KR101760174B1 - 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 우엉을 원료로 하여 세절한 다음 건조하고, 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 잡균을 멸균하는 제1단계; 버섯균주를 진탕 배양기를 통하여 배양하여 액상발효미생물을 제조하는 제2단계; 상기 제1단계의 우엉을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 1차 생물반응을 거쳐 1차 발효물을 생성하는 제3단계; 상기 제3단계의 1차 발효물을 열풍 건조기의 온도 60~80℃를 유지하는 조건 하에서 1~5시간 건조하는 제4단계; 상기 제4단계의 1차 발효물을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 2차 생물반응을 거쳐 2차 발효물을 생성하는 제5단계; 및 상기 제5단계의 2차 발효물을 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 액상발효미생물을 멸균하여 발효산물을 생성하는 제6단계;를 포함하여 이루어지되, 상기 제2단계는 발효미생물인 상황버섯(Phrllinus linteus, KCTC6190), 자흑색 영지버섯(Ganoderma neohaponicum, KACC51548), 운지버섯(Coriolus versicolor, KACC52347) 균주를 배양액 ml당 개체수가 9⁺⁴∼9⁺⁹의 개체수가 되도록 배양하여 제조하고, 상기 제3단계는 우엉에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 1차 발효물을 생성하고, 상기 제5단계는 1차 발효물에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 2차 발효물을 생성하는 것을 특징으로 한다.
이에 따라 본 발명은, 우엉을 버섯균주를 이용하여 1ㆍ2차에 걸친 다중발효를 통한 생물공정을 거쳐 발효산물을 취득하여 제형의 어려운 부분을 개선함에 따라, 식품원료를 비롯하여 화장품원료, 음용원료, 기능성식품 원료 및 의약 외용제 원료 등 활용할 수 있고, 우엉에 함유된 이눌린(Inulin)과 악티게닌(Arctigenin)의 유효성분이 온전하게 보존되어 산화와 염증에 강력한 저항력과 개선하는 능력으로 인하여 건강한 신체를 유지시켜 줄 수 있고, 저비용으로 고부가성이 부여된 발효산물을 대량으로 양산 가능한 효과가 있다.

Description

버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법{Method for preparing fermented extract of Arctium lappa L by using of mushroom strains}

본 발명은 버섯균주를 이용하여 다중 발효 생물공정을 통해 우엉 발효산물을 제조하는 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 우엉을 버섯균주를 이용하여 1ㆍ2차에 걸친 다중발효를 통한 생물공정을 거쳐 발효산물을 취득하여 제형의 어려운 부분을 개선함에 따라, 식품원료를 비롯하여 화장품원료, 음용원료, 기능성식품 원료 및 의약 외용제 원료 등 활용할 수 있고, 저비용으로 고부가성이 부여된 발효산물을 대량으로 양산 가능한 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

최근, 인구의 고령화, 서구화된 생활 및 식습관으로 만성질환의 발생이 증가 하고 있다. 특히 당뇨병은 한국인의 사망 원인 중 4위에 해당하고, 당뇨병은 국가의 경제적 주축인 30대, 40대의 발병률이 높게 나타났다. 이는 개인의 건강문제 뿐 아니라 국가의 사회적, 경제적 손실이 따르고 심각한 사회적 문제로 대두되고 있다.

한편, 우엉(Arctium lappa L.)은 오래전부터 우리나라에서 신진대사를 좋게 하는 음식물로 취급되었으며 우엉의 잎, 종자, 뿌리를 식용 및 약용으로 널리 사용되고 있는 여러해살이 식물이다. 우엉은 독성이 거의 없어 우리나라 뿐 아니라 일본과 중국 동북아시아에서도 널리 사용되고 있다.

우엉은 민간요법으로 이뇨, 발한, 해독, 해열작용에 탁월하며, 특히 우엉에 함유된 이눌린(Inulin)이 신장 기능을 돕는 작용을 하여 예부터 이뇨제로 사용되어 왔으며, 우엉에 포함된 타닌(Tannin)은 여드름, 머리의 발진 등 체내에 노폐물, 독소가 쌓이는 질병에 해독, 발한작용의 효과를 나타낸다. 또 우엉의 철분을 많이 함유하고 있어 조혈작용, 빈혈을 방지할 수 있다. 그 외에도 변비, 강장, 강정 등에 여러 효능이 있다. 또한 고혈압, 통풍, 심혈관질환, 간염에 효과가 있으며 항돌연변이능, 항염증능, 항균능, 항산화능, 간 보호능 효능을 가진 물질들을 함유하고 있다. 악티게닌(Arctigenin)은 동물실험 결과 기억력장애를 효과적으로 개선할 수 있으며, 특히 악성종양인 췌장암에 효과적으로, 이에 많은 연구자들이 우엉에 대한 연구를 광범위하게 하고 있다.

이와 관련된 선행기술로, 한국 등록특허공보 제10-0628429호의 "우엉 뿌리를 유효성분으로 함유하는 지혈용 조성물", 한국 등록특허공보 제10-1298568호의 "우엉추출물을 포함하는 항비만용 식품조성물", 한국 등록특허공보 제10-1488208호의 "악티게닌 고함유 우엉열매 엑기스 및 그 제조방법"등이 알려져 있다.

그러나 상기한 선행기술문헌은 우엉에 버섯균주를 이용하여 발효과정을 거쳐 우엉 발효산물 및 미생물 2차대사산물 조성물에 대한 특허등록 및 공개중인 문서는 존재하지 않을 뿐만 아니라, 특히 우엉을 여러 가지 형태로 제형의 변화가 어려워 대량으로 가공하여 양산하기에 곤란하므로 이를 활용하는데 있어 그 한계성을 보이고 있다.

한국 등록특허공보 제10-0628429호의 "우엉 뿌리를 유효성분으로 함유하는 지혈용 조성물" (등록일자: 2006. 09. 19.) 한국 등록특허공보 제10-1298568호 "우엉추출물을 포함하는 항비만용 식품조성물" (등록일자: 2013. 08. 14.) 한국 등록특허공보 제10-1488208호 "악티게닌 고함유 우엉열매 엑기스 및 그 제조방법" (등록일자: 2015. 01. 26.)

상기와 같은 종래의 문제점들을 근본적으로 개선하기 위한 본 발명의 목적은, 우엉을 버섯균주를 이용하여 1ㆍ2차에 걸친 다중발효를 통한 생물공정을 거쳐 발효산물을 취득하여 제형의 어려운 부분을 개선함에 따라, 식품원료를 비롯하여 화장품원료, 음용원료, 기능성식품 원료 및 의약 외용제 원료 등 활용할 수 있고, 저비용으로 고부가성이 부여된 발효산물을 대량으로 양산 가능한 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법을 제공하려는데 있다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명은, 우엉을 원료로 하여 세절한 다음 건조하고, 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 잡균을 멸균하는 제1단계; 버섯균주를 진탕 배양기를 통하여 배양하여 액상발효미생물을 제조하는 제2단계; 상기 제1단계의 우엉을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 1차 생물반응을 거쳐 1차 발효물을 생성하는 제3단계; 상기 제3단계의 1차 발효물을 열풍 건조기의 온도 60~80℃를 유지하는 조건 하에서 1~5시간 건조하는 제4단계; 상기 제4단계의 1차 발효물을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 2차 생물반응을 거쳐 2차 발효물을 생성하는 제5단계; 및 상기 제5단계의 2차 발효물을 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 액상발효미생물을 멸균하여 발효산물을 생성하는 제6단계;를 포함하여 이루어지되, 상기 제2단계는 발효미생물인 상황버섯(Phrllinus linteus, KCTC6190), 자흑색 영지버섯(Ganoderma neohaponicum, KACC51548), 운지버섯(Coriolus versicolor, KACC52347) 균주를 배양액 ml당 개체수가 9⁺⁴∼9⁺⁹의 개체수가 되도록 배양하여 제조하고, 상기 제3단계는 우엉에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 1차 발효물을 생성하고, 상기 제5단계는 1차 발효물에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 2차 발효물을 생성하는 것을 특징으로 한다.

이때, 본 발명에 따르면 상기 제1단계는 세절기로 0.5~1cm 크기로 세절하고, 급속멸균장치를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~20분간 잡균을 멸균하는 것을 특징으로 한다.

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또한, 본 발명에 따르면 상기 제4단계는 1차 발효물을 열풍 건조기의 온도 60~80℃를 유지하는 조건 하에서 1~5시간 건조하는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명에 따르면 상기 제6단계는 2차 발효물을 급속멸균장치를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~30분간 생물반응시 투입된 액상발효미생물을 멸균하는 것을 특징으로 한다.

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한편, 이에 앞서 본 명세서 및 특허청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다. 따라서 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.

이상의 구성 및 작용에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 의한 제조방법을 통해 얻어진 우엉 발효산물은 우엉을 버섯균주를 이용하여 1ㆍ2차에 걸친 다중발효를 통한 생물공정을 거쳐 발효산물을 취득하여 제형의 어려운 부분을 개선함에 따라, 식품원료를 비롯하여 화장품원료, 음용원료, 기능성식품 원료 및 의약 외용제 원료 등 활용할 수 있고, 저비용으로 고부가성이 부여된 발효산물을 대량으로 양산 가능한 효과를 제공한다.

또한, 본 발명은 우엉에 함유된 이눌린(Inulin)과 악티게닌(Arctigenin)의 유효성분이 온전하게 보존되어 산화와 염증에 강력한 저항력과 개선하는 능력으로 인하여 건강한 신체를 유지시켜 줄 수 있는 효과를 제공한다.

도 1은 본 발명에 따른 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법을 순차적으로 나타내는 블록도.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 상세하게 설명한다.

본 발명은 우엉을 원료로 이용하여 우엉 발효산물을 제조하는 방법에 관련되며, 이를 간략하게 설명하면 세절, 건조, 멸균, 액상발효미생물 배양, 1차 발효, 건조, 2차 발효, 멸균을 거쳐 발효산물을 제조한다.

본 발명의 제1단계는 우엉을 원료로 하여 세절한 다음 건조하고, 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 잡균을 멸균한다. 제1단계는 원료를 세절 및 건조하는 단계로, 우엉을 원료로 하여 세절 및 건조한다. 이는 우엉은 세절한 다음 건조하며, 품질 안정과 생산성 향상을 위한 각각의 단계는 전용의 자동화 설비를 도입하는 것이 좋다. 한편, 제1단계에서는 우엉은 자연 건조를 시행하지만, 필요에 따라 우엉은 건조시간이 많이 소요됨에 따라 급속 동결건조 과정을 시행하는 것도 가능하다할 것이다. 여기서, 우엉은 세척된 우엉을 제공하는 데, 세척된 우엉의 겉의 물기가 마른 상태로 제공된다.

이때, 본 발명에 의한 상기 제1단계는 세절기로 0.5~1cm 크기로 세절하고, 급속멸균장치를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~20분간 잡균을 멸균한다. 이는 원료, 즉 우엉을 세절기를 이용하여 0.5~1cm 크기로 세절한 다음 급속 동결건조 과정을 거친다. 이어서, 세절된 우엉에 함유되어 있는 잡균들을 멸균하여 원활한 생물공정을 위하여 급속멸균장치인 오토크레버(Autoclave)를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~20분 동안 멸균하여 잡균을 제거한다.

본 발명의 제2단계는 버섯균주를 진탕 배양기를 통하여 배양하여 액상발효미생물을 제조한다. 제2단계는 생물 반응에 필요한 액상발효미생물을 제조하는 단계로, 특히 액상발효미생물을 배양하기 위해서는 배양하기 위해서는 품질 안정과 생산성 향상을 위해 전용의 자동화 설비를 도입한다. 여기서 전용의 자동화 설비는 진탕 배양기를 통하여 버섯균주를 배양하여 액상발효미생물을 제조한다.

이때, 본 발명에 의한 제2단계는 발효미생물인 상황버섯(Phrllinus linteus, KCTC6190), 자흑색 영지버섯(Ganoderma neohaponicum, KACC51548), 운지버섯(Coriolus versicolor, KACC52347) 균주를 배양액 ml당 개체수가 9⁺⁴∼9⁺⁹의 개체수가 되도록 배양하여 제조한다. 이는 급속 멸균된 우엉을 발효하기 위해 발효미생물 중 유용성이 입증된 버섯균주를 배지에 접종 후, 진탕 배양기(shaking incubator)에서 ml당 개체수가 9⁺⁴∼9⁺⁹의 개체수가 되도록 대량으로 배양하여 액상발효미생물을 제조한다.

한편, 본 발명에 사용하고자 하는 발효미생물 중 버섯균주가 생성하는 2차대사산물에는 다른 균류에는 볼 수 없는 특징을 가지고 있다. 즉, 발효미생물인 상황버섯(Phrllinus linteus), 자흑색 영지버섯(Ganoderma neohaponicum), 운지버섯(Coriolus versicolor) 균주는 많은 대사산물을 가지고 있다. 이는 1차대사산물은 생물의 생존에 필수적인 물질로서 생리적 의의는 밝혀져 있으나 2차 대사산물의 의의는 아직 불명확하다. 외적에 대한 방어물질로서 항생물질로 연구가 되고 있으며, 생리활성에 대한 산물로 항 종양성 다당류, 항바이러스 물질, 항균성 물질, 효소저해제, 핵산관련물질, 아미노산 관련물질, 유기산, 식물 호르몬류, 그 외의 생리활성 물질로 펩타이드나 단백질계의 생리활성 물질들로 곤충, 선충, 점균 등에 작용하는 물질, 식물 생육저해물질, 비타민 B1 파쇄물질, 약리활성 물질 등 아직도 밝혀지지 않는 많은 부분들이라고 볼 수 있다. 한편, 액상발효 미생물로 사용되는 담자균류가 생성하는 2차 대사산물에는 다른 균류에서는 볼 수 없는 많은 대사산물을 가진다. 이들의 대사산물은 외적에 대한 방어 물질과 항생물질로 연구가 되고 있으며, 항종양성, 다당류, 항바이러스 물질, 항균성 물질, 아미노사 관련 물질, 효소저해제 , 약리 활성 물질 등 아직 밝혀지지 않은 많은 부분들을 가지고 있다.

본 발명의 제3단계는 상기 제1단계의 우엉을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 1차 생물반응을 거쳐 1차 발효물을 생성한다. 제3단계는 발효기 상에서 세절된 우엉과 액상발효미생물을 투입하여 1차 생물반응을 거쳐 1차 발효물을 취득하는 단계로, 품질 안정을 위해 해당 공정을 자동화한다. 여기서, 말하는 발효기는 는 무균시스템으로 되어 있고, 온습도가 자동으로 조정되어 우엉과 액상발효미생물들이 미생물의 증식과 발효가 동시에 이루어지는 인큐베이터를 말한다.

이때, 본 발명에 의한 상기 제3단계는 우엉에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 1차 발효물을 생성한다. 이는 1차 발효물을 생성하기 위해 발효기에 세절된 우엉과 액상발효미생물을 고루 잘 섞어주어 혼합물을 생성한다. 여기서 액상발효미생물은 수분율이 10~20%로 함유된 상태로 혼합한다. 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%가 자동으로 유지되는 조건 하에서 3~14일간 원활한 1차 생물반응을 거치면서 유용물질이 생성할 수 있도록 1차 발효물을 생성한다.

본 발명의 제4단계는 상기 제3단계의 1차 발효물을 열풍 건조기를 이용하여 건조한다. 제4단계는 1차 발효물을 건조하는 단계로, 특히 1차 발효물을 건조함에 있어 품질 안정을 위해 전용의 자동화 설비를 도입하는 것이 좋다.

이때, 본 발명에 의한 상기 제4단계는 1차 발효물을 열풍 건조기의 온도 60~80℃를 유지하는 조건 하에서 1~5시간 건조한다. 이는 1차 생물반응을 거친 1차 발효물을 열풍 건조기를 이용하여 건조하는데, 열풍 건조기의 온도 60~80℃가 자동으로 유지되는 조건 하에 1~5시간 건조한다.

본 발명의 제5단계는 상기 제4단계의 1차 발효물을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 2차 생물반응을 거쳐 2차 발효물을 생성한다. 제5단계는 발효기에서 1차 발효물과 액상발효미생물을 투입하여 2차 발효하는 단계로, 품질 안정을 위해 해당 공정을 자동화한다. 여기서, 말하는 발효기는 무균시스템으로 되어 있고, 온습도가 자동으로 조정되어 1차 발효물과 액상발효미생물들이 미생물의 증식과 발효가 동시에 이루어지는 인큐베이터를 말한다.

이때, 본 발명에 의한 제5단계는 1차 발효물에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 2차 발효물을 생성한다. 이는 상기 제3단계와 동일한 작업을 수행하는데, 즉 2차 발효물을 생성하기 위해 발효기에 1차 발효물과 액상발효미생물을 고루 잘 섞어주어 혼합물을 생성한다. 여기서 액상발효미생물은 수분율이 10~20%로 함유된 상태로 혼합한다. 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%가 자동으로 유지되는 조건 하에서 3~14일간 원활한 2차 생물반응을 거치면서 유용물질이 생성할 수 있도록 2차 발효물을 생성한다.

본 발명의 마지막 단계인 제6단계는 상기 제5단계의 2차 발효물을 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 액상발효미생물을 멸균하여 발효산물을 생성한다. 제6단계는 2차 발효물을 멸균 및 건조하는 단계로, 특히 2차 발효물을 멸균함에 있어 품질 안정과 생산성 향상을 위해 전용의 자동화 설비를 도입하는 것이 좋다.

이때, 본 발명에 의한 제6단계는 2차 발효물을 급속멸균장치를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~30분간 생물반응시 투입된 액상발효미생물을 멸균한다. 이는 2차 생물반응을 거친 2차 발효물을 급속멸균장치(Autoclave)로 70℃~121℃의 온도로 10~30분간 생물반응시 투입된 액상발효미생물, 상황버섯(Phrllinus linteus), 자흑색 영지버섯(Ganoderma neohaponicum), 운지버섯(Coriolus versicolor) 균주를 멸균 건조하여 우엉 발효산물을 생성한다.

한편, 통상적으로 급속 멸균이라 하면 121℃에서 10~30분간, 132℃에서 10~30분이 사용되고 있으나, 본 발명에서는 이보다 처리 온도가 70~121℃의 온도에서 시간이 긴 10~30분 동안 처리하여 효과적으로 액상발효미생물을 멸균 건조하게 된다.

이와 같이, 본 발명의 제조방법을 통해 제조된 우엉 발효산물은 용도에 있어서, 1, 2차에 걸친 생물반응, 즉 발효를 거듭함에 따라 우엉에 함유된 유효 물질의 분자의 사슬을 적은 단위로 끊어서 유효 성분이 더욱 효과적으로 흡수를 제공 가능하고, 다중 발효 생물공정을 거쳐 이눌린(Inulin), 악티게닌(Arctigenin), 타닌(Tannin), 철분이 함유된 우엉 발효산물을 이용한 식품원료를 비롯하여 화장품원료, 음용원료, 기능성식품 원료 및 의약 외용제 원료 등 다양한 원료로 활용함에 있어 제형 변화가 가능하여 저비용으로 고부가성 물질을 대량으로 양산 가능하다.

이하, 우엉 발효산물의 기능성 성분, 즉 발효우엉 에탄올 추출물의 DPPH 전자공여능, ABTS 전자공여능, 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량, NIH3T3 세포에 대한 발효우엉 에탄올 추출물의 세포생존율, 3T3-L1 지방세포 분화 시 발효 우엉 에탄올추출물의 지방 전환 분석을 하여 본 발명의 효과를 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

본 발명은 기재된 실시예에 한정되는 것은 아니고, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양하게 수정 및 변형할 수 있음은 이 기술의 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명하다. 따라서 그러한 변형예 또는 수정예들은 본 발명의 특허청구범위에 속한다 해야 할 것이다.

Claims (7)

1. 우엉을 원료로 하여 세절한 다음 건조하고, 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 잡균을 멸균하는 제1단계;
   버섯균주를 진탕 배양기를 통하여 배양하여 액상발효미생물을 제조하는 제2단계;
   상기 제1단계의 우엉을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 1차 생물반응을 거쳐 1차 발효물을 생성하는 제3단계;
   상기 제3단계의 1차 발효물을 열풍 건조기의 온도 60~80℃를 유지하는 조건 하에서 1~5시간 건조하는 제4단계;
   상기 제4단계의 1차 발효물을 발효기를 이용하여 액상발효미생물과 혼합하여 2차 생물반응을 거쳐 2차 발효물을 생성하는 제5단계; 및
   상기 제5단계의 2차 발효물을 급속멸균장치(Autoclave)를 이용하여 액상발효미생물을 멸균하여 발효산물을 생성하는 제6단계;를 포함하여 이루어지되,
   상기 제2단계는 발효미생물인 상황버섯(Phrllinus linteus, KCTC6190), 자흑색 영지버섯(Ganoderma neohaponicum, KACC51548), 운지버섯(Coriolus versicolor, KACC52347) 균주를 배양액 ml당 개체수가 9⁺⁴∼9⁺⁹의 개체수가 되도록 배양하여 제조하고,
   상기 제3단계는 우엉에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 1차 발효물을 생성하고,
   상기 제5단계는 1차 발효물에 액상발효미생물을 수분율 10~20%로 혼합하여 발효기의 온도 20~40℃와, 습도 45~80%를 유지하는 조건 하에서 3~14일간 발효하여 2차 발효물을 생성하는 것을 특징으로 하는 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법.
2. 제1항에 있어서,
   상기 제1단계는 세절기로 0.5~1cm 크기로 세절하고, 급속멸균장치를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~20분간 잡균을 멸균하는 것을 특징으로 하는 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법.
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 삭제
7. 제1항에 있어서,
   상기 제6단계는 2차 발효물을 급속멸균장치를 이용하여 70~121℃의 온도로 10~30분간 생물반응시 투입된 액상발효미생물을 멸균하는 것을 특징으로 하는 버섯균주를 이용한 우엉 발효산물을 제조하는 방법.

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