HUT51144A - Process for production of medical compositions containing peptid or protein active substances and alpha amin boric acid - Google Patents
Process for production of medical compositions containing peptid or protein active substances and alpha amin boric acid Download PDFInfo
- Publication number
- HUT51144A HUT51144A HU892373A HU237389A HUT51144A HU T51144 A HUT51144 A HU T51144A HU 892373 A HU892373 A HU 892373A HU 237389 A HU237389 A HU 237389A HU T51144 A HUT51144 A HU T51144A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- leucine
- peptide
- acid
- process according
- inhibitor
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
- A61K38/09—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH], i.e. Gonadotropin-releasing hormone [GnRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/33—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0043—Nose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
- A61K9/006—Oral mucosa, e.g. mucoadhesive forms, sublingual droplets; Buccal patches or films; Buccal sprays
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás peptid- vagy protein-hatóanyagot és /-amino-bórsav-származékokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására, közelebbről olyan készítmények előállítására, amelyek különböző nyálkahártyákon át felszívódva adagolhatok.
A peptideket és proteineket szokásosan parenterálisan adagolják, mivel más módon, például orálisan, nazálisán, szájüregen vagy hüvelyen át adagolva biológiai hozzáférhetőségük alacsony. A peptidnek vagy fehérjének az a hányada, amely sértetlenül abszorbeál ódik a szisztémás keringésbe attól függ, hogy a peptid vagy fehérje milyen mértékben áll ellen a peptidázok és proteázok lebontó hatásának, amely enzimek általában a beadás helyén előfordulnak, valamint a nyálkahártya gátakban is megtalálhatók.
A peptidázok általában felelősek a peptideknek állati szövetekben való lebomlásáért (Mammalian Proteases, és
Kiadók: A.J. Barratt 0. K. McDonald, II. kötet, 23-102).
Az enzim-gátakat igen hatékonynak tartják az orálisan beadott peptidek lebontásában, aminek következtében az orálisan adagolt peptidek biológiai hozzáférhetősége gyenge. Ugyanakkor ezt a gátat mérsékelten hatékonynak tartják az orálistól eltérő adagolásmódok esetén, ezért ezek az orálistól eltérő adagolási módok kedvezőek a peptidek biológiai hozzáférhetősége szempontjából. Például az egyik legkiterjedtebben tanulmányozott peptid, a leuprolid biológiai hozzáférhetőségét nazális, rektális, illetve hüvelyen át történő adagolás esetén háromszor, 35-ször, illetve 112-szer nagyobbnak találták, mint orális adagolás esetén. Ennek ellenére a pepiidnek a szisztémás keringésbe felszívódott hányada csak 0,1, 1,2, illetve
3,8 Va a beadagolt dózisnak. Másrészt viszont a leupro lid szubkután adagolásával a beadott dózisnak több mint 65 %-a abszorbeál ódik szisztémásán /Őkada és mtsai, 0. Pharm. Sci. 71, 1367-1371 (1982)7. Lehetséges, hogy ezek az eredmények az orr, a végbél és a hüvely nyálkahártyájában jelenlévő aminopeptidázok hatásának következményei /Stratford és mtsai, Int. J. of Pharm. 30, 73-82 (1985)7-
A 1euciπ-enkefa 1 innak az orrüregben való hidrolíziséről felteszik, hogy a nazálisán beadott peptidek alacsony biológiai hozzáférhetőségének egyik lehetséges tényezője /Á. Hussain, J. Faraj, A. Yukihiko és J. E. Truelove, Biochem. Biophys. Rés. Com. 133, 923 (1985)7.
Az átmeneti állapot analóg inhibitorai olyan molekulák, amelyek térszerkezete a szubsztrátéhoz hasonló annak átmeneti állapotában, de affinitásuk az enzim aktív helye iránt lényegesen nagyobb, mint a szubsztráté magáé. Ilyen inhibitorok a 4 537 773. és 4 499 082. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett amino-bórsav-származékok, amelyek bizonyos proteolitikus enzimek hatásos, reverzibilis inhibitorai. Ezek az amino-bórsav-származékok tetrahedrális borát fajtákat képeznek a trigonális bórsavból. A tetrahedrális borátok hasonlóak a peptideknek proteázok által való hidrolízise során létező átmeneti állapotához.
Szükséges az aminopeptidázokat gátló olyan hatékony inhibitorok alkalmazása, amelyek a farmakológiailag aktív peptidek és proteinek nazális, szájüregi, rektális és intramuszkuláris adagolása esetén javítják ezek szállítását. Az amino-bórsav-származékok kielégítik ezt az igényt.
A találmány szerint előállított gyógyászati készítmények lényegében egy gyógyászati célra alkalmas hordozóanyagból, egy proteinből vagy peptidből, és adott esetben egy felszívódást fokozó anyagból, valamint egy (I) általános képletű ‘t-amino-bórsav-származékból tevődnek össze. Az (I) általános képletben
- HW jelentése ásványisav, szulfonsav, alkánsav vagy perfluor-alkánsav;
- Y jelentése egy olyan dihidroxi-vegyületből szár- mazó csoport, amelyben legalább két hidroxilcsoport van, amelyeket egymástól legalább két összekapcsolódó lánc- vagy gyűrű-atom választ el egymástól, az említett lánc vagy gyűrű szénatomokból és adott esetben egy nitrogén, kén vagy oxigén heteroatomból állnak,
- R jelentése alkilcsoport vagy -CH2RX;
2
- R jelentése -XR , arilcsoport vagy egy vagy több alkilcsoporttal helyettesített arilcsoport;
- X jelentése oxigén- vagy kénatom;
- R jelentése hidrogénatom, alkilcsoport vagy
-Si R 3R4R 5;
• · · · 4 • · 4 · ·· « ,
- 5 3 4 5 — R , R és R jelentése egymástól függetlenül alkilcsoport, arilcsoport vagy egy vagy több alkoxicsoporttal helyettesített arilcsoport.
Az aminopeptidázok ezen hatékony inhibitorai a nazálisán, szájüregen át, rektálisan és intramuszkulárisan beadott, farmakológiailag aktív peptidek és proteinek transzportját stabilizálják és javítják.
A következőkben a találmányt részletesen ismertetjük.
1) A protein vagy peptid kifejezésen kifejezetten azokat a peptideket értjük, amelyek proteázok, különösen aminopeptidázok hatására érzékenyek, ezek hatására hídrólizálnak. Előnyös proteinek vagy peptidek a leucin-enkefalin , LH-RH, Tyr-Phe-Met-Arg-Phe-NH^, Tyr-Bradykinin és Thymopoietin II (TP5).
2) Az abszorpció fokozó kifejezésen olyan anyagokat értünk, amelyek fokozzák a proteinek és peptidek felvételét, és felhasználhatók a hatóanyagok behatolási jellemzőinek megváltoztatására. Előnyös abszorpció fokozok a nátrium-kólát, a nátrium-taurokolát, a nátrium-glikokolát, a nátrium-dezoxikolát, a nátrium-taurodezoxikolát és a nátrium-gl ikodezoxikol át. Más, ezekkel' ekvivalens abszorpció fokozó anyagok szakember számára ismertek .
3) A gyógyászati célra alkalmas hordozóanyag • · · · • ·«· · • · · · · •«·· ·· ··
- 6 megjelölésen bármely, nemtoxikus, gyógyászati célra alkalmas hordozóanyagot értünk. Megfelelő hordozóanyagok például a kapszulák, tabletták, kúpok, orr-permetek, nyálkahártya tapaszok és méhen belüli eszközök, folyékony oldatok vagy szuszpenziók előállítására szokásosan alkalmazott hordozóanyagok. Oldhatók a komponensek külön-külön vagy együtt injekciós célra szokásosan alkalmazott hordozóanyagokban is. A készítmények szakember számára ismert módon formálhatók. Egyéb adagolási módokhoz megfelelő készítmények szakember számára ismert, szokásosan alkalmazott nemtoxikus összetevőkből formálhatók. Előnyös, ha olyan hordozóanyagot alkalmazunk, amely nyálkahártyán abszorbeálódva történő adagolásra alkalmas.
4) Az X-amino-bórsav-származék megjelölésen minden, a 4 499 082. és 4 537 773. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett származékot értünk. Előnyösek a 4 537 773. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentés 5., 13. és 21. példájában leírt származékok.
A találmány szerinti eljárásban hasznos t<-amino-bórsav-származékok nanomoláris - mikromoláris koncentrácókban jelentős mértékben csökkentik a peptidek és fehérjék, például leucin-enkefalin, LH-RH, Tyr-Phe-Met-Arg-Phe-Nl·^ és Tyr-Bradykinin hidrolízisét, míg az egyéb ismert inhibitorok, például a Bestatin és Puromycin csak jóval nagyobb koncentrációban fejtenek ki hasonló gátló aktivitást.
·· ·· ·«·· • · · ♦ · · · · • · · · · ··· ·· ··
Amint azt az előzőekben már említettük, a peptidek és proteinek /-amino-bórsav-származékok jelenlétében való transzportja néhány különböző úton történhet. A származékot a peptid vagy fehérje proteázok által való hidrolízisét gátló hatásos mennyiségben, valamint a különféle nyálkahártyákon át való biológiai hozzáférhetőség fokozására alkalmas mennyiségben használjuk.
A következő vizsgálatokban a peptidekben
X-amino-bórsav-származék alkalmazása nélkül és ennek, valamint kívánt esetben abszorpciót fokozó anyagnak az alkalmazásával való transzportját vizsgáljuk oldatok alkalmazásával. A nazális adagolásra szolgáló készítmények általában olyan folyékony készítmények, amelyek a peptideket hidrolízist gátló mennyiségű inhibitorral és kívánt esetben abszorpciót fokozó anyaggal együtt tartalmazzák. Ezek a készítmények jellemzően úgy készülnek, hogy mintegy 0,1 ml folyadék, amelyet adagolt permetként adunk be, tartalmazzon valamennyi összetevőt.
Az összetevők aránya általában 0,0001 - 10 tömeg% peptid vagy protein, 0-10 tömegé hatásfokozó anyag, 0,00001 - 5 % <<-amino-bórsav-származék inhibitor, 0 - 10 % tartósítószer, a további mennyiséget desztillált víz, sóoldat vagy puffer teszi ki.
A szájüregben alkalmazandó jellemző készítmények 0,0001 - 10 tömeg% pepiidet vagy proteint, 0-10 tömeg% abszorpciót elősegítő anyagot, 0,00001 - 5 tömeg% inhibitort, 0-10 tömeg% tartósítószert, 0 - 99,9 tömegé • · ·· ··· ·
- 8 nemtoxikus hordozóanyagot, 0 - 20 % szuszpendálószert tartalmaznak, és 100 %-ra való kiegészítésül polimer mátrixot és/vagy nyálkahártyához tapadó anyagot tartalmaznak még.
A peptid vagy protein hatóanyagot, inhibitort és adott esetben abszorpciót fokozó anyagot tartalmazó jellemző orális készítmények tartalmazhatnak még hígítóanyagot, granulálást elősegítő anyagot, tartósítószert, kötőanyagot, ízesítőanyagot, színezőanyagot vagy bevonóanyagot .
Ismert eljárással és ismert segédanyagok előállításával szakember számára ismert módon más készítmények, például kúpok és méhen belüli eszközök is előállíthatok .
A találmányt a következőkben példákban mutatjuk be.
A találmány szerint előállított -amino-bórsav-származék inhibitorok hatékonyságának vizsgálata céljára állatkísérletet végzünk /Á. Hussain, J. Furaj, A. Yukihiko és J. E. Truelove, Biochem. Biophys. Rés. Com. 133, 923 (1985)7, hogy a proteinek és peptidek in situ és in vivő in situ patkányok orrüregében való bomlását mérjük.
A vizsgálatokat mintegy 300 g testtömegű Sprague-Dawley patkányokon végezzük. Minden patkányt 50 mg/kg nátrium-pentobarbitollal anesztetizálunk. Nyakukon bemetszést végzünk, és légcsövükbe PE 240 csőből kanült helyezünk. Az in situ vizsgálatokhoz a nyelőcsövön keresztül az orrüreg hátsó részébe egy másik csövet is behelye«« • · ·· • * · « • «·· · • « · 9 · • ·9 · ·· ·«
- 9 zünk, amelyen át a perfúziós oldatot vezetjük be. Az orr-szájpadlást tapasszal lezárjuk, hogy megelőzzük a perfúziós oldatnak az orrból a szájüregbe való lecsepegését. Az in vivő in situ vizsgálatokhoz a nyelőcsőbe egyik végén zárt PE 240 csőből álló kanült helyezünk. A cső zárt végét az orrjárat hátulsó végéhez nyomjuk és ott rögzítjük. Az orr-szájpadlást tapasszal zárjuk, hogy megakadályozzuk a perfúziós oldatnak az orrból a szájüregbe való átjutását. A patkányok egyik orrlyukába 50 /ul peptidoldatot adunk, amelyet két formában alkalmazunk, a kontroll oldat nem tartalmaz hozzáadott inhibitort, a vizsgálandó oldat a példákban megadott mennyiségű inhibitort tartalmaz. A peptid beadagolására szolgáló oldat 0,1 mól/literes, pH = 7,4-es foszfátpuffer. Adott időközönként (egy időpontban egy patkánynál) a hatóanyagot a másik orrlyukon keresztül 10 ml 0,1 mól/literes pH = 3,8-as foszfátpuffér alkalmazásával, perisztaltikus pumpa használatával kimossuk. A mosófolyadékot ezután ml-es mérőlombikba töltjük, és azonos pufferrel 10 ml térfogatra feltöltjük, majd peptidtartalmát nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással megmérjük.
Az in vivő in situ orrban való vizsgálatokhoz alkalmazott készítmények peptidet, inhibitort, 0,1 mól/literes, pH = 7,4-es foszfátpuffért, tisztított vizet és kívánt esetben abszorpciót fokozó anyagot tartalmaznak. A konkrét készítményeket a példáknál mindenütt megadjuk .
Analitikai módszerek: A leucin-enkefalin és nagyobb metabolitjai vizsgálatára alikvot mintákat ve·· ···« • · · · • · ·· · • ••e *«·* *»♦*
-löszünk, 200 yul 0,1 mól/literes, pH - 2,3-as citromsavval meghígítjuk a hidrolízis leállítására, és a mintákat elemezzük (az in vivő in situ vizsgálatok esetén a mosófolyadékokat közvetlenül kinyerésük állapotában injektáljuk be). A nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálatot
4,6 x 250 mm-es 0θ oszlopon végezzük. Az alkalmazott mozgó fázis 0,1 mól/literes NaH2P04, foszforsav és acetonitril 916:5:275 tömegarányú elegye, a mozgó fázis áramlási sebessége 1,7 ml/perc. UV detektálást végzünk 210 nm-en. A leucin-enkefalin és legnagyobb bomlásterméke, a Des-Tyr-1eucin-enkefalin retenciós ideje 7,3, illetve
4,8 perc. Az eredményeket az orr perfúziós oldatban megmaradó leucin enkefalin tömegVos mennyiségében adjuk meg a 0 időpontban aktuális koncentrációt 100 %-nak tekintve.
1. Példa
A vizsgálathoz 10 ml 0,1 mól/literes pH = 7,4-es foszfátpuffér oldatot alkalmazunk, amely pepiidként 100 /umól/liter leucin-enkefalint tartalmaz 0,1 yumól/liter
3-metil-l-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolán-2-il)-1-butamin-trif1uor-ecetsav-só (bór-leucin) inhibitor jelenlétében vagy távol1 étében. Ezt az oldatot használjuk az előzőekben leírt patkányok nazális perfúziós kezelésére .
A fenti peptidoldat 10 ml-es adagját köpennyel ellátott vízhűtéses tartályba helyezzük, 37 °C hőmérsék• ·
- 11 létén tartjuk és a patkányok orrüregén keresztül áramoltatjuk perisztaltikus pumpa alkalmazásával. A perfúziós oldatot az orrüregen át vezetve az orrlyukon kivezetjük, egy tölcsérre vezetjük, és visszavisszük a vízköpenyes tartályba. A perfúziós oldatot az előzőekben leírt analitikai eljárásokkal elemezzük.
A vizsgálat során kapott eredményeinket az I. táblázatban mutatjuk be.
• ·
c •f—ι ω Ώ ω r-d
I Ρ Ό JD
| C | ||
| Ρ | •rd | |
| >χ | r-d | |
| 1— | 1 | ω |
| 1 | C | 9-d |
| Ν | •rd | ω |
| (D | ω | |
| Q | □ | C |
| ω | ω | |
| ο\° | (-4 | ι |
ω Ό Ό Ο
Ν □_ '(D
C I τΗ
| C | r—1 | |
| •Γ-1 | CÜ | |
| Ο | 9-4 | Ό |
| Ζ3 | ω | Τ3 |
| ω | ω | |
| __ι | C | ί-4 |
| ω | ω | |
| ο\° | ι | Ε |
CZ f-i ·Ή
| >χ | <~Η | ω | |
| 1— | I | ro | χω |
| I | C | q-< | “Ο |
| Ν | •ι—1 | ω | ο |
| ω | ω | jd | Ν |
| α | ο | c | Ο. |
| ω | (D | χω | |
| ο\° | —1 | 1 |
I
| ι | C | |
| C | •rd | |
| •rd | ι—4 | |
| ω | CÜ | 'CD |
| 9-1 | Ο | |
| ω | ω | ro |
| r-d | t-l | |
| c | ro | |
| ο\° | ω | ε |
| Ο | ΟΙ | μχ | χο | ΟΙ | ΟΙ | Γ'Χ | UX |
| ο | ο | ο | ο | ο | ο | ο | ο |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | +1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| ο | ΧΟ | οχ | Γ'Χ | <3· | σχ | ||
| ο | Ο | ο | r—l | r—Η | Γ—1 | ΟΙ | ΓΟ |
| ο | UX | ο | Ο- | γο | UX | χο | ux |
| ο | <—d | ι^χ | r-d | κχ | ΟΙ | ΟΙ | Γ-Χ |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | -μ | + 1 | + 1 | + 1 |
| ο | χο | ux | <± | Γ- | 00 | CO | χο |
| CD | χο | κχ | χο | ΟΙ | <—4 | CO | UX |
| ο | σχ | σχ | σχ | σχ | σχ | CO | CO |
| Ο | Γ* | c-d | σχ | <3- | 00 | σχ | rx |
| ο | ο | ι—1 | οι | χο | UX | rx | |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| ο | Γ- | UX | ο | κχ | ο | 03 | <3· |
| ο | ο- | οι | rx | r-d | r-d | co | |
| r-d | οι | ΓΟ | <± | UX | ux |
| CD | σχ | ux | co | χο | r- | r- | «—1 |
| •χ | •χ | ex | •χ | rx | •X | •X | |
| O | o | t—d | Xű | o- | XO | xo | o- |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | +1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| 0 | rx | ux | σχ | 0 | <3· | 0 | ux |
| •X | «> | ex | *> | rx | *X | •x | ex |
| 0 | <d* | 0 | σχ | X0 | rx | CD | «—d |
| 0 | σχ | σχ | r- | XO | ux | Ol |
| O | UX | 0 1—1 | 0 Ol | 0 rx | ux | 0 XO | 0 σχ |
| 1—1 | Ol | ro | ux | XO | r- | oo |
Inhibitor nélkül mintegy 58 % bomlástermék, Dez-Tyr-leucin-enkefalin képződik a perfúziós oldatnak az orron 90 percen át való áramoltatása során. Másrészt, az inhibitor jelenlétében azonos körülmények között csak mintegy 3 % bomlástermék képződik.
2. Példa ml 0,1 mól/literes pH - 7,4-es foszfátpuffért, amely 100 yumól/liter leucin-enkefalint tartalmaz, és emellett 0,01, 0,03 vagy 0,1 /umól/liter bór-leucin inhibitort tartalmaz vagy inhibitor nélküli, az 1. példában leírt módon patkányoknál nazális perfúziós oldatként alkalmazunk. A vizsgálat végén az oldatot nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással vizsgálva meghatározzuk a 1eucin-enkefalin bomlástermékeit. Eredményeinket a II. táblázatban ismertetjük.
« · * ·
-H ro
N vro
XD 'ro cd ω 'CD c o
CD □ -P rH •h:z)
CD ι—I
C'CD •HC ro
| ι— | O | LA | o | r- | A | LA | XO | LA | |||
| ι- | >> | c | •χ | •χ | *x | rx | <x | rx | |||
| Ε | CD | t—1 | Ή | o | rH | A | r------1 | A | 04 | 04 | A |
| ro | Ό | CD | |||||||||
| O | > | E | ZD | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + | | +: |
| «Η | Ώ | CD | |||||||||
| 'x-' | E | H | o | XO | la | <d· | r- | co | CO | Xű | |
| CD | 1 | <X | <χ | ·> | ·> | •x | rx | rx | «X. | ||
| +-> | _Q | rH | f-l | o | xű | A | XO | OJ | rH | CO | LA |
| ro | 'CD | r. | Ό | o | Ox | σχ | σχ | σχ | σχ | co | co · |
| *0 | +> | o | XD | rH | |||||||
| ι—I | 'CD | ||||||||||
| O | r—1 | ||||||||||
| C | |||||||||||
| CD | CD | ||||||||||
| Ό | rH | ||||||||||
| •H | CD | ||||||||||
| N | Ό | ||||||||||
| 'D | r·-H | ||||||||||
| q-i | E | \ | CD | r- | XO | 04 | <d“ | A | <± | O | |
| f-4 | •H | ι—1 | C | *> | •x | ·> | ·> | rx | rx | ||
| CD | cd | 'O | •1—1 | CD | i—1 | rH | 04 | rH | rH | H | rH |
| CL | ZJ | E | CD | + 1 | |||||||
| 1 | ω | ZJ | D | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + ! | |
| ¢-4 | f—1 | CD | |||||||||
| ¢-1 | l | rH | CD | rH | xo | co | A | Γ- | LA | σχ | |
| O | P | FA | 1 | •χ | •χ | rx | rx | ·> | •x | •X | «X |
| Ό | O | ¢-1 | O | a | r—1 | CO | LA | «—1 | 04 | ||
| 'ZD | _D | •x | Ό | o | Ox | σχ | σχ | CD | CO | 00 | Γ- |
| E | o | XD | H | ||||||||
| r~H | |||||||||||
| ro | CD | ||||||||||
| 4-> | -H | ||||||||||
| P | •H | ||||||||||
| ro | rH | ||||||||||
| 4-» 1 | r—1 | ι—1 | |||||||||
| e | Ό | \ | O | LA | A | σχ | CD | o | ΧΟ | ||
| •rH | E | rH | C | •x | •x | *χ | ·> | •χ | rx | rx | |
| r—1 | ZD | Ό | •H | CD | a | LA | Ol | Cxl | OJ | rH | |
| ro | E | CD | + 1 | ||||||||
| 4-H | ZJ | Z) | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + ; | |||
| (D | rH | CD | |||||||||
| rH | CD | xo | 1------1 | H | σχ | OJ | 04 | ||||
| c | CD | rH | 1 | *χ | <x | •X | *χ | -x | •x | ||
| CD | o | Ui | O | o | σχ | σχ | σχ | xo | |||
| 1 | CD | »x | Ό | CD | σχ | co | Γ- | r- | XO | LA | |
| c | 'CD | o | XD | r—1 | |||||||
| •r—l | |||||||||||
| ω | ΓΑ | ||||||||||
| Ώ | O | CD | σχ | A | oo | χο | r- | θ' | rH | ||
| CD | (-4 | •χ | ·> | •X | *x | rx | <X | rx | rx | ||
| j—1 | o | O | CD | CD | rH | xo | a | XD | XO | θ' | |
| +-> | rH | + 1 | |||||||||
| P | •H | :zj | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + ; | ||
| CD | t—1 | JD | |||||||||
| 4-> | o | •H | ι—1 | CZD | A | LA | σχ | ο | o | XO | |
| •H | »x | XZ | '(D | rx | <x | •X | •x | •X | •X | rx | |
| r—1 | CD | E | E | CD | O | σχ | χο | A | o | «Η | |
| \ | 1—1 | O | σχ | σχ | xo | LA | <fr | 04 | |||
| rH | rH | ||||||||||
| Ό | |||||||||||
| E | |||||||||||
| □ | |||||||||||
| CD | CD | ||||||||||
| CD | ¢-1 | o | LA | o | o | o | LA | o | O | ||
| rH | *CD | CD | rH | 04 | A | xo | σχ | ||||
| XD | CL | ||||||||||
| 1—1 |
Az eredmények azt mutatják, hogy a bór-leucin inhibitor növekvő koncentrációi mellett a 1eucin-enkefalin bomlása csökken, nagyobb 1eucin-enkefalin koncentrációk találhatók a perfúziós oldatban az idő függvényében vizsgálva az értékeket.
3. Példa
A vizsgálatban 0,1 mól/literes pH = 7,4-es foszfátpuffért alkalmazunk, amely 100 /umól/liter leucin-enkefalint tartalmaz, és emellett 0,1 yumól/liter bór-leucint vagy 0,1 /umól/liter 4,4,5,5-tetrametil-<X.-(l-metil-etil)-1,3,2-dioxo-borolán-2-metánamin-trifluor-ecetsav-sót (bór-valin) vagy 0,1 /umól/liter, 7,4,4,5,5-pentametil-1,3,2-dioxaborolán-2-metánamin-trifluor-ecetsav-sót (bór-alanin) tartalmaz, vagy inhibitor nélküli.
Ezeket az oldatokat az 1. példában leírt módon patkányokban nazális perfúziós oldatként alkalmazzuk. A leucin-enkefalin bomlástermékeinek vizsgálatát az 1. példában leírt módon nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással végezzük. Eredményeinket a III. táblázatban ismertetjük.
100 /umól/liter 1eucin-enkefalin in situ nazális lebomlása 10 ml nazális perfúziós
| o | o | rH | CXJ | <—1 | <- | r-· | •X |
| «X | rx | rx | ·> | <X | •χ | CXJ | |
| o | rx | (XJ | CXJ | rx | <± | XO | (—d |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| o | σχ | l/X | r—l | UX | σχ | ||
| •X | rx | ·> | •X | rx | •X | *> | rx |
| o | r—l | co | <fr | r* | σχ | XŰ | |
| o | σχ | σχ | 00 | oo | r- | χο | ux |
| o | σχ | ux | XO | ux | ux | rX | |
| o | ι—1 | <—1 | ι—1 | ι—1 | CXJ | CXJ | |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| o | rx | Γ- | co | XO | rH | CXJ | ΓΧ |
| o | XO | UX | rH | σχ | xo | oo | |
| o | σχ | σχ | σχ | σχ | 00 | CD | r- |
| o | ux | o | r* | rx | ux | χο | ux |
| •X | *X | «X | r> | r | <x | •X | |
| o | rH | rx | rH | rx | CXJ | CXJ | rx |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| o | XŰ | UX | r- | 00 | co | XO | |
| rs | <x | rx | •X | •X | •X | rx | r. |
| o | XO | rx | XO | Cxl | «-Η | 00 | UX |
| o | σχ | σχ | σχ | σχ | σχ | oo | CD |
| o | σχ | ux | 00 | XO | r- | r- | <—1 |
| o | o | rH | XO | r- | xo | XO | Γ' |
| + 1 | + 1 | + 1 | 4-1 | + 1 | + 1 | 4-1 | 4-1 |
| o | rx | UX | σχ | o | <fr | O | XO |
| o | <± | o | σχ | χο | rx | o | ι—1 |
| o | σχ | σχ | r- | XO | ux | CXJ |
| o | ux | o | o | o | ux | o | o |
| rH | CXJ | rx | XO | σχ |
A táblázatban három különböző ¢4-amino-bórsav-származék ekvimoláris koncentrációjának leucin-enkefalin lebomlása ellen kifejtett gátló hatását hasonlítjuk össze. A bór-leucin és bór-valin inhibitorok jobb hatásúak, mint a bór-alanin.
4. Példa
0,1 mól/literes, pH = 7,4-es foszfátpuffér oldatot, amely 100 yumól/liter leucin-enkefalint tartalmaz, és emellett ismert inhibitorokat, így 10 yumól/liter bestatint vagy 100 yumól/liter puromicint, valamint vizsgált inhibitorként 0,1 yumól/liter bór-leucint patkányokban nazális perfúziós oldatként alkalmazunk az 1. példában leírt módon, majd a bomlástermékeket nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással vizsgáljuk ugyancsak az 1. példában leírt módon.
A vizsgálat eredményeit a IV. táblázatban ismertetjük .
c ω _D -Η ro TD r~Η
Ο
C •Γ—I ω ε ο
ZJ Q.
| ι—1 | ο | σχ | ο | Γ- | Γ*Χ | σχ | χο | LíX | |
| C | ·> | ·> | •χ | •X | ex | •X | <χ | ||
| γ—I | •ι-1 | ο | Γ·Η | γα | Γ—1 | ΓΛ | OJ | οι | γλ |
| Ό | ω | ||||||||
| ε | ZJ | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| Σ3 | ω | ||||||||
| . γ—Η | Ο | ΧΟ | UX | <± | Γ- | CO | 00 | Γ- | |
| 1 | ο | ex | ex | •χ | <χ | •χ | •χ | •χ | |
| ι—1 | Ν | ο | ΧΟ | Γ^Χ | ΧΟ | CXJ | ι—I | 00 | σχ |
| •χ | Ό | ο | σχ | σχ | σχ | σχ | σχ | οο | οο |
| ο | η | Γ—1 | |||||||
| γ—1 | ο | <± | «~ι | οι | OJ | χο | Γ- | ||
| ex | ** | ex | ex | <χ | •X | •χ | •χ | ||
| r—1 | C | Ο | OJ | Γ^Χ | <fr | rx | OJ | σχ | χο |
| Ό | •rH | ||||||||
| Ε | Ο | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| Ζ3 | >> | ||||||||
| Ε | ο | Γ-' | Γ'Χ | <Γ | σχ | χο | σχ | σχ | |
| Ο | e\ | ex | ♦X | •X | ex | «χ | <χ | ex | |
| Ο | C-ι | ο | ΧΟ | γ—| | OJ | 00 | ΓΧ | Γ'Χ | 00 |
| Ο | ο | σχ | σχ | 00 | γ*- | Γ*· | χο | <± | |
| <—1 | ο_ | Γ—I | |||||||
| ο | ΧΟ | Γ- | rx | CD | Γ^Χ | Γ- | οο | ||
| <-1 | <Χ | ** | ex | •χ | ex | <χ | ex | •χ | |
| ο | r-H | r—| | Γ'Χ | rx | σχ | χο | 00 | ||
| r—1 | C | ||||||||
| Ό | •(Η | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| Ε | Ή | ||||||||
| CÜ | ο | Γ-Χ | r- | ο | XŰ | ο | r*x | rx | |
| \ +-> | |||||||||
| tn | ο | r* | ο | χο | σχ | ΟΙ | r- | ||
| ο | CD | ο | σχ | σχ | σχ | co | r- | Γ- | σχ |
| t—ι | .Q | t—1 | |||||||
| ο | σχ | UX | CO | KO | ο- | ο | |||
| »χ | •X | •X | •X | •X | *χ | ex | |||
| ο | Ο | <—ι | ΧΟ | Γ- | χο | χο | Γ- | ||
| ο | |||||||||
| -Η | ι-Η | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| •γΗ | :zj | ||||||||
| .D | ο | OJ | σχ | σχ | ο | ο | UX | ||
| ··—1 | ι—1 | ex | •X | ο | •X | *x | •X | •χ | *χ |
| JZ | 'CD | ο | ο | σχ | χο | Γ^Χ | Ο | γ—( | |
| C | C | ο | σχ | σχ | Γ- | χο | σχ | 04 | |
| 1—1 | ι-—1 | ||||||||
| ω | |||||||||
| í-l | ο | υχ | ο | ο | ο | σχ | ο | Ο | |
| ω | γ- | CXI | Γ'Χ | χο | σχ |
Ο Q.
• · • · « · ···· ·· ·a
- 19 A fenti táblázatban leucin-enkefalin-peptid in situ lebomlását hasonlítjuk össze inhibitor alkalmazása nélkül, és három különböző, különböző koncentrációban adagolt inhibitor jelenlétében. A lebomlás gátlásának sorrendje a különféle inhibitorok alkalmazása esetén a következő: bór-leucin ) bestatin / puromycin. A bór-leucin gátló hatása jobb, mint a bestatiné, holott koncentrációja utóbbinak csak századrésze. Ez egyértelműen megmutatja a bór-1eucinnak az ismert inhibitorokhoz viszonyított jelentős hatékonyságát.
5. Példa
0,1 mól/1iteres, pH = 7,4-es, 35 /umól/liter tartalmazó foszfátpuffert
LH-RH-t (3-10 fragmens)/alkalmazunk inhibitor nélkül, vagy 0,46 yumól/liter bór-leucin inhibitor jelenlétében patkányok kezelésére, amelyet az 1. példa szerint végzünk. A perfúziós oldatot az 1. példában leírt módon nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással vizsgáljuk, azzal az eltéréssel, hogy mozgó fázisként az alábbi összetételű elegyet alkalmazzuk: 0,1 mól/1 Ν3Η2Ρ0^:H^PO^:CH^CN (916:5:240), a mozgó fázis áramlási sebessége 1,7 ml/perc, az elemzést 210 nm-nél UV-ben végezzük. Eredményeinket az V. táblázatban ismertetjük.
• ·
- 20 V. Táblázat yumól/l LH-RH (3-10 fragmens) eltűnése nazális perfúziós oldatban (10 ml) 0,46 /Umól/liter bór-leucin jelenlétében vagy anélkül
| Idő | Bór-leucin | 0,46 /Umól/1 |
| (perc) | nélkül | bór-leucin |
| 0 | 100,0 | 100,0 |
| 5 | 96,0 | 96,7 |
| 10 | 93,8 | 97,5 |
| 20 | 91,6 | 95,5 |
| 30 | 85,3 | 96,5 |
| 45 | 70,4 | 95,8 |
| 60 | 61,3 | 91,9 |
| 90 | 45,0 | 92,9 |
| 120 | 24,4 | 86,4 |
Az LH-RH eltűnése lényegesen gyorsabb inhibitor nélkül, mint inhibitor jelenlétében. A bór-1eucinnak igen kis koncentrációban való jelenléte a vegyület %-os megmaradását eredményezi, míg inhibitor nélkül csak 24 % marad meg.
6. Példa
100 yumól/liter Tyr-Phe-Met-Arg-Phe-NH2-t tartalmazó, 0,1 mól/literes, pH - 7,4-es foszfátpuffért adunk nazálisán patkányoknak az 1. példában leírt módon.
··♦· • · · · • · ·· · • · · · · «<·· ·· ··
- 21 A peptidet inhibitor nélkül vagy 2 /umól/liter bór-leucin inhibitor jelenlétében alkalmazzuk. A perfúziós oldatot nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással vizsgáljuk az 1. példában leírt módon, azzal az eltéréssel, hogy mozgó fázisként az alábbi összetételű oldatot alkalmazzuk: 0,1 mól/1 NaH^PO^:H^PO^:CH^CN (200:1:60), valamint hogy a mozgó fázist 1,4 ml/perc áramlási sebességgel használjuk. A detektálást UV-ben 210 nm-en végezzük.
Eredményenket a VI. táblázatban ismertetjük.
VI. Táblázat
100 yumól/liter Tyr-Phe-Arg-Phe-NP^ in situ nazális eltűnése nazális perfúziós oldatban (10 ml) inhibitor nélkül és yumól/liter bór-leucin inhibitor jelenlétében
| Idő (perc) | Bór-leucin nélkül | 2 /Umól/liter bór-leucin |
| 0 | 100,0 | 100,0 |
| 5 | 85,4 | 93,8 |
| 10 | 80,7 | |
| 20 | 71,1 | 84,3 |
| 30 | 59,5 | 78,8 |
| 45 | 44,4 | 70,5 |
| 60 | 30,4 | 63,3 |
| 90 | 10,6 | 49,5 |
| 120 | 2,8 | 32,9 |
• ·
- 22 Az eredmények azt mutatják, hogy 2 yumól/liter bór-leucin inhibitor alkalmazása mellett a peptid 33 %-a marad sértetlen, míg inhibitor nélkül csak 3 %.
7. Példa
Patkányonként
100 /ug
1eucin-enkefalint tartalmazó 0,1 mól/literes, pH - 7,4-es foszfátpuffért adunk be patkányoknak 0,05 % nátrium-kólát behatolást elősegí tő adalék alkalmazásával. A peptidet és a behatolást és fokozó anyagot inhibitor nélkül/bór-leucin inhibitor
0,054 /ug/patkány dózisban való alkalmazásával alkalmazzuk. A vizsgálati modell az 1. példában megadott, a vizsgálandó oldatok beadása és a mintavételi rend kivé telével. A beadagolást úgy végezzük, hogy a patkány egyik orrlyukába 50 yul peptidoldatot adunk, amely inhibitor nélküli vagy inhibitort tartalmaz. A peptidoldatot 50 /Ul-es Hamilton fecskendővel adagoljuk, amelynek végéhez 1/2 cm PE-50 cső van erősítve. Adott időközönként (egy időpontban egy patkánynál) a gyógyszert a másik orrlyukon át kimossuk 10 ml 0,1 mól/literes pH - 3,8-as puffer alkalmazásával perisztaltikus pumpa segítségével. Az orrból kimosott oldatot 10 ml-es mérőlombikba helyezzük, azonos pufferrel 10 ml-re feltöltjük, és a peptidet az
1. példában leírt módon elemezzük.
A kapott eredményeket a VII. táblázatban ismer tetjük.
• ···
| f-l | ||
| í-l | ο | |
| >> | -Ρ | ι—1 |
| Κ- | •ι—1 | :o |
| ι | _Q | |
| N | •ι—1 | ι-1 |
| ω | _£Σ | CD |
| α | c | C |
| O | ||
| c | •H | r—1 |
| LlJ | ··—1 | :=j |
| JD | ||
| =J | •1—1 | r—l |
| CD | _c | 'CD |
| c | C |
| r* | r—l | ||
| o | o | <—1 | o |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| xo | XO | OX | Cxl |
| o | r—l | Γ—I | CM |
CM CO r*· <—ι
LA
| + 1 | + 1 | + 1 |
| IA | ||
| r—l | <± | |
| CTX | r* | xű |
XO
| Oxl | 03 | |
| *χ | o | |
| LA | O | |
| r-H | «—1 |
| + 1 | + 1 | + 1 |
| «—1 | co | |
| rx | •X | «χ |
| 00 | co | 0x1 |
| ΓΑ | CM | r~d |
| r- | Cxl | «—1 | CD | Cxl |
| rx | rx | •X | •X | rx |
| CM | r-l | γα | CM | |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| o | LA | o | LA | 0X |
| rx | rx | rx | rx | rx |
| Γ- | !------1 | r—l | XŰ | Γ- |
| r—l | 0x1 | 0x1 | «—1 |
| Ox | CxJ | CM | CM | CM | |
| •X | rx | rx | rx | rx | rx |
| XO | LA | σχ | σχ | XO | t—1 |
| + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 | + 1 |
| r— | o | A- | co | XO | A |
| rx | <x | rx | »x | •x | rx |
| CxJ | •cf | σχ | r- | CM | |
| σχ | LA | A | r—l |
| O | LA | O | o | O | O |
| r—l | CM | A | LA |
·· ···« • · ·· · • · · · · • ·· · ·· ··
- 24 Leucin-enkefalin in vivő, in situ eltűnését és legnagyobb métából ltjának, a Dez-Tyr-1eucin enkefalinnak a megjelenését követjük nyomon. Inhibitor nélkül a leucin-enkefalin eltűnésének útja az abszorpció és a Dez-Tyr-leucin-enkefalinná való lebomlás, továbbá az utóbbihoz való abszorpció. Míg inhibitor jelenlétében a 1eucin-enkefalin eltűnése elsősorban az abszorpciónak tulajdonítható, az észlelhető lebomlás lényegtelen.
8. Példa
A 7. példában leírt módon járunk el, de Tyr-Phe-Met-Arg-Phe-Nl·^ pepiidet vizsgálunk. A peptidet 50 /ug/ml koncentrációban, 50 /ul tériogat/patkány mennyiségben adagoljuk bór-leucin inhibitor adagolásával vagy anélkül. Az inhibitort 0,3 /ug/patkány koncentrációban alkalmazzuk. Ebben a vizsgálatban behatolást elősegítő anyagot nem alkalmazunk.
Eredményeinket a VIII. táblázatban ismertetjük.
VIII. Táblázat
Tyr-Phe-Met-Arg-Phe-NHg (50 in vivő nazális eltűnése 0,3 jelenlétében vagy /ug/patkány) in situ, /ug/patkány bór-leucin távoli étében
Idő (perc)
Bór-leucin
0,3 /ug/patkány bór-leucin nélkül
| 0,0 | 100,0 + | 0,0 | 100,0 + 0,0 |
| 2,5 | 60,4 + | 8,5 | 84,2 + 3,8 |
| 5,0 | 39,9 + | 5,2 | 67,3 +. i>7 |
| 10,0 | 21,5 + | 3,9 | 42,1 + 6,7 |
| Az | eredmények azt | mutatják, hogy a Tyr-Phe-I | |
| -Arg-Phe-NHg | eltűnése | inhibitor távollétében gyorsabb |
Met-
Claims (9)
- Szabadalmi igénypontok1. Eljárás protein- vagy peptidtartalmű stabil gyógyászati készítmények előállítására gyógyászati célra alkalmas hordozóanyagok és stabilizáló rendszer alkalmazásával, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletű ού-amino-bórsav-származékot tartalmazó stabilizáló rendszert alkalmazunk - a képletben- HW jelentése ásványisav. szulfonsav, alkánsav vagy perf1uor-alkánsav ;- Y jelentése egy olyan dihidroxi-vegyületből szár- mazó csoport, amelyben legalább két hidroxilcsoport van, amelyeket egymástól legalább két összekapcsolódó lánc- vagy gyűrű-atom választ el egymástól, az említett lánc vagy gyűrű szénatomokból és adott esetben egy nitrogén, kén vagy oxigén heteroatomból állnak,- R jelentése alkilcsoport vagy -Ch^R1;- R jelentése -XR , arilcsoport vagy egy vagy több alkilcsoporttal helyettesített arilcsoport;- X jelentése oxigén- vagy kénatom;- R jelentése hidrogénatom, alkilcsoport vagy-SiR3R4R5;- R3, R4 és R3 jelentése egymástól függetlenül alkil- csoport, arilcsoport vagy egy vagy több alkoxicsoporttal helyettesített arilcsoport.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy proteázok által való hidrolízisre • · · » ··· • · · <•·*« **- 27 érzékeny proteint vagy peptidet alkalmazunk.
- 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve , hogy proteinként vagy pepiidként leucin-enkefalint, LH-RH-t, Tyr-Phe-Met-Arg-Phe-Nl^-t, Tyr-Bradykinin-t vagy Thymopoietin ΙΙ-t alkalmazunk.
- 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Y helyettesítőként (CH-,)?C-C(CH3)?,I I-CH2CH2-, ( CF-j) 2C-C (CF-j) 2 , vagy - ( C Η 2 ) Ν H ( C H 2 ) ~ csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk.
- 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve , hogy R helyettesítőként -CH^, -CHÍCH^^, -Ch^Cl·^(CH-j)2 , vagy benzil csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk.
- 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy HW helyén CF^CC^H, CH-jCC^H, HCl vagy HBr-t tartalmazó (I) általános képletű vegyületet alkalmazunk.
- 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy _-<-amino-bórsav-származékként 3-metil-l-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolán-2-il)-l-butamin-trifluor-ecetsav-sót alkalmazunk.
- 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szájüregben való alkalmazásra szolgáló dózisformát készítünk.• · · · •·«· · • 4 * «« ·*♦· »···
- 9. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy nazális adagolásra alkalmas dózisformát készítünk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US19269088A | 1988-05-11 | 1988-05-11 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT51144A true HUT51144A (en) | 1990-04-28 |
Family
ID=22710674
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU892373A HUT51144A (en) | 1988-05-11 | 1989-05-11 | Process for production of medical compositions containing peptid or protein active substances and alpha amin boric acid |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0341661A3 (hu) |
| JP (1) | JPH01319428A (hu) |
| KR (1) | KR900017581A (hu) |
| AU (1) | AU616968B2 (hu) |
| DK (1) | DK229089A (hu) |
| FI (1) | FI892254A (hu) |
| HU (1) | HUT51144A (hu) |
| IL (1) | IL90244A (hu) |
| MY (1) | MY104088A (hu) |
| NO (1) | NO891926L (hu) |
| NZ (1) | NZ229053A (hu) |
| PT (1) | PT90519B (hu) |
| ZA (1) | ZA893517B (hu) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2673376A1 (fr) * | 1991-03-01 | 1992-09-04 | Lefesvre Andre | Composition pharmaceutique pour le traitement des tumeurs de kaposi. |
| HUT69785A (en) * | 1991-12-18 | 1995-09-28 | Pfizer | Soybean protein or hydrolylates in pharmaceutical compositions to protect bioaltive peptides from enzymatic inactivation |
| US6153592A (en) * | 1992-11-09 | 2000-11-28 | Port Systems, Llc | Enhancing the bioavailability of proteolytically labile therapeutic agents |
| US7097839B1 (en) | 1993-10-26 | 2006-08-29 | Thomas Jefferson University | ST receptor binding compounds and methods of using the same |
| AU2003263343A1 (en) | 2002-09-09 | 2004-03-29 | Trigen Limited | Boronic acid salts ant their use in the treatment of thromobis |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4499082A (en) * | 1983-12-05 | 1985-02-12 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | α-Aminoboronic acid peptides |
| US4537773A (en) * | 1983-12-05 | 1985-08-27 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | α-Aminoboronic acid derivatives |
| US5187157A (en) * | 1987-06-05 | 1993-02-16 | Du Pont Merck Pharmaceutical Company | Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases |
| DE3840452A1 (de) * | 1988-12-01 | 1990-06-07 | Hoechst Ag | (beta)-amino-boronsaeure-derivate |
-
1989
- 1989-05-09 IL IL90244A patent/IL90244A/xx unknown
- 1989-05-09 NZ NZ229053A patent/NZ229053A/en unknown
- 1989-05-09 EP EP19890108324 patent/EP0341661A3/en not_active Withdrawn
- 1989-05-10 KR KR1019890006223A patent/KR900017581A/ko not_active Application Discontinuation
- 1989-05-10 FI FI892254A patent/FI892254A/fi not_active Application Discontinuation
- 1989-05-10 DK DK229089A patent/DK229089A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-05-10 JP JP1115238A patent/JPH01319428A/ja active Pending
- 1989-05-10 PT PT90519A patent/PT90519B/pt not_active IP Right Cessation
- 1989-05-11 MY MYPI89000629A patent/MY104088A/en unknown
- 1989-05-11 ZA ZA893517A patent/ZA893517B/xx unknown
- 1989-05-11 NO NO89891926A patent/NO891926L/no unknown
- 1989-05-11 AU AU34682/89A patent/AU616968B2/en not_active Ceased
- 1989-05-11 HU HU892373A patent/HUT51144A/hu unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA893517B (en) | 1991-01-30 |
| DK229089D0 (da) | 1989-05-10 |
| IL90244A0 (en) | 1989-12-15 |
| EP0341661A3 (en) | 1991-05-02 |
| NO891926D0 (no) | 1989-05-11 |
| AU616968B2 (en) | 1991-11-14 |
| PT90519B (pt) | 1994-10-31 |
| FI892254A0 (fi) | 1989-05-10 |
| EP0341661A2 (en) | 1989-11-15 |
| JPH01319428A (ja) | 1989-12-25 |
| NZ229053A (en) | 1990-12-21 |
| KR900017581A (ko) | 1990-12-19 |
| AU3468289A (en) | 1989-11-16 |
| IL90244A (en) | 1993-05-13 |
| FI892254A (fi) | 1989-11-12 |
| DK229089A (da) | 1989-11-12 |
| PT90519A (pt) | 1989-11-30 |
| MY104088A (en) | 1993-11-30 |
| NO891926L (no) | 1989-11-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3357883B2 (ja) | サイトカイン抑制剤 | |
| AU724728B2 (en) | Pharmaceutical compositions containing eletriptan hemisulphate and caffeine | |
| US5508292A (en) | Methods of inhibiting thrombin | |
| US5578567A (en) | Nasal pharmaceutical composition | |
| EP3678705B1 (en) | Conjugates of montelukast and peptides | |
| US11154587B2 (en) | Use of peptides to stimulate the immune system | |
| KR20030033002A (ko) | 그렐린 길항제 | |
| KR20030060771A (ko) | 국소용 마취제/아편양약물 제제 및 이들의 용도 | |
| JP2003530297A (ja) | Ｖｉｐアンタゴニストを用いる併用療法 | |
| CN1170592C (zh) | 美拉加林的新用途 | |
| HUT51144A (en) | Process for production of medical compositions containing peptid or protein active substances and alpha amin boric acid | |
| JPH0625068B2 (ja) | 鼻腔内投与用組成物及びその製造方法 | |
| KR970004039B1 (ko) | 점막 투여시 흡수 촉진제로서의 시클릭 펩티드 | |
| US20060100154A1 (en) | Long-acting gonadotropin-releasing hormone analogs and methods of use thereof | |
| HU216733B (hu) | Eljárás vaszkuláris szivárgás gátlására alkalmas gyógyszerészeti készítmények előállítására | |
| CN102675418B (zh) | Lhrh拮抗剂衍生物、其制备方法及用途 | |
| RU2264823C2 (ru) | Способ и пептиды для лечения эректильной дисфункции, способ и фармацевтическая композиция с использованием указанных пептидов | |
| JP3498041B2 (ja) | プラルモレリン含有点鼻用製剤 | |
| WO2004030687A1 (en) | Long-acting gonadotropin-releasing hormone analogs and methods of use thereof | |
| Kusterer et al. | The somatostatin analogue octreotide protects against ethanol-induced microcirculatory stasis and elevated vascular permeability in rat gastric mucosa | |
| GB2257908A (en) | Peptide compositions | |
| Derdowska et al. | New analogues of bradykinin containing a conformationally restricted dipeptide fragment in their molecules: Authors' affiliations | |
| JPS59501066A (ja) | α−エンドルフインフラグメントを含有する医薬製剤 | |
| AU678329C (en) | Cytokine restraining agents | |
| JPH05178758A (ja) | トリペプチドを有効成分とする骨疾患の予防および治療剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFC9 | Refusal of application |