JP2002037740A

JP2002037740A - 発酵組成物、並びに該発酵組成物を含有する抗アレルギー性組成物及び抗酸化性組成物

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Publication number: JP2002037740A
Application number: JP2000224127A
Authority: JP
Inventors: Akihiko Kimura; 彰彦木村; 敦士 ▲高▼田; Atsushi Takada; Masaki Omori; 正樹大森; Toshitaka Okada; 利孝岡田
Original assignee: TEKUNOOBURU KK; Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd; Toyo Hakko Co Ltd; Technoble Co Ltd
Current assignee: TEKUNOOBURU KK; Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd; Toyo Hakko Co Ltd; Technoble Co Ltd
Priority date: 2000-07-25
Filing date: 2000-07-25
Publication date: 2002-02-06
Anticipated expiration: 2020-07-25
Also published as: JP4841718B2

Abstract

(57)【要約】【課題】バラ発酵抽出物を含有する発酵組成物並びに
該発酵組成物を含有する抗アレルギー性組成物及び抗酸
化性組成物に関する。【解決手段】ＥＬＩＳＡ法を用いて、ヒトＩｇＥ−Ｉ
ｇＥレセプター結合阻害率を調べたところ、試料濃度が
０．０１％では、熱水抽出物である試料１で３２％なの
に対し、本発明のバラ発酵抽出物を含む試料３で６６
％、試料５で５９％本発明のバラ発酵抽出物と米糠・大
豆発酵抽出物を含む試料４で７５％、試料６で６８％
と、優れた値を示した。更に、試料濃度０．００１％で
は、試料１で０％なのに対し、試料３で１５％、試料４
で２２％、試料５で１８％、試料６で２５％と更に優れ
ていた。以上より、バラ発酵抽出物を含む試料３〜６
は、単なるバラ抽出物を含んでいるだけの試料１より
も、低濃度でヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合阻害作
用を有し、抗アレルギー作用に優れていることが分か
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、バラ及び／又はバ
ラ抽出物を発酵して得られるバラ発酵抽出物を含有し、
或いは、該バラ発酵抽出物やバラ及び／又はバラ抽出物
に米糠・大豆発酵抽出物を追加して得られる発酵組成物
に関する。また、本発明は、バラ及びバラ抽出物のうち
の少なくとも一方、米糠類、大豆類及び炭素源を発酵し
て得られる発酵組成物に関する。更に、本発明は、該発
酵組成物を含有することを特徴とする抗アレルギー性組
成物及び抗酸化性組成物に関する。本発明は、食品、化
粧品、医薬品等に利用される。

【０００２】

【従来の技術】本来、生体は体内に侵入した病原菌等の
異物から身体を守る免疫機能を備えている。そして、体
内に侵入した異物に対して過剰な免疫反応を起こし、身
体に有害な形で現れる場合の一つがアレルギーである。
アレルギーはプロセスによってＩ〜ＩＶ型に分類される
が、このうちＩ型のアレルギーを即時型といい、免疫グ
ロブリン抗体のうちのＩｇＥ抗体と抗原の反応が引き金
になって起こる。詳しく言えば、体内にカビ、花粉等の
抗原が侵入すると、これに対する特異的な抗体であるＩ
ｇＥ抗体が作られ、このＩｇＥ抗体のＦｃ部分が肥満細
胞や好塩基球表面のＩｇＥレセプター結合に付着する
（ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合）。そして、再び
同一の抗原が体内に侵入すると、これが細胞表面のＩｇ
Ｅ抗体のＦａｂ部分にある抗原結合基と結合し、その結
果、数個のＩｇＥを橋渡しする形となる。かかる橋渡し
により刺激された肥満細胞等から、ヒスタミン、ロイコ
トリエン等の種々のケミカルメディエーターが放出さ
れ、これらの働きによりアレルギーを引き起こす。この
ようなアレルギーによって引き起こされるアレルギー疾
患の代表的なものには、花粉症、蕁麻疹、アトピー性皮
膚炎及び気管支喘息等がある。そして、今日、これらの
アレルギー疾患に苦しむ人々の数は増加傾向にあり、そ
の予防方法及び改善方法が社会で注目されている。

【０００３】従来より、かかるアレルギー疾患に適用さ
れる化合物が各種報告されているが、そのほとんどが合
成医薬品である。例えば、クロモグリク酸ナトリウム、
トラニラスト、副腎皮質コルチコステロイド（プレドニ
ゾロン等）、テオフィリン、マレイン酸クロルフェニラ
ミン、塩酸ジフェンヒドラミン、及び塩酸シプロヘプタ
ジン等が現在、アレルギー疾患の治療に用いられてい
る。しかし、このような合成医薬品にはいずれも眠気等
の副作用がある点で問題がある。また、従来の抗アレル
ギー化合物は、テオフィリンやβ２受容体作用薬（塩酸
プロカテロール、サルブタモール等）のように、発作後
の症状改善を目的としたり、あるいは、抗ヒスタミンＨ
１薬（マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸ジフェンヒ
ドラミン、塩酸シプロヘプタジン等）やプランカルスト
のように、肥満細胞や好塩基球から放出されるケミカル
メディエーターの作用に拮抗するものが中心である。ア
レルギー疾患の予防という観点から見れば、肥満細胞や
好塩基球からケミカルメディエーターが放出された後、
それにより引き起こされる反応を抑えるより、むしろ、
それ以前のＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合反応や、ケミ
カルメディエーターの放出を抑制する作用を有すること
が好ましい。このような観点から、生体内において比較
的安全であると共に、ケミカルメディエーターが放出さ
れる前の段階の反応を抑制し、アレルギー性疾患の予防
に好適な抗アレルギー剤の開発が求められている。

【０００４】一方、スーパーオキシドジスムターゼ（以
下、ＳＯＤという。）は、酸素分子の１電子還元で生成
するスーパーオキシドラジカル（Ｏ₂ ^-）の不均化反応
（下式）を拡散律速に近い速さで触媒し、細胞内のＯ₂ ^-
濃度を低下させる酵素である。２Ｏ₂ ^-＋２Ｈ⁺→Ｈ₂Ｏ₂＋Ｏ₂ Ｏ₂ ^-に代表される活性酸素種は、通常、生体内において
活性化されたマクロファージなどの食細胞から産生さ
れ、殺菌作用や殺腫瘍作用を示す。しかし、これらの活
性酸素種には選択毒性がなく、正常細胞にも作用できる
結果、生体に対して種々の障害も引き起こすことが知ら
れている。例えば、脂質の過酸化による膜の損傷、タン
パク質の酸化修飾によるタンパク質の構造変化、ＤＮＡ
の切断等の結果、細胞に障害作用を示し、様々な疾病の
原因ともなることが明らかにされている。

【０００５】従って、Ｏ₂ ^-の除去酵素であるＳＯＤは、
生体を活性酸素種から守るために存在するものであり、
この活性酸素種を起因として生じると考えられる病気等
に有効であるとの観点から、近年、その反応機構、生理
機構等が研究されている〔「活性酸素−生物での生成・
消去・作用の分子機構」（新装版２刷、共立出版株式会
社発行、中野稔ら編著）２２３〜２３０頁）〕。また、
癌細胞ではＳＯＤ活性が低いという事実があり、更に、
ＳＯＤと発癌との直接因果関係は明らかではないが、Ｓ
ＯＤ又はＳＯＤ様物質を癌細胞に注入すると、増殖を抑
えるという報告もある（同６４頁）。安全で且つＳＯＤ
作用（活性酸素濃度を減少させる作用のみならず、これ
に起因して生じると考えられる種々の病気の予防、改善
の作用をも含む。）を有し、食品等に用いられるものが
あれば、人の健康及び美容にとって非常に有用であり、
その必要性は極めて大きい。従来、このような観点か
ら、生体内において安全な天然物を主成分としたものが
日々研究されている。ＳＯＤ作用と同様の作用を有し、
血圧上昇を抑制するものとして、例えば、米糠・大豆発
酵抽出物に緑茶抽出エキスを添加した活性酸素抑制組成
物及び血圧抑制剤が開発されている（特公平８−４０号
公報）。そして、現在もなお、より優れた生体内抗酸化
作用、活性酸素除去効果を奏するとともに、安全性の高
い抗酸化剤の開発が望まれている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記現状に
鑑みてなされたものであり、バラ及び／又はバラ抽出物
を発酵して得られるバラ発酵抽出物を含有し、或いは、
該バラ発酵抽出物やバラ及び／又はバラ抽出物に米糠・
大豆発酵抽出物を追加して得られる発酵組成物を提供す
ることを目的とする。また、本発明は、バラ及びバラ抽
出物のうちの少なくとも一方、米糠類、大豆類及び炭素
源を発酵して得られる発酵組成物を提供することを目的
とする。更に、本発明は、該発酵組成物を含有すること
を特徴とする抗アレルギー性組成物及び抗酸化性組成物
を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記の課
題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、バラ抽出物を発
酵させて得られるバラ発酵抽出物が、従来より抗アレル
ギー作用を奏することが知られているバラ抽出物（特開
平１０−７２３５８号公報）そのものよりも抗アレルギ
ー作用及び抗酸化作用に優れていること、及び従来より
ＳＯＤ様作用を奏することで知られている米糠・大豆発
酵抽出物を添加したり、或いは、バラ及びバラ抽出物の
うちの少なくとも一方、米糠類、大豆類及び炭素源を発
酵して得られる発酵組成物が、更に抗アレルギー作用及
び抗酸化作用を増強させることができることを見出して
本発明を完成するに至った。

【０００８】本第１発明の発酵組成物は、バラ及びバラ
抽出物のうちの少なくとも一方を含む培地に微生物を接
種し、発酵培養して得られたバラ発酵抽出物を含有する
ことを特徴とする。

【０００９】本第１発明において、上記「バラ」として
は、バラ科バラ属に属するバラ（Ｒｏｓａｓｐｐ．）
が好ましく、具体的には、ロサ・ガリカ（Ｒｏｓａｇ
ａｌｌｉｃａ）、ロサ・モスカタ（Ｒｏｓａｍｏｓｃ
ｈａｔａ）、ロサ・フォエティダ（Ｒｏｓａｆｏｅｔ
ｉｄａ）、ロサ・ギガンテア（Ｒｏｓａｇｉｇａｎｔ
ｅａ）、ノイバラ（Ｒｏｓａｍｕｌｔｉｆｌｏｒ
ａ）、テリハノイバラ（Ｒｏｓａｗｉｃｈｕｒａｉａ
ｎａ）等の野生種、又はこれらを交配して得られた園芸
種が挙げられる。また、本第１発明において上記「バ
ラ」の使用部位については特に限定はなく、花、花び
ら、葉、茎、根及び種子等のどの部分を使用してもよ
い。

【００１０】本第１発明において、上記「バラ抽出物」
とは、上記バラを原料として抽出することにより得られ
るものである。また、上記「バラ抽出物」としては、上
記バラを原料として抽出することにより得られる抽出液
を、タンナーゼ等の酵素を用いて酵素処理したものも含
まれる。更に、上記「バラ抽出物」としては、抽出液を
濾過したままの液でもよいし、これを濃縮した濃縮液で
もよい。その他にも、凍結乾燥等の公知の方法により溶
媒を除去した固形物や粉末化した粉末物でもよい。

【００１１】上記「バラ抽出物」を得るための抽出方
法、抽出条件については特に限定はない。例えば、原料
であるバラは未粉砕でも、粉砕したものでもよく、抽出
物の品質を維持できる限り、不純物除去等の前処理をし
てもよい。また、抽出溶媒としては、水又は熱水の他、
エタノール、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン等の有機溶媒
や、これらの有機溶媒と水又は熱水との混合溶媒等を用
いることができ、このうち、特に熱水が好ましい。熱水
の温度は、通常、４０〜１００℃、好ましくは５０〜８
０℃、更に好ましくは５０〜７０℃である。また、抽出
の際の抽出溶媒のｐＨは通常３〜７、好ましくは４〜
６、更に好ましくは４〜５である。ｐＨが７を超える
と、バラ及びバラ抽出物に含まれているポリフェノール
類が不安定となることから好ましくない。抽出温度は特
に制限されないが、常温又は加熱抽出が好ましい。

【００１２】上記「バラ発酵抽出物」を得るための発酵
条件については、抗アレルギー作用及び抗酸化作用を奏
するものが得られる限り特に限定はない。発酵培養は通
常、通気攪拌を行うことにより行われる。また、培養を
行うための培地についても、微生物、特に納豆菌、枯草
菌やＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵母が増殖
できるものであれば特に制限はなく、通常は液体培地で
あるが、固形培地であってもかまわない。また、培地の
ｐＨは通常４〜７、好ましくは５〜７、更に好ましくは
６〜７である。このｐＨが７を超えると、上記のように
バラ及びバラ抽出物に含まれるポリフェノール類が不安
定となることから好ましくない。更に、培養温度につい
ても、発酵が行われる限り特に制限はなく、通常４０〜
４５℃程度である。

【００１３】また、上記「バラ発酵抽出物」を得るため
に用いる上記「微生物」については、バラ又はバラ抽出
物を原料として発酵することにより、抗アレルギー作用
及び抗酸化作用を有する発酵組成物を産出する性質を失
わない限り特に限定はないが、通常は、上記第４発明に
示すように、細菌や酵母が用いられ、この中で、本第５
発明に示すように、納豆菌、枯草菌、或いはＳａｃｃｈ
ａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵母が好ましく用いられ
る。上記「Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵
母」としては、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅ
ｖｉｓｉａｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｕｖａｒ
ｕｍ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｂａｙａｎｕｓ、
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ
及びＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｒｏｕｘｉｉ種等の
酵母が挙げられ、この中で特にＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒ
ｏｍｙｃｅｓｒｏｕｘｉｉが好適に用いられる。

【００１４】本第２発明の発酵組成物は、（１）バラ及
びバラ抽出物のうちの少なくとも一方を含む培地に微生
物を接種し、発酵培養して得られたバラ発酵抽出物、又
はバラ抽出物と、（２）米糠類、大豆類及び炭素源を含
む培地に微生物を接種し、発酵培養して得られた米糠・
大豆発酵抽出物と、を含有することを特徴とする。

【００１５】本第２発明において、上記「バラ」「バラ
抽出物」及び「バラ発酵抽出物」は、上記第１発明と同
義である。また、上記「米糠類」とは、米胚芽、脱脂米
胚芽、米糠、脱脂米糠等をいい、上記「大豆類」とは、
脱脂大豆、キナ粉、大豆粉、大豆カス、これらの加水分
解物等をいう。更に、上記「炭素源」としては、通常用
いられるものを使用でき、例えば、グルコース、デキス
トリン、乳糖及びデンプン等の１種又は２種以上を用い
ることができる。

【００１６】本第２発明の発酵組成物は、第１発明のバ
ラ発酵抽出物又は上記バラ抽出物と、米糠・大豆発酵抽
出物とを含有するものである。本第２発明における上記
「米糠・大豆発酵抽出物」とは、上記米糠類、大豆類及
び炭素源を含む培地に微生物を接種し、発酵培養して得
られる抽出物である。上記「バラ発酵抽出物」や上記
「米糠・大豆発酵抽出物」を得るための上記「微生物」
としては、通常は細菌や酵母が用いられ、この中で、本
第５発明に示すように、納豆菌、枯草菌、或いはＳａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵母が好ましく用いら
れる。上記「Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵
母」としては、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅ
ｖｉｓｉａｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｕｖａｒ
ｕｍ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｂａｙａｎｕｓ、
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ
及びＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｒｏｕｘｉｉ種等の
酵母が挙げられ、この中で特にＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒ
ｏｍｙｃｅｓｒｏｕｘｉｉが好適に用いられる。

【００１７】また、上記米糠・大豆発酵抽出物を得るた
めの発酵培養条件については、発酵が行われる限り特に
制限はない。通常、発酵培養は通気攪拌を行うことによ
り行われ、培養温度は４０〜４５℃程度であり、ｐＨは
７．５〜１０、好ましくは８．５〜１０である。培地の
ｐＨを調節する場合は、アルカリ剤として炭酸水素ナト
リウム等を用いることができる。尚、培地原料としては
プロテアーゼを用いることができる。この場合は、大豆
ペプチドを更に分解するので有用である。

【００１８】本第３発明の発酵組成物は、バラ及びバラ
抽出物のうちの少なくとも一方、米糠類、大豆類及び炭
素源を含む培地に微生物を接種し、発酵培養して得られ
ることを特徴とする。

【００１９】本第３発明において、上記「バラ」及び
「バラ抽出物」は、上記第１発明と同義であり、上記
「米糠類」、「大豆類」及び「炭素源」は上記第２発明
と同義である。本第３発明の発酵組成物は、バラ発酵抽
出物の原料となる上記バラ及びバラ抽出物のうちの少な
くとも一方と、米糠・大豆発酵抽出物の原料となる上記
米糠類、大豆類及び炭素源を含有する培地に微生物を接
種し、発酵培養して得られるものである。

【００２０】また、本第３発明の発酵組成物を得るため
の発酵条件については、抗アレルギー作用及び抗酸化作
用を奏するものが得られる限り特に限定はない。発酵培
養は通常、通気攪拌を行うことにより行われる。また、
培地のｐＨは通常４〜７、好ましくは５〜７、更に好ま
しくは６〜７である。このｐＨが７を超えると、上記の
ようにバラ及びバラ抽出物に含まれるポリフェノール類
が不安定となることから好ましくない。更に、培養温度
は、発酵が行われる限り特に制限はなく、通常４０〜４
５℃程度である。尚、本第２発明の場合と同様に、培地
原料としてはプロテアーゼを用いることができる。この
場合は、大豆ペプチドを更に分解するので有用である。

【００２１】また、上記「培地」としては、それぞれの
原料を含み、微生物、特に納豆菌、枯草菌やＳａｃｃｈ
ａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵母が増殖できるものであ
れば特に制限はなく、通常は液体培地であるが、固形培
地であってもかまわない。更に、上記「バラ発酵抽出
物」を得るために用いる上記「微生物」についても、バ
ラ及びバラ抽出物のうちの少なくとも一方、米糠類、大
豆類及び炭素源を原料として発酵することにより、抗ア
レルギー作用及び抗酸化作用を有する発酵組成物を産出
する性質を失わない限り特に限定はないが、通常は、上
記第４発明に示すように、細菌や酵母が用いられ、この
中で、本第５発明に示すように、納豆菌、枯草菌、或い
はＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵母が好まし
く用いられる。上記「Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に
属する酵母」は、上記第１発明及び第２発明と同様のも
のが使用できる。

【００２２】尚、上記第１発明〜第３発明において、上
記「納豆菌」、「枯草菌」及び「Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙ
ｃｅｓ属に属する酵母」は、市販されている一般的なも
のを用いるのが通常であるが、自然的、又はニトロソグ
アニジン等の化学物質、Ｘ線、紫外線等により人為的変
異手段により得られ、菌学的性質が変異した変異株であ
っても、抗アレルギー作用及び抗酸化作用を有する発酵
組成物を産出する性質を失わない限り利用することがで
きる。また、本第１発明〜第３発明の各発酵抽出物の形
態については特に限定はなく、それぞれ培養して得られ
た培養発酵液を濾過したままの液でもよいし、これを脱
色等の後処理をした液でもよいし、又はこれを濃縮した
濃縮液でもよい。その他にも、凍結乾燥等の公知の方法
により溶媒を除去した固形物や粉末化した粉末物でもよ
い。

【００２３】本第１発明〜第３発明の各発酵組成物は、
抗アレルギー性及び抗酸化性という効果を奏するととも
に、天然素材を使用しているので、従来の合成アレルギ
ー剤と比較して安全性も高い。よって、本第６発明に示
すように抗アレルギー性組成物としたり、或いは本第７
発明に示すように抗酸化性組成物として利用することが
できる。本第４発明の抗アレルギー性組成物及び本第５
発明の抗酸化性組成物に含まれる発酵組成物の量（固形
分換算、Ｗ／Ｖ）は、通常０．０００１％以上、好まし
くは０．０００５〜１％更に好ましくは、０．００１〜
０．５％、最も好ましくは０．０１〜０．０５％であ
る。本第４発明の抗アレルギー性組成物及び本第５発明
の抗酸化性組成物に含まれる発酵組成物の量が０．００
０１％未満では、抗アレルギー作用及び抗酸化作用が減
弱するので好ましくない。また、１％を超える量を添加
しても、抗アレルギー作用及び抗酸化作用は頭打ちとな
るので、経済的に好ましくない。

【００２４】

【発明の実施と形態】以下、実施例により本発明を具体
的に説明する。（実施例）（１）酵母液の調製酵母（Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｒｏｕｘ
ｉｉ、理化学研究所、ＪＣＭＮｏ２３２５）１アンプ
ルを滅菌水１ｍｌに懸濁後、全量を下記に示す組成のＹ
Ｍ寒天培地にて、２５℃で７日間培養した。培養後、酵
母を白金耳でかき取り、滅菌水２５ｍｌに懸濁させて酵
母液とした。［ＹＭ寒天培地の組成］Ｇｌｕｃｏｓｅ２．０ｇＰｅｐｔｏｎｅ１．０ｇＹｅａｓｔｅｘｔｒａｃｔ０．６ｇＭａｌｔｅｘｔｒａｃｔ０．６ｇＡｇａｒ４．０ｇＨ₂Ｏ２００．０ｇ

【００２５】（２）バラ抽出物及び発酵組成物の調製試料１（熱水抽出物）乾燥バラ（ロサ・ガリカ）の花びら（粉砕品）２０ｇを
７０℃の熱水５００ｍｌで３０分間抽出後、濾過（濾過
助剤としてパーライト使用）した。次いで減圧濃縮後、
凍結乾燥をし、試料１（熱水抽出物）とした。試料２（酵素処理抽出物）乾燥バラ（ロサ・ガリカ）の花びら（粉砕品）２０ｇを
７０℃の熱水５００ｍｌで３０分間抽出後、冷却し、ｐ
Ｈ５．５に調整し、タンナーゼ（キッコーマン株式会社
製、商品名：「タンナーゼ「キッコーマン」−ＫＴＦ
Ｈ」）１２ｍｇを添加して４０℃にて９０分間攪拌し
た。その後９０℃にて１０分間加熱し酵素を失活させ、
濾過（濾過助剤としてパーライト使用）し、この濾液を
減圧濃縮後、凍結乾燥し、試料２（酵素処理抽出物）と
した。試料３（発酵組成物（Ｒ））乾燥バラ（ロサ・ガリカ）の花びら（粉砕品）２０ｇに
水５００ｍｌを加えて９０℃にて１０分間加熱後、冷却
した。ｐＨ６．０〜７．０に調整後、納豆菌（高橋祐蔵
研究所製、商品名：「納豆素」）５ｍｌを添加し、特に
強制通気はせず４０℃にて１８時間攪拌した。その後９
０℃にて１０分間加熱し、冷却後濾過（濾過助剤として
パーライト使用）した。この濾液を減圧濃縮後、凍結乾
燥し、試料３（発酵組成物（Ｒ））とした。試料４（発酵組成物（Ｒ−Ｇ））乾燥バラ（ロサ・ガリカ）の花びら（粉砕品）２０ｇ、
脱脂米糠３０ｇ、脱脂大豆５ｇ及び炭素源であるグルコ
ース０．５ｇに水５００ｍｌを加えて９０℃にて１０分
間加熱後、冷却した。ｐＨ６．０〜７．０に調整後、納
豆菌（高橋祐蔵研究所製、商品名：「納豆素」）５ｍｌ
を添加した。以下、と同様の操作により試料４（発酵
組成物（Ｒ−Ｇ））を得た。試料５（発酵組成物（Ｒ２））乾燥バラ（ロサ・ガリカ）の花びら（粉砕品）２０ｇに
水５００ｍｌを加えて９０℃にて１０分間加熱後、冷却
した。ｐＨ６．０〜７．０に調整後、上記（１）で調製
した酵母液１０ｍｌを添加し、特に強制通気はせず２５
℃にて１０日間攪拌した。その後９０℃にて１０分間加
熱し、冷却後濾過（濾過助剤としてパーライト使用）し
た。この濾液を減圧濃縮後、凍結乾燥し、試料５（発酵
組成物（Ｒ２））を得た。試料６（発酵組成物（Ｒ２−Ｇ））乾燥バラ（ロサ・ガリカ）の花びら（粉砕品）２０ｇ、
脱脂米糠３０ｇ、脱脂大豆５ｇ及び炭素源であるグルコ
ース０．５ｇに水５００ｍｌを加えて９０℃にて１０分
間加熱後、冷却した。ｐＨ６．０〜７．０に調整後、上
記（１）で調製した酵母液１０ｍｌを添加した。以下、
と同様の操作により試料６（発酵組成物（Ｒ２−
Ｇ））を得た。

【００２６】（３）ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合
阻害活性（３−１）ＥＬＩＳＡ法による方法ＥＬＩＳＡ法を用いて、ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター
結合阻害活性を次のように調べた。９６穴マイクロプレ
ートの各ウェルにＩｇＥレセプター（ＦｃεＲＩα鎖）
を固定吸着させ、次いで最終濃度が０．００１〜１．０
％（ｗ／ｖ）となるように調製した上記（２）の試料１
〜６を加えた後、最終濃度が０．４μｇ／ｍｌとなるよ
うにヒトＩｇＥ抗体を加えてインキュベーションした。
その後、各ウェルを洗浄して遊離の試料１〜６及びヒト
ＩｇＥ抗体を除去した。

【００２７】次に、上記各ウェルに最終濃度が０．４μ
ｇ／ｍｌとなるように西洋ワサビパーオキシダーゼ（Ｈ
ＲＰ）標識した抗ヒトＩｇＥ抗体を加えてインキュベー
ションした後、再度各ウェルを洗浄して遊離の抗ヒトＩ
ｇＥ抗体を除去した。その後、ＨＲＰの基質としてＯ−
フェニレンジアミン二塩酸塩（ＯＰＤ）を各ウェルに加
えて反応させ、発色させた後、各ウェルの４７０ｎｍに
おける吸光度をプレートリーダーにて測定した。また、
ヒトＩｇＥ及び試料を添加しなかった場合の吸光度を
（Ａ）、ヒトＩｇＥのみを添加して試料を加えなかった
場合の吸光度を（Ｂ）、試料のみを添加してヒトＩｇＥ
を加えなかった場合の吸光度を（Ｃ）、更にヒトＩｇＥ
及び試料を添加した場合の吸光度を（Ｄ）として測定
し、以下の式によりヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合
阻害率（％）を求めた。その結果を表１及び図１に示
す。阻害率（％）＝［１−（Ｄ−Ｃ）／（Ｂ−Ａ）］×１０
０

【００２８】

【表１】

【００２９】（３−２）ＣＨＯ細胞による方法ＣＨＯ細胞を用いて、ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結
合阻害活性を次のように調べた。ヒトＩｇＥレセプター
（ＦｃεＲＩα鎖）発現組換えＣＨＯ細胞に、０．００
５％及び０．０５％に希釈した上記試料１〜４及びＦＩ
ＴＣ標識ヒトＩｇＥを加えて競合反応をさせた。その
後、遊離の試料１〜４及びＦＩＴＣ標識ヒトＩｇＥを洗
浄除去し、反応後の細胞をセルソーターにて解析した。
尚、比較のため、ＣＨＯ細胞のみ、ＣＨＯ細胞に
０．０５％の上記試料１〜４を加えて反応させたもの、
及びＣＨＯ細胞にＦＩＴＣ標識ヒトＩｇＥを加えて反
応させたものについても、同様に反応後の細胞をセルソ
ーターにて解析した。その測定結果を図２（ａ）〜
（ｄ）に示す。

【００３０】（４）ヒスタミン遊離阻害活性ヒト末梢血より好塩基球を分離し、既にＩｇＥレセプタ
ーに結合しているＩｇＥを乳酸緩衝液により除去し、上
記試料１〜６を０．０１％及び０．１％（ｗ／ｖ）とな
るように添加した後、ヒトＩｇＥを１μｇ／ｍｌとなる
ように加えて好塩基球を感作させた。その後遊離のヒト
ＩｇＥを洗浄除去し、抗ヒトＩｇＥ抗体を濃度が３μｇ
／ｍｌとなるように加えて、３７℃にて４０分間インキ
ュベーションした。更に、遠心分離後、オンカラム誘導
体化法によるＨＰＬＣにより上清中のヒスタミン濃度を
測定し、次式よりヒスタミン遊離阻害率を算出した。そ
の結果を表２及び図３に示す。阻害率（％）＝［１−（Ｃ−Ａ）／（Ｂ−Ａ）］×１０
０Ａ：未処理（試料、ヒトＩｇＥ、抗ヒトＩｇＥ抗体とも
に添加せず）のコントロール細胞より遊離されるヒスタ
ミン量Ｂ：試料は添加せずヒトＩｇＥと抗ヒトＩｇＥ抗体によ
り刺激した場合に遊離されるヒスタミン量Ｃ：試料の存在下でヒトＩｇＥと抗ヒトＩｇＥ抗体によ
り刺激した場合に遊離されるヒスタミン量

【００３１】

【表２】

【００３２】（５）抗酸化性の測定リノール酸を基質としたロダン鉄法により抗酸化性を測
定した。密栓試験管に４％（ｗ／ｖ）リノール酸溶液５
ｍｌ、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）４ｍｌ及び
上記（２）で調製した試料１〜６を各試料の最終濃度が
１０及び１００ｐｐｍとなるように入れて混合し、４５
℃に放置した。反応開始７日後にこの各反応液０．１ｍ
ｌを採取し、７５％（ｗ／ｖ）エタノール４．７ｍｌ、
３０％（ｗ／ｖ）チオシアン酸アンモニウム０．１ｍｌ
を加えた。この各混合液に３．５％塩酸で調製した０．
０２Ｍ塩化第一鉄０．１ｍｌを添加して発色させ、３分
後に５００ｎｍにおける吸光度を測定した。尚、対照と
して試料を加えないものを用い、同様の方法を行って吸
光度を測定した。その結果を表３及び図４に示す。

【００３３】

【表３】

【００３４】（６）実施例の結果表１及び図１によれば、試料濃度が０．１％及び１．０
％では、ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合阻害活性は
全ての抽出物においてほぼ１００％近い値であった。一
方、試料濃度が０．０１％では、試料１（熱水抽出物）
で３２％であるのに対し、試料２（酵素処理抽出物）で
４５％と、若干阻害率が向上していることから、酵素処
理をすることにより、ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結
合阻害活性が向上することが判る。また、試料３（発酵
組成物（Ｒ））では６６％、試料４（発酵組成物（Ｒ−
Ｇ））では７５％、試料５（発酵組成物（Ｒ２））では
５９％、試料６（発酵組成物（Ｒ２−Ｇ））では６８％
と、試料１よりも２７％以上優れたヒトＩｇＥ−ＩｇＥ
レセプター結合阻害活性が認められた。

【００３５】更に、試料濃度０．００１％では、試料１
及び試料２において０％であるのに対し、試料３におい
ては１５％、試料４においては２２％、試料５において
は１８％、試料６においては２５％と更に優れていた。
以上より、バラ発酵抽出物を含む試料３〜６は、単なる
バラ抽出物含んでいるだけの試料１及び２よりも、低濃
度でヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合阻害作用を有
し、抗アレルギー作用に優れていることが判る。また、
バラ発酵抽出物のみの試料３及び５よりも、米糠及び大
豆と共に、バラを発酵して得られた試料４及び６の方が
阻害活性が高かったことから、バラ、米糠及び大豆成分
間の発酵による相乗作用により、抗アレルギー作用を更
に増強できることが判る。

【００３６】また、図２（ａ）〜（ｄ）によれば、試料
１〜４では、いずれも濃度が高くなるに従い、蛍光強度
のピークがＦＩＴＣ標識ヒトＩｇＥ無添加細胞側にシフ
トしており、阻害活性が認められたことが判る。また、
この阻害活性は、試料１及び試料２よりも、試料３及び
試料４の方が高く、試料３よりも試料４の方が高かった
ことから、細胞を用いた実験においても、上記ＥＬＩＳ
Ａ法による試験の場合と同様の結論となることが判る。

【００３７】表２及び図３によれば、試料濃度が０．１
％では、各抽出物のすべてがほぼ完全にヒト好塩基球か
らのヒスタミン遊離を阻害し、抗アレルギー作用のある
ことが認められた。一方、試料濃度が０．０１％では、
試料１（熱水抽出物）が約２４．７％、試料２（酵素処
理抽出物）は約３５．６％であるのに対し、試料３（発
酵組成物（Ｒ））は約５１．１、試料４（発酵組成物
（Ｒ−Ｇ））は約５６．４％、試料５（発酵組成物（Ｒ
２））は約５５．３％、試料６（発酵組成物（Ｒ２−
Ｇ））は約６３．７％と、試料１（熱水抽出物）及び試
料２（酵素処理抽出物）より高かった。以上の結果よ
り、ヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合阻害活性と同様
にヒスタミン遊離阻害活性も、バラ抽出物を酵素処理又
は発酵処理することでより高くなることが判る。更に、
バラ発酵抽出物のみの試料３及び５よりも、米糠及び大
豆とともに、バラを発酵して得られた試料４及び６の方
がヒスタミン遊離阻害活性が高かったことから、バラ、
米糠及び大豆成分間の発酵による相乗効果により、ヒス
タミン遊離阻害活性も向上することが判る。

【００３８】表３及び図４によれば、いずれの抽出物も
１００ｐｐｍの濃度において、吸光度は試料１（熱水抽
出物）の０．１１６に対して、試料２（酵素処理抽出
物）は０．０８４、試料３（発酵組成物（Ｒ））は０．
０７７、及び試料４（発酵組成物（Ｒ−Ｇ））は０．０
８１、試料５（発酵組成物（Ｒ２））は０．０７１、試
料６（発酵組成物（Ｒ２−Ｇ））は０．０６６と、強い
抗酸化作用を示していることが判る。また、１０ｐｐｍ
の濃度においては、試料１の０．２５４より試料２は
０．１６９と高く、試料３は０．１４２、試料４は０．
１２１、試料５は０．１３５、試料６は０．１１９と更
に強い抗酸化作用を示していることが判る。以上の結果
より、抗酸化作用もバラ抽出物を酵素処理又は発酵処理
することでより高くなることが分かる。更に、バラ発酵
抽出物のみの試料３及び５よりも、米糠及び大豆ととも
に、バラを発酵して得られた試料４及び６の方が抗酸化
作用が高かったことから、バラ、米糠及び大豆成分間の
発酵による相乗効果により、抗酸化作用も向上すること
が判る。

【００３９】尚、本発明においては、上記具体的実施例
に示すものに限られず、目的、用途に応じて本発明の範
囲内で種々変更した実施例とすることができる。即ち、
上記組成物の形態は、通常、水溶液若しくは原液等の液
状であるが、これに限らず、この抽出物を吸液性粉末に
含浸させた粉末品、造粒した造粒品、増量剤等他の粉末
成分を配合した錠剤、又はマイクロカプセル等とするこ
とができる。また、これらの水溶液、粉末品等を所定容
器に充填してなる商品形態、またこれ単独で使用するか
他剤（水溶液のもの、油性液のもの若しくは粉末を問わ
ない。）に配合して使用するかについても特に限定され
ず、例えば、ポーション型でもよいし、他形状容器に充
填してもよいし、粉末品をスティック状容器（袋）に充
填したものでもよい。更に、従来の清涼飲料水、ドリン
ク剤、乳製品、油剤化製品等に配合、分散して使用して
もよい。尚、この分散は油中水型、水中油型を問わな
い。また、他の栄養成分（例えば、各種ビタミン類、カ
ルシウムイオン成分、鉄イオン成分等）、薬効成分、調
味成分、匂い成分等を配合してもよい。これらのうち、
特に水溶性成分が好ましい。均一に溶解した商品とする
ことができるからである。

【００４０】

【発明の効果】本第１発明の発酵組成物は、バラ及び／
又はバラ抽出物を発酵して得られるバラ発酵抽出物を含
有することにより、バラ抽出物よりも優れた抗アレルギ
ー作用及び抗酸化作用を奏する。また、本第２発明の発
酵組成物のように、バラ発酵抽出物やバラ及び／又はバ
ラ抽出物に米糠・大豆発酵抽出物を追加することによ
り、或いは、本第３発明の発酵組成物のように、バラ及
びバラ抽出物のうちの少なくとも一方、米糠類、大豆類
及び炭素源を発酵することにより、バラ抽出物やバラ発
酵抽出物単独よりも更に抗アレルギー作用及び抗酸化作
用を向上させることができる。また、本第１発明〜第３
発明において、微生物として、本第４発明のように細菌
又は酵母を用い、特に第５発明に示すように、納豆菌、
枯草菌、或いはＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する
酵母を用いると、優れた抗アレルギー作用及び抗酸化作
用を有する発酵組成物が得られる。更に、本第１発明〜
第３発明の各発酵組成物は天然成分であることから、生
体内において安全である。よって、本第６発明に示す抗
アレルギー性組成物や第７発明に示すように抗酸化性組
成物として用いることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＥＬＩＳＡ法により求めた本実施例の各試料
（１〜６）のヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合阻害活
性を示すグラフである。

【図２】ＣＨＯ細胞を用いて求めた本実施例の各試料
（１〜４）のヒトＩｇＥ−ＩｇＥレセプター結合阻害活
性を示すグラフである。

【図３】本実施例の各試料（１〜６）のヒスタミン遊離
阻害活性を示すグラフである。

【図４】本実施例の各試料（１〜６）の抗酸化作用を示
すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｋ４Ｈ０２５Ａ６１Ｐ 37/08 Ａ６１Ｐ 37/08 39/06 39/06 Ｃ０９Ｋ 15/34 Ｃ０９Ｋ 15/34 Ｃ１２Ｎ 1/00 Ｃ１２Ｎ 1/00 Ｐ 1/16 1/16 Ａ 1/20 1/20 Ａ //(Ｃ１２Ｎ 1/16 (Ｃ１２Ｎ 1/16 ＡＣ１２Ｒ 1:85）Ｃ１２Ｒ 1:85） (Ｃ１２Ｎ 1/20 (Ｃ１２Ｎ 1/20 ＡＣ１２Ｒ 1:125）Ｃ１２Ｒ 1:125） (72)発明者大森正樹愛知県大府市追分町３丁目89番地株式会社東洋発酵内 (72)発明者岡田利孝愛知県大府市追分町３丁目89番地株式会社東洋発酵内Ｆターム(参考） 4B018 LE01 LE02 LE03 LE04 LE05 MD48 MD49 MD58 ME06 ME07 MF01 MF12 MF13 4B021 LA33 LW05 LW06 LW08 MC03 MK05 MK06 MP01 4B065 AA19X AA79X AA90X BB26 BB27 CA42 CA44 CA50 4C083 AA111 DD21 EE12 EE13 FF01 4C088 AB51 AB59 AB74 AC02 BA08 CA08 CA25 MA02 MA07 MA52 MA63 NA14 ZA89 ZB13 4H025 AC06 BA01

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】バラ及びバラ抽出物のうちの少なくとも
一方を含む培地に微生物を接種し、発酵培養して得られ
たバラ発酵抽出物を含有することを特徴とする発酵組成
物。
【請求項２】（１）バラ及びバラ抽出物のうちの少な
くとも一方を含む培地に微生物を接種し、発酵培養して
得られたバラ発酵抽出物、又はバラ抽出物と、（２）米
糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に微生物を接種し、
発酵培養して得られた米糠・大豆発酵抽出物と、を含有
することを特徴とする発酵組成物。
【請求項３】バラ及びバラ抽出物のうちの少なくとも
一方、米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に微生物を
接種し、発酵培養して得られることを特徴とする発酵組
成物。
【請求項４】上記微生物が細菌又は酵母である請求項
１乃至３のいずれかに記載の発酵組成物。
【請求項５】上記微生物が納豆菌、枯草菌、或いはＳ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する酵母である請求項
１乃至３のいずれかに記載の発酵組成物。
【請求項６】請求項１乃至５のいずれかに記載の発酵
組成物を含有することを特徴とする抗アレルギー性組成
物。
【請求項７】請求項１乃至５のいずれかに記載の発酵
組成物を含有することを特徴とする抗酸化性組成物。