CN102858356A - 以海带提取物为有效成分的抗菌辅助剂、抗菌组合物、以及饮食品 - Google Patents

以海带提取物为有效成分的抗菌辅助剂、抗菌组合物、以及饮食品 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种使用海带提取物作为抗菌辅助剂的方法，还提供一种通过并用该抗菌辅助剂和乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖而用作表现出强抗菌活性的抗菌组合物的方法。具体而言，公开了一种抗菌辅助剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分；以及一种抗菌组合物，其含有本发明的抗菌辅助剂和乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖；进而提供一种进一步含有黄原胶的抗菌组合物；以及含有抗菌组合物的饮食品。

Description

以海带提取物为有效成分的抗菌辅助剂、抗菌组合物、以及饮食品
技术领域
本发明涉及以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分的抗菌辅助剂。
此外，本发明涉及含有该抗菌辅助剂和乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖的抗菌组合物。
更进一步，本发明涉及含有该抗菌组合物的饮食品。
背景技术
海带是日本人的饮食生活中不可缺少的东西，常年用作矿物质等营养丰富的食材，备受喜爱。
一般而言，所谓海带是指与褐藻类海带科海带属具有近缘关系的海藻的总称。食用的海带中，已知的品种有真海带（真海带、学名：Laminaria japonica）、鬼海带（罗臼海带、学名：Laminaria diabolica）、利尻海带（利尻海带、学名：Laminariaochotensis）、狭叶海带（日高海带、三石海带、学名：Laminariaangustata）等。
海带的热水提取物即海带汤汁中，除了含有以谷氨酰胺为主体的鲜味成分和以藻酸为主体的食物纤维之外，还富含钾、钠、钙、镁、铁等矿物质。
以往，与强化或者减少上述成分中的特定成分的海带提取物的制造方法（例如专利文献1、专利文献2）相关的技术已有所公开。以往，海带提取物主要是利用其鲜味成分的显味性和食物纤维、矿物质的营养学价值。除此之外，以往已经公开了海带提取物具有抗癌作用（例如非专利文献1）、抗氧化作用（例如非专利文献2）、抗诱变性作用（例如非专利文献3）等生理功能。
此外，已公开了以海藻灰的提取液残渣为有效成分的抗菌剂（例如专利文献3）。并且，公开了一种针对大肠杆菌的抗菌组合物，其特征在于，含有海蕴的热水提取物及/或其处理物（例如专利文献4）。
此外，公开了以海藻提取物为有效成分的口腔用组合物（例如专利文献5）。更进一步的，公开了一种牙周病预防治疗用口腔组合物，其配合有对从海藻类提取的多糖类进行部分分解而得到多糖（例如专利文献6）。
但是，专利文献3中，是以原料海藻类的提取物残渣为对象的。专利文献4中，对于海带则没有公开，对病原性大肠杆菌O-157以外的菌也没有公开。
专利文献5中，对于海藻提取物的成分没有进行公开，显示出抗菌作用的对象菌限定于牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgingivalis）。
专利文献6中，为了得到多糖，需要对海藻类进行提取并进行部分分解。此外，专利文献5、6中，优选的是使用不宜食用的氯仿-甲醇混合溶剂作为提取溶剂。
另一方面，作为乳蛋白之一的乳过氧化物酶，是一种包括于哺乳类的乳汁以及唾液、泪液、呼吸道粘液等分泌液中的氧化还原酶，工业上可以由牛乳大量纯化。
已经公开乳过氧化物酶能够提高双歧杆菌、乳酸菌的存活性（例如专利文献7）。此外，已知乳过氧化物酶在过氧化氢以及硫氰酸存在下，催化生成亚硫氰酸（Hypothiocyanic acid），是一种表现出强抗菌活性的体系。这些都是作为乳过氧化物酶系统所周知的。
该组合中，硫氰酸未被批准作为食品添加剂，不能直接用于饮食品。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2000-270806号公报
专利文献2：日本特公平5-77379号公报
专利文献3：日本特开2000-344677号公报
专利文献4：日本特开2000-344679号公报
专利文献5：日本特开平9-48715号公报
专利文献6：日本特开2001-240604号公报
专利文献7：日本特开5-41981号公报
非专利文献
非专利文献1：Cancer Letters、爱尔兰、第30卷、1986年、p.125~131
非专利文献2：Biological & Pharmaceutical Bulletin、日本、第27卷、2004年、p.1037~1040
非专利文献3：Mutation Research、荷兰、第303卷、1993年、p.63~70
发明内容
发明要解决的问题
本发明的发明人根据前述背景技术，对有效利用海带所具有的生理功能的新用途，不断地进行深入探索，结果发现海带提取物中的分子量为5000以下的级分可以作为抗菌辅助剂使用。
此外，发现通过将该抗菌辅助剂与乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖并用，表现出具有强抗菌活性的抗菌组合物的作用。
更进一步，发现该抗菌组合物适合用于饮食品。
用于解决问题的方案
解决前述问题的本发明第一方式是一种抗菌辅助剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
本发明第一方式，优选用于乳过氧化物酶系统抗菌组合物的抗菌辅助剂。
本发明第一方式中，海带提取物优选为选自真海带（Laminaria japonica）、鬼海带（Laminaria diabolica）、利尻海带（Laminaria ochotensis）以及狭叶海带（Laminaria angustata）组成的组中的1种或多种海带提取物。
本发明第一方式中的抗菌辅助剂，优选用作针对金黄色葡萄球菌的抗菌组合物中的抗菌辅助剂。
此外，本发明第二方式是一种抗菌组合物，其含有本发明的抗菌辅助剂与乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖。
本发明第三方式是一种抗菌组合物，所述抗菌组合物中进一步含有黄原胶。本发明第三方式的抗菌组合物，优选作为增稠剂使用。
本发明第四方式是一种饮食品，其含有本发明的抗菌组合物。
进一步，本发明也包括下述（1）~（3）的内容。
（1）一种抗菌作用增强用药物组合物，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
（2）一种抗菌作用增强剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
（3）一种抗菌作用增强用添加剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
更进一步，本发明也包括下述（4）~（10）的内容。
（4）一种乳过氧化物酶系统用添加剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
（5）一种制造乳过氧化物酶系统用添加剂的方法，其包括：
利用溶剂进行提取，从海带中获得海带提取物的工序、和
从海带提取物中分级分子量为5000以下的级分的工序。
（6）根据（5）所述的方法，其中，溶剂是水或者水溶液。
（7）一种抗菌组合物，其含有从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、以及葡萄糖作为有效成分。
（8）一种抗菌组合物的制造方法，所述抗菌组合物含有从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分和乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、以及葡萄糖作为有效成分，
所述制造方法包括：
利用溶剂进行提取，从海带中获得海带提取物的工序，
从海带提取物中分级分子量为5000以下的级分的工序，和
将分级的分子量为5000以下的级分与乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、以及葡萄糖混合的工序。
（9）根据（8）所述的方法，其中，溶剂是水或者水溶液。
（10）根据（7）所述的抗菌组合物，其不含硫氰酸及其盐。
更进一步，本发明也包括从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分的用于制造上述抗菌组合物的用途（Use）。更进一步，本发明也包括通过给与上述抗菌组合物杀灭微生物的方法、消毒的方法、灭菌的方法。更进一步，本发明也包括上述抗菌组合物用于对微生物进行杀菌、消毒以及灭菌的用途（Use）。乳过氧化物酶系统用添加剂还可以称为抗菌用添加剂、抗菌组合物用添加剂、抗菌辅助剂、抗菌作用增强剂、抗菌作用增强用组合物。优选的实施形式中，本发明的抗菌组合物中含有黄原胶。
更进一步，本发明也包括下述（11）~（16）的内容。
（11）一种抗菌辅助剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
（12）根据（11）所述的抗菌辅助剂，其用于乳过氧化物酶系统抗菌组合物。
（13）根据（11）或者（12）所述的抗菌辅助剂，其中，海带提取物是选自真海带（Laminaria japonica）、鬼海带（Laminaria diabolica）、利尻海带（Laminaria ochotensis）、狭叶海带（Laminaria angustata）组成的组中的1种或多种海带提取物。
（14）一种抗菌组合物，其含有（11）~（13）中的任一项所述的抗菌辅助剂与乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖。
（15）根据（14）所述的抗菌组合物，其中，抗菌组合物中进一步含有黄原胶。
（16）一种饮食品，其含有（14）或者（15）所述的抗菌组合物。
发明的效果
本发明的抗菌辅助剂以及抗菌组合物可以用于确保体内、特别是口腔内的卫生状态。此外，安全，副作用少，可以与饮食品共同食用。本发明的抗菌辅助剂以及抗菌组合物，即使长期地日常摄取也是安全的。
此外，本发明的抗菌辅助剂以及抗菌组合物，可以散布在生活环境中细菌容易繁殖的位置。
本发明的抗菌辅助剂可以发挥如下所示的效果。
（1）本发明的抗菌辅助剂，通过用于乳过氧化物酶系统抗菌组合物（本发明的抗菌组合物）并被摄取，能够安全地发挥抗菌效果。
（2）使用本发明的抗菌辅助剂的乳过氧化物酶系统抗菌组合物，对细菌引起的疾病具有预防及/或治疗的效果。
（3）使用本发明的抗菌辅助剂的乳过氧化物酶系统抗菌组合物，对人体的安全性高，可以日常摄取。
此外，本发明的抗菌组合物可以发挥如下所示的效果。
（4）本发明的抗菌组合物，可以安全地使乳过氧化物酶系统发挥抗菌效果。
（5）对细菌引起的疾病具有预防及/或治疗的效果。
（6）对人体的安全性高，可以日常摄取。
（7）通过添加到饮食品中，可以容易地提供具有抗菌效果的饮食品。
（8）添加了黄原胶的抗菌组合物具有增稠剂的效果，因此，单独或者通过在饮食品中含有，可以提供减少吞咽困难者、高龄者发生细菌感染风险的饮食品。
通过解决本发明的课题，可以安全使用含有海带提取物的抗菌辅助剂以及抗菌组合物。
具体实施方式
接下来，对本发明优选的实施形式进行详细说明。不过，本发明并不限定于以下优选的实施形式，在本发明的范围内可以自由变更。另外，本说明书中的百分率，只要没有特别说明都是基于质量的百分率。
[海带提取物]
本发明中使用的海带提取物，可以使用市售的海带以常规方法制备。
作为本发明的海带提取物的起始原料使用的海带，优选真海带（真海带、Laminaria japonica）、鬼海带（罗臼海带、Laminaria diabolica）、利尻海带（利尻海带、Laminariaochotensis）、狭叶海带（日高海带、三石海带、Laminariaangustata）、长海带（Laminaria longissima）、皱海带（Laminariareligiosa）、革质海带（Laminaria coriacea）、卷边海带（Laminariacichorioides）、条斑海带（Laminaria yezoensis）等，特别优选真海带、鬼海带、利尻海带以及狭叶海带。可以使用这些海带中的一种，也可以并用2种以上的海带。
海带可以是通常作为食品使用的形态，也可以使用生海带、冷冻干燥的海带或者干燥海带，优选使用干燥海带。
作为海带提取物的制造方法，例如可以是通过将干燥海带浸渍在水中后以80~100℃、5~60分钟的条件进行提取，获得海带提取物。
作为海带提取物的提取溶剂，除了水以外还可以使用有机溶剂，作为有机溶剂，可以使用例如三氯甲烷、甲醇、乙醇、丙醇、二甲基亚砜、己烷等。
在这些提取溶剂中，水由于安全性高且简便而优选使用。
作为海带提取物，也可以使用市售的液状或者粉末状的海带提取物（例如San-Ei Gen F.F.I.,Inc.制等）。
本发明的抗菌辅助剂（乳过氧化物酶系统用添加剂），可以利用包括下述步骤的方法制造：利用溶剂进行提取从海带获得海带提取物的工序及从海带提取物分级分子量为5000以下的级分的工序。
用于提取的溶剂可以使用上述溶剂，在优选的实施方式中，溶剂为水或者水溶液。水溶液是指可以与水一样进行提取的水溶液，只要是人体可以安全摄取的水溶液，就可以没有特别限制的进行使用。作为水溶液，可以列举如含有氯化钠、氯化钾、糊精等的水溶液。利用溶剂进行的提取，可以是在常温或者加温下浸渍到溶剂中进行提取。在优选的实施方式中，利用溶剂进行的提取可以是浸渍到常温的水后加温进行提取。就加温而言，一般是加温（加热）到50~100℃、优选60~100℃、进一步优选70~100℃、进一步优选80~100℃、进一步优选90~100℃的温度范围而进行提取。提取时间可以适当设定，在优选的实施方式中，以一般是10~120分钟、优选20~100分钟、进一步优选30~90分钟、进一步优选40~80分钟、进一步优选50~60分钟的范围的时间进行提取。
所谓分级，只要是可以从海带提取物中将分子量为5000以下的级分分级的手段就可以使用。作为分级的手段，可以列举例如通过滤膜过滤、通过过滤器过滤、通过中空纤维过滤、离心分离、分子量色谱法（molecular weight chromatography）（凝胶过滤）等。此外，作为像这样的过滤，可以列举例如透析、离心过滤、抽滤、加压过滤、超滤等。本领域技术人员可以通过选择这些过滤膜、过滤器的孔径大小或者离心分离的加速度，分级分子量为5000以下或者分子量为4000以下的级分（组分）。
海带长久以来被用于饮食。特别是海带的热水提取物，在日本以海带汤汁的形式被用作传统的调味料。因此，可以确保海带提取物对人体具有极高的安全性。
另一方面，硫氰酸及其盐是在某些国家未被批准作为食品添加剂的化学物质。
在本发明中，不添加硫氰酸及其盐，只使用极安全、放心的成分就可以发挥出乳过氧化物酶系统的抗菌作用。根据本发明，可以实现乳过氧化物酶系统对人体的广泛应用。
海带提取物可以作为乳过氧化物酶系统用添加剂（抗菌辅助剂）使用是未知的。如本申请的实施例所示，海带提取物本身不能发挥作为乳过氧化物酶系统用添加剂的效果。但是，虽然其机理尚不明确，但如本发明所示，本发明的发明人从海带提取物中分级分子量为5000以下的级分，发现其可以发挥作为乳过氧化物酶系统用添加剂的效果，并完成了本发明。
本发明的抗菌辅助剂以海带提取物的分子量为5000以下的级分为有效成分。因此，为了作为本发明的抗菌辅助剂来使用，优选从海带提取物中去除分子量超过5000的成分。
此外，本发明的抗菌辅助剂也可以以海带提取物的分子量为4000以下的级分为有效成分。因此，为了作为本发明的抗菌辅助剂来使用，进一步优选从海带提取物中去除分子量超过4000的成分。
海带提取物的分级方法没有特别限定，优选使用超滤膜（UF膜）、纳滤膜（NF膜）、凝胶过滤法等，使用超滤法简单，故而更优选。
[乳过氧化物酶]
本发明中使用的乳过氧化物酶可以从哺乳类的乳汁等获得，可以从人、牛、马、羊、山羊等的乳汁等获得。例如，优选按照日本特开平5-41981号公报公开的方法那样，从乳汁等未加热的乳清或者脱脂乳中根据常规方法（例如离子交换色谱法等）进行工业制造，优选使用市售的来自天然物质的乳过氧化物酶（例如Biopol公司制造等）或者重组乳过氧化物酶〔例如根据Shinn等的方法[Biochemical and Biophysical ResearchCommunications，第271卷，2000年，p.831~836]表达、纯化的重组乳过氧化物酶、或者市售的重组乳过氧化物酶〕。
此外，本发明的乳过氧化物酶，优选为从哺乳类的乳汁获得的乳过氧化物酶，优选从牛、羊、山羊等的乳汁获得的乳过氧化物酶，特别优选从牛乳获得的乳过氧化物酶。这些原料常年用于人类的饮食，可以确保对人体具有极高的安全性。
另外，从牛乳获得的未加热的乳清可以以乳品制造的副产物形式大量、稳定地供给，因此特别优选作为本发明的乳过氧化物酶的原料。
在本发明中，乳过氧化物酶以乳过氧化物酶系统形式使用。通常已知的是，乳过氧化物酶系统是在乳过氧化物酶、过氧化氢、以及硫氰酸的存在下催化生成亚硫氰酸并表现出强抗菌活性的系统这样的组合物的组合。
一般而言，作为乳过氧化物酶系统的组合，可以列举例如乳过氧化物酶、葡萄糖、葡糖氧化酶、以及硫氰酸的组合。在本发明中，使用本发明的抗菌辅助剂代替乳过氧化物酶系统的硫氰酸。即，在本发明的优选的实施方式中，乳过氧化物酶系统是乳过氧化物酶、葡萄糖、葡糖氧化酶、以及本发明的抗菌辅助剂的组合。此外，含有该组合的组合物也可以称为本发明的乳过氧化物酶系统抗菌组合物。
[葡糖氧化酶]
本发明中使用的葡糖氧化酶，可以使用例如作为由黑曲霉（Aspergillus niger）、产黄青霉（Penicillium chrysogenum）等微生物产生的酶的市售的葡糖氧化酶（新日本化学工业公司制造等）。
[葡萄糖]
本发明中使用的葡萄糖，可以使用例如市售的葡萄糖（日本食品化工公司制造等）。
[黄原胶]
本发明中使用的黄原胶，可以使用例如市售的黄原胶（San-Ei Gen F.F.I.,Inc.制造、CP Kelco公司制造等）。
这些海带提取物、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、葡萄糖、以及黄原胶，均以食品或者食品添加剂形式销售、利用，易于获得。
[抗菌辅助剂]
本发明的抗菌辅助剂，以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
本发明的抗菌辅助剂，优选其海带提取物为选自真海带（Laminaria japonica）、鬼海带（Laminaria diabolica）、利尻海带（Laminaria ochotensis）以及狭叶海带（Laminaria angustata）组成的组中的1种或者2种以上的海带提取物。
本发明的抗菌辅助剂，可以以液体形式使用，也可以干燥后以粉末抗菌辅助剂形式使用。通过粉末化，可以延长保存时间，制剂化时更易于操作。
可以按照常规方法进行粉末化，优选通过冷冻干燥或者喷雾干燥去除水分。此外，优选在干燥前混合盐类、糊精等。
本发明的抗菌辅助剂，添加到目前已知的其他抗菌剂中可以显著提高抗菌剂的抗菌效果。此外，在其他抗菌剂由多种成分组合（抗菌体系）而成时，也可以作为该抗菌剂的成分之一而发挥抗菌效果。
具体而言，本发明的抗菌辅助剂优选添加至乳过氧化物酶系统抗菌组合物中，优选用作乳过氧化物酶系统抗菌组合物的成分之一。并且，本发明的乳过氧化物酶系统抗菌组合物优选为乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、葡萄糖、以及本发明的抗菌辅助剂的组合。
另外，本发明的抗菌辅助剂也可以以抗菌作用增强用药物组合物、抗菌作用增强剂、以及抗菌作用增强用添加剂形式使用。
在本发明中，所谓“抗菌”包括阻止菌的增殖（抗菌），从对象物中除去菌、减少菌（除菌）、灭菌（杀菌）的所有含义。
因此，本发明的抗菌辅助剂也可以称为除菌辅助剂或者杀菌辅助剂。同样，本发明的抗菌组合物也可以称为除菌组合物或者杀菌组合物。
[乳过氧化物酶系统抗菌组合物]
乳过氧化物酶系统抗菌组合物，是指含有乳过氧化物酶和发挥乳过氧化物酶系统的抗菌体系的成分的组合的组合物。乳过氧化物酶系统抗菌组合物可以列举例如一般含有乳过氧化物酶、葡萄糖、葡糖氧化酶、硫氰酸的组合物。本发明的乳过氧化物酶系统抗菌组合物中使用本发明的抗菌辅助剂，不添加硫氰酸或者其盐。
本发明的抗菌辅助剂，可以用作本发明的乳过氧化物酶系统抗菌组合物的成分之一，也可以向一般的乳过氧化物酶系统抗菌组合物中添加而使用。本发明的抗菌辅助剂，无论以何种方式使用，都可以显著提高乳过氧化物酶系统抗菌组合物的抗菌效果。
将本发明的抗菌辅助剂添加到抗菌组合物中时，抗菌辅助剂与乳过氧化物酶系统抗菌组合物（在抗菌组合物的一部分是抗菌辅助剂时，不包括抗菌辅助剂）的比例优选为：相对于100质量份抗菌辅助剂，乳过氧化物酶系统抗菌组合物为30~3000质量份。
另外，添加了本发明的抗菌辅助剂的乳过氧化物酶系统抗菌组合物，也可以称为本发明的抗菌组合物。
[抗菌组合物]
本发明第二方式的抗菌组合物，包括本发明的抗菌辅助剂和乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖。
本发明的抗菌组合物对金黄色葡萄球菌有效，因此可以在可能引起食物中毒的场所，例如细菌容易繁殖的厨房水槽、洗面台、浴室的浴槽和地板、厕所的地板和便器、阳台等位置散布使用。
本发明的抗菌组合物，由于其有效成分都是可以作为食品摄入的物质，因此安全性高，使用中没有特别限制。
本发明的抗菌组合物，由于其有效成分是海带提取物、乳蛋白质、酶以及糖类等被用于食品素材以及食品添加剂的物质，因此它具有对人体高安全性，通过日常经口摄取对金黄色葡萄球菌等有害细菌发挥抗菌效果的特征。
本发明的抗菌组合物，可以是本发明的抗菌辅助剂、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖的混合物，也可以含有除此以外的成分。
例如，本发明的抗菌组合物中，也可以含有乳汁中的有用蛋白质即乳铁蛋白、溶菌酶、免疫球蛋白、酪蛋白、α-乳清蛋白、β-乳球蛋白等和发挥益生菌作用的乳酸菌等。
此外，在本发明的抗菌组合物中，抗菌辅助剂、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖以外的成分，可以根据使用形式适当的选择。例如，可以通过经口给药而适当使用，也可以根据已知的方法加工成片剂、胶囊剂、含片、糖浆、颗粒剂、散剂等。此外，除了可以对人和动物给药以外，也可以在细菌易于繁殖的场所、想要确保卫生状态的场所进行喷雾、以液体形式散布、以固态抗菌剂形式静置在平面和墙壁等。
本发明的抗菌组合物，例如可以使用药学允许的赋形剂等任意添加剂将作为有效成分的抗菌辅助剂、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、以及葡萄糖制剂化，从而制造。制剂化时，制剂中有效成分的含量通常是0.005~20质量%，优选0.05~12.5质量%。制剂化时，可以使用赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味矫臭剂、稀释剂、注射剂用溶剂等添加剂。
作为赋形剂，可以列举例如乳糖、白糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇等糖衍生物；玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉等淀粉衍生物；微晶纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙等纤维素衍生物；阿拉伯树胶；葡聚糖；普鲁兰多糖；轻质无水硅酸、合成硅酸铝、偏硅酸铝酸镁等硅酸盐衍生物；磷酸钙等磷酸盐衍生物；碳酸钙等碳酸盐衍生物；硫酸钙等硫酸盐衍生物等，作为结合剂，可以列举例如上述赋形剂以及明胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等，作为崩解剂可以列举例如上述赋形剂以及交联羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮等经过化学改性的淀粉或者纤维素衍生物等，作为润滑剂可以列举例如滑石粉；硬脂酸；硬脂酸钙、硬脂酸镁等硬脂酸金属盐；胶态二氧化硅；硅酸铝镁、鲸蜡等蜡类；硼酸；二醇；富马酸、已二酸等羧酸类；安息香酸钠等羧酸钠盐；硫酸钠等硫酸盐类；亮氨酸；月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁等月桂基硫酸盐；无水硅酸、硅酸水合物等硅酸类；淀粉衍生物等，作为稳定剂可以列举例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等对羟基苯甲酸酯类；氯丁醇、苯甲醇、苯乙醇等醇类；苯扎氯铵；乙酸酐；山梨酸等，作为矫味矫臭剂可以列举例如甜味剂、酸味剂、香料等，作为注射剂用溶剂，可以列举例如水、乙醇、丙三醇等。
此外，本发明的抗菌组合物，也可以配合在饮食品中进行给与。给药量以及给药次数，根据作用效果、给药方法、治疗时间、年龄、体重等有所不同，成人单日给药量，通常可以选择10mg~10g的范围，可以适当选择给药次数和给药时间。
[含有黄原胶的抗菌组合物]
本发明第三方式的抗菌组合物，是含有本发明第二方式的抗菌组合物和黄原胶的抗菌组合物。本发明第三方式的抗菌组合物，包括本发明的抗菌辅助剂、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、葡萄糖以及黄原胶。
抗菌组合物通过含有黄原胶可以带有稠度，因此作为稠度赋予剂（增稠剂）添加至液状食品、液状药物品、液状饲料中时，可以对其赋予稠度。
例如，将含有黄原胶的抗菌组合物添加到液状食品中，液状食品的物性变为弱凝胶状，具有使吞咽困难者、高龄者易于下咽的效果。
并且，含有黄原胶的抗菌组合物，可以特别适用于饮食引起细菌感染风险高的吞咽困难者、高龄者。
摄入添加了含有黄原胶的抗菌组合物的液状食品时，具有稠度性的液体遍及口腔，易于浸透到牙齿的硬组织和牙龈组织之间。此外，由于在口腔内的停留时间变长，能够有效地维持和促进口腔卫生。
因此，在口腔内使用本发明的抗菌组合物时，特别优选抗菌组合物中含有黄原胶。
在含有黄原胶的抗菌组合物中，黄原胶以外的抗菌组合物与黄原胶的比例优选为：相对于100质量份除黄原胶以外的抗菌组合物，黄原胶为30~3000质量份。
此外，将含有黄原胶的本发明的抗菌组合物混合到液状食品时的混合比例优选为：相对于100质量份液状食品，含有黄原胶的抗菌组合物为1.5~3.0质量份。
[饮食品]
本发明第四方式是含有本发明第二方式的抗菌组合物的饮食品。本发明第四方式也可以是含有本发明第三方式的抗菌组合物的饮食品。
作为含有本发明的抗菌组合物的饮食品的形态，可以列举例如清凉饮料、乳饮料等或者这些饮料的浓缩原液以及调整用粉末；加工乳、发酵乳等乳制品；经肠营养食品及其调整用粉末、稠度调整饮料、稠度调整食品；功能性食品等，更进一步，可以列举碳酸饮料、营养饮料、果实饮料等饮料（包括这些饮料的浓缩原液以及调整用粉末）；冰激凌、冰果子露、刨冰等冷饮；荞麦面、乌冬面、粉丝、饺子皮、烧卖皮、中国面条、速食面等面类；糖、口香糖、糖果、口香糖、巧克力、定型糖果、零食、饼干、果冻、果酱、奶油、烤制甜点等点心类；鱼糕、火腿、香肠等水产、畜产加工食品；色拉油、天妇罗油、人造黄油、蛋黄酱、起酥油（shortening）、生奶油、沙拉酱等油脂以及油脂加工食品；酱油、调料汁等调味料；汤、炖菜、色拉、菜肴、腌菜、面包等。这样的饮食品，例如可以通过在本发明的口腔用杀菌剂或者食品添加剂（包括粉末或者其水溶液（酱汁等）等形态）中配合糊精、淀粉等糖类；明胶、大豆蛋白、玉米蛋白等蛋白质；丙氨酸、谷氨酰胺、异亮氨酸等氨基酸类；纤维素、阿拉伯树胶等多糖类；大豆油、中链脂肪酸甘油三酯等油脂类等而制造。
以下列举实施例，对本发明进行详细说明。本发明不限定于以下的实施例。
[实施例1]
本发明的抗菌辅助剂的制备
（1）海带提取物的制备
将市售的干燥真海带（八社公司制造）4g添加到装有纯化水400ml的烧杯中，室温下浸渍2小时。接下来，将装有真海带的烧杯在约95℃条件下加热30分钟。更进一步，将烧杯自然冷却后，使用孔径0.45μm的过滤器（advantech公司制造）除菌，得到海带提取物350ml。
在本实施例中，将海带样品4g添加到纯化水400ml中制备海带提取物，这是从干燥海带获得汤汁用于烹调时的浓度的约2倍。
（2）海带提取物的分级
取出海带提取物12ml，使用截留分子量5000的离心分离用超滤膜组件（Millipore公司制造），在2000rpm（960×g）、20分钟的条件下离心分离，将分子量超过5000的级分分离，得到由分子量为5000以下的级分组成的透过液（本发明的抗菌辅助剂）。
[实施例2]
将市售的干燥真海带（纳屋商店公司制造）1kg添加到装有纯化水20L的不锈钢容器中，室温下浸渍2小时后，在约95℃下加热30分钟，得到海带提取物15L。接下来，使用截留分子量为4000的超滤膜组件（旭化成公司制造）对上述海带提取物进行处理，得到由分子量为4000以下的级分组成的透过液13L。向上述透过液中添加作为赋形剂的糊精（东亚化成公司制造）450g，溶解，使用冷冻干燥机进行处理，制造出本发明的粉末抗菌辅助剂500g。
在本实施例中，从1kg干燥真海带中得到本发明的有效成分50g（干燥质量）。并且，本实施例的粉末抗菌辅助剂，在500g（干燥质量）中含有50g（干燥质量）有效成分，因此，上述粉末抗菌辅助剂的有效成分的浓度为10质量百分比。
[实施例3]
将以下组成的抗菌组合物原料粉末进行混合，得到抗菌组合物粉末117.6g。分别量取0.375g，添加到容量为250ml的塑料容器中，制造出粉末状抗菌组合物300个。
这样的装有抗菌组合物的容器，在使用时加250ml水将粉末溶解，可以作为液状抗菌组合物饮用。
Figure BDA00002281628200191
接下来，通过试验例，对本发明的抗菌辅助剂的作用进行详细说明。
[试验例1]
在本试验中，确认了本发明的抗菌辅助剂在乳过氧化物酶系统抗菌组合物中作为抗菌辅助剂是有效的。
（1）试样的制备
作为试验试样，使用在实施例1中制造的海带提取物的透过液（海带提取物低分子级分）。
另一方面，作为对照试样，直接使用实施例1的未分级的海带提取物。
（2）菌液的制备
使用1%细菌蛋白胨培养基对金黄色葡萄球菌[金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）JCM2151，来自理化学研究所]培养一晚。使用离心分离机（日立制作所公司制造），在3000rpm（2150×g）、10分钟、4℃条件下，对上述培养液20ml离心分离后，使用磷酸盐缓冲生理盐水10ml将残渣悬浊而制备菌液。
（3）试验方法
向容量5ml的管中加入试验试样1.0ml、氯化钠（国产化学公司制造）的3.4%水溶液0.5ml、乳过氧化物酶（Biopol公司制造）的1mg/ml水溶液20μl、葡萄糖（和光纯药公司制造）的1%水溶液30μl、纯化水403.3μl、以及上述（2）的菌液20μl，搅拌。
接下来，添加葡糖氧化酶（新日本化学工业公司制造）的10mg/ml水溶液26.7μl，搅拌，室温下保温5分钟后，用磷酸盐缓冲生理盐水以10倍的倍率逐级稀释。分别将上述稀释液20μl涂布到标准琼脂培养基，在37℃的培养箱中培养一晚后，测定琼脂培养基上形成的菌落数。根据检出的细菌菌落数，求得相当于上述试验混合液1ml的活菌数的对数值（log10cfu/ml）。
按照同样的方法，使用1.0ml对照试样进行试验。
更进一步，分别对试验试样、对照试样，除了不添加葡糖氧化酶以外，在与上述试验例完全相同的体系中进行同样的试验。
（4）试验结果
本试验的结果如表1所示。
在使用试验试样（真海带提取物的低分子级分）的体系中，试验混合液中的金黄色葡萄球菌的活菌数在检测限以下。另一方面，在使用对照试样（真海带提取物）的体系中，试验混合液中的金黄色葡萄球菌的活菌数几乎没有变化。此外，在未添加葡糖氧化酶的体系中，使用试验试样、对照试样的体系中金黄色葡萄球菌的活菌数都几乎没有变化。
根据上述结果，证明了海带提取物低分子级分、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、葡萄糖的组合发挥出显著的抗菌效果。并且，证明海带提取物不是作为抗菌剂，而是通过添加到其他成分中作为发挥抗菌效果的抗菌辅助剂起作用。
另外，证明了令人惊讶的下述效果：以往为了使乳过氧化物酶系统的抗菌体系发挥作用必须要有一定浓度以上的硫氰酸，但是在使用本试验的试验试样的组合中尽管完全没有应用该硫氰酸，也依然发挥出抗菌效果。
并且，证明海带提取物低分子级分具有作为乳过氧化物酶系统抗菌组合物的有效成分而发挥抗菌作用的显著效果。
此外，发现海带提取物中分子量超过5000的高分子级分中存在抑制物质，但是，去除该抑制物质则可以用于乳过氧化物酶的抗菌体系。
[表1]
Figure BDA00002281628200211
N.D.：检测限以下（<2.70）
初始菌数：约6.0log10cfu/ml
[试验例2]
在本试验中，研究可以作为本发明的抗菌辅助剂的原料使用的海带品种。
（1）试样的制备
使用市售的4个品种的干燥海带（真海带、鬼海带、利尻海带、以及狭叶海带）各4g，按照实施例1的方法，制备了海带提取物低分子级分。
对各海带品种，分别用不同市售品的3个样品制备了试样。
（2）菌液的制备
按照与试验例1（2）相同的方法，制备金黄色葡萄球菌的菌液。
（3）试验方法
按照与试验例1（3）相同的方法进行试验。
（4）试验结果
本试验的结果如表2所示。试验时分别对各种样品进行两次试验。
其结果证明了：通过试验的所有品种的海带制备的海带提取物低分子级分都使金黄色葡萄球菌的活菌数为检测限以下，表现出强杀菌活性。
根据上述结果，证明作为本发明的抗菌辅助剂的原料，真海带、鬼海带、利尻海带、狭叶海带的任何一种都是合适的。
[表2]
N.D.：检测限以下（<2.70）
初始菌数：约6.0log10cfu/ml
[试验例3]
本试验的目的是研究本发明的抗菌组合物的抗菌辅助剂的用量依赖性。
（1）试样的制备
使用实施例1中制备的真海带提取物低分子级分（以下，简称本发明的抗菌辅助剂）的试样，将其稀释倍率设为1倍。将该试样用纯化水分别以2倍的倍率逐级稀释，做成直至128倍的2倍逐级稀释系列。
（2）菌液的制备
按照与试验例1（2）相同的方法，制备了金黄色葡萄球菌的菌液。
（3）试验方法
除了将实施例1中制备的抗菌辅助剂及其2倍逐级稀释系列添加到试验混合液以外，采取与试验例1相同的方法进行试验。
（4）试验结果
本试验的结果如表3所示。
抗菌辅助剂直至稀释至32倍为止均使金黄色葡萄球菌的菌数为检测限以下，即使稀释64倍，金黄色葡萄球菌也降低至初始菌数的1/100以下。
根据本试验的结果，证明抗菌辅助剂的浓度与抗菌辅助效果存在相关性，本发明的抗菌辅助剂对乳过氧化物酶系统的抗菌作用的辅助作用存在用量依赖性。
[表3]
Figure BDA00002281628200231
N.D.：检测限以下（<2.70）
初始菌数：约6.0log10cfu/ml
[试验例4]
本试验的目的是确认含有黄原胶的本发明的抗菌组合物，尽管添加了黄原胶仍然发挥出显著的抗菌活性。
（1）试样的制备
按照常规方法制造下述组成的抗菌组合物，制备含有黄原胶的抗菌组合物（本发明第三方式的抗菌组合物），作为本发明品1。
另一方面，制备除了不含黄原胶以外与本发明品具有相同配方的抗菌组合物，作为本发明品2。按照本发明品2的质量与从本发明品中去除黄原胶的质量后的质量相同的方式进行制备。更进一步，作为对照品1，使用了没有添加实施例2中制造的粉末抗菌辅助剂（海带提取物）、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶、以及葡萄糖的市售的增稠剂组合物（森永乳液公司制造）。
（2）菌液的制备
按照与试验例1（2）相同的方法，制备了金黄色葡萄球菌的菌液。
（3）试验方法
向容量50ml的管中添加（1）的本发明的抗菌组合物0.5g（本发明品1）。同样准备向容量50ml的管中添加0.5g对照品1（本发明品2）的样品，以及向另外的容量50ml的管中添加市售的增稠剂组合物（对照品）0.5g的样品。接下来，向这些软管中添加上述菌液0.3ml与0.85%氯化钠水溶液30ml的混合液，充分进行涡流搅拌。在室温下保温5分钟后，用磷酸盐缓冲生理盐水分别以10倍的倍率逐级稀释。分别将20μl的上述稀释液涂布到标准琼脂培养基，在37℃的培养箱中培养一晚后，测定琼脂培养基上形成的菌落数。根据检出的细菌菌落数，求得相当于上述混合液1ml的活菌数的对数值（log10cfu/ml）。
（4）试验结果
本试验的结果如表4所示。
如本发明品1以及2的结果所示，无论是否含有黄原胶，本发明的抗菌组合物都使金黄色葡萄球菌的活菌数低于检测限以下，表现出强抗菌活性。另一方面，对照品没有对金黄色葡萄球菌的菌数产生影响。
因此，证明本发明的含有黄原胶的抗菌组合物发挥出强抗菌活性。
另外，本试验中使用的粉末抗菌辅助剂是将海带提取物的分子量为4000以下的成分进行粉末化得到的。因此，证明本发明的抗菌辅助剂也可以使用海带提取物的分子量为4000以下的成分。
[表4]
 样品   金黄色葡萄球菌活菌数(log10cfu/ml)
 本发明品1   N.D.
 本发明品2   N.D.
 对照品1   6.2
N.D.：检测限以下（<2.70）
初始菌数：约6.0log10cfu/ml
产业上的可利用性
含有本发明的抗菌辅助剂、乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖的抗菌组合物可以作为使用海带提取物的具有高安全性的抗菌组合物广泛应用。
此外，本发明的抗菌组合物可以以饮食品、药物、饲料形式广泛应用。

Claims (9)

1.一种抗菌辅助剂，其以从海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
2.根据权利要求1所述的抗菌辅助剂，其中，抗菌辅助剂用于乳过氧化物酶系统抗菌组合物。
3.根据权利要求1或2所述的抗菌辅助剂，其中，海带提取物是选自真海带（Laminaria japonica）、鬼海带（Laminariadiabolica）、利尻海带（Laminaria ochotensis）、狭叶海带（Laminaria angustata）组成的组中的1种或多种海带提取物。
4.一种抗菌组合物，其含有权利要求1~3的任一项所述的抗菌辅助剂和乳过氧化物酶、葡糖氧化酶以及葡萄糖。
5.根据权利要求4所述的抗菌组合物，其中，抗菌组合物中进一步含有黄原胶。
6.一种饮食品，其含有权利要求4或5所述的抗菌组合物。
7.一种制造乳过氧化物酶系统用添加剂的方法，其包括：
利用溶剂进行提取，从海带获得海带提取物的工序、和
从海带提取物中分级分子量为5000以下的级分的工序。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，溶剂为水或者水溶液。
9.一种乳过氧化物酶系统用添加剂，其以利用权利要求7或8所述的方法制造的、由海带提取物获得的分子量为5000以下的级分为有效成分。
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