HUE031601T2 - Sejttenyésztõ közegek vírusszûrése - Google Patents

Description

Sejttenyésztő közegek vlrusszírrése }Θ001| Λ viroiogtai biztonság jekniöf aggodalomra ad okéi a bloiéehnuilgiat; iparban,  veszély enyhítésére tett eroiesziiések elleném g biológiai anynpÉ nagy vohgnegű magukkor íógtaló incidensek aggodalmat keltettek m iparban, Λ nagy horderejű események közé tartozik példánk amikor a Genzyme 2000-ban üműtaűn. hógy Ψestivirus II I? ieriizés van CRÛ (aranvhöresüg petefészek) sejfteayészetében, ami ilMlIitbtta a Cérézyme# é#8-#abr^^eS:5f^nEn^> lését, valamim a Méfdfall a RotarixA' gakoina fiÉÉ? etyhavtes: j-gye! yalo'^èzê'm. A szennye·· zodés valószínű ferása a sejttenyészet taxis, A gyártó eég gazdasági vesztesége mellek (az egyik jelentés beeátéóe szerint 10(100 L-e$ biotnakior fzennyeZildite? ί§1&amp;· lAt §zlliifiő§ "Veszteséget okoz, plusz a hatóságok büntetései) Mel az eseaoénvek viaziiyt jelentenék a betegek szántára, és stiegnkadáiyozzák a MÄefeooiögmi ténnékekltez való hoMlierést (Lin óé misait Bioieclmok Prög;, 2000, 16, 425 ·434). Ennek eredményeként erősödött a hatóságok ellenőrzési tevékenysége, és az !i'en> uj teelmiLdsU, hog> kiimîiaaÂ,'P5«gél#M#::éabrffs#4%Ä:^ÄIi |^iptye^4fekek PÍÍ2| A vitális szennyezéseket általában upstream és downstream virális szennyezésekre lehel osztani A downstream szennyezéseket zári rendszerek alkalmazásával lehet szabályozni, azonban, ioleg az upstream s/enn>ezéseket nehéz szabályéztü:Is MmntaÄ még kitekéit vfks|i!a* tokkal sem. A s trails szennyezések származhatnak a biotechnológiai előállítás «órán alkalmazott állati eredetű anyagokból Is, Ha a termelő seitvonal mentes akilsö vimlls szennyezőktől,; és a termelésben item használnak állati eredetű anyagokat, a virális szenmezök még beléphetnek a sejtté· nyésztó közeggel. Például a szintetikus közeg |iii|s¾lÉfö^ëp:lzérumn\aifâ¾^zftett:î¾t^#¾óïteêÄ: előállított rekorhiiháhs növekedési MtorökRab mindazonáltal a fehérjemeáies köZóg tadálmáz szűrt téhérjelndroSizáíumokat. Λ να ralis szennyezés azokban elötbrdnlhit kémiailag teljesen dóink áh közegben is, mivel a nagymennyiségű sáptalankomponeoseket nem-steril tartályokba csomagol·· hatják, A hagyományos sterilizáló-minőségű szűröket sem lenézik, se nem képesek megvédeni: a: srahs seemivezesek ellen gv mss nie uu ek \«.M alk m> n vgs V óságuk Λ Munmnat biztonságot. (00831 Az esetleges vírusok kimutauw a tettnek' >s <. Na e, eus vagy teho ekenőizest o >ηΐ<αθ

•n «odaül gv Amku \nwo ,r a kimutatás ura t^abar nem N ereo mk * t, t > a Won * bru „ys« termékek urahs <zemneO0ow ellen, lók g ak sor ha e jokuhso vemne/o egv varatkn ismerek len, vagy egy feltörekvő uras ágens. Az Ils en virális ágensek elkerülhetik a kimutatást, még egy jól terű, ttl 1>\'S mikn tömb *.e\ lettel u am eh seeks en dt vírusok nagy gyűjteményét képviseli. A kihívás* tovább súlyosbítja egy sejttenyészet iktözéséhez szükséges virális szennyezők alacsony szintje, és jelenleg a kimutatási esszé ko>iàrc«ott llæèlenysège. |00b4] A viruld szennyezők mages there esetleg\mm manifesztálódik megváltozói; séjié- mevo, pu"-mtetet dón n burn peeked a looxeczet suntsegc, a tehene mesék, a normáim tartomány felen. I-'mellett, a tertozőképességi vizsgálatok nagyon speellkusak, és mindegyik vírushoz mis körülményt igényelnek Λ virálts szennyezés folyadék ex u írnék ok lehetnek szenow 'ettek, mm műbe dolláros költségét jelenthet a sar/s elkészítésében. a m'mdek nic^eMeusnesK t, a kacson köteteiben es a dekontarnmáiáshan. A nyersanyagok alapos átvizsgálása vírusokra nehéz, à itifoeltnofogiai eljárásokban hasz nált nagy téri ogat ok miatt, flKKB] A xirusmemcsilo technikák kéiiéáöpbiba bMltátik; ináldiváiás is szirén ÄzinÄivä- lási technikák cél ja a s írás fertő/öképességének irreverzíbilis elvesztése, msg a szűrési technikák célja , n, bvuiAt es ntOvba'Am c-»AKOOitese \ hagsm'earui* mai to akna ' > ős kw*. îatto nk, a ' oeKkx (I \ '< \ asc ο g,e ' \"-ngruza\ a ho az ko ν> n - χ x may - p' I - ms oldm/emd Λ tergenssel való ermtke/es alkalmazása. Azokban az. cselekben, amikor az nitrátból vsa sugárzás képes hatékonyam és irieverzibütseti eltávolítani a virális aktivitást, ez. a gyakorlatban nem lenne használható nagc menetelben, xagx alkalmatlan lenne a/ elkészített Lozegvkhez, Az antekhoo/ás, miközben lehetséges a hőre érzéketlen anyagokkal, megx^ltozUttJbatja az érzékeny közeget. Egy alternativ módszer· amely magas hömémddetd. róva! niem (HlSí) hőkezelés ttéven ismert, nem durva, de drága herende amkek aummati/akist, > s xaluUaM eliámsokm igények bogy megod//óh a közeg jdlemzoit, X Ars, ,s y ex magas ΊΙ x ' sale ettsttkerex neu balekom a Ictkí-egm mi fos szó o\, esek spektrumában. és negatívan Mélyásói ha ùa a közeg minőségét vagy ozmokritását. .Az oldószerre Ide-tergenssel való erintkeztetés hasmilőkégppy ttertt egy széles körben husználltalö tategoldfc, és esgk Ηρ ni hurok kai rendelkező vírusoknál használható Mmt olyan, egy ideális módszernek a exerça magoknál egyensúlyozni kell a költség-megfontolások és a virusuátávolttás igénye között, rés széles körben használható megoldást kell Irmaim, anélkül hogx rontana a nóxekedcc sdxAséget es a ho ürmöt Az EP 1 457 49? AI számú eurépa szahadaimi leírás vírusoknak terápiás alkalmazású:iilrmiögám oldatokból történd dtávolitására vonatkozik, amely korábban humán plazmából tisztított ibristpgfe oldatból indul ki, amelynek az összes fehérjére vonatkoztatott tisztasága 80% fibrinogén, vagy nagyobb, ami az oldat stabilizálása és iágyásAásácahátd én követő megolvasztása S és 20 Aközött* a netn oldódott anyái éiválssztása és a fehérje hígítása, majd a kapott oldat nanoszürese jelfemez,; 35 nm-nél kisebb pórusmérolü szúrok használatával. Λ műveleti idő általában 12 óránál rövklebb, pöőfj A vírös-visszátár# szűrés jelenti a megfelelő egyensúlyt. Kémiailag nem változtatja; meg a iMzeg komponvuselt, ék alkalmas hőérzékeny tápláiajokkalifeőzégékkel való használathoz,

Továbbá, á vi»visÄMi szűrés egy széles körben alkalmazható eljárás, mivel méretkizárásos etóen mihődifc, .Axt.mb.an a virus-visszatartó méátbrMők drágák (körülbelül 2000-5000 € per m”). A közeg-térfogatok szezetÄ jellenygp alacsony specifikus áramlási sebességek az eljárást gazdaságilag előnytelenné teszik olyan méretben* amely alkalmas nagyméretű binreaktór ellátására, a szükséges ^lái4^lÉWzöré«i iktatunk be sMiizIlé ntlnöségo közeg- szűrésbe, a vírnssxürésnek előnyösen egy munkanapon belöl meg keli történni, azaz maximum 2 - .10 órával a nagymennyirégi közeg élőálfitápt Ä% bogy megakadályozzuk a nagymennyiségű közeg fertőződését ivott nagy szüret telütóhe va» -vtikscg. begy rzen a kritikus UoablxWt Kiül mar,üljünk, ami viszont megemeli a költségeket. jööfft Meglepő módon azt talÉMk, Itögy a SÄM ibrin» teébnlka állása szerlnt: tímsszüeis hátrányait le lehet küzdeni a megfeleld készítmény szűrésével, amely készítmény egy sejttenyésztő közeg, V agy a sejtlenyésziő közegnek legalább egy komponense, legalább körülbelül 24 óra alatt a Yirnsszufőn kérésztől, amelynek a hatásos pömsméretó maximum 75 n.m„ és voiumetrikus kapacitása legalább körülbelül 21X10 liten'nrkJM a megfelelő készítmények kiránt tértbgatlt hósazahb Idmg vtnmk, azt' legalább 24 maie a vasútok xnbwneütkus kapuénak unnlkivuh méitekben nmg-nft, Meglepő módon emellett azt találtak, hogy szignifikáns teljes: virustit# «ioÂenésr lebet elém! ez ahnt a kiterjesztett tddumam alatt, Ez különösen előnyös az upstream vlms-elfát tüitásnál, sejlte-ns eszto Kunszerekben 18008) iébll m tallimfey áxwtótí eljárás fb&amp;ozzá: a vintsszütés gazdasági hatékonyságig fokozna az áteresztőképességet és a sohmtemkus kapacitást, Λ találmány szenmi eljárás legalább 2000 liter/nr sohnnetnkas kapacitással működik, ezzel segít maximalizálni a nagykápáPttááu kirus-szűrök alkalmazását, osökkerttcni az ehhez kapcsolódó tényleges költségeket, és egy olyan eljárást, kínál, amely nagy léptékben megvalósítható, és könnyen integrálható a meglevő eljárásokba, jitéöűj A találmány .-,/es orr vháras hutalnus hatosa, ét- s szóban íórgó vmtsszűrok ins units alkáltnazasa a steril gyártást eljárásokban, különösön olyan eljárásokban, amelyek steril kékxfmté;-nyékéi, például sejtteoyesztö közegeket és puff ere két alkalmaznak, megérthető az alábbi példáböl Tételezzük fel, hogy egy négyzetméter vírusszürö membrán átlagosan körülbelül 38(10 €-bá iirüL és egy (»Ivan seittenyésztó közeget használtntk, amely körülbelül 10 €-bs kerül per lifer: kőgeg, akkor 1000 liter virusszürt közeg ára 13 € per liter közeg, anu a közeg készítéséhez szükséges áméifó kék árát körülbelül 30%-kal megnöveli. Ha 12000 lilén lehet megszűrni egy virusszürö membránnal, ekkor a költség 11,50 f. A volumeirikus kapacitás további növelése, például SIMi; liter fölé, a kőin ségeket 0,ő k por liter közeg alá csökkenti, ami egy Utusszürt közeg feizíesltásának további költségéit jelentősen csökkenti, bűnek etedményeképpen, a virusszürók atkaimaxásának tnagas költ- C Î. ' uhmOM.» orok'Xíli^ li'v ΧΛΚ' ' if.t iii sAilUSO/' > . OsUO«m >td OOtatU 1 t'Mn S *gíU Okán «an csökken, ha víritsszörö eljárás volumdrikus kapacitását megnöveljük. jOOlOf A jelen találmány teljesen megcélozza a vkusszűrök magas költségének: és alacsony ':¥0Íte^^fe::lfe^a0Í|^öak. a pmMimájih A vírusszürő volometnkus kapacitása növelhető, ha a x trusszonsí legalább körülbelül 24 érán keresztül haitink végre eg\ elvan xiritsmsrön kerestük atm lynch i 1 vackom r misn ere η ομγ er, ?s arm c- xokm>etrko\ Kapacitása legalább lumlhehü 2oou hio |htc Mcgh po tnoJen a t lalthuk. hogs a h o>na t kéiooc.". vmissaurok xoltmiemku* kapacitását jobban ki lehet használni, ram a vohmieiiAm kapacitás 2-100-s/orm rmOkoeevo eredményezheti. miközben megtartja a szülő integritását. Bár a volumdrikus kapacitás 2-3-szoros nos elcsenek mái nagv halasa van m doalhUtst eljárásra es a kapott termek költségeire, a találmány szerinti eljárással a vohimetrikus kapacitás 1 UO-szoros, vagy még többszörös növekedésé is elérhető kV nagx lehetőségeké t biztosít, es a x kosok eltávolítását kőltseg-hatckonnsa teszi, még költséges vírusszürökkd is, arnds ek így használhatók a vitális biztonság további javítására a sejttenyésztést eljárásokban, pontosabban a sejttenyésztést eljárásokban, gxugvavzats, diagnosztikát oovagv kozmetika.! dflmivotfian dre-v-vokban,

A TALÁLMÁNY ÖSSZEFOGLALÁSA |0O11| A találmány tárgya djárás égj sirálís szennyező eltávolítására egy készítményből,: amely egy seitienyészto közeg, vagy legalább egy komponense egy sejttenyésztö közegnek! Az eljárás tartalmazza a szóban íorgó i késáimény ilegglább:Ms óta: hosszat tartó szóróséi égy olyan vírus-szűrön keresztük amelynek a hatékony pöprsmérgte mayimum ?#:.: legalább körülbelül 2uöú btetvperc, pill} A találmány tárgya továbbá egy vlrusszörö - amelynek a hatékony pörusméreíe ma» simám 7S nrn, és volumetrikus kapadií^%iátiisfc kői^lbélÖl. 2ÖÖÖ hter.nA - álkátoáziáa ö|y leg-aláfeb 24 órás szűrésben, a virális szenhyeilsnsk: egy készimíényböí való dtávöMiásáráj amely lehet egy sejttenyészto közeg, vagy egy ^tenyészti közegnél UmWh egy lopponaise; [0013j Λ takdmam tátgva tosábba eg\ készítmem ulkalma/nvu amely egy septemév/tö közeg, v\gv eg\ segnarua '~e közegnek Auùaha cgx komponense, amehet a }cA"t tahin i u \z„ Timi bármelyik eljárássá] elő lehet állítani seittenyésztéshez; gyógyászati, diagnosztikus és/vagy kozmetikai készibuényekhez, valamint élelmi szeripari készítményekhez, |tKM4j \ találnám szemet oss^s d tms c·- ékalmazas legalább komlbehú hgp h*e. m~ voiumeirikus kapacitással, előnyösen legalább kőrtUMOj 3U00 iiter/nr volurnetrikus kapacitással, legdönyösebfeen körülbelül 50ÖÜ IstetMÁ yotetehikua kapacitással mükööhih Módiéit, m készítményt szûrèÂk: yetjükü^fe. ^assÂési hajtjuk végre, vagy legalább 40 óra hosszúi, --gz-o s o körülhchá 7 hónapig, vags -mulTdül 72 óm hosszat hot slbdul 1 hon.épig \ s/utésí körülbelül. 2»60 yagy körülbelül 10*40*C kozott előnyösen körülbelül 15-37 7C kö^it öi^||yÉ végre, lillil Λ találmány összes megvalósítás* módjában a szűrést 100 mbar és körülbelül 4000 mbar. előnyösen körülbelül 200 mbar és körülbelül 350(1 mbar, legelőnyösebben körülbelül 1000 mbar és körülbelül 5000 mbar közölt! nyomáson bájtjuk \ égre. píllbj A találmány összes megvalósítási módjában: a hrpzhêïi visniszürö a vlrassMimpÄ^ nek legalább I Logu* csökkenési értéket ti RV) éri ek jMffj Meglepő módon azt találtuk, hogy a vírusszürök volumetrikns kapacitása rendkívüli .Ütértékben megnövelhetik ha a szűrést eljárást legalább körülbelül 24 óra hosszat végezzük Normális esetben a sejltem élethez, például nagytömegű sejttenyészt the/ \ag\ putïeralhiv elóalltmsaboz a készítményeket szakaszosan szűrjük, a nagytömegű készítmények előállítása után 2*10 órán belül,: azzal a céllal, hogy elkerüljük a készítmények bakteriális vagy vitális növekedéssel való szeunyezö-dését, lízén túlzott fölöslegben levő szűrési területet kell használni. Ezzel szemben kiderült, hogy a találmány szerinti eljárás alkalmazásával a használt költséges vtrüsiztkök vőlametríkus kapacitása jobban kihasználható, ami a volumetrikus kapacitás 2-100-szörős növekedéséhez vezet, miközben megtartja a szűrő integritását. Bár a volumetrikus kapacitás 2-100-szoros növekedésének már nagy hatása van a találmány szerinti eljárásra, és az ezzel kapcsolatos előállítási költségekre, a: találmány szerinti eljárással lOO-szoms, vagy még magasabb növekedés érhető ek Hz. nagy lehetőségeket kínál, és a vmrs-eluh oldás költségeit hatékonnyá teszi, még költséges vírusszütökiéí ·% ariÉpÊÂkst· használhatók, hogy tovább javítsuk a vírális biztonságot a sejttenyésziési eljárásokban;· különbözői scjttenycs/tési eljárások, gyógyászati, diagnosztikai és 'vagy kozmetikai és élelmiszeripari eljárások? u pstrean i virusföltá volhásibam |00IS) \ len találmány yu v dtkn* olnmK « t^es tett nxg'. aleetam -¾ odún nubam ka ak lesznek b zmnos megvalósítást nmdok es az igénypontok alábbi, reádetcsebb leírásából, A ' A1 UmiAklikN RO\ Fü % ISMER ΙΗΊ 1VK V ΜΠ U xL'U ABRAKAI jjlölüj A találmány pontosabb leírását adjuk meg bizonyos megvalósítási példáira hivatkoz va. amelyeket a csatolt ábrákon illusztrálunk. Ezek az ábrák a specifikáció részét képezik. Meg kell jegyeznünk azonban, hogy a csatolt ábrák a találmány példaként megadott megvalósítási utódjait ü* lu\ tra!j tk em<s ne n tekmth o* c dnnuts oitaHi koré kottunoavu'uk jOT2#f Az 1. ábra a Mruss/.nres kmetikáiát mutatja, egy árámlással szabályozott virussztbés : alkalmazásával (IC. ábra) különböző szűrőket használva, mindegyiket 3 különböző s/ójahidro-líz.ttnnnual kiegészített setttenyes/tö közeggel kombinah a t Kerry IhHeplMp -·' S. |)t i\K> 51 -fö MAF UF ál és 42)

Az tdkulmazou vutö es kiset hu körülmény ok (lásd például K4 Pcköti Λ szűrő. Sartorius Vim.vul < FW Wo eov ; 30 "(. -on, áramlás sebesség körülbelül 30 Ηκτ.·'(*η"**ό*ίθ P* .\.\no Vtnhp-.e X ;;0v'h. \t " ' : emk 3öX'-en. árán Pass sebesség körülbelül dmbO ln os so Vv ) \ v^s v''> s-. ;m s o\sm o smpig végeztük. \ugy amíg a 2000 nPu- nuxnmdis; nyomást meghal sötek Az :A ubm co-. : .; . vvu. .".cts Ans Aucu nàst mrs renouas per mombrást fUszim loris les et az időben ábrázolva, nme h minimum 400?> Hter'ívPWöl körülbelül 12000 iiter'm'Wg változik, A s/urés végén a nyomás körülbelül 600 tnbar os 2400 mbar közölt volt. a sztűrö Opusától luge göen (IB. ábra). Általában a szöjahidtolizätuitn»k közötti különbségi meglehetősen alacsony a voSutneínkus kapacitásra és a maximális nyomásra |ÜIB1| A 2 róna mutatja a ou\s.ujc* kinetikáját, un mix el tg\ árain laszti v ezórelt •viroas««'» rés alkalmazáséval végétünk (2C. ahmk különböző szűrökéi én aejttenyésztö kbzagekat: básináEby a külöbböki szójahtdrnlizátum sürz/sz! kiegészítve (Kfrry ByPepl(EXkit* :®öi® SBSö MAP KI 41 és -<B. Λ szűrési és kísérleti körülmények O.Ad az. i -Ί. példát): A szúró: Sartorius \ tro<ao CPV. IS«'* cm:: 30 0C-m,,k^sáM sobÂégikômibéiÜ! 30iiPriir^éli) D szűrő: Asahí BiolX in cm“; sz oh a hő m érsek I éten (körülbelül 22 °C), áramlási sebesség körülbelül 20 Üter/(m~*óra>. A/. I. ábránál leírt kísérletekkel szentben* a szűréseket, hosszabb ideig, egészen 81 napig végeztük, amíg elértük &amp; 2(100 mbar nyomásé, A 2À. ábra mutulfs a^voltmxelskas kapaéi-tást szűrt sériögat per membrán felszínt területei: liibfp ábrázolva, amelylkőrülbel|.l 16000 hter/miX·. tol (az ö szűrőre I KíkfO sE50 MAF íM-vel) egészei körülbelül 35000 llterrnk értékig (a D szűröm mind a 3 ktürüsbözo hidtoltzáimn sarassal). A maximális nyomás a szűrés végén körülbelül .1200 mbar ér 2000 mbar, a szűrő típusától függően (2B> ábrák Általában a szója htdrolízátwmok közötti különbség meglehetősen alacsony ;i volumemküs kapacitás és a maximális nyomás szempontjából píllf A 3. ez áramlás ^ ampsmásküiöibség közötti iaizelüggést umtuta. körűmen. 22 A rúL az \ szutot o-mtem^ \ emvat (ΊΑ , ki un \ wiamun a tXMlo SE50 M.-M 10· <> anzs szórniűdiobzát u&amp;ké tartalmazó közeget használva (JavJ az 5 ábsáu Minimum körülbelül 100 mbar nyomáskülönbségre vám szükség, hogy elérjünk tgiy pűiiítrlbs ki-mutatható specifikus áramlási sebességet, ami aztán fekőzalosan nö agy nyileépválőáp árápyöskot> relációval a specifikus áram bio sebesség és a nyomäkkiiiÄ%'kÖ^Ä lllÖIlj : A -1 ábra mutatja a különbséget egv nvomás· szabályozott és egy áramlási sebesség- ^mbsKn, h \'Unlo>,i %> V. t* * szr»» *. s iA|m* «ms V ,>v.n, í.PV Ά, um k a í\ooy HyPep IS lu :?2 szôjahidrohzùtumoî tartalmazó közeggel (lásd az I -4. példát), \ vusC'-c . 0' s uptg ' vgv/t, ><. es >. a '< „ \<>lamctnkus kφn.r. t\ kmulbolül őtMO-AKHf átér m' volt. Az : áramc.M sebessog-szabaU * v« 'P N.'mó'- xegO «(»miása o^szeh isonhtlntu -volt a· nyomán szabiiypzntt szülök·::Öyömásáxulí(Iásd -IB. ábrás, es a nyőmás-szabályozott szűrés végsö^.specifikus

áramlási sebessége összehasn« in ható volt az áramlási sebesség-szabályozott szűrésével (lásd a 4C, ibrat* Ez mulatja, hogy a i imsszwésiiek mindkét szabályozási stratégiája tezefeasmüittaé vei tápéin kos ka pác i t ást «mim én pzbssL ftUMf Az Ik 'llfA egy Âlilél' eresönényeil mutatja bt, a 6. példában r>. műtőien sont közép w mo Rtro -,..1 kong ha^zmlato «1 Λ $cirte«vesz?o közege« Nd/sonkem vintssaurtök A szűröve! a kísérlet niegkfzd## éléit A kísérleteket párhuzamosa« végeztük, 3 különböző s/ôjahidmlisàf ómmal t Kerry ItyFep ISICk Lotit h DOMO SESO MAF U1\ Lot fel és »u\iO KfV MAF I I'. I erén V udea-kit vg\ nmében-« tolyumat» >s signons és/tée «uobo 3 hétéből \/..mnmuuk, \‘era taiahuak Lúlónbaeg a megfelelő síeo.sKsrt kb,·eg »>--.» L S»g 3 »A u-gs 'i, 0 -μ u nAiv megfek te ''/u«-u«oa ? eh; re kese Kkv-X «Χον ν»λ 3 és v-> 3« a spemtikus nmnte-képességre «5Λ. ábra), a voiumetrskus termelőképességre «511 ábra) és a specifikus növekedésre (5€. ábra) vonatkozóan jÖOMj Vb abra e^\ »20 'iuk-. hn-nuisue, Klódét . ee neme t1 mtaoa be a ' peklabann meneteli szűrt közeg versus nem-szim közeg használatával. A sejbenyésztö közegei a bloreuktmok uxulWirLi! 'u' mii i. \jus-v xk el \ mot' » v ;A ** « > e 1 ύ,οό Λ!« I ·ν;, \ nos« \c M'B 35u > re ) 1¾.-\- « Mo u.-. s.g. kor. «b- \«' 55 o uvg foKamatoz ü/ermnódban. A virusszürt közeg betáplálás időintervallumait és volumetrikus kapacitását à ÖA. ábrán muÉüjnk bee Azrsdátö&amp;sfm i:niéryá|lumífkra: számitöllnk a különböző splrök hasznllalival Kern i »kötünk, kiröobeeg . megfelelő vintsszurt közeg és a nem-szúrt relerenma között a spe» dikes növekedési sebességre (6B. ábra) és u volunietrikps kápaeitásra vonalközösn (őfA ájbraje jÖ02öf A "\ ahu mu lati a a L>< AK > öt 50 MAI 11. Lm" à vojalmhoh/uiumoi tartalmazd. MVV .vpiKO-dv κα „g (- szuioxel « WVÜÍ Hanoié 1AM vnumzuiokkel legzett szűrése során s4p»>n , oresi rmnu -muvnhui talalt MM\ ienoznképevscgí me*· | K'ILK- mij sál avasai (tasd 3 abra). Alacsony szintű virus-áttörést figyeltünk meg 2-3 napon belük Ennek ellenére a virus-diávo-Hast hatvk'Uivnak láttuk (0027J \ S abra mutatja «az ds«> menetbe« D\L ol'50 XIAF' » F -5„ a 3, menetben D\l\ si V Μ l f 1 sz» \> mml ete'o t «dubnizok VM\ sV·»» M' kezed '.> s'».e t\ö\IU Bioi A « i'irusszürökkel végzett szűrése serén kapott szűrési mima sorozatban faléit MMV íértözüké-psssegt irtot iVlEKmtd; iáim asét »leM sí λ^λ\ \ont lígultank meg sons- m«"vsi, es a\nus-eb t.aio!itást baiektsn.ynak és teljesnek ladvk. |ΘΘ2£) Á 9. ábra mutatja a 10. példában ismertetett MMV ...vpike-HK k«veg szűrése során kapod szűrési minta sorozatban talált MMV fertözőképessegi tker [Τ0ΓΓ)·.;;ϊ mlj saltozását. Az 1. és második menetben (I.) szűrő) néni tlgseltbnk meg vírus-áttörést, ami hatékony és teljes virus-eííávo-hiax e»«'ms.i μ ott » >» ,n » , i **'<t'»* «.««Iw». ! e \la»Mm s'íw 1 ps at.orost ügyeltünk meg a 3. és A. menetben i! o/ûwft é* az. 5, ès b. menetben {ii szűrök Äs hatékony. de nem telles viras-dtávölíiási eredményezett a s/èiabunnüraoumn tartalmazó közegekből Meg se-breeds >N v u'nsn J'"eO ő^enun mm, a ' όχι.· 'bon *.15 ' net vs e b niuküvn Jl vntox mm csőiként vtms-d távol hast tsktoiokat eredményezett a szigniftkancàa halárán. Azonban mîndegyik Nnrm el d lehetet* erm a tohbmmt kontlhchn 5 Jogit Oh* »' * rwim iN robes tüOïme*Aene « 1, Táblázat

Yirusazürok es s/ejalndroh/uumtok kombinációja a „.spike-oh.u" Lberkiekben

3 l·'* .Am mumpn eg y, <0 >, pokUbm- ismerteteti svoÀm végrehajtod wrusszures kinetikáját. ,Λ nyomási. 0,8 és 1,2 bar között tartottuk (átlagosan IJ bar), kivéve a szándékos nyomás- és áramlás-tMspzaküásí. amely a -nÄÄsk'löt^jTn'önyßk legrosszabb esetét szimulálja, Slrulhelül 38 its !jfer%rxôra) kiindulást aramÂ-sefeességat értünk d, amely a kísérlet végéig ftkfÄösaa esőkként, azonban el lehetett érni a minimális 4 hter/(m“xíkat értéket. A teljes időtartam, beleértve a nyomás-megszakításokat is, 30 nap volt. A szűrőn körülbelül 0500 liter/tuM bocsátottunk át. A 1 i, ábra mulatja all. példában ismertetett MMV ,.spik'..--oít'' közeg szűrése során kapott szűrési musté aotozatban taktlt \t\J\ Artorokepessegs tűét |iVlJ)Hmiü alnvrsaí Λ 20 u-sgah uu\ev egyikében sem figyeltünk meg vírus··áttörést. A vmistorhelés oh flogst ΐ A ID<,hí c- - ^ ' log * '1 ClD\'.>j közén vdtozou. ;· ù ikeh< térfogat u>e tUggóen Λ °. tub.g khen a t> -„io.- '. 'moomek, - s.O^l'-gi.iTCttAbj ' olt. mii h 11 Honjuk a "apike-obf anyag km*,'.** is1 stníHvrbdevT!' -logis vüsm-e.'mkkenîési } aktot t eredményez. Fzt hatékonynak és teljesnek láttuk.

A TALÁLMÁNY RÉSZf.BÍbS ISMERTETESS M, tÉllmtov tárgya eljárás vitális szennyezés eltávolítását* eg> készimrényböl, amely lehet egv sejttem osztó közeg. vagy cg> sejuenyéssttö kí^egnek,.legalább egy komponense. Az. eljárás sprint a szóban lorgó késziUnérnt szűrésnek vetjük alá legalább 24 óra hosszat egy vi-rasv'utvn keresztig arat ívnél i ' m'tkkin prausraetAe maximum "5 nm, e* xmnmetnku? Mvuna \a kg.Oabh korjlhs lui ?UOO htot m‘ |0Ö3Ö| Toypbá, l; találmány tárgya egy vimsszntiiläszoälÄ, ÂèlpÂÂMIkk^v..^éÂk: merek' maximum ?5 mm és vohstnetnkus kapacitása legalább körülbelül 2000 liter m' egy legalább 24 «Mis sÂésbem egy vitális szennyezésnek egy készítményből való eltávolítása céljából, amely egv segtenvévm üszeg, Vags *gx turves Ίο ko ősnek íegmabb eg\ komponense, fölttj bmeitsa a mlahn.oo kogxa égaras egv Kommen). amoh egv -emeny észté közeg, vagy egy sej tien yésztö k ív égnék legalább egy komponense a Ik aim ázás ár a* amelyet bármelyik, a találmány szerinti eljárásán! megkaphatunk egy sejttenyés/f.thez; gyógyászán, diagnosztikus és# vagy kozmetikai készítményéi;, valamint élelmiszeripart készítmények. (01122} Λ találmány összes megvalósítási módjában a készítményt vírtisszürésnek vetjük alá, a vsrusszvrest vagy a vlrnsszürö használatát legalább körülbelül 24 óra. körülbelül 28 óra, körülbelül 22 óra hosszat, körülbelül 4 napig, körülbelül 6 napig. kőriUhelül 6 napig, körülbelül ? napig, körülbelül I hétig, körülbelül 1 hétig, körülbelül 3 bélig, körülbelül 4 hétig, tÄültjÄfliÄai^ körülbelül 2 hónapig, körülbelül 3 hónapig, körülbelül 4 hónapig, körülbelül 5 hónapig, körülbelül ts hónapig, vagy körülbelül 7 hónapig végezve. Továbbá, az egyik megvalósítási mód szerint a ké~ s-utmenyt vntrss/itrcsnek vettük aki. vagy axirusszurést körülbelül i hét "körülbelül 3 bet hosszan végezzük, körülbelül 2 hét ~ körülbelül 4 hét hosszan végezzük, körülbelül 1 hét ™ körülbelül 4 hét hosszan végezzük, körülbelül 2 hét kotulhehil 4 bét hossz.ei végezzük, körülbelül 1 bet komibb" lül ? hónap hosszan végezzük, körülbelül I hónap - körülbelül 5 hónap hosszan végezzligŐreibe-!il 2 höüáf - körülbelül 5 hónap hosszas végezzük, körülbelül 2 hónap - körülbelül 4 hónap kosz-sran végezzük, köiülbdüi 2 h»nap - körülbelül 1 hónap boss, an végezzük, rogy legalább körülbelül 24 óra - ? hónap hosszat, vagy körülbelül 4$ óra körülbelül 6 hónap hosszat, vagy körülbelül 72 óra ~ körülbelül 3 hónap hosszal végezzük. Továbbá, az egyik megvalósítást mód szerint a készítményt virusszüs'ésrmk vé|ük aíáykagy a vlrnssinrésitöbb rÉmt ÖSmmbppazátl egészpi körülbelül 2 hónapig, elom-osen kotuiKIul 1 hét 4 hónap hosszat vagy kotulbeiöl 1 hét hotülbnhd 3 hónap hosszat, V agx körülbelül 2 3 hónap hosszat vege-vük flíöiklj A lalalmanv szeonti dumát legalább kombidul '*000 bon m\ legalább kutülbdül 3000 literrar. vagy legalább körülbelül 4000 IhePhr, vagy legalább körülbelül 51*00 liter‘rar» leg-ahtbb konü'vk'* 7ot*0 ,Kvi η' „u· uhb hm * x lui 10' *00 ,,%¾ n s ips Vgd >bb KomOvU Ό\κκ htot m volumenem kaputt,Isui h.tpmk 'αρ> i.bhol a s/empoutlml t .oo'mmetrAus lapinas" ' 'aki to >. 'Uo k'UnuOí? - ohln »4 à/ u te* ,y «tut amelyet át lehel nyomni a vimsszűri,?áfteí»lrfft«· nal egy specifikus területem mielőtt a szőriét árama leeaökken. vagy a háttérnyomás nem kivám működési körülményekig no. a szűrő membrán dtömödése következtében,

PiMI Az a szándékunk. összes megvalósítási módot is lehessen használni önmagában, vagy más. a szakterületen ismeri megközelítési módokkal kapcsolatban, logy rrMmalizáljtik a vitális szennyeződést például szûrôvltâjpte^pbÂiÂseU kiniu-látással, vírus inaktiválással, adszörptiv retenciővak stb. Ez a módszer a nem kívánÉmráUs ágén-seknek a készítménybe való belépését, célozza meg, amely lehet egy scjtíenyésztö közeg, vagy egy ventemés/m közegnek legalább egy komponenNt;, ,0 előállítást eljárás komi fázisában, es egy sí rosesökkento mechanizmust biztosit. Λ találmanx~ előnyei közé tartozik a könnyebb megxaknát a\ nagy méretékbia, egy készítmény adott térfogatának foldolgozásdióz Szükséges szúrömefollán felület csökkentése:, ahoi a készítmény egy sejttenyésztö közeg, vagy egy sej (tenyésztő közegnek legalább egy komponense, az ebből adódó csökkent költséggel: Pontosakban a találmány szerinti kos# umeny ok % trusszuréaéí könnyen ímegraim lehet folyamutoa előállítási eljárásokba, azaz például v%,mustos sonn sosszto elsarasnkös, mini például perfu/κβ \fag\ kemo\/tát fellesi! bmreaktor rendszerekbe, 10035 j \ , bomersékk Γ wkköo ernst a további a talalmanv szerűm szúrt készítmények, szar például egy sejttenyészet közeg vagy*-puffer hőmérsékletével kapcaolatban használjuk, abban az időpontban. amikor keresztülmegy a vinrsszürört. A találmány egyik megvalósítási módja szerint a hőmérséklet körülbelül 2 °C és körülbelül 60 X között van Az egyik megvalósítást mód szerint a hóinerséklei-taíiont.my also korlat ja kon s! bel ül 2 C, körülbelül 4 'Ό, köiüfbelől 8 Ί\ későibe lui Hí Hó körülbelül 15 "C, körülbelül 20 CC, körülbelül 22 CC\ körülbelül 25 °C\ körülbelül 30 ®C, körülbelül °C. körülbelül 40 t\ körülbelül Su í " vagy körülbelül őO ';€\ Az egyik megvalósítás? mód szerint a hőmérséklet-tartomány körülbelül 4-4$ ö€ közön, vagy a körülbelül !ö ";C és körülbelül 40 CC közötti böméméklet-íanománybarn vagy körül beiül ; 30 °C és: körül belül 3 2 közih van. Sklbv tén az egyik megvalósítási mód szériát a hőmérséklet a környezet hőmérséklete, amely körülbelül 20-30 °C között van. Természetesen azokat a megvalósítási módokat is előnyben részesítjük, amelyekben a készítményekét a készítmények minden további Hitese vagy hetese nélkül vetjük alá a szűrösnek. Ezért a továbbiakban körülbelül 10-30 “C közötti hőmérsékletet használunk, annak a helynek a hőmérsékletétől függően, ahol a szűrést végezzük. Egy másik megvalósítási mód szerint körülbelül 30-37 C közötti hőmérsékletei alkalmazunk, például a folyadék-készítményt eiömeie live a szűrés előtt. A készítménynek ebből a szűrésből származó szürletét folyamatosan betáplálhatjuk egy bíoreaktorba. \ takum-my *.gs,k meg1,ahsnta-n módja s » unt a νχηνΜ hsrűlt'oiűl OV* mho *.s ko-nJKM hkt î ïKtr s igv s.mlKlü » t >e os kntu xxul mb kozo» > mo ua^ i h« ik végre. Λz egyik megvalósítási mód szerint a virusszörcsi egy olyan nyomástartományban hajtjuk végre, amelynek az alsó korlátja körülbelül 100 mbar, körülbelül 200 mbar. körülbelül S00 mbar, körülbelül 1000 mbar, körülbelöl 1200 mbar, körülbelül 1 500 mbar, körülbelül 2000 mbar, körűibe* lül 2500 mbar, vagy körülbelül 2S00 mbar, Λ felső korlát körülbelöl 1,200 mbar, körülbelül 1500 mbar, körülbelül 2000 mbar, körülbelül 2500 mbar, körülbelül 280(1 mbar, vagy körülbelül 3000 mbar. Az egyik megvalósítási mód szerint a szűrést, körülbelül 1000 és körülbelül -1000 mbar, körülbelül 1500 és körülbelül 3500 mbar, körülbelül 1700 és körülbelül 3300 mbar, vagy körülbelül 1 lOÖíék: körüliéiül lOOOImiar közötti siyomásíariományhan hajtják:vügrb, |0037| Hőmérséklet- és nyomás-változtatásokat a Hód mázhatunk a találmány tovább; megva lósítást módimban Hugs «JzaKfve ml, a smvtfikus atmid, u Vm m'get ον a \»> íoro Uikns kapáét üst \ vnlumetrikm kupac mb és ,r - intvotw aUudma/<m a; ík v.out innia további i,o utasát erhohűk ti m,v* d gar as; -pammetuek, aram v J<„sí ' N?n»ev, moma\ o- , m mickle* ' mouh ozavtv ,ù PcOaui kiderült, hogy néhány megvalósítási mód szerint az az előnyős, ha a készítményt körülbelül 10-40 í közötti houtcmcUeîon, köiülbeUri bkv mbar s's kösmoen. éöuty mix» közönt nyomáson rétink alá a szűrésnek, 10(1381 \,v előzetes s/mèsi ksserietok demonstrálták a szűrendő készén tények hotrtsrr vek létének a hatását a sAesség körülbelül 5fklÖ0%-os növe kedését ügvekoh meg, am tkot egy odaírnám szerinti be.vmnéoy \znie«i hőmérsékletét, amelynek a tárolási hőmérsékleté körülbelül 4 riö, körülbelöl lé 3~ °C-rj nővelruk Azonban az összes then megvalósítási nmiäbha az oltalmi körbe tartozik, hogy a legalább körülbelül 24 órás szűrés használata befolyásolja, logy a kasztrált költséges vírnsszűrofcet jobban ki lehet használni, ami a volumet-rikus kapacitás ,b HXnszartos növekedéséhez vezet, miközben a szűrő integritását megtartja. |0OÄ| Az egyik előnyben részesített megvalósítási mód szerint, az. eljárás, amely egy vírus- szennyezőnek egy készítményből való eltávolításaid vonatkozik, amely készítmény egy sejlte-nyészío kíizeg, vagy egy seíttenylkztS: közegnek leplább egy komponense, lanalmazza akt a: lépésű hogy a szóban forgó készítményt szűrésnek vetjük alá legalább 10 naptól körülbelül 2 hónapig terjedő ideig, egy virnsszűrön keresztül, amelynek az eOéktrv pôrosrnéreîe maximum 15 ma, kőrUtbe-Ifi 1000 mbar és 2000 mbar közötti nyomással, és 10 ö€ és 40 HŐ közötti hőmérsékleten, legalább ' tOO' ,er n uivu.ru k, \,t o, ^.é 1¾. tr.cv'e.x-mn az O" es toeb paianuu n? kovoioalhute , "el , ik< v k sud' meeda I ίοΓ„ ees to,»hhi r^gv.dos ,,,χ. n idkcsx „ s oh m to ms ef odO iblyámaios szűrési; módban ; valósítjuk mein ahol a szőriét egy előnyben reszesietiyáeittényéSZti közeg, például egy azígahidnmxátumot tartalmazó sejttenyészni közeg, vagy állati eredetű kompo- neeseket tartalmazó semem osztó közeg, ahoi a \ o: lotet η Vnouto-on mfe önó b* eg) Morvák o 'u, ioetrc ab*. ' ό rén aaktom t <- „ 'al ? ne* K tu r λ’ ^ " (i megvalósítási módot égy is \ egrehajthatjok.. hogy legalább ..y párhuzamosan vagy sorfeakótöít vú nemről használunk, |CHI4§| ¥élemêiyimk szerint az itt isroertetetí tirusszürési módszerek használhatók. hogy ksohheutsnk . μ u\s mouvez Cs- hamuhen te- mevré t normo az ogx sedtem.>V'V ó,\u ,ug\ ee\ Nejtteme-^o nozcgnok eg\ komponense z ' s t\ u i 1 , <,ü seoek elotrvoscr > n os vyok m \«'io íeuscszef on vtlu szaporításaia alkalma ko>v % \ pu lónk kmkus sse he < ,? καοον,* \o λ g tartalmaz ee> puffert, sókat, energia íurr.ua, ummosavakat, x u amino kai és esszenciális nyomelemeket.

IfHMI:I Λ „kés· suuénx" szakkttejsíés xmuiAvsk Ixuaubeo kompunuro:e v amdfe lehetsé ges része egy sejttem észté közegnek, a találmány szennti értelemben, es képes a megfelelő sejt növekedését támogatni sej tenyészetben, A szóban forgó? készítmények közé tartozik például egy puffer, vagy legalább egy uminosav vagy fehérje oldalai ; legalább egy vitamin oldatai; legalább egy szerves vaggszervétlen sé oldatai:; vsgydegsiáhb egy szénhidrái vagy eukortbrrás oldatait, jíNMiJ A jelen találmány szövegösszefüggésében a ‘"Log redukciós érték’' (LRV> a memb rán hatékonyságának a mérteke, hogy mennyire képes visszatartani egy részecskék azaz égy balt#· ro«rt*ií \<e s SiTv'·' m i e , gurumban Vo voban lot gu rt«/o» akcvraimatk a virusszurest membrán pesmcatiimb m lev* ses, i.c\kes?amho ' uszmpotott aransanak nzes alapú logaritmusa, Az. LRV érték specifikus eo\ «utóit típusú részecskére. Az egyik, találmány szerinti megvalósítási mód szsy· mu a \ irusszűrö legalább I boga., csökkenési értéket (LRV) ér el egy virális szennyezésre, vagy fe gúla éh I i og}r> csökkenet' éheket if bY> o" el egv \ sráhs s/enn) ercsi e, vagy legalább 3 log. csökkenem élteket íLRYi ct cl egy vuáhs szonm ezcsre. sagv legalább 4 I ogs,; csökkenési értékű t LRV) ér el egy virális szennyezésre, vagy legalább 5 Log**» csökkenési értékei (LRV| ér d egy tudás s/enme<we, sag) kjmluhb ó I ogn c-okkenes? értékei il RVlor si egs virabs szennvezesre^ vagy legalább ? Logio csökkenési értékei (LRV) ér el egy viráhs szennyezésre) vpgy legalább B I og. csökkenési ·.socket il R\ ' -,s cl ce5· uro·* azenn}CAs>c, cloroomn legalább 4 1 o*,· * csőkké eösi cru kd il RV i cs el cg\ \ nah > szcízíHwk' Tennea/eó sen cg) s, aktcruleten |arias szakember s ama*a nuhasnaré beás , -, .cukié kea ormom snabs xugx peu u ial s utáli- vertu) eresének bármilpi Ldgy* értékkel való esökkditeseplekimy bätasi az előállítási: eljárás hiztons|gosság|ns|;: a javiiására Ezért, főleg ezt a paraméteri lehet kombinálni az összes többi, ti találmány szerinti eljá-sásban uuz/nih punmotovel |tRbti| Az „áraiu“' szakkiieiezés, amit a továbbiakban fejeseiéivé használunk a „specifikus áramlási sebesség" vagy „áramlási sebesség" szakkifejezéssel, egy membránok jellemzésére hasz· náli ráillik, Muklűílét áramlást yohátkizik (a vltmsszirő membránon áthatold szürlct iéríögátiiás vágy tôïiigihiâ: kifejelve per a szaró lelökte és az idd, például liter/Cnm-öm).  ta-lálm|oy sgivegösszeíüggesbeu a „specifikus" szaktöfejczés jelentése egy meghatározott időtartam, azonban ha ν>Α az „áramlási sebesség" szakktietezo'd használtuk, esten parameter egv st-geiho! is ttyth ám aló. hogy "spectáfcus arsmkuo sebesség''-et értőnk alatta A „térfogat" mennyiség rőv Kincsében, í»mí „bter"-ben adunk meg. íz J" es? ..1 " egstnus hohen hasznuiháö. A lalahnanv szermtt emu shum'meed'ö t \ n?,mdasu schesAh) v adu t. ogs taboulés on tmhtl, >ag\ e nsegdxu t,>c Λ ve ma .dóm.. >- a, est ifam- ve ,. > vt1' adón \r un várót h tszneha V víen talaUn,m\ egv tk meg valósítási módja szermí a specifikus immkht sebtuseg komidéiul 5 Inerdnr ' oiaVm! körülbelül $00 liitm(m^0ra}-ig terjedhet, legalább 24 óráig, vagy maximum ? hónapig. Az áramlás alsó korlátja lehet körülbelül S I herd nv:< sóm), vagy körülbelül 10 Utero nr > óra). A felső limit lehet körülbelül 2$ lher/(rrr-órák körülbelül 75 hterdird'óra). körülbelül 100 liter {má*óta}, körülbelül 2Ö(n lőerőm mai. körülbelül 2?u Ute? t?r‘ ör.o körülbelül $00 laer-pn' ' or.u, vagv köri belül 5ü0 Inét fa'“^om) \ ear» tovább v.dtvvlur "> b,ú üe ' oia>-',ol kmùibelül loti ne> (" -,-rabtg. ko se belül lu bter pu Nor .í tol kírvübehd SOo hu" «n séta) sg, vaco kónübelul 10 htu ím' outi ,e, körülbelül 25 Ihentm^ótUMg. 0)0441 A „.szakaszos szűrés'“, vagy az „adagokban végzett szűrést mod"' itt egy olyan eljárást jelent, amelyben egy készítmény, amely egy sentenyeaztö közeg, vagy egy sejttenyesztö közegnek legalább egy komponense, egy spécid kas teljes mennyiségétvagy térfogatát egy szűrjük át; ogv vrüvvzùtvo. a -< stu'· v'uio kapacitásától lúgeuen, cs ahol a szuiem eb.tnvM oefcuv'-mk, ooehnt a szedetett- eiiurusba tsmoüiul s ?g> taobdnA. arm\Ss haszoáhuk sagv leOusundmk 041451 A „füvamuhu szturs“' ^.uo .online --.-üres" vagv „iodine - üres'* vakkdete/es te leölése egy olyan szűrési eljárás, amelyben egy készítmény, amely egy sejttenyésztő közeg, vngs egy sejttenyésztö közegnek legalább egy komponense, egy speed ikus teljes mennyiséget vagy tér-fogatát folyamatosan szűrjük át egy v iruss zűrön, a vírusszürö kapacitásától íüggoen. és ahol a szik ksí cl sárost lob-, tabuk, am-mu a u m ham 'M.e eljárásba irányi púk vágj tápláljuk, nmei-.ben has< miijük vagy felhasználjuk. fi§4éj A találmány összes megvalósítási módját végrehajtó atjuk szakaszos vagy folyamatos s,·üressel A jótekom hatosát mar akkor elemik, ha egv kes/nmenyt, ameh egv seplenv es/to közeg, vagy egy sej item észlö közegnek legalább egy komponense, szűrésnek vetjük alá, legalább .24 óm liawtt eg\ un-vt\en \v «s,'ü oeUtvka ei o*n ' pnrusnnu o naximum 75 nm. es vohnuvt rikus kapacitása legalább körülbelül 2000 lltennr, azzal a céllal, ltogy egy virusszennyezést cUdvo-listáik a szóban Ibrgö késztfefgyhök j$HM7j fcgy. a találmány szerint előnyben részesített rnegyaléslíiÉí s1ÂBééî1:MÂs. %%$$$*:· nyezis eltávolításának módszere egy készítmény hép amely lehet pgy s^örnyémtilfegé ::vagy f§yy segtemoNzte í « äh k i o, m ee\ < » ^väkäiv' a n eoao tm< ' kxN mmm s uonH óg<- tm A o <t ho>N οι >.y V \iu4s znm t -0-0-, <\ u *?Vte\ t uuíono ' pot< s n tone n^v t ,mi iu^" o!u m*mku* kapaotta-.'t Ngakthh komtbdul ?0oö bin t«' lolymnAoo \, ute-> ** s ' pabtn ï tmok uu köde si módnak a/ az douve, Imgv a készítmény előállított azurieto kiVvvtieniû es Folyamatosan betalálható egy eljárásba, ahol használjak vagy ;pha.§MÍSuk. sejtienyésztő közeg, vagy egy sdnenyésztö közegnek legalább egy komponense, egy további meg-valósítási módiig közvetlenül vagy folyamatosan táplálhatjuk egy bioreaktorba, előnyösebben egy nagyméretű bioreaktorba, amelyet egy folyamatos betáplálás« sejtíenyesziési eljárásban, például v„a Kcmo-s/hd ibamAiä, eg'. oeriuztíN dram-hm surv eg\ -'aka- o\ tauplaluM* ehündhar ka\z nálunk. Ezt a megvalósítási módot úgy hajthatjuk végr% hogy kdrSlbel^^ÍlJÖt^l^ikm^ityöaíM^ használunk, es 10'40 t kozotu hömemektotet. nhol a vhtotihllM IlpöltM Îfpîllb' .1000 liter An" vagy legalább 5000 literimb Emellett az is előnyös, ha a készítmény s itusszűrését legalább körülbelül 2%4B Â::ÂtôhnttjüliiT%^pimaxitnpni: t hónap alatt, előnyösebben legalább körülbelll sg\ bet On oí hónap ko. ónt \iotnrtan» alan, es legelőnyösebben legalább körülbelül 3 bit, vagy kö-mindül I ltot 3 U-om alatt, meg eond ín ölöm ősenben legalább 5-3 hónapig. FermészelONen az ÖNSzes k-bd pununeter komi múlható ezzel a megvalósítás« móddal Emellett az az donyös. ha a szúrenűa keszratany egy sducâpemto közeg, es a szutve módja ioiyantahv* szűrés. fíHMlj A szakterületen tan $n szakember szamara termeseteken t\metl Ικγν a vmtsszurt készítmények, amelyeket bármelyik tdáimány szerinti; módszernél elő lehet állítani» «vesztéshez kapesokkió előállítási eljárásokba Is irányíthatók vagy betáplálhatók; Ilyenek például a gyógyászati, diagnosztikai és Vagy kozmetikai készítmények, valamint az élelmiszerkészáhnények. Ezekben a megvalósítási módokban a készítmények iölyamatt>s szűrését részesítjük előnyben. jllMlj A találmány tárgya továbbá egy készítmény, amely egy septenyésztő közeg, vagy egy sejttenyésztő közegnek legalább egy komponense, amelyet a találmány -sejt tenyésztő közegre vonatkozó bút melyik módszerét el elő lehet ülnank gyógyászati, diagnosztikai cn vagy kozmebkat keNZiíniettsek, udanmti az eieirnss/ethés/dmemek j|#SÖ| Néhány ntegvahlsiíásl mód szerint a vímsszmzmdö sejHenyésztö közeg steril, vagy másképpen élökézéiti Méhány tnegyalisiásl mód szerint a sejttenyésztó közeg irnialtnaz iallaii le-herjekef vagy szérumot vagy utas, allais módéba komtxmeimehrn,, vagy álhitt teherje mentes, sav y szèn.onmenîes. vagy állati eredetű komponensektől mentes, vagy az előzőkben említett jellemzők blrihilyin kombinációját tartáte)8®/ll&amp;-:m»ígvalósííási módok szerint a sejtienyésztő közeg >al-y^ÎriÂ^tràciô^n tartalmát kllMlüi növényi vagy mikrobtális eredetű hkfroltzáuimokat, kü- »'«O'tv.* Í N Λ n OU î . UO O ' 1 gv V. Ot\ Λ 0' v'vMxM mOïÎÎI:, HO»'. I« vl f gU X N >0 közeg egy állati fehérje mentes közeg, amely különböző koncentrációban tartalmaz legalább egs s ' λλ x ' o öv1 ''"xsN.o \e "egs \* alsnam szét om ehaux* kuV » mm alkalmas állati Ibhájéiét, izemmel sags máa állati eredetű készimlu nyék Mmsszüsóséréj Izziti a céllak hugs tovább j»Ä|ik fsÄiek biztonságát« különösen akkor, ka sejiíenyésztési eljárásokban alkalmazzuk, gyógyászati* diagnosztikai és/vagv kozmetikai készitményekhen, χ alamint élelmiszer készítményekben. (1)0511 \ „^ütemes,do közti ömömck-'n a ta-almam céhe na cg1- ohe t ke.; eg. ameB al kalmas -mitek, előnyösen állati sejtek, még előnyösebben emlős sejtek szaporítására.. /« vinv sejtte-nyészeibcn. Bármelyik, a megfelelő sejtek növekedését támogatni képes közeg hv-ználhMb. A talál-mans szertan segkvo *. -- to közeg alapélbe As melyik alsptapiakoon, azaz például a DMEM. Hont I ΙΛ Medina- iw. M.aVn vagy RPMt tapUkm-n, amehsk .éta'uhun omette! .a .vaktetüloíen nrνο szak ember szóin ara. Az alap közeg tartalmazhat egy sor adalékanyagot, beleértve az amim »savakat, vit an unokát, szerves és szervetlen sokak \al amint szénhidrái-forrásokat, -mindegyik adalékanyag èfp$: jelen, amely támogatja egy sejt tenyésztését, ami ismert a szakterületen jár tas szakember számára. A közeg tartalmazhat kiegészítő anyagokat., azaz például pn dér ekei, például nániurtvhidmgénkatóoaatoí, aaöoxtdáosokat, stabdizálészerekek bogy ellenálljon a mechanikai ZR-ssmek, sags e;,-tu néni mvokat í:.Iö szükséges,. egy nem-ionos telidet λ*ιν anyag, pciaaiü polietilettghkólók ős pohpmmhngfíkolok (például Plútómé f ok.RTM . SÍ RVA> n- ndb.Uo borza bab-zásgát 1b anyagként.

PtlSfj A továbbiakban egy „állati fehérjét- tartdlmazö -lözeg'’ szakkifejezés jelentésé egy «etttenyessto ko# eg. umets h müven, embtn torra xho! xagy eny aihm tonasbo' származó tehet ml tartalmazz |0053j A toxabh-akban cgx Jeheu ententes vvVCpü egs septensesztő kos.. amd> uvmes bármilyen fehérjétől, amely egy emberi forrásbök vagy állati forrásból származik. PÖS4f Az „állati fehérje mentes sejttenyészti közeg” szakkifejezés jelentése n találmány sze rint egy közeg, amely nem tartalmaz magasafchretidil többsejtes, nem-növényi eukariotákböl származó fehérjéket és/vagy fehétjekompönensekei. A tipikus fehérjék, amelyek hiányosak belőle azok, amc-ivek szérumban és szérum-eredetit anyagokban találhatok meg« ílyett fáidáni az ühtmiífe M- növekedési faktorok. Az állati (eltérje mentes sejuenyésxtö közeg mentes bármi!)ou to/öton allen eredem termékektől és rekomblnáus állati eredetit termékektoi. valamim emésztett feb^.icknd e- m-ok koce-útadói. nto Itpid, xtmktomoktól sags azok tu- mou kmnpotXci>-e 'ér&amp;btű fehérjéket él feb#jekornponenseket még-MIl; kölönbözféthl ά nem-âllatt fehér-jlktől, ílmblnyékhöl gvdkmaz‘V$:kiglf<^M«k1őt és öligopeptldbkid! pltálálán;:1(1--20 aminosuv hosszú- ságáj. amely növény a szójabab, valamint az al&amp;c$ony-tbbren<to eukariótákból származéktól, il> ei? például a/ eies/sö amelyet tartalmazhat egv eoabnunv szereit ,ιΠηα tehene nettles aejttenyei/to közeg, jtH155| \ Amitől, ante vnkkt >> OO' g'lenb vem a' ,\ » endctu 'aev ouvem me>kte ku ràsanvag bármilyen emésztett formája, 'vagy éle.vióhoi, vagy baktériumokból számlázó kt vonalok, Λ találmány szerinti sejtienvésztö közeg tartalmazhat „s/ó gahidroh/ átumoC, amely lohe« ereken tiszif-U*» -s , rx s,! ï /tinHt s 1 ' * >. u' ot »*«>**. :|IPÍ| Λ közegre alkalmazott „szénimtarrtié'' szak ki felezés jelentése bármilyen sejttenyészet közeg, amely szérumot tartalmaz. |Ö05"?j A közegre alkalmazott .,szérimnnimtex” szakkiiejc-es jelentest- hátmiit en set tie ns és/tó kő/eg, amely mon tarie!ma/ szérumot, \ „s/erummomeN” szakkririezéx alatt azt vittük, hogy a közeg elemimen kevesebb, mim 0. i°o szérumok előnyösebben kevesebb, mim CM)km s/e-romot tartalmaz, \ vra t tfkse ο ο*' ,ek >*. a u misek'" u"*** um Ke* a hh’vnrogot on >Η H *0k Ostt^uht ïN,l lít * Oi. k jfM’lSSj \ebau> rrm a ilovta^t m<el er » \ üres ekam-evu mmon murietet v v m * szőttet áramát egy nagyméretű segienyé&amp;reibe illetve bioteaklorba tápláljuk. Eg> „ttag.yméreiü" segtenyészet Mentese a továbbiakban egy sejttensoszet, amelynek a mérete legalább körtükéiül 100 liter, legalább iklrillbelül 2lKí liter, legalább körülbelül 300 liter, legalább körülbelül 400 liter, legalább köritlbelül 5*10 üteg legalább kömlhelüi ICklkhter, leg#Ä kömlbeltll 1500 liter, legalább körülbelül 20CK1 liter, legalább kos ül beiül é5(«t htot, legalább kömibeltll 3000 htot, legalább körülbelül 4t*00 hivő legalább körülbelül 5«K}0 b|?r, Igpllbb körülbelül 7500 Itter, leplább körblbelttl 10000 llteevagy legalább Mriilhelül 2ÖÖ0Ö liter. Egy előnyben részesített megvalósítási mtrd szerint bármelyik találmány szerimi eljárással kapott szőriét iramot egy biotxtáto%i tápláljuk, amelyet egv kemosztát eljárásban, egy per&amp;lziós eljtk rásbmg vagy egy ráíáplálásos szakaszos eljárásban használunk, előnyösen folyamait ts szűréssel. lOOSf j Az itt megfontolt sejítenyészci lehet bármilyen sejttenyészet, függetlenül a tenyésztett sejtek típusától és jellegétől,, valamint a tenyésztett sejtek, növekedési fázisaiéi, azazpékfául letapadó vagy nem-ietapadó sejtek; növekedésben levő, vagy leÉtllôMÂàvlkédéàÔAéjÂ.. {Oífoíij A „sterir szakkttejezésnek a találmányban használt jelentése egy olyan anyag, amely mebtiáv yaiy lényegében metles a niikrobiális és/vagy virális szennyeződéstől. Ebből a szempontból a „menmezodes“ identem egv olyan nmey· amely eltu tm kevVnvov, amois egv fittememm közeg. \agy egv acnteovea/m Közegnek ley.dabb vg> k-'-ntponct'-u1. Inam komponensemé A „steril szűrés” s/övegócszetuggésében a steril szűrés egy funkcionális leírása tusnak, hogy egy készít-menst atï, 5 fvsaK e v símé N,most e „v cmod mA <. bakte. ,0' - on mnp, rotK.ysla/ma szennyező/ két. {íMKíi j Λ λ trusmines ' srakkuesezevt egyenrangú to hasznainak a . nmara-tuCN'' s/akkuen - -vsvol, os azt ieknd, hoe> a vzuré\> eljára-éioo eg\ meghuueo/uu pórusmet-oto vau^íúrot haszna lank* Ezeket a szürdkoí IItaláhaii arrs ^Eáí\||k^1pgf aítá^olltslk a vírusokat, f006!| A utrate xso. ni>ed" όι u d \to ό> vm ií *»voo\ Ct „ "" w 'U' un ssv.» ukevnl aitavolunnn adtot bz >tti>Ux o kà o is»ï ko raos <, ον ·>Κη . kik, e ι >

Ez a »k: fins elő vgy potenciáik virális szennyezést is magában foglal, amelyet szűréssel keli ehávo-Hinni, valamint azt is magabán taglalja, hogy a. találmány szerinti eljárással egynél több varast rávök-ltunk eL A virális szennyezés, vagy a potenciális vinnie szennyezés a kővetkező virtmcsaládok egy tagja kitek t otltoonvos ónra.. Xuauvutdae. Pautnoxos aralae, Rluibdov istdae. C"on>n oiriilu.. i:la\ 5' tnoae. Pleoraavsridae, I ocas irav.e. Ariern traite. UetVarx u> unta. Banyai ovi te, OJteiviridue, Reuovirniac, Reoviridae. Coran u-dae, AMoMvbora.. Poxvlmrau Herpes s tnitae, iriuo*. »raise vagy Rc*o tridao. Pontosabban a virális szennyezés az alábbi csoport bármelyike lehet: \osN,ucleK p t?N-,o r-!ii.',e u P\ * ónéra-, ki·,'' vsu; e ·,νλΧ!! * A.A kaMxssruN Bansamuors - s ko Norths* av agy\elogralksdra uras, »ofleesrza \ là Bras, Jaunt Bras, Faramtlueeza viras 1.1 X Murám N me- ' Mumps,.· * ants, S era asm.»rk.» rácraszrrsi szun »emm virus, Sendai virtue Nevraratk betegség virus, egerek Pneumonia vinsse. Iióiyngov azáigyulladás viras. Veszettség virus, Szarvas-"1 aha ks'tor ^ t,,5.N ragraa'o topUUrara un \ \, R \do mra\, - Vogue - ran veráMra ab. mson ura ' ' o „Oh \ 'N m I'Ό.Ν , 0'ra'ogMí knksN ' s,", \ *. s'"*,s zlra, d!oeephalomyt:mardlfiá viras, Coxsackie: virus B'f, lAeiler eg|r agyvelogyniladàs viras, szót éráki-o" I I on g\„"' m V vmimmueűz *. v. >muí restes » fosom,*»“' Send * ra <* ra ,\ le oh v 'has, R srácba ssots. Jeptn ugj 'kmsoráéra raus, hastens rá ,rax ok·,:'sibu-rás rares. sertés rapso-OokU' Cn leg/os/ux * randram* \m*s,1 *vo;o ratas. Rí-rauin I é b madar renyma, Roi λ mis. sentes mreovirus 1, Adermvirnx. Psendorabses virus, rágcsáló gammaherpes őrá Herpes simplex virus l, BÈkA viras 3, kis egérvágó vkus (MVAle), bbjetongue virus tBI'V},, já.rvártyos vérzéses beteg-Ν' ' ' t sz.n\aNnaíb. vnabs aavo, ov mo |Bvl>\ }. ^jtcs ;o\mr n d'lo > N mi» mo, 'O},'«, >, ,bMt..V j,. R.CUV N ΐ > *g “ram kC,n * vsa \ » \ΜΛ I *. ».mus A., poho, vagy liáfvősdiriőíté Bló. jiilái| A „virnsszüféé" szakkiíéiezéN· a „vims-reteutát szőrd'\ „virális szürő'MB ..nanoßlier' szakkifejezésekkel lélcserélheiüen használjuk,, és általában egy olyan szúrón.· vunatl«ik.ai»elynek a »ellemzot összességükben alkalmassá lesé a Brus visszatartására, ennek a lenke-ónak a teljesít-csohc/ meg tok k> porusmerette* tcndelkezxo I ,\k köze a jellemzők kőre urtüztm -példáié u membrán attribútumai' azaz például a luorlohnu«*, a pórus -tlakja. u (várusok sűrűsége és egyseges-» NCge '.tt'X λ ooravrovra. a noniDur t ,ο ^aa vb \ ^blma.iyb« » jól bavz » dbat ) tnemln i ;:fpk·;^melyok »Beiitiizaflkpn ős tőUeseu alapúimé, esetleg az : udezorpox retíun tova! Lumhmàb a Λ mmlkt/arhso^ t* ,e·· advorptiv tetőnek» mechanizmusul nem szükségszerűen zárják ki .egymást* #^|y.:.Ä*§ JôtiliâlMàiêèâî egy vagy több mechmtizmnsis. :PÍP|; A jelen találmányban definiált* és<m sggÿik Megvalósítási módjába» hasiéit vűigA s/.üröt eg.% olyan membrán jellemzi, amelyek ·%Ί^Μίν -pm^méme maxira»?« 75 am. A tallb n\mx ní, onts egst*. mcgvaln-aUM mod ν'er-s it a oAktov pot usmeret also korlatja körülbelül N ana korulhchO 10 nm. körülbelül iς ηπι, körülbelül 20 am* körülbelül '25 nm, körülbelül Ml am, körül-belül 35 am, körülbelül 5í> nm vagy körülbelül üö nifcA jóéban· forgó találmány szinti meg»4#: stutss módban a.? ebi Uh fontosom feko kot lat? a köiulhelul 10 nm, hönltlvlöl 15 m, körülbelül 20 nm, körülbelül 25 nm, körűi beiül 35 o.ng körülbelül 50 nm, körülbelül 60 ?rra. vagy körülbelül 75 "o \dhmt Ktkütn e χ */ »ti r y t ,>- t mod\tr t s n witro oftehus poiusmerete körülbelül :5--75 nm, \ agy körülbelül H»-~5 otn, χ agy km ötödül l^-?5 mn, vagy körülbelül 20-75 nnt. vagy körülbelül i 5-50 nm, xagv körülbelül í 5-35 run. |tj065| 4z eOelm ρόηηΓ'.,τοί jelentőse a a \ édnakban a membrán egy jellemzőm, es a re·· níCv 'kcock <«ía a m„,etető otd a ne! ve* a nnnAto hatok ο-a a χ kepe* üss atun.no otogsuuoh i, boga i hatol unj cap - r<ntgú ea> Jv-n mordu rev α,·Ά log u-hrukus csökkenem faktora írja te. fllöáéj A találmány szennn eljárásokban használt xirussaüto bármilyen szűrő lehet, amelynek ko'· 'rom \% mogVtci annak h <nx leges legxor ο,·,ο\ηα«>' egs kábább kotulbolnl.2000 htu m' vagy legalább körülbelül 3000 literm". vagy legalább körülbelül 4000 lileenr, vagy legalálb körük belül 500Qt liter ro:. vagy legalább körülbelül 7500 htetvtn' vnhimetrücus kapaeitáii; vagy legallbl I» műbélül HXHm htot nt sugs Ucukibb körülbelül 7ut't ohtot m , \ -,gy umelv tőbbmmt 24 om bősz-seat működtethető egészest ? hónapig, vagy előnyösen legalább körülbelül 48 tira hosszat, körülbelül; ' 3 osa he-s/.n, köttöbdöl 4 eup.g ^ortflbohtí * napsg. kotit'behíl o oaptg, komlóéiul ns.ug, körülbelül, 7 .napig, körülbelül 1 hétig, körülbelül 1 hétig, körülbelül 2 hétig, körülbelül 3 hátig., körülbelül 4 hétig, körülbelül 1 hónapig, körülbelül 2 hónapig*lirülfeelü! 3 hónapig, körülbelül 4 hónapig, IlfÄflnl 5 hönaptg, körülbelül 6 hónapig., körülbelül vagy körülbelül 7 hónapig lehessen üzemelteim. fOOilj Termeazetesen, ha a találmány szerinti eljárásban egynél több szűrői használunk, vdönho'o opusa, xtruss/urok has moll' a>A ^ komhmalbatok a színest epuosoaa, denxösou paötu nanosan vagy sorbakötve. fÖCI68j A példaként megadott vtrusszürö egy egyrétegű vaus többrétegű mernhan, és példá éi poboauhdút-Oeondboh cellulózból, uxodesmut cellulózból, peklátd aip\uronuvuum cellulóz üreges rostokból vagy poliéterszuifonból állítják elő. A víresaznrö.1·, membráttjársak a töltése lehet semleges, negatív vagy pozitív. A membránok lehetnek ionos rnembránök. például tartalmaz.bab.ak katiooos xagy anionos csoportokat, de a semleges otemhíánokat lehet, előnyben részesíteni, a pH-\ni !nen,, ,4 fuegoe t k xuüssz, ,<.* 'nttnbia s\ a ta 4«b s. - ^«dto (> ^v*nbtat < k k<.>

Jas/ihaiinh fei. Egv efönv ben rês/esm-P megvalósítási mód szerint a mlàimàny érinti eljárásban Inozuah \ 'su- von- me-mhrama pobvmdtden fh mnlmd ϊ Γ"'··1 11- 5 xagN ροηοη,ι ' milunboí koszul fűihiűj \ poldakem megesett s,\n,é lu t ,sm.Kék demon-ouilmk, X'gx képesek ehaxo- í v- un'vMt e koxmkemv tu'tozuxk m.md - ι ' i uy ' \< M< i'-'t ^ (aae'ao, es \»«η r.á'em 'Ό leelmel-ms ' ohm 'el ,hrm ' - es használható ,- '-»tok köze urM/nak, malik ül hogy ezekre korlátoznunk magunkul ksuhfs Pla-mm l> N szűrés s A sa hi Koset t orporarion, l aeo’ u I)n\, -e s^sxa V \ e,\ ' \ Λ \',,n >> Pkmm * hx mox) flm-o«.,, \ - m \vl! \λ 0 ' pe e' "*> r 'e »> e ,>í \ - Ό , \>aY \,'s„ * v mmn,

Is Iann v u Divmmri. lüO'îôl AM természetesén Äinätüs, hogy á fallilnáiiy szeririiiyyàfâsbàs. Maamáli s^êmm tokkn ózható legyen és vagy uraoklávo/xm és-vagy másképpen sienkzeő legyen felhasználás előtt. Azonban a sterilitás biztosításának összes más k-heíséges mórija alkalmas a találmány kivitelezéséhez. Továbbá az is kívánatos, hogy a szűrő integritása tesztelhető legyen felhasználás előtt es/vagy ni m 1 gy előny Km re o e? ítélt övre· ika-ná-e mod -·. es mi a t. dalműöv szerinti eljárásban eg> eutokfa vuzou, integritásra megvizsgált xmisszűröi használunk, amelynek a membránja poHvinilidén rluo-ridbol tPVDF) vagy pohéters/ulűmből késztlll 1Ô0?I| A „szőriét'* szakkifejezés. amelyet itt a „permeár szakkitejezésse! felcserélve haszná lónk. azt az oldatot jelenti, amely keresztülmegy a membránon, valamint azt az. oldatot,, amely keresztülment a szűrön x agy a membrrntőnl jOÖ72f A „retentât” szakkifejezés jelentése a továbbiakban az oldat egy olyan komponensét

Menti .moh vma/mmnad, m na m hp m a membránom vakumm ,mmh man Iorte at a -miaut sags <, metnbmm, |0073| Λ találmányban mi lusznalham vnusa/uro bereaxbezea tatalma/ legalább egy \ííu?* szűrő elemet, amely az áramot pre- és poszt-szűrő szakaszra osztja. A szűrőberendezés tipikus esetben taitalma/ eszközöket u in onus es az aram szabalvozasata. azaz például s/u anyukat es szelepeket, valamint áramlás- és nyomásmérőket és sűrűségmérőket. A berendezés tartalmukat számos szürömembrán elemet is, különböző kombinációkban, párhuzamosan vagy sörbákstve, vagy mindekét módon elrera.lez.ve. ||ΪΜ| Λ s/ütesi aram a nyomassál változik. Általában, m -i malis működést tartomány hm. nő nél magasabb a nyomás, annál nagyobb az. áram. Az. áram á hőmérséklettel is változik, A működési hőméraékiei növelése megnövelt az áramon megnő a membrán hajlama arra, hogy ntegiepedjen. A szervetlen membránoknál magasabb Mitnlfsék·· letéket és nyomásokat, valamint nmpsaib pil-tasiományokat leltet használni, mint a polimer rnétibtá-nokhoz.

Egy sæÂÂfoa jártas pak«lfr h«g?í aiy itgtllmlny szerinti •«irassyift lflyen használható egy olyas s^í^:«mely»ek g nmlekfoasúly vágási énéke kisebb, mim 5000 Dalion, vagy kisebb, mint 1000 Dalton, azzal a céllal, hogy ehávoh'isuk a vírusokat is. Ebben a szövegösszefüggésben a „molekulasúly vágás! érték’' (MWCO) egy mirö membrtm-jdkmzdje. amely oKgM&amp;wa» az oldod anyagok átlagos molekulasúlyát, azonban részecskék és vírusok sem fognál átjütni az ilyiú szúró membránján, jöÜíMj A taJálmátty szerinti vírusssrurést eljárásokban a pH 4 bármilyen értékre beállíthatjuk, amely iltloz szukaips, hogy megőrizzük m éppen szúrt készltsném. előnyösen egy sejttenyésztó hó/egxugs put'fur stabil nását és bmUáon,mtá\ál A pH 4 például beállít hatjuk I és Iri közé, élőm ö-komikén! 2 m homlhehl ^ koré \ze\ *,orJheh7 es ~ ko'e J nsosen koru'hhi! ok es 1.» éilbélöl i közéi, vagy legelőnyösebben körülbelül 7,0 és körülbelül 7.-45 közé (fiziológiás pH -érték), |CM>77| Azt is megfontoljuk, hogy a találmány szerinti eljárást integrálni lehet egy rendszer be, egx Merlszalo mbmsegn szűrőhöz viszonyítsa downshourm antch sztuo eka\oht|a a bakteriutu szennyezőket, és így egy készítmény steril tápáramát képezi, amely lehet, egy 4,ktindnlási készio-mens", uav harmed ik találmány szenntt altai áshun hasznait készítmény, |ÜÖ7S1 A találmány szerinti eljárás egyik megvalósítási módját végrehajthatjuk, két vagy több, sorba!-; ütött szűrő hasznú [másai. Etna.!· tz az élőmé. bogi fokozza a uras hamvas kapacs üst es a biztonságot egy potenciális virusszürö hiba vagy áttörés ellen. Alternativ megvalósítási módok azé risst a szűrést két vagy több párhuzamosan elrendezett virusszürö használatával végezzük, ez , hemse St;- 0. a uras*, oo-,--ereset. an,No) m-,s megszakítanunk em lohamat-", ,áj<srári, es meg ekv\o a, emm nests 'a,hu - A- eg-u-o,,n' m, például eköomdc\ ms at. \Mm\ Még további megvalósítási módok szerint a szűrést legalább kés, párhuzamosan él ten dezeti szüret használva hajtjuk végre egy Y-alakú elágazási tartaltuazó csőrendszerben, amely ben mtndcgvik s/nro boly adok-kommumk .semfom -, an az \-alakú elágazás 000 A .masai es egs ke s/ttmenu biztosító forrással. Nelunv megs utosdaM mod s/umt av Y-alakú d.u.o, ,0 tartalmaz ovo konnektort. Más megvalósítási módok szerint a szűrést egy olyan elrendezessél haittuk vogje, amely több szűrőt tárialmaz, mind sorba, mind párhuzamosan kötve, Á találmány összefüggésében különösen h.'.sznos cg> ekeiide/es, <nneiylien kgalal'h a második s/tuo p.ahnotmos elrendezesu. ,s többi patlwamov vagy sotos eltcnde/esu ouuozl összekötve, hogv megkaptuk a fohetoseges a, egük Vágy nsásik mitó kkaerélésere, anélküiftogy îeàÉf:ihiüi-É;szùrési:.:4|àlSÂ^te^Âfoé!ôkfek jüöiöj Néhány megvalósítási triód szerint a szűrőt a felhasználás előtt integritási vizsgálatnak vetjük alá. Az integritási vizsgálat magában foglalhat egy levegő*víz. diffúziós vizsgálatot, amelyben k s pót >. ,> ui\k s !>uo mad a 1 >t - er I \ , be meiönth, e, hu ! k A a \ > sgatg. -, ,mn szűrőben egy lukra utalna. filfilf Az egyik megvalósitáss svuk! szerint a vínísazürot vagy a vira.v»zürö membránt a vi- •nwzwèst ehams ohm ,ΆΑοαΙκΙ k-la-n tviüátü egy mosószered, főleg egy κη as mo.vos/errel, kayo mosószerekkel e- vagy etanoibü mosva, |§0E2| Az egyik találmány szerin&amp;meg^áátáei módban nmgeociâlis ármniású szúrást es végrehajthatunk a találmány szerinti eljárásban A találmány szövegösszefüggésében a Maageaciális áramlás« szűrés”· s^tóiféjiezést a ^k^resztáramlásdií^Élrés"' szakkifejezéssel íelcsetélltetöen használjuk. A tangeneíálie áramlási módban a szűrő upstream * Melau a κ>Ν,ϋθί utatrMm κηοκηΐΜ e vük MiKi»> ' s ί'ΐκηα vhitv , »au ίο xxag'to u ual > in, \ <m' » mratVossa xezoîjui A permeátnm át jutásat megkönnyitjük. a retentât áramlikát a betápláláshoz viszonyítva korlátozva, anti a rendszerre ellennyomást eredményez, és lehetővé teszi a petmcátum átjutását a szürömemferá-non. Az állandó sodró araiénak a membrán íduieten ktaes/m', az ,i Latéba. hogs nümmahzulja a a. a rend atekVn lexo vat OíC ."f au eh r vk^t Ihatnék κ ' os v to a\alm ·.- amely l>»t* okibb eg-. I logía i.sökkm e-f énekes ö 0h ) elet ego vuaUs x/eoo>>\ ,>r>,. > tg) legalább egy .? lop. %.N kwo^M e \>.t t[R\K et'' 'n h όογκτη, >, ' igv k' ^ <. -, - or vokkenem etkk. t (i.RV) elér egy viralis szennyezőre, vagy legalább egy 4 lospo csökkenést éneket (LRV) elér egy vitális szennyezőre: vagy legalább egy 5 logjo csökkenési értéket (1.1:¾ dér egy virálts szennyezőre,. vagy legalább egy ö logu- csökkenési értéket (LRV} elér egy vitális szennyezőre, vagy legalább eg\ " toy e^o*-kenőst őrieket d RV) elet egy xuako s con>e<ore.\ag> legalább egy 8 log-> ssok-kenesi értéket tLRV} elér egy viráiis szennyezőre, előnyösen legalább egy 4 log50 csökkenési értéket tlR\ > elet egy xirahs s/enme/ote Az ostveí log csökkenést tenyezo alkalmazható bamtehA, avims-nouo maximum Ά nm-es eiíekm jvrusmereUne Az eg vak találmány szetum mcgxaiosüusi midiai á víntsszűro effektiv pörusmérélé körülbelül 5 m körülbelül: ló nm, körülbelül 15 nm, körülbelül 20 mn, körülbelül 25 am. körülbelül 30 any körülbelül 35 nm, körülbelül 50 aim, vagy körülbelül OU nos Λ s/obtn lot go tálaim tm szermu sn*.gx Mosna-o m.-thum a e Hokin. pomsmetef felső korlátja körülbelül 10 nm. körülbelül 15 nm, körülbelül 20 nm. körülbelül 25 an, körülbelül 55 nm. körülbelül 50 nm, körülbelül óO nm, vagy körülbelül 75 am. Néhány találmány szerinti megvalósítási módban a virusszürö effektiv pórustnéreie körülbelül 5-75 nra„vagy. körülbelül 10-75 nm, vagy körülbelül 15 "Muo, vagy kouühelnl 20-75 nm, vagy körülbelül 15-50nm. xagv körülbelül 15-35 am.

||Ä1| A találmány néhány megvalósítási módjában normális áramlást) szűrést használunk. A ..normális áramlási szűrés'’ amelyet egymással íeleserélhetöen használjuk a „zsákutca” „egyszeres atjut.o" es „közvenea .mrnilou .:-oacs" soi, >„zv olyan ottK-zom '-west viime-na seoatko'-k, amelyben a folyadék áramot általában a szűrő felületére merőlegesen irányítják. a szaré egység konstrukciójától függően a fölxadékammot tangenciálisan is vezethetik a szürömembránhoz. viMotivitva, azonban a koresztárurmássní ellentétbe» a mentái keringetését nem alkalmazzák, ami α/t jelenti. hogy s specifikus áramlási sebesség a*onos a s/ürö előtt és mögött. Bármelyik vimsssürö baxvmálhato, amdy legalább egy I loge» csökkenési értéket (LRV) elét egy vuafi«. szennyezőm. vagy legalább egy ' lo> vv>kk*.rocM ermK V \\ ) dm e^\ " κθ - s \'»m\ o * s n ' lem nékH ' kv ^vAkene-· értéket (I.RYi elér egy virális szennyezőre. vagy legalább egy 4 log*» csökkenési értéket (LRV) elér em \it - ',ηην* c. s g' - »«'megs'' v ! ^okkuKsr crtekU (1 5Λ te e v>a!fs\ os ne itère, vagy legalább egy 6 iogm: csökkenési estéket tLRV) dér egy vitális stems venne, vagy legalább egy 7 log;.; csökkenési értéket sl-RV) elér egy virális smtnyezöre. vagy legalább egy § k»gw csőkké-neu értelet (1 R\ó >.. 'ér eg> s«mhs a xmatyezo e, dom-osen legalább eg> 4 log csókKnCM &amp; tokot (LRV) elé? egy viral is szennyezőre. Az összes i«g csökkenési tényező alkalmazhass bármelyik, abb russzürö maximum 75 nm-es effektiv pófusméretére. Λ/ egyik találmány szÄI megvaléáitáál dêd-ban à vimssMri ellbkitvfioniantosvte körülbelül N mo. kotdk'lr lu nm, km ütöd al 15 ans. körülbelül )u mo, k tűibe'd 15 rm . komlódul 5u nm. lonubeld nm, körülbelül 50 nm. vaus kotulbolnl öOtvm. \ szóban forgó tdáhnauy mmirni megvalósítási módban au dieküv pontméret felső korlatja körülbelül 10 rtm, körülbelül 15 surs, körülbelül 2.0 nm. köridőéiül 25 nnt. körülbelül 35 um. körülbelül A nnt, körülbelül í>0 mm vagy körülbelül 75 tűm Néhsinv találmány .szerinti megvalósítást mód-Ό tv tussi me e4t 1 n jvvvo'V'v o vmiKdtk s " nm. vagy körülbelül ÍÖd?5 nm, vagy körülbelül * "'Ti v. ans ko utódul 2''> 'Srmwagx komlóéiul I5' 5u un», sags kenn öd ul K-A mu |ü084] Arttiní azt a szakterületen jártas szakember méltányolnák, a találmány összes megvaló- sucsj n tód ta vegrehsuhato bármely il Kwnferhetö, a odra technikailag alkdmas mods/emel. például egy változtatható sebességű vagy állandó sebességit perisztaltikus szivattyúval. egy centrifugális s/nattymal. stb. Harmslyen nyomasdlo tartály \agy egyéb edén\ has/nalhato a r nuo-zmvu letesz fül történő áramoltatásra állandó, vagy változó nyomassuk a szűrési eljárás során, filOSől Amint azt a szakterületen jártas szakember méltányolják, a szúró típusának és modiá·· nak temkntea szutes \ag> tangeneiahs áramlásit szotesl kitaLss.rtam olyan íakunoktnl fiigg. mmt az övs/etetd. a fehérjetartalom, a moiekaka dy-dox/lás. szennyezettség részecske terhelés, vagy hamu más biokémiai vagy fizikai tulajdonság a feldolgozandó betáplálásban, a folyamat követelntényd és korlátái (a megengedett nyomás, az eljárás ideje, a szűrendő tér lógat z vagy a potenmhs virális szennyezés jellemm. pekláni a virus t nérete. Hgy ibiyamatközi integritási vizsgálat hozzáférhetőségét és a virális kiürülési vizsgálatok logisztikáját ta figyelembe kell venni. .A zsákutca szűrést kell ítpiku-s;tu alkalmazni a nagy tisztaságé betáplál as ; áramokhoz, hogy ésszerű eljárási áramot kapjunk, míg néhány megvalosuasi mád szemű a tangeneiáliv uramlású szűrés alkalmas nagy részecske-terhelésű betáplálást árutn^K hdögadnsám Néhány dombon részesnél! megvalósítási mód sAmnt a nomtahs ar.un ‘váirést reszenottk előny Km egy fidyautat nass nvo .a! ko ebmaHa, Vrnluho ecs, n s u Ν ί \\ o Vkia pen smack» stum n \ Us^' ' letme- okv' > t Di, V. V do-m -. ίό i> t <-lombmáim ’lehel a talalimiov s vunti mà- garamelu. elkel

ItHlMj [«Tr xwetv-en a/ mi1van\,dró Imeo v£ a tiU!nmn> nem lerlum'mhl ,v adoip lent '« gv ^tO'*na\< moo »sia nvoe! ezek tc»r o\?en.->,n ' ahoéhat uk k* e- m Jván vám, mm te ïit siiÂ*-oáíHermmológia csak bizonya moo-aiosnao mod leuasa colját szolgaija, c* szándékaink szerint item kotlátozo jellegit, mivel a találmány okalmi köréi csak a mellékek igénypontok korlátomé P0ÜT) Ahol értékek tariományat gdiitk meg, olt nyUviiyátÖ, hogy minden közbeeső- étiéi., ál áM telit égplpnek egytlÄiiyiÄak a sxöxegösszefiil§és világosan nem diktálja masking az adott tartomány íéiaő és alsó korlátja köpött, és minden más megadott vagy közbeeső érték a megadott tartományban, a találmányhoz öntözik. Eleknek a kisebb tartományoknak a felső és alsó sotl ο n e .pornotol tt gget ^ » ti Ív κ v ,nn A ,¾ -noebb ,, tóm xrx*.lb i, t.^ -- m\ ». ami o t tn>'/nak, -'-emmilyen -go.titkosan kizárt kúriaira nem vonatkozik ,j megadott tan*»mán>ban. Altöl a megadott tartomány tartalmazza egyik vagy másik korlátot, a.?, említeti tartalmazott km látok egyikét vagy másikát kizáró tartományok és a találmány részét képezik |CHIM| Hacsak másként nem definiáljuk, az ttt alkalmazott összes mdomnnso-* sm leeleukm szakkifejezésnek a szakterületen átlagos jártassággal rendelkező szakember számára általánosan ismert jelentése van. Bár számos, az itt ismertetetthez hasonló vagy ekvivalens eljárást és anyagot is kla, hasznain a κ oendahn.m u\,»kux l.rmsm vr,^'. h-holésebem *, aeddnalban ismertetjük &amp; rep-rexenuuiv illusztratív módszereket és anyagokat, jdölij Az , ehhii á spesfifiMeióbart idézett ém/M gihliliirót ék izábádálrnat referenciának lekincjük, ,minlii-:i|p^|sn--'e|p^tf#kácíőnií vagy szabadalomnál specifikusan és egyenként jelez-néni, hog\ seten-ncumak teknitiuk, hogv lenjük az efiaiasolat es x ag> anyagól a y ann kekkel lap-csoiaiban a publikációkat idézzük, Bármelyik publikációnak az idézése annak ismertetése a Εν nyújtás időpontja elolt, és nem tekinthető annak elismerésének, hogy a jelen találmány nem jogosult ilyen publikáció korábbi keltezésére korábbi találmány erejénél lógva. Továbbá, a megadott ptihh-kiölök álfámat ollérhétnek: a tényleges publikMtos dáimoeitól amelyeiet egyenként meg kell erősíteni p!t0) Al agi egyezzük, hogy az „egy" és az „az" egyesszám ά formák tartalmazzák a föbbes- izimü iróüáküt iá, hacsak a szövegösszefüggés nem jelzi világosan áz: ellenkezőjét, MégjégphziiÉ továbbá, hogy az igénypontokat úgy lehet megfogalmazni, hogy nedátüilmszzanak ppeional|s élemet, Mint olyannak, ennek a kijelentésnek az a célja, hogy előzetes alapként szolgáljon az olyan kizáró tenüinplőgia, mint a „kizárólag”, Is hasonlók lasiaalatlbökgäz igénypont éimnek előadásával vagy egy „negativ1' korlátozással kapcsolatban. |OWt| Amint az a szakterületen jÉÜM aJtsSisnak az oh asisa síjráp nyih<eiva!6 lesz, mhtdegvik ui tsrne-ntet és illhskkált ókgvaléshási módnak vannak diszkrét komponensei és tulajdonságai, an Hlyeket a többi számos nxmvakteàss mod tulajdonságából el Jete vá-Dm tarn. %,0.,-. azzal korona ma lel*« melk done eltérnénk a Hkm ' aln *.> - olts ni \otcnd vans szellemétől. Bármelyik idézett eljárást el lehet végezni az események megadott sorrendjében, vagy bámnlyen más, logisztikáikig teetség-m sotTíodtei,

PÉLDÁK |Ö092) V alabhakkm példák, t adunk mcg< hegyuite 'tiuimk a mién "ákÜm,utyt 1 zeVkel át példákkal nem az a szándékunk, hogy a jelen találmányt bármilyen adott alkalmazásra« vagy elme-h'tîe, V mo a,okom -se D'd Oo ok, jÖÖ93j 1. Példa: Vbusszarés mérvűtekké ütése különbőz·'· viruss/árokkei és sejttenyész.íó közegekkel. Λ különböze gyártóktól száműz,' uruss/nrn measbrannknak uzstetté a vme-t ki net k,,\U külön bozo aouíomeretokher kolomwo ^ov$boí es szál htoktól smnn, o -g ssonev muex'",, ' o t",\a,> otm *o, «'j/ο se ,te m so egekkel (ted ,t 1 tablante) \ NO'ttow,'', to ko,,v osv, tente és előállítását lásd a 2. példában. Λ szűrési kísérleteket vagy anyotrtenak egy nyomásaim tartályban való szabályozásával hajiluk végre |.k. 4.. 5. ábra, és spike-olást kísérletek a ?.. 8. es 9. ábrán, vagy az: ,r teas? NotV'tseg szabályozasisal például vgs putteomkus pumpánál ¢1,1.¾ te? ubmt Λ tee? -létek hőmérséklet- és nyomás-szabályozására használt más eszközüket át 3, táblázatban ismertetjük.

Sl llblázat: a vírusszürök listát#

3 Táblázat; A '>nj thtdtet/aUínmk o-ama

4, Táblázat: A berendezések Istája

pHPMj ?.. Példa' Sejuenvésztö Kéregkészítése :&amp; seittenyèsztô közeg készítésének általános leírását a/ alábbi 5. táblázatban adjak meg, a fenti A tlblMaíhan felsorolt kölöstbözö széjalbdselfeátumok bsszefefefe^ei A setttznyésztö lézég kölonbi·' zo sazzsaal ytézite szfejtik egy stati! gfei&amp;íiésü szűrövek azaz példáól égy kall Iduörodjnd® II IM-Meiabranö f ilter CfetitMgé ÔJ g-saL a ffeldäkbao ísBtenpeít kCliőíifefeÖ wyMzfifesék élőit Az itt ismertetett UVe^-íWeiéreleket használjuk az összes lent, és az 1-11. ábrákon bemutatott kísérletben. 5 Táblázat; Λ közeg összetétele

|Ö§95| 3, Példa: Szüm készítés: A vinisszűröket s vimsszürö gyártók termék~kézik5rryve alapján készítettük d. Ha a s/urôket nein sterilen szállították le, a szűröket > 130 XAon sterikztük 20 percig, )0096) 4, Példa: integritási teszt

Használat után a megjelelő mérető szűröket (a 2. táblázat A, t\ F és F szűrői) mossuk a megtételó gyanú utasstosai .szerint 1 gv i.liée Árainkon Fesztet végzünk Palttronie I Investor λΟ-vd (Pali, l SAV a gyártó utasításai szerint. Az itt ismertetett szűrési kísérletek után végzett integritási teszt összhangban volt a magadott Kataréi tekékkel |ÍH,tt?Í 5. Példa: .Arányos összefüggés a nyomás különbség és az áram között. A különböző nyomások és a volumetrikus áramlási sebesség közötti összefüggés vizsgálatára sejtté-nyésztö közegeket szűrüünk, aiïmklàvnztbî AitlssZurdkd használva különböző hométMkldék A közeget egy nyomásálló edénybe töltjük, majd küí.d«$jipe£$·®¥Ψ®Φ;· ál# helyezzük, A specifikus atomost sebe,"·», get es a k mihovo mon^okai < ex mérleged es eg> nvomás „e, ado-, a nteruk, műié aéüx'n tóg/itihk «A ahuri |0O98j ö. Pékbe Méreiesökkentő iennentádöa rendszer modell A sejUeo} e * to közegek \ -mwun ,;ari es anélkül sah1* o-vehexonh:. ,snt v, v teko.nbmoo'· tehet jet. exi»ess^iSM®"Sajtfetmáéa^lő|áb^ haszsálatávái vlgézzölc p. dsrat, A teljesítményt a noxxkedést sebesség és a hozam szempontjából vizsgáljuk. A 2. példában ismertetett sejttenyésziő közeget használjuk. A kísérlet egyik részét csak sterilre szűrt közeggel végezzük, mi g a másik részt ugyanazzal a közeggel, és egy további vímsszűréssel végezzük, egy Vírusán OPV | híj errr használatával. A szűrést 2-8 '-'C-on végezzük, A férmentádös kísérletet egy Rusltton típusú 10 literes asztali hioreaktorhan végezzük, in-line szabályozott pH-vaí pCbncl és hőmérséklettel. A paraméter beállt-ta\t női·, \ i - tartom insok » fc.u\ntni,kv r ,¾ sowtkcAtk pH: A0SÍÖJ-7J) I; 37.tr C (3X3X0 1X3, Art ij eg.olneXrixxOi À sejteket szakaszos Izysnmôdban tenyésztjük, ezt követi egy káposztát tenyészet, a közeget toválv b| vinssszurésse! vagy «ttáköi használva, A kpimsztát tenyészetből az adahÄ |pivékeáési sebes·· flg és tennelöké|teys|g| egy; négyhetes folyamatos ssjtigoyészetMl mremlpl, \ segNmo teker OAS\ mer«. %1 * o* > \ nmy \ kenmsztat te ne "ben t - x\ tö. se mm v, ks alövetkezöképpen határozzuk meg:

-lm* Π jüeeicH i Highest "ehm όο , ", a ap, kezeg Ku piáié"' m' <, , ' a n\ ''‘ nkîk'gut ,m nyakéra il ölj kataro/unk meg. Λ növekedési sebességeket a CAS's homogenizált segs/árookbél határozzuk meg. A biokémiai elemzéshez a Homogén szuszpenziót 400'g*veí emriiugáljuk egy I-íemeus Multi tug« "· \ eee tN jx^ ' »" ' " os , n/ mz mises p' v ev Vs * es * ' tároljuk. A sejímeníes idükrszókban elemezzük egy exptesszált rckombináns fehérje aktivitásai egy ^ í -s o\el a st.s, da'I μ\»λ' na\ veunt khhen a kísérletben a P volumebikus umnâtcképesséaet az alábbiak szentit számítjuk kit

\ oP smíNgNNítH t." temniokeeeN^eue: az alábbiul.

sva rmt se aminek ka

ptlff j: Pe d> 70 !'tetCN ntemk mhvu öt CmneoiecioN somborn n oee'J l'#> I bt liter', λ mnuLnorneio közegen s ágzott iblv,mutes virns-vuresi teCneka vizsgálunk, nne lőtt egy rekombmäßs fehérjét expresazálő CHO sejtfennemációs rendszerhez, adjuk, a növekedési sebességre és a hozamra gyaíme üt halasa alapján (6A. ábra. OB. ábra, és ?B. abrak A vizsgálatban ugv u emui a \< > msimme t ^ * j te " " emuoju u Pe urnák n e i trast asenlvetk össze, a) standard közeg; b> standard keze', \ meurt l **\ " trusazurovd n nrvt on ti sa adaté ko-reg \HUpe i \tn 'dsoMP" ms- rose eurz. A ti e, amatos eloalkust ehet tshm vet khlötrü m \ uusn mm « \ temet ( PN Vmlamp *000 ént' mm. t s" M , t|\ e \ esehv VP SO mi m e t > lm mnk vadakon t m stkuo mluy x Sartorius i PV szű?*>t használjuk <« K.00-Kj4. K""Me es k.^ Kei Umjesev'« eapokms, man! a VOPgi.r*. \i *' VoU ' basznaipik ,* u ia köz es k ' k vos estest evp.úo ' A paraméter beállítási pontok és tartományok a fermentációhoz, a következük; pH. 7,05(0A-:.;h I ' ái\0 C í m-'0d.p í>0 M'\tf sktk'hlésj(teu"OC't :Μ1ηΐ«ν^^®Ιβ?«Ι:' A scjts/ámokal CAS Y sejíszámiáló és analizáló rendszerrel határozzuk meg. A biokémia; elem-\ ' ' ou os*o - uvm - * '> 's \» * rt ~ 'U ~s * e *c\i\ Vu t » g\ 1-SdNinm iIhernm Soaennö-'. I dói X perem* mod i ml·es ahkxot rév-· el el kevnimk Eppendorf cm.nclboi»* - ' N X V > ív\ X so lo^mt ^ oC'm elunva oi ^e\ ><\pvx.\dt mkonümtan* lekapó oUixPusm -.ee kvuoopsm rv éxck a sumdard min omüben u\ .vemu A kemosztát tmyèazetb«» a specüikxis nüvekedèsa sebességet (μ) a kivetkezőképpen. határozzuk ηχηρ

ό 'N mk m V i mms * w X. ν' i ' k\ in > ,> e\\'«.v s i \ ei \\ f s\ in,' d' ;\k,ko> j A ívo>' \ ΐνΆ.λΛ setnv veesex - χΧ !v>revu ! >k h ,^ηηηοΙΡν íunarozzuk meg.

Ebben a kísérletben a F ®tes«ifikM;^ tinbeidlipességet sk aliblnái ^erfnl s«&amp;nÍrjuk ki;

A qP sejtspecifikas termelőképességet az alábbiak szerint számítjuk ki;

fOtOOI 8. Példa; Vinisszímés AS A Hl Piano va 1$N vmtsszürökkel

Vojahídroít/áiimuü tartalmazó közeget rlX^VK) SE50- MAP P5i spike-clunk MMV«·vek majd egy nagxnyomású narommeáz íbrm.vN összekötőn tartályba tesszük. Az MM\- spxke-Nt anyagot egy 10 enr-es Λ SAH! Plants a 15N virusszüron engedjük át in-line beállítva zsákutca üzemmódban, í Km ntbxu adandó ηχ* 'nzsun beta* a um ti \* aVeb' ru ámen* ti η n "on és maximum értékéit mén ük és iótymmnosan rögzítjük; betáplálás nyomása, betáplálás, szórtét és környező hóméin séüet* és a szurleí suis a (amelynek a változását használjuk a szőriét áramlási sebesség számítására!. Naponta veszünk mintát ? napig* majd elemezzük az MMV vúm titerét (7. ábra). 10101 j 1. Példa Yuiio ''ifs <\s \H1 Piaoov.i |{ui!'\ virusvmokkel ÂéjàÂiÉlkétte#iiarta!m|2éàÈi|zegêt: U. intés DOMO Skv-O l.l:· MAI- ;?>teb ,2> utas Élírtflb \1 -Mm \ \t * "*.> >kv\ v l\ VV\ X 1 * < ' * ' 1'0> * n svf ősz szekötöu tartályba tesszük. Az MMV spike-olt anyagot egy it) em^es -AS AH! Pianova ΒιοΕλ' vi-ruswurön engedjük át in-iine beállítva zsákutca üzemmódban, 2000 mbariiáÜtM nyomáspn (beállb iási ponti. Az alábbi paraméterek minimum és maximum értékeit mérjük és folyamatosan rögzítjük; bet *p kv X >n <oa, X'" míalo s/m et e - komu' ό nemeisckíek es a m ebe* soha temehnek a χal tozását használjuk a szőriét áramlási sebesség számítására). Naponta vészünk mintát 5 papig, tPajd elemezzük az \t\1\ xiros ökaef i>, abra) |iíi2;|i löt Féldit Yüusszárés összalögialás Különböző snnaiuümb ' ,η,ιΜ turnéin,M wzege' .nnke-munk MM.\ \el m nJ ug\ n,*gvv\ordasa phmgétgáz: fepápái A kütöbhözövíiMszhröket a;kilóm H<< * h. i, V \k^ ko <'b <'a ' , ' '* ,o M oV.ex-* oo«. \ 6. Táblásai: Vlrusszürök és újaiul roUzàtumoW komb»îàciôjànâk'^lÂiiiiÂii^lî|,MléïliÂtal'

(iliklj V műtősekti miatku ímasshv* * /Mkute.* tVemmodhm állítottuk tol .) bar állandó nsrnmAo.! tKulhmst pouf a/ *- es e kdödet kacielexel aine H eket 1J kir all.xtüe uvmtasou hajtottunk végre (heàlhtàsi pont}. A?, Aubin paraméterek minimum és maximum értékest mérjük és íol> .mtuiosan rog/.ttjuk: betáplálás nyomása; betáplálás, szurka és hbm>e/e hőmérséklet, és a sémiét $il>a iamelyoek a változását használjuk a szőriét áramlási sebesség számítására. A kísérlet futást Ideje alatt mintákat veszünk, és el^^Ä.:M^^Äut:.Änu. A teljes log csökkenéseket a szürleb ben levő teljes viríts fenözöképességi terhelés és a szúrós előtti teljes vírus fertö/bképességí terhelés különbségéből számítottuk (9. abrak (i'M04j 11. Példa; 1 lösszé idejű szűrés MMV vírus spike-ka! A 2 példákul istnet teteit sememeMo kezeset <pshe ólunk MMV-u'l 5,0 jhupp, IVflX ml)' ütem* maid hosszó 30 napos szűrésnél: vepűl: aii egy 20 mn pérusmereiü v&amp;usszürött (Sartorius Visrosart CPV 5 ont").Λ szűrést a 9 és Ul példában ismertetett felállításhoz hasonló felállításban hajtjuk X egri·, de állandó 1,J bar nyomással (specifikált tartomány: 03 bar - 13 bar), és szabályos időközönként uvomas as átamkts megszakítással bog) próbára tegyük a virusszürdí-B· kísértei mséái te', eme. iái a áramlást sebességeket, é\ ! hier tm' sorát felett tanodul 110 tbmt Λ szutkuhél Ht nun; tt vettünk íhetente et t, es meghatároztuk a/ MMV vírus titcrí és terhelést A .10 vizsgált, frakcióban ttom tapasztaltunk virus áttörést Á. Adrúkiérhelések <0,9(íogio{TCID^'mlt) és <13 [logs oí TClD^oi 1 )j kőrótt változtak a frakció térfogatától függően. A. MfeiMékben a teljes1 terhelés <3>Ö|IogsefT€Il>sf;/'m!)j mii - ima spike-ok mi vág kimdulasi viras föth^iésábol (aKís 855[feg^fTC’:IÖ;W»ö)| kmmtuk' -~ egy >$φ lôggrtdjes viruscsökkenési fök" Hsneredményeseit Εκ* hatékenynak és tejesnek láimk 0 i. ábra).

Claims (5)

1. SZABADALMI IGÉNYPÖbhÄ L kijárás egy viràli» ,szennyezés eliúvolfuteáiA egy késvrâmèaybôi,. -amely egy sejtre-nyészto közeg, vagy egy sejueuyésztö közvggek tegüibb egy komponense, azzal jelleotezv«, kegy a kd'Viîtke^ô lépest tartalmaplí: φ * szóban forgó kés/itotéap legalább i:|4 ém< hosszai tanó szüÄnek mt$k alá égy virosszüröm Äeiynek az effektiv pörulthlÄ mákibiupfS pp es volmnétdkűá kapáéitiÉr legalább kSIis® :30ü0 üterra". I:, légy maxi muté:; |;S tan plrusméreiö., és iegallhfe kirbîMit 2000 llteAnr vplepetrikus kapacitású vltnspüpl álkakoazása egy legalább 24 óm hosszat tartó: ppèshen virális skepyezés eltávolítására cgy lisklPénytZL ame \ ea> ^,tten>iS/io közeg, sags tps m itten uVtó közegnek legalább egy kompotlibp,
2. 3. Az L vagy 2> igénypont szerinti eljárás vagy alkalmazás,; amelyben a szóró legalább körülbelül 3000 IHer/nr. előnyösen legalább körülbelül 5000 literönz yplurngtnkM kagacríádsal; működik.
3. 4. Az 1 -3, igénypitplí bármelyike szerinti e|pás ya|f alkalmazás, amelyben a szóban hagè készumemt ;v eresnek vetjük alá \ agy a szűrést legalább körülbelül 48 óra hosszat, egészen ? lOnaptg tanó Időtartamban, és előnyükén kirüíbiftl 12 Óra Psszaí,;égészen S hónapig tart# időtartamban végezeplp Á Azt, 3, vagy 4 Igénypont szedőd elárás, azzal jéflemezv&amp; pgy tanalmazza még a következő lépést; bj A szürletet egy sejtienyészetbe, vagy más komponensekbe tápláljak be, amelyek szintén egy sejt-tényé szni közeg komponensei.
4. 6, Az 1Ά, igénypntók bármelyike szerinti eljárás vagy alkalmazás, amelybp a szűrés egy folyamatos szűrés. % Az 1-6. igénypontok bánneiyike szerinti eljárás vagy alkalmazás, amelyben a szűrést körülbelül 2-60 °€, előnyösen kirűlhéini 10-40 02, 12 kö zötti hőmérsékleten hajtjuk r égre,
5. 8. Az I. A. igénypontok bármelyike szerinti eljárás vagy alkalmazd, amelyben a szóban forgó virusszürö legalább 1 iogn> csökkenési értéket (LRY > ér el egy virábs szénnyezőre, előnyösen legalább 4 logm csökkenési értéket §LRV) ér el egy virális szennyezőre, és legelőnyösebben legalább 6 logm csökkenési értékfi (I.R V) er el egy vitális szemryezöm §:. Az 1-8. igénypontok bármelyike szennts eljárás vagy alkalmazás. amelyben: a szűrést két vagy több, sorba vagy párhuzamosan, vagy a keit** 1·,, \ érékében kötött s/uroveí hajtjuk végre. 1¾ Λ 0. Igenypizz s/mMo MàM, ^rmi jdkmezvr, bogy o. szűrést kot szűrövet babjuk X égre, párhuzamos. ekzMezcMez egv Y Mts ke dagazatu mdatazn esöreuMíórMz utueKMn oáMogvik Mrrö !oh abek4amwaonkádébert van m YMIuké elágazás cgyk ágával «s egy kászif-erény betáplálást forrással. If, Az Mik tgámgmuttk bármely lka szarnál eljárás, azzal Jdlemezve, hogy a szürke körülbelül IOMfböb mbar, dauyüsen kbrûlhelbl 100-3500 mbar, kgdfktybsdaben 1000-3000 mbar zozoté nyomáson bajijuk végre, U. Az Ml, rgdtypotuok bármelyike azennb eljárás, azzal jdtemuzvo. bogy a szobás Meé t *ns\N 'íve autökM v/baeY % Az M2, igénypontok bármelyike szentel eljárás, azzal jelluntezve, hogy a sejiie-m M/ré közeg vooYMMMtíoovo tartalom