KR102119825B1 - 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents

현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 및 이의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 및 이의 제조 방법{A COSMETIC COMPOSITION FOR MAINTAINING THE BALANCE OF MICROBIOM IN THE SKIN COMPRISING BROWN RICE, GREAN TEA AND DANDELION FERMENTATION EXTRACTS AND METHODE THEREOF}
본 발명은 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
피부는 신체의 외부를 덮고 있는 하나의 막으로 여러 가지 외부의 자극, 장해, 건조 등의 환경요소로부터 신체를 보호해 주는 다양한 생리적 기능을 수행하여 내부 장기와 그 밖의 체내 기관을 보호 조절하는 역할을 한다.
그러나, 피부는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적 기능이 저하되어 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되게 된다. 또한 광 또는 열에 반복적인 노출로 인해 피부의 외양 또는 기능이 변하게 되는데, 이로 인해 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상 기능 저하, 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등의 생성 및 피부 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다.
이러한 피부노화 및 손상을 방지하여 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻어진 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유 기능을 유지시키고 피부 세포를 활성화시켜 피부 신진대사를 촉진하여 피부 건강을 유지하고자 하는 노력이 계속되고 있으며, 이에 따른 화장품, 피부 외용제 등이 개발되고 있다.
그러나, 이들 물질은 피부 적용시 자극, 홍반, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부 기능 개선 효과를 기대기 어려웠다. 따라서, 기존의 피부 외용제 조성물 보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부 외용제 조성물의 개발이 요구되고 있다.
한국등록특허 제10-0479665호
본 발명의 목적은 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 측면은 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서, “현미”는 벼에 쌀겨를 제거하고 쌀 배아가 남아있는 것으로 단백질과 지방, 비타민 B1, B2, 광물질, 철, 인, 칼슘, 아미노산이 다량 함유되어 있어, 피부 보습 피부 톤을 유지해주는 효능이 있다. 특히 유산균을 접종하여 발효시킴으로써 다량의 유산균이 포함되어 피부 내 유익균 증진에 도움을 줄 수 있다.
본 발명에서, “녹차(Camellia Sinensis)”는 차나무과에 속하는 상록활엽관목으로, 이 잎을 건조한 차는 다방면에 활용되고 있다. 특히 항산화 작용, 항암작용, 심혈관계에 있어 혈중 지질 감소 작용, 혈액 순환 촉진 작용을 나타내는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서, “포공영(Taraxacum officinale)”은 민들레를 잎이 달린 채 뿌리를 캐내어 말린 것으로, 꽃과 잎, 줄기 뿌리에는 스테린류의 물질, 각종 지방산 등의 특수 성분이 포함되어 있고, 특히 칼슘, 인산 비타민 B1, C가 풍부하여 피부 개선에 활용되고 있다. 피부 산화적 스트레스를 예방하고 피부 속 각질세포를 보호하여 피부장벽 관리에 도움을 주는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 “발효”는 발효 균주 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정을 의미한다. 발효 균주를 통한 발효과정을 거친 원료는 발효 전보다 최소 2배에서 최대 수십배의 효과가 증대되는 것으로 알려져 있다. 발효를 거친 대사물질은 피부에 좋은 각종 아미노산, 유기산, 항산화물질을 함유하여 피부대사를 촉진시켜 피부결을 매끄럽게 가꿔준다. 또한 발효과정을 거치면서 입자가 작아지고 중금속 등의 독성이 분해되어 흡수율이 좋을 뿐 아니라 피부트러블이나 알레르기 부작용을 완화시켜준다. 나아가 유산균, 효모 등 유익균을 이용하여 발효시킴으로써 성분 내 유익균 중진 및/또는 증진 촉진 효능을 향상시킬 수 있다.
본 발명에서 “마이크로바이옴(microbiome)”은 미생물군집(microbiota) 및 유전체(genome)의 합성어로서 인간, 동식물, 토양, 바다, 호수, 암벽, 대기 등에 공존하는 미생물 군집과 유전체 전체를 의미한다. 그 중에서 피부 내 마이크로바이옴은 피부 내에 존재하는 미생물과 미생물, 숙주와 미생물 간의 복잡한 상호관계를 이루는 미생물군으로서, 인간 마이크로바이옴의 일부를 일컫는다.
상기 “피부 내 마이크로바이옴 균형 유지”는 피부 내 유익균의 활성 및 생존을 증진시키는 반면 피부 내 유해균의 증식 및/또는 활성을 억제함으로써 피부 내 미생물군집의 균형을 적절히 유지시키는 것을 의미한다.
한편 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지는 피부 상태 개선에 중요한 요소 중 하나이나, 노화 또는 자외선, 미세먼지, 호르몬, 식단 등 각종 생활습관, 환경적인 요인들에 의해 그 균형이 깨지기 쉽기 때문에 피부 내 미생물 균형을 유지시킬 수 있는 화장품의 필요성이 점차 증가하고 있다.
구체적으로 상기 마이크로바이옴 균형 유지는 피부 유익균을 증진시키거나 또는 피부 유해균을 억제시키는 것일 수 있다.
본 발명에서 “피부 유익균 증진”이란, 피부 속에는 2cm2당 약 1000가지 종류의 200만개 이상의 미생물이 존재하는데 이 중 피부 내 유익균의 증진을 촉진시키고 유익균의 생육을 활성화시킴으로써 피부 내 미생물 균형을 유지시키는 것을 의미한다.
본 발명 일 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물이 피부 유익균의 증진을 촉진시키는 것을 확인하였으며(표 2), 피부 속 마이크로바이옴 균형을 유지하여 피부 상태를 효과적으로 개선시킬 수 있음을 확인하였다.
본 발명에서 “피부 유해균 억제”란, 피부 내 유해균의 증진을 억제하거나 유해균의 생육을 불활성화시킴으로써 피부 내 미생물 균형을 유지시키는 것을 의미한다.
본 발명의 일 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물이 피부 내 유해균을 감소시키는 것을 확인하였으며(표 4), 피부 내 유해균 증진을 억제하여 피부 상태 개선에 효과적으로 활용될 수 있음을 확인하였다.
상기와 같은 결과는 본 발명의 화장료 조성물이 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지에 우수한 효능이 있음을 나타내는 것이다.
구체적으로, 상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라플란타룸 (Lactobacillus paraplantarum) 또는 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주로 발효된 것일 수 있다.
또한 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물 또는 갈락토미세스 발효여과물 및 스피룰리나 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에서 “갈락토미세스(Galactomyces)”는 비타민, 미네랄, 아미노산, 효소, 유기산, 효모, 펩타이드 등이 풍부한 천연 효모이다. 저분자로서 피부에 빠르게 흡수되는 장점을 가지고 있으며 피부에 상기 아미노산, 효소 등 영양분을 공급함으로써 건강한 피부를 만들고, 피부에 보습력을 부여하며 피부탄력 및 피부톤을 개선하는데 효능이 있다.
상기 “갈락토미세스 발효 여과물”은 갈락토미세스 균주를 배양한 후 여과하여 수득한 것으로서, 직접 제조하거나 또는 구입하여 사용할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는 현미, 녹차, 포공영 발효 추출물에 갈락토미세스 발효여과물을 혼합시킬 경우, 갈락토미세스 발효여과물이 포함되지 않은 조성물에 비해 유익균을 10% 이상 증가시킬 수 있음을 확인하였다(표 11). 이는 갈락토미세스 발효여과물이 피부 유익균 증진에 시너지 효과를 제공함을 시사한다.
본 발명에서 “스피룰리나(Spirulina)”는 지구에서 가장 오래된 조류로서 세포벽이 얇은 다세포 생물이다. 상기 스피룰리나는 고염분 알카리 환경에서 자생하며, 인공 양식으로 대량 생산이 가능하다. 상기 스피룰리나는 청록색으로 나선형이며 길이 300~500㎛, 너비 8㎛ 이다. 약 30종이 알려져 있으며, 구성 성분은 단백질 60~70%, 지질 6~9%, 탄수화물 15~20%로 이루어져 있다.
상기 스피룰리나는 공지된 다양한 스피룰리나 종을 포함하며 스피룰리나 플라텐시스(Spirulina platensis), 스피룰리나 막시마(Spirulina maxima), 스피룰리나 서브살사(Spirulina subsalsa), 스피룰리나 메이저(Spirulina major), 스피룰리나 게이트러리(Spirulina geitleri), 스피룰리나 시암(Spirulina Siamese), 스피룰리나 프린셉스(Spirulina princeps), 스피룰리나 락시시마(Spirulina laxissima), 스피룰리나 쿠타(Spirulina curta), 스피룰리나 스피루리노이드(Spirulina spirulinoides) 및 스피룰리나 플라테네시스(Spirulina platenesis)로 구성된 종에서 선택될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는 락토바실러스 균주를 이용하여 발효한 현미, 녹차, 포공영 발효 추출물의 유익균 증가 효과(표 2)를 확인하였으며, 유해균 억제 효과가 나타남을 확인하였다(표 4). 또한, 갈락토미세스 발효 여과물 및/또는 스피룰리나 추출물이 혼합된 경우 유익균 증가 효과 및 유해균 억제 효과가 향상됨을 확인하였다(표 4).
상기 결과는 갈락토미세스 발효여과물 및/또는 스피룰리나 추출물이 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물의 마이크로바이옴 밸런스 유지 효과를 상승시킬 수 있는 물질임을 시사한다.
또한 구체적으로, 상기 화장료 조성물은 pH를 4.0 내지 pH 6.5의 범위로 유지시킴으로써 피부 항상성을 유지시키는 것일 수 있다.
피부 내 미생물의 적절한 균형 유지는 외부 유해 성분으로부터 피부의 각질층을 보호해줌으로써 피부 장벽 강화, 피부 보습 유지 효과 상승 및 피부 건조 증상을 개선시킬 수 있을 뿐 아니라, 피부 표면에 pH 균형을 회복시키는 탁월한 효능을 제공할 수 있다.
피부가 pH 4.0 이하의 산성 상태에서는 피지 분비량이 많아 지성 상태의 피부 환경이 형성되기 쉽고, pH 6.5 이상의 알칼리 상태에서는 유분이 부족하여 건조하고 예민해지며 각종 세균이 번식하여 여드름 등의 염증이 유발되기 싶다. 반면 피부가 pH 4.0 내지 6.5 범위의 약산성 상태에서는 피부 장벽을 위해 보호막을 형성하여 외부로부터 미세먼지나 각종 오염물질의 침투를 차단하는 건강한 피부 상태가 유지될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는 피부 항상성 유지 효과를 확인하기 위해 락토바실러스 속 균주를 이용하여 발효한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 처리한 후 피부 pH를 측정한 결과, pH 4.0 내지 6.5 범위 내의 약산성 상태의 피부를 유지시킬 수 있음을 확인하였으며, 특히 알칼리성을 나타내는 피부에 대하여도 보다 빠른 시간에 약산성 피부로 변화시키는 것을 확인하였다(표 5).
또한 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 피부탄력 개선 용도를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에서 “피부탄력”이란 피부 진피층에서 탄력을 유지시키는 콜라겐과 엘라스틴 합성이 감소하면서 피부가 처지고 주름이 생기는 것을 의미한다. 피부 노화, 얼굴 근육 세포 퇴행, 자외선, 수분 섭취 부족, 스트레스, 수면부족, 혈액순환 장애 등이 주요 원인이다.
상기 “피부탄력 개선”은 피부가 처지고 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나 이미 처진 피부 또는 주름을 완화시키는 것을 의미한다.
본 발명의 일 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물을 처리하는 경우, 우수한 엘라스타아제 저해 활성을 나타냄으로써 피부탄력 개선에 현저한 효과가 있음을 확인하였다(표 6).
본 발명의 화장료 조성물은 용액, 외용 연고, 크림, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로하드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 피부에 직접 도포하거나 살포하는 등의 경피 투여 방법으로 사용될 수 있으며, 본 발명 조성물의 투여 경로는 목적조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물의 사용량은 연령, 병변의 정도 등의 개인 차이나 제형에 따라 적절하게 조절될 수 있으며, 1일 1회 내지 수회 적?량을 피부에 도포하여 1 주일 내지 수개월 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 a) 현미, 녹차 및 포공영에 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum) 또는 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 접종하는 단계; 및 b) 상기 접종 이후 배양하여 발효시켜 현미, 녹차 및 포공영의 발효 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에서는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum) 또는 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용하여 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 제조하고, 상기 발효 추출물을 포함한 화장료 조성물을 이용하여 피부 유익균을 증진시킬 수 있다.
구체적으로, 상기 제조방법은 상기 발효 이후 c) 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물 또는 갈락토미세스 발효여과물 및 스피룰리나 추출물을 더 혼합하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 락토바실러스 속 균주를 이용하여 발효한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 조성물은 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지 효과가 우수하다. 특히 피부 유익균을 증진시킴으로써 피부상태 개선, 피부 항상성 유지 및 피부탄력 개선에 탁월한 효능이 있는 바, 다양한 용도의 화장료 조성물로서 활용될 수 있다.
본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야한다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물
정제수로 세척하고 건조시킨 현미, 녹차 포공영을 조분쇄하여 추출용매(정제수)를 첨가하고, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주를 이용하여 발효 추출물을 수득하였다.
구체적으로 건조시킨 현미 10 g, 녹차 10 g, 포공영 10 g에 약 20배 부피의 정제수를 첨가하고, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)을 접종하였다. 이후, 37 ℃의 온도에서 72시간 내지 96시간동안 250 rpm으로 발효시킨 혼합 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 2. 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물
정제수로 세척하고 건조시킨 현미, 녹차 포공영을 조분쇄하여 추출용매(정제수)를 첨가하고, 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum) 균주를 이용하여 발효 추출물을 수득하였다.
구체적으로 건조시킨 현미 10 g, 녹차 10 g, 포공영 10 g에 약 20배 부피의 정제수를 첨가하고, 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum)를 접종하였다. 이후, 37 ℃의 온도에서 72시간 내지 96시간동안 250 rpm으로 발효시킨 혼합 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 3. 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물
정제수로 세척하고 건조시킨 현미, 녹차 포공영을 조분쇄하여 추출용매(정제수)를 첨가하고, 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum) 균주를 이용하여 발효 추출물을 수득하였다.
구체적으로 건조시킨 현미 10 g, 녹차 10 g, 포공영 10 g에 약 20배 부피의 정제수를 첨가하고, 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸를 1 : 1의 CFU로 접종하였다. 이후, 37 ℃의 온도에서 72시간 내지 96시간동안 250 rpm으로 발효시킨 혼합 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 4. 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물과 갈락토미세스 발효여과물 혼합 조성물
갈락토미세스 발효 여과물은 갈락토미세스 균주를 15 내지 20 ℃에서 48시간 내지 72시간 동안 배양하였다. 이후 배양액을 원심분리 및 0.45 μm의 필터로 여과막을 이용하여 1차 여과하였고, 배양균 및 찌꺼기를 제거한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축하여 갈락토미세스 발효여과물을 수득하였다.
이후 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물(실시예 1)과 갈락토미세스 발효여과물을 약 1: 1의 비율로 혼합하여 실시예 4의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 5. 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물과 갈락토미세스 발효여과물 혼합 조성물
상기 실시예 3과 동일한 방식을 이용하였으며, 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물(실시예 2)과 갈락토미세스 발효여과물을 약 1: 1의 비율로 혼합하여 실시예 5의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 6. 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물과 갈락토미세스 발효여과물 혼합 조성물
상기 실시예 3과 동일한 방식을 이용하였으며, 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물(실시예 3)과 갈락토미세스 발효여과물을 약 1 : 1의 비율로 혼합하여 실시예 6의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 7. 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
스피룰리나 추출물은 스피룰리나를 상온에서 완전히 건조시키고 분쇄하여 분쇄물을 수득하였다. 이후 약 20배 부피의 정제수를 첨가하고 121℃의 온도에서 15분 동안 추출을 진행하였다.
이후 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물(실시예 1)과 스피룰리나 추출물을 약 1 : 1의 비율로 혼합하여 실시예 7의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 8. 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
상기 실시예 5와 동일한 방식을 이용하였으며, 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물(실시예 2)과 스피룰리나 추출물을 약 1 : 1의 비율로 혼합하여 실시예 8의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 9. 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
상기 실시예 5와 동일한 방식을 이용하였으며, 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물(실시예 3)과 스피룰리나 추출물을 약 1 : 1의 비율로 혼합하여 실시예 9의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 10. 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
상기 실시예 1, 실시예 4 및 실시예 7에 개시된 방법을 이용하여 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물을 각각 제조한 후 1 : 1 : 1 로 혼합하여 실시예 10의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 11. 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
상기 실시예 2, 실시예 5 및 실시예 8에 개시된 방법을 이용하여 락토바실러스 파라플란타룸 균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물을 각각 제조한 후 1 : 1 : 1 로 혼합하여 실시예 11의 혼합 조성물을 준비하였다.
실시예 12. 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
상기 실시예 3, 실시예 6 및 실시예 9에 개시된 방법을 이용하여 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물을 각각 제조한 후 1 : 1 : 1 로 혼합하여 실시예 12의 혼합 조성물을 준비하였다.
비교예 1. 효모를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물
락토바실러스 속 균주가 아닌 효모를 이용한 발효 추출물을 제조하였다.
구체적으로 건조시킨 현미 10 g, 녹차 10 g, 포공영 10 g에 약 20배 부피의 정제수를 첨가하여 추출물을 얻었다. 상기 추출물에 효모를 접종하였다. 이때 효모는 사카로미세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였다.
이후, 배양은 약 72시간 동안 35℃로 유지하며 배양하였다. 이후 배양액을 원심분리 및 0.45 μm의 필터로 여과막을 이용하여 1차 여과하였고, 배양균 및 찌꺼기를 제거한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 효모를 이용한 현미, 녹차 및 포공영을 포함하는 발효 추출물을 준비하였다.
비교예 2. 효모를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물 및 갈락토미세스 발효여과물의 혼합 조성물
상기 실시예와 동일한 방식을 이용하였으며, 비교예 1의 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물에 갈락토미세스 발효여과물을 혼합한 비교예 2의 혼합 조성물을 준비하였다.
비교예 3. 효모를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물 및 스피룰리나 추출물의 혼합 조성물
상기 실시예와 동일한 방식을 이용하였으며, 비교예 1의 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물에 스피룰리나 추출물을 혼합한 비교예 3의 혼합 조성물을 준비하였다.
비교예 4. 효모를 이용한 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물, 갈락토미세스 발효여과물과 스피룰리나 추출물 혼합 조성물
상기 실시예와 동일한 방식을 이용하였으며, 비교예 1의 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물에 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물을 혼합한 비교예 4의 혼합 조성물을 준비하였다.
실험예 1. 피부각질형성세포 배양
피부각질형성세포인 HaCaT 세포는 Dr. C.G. Hyun (Jeju National University, Korea)로부터 분양 받아 100 units/ml 페니실린-스트렙토마이신 및 10 % 태아 소 혈청(fetal bovine serum, FBS)이 함유된 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 배지를 사용하여 37 ℃, 5% CO2항온기에서 배양하였으며, 3~4일 간격으로 계대배양을 시행하였다.
실험예 2. 세포 독성 평가(EZ-cytox assay)
실시예 1 내지 12의 피부 안정성을 확인하기 위해, EZ-사이톡스 분석(EZ-cytox assay)법을 이용하여 세포 독성 평가를 수행하였다. EZ-사이톡스 분석(EZ-cytox assay)은 살아있는 세포의 탈수소효소(Dehydrogenase)와 반응하여 주황색의 수용성 formazan을 생성하는 원리를 이용하여 세포생존율을 측정하는 대표적인 방법이다.
구체적으로, 피부각질형성세포에서의 독성을 확인하기 위하여 HaCaT 세포를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 5 X 104 cells/mL로 96 웰 플레이트에 분주하여 37℃, 5% CO2 조건에서 18시간 동안 반응시킨 후, 마이크로플레이트리더 (microplate reader)를 사용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료 군에 대한 평균 흡광도 값을 구하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 세포생존율을 평가하였다. 그 결과는 표 1에 나타내었다.
세포 생존율(대조군 %)
농도(ug/ml) 0 50 100 125
실시예 1 100 115 122 129
실시예 2 100 114 120 130
실시예 3 100 116 123 128
실시예 4 100 117 122 129
실시예 5 100 113 120 131
실시예 6 100 111 121 128
실시예 7 100 112 122 130
실시예 8 100 110 119 128
실시예 9 100 113 124 129
실시예 10 100 112 122 132
실시예 11 100 112 125 131
실시예 12 100 114 127 134
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1 내지 12의 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물 및 갈락토미세스 발효여과물 및/또는 스피룰리나 추출물까지 포함한 혼합 조성물들은 모두 농도에 상관 없이 우수한 세포 생존율을 나타냈으며, 피부각질형성세포에 대한 독성이 거의 없어 안정성이 높음을 확인하였다.
실험예 3. 피부 유익균 증진 효과 확인
상기 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물의 피부 유익균 증식에 미치는 효과를 확인하기 위한 실험을 수행하였다.
3-1. 류코노스톡 메센테로이데스( Leuconostoc mesenteorides )균 증식 촉진 효과 확인
유익균으로서 젖산균에 속하는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteorides) 균주의 증식 촉진 효과가 있는지 여부를 확인하였다.
먼저, 류코노스톡 메센테로이데스는 케피어 그레인(Kefir grain)으로부터 선별배지를 활용하여 분리하였다. 0.002% BPB-MRS 배지를 사용하여 30℃에서 72시간 동안 혐기 배양을 하였다. 이후, 유산균 콜로니를 선택한 뒤 16S rRNA 시퀀싱을 실시하여 동정하였다.
이틀 전 미리 깨워 둔 균의 탁도를 2.0으로 맞춘 후 MRS 브로스 3 mL 가 담긴 튜브에 주입한 후, 101 CFU/mL로 희석시키고 초기 균 수를 측정하였다. 이후 3 mL MRS 브로스에 실시예 1 내지 12의 조성물을을 각각 5 mg씩 넣고 5분간 초음파 처리(50초 작동, 10초 간격, 5회 반복) 후, DMSO 0.1 % 주입하였다. 동일한 방법으로 3 mL MRS 브로스에 비교예 1 내지 4조성물을 첨가하였으며, 배양시킨 후 균수(CFU/mL)를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.
구분 균수(CFU/mL)
실시예 1 3.16 x 107
실시예 2 3.15 x 107
실시예 3 3.17 x 107
실시예 4 3.25 x 107
실시예 5 3.24 x 107
실시예 6 3.27 x 107
실시예 7 3.23 x 107
실시예 8 3.22 x 107
실시예 9 3.24 x 107
실시예 10 3.48 x 107
실시예 11 3.47 x 107
실시예 12 3.53 x 107
비교예 1 4.31 x 106
비교예 2 4.45 x 106
비교예 3 4.46 x 106
비교예 4 7.50 x 106
그 결과, 류코노스톡 메센테로이데스 균주를 실시예 1 내지 12에서 배양한 경우 비교예 1 내지 4에서 배양한 것과 비교하여 생육이 현저히 증가하였다. 특히, 본 발명의 락토바실러스 속 균주를 이용한 발효 추출물은 효모를 이용한 비교예에 비해 유익균 증진효과가 뚜렷하게 증가하였는 바, 이는 발효 균주에 따라 효과가 달리 나타날 수 있음을 시사하는 것이다. 나아가, 갈락토미세스 발효여과물 및/또는 스피룰리나 추출물을 추가로 혼합한 조성물에서 유익균 증진효과가 더욱 증가함을 확인하였다.
3-2. 안면 피부에서의 유해균 감소 확인
25세에서 45세 사이의 여성 피험자(평균 연령 33. 8세) 10명을 대상으로 하기 표 3에 따라 제조한 에센스 제형의 화장료 조성물을 1일 2회 안면 피부에 도포한 후 2주 및 4주 후 안면 피부에서 유해균의 변화를 확인하였다.
성분 함량(중량%)
실시예 1 내지 12 조성물/비교예 1 내지 4 조성물 10.0
세토스테아릴알콜 2.0
친유형글리세릴스테아레이트 1.5
글리세릴스테아레이트SE 1.5
피토스쿠알란 4.0
하이드로지네이티드폴리데센 3.0
디메치콘 0.5
폴리소르베이트 60 1.0
소르비탄세스퀴올리에이트 0.5
메틸파라벤 0.1
프로필파라벤 0.1
정제수 잔량
부틸렌글리콜 5.0
폴리아크릴레이트-13 0.5
합 100
먼저 온도와 습도가 일정한 상태(온도 23±2℃, 습도 50±5%) 안면의 양쪽 볼 부분 피부 표면 미생물을 스왑하였다. 스왑은 Quick Swab(3M 마이크로바이올로지, 미국)을 이용하였다. 이후 스왑한 헤드 부분을 멸균된 가위로 잘라 50 mL 코니칼 튜브에 넣고 FastDNA SPIN Kit(고마바이오텍, 한국)의 2X 비즈, 인산 나트륨(sodium phosphate), MT 버퍼를 넣고 20분간 볼텍싱한 후 미생물의 유전체를 추출한 후 Bac9F/Bac541R 프라이머를 이용하여 PCR을 수행하였다(Meisel et al., 2016; Kong, 2016 참조). PCR 산물을 정제한 후 정제된 DNA 샘플을 Quant-iTTM PicoGreen® dsRNA 에세이 키트(인비트로젠, 미국)을 이용하여 정량하여 각각의 샘플이 동량의 DNA를 포함하도록 준비하였다. 이후 파이로시퀀싱(pyrosequencing)을 454 GS FLX 티타늄 시퀀싱 시스템(로쉐, 독일)을 이용하여 수행하였다. 상기 파이로 시퀀싱은 GS FLX 티타늄 시약을 이용하여 제조사의 지시에 따라 사용하였다.16S rDNA유전자로부터 OTUs를 기반으로 한 PICRUSt(phylogenetic investigation of communities by reconstruction of unobserved states)의 생물 정보학 소프트웨어를 이용하여 미생물군집의 메타 유전자분석을 시행하였다. 유해균은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes), 코리네박테리움 미누티시움 (Corynebacterium minutissimum) 및 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)을 대상으로 하였으며, 본 발명의 화장료 조성물의 유해균 억제 결과는 하기 표 4에 나타난 바와 같다.
구분 병원성 균주 시간에 따른 변화 (%)
0주 1주 2주
실시예 1 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 65.08 41.99
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.025 0.012
황색포도상구균 0.055 0.017 0
실시예 2 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 64.08 38.99
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.025 0.010
황색포도상구균 0.055 0.014 0
실시예 3 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 65.08 40.55
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.023 0.015
황색포도상구균 0.055 0.012 0
실시예 4 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 59.84 36.18
코리네박테리움 미누티시움 0.020 0.014 0.009
황색포도상구균 0.060 0.009 0
실시예 5 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 59.15 36.01
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.015 0.007
황색포도상구균 0.055 0.010 0
실시예 6 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 60.13 37.11
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.015 0.008
황색포도상구균 0.061 0.011 0
실시예 7 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 60.00 37.99
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.020 0.009
황색포도상구균 0.061 0.010 0
실시예 8 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 61.09 38.31
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.019 0.010
황색포도상구균 0.055 0.014 0
실시예 9 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 60.95 37.99
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.018 0.008
황색포도상구균 0.055 0.017 0
실시예 10 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 57.12 33.10
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.009 0.002
황색포도상구균 0.055 0.004 0
실시예 11 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 56.23 32.89
코리네박테리움 미누티시움 0.020 0.010 0.001
황색포도상구균 0.060 0.004 0
실시예 12 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 55.18 30.18
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.005 0.001
황색포도상구균 0.055 0.003 0
비교예1 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 66.87 47.19
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.024 0.018
황색포도상구균 0.055 0.015 0.004
비교예2 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 64.71 44.21
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.022 0.015
황색포도상구균 0.055 0.011 0.002
비교예3 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 64.01 45.13
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.023 0.012
황색포도상구균 0.055 0.009 0.003
비교예4 프로피오니박테리움 아크네스 70.04 63.01 40.13
코리네박테리움 미누티시움 0.025 0.015 0.009
황색포도상구균 0.055 0.010 0.001
그 결과, 상기 에센스를 피부에 일정기간 도포할 경우, 피부 유해균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네스, 코리네박테리움 미누티시움 및 황색포도상구균을 모두 감소시키는 것을 확인하였다.상기 결과는 본 발명의 화장료 조성물은 피부의 유익균은 증진시키고, 유해균은 감소시키는데 효과적인 물질임을 시사한다.
실험예 4. 피부 항상성 유지 효과 확인
상기 실시예 1 내지 12의 조성물이 피부 pH를 4.0 내지 6.5 범위로 피부 항상성 유지에 효과적인지를 확인하기 위한 실험을 수행하였다.
먼저 35세에서 55세 사이의 여성 피험자(평균 연령 45. 8세) 10명을 대상으로 얼굴에 상기 표 3에 따라 제조한 에센스를 도포하였으며, 도포 전, 1분 후, 1시간 후, 2시간 후, 5시간 후 및 12시간 후의 피부 pH를 각각 측정하였다. 상기 피험자들은 세균 번식 및 이에 의한 여드름성 피부로서 알칼리성 피부를 가졌으며, 본 발명의 조성물을 통해 정상 피부의 pH인 약산성으로 균형이 맞추어지는 것을 확인하였다.
피부 pH변화는 피부 pH 측정기 PH900으로 측정하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. pH 값은 10명을 평균하여 나타낸 것이다.
구분 시간 경과에 따른 평균 pH
바르기 전 1분 후 1시간 후 2시간 후 5 시간 후 12시간 후
실시예 1 7.5 6.8 6.0 5.8 5.4 5.5
실시예 2 7.5 6.7 6.1 5.4 5.4 5.4
실시예 3 7.5 6.7 6.1 5.5 5.3 5.3
실시예 4 7.5 6.6 5.8 5.5 5.4 5.5
실시예 5 7.5 6.6 5.9 5.8 5.5 5.4
실시예 6 7.5 6.5 6.0 5.7 5.5 5.3
실시예 7 7.5 6.5 5.9 5.4 5.4 5.5
실시예 8 7.5 6.6 5.9 5.5 5.5 5.4
실시예 9 7.5 6.5 6.0 5.7 5.4 5.3
실시예 10 7.5 6.3 5.5 5.3 5.2 5.5
실시예 11 7.5 6.4 5.6 5.4 5.4 5.2
실시예 12 7.5 6.2 5.5 5.2 5.2 5.1
비교예 1 7.5 7.0 6.7 6.6 6.5 6.2
비교예 2 7.5 6.9 6.7 6.5 6.2 6.1
비교예 3 7.5 6.9 6.6 6.5 6.3 6.2
비교예 4 7.5 6.8 6.5 6.4 6.2 5.9
그 결과, 상기와 같은 본 발명의 에센스를 피부에 일정기간 도포할 경우, 피부의 pH를 장시간 동안 약산성으로 유지하는 효과가 우수한 것을 확인하였다. 피부의 산도는 약산성으로 유지되면서 pH 밸런스가 유지되고, 이를 통해 피부의 항상성이 유지되는 바, 상기 결과를 통해 본 발명의 화장료 조성물이 피부 항상성 유지에 우수한 효과가 있음을 확인하였다. 특히, 갈락토미세스 발효여과물 및/또는 스피룰리나 추출물이 추가로 포함된 조성물의 경우, 약산성의 pH로 피부의 pH 밸런스가 더욱 빠른 시간에 이루어짐을 확인하였다.
실험예 5. 피부 탄력 개선 효과 확인
상기 실시예 1 내지 12의 조성물이 피부 탄력 개선에 효과적인지를 확인하기 위하여 엘라스타아제 억제 활성(elastase inhibition activity)을 평가하는 실험을 수행하였다.
구체적으로, corning flat 96 웰(well) 플레이트에 4.4 mM N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide(100 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0, 25℃)를 20㎕ 첨가 한 후, 100 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0, 25℃)을 270㎕와 상기 제조한 각 실시예 및 비교예 조성물을 하기 각 농도에 따라 첨가하고, 25℃에서 15분간 반응시켰다. 이후 1.0 unit 엘라스타아제 10㎕ 첨가하여 반응혼합물을 25℃에서 15분간 반응한 후, 분광분석기(Fluorescent microplate reader)를 이용하여 410nm에서 흡광도를 측정하였다. 엘라스타아제 저해 활성은 실시예 또는 비교예의 조성물을 처리하지 않은 경우를 대조군으로 하여 하기의 식을 이용하여 계산하였다.
[식 1]
엘라스타아제 저해활성(%) = 100-[(실시예 또는 비교예 조성물 처리군의 흡광도/ 실시예 또는 비교예 조성물 무처리군의 흡광도)X100]
구분 엘라스타아제 저해활성(%)
실시예 1 33.6%
실시예 2 33.5%
실시예 3 34.0%
실시예 4 45.5%
실시예 5 45.4%
실시예 6 46.5%
실시예 7 44.9%
실시예 8 45.2%
실시예 9 46.3%
실시예 10 54.7%
실시예 11 53.2%
실시예 12 58.2%
비교예 1 32.0%
비교예 2 32.5%
비교예 3 32.4%
비교예 4 33.2%
상기 표 6에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 내지 12의 조성물 적용시 비교예 1 내지 4에 비해 현저히 우수한 엘라스타아제 저해 활성능을 나타내는 것으로 확인되었다. 이는 본 발명의 조성물이 알레스틴을 분해하는 엘라스타아제를 억제함으로써 피부 탄력 유지에 뛰어난 효능이 있음을 시사한다.
제조예 1. 에센스 제조
하기의 표 7과 같이 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하였다(단위: 중량%).
성분 함량(중량%)
세테아릴알코올 2
세테아릴글루코사이드 1
호호바씨오일 5
실리카 0.5
글리세린 10
실시예 1 내지 12의 조성물 5
정제수 To 100
제조예 2. 크림 제조
하기의 표 8과 같이 크림 제형의 화장료 조성물을 제조하였다(단위: 중량%).
성분 함량(중량%)
실시예 1 내지 12의 조성물 5
스테아린산 15
에탄올 1
수산화칼륨 0.7
글리세린 5
프로필렌글리콜 3
방부제 적량
향 적량
정제수 to 100
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단 일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (7)

  1. 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물로서,
    상기 마이크로바이옴 균형 유지는 피부 내 유익균을 증진시키고 유해균을 억제시키는 것인, 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서,
    상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum) 또는 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주로 발효된 것인 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 갈락토미세스 발효여과물, 스피룰리나 추출물 또는 갈락토미세스 발효여과물 및 스피룰리나 추출물을 더 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  5. 제1항, 제3항 및 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 pH를 4.0 내지 pH 6.5의 범위로 유지시킴으로써 피부 항상성을 유지시키는 것인 화장료 조성물.
  6. 제1항, 제3항 및 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부탄력 개선 용도를 추가로 포함하는 것인 화장료 조성물.
  7. a) 현미, 녹차 및 포공영에 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus paraplantarum) 또는 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 파라플란타룸 복합균주를 접종하는 단계; 및
    b) 상기 접종 이후 배양하여 발효시켜 현미, 녹차 및 포공영의 발효 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 피부 유익균 증진용 화장료 조성물 제조방법으로서,
    상기 마이크로바이옴 균형 유지는 피부 내 유익균을 증진시키고 유해균을 억제시키는 것인, 화장료 조성물 제조방법.
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