KR20160122379A - 동치미 원료를 이용한 복합발효물의 제조방법 및 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 화장료 조성물을 포함하는 화장품 - Google Patents

Abstract

동치미 원료를 이용한 복합발효물의 제조방법 및 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 화장료 조성물을 포함하는 화장품이 제공된다. 화장료 조성물은 무(Raphanus Sativus), 양파(Allium cepa L.), 마늘(Allium scorodorpasum), 생강(Zingiber officinale Roscoe) 및 사과(Malus dornestica)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함하는 원료로부터의 발효 추출물로부터 유도되는 유기산을 0㎎/g 초과 내지 1000㎎/g 이하의 범위로 포함할 수 있다.

Description

동치미 원료를 이용한 복합발효물의 제조방법 및 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 화장료 조성물을 포함하는 화장품{MANUFACTURE METHOD OF FERMENTED COMPLEX USING DONGCHIMI MATERIALS AND COSMETIC COMPOSITION USING BY THE METHOD AND COSMETIC COMPRISING THE COSMETIC COMPOSITION}

본 발명은 동치미 원료를 이용한 복합 발효물의 제조방법, 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 화장료 조성물을 포함하는 화장품에 관한 것이다.

피부는 몸 표면을 싸고 있는 기관으로 외부의 자극으로부터 신체를 보호하고 항상성을 유지하는 기능을 하고 있다. 일반적으로 피부는 표피, 진피, 피하지방층으로 이루어져 있으며, 이 중 표피는 다시 각질형성세포의 분화정도에 따라 각질층, 과립층, 유극충 및 기저층으로 세분화 된다.

상기 각질층은 분화된 각질 세포와 그 사이를 채우고 있는 세포간 지질로 구성되며, 체내 물질이 외부로 나가는 것을 막아주고 외부의 물리적, 화학적, 생물학적 자극으로부터 인체를 보호하는 방어 기능을 한다. 정상 피부의 경우 각질층은 15~20층으로 구성되고 이들이 완전히 교체 되는데 약 28일가량이 소요된다.

상기 각질세포가 탈락되는 과정은 아직 명확하진 않지만, 세포간 지질, 단백질 분해효소, 수분 함량 또는 교소체 등이 모두 관여하는 것으로 알려져 있다.

정상적으로는 세포의 분열 주기가 조절되면서 세포가 성장하고 분화되어 탈락되는 과정이 일정한 비율과 기간으로 이루어지게 되지만 나이가 들어감에 따라 피부 구성 성분인 표피, 진피 및 피하조직의 두께가 얇아지고 피부의 수분함량이 급격히 감소하며 기저층의 각질형성세포의 분열이 감소하여 노후화된 각질이 정상적으로 탈락되지 않아 각질층이 두꺼워져 거칠어 지며 주름과 과각화 및 피부 가려움의 문제를 야기시킬 수 있다.

한편, 멜라닌(melanin)은 자연계에 널리 분포하는 페놀류의 생물고분자 물질로, 사람의 피부색을 나타내는 물질이다. 표피 기저층에 존재하는 멜라닌 생성 세포인 멜라노사이트(Melanocyte)에 의해 생성되는 멜라닌은 피부의 고유한 색을 나타내며 자외선으로부터 피부를 보호하지만 과잉 생산된 멜라닌은 피부에 침착되어 기미와 점, 주근깨 등을 형성하여 미용을 해치거나 변이된 멜라닌 세포에 의한 피부흑색종 등의 문제를 야기할 수 있다. 멜라닌의 생합성은 멜라노사이트 내의 아미노산의 일종인 티로신(Tyrosine)이 타이로시나제(Tyrosinase)에 의해 도파(Dopa)로 바뀌고 이후 여러단계의 생리학적 반응을 통해 최종적으로 멜라닌을 생성하게 된다. 따라서 멜라닌의 생성을 억제하기 위해서는 멜라닌 합성의 초기 반응을 일으키는 티로시나제의 활성을 억제하여 멜라닌의 합성을 억제하는 효과를 갖거나 또는 생성된 흑색 멜라닌의 환원을 촉진하여 최초의 엷은 색의 멜라닌으로 되돌아가도록 하는 한편, 이미 멜라닌이 침착된 오래된 각질을 제거하여야 한다. 현재까지 공지된 미백제는 조직대사의 항진작용이나 각질층의 박리를 촉진시키는 태반 추출물 및 표피세포의 분열을 촉진시키는 레티노익산(Retinoic acid) 등이 개시되어 있으며, 피부미백 메커니즘에서 가장 중요한 역할을 하는 타이로시나제(Tyrosinase) 억제제(Inhibitor)를 활용한 미백제 개발이 진행되고 있다.

최근에는 상기와 같은 우수한 각질층 제거 효과를 갖고, 멜라닌의 흑화를 막거나 멜라닌의 합성을 억제 또는 흑색 멜라닌의 환원을 촉진하여 우수한 미백효과를 갖도록 하는 화장료 조성물에 대한 연구가 진행되고 있다.

이에 본 발명이 해결하고자 하는 과제는, 우수한 각질 제거 효과를 갖는 동치미 원료를 이용한 복합 발효물의 제조방법, 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 화장료 조성물을 포함하는 화장품을 제공하는데 있다.

또한, 우수한 미백 효과를 나타내는 동치미 원료를 이용한 복합 발효물의 제조방법, 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 이를 포함하는 화장품을 제공하는데 있다.

본 발명의 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 무(Raphanus Sativus), 양파(Allium cepa L.), 마늘(Allium scorodorpasum), 생강(Zingiber officinale Roscoe) 및 사과(Malus dornestica)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함하는 원료로부터의 발효 추출물로부터 유도되는 유기산을 0㎎/g 초과 내지 1000㎎/g 이하의 범위로 포함할 수 있다.

또한, 상기 발효 추출물은 물, 에탄올, 메탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렐글리콜 및 글리세린을 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 추출용매를 이용하여 추출된 것을 특징으로할 수 있다.

또한, 상기 발효 추출물은 Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium bifidum, Bifodobacterium breve 및 Bifidobacterium longum로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 균으로 발효시켜 얻어진 것을 특징으로할 수 있다.

상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 화장품은 상기 화장료 조성물을 0.01중량% 내지 20 중량%로 포함하며, 상기 화장품은 스킨로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 로션, 영양크림, 밀크 로션, 영양 크림, 맛사지 크림, 핸드 크림, 에센스, 팩, 클렌징 로션 및 바디 클렌져를 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나일 수 있다.

기타 실시예들의 구체적인 사항들은 상세한 설명 및 도면들에 포함되어 있다.

본 발명의 실시예들에 의하면 적어도 다음과 같은 효과가 있다.

본 발명에 따르면, 우수한 각질 제거 효과를 보일 수 있는 동치미 원료를 이용한 복합 발효물의 제조방법, 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 이를 포함하는 화장품을 제공할 수 있다.

또한, 우수한 미백 효과를 보일 수 있는 동치미 원료를 이용한 복합 발효물의 제조방법, 이에 의해 제조된 화장료 조성물 및 이를 포함하는 화장품을 제공할 수 있다.

본 발명에 따른 효과는 이상에서 예시된 내용에 의해 제한되지 않으며, 더욱 다양한 효과들이 본 명세서 내에 포함되어 있다.

도 1은 실험예 1의 유기산 함량을 고속 액체 크로마토그래피에 의해 분석한 분석 그래프이다.
도 2는 실험예 5의 농도별 타이로시나제(Tyrosinase) 저해활성을 분석한 그래프이다.

본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.

이하, 도면을 참조하여 본 발명의 실시예들에 대하여 설명한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

화장료 조성물

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 발효 추출물로부터 유도되는 유기산을 0㎎/g 초과 내지 1000㎎/g 이하의 범위로 포함할 수 있으며, 예를 들어, 100㎎/g 내지 800㎎/g 또는 200㎎/g 내지 600㎎/g의 범위로 포함할 수 있다. 바람직하게는 상기 유기산은 400㎎/g 내지 600㎎/g의 범위로 포함할 수 있다. 상기 범위를 만족함으로써, 우수한 각질 제거 효과와 우수한 미백 효과를 낼 수 있다.

한편, 상기 발효 추출물은 무(Raphanus Sativus), 양파(Allium cepa L.), 마늘(Allium scorodorpasum), 생강(Zingiber officinale Roscoe) 및 사과(Malus dornestica)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함하는 원료로부터의 발효 추출물일 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니며, 바람직하게는 이들 중 적어도 둘 이상을 포함할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 이들 모두를 포함할 수 있다.

예시적인 실시예에서 상기의 원료들은 동치미를 만드는 재료일 수 있다. 즉, 동치미를 제조하는 과정에서 사용되는 무, 양파, 마늘, 생강, 사과 등을 사용하고 이들의 발효 추출물을 이용하여 화장료 조성물로 사용함으로써, 일반적인 식생활에 활용되는 재료들을 화장료 조성물로 이용할 수 있고, 각질 제거 효과 및 미백 효과를 개선할 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 경우, 상기와 같이, 동치미의 식자재로 사용되는 원료들을 화장료 조성물로 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니며, 필요에 따라, 다른 식자재의 원료들의 발효 추출물을 이용할수도 있다.

한편, 상기 발효 추출물은 물, 에탄올, 메탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렐글리콜 및 글리세린을 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 추출용매를 이용하여 추출된 것을 특징으로 할 수 있으며 보다 바람직하게는 증류수로 희석된 70% 함수 에탄올을 사용하여 추출할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 또한, 상기 발효 추출물은 Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium bifidum, Bifodobacterium breve 및 Bifidobacterium longum로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 균으로 발효시켜 얻어진 것을 특징으로 할 수 있다. 상기 균들은 인체에 유익한 균으로서, 이들 균들의 발효에 의해 생성되는 활성물질인 효소나 비타민류는 인체에 유용하게 이용될 수 있다.

화장료 조성물 제조방법

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물 제조방법은 무(Raphanus Sativus), 양파(Allium cepa L.), 마늘(Allium scorodorpasum), 생강(Zingiber officinale Roscoe) 및 사과(Malus dornestica)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함하는 원료를 준비하는 단계, 상기 준비된 원료에 추출용매를 이용하여 추출물을 수득하는 단계, 및 상기 추출물에 균을 접종하여 발효시키는 단계를 포함할 수 있다.

우선, 원료를 준비하는 단계에서는 상기 원료들을 세척하는 단계를 포함할 수 있으며, 세척 후에는 이를 분쇄 및 건조하여 건조물을 제조하는 단계를 포함할 수 있다.

상기 원료들을 세척하는 단계에서는 상기 원료의 가장 바깥쪽을 흐르는 물로 원료들에 잔류하는 이물질들을 제거할 수 있다. 상기 세척하는 단계는 물에 의해 세척하거나, 고압의 공기를 분사하여 세척하는 단계를 거칠수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니며, 식물을 세척하는 일반적인 방법을 사용할 수 있다.

또한, 상기 분쇄 및 건조하는 단계에서는 일반적인 분쇄기, 건조기 등을 사용할 수 있으며, 이에 대해서는 당해 기술분야에 널리 알려져 있는바 구체적인 설명은 생략하기로 한다.

다음으로, 상기 준비된 원료에서 추출물을 수득하는 단계를 수행할 수 있다. 상기 추출물은 수득하는 단계는 열수 추출법 및 용매 추출법 등 당업계의 통상적인 추출방법으로 추출할 수 있다. 예를 들어, 상기 추출물을 수득하는 단계는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매를 추출 용매로하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 에탄올 또는 메탄올로 추출한 추출물일 수 있다.

또한, 상기 추출 용매는 물, 에탄올, 메탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렐글리콜 및 글리세린을 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

예시적인 실시예에서 상기 추출물을 수득하는 단계는 상기 건조된 원료와 상기 추출 용매를 혼합하여 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 추출 될 수 있으며, 이를 여과하는 과정을 거칠 수 있다. 상기 추출기는 20 내지 80℃의 온도 범위에서 1 내지 48시간 추출할 수 있으며 보다 바람직하게는 30 내지 40℃의 온도에서 12 내지 24시간 추출할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 상기 추출기의 온도 범위에서 원료에 함유된 수용성 물질을 충분히 추출할 수 있으며, 추출기의 온도가 80℃를 넘을 경우, 고열에 의해 유효 물질이 파괴될 수 있다. 예시적인 실시예에서 40℃ 근방의 온도에서 오랜 시간 추출함으로써, 열에 의해 원료 내의 유효 성분이 파괴되는 것을 방지할 수 있다. 또한, 상기 추출기에서 추출하는 과정과 여과하는 과정은 수차례 반복하여 수행할 수 있다.

다음으로, 상기 추출물에 균을 접종하여 발효시키는 단계를 포함할 수 있으며, 상기 균은 Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium bifidum, Bifodobacterium breve 및 Bifidobacterium longum로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함할 수 있다.

상기 발효시키는 단계에서는 상기 균을 0.5 x 10⁶cfu/L 내지 1X10⁶cfu/L의 범위로 접종할 수 있다. 접종균 수가 0.5 x 10⁶cfu/L 이하 일때는 발효가 원할하게 이루어지지 않을 수 있고, 접종균 수가 1X10⁶cfu/L 이상일 때는 활성균 수가 많아 과잉 발효된 부산물과 균주 슬러지에 의해 불순물의 함량이 높아질 수 있다. 상기와 같은 균의 범위에서 적절한 배양시간안에 균이 활성화되어 활발한 발효과 진행되도록 할 수 있다.

또한, 상기 발효시키는 단계에서는 상기 균을 상기 발효 추출물에 접종한 상태로, 배양기에서 배양하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 배양하는 단계에서는 10 내지 50℃의 온도범위, 1 내지 7일의 배양시간, 및 pH 3 내지 pH 7에서 발효 할 수 있으며, 보다 바람직하게는 20 내지 30℃의 온도 범위, 2 내지 3일의 배양시간, 및 pH 3.5 내지 pH 5.5 범위에서 발효할 수 있다.

또한, 상기 배양하는 단계에 의해 제조된 배양물을 숙성하는 단계를 포함할 수 있다. 예시적인 실시예에서, 상기 숙성하는 단계는 상기 발효물을 멸균된 용기에 담아 밀봉하고 1 내지 30℃의 온도 범위에서 1 내지 7일간 숙성할 수 있으며 보다 바람직하게는 10 내지 15℃의 온도 범위에서 4 내지 5일간 숙성과정을 거칠 수 있다.

한편, 본 발명은 상기 발효시키는 단계에서 발효된 발효액을 원심분리기에 의해 침전물과 상등액으로 분리하는 단계, 및 상기 상등액을 수득하는 단계를 더 포함할 수 있다. 즉, 원심 분리기에 의해 침전물과 침전물 상의 상등액으로 분리될 수 있으며, 이에 의해, 화장료 조성물에 혼합되어 안정성을 해칠 수 있는 침전물은 제거하고, 상등액만을 본 발명의 화장료 조성물 제조에 사용함으로써, 액상으로 이루어지는 화장품의 제조에 보다 용이하게 사용할 수 있다.

또한, 상기 상등액을 수득하는 단계에서 수득된 상등액을 여과하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 이에 의해 상기 상등액 상에 잔류하는 침전물을 보다 정밀하게 여과할 수 있다. 상기 여과하는 단계는 비제한적인 예로, 여과지를 이용하여 수행될 수 있다.

한편, 상기 여과된 상등액은 추가로 건조하는 과정을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 상기 건조하는 과정은 동결건조방법에 의해 수행될 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

화장품

본 발명은 상기의 화장료 조성물을 포함하는 화장품을 제공할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장품은 스킨로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 로션, 영양크림, 밀크 로션, 영양 크림, 맛사지 크림, 핸드 크림, 에센스, 팩, 클렌징 로션 및 바디 클렌져를 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나일 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

또한, 상기 화장료 조성물은 상기 화장품 내에서 0.01중량% 내지 20 중량%로 포함될 수 있다. 상기 발효 추출물이 0.01중량% 이하로 사용할 경우 그 효과가 미미할 수 있고, 20% 이상 사용할 경우 효능 증대를 기대하기 어려울 수 있다.

상기 화장품에 대해 보다 구체적으로 설명하면, 예를 들어, 상기 화장품이 화장수일 경우, 상기 화장수는 상기 본 발명의 화장료 조성물, 글리세린, 부틸렌글리콜, 소듐히아루로네이트, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 에탄올, 트리에탄올아민 및 정제수 중 적어도 어느 하나를 포함할 수 있다. 또한, 방부제도 일부 포함할 수 있다.

또한, 상기 화장품이 에센스일 경우, 상기 에센스는 상기 본 발명의 화장료 조성물, 글리세린, 부틸렌글리콜, 베타클루칸, 세토스테아릴알코올, 글리세레스-26, 모노스테아린산 폴리에틸렌글리콜, 카르복시폴리머, 비즈왁스, 트리에탄올아민 및 정제수 중 적어도 어느 하나 이상을 포함할 수 있다. 또한, 방부제도 일부 포함할 수 있다.

또한, 상기 화장품이 크림일 경우, 상기 크림은 상기 본 발명의 화장료 조성물, 글리세린, 부틸글리콜, 스쿠알란, 비즈왁스, 유동파라핀, 폴리솔베이트60, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트, PEG-100스테아레이트, 베타인, 산탄검 및 정제수 중 적어도 어느 하나 이상을 포함할 수 있다. 또한, 방부제도 일부 포함할 수 있다.

상기에서는 상기 화장품이 화장수, 에센스, 크림일 경우를 예시로 설명하였으나, 이에 한정하지 않으며, 그 밖에도 다른 화장품들에 본 발명의 상기 화장료 조성물을 포함함으로써, 각질제거 효과를 개선시키고, 미백효과를 증대시킬 수 있다.

이하, 제조예, 실험예 및 실시예를 통해 본 발명의 화장료 조성물 및 화장품에 대해 보다 자세히 설명하기로 한다.

제조예 1

무를 세척하고 잘게 썰어 자연 건조하고 믹서기를 이용하여 분쇄하여 건조물을 만들었다. 상기 무 건조물 50g에 70% 함수 에탄올 1kg을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 80℃의 온도로 3시간 동안 추출하여 여과과정을 거치고 3회 반복 추출하여 추출물을 얻었다. 감압 농축기를 이용하여 에탄올을 제거하고 진공건조하여 무 추출분말을 만들었다.

*정제수와 무 추출분말을 10:1로 혼합하고 121℃에서 고압멸균 시킨 후 Lactobacillus brevis를 접종하였다. Lactobacillus brevis는 0.5 x 10⁶cfu/L 내지 1 x 10⁶cfu/L로 접종하였다. 발효 조건은 1L Fermenter에서 30℃의 온도로 pH 4 내지 pH 6 조건에서 5일간 발효하였다.

배양이 완료된 후 4℃에서 15일간 숙성하여 발효액을 얻었다. 발효액은 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 0.2um 투과 사이즈를 갖는 여과지로 여과한 후 동결건조된 것을 사용하였다.

제조예 2

무 건조물 대신 양파 건조물을 이용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효액을 제조하였다.

제조예 3

무 건조물 대신 마늘 건조물을 이용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효액을 제조하였다.

제조예 4

무 건조물 대신 생강 건조물을 이용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효액을 제조하였다.

제조예 5

무 건조물 대신 사과 건조물을 이용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효액을 제조하였다.

제조예 6

무 건조물 대신, 무, 양파, 마늘, 생강 및 사과 건조물을 각각 10g씩 이용한 것을 제외하고는, 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효액을 제조하였다.

실험예 1

상기 제조예 1 내지 6에서 제조된 발효액의 유기산의 함량을 고속 액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography: HPLC)를 이용하여 측정하였으며, 그 결과 그래프를 도 1에 나타내었다.

상기 유기산 함량의 측정은 Agilent HPLC(1200 Series, Agilent HPLC System) 기기를 이용하여, μ-Bondapak C18 컬럼, 증류수를 용매로 하, 0.6ml/min 유속, 25℃ 온도, 10ul의 샘플 주입량, RI detector 검출기로 하여 측정하였다.

하기 도 1과 같이, 제조예 1 내지 6의 경우, 유기산을 어느 정도 포함하고 있으며, 특히, 제조예 5 및 6의 경우, 매우 많은 양의 유기산을 함유하고 있다는 것을 확인할 수 있다. 유기산은 각질세포의 이온결합 에너지를 낮추어 각질층의 결합이 끊어지도록 하며 이로 인해 노후된 각질을 자연스럽게 제거하여 주기 때문에 유기산의 함량이 높을 수록 각질제거 효과를 증가시킬 수 있다.

실험예 2

상기 제조예 1 내지 6에서 제조된 발효액에 의한 각질제저효과를 측정 하기 위해 20~30대의 건강한 여성을 대상으로 각질 측정 tape을 피부에 살짝 붙였다가 3초 후 떼어 내 tape에 붙은 각질의 양을 각질 측정기 skin visiometer를 이용하여 면적당 각질의 수(pixel/cm²)를 측정하였다. 그 결과 하기 표1에 나타내었다.

	제조예1	제조예2	제조예3	제조예4	제조예5	제조예6
사용전	494	532	482	509	512	519
사용후	454	473	455	496	334	192
각질제거비율(%)	8.1	11.1	5.6	2.6	34.7	62.9

상기 제조예 1 내지 6에서와 같이 본 발명에 의한 발효액의 경우, 각질제거 효과가 있으며, 특히, 제조예 5와 6에서 우수한 각질제거 효과를 보였으며 제조예 6에서는 단위 면적당 각질의 수가 현저하게 낮아진 것을 확인 할 수 있었다. 이에 의해 상기 본 발명에 따른 제조예가 우수한 각질제거 효과를 가진다는 것을 확인할 수 있다.

실험예 3

상기 제조예 1 내지 6에서 제조된 발효액에 의한 노후된 각질과 노폐물 제거와 따른 미백효과 실험을 색도계를 이용하여 하기와 같은 방법으로 실시하였다.

건강한 여성(20~30세)을 대상으로 도포 부위를 증류수로 세척한 후에 색도계를 이용하여 피부 밝기 정도인 L값(Lightness-value)을 측정한 후, 상기 제조예 1 내지 6에서 제조된 발효액을 각각 1일 3회씩 도포하였다. 이후 계속하여 상기 발효액을 도포하면서, 이틀 간격으로 피부 밝기 정도인 L값을 측정하면서, 상기와 같은 실험을 일주일간 실시하였으며, 양성 대조군으론 각질제거제로 잘 알려진 AHA(Alpha Hydorxy Acid)를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 상기 L값이 높아진다는 것은 멜라닌이 침착된 노후된 각질이 제거되어 피부색이 밝아진다는 것을 의미하며, 상기 발효액에 의한 각질 제거와 미백 효과가 높다는 것을 의미한다.

	0.1% AHA	제조예1	제조예2	제조예3	제조예4	제조예5	제조예6
사용전	52.11	52.11	52.30	52.27	52.18	52.54	52.48
1회(2일후)	57.03	53.88	54.08	53.75	53.50	56.96	58.72
2회(4일후)	63.74	55.64	58.72	55.05	54.28	60.14	64.33
3회(6일후)	65.48	57.48	60.27	56.32	54.70	62.42	67.95

상기 표 2와 같이, 제조예 1 내지 제조예 6에 따른 발효액, 즉, 본 발명의 화장료 조성물을 사용하는 경우, 사용함에 따라 점차 피부의 밝기가 개선되는 것을 알 수 있으며 이는 피부의 멜라닌이 침착된 각질이 제거되어 피부가 밝아지고 미백 효과가 증가된다는 것을 확인할 수 있다. 특히, 제조예 6의 경우, 양성 대조군인 0.1% AHA(Alpha Hydorxy Acid)보다 우수한 각질 제거 효과가 있음을 확인할 수 있다.

실험예 4

상기 제조예 1 내지 6에서 제조된 발효액의 항산화력을 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)라디칼 소거 활성으로 측정하였다. DPPH 라디칼 소거능은 Mensor 등의 방법을 참고하였다. 80㎕의 0.2mM DPPH 에탄올 용액을 제조예 1 내지 제조예 6의 발효액 시료에 20㎕ 가한 후 1분간 교반한 후 25℃ 인큐베이터에서 10분간 반응시켜 ELISA reader를 사용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다. DPPH 라디칼 소거활성은 하기 식 1과 같이, 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도비로 나타내었다. 그 결과를 표 3에 나타내었다.

시료명	DPPH 라디칼 소거활성(%)	시료명	DPPH 라디칼 소거활성(%)
제조예 1	75	제조예 4	73
제조예 2	70	제조예 5	75
제조예 3	80	제조예 6	92

DPPH 라디칼 소거활성(%) = 1-A/B X 100 식 1

A: 시료 첨가구의 흡광도, B: 무처리구의 흡광도

DPPH 라디칼 소거활성의 수치가 높다는 것은 항산화 효과가 높다는 것을 의미하며 이는 멜라닌 생합성 과정의 산화반응의 억제를 통한 멜라닌 생성을 억제하여 미백효과를 나타낸다는 것이다. 제조예 6의 경우, 매우 높은 DPPH 라디칼 소거활성 수치값이 측정되었으며, 이에 따라 우수한 항산화 효과가 있다는 것을 확인하였다.

실험예 5

상기 제조예 1 내지 6에서 제조된 발효액의 Tyrosinase 저해 활성(Tyrosinase inhibitation activity)을 측정하였다. Tyrosinase 저해 활성은 농도 별 시료 100㎕에 0.2M potassium phosphate buffer(pH6.5) 50㎕, 2mM L-tyrosine 50㎕, mushroom tyrosinase(110U/ml) 10㎕를 혼합하여 37℃에서 20분간 반응시킨 후 490nm에서 Multiplate Reader를 사용하여 흡광도를 측정하였다. Tyrosinase 저해활성(Tyrosinase inhibition activity)은 하기 식 2와 같이, 시료 무첨가구에 대한 시료 첨가구의 흡광도비로 계산하였다. 그 결과 그래프를 도 2에 나타내었다.

Tyrosinase 저해활성 = 1-(A-B)/(C-D) x 100 식 2

상기 식 2에서 A: 시료 첨가구의 흡광도, B: 공시료의 흡광도, C: 대조군 흡광도, D: 대조군 공시료 흡광도 이다.

하기 도 2와 같이, 제조예 1 내지 6의 경우, 타이로시나제 억제제의 함량이 많아, 우수한 미백 효과를 나타낸다는 것을 확인할 수 있었으며, 특히 제조예 6의 경우, 매우 많은 타이로시나제 억제제의 함량에 의해 매우 우수한 미백효과를 보인다는 것을 확인할 수 있다.

실시예 1

상기 제조예 6의 발효액 1.0중량%, 글리세린 5.0중량%, 부틸렌글리콜 5.0%, 소듐히아루로네이트 0.1%, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유 0.3%, 에탄올 5.0%, 트리에탄올아민 0.1%, 방부제 소량 및 나머지 잔량을 정제수로 하여 화장수를 제조하였다.

실시예 2

상기 제조예 6의 발효액 2.0중량%, 글리세린 3.0중량%, 부틸렌글리콜 2.0%, 베타클루칸 0.2중량%, 세토스테아릴알코올 1.0%, 글리세레스-26 2.0중량%, 모노스테아린산폴리에틸렌글리콜 6.0%, 카르복시폴리머 0.2중량%, 비즈왁스 0.5중량%, 트리에탄올아민 0.2중량%, 방부제 소량 및 나머지 잔량을 정제수로 하여 에센스를 제조하였다.

실시예 3

상기 제조예 6의 발효액 8.0중량%, 글리세린 4.0중량%, 부틸렌글리콜 4.0%, 스쿠알란 1.5중량%, 비즈왁스 0.5중량%, 유동파라핀 5.0중량%, 폴리솔베이트60 1.5중량%, 스테아린산 1.5중량%, 글리세릴스테아레이트/PEG-100스테아레이트 1.5중량%, 베타인 3.0중량%, 산탄검 0.05중량%, 방부제 0.3중량% 및 나머지 잔량을 정제수로 하여 크림을 제조하였다.

실험예 6

상기 제조예 6에서 제조된 발효액을 함유한 화장료 조성물, 즉 상기 실시예 1내지 실시예 3에 대한 피부안전성을 확인하기 위하여 첩포시험을 진행하였다. 첩포시험은 한국식품의약품안전청 기준 피부안전성 검사법에 따라 과거력상에 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 20~30대 여성 20명을 선정하였고, 대상자 상박 내측에 첩포를 부착하였으며 48시간이 지난 후 첩포를 제거하였다. 약 60분간 안정을 취하도록 한 후 첫 판독을 시행하였고 첩포 부착 후 96시간이 경과한 후 2차 판독을 시행하였다. 판정기준은 하기 표 4에 나타낸 바와 같다.

반응	가중치	판정의 기준
-	0	무반응
±	0.5	희미한 홍반
+	1	경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진
++	2	뚜렷한 홍반, 구진 및 수포

또한, 피부 반응도는 하기 식 3를 통해 산출하며, 상기 실시예 1 내지 3에 대한 첩포 시험의 결과는 하기 표 5와 같다.

피부반응도(%) = (가중치 x 반응 수)/(최대가중치 x 총 피검자수) x 100 식 3

구분	48시간		96시간		반응도(%)
	+	++	+	++	48시간	96시간	평균
실시예1	-	-	-	-	-	-	0
실시예2	-	-	-	-	-	-	0
실시예3	-	-	-	-	-	-	0

또한, 피부 반응도에 대한 판정 기준은 하기 표 6과 같다.

피부의 평균 반응도	판정 기준
0.0 ~ 0.9	무자극
1.0 ~ 2.9	경자극
3.0 ~ 4.9	중자극
5.0 이상	강자극

상기 표 5와 같이 각각의 실시예 1 내지 실시예 3의 인체 첩포시험에 따르면, 피부 반응도는 모두 0으로서, 상기 표 6에 따른 피부 반응도 판정 기준에 의하면 모두 무자극으로 모든 피부에 사용해도 좋다는 것을 확인할 수 있다. 따라서, 상기 실시예 1 내지 3에서와 같이, 본 발명의 발효액을 이용하여 화장품을 제조할 경우, 우수한 각질제거 효과와 우수한 미백 효과를 내면서도 피부에 무자극을 주어 피부에 사용해도 좋다는 것을 확인할 수 있다.

Claims (4)

1. 무(Raphanus Sativus), 양파(Allium cepa L.), 마늘(Allium scorodorpasum), 생강(Zingiber officinale Roscoe) 및 사과(Malus dornestica)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상을 포함하는 원료로부터의 발효 추출물로부터 유도되는 유기산을 0㎎/g 초과 내지 1000㎎/g 이하의 범위로 포함하는 화장료 조성물.
2. 제 1항에 있어서,
   상기 발효 추출물은 물, 에탄올, 메탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렐글리콜 및 글리세린을 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 추출용매를 이용하여 추출된 것을 특징으로하는 화장료 조성물.
3. 제 1항에 있어서,
   상기 발효 추출물은 Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium bifidum, Bifodobacterium breve 및 Bifidobacterium longum로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 균으로 발효시켜 얻어진 것을 특징으로하는 화장료 조성물
4. 제 1항의 화장료 조성물을 0.01중량% 내지 20 중량%로 포함하는 화장품이며,
   상기 화장품은 스킨로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 로션, 영양크림, 밀크 로션, 영양 크림, 맛사지 크림, 핸드 크림, 에센스, 팩, 클렌징 로션 및 바디 클렌져를 포함하는 군으로부터 선택된 적어도 하나인 화장품.

Images