JP2000502069A

JP2000502069A - Ｎｓａｉｄとセラミドを含む口腔で使用する医薬組成物

Info

Publication number: JP2000502069A
Application number: JP9521039A
Authority: JP
Inventors: フィニドリ，クローディーヌ
Original assignee: サンテラボ
Priority date: 1995-12-06
Filing date: 1996-12-04
Publication date: 2000-02-22
Also published as: FR2742054B1; EP0865290B1; WO1997020572A1; ATE260667T1; DE69631783D1; US6056944A; EP0865290A1; FR2742054A1

Abstract

(57)【要約】非ステロイド系抗炎症剤およびセラミドを含む口腔で使用する医薬組成物を開示する。該組成物は歯周病を治療および予防するのに有用である。

Description

【発明の詳細な説明】ＮＳＡＩＤとセラミドを含む口腔で使用する医薬組成物本発明は、非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩ）を含有する口腔で使用する医薬組成物、およびその、歯周障害の予防および治療への使用に関する。ＮＳＡＩは、歯肉炎や歯周炎といった歯周組織に対する障害である、歯周障害の治療および予防には広く用いられていない。歯周組織は歯の支持組織を構成する。歯周組織は、主として、歯肉、靭帯、歯槽骨およびセメント質からなる。歯周障害の予防および治療へのＮＳＡＩの使用が限られていることは、一般に、ＮＳＡＩを含む口腔で使用する組成物の有効性が十分でないという事実によって説明づけられる。すなわち、この種の組成物が十分に有効であるためには、比較的高用量のＮＳＡＩが必要であるが、歯周組織は、一般にそのような高用量のＮＳＡＩに十分には耐えない。したがって、本発明は、ＮＳＡＩを含み、十分に改善された効能を有すると同時に歯周組織が十分に耐える、口腔で使用する新規組成物を提唱するものである。該組成物は歯周障害を予防および治療するのに有用である。すなわち、本発明は、非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩ）およびセラミドを含む口腔で使用する医薬組成物からなる。本出願人は、セラミドがＮＳＡＩをベクトル化する（vectorize）ことができること、すなわち、セラミドが作用部位におけるＮＳＡＩの生物学的利用能（バイオアベイラビリティ）を改善することをみいだした。すなわち、セラミドは単独でか、または下記の他の化合物と一緒になってベクトル化基剤を形成する。セラミドは、一般的には炭素数１４〜３４、より一般的には炭素数１７〜２３の脂質である。セラミドは、動物細胞の原形質膜の成分である。セラミドは、セラミドに加えて特にレクチンのようなリン脂質を含む脂質混合物の形で植物中にも存在する。セラミド誘導体は、セラミドの構造性炭素鎖に付着している１またはそれ以上の単糖類を含むことも知られている。該単糖類はグルコース、ガラクトース、マンノース、フコース、グルコサミンまたはガラクトサミンからなり得る。１またはそれ以上の単糖類を含む該セラミド誘導体は、本発明に不可欠な部分である。簡単にするため、特記しないかぎり、用語セラミドは、本発明の文脈内において、セラミド自体と該セラミドの誘導体の両方を意味するものと理解される。上記のごとく、セラミドは単独でか、または、セラミドに加えて、特に、リン脂質のような他の脂質と適切なタンパク質を含みうる混合物の形で使用することができる。本発明の文脈内において使用できる該混合物およびその製造方法は国際出願PC T/FR92/01048に記載されている。本発明のセラミドは好ましくは植物由来である。本発明の医薬組成物は、セラミドを０．００５〜５重量％、好ましくは０．２〜２重量％含むことができる。使用するセラミドは、油相の少なくとも一部がセラミドおよび適切な他の脂質からなる水性エマルジョンの形であり得る。ＮＳＡＩはベンジダミン、ケトプロフェンまたはケトプロフェンリジンから好都合に選ばれる。本発明の医薬組成物は、ＮＳＡＩを０．００５〜１０重量％、好ましくは０．２５〜２．５重量％含むことができる。本発明の口腔で使用する医薬組成物は、歯磨き剤、口内洗浄剤またはゲルの形であり得る。ＮＳＡＩとセラミドに加えて、該医薬組成物は、ゲルには、アクリル酸ポリマー、カルボキシビニルポリマー、シリカ、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、脂肪酸エステル、硬パラフィン、エタノール、イソプロパノール、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、グリセロール、ヒドロキシエチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、歯磨き剤には、炭酸またはリン酸カルシウム、アルミナまたはシリカ水和物、カルボキシメチルセルロース、カラギネート、アルギネート、ラウリル硫酸ナトリウムまたはラウリルサルコシン酸ナトリウム、ポリグリセロール化ドデカンジオール、グリセロール、ソルビトール、およびポリエチレングリコール、口内洗浄剤にはグリセロールおよびエタノールのようなアルコールといった少なくとも１種の他の賦形剤を含むことができる。該医薬組成物は、場合により、通常のように、保存剤、乳化剤、緩衝塩類、甘味料、芳香剤および色素を含むこともできる。本発明の医薬組成物は、常法にしたがって製造することができる。下記実施例１〜３に示すように、セラミドは、炎症反応時の結合組織の破壊をもたらす酵素であり、ヒト白血球酵素に対する阻害活性を有する一方、他方で同一用量を単独で用いた場合にＮＳＡＩより大きい抗炎症効果を誘導する。したがって、本発明の医薬組成物は歯肉炎や歯周炎といった歯周障害の予防および治療に使用することができる。以下の実施例により本発明を例示する。該実施例は、すべて、小麦粉から抽出した、INOCOSM Laboratoriesから市販されている植物セラミドを用いて実施した。該植物セラミドは８０％グリコシルセラミド、１０％グリアジンおよび１０％無極性脂質を含む。実施例１特に歯周障害において生じる結合組織の破壊を予防するセラミドの役割について観察した。歯周障害は歯肉の炎症を特徴とする。炎症過程において放出されるタンパク質分解酵素は、プロテアーゼインヒビターで不活化されない場合は組織の破壊を引き起こし得る。特にエラスターゼは、炎症時に歯肉の細胞内マトリックスを分解する役割を有することが示されてきた。したがって、白血球のエラスターゼに対するセラミドが及ぼす効果を観察するためにin vitroおよびex vivoでの試験を行った。in vitro試験は、ヒト白血球エラスターゼを、植物セラミドと酵素／インヒビターコンプレックスの形成に必要な５分間インキュベーションし、次いで合成基質、すなわち、Ｎ−メトキシスクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐ−ニトロアニリドとインキュベーションすることからなった。該酵素は該合成基質の加水分解をもたらし、着色産物、すなわち、ｐ−ニトロアニリンを生じ、その出現を吸光度４１０ｎｍでモニターする。反応生成物が出現する速度を、植物セラミドの存在下または非存在下で、種々の基質およびセラミド濃度を用いて測定する。初期速度間の比により、該酵素の阻害％を、反応媒質中のセラミド濃度について決定することができる。得られた結果は、セラミドは白血球エラスターゼのインヒビターであり、５０％阻害を生じるセラミド濃度は３２．７μg/mLであることを示した。 ex-vivo試験は、ヒト皮膚バイオプシーとラット歯肉バイオプシーについて行った。すなわち、ラット歯肉とヒト歯肉は、結合組織の主成分であるコラーゲン繊維と共に、細胞外マトリックスの表面部分の前弾性繊維およびより深い下方に成熟弾性繊維を形成する皮膚の構造と適合性の構造を有する。８ｍｍ厚の切片のバイオプシーを４群に分け、これを以下の処理にかけた。処理１：３７℃のトリス−ＨＣｌ緩衝液２００μＬ（ｐＨ８）中で１２時間インキュベーション（陰性コントロール群）。処理２：白血球エラスターゼのみと３７℃で１２時間インキュベーション（コントロール群）。処理３：植物セラミド単独（１％溶液２００μＬ）を作用させ、次いでＰＢＳで２回洗浄し、最後にヒト白血球エラスターゼ（皮膚の場合は１０μg/mL溶液、および歯肉の場合は２μg/mL溶液を２００μＬ）とインキュベーションする。この処理により、基質／セラミドコンプレックスの形成について試験することができる。処理４：植物セラミドおよびヒト白血球エラスターゼを３０分間混合、次いで該混合物を切片と３７℃で１２時間インキュベーション。この処理により、酵素／セラミドコンプレックスの形成を試験することができる。次に、切片をすすぎ、７０％アルコールで固定し、弾性繊維を可視化するにはカテシン−フクシンで、またコラーゲン繊維を可視化するにはシリウスレッドで染色する。該繊維の占める容積部分のコンピュータ化イメージ分析にて測定することにより、測定すべき酵素の阻害％を得ることができる。処理２後の観察では、白血球エラスターゼは成熟弾性繊維のかなりの破壊をもたらした。処理４後に得られた結果から、該酵素に対する植物セラミドの阻害作用の結果として弾性繊維の９０％以上が保護されることが証明された。コラーゲン繊維は処理３および４後にも保護されていることが観察され、このことから、セラミドは、コラーゲン繊維およびヒト白血球エラスターゼと一体になって、同時に相互作用することも観察された。実施例２本発明の組成物の抗炎症効果は、それらの、in vitroにおけるスーパーオキサイドアニオンに対する抗フリーラジカル能を検討することにより試験された。すなわち、抗炎症過程において活性化する多形核細胞はフリーラジカルを産生することが知られている。炎症は、フリーラジカル形成を活性化するシクロオキシゲナーゼといった酵素の活性化を伴うことも知られている。したがって、抗炎症組成物の抗フリーラジカル作用は、その抗炎症能のよい指標である。本発明の組成物の抗フリーラジカル能を、被験生成物を反応媒質に加えたときのチトクロームＣの減少速度の低下を測定することにより検討した。スーパーオキサイドアニオンは、キサンチンに対するキサンチンオキシダーゼの作用により生じ、該アニオンを捕捉することができる分子の非存在下でチトクロームＣの減少をもたらす。チトクロームＣの減少の出現は分光光度計で５５０ｎｍにて追跡する。該試験を実施するために、ＮＳＡＩおよびセラミドを含むエマルジョンを製造した。以下の組成：植物セラミド０．５ｇレシチン０．５ｇキサンタンゴム０．３ｇＮＳＡＩ０．５ｇ水終量１００．０ｇである該エマルジョンを、勢いよく撹拌しながらセラミド、レシチン、ＮＳＡＩを加え、次いで撹拌しながら冷却した後オートクレーブにかけることにより製造した。次に、該エマルジョンを１／２および１／４希釈し、ＮＳＡＩ濃度を２．５ｍｇ／ｍＬおよび１．２５ｍｇ／ｍＬとした。それぞれケトプロフェン、ケトプロフェンリジン、およびベンジダミンを含むこの性状の組成物を、セラミドに加えて同じ成分を含む溶液を用いて得られた結果と比較した。得られた結果から、セラミドを含む組成物による抗フリーラジカル保護は、ＮＳＡＩおよびその濃度に依存して、いかなるセラミドも含まない組成物に比べて６〜２２％増加した。実施例３抗炎症活性の試験はin vivoでも実施された。この試験は成熟ラットの足に炎症を誘発し、該足の容積を測定することにより浮腫の発現をモニターすることからなる。実験条件は以下の通りである：体重２００〜２２０ｇのラットに対し、炎症物質を投与する１８時間前と１時間前に胃管栄養法により、被験ＮＳＡＩ生成物０．５ｍＬ容量を、セラミドと組み合わせるかまたは組み合わせずに投与する。コントロール群には０．９％塩化ナトリウム溶液を投与した。カラギーナンの生理食塩水溶液０．１ｍＬを皮下注射して炎症反応を誘導する。炎症が起きる前、炎症が起きて３０分後、次いで６時間目までは毎時間、以降は最終２４時間後に水銀プレチスモグラフを用いて足の容積を測定する。容積の変化を目盛りスケールにてｃｍで測定する。試験を行うには、ケトプロフェンリジン１および３ｍｇ／ｋｇを、０．５％セラミドと組み合わせるかまたは組み合わずに投与し、また、ケトプロフェン１ｍｇ／ｋｇを１％セラミドと組み合わせるかまたは組み合わせずに投与した。得られた結果は、セラミドと組み合わせてケトプロフェンリジン１および３ｍｇ／ｋｇを投与することにより、３時間段階から先、コントロールに比べて有意で、６時間まで持続する抗炎症効果が誘導された。ケトプロフェンリジン１ｍｇ／ｋｇをセラミドと組み合わせて投与すると、該化合物１および３ｍｇ／ｋｇをセラミドと組み合わせずに投与した場合に生じる抗炎症効果に比べて有意に大きな抗炎症効果を示す（４時間段階では、該化合物１および３ｍｇ／ｋｇをセラミドと組み合わせずに投与した群に比べて約６０％の減少）。セラミドと組み合わせるかまたは組み合わせずにケトプロフェン１ｍｇ／ｋｇを投与すると、４時間から先で、コントロールに比べて有意で、５時間まで持続する抗炎症効果が誘導される。ケトプロフェン１ｍｇ／ｋｇをセラミドと組み合わせて投与すると、ケトプロフェンの同量をセラミドと組み合わせずに投与したときに比べて効果が大きい（５時間段階では、セラミドを組み合わせずに該化合物で処理した群に比べて約１５％低下）。以下の実施例において％値は重量％である。実施例４：歯磨き剤ケトプロフェン２．００ｇラミド２．００ｇフルオリド（ＮａＦまたはＫＦ）１０００〜５０００ppm シリカ１８．００ｇ７０％ソルビトール２５．００ｇカルボキシメチルセルロース１．５０ｇラウリル硫酸ナトリウム０．７５ｇポリグリセロール化ドデカンジオール０．７５ｇパラベン＊０．３０ｇミント香味料１．２０ｇ水終量１００．００ｇ＊メチルパラ−ヒドロキシベンゾエートとプロピルパラ−ヒドロキシベンゾエートの５０／５０（重量／重量）混合物実施例５：歯磨き剤ベンジダミン１．００ｇセラミド０．５０ｇシリカ１５．００ｇグリセロール２０．００ｇナトリウムカラギネート２．００ｇラウリル硫酸ナトリウム１．５０ｇパラベン＊０．３０ｇミント香味料１．２０ｇ水終量１００．００ｇ＊メチルパラ−ヒドロキシベンゾエートとプロピルパラ−ヒドロキシベンゾエートの５０／５０（重量／重量）混合物実施例６：口内洗浄剤ケトプロフェン１．００ｇセラミド１．５０ｇアルコール５．００ｇ色素０．３０ｇミント香味料０．２０ｇ糖酸ナトリウム０．２０ｇ水終量１００．００ｍＬ実施例７：口内洗浄剤べンジダミン０．５０ｇセラミド０．５０ｇグリセロール２．００ｇアルコール５．００ｇＴｗｅｅｎ８００．５０ｇ糖酸ナトリウム０．１５ｇ香味料０．１２ｇ水終量１００．００ｍＬ実施例８：口腔用ゲルケトプロフェン３．００ｇセラミド２．００ｇグリセロール２０．００ｇヒドロキシエチルセルロース５．００ｇ香味料０．３０ｇ糖酸ナトリウム０．３０ｇ水終量１００．００ｇ実施例９：口腔用ゲルベンジダミン２．００ｇセラミド１．５０ｇ９５゜アルコール４０．００ｇグリセロール１０．００ｇカルボキシメチルセルロース５．００ｇ香味料０．３０ｇ水終量１００．００ｇ

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/416 Ａ６１Ｋ 31/415 ６０４ 31/70 31/70 35/78 35/78 Ａ 45/00 45/00

Claims

【特許請求の範囲】１．非ステロイド系抗炎症（ＮＳＡＩ）剤およびセラミドを含む口腔で使用する医薬組成物。２．ＮＳＡＩ剤がベンジダミン、ケトプロフェンまたはケトプロフェンリジンである請求項１に記載の組成物。３．セラミドが水性エマルジョンの形である請求項１または２に記載の組成物。４．セラミド０．００５〜５重量％を含む請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。５．セラミドが植物由来である請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。６．歯磨き剤、口内洗浄液またはゲルの形である請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。７．ＮＳＡＩ剤０．００５〜１０重量％を含む請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。８．歯肉炎および歯周炎のような歯周障害を予防および治療することを目的とする医薬を製造するための請求項１〜７のいずれかに記載の組成物の使用。