KR100889605B1

KR100889605B1 - 주름개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR100889605B1
Application number: KR1020070066231A
Authority: KR
Inventors: 김호정; 김형만; 김진준; 박선규; 최재환
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2007-07-02
Filing date: 2007-07-02
Publication date: 2009-03-20
Also published as: KR20090002680A

Abstract

본 발명은 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 특히 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료에 관한 것이다.

본 발명에 따른 주름개선용 화장료 조성물은 피부에 안전하면서도 콜라겐 합성 촉진 효과가 우수하여 피부 주름개선 효과 및 상처 치유 효과와 그 효과의 지속성이 뛰어나다.

화장료, 발효 추출물, 주름개선, 버섯균, 콜라겐, 당귀, 백지, 인삼, 녹용,적작약

Description

주름개선용 화장료 조성물{Anti-wrinkle cosmetic composition}

본 발명은 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 피부에 안전하면서도 콜라겐 합성 촉진 효과가 우수하여 피부 주름개선 효과 및 상처 치유 효과와 그 효과의 지속성이 뛰어난 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

세포 외 기질(extracellular matrix)의 주요 구성성분인 콜라겐은 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포 외 간질에 존재한다. 또한, 생체 단백질 총 중량의 약 30 %를 차지하는 중요한 단백질로서 견고한 3 중 나선구조를 가지고 있다. 콜라겐은 피부, 건(tendon), 뼈 및 치아의 유기물질의 대부분을 형성하는데, 특히 뼈와 피부(지피)에 그 포함량이 높다. 대부분의 다른 체 구조물에서는 섬유상 봉입체로서 존재한다.

콜라겐은 비교적 약한 면역원인데, 콜라겐의 나선구조에 의한 잠재성 항원 결정인자의 차폐가 그 일부 원인이고, 이 나선구조는 또한 콜라겐이 단백질 분해에 대한 내성을 갖도록 한다. 콜라겐의 주된 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저향력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포 분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다(Van der Rest 등, Ann NY Acad Sci, 1990).

이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다(Arthur K. Balin et al., Aging and the skin, 1989). 또한 콜라겐은 상처치유에 있어서 중요한 역할을 담당하며, 손상된 상피에서 콜라겐의 합성을 촉진시켜서 상처를 신속하고 흉터 없이 회복시킬 수 있다.

종래에는 콜라겐의 피부 보습 효과 및 상처 치유 효과를 이용하기 위하여 화장품 또는 연고 등과 같은 피부외용제 조성물에 콜라겐을 배합한 제품들이 출시되어 있으나, 이들 제품들은 콜라겐 자체를 피부 표면에 도포하는 것으로서 고분자 물질인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 보습작용 또는 상처치유 효과를 기대할 수 없으므로 본질적인 피부기능 개선 및 상처치유의 기능을 나타낸다고 말할 수 없었다.

이러한 문제를 해결하기 위하여 콜라겐 합성 촉진 물질에 대한 관심이 높아졌으며, 종래에 알려진 콜라겐 합성 촉진 물질로는 비타민 C, 레티노익산(retinoic acid), 발암증식인자(transforming growth factor, TGF)(Cardinale G. 35 al, Adv. Enzymol., 41, p.425, 1974), 동물 태반 유래의 단백질(일본공개특허공보 평8-231370), 베툴린산(betulinic acid)(일본공개특허공보 평8-208424), 클로렐라 추출물(일본공개특허공보 평9-40526, 일본공개특허공보 평10-36283, 섬유아세포 증식 촉진작용) 등이 있다.

그러나, 이들 물질은 피부적용시 자극, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부기능 개선 또는 상처 치유의 효과 를 기대할 수 없었다. 따라서, 기존의 피부외용제 조성물보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부외용제 조성물의 개발이 절실히 요망되고 있다.

한편, 미생물이 가지고 있는 효소를 이용하여 유기물을 분해시키는 과정을 발효라고 한다. 발효와 부패는 비슷한 과정에 의해 진행되지만 분해 결과 우리의 생활에 유용하게 사용되는 물질이 만들어지면 발효라 하고, 악취가 나거나 유해한 물질이 만들어지면 부패라고 한다. 따라서, 한약재를 미생물을 이용하여 발효시키면 한약재의 독성이 감소되거나, 저분자화되어 소화가 용이하거나, 피부에 도포시 경피흡수 등이 용이하게 되어 생체 이용률이 향상된다.

또한 한약재들은 그 자체로도 약리 작용을 나타낼 수 있지만 발효를 통해 약리효과가 더욱 강화되거나 미생물의 대사에 의해 해로운 성분들이 만들어져 발효전의 한약재에 없던 새로운 약리작용을 발휘할 수 있다.

상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하고자, 본 발명은 피부에 안전하면서도 콜라겐 합성 촉진 효과가 우수하여 피부 주름개선 효과 및 상처 치유 효과와 그 효과의 지속성이 뛰어난 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 다른 목적은 발효를 통해 각 약재의 약리효과를 더욱 강화시켜 콜라겐 합성 촉진 효과가 더욱 향상된 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은

당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물을 제공한다.

이하 본 발명의 주름개선용 화장료 조성물에 대하여 상세히 설명한다.

본 발명의 주름개선용 화장료 조성물은 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기 발효추출물은 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재를 버섯균 발효시켜 버섯균 발효물을 추출하는 단계; b) 상기 a)단계의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시키는 단계; 및 c) 상기 b)단계 발효물로부터 발효추출물을 분리하는 단계를 포함하여 제조될 수 있다.

상기 당귀(Angelica gigas)는 미나리과(Umbelliferae)에 속하는 다년생 뿌리로서 신체허약, 두통, 변비 등에 사용된다. 상기 백지(Angelica dahurica)는 미나리과(Umbelliferae)에 속하는 이년생 초본으로, 두통, 어지럼증, 구안와사 등에 쓰인다. 상기 인삼은 오가피과(Araliaceae)에 속하는 다년생 숙근초로 혈액순환, 수 족냉감, 기관지염 등에 쓰인다. 상기 녹용(Cervus nippon)은 사슴과(Cervidae)에 속하는 매화록이나 근연동물의 미골화된 풀을 채취하여 건조한 것으로, 간과 신을 보호하고 뼈와 근육을 강하게 한다. 상기 적작약(Paeonia lactiflora)은 미나리재비과(Ranunculaceae)에 속하는 다년생 초본으로 혈액순환 촉진, 진통, 진경 등에 쓰인다. 상기 감초(Glycyrrhiza glabra)는 콩과(Legumisosae)에 속하는 다년생 초본으로 그늘에 말려 약용 또는 차로서 이용하며, 신경통, 기침, 동맥경화, 배뇨곤란 등에 쓰인다.

상기 약재는 통상의 방법에 따라 추출물로 제조할 수 있으며, 예를 들어 증류수, 탄소수 1∼4 개의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매로 추출한 후 감압 농축한 다음 건조하여 1차 추출물을 수득할 수 있다. 구체적으로, 생약재로 시판되는 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재를 구입하여 잘게 분쇄하고, 분쇄물 건조 중량에 대하여 5 내지 20 부피의 물이나, 탄소수 1∼4 개의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매로 환류냉각기가 달린 추출기에서 50∼100 ℃로 1∼5 시간 동안 가열하여 약재들의 추출물을 추출한다. 그 다음 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1 회 이상씩 더 추출한 후, 추출액들을 합하여 감압농축하고, 동결건조나 분무건조하여 건조추출물을 얻는다.

상기와 같이 수득한 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재들은 버섯균을 통하여 1차 발효된다. 상기 버섯균은 차가버섯(Inonnotus-obliquus), 동충하초균류(Cordyceps sinensis, Paecilomyces japonica), 송이버섯(Tricholoma matsutake), 상황버섯(phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum) 등의 약용 버섯류의 버섯균을 사용할 수 있다.

바람직하기로는 상기 버섯균 발효는 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재 자체 또는 절편, 분말화한 분쇄물 각각에 버섯균을 1∼10 중량%로 접종하고, 18∼25 ℃, 습도 60∼70 %에서 60 일간 고체발효시킨 후 이를 추출하여 버섯균 발효물을 얻을 수 있다.

상기 버섯균 발효물의 추출시 추출은 발효물 건조 중량에 대하여 5 내지 20 부피의 물이나, 탄소수 1∼4 개의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매로 환류냉각기가 달린 추출기에서 50∼100 ℃로 1∼5 시간 동안 가열하여 약재들의 추출물을 추출한다. 그 다음 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1 회 이상씩 더 추출한 후, 추출액들을 합하여 감압농축하고, 동결건조나 분무건조하여 건조추출물을 얻을 수 있다.

상기 버섯균 발효물은 이후 효모, 유산균 또는 비피더스균에 의한 원활한 발효를 위하여 멸균과정을 거친다. 상기 버섯균 발효물은 각각 효모, 유산균 또는 비피더스균에 첨가 배양하고 추출물을 분리하여 각각의 발효추출물을 얻을 수 있다. 바람직하기로는 상기 버섯균 발효물은 효모, 유산균 또는 비피더스균의 배양을 위한 배지에 1 내지 20 중량%로 첨가되는 것이 바람직하다.

상기 효모는 Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces ellipsoids, Saccharomyces boulardii 등을 사용할 수 있다.

상기 유산균은 Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus confusus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis 등을 사용할 수 있다.

상기 비피더스균은 Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis 등을 사용할 수 있다.

바람직하기로는 미생물로 효모를 사용할 경우에는 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물이 각각 함유된 기본 배지(YM 배지)에 효모를 접종(바람직한 농도(약 10⁵∼10⁷ cells/mL)로 한 후, pH 5.5∼6.5, 온도 25∼35 ℃, 통기량 0.05∼0.5 VVM의 조건을 유지하면서 30∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 약재 발효 추출물을 수득할 수 있다.

미생물로 유산균을 사용할 경우에는 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물이 각각 함유된 기본 배지(MRS 배지)에 유산균을 접종(바람직한 농도(약 10⁵∼10⁷ cells/mL)한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 24∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 약재 발효 추출물을 수득할 수 있다.

미생물로 비피더스균을 사용할 경우에는 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물이 각각 함유된 기본 배지(BL 배지)에 비피더스균을 접종(바람직한 농도(약 10⁵∼10⁷ cells/mL)한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 혐기배양 조건을 유지하면서 24∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 비피더스균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 약재 발효 추출물을 수득할 수 있다.

또한 본 발명의 주름개선용 화장료 조성물에 상기 약재의 발효추출물의 합계 총량이 0.0001 내지 20 중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 포함되는 것이다. 그 함량이 0.0001 중량% 미만일 경우에는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없다.

상기와 같은 본 발명의 주름개선용 화장료 조성물의 제형은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물은 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼, 오일젤 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때, 상기 피부외용연고는 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 바셀린 50∼97 중량% 및 폴리옥시에틸렌올레일-에테르 포스페이트 0.1∼5 중량%를 함유하도록 제조할 수 있으며, 유연화장수는 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 다가알콜류(프로필렌글리콜, 글리세린 등) 1∼10 중량% 및 계면활성제(폴리에틸렌올레일에테르, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유 등) 0.05∼2 중량%를 함유하도록 제조할 수 있다. 또한, 영양화장수 및 영양크림은 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 오일류(스쿠알란, 바셀린, 옥틸도데칸올 등) 5∼20 중량% 및 왁스성분(세탄올, 스테아릴알콜, 밀납 등) 3∼15 중량%를 함유하도록 제조할 수 있으며, 에센스는 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 글리세린, 프로필렌글리콜 등의 다가알콜류 5∼30 중량%를 함유하여 제조할 수 있다. 마사지 크림은 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 유동파라핀, 바셀린, 이소노닐이소노나노에이트 등의 오일 30∼70 중량%를 함유하여 제조되며, 팩은 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 폴리비닐알콜 5∼20 중량%를 함유하는 필 오프(peel off) 팩 또는 일반유화형 화장료에 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 카올린, 탈크, 산화아연, 이산화티탄 등의 안료가 5∼30 중량% 함유된 워시오프(wash off) 팩으로 제조할 수 있다.

또한 본 발명의 주름개선 화장료 조성물은 각각의 제형에 상기 기재한 성분들 이외에 일반 피부화장료에 배합되는 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 또는 향료 등을 필요에 따라 적절히 배합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 주름개선용 화장료 조성물은 종래의 약재 추출물의 효모발효추출물 또는 유산균 발효추출물을 사용하는 경우에 비하여 현저히 우수한주름개선 및 주름개선의 지속성을 갖으며, 인체에 무해하다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1

시판되는 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초를 구입하여 분쇄한 각각의 분쇄물 200 g을 정제수나 80 % 메탄올 3 L에 각각 넣고, 냉각콘덴서가 달린 환류추출기에서 3 시간 동안 끓여 추출하였다. 그 다음, 100 메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1 회 더 추출하였다. 각각의 추출물을 합하여 상온에서 와트만(Whatman) 2 번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 하기 표 1과 같은 각각의 건조 중량을 얻었다. 하기 표 1은 추출용매에 따른 약재 100 g 당 추출물의 건조중량을 나타낸 것이다.

약재	80% 메탄올	정제수
당귀	8.5 g	7.7 g
백지	8.4 g	7.7 g
인삼	8.2 g	7.6 g
녹용	8.4 g	7.6 g
적작약	8.1 g	7.5 g
감초	8.3 g	7.9 g

버섯균 발효물은 80 % 메탄올을 이용하여 얻어진 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초에 버섯균을 5 중량%로 첨가하여 고체발효시켰다.

구체적으로, 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 또는 감초 200 g을 절편으로 하여 일정한 습도하에서 Paecilomyces japonica를 5 중량%로 각각 접종하고 18∼25 ℃, 습도 60∼70 %에서 60 일간 발효시키고 건조시킨 후, 분쇄하여 얻어진 분쇄물 100 g씩을 80% 메탄올 3L에 각각 넣고, 냉각콘덴서가 달린 환류추출기에서 3 시간 끓여 추출하였다. 그 다음, 100 메쉬 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1회 더 추출하였다. 각각의 추출액을 합하여 상온에서 와트만(Whatman) 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 버섯균 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 2에 나타내었다.

약재	버섯균발효의 건조중량 (g)
당귀	7.45
백지	7.63
인삼	7.83
녹용	7.85
적작약	7.62
감초	7.52

상기 버섯균 발효된 발효물을 효모인 Saccharomyces cerevisiae에 대한 기본배지인 YM 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.

구체적으로, Saccharomyces cerevisiae를 약 10⁵∼10⁷ cells/mL의 농도로 5 중량%의 버섯균 발효물이 함유된 효모 기본 배지(YM 배지)에 접종한 후, pH 5.5∼6.5, 온도 25∼35 ℃, 통기량 0.05∼0.5 VVM의 조건을 유지하면서 48 시간 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 약재 버섯균-효모 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균-효모 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 3에 나타내었다.

약재	효모발효의 건조중량 (g)
당귀	5.89
백지	5.71
인삼	5.81
녹용	5.83
적작약	5.78
감초	5.71

실시예 2

상기 실시예 1의 버섯균 발효물을 Lactobacillus acidophilus에 대한 기본배지인 MRS 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.

구체적으로, Lactobacillus acidophilus를 약 10⁵∼10⁷ cells/mL의 농도로 5 중량%의 상기 실시예 1의 버섯균 발효물이 함유된 유산균 기본 배지(MRS 배지)에 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 48 시간 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 약재 버섯균-유산균 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균-유산균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 4에 나타내었다.

약재	유산균발효의 건조중량 (g)
당귀	5.79
백지	5.71
인삼	5.61
녹용	5.78
적작약	5.75
감초	5.70

실시예 3

상기 실시예 1의 버섯균 발효물을 비피더스균인 Bifidobacterium longum에 대한 기본배지인 BL 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.

구체적으로, Bifidobacterium longum를 약 10⁵∼10⁷ cells/mL의 농도로 5 중량%의 상기 실시예 1의 버섯균 발효물이 함유된 유산균 기본 배지(BL 배지)에 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 혐기배양 조건을 유지하면서 48 시간 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 비피더스균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 약재 버섯균-비피더스균 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균-비피더스균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 5에 나타내었다.

약재	비피더스균발효의 건조중량 (g)
당귀	5.82
백지	5.72
인삼	5.73
녹용	5.75
적작약	5.78
감초	5.73

실시예 4-11

상기 실시예 1 내지 3에서 제조한 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 또는 감초의 버섯균-효모 발효추출물, 버섯균-유산균 발효추출물, 버섯균-비피더스 발효추출물을 하기 표 6과 같이 혼합하였다.(단위는 중량비이다)

		실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	실시예5	실시예6	실시예7	실시예8	실시예9	실시예10	실시예11
당귀	버섯균-효모	100										10
	버섯균-유산균		100									10
	버섯균-비피더스균			100							20
백지	버섯균-효모										20	10
	버섯균-유산균				100					30
	버섯균-비피더스균
인삼	버섯균-효모
	버섯균-유산균										20	10
	버섯균-비피더스균					100				20		10
녹용	버섯균-효모
	버섯균-유산균						100					10
	버섯균-비피더스균										20
적작약	버섯균-효모							100		10		10
	버섯균-유산균
	버섯균-비피더스균											10
감초	버섯균-효모									20	20
	버섯균-유산균								100			10
	버섯균-비피더스균									20		10

실험예 1. 콜라겐 합성 촉진효과

상기 실시예 1 내지 11을 인간유래의 섬유아세포의 배양액에 첨가하여 세포수준에서 콜라겐 합성 효과를 실험하였다. 합성된 콜라겐의 측정은 PICP EIA kit(Procollagen Type Ⅰ C-Peptide Enzyme ImmunoAssay KIT)를 이용하여 정량하였다.

상기 실시예 1 내지 11의 약재 발효 추출물을 최종농도가 0.05 %가 되도록 각각 인간유래의 섬유아세포(human fibroblast 세포)의 배양배지에 첨가하여 1 일간 배양한 후, 배양액을 취하여 PICP EIA Kit로 각 농도에서 콜라겐 합성 정도를 분광광도계를 이용하여 450 ㎚에서 측정하였다. 이때, 효과의 비교를 위하여 아무것도 첨가하지 않은 섬유아세포의 배양배지(대조군), 당귀효모발효추출물, 백지유산균발효추출물, 비타민 C를 최종농도 0.005 %가 되도록 첨가한 시료에 대하여 동일한 방법으로 콜라겐 합성 정도를 측정하였다.

콜라겐 생성량은 UV 흡광도로 측정하고, 콜라겐 생성 증가율은 대조군에 대한 상대적인 콜라겐 생성량의 비율로 계산하고 결과를 하기 표 7에 정리하였다.

시료	증가율 (%)
대조군 (무첨가)	-
YM 배지 (최종농도 0.005 %)	107.51
MRS 배지 (최종농도 0.005 %)	108.68
BL 배지 (최종농도 0.005 %)	109.39
당귀효모발효추출물	129.14
백지유산균발효추출물	128.52
실시예 1	153.23
실시예 2	152.25
실시예 3	154.17
실시예 4	155.32
실시예 5	153.87
실시예 6	164.93
실시예 7	152.54
실시예 8	165.93
실시예 9	154.54
실시예 10	153.74
실시예 11	165.43
비타민 C (최종농도 0.0005 %)	136.67

상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 내지 11은 기본배지, 당귀효모발효추출물, 백지유산균발효추출물을 사용한 것 보다 인간유래의 섬유아세포에서 콜라겐 생성량이 현저히 증가되었으며, 전혀 정제되지 않은 상태임을 감안하면 기존에 알려진 콜라겐 합성 촉진물질인 비타민 C와 비교할 때 섬유아세포에서 매우 강력한 콜라겐 합성 촉진능이 있음을 알 수 있었다.

실험예 2. 농도에 따른 콜라겐 합성 촉진효과

상기 실험예 1과 같은 방법으로 배양된 인간유래 섬유아세포에 대하여 상기 실시예 6의 농도를 각각 0.5 %, 0.05 %, 0.005 %, 0.0005 %로 조절하여 각각의 농도에 따른 콜라겐 합성 촉진능을 조사하고, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.

시료	적용농도 (%)	저해율 (%)
대조군 (무첨가)	-	-
실시예 6의 성분	최종농도 (0.0005%)	144.35
	최종농도 (0.005%)	164.93
	최종농도 (0.05%)	178.87
	최종농도 (0.5%)	165.94
비타민 C	최종농도 (0.001%)	142.00

상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 6은 배양된 인간유래 섬유아세포에 대하여 매우 강력한 콜라겐 합성 촉진능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다. 특히 실시예 6의 성분이 단일물질이 아니고 혼합물질임에도 불구하고 단일물질인 비타민 C와 같은 농도에서 동등 이상의 콜라겐 합성 촉진능을 가지며, 본 발명의 주름방지용 화장료 조성물은 0.05 % 농도 이상에서도 세포독성을 나타내지 않으면서 강력한 콜라겐 합성 촉진능을 가지고 있으므로, 피부주름 개선제나 상처치유제로 매우 유용하게 사용될 수 있음을 예측할 수 있었다.

실시예 12 및 비교예 1

상기 실시예 1을 이용하여 하기 표 9의 처방으로 피부 외용연고를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 12	비교예 1
실시예1의 성분	10	-
디에틸 세바케이트	8	8
경납	5	5
폴리옥시에틸렌올레일에테르 포스페이트	6	6
벤조산 나트륨	적량	적량
바셀린	To 100	To 100

실시예 13 및 비교예 2

상기 실시예 3을 이용하여 하기 표 10의 처방으로 크림을 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 13	비교예 2
실시예3의 성분	1.0	-
스테아린산	15.0	15.0
세탄올	1.0	1.0
수산화칼륨	0.7	0.7
글리세린	5.0	5.0
프로필렌글리콜	3.0	3.0
방부제	적량	적량
향	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 14 및 비교예 3

상기 실시예 6을 이용하여 하기 표 11의 처방으로 유연화장수를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 14	비교예 3
실시예 6의 성분	0.2	-
에탄올	10.0	10.0
폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄	1.0	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.2	0.2
글리세린	5.0	5.0
1,3-부틸렌글리콜	6.0	6.0
향	적량	적량
색소	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 15 및 비교예 4

상기 실시예 8을 이용하여 하기 표 12의 처방으로 영양화장수를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 15	비교예 4
실시예 8의 성분	0.1	-
와셀린	2.0	2.0
세스퀴올레인산소르비탄	0.8	0.8
폴리옥시에틸렌올레일에틸	1.2	1.2
파라옥시안식향산메틸	적량	적량
프로필렌글리콜	5.0	5.0
에탄올	3.2	3.2
카르복시비닐폴리머	18.0	18.0
수산화칼륨	0.1	0.1
색소	적량	적량
향	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 16 및 비교예 5

상기 실시예 10을 이용하여 하기 표 13의 처방으로 팩을 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 16	비교예 5
실시예10의 성분	0.5	-
글리세린	5.0	5.0
프로필렌글리콜	4.0	4.0
폴리비닐알코올	15.0	15.0
에탄올	8.0	8.0
폴리옥시에틸렌올레일에틸	1.0	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.2	0.2
향	적량	적량
색소	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 17 및 비교예 6

상기 실시예 11을 이용하여 하기 표 14의 처방으로 에센스를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 17	비교예 6
실시예11의 성분	5.0	-
프로필렌글리콜	10.0	10.0
글리세린	10.0	10.0
하이루론산나트륨수용액 (1%)	5.0	5.0
에탄올	5.0	5.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	1.0	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.1	0.1
향	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실험예 3. 주름개선 효과

상기 실시예 13 및 비교예 2의 크림을 이용하여 피부 주름개선 효과에 대한 패널테스트를 실시하였다.

먼저, 35∼50 세까지의 건강한 여성 30 명을 15 명씩 2 개의 군으로 구분하고, 1군은 비교예 2의 크림을, 2군은 실시예 13의 크림을 안면부에 1 일 1 회 3 개월간 도포하도록 하였다. 3 개월 후 피부주름의 개선정도를 피실험자 설문조사를 통해 평가하였다. 피실험자의 피부 주름개선 및 탄력증진에 관하여 사용전과 비교하여 개선 없음, 약간의 개선, 상당한 개선의 3 단계로 판정하였으며, 그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.

구분	개선 없음	약간의 개선	상당한 개선
실시예 13	1	4	10
비교예 2	8	6	1

상기 표 15에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 13의 크림을 사용한 경우 피부주름 개선 및 탄력증진 효과가 우수함을 알 수 있었다.

이상에서 설명한 본 발명은 전술한 실시예에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 여러 가지 치환, 변형, 및 변경이 가능함은 본 발명의 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 명백한 것이다.

본 발명에 따른 주름개선용 화장료 조성물은 피부에 안전하면서도 발효를 통해 각 약재의 약리효과를 더욱 강화시킴으로써 콜라겐 합성을 효과적으로 촉진하여 피부 주름개선 효과 및 상처 치유 효과와 그 효과의 지속성이 뛰어나다.

Claims

당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 0.001-20 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
삭제
제1항에 있어서,

상기 버섯균은 차가버섯(Inonnotus-obliquus), 상황버섯(phellinus linteus), 동충하초균류(Cordyceps sinensis, Paecilomyces japonica), 및 영지버섯(Ganoderma lucidum)로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 효모는 Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces ellipsoids 및 Saccharomyces boulardii로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징 으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 유산균은 Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri 및 Lactobacillus confusus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 비피더스균은 Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum 및 Bifidobacterium infantis로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 주름개선용 화장료 조성물은 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼, 또는 오일젤의 제형인 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 화장료 조성물이 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 및 향료로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 첨가제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
a) 당귀, 백지, 인삼, 녹용, 적작약 및 감초로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재를 버섯균 발효시켜 버섯균 발효물을 추출하는 단계;

b) 상기 a)단계의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시키는 단계; 및

c) 상기 b)단계의 발효물로부터 발효추출물을 분리하는 단계

를 포함하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 원료의 제조방법.
제9항에 있어서,

상기 a)단계의 버섯균 발효는 고체발효인 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 원료의 제조방법.
제9항에 있어서,

상기 b)단계의 효모, 유산균 또는 비피더스균 발효는 액체발효인 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 원료의 제조방법.