JP2000504416A

JP2000504416A - 合成テストステイン

Info

Publication number: JP2000504416A
Application number: JP9526561A
Authority: JP
Inventors: プファイファー，マルティン
Original assignee: ペレク・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング
Priority date: 1996-01-25
Filing date: 1997-01-24
Publication date: 2000-04-11
Anticipated expiration: 2017-01-24
Also published as: DE59703864D1; AU1595097A; JP3295941B2; EP0886778B1; WO1997027482A1; US6107097A; ES2160319T3; EP0886778A1; DE19602673A1; ATE202419T1

Abstract

(57)【要約】本発明は、機械清掃工程の効果的な検査のための合成テストソイルに関するものである。そのテストソイルは、繊維素及び／又は繊維素前駆体を包含する。そのテストソイルは凝固し、血液ステインに関する清掃工程の効果的な検査に使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】合成テストステイン本発明は、合成テストステインと、該ステインを調製するための繊維素接着剤の使用と、合成テストステイン調製用のキットと、清掃プロセスの有効性の検査方法と、該方法を実行するためのキットと、に関するものである。多くの医療用及び外科用の器具及び装置は、使用後に、清掃され、消毒され、殺菌されなければならない。清掃及び消毒は、従来、いわゆる自動洗浄消毒機により行われていた。これらの機械では、器具は、後に続く殺菌に備えて、清掃され、消毒され、乾燥される。医療品に関するドイツ法や他国の類似規定では、用いられる機械的清掃プロセスの有効性の検査が要求される。これは、一方では、自動洗浄消毒機の製造者がそれが市販されるようになる前に管理しなければならないプロセスの型式認定を包含する。他方では、使用者は、定期的に機械の清掃能力を検査しなければならない。清掃能力を検査するために、限定されたテストステインを備えたいわゆるテストサンプルが要求される。医療用及び外科用の器具及び装置において最も扱いにくいステインであって、最も除去しにくいものは、普通は、凝固した血液である。それ故、従来技術では、製造者によって管理される型式認定は、しばしば、テストステインとして新鮮な人血を用いて行われている。保存血液は非凝固剤の添加によって凝固が減じられているので、新鮮な血液が要求される。しかしながら、使用者にとっては、清掃能力の定期的検査のために新鮮な人血を使用することは実行可能なことではない。それ故、従来技術（確立された従来使用）は、セモリナ、卵黄、でんぷん、小麦粉含有ステインのような種々のテストステインを提案している。これら全てのテストステインの特性は血液のそれとは著しく異なっているので、血液ステインに関する清掃プロセスの有効性にて得ることのできる証拠は、存在せず、又は不正確である。本発明の目的は、扱いやすく、且つ、清掃プロセスでの除去性に関して従来のテストステインよりも新鮮な人血のように振る舞う、合成テストステインを提供することである。本発明は、合成テストステインが繊維素及び／又は繊維素前駆体を含んでいるという事実によって目的を達成する。本発明の枠組みの中で、「繊維素」という語句は、単量体繊維素及び重合体繊維素の両方、及び／又は架橋結合された繊維素を含むものと理解される。本発明の枠組みの中で、「合成テストステイン」という語句は、繊維素及び／又は繊維素前駆体が別々に（例えば単離された形態で且つ天然の人間又は動物の血液の成分としてでなく）加えられた、任意のテストステインを包含している。従って、その語句は、新鮮な又は凝固された天然の血液がどんな繊維素又は繊維素前駆体も含まない他の成分に混合されてなるテストステインも、含まない。本発明は、新鮮な血液ステインの困難な除去性が主として血液凝固（繊維素原の繊維素への変換及び可能なその後の架橋結合）に因ること、及び繊維素又は繊維素前駆体を含んだテストステインが除去性に関してたいへん似た特性を有していることを認識している。これは、凝固因子が血液成分の最適な非常に小さな割合から成る限りにおいて、驚くべきことである。これは、実施例で例証される。人血１リットルは約５２０ｍｌの血漿を含んでおり、この血漿は約３５ｇの血漿タンパク質を含んでおり、これらは次々に、繊維素前駆体として繊維素原を最適の非常に小さな割合で包含している。本発明の驚くべき発見は、繊維素原／繊維素が血液成分の０．５％より小さい割合を占めるだけであるけれども、清掃プロセスにおける血液の挙動が繊維素及び／又は繊維素前駆体を含む合成テストステインによってうまくシミュレートされることである。繊維素前駆体は好ましくは繊維素原である。本発明のテストステインは、もっと良好に血液の特性をシミュレートするために、例えばアルブミン及び／又はヘモグロビンのような血漿タンパク質を、更に含んでもよい。それ故、本発明は、天然の血液成分自身からなるのではなく血液の着色特性を本質的に決定する種々の血液成分から合成的に得られるものであるのに、清掃技術に関する限りは、天然の血液に良好に近似して振る舞う、合成テストステインを、提供する。本発明は、また、本発明の合成テストステインを調製するための繊維素接着剤の使用を提供する。商業上利用できる繊維素接着剤は、２成分システム又は多成分システムであり、一成分は繊維素前駆体として繊維素原を含んでおり、他成分はトロンビンを含んでいる。トロンビンは、タンパク質加水分解酵素であり、血液凝固因子の一つであり、繊維素原の繊維素への変換をもたらすものである。普通は、繊維素接着剤は、また、血液凝固因子ＸＩＩＩを含んでおり、繊維素の繊維素ポリマーへの架橋結合を開始する。他の平凡な成分は、血液凝固で作用する酵素システムの活性剤としてのＣａ2+イオン (血液凝固因子 IV)、及び繊維素溶解剤 (例えばプラスミン又はその前駆体のプラスミノーゲン)、及び／又は非繊維素溶解剤（例えばアプロチニン）である。本発明の枠組みの中で使用され得る一つの繊維素接着剤キットは、例えば、ハイデルベルグ６９１２６のイムノ（Ｉｍｍｕｎｏ）有限会社からの登録商標「ティスコル」(ＴＩＳＳＵＣＯＬ) がある。本発明は、また、合成テストステイン調製用のキットを提供するものであり、該キットは次の成分を有している。ａ）繊維素前駆体、ｂ）繊維素前駆体用の変換開始剤。「変換開始剤」という語句は、繊維素前駆体の単量体繊維素への変換を、及び／又は繊維素の重合又は架橋結合を、開始及び／又は促進する、どんな物質も含んでいる。キットがまた２つ以上の成分を含むことができるという制限を、これらの成分のリストが示唆する必要のないことが、指摘される。従って、例えば繊維素前駆体及び変換開始剤は、凍結乾燥された形態で固体として存在し得るものであり、それはまず適当な溶媒に溶解される必要がある。それから、これらの溶媒はまたキットの一部となり得る。成分ａ）は好ましくは繊維素原を含み、成分ｂ）は好ましくはトロンビンを含む。成分ａ）は、更に、例えばアルブミン及び／又はヘモグロビンのような他の血漿タンパク質を含むことができる。成分ａ)にとっては、血液凝固因子ＸＩＩＩを含むことがたびたび適切であり、該因子は、繊維素を架橋結合させる作用を有し、それ故に凝固を高めるものである。これは、特に除去困難である扱いにくいテストステインを生成する。キットの成分の一つがＣａ2+イオン（血液凝固因子ＩＶ）を含むならば、それもまた好ましい。最後に、キットは、任意に、プラスミノーゲンのような繊維素溶解剤又はアプロチニンのような非繊維素溶解剤を含むことができる。キットの成分は、例えば生理食塩液として存在できる。代わりに、既に上述したように、それらは固体（凍結乾燥された）として存在でき、その場合、適当な溶媒もまたキットの一部となる。本発明の他面は、清掃プロセスの有効性の検査方法である。それは、次の工程からなっている。ａ）請求項１から４の内の一つの合成テストステインをテストサンプルに塗布し、ｂ）テストサンプルをテストすべき清掃プロセスに供し、ｃ）テストサンプルにおける合成テストステインの残留物を検知する。材料及び表面構造に関する限り、テストサンプルは、実際に清掃されるべき器具及び装置にできるだけ密接に対応すべきである。外科用器具の清掃をシミュレートするため、例えば１００×２０ｍｍの面積で厚さ１〜２ｍｍのステンレス鋼板を用いることができる。リブ、突起などのような種々の表面形状が、外科用器具の対応する「汚いコーナー」をシミュレートするために、提供される。テストサンプルの表面は、テストステインの接着を良好にするために、(例えば研磨粒１８０（ドイツ工業規格１７４４０ＩＶ、グレイン１８０に従って研磨された表面 )によって）粗くされ、それによって、おそらくテストサンプルが実際に使用される器具及び装置よりも更に清掃しにくくなることが確実である。ねじ頭及びねじ山が比較的清掃しにくい表面領域を有しているので、テストサンプルとしてステンレス鋼ねじを用いることも考えられる。内視鏡の場合の清掃作用を検査するために、内部空間を備えたテストサンプル、又は狭い穴を備えたプラスチック製又はゴム製のチューブを、用いることが可能である。内部スペース又はチューブ穴の少なくとも一部は、その表面のテストステインの残留物を検出できるようにするために、外側から（例えば透明なチューブ材料を用いることによって）観察可能にする。その検出は、好ましくは光学検査も含む。合成テストステインは、例えば、請求項６から１１の内の一つのキットの成分のスプレーによって、又は他の幾つかの塗布方法によって塗布される。塗布工程の後は、テストステインを凝固し及び／又は乾燥されるままに置いておくことが好ましい。その上、凝固は乾燥中に起こるので、その場合は、独立した凝固工程は必要がない。しかしながら、乾燥前にテストステインに凝固する時間を持たせることがしばしば好ましい。そのために、テストサンプルは、例えば、相対湿度９０％の環境に２０℃で１０分間晒される。本発明の枠組みの中で、「凝固」という語句は、存在する任意の繊維素前駆体（繊維素原）の繊維素への変換を包含する。凝固は、好ましくはまた、繊維素単量体の繊維素ネットワークへの重合を包含しており、その重合は、好ましくは、血液凝固因子ＸＩＩＩ及び補足因子（血液凝固因子ＩＶ）としてのＣａ²⁺の作用の下で行われる。上記重合され且つ架橋結合された繊維素ネットワークは、医療用器具における凝固された血液ステインの場合に存在する条件の、特に良好なシミュレーションである。テストステインは室温で乾燥され、その適切な期間は例えば１〜２４時間の間である。高い温度（例えば４０℃）で例えば１時間乾燥することは、更に可能である。本発明によるテストステインが凝固し、かつ乾燥された際に生成された特に溶解しにくいテストステインは、その上、消毒剤として取り扱われ、そしてそれ故に部分的に変性される。変性された血液残留物は、特に除去困難であり、例えば外科用器具が使用直後若しくは少し後に消毒液の容器内に保管される時に実際に生じる。テストサンプルのこの調製は使用者によって行われる。しかしながら、その代わりに、以下に説明するように、適切に調製されたテストサンプルを包含するテストキットを提供することが可能である。テストサンプル、又はテストステインで処理されたサンプルは、その時、テストされる清掃プロセスに供される。清掃が完了すると、テストサンプルはテストステインの残留物に関して検査される。好ましい方法で、かつ使用者にとって簡単な方法は、好ましくは呈色反応がテストサンプル上のステインタンパク質残留物に対して実施された後における任意の残留物の視覚探知である。タンパク質検出の伝統的で当業者にとって親しみのある反応は、例えばビウレット反応である。以下の非限定リストは可能な検出反応の更なる例を含んでいる：ケルダール反応、ローリー反応、ミロン反応、ニンヒドリン反応、パウリ反応、キサントプロテイン反応。本発明のテストステインが残余のステインの視覚認知をかなり促進するヘモグロビンを含んでいるならば、独立したタンパク質呈色反応は必要ではない。少々不経済な見込みは、テストサンプルにまだくっついているタンパク質を加水分解すること、及び加水分解生成物として生じるアミノ酸を分析することである。定量検出が必要ならば、テストステインのタンパク質は、好ましくは、^99mＴｃのような放射性指示薬を含む。清掃作用は、清掃前後のテストサンプルから発する^99mＴｃγ放射線を測定することによって評価される。この方法は、比較測定が^99mＴｃでもラベルされた天然血で行われるので、本発明の合成テストステイン又は本発明のテスト方法を校正することを可能にする。本発明のテストステインの構成は、清掃に向けたその挙動が天然血の挙動にできるだけ密接に対応するように、変えられる。本発明はまた、本発明の方法を実施するためのキットを提供する。そのキットは、次のパーツを含んでいる。 − 請求項１から４の内の一つの合成テストステインを備えたテストサンプル、 − テストステインの残留物を検出するための分析試薬。このキットは、あらゆる使用者に、その者の自動洗浄消毒機の有効性を検査するための簡単で日常的な手段を提供する。調製されたテストサンプル又はサンプルは、キットから取り出され、テストされるべき清掃プロセスに供される。キットに含まれた分析試薬は、そのとき、テストステインの残留物を検出し且つ視覚的に評価するために、上述のように使用される。ビウレット反応は、検出反応として好んで使用される。この場合、分析試薬は、一方ではアルカリ水溶液を、他方ではＣｕ²⁺イオンの水溶液を含む。アルカリ水溶液は、好んで更に、水酸化銅（ＩＩ）がアルカリ媒体中に沈殿するのを防ぐために、Ｃｕ²⁺イオン用の錯化剤を含む。例えば、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）又はその塩は、適切な錯化剤として使用される。当業者に親しみのある、Ｃｕ²⁺イオン用の他の公知の錯化剤（ＥＤＴＡなど）も、適切である。本発明の実施例を以下に述べる。全ての百分率は重量百分率である。実施例１本実施例は、本発明の合成テストステイン調製用のキットの成分の調製に関するものである。成分ａ）：繊維素原０．４ｇ及び血液凝固因子ＸＩＩＩの２００Ｕを０．９％生理食塩液５０ｍｌに溶解する。血液凝固因子 XIII の１単位Ｕは新鮮な規定血漿１ｍｌに含まれる活量に相当する。成分ｂ）：トロンビン（人間用）２５００ＩＵ、アルブミン８ｇ、及びＣａＣｌ₂・２Ｈ₂ Ｏの３０ｍｇを生理食塩液５０ｍｌに溶解する。トロンビンの１国際単位(ＩＵ) は、人間のトロンビンの第１国際標準の０．０８５３ｍｇに含まれる活量として定義される。２成分における液体の総量に基づいて（１００ｍｌ)、繊維素原の割合は０．４重量％であり、アルブミンの割合は８重量％である。これらの割合は、成分から調製されるべきテストステインの「扱いにくさ」を変えるために、(例えば、各々、０．１〜０．５重量％の範囲、５〜１０重量％の範囲で）変えられる。成分ａ）及びｂ）の内容物は、繊維素接着剤キット、例えば、既に上述したイムノ有限会社製の登録商標「ティスコル」(ＴＩＳＳＵＣＯＬ) キット、のパーツとして得ることができる。本実施例により調製されたキットは、繊維素の重合ネットワークへの架橋結合を促進し、それによって扱いにくいステインを生成するために、血液凝固因子ＸＩＩＩ及び補助因子としての塩化カルシウムを含んでいる。特に扱いにくいテストステインが望まれるならば、成分ａ）及びｂ）は高濃度にされ、例えばタンパク質及び補助物の上記量がそれそれ最適な生理食塩液５ｍｌに溶解される。実施例２本実施例は、本発明の合成テストステイン調製用の第２キットの成分の調製に関するものである。成分ａ）：繊維素原０．４ｇを０．９％生理食塩液５０ｍｌに溶解する。成分ｂ）：トロンビン（人間用）２５ＩＵ、アルブミン８ｇ、ヘモグロビン８ｇ、及びＣａＣｌ₂・２Ｈ₂Ｏの３０ｍｇを生理食塩液５０ｍｌに溶解する。２成分における液体の総量に基づいて (１００ｍｌ)、繊維素原の割合は０．４重量％であり、アルブミン及びヘモグロビンの割合は８重量％である。これらの割合は、成分から調製されるべきテストステインの「扱いにくさ」を変えるために、(例えば、各々、０．１〜０．５重量％の範囲、５〜１０重量％の範囲で) 変更することができる。このキットでは、成分ｂ）におけるトロンビンの割合は、テストステインの塗布中に凝固が生じるのを防止するために、著しく減じられている。ヘモグロビンは、視覚化のための独立の呈色反応を実行する必要なく、テストステインの任意の残留物の視覚評価も可能にする。実施例３分析試薬の成分の調製。溶液１：ＮａＯＨ３ｇ及びＮＴＡ（ニトリロ三酢酸）４ｇを水５０ｍｌに溶解する。溶液２：ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏの５ｇを水５０ｍｌに溶解する。これら２つの溶液を一緒にすると、ビウレット反応用の分析試薬となる。実施例４テストステインのテストサンプルへの塗布。１００×２０ｍｍの面積で厚さ２ｍｍのステンレス鋼板がテストサンプルとして用いられる。その板の表面は、ドイツ工業規格１７４４０ＩＶ、グレイン１８０に基づいて研磨された表面である。テストサンプルの表面は、実施例１の成分ａ）及びｂ）の容積が等しい割合で湿らされる。例えば、２つの成分ａ）及びｂ）は、湿らされるテストサンプル表面に同時にスプレーされたり、又は他の方法で塗布される。それから、テストステインは、室温（２０℃）で相対湿度９０％で１０分間、凝固するよう放置される。凝固は、繊維素原の繊維素への変換、及び繊維素単量体の重合ネットワークへの架橋結合も含む。凝固後、テストサンプルは、乾燥用キャビネット中にて４０℃で１時間乾燥される。乾燥後、テストサンプルは使用準備ができる。それは、実施例３の分析試薬と任意に一緒にされて、使用者へ送られる。実施例５本発明の方法の実施。実施例４のテストサンプルは、テストされるべき自動洗浄消毒機に設置され、従来の清掃サイクルに供される。実施例３の溶液１及び２の等量を混合して分析試薬を形成し、それに清掃されたテストサンプルを浸す。分析試薬中でのテストサンプルの滞留時間は、少なくとも６０秒が好ましい。タンパク質残留物がテストサンプルにまだ存在しているならば、ペプチド結合及び（存在しているならば）チロシン残留物がＣｕ2+イオンを錯化して紫色の錯体を与えるので、テストサンプル表面のテストステインの残留物は紫色によって認識できる。この検出方法によれば、タンパク質残留物は、金属表面の約１〜４μｇ／ｃｍ2 の限界より下でも視覚的に認識できる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年１２月１７日（１９９７．１２．１７）【補正内容】請求の範囲１．ａ）繊維素及び／又は繊維素前駆体、ｂ）ヘモグロビン、を包含することを特徴とする合成テストステイン。２．繊維素前駆体が繊維素原であることを特徴とする請求項１の合成テストステイン。３．更に血漿タンパク質を包含することを特徴とする請求項１又は２の合成テストステイン。４．アルブミンを包含することを特徴とする請求項３の合成テストステイン。５．合成テストステインの調製に繊維素接着剤を使用すること。６．下記成分、すなわち、ａ）繊維素前駆体、ｂ）繊維素前駆体の変換開始剤、によって特徴付けられ、これらの成分の少なくとも一つが更にヘモグロビンを包含する合成テストステイン調製用のキット。７．成分ａ）が繊維素原を包含することを特徴とする請求項６のキット。８.成分ｂ）がトロンビンを包含することを特徴とする請求項６又は７のキット。９．成分ａ）が更に血漿タンパク質を包含することを特徴とする請求項６から８のうちの一つのキット。１０．成分ａ）がアルブミンを包含することを特徴とする請求項９のキット。１１．キットの成分が生理食塩液として与えられることを特徴とする請求項６から１０のうちの一つのキット。１２．下記工程によって特徴付けられる、清掃プロセスの有効性の検査方法。すなわち、ａ）繊維素及び／又は繊維素前駆体を含む合成テストステインをテストサンプルに塗布し、ｂ）テストサンプルをテストすべき清掃プロセスに供し、ｃ）テストサンプルにおける合成テストステインの残留物を検出する。１３．テストステインが、塗布後に凝固し及び／又は乾燥されるよう放置されることを特徴とする請求項１２の方法。１４．テストステインの残留物が、化学的呈色反応及びそれに続く視覚評価によって検出されることを特徴とする請求項１２又は１３の方法。１５．使用される化学的呈色反応がビウレット反応であることを特徴とする請求項１４の方法。１６．下記パーツによって特徴付けられる、請求項１２から１５のうちの一つの方法を実施するキット。すなわち、 − 繊維素及び／又は繊維素前駆体を含む合成テストステインを備えたテストサンプル、 − テストステインの残留物を検出するための分析試薬。１７．分析試薬が、 − アルカリ水溶液、 − Ｃｕ²⁺水溶液、を包含することを特徴とする請求項１６のキット。１８．アルカリ水溶液が更にＣｕ²⁺イオン用の錯化剤を包含する請求項１７のキット。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．繊維素及び／又は繊維素前駆体を包含することを特徴とする合成テストステイン。２．繊維素前駆体が繊維素原であることを特徴とする請求項１の合成テストステイン。３．更に血漿タンパク質を包含することを特徴とする請求項１又は２の合成テストステイン。４．アルブミン及び／又はヘモグロビンを包含することを特徴とする請求項３の合成テストステイン。５．合成テストステインの調製に繊維素接着剤を使用すること。６．下記成分、すなわちａ）繊維素前駆体、ｂ）繊維素前駆体の変換開始剤。によって特徴付けた合成テストステイン調製用のキット。７．成分ａ）が繊維素原を包含することを特徴とする請求項６のキット。８.成分ｂ）がトロンビンを包含することを特徴とする請求項６又は７のキット。９．成分ａ）が更に血漿タンパク質を包含することを特徴とする請求項６から８の内の一つのキット。１０．成分ａ）がアルブミン及び／又はヘモグロビンを包含することを特徴とする請求項９のキット。１１．キットの成分が生理食塩液として与えられることを特徴とする請求項６から１０の内の一つのキット。１２．下記工程によって特徴付けた、清掃プロセスの有効性の検査方法。すなわち、ａ）請求項１から４のうちの一つの合成テストステインをテストサンプルに塗布し、ｂ）テストサンプルをテストすべき清掃プロセスに供し、ｃ）テストサンプルにおける合成テストステインの残留物を検出する。１３．テストステインが、塗布後に凝固し及び／又は乾燥されるよう放置されることを特徴とする請求項１２の方法。１４．テストステインの残留物が、化学的呈色反応及びそれに続く視覚評価によって検出されることを特徴とする請求項１２又は１３の方法。１５．使用される化学的呈色反応がビウレット反応であることを特徴とする請求項１４の方法。１６．下記パーツ、すなわち、 − 請求項１から４のうちの一つの合成テストステインを備えたテストサンプルと、 − テストステインの残留物を検出するための分析試薬によって特徴付けた、請求項１２から１５の内の一つの方法を実施するキット。１７．分析試薬が、 − アルカリ水溶液、 − Ｃｕ²⁺水溶液、を包含することを特徴とする請求項１６のキット。１８．アルカリ水溶液が更にＣｕ²⁺イオン用の錯化剤を包含することを特徴とする請求項１７のキット。