JP5306537B2 - 昆布抽出物を有効成分とする抗菌補助剤、抗菌組成物、及び飲食品 - Google Patents
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Description
また、本発明は、該抗菌補助剤と、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ及びグルコースとからなる抗菌組成物に関する。
さらに、本発明は、該抗菌組成物を含有する飲食品に関する。
一般に、昆布とは、褐藻類コンブ科コンブ属と近縁の海藻の総称である。食用の昆布には、マコンブ(真昆布、学名:Laminaria japonica)、ラウスコンブ(羅臼昆布、学名:Laminaria diabolica)、リシリコンブ(利尻昆布、学名:Laminaria ochotensis)、ヒダカコンブ(日高昆布、三石昆布、学名:Laminaria angustata)等の品種が知られている。
これらの成分のうち、特定の成分を強化あるいは低減させた昆布抽出物の製造方法(例えば、特許文献1、特許文献2)に関する技術がこれまでに開示されている。従来、昆布抽出物は、その旨味成分の呈味性と、食物繊維やミネラルの栄養学的価値が主に利用されてきた。その他にも、昆布抽出物には、抗がん作用(例えば、非特許文献1)、抗酸化作用(例えば、非特許文献2)、抗変異原性作用(例えば、非特許文献3)等の生理機能がこれまでに開示されている。
その他、海藻抽出物を有効成分とする口腔用組成物が開示されている(例えば、特許文献5)。さらには、海藻類より抽出された多糖類を部分分解することにより得られる多糖を配合する歯周病疾患予防・治療用口腔用組成物が開示されている(例えば、特許文献6)。
特許文献5には、海藻抽出物の成分について開示がなく、抗菌作用を示す対象の菌がポルフィロモナス.ジンジバリス(Porphyromonas gingivalis)に限定されていた。
特許文献6では、多糖を得るために、海藻類を抽出して部分分解する必要があった。また、特許文献5、6では、抽出溶媒として食用に適さないクロロホルム-メタノール混合溶媒を用いることが好適であった。
ラクトパーオキシダーゼは、ビフィズス菌や乳酸菌の生残性を高めることが開示されている(例えば、特許文献7)。また、ラクトパーオキシダーゼは、過酸化水素及びチオシアン酸の存在下においてヒポチオシアン酸の生成を触媒し、強い抗菌活性を示す系が知られている。これらは、ラクトパーオキシダーゼシステムとして知られる。
この組み合わせのうち、チオシアン酸は食品添加物として認められておらず、直ちに飲食品に使用できるものではなかった。
また、該抗菌補助剤が、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ及びグルコースと併用することによって、強い抗菌活性を示す抗菌組成物としての作用を示すことを見出した。
さらに、該抗菌組成物が、飲食品に好適に使用できることを見出した。
第一の本発明は、ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物の抗菌補助剤に用いられることが好ましい。
第一の本発明の抗菌補助剤は、黄色ブドウ球菌に対する抗菌組成物における抗菌補助剤として用いられることが好ましい。
第三の本発明は、抗菌組成物にさらにキサンタンガムを含む抗菌組成物である。第三の本発明の抗菌組成物は、トロミ剤として用いられることが好ましい。
第四の本発明は、本発明の抗菌組成物を含有する飲食品である。
(1)
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする、抗菌作用増強用医薬組成物。
(2)
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする、抗菌作用増強剤。
(3)
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする、抗菌作用増強用添加剤。
(4)
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする、ラクトパーオキシダーゼシステム用添加剤。
(5)
昆布から溶媒による抽出を行って昆布抽出物を得る工程、
昆布抽出物から分子量5000以下の画分を分画する工程、
を含む、ラクトパーオキシダーゼシステム用添加剤を、製造する方法。
(6)
溶媒が水又は水溶液である、(5)に記載の方法。
(7)
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、及びグルコースを、有効成分として含む、抗菌組成物。
(8)
昆布から溶媒による抽出を行って昆布抽出物を得る工程、
昆布抽出物から分子量5000以下の画分を分画する工程、
分画された分子量5000以下の画分、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、及びグルコースを、混合する工程、
を含む、
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、及びグルコースを、有効成分として含む、抗菌組成物の製造方法。
(9)
溶媒が水又は水溶液である、(8)に記載の方法。
(10)
チオシアン酸及びその塩を含まない、(7)に記載の抗菌組成物。
(11)
昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする抗菌補助剤。
(12)
抗菌補助剤が、ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物に用いられる(11)に記載の抗菌補助剤。
(13)
昆布抽出物が、マコンブ(Laminaria japonica)、ラウスコンブ(Laminaria diabolica)、リシリコンブ(Laminaria ochotensis)、ヒダカコンブ(Laminaria angustata)からなる群から選択される1又は複数の昆布抽出物である、(11)又は(12)に記載の抗菌補助剤。
(14)
(11)〜(13)のいずれか一項に記載の抗菌補助剤とラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ及びグルコースからなる抗菌組成物。
(15)
抗菌組成物にさらにキサンタンガムを含む(14)に記載の抗菌組成物。
(16)
(14)又は(15)に記載の抗菌組成物を含有する飲食品。
また、本発明の抗菌補助剤及び抗菌組成物は、生活環境で細菌の繁殖しやすい箇所に散布することができる。
(1)本発明の抗菌補助剤は、ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物(本発明の抗菌組成物)に用いて摂取することにより、安全に抗菌効果が発揮される。
(2)本発明の抗菌補助剤を用いたラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物は、細菌に起因する疾患の予防及び/又は治療に効果を有する。
(3)本発明の抗菌補助剤を用いたラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物は、ヒトに対する安全性が高く、日常的に摂取可能である。
また、本発明の抗菌組成物によれば、以下に示す効果が奏される。
(4)本発明の抗菌組成物は、ラクトパーオキシダーゼシステムによる抗菌効果が安全に発揮される。
(5)細菌に起因する疾患の予防及び/又は治療に効果を有する。
(6)ヒトに対する安全性が高く、日常的に摂取可能である。
(7)飲食品に添加することで、簡易に抗菌効果を有する飲食品を提供できる。
(8)キサンタンガムを添加した抗菌組成物はトロミ剤としての効果を有するので、単独で、あるいは飲食品に含有させることにより、嚥下困難者や高齢者に対して細菌感染リスクを低減した飲食品として提供できる。
本課題を解決することにより、昆布抽出物からなる抗菌補助剤及び抗菌組成物を安全に使用することができる。
本発明に使用する昆布抽出物は、市販の昆布から常法によって調製することができる。
本発明の昆布抽出物の出発原料として使用する昆布としては、マコンブ(真昆布、Laminaria japonica)、ラウスコンブ(羅臼昆布、Laminaria diabolica)、リシリコンブ(利尻昆布、Laminaria ochotensis)、ヒダカコンブ(日高昆布、三石昆布、Laminaria angustata)、ナガコンブ(Laminaria longissima)、ホソメコンブ(Laminaria religiosa)、ガツガラコンブ(Laminaria coriacea)、チヂミコンブ(Laminaria cichorioides)ゴヘイコンブ(Laminaria yezoensis)等が好ましく、特にマコンブ、ラウスコンブ、リシリコンブ及びヒダカコンブが好ましい。これらの昆布は1種でも使用でき、2種以上の昆布を併用することもできる。
昆布抽出物の製造方法としては、例えば、乾燥昆布を水に浸漬後、80〜100℃、5〜60分の条件で抽出することにより、昆布抽出物を得ることができる。
これらの抽出溶媒の中では、安全性が高く簡便であることから水を用いることが好ましい。
昆布抽出物としては、市販の液状あるいは粉末状の昆布エキス(例えば、三栄源エフ・エフ・アイ社製等)を使用することもできる。
一方、チオシアン酸及びその塩は、国によっては食品の添加が未だ認められていない化学物質である。
本発明では、チオシアン酸及びその塩を添加することなく、きわめて安全で安心な成分のみを使用して、ラクトパーオキシダーゼシステムの抗菌作用を発揮させることを可能としている。本発明によれば、ヒトに対するラクトパーオキシダーゼシステムの幅広い適用を、実現するものである。
また、本発明の抗菌補助剤は、昆布抽出物の分子量4000以下の画分を有効成分とすることもできる。従って、本発明の抗菌補助剤として使用するためには、昆布抽出物から分子量4000を超える成分を除去することがさらに好ましい。
昆布抽出物の分画方法は特に限定されるものではないが、限外ろ過膜(UF膜)、ナノろ過膜(NF膜)、ゲルろ過法等を使用することが好ましく、限外ろ過法を使用することが簡便であることからより好ましい。
本発明に使用するラクトパーオキシダーゼは、哺乳類の乳等から得ることができ、ヒト、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ等の乳等から得ることができる。例えば、特開平5−41981号公報に開示された方法のように、乳等未加熱のホエイ又は脱脂乳から、常法(例えばイオン交換クロマトグラフィー等)に従って工業的に製造することが好ましく、市販の天然物由来のラクトパーオキシダーゼ(例えばバイオポール社製等)、又は組換え型ラクトパーオキシダーゼ〔例えばシンらの方法[バイオケミカル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミュニュケーションズ(Biochemical and Biophysical Research Communications)、第271巻、2000年、p.831〜836]によって発現・精製された組換え型ラクトパーオキシダーゼ、又は市販の組換え型ラクトパーオキシダーゼ〕を使用することが好ましい。
なお、牛乳由来の未加熱のホエイは、乳製品製造の副産物として大量に安定供給できることから、本発明のラクトパーオキシダーゼの原料として特に好ましい。
一般に、ラクトパーオキシダーゼシステムの組み合わせとしては、例えば、ラクトパーオキシダーゼ、グルコース、グルコースオキシダーゼ、及びチオシアン酸の組み合わせを挙げることができる。本発明においては、ラクトパーオキシダーゼシステムのチオシアン酸の代わりに本発明の抗菌補助剤が使用される。すなわち、本発明の好ましい実施の態様において、ラクトパーオキシダーゼシステムは、ラクトパーオキシダーゼ、グルコース、グルコースオキシダーゼ、及び本発明の抗菌補助剤の組み合わせである。また、この組み合わせからなる組成物は、本発明のラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物と言い換えることができる。
本発明に使用するグルコースオキシダーゼは、例えば、アスペルギルス・ニガー(Aspergillus niger)、ペニシリウム・クリソゲナム(Penicillium chrysogenum)等の微生物の産生する酵素である市販品のグルコースオキシダーゼ(新日本化学工業社製等)を使用することができる。
本発明に使用するグルコースは、例えば、市販のグルコース(日本食品化工社製等)を使用することができる。
本発明に使用するキサンタンガムは、例えば、市販のキサンタンガム(三栄源エフ・エフ・アイ社製、CPケルコ社製等)を使用することができる。
本発明の抗菌補助剤は、昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分としている。
本発明の抗菌補助剤は、昆布抽出物がマコンブ(Laminaria japonica)、ラウスコンブ(Laminaria diabolica)、リシリコンブ(Laminaria ochotensis)及びヒダカコンブ(Laminaria angustata)からなる群から選択される1又は2以上の昆布抽出物であることが好ましい。
本発明の抗菌補助剤は、液体として使用することができるが、乾燥して粉末抗菌補助剤として使用してもよい。粉末化することで保存期間の延長が可能となり、製剤化の際に操作が容易となる。
粉末化は、常法により行うことができるが、凍結乾燥あるいは噴霧乾燥で水分を除去することが好ましい。また、乾燥前には、塩類やデキストリン等を混合することが好ましい。
本発明において、「抗菌」とは菌の増殖を阻止すること(抗菌)、対象物から菌を除いて減らすこと(除菌)、菌を殺すこと(殺菌)のいずれの概念も含んでいる。
したがって、本発明の抗菌補助剤は、除菌補助剤又は殺菌補助剤と言い換えることができる。同様に、本発明の抗菌組成物は、除菌組成物又は殺菌組成物と言い換えることができる。
ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物とは、ラクトパーオキシダーゼと、ラクトパーオキシダーゼシステムの抗菌系を発揮する成分との組み合わせからなる組成物をいう。ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物は、例えば、一般には、ラクトパーオキシダーゼ、グルコース、グルコースオキシダーゼ、チオシアン酸からなる組成物を挙げることができる。本発明のラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物においては、チオシアン酸又はその塩を添加することなく、本発明の抗菌補助剤を用いることができる。
本発明の抗菌補助剤は、本発明のラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物の一成分として使用することができるが、一般的なラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物に添加して使用することもできる。本発明の抗菌補助剤は、いずれの使用においても、ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物の抗菌効果を顕著に高めることができる。
なお、本発明の抗菌補助剤を添加したラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物は、本発明の抗菌組成物と言い換えることができる。
第二の本発明の抗菌組成物は、本発明の抗菌補助剤と、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ及びグルコースとからなっている。
本発明の抗菌組成物は黄色ブドウ球菌に有効であることから、食中毒の原因となりうる場所、例えば、細菌の繁殖しやすい台所のシンク、洗面台、浴室の浴槽や床、トイレの床や便器、ベランダ等に散布して使用することができる。
本発明の抗菌組成物は、有効成分がいずれも食品として摂取可能であることから安全性が高く、特に制限なく使用することができる。
本発明の抗菌組成物は、本発明の抗菌補助剤、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ及びグルコースの混合物であってもよく、それ以外の成分を含有していてもよい。
例えば、本発明の抗菌組成物には、乳中の有用な蛋白質であるラクトフェリン、リゾチーム、免疫グロブリン、カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリン等やプロバイオティクスとして働く乳酸菌等が含まれていてもよい。
第三の本発明の抗菌組成物は、第二の本発明の抗菌組成物とキサンタンガムとを含む抗菌組成物である。第三の本発明の抗菌組成物は、本発明の抗菌補助剤、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、グルコース及びキサンタンガムからなっている。
抗菌組成物は、キサンタンガムを含有することによってトロミを帯びるため、トロミ付与剤(トロミ剤)として、液状食品、液状医薬品、液状飼料に添加したときにトロミを付与することができる。
例えば、キサンタンガムを含む抗菌組成物を液状食品に添加すると、液状食品の物性が弱いゲル状となり、嚥下障害者や高齢者が嚥下しやすくなるという効果を有する。
そして、キサンタンガムを含む抗菌組成物は、食事による細菌感染リスクの大きい嚥下障害者や高齢者に特に好適に用いることができる。
したがって、本発明の抗菌組成物を口腔内で使用するときは、特に抗菌組成物がキサンタンガムを含んでいることが好ましい。
キサンタンガムを含む抗菌組成物において、キサンタンガム以外の抗菌組成物とキサンタンガムの比率は、キサンタンガム以外の抗菌組成物100質量部に対して、キサンタンガムが30〜3000質量部であることが好ましい。
また、液状食品にキサンタンガムを含む本発明の抗菌組成物を混合する場合の混合比率は、液状食品100質量部に対して、キサンタンガムを含む抗菌組成物が1.5〜3.0質量部であることが好ましい。
第四の本発明は、第二の本発明の抗菌組成物を含有する飲食品である。第四の本発明は、第三の本発明の抗菌組成物を含有する飲食品でもある。
本発明の抗菌組成物を含有する飲食品の形態としては、例えば、清涼飲料、乳飲料等又はこれらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末;加工乳、発酵乳等の乳製品;経腸栄養食及びその調整用粉末、トロミ調整飲料、トロミ調整食品;機能性食品等が挙げられ、さらに、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料等の飲料(これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む);アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓;そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類;飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類;かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品;サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品;ソース、たれ等の調味料;スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物、パン等を挙げることができる。このような飲食品は、例えば、本発明の口腔内用殺菌剤又は食品添加物(粉末又はその水溶液(シロップ等)等の形態を含む)に、デキストリン、デンプン等の糖類;ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質;アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類;セルロース、アラビアゴム等の多糖類;大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等を配合することにより、製造することができる。
[実施例1]
本発明の抗菌補助剤の調製
(1)昆布抽出物の調製
市販の乾燥マコンブ(八社会社製)4gを精製水400mlの入ったビーカーに添加し、室温で2時間浸漬した。続いて、マコンブ入りのビーカーを約95℃で30分間加熱した。さらに、ビーカーを放冷後、孔サイズ0.45μmのフィルター(アドバンテック社製)で除菌して、昆布抽出物350mlを得た。
本実施例では、昆布サンプル4gを精製水400mlに添加して昆布抽出物を調製したが、これは乾燥昆布から調理用にだしを取る場合の約2倍の濃度であった。
昆布抽出物12mlを分取し、分画分子量5000の遠心分離用限外ろ過膜カートリッジ(ミリポア社製)で2000rpm(960×g)、20分間の条件で遠心分離して、分子量5000を超える画分を分離し、分子量5000以下の画分からなる透過液(本発明の抗菌補助剤)を得た。
市販の乾燥マコンブ(納屋商店社製)1kgを精製水20Lの入ったステンレス製容器に添加し、室温で2時間浸漬後、約95℃で30分間加熱し、昆布抽出物15Lを得た。次に、この昆布抽出物を分画分子量4000の限外ろ過膜モジュール(旭化成社製)で処理し、分子量4000以下の画分からなる透過液13Lを得た。この透過液に、賦形剤としてデキストリン(東亜化成社製)450gを添加、溶解し、凍結乾燥機で処理し、本発明の粉末抗菌補助剤500gを製造した。
本実施例では、乾燥マコンブ1kgから本発明の有効成分が50g(乾燥質量)得られた。そして、本実施例の粉末抗菌補助剤は、有効成分が500g(乾燥質量)中に50g(乾燥質量)含まれるから、上記の粉末抗菌補助剤の有効成分の濃度は10質量パーセントである。
以下の組成の抗菌組成物原料粉末を混合し、抗菌組成物粉末117.6gを得た。これを0.375gずつ計量し、それぞれ容量250mlのプラスチック製容器に添加し、粉末状の抗菌組成物300個を製造した。
この抗菌組成物入り容器は、使用時に水250mlを添加して粉末を溶解することによって、液状抗菌組成物として飲用可能である。
ラクトパーオキシダーゼ(バイオポール社製) 0.6g
グルコースオキシダーゼ(新日本化学工業社製) 8.0g
グルコース(日本食品化工社製) 9.0g
[試験例1]
本試験では、本発明の抗菌補助剤がラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物において、抗菌補助剤として有効であることを確認した。
(1)試料の調製
試験試料として、実施例1で製造した昆布抽出物の透過液(昆布抽出物低分子画分)を使用した。
一方、対照試料として、実施例1の未分画の昆布抽出物をそのまま使用した。
黄色ブドウ球菌[スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)JCM2151、理化学研究所より分譲]を1%バクトペプトン培地で一晩培養した。この培養液20mlを遠心分離機(日立製作所社製)を用いて、3000rpm(2150×g)、10分間、4℃の条件で遠心分離後、残渣をリン酸緩衝生理食塩水10mlで懸濁して菌液を調製した。
容量5mlのチューブに、試験試料1.0ml、塩化ナトリウム(国産化学社製)の3.4%水溶液0.5ml、ラクトパーオキシダーゼ(バイオポール社製)の1mg/ml水溶液20μl、グルコース(和光純薬社製)の1%水溶液30μl、精製水403.3μl、及び上記(2)の菌液20μlを添加し、攪拌した。
次いで、グルコースオキシダーゼ(新日本化学工業社製)の10mg/ml水溶液26.7μlを添加し、攪拌し、室温で5分間インキュベーション後、リン酸緩衝生理食塩水で10倍ずつ段階的に希釈した。この希釈液を20μlずつ標準寒天培地に塗布し、37℃のインキュベーター中で一晩培養した後、寒天培地上に形成されたコロニーの数を測定した。検出された細菌のコロニー数から、上記の試験混合液1ml当りの生菌数の対数値(log10cfu/ml)を求めた。
同様の方法で、対照試料を1.0ml使用して試験した。
さらには、試験試料、対照試料について、グルコースオキシダーゼを添加しないことを除き、上記試験例とすべて同じ系において同様の試験を行った。
本試験の結果を表1に示す。
試験試料(マコンブ抽出物の低分子画分)を使用した系では、試験混合液中で黄色ブドウ球菌の生菌数を検出限界以下に低下させた。一方、対照試料(マコンブ抽出物)を使用した系では、試験混合液中で黄色ブドウ球菌の生菌数はほとんど変化しなかった。また、グルコースオキシダーゼ無添加の系でも、試験試料、対照試料とも、黄色ブドウ球菌の生菌数はほとんど変化しなかった。
この結果から、昆布抽出物低分子画分、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、グルコースの組み合わせによって、顕著な抗菌効果を発揮することが明らかになった。そして、昆布抽出物は抗菌剤としてではなく、他の成分に添加することで抗菌効果を発揮する抗菌補助剤として作用していることが明らかとなった。
なお、本試験の試験試料を用いた組み合わせでは、従来、ラクトパーオキシダーゼシステムの抗菌系を作用させるためには一定以上の濃度が必要であったチオシアン酸が全く使用されていないにも関わらず、抗菌効果を発揮するという驚くべき効果が明らかになった。
そして、昆布抽出物低分子画分が、ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物の有効成分として抗菌作用を発揮するという、顕著な効果を有することが明らかになった。
また、昆布抽出物は、分子量5000を超える高分子画分に阻害物質を有しているが、その阻害物質を除去すれば、ラクトパーオキシダーゼの抗菌系に利用できることが明らかとなった。
初菌数:約6.0 log10cfu/ml
本試験では、本発明の抗菌補助剤の原料として使用できる昆布の品種を検討した。
(1)試料の調製
市販の乾燥昆布4品種(マコンブ、ラウスコンブ、リシリコンブ、及びヒダカコンブ)各4gを使用し、実施例1の方法で昆布抽出物低分子画分を調製した。
試料は、昆布の品種ごとに異なる市販品3サンプルずつから調製した。
(2)菌液の調製
試験例1(2)と同様の方法で黄色ブドウ球菌の菌液を調製した。
試験例1(3)と同様の方法で試験した。
(4)試験結果
本試験の結果を表2に示す。試験は各サンプルとも2回ずつ行った。
その結果、試験した全品種の昆布から調製された昆布抽出物低分子画分が、黄色ブドウ球菌の生菌数を検出限界以下に低下させ、強い殺菌活性を示すことが明らかになった。
この結果から、本発明の抗菌補助剤の原料としては、マコンブ、ラウスコンブ、リシリコンブ、ヒダカコンブのいずれの昆布も好適に利用できることが明らかとなった。
初菌数:約6.0 log10cfu/ml
本試験は、本発明の抗菌組成物における抗菌補助剤の用量依存性を検討することを目的とした。
(1)試料の調製
実施例1で調製したマコンブ抽出物低分子画分(以下、本発明の抗菌補助剤)の試料を使用し、この希釈倍率を1倍とした。この試料は精製水で2倍ずつ段階的に希釈し、128倍までの2倍段階希釈系列を作成した。
(2)菌液の調製
試験例1(2)と同様の方法で黄色ブドウ球菌の菌液を調製した。
実施例1で調製した抗菌補助剤及びその2倍段階希釈系列を試験混合液に添加したことを除いて、試験例1と同様の方法で試験した。
本試験の結果を表3に示す。
抗菌補助剤は、32倍希釈まで黄色ブドウ球菌の菌数が検出限界以下であり、64倍希釈においても、黄色ブドウ球菌を初菌数の1/100以下に低下させた。
本試験の結果より、抗菌補助剤の濃度と抗菌補助効果には相関関係があり、本発明の抗菌補助剤は、用量依存的にラクトパーオキシダーゼシステム抗菌作用を補助することが明らかになった。
初菌数:約6.0 log10cfu/ml
本試験は、キサンタンガムを含有する本発明の抗菌組成物が、キサンタンガムの添加に関わらず顕著な抗菌活性を発揮することを確認することを目的とした。
(1)試料の調製
次の組成の抗菌組成物を常法により製造し、キサンタンガムを含有する抗菌組成物(第三の本発明の抗菌組成物)を調製し、本発明品1とした。
ラクトパーオキシダーゼ(バイオポール社製) 0.06
グルコースオキシダーゼ(新日本化学工業社製) 0.8
グルコース(日本食品化工社製) 0.9
キサンタンガム(三栄源エフ・エフ・アイ社製) 30
乳酸カルシウム・5水和物(第一化成社製) 2.6
クエン酸三ナトリウム(三栄源エフ・エフ・アイ社製) 2.4
デキストリン(東亜化成社製) 53.24
試験例1(2)と同様の方法で黄色ブドウ球菌の菌液を調製した。
(3)試験方法
容量50mlのチューブに、(1)の本発明の抗菌組成物(本発明品1)0.5gを添加した。同様に、容量50mlのチューブに対照品1を0.5g添加したもの(本発明品2)、及びこれとは別に、容量50mlのチューブに市販のトロミ剤組成物(対照品)0.5gを添加したものを用意した。次に、これらのチューブに上記の菌液0.3mlと0.85%塩化ナトリウム水溶液30mlの混合液を添加し、ボルテックスでよく攪拌した。室温で5分間インキュベーション後、リン酸緩衝生理食塩水で10倍ずつ段階的に希釈した。この希釈液を20μlずつ標準寒天培地に塗布し、37℃のインキュベーター中で一晩培養した後、寒天培地上に形成されたコロニーの数を測定した。検出された細菌のコロニー数から、上記の混合液1ml当りの生菌数の対数値(log10cfu/ml)を求めた。
本試験の結果を表4に示す。
本発明品1及び2の結果から明らかなように、本発明の抗菌組成物は、キサンタンガムの有無にかかわらず、黄色ブドウ球菌の生菌数を検出限界以下に低下させ、強い抗菌活性を示した。一方、対照品は黄色ブドウ球菌の菌数に影響を与えなかった。
したがって、本発明のキサンタンガムを含有する抗菌組成物は、強い抗菌活性を発揮することが明らかになった。
なお、本試験で用いた粉末抗菌補助剤は昆布抽出物の分子量4000以下の成分を粉末化したものである。したがって、本発明の抗菌補助剤は昆布抽出物の分子量4000以下の成分を用いることもできることが明らかになった。
初菌数:約6.0 log10cfu/ml
また、本発明の抗菌組成物によれば、飲食品、医薬品、飼料として広範に使用することができる。
Claims (9)
- 昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする抗菌補助剤。
- 抗菌補助剤が、ラクトパーオキシダーゼシステム抗菌組成物に用いられる請求項1に記載の抗菌補助剤。
- 昆布抽出物が、マコンブ(Laminaria japonica)、ラウスコンブ(Laminaria diabolica)、リシリコンブ(Laminaria ochotensis)、ヒダカコンブ(Laminaria angustata)からなる群から選択される1又は複数の昆布抽出物である、請求項1又は2に記載の抗菌補助剤。
- 請求項1〜3のいずれか一項に記載の抗菌補助剤と、ラクトパーオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ及びグルコースとからなる抗菌組成物。
- 抗菌組成物にさらにキサンタンガムを含む請求項4に記載の抗菌組成物。
- 請求項4又は5に記載の抗菌組成物を含有する飲食品。
- 昆布から溶媒による抽出を行って昆布抽出物を得る工程、
昆布抽出物から分子量5000以下の画分を分画する工程、
を含む、ラクトパーオキシダーゼシステム用添加剤を、製造する方法。 - 溶媒が水又は水溶液である、請求項7に記載の方法。
- 請求項7又は請求項8に記載の方法によって製造された、昆布抽出物から得られる分子量5000以下の画分を有効成分とする、ラクトパーオキシダーゼシステム用添加剤。
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