WO2019138182A1 - Utilisation cosmetique d'un extrait proteique des graines de moringa oleifera - Google Patents

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WO2019138182A1
WO2019138182A1 PCT/FR2019/050036 FR2019050036W WO2019138182A1 WO 2019138182 A1 WO2019138182 A1 WO 2019138182A1 FR 2019050036 W FR2019050036 W FR 2019050036W WO 2019138182 A1 WO2019138182 A1 WO 2019138182A1
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WO
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skin
extract
moringa oleifera
protein extract
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PCT/FR2019/050036
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Louis Danoux
Pierre DEPOUILLY
Sabrina Leoty-Okombi
Boris VOGELGESANG
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Basf Beauty Care Solutions France Sas
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    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/005—Preparations for sensitive skin

Definitions

  • the present invention relates to the field of cosmetology and dermatology, more particularly skincare and mucosal skincare cosmetics, in particular skins and / or mucous membranes which are sensitive, sensitized, reactive, fragile, and / or weakened, and use of a protein extract of ungerminated seed deoiled from Moringa.
  • the genus Moringa comprises some 14 species of plants (including Moringa peregrina, M. aptera, M. concanensis, M. clroithardii, M. hildebrandtii, M. longituba), of which Moringa pterygosperma (synonym Moringa oleifera) is the best known.
  • the different parts of the tree (leaves, roots, bark of roots, flowers, seeds) are used in traditional medicine in the countries where it grows.
  • the seeds of Moringa are characterized by the presence of an oil whose content varies between 21 and 53% according to the species and the maturity of the seeds.
  • the levels mentioned in the literature range from 21 to 34%.
  • Moringa oil also called Behen or Ben oil
  • This oil has been used by formulators in cosmetics until the last century and its use has been "rediscovered” recently.
  • Moringa seeds have more recently attracted the attention of researchers for their protein extract.
  • the application EP1064008 describes the use of a protein extract of Moringa seeds on the skin and the mucous membranes for their softening effect, physiological conditioner, moisturizing, restructuring, repairing, anti-wrinkle and as an antipollution agent.
  • Such an extract is in particular marketed by BASF under the name Purisoft® for its purifying and anti-pollution effect.
  • the application WO02 / 096448 describes for its part the use of a protein seed extract delipidated or not in the fields of deodorization, elimination of bad odors, cleanliness, personal hygiene, oral hygiene, dental care.
  • this document further describes that such an extract has a soothing, softening, moisturizing and reducing the feeling of tiredness.
  • this soothing effect is at no time suggested as being related to a decrease in the reactivity of the skin or to a treatment of inflammation of the skin and / or mucous membranes.
  • this document indicates that the extract maintains the balance of the bacterial and fungal flora on the surface of the mucous membranes, but only in the sense that it does not, unlike the other conventional deodorants.
  • the extract may be used in the treatment of sensitive and sensitized, reactive, fragile, weakened and / or intolerant skins and / or mucous membranes, in particular by reducing inflammation, or that he may have a beneficial effect on the beneficial commensal flora of the skin and / or mucous membranes, by preserving and / or increasing it.
  • Application FR2946879 also describes a Moringa extract for its use in cosmetics. However, it is an entire seed extract, that is to say, not deoiled.
  • the application CN103223010 also describes the use of a seed extract of Moringa seeds in cosmetics, in particular obtained by extraction with a supercritical fluid, extraction process which extracts the oily compounds.
  • the present invention thus relates to a new use of a protein extract of non-germinated seed de-oiled Moringa oleifera that has never been described or suggested in the prior art.
  • Increased neuro-sensory activity which is characterized by changes in the nerve endings of the epidermis, neurotransmitter accumulation, or disruption of information transmission in the central nervous system, is also a factor the sensitivity of the skin.
  • a third additional cause of skin sensitivity is an increased immune sensitivity comprising in particular a measurable increase in the density of epidermal Langerhans (CL) cells, which can, in the most extreme cases, lead to pathologies such as urticaria. contact, irritative or allergic contact dermatitis, or atopic dermatitis.
  • the polymorphism of sensitive skin is reflected by subjective sensations such as redness, feeling of warmth or warmth, tension, tingling, tingling, tightness. These unsightly and / or uncomfortable manifestations are characteristic of sensitive skin. In the most extreme cases, irritations or allergic reactions are also described.
  • the non-germinated seed extract of Moringa oleifera dewaxed seed also has an impact on the cutaneous and / or mucosal microbial flora, in particular by activating the growth of commensal beneficial strains, particularly those making it possible to fight against inflammation, such as S. epidermidis and / or A. Iwoljfii (Example 3b), but also by inhibiting the growth of opportunistic pathogenic strains such as Propionibacterium acnes (Example 3a).
  • the skin is indeed a complex ecosystem on which proliferate several types of microorganisms such as bacteria and fungi. These microorganisms constitute the cutaneous flora, also called cutaneous microbial flora. We distinguish between: - the commensal beneficial resident flora consisting of microorganisms proliferating conventionally on healthy skin, permanently by drawing their nutrients from the skin, and bringing known benefits to the skin,
  • transient flora present on the skin under abnormal conditions, for example by contact with soiled elements, and which can become pathogenic in the event of proliferation.
  • strain Staphylococcus epidermidis and the strain Acinetobacter Iwoljfii. These strains are found especially in the face on healthy skins where they participate in maintaining the balance of commensal skin flora.
  • the strain Staphylococcus aareus may be considered part of the transient skin flora potentially pathogenic to human skin and the strain Propionibacterium acnes as part of the resident opportunistic pathogenic flora.
  • Staphylococcus aureus and Propionibacterium acnes in case of proliferation can indeed cause a microbial imbalance in the skin flora, making it more vulnerable to infections and fungi, induce inflammation, including redness, swelling or even pimples and a burning sensation and / or localized heat accompanied by pain, pigmentation spots or scars for example following acne and therefore an inhomogeneity of the complexion, and finally may be the cause of actual infectious skin diseases such as skin infections such as boils, folliculitis, ulcers, abscesses, sycosis impetigo, ecthyma, erysipelas or acne.
  • a disturbance of the commensal flora can also be at the origin of mycoses of the skin such as candidiasis.
  • a disturbance of the flora of the oral mucosa, in particular of the gingival mucosa, can be the cause of gingivitis.
  • Cosmetic or dermatological solutions are already known to act on the cutaneous microbial flora. On the other hand, their actions are often antiseptic. These modes of action are thus not targeted because they are not directed against a strain of specific microorganism.
  • There are solutions for acting on the cutaneous microbial flora by targeting a group such as bacteria in the field of pharmaceutical ingredients. Examples include antibiotics.
  • antibiotics have the disadvantage of not always being tolerated especially in oral administration and further induce the development of resistance.
  • antibiotics in general act not only on the pathogenic microbial flora, but also on the commensal microbial flora, which can result in the appearance of fungal infections. Therefore, there is a significant need in the field of cosmetic and dermatology to provide active ingredients on the cutaneous microbial flora, especially by targeted action on a particular microbial strain or by protection of commensal flora, which are readily available and do not have the disadvantages or side effects described above.
  • the present invention therefore relates to the cosmetic use of a protein extract of non-germinated seed deoiled Moringa oleifera, preferably a protein extract ungerminated seed delipidated, in particular a protein extract of deoiled cake, more particularly delipidated, non-germinated seeds, more advantageously non-germinated seed almonds, Moringa oleifera, for the treatment of skin and / or sensitive mucosa, sensitized, fragile and / or fragile.
  • a protein extract of non-germinated seed deoiled Moringa oleifera preferably a protein extract ungerminated seed delipidated, in particular a protein extract of deoiled cake, more particularly delipidated, non-germinated seeds, more advantageously non-germinated seed almonds, Moringa oleifera, for the treatment of skin and / or sensitive mucosa, sensitized, fragile and / or fragile.
  • sensitive skins and / or mucous membranes may be defined as skins which, by nature, tolerate only very little aggressive agents, especially environmental agents such as pollutants, climatic factors (wind , cold, heat), UV exposures, emotional factors including stress and / or chemical agents (heavy metals, detergents, compounds contained in cosmetic treatments such as perfumes, preservatives, alcohols, pH, AHA or dermatological such as vitamin A acid) and / or aggressive conditions including sweating and mechanical aggression such as waxing, shaving, rubbing and even water especially limestone.
  • Sensitive skins are not skins with pathological characters unlike allergic skins.
  • the "sensitive skin” character can be esteemed by the subject himself with subjective skin sensations or by the dermatologist with objective cutaneous reactions.
  • Unsightly and uncomfortable manifestations can be generalized to the whole body, but most of the time they can have well-defined localizations such as, for example, the scalp, the face, the skin folds, the buttocks in the infant, etc. It can therefore be areas of skin and / or sensitive mucosa.
  • the sensitized skin is skins made momentarily sensitive so not pathological as such.
  • Reactive skin, or hyperreactive or intolerant or irritable skin is a skin whose threshold of tolerance has decreased and which reacts excessively.
  • Fragile or fragile skin that is to say, temporarily fragile, is a skin whose barrier function is weakened.
  • This condition may be related to the condition of the individual, the elderly and infants with fragile skin for example. This condition can result from chemical or physical aggression (abrasion, friction, cuts).
  • the term "cosmetic" is intended to mean a non-pharmaceutical, non-therapeutic use which is not intended for the prevention and / or treatment of skins and / or mucous membranes qualified as pathological by a specialist in the field, such as as a dermatologist. It is therefore a use on healthy skin and / or mucous membranes.
  • Skin and / or healthy mucosa means all or part of an area of skin including the scalp and / or healthy mucosa, especially human, thus having no infection, scar, disease or affection dermal candidiasis, impetigo, psoriasis, eczema, acne, ichthyosis, gingivitis or dermatitis or sores or wounds or ulcers or ulceration or burning and / or other dermatoses, or aphtosis or inflammation or irritation.
  • the term "skin” means the skin of all or part of the body, in particular human, selected from the legs, feet, armpits, hands, thighs, belly, Vietnameselleté, neck, the arms, the torso, the back, the labial mucous membrane, the face and / or the scalp, advantageously the cleavage and / or the face, still advantageously the face.
  • the term "mucosa (s)" the ocular mucosa, the vaginal mucosa, the urogenital mucosa and / or the oral mucosa, especially the oral labial mucosa and / or the gingival mucosa, preferentially , ocular and / or oral mucosa, and more preferably, the gingival mucosa, labial and / or ocular, more preferably the gingival mucosa.
  • the term "treatment of skin and / or sensitive, sensitized, fragile and / or weakened skins and / or mucous membranes” means reducing their reactivity so as to render them less sensitive and / or fragile, for example by decreasing and / or inhibiting the release of IL6 and / or IL8 cytokines with respect to sensitive, sensitized, fragile and / or fragile skin and / or mucosa not treated with the extract according to the invention, in particular as described in US Pat. example 2.
  • the ungerminated seed protein extract deoiled from Moringa oleifera according to the invention is topically and / or orally acceptable.
  • topically acceptable means an ingredient suitable for topical application, non-toxic, non-irritating to the skin and / or the mucous membranes, which does not induce an allergic response and which does not induce an allergic response. is not chemically unstable.
  • orally acceptable means an ingredient suitable for oral administration, non-toxic, which induces no allergic response and which is not chemically unstable.
  • the use of the extract according to the invention is to prevent and / or treat the unsightly and / or unpleasant and / or uncomfortable manifestations of sensitive and sensitized skins and / or mucous membranes, which are fragile and / or weakened, advantageously chosen from redness, feeling of warmth or warmth, tension, tingling, tingling, tugging, and a mixture of these manifestations. It brings a feeling of comfort to the skin and / or mucous membranes.
  • the present invention furthermore relates to the cosmetic use of a protein extract of non-germinated seed de-oiled with Moringa oleifera, advantageously of a protein extract of non-germinated delipidated seed, in particular of a protein extract of deoiled cake, more particularly delipidated non-germinated seeds, more advantageously ungerminated seeds almonds, Moringa oleifera, for the increase and / or protection and / or maintenance of the commensal beneficial flora in the skin and / or mucous membranes, in particular commensal beneficial bacterial flora, particularly selected from the group consisting of Staphylococcus epidermidis, Acinetobacter Iwolffii and mixtures thereof.
  • the term "commensal strain” means a strain or flora beneficial to the skin and / or the mucous membranes, which does not or does not become pathogenic for the skin and / or the mucous membranes.
  • commensal microorganisms selected from the group consisting of fungi, yeasts and bacteria, preferably bacteria, present or made on the skin or the mucous membranes, in particular human and whose action is beneficial for the skin and / or the mucous membranes such as Staphylococcus hominis, S. warneri, S. capitis, S epidermidis, Acinetobacter Iwolffii, preferentially Staphylococcus epidermidis and / or Acinetobacter Iwolffii.
  • the term "increase the commensal flora beneficial to the skin and / or mucous membranes” increase the growth of commensal flora beneficial to the skin and / or mucous membranes.
  • Several methods can be used to measure the content of strains of microorganisms in the skin and / or mucous membranes, including a count of colonies present on the skin or mucous membranes, an in vitro optical density measurement after recovery of samples containing the strains or a PCR measurement.
  • the content of the microorganisms is measured in vitro by optical density after recovery of samples containing the strains as exemplified in Example 3b.
  • the use of the ungerminated seed protein extract deoiled from Moringa oleifera according to the invention is not to improve the barrier function of the skin or to increase the hydration of the skin and / or mucous membranes neither for the treatment of dry skin, nor to soothe the skin and / or the mucous membranes, in particular the skin and / or the dry mucous membranes, nor to soften and / or reduce the sensation of fatigue of the skin and / or mucous membranes .
  • the use of the non-germinated seed extract of Moringa oleifera dehydrated seed according to the invention is not to protect the skin and / or the mucous membranes against pollution, more particularly urban pollution (such as heavy metals). , the exhaust gases and / or cigarette smoke) and advantageously against the damage caused by the pollution, and / or to purify the skin and / or the mucous membranes by eliminating the particles that make the skin and / or the impure mucous membranes such as pollution particles (eg coal particles).
  • pollution particles eg coal particles
  • the cosmetic use according to the invention is to prevent and / or reduce and / or eliminate the unsightly and / or uncomfortable effects of skins and / or mucous membranes whose commensal beneficial flora is impaired, in particular to prevent and / or reduce and / or delay the secretion of sebum and its unsightly and / or unpleasant and / or uncomfortable manifestations, in particular for preventing and / or reducing and / or delaying the formation of black spots and / or comedogenesis and / or the shiny appearance of the skin, and / or maintain and / or improve the homogeneity of the complexion of the skin and / or mucous membranes, for example by suppressing and / or reducing redness and / or irregularities, and / or to prevent and / or treat the sensation of heat and / or heat of the skin and / or mucous membranes and / or to prevent and / or reduce hair loss and / or hair loss, and
  • the homogeneity of the complexion of the skin can for example be measured by chromametry or by image analysis.
  • the latter method of measurement in vivo consists of taking high resolution photographs in cross polarized configuration of the face of volunteers taken at 45 ° before and after application of the tested product.
  • an image analysis makes it possible to extract and to quantify specific parameters (for example: L *, a *, b *, C, h °) related to the color, the brightness, the homogeneity, and the texture of the skin.
  • the beneficial commensal flora is a microorganism selected from the group consisting of Staphylococcus epidermidis, Acinetobacter Iwolffii and mixtures thereof.
  • the non-germinated seed extract of dewaxed Moringa oleifera is applied topically, advantageously on specific parts and / or areas of the body selected from the legs, feet, armpits, hands , neck, Vietnameselleté, belly, arms, thighs, hips, buttocks, waist, crotch, groin, torso, back, labial mucous membrane, face and / or leather and / or the oral and / or gingival mucosa, especially shaved areas, areas of maceration such as infant seat, areas of plaice such as the armpits, the back of the elbows, the back of the knees, the buttocks, crotch, groin, neck, and / or around the lips and / or excessively cleaned areas.
  • the term “topical route” means the application of the ungerminated seed extract of Moringa oleifera and / or of the composition and / or of the ingredient according to the invention to the surface of the skin and / or mucous membranes, in particular by direct application or by spraying.
  • the ungerminated seed extract of Moringa oleifera is orally administered, in particular for the purpose of treating the gingival mucosa.
  • the cosmetic comprising it is in the form of a cosmetic composition intended for oral administration, in particular on the gingival mucosa, further comprising a suitable cosmetic vehicle.
  • cosmetic and / or pharmaceutical ingredient (s) means one or more plant extracts and / or one or more natural or synthetic molecules and / or their mixtures intended for a particular purpose.
  • Cosmetic ingredients are defined in particular by the International Nomenclature of Cosmetic Ingredients (INCI).
  • suitable cosmetic or pharmaceutical vehicle means that the composition or the components thereof are suitable for use in contact with the skin and / or the human mucosa without toxicity, incompatibility, instability, allergic response, or their equivalents, undue.
  • the extract according to the invention may be obtained by various extraction methods known to those skilled in the art, advantageously chosen from maceration, with or without stirring, hot decoction, grinding, ultrasonic grinding or ultrasonic grinding. using a mixer.
  • the extraction is carried out by maceration, advantageously still with stirring.
  • the extraction may be carried out at a temperature of 4 ° C. to 300 ° C., preferably from 20 ° C. to 80 ° C., it being understood that 20 ° C. corresponds to the ambient temperature, advantageously between 20 and 25 ° C.
  • the extraction will be conducted for a period of 30 minutes to 12 hours, preferably for a period of 1 hour to 5 hours, more preferably for a period of 1 hour to 2 hours. Very advantageously, the extraction will be conducted for a period of 1 hour.
  • the extract according to the invention may be obtained by extraction in a protic polar solvent, advantageously chosen from the group consisting of water, an alcohol, a glycol, a polyol, a water / alcohol mixture, from 99/1 to 1/99 (w / w), a water / glycol mixture of 99/1 to 1/99 (w / w) and a water / polyol mixture of 99/1 to 1/99 (w / w) (such as water mixed with ethanol, glycerol and / or butylene glycol and / or other glycols such as xylitol and / or propanediol, etc.), advantageously in the water as the sole solvent.
  • a protic polar solvent advantageously chosen from the group consisting of water, an alcohol, a glycol, a polyol, a water / alcohol mixture, from 99/1 to 1/99 (w / w), a water / glycol mixture of 99/1 to 1/99 (w / w) and
  • extract obtained by aqueous extraction means any extract obtained by extraction with an aqueous solution containing more than 60% by weight, advantageously at least 70% by weight, in particular at least 80% by weight. , more particularly at least 90% by weight, particularly at least 95% by weight, of water relative to the total weight of the aqueous solution, more advantageously not containing glycol and in particular not containing any alcohol, more particularly containing only water.
  • the extract can be obtained from an amount of 0.1% to 20% of fresh or dry material, preferably dry, preferably from 1% to 10%, more preferably from 5% to 10%, very advantageously from in a quantity of 10% by weight of dry matter, non-germinated seeds delipidated from the plant Moringa oleifera, relative to the total weight of the non-germinated seeds delipidated plant and solvent.
  • non-germinated seed protein extract de-oiled from Moringa oleifera is as described in patent EP1064008 and is marketed by BASF under the trade name Purisoft®.
  • a polar protic solvent in particular chosen from alcohols, polyols, glycols, water and their mixture in any proportion, advantageously with a aqueous solvent, that is to say based on water, even more advantageously with water as sole solvent, so as to obtain a crude extract, preferably as described in Example la.
  • the extraction is carried out at room temperature.
  • the aqueous solvent may be a salt solution at different pH or a buffered medium, more preferably at a pH of between 4 and 8.
  • the method may also comprise an additional step c) after step b) of precipitating the crude extract, not modifying the pH of the aqueous crude extract obtained in step b) so as to obtain a basic pH, in particular greater than 8, more preferably greater than 11, for example with the aid of NaOH, and recovery of the precipitate obtained, advantageously as described in Example 1b.
  • the precipitate can then be washed and then solubilized in water so as to eliminate the insolubles and to obtain an extract in the form of a protein concentrate.
  • the method may also comprise, after step c) of precipitation, an additional step d) of decantation so as to allow better precipitation of the proteins, for example as described in Example 1c.
  • this step is carried out at a temperature below room temperature, preferably at 4 D C, more preferably for at least 6:00, especially overnight.
  • a step e) can be carried out after step b) comprising contacting the aqueous crude extract obtained in step b) with carboxymethylcellulose, advantageously during lhOO, especially at room temperature, so as to load it with the protein extract.
  • This step may be followed by a step f) of contacting the charged carboxymethylcellulose obtained with step e) with an aqueous saline solution, advantageously an NaCl solution, having a pH greater than 7, advantageously 7.5, and then recovering the eluate thus obtained, which corresponds to a partially purified extract.
  • the protein extract of non-germinated seed deoiled Moringa oleifera is advantageously an extract of shelled seeds, that is to say advantageously an extract of kernel seeds only (without its shell or shell).
  • the method may therefore comprise a step prior to step a) of shelling the seeds.
  • the extracts obtained can be centrifuged and / or filtered and / or distilled, so as to recover the water-soluble fraction and be in liquid form.
  • the supernatant obtained after centrifugation is filtered, advantageously at a cut-off point of 0.45 mhi. Additional steps of bleaching and / or deodorization can be performed on the extracts at any stage of the extraction and according to the techniques known to those skilled in the art.
  • the extracts may be discolored with activated charcoal.
  • the extract according to the invention is obtained by extraction of ungerminated seed cake, in particular deoiled, more advantageously delipidated, in an aqueous saline solution at a pH of about 5 followed by elimination of the proteins. high molecular weight.
  • the supernatant is recovered and constitutes an extract according to the invention.
  • the extracts may also be concentrated by evaporation of the solvent or dried for example by lyophilization or by spraying.
  • the extracts will then be in powder form.
  • the Moringa oleifera extract obtained will be sterilized.
  • the unprocessed seed protein extract deoiled from Moringa oleifera contains, on the basis of the dry extract, a protein content, in particular of native proteins, of between 0.01 and 100% by weight. weight, advantageously at least 25% by weight, in particular at least 40% by weight, more particularly at least 45% by weight.
  • the proteins of the protein extract according to the invention advantageously have a molecular weight of between 6500 and 13000 Da, advantageously between 7100 and 11000 Da, measured by chromatography.
  • the ungried seed extract of Moringa oleifera contains no alkaloid (such as, for example, spirochin), Pterygospermin, isothiocyanates (such as, for example, 4-2-L-Rhamnosyloxy benzyl). isothiocyanate) and kaempferol.
  • alkaloid such as, for example, spirochin
  • Pterygospermin such as, for example, Pterygospermin
  • isothiocyanates such as, for example, 4-2-L-Rhamnosyloxy benzyl. isothiocyanate
  • kaempferol such as, for example, kaempferol.
  • the extract according to the invention may be used in the form of a cosmetic or pharmaceutical ingredient intended to be incorporated in a cosmetic or pharmaceutical composition, and further comprising a suitable cosmetic or pharmaceutical vehicle.
  • the extract according to the invention is in another embodiment preferentially solubilized in and / or diluted in a particularly polar solvent, such as water, advantageously further comprising glycerin as in the product marketed under the name purisoft ® and in particular as described in Example 4a).
  • a particularly polar solvent such as water
  • the extract according to the invention in another embodiment can be atomized on an atomization support such as maltodextrin and be in the form of a powder in particular as described in Example 4b).
  • the extract according to the invention is present in the ingredient in one content between 0.01 and 10% by weight of dry matter relative to the total weight of the ingredient, preferably between 1 and 5% by weight.
  • the extract according to the invention is present in the ingredient in a content of between 10 and 60% by weight of dry matter relative to the total weight of the ingredient, preferably between 30 and 50% by weight.
  • the extract according to the invention may also be in the form of a cosmetic or pharmaceutical composition, advantageously intended for topical or oral administration, in particular by way of administration. topically, preferably cutaneous, further comprising a suitable cosmetic or pharmaceutical vehicle.
  • the cosmetic or pharmaceutical ingredient, in particular dermatological ingredient in liquid form and in particular that of Example 4a) may be used in a cosmetic or pharmaceutical composition, in particular a dermatological composition, preferably at a content by weight of dry matter relative to the weight total of the composition of between 0.01 and 10%, advantageously between 0.1 and 5%, in particular between 1 and 3%.
  • the cosmetic or pharmaceutical ingredient in particular dermatological in solid form and in particular that of Example 4b), may be used in a cosmetic or pharmaceutical composition, in particular dermatological, preferably at a content by weight of dry matter relative to the weight total of the composition of between 0.001 and 5%, advantageously between 0.01 and 1%.
  • the extract will be included in the cosmetic or pharmaceutical composition in a content of between 0.0001% and 20% by weight of dry matter relative to the total weight of the composition, preferably between 0.001% and 10% by weight, advantageously between 0.01 and 5% by weight.
  • compositions according to the invention may contain any suitable solvent and / or any suitable vehicle and / or any suitable excipient, optionally in combination with other compounds of interest. They may in particular contain a cosmetically or dermatologically acceptable excipient selected from surfactants, preservatives, buffering agents, blowing agents, chelating agents, biocides, denaturants, opacifying agents, pH adjusters, reducing agents. , stabilizing agents, emulsifiers, thickeners, gelling agents, film-forming polymers, solvents, fillers, bactericides, odor absorbers, mattifying agents, conditioners, texturizing agents, gloss agents , pigments, dyes, fragrances and sunscreens chemical or mineral, trace elements, essential oils, sweeteners, flavor modifiers. These combinations are also covered by the present invention.
  • CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition (1992) describes various cosmetic and pharmaceutical ingredients commonly used in the cosmetic and pharmaceutical industry, which are particularly suitable for oral administration and / or topical use.
  • the excipient or excipients are chosen from the group comprising polyglycerols, esters, polymers and cellulose derivatives, lanolin derivatives, phospholipids, lactoferrins, lactoperoxidases, sucrose stabilizers, vitamin E and its derivatives, xanthan gums, natural and synthetic waxes, vegetable oils, triglycerides, unsaponifiables, phytosterols, silicones, protein hydrolysates, betaines, aminoxides, plant extracts, sucrose esters , titanium dioxides, glycines, and parabens, and more preferably from the group consisting of steareth-2, steareth-21, glycol-15 stearyl ether, cetearyl alcohol, phenoxyethanol, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben, butylene glycol, caprylyl glycol, natural tocopherols, glycerin, dihydroxy
  • the cosmetic or pharmaceutical composition or the extract according to the invention may be in any of the galenical forms conventionally used for topical application or oral administration, in particular topical administration such as liquid forms or solids or even in the form of pressurized liquid.
  • aqueous or oily solution an aqueous cream or gel or an oily gel, in particular in a pot or in a tube, in particular a shower gel, a shampoo, a milk, an emulsion, a hydrogel, a microemulsion or a nanoemulsion, in particular oil-in-water or water-in-oil or multiple or silicone, a serum, a lotion, in particular in a glass or plastic bottle or in a measuring or aerosol flask, an ampoule, a liquid soap, a paste, a dermatological bread, an ointment, a mousse, an aerosol, a mask, a patch, an anhydrous product, preferably liquid, pasty or solid, for example in the form of a stick, in particular as a stick or in powders, especially makeup.
  • the composition is in the form of a serum, a lotion, a cream, a milk, an ointment, a paste, a mousse, an emulsion, a hydrogel, a shower gel, a mask, a stick of a patch, or makeup powders, preferably a cream or a lotion.
  • the cosmetic or pharmaceutical composition or the extract according to the invention may be in the form of a toothpaste or a dental paste. , a mouthwash, a lotion, an aerosol, a gel, a sucking tablet, an orodispersible tablet, a chewing gum or a mucoadhesive composition.
  • the cosmetic or pharmaceutical composition may furthermore comprise other active ingredients for the treatment of skin and / or mucous membranes of sensitive and sensitized skin, skin and / or mucosa, which are sensitive, reactive, fragile and / or weakened and / or have an effect on the skin.
  • cosmetic agents intended for the care of sensitive skin such as a plant extract of Cestrum latifolium as described in application WO2009 / 112590, for example marketed under the name of Symbiocell TM by the applicant, a butter extracted from the fruit of the tree Irvingia gabonensis marketed under the name Irwinol TM by the applicant, an extract of Eperua falcata root marketed under the name of Eperuline TM, an N-acetyl-L-Tyrosyl-L-Prolyl-L-Phenylalanyl-L-Phenylalaninamide peptide (INCI: acetyl tetrapeptide 15) sold under the name of Skinasensyl TM by the applicant.
  • a plant extract of Cestrum latifolium as described in application WO2009 / 112590
  • Symbiocell TM by the applicant
  • a butter extracted from the fruit of the tree Irvingia gabonensis marketed under the name I
  • the cosmetic composition may also contain one or more other active ingredients on the cutaneous and / or mucosal microbial flora and / or active on the barrier function of the skin, in particular moisturizing and / or soothing active agents, among which an oligosaccharide obtained by marketed enzymatic synthesis.
  • the subject of the invention is also a cosmetic treatment method for the treatment of sensitized, fragile and / or fragile skins and / or mucous membranes to prevent and / or treat its unsightly and / or unpleasant manifestations and / or uncomfortable, especially chosen from redness, sensation of warmth or warmth or tension, tingling, tingling, tightness and a mixture of these manifestations, and / or for the increase and / or protection and / or maintenance of beneficial flora commensal in the skin and / or mucous membranes, in particular to prevent and / or reduce and / or delay the unsightly and / or unpleasant and / or uncomfortable manifestations of skin and / or mucosa whose commensal beneficial flora is impaired, in particular particularly for preventing and / or reducing and / or delaying the secretion of sebum and its unsightly and / or unpleasant and / or uncomfortable manifestations such as for preventing and / or reducing and / or delaying the formation of black
  • the present invention furthermore relates to a protein extract of non-germinated seed deoiled from Moringa oleifera, advantageously a protein extract of ungerminated seed delipidated, in particular a protein extract of deoiled cake, more particularly delipidated, of non-germinated seeds, more advantageously of non-germinated seed almonds, Moringa oleifera, for its use in the treatment of reactive, hyperreactive, and / or irritated skin and / or mucous membranes and / or in the treatment and / or prevention and / or reduction of occurrence pathologies related to skin and / or mucous membranes that are sensitive, sensitized, reactive, fragile, fragile, intolerant, hyperreactive and / or irritated, such as contact urticaria, irritative or allergic contact dermatitis, eczema, psoriasis, seborrheic or atopic dermatitis, and / or in the treatment and / or prevention of inflammation and
  • the present invention also relates to a protein extract of non-germinated seed deoiled from Moringa oleifera, advantageously a non-germinated delipidated seed protein extract, in particular a protein extract of deoiled cake, more particularly delipidated, of non-germinated seeds, more advantageously of almonds non-germinated seeds, Moringa oleifera, for its use in the treatment and / or prevention and / or the reduction of the occurrence of pathologies related to an alteration of the commensal flora and / or mucosal flora beneficial, advantageously involving a decrease in the content of commensal beneficial skin and / or mucosal microorganisms and / or an increase in the content of pathogenic microorganisms, preferably in pathogenic bacteria, in particular Staphylococcus aureus and / or Propionibacterium acnes, advantageously pathologies chosen from the group consisting of infections, especially bacterial, skin and / or mucous membranes,
  • pathogenic microorganism is intended to mean a microorganism present on the skin and / or the mucous membranes in a non-permanent (transient) manner or a microorganism which normally lives on the skin but which under certain conditions may become virulent.
  • pathogenic resident opportunistic pathogen
  • inducing or capable of inducing non-pathological alterations of the skin and / or mucous membranes such as skin imperfections such as, for example, redness, dandruff and / or hair loss and / or hair, swelling or even pimples and / or a burning sensation and / or localized heat accompanied by pain, pigmentation spots or scars for example following acne and therefore an inhomogeneity of the complexion, and may be involved in real skin diseases including skin infections, such as boils, folliculitis, abscesses, ulcers, sycosis, ecthyma, erysipelas, acne or impetigo, see pathological conditions, such as fungal infections (such as candidiasis or dermatophytosis) such as scabies, ringworm and fungal infections caused by Candida albicans, malassezia, Streptococci, Propionibacterium acnes, Staphyloc
  • each example has a general scope.
  • the temperature is expressed in degrees Celsius and the pressure is the atmospheric pressure.
  • the Moringa extract is prepared according to the process described in patent EP1064008, in particular as described below:
  • Moringa oleifera kernels obtained after husking the seeds and containing 33.4% (weight / weight) of oil are delipidated by two successive extractions at reflux in hexane and, after filtration, the flour is dried in an oven at 40 ° C. ° C and has a residual oil content of 2.5%.
  • the supernatant is collected and then filtered through 0.45 ⁇ m to obtain 1.77 liter of yellow filtrate, containing 4.69% of dry extract and having a protein concentration measured by the Biuret technique of 21.54. g / l (ie a protein purity on the basis of the solids content of 45.92%).
  • the extract is spray-dried and 65.72 grams of atomisate is obtained with an estimated protein content of 54.7% (N ⁇ 6.25).
  • the chromatographic profile resulting from the Superose 12HR column gel permeation analysis of this extract shows a major fraction which represents 52% of the surface and corresponds to molecular weights between 7 800 and 11 000 Da. The presence of shoulders in this peak confirms the existence of several compounds and the range of molecular weights is close to that found in the literature for the monomers (6,500 and 7,000 Da) and the dimers (13,000 Da) of proteins flocculants of Moringa.
  • the precipitate is then dissolved in 270 ml of distilled water (ie 10% of the initial volume) and the pH of the solution is continuously adjusted to 4.5 with 6N HCl so as to allow the solubilization of the precipitate (the dispersion is facilitated by the use of a device of the type known as Turax).
  • the almond oil obtained by peeling the seeds of Moringa oleifera is extracted by pressing on a press of the type known under the designation KOMET and the cake obtained is crushed in order to obtain a homogeneous flour.
  • a crude extract is prepared from 1.24 kg of cake according to the procedure described in Examples 1a and 1b.
  • Proteins are precipitated at pH 11.8 according to Example 1b, but an additional step of decanting overnight at + 4 ° C is introduced to allow better protein precipitation.
  • the precipitate is treated under the same conditions as in Example lb (the pH of the solution for reconstituting the precipitate is however 6 instead of 4.5).
  • the protein concentrate thus obtained (1.05 liter to 4.59% dry extract) is dehydrated by atomization and 34.6 g of atomisate are collected, ie an atomization efficiency on the basis of the dry extract of 71.5%.
  • the protein content based on the nitrogen assay (N x 6.25) is greater than 90% (about 95%).
  • a crude extract is prepared from 150 g of cake according to the procedure described in Examples 1a, 1b and 1c.
  • CM52 Carboxymethylcellulose
  • WHATMAN Carboxymethylcellulose
  • the mixture is filtered on Buchner equipped with a # 42 WHATMAN filter, then the cellulose is collected and equilibrated again in 500 ml of water at pH 7.5.
  • the cellulose After removal of the aqueous medium by filtration, the cellulose is brought into contact, with stirring for one hour at room temperature, with the aqueous extract of almond cake Moringa oleifera.
  • the non-adsorbed compounds (fractions whose chromatographic profile is shown in broken lines in FIG. 3) are removed by filtration on Buchner and the "charged" cellulose is then washed twice with one liter of distilled water at pH 7.5. then filtered on Büchner.
  • the cellulose is then contacted with 120 ml of a 60 g / l NaCl solution pH 7.5 for 30 minutes.
  • the proteins eluted in NaCl medium are recovered by Buchner filtration (the chromatographic profile of the proteins adsorbed on CM 52 and eluted in NaCl medium 60 g / l is shown in solid line in Figure 3).
  • the Superose 12HR column gel permeation analysis of this extract shows a major fraction which represents 70% of the surface and which corresponds to molecular weights of about 7,100 Da.
  • the solution can be desalted by dialysis, or by ultrafiltration and dehydrated by lyophilization, atomization or any other suitable means.
  • the extract was atomized on maltodextrin support and formulated according to Example 4b) to be tested in the following examples.
  • Example 1d The product tested is that of Example 1d) formulated in the form of the ingredient according to Example 4b and used at 0.03% by weight relative to the total final medium (medium + product).
  • the test is carried out on human keratinocytes HacaT in culture.
  • the HacaT keratinocytes are inoculated at 2 ⁇ 10 6 cells / cm 2 in DMEM medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium) supplemented with 10% S VF (Serum fetal calf). The cells are incubated for 3 to 5 days at 37 ° C. under 5% CO 2 and 95% relative humidity. The DMEM medium is then replaced with 1mL of Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). The product to be tested is then added the desired concentration in EMEM medium and the whole is incubated an additional day until saturation of the cell layer.
  • DMEM medium Dulbecco's Modified Eagle Medium
  • S VF Serum fetal calf
  • 0.1 ml of a Staphylococcus aureus bacteria solution DSMZ 20231 ATCC 12600 (1.5x10 7 ) is added to each well for 2 hours at 37 ° C, 5% CO 2 aerobically, at relative humidity saturation. Then the media with bacteria are replaced by EMEM containing the product to be tested. The whole is again incubated for 24 hours at 37 ° C. and 5% of C0 2 .
  • the IL8 and IL6 assays are performed according to the recommendations of the supplier of the ELISA kit.
  • Table 2.1 Evaluation of the effect of the product according to the invention on the release of cytokine IL6 induced in keratinocytes by the presence of S. aureus
  • Table 2.2 Evaluation of the effect of the product according to the invention on the release of cytokine ILS induced in keratinocytes by the presence of S. aureus
  • IL8 caused by pathogenic bacteria 5. aureus in keratinocytes in culture. This demonstrates the effect of the product to treat sensitive skin, reactive, fragile, weakened, or sensitized and its anti-inflammatory effect.
  • Example 3 Selective effects of the product on the growth of commensal microorganisms vis-à-vis opportunistic pathogenic microorganisms
  • the product of the invention has a selective action on the growth of microorganisms of the skin.
  • the product promotes the growth of commensal microorganisms and especially the bacteria that help the skin to fight inflammation such as Staphylococcus epidermidis and Acinetobacter Iwolffii.
  • Example 3-a Inhibition of the growth of opportunistic pathogenic strain of
  • Example 1d The product tested is that of Example 1d) formulated in the form of the ingredient of Example 4b) at 0.0006% and 0.006% by weight relative to the weight of the total final medium (medium and product).
  • the ingredients are diluted in the culture medium of the bacteria (brucella broth).
  • the media containing the ingredients are then incubated for 48 hours at 35 ° C. ⁇ 2.5 ° C. under anaerobic conditions with a calibrated inoculum of 5 ⁇ 10 5 P. acnes ATCC 11827. Growth is estimated by measuring the density optics at 600nm after incubation.
  • Table 3.1 Evaluation of the effect of the product at different dosages on the growth of
  • Example 3-b Activation of the Growth of Commensal Strains to Control S. epidermidis and / or ⁇ Iwolffii Inflammation
  • Example 1d formulated in the form of an ingredient according to Example 4b) at 0.0006% and 0.006% by weight relative to the weight of the total final medium (medium and product).
  • a cosmetic or pharmaceutical liquid ingredient having the following formulation in percent by weight is prepared.
  • EXAMPLE 5 Composition according to the invention in the form of a lotion for the body and / or face:
  • the lotion is prepared by the usual methods in the field well known to those skilled in the art, by mixing the 6 phases.
  • EXAMPLE 6 Composition according to the invention in the form of a milk for the body and / or face
  • a cosmetic product in the form of milk for the body and / or face may, for example, have a weight composition, consisting of the following aqueous and fatty phases, as indicated below.
  • the fatty phase at 8 ° C., to bring the water of the aqueous phase also to 80 ° C. and to dissolve the preservative therein (Elestab 4112), then to pour the aqueous phase into the fatty phase with turbine stirring and to cool gradually stirring, to then add thereto, around 50 ° C, the aqueous mother solution of Moringa protein extract, then the perfume and, finally, to continue stirring until complete cooling.
  • EXAMPLE 7 Composition according to the invention in the form of a cream for the face
  • a cosmetic product in the form of a cream for the body and / or face may, for example, have a weight composition, consisting of the following aqueous and fat phases, as indicated below.

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera pour le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles et/ou fragilisées. Elle concerne en outre un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention et/ou la diminution de la survenance de pathologies liées aux peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles, fragilisées, intolérantes, hyperréactives et/ou irritées, telles que l'urticaire de contact, la dermatite irritative ou allergique de contact, l'eczéma, le psoriasis, la dermatite séborrhéique ou atopique, et/ou dans le traitement et/ou la prévention de l'inflammation et/ou de l'irritation, en particulier causée par Staphylococcus aurais, et/ou dans le traitement et/ou la prévention de l'érythème, en particulier l'érythème fessier du nourrisson.

Description

TITRE : UTILISATION COSMETIQUE D’UN EXTRAIT PROTEIQUE DES GRAINES DE MORINGA OLEIFERA
La présente invention concerne le domaine de la cosmétologie et de la dermatologie, plus particulièrement la cosmétique de soin pour la peau et les muqueuses, en particulier des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles, et/ou fragilisées et l’utilisation d’un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa. Le genre Moringa comprend quelques 14 espèces de plantes (dont notamment Moringa peregrina, M. aptera, M. concanensis, M. clroithardii, M. hildebrandtii, M. longituba), parmi lesquelles Moringa pterygosperma (synonyme Moringa oleifera) est la plus connue.
Il s’agit en l'occurrence d'un arbre à croissance rapide qui s'adapte très bien à des conditions variables, se développant partout dans les tropiques, en Asie, Afrique et Amérique du sud. Les fruits de 30 à 50 cm de long, pendent comme des baguettes de tambour d'où le nom anglais de "drumstick tree", et ses gousses vertes sont appréciées comme légume partout dans le monde. Il en résulte qu'on laisse rarement mûrir les graines en vue de la production d'huile.
Les différentes parties de l'arbre (feuilles, racines, écorce de racines, fleurs, graines) sont utilisées en médecine traditionnelle dans les pays où il pousse.
Les graines de Moringa sont caractérisées par la présence d'une huile dont la teneur varie entre 21 et 53 % selon l'espèce et la maturité des graines. Pour l'espèce Moringa oleifera les teneurs mentionnées dans la littérature vont de 21 à 34 %.
Du fait de son excellente stabilité à l’oxydation et de ses bonnes propriétés de fixation de parfums, l'huile de Moringa, également appelée huile de Behen ou de Ben, fut dans les civilisations antiques, l'huile la plus utilisée par les formulateurs d'onguents à usages cosmétiques et religieux. Cette huile a été utilisée par les formulateurs en cosmétique jusqu'au siècle dernier et son utilisation a été "redécouverte" récemment. En dehors de leur contenu en huile, les graines de Moringa ont plus récemment retenu l'attention des chercheurs pour leur extrait protéique. Ainsi, la demande EP1064008 décrit l’utilisation d’un extrait protéique des graines de Moringa sur la peau et les muqueuses pour leur effet adoucissant, conditionneur physiologique, hydratant, restructurant, réparateur, anti-rides et en tant qu’actif antipollution.
Un tel extrait est en particulier commercialisé par BASF sous la dénomination Purisoft® pour son effet purifiant et anti-pollution.
L’article d’ARMAND-STUSSI et al. (Personal care, May 2003) décrit également l’effet purifiant et anti-pollution (en combattant les effets néfastes de la pollution sur la peau telle que la fumée de cigarette ou les métaux lourds et en éliminant ou facilitant l’élimination des microparticules sur la peau telle que la poussière de charbon) de l’extrait commercialisé par BASF sous la dénomination Purisoft®.
La demande WO02/096448 décrit quant à elle l’utilisation d’un extrait protéique de graine délipidé ou non dans les domaines de la désodorisation, suppression des mauvaises odeurs, de la propreté, de l’hygiène intime, de l’hygiène buccale, des soins dentaires. En particulier ce document décrit en outre qu’un tel extrait a un effet apaisant, adoucissant, hydratant et réduisant la sensation de fatigue. Toutefois cet effet apaisant n’est à aucun moment suggéré comme étant lié à une diminution de la réactivité de la peau ou à un traitement de l’inflammation de la peau et/ou des muqueuses. En outre ce document indique que l’extrait maintient l’équilibre de la flore bactérienne et fongique à la surface des muqueuses, mais uniquement dans le sens où il ne l’agresse pas contrairement, aux autres déodorants conventionnels. Ainsi, cette demande ne décrit ni ne suggère que l’extrait puisse être utilisé dans le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles, fragilisées et/ou intolérantes, en particulier en diminuant l’inflammation, ni qu’il puisse avoir un effet bénéfique sur la flore commensale bénéfique de la peau et/ou des muqueuses, en la préservant et/ou en l’augmentant.
La demande FR2946879 décrit également un extrait de Moringa pour son utilisation en cosmétique. Toutefois, il s’agit d’un extrait de graine entière, c’est-à-dire non déshuilée.
La demande CN1032230Ü0 décrit par ailleurs l’utilisation d’un extrait de graines germées de Moringa en cosmétique, en particulier obtenu par une extraction à l’aide d’un fluide supercritique, procédé d’extraction qui extrait les composés huileux. La présente invention concerne donc une nouvelle utilisation d’un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera qui n’a jamais été décrite ni suggérée dans l’art antérieur.
En effet les inventeurs ont découvert qu’un tel extrait permettait d’inhiber la libération de cytokines pro-inflammatoires IL-6 et IL-8, en particulier induites par des bactéries pathogènes opportunistes S. aureus (exemple 2). Cet extrait a donc un effet sur les processus d’inflammation de la peau en les réduisant et donc est un produit de choix dans le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles, et/ou fragilisées.
Les réactions d’irritation et d’allergies cutanées (hypersensibilité retardée de contact ou allergie de contact ou encore eczéma de contact) sont devenues un problème de santé dans les pays industrialisés. Les causes sont aussi variées que le nombre d’irritants et d’allergènes de contact que l’on retrouve, par exemple, dans les sels de métaux, les produits cosmétiques et d’hygiène, les parfums, les médicaments, les conservateurs, les désinfectants, les vêtements, les plantes, etc. Dans ce même contexte, le nombre de personnes qui disent avoir la peau sensible ou réactive a fortement augmenté ces dernières années. Ce nombre est passé de 30% de la population dans les années 1980 à environ 60% aujourd’hui. Une des causes les plus importantes de la sensibilité de la peau tient à l’affaiblissement de la fonction barrière, provoquée entre autres par une déficience héréditaire/acquise des lipides intercellulaires du stratum corneum. Une activité neuro-sensorielle accrue, qui est caractérisée par des changements dans les terminaisons nerveuses de l’épiderme, une accumulation de neurotransmetteurs ou une perturbation dans la transmission des informations au niveau du système nerveux central, est également un facteur provoquant l’accroissement de la sensibilité de la peau. Une troisième cause supplémentaire de sensibilité de la peau est une sensibilité immunitaire accrue comportant notamment un accroissement mesurable de la densité des cellules de Langerhans (CL) épidermiques, et pouvant, dans les cas les plus extrêmes, entraîner des pathologies telles que l’urticaire de contact, la dermatite irritative ou allergique de contact, ou la dermatite atopique.
Le polymorphisme des peaux sensibles se traduit par des sensations subjectives telles que rougeurs, sensation de chaleur ou d’échauffement, de tension, de fourmillements, picotements, tiraillements. Ces manifestations inesthétiques et/ou inconfortables sont caractéristiques des peaux sensibles. Dans les cas les plus extrêmes, des irritations, voire des réactions allergiques sont aussi décrites.
Tant en cosmétique qu'en pharmacie, il est connu de diminuer la sensibilité de tous les types de peaux, notamment en prévenant et/ou traitant la réaction inflammatoire ou irritante. En effet chez les sujets pour lesquels la peau est dite « sensible », une exposition même mineure à des agents agressifs ou conditions irritantes peut se traduire par lesdites manifestations inesthétiques et/ou inconfortables cutanées et/ou mucosales pouvant même entraîner une réaction d'inflammation ou d'irritation importante qu’il convient d’éviter. Les traitements actuels pour les peaux sensibles ont pour objectif de rendre la peau plus tolérante, c'est-à-dire d’élever le seuil de réactivité des peaux sensibles qui sont caractérisées par un seuil d’irritabilité plus bas aux réactions irritantes, par exemple en inhibant la libération de cytokines pro- inflammatoires IL-6 et IL-8. Au vu du nombre de personnes ayant des problèmes de sensibilité de la peau et malgré les traitements disponibles de nos jours, il est primordial de trouver de nouveaux traitements ayant un effet sur les facteurs de l’inflammation de la peau pour pouvoir traiter de telles peaux.
Les inventeurs ont en outre découvert que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera avait également un impact sur la flore microbienne cutanée et/ou mucosale, en particulier en activant la croissance de souches bénéfiques commensales, particulièrement celles permettant de lutter contre l’inflammation, telles que S. epidermidis et/ou A. Iwoljfii (exemple 3b), mais également en inhibant la croissance de souches pathogènes opportunistes telle que Propionibacterium acnés (exemple 3a).
La peau représente en effet un écosystème complexe sur lequel prolifèrent plusieurs types de microorganismes tels que bactéries et champignons. Ces microorganismes constituent la flore cutanée, aussi nommée flore microbienne cutanée. On distingue : - la flore résidente bénéfique commensale constituée des microorganismes proliférant classiquement sur une peau saine, de façon permanente en puisant leurs nutriments sur la peau, et apportant des bénéfices connus à la peau,
- la flore résidente pathogène opportuniste telle que Propionibacterium acnés, qui vit normalement sur la peau mais qui, dans certaines conditions, peut devenir virulente et donc potentiellement pathogène et
- la flore transitoire, présente sur la peau dans des conditions anormales, par exemple par contact avec des éléments souillés, et qui peut devenir pathogène en cas de prolifération.
Parmi les microorganismes de la flore commensale cutanée, on citera en particulier la souche Staphylococcus epidermidis et la souche acinetobacter Iwoljfii. Ces souches se trouvent notamment au niveau du visage sur des peaux saines où elles participent au maintien de l’équilibre de la flore commensale cutanée. En revanche, la souche Staphylococcus aareus peut être considérée comme faisant partie de la flore transitoire cutanée potentiellement pathogène pour la peau humaine et la souche Propionibacterium acnés comme faisant partie de la flore résidente pathogène opportuniste. Staphylococcus aureus et Propionibacterium acnés en cas de prolifération peuvent en effet être à l’origine d’un déséquilibre microbien au niveau de la flore cutanée, ce qui la rend plus vulnérable aux infections et aux mycoses, induisent une inflammation s’exprimant notamment par des rougeurs, des gonflements voire des boutons et une sensation de brulure et/ou chaleur localisée accompagnée de douleurs, des tâches pigmentaires ou des cicatrices par exemple suite à l’acné et donc une inhomogénéité du teint, et enfin peuvent être à l’origine de réelles pathologies infectieuses cutanées comme les infections cutanées que sont les furoncles, les folliculites, les ulcères, les abcès, la sycosis l’impétigo, l’ecthyma, l’érysipèle ou l’acné. En outre, une perturbation de la flore commensale peut également être à l’origine de mycoses de la peau telles que des candidoses. Une perturbation de la flore de la muqueuse buccale en particulier de la muqueuse gingivale peut être à l’origine de gingivite. Des solutions cosmétiques ou dermatologiques sont déjà connues pour agir sur la flore microbienne cutanée. En revanche, leurs actions sont souvent antiseptiques. Ces modes d’action ne sont ainsi pas ciblés car ils ne sont pas dirigés contre une souche de microorganisme spécifique. II existe des solutions permettant d’agir sur la flore microbienne cutanée en ciblant un groupe comme les bactéries dans le domaine des ingrédients pharmaceutiques. On citera à titre d’exemple les antibiotiques. Toutefois, les antibiotiques présentent l’inconvénient de ne pas toujours être tolérés notamment en administration orale et induisent en outre le développement de résistances. En outre, les antibiotiques en générale agissent non seulement sur les flores microbiennes pathogènes, mais aussi sur la flore microbienne commensale, ce qui peut avoir pour conséquence l’apparition de mycoses. Par conséquent, il existe un besoin important dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie de fournir des ingrédients actifs sur la flore microbienne cutanée, notamment par action ciblée sur une souche microbienne particulière ou par protection de la flore commensale, qui soient facilement disponibles et ne possèdent pas les inconvénients ou effets secondaires précédemment décrits.
La présente invention concerne donc l’utilisation cosmétique d’un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, avantageusement d’un extrait protéique de graine non germée délipidée, en particulier d’un extrait protéique de tourteau déshuilé, plus particulièrement délipidé, de graines non germées, plus avantageusement d’amandes de graines non germées, de Moringa oleifera, pour le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées.
D’une manière générale, les peaux et/ou muqueuses sensibles peuvent être définies comme des peaux qui, par nature, ne tolèrent que très peu les agents agressifs notamment les agents de l’environnement tels que les agents polluants, les facteurs climatiques (vent, froid, chaleur), les expositions aux UV, les facteurs émotionnels notamment le stress et/ou les agents chimiques (métaux lourds, détergents, composés contenus dans les traitements cosmétiques tels que les parfums, les conservateurs, alcools, pH, AHA ou dermatologiques tels que vitamine A acide) et/ou les conditions agressives notamment la transpiration et les agressions mécaniques telles que épilation, rasage, frottement et même l’eau en particulier calcaire. Les peaux sensibles ne sont pas des peaux à caractères pathologiques à la différence des peaux allergiques. Elles peuvent néanmoins réagir aux agents et/ou conditions agressives par des manifestations inesthétiques et/ou inconfortables cutanées et/ou mucosales telles que picotements, sensation de chaleur ou d’ échauffe ment, de tension, de fourmillements, tiraillements, rougeurs. Ainsi, le caractère « peau sensible » peut être estimé par le sujet lui-même avec des sensations cutanées subjectives ou par le dermatologue avec des réactions cutanées objectives.
Les manifestations inesthétiques et inconfortables peuvent être généralisées à l'ensemble du corps, mais la plupart du temps elles peuvent avoir des localisations bien définies telles que par exemple le cuir chevelu, le visage, les plis cutanés, les fesses chez le nourrisson, etc. Il peut donc s’agir de zones de peau et/ou de muqueuse sensibles.
De même, les peaux sensibilisées sont des peaux rendues sensibles momentanément donc non pathologiques en tant que telles.
La peau réactive, ou hyperréactive ou intolérante ou irritable est une peau dont le seuil de tolérance a diminué et qui réagit de manière excessive.
Une peau fragile ou fragilisée c’est-à-dire rendue fragile momentanément, est une peau dont la fonction barrière est affaiblie. Cet état peut être lié à l’état de l’individu, les personnes âgées et les nourrissons ayant une peau fragile par exemple. Cet état peut résulter d’agression chimique ou physique (abrasion, frottements, coupures).
Les manifestations inconfortables et inesthétiques des peaux sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées sont les mêmes que pour la peau sensible, sans que ces manifestations et/ou états de peau ne relèvent de la prévention et/ou du traitement d’une pathologie. I
On entend au sens la présente invention par « cosmétique » une utilisation non pharmaceutique, non thérapeutique, qui n’est pas destinée à la prévention et/ou au traitement de peaux et/ou de muqueuses qualifiées de pathologiques par un spécialiste du domaine, tel qu’un dermatologue. Il s’agit donc d’une utilisation sur peaux et/ou muqueuses saines.
On entend par « peau et/ou muqueuse saine » tout ou partie d’une zone de peau incluant le cuir chevelu et/ou muqueuse saine, notamment humaine, ne présentant donc pas d’infection, de cicatrice, de maladie ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné, ichtyose, gingivite ou dermatite ou de plaies ou de blessures ou aphtes ou ulcération ou de brulure et/ou autres dermatoses, ou aphtoses ou d’inflammation ou d’irritation.
On entend au sens de la présente invention par « peau » la peau de tout ou partie du corps, notamment humain, choisi parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, la muqueuse labiale, le visage et/ou le cuir chevelu, avantageusement le décolleté et/ou le visage, encore avantageusement le visage.
Au sens de la présente invention, on entend par « muqueuse(s) », la muqueuse oculaire, la muqueuse vaginale, la muqueuse uro-génitale et/ou la muqueuse buccale, notamment la muqueuse buccale labiale et/ou la muqueuse gingivale, préférentiellement, les muqueuses oculaires et/ou buccales, et encore préférentiellement, la muqueuse gingivale, labiale et/ou oculaire, encore plus préférentiellement le muqueuse gingivale.
On entend au sens de la présente invention par « traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées », le fait de diminuer leur réactivité de façon à les rendre moins sensibles et/ou fragiles, par exemple en diminuant et/ou inhibant la libération de cytokines IL6 et/ou IL8 par rapport à une peau et/ou muqueuse sensible, sensibilisée, fragile et/ou fragilisée non traitée par l’extrait selon l’invention, en particulier tel que décrit dans l’exemple 2.
L’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera selon l’invention est topiquement et/ou oralement acceptable. Au sens de la présente invention, on entend par « topiquement acceptable », un ingrédient adapté à une application par voie topique, non toxique, non irritant pour la peau et/ou les muqueuses, qui n’induit pas de réponse allergique et qui n’est pas instable sur le plan chimique. Au sens de la présente invention, on entend par « oralement acceptable », un ingrédient adapté à une administration par voie orale, non toxique, qui n’induit pas de réponse allergique et qui n’est pas instable sur le plan chimique.
Ainsi avantageusement l’utilisation de l’extrait selon l’invention est pour prévenir et/ou traiter les manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées, avantageusement choisies parmi les rougeurs, la sensation de chaleur ou d’échauffement, de tension, de fourmillements, les picotements, les tiraillements, et un mélange de ces manifestations. Elle permet d’apporter une sensation de confort à la peau et/ou aux muqueuses.
La présente invention concerne en outre l’utilisation cosmétique d’un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, avantageusement d’un extrait protéique de graine non germée délipidée, en particulier d’un extrait protéique de tourteau déshuilé, plus particulièrement délipidé, de graines non germées, plus avantageusement d’amandes de graines non germées, de Moringa oleifera, pour l’augmentation et/ou la protection et/ou le maintien de la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses, en particulier de la flore bactérienne bénéfique commensale, particulièrement choisi dans le groupe constitué par Staphylococcus epidermidis, Acinetobacter Iwolffii et leurs mélanges.
On entend donc au sens de la présente invention par « souche ou flore commensale » une souche ou flore bénéfique pour la peau et/ou les muqueuses, qui n’est pas ou ne devient pas pathogène pour la peau et/ou les muqueuses.
On entend au sens de la présente invention par « maintenir et/ou protéger la flore commensale bénéfique au niveau de la peau et/ou des muqueuses» maintenir constant la teneur au niveau de la peau et/ou des muqueuses d’une ou plusieurs souches de microorganismes commensaux choisi dans le groupe constitué par les champignons, les levures et les bactéries, préférentiellement les bactéries, présentes ou apportées sur la peau ou les muqueuses notamment humaines et dont l’action est bénéfique pour la peau et/ou les muqueuses tels que Staphylococcus hominis, S. warneri, S. capitis, S. epidermidis, Acinetobacter Iwolffii, préférentiellement Staphylococcus epidermidis et/ou Acinetobacter Iwolffii.
Au sens de la présente invention, on entend par « augmenter la flore commensale bénéfique au niveau de la peau et/ou des muqueuses » augmenter la croissance de la flore commensale bénéfique au niveau de la peau et/ou des muqueuses. Plusieurs méthodes peuvent être utilisées pour mesurer la teneur des souches de microorganismes au niveau de la peau et/ou des muqueuses, parmi lesquelles un comptage des colonies présentes sur la peau ou les muqueuses, une mesure in vitro par densité optique après récupération d’échantillons contenant les souches ou une mesure par PCR. Avantageusement, la teneur des microorganismes est mesurée in vitro par densité optique après récupération d’échantillons contenant les souches comme exemplifié dans l’exemple 3b.
Selon l’invention, l’utilisation de l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera selon l’invention n’est pas pour améliorer la fonction barrière de la peau ni pour augmenter l’hydratation de la peau et/ou des muqueuses ni pour le traitement des peaux sèches, ni pour apaiser la peau et/ou les muqueuses, en particulier la peau et/ou les muqueuses sèches, ni pour adoucir et/ou réduire la sensation de fatigue de la peau et/ou des muqueuses.
En particulier l’utilisation de l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera selon l’invention n’est pas pour protéger la peau et/ou les muqueuses contre la pollution, plus particulièrement la pollution urbaine (telle que les métaux lourds, les gaz d’échappement et/ou la fumée de cigarette) et avantageusement contre les dommages causés par la pollution, et/ou pour purifier la peau et/ou les muqueuses en éliminant les particules qui rendent la peau et/ou les muqueuses impures telle que les particules de pollution (par exemple les particules de charbon).
Ainsi avantageusement l’utilisation cosmétique selon l’invention (et donc non thérapeutique) est pour prévenir et/ou réduire et/ou supprimer les effets inesthétiques et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses dont la flore bénéfique commensale est altérée, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la sécrétion de sébum et ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la formation de points noirs et/ou la comédogénèse et/ou l’aspect luisant de la peau, et/ou maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses par exemple par suppression et/ou diminution des rougeurs et/ou des irrégularités, et/ou prévenir et/ou traiter la sensation d’échauffement et/ou de chaleur de la peau et/ou des muqueuses et/ou pour prévenir et/ou réduire la chute des cheveux et/ou des poils, et/ou pour prévenir et/ou réduire les pellicules.
Au sens de la présente invention, on entend par «maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses», prévenir et/ou réduire et/ou traiter les imperfections du teint, telles que des rougeurs ou irrégularités de la peau, de façon à rendre le teint de la peau et/ou des muqueuses plus homogène et donc moins terne et plus lumineux, et/ou diminuer l’aspect rougeâtre de la peau en lui donnant un aspect en bonne santé et/ou nourri et donc un effet bonne mine. L’homogénéité du teint de la peau peut par exemple être mesurée par chromamétrie ou par analyse d’image. Cette dernière méthode de mesure in vivo consiste à prendre des photographies haute résolution en configuration polarisée croisées du visage de volontaires prises à 45° avant et après application du produit testé. Sur la base de ces photographies numériques, une analyse d'image permet d'extraire et de quantifier des paramètres spécifiques (par exemple: L*, a*, b*, C, h°) reliés à la couleur, l’éclat, l'homogénéité, et la texture de la peau. Au sens de la présente invention, on entend par « une peau et/ou muqueuse dont la flore bénéfique commensale est altérée » une peau et/ou muqueuse dont la teneur en flore bénéfique commensale, en particulier la teneur en Staphylococcus epidermidis et/ou Acinetobacter Iwolffii, est inférieure à la teneur en flore bénéfique commensale, en particulier la teneur en Staphylococcus epidermidis et/ou Acinetobacter Iwolffii mesurée initialement avant l’altération ou sur une autre partie du corps non altérée. Dans un mode de réalisation avantageux, la flore commensale bénéfique est un microorganisme choisi dans le groupe constitué par Staphylococcus epidermidis, Acinetobacter Iwolffii et leurs mélanges.
Dans un autre mode de réalisation avantageux, l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est appliqué par voie topique, avantageusement sur des parties spécifiques et/ou zones du corps choisies parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, le cou, le décolleté, le ventre, les bras, les cuisses, les hanches, les fesses, la taille, l’entrejambe, l’aine, le torse, le dos, la muqueuse labiale, le visage et/ou le cuir chevelu et/ou la muqueuse buccale et/ou gingivale, en particulier les zones rasées, les zones de macération tel que le siège du nourrisson, les zones de plie telles les aisselles, l’arrière des coudes, l’arrière des genoux, les fesses, l’entrejambe, l’aine, le cou, et/ou le tour des lèvres et/ou les zones excessivement nettoyées.
Au sens de la présente invention, on entend par « voie topique », l’application de l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera et/ou de la composition et/ou de l’ingrédient selon l’invention sur la surface de la peau et/ou des muqueuses, notamment par application directe ou par vaporisation.
Dans un autre mode de réalisation avantageux, l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est administré par voie orale, en particulier dans le but de traiter la muqueuse gingivale. Ainsi de façon avantageuse, l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera ou l’ingrédient cosmétique le comprenant se trouve sous la forme d’une composition cosmétique destinée à une administration par voie orale, en particulier sur les muqueuses gingivales, comprenant en outre un véhicule cosmétique approprié.
Au sens de la présente invention, on entend par « ingrédient(s) cosmétique(s) et/ou pharmaceutique(s) » un ou des extraits végétaux et/ou une ou des molécules naturelles ou synthétiques et/ou leurs mélanges destiné à une application cosmétique et/ou pharmaceutique. Les ingrédients cosmétiques sont notamment définis par la nomenclature internationale des ingrédients cosmétiques (INCI).
Au sens de la présente invention, le terme « véhicule cosmétique ou pharmaceutique approprié », signifie que la composition ou les composants de celle-ci sont adaptés à l'utilisation en contact avec la peau et/ou les muqueuses humaines sans toxicité, incompatibilité, instabilité, réponse allergique, ou leurs équivalents, indue.
L’extrait selon l’invention pourra être obtenu par différentes méthodes d’extraction connues de l’Homme du métier, avantageusement choisies parmi la macération, avec ou sans agitation, la décoction à chaud, le broyage dont le broyage aux ultrasons ou à l’aide d’un mixeur. Préférentiellement, l’extraction est réalisée par macération, avantageusement encore sous agitation.
L’extraction pourra être conduite à une température de 4°C à 300°C, préférentiellement de 20°C à 80°C, étant entendu que 20°C correspond à la température ambiante, avantageusement entre 20 et 25°C.
L’extraction sera conduite durant une période de 30 minutes à 12 heures, préférentiellement durant une période de 1 heure à 5 heures, encore préférentiellement durant une période de 1 heure à 2 heures. Très avantageusement, l’extraction sera conduite durant une période de 1 heure.
L’extrait selon l’invention pourra être obtenu par extraction dans un solvant polaire protique, avantageusement choisi dans le groupe constitué par l’eau, un alcool, un glycol, un polyol, un mélange eau/alcool, de 99/1 à 1/99 (p/p), un mélange eau/glycol de 99/1 à 1/99 (p/p) et un mélange eau/polyol de 99/1 à 1/99 (p/p) (tels que l’eau en mélange avec éthanol, glycérol et/ou butylène glycol et/ou autres glycols tel que xylitol et/ou propanediol, etc.), avantageusement dans l’eau comme unique solvant. De façon particulière, l’extrait est obtenu par extraction aqueuse.
Au sens de la présente invention, on entend par « extrait obtenu par extraction aqueuse » tout extrait obtenu par extraction avec une solution aqueuse contenant plus de 60% en poids, avantageusement au moins 70% en poids, en particulier au moins 80% en poids, plus particulièrement au moins 90% en poids, de façon particulière au moins 95% en poids, d’eau par rapport au poids total de la solution aqueuse, encore plus avantageusement ne contenant pas de glycol et de façon particulière ne contenant pas d’alcool, plus particulièrement ne contenant que de l’eau.
L’extrait peut être obtenu à partir d’une quantité de 0,1% à 20% de matière fraîche ou sèche, préférentiellement sèche, avantageusement de 1% à 10%, encore avantageusement de 5% à 10%, très avantageusement à partir d’une quantité de 10% en poids de matière sèche, des graines non germées délipidées de la plante Moringa oleifera, par rapport au poids total des graines non germées délipidées de plante et du solvant.
Dans un mode de réalisation avantageux, l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est tel que décrit dans le brevet EP1064008 et est commercialisé par BASF sous la dénomination commerciale Purisoft®.
Il s’agit en particulier d’un extrait hydrosoluble, plus particulièrement obtenu par extraction dans un solvant polaire protique, avantageusement dans l’eau.
Le procédé d’extraction est avantageusement celui décrit dans le brevet EP1064008 et en particulier comprend les étapes suivantes :
a)- extraction de l’huile des graines de Moringa oleifera, avantageusement à l’aide d’une presse ou par extraction à reflux dans un solvant apolaire tel que l’hexane; b)- extraction du tourteau ou de la farine déshuilée obtenue à l’étape a) avec un solvant polaire protique, en particulier choisi parmi les alcools, les polyols, les glycols, l’eau et leur mélange en toute proportion, avantageusement avec un solvant aqueux, c’est à dire à base d’eau, encore plus avantageusement avec de l’eau comme unique solvant, de façon à obtenir un extrait brut, avantageusement tel que décrit dans l’exemple la.
De façon avantageuse, l’extraction est réalisée à température ambiante.
Le solvant aqueux peut être une solution saline à différents pH ou un milieu tamponné, plus avantageusement à un pH compris entre 4 et 8.
Le procédé peut également comprendre une étape supplémentaires c) après l’étape b) de précipitation de l’extrait brut pas modification du pH de l’extrait brut aqueux obtenu à l’étape b) de façon à obtenir un pH basique, en particulier supérieur à 8, plus avantageusement supérieur à 11, par exemple à l’aide de NaOH, et récupération du précipité obtenu, avantageusement tel que décrit dans l’exemple lb.
Le précipité peut ensuite être lavé puis solubilisé dans l’eau de façon à éliminer les insolubles et à obtenir un extrait sous forme de concentré protéique.
Le procédé peut également comprendre après l’étape c) de précipitation une étape supplémentaire d) de décantation de façon à permettre une meilleure précipitation des protéines, par exemple tel que décrit dans l’exemple le. En particulier cette étape est mise en œuvre à une température inférieure à la température ambiante, avantageusement à 4DC, plus avantageusement pendant au moins 6h00, en particulier pendant une nuit.
A la place des étapes c) et d), une étape e) peut être mise en œuvre après l’étape b) comprenant la mise en contact de l’extrait brut aqueux obtenu à l’étape b) avec de la carboxyméthylcellulose, avantageusement pendant lhOO, en particulier à température ambiante, de façon à la charger avec l’extrait protéique. Cette étape peut être suivie par une étape f) de mise en contact de la carboxyméthylcellulose chargée obtenue à l’étape e) avec une solution aqueuse saline, avantageusement une solution de NaCl, ayant un pH supérieur à 7, avantageusement de 7,5, puis récupération de l’éluât ainsi obtenu qui correspond à un extrait partiellement purifié.
L’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est avantageusement un extrait de graines décortiquées, c’est à dire avantageusement un extrait de l’amande des graines uniquement (sans son enveloppe ou coque).
Le procédé peut donc comprendre une étape préalable à l’étape a) de décorticage des graines.
Enfin les extraits obtenus (extrait brut, concentré protéique et/ou extrait partiellement ou totalement purifié) peuvent être centrifugés et/ou filtrés et/ou distillés, de façon à récupérer la fraction hydrosoluble et se trouver sous forme liquide. Préférentiellement, le surnageant obtenu après centrifugation est filtré, avantageusement à un seuil de coupure de 0,45 mhi. Des étapes supplémentaires de décoloration et/ou désodorisation peuvent être effectuées sur les extraits à n’importe quel stade de l’extraction et selon les techniques connues de l’Homme du métier. De façon particulière, les extraits pourront être décolorés au charbon actif.
Selon un mode particulier, l’extrait selon l’invention est obtenu par extraction de tourteaux de graines non germées, en particulier déshuilé, plus avantageusement délipidées, dans une solution aqueuse saline à un pH d’environ 5 suivi d’une élimination des protéines de haut poids moléculaire. Le surnageant est récupéré et constitue un extrait selon l’invention.
Les extraits peuvent également être concentrés par évaporation du solvant ou séchés par exemple par lyophilisation ou par atomisation. Les extraits se présenteront alors sous forme de poudre.
Dans un mode particulier de réalisation de l’invention, notamment pour son utilisation en dermatologie, l’extrait de Moringa oleifera obtenu sera stérilisé. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux, l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera contient sur la base de l’extrait sec, une teneur en protéines, en particulier en protéines natives, comprise entre 0,01 et 100% en poids, avantageusement d’au moins 25% en poids, en particulier d’au moins 40% en poids, plus particulièrement d’au moins 45% en poids.
Les protéines de l’extrait protéique selon l’invention ont avantageusement un poids moléculaire compris entre 6500 et 13000 Da, avantageusement entre 7100 et 11000 Da, mesurée par chromatographie.
En particulier l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera ne contient pas d’alcaloïde (tels que par exemple de la spirochin), de Pterygospermin, d’isothiocyanates (tel que par exemple de 4-2-L-Rhamnosyloxy benzyl isothiocyanate) ni de kaempferol.
L’extrait selon l’invention peut être utilisé sous la forme d’un ingrédient cosmétique ou pharmaceutique destiné à être incorporé dans une composition cosmétique ou pharmaceutique, et comprenant en outre un véhicule cosmétique ou pharmaceutique approprié.
Dans ce cas, l’extrait selon l’invention est dans un autre mode de réalisation préférentiellement solubilisé dans et/ou dilué dans un solvant notamment polaire, tel que l’eau, comprenant avantageusement en outre de la glycérine comme dans le produit commercialisé sous la dénomination purisoft ® et en particulier tel que décrit dans l’exemple 4a).
L’extrait selon l’invention dans un autre mode de réalisation peut être atomisé sur un support d’atomisation comme par exemple la maltodextrine et se présenter sous la forme d’une poudre en particulier telle que décrite dans l’exemple 4b).
De façon avantageuse, lorsque l’ingrédient est sous forme liquide comme celui décrit dans l’exemple 4a), l’extrait selon l’invention est présent dans l’ingrédient en une teneur comprise entre 0,01 et 10% en poids de matière sèche par rapport au poids total de l’ingrédient, avantageusement entre 1 et 5% en poids.
De façon avantageuse, lorsque l’ingrédient est sous forme solide notamment poudre tel que décrit dans l’exemple 4b), l’extrait selon l’invention est présent dans l’ingrédient en une teneur comprise entre 10 et 60%, en poids de matière sèche par rapport au poids total de l’ingrédient, avantageusement entre 30 et 50% en poids.
L’extrait selon l’invention éventuellement sous la forme d’un ingrédient cosmétique ou dermatologique peut également se trouver sous la forme d’une composition cosmétique ou pharmaceutique, avantageusement destinée à une administration par voie topique ou par voie orale, en particulier par voie topique, préférentiellement cutanée, comprenant en outre un véhicule cosmétique ou pharmaceutique approprié. L’ingrédient cosmétique ou pharmaceutique, en particulier dermatologique sous forme liquide et notamment celui de l’exemple 4a), peut être utilisé dans une composition cosmétique ou pharmaceutique, en particulier dermatologique, préférentiellement à une teneur en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition comprise entre 0,01 et 10%, avantageusement entre 0,1 et 5%, en particulier entre 1 et 3%.
L’ingrédient cosmétique ou pharmaceutique, en particulier dermatologique sous forme solide et notamment celui de l’exemple 4b), peut être utilisé dans une composition cosmétique ou pharmaceutique, en particulier dermatologique, préférentiellement à une teneur en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition comprise entre 0,001 et 5%, avantageusement entre 0,01 et 1%. Dans un mode de réalisation de l’invention, l’extrait sera compris dans la composition cosmétique ou pharmaceutique en une teneur comprise entre 0,0001% et 20% en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition, préférentiellement entre 0,001 % et 10% en poids, avantageusement entre 0,01 et 5% en poids.
Les compositions selon l’invention peuvent contenir tout solvant approprié et/ou tout véhicule approprié et/ou tout excipient approprié, éventuellement en combinaison avec d’autres composés d’intérêts. Elles peuvent notamment contenir un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable choisis parmi des agents tensioactifs, des conservateurs, des agents tampon, des agents gonflants, des agents chélatants, des agents biocides, des dénaturants, des agents opacifiants, des ajusteurs de pH, des agents réducteurs, des agents stabilisants, des émulsifiants, des épaississants, des gélifiants, des polymères filmogènes, des solvants, des charges, des bactéricides, des absorbeurs d'odeurs, des agents matifiants, des agents conditionneurs, des agents de texture, des agents de brillance, des pigments, des colorants, des parfums et des filtres solaires chimiques ou minéraux, des oligo éléments, des huiles essentielles, des édulcorants, des agents modificateurs du goût. Ces combinaisons sont également couvertes par la présente invention. Le CTFA Cosmetic Ingrédient Handbook, Second Edition (1992) décrit différents ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques utilisés couramment dans l'industrie cosmétique et pharmaceutique, qui sont en particulier adaptés à une administration par voie orale et/ou à une utilisation topique.
Avantageusement, le ou les excipients sont choisis dans le groupe comprenant les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrose, la vitamine E et ses dérivés, les gommes de xanthane, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytostérols, les silicones, les hydrolysats de protéines, les betaines, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de saccharose, les dioxydes de titane, les glycines, et les parabens, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol-15 stéaryle éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparabène, l'éthylparabène, le propylparabène, le butylparabène, le butylène glycol, le caprylyl glycol, les tocophérols naturels, la glycérine, le dihydroxycétyl sodium phosphate, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, la triisononanoine, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, l'hexylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l'hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les triglycérides caprique/caprylique, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l'huile de pépins de raisin, l'huile de jojoba, le sulfate de magnésium, l'EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l'acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8, la cire d'abeille, les glycérides d'huile de cœur de palme hydrogénée, l'huile de lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée, et leurs mélanges.
La composition cosmétique ou pharmaceutique ou l’extrait selon l’invention éventuellement sous forme d’ingrédient cosmétique ou pharmaceutique, peut se présenter sous toutes les formes galéniques classiquement utilisées pour une application topique ou administration orale, en particulier topique telles que les formes liquides ou solides ou même sous la forme de liquide sous pression. Elles peuvent notamment être formulées sous la forme d’une solution, aqueuse ou huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment en pot ou en tube, notamment un gel douche, un shampoing, un lait, une émulsion, un hydrogel, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée, un sérum, une lotion, notamment en flacon de verre, de plastique ou en flacon doseur ou en aérosol, une ampoule, un savon liquide, une pâte, un pain dermatologique, une pommade, une mousse, un aérosol, un masque, un patch, un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de bâtonnet notamment en stick ou en poudres, notamment de maquillage. En particulier la composition se présente sous la forme d’un sérum, d’une lotion, d’une crème, d'un lait, d'une pommade, d'une pâte, d'une mousse, d'une émulsion, d’un hydrogel, d’un gel douche, d’un masque, d’un stick d’un patch, ou de poudres de maquillage, avantageusement d’une crème ou d’une lotion.
Dans le cas d’une administration par voie orale, la composition cosmétique ou pharmaceutique ou l’extrait selon l’invention éventuellement sous forme d’ingrédient cosmétique ou pharmaceutique, peut se présenter sous la forme d’un dentifrice, d’une pâte dentaire, d’un bain de bouche, d’une lotion, d’un aérosol, d’un gel, d’un comprimé à sucer, d’un comprimé orodispersible, d’une gomme à mâcher ou d’une composition mucoadhésive.
La composition cosmétique ou pharmaceutique pourra en outre comprendre d’autres ingrédients actifs sur le traitement des de la peau et/ou des muqueuses des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles et/ou fragilisées et/ou ayant un effet sur l’augmentation et/ou la protection et/ou le maintien de la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses, induisant un effet complémentaire ou de synergie avec l’extrait selon l’invention, choisi par exemple parmi
- une combinaison de hyaluronate de sodium, pullulan et alginate de sodium notamment commercialisée dans une formulation contenant de la sérine, tréhalose, urée et glycérine sous le nom PatcH20™ par la déposante ;
- les agents cosmétiques destinés aux soins des peaux sensibles tels qu’un extrait végétal de Cestrum latifolium tel que décrit dans la demande W02009/112590 par exemple commercialisé sous le nom de Symbiocell™ par la déposante , un beurre extrait du fruit de l’arbre Irvingia gabonensis commercialisé sous le nom Irwinol™ par la déposante, un extrait de racine d’Eperua falcata commercialisé sous le nom de Eperuline™ , un peptide N-acetyl-L-Tyrosyl-L-Prolyl-L-Phenylalanyl-L- Phenylalaninamide (INCI :acetyl tetrapeptide 15) vendu sous le nom de Skinasensyl™ par la demanderesse.
La composition cosmétique pourra contenir en outre un ou plusieurs autres ingrédients actifs sur la flore microbienne cutanée et/ou mucosale et/ou actifs sur la fonction barrière de la peau notamment actifs hydratants et/ou apaisants, parmi lesquels un oligosaccharide obtenu par synthèse enzymatique commercialisé par la société So labia sous le nom de BioEcolia™ ou un complexe d’alpha- glucooligosaccharides commercialisé par la même société sous le nom de Ecoskin™, un extrait d’Alisma plantago-aquatica, un extrait d’Argania spinosa (Lipofructyl™ Argan), un mélange de céramides (Sphingoceryl™ VEG) , des extraits purifiants de Boldo (Betapur™), des produits à base d’inuline ou de fructooligosaccharides, des extraits de bifidobactéries ou encore un extrait d’Orthosiphon stamineus pour lutter contre la peau grasse (MAT-XS™ Bright), un extrait naturel de miel commercialisé par la demanderesse sous le nom de Melhydran™ pour son propriété hydratante, un extrait de lin commercialisé sous le nom Oligolin™ par la demanderesse, un extrait de levure modifié par biotechnologique et commercialisé par la demanderesse sous le nom Relipidium™ , un extrait de racine de Pueraria lobata commercialisé sous le nom Inhipase™ par la demanderesse, un dérivé de beta-glucan issu de levure de boulanger commercialisé par Mibelle sous le nom CM-Glucan Forte™ et/ou un extrait de Mirabilis jalapa commercialisé sous le nom de Pacifeel™ par Sederma.
De manière avantageuse, l’invention a également pour objet une méthode de traitement cosmétique pour le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées pour prévenir et/ou traiter ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables, en particulier choisies parmi les rougeurs, la sensation de chaleur ou d’échauffement ou de tension, de fourmillements, les picotements, les tiraillements et un mélange de ces manifestations, et/ou pour l’augmentation et/ou la protection et/ou le maintien de la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder les manifestation inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses dont la flore bénéfique commensale est altérée, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la sécrétion de sébum et ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables telles que pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la formation de points noirs et/ou la comédogénèse et/ou l’aspect luisant de la peau, et/ou pour maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses et/ou diminuer les rougeurs, et/ou pour prévenir et/ou traiter la sensation d’échauffement et/ou de chaleur de la peau et/ou des muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou réduire la chute des cheveux et/ou des poils et/ou pour prévenir et/ou réduire les pellicules, lesdites peaux et/ou muqueuses étant des peaux et/ou muqueuses saines d’un individu qui en a besoin/qui le souhaite comprenant les étapes :
a) L’identification sur l’individu d’une zone de peau et/ou de muqueuse sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées que l’on souhaite traiter et/ou dont on souhaite prévenir et/ou traiter ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables, en particulier choisies parmi les rougeurs, la sensation de chaleur ou d’échauffement ou de tension, de fourmillements, les picotements, les tiraillements et un mélange de ces manifestations, et/ou dont on souhaite augmenter et/ou protéger et/ou maintenir la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder les manifestation inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses dont la flore bénéfique commensale est altérée, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la sécrétion de sébum et ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables telles que pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la formation de points noirs et/ou la comédogénèse et/ou l’aspect luisant de la peau, et/ou pour maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses et/ou diminuer les rougeurs, et/ou pour prévenir et/ou traiter la sensation d’échauffement et/ou de chaleur de la peau et/ou des muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou réduire la chute des cheveux et/ou des poils et/ou pour prévenir et/ou réduire les pellicules, lesdites peaux et/ou muqueuses étant des peaux et/ou muqueuses saines, et
b) L’application topique sur cette zone de peau ou l’administration orale d’une composition cosmétique contenant l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera selon l’invention en une quantité efficace pour le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées pour prévenir et/ou traiter ses manifestations inesthétiques, en particulier choisies parmi les rougeurs, la sensation de chaleur ou d’échauffement ou de tension, de fourmillements, les picotements, les tiraillements et un mélange de ces manifestations, et/ou pour l’augmentation et/ou la protection et/ou le maintien de la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder les manifestation inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses dont la flore bénéfique commensale est altérée, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la sécrétion de sébum et ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables telles que pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la formation de points noirs et/ou la comédogénèse et/ou l’aspect luisant de la peau, et/ou pour maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses et/ou diminuer les rougeurs, et/ou pour prévenir et/ou traiter la sensation d’échauffement et/ou de chaleur de la peau et/ou des muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou réduire la chute des cheveux et/ou des poils et/ou pour prévenir et/ou réduire les pellicules, lesdites peaux et/ou muqueuses étant des peaux et/ou muqueuses saines.
La présente invention concerne en outre un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, avantageusement un extrait protéique de graine non germée délipidée, en particulier un extrait protéique de tourteau déshuilé, plus particulièrement délipidé, de graines non germées, plus avantageusement d’amandes de graines non germées, de Moringa oleifera, pour son utilisation dans le traitement des peaux et/ou muqueuses réactives, hyperréactives intolérantes, et/ou irritées et/ou dans le traitement et/ou la prévention et/ou la diminution de la survenance de pathologies liées aux peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles, fragilisées, intolérantes, hyperréactives et/ou irritées, telles que l’urticaire de contact, la dermatite irritative ou allergique de contact, l’eczéma, le psoriasis, la dermatite séborrhéique ou atopique, et/ou dans le traitement et/ou la prévention de l’inflammation et/ou de l’irritation, en particulier causée par Staphylococcus aureus, et/ou dans le traitement et/ou la prévention de l’érythème, en particulier l’érythème fessier du nourrisson et/ou dans le traitement des gingivites.
La présente invention concerne également un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, avantageusement un extrait protéique de graine non germée délipidée, en particulier un extrait protéique de tourteau déshuilé, plus particulièrement délipidé, de graines non germées, plus avantageusement d’amandes de graines non germées, de Moringa oleifera, pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention et/ou la diminution de la survenance de pathologies liées à une altération de la flore cutanée et/ou mucosale commensale bénéfique, avantageusement impliquant une diminution de la teneur en microorganismes commensaux bénéfiques cutanés et/ou mucosaux et/ou une augmentation de la teneur en microorganismes pathogènes, préférentiellement en bactérie pathogène, en particulier de Staphylococcus aureus et/ou de Propionibacterium acnés, avantageusement de pathologies choisies dans le groupe constitué par les infections, en particulier bactériennes, de la peau et/ou des muqueuses, les ulcères, l’herpès, les furoncles, les folliculites, les abcès, la sycosis, l’impétigo, l’ecthyma l’érysipèle, l’acné, les mycoses telles que les candidoses ou les dermatophytoses, telles que la teigne et/ou la gale et/ou dans le traitement et/ou la prévention de la surinfection des plaies, et/ou dans la prévention des taches pigmentaires et/ou cicatrices d’acné.
On entend par ailleurs au sens de la présente invention par « microorganisme pathogène » un microorganisme présent sur la peau et/ou les muqueuses de façon non permanente (transitoire) ou un microorganisme qui vit normalement sur la peau mais qui dans certaines conditions peut devenir virulente et donc potentiellement pathogène (résidente pathogène opportuniste) et induisant ou pouvant induire des altérations non pathologiques de la peau et/ou des muqueuses telles que des imperfections cutanées comme par exemple des rougeurs, des pellicules et/ou chutes de cheveux et/ou poils, des gonflements voire des boutons et/ou une sensation de brulure et/ou chaleur localisée accompagnée de douleurs, des tâches pigmentaires ou des cicatrices par exemple suite à l’acné et donc une inhomogénéité du teint, et pouvant être impliqué dans de réelles pathologies cutanées notamment des infections cutanées, comme les furoncles, les folliculites, les abcès, les ulcères, la sycosis, l’ecthyma, l’érysipèle, l’acné ou l’impétigo, voir des affections pathologiques, tels que des mycoses (telles que candidoses ou dermatophytoses) par exemple la gale, la teigne et les mycoses dues à Candida albicans, les malassezia, les Streptocoques, Propionibacterium acnés, les Staphylocoques et de façon particulière Staphylococcus aureu Enfin, la présente invention concerne une méthode de soin cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur au moins une zone concernée de la peau et/ou des muqueuses du visage ou du corps, et/ou l’administration par voie orale de l’extrait selon la présente invention, éventuellement sous la forme d’un ingrédient cosmétique ou d'une composition cosmétique le comprenant, à titre d'agent actif, l’extrait selon l’invention telle que définie précédemment, pour le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées et/ou pour l’augmentation et/ou la protection et/ou le maintien de la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses et avantageusement pour traiter les manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles, et/ou fragilisées, avantageusement choisies parmi les rougeurs, la sensation de chaleur ou d’échauffement ou de tension, de fourmillements, les picotements, les tiraillements et un mélange de ces manifestations et/ou pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder les manifestation inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses dont la flore bénéfique commensale est altérée, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la sécrétion de sébum et ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables tel que pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la formation de points noirs et/ou la comédogénèse et/ou l’aspect luisant de la peau, et/ou pour maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses et/ou diminuer les rougeurs, et/ou pour prévenir et/ou traiter la sensation d’échauffement et/ou de chaleur de la peau et/ou des muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou réduire la chute des cheveux et/ou des poils et/ou pour prévenir et/ou réduire les pellicules.
D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à l'homme de l'art suite à la lecture de la description explicative qui fait référence à des exemples qui sont donnés seulement à titre d'illustration et qui ne sauraient en aucune façon limiter la portée de l'invention.
Les exemples font partie intégrante de la présente invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la technique antérieure quelconque à partir de la description prise dans son ensemble, incluant les exemples, fait partie intégrante de l'invention dans sa fonction et dans sa généralité.
Ainsi, chaque exemple a une portée générale.
D'autre part, dans les exemples, et sauf indication contraire, la température est exprimée en degré Celsius et la pression est la pression atmosphérique.
Exemple 1 : préparation de l’extrait de Moringa selon l’invention
L’extrait de Moringa est préparé selon le procédé décrit dans le brevet EP1064008, en particulier tel que décrit ci-après :
EXEMPLE la (Préparation de l'extrait la)
Des amandes de Moringa oleifera obtenues après décorticage des graines et contenant 33,4 % (poids/poids) d'huile sont délipidées par deux extractions successives à reflux dans de l'hexane et, après filtration, la farine est séchée en étuve à 40° C et présente une teneur en huile résiduelle de 2,5 %.
Dans un réacteur on ajoute 200 g de farine délipidée à 2 litres d'eau distillée. Après 10 minutes d'agitation, le pH est ajusté à 7,5 par addition de NaOH 4N et l'extraction est ensuite réalisée pendant une heure à température ambiante en maintenant le pH à 7,5. L'insoluble est éliminé par centrifugation pendant 15 min. à 5000 g.
Le surnageant est recueilli puis filtré sur 0,45 pm : on obtient ainsi 1,77 litre de filtrat de couleur jaune, contenant 4,69 % d'extrait sec et présentant une concentration en protéines mesurée par la technique du Biuret de 21,54 g/l (soit une pureté protéique sur la base de l'extrait sec de 45,92 %). L'extrait est déshydraté par atomisation et on obtient 65,72 grammes d'atomisat présentant une teneur en protéines estimée à 54,7 % (N x 6,25). Si on tient compte des pics élués entre le volume exclu et le volume total de la colonne, le profil chromatographique résultant de l'analyse en perméation de gel sur colonne Superose 12HR de cet extrait met en évidence une fraction majeure qui représente 52 % de la surface et qui correspond à des poids moléculaires situés entre 7 800 et 11 000 Da. La présence d'épaulements dans ce pic confirme l'existence de plusieurs composés et la gamme de poids moléculaires est proche de celle trouvée dans la littérature pour les monomères (6 500 et 7 000 Da) et les dimères (13 000 Da) de protéines floculantes de Moringa.
EXEMPLE lb fPréparation de l'extrait lb
On extrait 300 g de farine délipidée selon l'exemple la de manière à obtenir un extrait aqueux brut. Le pH du filtrat (2,74 litres) est ajusté à 11,8 par addition progressive de NaOH 4N. La précipitation débute vers pH 8,0 (trouble net de la solution) et après 30 minutes la solution est centrifugée pendant 15 min à 5000 g. Le précipité collant est recueilli (43,2 g humide) puis lavé deux fois par 500 ml d'eau distillée à pH 11,8. Le précipité est ensuite dissout dans 270 ml d'eau distillée (soit 10 % du volume initial) et le pH de la solution est ajusté en continu à 4,5 par HCl 6N de façon à permettre la solubilisation du précipité (la dispersion est facilitée par l'emploi d'un appareil du type connu sous la désignation Turax).
Après 30 min d'agitation le mélange est centrifugé pendant 15 min. à 5000 g pour éliminer l'insoluble et le surnageant est filtré sur Büchner muni d'un filtre Whatman n° 41. On obtient ainsi 260 ml de concentré protéique, jaune et limpide, qui est déshydraté par lyophilisation.
De cette manière, 11,5 grammes de lyophilisât sont obtenus avec une teneur pondérale en protéines de 90-95 %.
L'analyse en perméation de gel sur colonne Superose 12HR de cet extrait met en évidence une fraction majeure qui représente 70 % de la surface et qui correspond à des poids moléculaires d'environ 8 800 Da. EXEMPLE le (Préparation de l’extrait le)
L'huile d'amandes obtenues par décorticage des graines de Moringa oleifera est extraite par pression sur une presse du type connu sous la désignation KOMET et les tourteaux obtenus sont broyés afin d'obtenir une farine homogène.
Un extrait brut est préparé à partir de 1,24 kg de tourteaux selon le mode opératoire décrit dans les exemples la et lb.
Les protéines sont précipitées à pH 11,8 selon l'exemple lb, mais une étape supplémentaire de décantation d'une nuit à + 4° C est introduite afin de permettre une meilleure précipitation des protéines.
Le précipité est traité dans les mêmes conditions que dans l'exemple lb (le pH de la solution de reconstitution du précipité étant toutefois de 6 au lieu de 4,5).
Le concentré protéique ainsi obtenu (1,05 litre à 4,59 % d'extrait sec) est déshydraté par atomisation et 34,6 g d'atomisat sont recueillis, soit un rendement d'atomisation sur la base de l'extrait sec de 71 ,5 %.
La teneur en protéines sur la base du dosage de l'azote (N x 6,25) est supérieure à 90 % (environ 95 %).
EXEMPLE ld (Préparation de l'extrait ldi
Un extrait brut est préparé à partir de 150 g de tourteaux selon le mode opératoire décrit dans les exemples la, lb et le.
Après filtration sur 0,45 pm, on obtient 1,35 litre de filtrat jaune limpide.
100 grammes de Carboxymethylcellulose (CM52, WHATMAN) sont mis à équilibrer pendant 30 minutes dans 500 ml d'eau distillée à pH 7,5.
Le mélange est filtré sur Büchner muni d'un filtre WHATMAN n° 42, puis la cellulose est recueillie et équilibrée de nouveau dans 500 ml d'eau à pH 7,5.
Après élimination du milieu aqueux par filtration, la cellulose est mise en contact, sous agitation pendant une heure à température ambiante, avec l'extrait aqueux de tourteaux d'amandes de Moringa oleifera. Les composés non adsorbés (fractions dont le profil chromatographique est représenté en trait interrompu sur la figure 3) sont éliminés par filtration sur Büchner et la cellulose "chargée" est ensuite lavée par deux fois avec un litre d'eau distillée à pH 7,5 puis filtrée sur Büchner.
La cellulose est ensuite mise en contact avec 120 ml d'une solution de NaCl 60 g/l pH 7,5 pendant 30 minutes.
Les protéines éluées en milieu NaCl sont récupérées par filtration sur Büchner (le profil chromatographique des protéines adsorbées sur CM 52 et éluées en milieu NaCl 60 g/l est représenté en trait plein sur la figure 3).
On obtient ainsi 110 ml de filtrat avec une teneur d'extrait sec de 9,63 % et avec une concentration en protéines de 64,6 g/l (soit une pureté protéique sur la base de l’extrait sec de 67 %).
L'analyse en perméation de gel sur colonne Superose 12HR de cet extrait met en évidence une fraction majeure qui représente 70 % de la surface et qui correspond à des poids moléculaires d'environ 7 100 Da.
La solution peut être dessalée par dialyse, ou par ultrafiltration et déshydratée par lyophilisation, atomisation ou tout autre moyen approprié. Selon l’exemple ld, l’extrait a été atomisé sur support de maltodextrine et formulé selon l’exemple 4b) pour être testé dans les exemples suivants.
Exemple 2: Evaluation de l’effet de l’ingrédient selon l’invention sur l’inhibition de la libération de cytokines oro-inflammatoires 1L-6 et IL-8 induite par des bactéries pathogènes opportunistes S. aureus.
Le produit testé est celui de l’exemple ld) formulé sous la forme de l’ingrédient selon l’exemple 4b et utilisé à 0,03% en poids par rapport au milieu final total (milieu + produit). Le test est effectué sur des kératinocytes humain HacaT en culture.
Les kératinocytes HacaT sont ensemencées à 2xl06 cellules /cm2 dans du milieu DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) supplémenté en 10% de S VF (Sérum de veau fœtal). Les cellules sont incubées 3 à 5 jours à 37°C sous 5% C02 et à 95% d’humidité relative. Le milieu DMEM est ensuite remplacé par lmL de milieu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium). Le produit à tester est ensuite rajouté la concentration désirée dans du milieu EMEM et l’ensemble est incubé un jour supplémentaire jusqu’à saturation du tapis cellulaire.
0,1 ml d’une solution de bactéries Staphylococcus aureus DSMZ 20231 ATCC 12600 (l,5xl07) est ajouté dans chaque puits pendant 2 heures à 37°C, 5% de C02 en aérobie, à saturation d’Humidité relative. Ensuite les milieux avec bactéries sont remplacés par du EMEM contenant le produit à tester. L’ensemble est à nouveau incubé durant 24 heures à 37°C et 5% de C02.
Les dosages IL8 et IL6 sont effectués selon les recommandations du fournisseur du kit ELISA.
Tableau 2.1 : Evaluation de l’effet du produit selon l’invention sur la libération de cytokine IL6 induite dans des kératinocytes par la présence de S. aureus
Figure imgf000034_0001
Tableau 2.2 : Evaluation de l’effet du produit selon l’invention sur la libération de cytokine ILS induite dans des kératinocytes par la présence de S. aureus
Figure imgf000034_0002
IL8 provoquées par les bactéries pathogènes 5. aureus dans des kératinocytes en culture. Ceci démontre l’effet du produit pour traiter les peaux sensibles, réactives, fragiles, fragilisées, ou sensibilisées ainsi que son effet anti-inflammatoire.
Exemple 3 : effets sélectifs du produit sur la croissance de microorganismes commensaux vis-à-vis des microorganismes pathogènes opportunistes
Le produit de l’invention a une action sélective sur la croissance de microorganismes de la peau. Le produit promeut la croissance de microorganismes commensaux et notamment les bactéries aidant la peau à lutter contre l’inflammation comme staphylococcus epidermidis et acinetobacter Iwolffii.
D’autre part, il a peu d’effet sur les bactéries pathogènes opportunistes telles que P. acnés responsable des phénomènes inflammatoires sur la peau.
Exemple 3-a : Inhibition de la croissance de souche pathogène opportuniste de
Propionibacterium acnés
Le produit testé est celui de l’exemple ld) formulé sous la forme de l’ingrédient de l’exemple 4b) à 0,0006% et 0,006% en poids par rapport au poids du milieu final total (milieu et produit).
Les ingrédients (phénonip® pour le témoin positif ou produit selon l’invention) sont dilués dans le milieu de culture des bactéries (le bouillon brucella). Les milieux contenant les ingrédients sont ensuite incubés 48 h à 35°C+/- 2,5°C en respectant les conditions d’anaérobie avec un inoculum calibré à 5xl05 de P. acnés ATCC 11827. La croissance est estimée en mesurant la densité optique à 600nm après incubation. Tableau 3.1 : Evaluation de l’effet du produit à différents dosages sur la croissance de
Propionibacterium acnés
Figure imgf000035_0001
Exemple 3-b activation de la croissance de souches commensales permettant de lutter contre l’inflammation S. epidermidis et/ou Æ Iwolffii
Le produit testé est celui de l’exemple ld formulé sous la forme d’un ingrédient selon l’exemple 4b) à 0,0006% et 0,006% en poids par rapport au poids du milieu final total (milieu et produit).
Pour S. epidermidis (souche ATCC 14990): Après une préculture en milieu enrichi (Tryptic soy broth dit TSB°, une microplaque contenant le milieu de culture approprié est ensemencée, avec les bactéries à D06oo= 0,05 (~ 107 bactéries) et incubée 24h avec le produit de l’invention à différentes concentration. La croissance est estimée en mesurant la densité optique à 600nm après incubation. Un control non traité est réalisé ainsi qu’un témoin d’inhibition (sodium dodecyl sulftate dit SDS).
Les résultats montrent que le produit selon l’invention promeut la croissance de microorganismes commensaux S. epidermidis et A. Iwolffii.
Exemple 4 : Ingrédients cosmétiques ou pharmaceutiques selon l'invention contenant Pextrait de Moringa selon l’invention
4a) Un ingrédient liquide cosmétique ou pharmaceutique ayant la formulation ci- après en pourcentage en poids est préparé.
Figure imgf000036_0001
4b) Un ingrédient solide sous forme de poudre ayant la formation suivante est préparé :
Figure imgf000036_0002
Exemple 5 : Composition selon l’invention sous la forme d’une lotion pour le corps et/ou le visage:
Figure imgf000037_0001
La lotion est préparée par les méthodes usuelles dans le domaine bien connu de l’homme du métier, en mélangeant les 6 phases.
Exemple 6 : Composition selon l’invention sous la forme d’un lait pour le corps et/ou le visage
Un produit cosmétique sous forme de lait pour le corps et/ou le visage pourra, par exemple, présenter une composition pondérale, constituée à partir des phases aqueuses et grasses suivantes, telle qu'indiquée ci-après.
Figure imgf000037_0002
Figure imgf000038_0001
la phase grasse à 8ü°C, à porter l'eau de la phase aqueuse également à 80°C et à y dissoudre le préservateur, (Elestab 4112), puis à verser la phase aqueuse dans la phase grasse sous agitation turbine et à refroidir progressivement sous agitation, à y ajouter ensuite, vers 50° C, la solution mère aqueuse d'extrait protéique de Moringa, puis le parfum et, enfin, à poursuivre l'agitation jusqu'à refroidissement complet.
Exemple 7 : Composition selon l’invention sous la forme d’une crème pour le visage
Un produit cosmétique sous forme d’une crème pour le corps et/ou le visage pourra, par exemple, présenter une composition pondérale, constituée à partir des phases aqueuses et grasses suivantes, telle qu'indiquée ci-après.
Figure imgf000038_0002
Figure imgf000039_0001
la phase grasse à 80° C, à porter la phase aqueuse également à 80° C et à y dissoudre l’Elestab 4112, à préparer séparément la solution mère d'extrait protéique de Moringa Oleifera, à verser la phase grasse dans la phase aqueuse sous agitation turbine, puis, aux environs de 50° C, à y introduire la solution mère d'extrait de Moringa et enfin à poursuivre l'agitation jusqu'au refroidissement.

Claims

REVENDICATION
1. Utilisation cosmétique d’un extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera pour le traitement des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles et/ou fragilisées pour prévenir et/ou traiter les manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles, et/ou fragilisées, lesdites peaux et/ou muqueuses étant des peaux et/ou muqueuses saines.
2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, caractérisée en ce que les manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, fragiles, et/ou fragilisées sont choisies parmi les rougeurs, la sensation de chaleur ou d’échauffement ou de tension, de fourmillements, les picotements, les tiraillements et un mélange de ces manifestations.
3. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce que l’utilisation de l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est en outre pour l’augmentation et/ou la protection et/ou le maintien de la flore bénéfique commensale au niveau de la peau et/ou des muqueuses.
4. Utilisation selon la revendication la revendication 3 pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder les manifestation inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables des peaux et/ou muqueuses dont la flore bénéfique commensale est altérée, en particulier pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la sécrétion de sébum et ses manifestations inesthétiques et/ou désagréables et/ou inconfortables telles que pour prévenir et/ou réduire et/ou retarder la formation de points noirs et/ou la comédogénèse et/ou l’aspect luisant de la peau, et/ou pour maintenir et/ou améliorer l’homogénéité du teint de la peau et/ou des muqueuses et/ou diminuer les rougeurs, et/ou pour prévenir et/ou traiter la sensation d’échauffement et/ou de chaleur de la peau et/ou des muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou réduire la chute des cheveux et/ou des poils et/ou pour prévenir et/ou réduire les pellicules.
5. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 3 ou 4, caractérisé en ce que la flore commensale bénéfique est un microorganisme choisi dans le groupe constitué par Staphylococcus epiciermidis, Acinetobacter Iwolffii et leurs mélanges.
6. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non ger ée déshuilée de Moringa oleifera est appliqué par voie topique sur des parties spécifiques du corps choisies parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, le cou, le décolleté, le ventre, les bras, les cuisses, les hanches, les fesses, la taille, l’entrejambe, l’aine, le torse, le dos, la muqueuse labiale, le visage et/ou le cuir chevelu, en particulier les zones rasées, les zones de macération tel que le siège du nourrisson, les zones de plie telles les aisselles, l’arrière des coudes, l’arrière des genoux, les fesses, l’entrejambe, l’aine, le cou, et/ou le tour des lèvres et/ou les zones excessivement nettoyées.
7. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est un extrait hydrosoluble, en particulier obtenu par extraction dans un solvant polaire, avantageusement dans l’eau.
8. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera contient sur la base de l’extrait sec, une teneur en protéines, en particulier en protéines natives, comprise entre 0,01 et 100% en poids, avantageusement d’au moins 25% en poids.
9. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera ne contient pas d’alcaloïde, de Pterygospermin, d’isothiocyanates ni de kaempferol.
10. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est un extrait de graines décortiquées.
11. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera se trouve sous la forme d’un ingrédient cosmétique destiné à être incorporé dans une composition cosmétique, et comprenant en outre un véhicule cosmétique approprié.
12. Utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est présent dans l’ingrédient cosmétique sous forme liquide en une teneur comprise entre 0,01 et 10% en poids de matière sèche par rapport au poids total de l’ingrédient, avantageusement entre 1 et 5% en poids ou sous forme solide en une teneur comprise entre 10 et 60% en poids total de l’ingrédient, avantageusement entre 30 et 50% en poids.
13. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera ou l’ingrédient cosmétique le comprenant se trouve sous la forme d’une composition cosmétique destinée à une administration par voie topique comprenant en outre un véhicule cosmétique approprié.
14. Utilisation selon la revendication 13 caractérisée en ce l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est présent dans la composition cosmétique en une teneur comprise entre 0,0001% et 20% en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition, avantageusement entre 0,01 et 5% en poids.
15. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 13 ou 14 caractérisée en ce que la composition se présente sous la forme d’un sérum, d’une lotion, d’une crème, d'un lait, d'une pommade, d'une pâte, d'une mousse, d'une émulsion, d’un hydrogel, d’un gel douche, d’un aérosol, d’un masque, d’un stick, d’un patch, ou de poudres de maquillage, avantageusement d’une crème ou d’une lotion.
16. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisée en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera ou l’ingrédient cosmétique le comprenant se trouve sous la forme d’une composition cosmétique destinée à une administration par voie orale, en particulier sur les muqueuses gingivales, comprenant en outre un véhicule cosmétique approprié.
17. Extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, pour son utilisation dans le traitement des peaux et/ou muqueuses réactives, hyperréactives intolérantes, et/ou irritées et/ou dans le traitement et/ou la prévention et/ou la diminution de la survenance de pathologies liées aux peaux et/ou muqueuses sensibles, sensibilisées, réactives, fragiles, fragilisées, intolérantes, hyperréactives et/ou irritées, telles que l’urticaire de contact, la dermatite irritative ou allergique de contact, l’eczéma, le psoriasis, la dermatite séborrhéique ou atopique, et/ou dans le traitement et/ou la prévention de l’inflammation et/ou de l’irritation, en particulier causée par Staphylococcus aureus, et/ou dans le traitement et/ou la prévention de l’érythème, en particulier l’érythème fessier du nourrisson et/ou dans le traitement des gingivites.
18. Extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, pour son utilisation selon la revendication 17 et en outre pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention et/ou la diminution de la survenance de pathologies liées à une altération de la flore cutanée et/ou mucosale commensale bénéfique, avantageusement impliquant une diminution de la teneur en microorganismes commensaux bénéfiques cutanés et/ou mucosaux et/ou une augmentation de la teneur en microorganismes pathogènes, préférentiellement en bactérie pathogène, en particulier de Staphylococcus aureus et/ou de Propionibacterium acn s, avantageusement de pathologies choisies dans le groupe constitué par les infections, en particulier bactériennes, de la peau et/ou des muqueuses, les ulcères, l’herpès, les furoncles, les folliculites, les abcès, la sycosis, l’impétigo, l’ecthyma l’érysipèle, l’acné, les mycoses telles que les candidoses ou les dermatophytoses, telles que la teigne et/ou la gale et/ou dans le traitement et/ou la prévention de la surinfection des plaies, et/ou dans la prévention des taches pigmentaires et/ou cicatrices d’acné.
19. Extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 17 ou 18 caractérisé en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera est tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 10.
20. Extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera, pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 17 à 19, caractérisé en ce que l’extrait protéique de graine non germée déshuilée de Moringa oleifera se trouve sous la forme d’un d’ingrédient pharmaceutique ou d’une composition pharmaceutique comprenant en outre un véhicule pharmaceutique approprié.
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