JP2001204400A

JP2001204400A - メナキノン−７生産

Info

Publication number: JP2001204400A
Application number: JP2000046595A
Authority: JP
Inventors: Hiroyuki Sumi; 洋行須見
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2000-01-19
Filing date: 2000-01-19
Publication date: 2001-07-31

Abstract

(57)【要約】【課題】この発明は新規のメナキノン−７の取得法、
及び該ビタミン剤を骨粗鬆症などの予防食品に応用しよ
うとするものである。【解決手段】麦成分を主原料とする無菌化培養基質に
納豆菌を添加してなる発酵物、及びそれを乾燥、粉末化
してなるメナキノン−７高含量食品、あるいは発酵物か
ら水、有機溶媒などの抽出液で抽出することを特徴とす
るメナキノン−７剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は納豆菌で麦成分を主
原料としたものを発酵させたものをメナキノン−７高含
量食品として利用する、あるいはさらに水抽出、有機溶
媒処理などを組み合わせた方法で精製するビタミン剤に
関する。今日、骨粗鬆症などカルシウム結合性タンパク
質の低下による病気予防にビタミンＫ、特にビタミンＫ
_２であるメナキノンタイプの必要性が報告されている
が、食品由来の本物質はそれを非常に安価に調製でき、
食べて安全性が高く、また得られたものは熱や光に対す
る安定性もよく、予防食品としての利用価値が高いと考
えられる。

【０００２】

【従来の技術】これまで、食品に用いることの可能なメ
ナキノン−７の生産としては、納豆にその含量の高いこ
とから、納豆あるいは大豆成分を主原料とする納豆菌培
養液の油成分画から得る方法があった（磯部ら：特開平
８−７３３９６）。しかし、培養基質としてはいずれも
大豆タンパクあるいは豆腐などのカス（オカラ）（荒木
ら：特開平８−９９１６）、そして大豆煮汁（荒木ら：
特開平８−１９３７８；特開平１０−２９５３９３）を
主原料に用いたものであった。他の穀類としては、タン
ク培養で糖原料としてコーンスチープリカーやフスマな
どが使われていたくらいで、大麦、小麦などの麦類を主
要な培養基質として納豆菌発酵でメナキノン−７が高生
産できることは全く知られていなかった。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】一般の大豆成分の発酵
では得られない高含量のメナキノン−７を含有食品とし
て取得する。このものは安価、安定で、食べて安全であ
るがゆえに、そのまま多くの加工食品、健康食品への応
用が期待でき、また医薬としてのメナキノン−７製剤の
原料としても有望である。

【０００４】

【課題を解決するための手段】我々は、食品を中心に天
然素材中に種々の生理活性物質を検索することに鋭意努
力し、日本の伝統的発酵食品である納豆中に血栓溶解酵
素であるナットウキナーゼを発見し、その取得方法ある
いは酵素化学的性質について報告してきた（須見ら、機
能性食品素材、食品由来の生理活性物質における研究と
開発、ｐ．８８、工業技術会、１９８９）。また、納豆
菌が生産する抗菌物質（須見、でん粉と食品、２２：９
−１１、１９９７；ＢＩＯＩＮＤＵＳＴＲＹ編、新し
い食品素材と機能、ｐ．１９０−１９６、ＣＭＣ、東
京、１９９７；須見、大杉、農化、７３：１２８９−１
２９１、１９９９）、ＳＯＤなどの活性酸素消去系酵素
（須見ら、醸協、９４：１０１６−１０１８、１９９
９）についても分析してきた。納豆あるいは納豆菌発酵
物中のメナキノン−７に関しても、最近その測定方法を
確立し（須見、家政、５０：３０９−３１２、１９９
９）、オカラ発酵で生産できること（須見ら、農化、７
３：５９９−６０４、１９９９）などを報告してきた。
また緑豆、小豆からハトムギまで、大豆以外の各種穀類
の納豆菌による発酵の基礎研究として主にナットウキナ
ーゼの分析（須見ら、岡山県立大学保健福祉紀要、３：
１−４、１９９６；農化、７３：１１８７−１１９０、
１９９９）を行うなど、その穀類発酵の経験は深い。こ
のように常に対象として食品由来のものを選んだのは、
新素材として長年摂取されても安全性に問題が少ないと
考えたからである。本発明は、そうした研究の過程で発
見するに至ったメナキノン−７生産に関するものであ
る。

【０００５】

【発明の実施の形態】次に本発明を実施例にて詳細に説
明する。

【０００６】第１例５００ｍｌの三角コルベンに岡山市内で購入した９種類
の穀類のミキサー粉砕したものを蒸留水と混ぜて、３％
の濃度、３００ｍｌになるよう加え、綿栓をした後、オ
ートクレーブで１２０℃、１５分間滅菌処理した。冷却
後、これらにクリーンベンチ内で納豆菌としてスラント
培養した宮城野菌（宮城野納豆製造所、仙台）を各々一
白金耳接種し、３７℃、３日間、１００ｒｐｍで振盪培
養した。６，０００ｒｐｍ、１０分間遠心分離し、得ら
れた培養液中のメナキノン−７濃度（ＨＰＬＣ法：須
見、家政、５０：３０９−３１２、１９９９）及び血栓
溶解酵素であるナットウキナーゼ活性（フィブリン平板
法：Ｓｕｍｉｅｔａｌ．，Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉ
ａ，４３：１１１０−１１１１，１９８７）を測定した
結果が図１である。丸麦、オーツ麦を基質にしたものに
は、大豆、緑豆を基質としたもの以上の非常に高いメナ
キノン−７活性の含まれていることが分かる。また、麦
類の発酵で得られたものを凍結乾燥したものは１００
℃、３０分の熱処理、あるいは遮光をしない状態で、室
内に３ヶ月間そのまま放置しても、メナキノン−７含量
の９０％以上が保持されていることが確認された。しか
し、麦類発酵物中には血栓溶解酵素ナットウキナーゼの
活性は認められなかった。

【０００７】第２例小麦（プロフーズ、岡山市購入）を水道水でよく洗浄、
室温で１日間浸漬後、その湿重量に対して１％量になる
ようにグリセロールを加え、それを１２０℃、２０分間
蒸煮滅菌した。これを１００×１４５ｃｍのステンレス
製トレイの中に厚さ約３ｃｍになるよう拡げ、このもの
に成瀬菌（成瀬醗酵化学研究所、東京）を滅菌水に懸濁
したものを１０^７個／ｍｌになるように添加した後、発
酵ムロに入れ、表１のような温度条件で発酵させた。こ
のものの凍結乾燥粉末をソックスレー抽出装置でヘキサ
ン抽出した油分画に含まれるメナキノン−７量を第１例
と同様に分析した結果が図２のＨＰＬＣパターンであ
る。計算上、発酵物の凍結乾燥粉末１００ｇ中には２．
３ｍｇ以上のメナキノン−７が含まれることが分かっ
た。なお、納豆菌で処理しないで同様の操作を行って
も、得られた凍結乾燥粉末には同条件下で分析してもメ
ナキノン−７は全く検出されなかった。その他、目黒菌
（目黒研究所、大阪）を用いて、３０℃及び５５℃で、
１週間、同様の発酵実験を行った結果、凍結乾燥粉末１
００ｇ中には各々３．７ｍｇ及び５．８ｍｇ以上のメナ
キノン−７が検出された。これらの含量は市販納豆での
分析値（科学技術庁編、五訂、日本食品成分表、ｐ．５
３、医歯薬出版、東京、１９９７で８７０μｇ／１００
ｇ）に劣らない多いものである。

【表１】

【０００８】第３例小麦５００ｇを水道水に１日間浸漬すると７８５ｇにな
った。これを１２１℃のオートクレーブ処理して滅菌し
たものをホーローびきのトレイ中に拡げ、クリーンベン
チ内で９×１０^１０個／ｇの目黒菌（目黒研究所、大
阪）を０．５ｇ量添加、４０℃で３日間発酵させた。真
空熱乾燥後、粉末化したものは大豆発酵物（一般の納
豆）のような臭いはなく、香ばしい良い香りで、そのメ
ナキノン−７の含量は第１例と同様のＨＰＬＣ法で１０
０ｇ当たり２．１ｍｇ以上であった。これを小麦粉（強
力＋中力１：１）に対して３割量加え、さらに２％量の
生イースト、砂糖３％、その他バター、食塩を少量加え
て発酵させた後、１８０℃で焙焼してできたビタミン高
含量パンは大変美味であった。なお、パンを焼くことで
メナキノン−７含量が低下するということはなかった。

【０００９】

【発明の効果】本発明によれば、安価、安定で、食べた
り飲んで安全なメナキノン−７（ビタミンＫ）が提供で
きる。

【図面の簡単な説明】

【図１】各種穀類を基質として、納豆菌で発酵した場合
のメナキノン−７及びナットウキナーゼ含量を示す。ナ
ットウキナーゼ活性は試料３０μｌが３７℃、１８時間
のインキュベイションで溶解する面積（ｆｉｂｒｉｎｏ
ｌｙｓｉｓ，ｍｍ^２）で表示。

【図２】発酵小麦が持つメナキノン−７のＨＰＬＣパタ
ーン。Ｒｔ＝約１７分がメナキノン−７ピークである。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】麦成分を主原料とする無菌化培養基質に
納豆菌を添加してなる発酵物。
【請求項２】請求項１記載の発酵物から水抽出、ある
いは適当な極性有機溶媒処理、限外濾過処理、吸着クロ
マトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル
濾過などの操作を一種類以上組み合わせて精製するメナ
キノン−７の取得法。
【請求項３】請求項１記載の発酵物又は請求項２記載
の方法で得られたメナキノン−７と他の原料を用いた食
品。