JP2002223795A - 液状カタラーゼの安定化法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】安定剤を併用することなく、保存安定性の高い
液状カタラーゼを得る。 【解決手段】カタラーゼ水溶液、特に「カタラーゼを含
有する、液状の、生化学診断用試薬」に、メチルアルコ
ールを添加する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は液状カタラーゼの安
定化法に関する。特にカタラーゼを含有する、液状の、
生化学診断用試薬の安定化法に関する。

【０００２】

【従来の技術】カタラーゼは、過酸化水素を分解し水と
酸素を生成せしめる作用をもつ酵素のひとつで、医学分
野では、血液（血清）、尿、唾液などの生物学的試料
（体液）に存在する分析対象物から過酸化水素を生成
し、生成した過酸化水素を測定することにより、分析対
象物を検出し生化学診断する方法において、該分析対象
物以外の物質（妨害物質）に由来する過酸化水素を過酸
化水素消去試薬を用いて消去した後、分析対象物を検出
する方法の、該過酸化水素消去試薬として広く用いられ
ている。また食品分野、その他の工業分野などにおいて
も、このカタラーゼの過酸化水素分解能を利用すること
が盛んに行われている。

【０００３】しかし、カタラーゼは水溶液中では、非常
に不安定である欠点を有している。従来、液状カタラー
ゼの安定化法として、１）カタラーゼ水溶液に対して、
グリセリン１５〜２０％（Ｖ／Ｖ）、クエン酸ソーダ４
〜６％（Ｗ／Ｖ）、エチルアルコール３〜８％（Ｖ／
Ｖ）及び食塩５〜１０％（Ｗ／Ｖ）が同時に存在するよ
うに添加する、安定化された液状カタラーゼの製造法
（特公昭５５−７２３４参照）、２）カタラーゼを、２
０％（Ｗ／Ｗ）以上のエチルアルコールと５％（Ｗ／
Ｗ）以上の糖アルコールを含む水溶液に溶解し、安定な
カタラーゼ溶液を得る方法(特公昭６２-５５８３６参
照)、および３）カタラーゼ水溶液に対し、塩化アンモ
ニウム０．５〜５％、エタノール１〜２％およびクエン
酸ナトリウム１〜３％を添加する液状カタラーゼの安定
法（特公平３−５８７１０参照）などが知られている。

【０００４】これらの方法は、エタノールと他の安定剤
を組合わせて液状カタラーゼの安定化を図るものであ
り、メチルアルコールを単独で使用して液状カタラーゼ
を安定化することは記載されていない。また、これらの
方法は、エチルアルコール以外に他の安定剤の併用を余
儀なくされている。すなわち、上記１）の方法では、グ
リセリン、クエン酸ソーダおよび食塩を、また２）の方
法では、ソルビトール、マルチトール又はマニトールな
どの糖アルコールを、そして３）の方法では、塩化アン
モニウムおよびクエン酸ナトリウムを、それぞれ併用し
て添加することを余儀なくされている。したがって、こ
れらの方法は、液状カタラーゼの調製操作が煩雑にな
り、また最も重要なことであるが、液状カタラーゼに含
まれる安定剤の成分の種類および濃度が多くなると、該
液状カタラーゼを生化学診断用試薬などで利用する際、
影響が大きくなり、測定の精度が低下したり、また測定
値の信頼性が低下したりする危険性を有する。

【０００５】

【本発明が解決しようとする課題】従って、本発明は、
安定剤を併用することなく、保存安定性の高い液状カタ
ラーゼを得ること目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するため種々検討を重ねた結果、カタラーゼ水溶
液に対し、メチルアルコールを添加した場合、メチルア
ルコール以外に他の安定剤を使用することなく、安定な
カタラーゼ水溶液を得ることを知り、この知見に基づい
て本発明を完成した。即ち、本発明は、カタラーゼ水溶
液に対し、メチルアルコールを添加することを特徴とす
る液状カタラーゼの安定化法である。

【０００７】

【実施の態様】本発明で用いるカタラーゼとしては、動
植物起源及び微生物起源の任意のカタラーゼが挙げられ
る。

【０００８】本発明のカタラーゼ水溶液としては、カタ
ラーゼを含有する溶液であれば、特に制限はなく如何な
る性状を有する溶液でも適用される。具体的には、カタ
ラーゼを水又は緩衝液に溶解して得られる液状カタラー
ゼおよび従来公知の、カタラーゼを含有する、液状の、
生化学診断用試薬、例えば１）カタラーゼを含有する、
液状の、トリグセライド測定試薬、２）同、ＬＤＬ（lo
w-density lipoprotein）コレステロール測定試薬、
３）同、クレアチニン測定試薬、４）同、尿素窒素（Ur
ea Nitrogen）測定試薬、５）同、コレステロールエス
テル測定試薬、６）同、リン脂質測定試薬、７）同、無
機リン測定試薬、８）同、ＧＰＴ測定試薬および９）
同、α−アミラーゼ測定試薬などが挙げられる。

【０００９】カタラーゼを含有する、液状の、生化学診
断用試薬の具体例を以下に示す。

【００１０】 １）カタラーゼを含有する、液状の、
生化学診断用測定試薬（第１試薬） 体液（血液、血清、尿、唾液などの生物学的試料）に含
まれる妨害物質に作用して過酸化水素を生成する酵素ま
たは該妨害物質に由来する物質に作用して過酸化水素を
生成する酸化酵素およびカタラーゼを含有する第１試薬
および体液の測定成分に作用して妨害物質を生成する酵
素、該妨害物質または該妨害物質に由来する物質に作用
して過酸化水素を生成する酵素、ペルオキシダーゼおよ
び色原体を含有する第２試薬からなる生化学診断用測定
試薬において用いる、該「カタラーゼを含有する、液状
の、生化学診断用測定試薬（第１試薬）」が挙げられ
る。

【００１１】２）カタラーゼを含有する、液状の、トリ
グリセライド測定試薬 体液のトリグリセライドを測定するに当たり、体液に含
まれるグリセリンに、「カタラーゼを含有する、液状
の、トリグリセライド測定試薬（グリセロールキナー
ゼ、グリセロール−３−リン酸オキシダーゼおよびカタ
ラーゼを含有する）」を作用させて、グリセリンから生
成した過酸化水素を消去した後、次いで体液のトリグリ
セライドにリポプロテインリパーゼ、グリセロールキナ
ーゼ、グルセロール−３−リン酸オキシダーゼ、ペルオ
キシダーゼおよび色原体を作用させて、トリグリセライ
ドからグリセリンを生成させ、グリセリンからグリセロ
ール−３−リン酸を生成させ、グリセロール−３−リン
酸から過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を発色させ
た後、その発色強度を測定することにより、前記体液の
トリグリセライドを測定する方法において用いる、「カ
タラーゼを含有する、液状の、トリグリセライド測定試
薬」が挙げられる。

【００１２】３）カタラーゼを含有する、液状の、ＬＤ
Ｌコレステロール測定試薬 体液のＬＤＬコレステロールを測定するに当たり、体液
に含まれるＬＤＬ以外のリポ蛋白に、「カタラーゼを含
有する、液状の、ＬＤＬコレステロール測定試薬（コレ
ステロールエステラーゼ、コレステロールオキシダー
ゼ、界面活性剤（ポリオキシエチレン誘導体）及びカタ
ラーゼを含有する）」を作用させて、ＬＤＬ以外のリポ
蛋白から生成した過酸化水素を消去した後、次いで体液
のＬＤＬコレステロールにコレステロールエステラー
ゼ、コレステロールオキシダーゼ、非イオン性界面活性
剤を作用させ、過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を
発色させた後、その発色強度を測定することにより前記
体液のＬＤＬコレステロールを測定する方法において用
いる、該「カタラーゼを含有する、液状の、ＬＤＬコレ
ステロール測定試薬」が挙げられる。

【００１３】４）カタラーゼを含有する、液状の、クレ
アチニン測定試薬 体液のクレアチニンを測定するに当たり、体液に含まれ
るクレアチンに、「カタラーゼを含有する、液状の、ク
レアチニン測定試薬（クレアチンアミジノヒドラーゼ、
ザルコシンオキシダーゼ、カタラーゼを含有する）」を
作用させ、クレアチンから生成した過酸化水素を消去し
た後、次いで体液のクレアチニンにクレアチニンアミド
ヒドラーゼ、クレアチンアミジノヒドラーゼ、ザルコシ
ンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ及び色原体を作用さ
せて、クレアチニンからクレアチンを生成させ、クレア
チンからザルコシンを生成させ、ザルコシンから過酸化
水素を生成させ、該過酸化水素を発色させた後、その発
色強度を測定することにより前記体液のクレアチニンを
測定する方法において用いる、該「カタラーゼを含有す
る、液状の、クレアチニン測定試薬」があげられる。

【００１４】５）カタラーゼを含有する、液状の、尿素
窒素測定試薬 体液の尿素窒素（ＵＮ）を測定するに当たり、体液に含
まれるピルビン酸に「カタラーゼを含有する、液状の、
尿素窒素測定試薬（ピルビン酸オキシダーゼおよびカタ
ラーゼを含有する）」を作用させて、ピルビン酸から生
成した過酸化水素を消去した後、次いで体液の尿素窒素
にＡＴＰ−hydorolysing型ウレアーゼ（ＵＲＬ）、フォ
スフォエノールピルビン酸カリウム塩（ＰＥＰ）、ピル
ビン酸キナーゼを作用させ、ピルビン酸を生成させ、さ
らに、ピルビン酸は、ピルビン酸オキシダーゼ（ＰＯＰ
Ｇ）から過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を発色さ
せた後、その発色強度を測定することにより体液の尿素
窒素を測定する方法において用いる、該「カタラーゼを
含有する、液状の、尿素窒素測定試薬」が挙げられる。

【００１５】６）カタラーゼを含有する、液状の、コレ
ステロールエステル測定試薬 体液のコレステロールエステルを測定するに当たり、体
液に含まれるコレステロールに「カタラーゼを含有す
る、液状の、コレステロールエステル測定試薬（コレス
テロールオキシダーゼおよびカタラーゼを含有する）」
を作用させて、コレステロールから生成した過酸化水素
を消去した後、次いで体液のコレステロールエステルに
リパーゼ、コレステロールオキシダーゼ、ペルオキシダ
ーゼおよび色原体を作用させて、コレステロールエステ
ルからコレステロールを生成させ、コレステロールから
過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を発色させた後、
その発色強度を測定することにより体液のコレステロー
ルエステルを測定する方法において用いる、該「カタラ
ーゼを含有する、液状の、コレステロールエステル測定
試薬」が挙げられる。

【００１６】７）カタラーゼを含有する、液状の、リン
脂質測定試薬 体液のリン脂質を測定するに当たり、体液に含まれるコ
リンに「カタラーゼを含有する、液状の、リン脂質測定
試薬（コリンオキシダーゼおよびカタラーゼを含有す
る）」を作用させて、コリンから生成した過酸化水素を
消去した後、次いで体液のリン脂質にホスフォリパーゼ
Ｄ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼおよび色原
体を作用させて、リン脂質からコリンを生成させ、コリ
ンから過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を発色させ
た後、その発色強度を測定することにより体液のリン脂
質を測定する方法において用いる、該「カタラーゼを含
有する、液状の、リン脂質測定試薬」が挙げられる。

【００１７】８）カタラーゼを含有する、液状の、無機
リン測定試薬 体液の無機リンを測定するに当たり、体液に含まれるヒ
ポキサンチンに「カタラーゼを含有する、液状の、無機
リン測定試薬（キサンチンオキシダーゼおよびカタラー
ゼを含有する）」を作用させて、ヒポキサンチンから生
成した過酸化水素を消去した後、次いで体液の無機リン
にイノシンおよびプリンヌクレオチドフォスフォリラー
ゼ、キサンチンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼおよび
色原体を作用させて、無機リンからヒポキサンチンを生
成させ、ヒポキサンチンから過酸化水素を生成させ、該
過酸化水素を発色させた後、その発色強度を測定するこ
とにより体液の無機リンを測定する方法において用い
る、該「カタラーゼを含有する、液状の、無機リン測定
試薬」が挙げられる。

【００１８】９）カタラーゼを含有する、液状の、ＧＰ
Ｔ測定試薬 体液のGlutamic Pyruvic Transaminase（ＧＰＴ）を
測定するに当たり、体液に含まれるピルビン酸に「カタ
ラーゼを含有する、液状の、ＧＰＴ測定試薬（ピルビン
酸オキシダーゼおよびカタラーゼを含有する）」を作用
させて、ピルビン酸から生成した過酸化水素を消去した
後、次いで体液のＧＰＴにＬ−アラニン、α−ケトグル
タル酸、ピルビン酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼお
よび色原体を作用させて、ＧＰＴからピルビン酸を生成
させ、ピルビン酸から過酸化水素を生成させ、該過酸化
水素を発色させた後、その発色強度を測定することによ
り体液のＧＰＴを測定する方法において用いる、該「カ
タラーゼを含有する、液状の、ＧＰＴ測定試薬」が挙げ
られる。

【００１９】１０）カタラーゼを含有する、液状の、α
−アミラーゼ測定試薬 体液のα−アミラーゼを測定するに当たり、体液のグル
コースに「カタラーゼを含有する液状の、α−アミラー
ゼ測定試薬（グルコースオキシダーゼおよびカタラーゼ
を含有する）」を作用させて、グルコースから生成した
過酸化水素を消去した後、次いで体液のα−アミラーゼ
にアミラーゼ基質、グルコースオキシダーゼ、ペルオキ
シダーゼおよび色原体を作用させて、α−アミラーゼか
らグルコースを生成させ、グルコースから過酸化水素を
生成させ、該過酸化水素を発色させた後、その発色強度
を測定することにより体液のα−アミラーゼを測定する
方法において用いる、該「カタラーゼを含有する、液状
の、α−アミラーゼ測定試薬」が挙げられる。

【００２０】本発明は、カタラーゼ水溶液に対し、メチ
ルアルコールを添加する事を最も特徴としている。本発
明においてこの点は極めて重要な点であり、他のアルコ
ール、例えば、エチルアルコールを用いる場合は、他の
安定剤の併用を余儀なくされる。これに対し、メチルア
ルコールの場合は、他の安定剤を併用することなくカタ
ラーゼを安定化させることが出来る。メチルアルコール
濃度は、０．００５〜３．０％（以下、メチルアルコー
ル濃度は、Ｖ／Ｖ％を意味する）が好ましく、０．０１
〜２．０％がより好ましい。本発明によれば、「カタラ
ーゼを含有する、液状の、各種の生化学診断用試薬」、
を３５℃または４２℃にて保存した場合、該カタラーゼ
残存活性を、少なくとも１０日間、６０％以上に保持す
ることが可能となる。

【００２１】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明の効果をより具
体的に説明する。

【００２２】実施例１ （保存安定性の高い液状カタラーゼの調製例）５０ｍＭ
リン酸二水素カリウム−リン酸水素二カリウム（ｐＨ
７．０）にカタラーゼ ５００Ｕ／ｍｌを含有する水溶
液を調製した。これに安定剤として、メチルアルコール
を、無添加（０．００％）（比較例）、０．００５％、
０．０１％、０．０５％、０．１０％、０．２０％、
０．５０％、１．００％、２．００％あるいは５．００
％となるように加えた。これを、品温３５℃で保存し、
２、５、１０日目にカタラーゼの残存活性を測定した。
その結果を図１（３５℃保存）に示す。また、品温４２
℃で保存し、２、５、１０日目にカタラーゼの残存活性
を測定した。その結果を図２（４２℃保存）に示す。

【００２３】図１の結果から、メチルアルコールを含有
しない（比較例）液状カタラーゼは、３５℃、１０日間
保存した場合、６０％の残存活性を示すが、メチルアル
コールを０．００５％〜２．００％含有する液状カタラ
ーゼは、８０％以上の残存活性を示し、安定性が良くな
ることが判る。

【００２４】また図２の結果から、メチルアルコールを
添加しない液状カタラーゼは、４２℃、１０日間保存し
た場合（このような過酷な条件は、経験上、冷蔵庫で１
年間保存した場合に相当する）、５０％の残存活性を示
すが、メチルアルコールを０．００５％〜２．００％含
有する液状カタラーゼは、約７０％以上の残存活性を示
し、また０．０１％〜１．００％含有する液状カタラー
ゼは、約８０％の残存活性を示し、安定性が良くなるこ
とが判る。

【００２５】実施例２ （カタラーゼを含有する、液状の、トリグリセライド測
定試薬の調製例）体液のトリグリセライドを測定するた
め、下記第１試薬および第２試薬から構成されるトリグ
リセライド測定試薬を調製した。

【００２６】 第１試薬（以下、カタラーゼを含有する、液状の、トリグリセライド測定試 薬という） カタラーゼ ５００ Ｕ／ｍｌ グリセロールキナーゼ １．０ Ｕ／ｍｌ グリセロール−３−リン酸オキシダーゼ ４．０ Ｕ／ｍｌ アデノシン三リン酸二ナトリウム １．５ ｍＭ ＭＯＰＳバッファー ０．２ Ｍ、ｐH ７．０ Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン （ＴＯＯＳ） １．５ ｍＭ トリトンＸ−１００ ０．１ ％ 塩化カリウム ５０ ｍＭ

【００２７】 第２試薬 ４−アミノアンチピリン １．２ ｍＭ リポプロテインリパーゼ ３００ Ｕ／ｍｌ ペルオキシダーゼ ６．０ Ｕ／ｍｌ ＭＯＰＳバッファー ０．２ Ｍ、ｐＨ ６．５ トリトンＸ−１００ ０．１ ％ 塩化カリウム ５０ ｍＭ

【００２８】次いで、上記第１試薬（カタラーゼを含有
する、液状の、トリグリセライド測定試薬）にメチルア
ルコールを、無添加（０．００％）（比較例）、０．０
０５％、０．０１％、０．０５％、０．１０％、０．２
０％、０．５０％、１．００％、２．００％、あるいは
５．００％となるように加え、本発明の「カタラーゼ
を、含有する液状の、トリグリセライド測定試薬」を調
製した。

【００２９】これを、３５℃で保存し、２、５、１０日
目にカタラーゼの残存活性を測定した。その結果を図３
（３５℃保存）に示す。また、４２℃で保存し、２、
５、１０日目にカタラーゼの残存活性を測定した。その
結果を図４（４２℃保存）に示す。

【００３０】図３の結果から、メチルアルコールを添加
しない場合（比較例）、カタラーゼ活性は、１０日間の
保存で、４０％が失われる。これに対し、メチルアルコ
ールを０．００５％〜２．００％添加した場合、カタラ
ーゼは大部分の活性が保持され、約８０％〜約９０％の
残存活性を示すことが判る。

【００３１】また図４の結果から、メチルアルコールを
添加しない場合（比較例）、４２℃、１０日間の保存
で、０％の残存活性を示し、活性が完全に失活するのに
対して、メチルアルコールを０．００５％から２．０％
まで添加した場合、３７％以上の残存活性を、０．０１
％から２．０％まで添加した場合、５０％以上の残存活
性を示すことが判る。以上のことから、本発明によれば
保存安定性の高い「カタラーゼを含有する、液状の、ト
リグリセライド測定試薬」が得られることが判る。

【００３２】実施例３ （カタラーゼを含有する、液状の、ＬＤＬコレステロー
ル測定試薬の調製例）体液のＬＤＬコレステロール測定
するための、下記第１試薬および第２試薬から構成され
るＬＤＬコレステロール測定試薬を調製した。

【００３３】 第１試薬（以下、カタラーゼを含有する、液状の、ＬＤＬコレステロール測 定試薬という） カタラーゼ ５００ Ｕ／ｍｌ コレステロールエステラーゼ ０．７ Ｕ／ｍｌ コレステロールオキシダーゼ ０．６ Ｕ／ｍｌ 塩化マグネシウム １５ ｍＭ 塩化ナトリウム ５０ｍＭ ＢＥＳバッファー ０．１ Ｍ、ｐＨ ７．０ Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメチオキシアニリン （ＨＤＡＯＳ） １．０ ｍＭ エマルゲンＢ-６６ ０．２ ％

【００３４】 第２試薬 ４−アミノアンチピリン ３．０ ｍＭ ペルオキシダーゼ ７．０ Ｕ／ｍｌ ＢＥＳバッファー ０．１ Ｍ、ｐＨ ７．０ トリトンＸ−１００ ３．０ ％ 塩化ナトリウム ５０ｍＭ

【００３５】次いで、上記第１試薬（カタラーゼを含有
する、液状の、ＬＤＬコレステロール測定試薬）にメチ
ルアルコールを、無添加（カタラーゼ濃度０．００％）
（比較例）、０．００５％、０．０１％、０．０５％、
０．１０％、０．２０％、０．５０％、１．００％、
２．００％、あるいは５．００％となるように加え、本
発明の「カタラーゼを含有する、液状の、ＬＤＬコレス
テロール測定試薬」を得た。

【００３６】次いで、本実施例で得られた「カタラーゼ
を含有する、液状の、ＬＤＬコレステロール測定試薬」
を、３５℃で保存し、２、５、１０日目にカタラーゼの
残存活性を測定した。その結果を図５（３５℃保存）に
示す。また、４２℃で保存し、２、５、１０日目にカタ
ラーゼの残存活性を測定した。その結果を図６（４２℃
保存）に示す。

【００３７】図５の結果から、メチルアルコールを添加
しない場合（比較例）、３５℃、１０日間の保存で、７
０％の残存活性を示すのに対して、メチルアルコールを
０．００５％〜２．００％添加した場合、約８０％の残
存活性を示した。

【００３８】また、図６の結果から、メチルアルコール
を添加しない場合（比較例）、４２℃、１０日間の保存
で、約２０％の残存活性を示すのに対して、メチルアル
コールを０．００５％〜２．０％添加した場合、約４０
％の残存活性を、０．０１％〜２．０％添加した場合、
約５０〜６５％の残存活性を示した。図５および図６の
結果から、本発明によれば保存安定性の高い「カタラー
ゼを含有する、液状の、ＬＤＬコレステロール測定試
薬」が得られることが判る。

【００３９】実施例４ （カタラーゼを含有する、液状の、クレアチニン測定試
薬の調製例）体液のクレアチニンを測定するための、下
記第１試薬および第２試薬から構成されるクレアチニン
測定試薬を調製した。

【００４０】 第１試薬（以下、カタラーゼを含有する、液状の、クレアチニン測定試薬とい う） カタラーゼ ５００ Ｕ／ｍｌ クレアチンアミジノヒドラーゼ ３０ Ｕ／ｍｌ ザルコシンオキシダーゼ １０ Ｕ／ｍｌ ＴＥＳバッファー ０．１ Ｍ、ｐＨ ７．０ Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン（ ＴＯＯＳ） ３．０ ｍＭ トリトンX−１００ ０．１ ％ 塩化ナトリウム ５０ｍＭ

【００４１】 第２試薬 ４−アミノアンチピリン ３．０ ｍＭ クレアチニンアミドヒドラーゼ ２５０ Ｕ／ｍｌ ペルオキシダーゼ １０ Ｕ／ｍｌ ＴＥＳバッファー ０．１ Ｍ、ｐＨ ７．０ トリトンＸ−１００ ０．１ ％ 塩化ナトリウム ５０ｍＭ

【００４２】次いで、上記第１試薬（カタラーゼを含有
する、液状の、クレアチニン測定試薬）にメチルアルコ
ールを、無添加（カタラーゼ濃度０．００％）（比較
例）、０．００５％、０．０１％、０．０５％、０．１
０％、０．２０％、０．５０％、１．００％、２．００
％、あるいは５．００％となるように加え、本発明の
「カタラーゼを含有する、液状の、クレアチニン測定試
薬」を得た。

【００４３】次いで、本実施例で得られた第１試薬（カ
タラーゼを含有する、液状の、クレアチニン測定試薬）
を、３５℃で保存し、２、５、１０日目にカタラーゼの
残存活性を測定した。その結果を図７（３５℃保存）に
示す。また、４２℃で保存し、２、５、１０日目にカタ
ラーゼの残存活性を測定した。その結果を図８（４２℃
保存）に示す。

【００４４】図７の結果から、メチルアルコールを添加
しない場合（比較例）、３５℃、１０日間の保存で、約
３０％の残存活性を示すのに対して、メチルアルコール
を０．００５％から２．０％まで添加した場合、約７５
％〜８５％の残存活性を示した。

【００４５】また図８の結果から、メチルアルコールを
添加しない場合（比較例）、４２℃、１０日間の保存
で、カタラーゼは、殆ど失活して、残存活性は殆ど示さ
ないのに対して、メチルアルコールを０．００５％〜
２．００％添加した場合、４０％以上の残存活性を、
０．０１％から２．００％まで添加した場合、約５０〜
６０％残存活性を示した。図７および図８の結果から、
本発明によれば保存安定性の高い「カタラーゼを含有す
る、液状の、クレアチニン測定試薬」が得られることが
判る。

【００４６】以上、実施例２〜実施例４の結果から、長
期間保存安定性の高い、「カタラーゼを含有する、液状
の、生化学診断用試薬」が得られることが判る。

【００４７】

【本発明の効果】本発明は、安定剤を併用することな
く、保存安定性の高い液状カタラーゼを容易に得ること
ができる。特に、保存安定性の高い、「カタラーゼを含
有する、液状の、生化学診断用試薬」を得ることができ
る。本発明で得られる液状カタラーゼは、従来公知の過
酸化水素消去試薬として好適に用いることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１で得られた液状カタラーゼの３５℃に
おけるカタラーゼ保存安定性を示すグラフである。

【図２】同液状カタラーゼの４２℃におけるカタラーゼ
保存安定性を示すグラフである。

【図３】実施例２で得られた、「カタラーゼを含有す
る、液状の、トリグリセライド測定試薬」の３５℃にお
けるカタラーゼ保存安定性を示すグラフである。

【図４】同試薬の４２℃におけるカタラーゼ保存安定性
を示すグラフである。

【図５】実施例３で得られた「カタラーゼを含有する、
液状の、ＬＤＬコレステロール測定試薬」の３５℃にお
けるカタラーゼ保存安定性を示すグラフである。

【図６】同試薬の４２℃におけるカタラーゼ保存安定性
を示すグラフである。

【図７】実施例４で得られた「カタラーゼを含有する、
液状の、クレアチニン測定試薬」の３５℃におけるカタ
ラーゼ保存安定性を示すグラフである。

【図８】同試薬の４２℃におけるカタラーゼ保存安定性
を示すグラフである。

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】カタラーゼ水溶液に対し、メチルアルコー
   ルを添加することを特徴とする液状カタラーゼの安定化
   法。
2. 【請求項２】メチルアルコールを０．００５〜３．０Ｖ
   ／Ｖ％添加する請求項１記載の液状カタラーゼの安定化
   法。
3. 【請求項３】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、生化学診断用試薬である請求項１または請
   求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
4. 【請求項４】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、トリグリセライド測定試薬である請求項１
   または請求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
5. 【請求項５】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、ＬＤＬコレステロール測定試薬である請求
   項１または請求項２に記載の液状カタラーゼの安定化
   法。
6. 【請求項６】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、クレアチニン測定試薬である請求項１また
   は請求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
7. 【請求項７】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、尿素窒素測定試薬である請求項１または請
   求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
8. 【請求項８】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、コレステロールエステル測定試薬である請
   求項１または請求項２に記載の液状カタラーゼの安定化
   法。
9. 【請求項９】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
   る、液状の、リン脂質測定試薬である請求項１または請
   求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
10. 【請求項１０】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
    る、液状の、無機リン測定試薬である請求項１または請
    求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
11. 【請求項１１】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
    る、液状の、ＧＰＴ測定試薬である請求項１または請求
    項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。
12. 【請求項１２】液状カタラーゼが、カタラーゼを含有す
    る、液状の、α−アミラーゼ測定試薬である請求項１ま
    たは請求項２に記載の液状カタラーゼの安定化法。