JP2001240604A - 歯周疾患予防・治療用口腔用組成物 - Google Patents
歯周疾患予防・治療用口腔用組成物Info
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- JP2001240604A JP2001240604A JP2000055589A JP2000055589A JP2001240604A JP 2001240604 A JP2001240604 A JP 2001240604A JP 2000055589 A JP2000055589 A JP 2000055589A JP 2000055589 A JP2000055589 A JP 2000055589A JP 2001240604 A JP2001240604 A JP 2001240604A
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Abstract
類より抽出された多糖類を部分分解することにより得ら
れる多糖を少なくとも1種以上配合することを特徴とす
る歯周疾患予防・治療用口腔用組成物。 【効果】 本発明の歯周疾患予防・治療用口腔用組成物
は、部分分解した海藻抽出多糖を用いたことにより、安
全性が高く、かつ歯周病予防に有効なものである。
Description
植物門及び紅藻植物門に属する藻類から抽出した多糖類
を部分分解することにより得られる多糖により、歯垢の
成熟を抑制し、かつ非特異的な生体応答能を高めること
で、歯周疾患を予防又は治療する口腔用組成物に関す
る。
には300種以上の細菌が存在し、これらが複雑に絡み
合って歯垢を形成している。歯周疾患は、これら成熟し
た歯垢と宿主である生体の相互作用の結果、進行するこ
とが知られている。従って、従来より塩化セチルピリジ
ニウムやトリクロサン等の殺菌剤により歯垢細菌全体を
抑制したり、イブプロフェン等に代表される非ステロイ
ド性抗炎症剤により生じた炎症を抑制することが歯周疾
患に有効であることが知られている。また、これら歯垢
細菌に対する特異抗体を用いて、付着を抑制することや
免疫応答を高めること等により歯周疾患を予防する試み
もなされている。
も、これまで、グルコシルトランスフェラーゼ阻害によ
るう蝕予防技術(特開平1−186813号公報)、紅
藻類より抽出される多糖類によるう蝕原因菌であるスト
レプトコッカス・ミュータンスの付着阻害及び脱離のた
めの口腔用組成物(特開平5−139979号公報)、
フノランを有効成分とする歯周病原因菌の定着阻害及び
脱離のための口腔用組成物(特開平8−154585号
公報)、歯周病原因菌であるポルフィロモナス・ジンジ
バリスに対する特異的抗菌活性を有する海藻抽出物(特
開平9−48715号公報)等の特定の細菌に対する効
果が開示されている。
・治療に適した口腔用組成物が求められている。
もので、緑藻、褐藻及び紅藻植物抽出物を用いることに
より安全性に優れ、かつ効果の高い歯周疾患の予防・治
療を行うために有効な口腔用組成物を提供することを目
的とする。
発明者は、上記目的を達成するため種々検討を重ねた結
果、緑藻植物門、褐藻植物門及び紅藻植物門に属する海
藻類から抽出した多糖類を部分分解することにより得ら
れる多糖が、非特異的な生体応答能を高め、かつ歯垢の
成熟を抑制することを見出し、本発明をなすに至った。
海藻抽出物を配合した口腔用組成物という点で本発明と
一部共通するが、海藻由来の多糖類及びその部分分解物
が非特異的な生体応答能を高めることについては全く記
載されていない。更に、上記公報記載の海藻抽出物以外
の海藻由来多糖類の部分分解物に特に優れた歯垢の成熟
を抑制できることも記載されておらず、本発明とは根本
的に異なるものである。
本発明の口腔用組成物においては、有効成分として、緑
藻類、褐藻類、紅藻類から選ばれる海藻類より抽出され
た多糖類を更に部分分解することにより得られる多糖を
使用する。
としては、緑藻植物門のヒトエグサ科Monostro
mataceae、アオサ科ulvaceae、ハネモ
科Bryopsidaceae、イワヅタ科Caule
rpaceae、ミル科Codiaceae、褐藻植物
門のアミジグサ科Dictyotaceae、ナガマツ
モ科Chordariaceae、モズク科Nemac
ystaceae、コンブ科Laminariacea
e、アイヌワカメ科Alariaceae、レッソニア
科Lessoniaceae、ヒバマタ科Fucace
ae、ホンダワラ科Sargassaceaea、ダー
ビリア科Durvilleaceae、及び紅藻植物門
のウシケノリ科Bangiaceae、テングサ科Ge
lidiaceae、カクレイト科Cryptonem
iaceae、フノリ科Gloiopeltidace
ae、ツカサノリ科Kallymeniaceae、ミ
リン科Solieriaceae、オゴノリ科Grac
ilariaceae、スギノリ科Gigartina
ceae、カギノリ科Bonnemaisoniace
ae、ダルス科Rhodymeniaceae、イギス
科Ceramiaceae、フジマツモ科Rhodom
elaceaeに属する海藻である。
onostroma nitidum)、アナアオサ
(Ulva pertusa)、オオアオサ(Ulva
sublittoralis)、シーレタス(Ulv
a lactuca)、スジアオノリ(Enterom
orpha prolifera)、ハネモ(Bryo
psis plumosa)、クビレヅタ(Caule
rpa lentillifera)、ミル(Codi
um fragile)、アミジグサ(Dictyot
a dichotoma)、ヤハズグサ(Dictyo
pteris latiuscula)、マツモ(An
alipus japonicus)、オキナワモズク
(Cladosiphon okamuranus)、
モズク(Nemacystis decipien
s)、マコンブ(Laminariajaponic
a)、ミツイシコンブ(Laminaria angu
stata)、カジメ(Ecklonia cav
a)、エクロニア マキシマ(Ecklonia ma
xima)、クロメ(Ecklonia kurom
e)、アラメ(Eisenia bicyclis)、
ワカメ(Undaria pinnatifida)、
レッソニア ニグレッセンス(Lessonia ni
grescens)、オオウキモ(Macrocyst
is pyrifera)、ヒバマタ(Fucus e
vanescens)、フカス ベシキュロサス(Fu
cus vesiculosus)、アスコフィラム
ノドッサム(Ascophyllum nodosu
m)、ヒジキ(Hizikia fusiformi
s)、オオバモク(Sargassum ringgo
ldianum)、ホンダワラ(Sargassum
fulvellum)、アサクサノリ(Porphyr
a tenera)、スサビノリ(Porphyra
yezoensis)、マクサ(Gelidium a
mansii)、ヒラクサ(Beckerella s
ubcostata)、オバクサ(Pteroclad
iacapillacea)、プテロクラディア テニ
ュイス(Pterocladia tenuis)、マ
フノリ(Gloiopeltis tenax)、フク
ロフノリ(Gloiopeltis furcat
a)、ネザシノトサカモドキ(Callophylli
s andata)、ホソバノトサカモドキ(Call
ophyllis japonica)、ヒロハノトサ
カモドキ(Callophyllis crispat
a)、キヌハダ(Callophyllis firm
a)、カロフィリス バリエガータ(Callophy
llisvariegata)、キリンサイ(Euch
euma muricatum)、カタメンキリンサイ
(Eucheuma gelatinae)、ユーキウ
マスピノサム(Eucheuma spinosu
m)、ユーキウマ コットニー(Eucheuma c
ottonii)、トサカノリ(Meristothe
ca papulosa)、オゴノリ(Gracila
ria verrucosa)、スギノリ(Gigar
tina tenella)、シキンノリ(Gigar
tina teedii)、ギガルティナ チャミソイ
(Gigartina chamissoi)、アカバ
ギンナンソウ(Rhodoglossum japon
icum)、イリディア コルデータ(Iridaea
cordata)、ツノマタ(Chondrus o
ccellatus)、トチャカ(Chondrus
crispus)、カギノリ(Bonnemaison
ia hamifera)、タマイタダキ(Delis
ea fimbriata)、ダルス(Rhodyme
nia palmat)、イギス(Ceramium
kondoi)、アミクサ(Ceramium boy
denii)、マクリ(Digenea simpl
e)などが挙げられるが、これらに制限されるものでは
ない。
は、特に制限はなく、通常の水系抽出法が採用され、
水、適当な塩溶液、緩衝液及び親水性有機溶媒等から選
ばれる単独あるいは2種以上の溶媒を組み合わせて行う
ことができる。
除いた後、生のままや細切したものを用いることができ
るが、乾燥した後、粉砕したものを用いることが好まし
い。また、これら原料は上述の抽出液で抽出されるもの
であるが、あらかじめ有機溶媒で処理することにより脂
溶性物質を除くことが好ましい。この場合、用いられる
有機溶媒は、メタノール、エタノール、プロパノール等
の低級アルコールやアセトン、酢酸エチル、クロロホル
ム、n−ヘキサン等あるいはこれらを任意の割合で混合
したものが好適に使用できる。
出する場合の温度は、室温以上の温度であれば特に制限
されるものではないが、80℃以上が特に好ましい。ま
た、その抽出時間も通常は10分〜24時間が好まし
い。抽出後、遠心分離、濾過等により固形分を除去し、
多糖画分を得ることができる。また、必要に応じて次亜
塩素酸等による脱色、有機溶媒による沈殿、塩析、透
析、限外濾過、ゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィ
等の処理を行うことができる。
についても特に制限されるものではなく、通常の酵素に
よる方法、酸、塩基による方法を用いることができ、特
に酸による加水分解を好ましく用いることができる。多
糖の部分分解は、上述の抽出操作と同時に行うこともで
きるが、酵素を用いる場合の抽出温度、pHは、用いる
酵素の至適条件により選択する必要がある。
→4結合を加水分解するβ−アガラーゼ等の多糖を加水
分解する能力を有するものであれば、起源を問わず使用
することができる。また、酸、アルカリで抽出する場合
には、加水分解反応を制御する目的で抽出温度は室温付
近で行うことが望ましい。
て更に精製し、使用することができる。精製方法として
は、有機溶媒による沈殿、塩析、透析、限外濾過、ゲル
濾過、イオン交換クロマトグラフィ等その目的に応じて
適宜組み合わせて用いることができる。
ル、エタノール、プロパノール等の低級アルコールが好
ましく、特にエタノールを好ましく用いることができ
る。また、ゲル濾過は、ポリアクリルアミド、デキスト
ラン等の担体を用いる方法が好ましく使用でき、通常、
バイオゲルPシリーズ、セファデックスGシリーズ等の
名称で販売されているものを使用することができる。以
上の精製法を組み合わせて得られた部分分解多糖は、そ
のまま有効成分として組成物に配合することができる
が、通常は更に乾燥(凍結乾燥、噴霧乾燥等)操作を加
え、目的物質を得ることができる。
1種を単独で用いても2種以上を組み合わせて用いるこ
ともできる。また、本発明の組成物におけるこれら部分
分解多糖の配合量は、組成物全体の0.001〜10%
(重量%、以下同様)、特に0.01〜3%が好まし
い。
剤、歯肉マッサージクリーム、局所塗布剤、洗口剤、ト
ローチ剤、チューインガム等の様々な剤型とすることが
可能である。この場合、本発明の口腔用組成物には、上
述した成分以外にも通常の口腔用組成物に使用される各
種基剤成分を配合することができる。
剤、粘稠剤、甘味剤、香料などを常用量で配合し得る。
2水和物、第3リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ピ
ロリン酸カルシウム、水酸化アルミニウム、無水ケイ
酸、ケイ酸アルミニウム、不溶性メタリン酸ナトリウ
ム、第3リン酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、硫酸
カルシウム、ベントナイト、ケイ酸ジルコニウム、ポリ
メタクリル酸メチル、その他の合成樹脂等の1種又は2
種以上を本発明の効果を損なわない範囲で配合し得る。
ルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロー
ス、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導
体、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸プロピレングリ
コール等のアルギン酸誘導体、キサンタンガム、ジェラ
ンガム、トラガントガム、カラヤガム等のガム類、ポリ
ビニルアルコール、ポリアクリル酸ナトリウム、カルボ
キシビニルポリマー等の合成粘結剤、シリカゲル、ビー
ガム、ラポナイト等の無機粘結剤などの1種又は2種以
上を配合し得る。
ト、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、
キシリトール、マルチトール、ラクチトール等の多価ア
ルコールの1種又は2種以上を配合し得る。
ウム等のアニオン性界面活性剤、ラウリン酸デカグリセ
リル、ミリスチン酸ジエタノールアミド等の非イオン性
界面活性剤、ベタイン系等の両性界面活性剤を配合し得
る。
ル、カルボン、オイゲノール、n−デシルアルコール、
シトロネロール、α−テルピネオール、シネオール、リ
ナロール、エチルリナロール、ワニリン、チモール、ペ
パーミント油、スペアミント油、ウインターグリーン
油、丁字油、ユーカリ油等の香料を単独で又は組み合わ
せて配合し得る。更に、サッカリンナトリウム、ペリラ
ルチン、ソーマチン等の甘味剤を配合し得る。
化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化セチル
ピリジニウム、塩化デカリニウム等の陽イオン性殺菌
剤、トリクロサン、ヒノキチオール、ビオゾール等のフ
ェノール性化合物、デキストラナーゼ、ムタナーゼ、リ
ゾチーム、アミラーゼ、プロテアーゼ、溶菌酵素、SO
D等の酵素、モノフルオロリン酸ナトリウム、モノフル
オロリン酸カリウムなどのアルカリ金属モノフルオロフ
ォスフェート、フッ化ナトリウム、フッ化第一錫などの
フッ化物、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン
酸、アラントイン、ジヒドロコレスタノール、グリチル
リチン酸類、グリチルレチン酸、グリセロフォスフェー
ト、クロロフィル、塩化ナトリウム、塩化亜鉛、水溶性
無機リン酸化合物、ビタミンA、ビタミンB群、ビタミ
ンC、ビタミンE等のビタミン類及びそれらの誘導体等
の公知の有効成分を1種又は2種以上配合することがで
きる。
成物は、部分分解した海藻抽出多糖を用いたことによ
り、安全性が高く、かつ歯周病予防に有効なものであ
る。
発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制
限されるものではない。
80gにクロロホルム−メタノール(2:1)混液、2
リットルを加えて室温で2時間撹拌し、濾過後、上清を
溶媒留去することにより、上清画分及び残渣を得た。残
渣を次亜塩素酸溶液で2時間処理、水洗、乾燥後、蒸留
水2リットルを加え、沸騰水浴中で撹拌しながら3時間
抽出を行い、多糖を濾過により固形分と完全に分離する
ことによって得た。残った固形分は、同様の条件で再度
抽出を行い、先の抽出液と合わせ、5倍量のエタノール
を添加することにより生じた沈殿を遠心分離により回収
し、蒸留水に溶解後、凍結乾燥を行い、乾燥物10.8
gを得た。
よりpHを2に調整し、室温で反応させ、ポリサルフォ
ン系の分画分子量100,000の限外濾過膜(グレー
スジャパン株式会社)を用いて限外濾過を行い、未反応
及び分子量100,000以上の多糖を除去した。この
ものを1N水酸化ナトリウム溶液で中和後、脱塩処理を
施し、凍結乾燥後、目的の物質2.6gを得た。
洗浄後、細切し、エタノール3リットルを加えて室温で
20分間洗浄を行った。エタノールを完全に除去した
後、蒸留水3リットルを加え、2時間沸騰水浴中で抽出
操作を行った。この操作を2回繰り返すことにより得ら
れた粗抽出液を凍結乾燥して、乾燥物48.2gを得
た。この乾燥物10gをリン酸緩衝液(pH6.0)1
00mlに溶解し、シュードモナス属由来のβ−アガラ
ーゼ(WORTHINGTON BIOCHEMICA
L CO.)100ユニット添加し、40℃で24時間
反応させた。反応終了後、沸騰水浴中で酵素を失活さ
せ、凍結乾燥物6.5gを得た。このものを蒸留水に溶
解後、バイオゲルP−10(日本バイオラッドラボラト
リーズ)により分子量100,000以下の画分を分取
し、凍結乾燥後、試料3.1gを得た。
メタノール100mlを加えて室温で2時間撹拌し、濾
過後、固形物に蒸留水100mlを加え、沸騰水浴中で
撹拌しながら1時間抽出を行い、遠心分離により抽出上
清を得た。この上清を1N塩酸によりpHを2に調整
し、室温で2時間加水分解を行い、分画分子量100,
000のセントリプラス(グレースジャパン株式会社)
により限外濾過を行い、未反応及び分子量100,00
0以上の多糖を除去した。このものを1N水酸化ナトリ
ウム溶液で中和後、脱塩処理を施し、凍結乾燥後、目的
の物質620mgを得た。
シーレタス、スジアオノリ、ハネモ、クビレヅタ、ミ
ル、アミジグサ、ヤハズグサ、マツモ、オキナワモズ
ク、モズク、ミツイシコンブ、カジメ、エクロニア マ
キシマ、クロメ、アラメ、ワカメ、レッソニア ニグレ
ッセンス、オオウキモ、ヒバマタ、フカス ベシキュロ
サス、アスコフィラム ノドッサム、ヒジキ、オオバモ
ク、ホンダワラ、アサクサノリ、スサビノリ、マクサ、
ヒラクサ、オバクサ、プテロクラディア テニュイス、
マフノリ、フクロフノリ、ネザシノトサカモドキ、ホソ
バノトサカモドキ、ヒロハノトサカモドキ、キヌハダ、
カロフィリス バリエガータ、キリンサイ、カタメンキ
リンサイ、ユーキウマ スピノサム、ユーキウマ コッ
トニー、トサカノリ、スギノリ、シキンノリ、ギガルテ
ィナ チャミソイ、アカバギンナンソウ、イリディア
コルデータ、ツノマタ、トチャカ、カギノリ、タマイタ
ダキ、ダルス、イギス、アミクサからも酸部分分解多糖
を得た。
機溶媒抽出液を減圧乾固することにより得られた有機溶
媒抽出画分、及び、製造例1〜3で記載した部分加水分
解前の粗抽出画分を以下に示す実験例の比較試料として
使用した。
カゼイン溶液を注入し、16時間後に遊走してきた多形
核白血球(PMN)を採取した。このものをFicol
l−Paque(ファルマシア)比重遠心後、低張Na
Cl溶液処理により混在する赤血球を除いた後、ハンク
ス液(HBSS)に懸濁したものを実験に使用した。ま
た、被貧食細菌にはヘミン、メナジオン添加GAMブイ
ヨン(日水製薬)で嫌気的に24時間培養し、遠心集菌
後ハンクス液に懸濁したポルフィロモナス・ジンジバリ
ス(Porphyromonas gingivali
s)ATCC33277株(Pg)を用いた。
子量100,000以下の多糖分解物及び比較製造例で
得られた抽出物(終濃度1mg/ml)を添加し、10
%血清存在下、PMN:Pg=1:50の比率で嫌気的
条件(10%CO2,10%H2,80%N2)で60分
間反応を行った。反応終了後、反応液を血液平板に塗
沫、培養することにより生じたコロニーを計測して残存
生菌数を求め、コントロールに対する貧食殺菌活性
(%)を算出した。また、PMNを添加しない系でも反
応を行い、試験サンプルの殺菌活性(コントロールに対
する殺菌活性(%))も同時に比較した。結果を表1,
2に示す。
歯を対象歯牙とし、実験を行った。対象歯牙をスケーリ
ング、ポリッシングすることにより付着歯垢、歯石を完
全に除去した後、片顎には表3に示した試験サンプルの
1%水溶液を、もう片顎には生理食塩水を噴霧すること
により1日2回投与した。実験開始4日目に口腔内を十
分洗浄後、形成された歯垢をかき取り、タンパク量をL
owry法によって測定することにより、形成歯垢量を
求め、コントロール(生理食塩水投与部位)に対する抑
制率(%)を算出した。結果を表3に示す。
試験 雄性のビーグル犬(4頭)の左右下顎P2〜P4の計6
歯を用いて試験を行った。対象歯牙はスケーリングした
後、1日2回のブラッシングを4週間続けることによっ
て健康歯肉を確立した。その後、一切の口腔内清掃を中
止することにより歯肉炎を誘発させ、同時に片顎には表
4に示した試験サンプルの1%水溶液を、もう片顎には
生理食塩水を1日2回対象歯牙辺縁部に塗布した。歯肉
炎誘発後4週目に対象部位の歯肉炎指数を測定し、生理
食塩水に対する歯肉炎抑制率を算出した。結果を表4に
示す。
Claims (1)
- 【請求項1】 緑藻類、褐藻類及び紅藻類に属する海藻
類より抽出された多糖類を部分分解することにより得ら
れる多糖を少なくとも1種以上配合することを特徴とす
る歯周疾患予防・治療用口腔用組成物。
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