JP2000502141A - 低い多分散指数を有するヒアルロン酸分画の調製方法 - Google Patents
低い多分散指数を有するヒアルロン酸分画の調製方法Info
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Abstract
(57)【要約】
5,000 と300,000 の間より成る平均分子量及び1.7 以下の多分散指数を有していて、出発高分子量ヒアルロン酸を次亜塩素酸ナトリウムと超音波で同時に処理することより成る、ヒアルロン酸の調製方法。
Description
【発明の詳細な説明】
低い多分散指数を有するヒアルロン酸分画の調製方法 発明の分野
本発明は平均分子量が5,000 と300,000 の間より成り且つ出発高分子量ヒアル
ロン酸を次亜塩素酸ナトリウムと超音波で同時に処理する1.7 以下の多分散指数
を有するヒアルロン酸分画の調製方法に関する。従来の技術
ヒアルロン酸は配糖体結合β1-3 及びα1-4 によりリンクされたグルクロン及
びN-アセチルグルコサミンにより形成された二糖単位の繰返しにより構成された
天然の、線状多糖類で、生体親和性且つ生分解性である。
ヒアルロン酸は高級器官の結合組織の中、滑液の中、膝帯の中及び鶏頭の中に
存在する；それは又連鎖球菌のようなある種の細菌形態から合成もされ得る（ケ
ンドールほか，Journ．Biol．Chem.，vol．118，ｐ61，1937）。
ヒアルロン酸は組織の水和、ムコ多糖の組織化、細胞分化及び脈管形成のよう
な多くの生物学的過程で活発な役割を演じる。ヒアルロン酸溶液のレオロジー的
性質に関連して多くの生体医学的応用がある：一つの重要な部門は眼の外科手術
のそれである（グラブほか，Exp．Eye Res.，vol．31，ｐ119，1979）。ヒアル
ロン酸及びその誘導体（デラバレとロメオ，EP 0216453，1987．で記述されたヒ
アルロン酸エステルのような）を含む他の生体医学的応用は組織回復（外傷、火
傷）に関連した過程に関する。
低分子量分画に関して、種々の分野又は応用が皮膚科学（スコット EP0295092
,B1，1987）及び薬理学で成功裡に探求されている。ある種の生物学的性質が分
子量の減少及び種々の局在化と分散指数（Mw，Mn，Mz）及び多分散指数により特
徴付けられた分布曲線の機能に敏感なことを証明した。例えば、低分子量ヒアル
ロン酸は多糖類の血管新生を増加させる能力で作用する、又はTNF のような特定
の抑制因子として炎症性の進行を阻害する脈管形成可能な物質として作用する（
ノブルほか，J．Clin．Inv.，vol．91，ｐ2163，1993）。更に、ヒアルロン酸の
低分子量分画は骨形成現象に又抗ウイルス剤として使用できる。
ヒアルロン酸分画の調製には例えば加熱、超音波、紫外線及びガンマー線照射
を含む物理的方法、又はヒアルロン酸分解酵素を用いる酵素反応（チャブレック
ほか,Jour．Appl．Poly．Sci.，vol．48，ｐ233，1991; レハコバほか，Int．
Ｊ．Biol．Macrom.，vol．16/3，ｐ121，1994）による、更にまた、アスコルビ
ン酸との化学的解重合反応（クリーブランドほか，Bioch．Biophy．Acta，vol．
192，p385，1969）又は次亜塩素酸塩類との処理（シラーほか，Biol．Chem．Hop
p-Seyler，vol．375，ｐ169，1994）により得られた多くの例がある。然し、す
べての引用した方法は得られた生成物のタイプについて幾つかの方法に分けられ
る。事実、これらの幾つかは例え配糖体結合を阻害して一次重合構造を変更しな
いとしても、これらは低い多分散指数により特徴付けられる分解された低分子量
生成物を生成することは出来ない。事実、超音波又は熱を用いた技術は漸近的傾
向を呈する解重合反応速度論（depolymerization kinetics）を作ることが見ら
れた。更に同時に同じ条件（超音波出力と温度）での処理は生成物の完全な分解
に導く。
これらの物理的方法と違って、ヒアルロン酸分解酵素の作用により誘導された
解重合は結果としての重合鎖の一次構造の保持による反応の効力及び分解反応速
度論の制御のような或種の利点を生じさせる。然しこれらのパラメーターの観察
は低分子量分布により特徴付けられる高い化学的生産量又は生産物を保証しない
。
最後に、次亜塩素酸ナトリウムやアスコルビン酸のような化学薬品の大量の作
用は同時に分子量の損失及び重合鎖の化学構造の重大な変更に導く。望ましい分
子の輪郭を持つ分解誘導体はこれらの試薬の注意深い且つ制御された使用によっ
てのみ得ることができる、それ故工業的規模での化学工程の可能性のある使用は
大きく制約される。発明の要約
本発明は、50,000と10,000,000の間の平均分子量を有しているヒアルロン酸又
はその塩を、次亜塩素酸ナトリウム／ヒアルロン酸繰返し単位（HA r.u．）のモ
ル比が0.01と5 の間より成るような濃度の次亜塩素酸ナトリウムの存在下で同時
に超音波で240 分間以下の時間処理することより成る、5,000 から300,000 まで
の範囲の平均分子量を有しているヒアルロン酸又はその塩の分画の調製方法に関
する。図面の簡単な説明
図１：1.0から10.0までの範囲のNaClO/HA r.u．のモル比を使用して平均分子量1
75,000を有している出発ヒアルロン酸を8 時間次亜塩素酸ナトリウムだけで行っ
た解重合の結果を図表の形で表現、前記モル比は横軸で、平均分子量は左縦軸に
且つ多分散指数は右縦軸に書いた。
図２：モル比: NaClO/HA r.u.=5.O で次亜塩素酸ナトリウムだけで行った解重合
の分解反応速度論（degradation kinetics）のグラフ、ここで時間は横軸に、平
均分子量は左縦軸に且つ多分散指数は右縦軸に書いた。
図３：ヒアルロン酸分画D3-bに行われた解重合の分解反応速度論の図表、時間を
横軸に、平均分子量は左縦軸に且つ多分散指数は右縦軸に書いた。
図４：ヒアルロン酸分画D2に行われた解重合の分解反応速度論の図表、時間（分
）を横軸に、平均分子量は左縦軸に且つ多分散指数は右縦軸に書いた。
図５：次のモル比NaClO/HA r.u.:0.5，1.0，2.5を持つ次亜塩素酸ナトリウムと
超音波で同時に処理された分子量990,000 及び多分散指数=1.40 を有する出発ヒ
アルロン酸及び比較のための超音波だけで処理した同じヒアルロン酸に行われた
解重合の分解反応速度論の表現、平均分子量は縦軸で、一方時間（分）は横軸に
書かれた。
図６：次のモル比NaClO/HA r.u.: 0.5，1.0，2.5を持つ次亜塩素酸ナトリウムと
超音波で同時に処理された分子量990,000 及び多分散指数=1.40 を有するヒアル
ロン酸及び比較のための超音波だけで処理した同じヒアルロン酸に行われた解重
合の分解反応速度論の表現、多分散指数は縦軸で、一方時間（分）は横軸に書か
れた。発明の詳細な説明
本発明に従う工程は異なった分子量を有しているヒアルロン酸又はそれの塩を
解重合するのに使用され得る。
例えばそれはEP 0138572及びEP-A-0535200に記載されている如く100,000 から
1,500,000 までの範囲の平均分子量を持っている鶏頭から抽出されたヒアルロン
酸を解重合するのに使用され得る。
この場合ヒアルロン酸分画はなるべくなら5,000 から50,000 までの分子量を
持つ、もっと出来れば以下の範囲内にあるのがよい：5,000-10,000，10,000-15,
000，15,000-25,000，及び25,000-50,000。
本発明に従う工程は例えば発酵技術由来の且つ寧ろ高い分子量、一般に1,000,
000 から5,000,000 までの範囲、を持つことを特徴とする市販のヒアルロン酸の
解重合にも都合よく使用できる、又本発明に従う解重合工程により前記ヒアルロ
ン酸から50,000から300,000 の範囲より成る平均分子量を持っているヒアルロン
酸分画を得ることが可能である。
最後に本発明に従う工程はPCT 特許出願番号WO 95/24497 で公開された生体外
合成法により得られる、50,000から10,000,000までの分子量範囲を持つことを特
徴とするヒアルロン酸の高分子量分画にも都合良く実行され得る。
本発明に従う工程は一般になるべくなら10mg/ml の濃度で且つなるべくなら4
℃の温度で出発ヒアルロン酸又はその塩を含んでいるNaCl水溶液で実行される。
本発明に従う工程では、NaClO は一般に1から20重量％の範囲の濃度で水溶液
の形で前記溶液に添加される。
本発明に従う工程では、NaClO はなるべくならモル比 NaClO/HA r.u.が0.5 と
2.5 の間より成るような濃度で添加される。
本発明に従う工程はなるべくなら120 と240 分の間より成る時間行われる。
超音波はなるべくなら50と200 ワットの間の出力で且つ10から50kHz の周波数
範囲を持つ。
更に本発明に従う工程は簡単な数学関数により制御と追跡が出来る解重合反応
速度論を用意する、然しとりわけ前述の如く、それは低い多分散指数（Pd値= Mw
／Mn＜1.7）を有している多糖類分画を得ることを許す、さもなければそれは長
時間で且つ高価な精製工程によってだけ入手可能となるであろう。
分子量と多分散指数値は、屈折率（RI）及び多角レーザー光散乱（MALLS）な
どを計測する種々の計器と結合した次元分子篩（dimensional exclusion）クロ
マトグラフィーにより決定された。
本出願人はNaClO と超音波の同時処理だけがこの目的に達することを実際思い
もかけず発見した、これに反し超音波技術とNaClO が二つの別々の段階で加えら
れるような選択的方法では低い分子量分画と低い多分散指数とを同時に得ること
には成功しなかった。
事実次の三つの選択的方法が行われた：
1) 方法‘A':次亜塩素酸ナトリウム溶液の添加に続いてその溶液への超音波処
理により得られた解重合。
2) 方法‘B':与えられた出力を固定した超音波の作用、続いて次の段階で次亜
塩素酸ナトリウム溶液の添加することによる解重合。
3) 方法‘C':次亜塩素酸ナトリウム溶液と超音波を組み合わせた同時作用によ
り得られた解重合。
三つの方法の比較を容易にするために、反応変数（ヒアルロン酸の濃度、次亜
塩素酸塩の濃度、超音波の出力など）を出来るだけ不変に与えることを試みた。
抽出により得られた100,000 と1,500,000 の間の範囲にあるMwを持つヒアルロン
酸溶液で出発して、分解反応速度論で50℃で違ったモル比NaClO/HA r.u．の次亜
塩素酸塩の(5%)溶液で1 と48時間の間の変動する期間処理することによる重合体
を研究した。ねらいは多分散指数≦1.7 を持つ分子量5,000 乃至20,000Daのヒア
ルロン酸分画を作り出すことにあった。
図１は平均分子量175,000 を持つヒアルロン酸HA-1から出発して表１に書かれ
た1.0 と10の間の異なったモル比NaClO/HA r.u．で次亜塩素酸ナトリウム溶液と
8 時間反応して得られたヒアルロン酸分画と多分散指数を表している、又モル比
値5.0 をとり曲線は表２に書かれたデータと共に図２の分解反応速度論を構成し
且つ表現した。 20,000D 以下の分子量で且つ数値（Mw/Mn）が1.7を越えない多分散指数により
特徴付けられるヒアルロン酸分画を得ることが困難なことは得られたデータから
明らかである。多量の解重合剤の使用及び／又は反応時間の増加によって、望み
の分子分布特性を持つヒアルロン酸分画（重合体の完全な分解）を得ることは不
可能である。
方法‘A'の研究を完成させるために、メタノールとアセトンより成る有機混合
液での沈澱により反応混合物から分離された記号Ｄ2及びＤ3-bの分画を使用し
た。NaClの0.15M 溶液に溶解した後、これらは150 と200Wの間の出力で且つ 20k
Hzに設定した超音波で15分間から8 時間の間処理される。表３はゲル浸透クロマ
トグラフィーにより明らかになったMwと多分散指数値を示す。
データと関連グラフ（図３と４）は方法‘A'を用いて望ましいMwを持つHA分画
を製造することが不可能なことを示す。超音波処理時間を増加させる、又は化学
的多分散条件を変更することによってさえ、多分散指数＜1.7によって特徴付け
られ且つ5,000 と20,000の間の分子量を持つ最終生成物を得ることは未だ不可能
である。
方法‘B'も又、方法‘A'で述べたのと同じく天然ヒアルロン酸から出発して、
超音波及び次亜塩素酸塩との反応の二つの別々の工程による二重処理を含むが、
望まれる平均Mw又は多分散指数を持つ分画は製造しない。正確に言うと、超音波
の作用は約35,000の分子量と多分散指数1.5（4℃で4 時間の処理後）を持つヒア
ルロン酸を作り出すけれども、その後の次亜塩素酸ナトリウムとの化学反応が極
度に穏やかな条件下であってさえも製品の構造特性を荒廃させる効果を有するこ
とが指摘された。
方法‘C'、本発明で記述されるその革新的結果は超音波と次亜塩素酸ナトリウ
ムの作用を組合わせ且つ制御する。その組合わせた作用は0 と480 分間の間の期
間にわたってこれら二つの因子の同時使用を含む。化学物理的分解は、チタンを
コートした投込み型プローブで作られる20kHz の周波数を持つ150W超音波を使用
しながら、NaClの溶液（4℃の温度で0.15M）中で起こる。更に、NaClO の5％溶
液が0.5 と2.5（NaClO のモル／ヒアルロン酸のモル）の間の範囲で天然ヒアル
ロン酸（w約1,000,000 ）に関して一モル濃度に加えられる。反応速度論的に決
まった時間毎に溶液の一定量を採取して５倍量のメタノール／アセトン混合液中
に沈澱させる。生成物はそこで乾燥され、二つの前述の計測手段を用いてゲル浸
透クロマトグラフィーにより分析される：その間TSK 型（G2000及び G30OO）の
二つの直列カラムが分離に使用される。
この分析のデータは表４（分子量）と表５（多分散度）に記載した。この結果
をよりはっきりさせるため、方法‘B'の第一段階（超音波処理だけ）で得られた
Mwも含めた。
*＝モル比 NaClO/HA r.u.
*＝モル比 NaClO/HA r.u.
二組の分析データの比較は要求される分子輪郭を持つ少なくとも三つの分画を
得ることが可能なことを示す。これら三つの別種の生成物は記号名D4(時間:240
分; NaClO 0.5 ）、D5（時間:120分; NaClO 1.0 ）及びD6（時間:120分; NaClO2
.5）で呼ばれるだろう。これらは夫々13,400、11,500及び7,800 の分子量を持ち
、多分散指数値は1.55と1.7 の間にある。
5,000 以下のMw値はそれらが計器の感度限界以下にあるので正確に確かめるこ
とは非常に難しい、それで斯かる値を持つ分画は規定が困難である。
同時に組合わせた分解方法‘C'が分子量の多分散度による許容限界内に残るヒ
アルロン酸分画を製造することを示すことは興味がある。これらの結果は解重合
反応の特異性を確認する、そして図５と６の曲線による判断、以下の反応パラメ
ーター：超音波出力150W、120 分の期間及び1 モルのNaClO／ヒアルロン酸のモ
ルのモル濃度、を用いて実行された三つのテストにより確認された良好な反応速
度論的制御、前述の実験に用いたのと同じヒアルロン酸から出発して又表６に記
した対応するデータは同じ実験条件が使用される時には分解工程が再現可能であ
ることを示す。
ここで実例として以下の諸例を記載するが、本発明に従う方法の目的を限定
するものではない。実施例１： 5,000 と10,000の間の分子量を持つヒアルロン酸の調製
抽出によって得られたヒアルロン酸から990,000Da の分子量を持つヒアルロン
酸ナトリウム2.40grを、NaC1の0.15M 溶液240m1 中に溶解させる。14% NaClO溶
液7.9m1 を添加する。+4℃に保温したまま、その結果としての溶液は150Wの強度
で且つ20kHz の周波数の超音波で120 分間処理される。
一滴の粘性から反応の完了がわかると直ちに、0.1N HClでpHを6.5 にして、メ
タノール- アセトン2:1の混合液1,000 ml中に沈澱させる。生成物は瀘過で分離
されて45℃で48時間真空乾燥させられる。
斯くしてナトリウム塩の形で1.65grが得られる（記号 HA-D9-Na ）。高速液体
クロマトグラフィー- ゲル浸透クロマトグラフィー分析は、得られたヒアルロン
酸分画が重量平均分子量（Mw）5,850、数平均分子量（Mn）3,640及び多分散指数
1.61を持つことを明らかにした。
天然ヒアルロン酸と比較したフーリエ変換赤外分光法はスペクトルにどんな異
常も明らかにしなかった。最後に、D-グルクロン酸の決定用のカルバゾールを用
いる方法によって得られた、ヒアルロン酸の存在率の分析は純度95% を示した。実施例２： 10,000と15,000の間の分子量を持つヒアルロン酸の調製
抽出によって得られたヒアルロン酸から740,000DaのMwを持つヒアルロン酸ナ
トリウム2.5gr を、NaClの0.15M溶液250m1 中に溶解させる。14% NaClO 溶液3.3
ml を添加する。+4℃に保温したまま、その結果としての溶液は150Wの強度で且
つ20kHz の周波数の超音波で120 分間処理される。
一滴の粘性から反応の完了がわかると直ちに、0.1N HClでpHを6.5にして、メ
タノール- アセトン2:1の混合液1,000 ml中に沈澱させる。生成物は濾過で分離
されて45℃で48時間真空乾燥させられる。
斯くしてナトリウム塩の形で1.50 gr が得られる（記号HA-D9-Na）。高速液体
クロマトグラフィー- ゲル浸透クロマトグラフィー分析は、得られたヒアルロン
酸分画が重量平均分子量（Mw）11,650、数平均分子量（Mn）7,330 及び多分散指
数1.59を持つことを明らかにした。
天然ヒアルロン酸と比較したフーリエ変換赤外分光法はスペクトルにどんな異
常も明らかにしなかった。最後に、D-グルクロン酸の決定用のカルバゾールを用
いる方法によって得られた、ヒアルロン酸の存在率の分析は純度98% を示した。実施例３： 15,000と25,000の間の分子量を持つヒアルロン酸の調製
抽出によって得られたヒアルロン酸から約1,000,000Da の分子量を持つヒアル
ロン酸ナトリウム1.00grを、NaC1の0.15M 溶液100ml 中に溶解させる。
14% NaClO 溶液0.6mlを添加する。＋4℃に保温したまま、その結果としての溶液
は150Wの強度で且つ20kHz の周波数の超音波で120 分間処理される。
一滴の粘性から反応の完了がわかると直ちに、0.1N HClでpHを6.5にして、メ
タノール- アセトン2:1の混合液500ml 中に沈澱させる。生成物は濾過で分離さ
れて45℃で48時間真空乾燥させられる。
斯くしてナトリウム塩の形で0.65grが得られる（記号HA-D8-Na）。高速液体ク
ロマトグラフィー- ゲル浸透クロマトグラフィー分析は、得られたヒアルロン酸
分画が重量平均分子量（Mw）22,500、数平均分子量（Mn）15,550 及び多分散指
数1.45を持つことを明らかにした。
天然ヒアルロン酸と比較したフーリエ変換赤外分光法はスペクトルにどんな異
常も明らかにしなかった。最後に、D-グルクロン酸の決定用のカルバゾールを用
いる方法によって得られた、ヒアルロン酸の存在率の分析は純度97% を示した。
本発明の方法により得られるヒアルロン酸分画は組織回復機構、脈管形成及び
骨形成における細胞相互作用を持つ薬学的組成品の調製に広く使用できる。
更に、これらのヒアルロン酸分画は、欧州特許No.0341745 B1 に記載の方法に
従って、麻酔性、抗炎症性、血管収縮神経性、抗生物質、抗菌性、抗ウイルス性
作用を持つ化合物を含んでいる眼科的用法又は機構のための薬学的組成品の調製
に使用されるべき自己架橋ヒアルロン酸の工業的製造工程に使用できる。
ヒアルロン酸誘導体も又保健及び外科的関節間分節の準備及び産業、食品及び
化粧品の分野でも使用できる。
前記分画は又、欧州特許No.0216453 B1 に記載の方法に従って、眼科学、皮膚
科学、耳鼻咽喉科学、歯科学、脈管学、婦人科学での及び保健と外科的関節間分
節（surgical articles）の準備に関する神経学の分野での使用のため、エステ
ル化したヒアルロン酸のエステル化調製工程を受けることができる。
合成的に自己架橋した及びエステル化したヒアルロン酸に加えて、生体医学的
生成物及び同じく外被用として、医薬品の解放を制御する賦形剤として、炎症の
治療に及び挫傷や火傷の傷治癒過程の加速に、眼科学、皮膚科学、耳鼻咽喉科学
、歯科学、脈管学、婦人科学、泌尿器科学、血液透析、心臓学、体外循環での使
用のために、特許出願No.PCT WO 95/25751に記載の方法に従って硫酸塩にしたヒ
アルロン酸調製のため本発明に従う工程で得られたヒアルロン酸分画を使用する
ことも可能である。
ここで述べた発明でこれらの方法が、動物、生体工学又は生合成源から得られ
た天然重合物から出発して300,000Da までの分子量を持つヒアルロン酸分画を得
るように変更できることは明らかである。斯かる変更が本発明の精神と目的から
の逸脱と見なすべきではない。
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フロントページの続き
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Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １． 5,000 から300,000 までの範囲の平均分子量を有するヒアルロン酸又は それの塩の分画の調製において、50,000から10,000,000までの範囲の平均分子量 を有する出発ヒアルロン酸又はその塩を、次亜塩素酸ナトリウム／ヒアルロン酸 繰返し単位のモル比が0.01と5 の間より成るような濃度での次亜塩素酸ナトリウ ムの存在下で同時に超音波で240分以下の時間処理することより成る調製方法。 ２． ヒアルロン酸が100,000 と1,500,000 の範囲の分子量を有する鶏頭から 抽出される、請求項１に記載の方法。 ３． 生成するヒアルロン酸分画が5,000から50,000までの範囲の分子量を持 つ、請求項２に記載の方法。 ４． 生成するヒアルロン酸分画が5,000〜10,000の範囲の平均分子量を持つ 、請求項３に記載の方法。 ５． 生成するヒアルロン酸が10,000〜15,000の範囲の平均分子量を持つ、請 求項３に記載の方法。 ６． 生成するヒアルロン酸が15,000〜25,000の範囲の平均分子量を持つ、請 求項３に記載の方法。 ７． 25,000〜50,000の範囲の平均分子量を持つ請求項３に記載の方法。 ８． 出発ヒアルロン酸が発酵工程からの由来であり且つ1,000,000 から5,00 0,000 までの範囲の平均分子量を有する、請求項１に記載の方法。 ９． 生成するヒアルロン酸分画が50,000から300,000 までの範囲の平均分子 量を持つ、請求項８に記載の方法。 １０． 出発ヒアルロン酸が生体外合成からの由来であり且つ50,000から10,0 00,000までの範囲の平均分子量を有する、請求項２に記載の方法。 １１． 出発ヒアルロン酸又はそれの塩を含むNaC1水溶液が温度4℃且つ濃度1 0mg/mlで実行される、請求項１-１０の何れにも記載の方法。 １２． １から20重量％の範囲の濃度を有する水溶液の形でNaC10が前記溶液 に添加される、請求項１１に記載の方法。 １３． モル比 NaClO／ヒアルロン酸繰返し単位が0.5 と2.5 の間より成るよ うな濃度でNaClO が添加される、請求項１-１２の何れにも記載の方法。 １４． 120 と240 分の間より成る時間実行される、請求項１-１３の何れに も記載の方法。 １５． 超音波が50と200Wの間より成る出力を有する、請求項１−１４の何れ にも記載の方法。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006101030A1 (ja) * | 2005-03-22 | 2006-09-28 | Q.P. Corporation | 低分子ヒアルロン酸および／またはその塩、およびその製造方法、ならびにこれを含有する化粧料および食品組成物 |
| WO2007099830A1 (ja) * | 2006-02-24 | 2007-09-07 | Q.P. Corporation | 新規な低分子ヒアルロン酸および／またはその塩、ならびにこれを用いた化粧料、医薬組成物および食品組成物 |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1282219B1 (it) * | 1995-12-20 | 1998-03-16 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Processo chimico fisico combinato per la preparazione di frazioni di acido ialuronico a basso peso molecolare caratterizzate da bassa |
| IT1291452B1 (it) | 1997-04-14 | 1999-01-11 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Rivestimento a base di acido ialuronico e suoi derivati per la protezione di parti elettroniche da agenti esterni |
| US20020172712A1 (en) * | 2001-03-19 | 2002-11-21 | Alan Drizen | Antiemetic, anti-motion sustained release drug delivery system |
| US20060153893A1 (en) * | 2002-04-08 | 2006-07-13 | Denki Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Therapeutic composition for bone infectious disease |
| US20050142208A1 (en) * | 2002-05-09 | 2005-06-30 | Won Min Yoo | Pharmceutical composition for treatment of wounds conntaining blood plasma or serum |
| AU2003228958C1 (en) * | 2002-05-17 | 2009-01-08 | Fidia Advanced Biopolymers, S.R.L. | Injectable solid hyaluronic acid carriers for delivery of osteogenic proteins |
| AU2003247816A1 (en) * | 2002-07-02 | 2004-01-23 | Procyte Corporation | Compositions containing peptide copper complexes and soft tissue fillers |
| US20060183709A1 (en) * | 2005-02-15 | 2006-08-17 | Ahmad Alkayali | Preparation of low molecular weight hyaluronic acid as a food supplement |
| US7323184B2 (en) * | 2005-08-22 | 2008-01-29 | Healagenics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of wounds and the reduction of scar formation |
| WO2008000260A1 (en) * | 2006-06-28 | 2008-01-03 | Novozymes Biopolymer A/S | Compositions with several hyaluronic acid fractions for cosmetic and medical uses |
| WO2008003321A2 (en) * | 2006-07-07 | 2008-01-10 | Novozymes Biopolymer A/S | Compositions with several hyaluronic acid fractions for cosmetic use |
| JP2009545637A (ja) | 2006-08-04 | 2009-12-24 | ノボザイムス バイオファーマ デーコー アクティーゼルスカブ | 分岐ヒアルロン酸及びその製造方法 |
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| KR20100094982A (ko) | 2007-11-13 | 2010-08-27 | 바이오-테크널러지 제너럴 (이스라엘) 리미티드 | 점탄성 바이오폴리머의 희석식 여과 멸균 방법 |
| US20130209531A1 (en) * | 2010-06-08 | 2013-08-15 | University Of Utah Research Foundation | Applications of partially and fully sulfated hyaluronan |
| CN113512134B (zh) * | 2021-07-30 | 2022-05-20 | 梅晔生物医药股份有限公司 | 一种全分子量分布的透明质酸钠及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5166331A (en) * | 1983-10-10 | 1992-11-24 | Fidia, S.P.A. | Hyaluronics acid fractions, methods for the preparation thereof, and pharmaceutical compositions containing same |
| NO169637C (no) * | 1983-10-11 | 1992-07-22 | Fidia Spa | Fremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive hyaluronsyre-fraksjoner |
| US4851521A (en) * | 1985-07-08 | 1989-07-25 | Fidia, S.P.A. | Esters of hyaluronic acid |
| GB8713747D0 (en) * | 1987-06-12 | 1987-07-15 | Unilever Plc | Skin treatment composition |
| IT1219587B (it) * | 1988-05-13 | 1990-05-18 | Fidia Farmaceutici | Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati |
| JPH0675512B2 (ja) * | 1989-03-20 | 1994-09-28 | 株式会社紀文食品 | 低重合度ヒアルロン酸アルカリ塩の製造方法 |
| IT1247175B (it) * | 1991-04-19 | 1994-12-12 | Fidia Spa | Procedimento per la purificazione di acido ialuronico e frazione di acido ialuronico puro per uso oftalmico. |
| IT1260148B (it) * | 1992-04-17 | 1996-03-28 | Fidia Spa | Impiego di preparazioni di acido ialuronico per la formazione di tessuto osseo |
| IT1268954B1 (it) * | 1994-03-11 | 1997-03-18 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Processo per la preparazione di acido ialuronico mediante sintesienzimatica e relative composizioni farmaceutiche |
| ITPD940054A1 (it) * | 1994-03-23 | 1995-09-23 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Polisaccaridi solfatati |
| IT1282219B1 (it) * | 1995-12-20 | 1998-03-16 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Processo chimico fisico combinato per la preparazione di frazioni di acido ialuronico a basso peso molecolare caratterizzate da bassa |
-
1995
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-
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Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006101030A1 (ja) * | 2005-03-22 | 2006-09-28 | Q.P. Corporation | 低分子ヒアルロン酸および／またはその塩、およびその製造方法、ならびにこれを含有する化粧料および食品組成物 |
| JP2006265287A (ja) * | 2005-03-22 | 2006-10-05 | Q P Corp | 低分子ヒアルロン酸および／またはその塩、およびその製造方法、ならびにこれを含有する化粧料および食品組成物 |
| JP4576583B2 (ja) * | 2005-03-22 | 2010-11-10 | キユーピー株式会社 | ヒアルロン酸またはその塩、およびその製造方法、ならびにこれを含有する化粧料および食品組成物 |
| US8933054B2 (en) | 2005-03-22 | 2015-01-13 | Q.P. Corporation | Low molecular weight hyaluronic acid and/or salt thereof, method for producing same, and cosmetic preparation and food composition containing same |
| WO2007099830A1 (ja) * | 2006-02-24 | 2007-09-07 | Q.P. Corporation | 新規な低分子ヒアルロン酸および／またはその塩、ならびにこれを用いた化粧料、医薬組成物および食品組成物 |
| US8367818B2 (en) | 2006-02-24 | 2013-02-05 | Q.P. Corporation | Low molecular weight hyaluronic acid and/or salt thereof, and cosmetic preparation, pharmaceutical composition, and food composition each using same |
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