JP2002506045A - 併合ワクチン組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 青年への投与に好適な新規の併合ワクチン組成物であって、Ｂ型肝炎ウィルス抗原及び単純ヘルペスウィルス抗原と、任意的に更にＥＢＶ抗原、Ａ型肝炎抗原又は不活化弱毒ウィルス、ＨＰＶ抗原、ＶＺＶ抗原、ＨＣＭＶ抗原、トキソプラスマ・ゴンジイイ抗原の１又は複数とを含んで成る併合ワクチン組成物を提供する。このワクチン組成物はＴＨ１細胞応答の優先刺激因子であるアジュバント、例えば３Ｄ−ＭＰＬ及びＱＳ２１と共に調合する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は新規のワクチン製剤、その調製方法、及び治療におけるその利用に関
する。詳しくは、本発明は青年に投与するための併合ワクチンに関連する。

【０００２】 ＨＳＶ−２は陰部ヘルペスの主たる病因学的因子である。ＨＳＶ−２及びＨＳ
Ｖ−１（口唇ヘルペスの原因因子）は主として神経ガングリア細胞において急性
疾患を誘導し、且つ潜伏感染症を樹立してしまう能力を特徴とする。

【０００３】 陰部ヘルペスは米国だけで約５百万人において発症しているものと推定され、
毎年５００，０００の臨床例が記録されている（一次及び再発性感染症）。一次
感染症は一般に思春期に発症し、そして痛そうな皮膚損傷の局部的出現を特徴と
し、それは２〜３週間持続する。一次感染後６ヶ月以内に患者の５０％において
疾患が再発する。患者の約２５％は毎年１０〜１５回の疾患の再発を被る。免疫
無防備状態の患者においては、高頻度な再発の発症率が正常な患者集団における
それよりも統計学的に高い。

【０００４】 ＨＳＶ−１及びＨＳＶ−２ウィルスは共にウィルスの表層に位置する多数の糖
タンパク質成分を有する。これらはｇＢ，ｇＣ，ｇＤ及びｇＥ等として知られる
。

【０００５】 １又は複数種のＢ型肝炎抗原を含んで成るＢ型肝炎感染症の予防用のワクチン
がよく知られている。例えば、Smithkline Beecham Biologicals由来のワクチン
Ｅｎｇｅｒｉｘ−Ｂ (商標）がＢ型肝炎の予防に利用されている。このワクチン
はＢ型肝炎表層抗原であり（特にHarford ら、Postgraduate Medical Journal,
1987, 63 (Suppl.2), p65-70に記載の通り、２２６個のアミノ酸のＳ−抗原）、
そしてアジュバントとして水酸化アルミニウムを用いて調剤されている。

【０００６】 青年が特にかかり易い疾患を予防するのに有効な併合ワクチンのニーズがある
。

【０００７】 本発明はワクチン組成物であって （ａ）Ｂ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）抗原及び （ｂ）単純ヘルペスウィルス（ＨＳＶ）抗原と、 ＴＨ１細胞応答の優先的刺激因子であるアジュバントとの組合せを含んで成る
ワクチン組成物を提供する。

【０００８】 本発明は特にＨＢＶ及び／又はＨＳＶ感染症の危険性にありうる青年への投与
に極めて有益である。

【０００９】 任意的に、本発明のワクチンは更に以下に記載の多数のその他の抗原を一又は
複数含んで成る。

【００１０】 本発明に係るワクチン組成物は驚くべきことに干渉を示さない、即ち、本発明
の組成物内の各々の抗原に対する免疫応答が、ＴＨ１細胞応答の優先的刺激因子
であるアジュバントと一緒に個別に付与した各々の抗原により獲得される免疫応
答と本質的に同じであることが見い出された。

【００１１】 Ｈａｖｒｉｘ (商標) ワクチン（これもSmithkline Beecham Biologicals由来
）がＡ型肝炎感染症の予防に使用できるワクチンの例である。これはアジュバン
トとしての水酸化アルミニウムで調剤されている。このワクチンはホルモン（ホ
ルムアルデヒド）で不活化されたＨＭ−１７５ Ａ型肝炎ウィルスの弱毒株を含
んで成る（Andre ら、Drog. med. Virol., vol.37, p1-24を参照のこと。

【００１２】 本明細書において使用する語「Ａ型肝炎ウィルス（ＨＡＶ）抗原」は、Ａ型肝
炎ウィルス、又は任意的に例えばホルムアルデヒドで不活化せしめたＨＡＶの弱
毒株に由来するタンパク質のいずれかを意味するように用いている。ＨＡＶ抗原
がＡ型肝炎ウィルスに由来するタンパク質であるなら、それは任意的に組換タン
パク質であってよい。

【００１３】 Ｔｕｉｎｒｉｘ (商標) ワクチンは組換Ｂ型肝炎抗原と上記の不活化弱毒Ａ型
肝炎ウィルスとの組合せである。このワクチンはＡ型肝炎及びＢ型肝炎に対する
同時防御に利用されうる。

【００１４】 ヨーロッパ特許第０，３３９，６６７号（Ｃｈｅｍｏ Ｓｅｒｏ）にはＡ型肝
炎抗原とＢ型肝炎抗原とを組合せて併合ワクチンを作製する一般的な概念が記載
されている。この明細書には、使用するアジュバンドは重要でない旨記載されて
いる。それには免疫活性を所望の程度にまで高めることができ、且つ任意の副作
用を及ぼさないものでなくてはならないとしか記載されていない。アルミニウム
ゲル、特に水酸化アルミニウムゲル及びリン酸アルミニウムゲルを使用してよい
旨記載されている。

【００１５】 別の観点において、本発明はワクチン組成物であって： （ａ）Ｂ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）抗原； （ｂ）単純ヘルペスウィルス（ＨＳＶ）抗原；及び （ｃ）Ａ型肝炎ウィルス（ＨＡＶ）抗原を、 ＴＨ１細胞応答の優先的刺激因子であるアジュバンドと一緒に含んで成るワク
チン組成物を提供する。

【００１６】 かかるワクチンは特にＨＢＶ及び／又はＨＳＶ感染症、及び／又はＨＡＶ感染
症の危険性にありうる青年への投与に極めて有益である。

【００１７】 免疫応答は広義には２つの究極的なカテゴリー、即ち、体液免疫応答又は細胞
媒介免疫応答に分けることができうる（古典的には、各々抗体及び細胞エフェク
ター防御機構を特徴とする）。このような応答のカテゴリーはＴＨ１型応答 (細
胞媒介応答) 及びＴＨ２型免疫応答 (体液応答）と称されている。

【００１８】 究極的なＴＨ１型免疫応答は抗原特異的ハロタイプ制限細胞障害性Ｔリンパ球
の構築及びナチュラルキラー細胞応答を特徴としうる。マウスでは、ＴＨ１型応
答は往々にしてＩｇＧ２のサブタイプの抗体の作製を特徴とし、ヒトではこれら
はＩｇＧ１型抗体に相当する。ＴＨ２型免疫応答はマウスＩｇＧ１，ＩｇＡ及び
ＩｇＭ等の広域な免疫グロブリンアイソタイプの作製を特徴とする。

【００１９】 このような２タイプの免疫応答の展開の裏にある駆動力はサイトカインである
と考えられうる。高レベルのＴＨ１型サイトカインは所定の抗原に対する細胞媒
介免疫応答の誘導を優先する傾向にあり、一方高レベルのＴＨ２型サイトカイン
は抗原に対する体液免疫応答を優先する傾向にある。

【００２０】 ＴＨ１及びＴＨ２型免疫応答の違いは絶対的なものではない。実際には、個体
は優先的ＴＨ１又は優先的ＴＨ２と称されている免疫応答を保持するようである
。しかしながら、サイトカインの種類を、Mosmann and Coffman (Mosmann, T. R
. and Coffman, R. L. (1989) TH1 and TH2 cells : different patterns of ly
mphokine secretion lead to different functional properties. Annual Revie
w of Immunology, 7, p145-173) によるネズミＣＤ４＋ｖｅＴ細胞クローンに記
載の観点で検討するのが往々にして好都合である。伝統的には、ＴＨ１型応答は
Ｔ−リンパ球によるＩＮＦ−γ及びＩＬ−２サイトカインの生産に関連する。往
々にしてＴＨ１型免疫応答の誘導に直接関連するその他のサイトカイン、例えば
ＩＬ−１２はＴ細胞によっては生産されない。それに対し、ＴＨ２型応答はＩＬ
−４，ＩＬ−５，ＩＬ−６，ＩＬ−１０及びβ−腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−β）の
分泌に関連する。

【００２１】 所定のワクチンアジュバントはＴＨ１又はＴＨ２型サイトカイン応答のいずれ
かの刺激に極めて適することが知られている。伝統的には、種痘又は感染後の免
疫応答のＴＨ１：ＴＨ２のバランスの最良の指標には、抗原による再刺激後のｉ
ｎ ｖｉｔｒｏでのＴリンパ球によるＴＨ１又はＴＨ２サイトカインの生産量の
直接的な測定及び／又は抗原特異的抗体応答のＩｇＧ１：ＩｇＧ２ａ比の測定が
挙げられる。

【００２２】 かくして、ＴＨ１型アジュバントはｉｎ ｖｉｔｒｏで抗原により再刺激した
ときに高レベルのＴＨ１型サイトカインを生産するように単離Ｔ−細胞集団を刺
激し、ＴＨ１型アイソタイプに関連する抗原特異的免疫グロブリン応答を誘導す
るものである。

【００２３】 ＴＨ１細胞応答を優先的に刺激できるアジュバントは国際特許出願ＷＯ９４／
００１５３及びＷＯ９５／１７２０９に記載されている。

【００２４】 ３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａ（３Ｄ−ＭＰＬ）は一のかかるアジ
ュバントである。これはＧＢ２２２０２１１（Ribi) により知られている。化学
的には、それは３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａと４，５又は６アシル
化鎖の混合物であり、そしてRibi Immunochem. Montanaにより製造されている。
３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａの好適な形態はヨーロッパ特許第０，
６８９，４５４ Ｂ１号（SmithKline Beecham Biologicals SA)に開示されてい
る。

【００２５】 好ましくは、３Ｄ−ＭＰＬの粒子は０．２２ミクロン膜で除菌濾過できるほど
に十分に小さい（ヨーロッパ特許第０，６８９，４５４号に記載の通り）。３Ｄ
−ＭＰＬは１回の投与当り１０μｇ〜１００μｇ、好ましくは２５〜５０μｇの
範囲で存在し、ここでこの抗原は一般に投与当り２〜５０μｇの範囲で存在する
であろう。

【００２６】 別の好適なアジュバントは、キノラジャ・サポナリア・モリナ（Quillaja Sap
onaria Molina)の樹皮に由来するＨＰＬＣ精製された無毒な画分、ＱＳ２１を含
んで成る。任意的に、これは３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａ（３Ｄ−
ＭＰＬ）と、任意的に担体と共に混合されている。

【００２７】 ＱＳ２１の製造方法は米国特許第５，０５７，５４０号に開示されている。

【００２８】 ＱＳ２１を含む非反応原性アジュバント製剤は過去に発表されている（ＷＯ９
６／３３７３９）。ＱＳ２１及びコレステロールを含んで成るかかる製剤は抗原
と共に調剤したときに有効なＴＨ１刺激性アジュバントとなると示されている。
かくして、本発明の一部を構成するワクチン組成物はＱＳ２１とコレステロール
との組合せを含みうる。

【００２９】 ＴＨ１細胞応答の優先的な刺激因子である更なるアジュバントには免疫調節オ
リゴヌクレオチド、例えばＷＯ９６／０２５５５に開示の非メチル化ＣｐＧ配列
が含まれる。

【００３０】 様々なＴＨ１刺激アジュバント、例えば上記のものの組合せも、ＴＨ１細胞応
答の優先的な刺激因子であるアジュバントの供与として考慮される。例えば、Ｑ
Ｓ２１は３Ｄ−ＭＰＬと一緒に調剤できうる。ＱＳ２１：３Ｄ−ＭＰＬの比は一
般に１：１０〜１０：１、好ましくは１：５〜５：１、そして往々にして実質的
に１：１の程度であろう。最適な相乗効果のために好適な範囲は２．５：１〜１
：１の３Ｄ−ＭＰＬ：ＱＳ２１である。

【００３１】 好ましくは、本発明に係るワクチン組成物の中には担体も入っていてよい。こ
の担体は水中油エマルション、又はアルミニウム塩、例えばリン酸アルミニウム
又は水酸化アルミニウムであってよい。

【００３２】 好適な水中油エマルションは代謝性油、例えばスクアレン、アルファートコフ
ェロール及びＴｗｅｅｎ ８０を含んで成る。更に、この水中油エマルションは
ｓｐａｎ ８５及び／又はレシチン及び／又はトリカプリリンを含んでよい。

【００３３】 特に好適な観点において、本発明に係るワクチン組成物中の抗原は３Ｄ−ＭＰ
Ｌ及びみょうばんと組合せる。

【００３４】 ヒトへの投与のために典型的には、ＱＳ２１及び３Ｄ−ＭＰＬはワクチンの中
に投与当り１μｇ〜２００μｇ、例えば１０〜１００μｇ、好ましくは１０μｇ
〜５０μｇの範囲で存在するであろう。典型的には水中油は２〜１０％のスクア
レン、２〜１０％のアルファートコフェロール及び０．３〜３％のＴｗｅｅｎ
８０を含んで成るであろう。好ましくは、スクアレン：アルファートコフェロー
ルの比は１以下とし、なぜならこれはより安定なエマルションを供するからであ
る。ｓｐａｎ ８５も１％のレベルで存在してよい。状況によっては、本発明の
ワクチンは安定剤を更に含むのが好都合でありうる。

【００３５】 無毒な水中油エマルションは好ましくは無毒な油、例えばスクアレン又はスク
アレン、乳化剤、例えばＴｗｅｅｎ ８０を水性担体中で含む。この水性担体は
例えばリン酸緩衝食塩水であってよい。

【００３６】 水中油エマルション中にＱＳ２１，３Ｄ−ＭＰＬ及びトコフェロールを包含す
る特に強力なアジュバント製剤はＷＯ９５／１７２１０に記載されている。

【００３７】 本発明の組成物中のＨＳＶ抗原は好ましくはＨＳＶ−２に由来し、典型的には
糖タンパク質Ｄである。糖タンパク質はウィルス膜上に位置し、そして感染細胞
の細胞質にも見い出せる（Eisenberg R. J. ら、J. of Virol 1980, 35, 428-43
5)。それはシグナルペプチドを含む３９３個のアミノ酸を含んで成り、そして約
６０kDの分子量を有する。ＨＳＶエンベロープ糖タンパク質全てのうち、おそら
くはこれがもっとも良く特性決定されている（Cohen ら、J. of Virology, 60,
157-166)。ｉｎ ｖｉｖｏで、それは細胞膜に対するウィルス結合において中心
的な役割を果たすことで知られている。更に、糖タンパク質Ｄはｉｎ ｖｉｖｏ
で中和抗体を誘導できることが示されている（Eingら、J. Med. Virology 127 :
59-65) 。しかしながら、潜伏性ＨＳＶ−２ウィルスは患者血清中の高い中和抗
体力価の存在にもかかわらず、未だ再活性化でき、そして病気の再発を誘導でき
る。

【００３８】 本発明の態様は３０８個のアミノ酸のトランケーション型ＨＳＶ−２糖タンパ
ク質Ｄであり、それは天然糖タンパク質のアミノ酸１〜３０６を含んで成り、こ
のトランケーション型タンパク質のＣ末端にアスパラギン及びグルタミンが追加
され、膜アンカー領域はない。この形態のタンパク質はシグナルペプチドを含み
、それが切断されて２８３個のアミノ酸の成熟タンパク質となる。チャイニーズ
ハムスター卵巣細胞中でのかかるタンパク質の生産がＧｅｎｅｎｔｅｃｈのヨー
ロッパ特許ＥＰ−Ｂ−１３９，４１７に記載されている。

【００３９】 この組換成熟ＨＳＶ−２糖タンパク質Ｄトランケーション体を本発明のワクチ
ン製剤に使用するのが好ましく、そしてそれをｒｇＤ２ｔと命名する。

【００４０】 この抗原とアジュバント３Ｄ−ＭＰＬとの組合せはＷＯ９２／１６２３１に記
載されている。

【００４１】 本発明の組成物中のＢ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）抗原は一般にＢ型肝炎表層抗
原である。

【００４２】 Ｂ型肝炎表層抗原（ＨＢｓＡｇ）の調製は十分に発表されている。例えば、Ha
rford ら、Develop. Biol. Standard 54, 第125 頁(1983)，Gregg ら、Biotechn
ology, 5, 第479 頁（1987),ＥＰＡ０，２２６，８４６、ＥＰＡ０，２９９，１
０８及びそれらの中の引用文献に記載されている。

【００４３】 本明細書の中で用いる表現「Ｂ型肝炎表層抗原」（略してＨＢｓＡｇ又はＨＢ
Ｓ）には、任意のＨＢｓＡｇ抗原又はＨＢＶ表層抗原の抗原性を示すそのフラグ
メントが含まれる。ＨＢｓＡｇＳ抗原の２２６個のアミノ酸配列に加えて（Tiol
laisら、Nature, 317, 489 (1985) 及びその中の引用文献）、本明細書に記載の
ＨＢｓＡｇは、所望するなら、上記の文献及びＥＰＡ０，２７８，９４０の中に
記載のプレーＳ配列生体又はその一部を含みうる。本明細書に記載のＨＢｓＡｇ
は変異体、例えばＷＯ９１／１４７０３に記載の「エスケープ突然変異体」を意
味することもある。更なる観点において、このＨＢｓＡｇは、ヨーロッパ特許出
願第０，４１４，３７４号に記載のタンパク質、即ち、Ｂ型肝炎ウィルス大型（
Ｌ）タンパク質（ａｄ又はａｙサブタイプ）のアミノ酸配列の一部から成り、ア
ミノ酸配列が： （ａ）当該Ｌタンパク質の残基１２−５２、次いで残基１３３−１４５、次い
で残基１７５−４００；又は （ｂ）当該Ｌタンパク質の残基１２、次いで残基１４−５２、次いで残基１３
３−１４５、次いで残基１７５−４００； のいずれかから成ることを特徴とするタンパク質を含んで成ってよい。

【００４４】 ＨＢｓＡｇはＥＰ０，１９８，４７４又はＥＰ０，３０４，５７８に記載のポ
リペプチドを意味してもよい。

【００４５】 通常、ＨＢｓＡｇは粒状の形態であろう。それはＳタンパク質だけを含んで成
るか、又は複合粒子、例えば（Ｌ^* Ｓ）（ここでＬ^* は前記の通りであり、そし
てＳはＢ型肝炎表層抗原のＳ−タンパク質を表わす）であってよい。

【００４６】 ＨＢｓＡｇはＷＯ９３／２４１４８に記載のようにリン酸アンモニウムに収着
させてよい。

【００４７】 好ましくは、本発明の製剤において使用されるＢ型肝炎（ＨＢＶ）抗原は商品
Ｅｎｇｅｒｉｘ−Ｂ（商標）（Smithkline Beecham Biologicals) に使用される
ＨＢｓＡｇＳ抗原である。

【００４８】 ３Ｄ−ＭＰＬと一緒にＢ型肝炎表層抗原を含んで成るワクチンはヨーロッパ特
許出願０，６３３，７８４号に記載されている。

【００４９】 ヘルペスウィルス群の構成員であるアプステインバーウィルス（ＥＢＶ）はヒ
トにおいて一次疾患としての感染性単球細胞症を惹起する。主に、それは子供又
は青年を冒かす。平均成人人口の９０％超がＥＢＶにより感染され、それは生存
の間末梢Ｂ−リンパ球の中で存続する。このウィルスは耳下腺内で長期にわたり
生産され、そして主としてそのウィルスを散布する個体からの唾液の交換により
拡布される。ＥＢＶに感染した子供はほとんどが無症候性であるか、又は極めて
温和な徴候を有し、一方感染した青年及び成人は発熱、咽頭炎及びアデノパシー
を特徴とする典型的な感染性単球細胞症を発症する。感染した者はその人生の残
りの間抗ＥＢＶ抗体を維持し、従って更なる感染に対して免疫されている。

【００５０】 感染性的性質の他に、ＥＢＶはリンパ球を急速分裂細胞へと形質転換せしめる
ことが示され、それ故アフリカバーキットリンパ腫（ＢＬ）等のいくつかの異な
るリンパ腫に関与していることが示されている。ＥＢＶは鼻咽頭癌腫（ＮＰＣ）
の惹起にも関与しうる。世界中で、８０，０００の鼻咽頭癌腫の症例が生じてい
ると推定され、そして中国系民族ではもっと広がっている。感染性単球細胞症は
ＥＢＶによる一次感染の結果である。それは更なる危険因子がなければ、生命を
脅かす疾患ではない。

【００５１】 いわゆる膜抗原複合体を構成するＥＢＶウィルスエンベロープの４種類のタン
パク質が発表されている。それらは通常ｇｐ２２０／３５０もしくはｇｐ２５０
／３５０、又は単にｇｐ２５０もしくは３５０と称されている（ＥＰＡ１５１０
７９を参照のこと）。ｇｐ３５０及びｇｐ２５０が中和抗体の生産を誘導し、ま
たｇｐ３５０及びｇｐ２５０に対する抗体が中和能力を有するという確証がある
。これらのタンパク質は可能なＥＢＶワクチンの候補である。ｇｐ２５０／３５
０のＥＢＶ関連疾患の予防及び治療の用途についての更なる情報については、Ｅ
Ｐ０，１７３，２５４を参照のこと。

【００５２】 主要ＥＢＶ表層糖タンパク質ｇｐ３５０／２２０は細胞膜タンパク質ＣＤ２１
との相互作用を介してヒト標的細胞に感染する。ｇｐ３５０／２２０はヒトにお
けるＥＢＶ中和抗体の主要標的であり、そしてｇｐ３５０／２２０のいくつかの
形態がＥＢＶ関連疾患に対する防御を示している。好ましくは、本発明に係るワ
クチン組成物はＥＢＶのｇｐ３５０を含んで成るが、その他の防御性抗原を使用
してもよい。

【００５３】 パピロマウィルスは小さなＤＮＡ腫瘍ウィルスであり、それは高度に種特異性
である。今までに７０超の個別のヒトパピロマウィルス（ＨＰＶ）ゲノタイプが
発表されている。ＨＰＶは一般に皮膚（例えばＨＰＶ−１及び−２）又は粘膜表
層（例えばＨＰＶ−６及び−１１）のいずれかに特異的であり、そして通常は何
か月も何年も存続する良性腫瘍（いぼ）の原因となる。かかる良性腫瘍は関連の
個体にとって不快ではありうるが、数例を除き、生命を脅かす傾向にはない。

【００５４】 いくつかのＨＰＶも癌に関連する。ＨＰＶとヒト癌との間の最も強い関係は、
ＨＰＶ−１６及びＨＰＶ−１８と頸部癌腫との間にあるものである。頸部癌は発
展途上国において最も多い悪性腫瘍であり、毎年世界中で約５００，０００の新
しい症例が発症している。ワクチンを用いて一次ＨＰＶ−１６感染症、そして更
には樹立したＨＰＶ−１６含有癌でさえも積極的に撲滅することが現在技術的に
可能である。ＨＰＶ−１６に対する予防及び治療的種痘の見込みについては、Ca
son J., Clin. Immunother. 1994 ; 1 (4) 293-306及びHagenesee M. E., Infec
tions in Medicine 1997 14 (7) 555-556, 559-564を参照のこと。好ましくは、
本発明に係るワクチン組成物は主要カスピドタンパク質、Ｌ１タンパク質を含ん
で成る。

【００５５】 今日、様々なタイプのＨＰＶが単離され、そして細菌中のクローニングシステ
ム、そしてより最近ではＰＣＲ増幅の助けにより特性決定されている。ＨＰＶゲ
ノムの分子統合は十分に特性決定された１型ウシパピロマウィルス（ＢＰＶ１）
のそれとの対比基準に基づき決定される。

【００５６】 ささいな変動はあるにしても、発表されているＨＰＶゲノムは全て少なくとも
７つの早期遺伝子、Ｅ１〜Ｅ７、並びに２つの後期遺伝子、Ｌ１及びＬ２を有す
る。更に、上流調節領域は調節配列を有し、それはＨＰＶゲノムのほとんどの転
写現象を調節するようである。

【００５７】 Ｅ１及びＥ２遺伝子はウィルスの複製及び転写の調節の各々に関与し、そして
ウィルスの組込みにより中断されがちである。Ｅ６及びＥ７、また最近の証拠が
示すにはＥ５もウィルス形質転換に関与する。頸部癌腫に関与するＨＰＶ、例え
ばＨＰＶ１６及び１８において、腫瘍形成過程はウィルスＤＮＡの組込みを経て
開始する。組込みはカスピドタンパク質Ｌ１及びＬ２をコードする遺伝子の不活
化をもたらし、また正常な細胞分化及び癌腫の発育の暫時的な低下に結びつく２
つの早期タンパク質Ｅ６及びＥ７の連続過剰発現を指令する。

【００５８】 頸部の癌腫は女性に一般的であり、そして前癌性中間段階から往々にして死に
至る侵襲癌腫へと進行する。この疾患の中間段階は頸部上皮内新形成として知ら
れ、そして症度の悪化の観点でＩ〜III へと等級分けされている。

【００５９】 臨床学的には、女性肛門性器管のＨＰＶ感染症は頸部扁平コンジロームとして
明示され、その目印は頸部扁平上皮の表層及び中間細胞を主に冒かす空胞細胞症
である。

【００６０】 ウィルスの細胞病理学的作用の結果である空胞細胞症は核周囲の透明な輪を有
する核細胞として出現する。その上皮細胞は厚みを帯び、いぼ状の損傷外観を担
う異常な角質化を伴う。

【００６１】 かかる扁平コンジロームはＨＰＶ１６又は１８血清型に対して陽性なら、それ
自身侵襲性頸部癌腫の前駆損傷であると認められている頸部上皮内新形成（ＣＩ
Ｎ）及び現場癌腫（ＣＩＳ）への進行のためのハイ−リスク因子である。

【００６２】 国際特許出願ＷＯ９６／１９４９６号はヒトパピロマウィルスのＥ６及びＥ７
タンパク質の変異体、特にこのＥ６及びＥ７タンパク質の双方において欠失を有
するＥ６／Ｅ７の融合タンパク質を開示する。このような欠失融合タンパク質は
免疫原性であると記載されている。

【００６３】 ＨＰＶ Ｌ１をベースとするワクチンがＷＯ９４／００１５２，ＷＯ９４／２
０１３７，ＷＯ９３／０２１８４及びＷＯ９４／０５７９２を開示されている。
かかるワクチンはＬ１抗原をモノマー、カプソマー又はウィルス様粒子として含
んで成りうる。かかる粒子は更にＬ２タンパク質を含んで成ってよい。その他の
ＨＰＶワクチンは早期タンパク質、例えばＥ７、又は融合タンパク質、例えばＬ
２−Ｅ７を基礎とする。

【００６４】 本発明のワクチンにおいて、Ｔ細胞エピトープを有する免疫学的融合パートナ
ーに連結されたＥ６又はＥ７タンパク質のいずれかを含んで成る組成物を利用す
るのが好ましい。

【００６５】 本発明の好適な形態において、この免疫学的融合パートナーはヘモフィルス・
インフルエンザ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）Ｂのタンパク
質Ｄに由来する。好ましくは、このタンパク質Ｄ誘導体はこのタンパク質の最初
の約１／３、特に最初のＮ末端約１００〜１１０個のアミノ酸を含んで成る。

【００６６】 従って、本発明は、一の態様において、上記のＨＰＶに由来する抗原を含んで
成る。好ましくは、本発明はＨＰＶ１６由来のタンパク質Ｄ−Ｅ６，ＨＰＶ１６
由来のタンパク質Ｄ−Ｅ７，ＨＰＶ１８由来のタンパク質Ｄ−Ｅ７、及びＨＰＶ
１８由来のタンパク質Ｄ−Ｅ６を含んで成る融合タンパク質を含んで成る。

【００６７】 本発明のタンパク質は好ましくはＥ．コリの中で発現させる。好適な態様にお
いて、これらのタンパク質は５〜９、好ましくは６個のヒスチジン残基を含んで
成るヒスチジンテールを伴って発現させる。これらは精製を助けるうえで有利で
ある。かかるタンパク質の製造の説明は同時係属中の英国特許出願ＧＢ９７１７
９５３．５に完全に記載されている。

【００６８】 好適な観点において、本発明のワクチン組成物は更にバリセラ・ゾスター（Ｖ
ａｒｉｃｅｌｌａ Ｚｏｓｔｅｒ）ウィルス抗原（ＶＺＶ抗原）を含んで成る。
ワクチン製剤の中に含ませるためのＶＺＶの適当な抗原にはLongneckerら、Proc
. Natl. Acad. Sci. USA 84, 4303-4307 (1987) に記載のｇｐＩ−Ｖが挙げられ
る。

【００６９】 好適な態様において、ｇｐＩ（Ellis ら、米国特許第４，７６９，２３９号を
参照）を使用する。ヨーロッパ特許第０，４０５，８６７ Ｂ１も参照のこと。

【００７０】 別の好適な観点において、本発明のワクチン組成物は更にヒトサイトメガロウ
ィルス（ＨＣＭＶ）抗原を含んで成る。ＨＣＭＶはヘルペスウィルス科に属する
ヒトＤＮＡウィルスである。ＨＣＭＶは世界中の大部分において固有となってい
る。２つの集団間で、ＨＣＭＶは重篤な医学的症状の原因となっている。ＨＣＭ
Ｖは新生児における先天性障害の主因である。危険性のある第二の集団は免疫無
防備患者、例えばＨＩＶ感染症に苦しむ者、及び移植を受けた患者である。この
臨床学的疾患は発熱、肝炎、肺炎及び感染性単球細胞症等の様々な症状を惹起す
る。ＨＣＭＶに対するワクチンに利用するための好適な抗原はＷＯ９５／３１５
５５に記載のｇＢ６８５である。ＨＣＭＶワクチンに利用するための免疫原も、
ＷＯ９４／００１５０（Ｈｏｐｅ市）に記載のＨＣＭＶマトリックスタンパク質
、ｐｐ６５により供されている。

【００７１】 一の好適な観点において、本発明のワクチン組成物は更にＶＺＶ及びＨＣＭＶ
抗原の双方、特に上記の抗原を含んで成る。

【００７２】 別の好適な観点において、本発明のワクチン組成物は更にトキソプラスマ・ゴ
ンジイイ抗原を含んで成る。トキソプラスマ・ゴンジイイは温血動物、例えばヒ
トにおけるトキソプラスマ症の原因となる偏性細胞内原虫寄生生物である。それ
は健康な個体では一般に臨床学的無症候であるが、トキソプラスマ症は妊婦及び
免疫無防備患者において重篤な併合症を惹起しうる。トキソプラスマ・ゴンジイ
イに対するワクチンにおいて利用するための好適な抗原はＷＯ９６／０２６５４
に記載のＳＡＧ１（Ｐ３０としても知られる）又はＷＯ９２／１１３６６に記載
のＴｇ３４である。

【００７３】 一の好適な観点において、本発明のワクチン組成物は更にトキソプラスマ・ゴ
ンジイイ抗原、特に上記の抗原と組合さったＶＺＶ抗原又はＨＣＭＶ抗原のいず
れかを含んで成る。

【００７４】 好適な観点において、本発明のワクチン組成物は多価ワクチン、例えば四価又
は五価ワクチンである。

【００７５】 本発明の製剤は防御免疫力を誘導するのに、たとえ極めて低い抗原用量（例え
ば５μｇのｒｇＤ２ｔはどの低さ）でさえも、極めて有効である。

【００７６】 これらは一次感染に対する優れた防御を供し、そして好都合には特異的な体液
免疫応答（中和抗体）、更にはエフェクター細胞媒介（ＤＴＨ）免疫応答を刺激
する。

【００７７】 本発明は更なる観点において医学療法において利用するため、特に単純ヘルペ
ス感染症及びＢ型肝炎ウィルス感染症の治療及び予防において利用するための本
明細書に記載のワクチン製剤を提供する。

【００７８】 本発明のワクチンは免疫学的防御量の抗原を含み、そして慣用の技術により調
製できうる。

【００７９】 ワクチン調製品は一般にPharmacentical Biotechnology, Vol.61 Vaccine Des
ign-the subunit and adjuvant approach, Power and Newman 編、Plenurn Pres
s, 1995 ; New Trends and Developments in Vaccines, Voller ら編、Universi
ty Park Press, Baltimore, Maryland, U. S. A. 1978 に記載されている。リポ
ソーム内への封入は例えばFullerton 、米国特許第４，２３５，８７７号に記載
されている。タンパク質の巨大分子への接合は例えばLikhite 、米国特許第４，
３７２，９４５号及びArmor ら、米国特許第４，４７４，７５７号に開示されて
いる。

【００８０】 各ワクチン剤型中のタンパク質の量は、典型的なワクチンにおいて有意に有害
な副作用なく免疫防御応答を誘導する量として選定される。かかる量はどの特異
的な免疫原を使用するかに依存して変わるであろう。一般に、各剤型は１〜１０
００μｇのタンパク質、好ましくは２〜１００μｇ、最も好ましくは４〜４０μ
ｇのタンパク質を含んで成るであろう。特定のワクチンについての最適な量は抗
体力価及び被検体におけるその他の応答の検討を包含する標準試験により確認で
きる。最初の種痘に続き、被検体に約４週間目においてブーストを与えてよい。

【００８１】 ＨＳＶ又はＨＢＶウィルス感染症にかかり易い者の種痘に加えて、本発明の医
薬組成物はかかるウィルス感染症に苦しむ患者を免疫療法学的に処置するために
利用できうる。

【００８２】 本発明の更なる観点において、本明細書に記載の製造方法を提供し、ここでこ
の方法はヘルペスウィルス抗原及びＢ型肝炎ウィルス抗原をＴＨ−１誘導アジュ
バント、例えば３Ｄ−ＭＰＬと、更には好ましくは担体、例えばみょうばんと混
合することを含んで成る。

【００８３】 所望するなら、本明細書に記載の多価ワクチン組成物を提供するため、他の抗
原を任意の好都合な順序で添加してよい。

【００８４】実施例１：ｇＤ＋ＨＢｓの組合せによる免疫原試験 この試験の目的はＡｌ（ＯＨ）₃ ／３Ｄ−ＭＰＬ製剤中のＨＳＶ ｇＤ／ＨＢ
Ｖ ＨＢｓ組合せの適性の実証にある。これらの抗原を単独で又は組合せて使用
して免疫することによりモルモットで誘導した免疫応答を比較した。ＨＢｓはＢ
型肝炎表層抗原、詳しくは上記のＳ−タンパク質の略語である。ｇＤは上記のｒ
ｇＤ₂ ｔの略語である。

【００８５】 実験プロトコール 実験プロトコールは以下の通りとした。６匹の雌Ｈａｒｔｌｅｙモルモットの
グループに下記の製剤を０日及び２８日目に筋肉内注射した： −グループ１：ＨＢｓ５μｇ／Ａｌ（ＯＨ）₃ １２５μｇ／３Ｄ−ＭＰＬ １２
．５μｇ −グループ２：ｇＤ５μｇ／Ａｌ（ＯＨ）₃ １２５μｇ／３Ｄ−ＭＰＬ １２．
５μｇ −グループ３：ＨＢｓ５μｇ＋ｇＤ５μｇ／Ａｌ（ＯＨ）₃ １２５μｇ／３Ｄ−
ＭＰＬ １２．５μｇ −グループ４：ＨＢｓ５μｇ＋ｇＤ５μｇ／Ａｌ（ＯＨ）₃ １２５μｇ／３Ｄ−
ＭＰＬ^* １２．５μｇ ＊異なる３Ｄ−ＭＰＬバッチ

【００８６】 動物から２回目の免疫の１４日及び３１日目に採血した。ＨＳＶ ｇＤ及びＨ
ＢＶ ＨＢｓに対する体液免疫応答をＥＬＩＳＡで両時点で評価した。

【００８７】 遅延型敏感（ＤＴＨ）反応もＨＢｓについて評価した。これらは１０μｇのＨ
Ｂｓの皮内注射から成り、二重測定で行った。ＤＴＨ反応の発生を注射してから
０，２４及び４８時間後を皮膚の厚みを測定することにより追跡した。

【００８８】 結果 １．抗体応答 抗−ｇＤ ＥＬＩＳＡ力価を図１に示す。ｇＤで免疫したグループにおける抗
−ｇＤ力価はｇＤ＋ＨＢｓの組合せで免疫した動物において誘導されたものと同
等であった。製剤中のＨＢｓの存在は抗−ｇＤ抗体応答の誘導に影響を及ぼさな
かった。

【００８９】 同様に、抗−ＨＢｓ抗体力価をＨＢｓ単独又はｇＤとの組合せで免疫した動物
において比較した。図２は同等な抗−ＨＢｓ力価がＨＢｓ単独又はＨＢｓ＋ｇＤ
で免疫した動物において観察されたことを示す。

【００９０】 結果を図１〜４に示し、それから試験した製剤、ｇＤ／ＨＢｓ組合せが、同抗
原を単独で利用することにより誘導された抗体応答を同等のそれ、及びＨＢｓ単
独により誘導されたＤＴＨ応答と同等のそれを誘導するものと考えられうる。従
って、ＤＴＨ応答、対、ＨＢｓにおける有意な差はＨＢｓ又はＨＢｓ＋ｇＤ種痘
動物において認められなかった。ｇＤの存在はＨＢｓに対するＤＴＨ応答に影響
を及ぼさなかった。

【００９１】実施例２：ＰＲＯ３０実験 ＨＢＶ／ＨＳＶの組合せ この試験の目的はＨＳＶモルモットモデルにおいて、３Ｄ−ＭＰＬ／みょうば
ん製剤中のｇＤ単独との対比における、３Ｄ−ＭＰＬ／みょうばん製剤中のＨＳ
Ｖ ｇＤ＋ＨＢＶ ＨＢｓ組合せの防御効能を検討することにある。３Ｄ−ＭＰ
Ｌ／みょうばん製剤は１０重量部のみょうばん、対、１重量部の３Ｄ−ＭＰＬを
含んで成る。

【００９２】 実験プロトコール １２匹の雌のＨａｒｔｌｅｙモルモットのグループを下記の製剤で免疫するか
、又は未処置のままとした。

【００９３】

【表１】

【００９４】 動物を０日及び２８日目にて２回筋肉内免疫した。それらは１０⁵ pfu のＨＳ
Ｖ２ ＭＳ株（１００μｌ）を５７日目において膣内負荷し（２回目の免疫の１
ヶ月後）、次いで一次疾患（感染後４〜１２日）及び再発性疾患（感染後１３〜
３９日）の臨床的徴候を毎日追跡した。誘導される防御は表１に記載の厳格な基
準に従い、且つ累積採点曲を介して測定した。

【００９５】 第II免疫後１４日及び２８日目において集めた血清をその抗−ｇＤ ＥＬＩＳ
Ａ Ａｂ力価（ＥＵ／mlとして表示）についても試験した；第II免疫後２８日目
において獲得した血清をそのＨＳＶ中和活性についても試験した（「ＮＥＵＴＲ
Ａ」；ＨＳＶ２に対して１００％の防御を供する血清希釈率の逆数に相当する力
価）。

【００９６】 結果血清学的結果： 免疫原データを下記の表及び図５に示す。

【００９７】

【表２】

【００９８】 似たようなＥＬＩＳＡ及び中和力価が３Ｄ−ＭＰＬ／みょうばん製剤中のｇＤ
（５μｇ）＋ＨＢｓ（５μｇ）の組合せ及びｇＤ／３Ｄ−ＭＰＬ／みょうばん製
剤によって誘導された。

【００９９】一次疾患に対する防御 図６（累積採点曲線）及び以下の表１に示すように、ｇＤ＋ＨＢｓ／３Ｄ−Ｍ
ＰＬ／みょうばん併合製剤は一次疾患に対し、３Ｄ−ＭＰＬ／みょうばん製剤中
のｇＤのみを同じぐらいに良好な防御を供した。

【０１００】再発性疾患に対する防御 ヘルペスの再発に対する防御を図７（累積採点曲線）及び以下の表２に示す。
ｇＤ＋ＨＢｓ／３Ｄ−ＭＰＬ／みょうばん併合製剤は再発性疾患に対し、３Ｄ−
ＭＰＬ／みょうばん製剤中のｇＤのみと同じぐらいに良好な防御を供した。

【０１０１】 ｇＤ＋ＨＢｓ及びｇＤのみのグループでは同じぐらいの数の動物において再発
があった。正確には、これらのグループにおける同数の動物が観察期間（負荷後
１３〜３９日目）の間に１回より多く再発した。再発したこれらの動物において
、同等の損傷症度が記録された。

【０１０２】

【表３】

【０１０３】

【表４】 実施例３： この試験の目的はアルミニウム塩及び３Ｄ−ＭＰＬと共に調合したＨＡＶ，Ｈ
Ｂｓ及びｇＤを含んで成る併合ワクチンによりマウスで誘導した血清学免疫応答
の検討にある。本実施例において用いたＡ型肝炎成分（「ＨＡＶ」と略す）はＨ
ａｒｖｉｘの中に入っているＨＭ１７５株とした。

【０１０４】 材料及び方法 抗原／３Ｄ−ＭＰＬバッチ ＨＢｓ：Ａｌ：４５５０μｇ／ml、予備収着化ＨＢｓ：２２７，６２μｇ／ml ＨＡＶ：Ａｌ：１３８０μｇ／ml、ＨＡＶ：２５２３０ＥＵ／ml ｇＤ：４９３μｇ／ml ３Ｄ−ＭＰＬ：９５７μｇ／ml調合工程 ・グループ１：ＨＢｓ ＡｌＰＯ₄ ／３Ｄ−ＭＰＬ ＨＢｓ／Ｈ₂ Ｏ／ＮａＣｌ／フェノキシ／ＡｌＰＯ₄ を１５min ＋３Ｄ−ＭＰＬ
を１hr ・グループ２：ｇＤ ＡｌＯＨ₃ ／３Ｄ−ＭＰＬ Ｈ２Ｏ／ＡｌＯＨ₃ を５min ＋ｇＤを１５min ＋３Ｄ−ＭＰＬを３０min ＋ＰＢ
Ｓを１５min ＋フェノキシ ・グループ３：ＨＡＶ ＡｌＯＨ₃ ／３Ｄ−ＭＰＬ Ｈ₂ Ｏ／ＮａＣｌ／Ｐｈｅｎｏｘｙを５min ＋ＡｌＯＨ₃ ／ＨＡＶを３０min ／
３Ｄ−ＭＰＬ ・グループ４： １．Ｈ₂ Ｏ／ＮａＣｌ／フェノキシを５min ＋ＡｌＰＯ₄ ／ＨＢｓを５min ＋３
Ｄ−ＭＰＬを３０min ２．ｇＤ／ＡｌＯＨ₃ を１５min ＋３Ｄ−ＭＰＬを３０min １及び２を２０min 混合＋ＨＡＶを１hr混合。

【０１０５】血清学測定 ・抗ＨＢｓ及び抗ｇＤ抗体の定量は被覆抗原としてＨＢｓ又はｇＤを用いるＥＬ
ＩＳＡにより実施した。抗原及び抗体の溶液はウェル当り５０μｌで使用した。
抗原をＰＢＳの中で１μｇ／mlの最終濃度を希釈し、そして４℃にて一夜かけて
９６穴マイクロタイタープレート（Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Denmark) の
ウェルに収着させた。次いでのプレートを３７℃で１hr、１％の半血清アルブミ
ン及び０．１％のＴｗｅｅｎ ２０を含むＰＢＳ（飽和バッファー）とインキュ
ベーションした。飽和バッファー中の２倍希釈率の血清を抗原被覆プレートに加
え、そして３７℃で１時間３０分インキュベーションした。これらのプレートを
ＰＢＳ ０．１％ Ｔｗｅｅｎ ２０及び飽和バッファー中に１／１０００に希
釈したビオチン接合抗マウスＩｇＧ（Ａｍｅｒｓｈａｍ，ＵＫ）で４回洗った。
洗浄工程の後、飽和バッファーに１／５０００又は１／１０００に希釈した（Ｈ
Ｂｓ及び抗ｇＤ ＥＬＩＳＡ各々）ストレプトアビジン−ビオチニル化ペルオキ
シダーゼ複合体（Ａｍｅｒｓｈａｍ）を更に３０分、３７℃で加えておいた。プ
レートを上記の通りにして洗浄し、そして０．１％のＴｗｅｅｎ ２０、０．０
５Ｍのクエン酸バッファー、pH４．５中のＯ−フェニレンジアミン（Ｓｉｇｍａ
）０．０４％，Ｈ₂ Ｏ₂ ０．０３％の溶液と２０分インキュベーションした。反
応をＨ₂ ＳＯ₄ ２Ｎで止め、そして４９２／６２０nmで測定を行った。ＥＬＩＳ
Ａ力価はＳｏｆｔｍａｘＰｒｏにより対照から計算し（４通りのパラメーター式
を利用し）、そしてＥＵ／mlで表示する。

【０１０６】 ・抗ＨＡＶ抗体の定量はＥｎｚｙｍｕｎ ＥＬＩＳＡ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ）
により、その製造者のプロトコールに従って実施した。

【０１０７】 実験プロトコール ７匹のＢａｌｂ／Ｃマウスのグループを下記の製剤で筋肉内免疫した（ヒト用
量の１／１０に相当）： １．ＨＢｓ（２μｇ）／ＡｌＰＯ４（５０μｇ）／３Ｄ−ＭＰＬ（５μｇ） ２．ｇＤ（２μｇ）／Ａｌ（ＯＨ）３（５０μｇ）／３Ｄ−ＭＰＬ（５μｇ） ３．ＨＡＶ（７２ＥＵ）／Ａｌ（ＯＨ）３（５０μｇ）／３Ｄ−ＭＰＬ（５μｇ
） ４．ＨＡＶ（７２Ｕ）／Ａｌ（ＯＨ）３（５μｇ）＋ＨＢｓ（２μｇ）／ＡｌＰ
Ｏ４（４０μｇ）／３Ｄ−ＭＰＬ（２．５μｇ）＋ｇＤ（２μｇ）／Ａｌ（ＯＨ
）３（５μｇ）／３Ｄ−ＭＰＬ（２．５μｇ）

【０１０８】 動物を０及び２１日目に５０mlのワクチンで２回免疫した。血清を免疫後様々
な時点で集め（第Ｉ免疫の２１日後（２１ｐｏｓｔ Ｉ）及び第II免疫の１４日
後（１４ｐｏｓｔ II））、そしてその抗ＨＡＶ，ＨＢｓ及びｇＤ抗体力価につ
いて試験した。

【０１０９】 結果 第Ｉ免疫の２１日後及び第II免疫の１４日後の個々のデータ−を表３に示し、
そして以下にまとめる。

【０１１０】

【表５】

【０１１１】

【表６】

【０１１２】

【表７】

【０１１３】

【表８】

【０１１４】 所見 ・併合ワクチンとアルミニウム塩及び３Ｄ−ＭＰＬ含有ＨＢｓワクチンとにおい
て同等の抗−ＨＢｓ抗体力価が観察された。 ・併合ワクチンとアルミニウム塩及び３Ｄ−ＭＰＬ含有ｇＤワクチンとにおいて
同等の抗−ｇＤ抗体力価が観察された。 ・併合ワクチンとアルミニウム塩及び３Ｄ−ＭＰＬ含有ＨＡＶワクチンとにおい
て同等の抗−ＨＡＶ抗体力価が観察された。

【０１１５】 従って、ＨＢｓ，ｇＤ及びＨＡＶをアルミニウム塩及び３Ｄ−ＭＰＬ含有ワク
チンの中で組合せたとき、干渉は認められなかった。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年３月１日（２０００．３．１）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００６

【補正方法】変更

【補正内容】

【０００６】 青年が特にかかり易い疾患を予防するのに有効な併合ワクチンのニーズがある
。 ＷＯ−Ａ−９２ １１２９１には第一ポリペプチドを含んで成る免疫原性ハイ
ブリドポリペプチドが記載され、かかる第一ポリペプチドはＨＳＶのｇＤの如き
第二ポリペプチドに対してこの第一ポリペプチドにおける自然硫黄原子を介して
共有結合したＢ型肝炎表層抗原である。

【手続補正３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１４】 ヨーロッパ特許ＥＰ−Ｂ−０，３３９，６６７号（Ｃｈｅｍｏ Ｓｅｒｏ）に
はＡ型肝炎抗原とＢ型肝炎抗原とを組合せて併合ワクチンを作製する一般的な概
念が記載されている。この明細書には、使用するアジュバンドは重要でない旨記
載されている。それには免疫活性を所望の程度にまで高めることができ、且つ任
意の副作用を及ぼさないものでなくてはならないとしか記載されていない。アル
ミニウムゲル、特に水酸化アルミニウムゲル及びリン酸アルミニウムゲルを使用
してよい旨記載されている。

【手続補正４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２４】 ３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａ（３Ｄ−ＭＰＬ）は一のかかるアジ
ュバントである。これはＧＢ２２２０２１１（Ribi) により知られている。化学
的には、それは３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａと４，５又は６アシル
化鎖の混合物であり、そしてRibi Immunochem. Montanaにより製造されている。
３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａの好適な形態はヨーロッパ特許ＥＰ−
Ｂ−０，６８９，４５４ Ｂ１号（Smithkline Beecham Biologicals SA)に開示
されている。

【手続補正５】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３２

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３２】 好適な水中油エマルションは代謝性油、例えばスクアレン、アルファートコフ
ェロール及びＴｗｅｅｎ ８０（商標）を含んで成る。更に、この水中油エマル
ションはｓｐａｎ ８５及び／又はレシチン及び／又はトリカプリリンを含んで
よい。

【手続補正６】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４８

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４８】 ３Ｄ−ＭＰＬと一緒にＢ型肝炎表層抗原を含んで成るワクチンはヨーロッパ特
許出願ＥＰ−Ａ−０，６３３，７８４号に記載されている。

【手続補正７】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００６９

【補正方法】変更

【補正内容】

【００６９】 好適な態様において、ｇｐＩ（Ellis ら、米国特許第４，７６９，２３９号を
参照）を使用する。ヨーロッパ特許ＥＰ−Ｂ−０，４０５，８６７ Ｂ１も参照
のこと。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，Ｇ Ｈ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 ウェッテンドルフ，マルティーヌ アンヌ スシル ベルギー国，ベ−1330 リクサンサール， リュ ドゥ ランスティテュ 89，スミス クライン ビーチャム バイオロジカルズ ソシエテ アノニム Ｆターム(参考） 4C085 AA03 BA02 BA76 BA78 BA88 BA89 CC08 EE03 EE06 FF02 FF11 4H045 AA30 CA01 CA02 CA03 CA20 DA86 EA31

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （ａ）Ｂ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）抗原；及び （ｂ）単純ヘルペスウィルス（ＨＳＶ）抗原を、 ＴＨ１細胞応答の優先的刺激因子であるアジュバントと一緒に含んで成るワク
   チン組成物。
2. 【請求項２】 担体を更に含んで成る、請求項１記載のワクチン組成物。
3. 【請求項３】 前記ＴＨ１−細胞応答の優先的刺激因子が３Ｄ−ＭＰＬ，Ｑ
   Ｓ２１，ＱＳ２１とコレステロールとの混合物、及びＣｐＧオリゴヌクレオチド
   を含んで成るアジュバントの群から選ばれ、ここで当該３Ｄ−ＭＰＬの粒子の大
   きさは好ましくは約１００nm又はそれ未満である、請求項１又は２記載のワクチ
   ン組成物。
4. 【請求項４】 前記ＴＨ１−細胞応答の優先的刺激因子が３Ｄ−ＭＰＬであ
   る、請求項３記載のワクチン組成物。
5. 【請求項５】 前記Ｂ型肝炎抗原がＢ型肝炎表層抗原である、請求項１〜４
   のいずれか１項記載のワクチン組成物。
6. 【請求項６】 前記ＨＳＶ抗原がＨＳＶ２ｇＤ又はそのトランケーション体
   である、請求項１〜５のいずれか１項記載のワクチン組成物。
7. 【請求項７】 ＥＢＶ抗原が追加的に存在する、請求項１〜６のいずれか１
   項記載のワクチン組成物。
8. 【請求項８】 前記ＥＢＶ抗原がｇｐ３５０である、請求項７記載のワクチ
   ン組成物。
9. 【請求項９】 Ａ型肝炎抗原が追加的に存在する、請求項１〜６のいずれか
   １項記載のワクチン組成物。
10. 【請求項１０】 前記ＨＡＶ抗原がＨＭ−１７５株に由来する、請求項９記
    載のワクチン組成物。
11. 【請求項１１】 ヒトパピロマウィルス（ＨＰＶ）抗原が追加的に存在する
    、請求項１〜６のいずれか１項記載のワクチン組成物。
12. 【請求項１２】 前記ＨＰＶ抗原がＬ１，Ｌ２，Ｅ６，Ｅ７，Ｄ−Ｅ６タン
    パク質、Ｄ−Ｅ７タンパク質又はＬ２−Ｅ７のうちの１又は複数から選ばれる、
    請求項１１記載のワクチン組成物。
13. 【請求項１３】 前記担体が水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム及び
    トコフェノール、並びに水中油エマルションを含んで成る群から選ばれる、請求
    項１〜１２のいずれか１項記載のワクチン組成物。
14. 【請求項１４】 ＶＺＶ抗原を更に含んで成る、請求項１〜１３のいずれか
    １項記載のワクチン組成物。
15. 【請求項１５】 前記ＶＺＶ抗原がｇｐＩである、請求項１４記載のワクチ
    ン組成物。
16. 【請求項１６】 ＨＣＭＶ抗原を更に含んで成る、請求項１〜１５のいずれ
    か１項記載のワクチン組成物。
17. 【請求項１７】 前記ＨＣＭＶ抗原がｇＢ６８５^**又はｐｐ６５である、請
    求項１６記載のワクチン組成物。
18. 【請求項１８】 トキソプラスマ・ゴシジイイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇ
    ｏｎｄｉｉ）抗原を更に含んで成る、請求項１〜１７のいずれか１項記載のワク
    チン組成物。
19. 【請求項１９】 前記トキソプラスマ・ゴンジイ抗原がＳＡＧ１又はＴＧ３
    ４である、請求項１８記載のワクチン組成物。
20. 【請求項２０】 ＨＢｓＡｇＳ抗原及びＨＳＶ２ｇＤｔと、任意的に更にＥ
    ＢＶｇｐ３５０；ＶＺＶｇｐ１；ＨＡＶ ＨＭ−１７５不活化株；ＨＰＶのＬ１
    ，Ｌ２，Ｅ６，Ｅ７，Ｄ−Ｅ６タンパク質、Ｄ−Ｅ７タンパク質もしくはＬ２−
    Ｅ７；ＨＣＭＶのｇＢ６８５^**もしくはｐｐ６５、又はトキソプラスマ・ゴンジ
    イイのＳＡＧ１もしくはＴＧ３４−抗原のうちの１又は複数とを含んで成る、請
    求項１〜４のいずれか１項記載のワクチン組成物。