CN115697367A - 辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途 - Google Patents

辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物作为抗花粉剂的用途。本发明还涉及该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，用于治疗和/或预防和/或减少花粉过敏和/或与花粉过敏相关的疾病和/或症状的发生。

Description

辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途
本发明涉及家庭卫生产品领域，特别是美容和皮肤病学领域。本发明涉及一种未发芽、脱油的辣木籽蛋白质提取物作为抗花粉保护剂的用途，以及一种用于预防和/或减少花粉过敏及其病理表现的药品，特别是皮肤科药品。
辣木属包括大约14个植物物种(包括阿拉伯辣木(Moringa peregrina)、无翅型辣木(M.aptera)、坎康辣木(M.concanensis)、象腿树(M.drouhardii)、大叶辣木(M.hildebrandtii)、长管辣木(M.longituba))，其中翼籽辣木(Moringa pterygosperma)(也被称为辣木(Moringa oleifera))是最著名的。
在这种情况下，它是生长迅速的树，非常适应多种条件，生长遍及亚洲、非洲和南美的热带地区。30至50cm长的果实像鼓槌一样悬挂，因此英文名称为“鼓槌树(drumsticktree)”，并且其绿色荚果在世界范围内被认为是一种蔬菜。因此，籽很少留至成熟用于产油。
在辣木生长的国家，树的不同部分(叶子、根、根皮、花和种子)被用于传统医学。
辣木属的籽的特征在于油的存在，该油的含量根据籽的种类和成熟度在21％至53％之间变化。对于辣木(Moringa oleifera)物种，文献中提及的含量范围为21％至34％。
由于辣木关于氧化方面具有优异的稳定性，并且具有良好的固定香料性能，因此辣木油(也称为Behen或Ben油)是古代文明中软膏配制者最常用于化妆品和宗教用途的油。直到上个世纪，化妆品配制者一直在使用这种油，而最近这种油的用途被“重新发现”。
除了含油量外，最近辣木籽还因其蛋白质提取物而引起研究人员的关注。因此，申请EP 1064008中描述了辣木籽的蛋白质提取物在皮肤和粘膜上的用途，这是基于其具有软化、生理调节、保湿、重构、修复以及作为抗皱和抗污染剂的作用。
特别地，这种提取物由于其针对污染微粒的净化和抗污染效果由BASF在商品名
Figure BDA0003955001970000021
下出售，并由于其保护头发抗污染的效果在商品名
Figure BDA0003955001970000022
下出售
申请WO 02/096448描述了脱脂或非脱脂籽的蛋白质提取物在除臭、去除难闻的气味、清洁、私处卫生、口腔卫生和牙科护理领域中的用途。
最近的专利申请FR 3076460还描述了利用辣木籽的蛋白质提取物用于预防和/或减少和/或消除其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或令人不舒服的效果，特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，特别是用于预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观，和/或例如通过消除和/或减少发红和/或不均匀来维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性；和/或用于预防和/或治疗在皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉，和/或用于预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或用于预防和/或减少头皮屑。
然而，这些文献都没有描述或提出辣木籽的蛋白质提取物能有助于保护表面(特别是皮肤、粘膜和/或皮肤附属器的表面)来抗花粉。
因此，本发明涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的一种新颖用途，该新颖用途从未在现有技术中被描述或提出。
发明人发现，这种提取物可以防止花粉粒粘附在皮肤、粘膜和/或皮肤附属器上，更广泛地说，可以防止花粉粒粘附在任何类型的表面上(实例2)。因此，这种提取物具有非常有意义的抗花粉作用，并因此是一款用于治疗(特别是暴露于花粉的皮肤和/或粘膜和/或头发)的表面的首选产品，尤其是对花粉敏感和/或过敏的人。
花粉是一种非常细小的粉尘，由植物花药产生和释放的微小有机颗粒组成。花粉粒大致呈卵球形，粒径为5至200微米，平均粒径在20至60微米。
花粉粒是一个非常复杂的整体，有着独特的有机结构。它坚硬的外壁具有保护作用，被称为花粉外壁。花粉外壁的外观因物种而异，因此仅通过观察花粉粒就能描述植物物种。花粉外壁被突起和弯曲起伏覆盖，这些突起和弯曲起伏被一种主要为脂质的物质所填充，被称为花粉外被。后者具有粘性并使花粉具有特殊的粘附特性。因此，这种粘附通过花粉外壁的纹饰和/或覆盖在花粉外壁上的粘性的、脂质的覆盖层来确保，从而使其附着在授粉动物上。
然而，花粉是全球健康问题的罪魁祸首。在亚洲，特别是雪松花粉被描述为一种真正的季节性灾害。2019年，雪松花粉过敏的情况有所增加。检测到有78％的日本人对雪松花粉过敏，其中41％的人对花粉有所抱怨。北美的山雪松也出现了同样的问题。在欧洲，极易引起过敏的豚草花粉到2050年可能会增长至四倍。在法国，原产于北美洲的豚草(Ambrosiaartemisiifolia)已经入侵勃艮第地区、奥弗涅地区及罗讷-阿尔卑斯大区地区，并且其花粉可引起过敏，在病理学上尤其表现为鼻炎、鼻窦炎、结膜炎、气管炎甚至引起哮喘发作。这些问题也会严重影响皮肤，因为花粉会引起皮肤的过敏性炎症，其特征为干燥、发红和皮疹。此外，花粉暴露会加剧湿疹。城市污染物会加剧花粉的危害。研究表明，空气污染物，特别是污染微粒，会增加花粉粒中的过敏原含量以及它们释放到空气中的能力，并释放过敏原(部位)，从而增加它们的致敏性。(D′amato G等人，2007：allergic pollen and pollenAllergy in Europe；Laaidi M，2011：pollen allergies，pollution and climate：Literature review；Sedghy F等人，2018：Interaction between Air pollutants andpollen Grains：the role on the rising trend in allergy).
花粉过敏的治疗通常需要使用抗组胺和/或皮质类固醇药物，这些药物具有许多副作用。通过保护来防止花粉过敏仍然是避免过敏治疗的首选途径。然而，困难在于花粉对健康的影响不仅与授粉地区的户外暴露有关，而且还存在于住所内部。实际上，这些颗粒粘附到所有表面上，例如织物，特别是衣服、鞋子，而且还粘附在皮肤、粘膜和皮肤附属器上，特别是头发纤维上。因此，花粉粒将粘附在这些表面上，然后释放到住所内。这种现象在长发上尤为常见。
因此，在家庭卫生领域，特别是化妆品和皮肤病领域，迫切需要提供一些成分，以限制和/或减少存在于一般表面上的花粉数量，特别是皮肤、粘膜和/或皮肤附属器，尤其是头发，特别是通过防止其粘附，并且这些成分要容易获得。
因此，本发明涉及一种未发芽、脱油的辣木籽蛋白质提取物，有利地是未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别是来自辣木的未发芽的籽(更有利地是未发芽的籽的籽粒)的脱油的油渣饼(更特别地是脱脂的油渣饼)的蛋白质提取物的作为抗花粉剂的用途。
在本发明中，术语“抗花粉剂”旨在表示具有限制和/或减少存在于表面(特别是外部表面，更具体地是指皮肤、粘膜和/或皮肤附属器，特别是头发)上的花粉数量的特性的任何化合物或化合物的混合物，特别是通过防止其粘附和/或防止其扩散。
限制和/或减少附着在表面(特别是外部表面，尤其是头发)上的花粉数量的特性可以通过实施例2中所述的测试来测量。
特别地，根据本发明的用途是用于治疗暴露于花粉的皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器(例如头发)的表面，并且优选地用于对花粉敏感和/或过敏的人。尤其涉及化妆品用途。
在本发明中，术语“化妆品”是指非药物、非治疗性的用途，不用于预防和/或治疗由本领域专家，如皮肤科医生鉴定为病理性的皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器。因此，其用途是用于健康的皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器。
术语“健康的皮肤和/或黏膜和/或健康的皮肤附属器”旨在表示没有感染、疤痕、皮肤疾病或病症(例如念珠菌病、脓疱病、铱屑病、湿疹、痤疮、鱼鳞病、牙龈炎或皮炎或伤口或损伤或口腔溃疡或溃疡或烧伤和/或其他皮肤病，或口疮或炎症或刺激，或荨麻疹或过敏如接触过敏)的(尤其是人类的)皮肤的健康区域的全部或部分(包括健康的头皮和/或黏膜和/或皮肤附属器)。
在本发明中，术语“皮肤”旨在表示(特别是人类的)身体的全部或部分皮肤(包括头皮在内)，该皮肤选自面部、手、手臂、胸部、小腿、颈部、背部、肩部、腹部、手腕、前臂、脚踝、大腿、颈背。特别地，皮肤是指可能与花粉接触的皮肤，即未被衣物覆盖的皮肤。因此尤其涉及面部、手部、颈部和胸部。
在本发明中，术语“粘膜”是指眼、鼻粘膜和/或口腔粘膜(特别是口唇粘膜)，优选唇、眼和/或鼻粘膜。
术语“皮肤附属器”旨在表示指甲和“角蛋白纤维”。
术语“角蛋白纤维”是指毛发纤维(头发)、睫毛、眉毛，体毛尤其是鼻粘膜、耳朵的毛、胡须和/或唇须。
优选地，在局部进行施用，有利地施用在暴露于花粉的身体的特定部分和/或区域上，特别是选自面部、手部、手臂、胸部、唇、鼻和/或眼部粘膜、体毛、睫毛、眉毛和/或头发，优选头发。
根据本发明所述的未发芽、脱油的辣木籽蛋白质提取物是局部可接受的。在本发明中，术语“局部可接受的”旨在表示一种适用于局部施用的成分，该成分是对皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器是无毒的、无刺激性的，不会引起过敏反应，并且不是化学上不稳定的。
在本发明中，术语“花粉”是指植物的花粉粒，优选具有20至60微米的平均赤道直径(简称E)和/或20至60微米的平均极轴(简称P)。
优选地，花粉从最致敏的花粉中选择，尤其是从以下植物中选择的花粉：
-桦木科，特别是桦木属(尤其桦树)、桤木属(尤其是桤木)，榛属(尤其是榛树)；
-柏科，特别是柏树(Cupressus)和日本柳杉(Cryptomeria japonica)、山雪松(Cyprès de Mulange)；
-松科，尤其是雪松；
-菊科，特别是豚草(Ambrosia artemisiifolia)；
-禾本科(或禾木植物)
-橡树(栎属Quercus)和/或梧桐树(悬铃木属Platanus)
优选地，花粉是桦树、榛树、日本柳杉、山雪松、禾木植物和/或豚草的花粉。
根据本发明，本发明的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的用途不改善皮肤的屏障功能，也不增加皮肤和/或粘膜的水合作用，也不用于治疗干性皮肤，不舒缓皮肤和/或粘膜(特别是干性皮肤和/或粘膜)，也不软化和/或减少皮肤和/或粘膜的疲劳感。特别地，根据本发明的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的用途不保护皮肤和/或粘膜免受污染，尤其是城市污染(如重金属、废气和/或香烟烟雾)，由污染造成的损害；和/或不能通过消除使皮肤和/或粘膜变得不纯净的污染颗粒(如煤颗粒)来净化皮肤和/或粘膜。
此外，根据本发明的用途也不是用于预防和/或减少和/或消除其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或令人不舒服的效果，不用于预防和/或减少和/或/或延迟皮脂的分泌及其不美观和/或令人不愉快和/或令人不舒服的效果，也不预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的外观光泽；和/或不用于例如通过消除和/或减少发红和/或不规则来维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性；和/或不用于预防和/或治疗在皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉；和/或不用于预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或不用于预防和/或减少头皮屑。
在另一个可供选择的实施方案中，将脱油、未发芽的辣木籽蛋白质提取物施用于暴露于花粉的惰性表面(特别是家庭内的表面、纤维(特别是织物，例如衣服和/或内衣))。
在本发明中，术语“局部地”旨在表示将根据本发明的脱油、未发芽的辣木籽蛋白质提取物和/或组合物和/或成分施用于皮肤和/或粘膜的表面(特别是外表面)，尤其是通过直接施用或喷涂。
就本发明而言，术语“化妆品和/或药物成分”旨在表示一种或多种植物提取物和/或一种或多种天然或合成分子和/或其混合物，用于化妆品和/或药物用途。化妆品成分特别由国际化妆品原料标准命名法(INCI)定义。
在本发明中，术语“合适的化妆品或药物载体”是指该组合物或其组分适合用于与人类的皮肤和/或粘膜接触而没有毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应或其等效项。
根据本发明的提取物可以通过本领域技术人员已知的多种提取方法获得，有利地选自浸渍(搅拌或不搅拌)、热煎剂、研磨(包括超声研磨或使用搅拌机研磨)。优选地，通过浸渍(更有利地与搅拌一起)进行提取。
假设20℃是室温，有利地在20℃与25℃之间，则提取可以在4℃至300℃，优选地20℃至80℃的温度下进行。
提取的时间段为30分钟至12小时，优选1小时至5小时，更优选1小时至2小时。非常有利地，提取将在1小时内进行。
根据本发明的提取物可以通过在质子极性溶剂中，该质子极性溶剂有利地选自下组，该组由水、醇、二元醇、多元醇、从99/1至1/99(w/w)的水/醇混合物、从99/1至1/99(w/w)的水/二元醇混合物和从99/1至1/99(w/w)的水/多元醇混合物(例如与乙醇、甘油和/或丁二醇和/或其他二醇(如木糖醇和/或丙二醇等)混合的水)组成，有利地在作为唯一溶剂的水中提取而获得。
特别地，提取物通过水提取获得。
在本发明中，术语“通过水提取获得的提取物”旨在表示通过用相对于水溶液的总重量，水含量按重量计大于60％、有利地按重量计至少70％、特别地按重量计至少80％、更特别地按重量计至少90％、特别地按重量计至少95％的水溶液、甚至更有利地不合二醇的水溶液、并且特别地不含醇的水溶液、更特别地仅含水的水溶液提取而获得的任何提取物。
相对于未发芽、脱脂的植物籽和溶剂的总重量，提取物可以从辣木植物的未发芽、脱脂的籽的新鲜或干物质(优选干物质)中以0.1％至20％的量、有利地以1％至10％、更有利地以5％至10％、非常有利地从按干物质的重量计10％的量获得。
在一个有利的实施方案中，未发芽的、脱油的辣木籽的蛋白质提取物正如专利EP1064008中所述，且由BASF在商品名
Figure BDA0003955001970000071
下出售。
特别地，该提取物是水溶性提取物，更特别地是通过在质子极性溶剂中，有利地在水中提取而获得。
提取方法有利地是专利EP 1064008中所述的方法，并且特别包括以下步骤：
a)-从辣木籽中提取油，有利地使用压榨或通过使用非极性溶剂(如己烷)进行回流提取；
b)-用质子极性溶剂提取步骤a)中获得的脱油的油渣饼或粉状物，该质子极性溶剂特别地选自醇、多元醇、乙二醇、水以及处于任何比例的其混合物，有利地使用水性溶剂(即水基溶剂)，甚至更有利地用水作为唯一溶剂，从而获得粗提取物，有利地如实施例1a中所述。
有利地，该提取在室温下进行。
水性溶剂可以是在多种pH下的盐溶液或缓冲介质，更有利地在包括4与8之间的pH下。
该方法还可以包括在步骤b)之后的另外的步骤c)，该步骤是通过例如使用NaOH改变步骤b)中获得的粗水性提取物的pH，从而获得碱性pH(特别地大于8，更有利地大于11)来沉淀粗提取物，并回收获得的沉淀物，有利地如实施例1b中所述。
然后可以洗涤沉淀物并溶解在水中，从而除去不溶性组分并获得蛋白质浓缩物形式的提取物。
该方法还可包括在沉淀步骤c)之后的另外的倾析步骤d)，从而允许蛋白质更好地沉淀，例如像实施例1c中所述。特别地，该步骤在低于室温的温度(有利地在4℃)下，更有利地持续至少6小时(特别是过夜)进行。
代替步骤c)和d)，可以在步骤b)之后进行步骤e)，包括使步骤b)中获得的粗水性提取物与羧甲基纤维素有利地接触1小时(特别是在室温下)，从而使其负载有蛋白质提取物。在该步骤之后可以进行步骤f)，使步骤e)中获得的有负载的羧甲基纤维素与水性盐溶液(有利地为NaCl溶液，具有大于7(有利地为7.5)的pH)接触，并然后回收由此获得的洗脱液(其是部分纯化的提取物)。
未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物有利地是去壳的籽的提取物，也就是说有利地仅是籽的籽粒的提取物(没有其外壳或壳)。
因此该方法可以包括在步骤a)之前的将籽去壳的步骤。
最后，可以将获得的提取物(粗提取物、蛋白质浓缩物和/或部分或完全纯化的提取物)进行离心和/或过滤和/或蒸馏，从而回收水溶性级分并为液体形式。优选地，有利地以0.45μm的截止阈值过滤离心后所获得的上清液。另外的脱色和/或除臭步骤可以根据本领域技术人员已知的技术在提取的任何阶段时提取物进行。特别地，提取物可以用活性炭脱色。
根据一个特定的实施例，根据本发明的提取物是通过在pH大约5的盐水溶液中提取未发芽的，特别是脱油的，更有利地是脱脂的籽的油渣饼，然后通过除去高分子量蛋白质而获得的。回收上清液并构成根据本发明的提取物。
然后还可以将提取物通过溶剂蒸发来浓缩，或例如通过冷冻干燥或喷雾干燥来干燥。然后该提取物将呈粉末形式。
在本发明的一个特定的实施方案中，特别地针对其在皮肤病学中的用途，将对所获得的辣木提取物进行灭菌。
在一个特别有利的实施方案中，未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物基于干提取物包含的蛋白质(特别是天然蛋白质)按重量计包含0.01％至100％之间，有利地按重量计至少25％，特别地按重量计至少40％，更特别地按重量计至少45％的含量。
通过色谱分析法测量，根据本发明的蛋白质提取物的蛋白质有利地具有在包括6500与13000Da之间，有利地在7100与11000Da之间的分子量。
特别地，未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物不含有生物碱(例如像凤尾辣木素)、印度辣木素、异硫氰酸盐(例如像4-(2-L-鼠李糖基氧基)苄基异硫氰酸盐)或山萘酚。
根据本发明的提取物可以以适合其应用于暴露于花粉的表面(特别是外表面)的任何形式配制。
在本发明的一个实施方案中，将提取物掺入卫生和/或保养组合物(特别是去污剂中)，进一步包含至少一种合适的赋形剂。该组合物可以包括其他目的试剂，例如一些常规的消毒剂、去污剂、表面活性剂和杀菌剂。
在另一实施方案中，根据本发明的提取物可以按旨在掺入化妆品或药物组合物中的化妆品或药物成分的形式使用，并且还包含合适的化妆品或药物载体。
在这种情况下，在另一个实施方案中，将根据本发明的提取物优选地溶解于和/或稀释于溶剂中，特别是在极性溶剂，例如水，有利地还包含甘油，如在商品名
Figure BDA0003955001970000091
或
Figure BDA0003955001970000092
下出售的产品，特别是如在实施例3a)中所述的。
在另一个实施方案中，根据本发明的提取物可以喷雾干燥到喷雾干燥支持体(例如麦芽糖糊精)上，并且可以为粉末形式，特别是如实施例3b)中所述的。
有利地，当成分为液体形式(如实施例3a)中所述)时，相对于该成分的总重量，根据本发明的提取物以包含按干物质重量计0.01％与10％之间、有利地按重量计在1％与5％之间的含量存在于该成分中。
有利地，当成分为固体形式(特别是粉末，如实施例3b)中所述)时，相对于该成分的总重量，根据本发明的提取物以包含在按干物质的重量计10％与60％之间、有利地按重量计在30％与50％之间的含量存在于该成分中。
任选地为化妆品或皮肤病学成分形式的根据本发明的提取物也可以为化妆品或药物组合物形式，旨在用于局部施用，优选皮肤，还包含合适的化妆品或药物载体。
为液体形式的化妆品或药物成分(特别是皮肤病学成分，并且特别是实施例3a)中的成分)能以相对于组合物的总重量按干物质的重量计优选地在0.01％与10％之间，有利地在0.1％与5％之间，特别是在1％与3％之间的含量用于化妆品或药物组合物(特别是皮肤病学组合物)中。
为固体形式的化妆品或药物成分(特别是皮肤病学成分，并且特别是实施例3b)中的成分)能以相对于组合物的总重量按干物质的重量计优选地在0.001％与5％之间、有利地在0.01％与1％之间的含量用于化妆品或药物组合物(特别是皮肤病学组合物)中。
在本发明的一个实施方案中，相对于组合物的总重量，提取物将以包含在按干物质的重量计0.0001％与20％之间、优选地在按重量计0.001％与10％之间、有利地在按重量计0.01％与5％之间的含量包含在化妆品或药物组合物中。
根据本发明的组合物可以包含任何合适的溶剂和/或任何合适的载体和/或任何合适的赋形剂，任选地与其他目的化合物组合。它们可以特别地包含化妆品或皮肤病学上可接受的赋形剂，该赋形剂选自表面活性剂、防腐剂、缓冲剂、发泡剂、螯合剂、灭微生物剂、变性剂、乳浊剂、pH调节剂、还原剂、稳定剂、乳化剂、增稠剂，胶凝剂、成膜聚合物、溶剂、填充剂、杀菌剂、气味吸收剂、去油剂、调节剂、调质剂、光泽剂、颜料、染料、香料和化学或矿物遮光剂、微量元素、精油、甜味剂或调味剂。这些组合也被本发明涵盖。CTFA化妆品成分手册，第二版(1992年)中描述了在化妆品和制药行业常用的不同化妆品和药物成分，其特别适合于口服施用和/或局部使用。
有利地，一种或多种赋形剂选自下组，该组包含：聚甘油、酯、纤维素聚合物和衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、基于蔗糖的稳定剂、维生素E及其衍生物、黄原胶、天然和合成蜡、植物油、甘油三酸酯、不皂化物、植物甾醇、硅酮、蛋白质水解物、甜菜碱、氨基氧化物、植物提取物、蔗糖酯、二氧化钛、甘氨酸和对羟基苯甲酸酯，并且更优选地选自下组，该组由以下项组成：硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-21、乙二醇-15硬脂醇醚、鲸蜡硬脂醇、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、丁二醇、辛二醇、天然生育酚、甘油、二羟鲸蜡醇磷酸钠、异丙基羟基酮醚、硬脂酸乙二醇酯、三异壬精、椰油酸辛酯、聚丙烯酰胺、异链烷烃、月桂醇聚醚-7、卡波姆、丙二醇、己二醇、甘油、没药醇、二甲聚硅氧烷、氢氧化钠、PEG 30-二聚羟基硬脂酸酯、癸酸/辛酸甘油三酯、鲸蜡硬脂醇辛酯、己二酸二丁酯、葡萄籽油、霍霍巴油、硫酸镁、EDTA、环甲硅油、黄原胶、柠檬酸、月桂基硫酸钠、蜡和矿物油、异硬脂基异硬脂酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇异硬脂酸酯、PEG 8、蜂蜡、氢化棕榈心油的甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、鲸蜡醇乳酸酯、羊毛脂醇、蓖麻油、二氧化钛、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯、等渗盐水溶液、及其混合物。
根据本发明的化妆品或药物组合物或提取物，任选地为化妆品或药物成分形式，可以是常规用于局部施用的任何盖仑制剂形式，例如液体或固体形式或加压液体形式。可以特别地按以下形式配制它们：水性或油性溶液、霜或水性凝胶或油性凝胶(尤其在罐或管中)；尤其是淋浴凝胶、洗发香波、乳、乳剂、水凝胶、微乳剂或纳米乳剂，尤其是水包油或油包水或复合型或基于硅的乳剂、精华、乳液(尤其在玻璃瓶或塑料瓶或量瓶或气雾剂瓶、小瓶中)；液体肥皂、糊剂、皮肤病学皂、软膏、泡沫、气雾剂、面膜、贴剂、无水产品，该无水产品优选为液体、糊剂或固体(例如为杆的形式，特别是棒的形式)或粉末(特别是扑面粉)。特别地，该组合物为以下形式：精华、乳液、霜、乳、软膏、糊剂、泡沫、乳剂、水凝胶、沐浴凝胶、面膜、棒、贴剂、或扑面粉，有利地为霜或乳液。
在面部(voie musosale)施用的情况下，根据本发明的化妆品或药物组合物或提取物任选地为化妆品或药物成分的形式，可以以滴眼剂、乳液、气雾剂、凝胶或粘膜粘着剂组合物的形式存在。
化妆品或药物组合物还可包含用于治疗皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器的其他活性成分，与根据本发明的提取物产生互补或协同的效果，这些活性成分例如，选自例如：
-透明质酸钠、支链淀粉和海藻酸钠的组合，尤其是由申请人以含有丝氨酸、海藻糖、尿素和甘油的配制品在商品名PatcH2OTM下销售；
-旨在用于敏感性皮肤护理的化妆品试剂，如申请WO 2009/112590中所述的例如阔叶夜香树(Cestrum latifolium)的植物提取物，例如由申请人在商品名SymbiocellTM下销售；从非洲野芒(Irvingia gabonensis)树的果实中提取的黄油，由申请人在商品名IrwinolTM下销售；镰形木荚苏木(Eperua falcata)的根提取物，在商品名EperulineTM下销售；N-乙酰基-L-酪氨酰-L-脯氨酰-L-苯丙氨酰基-L-苯丙氨酸酰胺肽(INCI：乙酰基四肽15)由申请人在商品名SkinasensylTM下销售。
化妆品组合物还可含有一种或多种对皮肤和/或粘膜微生物菌群具有活性和/或对皮肤的屏障功能具有活性的成分，特别是保湿和/或舒缓活性剂，包括通过酶催化合成获得、由素莱碧雅公司(Solabia)在商品名BioEcoliaTM下销售的寡糖或由同一公司在商品名EcoskinTM下销售的α-葡萄糖寡糖复合物；川泽泻(Alisma plantago-aquatica)的提取物；摩洛哥坚果(Argania spinosa)(LipofructylTM Argan)的提取物；神经酰胺混合物(SphingocerylTM VEG)；Boldo的纯净提取物(BetapurTM)；基于菊粉或低聚果糖的产品；双歧杆菌提取物或对抗油性皮肤的猫须草(Orthosiphon stamineus)提取物(MAT-XSTMBright)、由申请人针对保湿特性在商品名MelhydranTM下销售的天然蜂蜜提取物；由申请人在商品名OligolinTM下销售的亚麻提取物；通过生物技术修饰的、并且由申请人在商品名RelipidiumTM下销售的酵母提取物；由申请人在商品名InhipaseTM下销售的野葛根(Pueraria lobata)的根提取物；衍生自由Mibelle在商品名CM-Glucan ForteTM下销售的面包酵母的β-葡聚糖衍生物；和/或由法国司达玛公司(Sederma)在商品名PacifeelTM下销售的紫茉莉(Mirabilis jalapa)提取物。
有利地，本发明还涉及用于限制和/或减少存在于表面(特别是是皮肤、粘膜和/或皮肤附属器，优选毛发)上的花粉数量的一种表面处理的方法，特别是通过防止它们粘附和/或用于防止花粉传播，所述表面暴露于花粉粒，所述方法包括以下步骤：
-识别可能与花粉接触的表面，特别是在个体上可能与花粉接触的皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器的区域，所述皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器是健康的皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器，以及
-在该表面上(特别是在皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器的该区域上)局部施用组合物(特别是化妆品的组合物)，其包含有效量的根据本发明的一种未发芽、脱油的辣木籽蛋白质提取物，用于限制和/或减少表面(特别是皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器的区域)上存在的花粉数量，所述皮肤和/或粘膜和/或皮肤附属器是健康的皮肤和/或或粘膜和/或皮肤附属器。
本发明还涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，有利地是未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别地是辣木的未发芽的籽(更有利地是未发芽的籽的籽粒)的脱油的油渣饼(更特别地是脱脂的油渣饼)的蛋白质提取物，其用途(特别是局部使用)是用于治疗和/或预防和/或减少花粉过敏和/或与花粉过敏相关的疾病和/或症状的发生，尤其是“花粉热”、鼻炎、鼻窦炎、结膜炎、气管炎、流泪、打喷嚏、发瘁、头痛、瘙瘁、嗅觉丧失、流鼻涕、鼻塞和/或哮喘发作。
本发明特别旨在用于对花粉过敏的人(即暴露于花粉粒会引起I型超敏反应的人)的皮肤、粘膜和/或皮肤附属器(特别是头发)的护理和/或药物治疗(尤其是皮肤病学的护理和治疗)。
在本发明中，术语“花粉过敏”是指由花粉抗原引发的I型超敏反应。
参考仅作为说明给出的实施例和附图，基于阅读说明性描述，本领域技术人员将清楚地理解本发明的其他目的、特征和优点，该说明性描述并且不能以任何方式限制本发明的范围。
实施例是本发明的组成部分，其任一特征在功能性和一般概括性方面都是本发明的组成部分，从包括实施例在内的说明书整体来看，所述任一特征无论怎样相对于现有技术都呈现出新颖性。
因此，每个实施例都有一个一般通用范围。
另外，在实施例中，除非另有说明，否则温度以摄氏度表示，压力为大气压。
附图简要说明
图1是根据实施例2的方案在显微镜下观察到的用不包含根据本发明的提取物的水处理约16小时的一绺对照头发(该对照头发上已喷洒了确定量的日本柳杉花粉)的照片。
图2是根据实施例2的方案在显微镜下观察到的用含有0.1％(wt/wt)实施例1d的提取物并根据实施例3a配制的水处理约16小时的一绺头发(该头发上已喷洒了确定量的日本柳杉花粉)的照片。
图3是根据实施例2的方案在显微镜下观察到的用包含1％(wt/wt)实施例1d的提取物并根据实施例3a配制的水处理约16小时的一绺头发(该头发上已喷洒了确定量的日本柳杉花粉)的照片。
实施例
实施例1：根据本发明的辣木提取物的制备
根据专利EP 1064008中所述、特别是如下所述的方法制备辣木提取物：
实施例1a(提取物1a的制备)
将辣木籽的壳去除后获得的且含有33.4％(wt/wt)油的辣木的籽粒通过在己烷中回流进行两次连续提取来脱脂，并且在过滤后，将粉状物在40℃的烤箱中干燥，残余的油含量为2.5％。
在反应器中，将200g脱脂的粉状物添加至2升蒸馏水中。搅拌10分钟后，通过添加4N NaOH将pH调整至7.5，然后在室温下进行一小时提取，同时将pH维持在7.5。通过在5000g下离心15min除去不溶性组分。
收集上清液，然后以0.45μm过滤：由此获得1.77升黄色滤液，其含有4.69％的干提取物，通过缩二脲技术测量，蛋白质浓度为21.54g/l(或基于干提取物计，蛋白质纯度为45.92％)。通过喷雾干燥将提取物脱水，获得65.72克雾化物，其中蛋白质含量估计为54.7％(N x 6.25)。
如果考虑在柱的排除体积和总体积之间洗脱的峰，则该提取物在Superose 12HR柱上通过凝胶渗透分析得出的色谱图显示主要的级分，该级分占面积的52％，对应在7,800与11,000Da之间的分子量。在该峰中肩部的存在证实了存在若干种化合物，分子量范围接近在关于辣木絮凝剂蛋白的单体(6,500和7,000Da)和二聚体(13,000Da)的文献中记载的分子量范围。
实施例1b(提取物1b的制备)
根据实施例1a提取300g脱脂的粉状物，从而获得粗水性提取物。通过渐进式添加4N NaOH将滤液(2.74升)的pH调整至11.8。在pH 8.0左右开始沉淀(溶液浑浊明显)，30分钟后将该溶液以5000g离心15min。收集粘稠的沉淀物(43.2g，湿物质)，然后用500ml蒸馏水于pH 11.8洗涤两次。
然后将沉淀物溶于270ml蒸馏水(即初始体积的10％)中，并通过6N HCl将溶液的pH连续调节至4.5，从而使沉淀物溶解(使用称为Turax的设备促进分散)。
搅拌30分钟后，将混合物以5000g离心15分钟，以除去不溶性成分，并通过装有沃特曼(Whatman)41号过滤器的布氏漏斗过滤上清液。由此，获得260ml黄色且澄清的蛋白质浓缩物，通过冷冻干燥将该浓缩物脱水。
以这种方式，获得了11.5克冻干物，其中按重量计蛋白质含量为90％-95％。
该提取物在Superose 12HR柱上的凝胶渗透分析显示出主要的级分，该级分占面积的70％，并且对应大约8,800Da的分子量。
塞施例1c(提取物1c的制备)
通过在名称为KOMET的压机上加压提取获得自去壳辣木籽的籽粒中的油，并将获得的油渣饼研磨以获得均匀的粉状物。
根据实施例1a和1b中所述的操作程序，由1.24kg油饼渣制备粗提取物。
根据实施例1b，蛋白质在pH 11.8下沉淀，但是引入另外的倾析步骤，在+4℃下持续一夜，以使蛋白质更好的沉淀。
在与实施例1b相同的条件下处理沉淀物(沉淀物重构溶液的pH为6而不是4.5)。
通过喷雾干燥将由此获得的蛋白质浓缩物(1.05升，按干提取物的4.59％)脱水，并收集34.6g雾化物，即基于干提取物的喷雾干燥产率为71.5％。
基于氮含量测定(N x 6.25)，蛋白质含量大于90％(大约95％)。
实施例1d(提取物1d的制备)
根据实施例1a、1b和1c中所述的操作程序，由150g油饼渣制备粗提取物。
以0.45μm过滤后，获得1.35升澄清的黄色滤液。
将100克羧甲基纤维素(CM52，沃特曼公司(WHATMAN))在500ml pH 7.5的蒸馏水中平衡30分钟。
通过装有沃特曼42号过滤器的布氏漏斗过滤混合物，然后收集纤维素，并再次在500ml的pH 7.5的水中平衡。
通过过滤除去水性介质后，在室温下伴随搅拌使纤维素与辣木籽粒油渣饼的水性提取物接触一小时。
通过布氏漏斗过滤除去未吸附的化合物(其色谱图在图3中用虚线表示的级分)，然后用一升pH 7.5的蒸馏水将“负载的”纤维素洗涤两次，然后通过布氏漏斗过滤。
然后使纤维素与120ml 60g/l pH 7.5的NaCl溶液接触30分钟。
通过布氏漏斗过滤回收在NaCl介质中洗脱的蛋白质(吸附在CM 52上且在60g/l的NaCl介质中洗脱的蛋白质的色谱图如图3中实线所示)。
因此，获得110ml滤液，其中干提取物含量为9.63％且蛋白质浓度为64.6g/l(即基于干提取物的蛋白质纯度为67％)。
该提取物在Superose 12HR柱上的凝胶渗透分析显示出主要的级分，该级分占面积的70％，并且对应7,100Da左右的分子量。
可以通过透析或通过超滤使溶液脱盐，并通过冷冻干燥、喷雾干燥或任何其他合适的方式使溶液脱水。根据实施例1d，将提取物在麦芽糖糊精支持体上喷雾干燥，并根据实例4b)配制，以在以下实施例中进行测试。
实施例2：评估根据本发明的抗花粉剂对花粉粒粘附到头发上的效果
方案：已经进行了初步试验，结果表明，日本柳杉(Cryptomeria japonica)的花粉粒(在封闭的测试室中被喷洒在头发上)强烈附着在头发上。用根据实施例1d获得并根据实施例3a)配制的成分预先处理多束头发(女性正常长发)约16小时，并且以相对于水/成分混合物的总重量按重量计0.1％和1％(wt/wt)的含量在水中使用。然后梳理发绺，将确定量的日本柳杉花粉喷洒在这些发绺上，然后在密闭的试验室中整体震摇5到10分钟。在显微镜下观察发绺，可以通过图像分析计数来可视化并量化粘附在头发上的花粉粒的比例。以相同方式进行了仅包含水但不包含该成分的对照。
结果：获得的结果如图1、2和3所示。该测试表明，预前使用根据本发明的抗花粉剂的显著且剂量依赖性地降低了花粉粒对发绺的粘附。在按重量计1％的水中，实施例3a)中的成分使粘附在发绺上的花粉粒数量减少了70％。
用织物纤维代替发绺重复同样的测试，也表明该产品具有显著降低花粉附着的特性。
实施例3：包含根据本发明的辣木提取物的根据本发明的化妆品或药物成分
实施例3a)
制备具有以下重量百分比配方的液体化妆品或药物制剂。
表1
名称 以按重量计％表示的量
甘油 67
根据实施例1a-1d的辣木提取物 1.6
苯氧乙醇 2
磷酸二钠 0.8
柠檬酸 0.5
实施例3b)
制备具有以下配方的粉末形式的固体制剂：
表2
名称 以按重量计％表示的量
麦芽糖糊精 50
根据实施例1a-1d的辣木提取物 50
实施例4：根据本发明的用于身体和/或面部的乳液形式的组合物：
表3
Figure BDA0003955001970000181
Figure BDA0003955001970000191
通过本领域的技术人员熟知的本领域常规方法，通过混合6种相来制备乳液。
实施例5：根据本发明用于身体和/或面部的乳形式的组合物
用于身体和/或面部的乳形式的化妆品可以具有例如以下重量组成，该重量组成由如下所说明的以下水相和脂肪相组成。
表4
Figure BDA0003955001970000192
用于制备用于面部和/或身体的乳的方法基本上由以下组成：使脂肪相达到80℃，使水相的水也达到80℃，并将防腐剂(Elestab 4112)溶于其中，然后伴随涡轮搅拌将水相倾倒入脂肪相中，并在搅拌下逐渐冷却，然后在50℃左右向其中添加水性辣木蛋白质提取物储备溶液，然后添加香料，最后继续搅拌直至完全冷却。
实施例6：根据本发明的用于面部的霜形式的组合物
用于身体和/或面部的霜形式的化妆品可以具有例如以下重量组成，该重量组成由如下所说明的以下水相和脂肪相组成。
表5
Figure BDA0003955001970000201
用于制备面霜的方法基本上由以下组成：使脂肪相达到80℃，使水相也达到80℃，并将Elestab 4112溶于其中，单独制备辣木蛋白质提取物储备溶液，伴随涡轮搅拌将脂肪相倾倒入水相中，然后在大约50℃下加入辣木提取物储备溶液，并最后继续搅拌直至冷却。

Claims (16)

1.一种未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的用途，有利地是辣木的未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别是来自辣木的未发芽的籽的脱油的油渣饼的蛋白质提取物作为抗花粉剂的用途，所述脱油的油渣饼更特别地是脱脂的油渣饼，所述未发芽的籽更有利地是未发芽的籽的籽粒。
2.如权利要求1所述的用途，该用途用于限制和/或减少存在于表面上的花粉数量，特别是通过防止其粘附和/或防止其扩散，所述表面更具体地是指皮肤、粘膜和/或皮肤附属器，特别是头发。
3.如权利要求1或2中任一项所述的化妆品用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物被使用于暴露于花粉的表面，特别是家庭内的表面、衣服、皮肤、粘膜和/或皮肤附属器，优选头发。
4.如权利要求1至3中任一项所述的用途，其特征在于花粉是选自以下植物的花粉：桦木科，特别是桦木属，尤其是桦树；桤木属，尤其是桤木；榛属，尤其是榛树；柏科，特别是柏树(Cupressus)和日本柳杉(Cryptomeria japonica)；山雪松(Cyprès de Mulange)；松科，尤其是雪松；菊科，特别是豚草(Ambrosia artemisiifolia)；禾本科(或禾木植物)；橡树(栎属Quercus)和/或梧桐树(悬铃木属Platanus)；更优选地，花粉是桦树、榛树、日本柳杉、山雪松、禾木植物和/或豚草的花粉。
5.如权利要求1至4中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物被局部施用于暴露于花粉的身体的特定部分和/或区域上，选自面部、手部、手臂、胸部、唇、鼻和/或眼部粘膜、体毛、睫毛、眉毛和/或头发，优选头发。
6.如权利要求1至5中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物是水溶性提取物，特别地是通过在极性溶剂中、有利地在水中提取而获得。
7.如权利要求1至6中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物基于干提取物包含的蛋白质、特别是天然蛋白质按重量计为0.01％与100％之间，有利地按重量计为至少25％。
8.如权利要求1至7中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物是去壳的籽的提取物。
9.如权利要求1至8中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物为旨在掺入化妆品组合物中的化妆品成分的形式，并且还包含合适的化妆品载体。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物以液体形式以相对于该成分的总重量，按干物质的重量在0.01％与10％之间、有利地按重量计在1％与5％之间的含量存在于该成分中，或以固体形式以该成分的总重量按重量计在10％与60％之间、有利地按重量计在30％与50％之间的含量存在于该成分中。
11.如权利要求1至10中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物或包含该提取物的化妆品成分为化妆品组合物形式，旨在用于局部施用，还包含合适的化妆品载体。
12.如权利要求11所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物相对于组合物的总重量，以包含在按干物质的重量计在0.0001％与20％之间、有利地在按重量计在0.01％与5％之间的含量存在于化妆品组合物中。
13.如权利要求11或12中任一项所述的用途，其特征在于该组合物为以下形式：精华、乳液、霜、乳、软膏、糊剂、泡沫、乳剂、水凝胶、沐浴凝胶、气雾剂、面膜、棒、贴剂、或扑面粉，有利地为霜或乳液。
14.一种未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，其用途、特别是通过局部施用在于：治疗和/或预防和/或减少花粉过敏和/或与花粉过敏相关的疾病和/或症状的发生，尤其是“花粉热”、鼻炎、鼻窦炎、结膜炎、气管炎、流泪、打喷嚏、发瘁、头痛、瘙瘁、嗅觉丧失、流鼻涕、鼻塞和/或哮喘发作。
15.如权利要求14所述的用途的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物如权利要求1至8中任一项所述。
16.如权利要求14或15中任一项所述的用途的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物为药物成分或药物组合物形式，还包含合适的药物载体。
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