CN111526864A - 辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途 - Google Patents

辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及脱脂、未发芽的辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途，该用途用于治疗敏感性、敏化性、反应性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜。本发明涉及脱脂、未发芽的辣木籽的蛋白质提取物，该蛋白质提取物用于在以下中使用：治疗和/或预防和/或降低与敏感性、敏化性、反应性、脆弱性、衰退性、不耐受性、过度反应性和/或刺激性的皮肤和/或粘膜有关的病理学症状，如接触性荨麻疹、刺激性或过敏性接触性皮炎、湿疹、银屑病、脂溢性或特应性皮炎的发生；和/或治疗和/或预防炎症和/或刺激，特别地是由金黄色葡萄球菌造成的炎症和/或刺激；和/或治疗和/或预防红斑，特别是尿布疹。

Description

辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途
本发明涉及美容和皮肤病学领域，更特别地涉及用于护理皮肤和粘膜(特别是敏感性、敏化性、反应性、脆弱性和/或衰退性(weakened)的皮肤和/或粘膜)的化妆品，以及涉及未发芽、脱油的辣木籽蛋白质提取物的用途。
辣木属包括大约14个植物物种(包括阿拉伯辣木(Moringa peregrina)、无翅型辣木(M.aptera)、坎康辣木(M.concanensis)、象腿树(M.drouhardii)、大叶辣木(M.hildebrandtii)、长管辣木(M.longituba))，其中翼籽辣木(Moringa pterygosperma)(也被称为辣木(Moringa oleifera))是最著名的。
在这种情况下，它是生长迅速的树，非常适应多种条件，生长遍及亚洲、非洲和南美的热带地区。30至50cm长的果实像鼓槌一样悬挂，因此英文名称为“鼓槌树(drumsticktree)”，并且其绿色荚果在世界范围内被认为是一种蔬菜。因此，籽很少留至成熟用于产油。
在辣木生长的国家，树的不同部分(叶子、根、根皮、花和种子)被用于传统医学。
辣木属的籽的特征在于油的存在，该油的含量根据籽的种类和成熟度在21％至53％之间变化。对于辣木(Moringa oleifera)物种，文献中提及的含量范围为21％至34％。
由于辣木关于氧化方面具有优异的稳定性，并且具有良好的固定香料性能，因此辣木油(也称为Behen或Ben油)是古代文明中软膏配制者最常用于化妆品和宗教用途的油。直到上个世纪，化妆品配制者一直在使用这种油，而最近这种油的用途被“重新发现”。
除了含油量外，最近辣木籽还因其蛋白质提取物而引起研究人员的关注。因此，申请EP 1064008中描述了辣木籽的蛋白质提取物在皮肤和粘膜上的用途，由于其具有软化、生理调节、保湿、重构、修复以及作为抗皱和抗污染剂的作用。
特别地，这种提取物由于其净化和抗污染效果由BASF在商品名
Figure BDA0002559111360000021
下出售。
ARMAND-STUSSI等人的文章(Personal Care[个人护理]，2003年5月)还描述了由BASF在商品名
Figure BDA0002559111360000022
下出售的提取物的净化和抗污染效果(通过对抗如香烟烟雾或重金属等污染对皮肤的有害效果，以及通过消除或促进消除皮肤上的微粒(例如煤尘))。
申请WO 02/096448描述了脱脂或非脱脂籽的蛋白质提取物在除臭、去除难闻的气味、清洁、私处卫生、口腔卫生和牙科护理领域中的用途。特别地，该文件还描述了这种提取物具有舒缓、软化和保湿效果并减少疲劳感。然而，从来没有提出这种舒缓效果与皮肤反应性的降低或皮肤和/或粘膜炎症的治疗有关。此外，此文件说明该提取物维持了粘膜表面上细菌和真菌菌群的平衡，但是仅在不损害它们的意义上，不同于其他常规除臭剂。因此，该申请既没有描述也没有提出该提取物可用于治疗敏感性、敏化性、反应性、脆弱性、衰退性和/或不耐受性的皮肤和/或粘膜，特别是通过减少炎症，也没有描述和提出该提取物通过保存和/或增加可以对皮肤和/或粘膜的互利共生菌群产生有利效果。
申请FR 2946879也描述了辣木提取物用于其化妆品用途。然而，这是一个整体的问题，即，没有脱油的籽提取物。
申请CN 103223000进一步描述了发芽的辣木籽提取物在化妆品中的用途，该提取物特别是通过使用超临界流体(一种提取油性化合物的方法)提取而获得。
因此，本发明涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的新颖用途，该新颖用途从未在现有技术中被描述或提出。
实际上，发明人已经发现这种提取物可以抑制特别是由条件性致病性细菌金黄色葡萄球菌(S.Aureus)引起的促炎细胞因子IL-6和IL-8的释放(实例2)。因此，该提取物通过减少皮肤炎症过程而对皮肤炎症过程产生效果，并因此在治疗敏感性、敏化性、反应性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜中是一种选择产品。
在工业化国家，皮肤刺激性反应和过敏(延迟的接触性超敏反应或接触性过敏或接触性湿疹)已成为健康问题。原因在于例如在金属盐、化妆品和卫生产品、香料、药品、防腐剂、消毒剂、衣物、植物等中发现的接触刺激物和过敏原的数量而异。在此上下文中，在过去的几年中，声称自己具有敏感性或反应性皮肤的人数大大增加。该数字已经从1980年代人口数量的30％增长到如今的60％左右。
皮肤敏感性的最重要的原因之一涉及角质层细胞间脂质的遗传性/获得性缺乏(除了其他方面)引起的屏障功能减弱。以表皮神经末梢的变化、神经递质的积累或中枢神经系统中信息传递的中断为特征的神经感觉活动的增加也是可以导致皮肤敏感性增加的因素。皮肤敏感性的第三个另外的原因是免疫敏感性增强，尤其包括表皮朗格汉斯细胞(LC)密度可测量的增加，并且在最极端的情况下，可能导致如接触性荨麻疹、刺激性或过敏性接触性皮炎或特应性皮炎的病理学症状。
敏感性皮肤多态性由主观感觉反映，如发红、发烫或发热的感觉、拉紧、麻刺感、刺痛或紧绷。这些不美观和/或令人不舒服的表现是敏感性皮肤的特征。在最极端的情况下，还描述了刺激性甚至过敏性反应。
在化妆品和药学中，已知降低所有类型的皮肤的敏感性，尤其是通过预防和/或治疗炎性或刺激性反应。在具有所谓“敏感性”皮肤的受试者中，即使是轻微暴露于侵蚀因素或刺激性条件，也可以通过所述不美观和/或令人不舒服的皮肤和/或粘膜表现来反映，这甚至可能导致应该避免的严重的炎症或刺激反应。当前对敏感性皮肤的治疗具有使皮肤更具耐受性的目的，即增加敏感性皮肤的反应性阈值，其特征在于对刺激性反应的较低刺激性阈值，例如通过抑制促炎性细胞因子IL-6和IL-8的释放。考虑到存在皮肤敏感性问题的人数，尽管目前的治疗方法可用，寻找对能够治疗此类皮肤的皮肤炎症因素有效果的新治疗方法是至关重要的。
发明人已经发现未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物也对皮肤和/或粘膜微生物菌群有影响，特别是通过激活互利共生菌株的生长，特别是对抗炎症的那些菌群(如表皮葡萄球菌(S.epidermidis)和/或鲁氏不动杆菌(A.lwoffi))(实例3b)，以及抑制条件性致病性菌株(如痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的生长(实例3a)。
皮肤实际上代表了一个复杂的生态系统，在该生态系统上会繁殖若干种类型的微生物(如细菌和真菌)。这些微生物构成皮肤菌群，也称为皮肤微生物菌群。这些菌群是：
-互利共生常驻菌群，由通常在健康皮肤上繁殖的微生物组成，这些微生物不断从皮肤中吸收营养，并为皮肤提供已知的好处；
-机会致病性常驻菌群，如痤疮丙酸杆菌，该菌通常生活在皮肤上，但在某些条件下会变得有毒，因此具有潜在的致病性；以及
-暂驻菌群，在异常条件下存在于皮肤上，例如通过与被污染的物品接触，这些暂驻菌群在增殖发生时会变成致病性。
皮肤共生菌群微生物特别包括表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)菌株和鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)菌株。这些菌株尤其在面的健康皮肤上发现，参与维持皮肤共生菌群的平衡。
反过来，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)菌株可被认为是人类皮肤潜在致病性皮肤暂驻菌群的一部分，并且痤疮丙酸杆菌菌株被视为条件性致病性常驻菌群的一部分。金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌实际上可能在增殖发生时造成皮肤菌群中微生物的失衡，这使得皮肤更容易受到感染和真菌感染，引起特别是通过发红、肿胀甚至丘疹和灼热感和/或局部发热伴随疼痛、色素沉着斑点或疤痕(例如由于痤疮)而表现的炎症，并因此导致肤色不均匀，且最终可能导致实际的感染性皮肤病理学症状(例如皮肤感染，如疔疮)、毛囊炎、溃疡、脓肿、须疮、脓疱病、臁疮、丹毒或痤疮)。此外，共生菌群的破坏也可能引起皮肤的真菌感染(如念珠菌病)。口腔粘膜菌群(特别是牙龈粘膜的菌群)的破坏可能引起牙龈炎。已知化妆品或皮肤病学解决方案可作用于皮肤微生物菌群。然而，这些作用通常是抗菌的。因此，这些作用方式没有靶向性，因为它们不针对特定的微生物菌株。在药物成分领域中，存在一些通过靶向如细菌的群组使其可能对皮肤微生物菌群起作用的解决方案。实例包括抗生素。然而，抗生素具有不能总是被耐受的缺点，特别是通过口服施用，并且还引起耐药性的发展。此外，抗生素通常不仅作用于致病性微生物菌群，而且作用于共生微生物菌群，这可导致真菌感染。因此，在化妆品和皮肤病学领域中存在提供对皮肤微生物菌群起作用的成分(尤其是通过对特定微生物菌株的靶向作用或通过保护共生菌群而起作用的成分)的巨大需求，这些成分容易获得并且没有先前描述的缺点或副作用。
因此，本发明涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物(有利地是未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别是来自辣木的未发芽的籽(更有利地是未发芽的籽的籽粒)的脱油的油渣饼(更特别地是脱脂的油渣饼)的蛋白质提取物)的化妆品用途，该化妆品用途用于治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜。
通常，可以将敏感性的皮肤和/或粘膜定义为本质上不能很好地耐受侵蚀性因素(尤其是环境因素，如污染物、气候因子(风、冷、热)、UV暴露、情感因素(尤其是压力)、和/或化学药剂(重金属、洗涤剂、化妆品治疗中所含的化合物(如香料、防腐剂、酒精、pH、AHA)或皮肤病学治疗剂中所含的化合物(如维生素A酸))和/或侵蚀性条件(包括汗水和机械侵蚀，如上蜡、剃毛、摩擦，以及甚至水(尤其是硬水))的皮肤。与过敏性皮肤不同，敏感性皮肤不是病理性皮肤。然而，其可能通过不美观和/或令人不舒服的皮肤和/或粘膜表现(如刺痛、发烫或发热的感觉、拉紧、麻刺感、紧绷和发红)，对侵蚀性因素和/或条件起反应。因此，“敏感性皮肤”特征可以由受试者自身根据主观的皮肤感觉来估计，或由皮肤科医生根据客观的皮肤反应来估计。
不美观和令人不舒服的表现可能会泛化到整个身体，但是在大多数情况下它们可以在明确的位置，例如像头皮、面、皮肤褶皱、婴儿臀部等。因此，问题可能在于敏感性皮肤和/或粘膜的区域。
同样，敏化性皮肤是暂时使皮肤敏感的皮肤，因此像这样是非病理性的。
反应性或过度反应性或不耐受或易刺激的皮肤是其耐受性阈值降低并且反应过度的皮肤。
脆弱性或衰退性的皮肤，即暂时变得脆弱的皮肤是屏障功能减弱的皮肤。这可能与个体状态有关；例如，老年人和婴儿具有更脆弱的皮肤。这种状态可能是由于化学或物理侵蚀(磨损、摩擦、割伤)引起的。
敏感性、脆弱性和/或衰退性的皮肤的不舒服和不美观表现与敏感性皮肤相同，而这些表现和/或皮肤状况不被认为涉及病理学的预防和/或治疗。
出于本发明的目的，“化妆品”旨在意指非药物、非治疗用途，该用途并非旨在用于预防和/或治疗被本领域的专家(如皮肤科医生)认定为病理性的皮肤和/或粘膜。因此，它可用于健康的皮肤和/或粘膜。
“健康的皮肤和/或粘膜”旨在意指没有感染、疤痕、皮肤疾病或病症(例如念珠菌病、脓疱病、银屑病、湿疹、痤疮、鱼鳞病、牙龈炎或皮炎、或伤口或损伤、或口腔溃疡或溃疡、或烧伤和/或其他皮肤病、或口疮或炎症或刺激)的(尤其是人类的)皮肤的健康区域的全部或部分(包括头皮和/或粘膜)。
出于本发明的目的，“皮肤”旨在意指(特别是人类的)身体的全部或部分的皮肤，该皮肤选自腿、脚、腋下、手、大腿、胃、胸、颈、臂、躯干、背、唇黏膜、面和/或头皮(有利地是胸和/或面，甚至更有利地是面)。
出于本发明的目的，“粘膜”旨在意指眼粘膜、阴道粘膜、泌尿生殖道粘膜和/或口腔粘膜，尤其是口腔、唇粘膜和/或牙龈粘膜，优选眼和/或口腔粘膜，并且更优选牙龈、唇和/或眼粘膜，仍更优选牙龈粘膜。
出于本发明的目的，“治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜”旨在意指如下事实：相对于没有用根据本发明的提取物治疗的敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜，例如通过减少和/或抑制细胞因子IL6和/或IL8的释放(特别是例如像实例2中所述的)来降低敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜的反应性，从而使其敏感性和/或脆弱性更低。
根据本发明所述的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物是局部和/或口服可接受的。出于本发明的目的，“局部可接受的”旨在意指适用于局部施用的成分，该成分是无毒的且对皮肤和/或粘膜是无刺激性的，不会引起过敏反应，并且不是化学上不稳定的。
出于本发明的目的，“口服可接受的”旨在意指适用于口服施用的成分，该成分是无毒，不会引起过敏反应，并且不是化学上不稳定的。
因此，有利地，根据本发明的提取物的用途，该用途是用于预防和/或治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现(有利地选自发红、发烫或发热的感觉、拉紧、麻刺感、刺痛、紧绷和这些表现的混合)。该用途为皮肤和/或粘膜提供舒服的感觉。
本发明还涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物(有利地是未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别地是辣木的未发芽的籽(更有利地是未发芽的籽的籽粒)的脱油的油渣饼(更特别地是脱脂的油渣饼)的蛋白质提取物)的化妆品用途，该化妆品用途用于增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群，特别地是互利共生细菌菌群，特别地选自由表皮葡萄球菌、鲁氏不动杆菌及其混合物组成的组。
因此，出于本发明的目的，“共生菌群或菌株”旨在意指对皮肤和/或粘膜有利，并且对皮肤和/或粘膜无致病性或不会变为致病性的菌株或菌群。
出于本发明的目的，“维持和/或保护皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群”旨在意指维持皮肤和/或粘膜中一种或多种共生微生物菌株的含量恒定，该一种或多种共生微生物菌株选自由真菌、酵母和细菌组成的组，优选地是存在于或供应给(尤其是人类的)皮肤或粘膜的细菌，该细菌的作用对皮肤和/或粘膜有利，如人葡萄球菌(Staphylococcushominis)、华纳葡萄球菌(S.warneri)、头状葡萄球菌(S.capitis)、表皮葡萄球菌、鲁氏不动杆菌，优选表皮葡萄球菌和/或鲁氏不动杆菌。
出于本发明的目的，“增加皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群”旨在意指增加皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群的生长。可以使用若干种方法来测量皮肤和/或粘膜中的微生物菌株的含量，包括对存在于皮肤或粘膜上的菌落进行计数，在回收含有菌株的样品后通过光密度进行体外测量，或通过PCR测量。有利地，如实例3b中所示例，在回收含有菌株的样品后，通过光密度在体外测量微生物含量。
根据本发明，根据本发明的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的用途不改善皮肤的屏障功能，也不增加皮肤和/或粘膜的水合作用，也不用于治疗干性皮肤，不舒缓皮肤和/或粘膜(特别是干性皮肤和/或粘膜)，也不软化和/或减少皮肤和/或粘膜的疲劳感。
特别地，根据本发明的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的用途不保护皮肤和/或粘膜免受污染，更特别地城市污染(如重金属、废气和/或香烟烟雾)，并且有利地避免由污染造成的损害；和/或不能通过消除使皮肤和/或粘膜变得不纯净的颗粒(例如污染颗粒，如煤颗粒)来净化皮肤和/或粘膜。
因此，有利地，根据本发明的化妆品用途(因此不是治疗用途)用于预防和/或减少和/或消除其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或令人不舒服的效果；特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现；特别是用于预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观；和/或例如通过消除和/或减少发红和/或不规则来维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性；和/或用于预防和/或治疗在皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉；和/或用于预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或用于预防和/或减少头皮屑。
出于本发明的目的，“维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性”旨在意指预防和/或减少和/或治疗肤色缺陷，例如皮肤发红或不规则，从而使皮肤和/或粘膜的肤色更均匀，因此变得更少暗沉和更光泽，和/或通过给予皮肤健康和/或滋润的外观来减少皮肤的发红外观，因此使皮肤焕发活力。可以通过例如比色法或图像分析来测量肤色均匀性。后一种体内测量方法包括在应用被测产品之前和之后，以志愿者面45°的交叉极化配置拍摄高分辨率照片。以这些数字照片为基础，图像分析允许提取和量化与颜色、亮度、均匀性和皮肤肌理相关的特定参数(例如：L*、a*、b*、C、h°)。
出于本发明的目的，“其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜”旨在意指其互利共生菌群的含量，特别是表皮葡萄球菌和/或鲁氏不动杆菌的含量低于互利共生菌群的含量(特别是在改变之前或在身体的另一个未改变的部位进行初步测量的表皮葡萄球菌和/或鲁氏不动杆菌的含量)的皮肤和/或粘膜。
在一个有利的实施例中，互利共生菌群是选自下组的微生物，该组由表皮葡萄球菌、鲁氏不动杆菌及其混合物组成。
在另一个有利的实施例中，将未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物局部地、有利地应用于身体的特定部位和/或区域，这些特定部位和/或区域选自腿、脚、腋下、手、颈、胸、胃、臂、大腿、髋、臀、腰、胯、腹股沟、躯干、背、唇粘膜、面和/或头皮和/或口腔和/或牙龈粘膜，尤其是剃毛区域或浸渍区域(如婴儿屁股)、皮肤皱褶(如腋下、肘后部、膝后部、臀、胯、腹股沟、颈、和/或唇角)和/或过度清洁的区域。
出于本发明的目的，“局部地”旨在意指将未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物和/或根据本发明的组合物和/或成分应用于皮肤和/或粘膜表面(尤其是通过直接施用或喷涂)。
在另一个有利的实施例中，将未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物口服施用，特别是出于治疗牙龈粘膜的目的。因此，有利地，未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物或包含该蛋白质提取物的化妆品成分被发现处于旨在口服施用(特别是在牙龈粘膜上口服施用)的化妆品组合物的形式，还包含合适的化妆品媒介物。
出于本发明的目的，“化妆品和/或一种或多种药物成分”旨在意指用于化妆品应用和/或药物应用的一种或多种植物提取物和/或一种或多种天然的或合成的分子和/或其混合物。化妆品成分由化妆品成分的国际命名法(INCI)定义。
出于本发明的目的，术语“合适的化妆品或药物媒介物”意指该组合物或其组分适合用于与人的皮肤和/或粘膜接触而没有任何不适当的毒性、不相容性、不稳定性、过敏性反应或其等效项。
根据本发明的提取物可以通过本领域技术人员已知的多种提取方法获得，这些方法有利地选自浸渍(搅拌或不搅拌)、热煎煮、研磨(包括超声碾磨)或使用搅拌机。优选地，通过浸渍(更有利地与搅拌一起)进行提取。
假设20℃是室温，有利地在20℃与25℃之间，则提取可以在4℃至300℃，优选地20℃至80℃的温度下进行。
提取将进行30分钟至12小时的时间段、优选地1小时至5小时的时间段、更优选地1小时至2小时的时间段。非常有利地，提取将进行1小时的时间段。
根据本发明的提取物可以通过在质子极性溶剂中，该质子极性溶剂有利地选自下组，该组由水、醇、乙二醇、多元醇、从99/1至1/99(w/w)的水/醇混合物、从99/1至1/99(w/w)的水/乙二醇混合物和从99/1至1/99(w/w)的水/多元醇混合物(例如与乙醇、甘油和/或丁二醇和/或其他二醇(如木糖醇和/或丙二醇等)混合的水)组成，有利地在作为唯一溶剂的水中提取而获得。
特别地，提取物通过水提取获得。
出于本发明的目的，“通过水提取获得的提取物”旨在意指相对于水溶液、甚至更有利地不含乙二醇的水溶液、并且特别地不含醇的水溶液、更特别地仅含水的水溶液的总重量，通过用含有按重量计大于60％、有利地按重量计至少70％、特别地按重量计至少80％、更特别地按重量计至少90％、特别地按重量计至少95％的水溶液提取而获得的任何提取物。
相对于未发芽、脱脂的植物籽和溶剂的总重量，提取物可以从辣木植物的未发芽、脱脂的籽的新鲜或干物质(优选干物质)中以0.1％至20％的量、有利地以1％至10％、更有利地以5％至10％、非常有利地从按干物质的重量计10％的量获得。
在一个有利的实施例中，未发芽的、脱油的辣木籽的蛋白质提取物正如专利EP1064008中所述，且由BASF在商品名
Figure BDA0002559111360000111
下出售。
特别地，该提取物是水溶性提取物，更特别地是通过在质子极性溶剂中，有利地在水中提取而获得。
提取方法有利地是专利EP 1064008中所述的方法，并且特别包括以下步骤：
a)-从辣木籽中提取油，有利地使用压榨或通过使用非极性溶剂(如己烷)进行回流提取；
b)-用质子极性溶剂提取步骤a)中获得的脱油的油渣饼或粉状物，该质子极性溶剂特别地选自醇、多元醇、乙二醇、水以及处于任何比例的其混合物，有利地使用水性溶剂(即水基溶剂)，甚至更有利地用水作为唯一溶剂，从而获得粗提取物，有利地如实例1a中所述。
有利地，该提取在室温下进行。
水性溶剂可以是在多种pH下的盐溶液或缓冲介质，更有利地在包括4与8之间的pH下。
该方法还可以包括在步骤b)之后的另外的步骤c)，该步骤是通过例如使用NaOH改变步骤b)中获得的粗水性提取物的pH，从而获得碱性pH(特别地大于8，更有利地大于11)，来沉淀粗提取物，并回收获得的沉淀物，有利地如实例1b中所述。
然后可以洗涤沉淀物并溶解在水中，从而除去不溶性组分并获得处于蛋白质浓缩物形式的提取物。
该方法还可包括在沉淀步骤c)之后的另外的倾析步骤d)，从而允许蛋白质更好地沉淀，例如像实例1c中所述。特别地，该步骤在低于室温的温度(有利地在4℃)下，更有利地持续至少6小时(过夜)进行。
代替步骤c)和d)，可以在步骤b)之后进行步骤e)，包括使步骤b)中获得的粗水性提取物与羧甲基纤维素有利地接触1小时(特别是在室温下)，从而使其负载有蛋白质提取物。在该步骤之后可以进行步骤f)，使步骤e)中获得的有负载的羧甲基纤维素与水性盐溶液(有利地为NaCl溶液，具有大于7(有利地为7.5)的pH)接触，并然后回收由此获得的洗脱液(其是部分纯化的提取物)。
未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物有利地是去壳的籽的提取物，也就是说有利地仅是籽的籽粒的提取物(没有其外壳或壳)。
因此该方法可以包括在步骤a)之前的将籽去壳的步骤。
最后，可以将获得的提取物(粗提取物、蛋白质浓缩物和/或部分或完全纯化的提取物)进行离心和/或过滤和/或蒸馏，从而回收水溶性级分并处于液体形式。优选地，有利地以0.45μm的截止阈值过滤离心后所获得的上清液。另外的脱色和/或除臭步骤可以根据本领域技术人员已知的技术在提取的任何阶段对提取物进行。特别地，提取物可以用活性炭脱色。
根据一个特定的实施例，根据本发明的提取物是通过在pH大约5的盐水溶液中提取未发芽的，特别是脱油的，更有利地是脱脂的籽的油渣饼，然后通过除去高分子量蛋白质而获得的。回收上清液并构成根据本发明的提取物。
然后还可以将提取物通过溶剂蒸发来浓缩，或例如通过冷冻干燥或喷雾干燥来干燥。然后该提取物将呈粉末形式。
在本发明的一个特定的实施例中，特别地针对其在皮肤病学中的用途，将对所获得的辣木提取物进行灭菌。
在一个特别有利的实施例中，未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物基于干提取物包含的蛋白质(特别是天然蛋白质)按重量计包含0.01％与100％之间，有利地按重量计至少25％，特别地按重量计至少40％，更特别地按重量计至少45％的含量。
通过色谱分析法测量，根据本发明的蛋白质提取物的蛋白质有利地具有在包括6500与13000Da之间，有利地在7100与11000Da之间的分子量。
特别地，未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物不含有生物碱(例如像凤尾辣木素)、印度辣木素、异硫氰酸盐(例如像4-(2-L-鼠李糖基氧基)苄基异硫氰酸盐)或山萘酚。
根据本发明的提取物可以按旨在掺入化妆品或药物组合物中的化妆品或药物成分的形式使用，并且还包含合适的化妆品或药物媒介物。
在这种情况下，在另一个实施例中，将根据本发明的提取物优选地溶解于和/或稀释于溶剂(特别是在极性溶剂中，例如水，有利地还包含甘油，如在商品名
Figure BDA0002559111360000131
下出售的产品，特别是如在实例4a)中所述的)。
在另一个实施例中，根据本发明的提取物可以喷雾干燥到喷雾干燥支持体(例如像麦芽糖糊精)上，并且可以处于粉末形式，特别是如实例4b)中所述。
有利地，当成分处于液体形式(如实例4a)中所述)时，相对于该成分的总重量，根据本发明的提取物以包含在按干物质的重量计0.01％与10％之间(有利地按重量计在1％与5％之间)的含量存在于该成分中。
有利地，当成分处于固体形式(特别是粉末，如实例4b)中所述)时，相对于该成分的总重量，根据本发明的提取物以包含在按干物质的重量计10％与60％之间(有利地按重量计在30％与50％之间)的含量存在于该成分中。
任选地处于化妆品或皮肤病学成分形式的根据本发明的提取物也可以被发现处于化妆品或药物组合物(有利地旨在用于局部或口服施用，特别是局部施用，优选皮肤)形式，还包含合适的化妆品或药物媒介物。
处于固体形式的化妆品或药物成分(特别是皮肤病学成分，并且特别是实例4a)中的成分)能以相对于组合物的总重量按干物质的重量计在0.01％与10％之间(有利地在0.1％与5％之间，特别是在1％与3％之间)的含量用于化妆品或药物组合物(特别是皮肤病学组合物)中。
处于固体形式的化妆品或药物成分(特别是皮肤病学成分，并且特别是实例4b)中的成分)能以相对于组合物的总重量按干物质的重量计在0.001％与5％之间(有利地在0.01％与1％之间)的含量用于化妆品或药物组合物(特别是皮肤病学组合物)中。
在本发明的一个实施例中，相对于组合物的总重量，提取物将以包含在按干物质的重量计0.0001％与20％之间(优选地在按重量计0.001％与10％之间，有利地在按重量计0.01％与5％之间)的含量包含在化妆品或药物组合物中。
根据本发明的组合物可以包含任何合适的溶剂和/或任何合适的媒介物和/或任何合适的赋形剂，任选地与其他目的化合物组合。它们可以特别地包含化妆品或皮肤病学上可接受的赋形剂，该赋形剂选自表面活性剂、防腐剂、缓冲剂、发泡剂、螯合剂、灭微生物剂、变性剂、乳浊剂、pH调节剂、还原剂、稳定剂、乳化剂、增稠剂，胶凝剂、成膜聚合物、溶剂、填充剂、杀菌剂、气味吸收剂、去油剂、调节剂、调质剂(texturizing agents)、光泽剂、颜料、染料、香料和化学或矿物遮光剂、微量元素、精油、甜味剂或味道改良剂。这些组合也被本发明涵盖。CTFA化妆品成分手册，第二版(1992年)中描述了在化妆品和制药行业常用的不同化妆品和药物成分，其特别适合于口服施用和/或局部使用。
有利地，一种或多种赋形剂选自下组，该组包含：聚甘油、酯、纤维素聚合物和衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、基于蔗糖的稳定剂、维生素E及其衍生物、黄原胶、天然和合成蜡、植物油、甘油三酸酯、不皂化物、植物甾醇、硅酮、蛋白质水解物、甜菜碱、氨基氧化物、植物提取物、蔗糖酯、二氧化钛、甘氨酸和对羟基苯甲酸酯，并且更优选地选自下组，该组由以下项组成：硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-21、乙二醇-15硬脂醇醚、鲸蜡硬脂醇、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、丁二醇、辛二醇、天然生育酚、甘油、二羟鲸蜡醇磷酸钠、异丙基羟基酮醚、硬脂酸乙二醇酯、三异壬精、椰油酸辛酯、聚丙烯酰胺、异链烷烃、月桂醇聚醚-7、卡波姆、丙二醇、己二醇、甘油、没药醇、二甲聚硅氧烷、氢氧化钠、PEG 30-二聚羟基硬脂酸酯、癸酸/辛酸甘油三酯、鲸蜡硬脂醇辛酯、己二酸二丁酯、葡萄籽油、霍霍巴油、硫酸镁、EDTA、环甲硅油、黄原胶、柠檬酸、月桂基硫酸钠、蜡和矿物油、异硬脂基异硬脂酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇异硬脂酸酯、PEG 8、蜂蜡、氢化棕榈心油的甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、鲸蜡醇乳酸酯、羊毛脂醇、蓖麻油、二氧化钛、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯、等渗盐水溶液、及其混合物。
根据本发明的化妆品或药物组合物或提取物，任选地处于化妆品或药物成分形式，可以是常规用于局部施用或口服施用的任何盖仑制剂形式，特别是局部施用的如液体或固体形式或加压液体形式。可以特别地按以下形式配制它们：水性或油性溶液、霜或水性凝胶或油性凝胶(尤其在罐或管中)；尤其是淋浴凝胶、洗发香波、乳、乳剂、水凝胶、微乳剂或纳米乳剂，尤其是水包油或油包水或复合型或基于硅的乳剂、精华、乳液(尤其在玻璃瓶或塑料瓶或量瓶或气雾剂瓶、小瓶中)；液体肥皂、糊剂、皮肤病学皂、软膏、泡沫、气雾剂、面膜、贴剂、无水产品，该无水产品优选为液体、糊剂或固体(例如处于杆的形式，特别是棒的形式)或粉末(特别是扑面粉)。特别地，该组合物处于以下形式：精华、乳液、霜、乳、软膏、糊剂、泡沫、乳剂、水凝胶、沐浴凝胶、面膜、棒、贴剂、或扑面粉，有利地为霜或乳液。
在口服施用的情况下，根据本发明的化妆品或药物组合物或提取物任选地处于化妆品或药物成分的形式，可以按牙粉、牙膏、漱口水、乳液、气雾剂、凝胶、锭剂、口腔分散片、口香糖或粘膜粘着剂组合物的形式存在。
化妆品或药物组合物还可包含其他活性成分，用于治疗敏感性、敏化性、反应性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜，和/或对增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群具有效果，引起与根据本发明的提取物互补或协同的效果，这些活性成分例如，选自
-透明质酸钠、支链淀粉和海藻酸钠的组合，尤其是由申请人以含有丝氨酸、海藻糖、尿素和甘油的配制品在商品名PatcH2OTM下销售；
-旨在用于敏感性皮肤护理的化妆品试剂，如申请WO 2009/112590中所述的例如阔叶夜香树(Cestrum latifolium)的植物提取物，例如由申请人在商品名SymbiocellTM下销售；从非洲野芒(Irvingia gabonensis)树的果实中提取的黄油，由申请人在商品名IrwinolTM下销售；镰形木荚苏木(Eperua falcata)的根提取物，在商品名EperulineTM下销售；N-乙酰基-L-酪氨酰-L-脯氨酰-L-苯丙氨酰基-L-苯丙氨酸酰胺肽(INCI：乙酰基四肽15)由申请人在商品名SkinasensylTM下销售。
化妆品组合物还可含有一种或多种对皮肤和/或粘膜微生物菌群具有活性和/或对皮肤的屏障功能具有活性的成分，特别是保湿和/或舒缓活性剂，包括通过酶催化合成获得、由素莱碧雅公司(Solabia)在商品名BioEcoliaTM下销售的寡糖或由同一公司在商品名EcoskinTM下销售的α-葡萄糖寡糖复合物；川泽泻(Alisma plantago-aquatica)的提取物；摩洛哥坚果(Argania spinosa)(LipofructylTMArgan)的提取物；神经酰胺混合物(SphingocerylTMVEG)；纯净的Boldo提取物(BetapurTM)；基于菊粉或低聚果糖的产品；双歧杆菌提取物或对抗油性皮肤的猫须草(Orthosiphonstamineus)提取物(MAT-XSTMBright)、由申请人针对保湿特性在商品名MelhydranTM下销售的天然蜂蜜提取物；由申请人在商品名OligolinTM下销售的亚麻提取物；通过生物技术修饰的、并且由申请人在商品名RelipidiumTM下销售的酵母提取物；由申请人在商品名InhipaseTM下销售的野葛根(Pueraria lobata)的根提取物；衍生自由Mibelle在商品名CM-Glucan ForteTM下销售的面包酵母的β-葡聚糖衍生物；和/或由法国司达玛公司(Sederma)在商品名PacifeelTM下销售的紫茉莉(Mirabilis jalapa)提取物。
有利地，本发明的目的还在于用于治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜的化妆品治疗方法，该方法用于预防和/或治疗其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现(特别选自发红、发烫或发热或拉紧的感觉、麻刺感、刺痛、紧绷以及这些表现的混合)；和/或用于增加和/或保护和/或维持在皮肤和/或粘膜中的互利共生菌群，特别是用于预防和/或减少和/或延迟其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现；特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现(如用于预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观)；和/或用来维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性和/或减少发红；和/或用于预防和/或治疗在皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉；和/或用于预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或用于预防和/或减少头皮屑，所述皮肤和/或粘膜是需要/想要接受这种治疗的个体的健康的皮肤和/或粘膜，所述方法包括以下步骤：
a)在个体中识别出敏感性或敏化性、脆弱性或衰退性的皮肤和/或粘膜的区域，该个体希望治疗和/或希望预防和/或治疗其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现(特别选自发红、发烫或发热或拉紧的感觉、麻刺感、刺痛、紧绷以及这些表现的混合)；和/或用于个体希望增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜中的互利共生菌群，特别是用于预防和/或减少和/或延迟其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现；特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，如用于预防和/或减少和/或阻滞黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观；和/或用来维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性和/或减少发红；和/或用于预防和/或治疗皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉；和/或预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或预防和/或减少头皮屑，所述皮肤和/或粘膜是健康的皮肤和/或粘膜，并且
b)在皮肤的该区域以有效量局部应用或口服施用包含根据本发明的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的化妆品组合物，用于治疗敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜；用于预防和/或治疗其不美观的表现(特别地选自发红、发烫或发热或拉紧的感觉、麻刺感、刺痛、紧绷以及这些表现的混合)；和/或用于增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜中的互利共生菌群，特别是用于预防和/或减少和/或延迟其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现；特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，如用于预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观；和/或维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性和/或减少发红；和/或用于预防和/或治疗皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉；和/或预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或用于预防和/或减少头皮屑，所述皮肤和/或粘膜是健康的皮肤和/或粘膜。
本发明还涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，有利地是未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别地是辣木的未发芽的籽(更有利地是未发芽的籽的籽粒)的脱油的油渣饼(更特别地是脱脂的油渣饼)的蛋白质提取物，其用于在以下中使用：治疗反应性、过度反应性、不耐受性和/或刺激性皮肤和/或粘膜，和/或治疗和/或预防和/或降低与敏感性、敏化性、反应性、脆弱性、衰退性、不耐受性、过度反应性和/或刺激性的皮肤和/或粘膜有关的病理学症状(如接触性荨麻疹、刺激性或过敏性接触性皮炎、湿疹、银屑病、脂溢性或特应性皮炎)的发生，和/或治疗和/或预防炎症和/或刺激(特别地是由金黄色葡萄球菌造成的炎症和/或刺激)；和/或治疗和/或预防红斑(特别是婴儿尿布疹)；和/或治疗牙龈炎。
本发明还涉及未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，有利地是未发芽、脱脂的籽的蛋白质提取物，特别地是未发芽的籽(更有利地是未发芽的辣木籽的籽粒)的脱油的油渣饼(更特别地是脱脂的油渣饼)的蛋白质提取物，其用于在以下中使用：治疗和/或预防和/或降低与皮肤和/或粘膜的互利共生菌群的改变有关的病理学症状的发生，有利地涉及减少互利共生的皮肤和/或粘膜的微生物的含量和/或增加致病性微生物的含量(这些致病性微生物优选是致病性细菌、特别是金黄色葡萄球菌和/或痤疮丙酸杆菌)，有利地病理学症状选自由以下组成的组：感染(尤其是皮肤和/或粘膜的细菌感染)、溃疡、疱疹、疔疮、毛囊炎、脓肿、须疮、脓疱病、臁疮丹毒、痤疮、真菌感染(如念珠菌病)或皮肤癣菌病(如癣)和/或疥疮；和/或治疗和/或预防伤口感染；和/或预防色素斑点和/或痤疮疤痕。
此外，出于本发明的目的，术语“致病性微生物”旨在意指以非永久性(暂驻)方式存在于皮肤和/或粘膜上的微生物或通常生活在皮肤上，但在某些条件下可能变成有毒的微生物，因此具有潜在的致病性(条件性常驻病原菌)以及引起或能够引起皮肤和/或粘膜的非-病理性改变如皮肤缺陷，例如像发红、头皮屑和/或头部毛发脱落和/或身体毛发脱落、肿胀或丘疹和/或灼热感和/或局部发热伴随疼痛、色素沉着斑点或疤痕(例如由于痤疮，而因此肤色不均匀)，并可能涉及实际的皮肤病理学症状，包括皮肤感染，如疔疮、毛囊炎、脓肿、溃疡、须疮、臁疮、丹毒、痤疮或脓疱病；甚至病理性病状，如真菌感染(如念珠菌病或皮真菌病)，例如白色念珠菌(Candida albicans)、马拉色氏霉菌属(Malassezia)、链球菌(Streptococci)、痤疮丙酸杆菌、葡萄球菌(并且尤其是金黄色葡萄球菌)引起的疥疮、癣菌病和真菌感染。
最后，本发明涉及一种化妆品护理方法，其特征在于该方法包括向面或身体的皮肤和/或粘膜的至少一个相关区域使用，和/或口服施用根据本发明的提取物(任选地处于包含提取物作为活性剂的化妆品成分或化妆品组合物的形式)，如上文所定义的根据本发明的提取物用于治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜；和/或用于增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群；并且有利地用于治疗敏感性、敏化性、脆弱性、和/或衰退性的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现(有利地选自发红、发烫或发热或拉紧的感觉、刺痛、麻刺感、紧绷以及这些表现的混合)；和/或用于预防和/或减少和/或延迟其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现；特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，如用于预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观；和/或维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性和/或减少发红；和/或用于预防和/或治疗皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉；和/或预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落；和/或用于预防和/或减少头皮屑。
基于阅读说明性描述，本领域技术人员将清楚地理解本发明的其他目的、特征和优点，该说明性描述参考了仅作为说明给出的实例，并且不以任何方式限制本发明的范围。
实例形式是本发明的组成部分，并且任一特征在功能和一般性质上形成本发明的组成部分，从包括实例在内的说明书整体来看，所述任一特征无论怎样都相比于任何现有技术具有新颖性。
因此，每个实例具有一般范围。
此外，在实例中，除非另有说明，否则温度以摄氏度表示，并且压力为大气压。
实例1：根据本发明的辣木提取物的制备
根据专利EP 1064008中所述、特别是如下所述的方法制备辣木提取物：
实例1a(提取物1a的制备)
将辣木籽的壳去除后获得的且含有33.4％(重量/重量)油的辣木的籽粒通过在己烷中回流进行两次连续提取来脱脂，并且在过滤后，将粉状物在40℃的烤箱中干燥且具有残余的油含量为2.5％。
在反应器中，将200g脱脂的粉状物添加至2升蒸馏水中。搅拌10分钟后，通过添加4N NaOH将pH调整至7.5，然后在室温下进行一小时提取，同时将pH维持在7.5。通过在5000g下离心15min除去不溶性组分。
收集上清液，然后以0.45μm过滤：因此获得1.77升黄色滤液，其含有4.69％的干提取物并且其通过缩二脲技术测量的蛋白质浓度为21.54g/l(或基于干提取物的蛋白质纯度为45.92％)。通过喷雾干燥将提取物脱水，并获得65.72克雾化物(atomisate)，其中蛋白质含量估计为54.7％(N x 6.25)。
如果考虑在柱的排除体积和总体积之间洗脱的峰，则该提取物在Superose 12HR柱上通过凝胶渗透分析得出的色谱图显示主要的级分，该级分占面积的52％并且对应在7,800与11,000Da之间的分子量。在该峰中肩部的存在证实了若干种化合物的存在，并且分子量范围接近在针对絮凝剂辣木蛋白的单体(6,500和7,000Da)和二聚体(13,000Da)的文献中发现的分子量范围。
实例1b(提取物1b的制备)
根据实例1a提取300g脱脂的粉状物，从而获得粗水性提取物。通过渐进式添加4NNaOH将滤液(2.74升)的pH调整至11.8。在pH 8.0左右开始沉淀(溶液浑浊明显)，并且在30分钟后将该溶液以5000g离心15min。收集粘稠的沉淀物(43.2g，湿物质)，然后用500ml pH11.8的蒸馏水洗涤两次。
然后将沉淀物溶于270ml蒸馏水(即，初始体积的10％)中，并通过6N HCl将溶液的pH连续调节至4.5，从而使沉淀物溶解(使用称为Turax的设备促进分散)。
搅拌30分钟后，将混合物以5000g离心15分钟，以除去不溶性成分，并通过装有沃特曼(Whatman)41号过滤器的布氏漏斗过滤上清液。因此，获得260ml黄色且澄清的蛋白质浓缩物，并且通过冷冻干燥将该浓缩物脱水。
以这种方式，获得了11.5克冻干物(其中按重量计蛋白质含量为90％-95％)。
该提取物在Superose 12HR柱上的凝胶渗透分析显示出主要的级分，该级分占面积的70％，并且对应8,800Da左右的分子量。
实例1c(提取物1c的制备)
通过在名称为KOMET的压机上加压提取获得自去壳辣木籽的籽粒中的油，并将获得的油渣饼研磨以获得均匀的粉状物。
根据实例1a和1b中所述的操作程序，由1.24kg油饼渣制备粗提取物。
根据实例1b，蛋白质在pH 11.8下沉淀，但是引入另外的倾析步骤，在+4℃下持续一夜，以便于允许蛋白质的更好沉淀。
在与实例1b相同的条件下处理沉淀物(沉淀物重构溶液的pH为6而不是4.5)。
通过喷雾干燥将因此获得的蛋白质浓缩物(1.05升，按干提取物的4.59％)脱水，并收集34.6g雾化物，或基于干提取物的喷雾干燥产率为71.5％。
基于氮含量测定(N x 6.25)，蛋白质含量大于90％(大约95％)。
实例1d(提取物1d的制备)
根据实例1a、1b和1c中所述的操作程序，由150g油饼渣制备粗提取物。
以0.45μm过滤后，获得1.35升澄清的黄色滤液。
将100克羧甲基纤维素(CM52，沃特曼公司(WHATMAN))在500mlpH 7.5的蒸馏水中平衡30分钟。
通过装有沃特曼42号过滤器的布氏漏斗过滤混合物，然后收集纤维素，并再次在500ml的pH 7.5的水中平衡。
通过过滤除去水性介质后，在环境温度下伴随搅拌使纤维素与辣木籽粒油渣饼的水性提取物接触一小时。
通过布氏漏斗过滤除去未吸附的化合物(其色谱图在图3中用虚线表示的级分)，然后用一升pH 7.5的蒸馏水将“负载的”纤维素洗涤两次，然后通过布氏漏斗过滤。
然后使纤维素与120ml 60g/l的NaCl溶液在pH 7.5下接触30分钟。
通过布氏漏斗过滤回收在NaCl介质中洗脱的蛋白质(吸附在CM 52上且在60g/l的NaCl介质中洗脱的蛋白质的色谱图如图3中实线所示)。
因此，获得110ml滤液，其中干提取物含量为9.63％且蛋白质浓度为64.6g/l(或基于干提取物的蛋白质纯度为67％)。
该提取物在Superose 12HR柱上的凝胶渗透分析显示出主要的级分，该级分占面积的70％，并且对应7,100Da左右的分子量。
可以通过透析或通过超滤使溶液脱盐，并通过冷冻干燥、喷雾干燥或任何其他合适的方式使溶液脱水。根据实例1d，将提取物在麦芽糖糊精支持体上喷雾干燥，并根据实例4b)配制，以在以下实例中进行测试。
实例2：评估根据本发明的成分对由条件性致病性细菌金黄色葡萄球菌 (S.Aureus)引起的促炎性细胞因子IL-6和IL-8释放的抑制作用的影响
测试的产物是来自实例1d)中配制为根据实例4b的成分的形式的产物，并且相对于总的最终培养基(培养基+产物)以按重量计0.03％的量使用。测试是在培养物中的人类HacaT角质形成细胞上进行的。
将HacaT角质形成细胞以2x 106个细胞/cm2接种在补充有10％胎牛血清(FCS)的DMEM(杜氏改良的伊格尔培养基)培养基中。将细胞在37℃下，在5％CO2和95％相对湿度下孵育3至5天。然后将DMEM培养基替换为1mL的EMEM(伊格尔极限必需培养基(Eagle'sMinimum Essential Medium))培养基。然后将待测试的产物以所需浓度添加至EMEM培养基，并将所有物质再孵育一天，直到细胞层饱和。
将0.1ml金黄色葡萄球菌DSMZ 20231ATCC 12600细菌溶液(1.5x107)在有氧条件下于37℃，5％CO2和相对湿度饱和的条件下添加至每个孔中持续2小时。接下来，将含有细菌的培养基替换为含有待测产品的EMEM。将所有物质在37℃和5％CO2下再次孵育24小时。
根据ELISA试剂盒供应商的建议测定IL8和IL6。
表2.1：评估根据本发明产品对由金黄色葡萄球菌(S.aureus)存在下在角质形成 细胞中引起的细胞因子IL6释放的影响
Figure BDA0002559111360000231
表2.2：评估根据本发明的产品对由金黄色葡萄球菌(S.aureus)存在下在角质形 成细胞中引起的细胞因子IL8释放的影响
Figure BDA0002559111360000241
本发明的产物引起了由金黄色葡萄球菌致病性细菌在培养的角质形成细胞中引起的细胞因子IL-6和IL-8的释放的减少。这证明了该产品治疗敏感性、反应性、脆弱性、衰退性或敏化性皮肤的效果及其抗炎效果。
实例3：关于条件性致病性微生物，产品对共生微生物生长的选择性作用
本发明的产品对皮肤微生物的生长具有选择性作用。该产品可促进共生微生物以及特别是有助于皮肤对抗炎症的细菌(如表皮葡萄球菌和鲁氏不动杆菌)的生长。
此外，它对导致皮肤的炎性现象的条件性致病性细菌(如痤疮丙酸杆菌)的影响很小。
实例3a：抑制条件性致病性菌株痤疮丙酸杆菌的生长
测试的产品是来自实例1d)中配制为处于实例4b)的成分形式的产物，并且相对于总的最终培养基(培养基和产品)的重量以按重量计0.0006％和0.006％的量使用。
将成分(
Figure BDA0002559111360000242
用于阳性对照或根据本发明的产物)在细菌培养基(布氏肉汤)中稀释。然后将含有成分的培养基在35℃+/-2.5℃下孵育48小时，同时遵循厌氧条件，在5x 105的痤疮丙酸杆菌ATCC 11827下校准接种物。在孵育后，通过测量600nm处的光密度来估计生长。
表3.1：评估不同剂量的产品对痤疮丙酸杆菌生长的影响
Figure BDA0002559111360000251
实例3b：激活共生菌株的生长以对抗表皮葡萄球菌和/或鲁氏不动杆菌炎症
测试的产品是来自实例1d中配制为处于根据实例4b)的成分形式的产物，并且相对于总的最终培养基(培养基和产品)的重量以按重量计0.0006％和0.006％的量使用。
对于表皮葡萄球菌(菌株ATCC 14990)：在富集培养基(胰蛋白酶大豆肉汤，TSB)中预培养后，用OD600＝0.05(约107个细菌)的细菌接种含有适当培养基的微孔板，并以不同浓度与本发明产物孵育24小时。在孵育后，通过测量600nm处的光密度来估计生长。进行未处理的对照，以及抑制对照(十二烷基硫酸钠或SDS)。
结果表明，根据本发明的产物促进了共生微生物(表皮葡萄球菌和鲁氏不动杆菌)的生长。
实例4：包含根据本发明的辣木提取物的根据本发明的化妆品或药物成分
4a)制备具有以下重量百分比配方的液体化妆品或药物成分。
Figure BDA0002559111360000252
Figure BDA0002559111360000261
4b)制备具有以下配方的处于粉末形式的固体成分：
名称 以按重量计％表示的量
麦芽糖糊精 50
根据实例1a-1d的辣木提取物 50
实例5：根据本发明处于身体和/或面乳液形式的组合物：
Figure BDA0002559111360000262
通过本领域的技术人员熟知的本领域常规方法，通过混合6种相来制备乳液。
实例6：根据本发明处于身体和/或面乳形式的组合物
处于身体和/或面乳形式的化妆品可以例如具有以下重量组成，该重量组成由如下所说明的以下水相和脂肪相组成。
Figure BDA0002559111360000271
用于制备面和/或身体乳的方法基本上由以下组成：使脂肪相达到80℃，使水相的水也达到80℃，并将防腐剂(Elestab 4112)溶于其中，然后伴随涡轮搅拌将水相倾倒入脂肪相中，并在搅拌下逐渐冷却，然后在50℃左右向其中添加水性辣木蛋白质提取物储备溶液，然后添加香料，并最后继续搅拌直至完全冷却。
实例7：根据本发明处于面霜形式的组合物
处于身体和/或面霜形式的化妆品可以例如具有以下重量组成，该重量组成由如下所说明的以下水相和脂肪相组成。
Figure BDA0002559111360000272
Figure BDA0002559111360000281
用于制备面霜的方法基本上由以下组成：使脂肪相达到80℃，使水相也达到80℃，并将Elestab 4112溶于其中，分别制备辣木蛋白质提取物储备溶液，伴随涡轮搅拌将脂肪相倾倒入水相中，然后在大约50℃下引入辣木提取物储备溶液，并最后继续搅拌直至冷却。

Claims (20)

1.一种未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的化妆品用途，该用途用于治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜，以预防和/或治疗敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，所述皮肤和/或粘膜是健康的皮肤和/或粘膜。
2.如权利要求1所述的化妆品用途，其特征在于敏感性、敏化性、脆弱性和/或衰退性的皮肤和/或粘膜的这些不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现选自发红、发烫或发热或拉紧的感觉、麻刺感、刺痛、紧绷、以及这些表现的混合。
3.如权利要求1或2中任一项所述的化妆品用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物的用途还用于增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜上的互利共生菌群。
4.如权利要求3所述的用途，该用途用于预防和/或减少和/或延迟其互利共生菌群被改变的皮肤和/或粘膜的不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，特别是用于预防和/或减少和/或延迟皮脂分泌及其不美观和/或使人不愉快和/或令人不舒服的表现，如用于预防和/或减少和/或延迟黑头和/或粉刺的形成和/或皮肤的光泽外观，和/或用于维持和/或改善皮肤和/或粘膜的肤色均匀性和/或减少发红，和/或用于预防和/或治疗在皮肤和/或粘膜上发热和/或发烫的感觉，和/或用于预防和/或减少头部毛发脱落和/或身体毛发脱落，和/或用于预防和/或减少头皮屑。
5.如权利要求3或4中任一项所述的用途，其特征在于该互利共生菌群是选自下组的微生物，该组由表皮葡萄球菌、鲁氏不动杆菌及其混合物组成。
6.如权利要求1至5中任一项所述的用途，其特征在于将未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物局部地应用于身体的特定部位，这些身体的特定部位选自腿，脚，腋下，手，颈，胸，胃，臂，大腿，髋，臀，腰，胯，腹股沟，躯干，背，唇粘膜，面和/或头皮，尤其是剃毛区域或浸渍区域如婴儿屁股，皮肤皱褶如腋下、肘后部、膝后部、臀、胯、腹股沟、颈和/或唇角，和/或过度清洁的区域。
7.如权利要求1至6中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物是水溶性提取物，特别是通过在极性溶剂中、有利地在水中提取而获得的水溶性提取物。
8.如权利要求1至7中任一项所述的用途，其特征在于基于干提取物，该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物包含按重量计在0.01％与100％之间、有利地按重量计至少25％的蛋白质含量，特别是天然蛋白质的蛋白质含量。
9.如权利要求1至8中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物不含有生物碱、印度辣木素、异硫氰酸盐或山萘酚。
10.如权利要求1至9中任一项所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物是去壳的籽的提取物。
11.如权利要求1至10中任一项所述的用途，其特征在于发现该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物处于旨在掺入化妆品组合物中的化妆品成分的形式，并且该化妆品组合物还包含合适的化妆品媒介物。
12.如权利要求11所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物以液体形式以相对于成分的总重量按干物质的重量计在0.01％与10％之间、有利地按重量计在1％与5％之间的含量存在于该化妆品成分中，或以固体形式以按成分的总重量计在10％与60％之间、有利地按重量计在30％与50％之间的含量存在于该化妆品成分中。
13.如权利要求1至12中任一项所述的用途，其特征在于发现该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物或包含该蛋白质提取物的化妆品成分处于旨在局部施用的化妆品组合物的形式，该化妆品组合物还包含合适的化妆品媒介物。
14.如权利要求13所述的用途，其特征在于该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物以相对于该组合物的总重量按干物质的重量计在0.0001％与20％之间、有利地按重量计在0.01％与5％之间的含量存在于该化妆品组合物中。
15.如权利要求13或14中任一项所述的用途，其特征在于该组合物处于以下形式：精华、乳液、霜、乳、软膏、糊剂、泡沫、乳剂、水凝胶、沐浴凝胶、气雾剂、面膜、棒、贴剂、或扑面粉，有利地为霜或乳液。
16.如权利要求1至12中任一项所述的用途，其特征在于发现该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物或包含该蛋白质提取物的化妆品成分处于旨在口服施用、特别是在牙龈粘膜上口服施用的化妆品组合物的形式，该化妆品组合物还包含合适的化妆品媒介物。
17.一种用于在以下中使用的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物：治疗反应性、过度反应性、不耐受性和/或刺激性的皮肤和/或粘膜；和/或治疗和/或预防和/或降低与敏感性、敏化性、反应性、脆弱性、衰退性、不耐受性、过度反应性和/或刺激性的皮肤和/或粘膜有关的病理学症状，如接触性荨麻疹、刺激性或过敏性接触性皮炎、湿疹、银屑病、脂溢性或特应性皮炎的发生；和/或治疗和/或预防炎症和/或刺激，特别地是由金黄色葡萄球菌造成的炎症和/或刺激；和/或治疗和/或预防红斑，特别是婴儿尿布疹；和/或治疗牙龈炎。
18.如权利要求17所述的用于使用的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，该蛋白质提取物还用于在以下中使用：治疗和/或预防和/或降低与皮肤和/或粘膜的互利共生菌群的改变有关的病理学症状的发生，有利地涉及减少互利共生的皮肤和/或粘膜的微生物的含量和/或增加致病性微生物的含量，这些致病性微生物优选是致病性细菌、特别是金黄色葡萄球菌和/或痤疮丙酸杆菌，有利地病理学症状选自由以下组成的组：皮肤和/或粘膜的感染、尤其是皮肤和/或粘膜的细菌感染、溃疡、疱疹、疔疮、毛囊炎、脓肿、须疮、脓疱病、臁疮丹毒、痤疮、如念珠菌病的真菌感染、或如癣的皮肤癣菌病、和/或疥疮；和/或治疗和/或预防伤口感染；和/或预防色素斑点和/或痤疮疤痕。
19.如权利要求17或18中任一项所述的用于使用的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，其特征在于该未发芽的、脱油的辣木籽的蛋白质提取物是如权利要求1至10中任一项所定义的。
20.如权利要求17至19中任一项所述的用于使用的未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物，其特征在于发现该未发芽、脱油的辣木籽的蛋白质提取物处于药物成分或药物组合物的形式，该药物组合物还包含合适的化妆品媒介物。
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