KR20190091164A

KR20190091164A - 인삼 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20190091164A
Application number: KR1020180010264A
Authority: KR
Inventors: 남기백; 정규상; 명길선; 신미숙; 김수나; 변경희; 김현나
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2018-01-26
Filing date: 2018-01-26
Publication date: 2019-08-05
Also published as: KR102540405B1

Abstract

본 발명은 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물로서, 보다 자세하게는 인삼 또는 인삼의 추출물을 락토코커스(Lactococcus) 속(genus)에 속하는 균주, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주 및 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주를 혼합한 혼합 발효 균주로 발효시켜 제조한 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하여 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복) 효과를 발휘하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

인삼 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Improving Skin Condition Containing Ginseng Root Fermentation Extract}

피부(skin) 중에서 최외각에 위치한 표피(epidermis)의 가장 중요한 기능은, 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등의 물리 및 화학적 자극인자)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 때만 그 기능을 유지할 수 있다. 표피 중에서도 가장 바깥에 존재하는 각질층(Stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질 세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어있다(J. Invest. Dermatol., 80:44-49, 1983). 각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적인 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 「표피 세포의 분화」 또는 「각화(keratinization)」라고 부른다. 각화과정 중에 각질형성세포는 천연보습인자(Natural Moisturizing Factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여, 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다.

그러나 이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요인, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 현대에 들어서 더욱 늘어난 여러 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람들이 점점 증가하고 있는 추세이다. 따라서, 적절한 피부수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 많이 진행되어 왔으며, 실제로 수분보유능력이 있는 여러 종류의 보습제(moisturizer)가 개발되어 주로 화장품 영역에서 많이 사용되고 있다.

그러나 생활환경 중에 인간에 대한 위해 요인이 점점 증가하고, 노령인구가 급격히 늘어나면서, 각질층의 생성-탈락속도(turnover rate)가 늦어지고, 각질형성세포의 지질합성능력이 저하되거나, 표피에서 정상적인 세포의 분열, 성숙 및 분화가 원활하지 않음으로써, 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 정상적인 각질층의 기능을 유지하지 못하는 상태, 즉 피부 장벽 기능이 와해된 상태의 피부를 갖고 있는 사람들의 수가 점점 증가하는 추세에 있다.

이러한 비정상적인 표피세포의 분열, 분화로 인해 피부는 피부 건조증, 아토피 및 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 되며, 이러한 제 질환들은 자체로 수분 보유 기능만을 갖는 통상적인 보습제만으로는 그 증상을 약간 완화시킬 수는 있으나, 근본적인 치유를 기대하기는 어려운 실정이다.

또한, 건강한 피부의 각질층은 15~20%의 수분을 함유하고 있으며 수분이 10% 이하로 떨어지면 피부가 건조해지고 윤기와 탄력이 없어져 주름이 증가하게 된다. 이 모든 결과로 인해 노화된 피부는 탄력을 잃고 주름이 발생하게 된다.

최근 화장품 분야에서는 천연물의 사용이 두드러지고 있으며, 보습력과 노화 개선 기능, 항산화 효과가 우수하고, 특히 피부 노화 개선 효과 면에서 우수하다고 보고된 천연물 추출물을 이용한 화장료 조성물에 대해서도 많은 연구가 이루어지고 있다. 그러나 통상의 방법으로 추출한 천연물 추출물을 사용하는 조성물들은 원하는 미백, 주름 개선, 항산화 등의 효과가 미미할 뿐 아니라, 이러한 추출물의 활성을 지속적으로 유지, 제어하기가 어려워 실용성이 높지 않았다.

피부는 외부로부터 신체를 보호하는 방어막으로서 역할을 한다. 피부에 상처가 생기면 생체의 자연 치유 작용에 의해 상처 자리를 혈액이 채우게 되고 혈소판의 과립감소와 하게만 인자(hageman factor)의 활성화가 시작되어 상처 치유 과정이 진행된다. 혈액의 응고는 임시 방어 작용으로서, 노출된 상처 조직들을 보호하고 치유 과정 동안 세포들이 이동할 수 있는 기반을 제공한다(Lee et al., Skin Barrier., Ryo Moon Gak, 2004).

상처 치유 과정은 크게 염증기, 재상피화기, 증식기 및 성숙기의 4단계로 구분된다. 염증기 동안에는 상처 자리에 면역 세포들이 출현하는데, 이 세포들은 혈관으로부터 상처 부위로 이동한 것이다. 이어 과립조직 형성을 유도하는 성장인자와 신호전달 물질들이 분비된다. 중대한 감염이 없는 상태에서는 염증기가 일반적으로 짧게 진행된다(Care KRGf.Advances in wound Care. Seoul: Korea Medical Book Publisher, 2002). 염증기는 상처 치료 과정에 꼭 필요한 단계이다.

증식기는 재상피화기와 비슷하게 일어나게 되는데 상처 부위에서 과립 조직들이 형성되는 특성을 나타낸다(Kubo et al., J Artif Organs, 6(1):64-70, 2003). 과립조직들은 섬유아세포(fibroblasts) 및 염증성 세포(inflammatory cells)와 함께 미성숙 콜라겐(immaturity collagen), 피브로넥틴(fibronectin) 및 히알루론산(hyaluronic acid) 등의 세포외기질 구성요소들의 조합으로 이루어져 있고, 이 과립조직들이 상처 부분을 빠르게 채우고 조직적인 구조를 갖추는 것이 상처 치료에 중요하다. 벗겨진 상처 표면이 각질형성세포(keratinocytes)층에 의해 덮이면서 새로운 표피가 생성되고 상피층이 재건되게 된다. 세포들은 상처 가장자리 또는 남겨진 피부의 진피 잔여물에서 상처를 통하여 떠올라 딱지 아래와 살아있는 결합 조직 위를 통하여 이주를 시작한다.

상처의 재상피화가 완료되면 결합조직의 증가와 재편성을 통해 상처 면적이 감소되는 일련의 과정들이 진행되게 된다. 그 후, 성숙기 동안에는 회복기 조직의 엉긴 세포들과 모세혈관들이 조금씩 사라지게 되는데 이런 조직들이 과형성되거나 정상적으로 분해되지 않을 경우 흉터가 생기게 된다. 이것이 일반적인 상처 치료 과정이다. 상처 치유 과정에서는 상처를 빠르게 치료하는 것뿐만 아니라 부작용이나 흉터 없이 치료하는 것이 중요하기 때문에 염증의 억제와 성장 인자들의 발현 조절을 통해 조직세포들이 균형 있게 채워져 나가는 것이 더욱 중요하며, 이러한 효능을 가지는 물질을 찾고자 하는 노력이 계속 진행되고 있다.

인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로서 한국, 중국 및 일본 등지에서 2,000여년 전부터 사용되어 온 생약이며, 경험적으로 질병을 예방하고 수명을 연장시킬 목적으로 사용되어 왔다. 지금까지 알려진 인삼의 효능 및 효과는 중추신경계에 대한 작용, 항발암 작용, 항암활성, 면역기능 조절작용, 항당뇨 작용, 간기능 항진효능, 심혈관 장해개선, 항동맥경화 작용, 혈압조절 작용, 갱년기 장애 개선, 골다공증에 미치는 효과, 항스트레스 및 항피로 작용, 항산화 활성 및 노화억제 효능 등이 있다(최신고려인삼 ‘성분 및 효능편’, 한국인삼연초연구원, 56-112, 1996).

인삼의 대표적 생리활성 성분인 진세노사이드(Ginsenoside)는 인삼의 지상 및 지하부에 고르게 분포되어 있으며, 특히 인삼 근(뿌리), 인삼엽 및 인삼 열매 등 부위에 따라 진세노사이드 함량뿐만 아니라 조성도 다른 것으로 알려져 있다(Attele AS et al, Biochem Pharmacol, 58:1685-1693, 1999).

인삼 발효 추출물에 관한 선행 연구를 살펴보면, 인삼 열매 유래 발효 추출물이 피부의 콜라게나아제 억제 효능, 멜라닌 생성 억제 효능, 각질형성세포 분화 촉진 효능, 피부 장벽 기능 회복 효능 및 피부 보습력 개선 효능이 있는 것으로 보고된 바 있으나(특허문헌 1: 대한민국 공개특허 제10-2011-0098122호 참조), 2종 이상의 서로 다른 속(genus)에 속하는 미생물을 혼합 발효 균주로 이용하여 제조한 인삼 발효 추출물이 피부 상태, 특히 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복) 효과에 관한 선행 연구는 아직까지 이루어지지 않은 실정이다.

이러한 기술적 배경하에서, 본 발명자들은 피부 상태 개선용 화장료 조성물, 특히 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복)시킬 수 있는 피부 상태 개선용 화장료 조성물을 개발하고자 예의 노력한 결과, 인삼 또는 인삼의 추출물을 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 사카로마이세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae), 락토바실러스 사케아이(Lactobacillus sakei) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)을 혼합한 혼합 발효 균주로 발효시켜 제조한 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물이 각질형성세포 분열을 촉진하고 피부 재생을 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복)시키는 효과가 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

대한민국 공개번호 제10-2011-0098122호(2011년 9월 1일 공개)

본 발명의 주된 목적은 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복)용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물로 제조되는 화장품을 제공하는 데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물로서,

상기 인삼 발효 추출물은 락토코커스(Lactococcus) 속(genus)에 속하는 균주, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주 및 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주를 혼합한 혼합 발효 균주를 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종한 후, 발효시켜 수득한 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물, 바람직하게는 상기 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복)용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물은 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복) 효능이 탁월하여 피부의 보습, 피부의 재생 또는 피부의 상처 회복용 화장품 제조에 이용할 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 제조예 1에서 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 제조한 실시예 4의 인삼 발효 추출물(발효물)에 의한 각질형성세포의 분열 촉진 효과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 제조예 1에서 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 제조한 실시예 4의 인삼 발효 추출물(발효물)에 의한 피부 세포 재생 효과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 제조예 1에서 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 제조한 실시예 4의 인삼 발효 추출물(발효물)에 의한 피부 세포 재생 효과를 시험관 내 상처 치유 측정법으로 측정하여 세포재생율로 나타낸 것이다.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.

이하, 본 발명에 대하여 보다 구체적으로 설명한다.

본 명세서에서 부피, 시간(기간), 농도, 용량(함량 등), 면적, 온도 등을 표현하는데 사용된 용어 "약"은 해당 수치 또는 수치 범위에서 최대 10%의 허용오차가 존재한다는 것을 의미한다.

본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 "%"는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량) %, 고체/액체는 (중량/부피) %, 그리고 액체/액체는 (부피/부피) %이다.

본 발명의 일 실시예에서는, 본 발명에 따른 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 제조한 인삼 발효 추출물의 당류 분석을 수행하였다. 그 결과, 하기 표 3 및 표 4에 나타낸 바와 같이, 인삼 추출물의 발효 조건에 따라 인삼 발효 추출물에 포함되는 당류의 평균 분자량 값이 다르게 나타났으며, 구체적으로 인삼 추출물을 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 혐기 조건하에서 1일, 4일 및 9일의 기간 동안 발효시켜 제조한 인삼 발효 추출물에 포함된 당류의 분자량 범위는 44,000Da에서 838,000Da로 다양한 크기의 당류가 상기 추출물에 포함되어 있음을 확인하였다. 또한, 인삼 추출물을 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 호기 조건하에서 1일, 4일 및 9일의 기간 동안 발효시켜 제조한 인삼 발효 추출물에 포함된 당류의 분자량 범위는 14,000Da에서 830,000Da로 다양한 크기의 당류가 상기 추출물에 포함되어 있음을 확인하였다. 특히, 인삼 추출물의 발효 조건과 무관하게 발효 일수가 길어질수록 분자량이 낮은 당류 종들(species)이 출현하는 것을 확인하였다. 즉, 혐기 조건하에서 제조한 인삼 발효 추출물은 44,000~838,000Da의 분자량을 갖는 당류 종이 많았고, 호기 조건하에서 제조한 인삼 발효 추출물은 14,000~400,000Da의 분자량을 갖는 당류 종이 많은 것으로 나타났다(시험예 1 참조).

본 발명의 다른 실시예에서는, 본 발명에 따른 인삼 발효 추출물에 의한 각질형성세포의 분열 촉진 효능을 평가하였다. 그 결과, 하기 도 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 4의 10ppm의 인삼 발효 추출물을 처리한 HaCaT 세포는 음성대조군보다 우수한 세포 증식 효과를 나타내었다(시험예 2 참조).

본 발명의 또 다른 실시예에서는, 본 발명에 따른 인삼 발효 추출물에 의한 피부 재생 효능을 평가하였다. 그 결과, 하기 도 2 및 도 3에 나타낸 바와 같이, 실시예 4의 10ppm의 인삼 발효 추출물을 처리한 HaCaT 세포군은 음성대조군보다 우수한 세포 재생 효과를 나타내었다(시험예 3 참조).

따라서, 본 발명은 일 관점에서, 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물로서,

상기 인삼 발효 추출물은 락토코커스(Lactococcus) 속(genus)에 속하는 균주, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주 및 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주를 혼합한 혼합 발효 균주를 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종한 후, 발효시켜 수득한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물, 바람직하게는 상기 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부의 각질형성세포 분열 촉진, 피부 장벽 기능 강화, 피부 보습력 개선 및 피부 재생 촉진(피부 손상 회복 또는 피부 상처 회복)용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 명세서에서 사용된 "피부 손상" 또는 "상처"라는 용어는 서로 교환하여 사용이 가능하며, 예를 들면, 긁힘, 칼로 베임, 찢어진 상처, 눌린 상처, 압박 상처, 스트레치 손상, 물린 상처, 찰과상, 총탄 상처, 폭발 손상, 바디 피어싱, 찔린 상처, 화상, 바람에 의한 상처, 태양 화상, 화학약품 화상, 수술 상처, 수술적 간섭, 의료용 간섭, 세포, 조직 또는 기관 이식 후 숙주 거부반응, 약제 효과, 약제학적 부작용, 욕창, 방사선 손상, 화장품으로 인한 피부 상처, 발생 과정, 성숙 과정(예컨대 여드름), 유전자 비정상, 발생 비정상 및 환경적 손상을 포함한다.

본 발명에 있어서, 상기 인삼 발효 추출물은 락토코커스(Lactococcus) 속(genus)에 속하는 균주, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주, 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주를 혼합한 혼합 발효 균주를 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종한 후, 발효시켜 수득한 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 따른 락토코커스(Lactococcus) 속에 속하는 균주로는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 락토코커스 컨퓨서스(Lactococcus confusus), 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis), 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis), 락토코커스 푸지엔시스(Lactococcus fujiensis), 락토코커스 라피노락티스(Lactococcus raffinolactis) 등을 예로 들 수 있으나 이에 한정되지 아니하고, 바람직하게는 락토코커스 락티스, 락토코커스 가비에, 락토코커스 컨퓨서스, 락토코커스 중앙젠시스, 락토코커스 타이완엔시스, 락토코커스 푸지엔시스, 락토코커스 라피노락티스, 더욱 바람직하게는 락토코커스 락티스 또는 락토코커스 가비에, 가장 바람직하게는 수탁번호 KCCM11915P로 수탁된 락토코커스 락티스 아종 락티스 W-카멜리아(Lactococcus lactis subsp . lactis W-camellia), 수탁번호 KCCM12006P로 수탁된 락토코커스 락티스 아종 락티스 R-카멜리아(Lactococcus lactis subsp . lactis R-camellia) 또는 수탁번호 KCCM12007P로 수탁된 락토코커스 가비에 BL-L1(Lactococcus garvieae BL-L1)일 수 있고, 특히 수탁번호 KCCM11915P로 수탁된 락토코커스 락티스 아종 락티스 W-카멜리아, 수탁번호 KCCM12006P로 수탁된 락토코커스 락티스 아종 락티스 R-카멜리아 및 수탁번호 KCCM12007P로 수탁된 락토코커스 가비에 BL-L1를 인삼 또는 인삼의 추출물 발효시 함께 사용하는 것이 균주 간의 성장률을 균일하게 유지시켜 최종 생성되는 인삼 발효 추출물의 품질관리(QC(Quality Control) 등)가 용이하다.

본 발명에 따른 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주로는 사카로마이세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 루시(Saccharomyces rouxii), 사카로마이세스 오비폴미스(Saccharomyces oviformis), 사카로마이세스 스테이네리(Saccharomyces steineri), 사카로마이세스 클루베리(Saccharomyces klutveri), 사카로마이세스 코레아누스(Saccharomyces coreanus), 사카로마이세스 사케(Saccharomyces sake) 등을 예로 들 수 있으나 이에 한정되지 아니하고, 바람직하게는 사카로마이세스 세레비제, 사카로마이세스 루시, 사카로마이세스 오비폴미스, 사카로마이세스 스테이네리, 사카로마이세스 클루베리, 사카로마이세스 코레아누스, 사카로마이세스 사케, 더욱 바람직하게는 사카로마이세스 세레비제, 가장 바람직하게는 수탁번호 KCCM12008P로 수탁된 사카로마이세스 세레비제 JTL-L1(Saccharomyces cerevisiae JTL-L1)이다.

본 발명에 따른 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주는 락토바실러스 사케아이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 락티스(Lactobacillus lactis), 락토바실러스 루트리(Lactobacillus reutri), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbruekii), 락토바실러스 존슨니(Lactobacillus johnsonii), 락토바실러스 부츠네리(Lactobacillus buchneri), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus leuteri) 등을 예로 들 수 있으나 이에 한정되지 아니하고, 바람직하게는 락토바실러스 사케아이, 락토바실러스 플란타룸, 락토바실러스 람노수스, 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 불가리쿠스, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 락티스, 락토바실러스 루트리, 락토바실러스 브레비스, 락토바실러스 델브루에키, 락토바실러스 존슨니, 락토바실러스 부츠네리, 락토바실러스 퍼멘텀, 락토바실러스 루테리, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 사케아이 또는 락토바실러스 플란타룸, 가장 바람직하게는 수탁번호 KCTC12675BP로 수탁된 락토바실러스 사케아이 MD_허니수클(Lactobacillus sakei MD_honeysucle), 수탁번호 KCCM11179P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331261(Lactobacillus plantarum APsulloc 331261), 수탁번호 KCCM11180P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331263(Lactobacillus plantarum APsulloc 331263), 수탁번호 KCCM11181P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331266(Lactobacillus plantarum APsulloc 331266) 또는 수탁번호 KCCM11182P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331269(Lactobacillus plantarum APsulloc 331269)일 수 있고, 특히 수탁번호 KCTC12675BP로 수탁된 락토바실러스 사케아이 MD_허니수클, 수탁번호 KCCM11179P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331261, 수탁번호 KCCM11180P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331263, 수탁번호 KCCM11181P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331266 및 수탁번호 KCCM11182P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331269를 인삼 또는 인삼의 추출물 발효시 함께 사용하는 것이 균주 간의 성장률을 균일하게 유지시켜 최종 생성되는 인삼 발효 추출물의 품질관리(QC(Quality Control) 등)가 용이하다.

본 발명에 있어서, 상기 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종하는 혼합 발효 균주의 전체 접종량은 인삼 또는 인삼의 추출물 1~20g, 바람직하게는 5~15g, 가장 바람직하게는 8~12g 당 1x10⁵~1x10⁹cfu(colony forming unit), 바람직하게는 1x10⁶~1x10⁸cfu, 가장 바람직하게는 0.9x10⁷~1.1x10⁷cfu인 것을 특징으로 할 수 있다. 특히, 상기 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종하는 혼합 발효 균주의 전체 접종량이 인삼 또는 인삼의 추출물 1~20g 당 1x10⁵~1x10⁹cfu인 경우, 균주 간의 성장률을 균일하게 유지시켜 최종 생성되는 인삼 발효 추출물의 품질관리(QC(Quality Control) 등)가 용이하다.

본 발명에 있어서, 상기 혼합 발효 균주는 동등한 cfu 함량으로 각각의 균주를 혼합한 것임을 특징으로 할 수 있으나, 필요에 따라 균주 간의 cfu 혼합비는 조정될 수 있다. 다만, 균주 간의 cfu 혼합비를 동등하게 하여 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종할 경우, 균주 간의 성장률을 균일하게 유지시켜 최종 생성되는 인삼 발효 추출물의 품질관리(QC(Quality Control) 등)가 용이하다.

본 발명에 있어서, 상기 발효는 36~38℃, 바람직하게는 36.5~37.5℃, 가장 바람직하게는 37℃의 온도에서 1~12일, 바람직하게는 1~9일, 가장 바람직하게는 9일 동안 정치 배양 또는 교반 배양할 수 있으나, 이에 한정되지 아니하고, 필요에 따라 배양 온도, 배양 기간, 정치/교반 배양 등의 배양 조건은 조정될 수 있다. 다만, 상기 혼합 발효 균주에 포함되는 락토코커스 속에 속하는 균주, 사카로마이세스 속에 속하는 균주 및 락토바실러스 속에 속하는 균주를 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종 후, 36~38℃, 바람직하게는 36.5~37.5℃, 가장 바람직하게는 37℃의 온도에서 배양할 경우, 균주 간의 성장률을 균일하게 유지시켜 최종 생성되는 인삼 발효 추출물의 품질관리(QC(Quality Control) 등)가 용이하다.

본 발명에 있어서, 상기 정치 배양 또는 교반 배양 후, 원심분리하여 수득한 배양물은 약 121℃의 온도에서 가온하여 살균하거나, 0.1~0.45μm 멸균여과 및 동결 건조를 추가로 수행하여 인삼 발효 추출물로 수득하는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, 혼합 발효 균주 배양시 이용되는 배양물은 통상적으로 미생물 배양에 사용되는 효모 추출물, 펩톤, 포도당, 염분 등을 추가적으로 더 포함하는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 일 측면에 있어서, "인삼의 추출물"은 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고, 인삼의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질을 모두 포함하는 것이며 그 성분을 뽑아내는 과정에서 열, 산(acid), 염기(base), 효소 등으로 처리하는 공정을 포함하는 추출 방법을 통해 얻어진 물질을 포함하며, 또한 인삼의 성분을 뽑아내어 얻어진 물질을 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질, 바람직하게는 인삼의 유효성분을 추출하기에 적절한 형태의 원료를 모두 포함하는 광범위한 개념이다.

본 발명의 일 측면에 있어서, "인삼"은 추출물의 형태이거나, 생(生) 인삼, 생 인삼의 분쇄물, 인삼의 건조물, 인삼의 건조 분쇄물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 인삼은 그 입수 방법에 제한이 없으며, 재배하여 사용하거나 시판되는 것을 구입하여 사용할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 인삼의 추출물은 물, 유기 용매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물일 수 있다.

본 발명에 있어서, 인삼의 추출물 제조에 이용되는 물은 증류수 또는 정제수를 포함하고, 유기 용매는 C1~C6의 저급 알코올, 아세톤, 에테르, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 에틸메틸케톤 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로 상기 알코올은 에탄올일 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 인삼 추출물의 제조방법은 공지의 천연물 추출법, 예를 들어 냉침 추출법, 열수 추출법, 초음파 추출법, 환류냉각 추출법 또는 가열 추출법이거나, 압착, 초임계, 아임계 등의 추출방법일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 예컨대, 상기 인삼 추출물은 인삼을 냉침 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 또는 가열 추출한 인삼 추출물; 인삼을 압착시켜 수득한 인삼 추출물; 또는 인삼을 분쇄시킨 다음, 초임계 유체, 아임계 유체 또는 지용성 용매를 첨가한 후, 수득한 인삼 추출물인 것을 특징으로 할 수 있다.

상기 초임계 추출방법에서 초임계 유체의 밀도는 액체와 유사하고, 점도와 확산계수는 기체와 유사하다. 따라서 초임계 유체를 추출용매로 사용하면 식물체의 미세기공으로 쉽게 침투하고, 적절한 분자밀도를 갖게 됨으로써 원하는 물질의 분자를 에워싸서 빠져나오는 방식으로 원하는 물질의 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 초임계 상태로 만들어서 추출용매로 사용할 수 있는 물질로서는 우선 무독성이어야하고, 초임계 상태가 고온/고압이므로 폭발의 위험성이 없어야 하며, 추출용매로서 용해력이 우수해야 한다. 이러한 조건만 충족시키면 어떠한 물질도 초임계 유체로 만들어서 추출할 수 있다.

상기 아임계 추출방법에서 이용되는 아임계 유체는 초임계 유체와 같은 성능을 낼 수 있으며, 예컨대 아임계 유체로서 물을 사용할 수 있다. 특히, 초임계 이산화탄소는 극성물질은 추출하지 못하므로 유기용매를 보조용매로 함께 사용하여야 하지만, 아임계 물은 추출성능이 더 뛰어나고, 조업 조건의 변화 범위가 넓어서 비극성물질 및 극성물질을 모두 추출할 수 있다. 또한, 아임계 물로 추출하는 경우에는 가수분해 반응도 진행할 수 있다.

예컨대, 인삼 추출물을 상기 아임계 추출방법으로 제조할 경우 인삼을 준비한 후 아임계 추출장치를 이용해서 50~200MPa, 바람직하게는 100MPa의 고압에서 인삼을 분해하여 유효성분을 추출할 수 있다. 50MPa 미만의 압력에서는 유효성분들이 충분히 추출되지 않고, 200MPa 초과 압력에서는 고압 대비 유효성분 추출 증가량이 미미하기 때문에 상기 범위의 압력에서 추출하는 것이 바람직하다. 추출 후 1.2μm 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45μm 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.2μm 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링하여 이물질 및 미생물을 제거하고, 인삼 추출물을 수득할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 조성물에 포함되는 인삼 발효 추출물의 함량은 조성물의 총 중량을 기준으로, 0.00001~10중량%, 바람직하게는 0.0001~5중량%, 더욱 바람직하게는 0.001~2중량%, 가장 바람직하게는 0.002~1중량%인 것을 특징으로 할 수 있으며, 상기 인삼 발효 추출물의 함량이 조성물의 총 중량을 기준으로 0.00001중량% 미만이면 피부 상태 개선 효과가 미미하고, 10중량%를 초과하면 함량 증가에 비해 그 효과의 증가가 크지 않으며 제형 안정도와 사용감을 저하시킬 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 조성물은 제형화하는데 있어서 특별히 한정되는 바가 없으나, 피부용 연고, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 로션, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스, 팩 등의 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있다. 이들 각 제형의 화장료 조성물은 상기한 각종 제형에 따라 또는 최종 목적에 적합하게 통상의 화장료 조성물에 배합되는 각종 성분들을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 조성물은 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다. 이때 배합 성분으로는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등이 사용될 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

[ 제조예 1] 인삼의 발효 추출물의 제조

건조한 100g의 인삼(경북 영주시 풍기 소재, 금강농산에서 입수함)을 분쇄시켜 인삼 분쇄물을 준비한 다음, 상기 분쇄물 100g을 에탄올 수용액 3L에 현탁시키고, 약 80℃의 온도에서 처리한 후, 농축과정을 통해 에탄올만 선택적으로 제거한 다음, 인삼 분쇄물이 있는 수용액 상에서 한국미생물보존센터(국외)에 수탁한 미생물인 락토코커스 락티스 아종 락티스 W-카멜리아(수탁번호: KCCM11915P; 수탁일자: 20161020), 락토코커스 락티스 아종 락티스 R-카멜리아(수탁번호: KCCM12006P; 수탁일자: 20170404), 락토코커스 가비에 BL-L1(수탁번호: KCCM12007P; 수탁일자: 20170404), 사카로마이세스 세레비제 JTL-L1(수탁번호: KCCM12008P; 수탁일자: 20170404), 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331261(수탁번호: KCCM11179P; 수탁일자: 20110328), 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331263(수탁번호: KCCM11180P; 수탁일자: 20110328), 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331266(수탁번호: KCCM11181P; 수탁일자: 20110328), 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331269(수탁번호: KCCM11182P; 수탁일자: 20110328) 및 한국생명공학연구원에 수탁한 미생물인 락토바실러스 사케아이 MD_허니수클(수탁번호: KCTC12675BP; 수탁일자: 20140911) 각각의 균주를 동등한 cfu(colony forming unit) 함량으로 혼합한 혼합 발효 균주를 전체 접종량(총 접종량)이 약 1x10⁷cfu가 되도록 접종하여 배양물을 준비하였다. 그다음, 상기 배양물을 약 37℃의 온도에서 1일, 4일 및 9일 동안 정치 배양(실시예 1~4: 혐기 발효) 또는 교반 배양(실시예 5~8: 호기 발효)하여 발효시킨 다음, 상기 발효물을 원심분리기를 이용하여 원심분리하여 침전물을 제거하고, 상등액만을 취한 다음, 0.45μm 여과필터를 사용하여 멸균여과하고, 동결 건조를 추가로 수행하여 인삼 발효 추출물을 수득하였다(하기 표 1 및 표 2 참조).

	발효 조건	발효 일수	인삼 발효 추출물 수득량(g)
실시예 1	혐기	0일	33.7
실시예 2	혐기	1일	32.5
실시예 3	혐기	4일	30.9
실시예 4	혐기	9일	27.4

	발효 조건	발효 일수	인삼 발효 추출물 수득량(g)
실시예 5	호기	0일	33.7
실시예 6	호기	1일	33.2
실시예 7	호기	4일	31.5
실시예 8	호기	9일	29.1

[ 시험예 1] 인삼 발효 추출물의 당류 분석

상기 제조예 1에서 제조한 인삼 발효 추출물에 포함된 당류(saccharides)의 분자량을 확인하기 위하여 겔 투과 크로마토그래피(Gel permeation chromatography, GPC)를 수행하였다.

구체적으로, pL aquagel OH-30, 40, 50(7.5 X 300 mm, VARIAN, USA) 컬럼과 고압액체크로마토그래피(Agilent Technologies 1200 Series HPLC/GPC, Agilent, USA에서 제조), ELSD 검출기(ELSD 3300, Alltech, USA에서 제조)를 이용하여, 이동상 DeIonized Water, 컬럼 온도 25℃, 분당 0.7mL 유속, 검출기 온도 50℃, 질소가스 유속 1.4L/min의 조건으로 검출하였으며, 표준물질로 각 분자량 별 PEG(Polyethylene glycol)를 사용하여 시료의 컬럼 내 지연시간에 따른 분자량의 검량선을 작성하여, 제조예 1에서 제조한 인삼 발효 추출물에 포함되는 당류의 분자량 분포를 확인하였다.

그 결과, 하기 표 3 및 표 4에 나타낸 바와 같이, 인삼 추출물의 발효 조건에 따라 인삼 발효 추출물에 포함되는 당류의 평균 분자량 값이 다르게 나타났으며, 구체적으로 인삼 추출물을 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 혐기 조건하에서 1일, 4일 및 9일의 기간 동안 발효시켜 제조한 인삼 발효 추출물에 포함된 당류의 분자량 범위는 44,000Da에서 838,000Da로 다양한 크기의 당류가 상기 추출물에 포함되어 있음을 확인하였다.

또한, 인삼 추출물을 9종의 미생물 군(혼합 발효 균주)을 이용하여 호기 조건하에서 1일, 4일 및 9일의 기간 동안 발효시켜 제조한 인삼 발효 추출물에 포함된 당류의 분자량 범위는 14,000Da에서 830,000Da로 다양한 크기의 당류가 상기 추출물에 포함되어 있음을 확인하였다.

특히, 인삼 추출물의 발효 조건과 무관하게 발효 일수가 길어질수록 분자량이 낮은 당류 종들(species)이 출현하는 것을 확인하였다. 즉, 혐기 조건하에서 제조한 인삼 발효 추출물은 44,000~838,000Da의 분자량을 갖는 당류 종이 많았고, 호기 조건하에서 제조한 인삼 발효 추출물은 14,000~400,000Da의 분자량을 갖는 당류 종이 많은 것으로 나타났다.

하기 표 3~4는 겔 투과 크로마토그래피에 의해 실시예 1~8의 인삼 발효 추출물에 포함되는 당류의 분자량(단위: Da)의 평균값을 측정한 결과를 나타낸 것이다.

	발효 조건	발효 일수	당류의 분자량
실시예 1	혐기	0일	830,000; 242,000~86,410
실시예 2	혐기	1일	757,000; 85,000
실시예 3	혐기	4일	838,000; 53,500
실시예 4	혐기	9일	785,000; 44,000

	발효 조건	발효 일수	당류의 분자량
실시예 5	호기	0일	830,000; 242,000~86,410
실시예 6	호기	1일	390,000; 57,000
실시예 7	호기	4일	320,000; 54,000~14,000
실시예 8	호기	9일	400,000; 52,000~14,000

[ 시험예 2] 인삼 발효 추출물에 의한 각질형성세포의 분열 촉진 효능 평가

상기 제조예 1에서 제조한 실시예 1~8 중 실시예 4의 인삼 발효 추출물에 의한 각질형성세포의 세포분열(cell division) 촉진 효능을 확인하기 위해 각질형성세포에 인삼 발효 추출물을 처리한 다음, 각질형성세포의 세포분열 촉진 여부를 CCK-8 어세이로 확인하였다.

구체적으로, 인삼 발효 추출물이 각질형성세포의 성장에 미치는 효과를 평가하기 위해서 각질형성세포인 HaCaT 세포를 10% FBS(fetal bovine serum)(Gibco, 미국가 함유된 DMEM(Dulbecco Modified Eagle Medium)(Gibco, 미국)를 이용하여 약 1.5x10⁴cells/well로 96-웰 플레이트에 분주한 다음, 37℃/5% CO₂인큐베이터(incubator)에서 약 24시간 동안 배양하였다. 약 24시간 경과 후, 상기 배양한 HaCaT 세포를 PBS(phosphate buffered saline, pH7.4, Sigma, 미국)로 1회 세척한 후, FBS가 없는 새로운 DMEM에 인삼 발효 추출물의 최종 농도가 1ppm 및 10ppm이 되도록 희석하여 HaCaT 세포에 처리하고, 인큐베이터에서 약 48시간 동안 더 배양하였다. 약 48시간 경과 후, CCK-8 키트(Cell Counting Kit-8, Dojindo, 미국)를 이용한 CCK-8 어세이로 인삼 발효 추출물의 HaCaT 세포에 대한 증식 효과를 확인하였다.

상기와 같은 배양 및 처리 조건에서 HaCaT 세포에 인삼 발효 추출물 대신 0.01% DMSO(Dimethyl sulfoxide), Sigma, 미국; 인삼 발효 추출물의 희석용매로 사용)을 처리한 시료는 음성대조군으로 준비하고, 5% FBS를 처리한 시료는 양성대조군으로 준비하였다.

그 결과, 하기 도 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 4의 10ppm의 인삼 발효 추출물을 처리한 HaCaT 세포는 음성대조군보다 우수한 세포 증식 효과를 나타내었다.

[ 시험예 3] 인삼 발효 추출물에 의한 피부 세포 재생 효능 평가

상기 제조예 1에서 제조한 실시예 1~8 중 중 실시예 4의 인삼 발효 추출물에 의한 피부 재생 효능을 확인하기 위해 각질형성세포군 중 "긁힘-손상"(scratch)을 유도한 각질형성세포군에 인삼 발효 추출물을 처리한 다음, 배양 용기인 플레이트의 웰(well) 상에서 "긁힘-손상"에 의해 세포군이 제거된 손상부위(손상면적 또는 간극)가 각질형성세포의 증식(proliferation)과 손상부위로의 이동(migration)에 의해 치유(회복; 긁힘-손상 부위가 세포들로 채워지는 현상)되는지 여부를 시험관 내 상처 치유 측정법(in vitro wound healing assay)으로 확인하였다.

구체적으로, HaCaT 세포를 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM(Dulbecco Modified Eagle Medium)를 이용하여 약 2x10⁵cells/well로 12-웰 플레이트에 분주한 다음, 37℃/5% CO₂인큐베이터(incubator)에서 약 24시간 동안 배양하였다. 약 24시간 경과 후, 200μL 피펫 팁(pipette tip)을 이용하여 웰 상의 HaCaT 세포군이 분포한 부위에 긁힘-손상을 만들고 마이크로이미지 비디오 카메라(Boyertown, PA)가 장착된 광학현미경(50X 배율)으로 촬영한 후, 인삼 발효 추출물의 최종 농도가 10ppm이 되도록 희석하여 HaCaT 세포군에 처리하고, 인큐베이터에서 약 48시간 동안 더 배양하였다. 약 17시간 경과 후, 상기 긁힘-손상 부위가 회복(긁힘-손상 부위가 세포들로 채워지는 현상)되는지 상기 광학현미경(50X 배율)으로 다시 촬영하였다. 아울러, 긁힘-손상 부위의 회복 정도를 측정하기 위해 긁힘-손상 직후(0시간)에 측정된 긁힘-손상 부위의 면적과 긁힘-손상 후 약 17시간이 경과된 시점에서의 긁힘-손상 부위의 면적을 비교하여 세포재생율의 값으로 산출하였다.

상기와 같은 배양 및 처리 조건에서 HaCaT 세포에 인삼 발효 추출물 대신 0.01% DMSO(인삼 발효 추출물의 희석용매)을 처리한 시료는 음성대조군으로 준비하고, 5% FBS를 처리한 시료는 양성대조군으로 준비하였다.

그 결과, 하기 도 2 및 도 3에 나타낸 바와 같이, 실시예 4의 10ppm의 인삼 발효 추출물을 처리한 HaCaT 세포군은 음성대조군보다 우수한 세포 재생 효과를 나타내었다.

본 발명에 따른 혼합 발효 균주로 제조한 인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물은 다양한 제형으로 제품화될 수 있으며, 구현하고자 하는 제품의 기능성, 비용 및 기타 조건을 고려하여 적정 함량 비율로 제어할 수 있다.

[ 제형예 1] 연고

유상성분과 수상성분을 포함하는 표 5의 성분들을 혼합하여 본 발명의 인삼 발효 추출물을 포함하는 연고를 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
인삼 발효 추출물	0.99
카프린/카프릴트리글릭세리드	10.00
액상파라핀	10.00
솔비탄세스퀴올리에이트	6.00
옥틸도데세스-25	9.00
세틸에틸헥사노에이트	10.00
스쿠알란	1.00
살리실산	1.00
글리세린	15.00
솔비톨	10.00

[ 제형예 2] 영양화장수

유상성분과 수상성분을 포함하는 표 6의 성분들을 혼합하여 본 발명의 인삼 발효 추출물을 포함하는 영양화장수를 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
인삼 발효 추출물	0.09
밀납	4.00
폴리솔베이트 60	1.50
솔비탄세스퀴올레이트	1.50
유동파라핀	0.50
Montana 202 (제조사:Seppic)	5.00
글리세린	3.00
부틸렌글리콜	3.00
프로필렌글리콜	3.00
카르복시비닐폴리머	0.10
트리에탄올아민	0.20
방부제, 색소, 향료	적량

[ 제형예 3] 마사지 크림

유상성분과 수상성분을 포함하는 표 7의 성분들을 혼합하여 본 발명의 인삼 발효 추출물을 포함하는 마사지 크림을 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
인삼 발효 추출물	0.09
밀납	10.00
폴리솔베이트 60	1.50
피이지 60 경화피마자유	2.00
솔비탄세스퀴올레이트	0.80
유동파라핀	40.00
스쿠알란	5.00
Montana 202 (제조사: Seppic)	4.00
글리세린	5.00
부틸렌글리콜	3.00
프로필렌글리콜	3.00
트리에탄올아민	0.20
방부제, 색소, 향료	적량

[ 제형예 4] 팩

유상성분과 수상성분을 포함하는 표 8의 성분들을 혼합하여 본 발명의 인삼 발효 추출물을 포함하는 팩을 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
정제수	잔량
인삼 발효 추출물	0.09
폴리비닐알콜	13.00
소듐카르복시메틸셀룰로오스	0.20
글리세린	5.00
알란토인	0.10
에탄올	6.00
핑이지-12 노닐페닐에테르	0.30
폴리솔베이트 60	0.30
방부제, 색소, 향료	적량

[ 제형예 5] 로션

표 9에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 본 발명의 인삼 발효 추출물을 포함하는 로션을 제조하였다.

배합성분	함량(중량%)
세토스테아릴알코올	2.00
EDTA 2Na	0.20
히드록시에틸셀룰로오즈	0.50
미네랄 오일	5.00
인삼 발효 추출물	0.99
방부제, 향료 및 색소	적량
정제수	잔량

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

한국미생물보존센터(국외)

KCCM11915P

20161020

한국미생물보존센터(국외)

KCCM12006P

20170404

한국미생물보존센터(국외)

KCCM12007P

20170404

한국미생물보존센터(국외)

KCCM12008P

20170404

한국생명공학연구원

KCTC12675BP

20140911

한국미생물보존센터(국외)

KCCM11179P

20110328

한국미생물보존센터(국외)

KCCM11180P

20110328

한국미생물보존센터(국외)

KCCM11181P

20110328

한국미생물보존센터(국외)

KCCM11182P

20110328

Claims

인삼 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물로서,
상기 인삼 발효 추출물은 락토코커스(Lactococcus) 속(genus)에 속하는 균주, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주 및 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주를 혼합한 혼합 발효 균주를 인삼 또는 인삼의 추출물에 접종한 후, 발효시켜 수득한 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 락토코커스(Lactococcus) 속에 속하는 균주는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 락토코커스 컨퓨서스(Lactococcus confusus), 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis), 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis), 락토코커스 푸지엔시스(Lactococcus fujiensis) 및 락토코커스 라피노락티스(Lactococcus raffinolactis)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 균주인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 사카로마이세스(Saccharomyces) 속에 속하는 균주는 사카로마이세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 루시(Saccharomyces rouxii), 사카로마이세스 오비폴미스(Saccharomyces oviformis), 사카로마이세스 스테이네리(Saccharomyces steineri), 사카로마이세스 클루베리(Saccharomyces klutveri), 사카로마이세스 코레아누스(Saccharomyces coreanus) 및 사카로마이세스 사케(Saccharomyces sake)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 균주인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주는 락토바실러스 사케아이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 락티스(Lactobacillus lactis), 락토바실러스 루트리(Lactobacillus reutri), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbruekii), 락토바실러스 존슨니(Lactobacillus johnsonii), 락토바실러스 부츠네리(Lactobacillus buchneri), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum) 및 락토바실러스 루테리(Lactobacillus leuteri)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 균주인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제2항에 있어서, 상기 락토코커스 락티스는 수탁번호 KCCM11915P로 수탁된 락토코커스 락티스 아종 락티스 W-카멜리아(Lactococcus lactis subsp . lactis W-camellia) 및 수탁번호 KCCM12006P로 수탁된 락토코커스 락티스 아종 락티스 R-카멜리아(Lactococcus lactis subsp . lactis R-camellia)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 균주인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제2항에 있어서, 상기 락토코커스 가비에는 수탁번호 KCCM12007P로 수탁된 락토코커스 가비에 BL-L1(Lactococcus garvieae BL-L1)인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제3항에 있어서, 상기 사카로마이세스 세레비제는 수탁번호 KCCM12008P로 수탁된 사카로마이세스 세레비제 JTL-L1(Saccharomyces cerevisiae JTL-L1)인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제4항에 있어서, 상기 락토바실러스 사케아이는 수탁번호 KCTC12675BP로 수탁된 락토바실러스 사케아이 MD_허니수클(Lactobacillus sakei MD_honeysucle)인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제4항에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸은 수탁번호 KCCM11179P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331261(Lactobacillus plantarum APsulloc 331261), 수탁번호 KCCM11180P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331263(Lactobacillus plantarum APsulloc 331263), 수탁번호 KCCM11181P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331266(Lactobacillus plantarum APsulloc 331266) 및 수탁번호 KCCM11182P로 수탁된 락토바실러스 플란타룸 APsulloc 331269(Lactobacillus plantarum APsulloc 331269)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 균주인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 발효는 36~38℃의 온도에서 1~9일 동안 정치 배양 또는 교반 배양하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 각질형성세포 분열 촉진용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 장벽 기능 강화용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 보습력 개선용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 재생용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.