlich lösliche Proteine, Kollagen, Strukturglykoproteine und Elastin. Die Bestimmung der

1 4

Proteine und der Hexosamine und das Einfügen des C Prolins in die verschiedenen Extrakte ermöglicht eine Beurteilung der biosynthetischen Aktivität der behandelten H.-: itproben.

5 Aus dieser Untersuchung geht hervor, daß die beiden Präparate eine deutliche Wirkung auf die Biosynthese der Makromoleküle der interzellularen Hautmatrix ausüben. Diese Wirkung ist verschieden, je nachdem, ob es sich um nicht mit einem Einschnitt versehene Haut oder um eine Narbe handelt. Bei der nicht mit einem Einschnitt versehenen Haut wirken die Produkte überwiegend auf die Biosynthese von Proteinen ein, die mit Magnesiumchlorid

709850/0908

It H MbUI-* · MULLLN :> I LINMLIS 11 U J NVAl'

extrahiert werden können (Proteoglykane und lösliche Proteine) und die mit Trichloressigsäure extrahiert werden können (Kollagen) ein. Die hierbei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle I angegeben.

709850/0908

Tabelle I

•*s. O CO

	Salbengrundlage	%	5 % lösliches Elastin	%	10% faseriges > Elastin	%
MgCl₂
Proteine	4,8 mg	11,3	7 mg	13,6	4,7 mg	13,8
Radioaktivität	191 331 cpm/mg	40,8	178 567 cpm/mg	49	140 380 qm/mg	37,2
Hexosamine	265 Mg	3,5	380 Mg	6,4
Trichlor-
essigsa'ure
Proteine	26,4 mg	62,4	30 mg	58	18,4 mg	54
Radioaktivität	3 652 cpm/mg	0,7	8 226 cpm/mg	2,3	6 380 cpm/mg	1,7
Hexosamine	477 Mg	1,18	675 Mg	1,7

Il K Ml LU MHI I I N ■ : .11 INMI I: . I I K INVAl*

Bei den mit Narben versehenen Hautbereichen wirken die Produkte überwiegend auf die Biosynthese von Proteinen ein, die mit Guanindin (Strukturglykoproteine) und äthanolischer Kaliumhydroxidlösung (Elastin) extrahiert werden können. Die hierbei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle II angegeben.

709850/0908

Tabelle II

O CD GD cn ο

co O 00

Guanidin	Salbengrundlage	%	5 % lösliches Elastin	I %	10% faseriges Elastin	I %
Proteine Radioaktivität Hexosamine KOH-ÄtOH
Proteine Radioaktivität	13,3 mg 119 325 cpm/mg 208 μ%	19,6 20,6 2,7	12,1 mg 90 905 cpm/mg 495 μg	20 21,5 3,7	12,1 mg 77 325 cpm/mg	27,6 25,2 I I
2,7 mg 187 770 cpm/mg	4 32,4	2,9 mg 187 073 cpm/mg	4,8 44,3	3,3 mg 81 366 cpm/mg	7,5 j 26,5

fe·

CjJ CO O 00

"ILH ML⁷IIR -MULLIlIi · S I I INM!.IS 1 LN 1NVA1»

Interessant ist die Wirkung, die man mit einer 5% lösliches Elastin enthaltenden Creme erhält. Sie bewirkt eine Steigerung der biosynthetischen Wirkung der Proteine des faseriges Elastin enthaltenden Extrakts.

Diese Ergebnisse ergänzen jene der morphologischen Untersuchungen und beweisen,daß das in den Präparaten enthaltene Elastin den Elastingehalt der behandelten Narbengewebe erhöht, indem es entweder in das Narbengewebe eindringt oder dort die Bildung von Elastin stimuliert oder indem es beides bewirkt. Demzufolge kann das Material zur Behandlung der Haut verwendet werden, insbesondere zur Behandlung von Wunden, Verbrennungen, aufgesprungener Haut und sämtlichen Hautleiden, die eine Wiederherstellung des Stoffwechsels der Zellen der Lederhaut und der Epidermis erforderlich machen.

In der Praxis arbeitet man die Elastinderivate in Mengen von 0,01 bis 10 Gew.-% in kosmetische Produkte ein. Insbesondere verwendet man 0,1 bis 10 Gew.-% faseriges Elastin in Seifen, scheuernden Zahnputzmitteln und Pudern (Talkum) und 0,01 bis 5 Gew.-% lösliches Elastin in Seifen, Zahnputzmitteln,Shampoos, Schaumbädern, Cremes, Milchpräparaten und Lotionen. Für pharmazeutische Zubereitungen kann man 1 bis 20 Gew.-% faseriges Elastin oder 1 bis 10 Gew.-% lösliches Elastin verwenden.

Die folgenden Beispiele solcher Präparate dienen der weiteren Erläuterung der Erfindung.

709850/0908

I M Ml I \i Mt Μ I I U ■ - . I I M-JNtI I: . H

INVAP

10

*-yi -* iO	Seife	C
Bestandteile
Seife aus Kokosfett	Menqe (Teile)
Seife aus Talg	2O
Titanoxid	80
Farbstoff	0,05
Duftstoff	O,O3
Wasser	1
Feinstvermahlenes faseriges Elastin (für schmirgelnde Seifen) oder	1O
1

Lösliches Elastin (für Toiletteseilen)

0,5

15

Zahnputzmittel

20

25

Bestandteile	Menge (Teile)
Natriumalginat oder	1
Carboxymethylcellulose
Glycerin	30
Natriumlaurylsulfoacetat	2
Dicalciumphosphat oder	45

30

CaIciumcarbonat

Peroxybenzoesäuremethylester

50%ige Saccharinlösung

Farbstoff

Duftstoff

Faseriges Elastin

oder Lösliches Elastin

0,1

0,1 O,O3

0,5

709850/0908

I M < Ml .11 < Mill I I \t ■ : · I I INMI I; i I I I»'

INVAI'

Shampoo	Menge (Teile)
Bestandteile	10
Natriumlaurylsulfat	10
Triäthanollaurylsulfat	0,03
Farbstoff	1
Duftstoff	80
Wasser	0,05
Lösliches Elastin

10

Schaumbad

Bestandteile	Menge (Teile)
Ammoniumlaurylsulfat	14
Triäthanolaminlaurylsulfat	6
Destilliertes Wasser	80
Farbstoff	0,03
Duftstoff	1
Lösliches Elastin	0,5

Cremes

20

25

a) Fettcreme	Menge	(Teile)
Bestandteile	18
Stearin	1	,5
Triäthanolamin	2	,5
Lanolin	2
Polyäthylenglykol	12
50%iges Sorbit	5
Polyäthylenglykolstearat	65
Destilliertes Wasser	1
Lösliches Elastin

709850/0908

Il Ιί Ml IK Mill I I

ι I I INMt I' ι I I K

INVAl·

Cremes

22,

b) Tagescreme	Menge (Teile)
Bestandteile	2O
Triäthanolaminstearat	5
Glycerin	5
Polyäthylenglykolstearat	0,5
p-Hydroxybenzoesäuremethylester	45
Wasser	1
Lösliches Elastin

10

15

c) Reinigungscreme Bestandteile Stearin

Triäthanolamin Paraffinöl Spermaceti Polyäthylenglykol Wasser Lösliches Elastin

Menge (Teile) 10

30 15 12 40

Milch

20

25

Bestandteile	Menge (Teile)
Stearin	12
Wachs	4
Lanolin	4
Süßmandelöl	8
Propylenglykol	8
Triäthanolaminlaurylsulfat	8
Wasser	75
Lösliches Elastin	0,5

709850/0908

I \i Ml I M · MUI I I \i ■ :·Ι I INMI I: . I I INVAI'

10

23 2773908

Lotionen

15

a) Adstringierende Lotion Bestandteile

Chelatbildner (Calon E)

Natriumhaitiger p-Hydroxybenzoesäuremethylester

Salicylsäure

Sorbinsäure

Destilliertes Wasser

Hamameliskonzentrat

Rosenwasser

Glycerin

Farbstoff

Duftstoff

Lösliches Elastin

Menge (Teile)

0,05 0,05

0,03

0,03 70

5 20

0,05

0,5

0,3

20

25

b) Hydratisierende Lotion Bestandteile

Rosenwasser

Orangenblütenwasser

Propylenglykol

Milchsäure

Ammoniumlaurylsulfat

Farbstoff

Duftstoff

Wasser

Lösliches Elastin

Menge (Teile)

15 15 42

0,1

0,2 25

709850/0908

IN Ml I N Mill I I N Mil INMI.IM I I N

INVAP

44

Talkum

10

Bestandteile	Menge (Teile)
Feinstvermahlenes faseriges	5
Elastin
Magnesiumstearat	3
Zinkstearat	3
Magnesiumcarbonat	10
Zinkoxid	5
Natriumdehydroacetat	0,1
Duftstoff	0,2
Talkum	70

Beispiele für Arzneimittelformulierungen:

15

20

Behandlungscreme (Emulsion) Bestandteile

Lösliches Elastin Propylenglykolmonodistearat Konservierungsmittel Destilliertes Wasser

Gel

25

Bestandteile

Lösliches Elastin

Carboxyvinylpolymeres (Carbopol 940)

Konservierungsmittel Destilliertes Wasser

Menge	(Teile)
5
17
0,	01
ad 10O	Teile
Menge	(Teile)
3
2
0,	01
ad 100	Teile

709850/0908

Claims

Patentansprüche

{^j Pharmazeutische, dermatopharmazeutische oder kosmetische Zubereitung, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Elastin.
2. Pharmazeutische oder dermatopharmazeutische Zubereitung, gekennzeichnet durch

einen Gehalt an Elastin.
3. Dermatopharmazeutische Zubereitung, gekennzeichnet durch einen Gehalt von

1 bis 20 Gew.-% faserigen Elastins.
4. Dematopharmazeutische Zubereitung, gekenn

zeichnet durch einen Gehalt von 1 bis 10 Gew.-% löslichen Elastins.
5. Kosmetische Zubereitung, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Elastin.
6. Zubereitung nach Anspruch 5,dadurch ge

kennzeichnet, daß sie 0,01 bis 10 Gew.-% Elastin enthält.
7. Seife, Zahnputzmittel oder Puder, gekennzeichnet durch einen Gehalt an 0,1

20 bis 10 Gew.-% faserigen Elastins.
8. Seife, Zahnputzmittel, Shampoo, Schaumbad, Creme, Milch oder Lotion, gekennzeichnet durch einen Gehalt an 0,01 bis 5 Gew.-% löslichen Elastins.

ORIGINAL INSPECTED