HUE027823T2 - Immunstimuláló oligonukleotidok - Google Patents

Immunstimuláló oligonukleotidok Download PDF

Info

Publication number
HUE027823T2
HUE027823T2 HUE14161886A HUE14161886A HUE027823T2 HU E027823 T2 HUE027823 T2 HU E027823T2 HU E14161886 A HUE14161886 A HU E14161886A HU E14161886 A HUE14161886 A HU E14161886A HU E027823 T2 HUE027823 T2 HU E027823T2
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
antigen
cpg
rti
virus
cells
Prior art date
Application number
HUE14161886A
Other languages
English (en)
Inventor
Heather Lynn Davis
Risini Dhammika Weeratna
Original Assignee
Coley Pharm Group Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Coley Pharm Group Inc filed Critical Coley Pharm Group Inc
Publication of HUE027823T2 publication Critical patent/HUE027823T2/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/001103—Receptors for growth factors
    • A61K39/001104—Epidermal growth factor receptors [EGFR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/001103—Receptors for growth factors
    • A61K39/001106—Her-2/neu/ErbB2, Her-3/ErbB3 or Her 4/ErbB4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/00118—Cancer antigens from embryonic or fetal origin
    • A61K39/001182—Carcinoembryonic antigen [CEA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001184—Cancer testis antigens, e.g. SSX, BAGE, GAGE or SAGE
    • A61K39/001186—MAGE
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001184—Cancer testis antigens, e.g. SSX, BAGE, GAGE or SAGE
    • A61K39/001188—NY-ESO
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001193—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; PAP or PSGR
    • A61K39/001194—Prostate specific antigen [PSA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/085—Staphylococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A61K39/092—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/305—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Micrococcaceae (F)
    • C07K14/31—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Micrococcaceae (F) from Staphylococcus (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16611—Simplexvirus, e.g. human herpesvirus 1, 2
    • C12N2710/16634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
    • C12N2740/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Toxicology (AREA)

Description

IMRÏïl N:STI MBKA LÔ ÖLíGONllKLEÖTIDON
A TALÁLMÁNY ALKALMAZÁSI TERÜLETE A találmány tárgya immunsiimuláte oligonufcíeotídok és eljárások invnmostimuiálé oligonukleotiáok sntigénspeci likas immunválasz kiváltására ttkíénóalkalmapsärs.
A TALÁLMÁNY MŰSZAK! HÁTTERE A feákíérlál is DNS-neik iBrséjtekei és ferméázeteá hlis^tékéí áfetváfe iínntunstkmtíáos hatása va», míg a princes: SUS-mk mm (Ifekottap, T, és rnahicafersai 1988, jp. j<; Ömeer Rés. 79:682-686: fóitmsga, T. és munksdässaii 19P.3NO 72:955~Ä; Messim |. R. ésmgttkfeáesp1991, }. Immunok 147:1759-064; óssae-foglalva: Krieg, í99%. Applied Oiigonndeotide YeePology, M A, Stem és A. M. Krieg, (sseth.)» Mm Wiley aad Sans, .ip., Név? -βΙΙ*,. 437-448 ©.), Ismert, hogy a bakteriális DNS ezen MftntiB :istó» bakteriális DNPbeP: képoségesen eléferPló, bizonyos Ifctóáíteyemfeea (CpO-mofivafet található tneffilaiktn Cpö ffiaakfeofiítók: -amelyek Mttá és Atkák a gerinces DNS-bes - jelenlétének eredményei (Krieg ét ál, 1995 Nature 374:540*549; Krieg, 1999 Biochlm, Biöpys. Acía Î4t9:.lt?-H.&amp;>, A bakteriális DNS imsntmsömaíáns listásai ezen CpO^mottvnmokst tartalmazd szintetikus oligodezoKlnnkienstdokkai (ODNy uíá-nozhaíók, Az ilyen CpO ÜDhl-ok érésén stimuláló hatásúak humán és egér leukoeitákm. B-sefi próffepiöi citekfe és iaunnuglobalin szekréciót iinsfekátaaik, indukálják: a természetes őssejtek (MK) lltlkas- akíivifesát és IFIN-y szektPióp, és it;duká|iák a déatkitikes sspek (l>€ék) és más arttlgén prezentáló sejtek kostitmtláió m~ iefeelákstt expresszáld és eiföklnekst - kilönösen a Tb-1 -ssserS eitekineket, amelyek fentes szerepet játszanak a Tb-szerti T-sejt válás® kifejlődésének eibsegiiésében - szvkretáld aktivitási, A natív feszIPiészíer-genneű CpO öDN-sk Immnnsbmniáld Itatási érésén CpSl-speetikmak afels^i ä tektatetÄ, légy maeupyihés a OpD--motívum melil&amp;lt, GpO-fu csereijük, vagy más nfedon éfimináljnk vagy megvaítöatatpA:,; a hatások drámái módon csökkennek (Krieg et ai, 1995 Nature 374:546-549: Hartmann et ai, 1999 Proc. Natl. Acad. Sei. USA 96:9395-18), kspnMés maakaíársai (Antimicrobial agents and Chemotherapy. 2693,52. kötet, 3, szám, Ilii -1120. oldal) tottennsitmafölp: de®0xletttÄde®ovtgö88öAn (CpO) titedynpokat tartalmazó eiigo#2öxinuklőotidokat (ÖDN -eket) írnak le és leszámolnak arról, hogy egyes CpG OPN-ok képesek gátolni embert eíiotnegaioviras (ÚCMV) replikáeimshi^^ és cndotélsejtekben.
Korábban !círták, hogy a Cpö öllgoPkíeeidok ímnmnstimuláió aktivitása függ a Cpö-moiivumok számától, a Cö-dfeukleotíítet szegélyezi szekvenciáktól, a Cpl-motivumfekj irelyéii és a CpO-snoíivnmok kdzti feihdztél (spaeingj (Bahas és munkatársai, 1Ä„ 3.,. Immunoi 137(5): 1849-5; Mkm és nmnkatársai, 2080, 3, fmnrnnol:.. 164(3): 1617-24; Klintnan és muakatársat, 2M3, Cite. Exp. Immunol., 133(2): 227-32). Olyan Mmm@®âtÊà eitgcmnkleotidot támxtk fel amelynek 3:* :£p3-motivnmkt eltásmltoituk, és amely me^epb •raklot) tnegtanja iíHtntmstinmiáíó aktivitását Feltárunk továbbá m imntanstimníűíó oligontskleotidot és egy tattlgénl tariahnavó oltóanyagot és a vakeina alkalmazására szolgáló eljárásokat.
AITAiiA:LMÁN¥ RÖVID OSSZFBOOLALÁSA A taláimluy tárgya atdigén és -î^^ÂDIâé· oipáttkleóii, Äf lattáltnaa^a a .5'" TCíjíGöTÍ ITTCGOTGCT T ÍT 3’ (SEQ 1D NO;í) nukleoíidszekvenciái arra rásseruló alanyban anitgén-sSpeciltkns inrannaválasí! kiváltására szolgáié eljárásban történő atkalttuiPsra, ahol az eljárás magában foglalja ág ástigéít és az itmnunsíimuialo oligoTípkleoíid beadását &amp;z alanyrtak iínmunválasz kiváilására hatásos dé®ts~ Sïi Egyes niegyáilsitási módok SM M tMtbmsimmiàlé oligyaukieotid egy vagy több módosított kötési |ίρ|Βρ® Entminst ánaláío oligoratklöörid egy vagy több foszforoíioál ÄS WMmm Äonyos raegvaiositásí módok szermi u Pigonukleoiid valamennyi imetnuklesítid kötesd: ripmferrpép kötés Egyes megvalósítási módok sprint m iovmnnstimPalo oÉgönnkleotkl legalább egy ilipolil, szobsztituák mikieoudanaiogot és pírimtdm-purin dinukleotidot tartalmaz. A leírás szempontjai sprint antigént es a SEQ ID Nö:l szerinti nnkieoritfeplwetteiät -»SigtisÉ'li&amp;nmn-sítmuiáló olígoniíkieo·«dot tartalmazó »kőanyag biztosított, amely gyogydszati&amp;ig:· elfogadható ítördöZÁt Is tár-·· talmaz. Egyes megvalőriiáP módok szerint az tmffiunstánuiáió oligomtkleodd Ébt*#osppî® -liam^láíasz. kiváltásához hatékony tnpnyjségbea vasi jelen. Más megvalósítási módok szénné a kiváltott anigé:ns|íée&amp;sts hgigopyáksz 1¾ í Inmnmyáiász, Egyes megyátősttásl módok szerbit m antigén mfabiábs an%gs* -$a0. antigén vagy addiktív spri Más: magvalósítást jmodrik sprip a bakteriális antigén Stapkphcoccm mwm&amp;sém^r' ibgpttyasödást okozA baMÓrihgmisí láiMsötsios, Töyábbí megvalósítási módok: szerin· a baktéritatt Μηψίο-cocats műtőm, Mtréptococcœ sobrinus, S&amp;vptoeacctts *ott$nk. ItmobacMfas míéophifh vagy ác&amp;mmpczs viscom*. Más megvalósítási módok szerint a bakteriális antigén periedoniáEs beíégséget okozó Pskiérlammai kapcsolatos. További megvalósítási módok szerint a baktérium Ptvphyremmm·gfag&amp;aUs ocntivmyceiemmmttans. Egyes megvalósítási módok szerint a vitális antigén lógót! óriássejtes vitnssnl p:S¥), 1 -es Herses sssspfcx Pmasai, 2-es T-ferpes simples vtínssál, I -es erobert mmninbiányt előidéző vírussal ;|ϊ:ϊ1¥"Ϊ ) vagy HíV-d-yéEkaposolalös. Más megvttïôsMsi niiódbk szerint a parazkaantigén; maláriái okozó parazitával kapcsolatos, Egyes megvalósítási módok szerint á saját antigén tömoraotlgétt, Atzhelmer-betegséggiîl kapcsolatos antigén, bnntán ellenanyag elinni; antigén vagy Immáo endogén retroviráis elenmkből expzîssPlôdo antigén., További megvalósítást mééak szerint a tanïor«igén MER:*, MAöE, hlT-EEÖ, ERA, €EA vagy E€íM. variánsa, Más :n5figvalósítiáal módok szsrint, iátótm antigén Ahhekrmr-bemgséggel kapcsolatos, az antigén tan- vagy fkarnikad. Egyes megvalósítást módok szerint an antigén IgE» Egyes megvalósítást módok szerint az antigén hoMoxohsz kopogói nlkotlnhaptétt. További megvalósMsí módok szerint a. boofczó, amelyhez aMkoímhaptéso kenj agálva van, dlMristoxin (DT); Más megvalósítási módok szerint m antigén pepid, rekomhlnáns pepid, tisztítóit pepid, teljes eiólt patogén, élő, legyengített: virus vagy vimsvektor, élő, legyengített baktérlimt vagy battériái A vektor; poilszaebarld, Eaptén vagy ptentld ÖNS áitai kódolt antigén.
Egyes megvaiősltási: módok szerint azamtgén hordozóhoz konjugáR, További megyalMlási ntödök szerint a hordozó rilttériatoxto (ÖT), Más megvalrisSási módok szedni a hotxteö vírnsszerii részecske. További megvalósítást módok szerint a vírasszeri ipzeeske Qjl RNS-fág, hepatitisz B felszíni antigén téíbsAg) vagy heptsisx B mag antigén (ITbcAg). Egyes megvalósítási módok szerint az oltóanyag egy vagy több apnvánsl is tartalmaz; További megvalósítási módok sserint áa aí|uvifes á TER. E-tőI MiörÄzö Toll-szerő receptor (TÉR) agonistája. Más megvalósítási módok szerint az agoniste a T1..E. % sgonisiája. További megvalósítási módok szem a Oil i-agoaisía po!í(i:C), Egyes megvalósítási módok szerint az agorásta a Tí.R 4 agonistája, További megvalósítási módok szerint a T5..R 4-agonista iípopoliázaeharid (I.PS) származéka. Még további. megyálőatPsI ttpdők szerint az: EES-számtazók MEE v^y OL.á, Más : megvalósítási .módok szerinr az: agonisla a TÉR. 5 agonisiájá. További «^valósítást módok, szeriht a TER á-ageínsía iagoIlitt, Egyes mégvalóslPst Ptdilok szerint az agonists a TEE. 1 vagy % ngí>ttlsb|a- További megualÖPás! módok, szerint a TÉR. ? vagy -f agóttist^a; az imídazokinoim családba tartozó Psíttolefeniá, Más ínégyálósltási módok szerint az adjuvant: aiumírnumsó. További mégvaióshári: módok »szerint az aldspmiuntső álPdtnEaPPidmvld. :;E^es :m^vatosMsí jnódok szeriöt &amp;z tejpytes ifciímslteiiáió fcomptet (ISMQMl Mas megvalósítási módok szénái az sdjttvtes öte^vizben: m$$ víz-az-olaíban snmlzfó· Egps megvalósítást módok szerint az adpváns Jlposzsóma. Más megvaíÓsMsi módok szeráf az tepváns szálifidreteteéó További megvalósítási mólói teérte: &amp; s^Mióresásásr 'm^émcées-vagy mikrorészecske.
Egyél megvalósítási módok szédíti az tnvmmsítehíáió oiiapsóíkléötíd egy vágy több módosított kötést ;taiisl®a&amp;: További htégvalósnás! modok szériái m iavmmstimnláió oíigpnteíeöttd egy vagy több foszfotteíöái EótéSt: táríáteáz. Slzónyos megvalósítási módok szeriek: m. óbgónhkléóídd tnteteh intetraskiaood kM ihszâvteltte Äte. Más megvsiósiíM módok szedői az mmmnstteniilö fí!teosííkle»t):á legalább egy IfpoÉi, szafcsziteáíi zRrkleotekmakigot és pmtedtepteis áinteieníídot tetóteóz, Egyes megvalósítást módok szerint az oltóanyag beadásra kiszórok. További megvalósítási módok szerte m oltóanyag parenhteíis étem. történd beadásra kiszereli, atet a pareníerálls át temmaszkalárte stebksián, teradertsáJls,, ítttaÉÉ vagy iste-peritoseäläs. MégJövábbí isegvalósítási módok szerük az oltóanyag helyi ötös történő beadásra kiszereli, ahol a íteyíót a bók, iraeszdet-toálls vagy oyálkibiárívmietdleí. További inegvalósításí módok szériát a «teíkahártyán keresztet ói orális, irtemázálé, teravgloáiis, terarektális, iobsbakkáiís vagy teraofcnláris, A találmány «gyes soötnpontyd szerte a teáitefey tárgya antigén és ''mmmStkmMó· oügotiakteíb,. amely SEQ ID NO:l szerte! nakieoridszekvenete iateímaz, stra teznteó: személtek athlgenspemikns: m? manvááász índukálásárs: szolgáié e|árásbaa tötenntekaimazásra, ahol az eljárás magában brglaija az giaoybas: az immoriválase kiváltására hatékony mennyiségű antigén és itawálwW oftgoateleoíid: beÄsli az stay-· pák, Egyes rsíggvalöstest mÄ szériát a&amp; antigén tefeóbiálls ij*Ég&amp;¥ antigén vagy adóterv szer. 1b* vábbi megvalósítási módok szerte a nókrobialis antigén bakteriális «η%&amp;* vitális antigén vagy parazteanti-geo. Más tnggvalóstíást módok szarbá &amp; bakieriáis antigén 8t<$^Mmem. tepesolaios vagy iog- szavasoílási:: pifcözó baktétemínaí ippesoiaíos. Ibvábbi megvalósitásó módok szerte a baktédmn ^iwpmcomm műtőm, Sírepiomcem Atetete Sír^memms Μηρόν. Imtohocigm mí&amp;mhtiM vagy jmímrnmm pmosm Más megvalósítási söóáofc szerte a teMerióis ategte pertetetelis: feetégtegé1 ókezé bakítettetnal kapcsote tos. További megvalósítási módok szerint a baktérium Porphymmoms gmgivaïis vagy Aciimbaalkm aciino-Az óligóöókiéóiíd: égps niegvaiositásl módte szerte; a vteils tetigén légúti óríteséjte ví-russai (RSVT, l~és Tlerpk tenplsk vimssaí. 3-es Herpes slnrpfe vlmsssk tms mÉmí Im-Hiínbiányt élöldézó vtmssai (Hl V-t) Vagy ftl¥#?v«| kapSölatos, Más fn«gvai#síí:ási módok Sprint a psraziiaaoiigén maliriát oko* 2ó parazitával kapósolatm. Egyes tegTaiósítási rtródók szerint a sä ániteE tamotantigén, áiteetmer-'betegségp! kapesbíátos antígóo, teíríáp eHenanyag edem íteifdo vagy barnte égte#« retervírélís deoteMI expresszálódb aMlgem ïôvàîM megvalósítási módtrfc szerte a titroor aotipn Mii.", MAME, KY-ESO, ÍSA, . €BA vagy IMIÉ variánsa. Más toegvaiósitásí nsödok szerint, aboi az antigén Alzbeisner- betegRÓggei kapesoia· tos, az. antigén tan- vagy b-atnlioid. E^yes «gvaí#tesi mteók szerint sn antigén IgE. Egyes megvaiósiíási módok szerint az antigén hordszóböz konjugalf nikoíinhaptén. További megvaiösitási módok szednt a hordozó, atneiyitez a nikotinhaptén konjugáiva van, dillériatoxin (Dl). Mp megvalósítási módok szerint az antigén pepiid, rekontbínáns ρ«|ϋό, tisztított peptid, teljes élőit patogéo, «Io, iegyettglteb Viras vagy vteswMöíj éió, kgvengitett baktériutn vágy bakteriális vektor, pobszaeharld, hantén vagy piaznod DNS átei kódolt antigén,:
Egyes megvalósítási oróbok szerint az antigén hordozóhoz koojogáit. További tKegvalosbásI rnódtsk szerint a boaiozó: diléríalnxiin: (BT);. Más megyalósí-ási ntódok szerint a hordozó vlrnssiteri részecske. További: megvalósítási módok szedni a vírssszerS részecske Qp RNS-tág, hepatitisz: B felszíni antigén (MbsAg) vagy hepatitisz B '-mag; antigén(lîbcAg). Egyes a*^gwï&amp;iâsl módok. sseani; -az ídíóanysg egy vagy: több adtovánsi ls; tartalmaz. Tovább) megvalósítási módok szerint a® sájaváns: a TLR 0-íél klllöolmzÖ Tolbszerii: receptor fïl$t| ïsâiÉJk szerint m agonists, o TLR 3 agBoistájs. Teväfefet megvÄsi&amp;si módok, szerint a TLR T-agoniSta: polcbC). iEgyemmsgv^ösitásl módok szerint gzagonists a TLR 4 agon istája. További megyalóskási módok ässÄt a: Tl..R.4-agomsíaTipopoliszaehariö (LPS) sstämmäk&amp;. M«g továbbá megvalósítási modök symal: az I.TS-szÉ'Kíaaék MEL vagy ÖEA. Egyéb megvalósítási módok szerint az agonist» s TÉR 5 agomstáp. További megvalósítási módok szerint a TL1S agonista ílagslin. : Egyes megvalósítási médôàsaærtet az sgonlsta a TLR ? vagy 8 agotnsMja, További .megvalósítási módok szerint a TLR 7 vagy &amp; agon istája az Imidazokmolm családba íariozó kismoiekbfet. MáS: megvalósítási máidöfc szabiid a® adjuvans altonlniurnsó:, További1 rnegvalósiíási módok. szerint azalúmmlííníSó: ainorintom-hidrosid, Egyes ínegvaloshasi módok száriéi az: adjtmbss itmmmtimôÂ) kontplex: (ÍSGOM):. Más: snegvalésltási módok szénnt az stdpváns okj-a-vízbcn vagy vlz-az-oiígbars ««Ä -Egyes megvalósítási módok szerint az aá)av|es Ipöszáttta. Egy«·» megvalósítás} módok: szerig} a® .adptváns. szállítórendszer. láovábbl iriegyaiósMsí módok pzeript ö szállííórendxzer ttanorészecske· vagy mikmtoszeeske.
Egyes megvalósítási toridok sæeribî az 'ietotossrioïolâsô obgonokleotid egy vagy több módosító« kötési tartalmaz. Továbbá megvalósitáéi módok szerint: az ImmonstímuMlö óilpöakléMíd egy vagy több iosziprotioat kötési ísriákmto:. Bizonyos megvalósítást módok szerint az oEgondklOoíiidrvátáieeeíiííyí ástemOkisMsd kötése Mszferotíóát kötés, Más megvalósuási módok szerint az Immunst! mutáló ojigotiokieotid tépláfehegy llpóítb sznbsztiruált nukieovidanaiógot és pirántdin-purio dinukleoriuos tari almaik ;Ís|$ós szerint az antigén és/v&amp;gy hnmoHsJitnaláló olígomtkleorid beadásra tsikaJtnas ílmnábsm kiszerelő További megvalósítási módok szerint az antigén és'vagy Immunstmnfíáló olígonakleotid paamteíáfs ÂS.Âéi#:'i^aid]as^ trikaimaS: ifàmêfcm kiszerelj aí»í a. parenterális ét mtratímszkuláris, szttbkuíám iotmdemMíkb inRáyénás vagy létra-peritoneális. Még további megvalósítási módok szerbe az antigén és/vagy ímmonstimaláiő niigonukleotid helyt úton történő beadásra kiszerelt, ahol a helyi út a bőr, íraaszdennalís vagy nyálkahártya-febliet. További megválót; ti ási móéOk szerint a nyálkahártyán kórésriltlí et ónálls. fctranazÄ,. iotravagmábs, Intmrektá&amp;b sntra-tmlckális vágy ieiraokolárís, Egyes megvídósiási módok szerint az antigén ás· immtmsitmniälö oligonukieotld azonos, häsexdö vagy különböző úton kerül beadásra. Más megvalósítási módok szerint az antigén és az im-nnmstmndáió ollgonakfeMid kapcsoltan. egyidóben vagy külön keríti beadásra. További megvalósítási módok szerint az antigén és az Immtínsriínoíáló oligoenkfepd egymáshoz kéiiesí 24 ötán beldí Imréi beadásra. Egyes megvalósítási módok szerint az alany állatorvosi kozelésben részesülő fáj. Más megvalósítási emdofc szerlm az alany oeót rágesálo Egyes mogvalósitási màà^;^6ô«t;«aï^iy: taaber.
AZ ÁBRÁK ISMERTETÉSE Έ ábrití l-lnmoráiis imnteevdiasz föközása egérbáhy Eeleótt:{íb8 ÏMm e“|i csoporionkèet) egereket íiommrizáittíSk; i eg HbsAg-nel (baloldali tábla) vagy 20 gg; OVá-öál (fobboldali tábla) ;ad]áváes néíkttl vagy CFG 2-1555-tel, 10103-mai vagy lÖOö-eel (115 gg) vagy aem-CpG konlróíl ODN 2137-tel CIO pg;: csak -nal; kombínáelóbae. Az umisó eitílékeziétét köve;« 2 heti (HBsAg) vágy 1. heti (OV A) flazmáí vizsgáitok antlgénspecifíkus, teljes IgG-, IgQI- és lgG2e/c-szíts lm (anii-HBs vagy &amp;otl-G¥:A). Az: oszlopok á te$es: 10* -liter geotnesrkó állagát l-r SLM; ábrá2xtlj;lk. A Étereket a nesti-nntnenizält plazma kétszeres ábszorbaeesáéstékét eredményázS; lepagyobb bigitáskéríl határoztok teeg, Ö?Ö5 küszobériék mellett, Az öszIo-pók ieletli számokjeléeiése: aetlgénspeeilikes ígG2a (vagy 2eVígul arásty. 2. ábra: Aat egérbe» indukált humorális ismnaaváSusz természete. Felnőtt (6-8 3veS.es; r-ÍO csopor-sónkén!) égesrefest immunizáltunk I pg ííbsAg-nel (bakiidat) tábla) vagy 20 pg: ÖVA-nai jobboldali tábla) adjuvants κέΜ vagy U*G 24555-tól, 19103-mal vagy 7009-cel (10 pg) vagy nem-CpG kontroli ODN 2i247-tel (Hí ug: csak OVA-íssS) kombinációban. Az utolsó emlékezetőt követő 2. heti (HBsAg) vagy 1> beli föVA): plazmát vizsgáltuk IgGI-s/imre tűrés oszlopok) és ígC2a-sziwre vagy igG2e-szintre (fekete oszlopok) BBsAg--nd (anti-BBa) vagy OVA-nal umts-OVAï szemben. Az osziopok a teljes csoport (a-30) EU SA végponti hígítás literének geometrikus atiugáí U SEM) ábrázolták. A litereket a nent-immunizált plazma kétszeres abszerbasolsértétó: credfenyezA legnagyobb hígításként batároztük tseg, $$5 ktiszöfefek mellett &amp; átírm ínct« hált eitotosikus T-Simfoeit« válasz egérbe®. Faihőit (6-8: hetes;; m$ csoportonként} egereket smmöoizálfenk 1 pg IfbsAg-nel (.felső· táblái) vagy 20 pg ÖVA-ttal (alsó: tábla) adjaváas nélküli vagy CFG :«rçgy 7909~eei (10 ug) vagy wm-€pO kőmről?. ÓD'M 2:í37-le3 (10 ug; csak 0¥A-eal| kombinációban. Az utolsó emlékeztetői köv«tő 2, bet) (HSsAg) vagy 3, heti (ÖVA) lepsejteket vizsgáltak ^0féssp®cif.^tz>jP11iíryÍfevW8 standard ^Crdvasjás vizsgálat, alkakssaásával;. 4. ábrát TriiR94t!iáayös egerek 01,-yál»száham sloes CpC-mediáti asrgraeatáeió. TLR94ôàay®s feleóít (6-8 hetese -mS esoportiáíként) egerekét: kmsuoiatáltoak 20 ug ÖVA-ssl sdjaváns: fekií vagy: CM* 2655:5-161, iÖlÚ3-:mai vagy 7909-cd (Hl gg) vagy :nets-CpG konooO OON 2B24el(Í&amp; pg)teablssciôbœ Az utolsó emlékeztetőt követé 1. heti lépsejts két vizsgáltak ÖVA-speeMikus válaszra standard 5’€r4eadás vizsgálat alkalmazásává!. 5, ábra; €(FA-«j3feÄ»S CHS C-sejtek vad típusú és TîJtO-lMàayos egérbe«;. Vád típusú és TLR9--hlágyos Iclneít (6-8 boté»,. a-:S csoportonként) egerekét immnaizaltunk 2© gg ÖVA-nai st^pváns nélki! vagy CkG 24555-tel, 10!ö3-mai vagy 7909-cd (Hl pg) vagy nem-CpG kontroli ODN 213?-?e; (10 pg) kombinációban. Az utolsó emlékeztetőt követő I, heti Hősegeket vizsgáltuk OVA~spedfikus CD© T-sejtre MHC1, osztályé tl-2Kh“SIIÍ9FEk:L fetípájerálkaia^zásávaiv 6, ábrát Antigénspeeifikus IFN-g szekréció egérben. fehsőti (6-8 hetes, rr-5 csoportonként) egereket immunizáltunk i ug BbaAg-tíel (baloldali tábla) vagy 20 ug OVA-n&amp;l (jobboldali tábla; adjuváns nélkül vagy €FO 245:S3-iel, 10104-íaal vagy 7909-cel: (10 pg) vagy nfe~€pG kontroli ODN 2137-te) ( 10- pg; csak OVA--aaR krurdsInáétóban. Az utolsé etpiékeztetOt kOveté 2.heir(ÄsAg} vagy í , heti (ÔVA) íépsejfeket ábpalálbsk a releváns aoíigénoeL az ábrákon beaudaKnt módon, 72 órán keresztöl, és a tenyészet; felülúszóiát vizsgáltuk. EU SA módszerrel ÍFN-y-ra. 7. ábra: Tl-RO-hiányos égerek aoíigénspedfikus IFA-γ szekréciójábaa aises CpG-arediálí arígaretitáetó. Í'I.R9-hiáoyos feinött (6-8 hetes, a=“ó esóivsrtMkéat} egetekét imtmuuzáiíustk 20 gg OVA-nai tídiaváas nőikül vagy CPG 24555-td. 10 i 03-maí vagy 7009-cel ( 10 pg) vagy tietn-CpG kontroll OÖN 2137-tel (10 pg) kombiaáeiöbaa:. Az aMsó öalékeziesit ikbs'stó L heti lópscpeket stisa;uiáltíik 0S05 és 1 stg/mí konceht-ráciö|á ÖVA-aal 72 órás ksreszrdí és a tiesysszet iéítilbszéját vizsgaltukS2SA módszerrel g, ábra: AntlgéaspeeiAikas mal0esÉ®y»-s^aki«4áiö T-sejtpopOSaélák egérben. Eélabtt (6-8 fees, avó esoportettkéní) egereket immmrtzá&amp;tak 1 pg íibsAgsoek csak aaügéháek vagy CFG 24SS5~íek 10103-a^l vazy 7909-cél (ló p|) kÄbisäciöbab. Az atolsé etsiekezteiót kővető 2, ketr l^séjfeket öjtfeimtiiálthk HBsAg-antigérme! (CD4 esetéei vagy IÄ1 osztüyó peptidíld (€08 e^tés) és az iFH-y-t, CMp-ee-t és/vt^y iL-24 szektptáló CD4 (A tábla) és CDS (B tábla) T-sejipopalacíókat kysBiliÄuk áramlási citmfesmalkalom^ zásávsl. &amp; ilpSí TerïséssiîiÊS immunitás ipjMn PBMOkbe®. Humán PBMC-i (5xJö6/ml> mknbâltenk különböző koncentrsdójó CPG; lOSOS-and.. CPG 24SS5-tet vagy oemATpG J^ootteti :|2§8|-^èl:24 vagy 48 órán keresztül. A sejtek felülpApt begyűjtöttük és vissgáiíök dtokppmoktn szpréders lornban hozzáférhető ELISAAesztet alkalmazásával. A 9A ábra az PH-«, MÇP-1 és IP-Rksgstóej# muMja be. Λ 98 ábra a;·: II..A IL-lö és IB-M szekrédöí bíaiatja be.
Nk ábra: in vhw termésäefos smmasjtis 8ALB/C egérbejt BALBA egereket (n~5 esopőrlo«fcé®l3 ír-jéklálrtmk szabkuía® PBS-mal ipáeebö kontrall) CPG 345S54eL CPG I01ö3-mal vagy ndrt-GpG kbnîtoll GPlt 2I37-te! 500 μ&amp; dózisba», Az injekeié löáa 3 órával arÂkAîôii vért verttmk. és &amp; plazmát kejaskedefei forgalomban hozzáférhető ELISA alkalmazásával vizsgáltuk P-IO-s® (1ÛA ábra) és IL-72-re ( PB ábra) vagy ll.>Ö"ra(IÖG ábteij
M. ábra; Μ *#p bnmoráis immuartas WAÈBfc egérbe®. BALBA egereket (n-~5 csopoBöRkéntl im-mmáa&amp;iiadk i®trtmms;AulMsmTÍBsAg (i gg) .a €PG 2455S-tel vagy Iöi03-«ual pö ggL ÓVA OLG 24SS5rtel vagy Í0lö3-nml (ib gg), vagy Texas iaBuesza A HA-ael, 1133¾. £f gg) v abanímraRfRutal (23 Mg AI3p A CPG 24553-tdvagy 10103-mai (10 gg| Az egereket a Ö. és 14. ®gpon (IlBsAg), a®*?) és 21. ®apo® (ÓVA) vagy csak a 0. :®ap«n {HA) IntmRötaáítsík. A ti A ábra a 2 héttel m utolsó emlékeztető «Is® végpont ELISA-val mért BbstAg-spedflkus te$es igörtilersket nrutatp. A IIB ábra m ÖVA-specIüktíS tefe ígG--tiíereket matatja az utelso emlékeztető «iá® I. hété®. A1 IC ábra a HA-spedEkas teljes ígG kinetikáját Rtdaíp végprmt ELISA ziapbt az zsarum tzáeiői követe kítiŐRfeözö idöptpokbá® mérve. 11«. ábra: l-sep: váBszok BALBA egérbe®. BALB/e egerekét iípktáiRtnk mirtesaszkdárcsen BBsAg--miß gg) 30 jpCEG ODN :245$-M, CPG KHO-sush vagy nem^CpG koSirötiODN 2137-íG vagy áttelkóL áz. egereket a 0. és 14. napon injektáltak. A I2A ábra a líBsAg-spedfíkus CTL-t mérve az estiékextelőí;követő 2. . hété®, CSihhS égereket irúektáltunk intranüiszkelärssa® OVA^gáí {2Ó pg), IÖ :pg CPG; GÖ4:2453AelS; CPG 10ί#νύΡ Vágy ®»w-CpG kontroll ODN 2137-tel vagy agélkSL Az egte'eket aO., 7> yagy2:| > :ítapfrb|íek(álíyk, A 128 ábra ár ÖVA-specíkkus CTL-ΐ mulatja* ^Cr-felszabpslasssa! mérve az utolsó emlékeztetői követe I. héten. ÜL ábj'áí T-sejt válaszok BALBA egérbe®. BALBté egereket :fojektáltn®k intramuazkulártsair íllísAg-*nd Π Mg) Hl Mg CPG ODN 2455-iek CPG lOlbl-níál vagy nsrnA^pG koa&amp;öll OÖN 2137-tet vagy aPéfck Az egereket a 0, és 14. napon injektáltuk. Az atolsó emlékeAétŐt kóvétő 2. heti Jépsejteket Inkubáltusk a íRegíelelő atiiigénaeí 72 óra® kereszttU és a tenyészet ielíllúszójst EL ISA mÄzertel íesztelttlk l?N^y-ra (13 A ábrák C57bl/6 egereket ágekíákunk teíraoúiszWárisen CIVA-nal (20 ug), 10 gg ÇPO GDB 245S:-tek CPG 1010^--mai vagy nens-CpG kontreb Góbi 2137-íel vagy anélkül. Az egereket a 0.. 7. vagy 21, nap® Injektáltuk. Az iítelsó síPlékéztetŐt: követő L. 'heti lépséjték«) lllkohakunk a tncgteleib anilgensei 72 órán keresztül :és a tehp^ szét MklószójótiBiJSA méószerréllésziéltükIFN-y-va ( L3B ábra». 44. ibîs^iï AáiyiA ó Mttel az IssöUínteáető niáa. Nósteny BALB/e egeteket itemtettÄöoli HA (1 pg) A GpG^vel vagy kontroll ODN G0 ag> í alunjmluRunai (25 pg Α.Ι3·ί·) 50 μ| teljes térfogaiba®· .Az autí-HA ítteöpytségét 6 bend az Imrounlzáció elán mértük. 1.5« ábra: Bemaggt?stl®ádés inbtbtelés ||I|A| titer 4 béttet m iSíiJsnstszástíé elás« Az elleüSüpgok mf kodóksgességé) beígágglutisádós s:sb!hfcíös teszt: (HIA): aikétetasásáva) őAékeltbk, Mértük a: M1A ílter ®Őve-lésének képessegét Önmagában vagy shonnk umssai komhi®álva. itk ábrát BA«spe«Blk®s ífNy-székrádÓ. Nőstény BALBA egerekét fenmoizattenk HA(:I pg| A GpG- •*«íÉ vagy termiről! GOM '-(Ϊδ * almaímömmal (25 «g Ai34) S6 gi té§es léríbpibag. Az bmeunixációt kövedén 6 héttel eM^Ärit iépsejisket alkalmaztak' az: así^as^eeMkas vfesgáktti&amp;oz, 17. ábra:; íltaorájis válaszck -mm bemás* MetaíÓshec, Közönséges makákókaí p-5 éves, a~5 csogor-takéat). âmaîuhlzltaïk SsgefíxrB-vei <10 gg: ffisAgjJSB gg APM-j önmagában v^'-kertmâcÂs« B>5 mg CFG 2909-eel : vagy CPG 245:5ó-tel, taatmrÄölaris lajekeiová! a 0., 4. és &amp;. héten, Az ahatokiói rendszeres tÂôztekênfc vért vettünk és a HSsAg-specsttkos eilesaspg-tttsri Ärcskedefer forgalomban kaphatók|# lekkel <M£« M SA™ Artti-HBS) m$mk. ffejtate i»nü válaszok ne tn fennta főemlősbe«, · K4l«öíi#gés tnákákókát <3-5 éves, n~S csoportonként): iBSiP^rkxáitoak Bärgöm-B-vel < 10 pg MBsAg· 250: pg AB ό AßÄgäfeas vagy kemtaaesohan 0,5 mg €FO ?9f9-eel vagy CFG 24555-tel., äßtremunÄuläric a 0., 4. % k,Âeà, A 2. tansmxalasi követő 4. Mii. és: a. 3. immonlzálásí kb vats 2, hvû plazmát vjasgá^É- wdiásta Äita4tM«tat elózstés módszerrel. 19, ábrát fF-8éji vá®sXöh nem barnás féemfősbem Kbzöaséges makákóksí (3-5 éves, η-5 csoportonként) immunizáltak Engeríx-B-veí <!0 gg lipsAg; 250 pg AB t< 0nrMd|gba£i vágy tepbMéïébab 0,5 reg CPG ?909-ed vagy CPG 24555-tel. intramtinÂjSœ' mj&amp;çtaal l |, 4, és fl, béren. FeAféíiás sä srema-nukleáris sejtjeit (PBMCi vizsgáltuk a vakcmáeiöt megelozien és a v^eináeíói kiAéíÓ külösbözó Idöpontók“ b«o HBsAg-specifikus CD4 T-sejt médiába iateeeíMarís ekbkíe szekrécióra ársiná&amp;r diometriávak A t§A ábra az 1 FN-γ szekréciói mutatja be. A \9C ábra af MF-a szekréciói muraija be, 20> -Mimi válaszok: pokítaketaális C4í4 Iksejíek; kvsatgab* aaailzls. Közönséges makákókat (3-5 éves. n*5 csoporíonkéut) immsaiáteÉ. fhpftk-B-vel (1Ö gg lÄ&amp;gi 250 gg A!34} önmagában vagy kombinációban 0,5 mg CPG 7909-ecí vagy C|*G 24·$55<Μ» h|®i|iáÉiMMs' «#keîÔ¥d:.*;É* 4dMk héten. Perifériás vér moBonukieáris sejtjeit (PBMC) taiplasi eitomÄiavabteszteitük a 3. ímnHimzáeíót kóvetó 2. héten egy, ketté vagy három cjtokml szekretáíó HBsAg-speei&amp;p CíM T-seitre, A 2ÔA ábra ae egy, kei® vagy három ettoklm szekretáló BBsAg-specitíkus ÜDA ?-sejtek számát mittatja egymiOié arializált Cl>4 'F-~$φερ vebafezíatvs, A 20B ábra; $&amp;. égy, kél vagy bárosn citokist terme® T-sqleJt arányát matatja a teljes HBsAg-sgeeíhktts €04 T"Sejtpoguládóbae, 2|, ábra: T~se|í vátasvofe; pelhhskeiöaÄ €Ü4 T-ssjtek; kvalitatív analízis. Az i;L52-t, IFIM-y-t és TbiFs-t: vágy ezen cltckinek ke:mbmáéióit: szclíretásé sejtek számát mértbk. Kösön^gps rsakakiiari: (3-5 éves. η™» csegettoekéní) immmiizáitsak Ebgerisí-lS-vet (10 gg HBsAg; 250 gg AI3t ) ónmagáfen vagy könibinádó-ban 0,5 mg CPQ 7909-cei vagy CFG 24555-tei, imra?mtszkuíáns ittjckciévai a 0., 4. és 8. Mgem Fériériás vér HíOíKíaakleáris sejtjeit (PBMC) áramlási citometriávaí teszieitük; a 3. immanizécíót kóvetb 2. béter IL-24, liPM-•·γ··ί és TNP'a-t vagy ezen citokinek kombinációit szekretálói iHBs.Agrspeciikcs CÍM T-scjtek szárnám, A SZEKVENCIÁK ISMERTETÉSI?
SbQ ].D ND: I -- ÖX>N CFG 24555 jmnuarSíímttlále oigóaukJeoíjdíbtAlcötldszekve^iájs. SLQ ÍD NO:2 - CPG 10103 immansttmoláSó céiaonakScotid miklsotidsrekvcmdáta. SHQ ID 140:3 - CPG 7909 immansÍimi.f:ál>:> oligonukleotid auklemiószekvenciája. ;SBíj IP PO:4 - éáígtmtdttoiM. tuiifesÂasÉïvencî^a.. S£Q li> P0:5 - öem-€|íG: SlSI elsgBöttkleofid: rrokkckidsxckvecciája,
A TALÁLMÁNY KÉSZLETES ISAt OITETÉSE A találmány szempontjai részben azon a meglepő felfedezésen alapulnak, imgy a Cpü-motivum éiláyslp lásá egy ihmmdsthmrláió oligonOkfesdidhol nem volt negatív hatásá az odgouakfeotidnak m&amp; &amp; képességére nézve, hogy növelje ez astigéidplteÂôs ^musvftszt Meglepő módon szí Is találtak, hagy a CpO-motlvunr eltávolítása tehetővé teszi aoiigghspééíife T-stgtgepuláeio előállításit, amely lltlőnhözö, Konkrétan, aztíplill-tuk, hogy az amigéíispeetíikus: tksejípppaláeió több IFN-gammát szekretáló Ifeseftei és töké pelidorkeionâlis ?--sejtet tartalmaz. A találmány »mpenijat szerint m rmmunstimuláló oligonekleetid nnkfemsav-Kzekvenelája 5' «iwrrnric«BCTOT 3? tommmMm; seq m no:i>, a mammon* smmtMms^sstimu- táM bligonnkieotid: naklelnssv-szekveneia :ä 3’ véghez legközelebbi 00 dinnkleotid a ikoráhbnn leht ÖDM 10183 inummszmníláiö íúlgurmfcleöiidtél 9 tCm'CQrfffWmW^^' $* (SFQ JD NG:2); A két iotmmiSthöiÄS obgoaukieotid aMvilásán# hayon kisaga meglepi* :fek he,, hogy a CpG cdigönukteoíldók, immbiMimnlâié aktivitása a CpG-mtdiVúOiöR szlnsától, ö CG ÄÄfetidekat: szegélyező: szekvenciáktól, a CpG-mofeimok helyzetétől és s ia 0|tö~htoiv«ppfe térköz-tói:(spneing} függ (BalkíS: és mankatársai, 1996., , J. ίηηηηηοΙ, 15:7(5): IMtkS; FlartsnanS: és muhksalm&amp;i, 2880, J. Immunok, 164(3); 1637-24;Rlistoan és munkatársai, 2883, Clin, Exp. lotmuspl,,: 133{2): 227-32). A. 3' véghez: tegkífenfe^ €0 dimíkteptíd eltávolítása a CPGGDbí ;24|55ybeo (SEQ 1Û NO::|) netn eredményezett negatív Mist ezen immmtstmmiáló oligoiiukieotsd aptjgéu^eelfikgs immunválaszt auginenták) képésségébön, amint M a korábbi kitanMsok alapján várható lett vote, ACPG ODN 24553 ôgÿ^aoiyan, és néhány esethea fokozott jmmunstimalák) aktivitást mutatott, mint a CFG ODN 18103.
Ezenkívül azt találtuk, hogy a CPG ODN 24555 a CPG ODK I8i:83--iúl eltérő antigénspeciíikas: X--sejtpopuláeiót indukál (lásd §. ábra* h % 2. táblázat). Különösen* meglepő módón ·$Μ:.M$t$aCSÍPö ODN 24555et adjuvánsként alkalmazva gébérMt arbigénspedfíkus l-sejípoptdáció (különösen az antigén-specifikus CD4 t Γ-sejtpopuláció) több IFN-gammát szekreíaló T-sejtet és több políftmkeionáhs l-sejtet iü Mi, mintj# €P0Í Φ&amp;Μ Ä183 vagy CPG ODN 7909 aikdmasAsávsl generált antígésspeetSktsT-seitpeptláeté. Például nagyobb arányú IFN-y-t mOndö antigéospeeifikus CD4·*· T-sejtet kaptunk, mint a CpG ODN í:81Ö3-«m! eléálitott: antlgénspecíílkus: €D4-t- T-sejtek esetén. A tnind i'FN-y-í. mind TNF-α-ΐ, a mind JFN-y-t és IL-2-é vagy a mind TNF-a-t és IL-2~t vagy még az lEhfey-t, XNFAx-t és IL-2-t szekretálo îripiaîsïxngJÔ, poiífcokelönálie antigénspeciltkus CD4t- "F-sejteket is nagyobb arányban áí iitottnk éld, mint a GFÏ) ODN iOHD-mal vagy CPG ODN 7909-cei eíöáíKtott antlgénspecídkus CD4r l'-sejtek esetén. A CPG ODN 10103-«înal «IMIiîMr antlMnspeedlkus CPS-r l^^tpnpniáeióhnz képest nagyobb arányt! andgénspeeiírkns, TNf-st termelő CDS1 T-sejíet: is kaptunk. A CFG ODN 10H)3-mal vagy CFG ODN 7909-cei előalíitotí atdigén-specil'ikíís CDS t T-sejtpopuláeióhoz képest nagyobb arányú mind iFN-y-t és li.-2-t vagy mind TNF-«-i és il.,-2--t, vagy akár ÍPN-y-t, TNF-a-t és ll..-2-t szekretáló Páplatermelő ant!ge«S;>eclftkas CDiD T-sejtet kaptunk. A Ostjtsk |elé^őséj|n·«*: Immímógenfehásháh: netötéglhen ketúh előtérbe^ HOid- nOsep,; az anigéhspetijktfe 'psgjtek pöiilútikebsahtásáti a kemokintermelést (például 1114-:¾ TNF-o és Íié2j iletësh: körreiáiíanák égyés: esetekben a prötéktlt l> épességükkel (Isd. pl, llararl A, és múdkátársat. Immunoi Rév, 2®Ö6;211:236-54, Makeilenas G aisd Eetts MR, Springer Seuih Immnnepaihöh: 2S86:;28(3):2Ö9-i9, Freepptö ML és tnuhkaíársaii, 1 Bxp Med, 2007 284(6):1485-16, Rtt Ü. és munkatársai Yaecine. 208S; 26(37),4839-29), : antelyrői ágy vélik, hogy a esnpán egyetlen citrAint teßrtelO T-sejtekhez képest jobb eRektor funkciójuknak köszönhető. A CFG Cäf>N 24555 adjuvánsként: allsálmazva előnyösen fehétóvé teszi pöitinkélöiiáliá antigén- spedl-ikus lemtélésél, amély fontos fetet oltóanyag kialakításánál .At immónstimaláló »okleiinsävaik létettek: dopfaszálóak tep egyséáluak. Általánosságban a dnplaszálá molekulák m hîpô sldaiabbak, míg: az égyszálb »fefaÄ. inmmriakííivitása fokozott A laláiorány bizonyos &amp;»sr-pontjai szempontok szerint a puklemsav előnyösen íujplaszálá. A „oakfefesay" ës ^igpoBkfeoîsci^ kiis|ezések alatt egymással iiteserélheíb médoa több ookleetidot (azaz etskrst (pl, rlhőzt vagy dezoxiribózí) tartalmaz foszfótcsoporíhoz ás felcserélhető szerves »ázáshoz kötve, amply bázis: vagy szabäÄ#S plrímldin (pl. eilozin (C>, tlmidin (T) vagy uracil (U) vagy szubsztitnáh púm, (pl. adeem (Ai vagy guanfo (O)). A leirástep a kifejezések o1igodea»xhrib>«ukleotídokxa, oligofilmnukr leobdokra (azaz polmukleötid foszfát nélkül) ás bár mely más,. e$^j|çus-'|!i#| :^|gstgíj^: ti$ge£i$j^ oak. A nuklemsav-molekulák előállíthtuók létező sukiemsav forrásokból (pl. geabteikos:k$gy M.:^- styösen szintetikusak (pl. ittfklpfosävfezipfezuätel előállítottak).
A (sllöalby szeïpjpajj^l *i£É&amp; 1¾ fs^uostKnuláló «I ÄJosifosokat és szobsztittefokat a tefmészeíes RNS-hez és DNS-hez képest, beleértve a itezfodiéiazter iifoén-íukleoztd ikPlést, a fl-íferifeőz egységet ős/vagy a természetes nuMeozid bázist (admis, guamn, bitóit,, tfomg őrseid), à kémiai módosítások a szakember köteles tteásálmzteeíozoak és leírja példásd öibímamr E. és teSíÉatársaíi PS*99). Chets. tev. i(fo;|íi3;; "ErotoeolS: for Olipruteeebdgs and Analóg*" Synthesis and Properties M EpÉéStS and Analytical: Téehmóoes,jS. Âgrçwtei, Ed., ilmsana illess, Tatom. USA 1993; Crooks. &amp;.T.. és: sïsakatlitei: (!f9ö) Aaso, B.ev. Ebarrascöl Itedeol 3Ő; (87-1.29:; ás lifemziker ií. és isnokafeai, (1995¾ Mod. Synth. Methods 7:331-417. Egy találmány szerinti oilgormkleosiid egy vagy több sfodosdast tartaimazAab atei mindegyik módosítás fetet egy adott ifoszfodfeszfer Istentakkszld kötésen és/vsp egy adod p-iDvriböx egységest ésfeagy egy adott Itezfodiásterlmer&amp;tefoszád; kötésen és/vagy ep adMt termés^tas aoklaozld Mafom a természetes DMS~ből vagy RNS-böí allô, azonos szekvenciáiéi oiigonukieetidhoz képest  találmány szempontjai szerint az oligortukíemídok zeoalmszteótak egy vagy több módosítást. A nfo-fedások letetnek n kővetkezők közií yilaszfotek:: a) edklenzid 3' és/vap 5’ végéi* lévő foszfodiészter Intemykieozsd híd helyettesítése módosított interoakleozid híddal, b) nnkieozid 3! és/vagy 5’ végén lévő foszfodlészter iplemekfoozid Éld :0 a cakők-foszíáí gmáne eakör-iaszfat épségé nek telyettesitése másik egységgel, d} jl-D-ribőz egység helyettesítése módosított euhoregységgei és a) természetes rurklasted bázis helyettesítése, A nohieínsavak magukba foglaiák a sznbsxtimált porinökst és pii#md|teke£ iis, péld&amp;rí i C-S propla pirimldín és 7-déaza~7-sz5jbszt5tnált, parim mödosóotí bázisokat Binteebnol. 14:Μ(Μ), A porhmk és plrhsidinek mapj^sa Eiglaijik, a g ikiSveíkip^i»^; adealp, eiiozln, pánin, îteldin, d-metsleltozia, z^88ípo4®őrporfo, ilíö-diftoteopatá!, hlpossotp és más, természetesest előforduló vsgy természetesen elé nem forduló nukieebázlsok, szabsztltuáit és szufeszís-inalatlea aromás csoptMfoc. Más basonl&amp;nmdesltások ktetsnformk a szakember stemára. Módosffotí bázis bárnciely bázis, amely kémíadag kiitebözlk a IMS-tea és RiHS-ben lalaibÄ foMé-szeteseo eidfordolé tezlstetol, pákiául % C, G, A, de tutelyek alapvető kémiai szerkezete azonos ezen természetesen előfordoin bázisokkal Ä módosított bázisok péktâid a következők .közöl választottak lehetek: bipoxanpa, dihidronracií pszeodouracll, 2-tiouracii, 4-tfonraeii. 5-aminourac.U, SdCrőy-aikiomctk 5-(CrCí.)--alteniiomeíl, 5-(CrC6}-aíkilniiuracii, áAbtdmfVtmteiloraeii, 5-klömraeil, S-Onomracii, S-brómuracü, 5-dsidrovieitozín, S-((3s-C;,)-aikdeitozio, 5-{CrCG-aíkerúidtozin, S-CC^-Cftl-alkiltilieikszin, S-kloreitozin, 5- riteomltOZlOi. lAnémdlozm, i^rdimiXilgnateo, :2í4~dinteina-pmi0; S-azaptO'ln, sznbszíitnáii ?-deazap«rtn,. -Ä·· :8ÿ^«îi?~:à&amp;Â"?"»ÂÎbiaâ-iixsài{ és vagy f-desza-S-sztibsztltoáít purin, 5~hidmxlmstijteÉö«jní: M4-aikildtezin(pi. N4-eliídtwin ), 5-hídruxtvteoxlcihdtn, 5*hjdroximdtldeoxietttdm,!. lN4-a^MeöX}e|íÍíl|sí| (pi, ^^^ülseóxíelíídlpl, é-tkxteoxignanozm, teíroplrro) <le«ísdslN^kko?jdjaf* C5-propiailpirímsdln, dilamtnegnrin (pl. 2,6-älaofete-ptriin), Isösápj; l-söílsopsrís, 2-íoteuo-b~klő:^urm,: bipoxatefe vagy természetes onkteozM bázis más módosítását . A fei® A találmány egyes szempont]ai szénát az sít feltárt i nununsí imuiálő edlgomAkotkik CpG ditrakieofidja előnyösen metüálaíian. à mstílátetlas: CpG-motivum jelemtése metsIáIstlan eitozín-gnaten dimrkíeoííd szekvencia (azaz nteiíalsíían 5! eiioztni Ψ gaanm követ és ttszldíkötesséí fe^esdiak:^ Más szetnptteíok szerint a CpG--modvmnbfc metdáítak. Λ. m&amp;àMi szekvencia Rázást mmtM?Wmmt T gmtm kivet és fesaflíkötesseí kapcsoltak). A telataány egyes szempontját szériát az módosított ciiozint tartalma«* îtak Asmeáesiöit dtezia Cïtezia tiírsríészetesea eld^vláió, vagy természetesen elő sem forduló pú-imidl» bázis-analógja. amely helyenesltbebeztá bázist mÂtil, búgy károsítaná az oilgonukteoud Ímmunsíímuíáíá aktivitási. A módosított dtozinok közáiSriozpak, a köriátözás: szándéka nélkül, a kővetkezők- 5~SKafeszíkn|tt dtozinok fpi S-teenl-eitozin, S-fíttor-dtoztík ővklór-díoáls,: S-dtőor-eitozm, .?-jóá«ctaio. >htdrajiÄÄ>: S-mdroxl-métilfejíozm, ő-dtllttonnellí-ciíozm és sztdJsiäteliiiSd vagy sznhsztituált S-alkmsbcifezmk feszabsztrtaált ejfezmok, iNA-sziibsztítítek dtozmok (pl. bí4-:eíll-eitozins, 5-aza-ciío/m, 2-merkapto-cin>zín, izoeifezis, psasm-dô-izodtosàn, kondenzált gyárümndszerii dtozmanaiógok (pl. N.N-propilén eltozto vagy tenoxazm). Az egyes előnyös rhozmoK magokba» foglalnak 5~reeiii-eiíöz!ái, SAloor-citozmi, S-Éife-ete-eitezmí, S-bidmxásetd--dtozmi és N4-e»i-c»cÄt A találmány teás megsteóaiíisi módjai szerintaoiozm bázis általásos Msissal (pl. ll-teiropirrol P-bázis). aromás gyürürendszcrreí (pl. dltorbeszol vagy dilteorbenzo!) vagy hidrogénatommal fdSpacerl szábsztitnák. Egyes ü^rti szerint az immensiimtiidk} teigomikteofid tarialmazbat uraeilt éstvagy szicrnsssékáií (pl, S-Suon-nmdl, S-ferPmvítei-m^iL dvEo-uracil, 5- -propítel-nméil), A találmány egyes stemponíjat szenei az immnnsrimulásó otígooukleerid tartalmazhat módosított gestern, A módosított guasm pteom természeteses slritordteő, vagy temteszetessn eto nem tbrdide parin bazis-analőgja, amely helyettesítheti esi' a bázist anéíkol, hogy kámsítaná az oigotsfeteötM ímmtmsimnliié aktivitás sâî.  módosított guanótok közé tartoznak., a korlátozás szkodéba néíkíii, a kővetkezők: T-deazaguaom, 7-deaza·--7-szobsatiiisáft pan%. hipoxanim, N2-szahsztkteit gtteomok (pl Nríttetd-geafeu), 5-am£0s-3-metlt-3H,6kl--tiazoÍp[4 J-d|pirtmídm>-3.7-dión, 2,6-dlamlsepjZm, 2ramlaoptírm{ purin, indok adeten, szafesziiiaált aösomek íplőM^metd-adenín, Svoxo-adeahi), S-szabsztitaák gnaaiook {pl k-hldsoxigaanir vagy k-bróingsanin) és 6--tiögpásm. A íalálmőöv egy másik megvalösitssí mo^a szerint &amp; gaanto bázis egy általános bázissal (pl. 4--metil-iadob .l-nitro-iralol, vagy K-bázis), aromás g^yóritrendszerrei tpl. beozimláazol vagy diklőr-benzimteazöL 1 -meüí-1 H-{ L;2„4|imzoj-3-karboKÍisav anttd) vagy hidrogéoatonsoul (dSpaeer) szxtbszlituall &amp;iteàbïtâsy bl^vnyos szémptmíjaí szermt az: otlgooaMeotidok tarialmaziteteaJs mMosltoit Imemnkleotld katésdtet. Ezen ntedostotî ÂéstÉ. Eepsáéeiisák Ädsgessn elsnáiiEk (pl., .stabilizáltak ) tehetnek, A „stabilizált nukiemsav tmdekula” kifejezés olyas pakleínsav tnöimkálái jelent, amely viszonylag elíenálló az >« vivő dngmdáoiévd (fI. exo- vagy esdohafeíeáz.Étái) sztmtben, A stsbilMcio tehet hossz vagy másodlagos sírőktáte ervximértye. A több tíz-több száz kiiobázis ímsszőságá nukieinsavak viszony lag eitenállók az in vivít- degmdàd·- óva! szemben. A rövldcbb rRtklelnsavakat a másodlagos stnrkiúrájuk stabilizálhatja és növelheti halástskat Törzs-hurok (,Atem tpättfcai khakid $sa stabilizálhatja a 'Β^Μϊ^«Ίρ»|^|ίιΜΐ f naklewsav 3‘ vége komplementer egy upstream régióval, ami állal visszahajiogstődkaí és törzs-hurok struktúrát alakíthat ki, a mtklemsav stabilizálódik és több aktivitást fejt ki. h&amp;kfeinsáv stabilizálás: valósítható meg fósiílilprlne mödeÄsolka! #· Bosa^ltidrat kötésekkel tméfell· km&amp;olgopfkleofidok maxihÄs altivtiast biztostíkatímk egyes megvAlósitási módok ssseimi és : »egyelhetik m eMpúúkléötibot az íntraeeilkl&amp;ris: ékó- és eaág^|i^|i§#:i|tó!'JtópiÉleíétói M m>ü alkalmazás eéljáta a ntrkjgmssyáfe: eÄpseö yistsötiylag ellenálld! *. degtsÄidkat fpl, eStto» «agy exonbkleázok) szemben.. Bizonyított, Imgy a mtkleibsav gerincének módosítása m vím beadók éMén a sokiemsav rnegoővekedéti aktivitását biztosítja, oéldáttl a lotp-lntrok síábilizálbg|aé
Mikleimavid lebomlás dien. Másként. a oukleinsav stabilizálás elérhető foszfëtgerinc módosításokkal. Az előnyös stabilizált suhieínsav gerince legalább részben losztorotimAt módosltött, A »zferotíoátok szinMizálha-lék automata eljárások alkalmazásával,, akár bxszlötoamidái, akár il-tbszkmá? kémia alkalmazásával Az aril- es mki-íös^nátok előállíthatok péMáeí a ΐΜ 4 4ó9 863 szabadalmi irat leírása szedni, és as aikii:fesÂ>trÎisï3efek (amelyekben a lökéssé! rendelkező sklgénuész alkiált, amint azt a ME 54123 243 szabadalmi: km; és az Ef 092 574 európai szabadalmi irat lekatgí^ éíiállkbaiók kereskedelmi ibrplomhan kapható magessek alkalmazásúval aatómatízált szilárdiazis szirrtézissel Egyéb ÖhlS-genne zuódosííásök és szabszóföeíók előállMsára szot-gáló eljárások a szakirodalomban feltártak föhlmaon, B. aad Feyman, A. (3990) Cbem. Kev, 90:544; öoodehlki, I, (1990)Bkmenjt^^ 1:165]. A CpG-motívummaí rendelkező 2’-0-metii nukieinsavak az etovi-módosííou CpG-rmklelnsavakhöz hasonlóan ímamnaktiváciát okoznak; falójában nem tálaltak olyan géfiííéínódosíiási, amely teljesen mgszitítetné a CpG-haiád, báb# a € helyídtesitése 5-metif C~nai nagyaneóék-ben eSŐlkeóti. A foszfbrotíoát kötéssel rendelkező konstrukciók bizltssl^ák a tegöaj^obb· atóvtíÉSí 3Μ£$&amp;*. nukleinsavat az e>;o- és eodonukleázok által okozott dcgraááclótól Az egyéb módosított mrklemsavak közé táríözitáká: Äsztbdiesztsi· ibéíkísitott nokiemsavak, foszfódíészfér ék losálbí'oboáí nnkieinsav kombíhiemkj metililbszkíbát:, tneó Iíoszlbrotíoát, foszlbrodítioát, p-emxi és kombinációik. Ezen kombinációk mindegyike és iiamnáSéjtekre gyakorolt adott hatásuk nagyobb részletességgel, CpG-nokiemsavak vonatkozáséba» leirt a következő iközzételt PC I' smhadáhsi bejelentésekben: PCX 13895/01570 (WO 9602555) és PCT ÜS97/19791 IWG 9g/fkb !03 és a 6 194 )S8 Bl (2001. február 7.) számé és <$ 239 116 B! számú (2001. májós 29.) US szaba-xi&amp;lmí lkaiban, üeltéte lezik, hogy a módos ltod onkleiusavak lőbb stimulâtoros aktivitást mutálhatnak a fokozott éukleáz; reziszlenetának, megnövekedőit sejbe történő fölvételnék, ntégnóvefeedeít fehépkötésnek ésévagy megváltozott sejten belüli lokalizációnak köszönhetően. :fa Geo beadás céljára a rtakfeitísavak asszoetáibátök i célsejt [pl. B-kéjt, :tnónóeita vagy természetes ölő seit (NK)j felszínéhez nagyold kötési afBnltásá és/vagy a célsejtek által snéptóvékedett cellulárls felvételt eredraéayező taolekxdávai, ezáltal „raxklemsav szállítókomplexet” képezve. A i3xik!eiasavak ionosán vagy kovalensen kötöttek lehetnek megtb&amp;ls íSötélbKkkak á IzÄfrodalomban IpEtezt ejjárásoknt alkalmazva. Többléle kapcsoló vagy keresziköíö any^t glkalmaidi^tmk,^^ péidáöl pmtein A-t, karbodiimidet vagy N-szukeini;nidíl-3--(2-:pi:rMiidltlo} propionátot (SPDP). A nuklemsavak más esetben ismert eljárásokkal liposzőntába vagy víroszx'mába csomagoltak lehelrsek. A z egyéb sfabüMIí nukleínsavak k>Szé izrtoznak, a korlátozás szándéka nélkül, a következei: nem ionos DNS-anaíőgok, például alkil- vagy ari!-i<>sziakxk (amelyekben a töltéssel tendeikezö foszlbííát oxigént síkil- vagy arítesoport Ihelyettesití), tbszfeáíészter és ialkíitíszfolíMs^erek^aíseíyskte a töltässali'eiäelkßKö: oxtgéo-rësz alkilálí:, Á milâmmrtfc-< amelyek egyik vagy raÉÂét végÂ8» dlolt, jaélditá tstrttetitengllkoit vagy teaeÂ^ÉlÉ^IWÉteteèli:, steteán tsMáÉözíak stâleéz degradáiiv]|! sptefeeà.
Egyes sriegvalösitási médok szerint ai teiálmáoy szerinti itnmunstimuiáló oiígottekieotid legalább egy lipoítl, s2ölskj:iía:áii:a!4kl»oEdaaaÍdgoí ës/vagy ixdmidttHporm à»kle«iàfet: tartalmazhat, Μ. oligonahlsmidokoak egy vagy két hopápjÉtetö 5’ vége tehet. Lehetséges két: ilyen 5' véggel rendelkező eligtsnnkteoíidoíelMittanh példáéi két oKjpbnklentM 3V3* kötéssel való összekapcsolásával, ily önödön égy vagy két feozzkiltteetö: 5' véggel rendelkező ol%on:nkteoildot állítva: dó. Λ 2 o; kötés teltet: teszSötfiészter, foszterötibit; 'vagif más nisődotetott ínternokleazid bid.: Ilyett kötések kislakkásásra szolgáló «látások a. SKakbödÄöthait ikíHéelíd;, Hye« kötéseket: te te iteldástl Seliger, $1, és íiteokatázsai, O'lgontreleoíide asalogs wllií tétteiftet! Stel'Atíhí SbSMoteteöeleotidic linkages m tettiteítsé inhibitors of vira) gene vxpmtiwtb· MdCteöSldéSM IMtteteöfldés: (199 t), 10( i-3k 469-7? aad Hang, és munkatársai, Pseudo-cyclic otlgemteleotldes; te vitro and te vivo properties., Bieorganie &amp; Medicinal Chemistry (1999), 7( 12y 2727-273$.
Továbbá, 33'-kttpe«0li oligonukleobdok, ahoi a 3* terminális nukieozidok közötti kötés sete fosaíódk észm( teszlbrotmfetvagy más mmiostiutr teldyáíö&amp;lliíkatök: további térkitöltő; például t# ysgy tetra- 'eillérigiíkpl-tessite: csppai alkateasásáya] (Durand, M, ék inonkaifesi, Îrlple-helk testeten fey an oligonucleotide eoíUatemg one (d.A)l2 and two (dT}s2 sentences bridged: fey two hexaethytese glycol ebams, Smeteamlsiry (1992), 31 (38), 9}97-204, US $ 6SS 738; Dfe 5 668 205), Másként, a sem aokleoildÄbdseteott szártriazitat:: etándioíbö), propándioiböl vagy álxteíáös dezóxkrbőz (dSpsser) egységből (fontaik kiérte Laerenee :é&amp; munkatársai, Started Recognition by T4 poíymteteoíids kinase öf non-naeteosnhe moieties 5’--íttíaebeci to oigonuetertedes; Nucleic ,Aeids: Research 0994), 22(11), 2622-7), standard :^®A»mÉfe:'Ífeiár alkalmazva, &amp; teem tmkleottd kőítet^priök egyszer Zagy többször is beágyaateamk, vagy kmnteteÄamk egy-mássaí, Így lehetővé téve bármely adott távolságot a két összekötendő oligonukleotld 3' vége között.
Nnkíeozld .V és/vagy .5' végért található tbszibdteszter teternokieozid híd helyettesíthető médositott internnkleozid híddal, atneiy például a kővetkezők közül választott: foszíorotioát, íbsztbrodüíoát, NR:R?·· horanofoszlat, ateidmylbeazil (oszfenát, tbsgfte-CCt-C^VO-alkil észter, fôs®iate|(CâÆî3)arih -(CrCji)-O-alkiljèszter, (CrCDaíkiltöszfósát és/vagy (C^Cjteariiíösztíítáí hidak, (CVCste- a-hidroximetii~aril (pl, tt WO 95/01363 iratban feltártak szerint), ahol (€<;-€n)ani, {CVQe)aril és {€.-,-€ ;í}arll adóit esetben halogénnel, alkfiesopoftl&amp;l, aíkssxtc.sofx-ntai, rdtrocsoportteí, damxtsopoítíai szubsztíttttáis. és ahöl R ' cl* R'' jetenlése egymástól lliggetlenül hidrogén, (CrCt3)-alkti, (Cs-C:2o)-arii, (0<,-€μ)-5ϊπΙ, (Ci-Q)-aikií, előnyösen hidrogén, (CrCjt.ydksi, előnyösén (C,-C()~aikii ős/vagy nretoxietil vagy R( és R4Í az: őket hord<>zó M~nei egyíítt $ vagy 6 tagé hete-roetkitisos györőt alkot, amely iartaiinazteat további hetematcsmot Is, amely a következők közül választott: O, S és N. lítekfeaid &amp; és/vagy 3? véggn találbteó íbsztbdiésztet hiti belyettesitheiS deíbszfohíddal: (dstesdb-btáakat ismertet például Ohlmann E, és Feyman A, '’’Metáoás.in Mblseo$a$ ’Βΐφ)^** Vol, 26, “Protocols tor Oligonucleotides: and Anategs", S, Agr&amp;wal, Ed., (famana IfetaSi Totowa 1993, iák fedezet, 355i> olda:kdl)i ahol :a deioszlbbld például a következők közül vâlasztoit:: IbrmaeetaL S'Ateformscotni, ínerilhklroxilamin, oxlm, trmtlléadmtelildtidíazo, dimettlérssztdlbn és/vagy edhiesopote ttefoszibfeidak. A tal;álm:ány szerinti inmmnstímoiáiő oligomtkfeöt&amp;teak adott esetben kimér» gerinee: teltet. A kimém ge-hne egytte! ttebhlipnsu kötést tartalmaz. Egy irtegvatesStásf mód' szerint a kintera gerinc az 5’ YÎMI.ZM2Y2 3' képlettel jellemezhető. Yi és Y2 jetepiôe l·· I© ïrtîsôi^ feöss2á#gó uokiptusav tpolektds:. Y1 és Y2««udegytke tartalmaz legalább egy tsiMósltötí hnensukleond kötési. Mivel a tóméra obgorsakleobdok legalább két mikleotldja îartalsnaz *æe&amp;. » -miädäm^k » e^'%asàR#f^Âi: A kitnérs olsgortakkötkiokra vonatkoztatva Y ( és ¥;< egysmstbi ixiggetle??. &amp; agi jeléptk hogy Y, és Y> szekvetietájs? és-gsrisckötéseí köÍ©gfe<5KÍkíbísk egymástól vagy azonosak lehelnek ögyaRaZott a molekulán belül. Egyes megvalósítási módok szerint Y} és/vagy Y2 3~b m?kleotk! hosszá. Ns és Nj jelentése: 0-5 nakleoiid hosz-szúságn nukleiosav, amennyiben NsZNrben összesen legalább 6 «ökleim van. NjZN2 nnkleoddjamak îÎïCük V&amp;&amp;> iîètK Ι·^ΐ^^!ΐΐ'ί<5Ζΐΐ^$.^ móiiositelt gerincű oakleimavakat. Z Jelsntése immun$t«nyl.á-ló isukiemsav-inotivijrn, előnyösen az 1«: kitárt immuostirtíuiáló nÖgoííifkíeoíidok közül válaszba, A YíH|Zbl|Y2 képiéi: sze?Ä kSagotui utfkléöíldök pyEN*) réPdelfcSKnek mszdxlíészter ioteMoklédilá kötéssel és Y; és rendelkezik legalább egy, de rendelkezhet több módosított mtemoklsoíM kötéssel, vagy akár intődet? inteiwklemid: festése módosított lehet, Előnyős megvalósítási tbódok szett?« Y; sYvagy Y) leg-alább kettő, vagy kenő-öt totklosttoU mlerauklentid kölessel rendelkezik vagy Ys-nek öt módosítod inter-nakleoiid kötése, Yruek két ^bsH íiáernukleötid kötése m Egyes megVaJásMsí >«ódek szerb« a módosítót? mtemtikle?«?© kötés íbszibíotts# módosítóit kötés,, ibszíöeödíioáí kötés vagy p-etoxi módositot? kötés. A nukieinsavak közé tartoznak olyat? imkleiitsavak Is, s?neíyek ^rinceukoijal pozíeitp hidrox;k$ó-pöííiöl és 5’ pozíciójú ibsztátcsopofttöl kölötíb&amp;sk alaesotiy ínolokmíatOmegtl szerves ésoporihoz kapcsoltak. It?oéí|#va a iÉÉíí máMmmsk közé tartozhat 260-aiklíaif Abésmsöpfírt.: YováM, a ipódosított stddein-savak tarialmazhatnak rihóz helyet; például arabbróz, vagy 2Mhioraitibmóz ct?krot. Ennélfogva a mskieinsavak a prise összetételiét illetően: betérógéaek lehetnek, ezáltal bánwely lehetséges, egymáshoz kapcsolt plbnér-egysei kombinációját tartalntazva, például pcptid-mtkkíhsáv (amelyeknek mûmm* géméé van adkMss&amp;y bázisokkal). Egyes inegvaíositási módok szersnt a nukieinsavak germeósszetétele homogén. A cukor-foszfát genne (a eukor-íbszí'át gerinc tmkor-fbszfât egységekből áll) egy Pukor-feszíSt egysége (azaz p-D-ribóz és fosztodiészter híd együttesen cukor-foszfát ipslk egységgel:,
afeel ámésífc egység példán! alkalmas Ü%Ri®sÉ»í|8mí8t azt pldáol Sihxdmkl,M és mtínkaiáínai {|$S9> Modele Add kés. 17:6129-41 letipj, azaz: példán! bélÿelîessiés ntotfolimvszármazékkal, vagy poüaorbl nukleínsav („EMS", «misât, azt példáid: Nielse«:E E;,és «mitksíársai: (1994) JMmærgugzCle?«.. 5;3-7 leírja? felépítésére, azaz példtud belyettesttés FttS-gerine egységgel péklátd: 2Ht?3r?ii?oeti!gl5dm?el. Az oíigoxsakieotiíÍbás·! lehetnek egyéb szibdähdtgeriru; möílosifeMA és hő.%n«íed!:ések:, péidáttl :pept«l nHkleíítsatmk: Ibszfátcsoportokkal (PHONA). zárt nt?k!elt?sav („locked nt?eicíe aetd”, Lbl.A) és alkll-ktbécsopormkát vagy ammo--kötöe&amp;>po:rtokat tastalotazo szegmenseket tartahoazó germed olígímokleotídok. Az tdkil-kötöcsopoÁ leiét elágazó vagy stent elágtíZíl sztíbsztíttíáb vagy kMl» íteá: ya^::*æ^?m. á p-riMz egység: vagy a p-O-2' doxoxtribéz egység Ee^é«e^íi^ éPÂÈSység&amp;dl* amely módosított eukoregység például a következők közöl választott ot-D-S'-dezoxiríbóz, L-2'-dezox:ífÍ:bóz, 2:'~F-'2’-dezoxli'ilx>z, 2I-P~ambíí?óz, 2-O-iCj-Q.)alkΠ-ríbáz^ előnyösená 2-0-(0.1^.),) alkd-rtbóz2bO-?net.!lríMzs. 2^0s(€pCy|álke?:il-rlbóz! 2'-[0-(E)-CdalklbO-tCrCdalkill-ríbóz, ÄI2-2’-dezoxiríbó?, β-D-sllo-immó«,ψ 2j,4-did«ox?-p-i>eríírO“hexo-pir«nóz. karboeiklus (leltjn példáid broélléf J, (7992) Am. Cífes?«. Soe. IIMíOil): ésívggy oytlt 7st?eá enkoranaíógok Clcísja példá?il Yandendriessehe és mnnkalársaí ( 1.993) l'étmléiirói?: d9::722:|) ésdvsgyfbfeifelo-cpkomnalögok <lpir|á: például Tpfcgy: és tnurtkalársa? (Wb í íely,
Chím. .Acts. 7?5:4SI).
Egyes megvalósítási módiik szerint a cukor 2’A)-oserilríkóa, különösen a Stszíódlászisr vagy foszfo-dïësætersasrâ í«íes«kfeoaid IteÄlÄ æ©dk vagy mindkét Bukleoddésetésu  taláitsány xzeÄ ökgosiíkléidísS és mm-*sáátíMÉ&amp;ÉáL-&amp;szààreàâmàmiwmtâ .ssá®miéi$M· bármelyi ké vei :Püidá»l»'í«k«^8-ifertaataítíá..*^^^Í peatreaga, S·. L·, and Camthers, M. 11,11¾) ¾. Let 22:1859), a nukleozid H-íbszfonát eljárással (öaregg ás munkatársai, (1986) Tét Lel 2? 4051-4054., lùmebler és munkatársai, (191ft ML ágd les.l9::53»5«LÔd^| és magasat (1980) 22:4055-4058; Caíisey es wWæ, ((988) Te*. Let. 29:2619-2622). Esten kémiai párásak mcpaiöÄaÄ apacsaJeíés-tévE különböző automatizált óiÉÍÓÍ9sáy--S2ÍnteHaá{£>{Tai. Ezen ofigoouk leoido^t'^^Üi nevezzük. Másrészről, T-ben gazdag és/vagy TG dinukleotkíokat állíthatunk elő nagy mennyiségben plaztni-dokhán (kiad Sambrook T. ét munkatársai, "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", Coki Spring Barbor laboratory Press, Mew York, )989) és kisebb darabokra választhatjuk szét vagy beadhatjuk teijes piszéidként, A nnkleinsavak eiöáiíithatók létező nukleinsav-szekvenciákból (pl, genomikus vagy cDNS) ismén eljárásokat például restrikciós enzimeket exormkíeázokat vagy endonukieázokai alkalmaz» eljárásokat alkalmazva. A találmány egy megvalósítási módja szerint az ttmmmsítmuiáió oligonukleotki valarnemtyl ioternukleotid kötése íbszíőzödoát kótés. A módosított germe, például fcszlkotloáí akár fesfermmidát, akár H-fezfonát kémiai e|árásokái ál kalmazó automatizált eljárások alkalmazásává): szíoteilaálbstó:. Az árit és áiktllbszlrmátofeaí pl számó OS szabadslöwéan fé&amp;ásrí utódon és az alkilswaibtrlészteéket (amelyekben a töltéssel remMkezd ósd-gótsrész alkiláli a 5 #23 243 szántó US szahadaloníha»: leltáriak szerint) kereskedelmi forgalomban lseszetezbeid redgeásék alkalmazásával autontatizált sztiárdíázts szintézissel áüíbatjök «$&amp;. Egyéb DNS gsdnsmródesstfeok és sztife&amp;Äellk éiőáíiiásárs szdlgib # üíMp ismertét |>l, Dbtamn, E. and layman, A.,
Chere. Reá: 90Ô49, 1990; Goodeisild, .1. Biocoojugate Chenu 1:165, MT;,
Az ilyen módon «IMlldmii uokletpavsikdtizoíáii nuklsrinsavnak nevezzük, Az „izolált nuklelnsáv” kiíe-jgzés: általánosságban olyan a sej|M|: sejbnagból, ótiiokondriumból vagy kroipáiíiibéi
véle: együtt izolált és bármely egyéb, m^0^ÊÊ9^komponenstöl eiválasztotí.tgy otegyálőpási tnöd szerint a találmány sze« óllpmtléóSid Sz f ^®mf^*G*Tn«f*T*VC*G*Q* f *G*€*1 W 3,: székvenciából áll, ahol * fószfóredóát kötési jelőL
Egy megvalósítási mód szerint a találmány szerinti sómónstimuláló oligormkieotid nagyarányú antigért-.sp&amp;$fe*s>, P&amp;jjMti «aelttsÄ CD4 - T-sejtet indukál. |f^:®ié#i?a|ósításí: tSÄSKeriut a tsMtelay szöriitti jpE omnsíteoláíó oiipttnkisobd: képes legalább 40%, elöoyóséá légalább 45%; még előnyösebben IsgalÄ 59%; őség élónyósebben: tninlegy 53% sartgénspeeiiikus. IFN-y-t szekréció 004+ T-scjter Indukálni az lÉbby-L TNF-o-t ésivagy ll..-2-t szekretáíó amigenspeeifrkus CD4·:· T-sejipopulációst belül. Egy megvalósítási mód szerint sz ÍEMA-t szekretalo auttgenspecítíkus OEM1 Γ sejtek hányada polikromáztás apmlásí éikattetriával tneghatározott. ilyen meghatározás példáját tárja lei az I, példa (lásd A-níigénspecífikus tnpliésiokla-szekretáió 'I-seitpopuksdok oítmi; bekezdés).
Egy tsegv^esitási mMszerita a ialatednyp3"iuii insmug^mipláió nligognkleotid képes legalább 19%, előnyösen légalább 15%, 22% mind pp-p, tpipd ?%E”ttA szekretáiás aniigéuspedEkus CI34 t T-sejt Indukálására az PEi-y-t, IME-ad esévggy 11.,-2-1 szekretáíó áhrigéo·' speciíikus 0)44 T-sejtpopuiáotÖn: beldt Egy ntegyalósliási :méd szerint a tttittá iEbl^y-i,: :miud ΤΜΕ-α-î anitgéó-specifikus Clî44· Ί'-sejt^k bóttyáda pölikromPiás áramlási: éfensetriávali meghatározod. Ilyen megbaplrozás: példtpf tárja fel sœ 1. péfős llàsdiÂîîilgënspsiciinkus mult iestokin-szekmáló T-sejtpopulációk c»mő kezdés).
Egy megvalósítási mód szerint à találmány szerinti immunslirouláió obgomikleotld képes legalább 30%, előnyősé:» legalább 40%. elösívösébbéh légálább 45%, előnyösebbe» nántegy 47% mind IFN-y-l, miöd TNF-«-t saseksst^őaurig^peciftkus G:D8+ iúdökálására «a IFN-y-u INF-a-t tWagy lî.-2-ί szvkretáló antigén“ specifikus CDfef l'-seitpöpuláción bellit. Ép msp^lösíláslmdd saermí a mind Π·'Ν~ν~ΐ,mind TNF4&amp;4 antigén-speeiÉfeas CM1*“ T-sejtek hányada pöltkmmáziás áramlási efemeîriàval meghatározott, ilyen meghatározás példáját tátja fe! az I, példa riásd Atítigénspseíflkas mniiMioÄvsze krétáid T-s^tpspuMciók cbnh békezdés). A iatálmásy nettót sakíeí^v^:í*e^tófe:.:^%teieí:-^i|fe;· Előnyösen az ttógm speeiikus a megelőzni vagy kezelni kivárd betegségre, Például, amennyiben ikbeteg:feg fert&amp;zó betegség, az:antigétt előnyösen a fertőző szervezetből (pl. baktérium, virus, parazita, gomba, stb.) származik. amennyiben a betegségben saját antigén játszik szerepet (pl, tánsot, néúfeödbgbi^Mík belégsegv például Alzbeiiser-betépég, antigén hurná« ellenanyag ellen vagy antigén, amely humán endogén retrovirábs élűmből expresszáiödik), az antigén előnyösen m. adóit, az antigénnel kapcsolatos mndeiehesss^ll szármázik, Amennyiben a madetienesslgben adíllktív szer éöbíöfe az antigén előnyösen ázádöife áz álSígesnel kapcsolatos: addiktív szerből származik jgk ntkotmhaptéft), A felírásban a ,srenáeienesség>x és a „betegség" kifejezésükéi: egymással felcserélhető módon használjuk.
Egy megvalósítási: ®M szerint a találmány szerinti megoldás á találmány szerinti írnmuírúímníáld oiigonukfeetid oltóanyagban betegség: kezelésére vagy megelőzésére adjuvánskent íSrténő afealmazasra vonat-kozik, akii iaz: ídtőanyag legaiább ggy antigént tartalmaz és ahol a betegség szempontjából kedvező a pobmnk-cionáiís akigért^seeíbfeEts «sejtek képződése.
Azt tatátok, begy a C FG ODN 24555 nagyobb hányadú IFN-y-t szekretáló, antigénspeciílkus CD4-+ T--sejtet: tódulni a CFG D13bi lö l:03-n«l kapott ashgénspeeffikus CÖ4+ T-sejipoulácíóhöz képest Nagyobb hi-ayadá, totod: IFN-yrt .mind TGlfeo-í:;: mind íFN-y-t, mind IL-2-4, mind TMf-a-t, mind lL-2-t termelő, vagy akár tripla, iF14-y-t,'kbiF"tt ‘t és IL-3-î termelő pöhfeoketonálls: antigén specifikus: CI>fe—seiteí Is kaptunk a CFG ODN 10iö3-mal vagy CFG GDM 2éÖ9-e«l kapott amigénspeeiítkas €04A hányadú mind IFN-y-t, miád lL-2:-ts mind TNF-a-í. nttnei ;L-2-:t, vagy akár tripla, IFN-y-tjTNF-ad és 11%2-t termelő poJlfimkcionáiis antigénspedfíkus CDS·;· T-sejtet kaptunk a a CFG QPtSi 10103-mal vagy CFG: OPN 7909-cei előállított smigénspeclftkus CDU - T-sejtpopu Iádéhoz képest
Az IFN-γ, TNF-a és Ü.-2 számos betegségben játszik szerepet. Példán!, a TNF-α szerepet játszik íákháh és az IFN-γ érintett fertőző betegségekben, példáié vírus fertőzésben Ennélfogva, egy megvalósítási mód szerint: a találmány szerinti megoldás a találmány szerinti immunstimniáló oügopeptld oltóanyagban adjuváosként rák kezelésére vagy megelőzésére szolgák· alkalmazására vonatkozik. Egy megvalósítási mód szerint :a találmány szerinti megoldás a találmány szerinti hnrntosttoofeiö őllgopepod oltóanyagig adjovánskéní rák kezelésére vagy megelőzésére szolgáló alkalmazására vonatkozik, ahol az: oltóasyag legalább egy antigént'tartalmaz, előnyösen az itt feliérttumomnogének bármely tké; lígy megvalósbásí mód; szerint a találmány szísiníí mégőiáás a táláltnány szerinti jntmunstmmláió: oligopeptid oltóanyagban adjnvánsként fertőző betegség kezelésére vagy megelőzésére szolgáld alkalmazására vöiratkozik. Bgy tneg valós írási mód siceriot a taláimánv szerinti tttegoldás a találmány szerinti immunstimuiáló öiígöpe^tid eltóanyagban: aájuvánskéní tsaíoző hidegség kezelésére: mgg' megelőzésére szolgáló alkalmazására vontäkrsrik, ahol az oltóanyag legalább egy mikrobíáils autigint fertalmaz,: előnyösen az sít leltárt mikrobialis: asll^sÄ bártuelyikét. A találmány egyes szesngónfai szerint az temnurtimaláin oltgonukleotsdok alkalmasak profi toktikus oltóanyagként fertőzés |sæ Ifü feegségj, safakas%&amp;^í: kapcsolatos RÂltes^ vagy addiktiv szerrel kapcsolatos imèM&amp;msâg megelőzésére. Előnyösem a megelőző vakeinálást olyan alanyokban alkalmazzuk, akiket nem diagnosztizáltak az âtiaportat, analyse: m. oteanyag szolgál, és előnyösebben an almwok ezeu állapotok kifejlődésének kockázatának vanssk kitéve:, Például, :m alany fertőző organizmussal iőrtéiuó fertőzés kifej-iődőséuek kockázatának lehet f&amp;Éfe* vagy letel egy saját míígémú kapcsolatos rendtelteíssségre, vagy fogékony lehet agy addíktiv szerrel kapcsolatos rendelíenességre.Kockázamak kitett alany alatt a leírásban olyas alanyt értőnk, aki fertőzést okozó patogénnek, saját antigénnel kapcsolatos rendellenességnek, vagy ad-díktiv szenei kapcsolatos rendellenességnek történd expozíció bármilyen kockázatát hordozza. A kockázatnak kitett alany magában foglalja azokat az. alanyokat is, akik hajlamosak ilyen tetegségekkifejlődésére. A hajlam egyes típusa; letetnek genebteiak (és ennélfogva akár genetikai analízissel, akár családtörténet stopján azonosíthatók), A haj lan; egyes típusai lehetnek környezetiek (pl. korábbi kitettség fertőző ágensnek, saját antigénnek vagy addifetív széraékh Fertőzés kifejlődésének kockázatot hordozó alanyra példa alany, aki olyan helyen él, vagy várhatóan olyan helyre utazik, ahol az adott típusú fertőző ágens dőltedül vagy előfordult, vagy fokét olyan alany, aki organizmusnak kitett életmódja vagy orvosi eljárás által, direkt, vagy fertőző organizmusokat lehetséges módon tartalmast tesífelyaáékkal való érintkezés ftps Indirekt ütődön. A fertőzés ktfojlődésének kockázatát hordozó alanyok közé tartoznak azok az általános csoportok is, akik részére az í^észségögyl szervezetek adott fertőző orgauiznsss ellető oltást ajánlanak. Az alany állstorvoslással kezelt alany, rágcsáló vagy nem: rágcsáló, á: séfe rágcsáló stooyok közé tartozik, a korlátozás szándéka nélkül az ember vagy gerinces diát, példágl kutya, teapste, ló, szarvasutáfoa, sertés, birka, kecske, tyúk, főemlős (pl. majom) és hát (vtzi fejők, például lazac). A rágcsálj alanyok közé tartozik, a korlátozás szándöte nélkül, a patkány ás egér. Egyes megva-lósítas! módok szerint az alany ember.
Az immunstimutoló ollgomskleotldek arttigén uélküi is beadhatok alanynak* fertőzés é|eni rővsdébb távú yéddenu*. Ebben az esetten Isméiéit dózisok lehetővé teszik a hosszabbtávú véteteél
Megfertözóttülany az, aki fortözó patogénnek volt kitéve, és testében Vágy ekkrtetgítebsu apafegén akut vagy krósikus szinije mérbetó. Terápiásán alkalmazva az immnusíinmlátő ollgohtteleotidok siktetnatÉáfok önállóan vagy más terápiás tetőarsyaggaS kombinációban. Például, jntmuusfentdáló oligopegődéi alkáfúfezkfe lünk: terápiásán antigénnel1 kombinációban, hogy megműveljük az: antigáuspeei&amp;os szisztémás vagy mpkozálls: immunválaszt,:amely képes me$mmmúimí &amp; fertőző,p&amp;fegém, vagy szintjét csökkenteni,
Fertőző betegség Alatt s foitásten olyan betegséget éritek, tteÉf1- i&amp;iitaAÄ' jefonlétébői ered, Különösen fontos hatékony oltási stratégiát és kezeléseket: klfejleszteul a lest: nyáSkáhártyáp -foisziheluek védelmére, amelyék a pátogén belépésének elsődleges bélySZitei:, S^Étohtlgétteei kapcsolatos rendellenesség bármely olyan rendellenesség, amelyet ez alanyban immun-VÊbÊ&amp;i feiVÄy jaÉfoy «»jm sejtjeinek vagy scjftermékemek antigénje okoz. Például, egyes megvatáskást módok szerint a saját antigén tumorantigén, Aizheimcr-heíegségge! kapcsolatos antigén, ellenanyag ellen antigén vagy humán endogén refeovirális elemekből ezpesszáfodó antigén. I'umor&amp;aiigén lehet HLR', MAGÉ, teYESÖ-l, ESA, GEA vagy EGFR variánsa. Alztelmssvtetegsággei kapcsolatos antigén lehet tsa- vagy p--amyloid. Ellenanyag ellesi: antigén lehet barnás eltesauyag el feat antigén, példánk egyes megvalósítási nfedók szerint az írn i igén IgE,
Egyes megvalósítási módok szerint: a tamoraniigén MAGE A t, MAS® A2, M AGE A3, MAGE A4, MAGE A6, MAGE AUF MAGE A = 2, MÁÉI (CH 3), BA.GE, BORIS, SSX-2, LAGE-i, CAMEL (LÄGE-1 alternativ leolvasási keret), GAGE 1,2.,3., TRAG-3, MY-ESO-i. Mdan-A/M ART-1, íirosioáz, tyrpl {gp?5>, tyrp2, gplOÜ/pmeii". PAP. PSA, GHA. Ep-CAM, RSMA, MOC&amp; MUC,, HER-2, ΛΓΡ, EphA2, PÖF-5, Eiert, «CE, Livin tML-lAPj* RAGE, R.U2, Setvlvia,, Survtvln 2B, WTi, TLötr^n-PMedssMefe (TF> antigén, STA, PSCA, STE AP, TGR,, Adtpbphilin, AIM-1,. 'G2d% OGT, TGFaRí?, GO-95 (ΚΙΛΑ 14 ló), GO-94 GehTD), CO-9 (HDAC 5). C'O-61 (BITI !R| €0-53 (K.1SL6| GCMét, CO-42 (TRP4), GO-41 (MBD2), Ren-32 (Lamin €), TNKL (BG-203), CQ-M {MMX I), SDCGABd, GA233-2, STn, CAI25, EGfRvRi, 8G&amp;~aM, nagy MStníásű felâbeeeptor, mezoíéliitb hCG, PAP alia, Gyciin 1, íopnizottteráz., Seepîn BórMasptS:, lappjai»* CBKA FRAME, ADAM 17, EDDR1 νΤΧ\ Repbkádés Protein A. CDK2, GM2, Giobo ti, ΓΟΟ, Ley, in<c). ísln(c). GD2, GD3 vagy GD3L.
Addikiv szerrel kapcsolatos rendellenesség bármely rendélilenesség, atnefyben szeropet játszik kémiai vagy bySögiai :anyag, atnely alanyban addiikdv szerhez addlketd kiféjlddéséi: okozza. PéidÉá, egyes |öegy^éií>· :lfet.TÉ®Í^.s^tó'«a'.i8ááiaí'ív szer lehet nikotin vágy kokaint Egyes megvalósítás! módeÉsaiOTt -gtkotiaaatlgéo lebet boMozóböz kötfidgáh: eikollabaptéá. .'Egyes. őmgyaiésiási szérnd a kérdőéi, mnelybez a. nikúlblkpÉLRer^^ diifóriatoxín. :Á: fertőző betegséggel ka|xisolatk^B: Mszjiä|«k, a „kezd”, ,A«zeÉw kli^eæsek profiiaktikus kezelésre vonatkoznak, amely megnöveli egy alany {itskőződés kocMzfRáí b(s^ozó :aÍaöy) ellenállasát paíogánnel történd fertőződéssel szemben, vagy stták szavakkal, esökkeMi annak vaiöszMBegét bogy az akmy megilríöződik a paíogénnel: és a fertőzésül való megldadésra vonaîkeanak, pi. a fertőzés csökkentésére vagy megsziMfsfésére, vagy rosszabbodásának megskadályoMsátA szolgáld kezelésre azután, begy az' alany {roeglfíilzMőít alany) roegferíőződöíL Amennyiben saját antigénnel kapcsolatos rendellenességgel kapesolat-bart baszriáljnk, a „kezel”,, „kezelt” kifejezések profi'lskíikns: kezelésre vonatkoznak, atnefy megnövel egy als» {fertőződés kockázatát hordozd alany) ellenállását : Ilyen readellenesség kifejlődésével szemben, vagy csökkeni: annak lehetőségét, hogy az alanyban Miejlödik a :Sípi 'Antigénnel kapcsolatos reodeliagesség; és a rendellenes^ ség hatásának: esSkkeatését® vonaáfcoznak, pl. a rendellenességgel kapcsolatos jelok vagy tüneteket csökkentésére vagy íSfigszörtíetésére, vagy rtAszabbödásnk megakadályozására szolgától kezelésre sAhánybögy az alanyba® (saját aatigénael kapesolätös föadellénesség kockázatát hordozd· Äby| kîF^lÔdÔti Í&amp;Ü :ÄiÄ5«ls®!g, vagy ilyen beíogSégkíÉjlbdése jéSeaték vagy tünetéinek kitel iódése megfcszÄött, A szerrel kapcsolatban használjak, a „keze:", „kezelt” kifejezések pro filok· tkus kezelésre vonatkoznak, amely megnövel; egy alany (uddíktív szerrel kapcsolatos rendelieneség kockázatát hordozd alany) eiesál'Mképességét addikttv szemel kapcsolatos rendeOeneség kifejlődésével szemben, vagy csökkenti annak lehetőségéi, begy az alanyban kifejlődik azadBIMÁ szent® 1 kapcsolatos rendellenesség; és a renddlenesség hatásának csökkentésére vonatkoznak, pl a rendellenességgel kapcsolatos jelek vagy tSnéteket csökkentésére vagy megszüntetésére, vagy rosszabbodásaik megakadályozására szolgálb kezetés^ azaÄ, bögy az alanyban (sddiktiv szerrel kapcsolatos remMienesség kockázatát hoMozd alany) kiAjilMÄ itÿeâ rersdele-nesség, vagy ilyen betegség kifejlödése jeleinek vagy tüneteinek kifejlődése tnegkezdődött.
Aiany kezelése bomifnsmnuiáió obgonukleottddal az itt leíA tnödon fétlőzés csökkenését vagy fcn&amp;zés teljes megszűnését, saját antigénnel kapcsolátös téndéllétissséggét kbpcsolatds jéidsbdnetek csőkké vagy a rendeHett^ség tejjes tnegszattését, vagy addikSv szerrel fe^solatös rendeílesssseggeí k^esoltKös jeiekdiae-tek esokk^sését vagy a rendellenesség teljes ntegszSnéset er^tnéayezi, Ep akmy kézéfeék tekíntbeíb, ba ia fertőző betegséghez, saját mtígésn# kapcsolatos: rendellenességkm vagy adötktív szerrétfegpesohdos reinieife-nességhez kötődő tünetek csökkentek, kezelés alatt álnak vagy megszűntek a kezelés eredményeként, ífeztőző betegség esetén a kezelés magéban foglalja az alanyban lévő fertőző ágens themty leégések csökkenését: is p mennyiség mérhető pl. a szakember számára ismert szokása® vizsgálatok alkalmazásával, ifeldlti lUSÂ-feàlïk Saját' antigénnel kapcsolatos rendellenesség esetén a. kezelés magában feglalja m alanyban lévé saját antigén mennyiségéu# csökkenését vagy a saját antigén eredményéként mdafeált immunválasz csőlfetésétls. Ádiiktív szerte! kapcsolatos rendellenesség esetén a kezelés magában fogtálja az: sddikílv szertől sálé függés jelel-neMöneteinek csőkkeaéset is,: „Antigén” alatt a leírásban immanválasz kiváltására képes molekulát értünk. Az antigén# köze tartoznak, a korlátozás szándéka nélkül a sejtek, scjíkivonatok. fehérjék, rekombinásrs fehérjék, tisztított fehérjék, polipeptídek, pepiid#, poliszacbaridok, políszacharid konjugátumok, poliszaehandok pepiid és nem peptid ndmetimmai és más, plaznrid DNS által kódolt molekulák, haptének, klsmolekniák, lipklek, gükolipidek, szénhidrátok, teljes elölt pstegén#, ykasek és élő, iegyengSfett vírusok vagy virnsvéktör#, élő, legyengítettimkíármmak vagy bakferiáis vektorok és többsejtű organizmnsok, példáéi paraziták és atlérgénefe Az antigén kifejezés tág értelemben magában íoglaí bármely ítposis moléknlát, amit a gazdaszervezet mamm-rendszere idegenként ismer fel. Az a#®éssk közé tarfestak, a korlátozás szándéka nélkül, a tnikfobtális miig# n#s saját mtigánek: és aádiktiv szerek. A találmány egyes szempontjai szerint m antigén hordozóval konjuiáli Egyes ttiegvalósttási módok szerint a hordozó diíiériatoxm vagy vlrösszern részecske. Bgyes megvaiőshásimőd# szerint a vlrttsszsrü reszeesv ke Qß RMSfág, hepatitisz B felszisrí antigén (BBsAgj: vagy hepatitiszB mag:anligén CllBeAg). ^Mikrobiáhs antigén” alatt a leírásban mikroorganizmus antigénjei érijük, és magában feglal, á fesdáö*-zás szánd#» nélkül vírust. baktériumot. parazitát és gombát Egyes megvalósítási módok szerint a bakteriális ántigép: ísi&amp;phyh' οι,αβ mí?\us báktérinannal kapcsolatos antigén:. Más megvalÖÄsi módok szerint a bakteriális: antigén fogszuvasodást ölíogó baktériummal például Sirspiosomm MMWsy Sü'epí&amp;cmaw mbrimsi $mgm> LacioéeüMm apMppMk vagy Áeimonsyees vlspmm) kápesolatos antigén, Egyes meg-valósítási módok szarni a bskfertálís: snigén peripdöntálls rendellenességet üköző bakiérinmmal kapcsolatos,: példán! Fmphyremmas gísgívfeö-szal vágy esaW» ^{momywiemcomíiam-stal. Egyes megvalósítás! módok szerint: a vtrahs antigén légáti öriásséjfes vírussal (RSV), fees fferpes simplex vírussal íHSVI), Herpes simples vírussal (BSVl# vagy !-es emberi immositiányt előidéző vírussal (.HÍV-1} vagy HIV-2-yé!: kapesolatos antigén. Egyes megvalósítási feődök Skerlttî a parazitaantigén maláriát okozo parazitával kapcsolás tes antigén:.
Az ilyen antigének közé tartoznak mind ez intakt mikroorganizmusok, mtöiÉ tàufeëæeüti;i2É||8UiÈÉi·# fragmenseik vagy származékaik e» színíetikus vegyüielek is. amelyek temxfezetes mlkroorganfejmss-antigem-el azonosak vagy ahhoz hasonlók. és arra a mtkroorgan izmusra spec il lka,s immun választ indukálnak. Bgy vegyüld hasonló egy természetes raikrmirganizrtRfs-antígénhez, amennyiben immunválaszt {Immorálist és/vagy eeílnlá-ristj indukál a természetes mikroorganizmus-antigénre. Újért antigéneket rutinszerűen .használnak a szakterületen, és ismerek: a szakember számára, A. találmány egyes szemposítjái; szerint az: alany m antigénnek „kitett", A leírásban «„kitett" kifejezés, vagy az alany antigénnel történő érintkeztetésép#: aktív lépésére, vagy az alany antigén»# történő passzív, in vm kitéítségóre utal. Alany antigénnek történő aktív kjtelére szolgáló eljárások, közismert# a szakterületen. aclsatkhe: az alanynak Iptravénás, Inö-amnszkutáris, orális, transzdtenátls, TOBteüSSIs,. tníranazálls, latratekáls vagy aztíhkntán beadás bármelyikével. A® antigén: beadható lokálisan vagy szisztémásán, As süiita résslfftesekèea ísmsríetjkk: s® ästige« és as: hunumstlrauláiő cdlgramkietkiö beadására szolgáló eljárásokat Alany egy antigésoák passzív módon :kiteits,ametmyiben: egy antigén a testben az; immnlrséjlek szátnárá kltetté válik.· Alany antigénnek passzív módon kitett hihet: példáid idegen antigén testbe történő belépése Áltól.
As eljárások, amelyek során as alany antigénnek pa^zivan kitett, különösen függhetnek as irnnmnsttrou-iáló öligöríukleotld beadásának időzttésétól. Például, fertőző betegség kifejlődésének kockázatát hordozó alanynak :M immunstínmláló ollgonnk lentid rendszerese beadható, amikor a kockázat a legnagyobb. Ezenkívül, a® intníötíSíintuSáló oítgonukicotid beadható utazóknak olyan országba történő utazás elölt, ahol a fertőző ágenseknek történő kitettség kockázata jelest van. A® irasnunstlmpláltí az snttgénré adott szisze tsotás vagy mtAozalís immun:válasz Indnkálására kaieuáknak: vagy polgási: szsméiyékoekí ákík: biológiát hadvik sciés kockázatának vasnak kite ve, amikor és amennyiben a®: alany sratek feltett.
Emberisen talált vírusokra példa a korlátozás szándéka: nélkft Betrovirídas (pl. emberi stntnőssltlaííy t előidéző vírusok. például H1V-Í (más néven HTLV-HÍ, :LA¥ vagy: HIIÍAl-tB/LAV vagy íÍi¥-ll:;: ás: íí^s::izolátn-ítsök, például HIV-ί,Ρ); Ptcernaviridae (pi. poiovímsok, hepatitis A viras; enterosirusok, barnán Coxsackie Vírusok, rbinovírtssök, echovírasok); C&amp;klvirídse (pl. gasziraentntiszt okozo törzsbe); Togasdridae (pl. ló eakeíallhsz: vírusok, Rubellá vírusok');. Elavírídae (pl:, dengne-iá® vírusok, éhkeíaiiitsz vírusok, sárgaláz: van-sok); üoronevirklae (pl. kormtavirusok); Rhahdoviradae (pl vesisuíaris stomatitis vírusok, veszeítségvirusok); FilovírKlae (pi. eboiavímsok); faramyzoviridae (pl. parainílnenza vírusok, mumpsz virus, kanyaróvirus, Íégóíi óriássejíes vírus); Orthomyxoviridae (pi. Influe«zavhúsok); Bongaviridae (pi, Hantaan vírusok, buogavirusok, g&amp;lebovirosefc és Nairo vírusok); Arena virídáé (hetuorráglás láz vírusok); Reovirídae (pl. reovímpk, orbivintrsok és rotayirusok); Blrnavínáac; Hepadnavirtdae (Hepatitis B virus); Parvpytdda {parvovírusokj; Papovaviridae (papitlomavirusofc, poltémavitusokj; Adenovíridac (a le^öbfe -adejKtvítis)* M«ipesvœl<te: (I-es és 2-es Herpes simplex virus (HSV), varicella zoster virus, citomegakmrus (CMV), herpeszvirus); Foxviridae Iklmfeirusok, vaccinia vírusok,; poxvirosuk ), és lÄ#m?ss (pl afrikai sorté#® vfeas); és osztályozás nélkül vírusok (pi. a spongiform enkeíáíopátiák k salak ti fásában szerepet játszó ágensek, delta hepatitisz ágense (felié-teiezheíőcn Hepatitis B virus defektes szatellitje), a nem-A, nenr-8 típusú hepatitisz ágensei (1. osztály-beí-sőleg terjedő; 2. osziály-paíenteráiisart tetjedő (pl Hepatitis C); Norw&amp;lk ős rokon vírusok és mztrovirusok). Egyes megvalósítási módok szerint a vírusok légáti óriassejies virus pB¥)i I -es Herpes simplex viras (HSV ! ), 2-es Herpes simplex vírus (HSV2), i-cs emberi imtntmhiányt előidézd viras (HÍV 1 ) vagy HÍV2.
Habár é feltárt mikrobiáiis antigének közöl számos iramán rendellenességekkel kapcsolatos, a találmány szerinti megoldás alkalmas nem humán gerincesek kezelésem îs. A rtetn humán gerincesekben Is kifejlődhetnék fertőzések,; amelyek mé|ëlôzhe vagy kezelhetők a leltárt «mmmstmmláió nukieinsavakkai. Például, a fertőző humái hótégségek: kezelésén kívül a laíáttpány szenati eljárások: alkalmasat állatok lertőzésélpek kezelésére.
Mind a ipmm-negaíív, .mind a graor-pozítíy bákhirltidtok lehetnek antigénéit gerinces állatokban;, A: (iram-pozitlv haktáAutsok közé tartoznak, a ikorlilozás sz^ídéiía: PélkSl; P&amp;$tewÆfa$$0kï· Simhykxwms* -iáfök és SêrepkHwccm-f&amp;yik:- A (Iram-negatív baktériumök: közé tartoznak, a korlátozás szándéka nélkül Mwkmvhtü mii; Pseadmwmis-lajők és Bahmmétii?lájpik^ Feriőző::báitérlumokra példa, a. korlátozás azápdéka; hélkítl; láhkvJŐocíer yuVórís, Bömim .Mgiiw&amp;tfü ßiSimopMki, sps, (pl. M laberouiosis, M -.wrium, M TmmmlMare, M kmsaä, M gmêame^ Siapêptmocem· Lîeisseria gonorrhoeas. Feissma mmmgiëdis, Listeria momayiogenm Sireptococeus pymgsms ißteepimoeaus Ä-*csöprí^ Strepm-omes agdaáím Í0Mpíoc&amp;aem &amp;<mpOtei% Streptococcus ÇMêmsi csoport), Streptococcus TmcoLis, Sa-ept&amp;eocem bovisi Mrepteo&amp;ecus (anaerob risjok ·, Sireptecucms pneumoniae,, patogén Ciamgÿio-feseter-fog Enteroeoecos ψ., Baemopbias iniaeßzae* Saelte aotracis, Corynebádtedum dipbtheriae, Corynebacterhm sp., Erm^wioibrix rfamapathiagy Ciosrridium perjnngem. CiOstridiam tekerni, Enterobacter aerogenes. Kiebsicihi pneumoniae, PimmrePa muliodda haderőiden sp., Fusobacterium mtcientem, ^epfàirncÊâig^metàltfbmfâ. Trepommapadidtem, Treponema periemre, Lepi aspira, Rickettsia és Actinomyces isméid. Egye» megvalósítási módok szerint a bakteri am fogsz·» vaxodást »dcozó baktérium, példáid Streptococcus mutáns, Streptococcus mértem. Streptococcus rangúi*, Lactohaciilm acidophihs vagy Actinomyces visâmes. Más megvalósítási módok szerint s baktérium periodottiális reRdeikmességet okosó baktérium, példáid Porpfryromoiuts gtegmdis vagy Admobaciihis. admomycatemeomitans. laktérpik patogének poíipepíídjaí közé rmtóznák, a korlátozás szándéka oé&amp;öl, feratrkulózíst okosó £8fÄ»J»bÄ külsőmembráo tekerje je (ÖMB) és Â'pôteiïpi Mmtbscterhm soimommrum p57 proteinje, amely baMeriáBs vesebetegségeí {BEDj ideas, Yersiaiosts M Stosmel asszociált antigénje (msa), Mszinën macesszal eiíotoxispe (wpr% Mszmm expresszáitt beomíizmjs (¾) iíagei laris antigénje, Ttesteurefiosm oxímceiuiáris fehérjéje (ECí% MGMByjs és sírektúríehéíjéje, Wtbrosis angmUamm -és K ordaiíi DMF-je és llagsitárrs )001¾¾% Edwardsielkms icteém ès M. mrm Ägeiiads Méçjéje, ÖMP-iéhéijéje, âroÀ-ja és parA-ja, fetithyr^htbirius í'élszibi antigénje és Gytopbagacaimmari 'MÊâét- és regulatoros fehágéj« és iFckeimia séraktör- és rsgulátoros tebérjéie. A gombák közé tartozó példák: Gyptococcm Mt/amam,. Wi$te0mw eapstdpmm Goecidmdes ámiítíg, Blastomyces demenùidix Chlamydia trachomatis, Candida aíbieans, Egyéb íertözé Organizmusok (pl. proííszták) közé tartósnak: Piasmodium spp., pl. Plasmodiumßdcipanm, Pitemódiam maiarbm Plmmaéium ovale, Plasmodium vimx és Toxoplasma gondii. Vér- ésAagy szöveti parazítak közé tartóat#:: Pimmodmm spp., Babesia .microti, Babesia divergens. Leishmania tropicai itedbmamt spp., ledhmarm brmibensis, Leishmania dopmanl Trypanosoma gambmnsa és Trypanosoma réodssiease -{tft&amp;aí áiomkófd, Tp^mmomi isrorr (Cbagas-betegség} és Toxoplasma gondii Egyes iaegvalósítást síiódok szerttït a pafâKîîa smtar^isd kap-esoiaíos. Egyél?, orvost szoíopootból rdeváos mtkroorgaoizraossdeat kimerítően t&amp;^yal a szakimdaiom, pl lásd: C: G, A l'bosnas, Medical Microbiology, Bsiüiere Tiadalk Great Britain 1M3,
Beoncu, K., Coatpeadiaot of Veterinary Ftaddets, âed Ä Nonb AtssrEtso Gempepdiams, !a«>:, ÎÉ9S számos, nem humán gerinces kezdésére szolgáié oltóanyagot iát fel. Amin; az: idd krtpjisttük, az adtigésék közé tartoznak a léslözö mikrobák, péiiádi vtrasök,: graziak, ibáktémmok és gombák é&amp; természetes aPdeti és Szmtstífeos fragmenseik. Az o-rútor és a nem immán geriaceaeket tertózó virrísok közé tariozoak a rcdrovlrusok, RNS-virosok és DNS-virosok, Λ retrovirosok ezen csoportja toagábao foglalja az egyszerű és komplex retro vimsokbt is, Az épszerg mo^fesok közé WÉ- a 1 Apísá retrovf ások, C -ttposd rétfovirtisok és B-‘típusú retrovlrasok afosoporljai. A B-üpusú rotrovirascfk egy példája az egér emlóiumor virus i MM TV), A C--Epusú retrovírosok közé taríoaoak &amp; €-í|sfSik A-osjporlú (Woátvo a. Rous szarkóioa vimsi: p:S¥|) vírusok, madár leukémia virus í At.V) és madár mielobiasztózis virus (AMV) és a C-tipusú B-csoportú (bdeértve a macska leukémia vírust (FeLV)} vírusok, gibbon otajom ieuketuia viras (GALV), lép nekrózis virus (SNV) íetiouloeratetbeters ysrsk (kV) os rpatoírs szækotrta vírus (SSV), A EMipusá vepovitpsOk közé MMÉ Ma- :Söa-Píízer majore virus (MPMV) és I-es típusú oagoat retrovirus (SRV-I). A kompié* &amp;$$£:igst- toznsk a lemw>rusok, T-seUes leukémia vitások es a foatuv vírusok alcsoportjai. A leafivirusbk$$&amp;tüSöimäk a HiV-K de a IHV-2 blV, Visas virus. nüËÉà mamsnhíányí előidéző virus (FIV &amp; H ftll ÜÂ^te; (SiAV) is. A. Τ~ηφφ: leukémia Vírusok: tariozaak a HTLV-L HTi.V-il, majogt Irse||«S fer&amp;émia vtei: (ΚίΧ,¥) ës « szarvasmadiâ ietikënaa viras (BE¥). À fouory vítasök köré i&amp;doznak a torosán foamy virus (MF¥), atajom feany viras (SF¥) és szarvasmarha viArs (BFV).
Egyéb, gerinces állatokban arUlgée RNÉkvieusok közé 00¾¾¾¾ a korlátozás szándéka aéiklíi Esoyiçidae család íagpE ideértve· az Clrtboreoviras oernzetslgeí (emlős és madár retrovímsök több szerodpsá), az nemzetséget fkéknyeiv vírus, Eagertangse vírus* Kemerovo vírus, .afrikai lóhetegség vírus és Cólora-do Iraííaaesláz MrasX a Rotavirus oesnzetsépt -0tmêm· rotavirus, Nebraska borjú hasmenés vitás, taajoro rotavirus, szarvastnarba és jab rotavirus, madár rotavirus), a Pkoruaviridae család, beleértve az Enterovirus Coxsackie virus A és S, BCBÔ (enterálfS sejtkátositó.humán árva) vírusok, hepatitis A esterovirusok, egétféiék ettkefeintniefiilsz (MB) vírusai, Pokovíras muris, szarvasmarha eoíena-Vimsok, sertés utderovirusok, a Cardiovsrus nemzetséget (EoeepíNíotnyocatzlrtís vaus |BMC|, Meagovlrusg a Bbíaovirus oeúyzetsdgei (baraáo rmovírnsok, legalább i I s altípus tartozik közéjiík; egyéb rioovintsokj* az A|dbov'tms neoizuiségei (szájF és-körömfájás íFMÖ¥)); a Ctdemridae estdád, beleértve a sériés vezikaíárís bőrbetegség vírust, Sas M igueí omszlánioka v Iras, amésfca picoroavsros és Norwalk viras; a Toggvlrtdae család, beleértve az Alphavirus nemzetséget (keleti lö-agyvelógyuliadás viras, Sémiik! erdei vírus, Sindbis virus, Chikungunya virus. O'NyougvNyoug vírus. Ross felyö vírus, ¥enezueías íd-agyveii^yaiíadás virus, ítyugati .lé« agyveidgyuiiadAs virus), a Flavians nemzetséget Iszdnvog terjesztette sárgaláz virus, i3eague4âz viras, japán agyveiogyuiladás virus, St. Louis agyvvlégynlltdls viras. Murray Valley agy velögyuíladás vírus, Nyugsteíiasi láz virus. Kenj in vírus, közép-európai Wishes terjesztette vírus, iávolkeleti kullancs terjesztené vírus, Kyasanur erdei virus. Looping Hl viras. Powassan viras, omszki vérzéses lâz: viras), a RabíVirus nemzetséget (rózssiántie virus), a Pesti vírus nemzetséget (nyálkahártya betegség vírus, Hog ."kőiére vírus,; Border disease vírus); a Sunvavindae család, beleértve a Banyvtrus nemzetséget íBtusyamwera és rokon vírusok, kaliforniai agyveíőgyalludas csoportba tartozó vírusok), a Píticbovirus nemzetséget (szúnyog terjesztette s/kdltai vírus, Rift Valley-dáx viras), a Naírűvirus neotzétségét ffcróm-kongóí vérzéses láz virus. Nairobi juhbetegseg viras), és az Kukuvizus nemzetséget (Uukuniend és rokon vírusok); s Ûrihotnyxovirldae család, beleértve az fAtestzavirus nemzetségei (A típusú: íolttepza vírus, számos barnán altípus); seriésmftenza. viras: és rnsdár-IbioBueuzu: vírusok; Influenza B: típus (szátuos bataâa altípus) és luÉuenzá: C ítpas fleiteiseges,, bogy Isién nemzetség); Fíaamyxövirkiss: család, beiéért ve 3 Raramyxov iras aejaMíségéti (Paraiofíaenza: virus 1. íipus, Sendai vírus, Irentadszerpcio vsras, Pamtnfineaza vírusok 2-5 típusok*Nutveasílebetegségyírus, rugtApszvirús), tfee genus Morbillivirus (kieasies virus, subacute sclsrosiog pauébéepItSldlS: vídts, disieíopeé virus* Étuderpesi éirusk a Ptteumovtrus nent/e; saget (légúti ériássejtes virus (R|¥j, légiig Vte: '0$. ptteutnönta vírus); a Rhabdov Irídae család, beleértve a Ve5kuÍdváú:S: (¥SX0rneatzeBé|éí;(CbsAdápí:aa vírtts, Flanders-Bád: Fáik: vfets), a Lysssvkus Bettatétségeí (veszettség yirusj, baí Rbabdovirusok, és két, valöszmu)^ Kbabdovirust: (Mdtíburg viras és Bboia: vírtts); a Arettavírídse család, beleértve: a (.yrapbocytie: oborionteuir^ids vírust (BCM|: l'aéSribé vílss kötspleget és Lusse vírast; a Coroapaviridae család,. í®íeéAve a fertőzd Mr^tarat vírust pÖ V), hepatitis yirast, bstnán eóteváíís corouavírusí és a; macskatéldk fertőző pediosaiiszépak viotstd ímaeskafélék cordnavirusá),:
Jellemző, gerinces állatokban antigén ÄS-v^st^/äiicrtoöäsä^ .s^aÄä nélkül, például: a. Poxvtmke csillád, bekenve az Úrtheftökviriís hétözeíségéí f Variola major, Vadak ódaor; majöip himlő Vaccinia, téhen-hiíiiiő, hyállrimlő, Bctromelia). &amp; .ypppox^l pœséiÈsiget (Myyotns, gz (barooriïhimlê, egyéb madáririmlő vírusok)., n eagrtpöxvlrus nemzetséget (birkahús·· 1¾ 'Êim3s«htmlô|, a Sypoxviras nemzsitsépt: (sertésblisiő}, a: Farafmxvims nemzetséget periózö hólyagos bőr-gyulladás: virus* pseudoco wpex, $mrwm®fäs&amp; hólyagos szájgytdladásának yi[r»|; a frldovlridae család (afrikai seríésláz: yfcas*. béka vírusok 2. és 3i. típus,·/te! Lymphoeysris vírusa};. a líerpesvlrídae család* beleértve az alfa--íterps »vírusokat (l-es és 2-es Merpes Simplex, iteteyhímíőVivsömOr, ló abortusz vírus, ló herpesz vírus 2 és 3> álveszeitseg viras» szarvasmarha fertőző kefkesnígnncíiviisét akozó: viras, szarvasmarha fertőző rhinó·-iraeheítlséi okozó vírus, mscsteíajiáR rhirmtraeheiís vírusa, fertőző iaryngötraeheitis vírus) a béta-terpes-· vírusokat (humán eytomepfölmus és sertés és majmok eytomegaíovirusaí};; a ganrina^berpesvírosökst (Epslsís--&amp;m viras (EBV), Mamtebepígség vírus, í-ierpes saimM. Herpesvirus steles, Herpesvirus sylvílagus, tengeri-malac herpesvírnsa, Lnchertumor ylrusjí m .Adesoyirites család, beleértve a Mastadeaoviras nemzetséget (A, B, C, D, E it urnán alcsoportok nem csoportosított vírusok); majom adenovimsok ('legalább 23 szerotipusj, kutyák fertőző hepatitisze és szarvasmarha, disznók, birka, békák, és számos egyéb faj adenovírusaí, az Aviadenovirus nemzetséget (madár adenovírusok); és nesn tenyészthető srienovírnsokat; a tepoviridae család, beleértve a Papillomavirus nemzetséget (humán paplikSínavirnsok. szarvasmarha papdlőmavkusok, Shops nyál papillomavirus és más fajok különböző patogén papiíkteavirusai), a Pelyomavirus nemzetséget (poiiómavirns, majom: vakeohzáió ágens (SV -At))., nyúl vakxsolízáíé ágens (RKV). K virus, BK virus, .IC vírus, és egyéb Ibem-lös poíiómuvlrusok, példád! Lymphotrophic papillomavirus}; a Parvoviridae család, beleértve az sdeno--asszociált vírusok nemzetséget, à farvovirtis teortelségei (maeskaíelék partledkepema pirosa, szarvasmarha parvovirus, kutyafélék parvovirosa, aletiíi nyércek vírusa, stb), Továbbá, a DNS-vírusok Őzé tartozhatnak olyast vírusok,, amelyek nem Illenek a lenti családokba, például kuni és CáetíízMdt-teeob betegség vírusai és krónikus lertőző seuropátiás ügenssk:|CfíIHA vírus}.
Egy ütegvalOsitás i mód szerint a leírás aniigénspeetSkos únmmív&amp;sz mdukálátera szolgáló eljárásra vonatkxtzik, amely inasában fogislja aniigêiî és: találmány szerinti ImmunsrimuSSlo oíigonukleted beadását, ahol az indukált antígénspeclikus CIOór Tkséjték: legalább 40%-a, előnyösen legalább AStó-a, előnyösebben SíBVa, előnyösebben mintegy 53Ó»-a IFH-y-i aáekréiáipaz íPóí-y-t, TóiF-o^t ésfvagy fteM szefcretáió antigdnspeclflkus C1>H- T-sejM' populációján belli. Egy mégvalósltásí métí szerint az IFhi-yrt szektetálö aarigénspeeirikns CDd · T-sejtek: hányadát pOílkromáztáá áráíhiásl eilötuórláva! határozzuk meg, ilyen me^iaíóre^s példáját tárja fel a jelen doknfnsntnm 1. pékkíja (lásd az A.stígéssí>ecíikus unxltiettokln székretáíő T-sejt: populációk címli bekezifêsi|> Egy snegvaiósMsi mód szerint az aoigént és az ímmunstiosolálő: oilgonukleotldös aíanyban amí^aspecirikus immunválasz Indukáiásához hatékony mennyiségben adjuk he, Egy m^valósltásí mód; szedni az antigén bártnelyík üt feltárt: antigén lehet. E^f megvalósítási mód szerint a leírás antigenspeciftkns immsovälasz Indstkáiásám szolgáló é|#Asra vonatkozik, amely magában foglalja antigén és találmány szériái ímmupstlmaláíé oligonekléotid beadását, ahol m lódukái apiigisspectitkus ® t legalább 10%-a,: eldttyOsets légaiáld> 15%»*, ef&amp;tyOsebbes :fef- aiáhb 2<rii-a, eíőr.yőseblxrt) légpiáHS mintegy 2234-3 dupla citokiniertuelö, előnyösen mind lFN-γ-ί, mmd TNF--uét szdóeíálv m IhN-y-t, IBn-ó-t ésfvagy ÍL^2-t szekretáló atdiÄspeeiilos CDda- T-sejtek: popalácí^lO; beiül. Egv megyaiostíasi mód szerint az ÍFN-y-t és T'N F-ö-í szekretáíO nntigénspeciftkns CIMx T-sejtek bánya dót pollkrômâziàs áramlási éítometriaval báilrezzöl: meg, Ilyen meghatározás példáját: táif s te! a, jelen dokumentum: |, példája: {lásd m Antigénspeciftkus oudheítökíö szekretáló T-sejt fopulskdők eíruá bekezdést). Egy megvalósítási tnód $2m$$í antigént es az immönsimöláló obgomtkteotkfet alanyban antlgéíispöelfikíjs ím·· mtmvissz indukálásáboz: hatékony mennyiségben sálak be, Egy niegvatŐsMs!: $*#· szériái az: sfttígéa bármelyik itt latért :aatigën lehet· £gy tnegvalósitásí mód szerűit a leírás antigens'xicißkus immun válasz indukálásána szolgáló eljárásra, vonatkozik, amely magában foglalja antígéa és találmány szerinti immunsúmnláló oügomskleotíd beadáséi, ahol az indukáft antigénspeciftkus CDS1· T-sejtek legalább 30%-a, előnyösen legalább áO^va, előnyösebben legalább 45%-a, előnyösebben legalább mlmegy à ?%~a dupla dtokinlermelö, előnyösen mind IP'N-y-t, mind TNF·· -ó.-t szekratái, az IFN-y-í, ThiE-u-r észvagy 11,-2-t: szejdelllö antigénspeéjEkus COS·* T-sejtek populációján belől Egy ntegvalóshásí mód szedni: az ÍFbí-y-tds: TNF-nt-t szekretáló :aMi0nspeeíííkus CD4-·- 'Γ-sejtek hánya-dst polikromáziás áramlási ehommrlávsl határozzuk: meg, Ilyen meghatározás példáiéi iái ja iái a jétett bóktó mentőm I, példája: {lásd az Anlígénspeeiftkas nmlílelmkin szekretáló T-sejt populációk elmö Mlezdéstj, így megvalósítási mód szerint m antigént és az Immensílnmláiö oligonnkleotidot alanyban antigénspeciftkus immunválasz indu hálásához: hátékösy menny tségbon adjak bm Egy megvnkísMsi mêâ szerint az antigén bármelyik itt Íeiíáft antigén lehet.
Egy megvalősitásí mód: szerint: a találmány szerinti :msgo!dás az irnnsnöstismíláló ollgonoklaoílá sntlgda ellem immhöválész Indukáíására szolgáló slkalamzására vonatkozik,: ahol m Indiíkált aotigenapeexEksrs €Ö4f T^ejtek iegálább díBn-a, előnyösen legalább 4á%-a, előnyösebbet* Söfs-4j előnyösebben mintegy 03%-a -íSzekreták az IFN-y-í, TNF-a-t és/vagy IL-2-t szekretáló ápisgénspeciEkos ÜD44 T-sejtek pöphlaelaján feelii Egy megvalósítási mód szerint az IFN-y-ΐ szekretáló söíígénspécISna Clp44 T-s^^hányadát pöktedmázláa árarnídsi eiíotoetriavaí határozzak meg, Ilyen msgbatározás a: jelen dokxnnarthint 1, példája jlásd az dntigéRspecdtkns xnaítíchokln szekretáló T-sejt populációk dmü bekezdést). Egy megvalósítási mód szerint az antigén bármelyik át leltárt antigén leket.
Egy megvalósítási rnéd szerint a találmány szerinti megoldás az Imrnenstímuíáiő oligonukíeotid antigén elleni immun válasz indukáíására szolgáló alkalmazására vonatkozik, ahol az {»dukált amígétmp^tikas €p4* T-sejtek legalább 10%-a. előnyősén: legalább 15%-a, előnyösebben legalább 20%-a, előnyösebben legalább mintegy 22%-a dupla citokintermelö, előnyösen mind IFN-y-t, mind ΤΝΡ-οκ szehretál, az IFN-y-t, TNF-u-t es/vagy !L-2~í székmtáló aoîsgéÉsgeetftkns CD4* T-sejíek popníáelóján belöl Egy megvslősrtásl mód szerint m IPM-y-t és I MF-n-t szekreíáki antigénspecifíkns CD4 r T-sejtek hányadát poiikromáziás áramlási citomet-riáva.1 hatánrzzuk rneg. Ilyen tncghntároztb példáját tárja fel a jelen dokutnenSum t. péidáia (lásd az Antigén-speelbkns mulríettökln szekretáiö Iksejt ptgsnláeiék cimn bekezdést). Egv megvaiőspkf mód sprint az antigén bánnelyík itt: Edíárt a-riígén iebet. 'fgy megvalösitásl tnód szerbit a találmány szerinb megoldás az ellem immunvafesz Indakálására szolgáié âik$ஜà$àm vonatkozik, ahol m ·€Ρ$* T-sejtek legalább 2ö%-a, előnyösen legalább 4l)%-a, előnyösebben legaläMr 4S%-a, előnyösében légaÉbb tnlntegy 43%-ä dopla dtokmtenneiő, előnyösen mind IFM-y-t, mind l'NF-u-t szekreták az IFH-y-t, TNF-«-t és/vsgy ïL-2-ι szekretáló antigénspecifikus CD8 r T-sejtek populációján belől. Egy isegvalósbási mód szerint az IFN-y-t és TNE-s-t szekretáló antigénspechlkas C1>H T-sejtek iiányadái poliio-omáziás árantlási eitomet-rlával katárezznk meg. Ilyen tnegbmárnzás pilótát tárja lei a jelen dokumentum 1. gtéldája (lásd az: Antigén specifikus multlcitokin szekretâlè T-sejt populációk elm« bekezdést}· Egy megvalósítási mM szerint az antigén bármelyik itt fokán antigén lobot.
Egy megvÄÄriÄ szerint ä täältMny szerinti megoldás az «mpitsiMiiié niigomtkfeoid ölíé-anyagban adjavánskerst Utrténö alkalmazására vonatkozik, aböl az oltóanyag antigén elled i nimmt választ Hd®-kábés abol az índnkáii anttgènspecifikus Cí>41- T-sejtek legalább 40e·«-». előnyösön legalább 4$%·&amp; előöyőseb-ben Sö%^S; előstyösebben mintegy 53%-a ü'N-γ-ί szekretál, az ΙΤΝ-γ-t TNF'«-t és/vagy 11-241 szekretálő arítigénspeeifcrs €.D4t T-*eHek populációján bőiül. Egy megváltási mód szét int tFbj-y-t pekretálő antigèî5S|îeçi&amp;is CB4+ Igeitek Mpysdai pollkmmózlás áramlási citomeiriával Imtározzxsk mef.Ilyen meghatározás példáját táíja M a Jelen dokementm®: I, példt|a:Psd az Antigonspeclfikus muitscitókin szekteíáM F-sejt populációk dm« bekezdést! Egy megvalósítási mM szerint az antigén bármelyik itt íoHártnniigéít: lolot.
Egy nmgvalósMsi méd szerint a találmány szorító megoldás az immtmsíinmlió öflgenóklsetid oltó-anyagbstt i^yánsként lőnenö alkaltnazására, vonatkozik, aboi az oltóanyag antigén elleni timnnövásaazt Indokéi: és aböf az indukált anttgettspoeiikós CB4·}· T-sejlek legalább 10%-a, előnyősön legalább 3SM-a* slőnyöséb-ben legalább |Ő%-s, előnyösebben jégttláhb otíráep 22%-a dupla eitoklntemoió, előnyösen mint! JFM-y-t, mind TNF~n# székretái, az. IFÜ^Í* 1^£N*44t#®ÍS?' $k-2-4 szekcstáló antlgénspsciEkas CD4h- T-sejísk poptt-· iádóján bt» Így megvalöÄF wM szermt:m. PM-y-t és TNF-ö-t szekretálő mÉ^mpvMkm 034·#· f--sejtek hányadat poükromâ álpstilásleimméirtival háiáMzzók meg. Ilyen mo^atáríszás péMáját tdp lel a jele® dokumentont S, példája (lásd az Ató^tepeelikt^ multickokdp székretáíó T^ejt-ptp^Ä: «fo*S fcste·· désr). Egy megvaiósstásl mód szerittí az antigén bármelyik; itt feltárt antigén lehet.
Egy megvalósítási mód szerint a találmány szótan# megoldás m irnrupasílpmlálő öllgotókleotid oü-snvagbsn aápvássként törtátt# aWmazásafa vonatkozik, ahol az oltóanyag antigén dlemímmun választ indukál. és altöl az indukált antigénspeeilkus €IM+ F~$sjtek legalább 3ő%~a, előnyösen logdább 4f%-a, előnyösebben legalább 45%-a, előnyösekben: legalább mintegy 47%-a dupla estokintermelő, előnyőseit mind IFN-y-i, mmá ÍNF~mí szekál, az lEM-f-i ós/vagy 11/-M szekretálő sötígénspectSkős COS# iFs^tefcpop;' láelöján belől. Egy megvalósítási méd -sset m íFN-p4 Is TMF-o.-t szekretálő 'T- -scjlek hányadát prőlfcrömáziás áramlási eítőmetriával határozzak meg. ilye»· :0iegkpSb@Â;|ilÉtiÉ::^t fel a jelen áekamédtat® 1. pékiája (lásd az AntlgénspecMtkns mnliidtoki« szekretáló T~sgjt Mp^éiék: dmt bekezdést). Egy megvalósítási Ipód: szerint az antigén bármelyik Itt ieltárí antigén lebet.
Egy megvalósítási libád szerini a találmány tárgya .miigént és találmány szerinti immnnstlamlátó oligontíklcötitibí tartalmazó oltóanyag m antigén ellesi hnmmtválasz Indttkálására -szóipió alksimsMsrá, Äol az indttkáíi: atttigénspeciikes CB4:k l-sejtek legalább 4Ö%-a, előnyőse® iegalálb 45%-a, előnyösebben 5ö%-s, előnyősebbett minteg)· S3%-tt. iEöí-y-t ssefeetâ# az iFN-y-t, THF-«-t épívagy !E-2-t szekretáló antígénspedlákás CD4# T-sejtek ptípdációján kü Egy tnegvaíÓsMsi mód skérittt; áá: ÍFp-y~; szekretáló antígénspeciEkas CD4# T-sejiek bányádét polikrnosáziás ärampsl eltontediávaF baíÉ'öztktfe ntég. ilyen meghatározás: példáját: látja lel a jelé®: őokotnenlnnt I . példája {láss! m ARttpstspeeiÄSiiSÄdjteiÄß, .szotee^p T-sejt pöpuiáesék; eámü bekezdést}. Egy mögyslósitási mód szsript az antigén bármelyik üt felíátl antigén: lelet.
Egy megvalósitasl mód szerint a találniiity iárgyá antigénl: és találmány szerinti ImmtttssitmnMd: öSgo-«nklentttlbi íartaimazó öltőanyag m. antigén ellejtr ISttttbnválás®: tndtÉliásárá szolgáié alkalmazásra, sbol: az iednkáit arttigénspeciilkns: €04·- l-sejtek legálálíb lőík-á, előnyösé® legálább ;|S%-a, élŐnylsebbs®; legalább 20%-a, előnyösebben legalább mintegy 22%-s ddpíá: éibskinierrnéiöj éi&amp;nyőset* imintl !FFl-y-t, tnibtl TőiF-mt: szakmái, -aÉ IbhüvyA., TléE-et-t ès/yagy ILyl-t szé&amp;retáló amigénspeciítkas 0)4-:- T-sejtek populációján belül. Egy megyálósitasi módázerlm az ÍFN-y-t és ÏNF-«-· szekreíáló anHgánspecjfUcus CD4-- T-sejtek hányadát poükromáziás áramlási citomemával haiawatuk meg. Ilyen meghatározás példáját látja fel a jelen dokumtüia i. példája (Itfedcax ánbg^nspeelbkus m£díieits^m :s»8feeíá;ó 7-sejr populációk dmü bekezdést). fcgy mcgyáió-shási módszerint :az antigén bármelyik in felfest a«%én feliét
Egy megvalósítási mód szerint a talál massy tárgya asiigéet es: találmáay iszerfeír feímörssllmaiáló oiigo-mtklestidot; fetfefeip$ ofesssnyag az. antigén: ellem immunválasz: mdukálására szolgáló alkáfmazásrs, az indukált: ántigénspeeíítkas ¢$$4 fejlek. legalább előnyösen legalább 4i)%-a, előnyösebben legalább 4S%r&amp;, előnyösebben legalább mintegy 47%-a dapls ebókiniermslb, elönybsen mfed IFhl-y4,: mfed TMFAr-t szekreíál, ár iPbÉM, TNF-ck és/vagy lE-2-ί szekretáló antlgénspeeibksis CD&amp;F 1-sejfek gmpóláelőján belül. Egy megvalósítási mód szerint az IFN-Ή és TNF-o-t sz^téÉÜÓ anMgénspeállfeS *334+· Tejfel:lstey»áÉ?poik'ms)ásdás· fetalis! chomvirlával hafemzáfec ineg. Ilyen: nhígbátározás példáját' iátfa tél :á jóléti dehsmenife 1. példát:, (lásd az Anügénspectfikas muitleikskm szekretáló T-seit populációk eteti beteÄStlyEgy megvalósítási mód szerint az antigén bármelyik ál feltár- antigén leltei, A „hatékony mennyiség’' kifejezés nuklemSáy molekula esetén a káváitlÉíll^áiItatási-p|Éi%witoló^é Is* szükséges vagy elégséges mennyiségre itták f éidání, rendellenesség kezelésére szolgáló*: fegtdáhb egy meliálaílan CpG-r tartalmazó nuklektsav hatékony mennyisége lebet a mennyiség, ámely mifebtéiis feriózés vagy ttamor megszüntetéséhez: szükséges. sliióatíyttgmdinvánsként történd alkalmaalsm, hafekany mennyiség lebst: az: &amp; mennyiség,; amely alkalmas: alany oltóanyagra adott immun válaszának: felerősítéífec Fertőző betegség, ááléí sniigëïmel kapcsolatos remfcüsaasség: vagy addikítv szerrel kapcsolatos rendellenesség kezelésére jm&amp;mf mennyiség" lehel m aníigénspfefíkds immtmtelasz kiváltására alkahsar mennyiség, Ä bármely adón alkalmazásra hatékony mennyiség változhat olyan fáktorok íhggvényében, fefet: a kezet readellenesség vagy állapot., a beadót!, adott CpG ImmunstlmóPó ollgonokieotid, az alany mérete vagy a mndelfeaesság vagy állapot súlyossága. Szakember képes cmpMktfe módon meghatározni mradóit ©llgönakleotkl hatékony smrtnyi-ségét felesleges mértékű kísérletezés nélkül. iktapmány szemponijní: szerit« az oltóanyag rarmlmazhst adjuvánst is, Egyes megvalósítási módok szerint az adjuváns TI,R9-től különböző ToÍÍ<S2eii.!t«0^örÇFI^îagmtrsiàja, TLR agontsífe egyes megvalósítási módok szent« TLRa-agonista (például stabilizált poli{5:€}} TLR4~agomsta (például imidaztkinolin családba tfe'tödS kiäßiOfeltifej vagy TLRfegonista {pêl^imttteâçÂfe- családba tartozó klsmofeknlah Egyes megva-léshási módók fernst az aóiuváns alnminioms% példán! álumlnium-mdífeid, iMisteM fcotnplek (ISCOS% ólaj-a-vlzben vagy viz-az-olaiba« emnizlô, liposÄm vagy széöltófendszer, pifiMI: nanorészeeske vagy mikrorészecske. A CpG ampítastímuMló ollgonukleotid batékony ntertnyisége ktfeiezés a kívánt biológiát hatás elbt^se-bta;: szükséges vagy eiégséges: mennyiségre atal, ültet, antigésspectite együtt beadott CpG mmH-nstimsdáió oitgonoklezfed b&amp;tékony «tenttyisége az a mennyiség, amely aatigétmek történő expozíció esetén immunválasz kiváltását«« szükséges, llatéko-iy, alapvető tssdeltást nem okozó, az: adott alanyt mégis: balékeoyao kezeld prollaktikós vagy kezelést rend tervezhető :á leírásban adott idtanitás! kombinálva a számos aktiv Immnn&amp;timnlálé: óiigenukleotldtíóí történé vélásztássáS : és bizonyos Mtosxzk,, tséidá-sl pöiepeiik: téíaiív biológiai; bozzáléfheiósKg, a beteg testtömege, ncmklváaatos :t«eílékbatások sólyossáp éS: á preletált bssílási: mód mérlegelésével, M : batitony memïyisôg bármely adott alkalmazás esetén változhat olyan faktorok függvényében. mint például a kezeli rendellenesség vagy állapot, a beadott, adott CIpG Immunsömtdáló oSigonukieetid. az alany mérete vagy a rendellenessé vagy állapot sólyoSsága, Sádfe^»'Mpfis:.í^^feSc«És?'ínó-don msgbaíára# az adott CpG imntuaslimuláló oligoaukleotid ès/^p' ätj&amp;iiöt; '$Φ^' I«#· anyag hatékony mennyiséget a jelen kitanilás fényesén anélkül, hogytüjzöl ^^|ϋΙίίϋ||| szükség, .A Éhért vegyületek alanyra vonatkoztatott dózisa lokális beadás esg$8 jellemzően feladásonként a ö, 1 pg: és- M æag 'fcőzőií: tartományba «sík, ameh. az alkalmazásiéi függően, naponta, hetente, havonta vagy bármely ezek közötti ídölníervíálemfea« leadható. Még inkább jeiJeírizö módon a helyi kendás dózisa a beadáson“ ként! fü gg és 10; mg közötti tartományba esik, és előnyösen a mintegy ICO ggés; 1 mg: közötti tartományba., 2--4 beadásiak amelyeket napok vagy betek választanak el egymástól Még Inkább jélleíPzö Älött az ímmüüstt-ernláns dózis a headásonkémi 1 ug es Id mg közötti tartományba esik, és leginkább jellemző módon a 10 a.g és 1: big közötti tartotnanyöm naponta vagy bétéine;#riéd&amp; beadással, A feltárt vagyhkaefc alanyra; vtmaíhmrtaíoü dözlsá ábtigéKspeeffikns mm un válasz kiválásira szolgáló patemeráhs bejabmás esetén, sárikor a. vegyüleíet antigénnel együtt, de más terápiás hatóanyag nélküláí§«k be,· Jellemzőéi?. S-iÓÜÖŐ-szer nagyobb, mint a® oltó-anyag-aojuváns vagy immunstmuüáns alkalmazAsek |^lb^ty'"fe^i^l dózisa, és még inkább jellemző m#on 10--löööö-szer, és leginkább jellemző módon 20- lOÖ-szöíi pagyobb- Az itt Mtárí vegyüljek: preoteíólls bmolta-tasra szolgáié dô'zjsa például természetes immun válasz mÖtMlásárg, m étetaay^i^p dtás fokozására, amígénspeeiíikus immunválasz klyállásáímaCpG egyéb terápi ás hatóanyaggal kombinációban történő vagy speclaSiMk b^dttmő rendszerdskeí lörtérös beadása esetén jellemzően a beadásonként? 0,1 pg és 10 mg közötti tartományba esik. amely az alkalmazástól függően, naponta, hetente, havonta vagy bármely szak közötti idüíaísrvallrnrsfeas beadható. Még inkább jellemző módon az ezest célokra szolgáló paremerátls dózis a beadásonként! 10 pg és 5: mg közötti és tegmkábfe jeietnzö módon a beadásonként! mintegy 100 pg és í :m.g közötti tartományba esik, 2-4 beadással, amelyeket napok vagy hetek választanak el egymástól Egyes megyálósMst módok, sprint azonban az ezen célokra szolgáló preiüerálls dózis alkalmazható 5- löSÖO-szer nagyőbfe: mmtnylségben, mint a&amp;# jeifemző dózisok.
Valamennyi itt föltárt vegvöletre: vonatkozó terápiásán feaíékoriy mennyiség kezdetben mefhatámzhátö állateodellek alapján. A terápiásán hatékony dózis meghatározható olyas) CpG oligomddeotidok humán adatai alapján is, atnelyekeí tesztellek emberen (pl elkezdődtek a humán kílimkai vizsgálatok) és olyan vegyítsetek humán adatai alapján, amelyekről ismert, hogy hasonló farmakológia? aktivitást fejtenek ki, például egyéb adjttvássok, pl, IT és egyéb, oMsl óéira alkalmazott antigének- A panenteráits alksteaMsöez magasabb dózis liebet szükséges. Az alkalmsa# dózist a beadott vegyidet relativ biológiai bozzáiérbetósége és ptáeneiálja atáp--ján állíthatjuk be. A dózis maximális hatékonyékonyságot biztosító beállítása a lent leirí: eljárások és egyéb módszerek alapján a s#mrületmr közismert és a szakember köteles tudásához tartokík. A találmány szerinti készítmények gyógyászati lag elfogadható oldatban keröloek beadásra, amely szokásosan hatalmazhatja sok, puferelö anyagok, tartósítószerek, kompatibilis hordozók, adjuvánsok és adott esetben terápiás alkotóelemek gyógyászati lag el Ibgadhatő koncentrációját. terápiában töt## alkalma#?» a €j?G m#ü«stknulálÓ olígosgkle#d hatékony ttnernsylsége feátmely módon beadható az alanynak, amely eljuttatja az oligortnkleoîidot á kfvátít felületre. A találmány szerinii gyógyászati készítmény beadása megvalósítható bármely, a szakember által ismert módon. A beadás preferált, de nem korlátozó: jellegű áfa; pareuferális ipéldánl míramttszkalám, sz#kütán,: míradsrmáis, Intravénás,
Intravexikális vagy ífÉ^psfíissíeálls}, tepíkáis fpéidánl bör#» (büiiiÄÄJ. nyálksikniyáríji orális, íntranazáíis, .¾ äpm^ÄöÄt öii^aakteÄlsk beadhatok bárntéíy M Mi£ äfc^-egy# terápiás hatóanyaggal kombinációban, %y«s előnyös megvalósítási módok szerint a apadás tt|i A Mÿî beadás lefest tôf?M% alkalmazás «ydikahärtp-feteaSnea, gáláid száj- vagy genitákák oyálkáhátlyáís, bőr.
Amennyiben az tamaBStimitÄ elígnookleotidokaí: szisztémásán kell beadni, jsanemeráíte beadásra alkalmas tormában is: kiszerelhetök, pi botes injekcióként vagy folyamatos infúzióként Aziigakeiás klsKerelisí forma jelenthet egység dózik lelszerelési, pl, .ampullát, vagy több dózist tartalmazó tárolót, hozzáadőtt taítösffo-szerrel &amp; készitményék foszérefoetök eláios vagy vizes vivőanyagban szirszpenzio, oldat vagy emulzió: M· jóban, 4$ to^lmaÂiÉSÉ. ϊ$βΡ«Μ|^^$ SÄSÖges anyagokat, például szaszpendákK stabilizáló- ésívagy dísz-ifoegáíószereket. A pmwfes#te1&amp;8adásr« alkalmas gyógyásza;I kiszereld«* formák közé tartozik az immtmsiinmMtö: otign-gakleotidek vímldhsíő formáiénak vizes oldata. Továbbá, az mmsuosttrauíáló oligonukkotidok szpzpenziői megfelelő olajos ipjgfoáé szuszpenzi okéra is előállíthatok. A megfelelő H|XstU okfoszerek vagy viuőányagok isissé' rníomvk. &amp; asöm «jtejpfe, például szezámolaj vagy szintetikus zsírsav-észterek, például ehboíeát vagy trtgiíeeddek vagy :ifoöäZöKÄ.. A vizes injekció szuszpePíiókytanajínazbatnak a szuszpenzío vbzkozifosát növelő anyagokat, példánl nátrimn- k^btvxttnetlkeeliitildzt, szorbkolt vagy áexfomt Adott esetben a szpzpsmzió mgfefefo síahítízáJészsreket vagy az immnosífttmíáló oilgsmukleotidok öidekonyságáoak növeiőséyét négy ífonénységö oldat előállításit lehetővé tévő agyagokat ísbfeíálmaKhat.
Amennyiben szlfoténíás beadás kívánatos,. az imimnmíknnláló 0%ö®nk!«QÄfe Ä&amp;Äefok. Injekció-.alkateas" fotmátetm, példán! injekcióként vagy folyammos infoziőkéfo:. Azdnjekeiós kiszefoiesi torma jelenthet egysé|.âÂ;ÂBeKilè^y.|à«.^0î»Iài vagy több dazi«t tartalmazó tárntnt, Kb^iaáöfi IsrtÖÄszeo^l A készítmények kiszerelbetbk ölajós: vagy vizes vivbanyaghao szoszpeozió, oldat vagy enmizfo formiplxm és tartalmazi-mnák ibrmôlâtàsàoz szfts%es mtyagoàat». például szuszpendáió-, stabilizáló- isfoagy diszpergáloszeréket A terápiás szer hígítható vagy térfogata növelhető mert anyaggal. A Mgitószerek kézé tartoznak a szóm Ihörálök. ktiiöt;ösen á tnahnlfoí, a-Saktáz, vízmentes íaktöz, cellulóz, szacharóz, efodosített dextrán éstvagy keményítő. Bizonyos szérvéífeo sók' te tlkÂ^^it.ÂÂœyj^kénh példán! imkmm-irifoszfot, mapéfoöa-· -ÉsdJöítáí >l^j&amp;}ftiÄÄ»t«rialt>tstet beszemZhétő hígítószer: Basí-Fkx Enfoex, STA-Rx 1588, Emcompress és A vicéik A terápiás anyag vizes környezetbe történd öldtklásának elősegítésére oedvesiöszerként felületaktív anyagot adhatunk Mzzá. A foliiietaktiv anyagok közé tartozhatnak az amoaes detergeítsek, például nátriam--Ismi-szelbtt, diokül-nátriotn-szulíbszukcinái és/vagy dioktll-nátrlunt-s^líbnák ASkaímazhatők kaiiotses detergensek, közéjük tattezhar a benzalkehmm-klsrld vagy benzetöntíum-kledá, A ktszemlés során íélületaktiv ;^yagkéat í^»fe«ös deterpnsek ÍMfa: íanromakrogol 480, polioxü 40 sztearák pohöslétiÓn, Üh^ne^et. i»Éji 18, S8 és/vsgy ®ktlieeidß-n5onösziearäki pöijszorbáí; 48,08, őái ss/vagy 88, szacharóz zsírsav-észter, :m«l-eelhílóz: ős kiU'bekhnesiNelhiiöz, Ízes* lellintaktíy anyagok őgyedii vagy kőlÖsbözö ará-nyá keverékben lehetnek jelen szimtnenstlnvuläle eligonukieotkibk: kiszerelési fermájbah- A parenterális: beadásra alkalmas gyógyászati kiszerelési: tonnák közé htrtöZik aá inhthíisÉPölálÖ oigbntikieőíidok vlzeldható fómtájőnak vizes öldabt. '!k*váfebá,: az iimmasstösuMlö oligonakleoíldbk: Skásapte zîéî megfelelő olajos injekció szoszpenziókérft &amp; eioáíiitlmtök. A megMéW. fepoiïi oldószerek vagy ÿrvê&amp;spfc» gok közé tartoznak a zsíros olajok, például szezMoiáj vagy szintetikus zsírsav-észterek, például etil-okát vagy tríglieerídek vagy líposzómák. A ví^s: IsjekciA szaszpenziók iaAalmazâatnak s szuszpenzsó viszkozitását növelő anyagokat, példái inamon*- karfeoxúoeil-peliloléss, szorhltoii vagy doé&amp;Adt, Adott esetben a szaszpenztó megfelelő stabiiizálószereket vagy az ímnnmstúnuláiő oilgonokleotidok oldékonyságának növefesOvel nagy töménységá oldat előáfilását tehetővé tevő aayagokal istaríalmazfeai:. Másként, as immoostltmdáfo oiigooukleotidok por tormájában is kísxerelhetók, alkalmazás elán megfe-telő vivöanvaggaí, például steril, pirogénmesfes viszel történő összetételként. (Mils alkaloíásasta a vegylifotek (pl. Eipöi itmpoosttafláfo oligmtokleotidok, antigének és más terápiás festőanyagok ) hötmyeh klszefelhetök ss Idmsofestőao^lő o;ilgöoakloötldöteak a szakmAílétea közsísiest, gyögy-ássnilag elfogadható hordozókkal történő kombinálásával, Az ilyen hordozók lehetővé teszik a találmány szerinti inttounstitoefálö: ofigonukleotidok kiszerelését tablettaként, piluiakónt, drazséként, kapszulaként, folyadék-ként. gélként,; szirupként, som szttszpenztókóni,. szttsvpenziőkéní és feasenfeNÄfe g teeléndő által történő orális bevételire. Az: orális alkaímázásó: gyógyászati késæifeaények: eíiőáiiffeaíók szilárd: segédányaggai adott esetben a kolelltozé ksveÄ őrlésével és a grarndntnkeverék feldolgozásával megfelelő kiegészítő anyagok hozzáadásé piád gfoennylben skbkségés,: iabléíía vagy dntzsemag elÄitÄfoz. A mepífelö segédanyagok kölöttóseo ktfeíföaoyagök, példáit! énkor, IfeleljtVé: a Isktózi, szaefearózfe eiasnítólí vagy szorfeloli; eeíialózké-szltmenyek, mint például kukórseakeményírö, bózákesfenybö; rjzs&amp;etndfeylfo. fotrgooyaksményltö, zselatin, tragaaltnezea, metíl-ceibdóz, bldtbkipropiloioitbeeioloz, oáirientAatbösiofotleofiitlőz, és/vagy polivmil--pírról időn (PVPj. Amennyiben kivánátosj szÉSsési segítő mtpgok hozzáadhatok, például; &amp; keresztkőlőtt polivinil -pirrolidon, agat, áfgiosav vagy sála, például; nálAttm-ttígínái. Adott esetben az orális ifeadásraaitaímas kiszerelési forma kiszerelheti fezfolágiáx sóoidatban vagy púiéiban, pélául EDTA-feás, a: belső savas körölmé-nyeksemlegssliésóre, vagy beírtatok bármilyen hordozó oélkö!. Á fefei; festőanyagok vagy készítmények: orális adagolást fermât la igysfetobe vetsfeők, A feptpatp^k vagy tészdofenyek kéadaiiág infedpsitfeatófc ágy, begy a hatékony lépes. Általános- ságbáo, a számításba vett kémiái módosítás legalább egy csoporti feafesnyagboz vagy készbményfeez máglfeőz kapcsolása,: almi a csoport tebeiővé teszi (a ) proteoiízis gátlását és#! á vékámba történő fel vételt; a potnmMi vagy feibőb iziatón kiváittdöS a hatóanyag vagy készifotény általános stabilitásának növelése Os a enknlációs kfo növéiésé st testben. Az Ilyen csoportok közé polfetifemgliimi, egíéáv|pká &amp; koppifc^Kil»diestrán, polícimi-aíkohol, pnlivlnll-pirrolidon Os ptdltsiőlm. AbueboiwOki ős Davis, 1981, "Soluble íhMmer-Eozyme Adducts" In: Enzymes as Drugs, Hocesberg and Roberts, szerk,, Wtley-Intersc ieoee. blew York, N.Y , 367-383. oldal; Newmsrk, és tmitikatársai, 1982, Appl. Biochetn. 4:185-189. Egyéb alkalmazható polimerek a polí-iJ-díoxolán Os pan -1,3 ,tS-tíoxokán. Gyógyászati tslkaímazásra a fentiek fényében előnyösek a pnítetllOn-gítkoi esopoáek;. A találmány szerinti gyógyászati készilmény intranazáiís bejtilíatása szintén figyelembe veendő. Az intranazáils bej átlátás lehetővé teszi tafáítnány szerinti gyógyászati késítitmény belépését a véráramba a terápiás dózis pfeba történő bestfesat követően azonnal, apélktil, hogy a termék lérakődna a tüdőbem: A nazális felsős-tásm aikabnas kiszerelési fonnák közé tartoznak a devizást vagy cikfodextrant tartalmazok.
Az tntranaaális isadás^ alkaltnas eszköz egy kis, kemény flakon, amelyhez adagoiószefepes szórófej ssallakaíik. Egy msgyaíösiásl mód szerint az adagolt dözin: a találmány azeríntt gyógyásMi készítmény olda- iának meghatározott teÄgara kamrába vertesével áiiipk élő, ahol a kaiata olyas; kialakítasö: Äse! rep#l|s-zik, amely alkalmas arra, hogy amennyiben egy folyadékot &amp; kamrában összenyomunk, spray képzésével aeroszol kiszerelést formal diszpergaijon. A találmány »fis gyógyászati készítmény Beadásához a kamrát összenyomjuk. Egy kookréi megvalósítási mód szerint a kamra dogatiyó elrendezés. Az ilyen kdSzalefcek kéréskor dein« forpiombso beszérezhet&amp; Másként, mianyag: összenyomható paiaék Olyan ktalaklfosfe réssé! vagy kilássa!, amely alkalom arra, hogy amennyiben a palaököt összenyomj tik, spray képzésévé dliszpergálía az aeroszol kiszerelési formát, A nyílás szokásosan a palack telefon található. és a palack teteje áltálában elkeskenyedő, begy részben illeszkedjen az arrjámfea az. aeroszol kiszerelést: forma hatékony Beadása érdékéBem 'Előnyösen, a nazális Inhalátor az aeró-szol kiszsrélésí forma Moforl nteogylségét biztosítja a gyógyszer kimért dózisának Beadása érdekében.
Toioszbokkálfe beadásra á keszhményidí iebeinek tabletta vagy pasztilla, szokásos módim kiszerelve, A:végytiiéték klSZerelhelök rákiálts vagy vagínáils készlboényhéirt, példáid képként vagy retóosiós Beön-léskéög amelyek: pi> szokásos kópalapot, példátd: kakaévojai: vagy más glteeridet tartalmaznak, A korábban; Jeliért kiszerelési formákon klvti a vogyäletek klszerelhetök depot készlteényként; is. Az ilycti bosszú hatásé kiszerelés! fonnák megfelelő polimer vagy kidroíöB anyagokkal például emulzlö elfogadható olajban! vagy ióoeserélő gyanlákkal alakfomfok ki, vagy lassan oldódó származékként, például lassan oldódó sóként. A gyógyászati készltnfopyék lartalmazhÄOk nreglelélö szilárd vagy géüazisó hordozókat vagy segéd-«mysgökai ilyen hordozók vagy segédanyagok, ä korlátozás Szándéka nélkül, a kakitan-karhötsát, kÄfot®-fosz~ fot, különböző cukrok, keményítők, eéliiBÍ:ázsrirfoazékdk,: zselatin ás pôlïmerek, példáid poliedlén-glikplök.
Megfelelő folyékony vogy: szilárd gyógyászait kiszerelési forrnák; példád! vizes oldatok: vagy sOoldafok mhálálásfeoz, nitkrőkapszulázötl, sgiráiformálgm feltéfcersdsit memhmnBa. csomagolt („saepouleaied”}, mikroszkópos remayrészeeskékre Bevonmolt, llpOSZŐötába zárt,: nebtdizáU, aeroszol, bérbe ültethető :pé#é! vagy éles eszközre szárított, amely eszközzel a borim karcolható-, A. gyógyászéit készifoteoyek közé t^O&amp;foÉ· $ ffootde-took, porok, tabletták, ibevobaíos tabletták, mltókagszulák, kúpok, szifúpok. emulziók, szoszpéöztsfo, krémeké cseppek vagy ;a hatóanyag elhúzódó folszivódásáí biztosító készkmények, amelyek elöáilltdkáfcah segédanyaga-kát és adalekattyagpkat és/vagy k isegifopoyagokst, példán! szétesést elősegítő myagokat, kötőanyagokat, bevonatképző anyagokat:,: dozzadóanyagokáí, kenőanyagokat, izesífoszereket, édesítőszereiket vagy oldószereket szokásosan alkalmaznak, amint asst font leírtok.; A gyógyászat! késztafoayék alkahrt&amp;ssk különböző; gyógyszerszál-Ikó rendszerben történő alkalmazásra. A gyógyszerszállítás módszereinek rövid összefoglalója hunger, Science 249:1527-1533, 1990. Â Cpß mmsonstiímrláfo oltgoonkleotídok és aáeft esetben más terápiás aopgek és/vagy antigéoek Beadhatók per se psztán) vágj? ^ógyászatiíng eifogadható só formájában, Aomnnyifecn gyógyszerben alkálmsz-ztdc, a sónak gyégyászadlag elfogadhatónak kell fenolé, Ős nem-gyögyászaiülag elfogadható sók nmdesgn alkalmazhatók heiöiök gyégyászatdag elfogadható só előállítására, ilyen sók a korlátozás -szándéka, nélkül a kővetkező savakból eiiilitottak; sósav, bidfögén-bromid, kénsav, foszforsav, mafelosáv, ecetsav. szaiíciisáv, p -toluol szuíf&amp;osav, Borkőssv, eeetssv, tnetás-szalfonsav, hangyasav, malonsav, borostyáokősav, nad&amp;!m-2-szu|~ fonsav és ixítízol-szoliónsav. Az ily«« sok előálliihatók ajkáhSm vagy aSaöt-^MSar sékíat* JÄM » karíríoxílsav-csoport nátrhon-, .káliom- vagy kalclumsójakénfo
Megfolélöpoilíerelö szerek közé tartozik: «cetsav es#|f^ megtéribgatíéj; és íoszlbrsav és só (Ö,&amp;-2 íöntsg/iéAbgat%jv Megfelelő tartósítószerek: közétartozik ûbemr $kéni«s*Ârià #,08348,03 klértaanol (&amp;&amp;Q;9 tönmgMribgateig patakénak (0,:81-0.,25: íötneg/léidugaí 3kg és ilmerosxa! (0,004-0,02 rtlmeg/teriogarti}. à találmány saeriíkl g^égÿés^iMkés^OîHéBÿsk CpG Imtauhrtinrelálö olgonuklaolid: mennyiségét tartakhttzzäk, és adóit éSélfeei egyéb; tetAltebaióönyagöfca;,, adott esetben gyógyászs-
Pag eiingàdhâié herdözóbstm A gyógyászatba! ejfugadhatő bordózó kiíspzés egy vagy több kompatibilis sas-Mrd vagy Myakony kkbilÉanyagóh jtígitőszsrt; vágy kapszuláié ááyágölákláie, ásneiyefc alkalmasak «erber-sek: vagy mási -i*!8Â$K; ÀMwkzé kOsjazés Sáárvés vagy saaTvelfeá^téröíészetes vagy szintetikus alkotódén*« jelent, amellyel a hatóanyagú; kombináljuk az alkalmazás elősegítésé eg|áböl, A gyógyászai készítmények összetevői Is össZékeverhetók a találmány szerinti vegyületld és egymással oly mé~ dptt5 begy nem jön létre a leivaáS : gyógyászait hatekoro súgót lényegében károsító interakció. A leírás tmódokai ismertek a kővetkező iszámoz^á beke2#sákí
:í, bmmmsiiumiáló obgonulleorid;, amely tartalmazza az 3- pliQ A IMÖ: I ):mtkieölldszekvepelát:. 2. Az :1, bekezdés szerinti hntsanstimníáló oligonnkletetd;, amely tartalmaz egy vagy több móteítatí kötést 3. A 2. bekezdés szerinti temunstínndáiö oiigaoukieond, amely tartalmaz egy vagy több foszíorotioát kötést. 4. Az !.. bekezdés szerinti temumáiimtiáló oligötmkisoöd, amely tartalmaz legalább egy bpeit, SZáhteitaáit nukleőtídanaíogat és pirimidm-parin dimtkleötidöt $i: iÄÖasyag, amely tartalmaz gtegem es a S:E||: IP bií):l szerte! mikteotidsimkveaciäi ísrtóí®tó:;^«· manstii*^ät§.'Ol%ÄÄö®Ä^ vdáthte gyó^szailai elisgadháto hordozót. 6. Az 5. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol az ítmntmsilmuláló ólígöoakleotld anflgénspecidkus immunválasz kiVÓltáSábsz % h A, bekezdés szerinti oteanyt^,: ábíd a -klváltótt: ámigéöspeeirtktrt; immmrvhlasz 1M Immunválasz. 8. Az 5. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol az antigén mikrobiális antigén, saját antigén vagy addiktlv hatású anyag. 0. A §, bekezdés szerinti oltóanyag, ahol a mikrobiális antigén bakteriális amígén, vÉrasantlgé® vagy paradtaasstigén. 10. A 9. bekezdés szerinti ohómsyag, aboí áj a bakteriális antigén Síaphvi&amp;ax:eux ««reus-sZSl kapesolates, Í>gs^titssó^5óifeoss6' kapesnte íos Vagy periodonteis betegséget okozó bakériummal kapesölátes, bj a yírusanfigén légúti öriássepes virsssa! (fvS¥;k M&amp;pes smpies j-es vírussal, tietpepxmpkx 2-es víriiSSáh emberi immsmhiányt előidéző 1-es vagy 2-es vtassál (íf!¥~ 1 vagy P! V-2) kapcsolatos,: vagy éj a parazltaámigén maláriát okozó parazitává! kapssölatos, I t, A Μ» bekezdés szsritúi oltóanyag, tea! aj a fogszuvasodást okozó baktérium őózpímmeete Ammm, so&amp;?mm; Smípimmmx step% íúctobiielMm addmhMA m^áctimmpemvismsm^ vagy bj a periodoatális betegségét okozó %ktéri«é. f/agdaÄ vagpdcsêmèmilîm wímm^siisx-· è&amp;miians. 1:2. A 8,. bekezdés szer mii oltóanyag, ahol1 Aiztóióer^Aögségggl feaffesolá·· to$ antigén,: humán ellenanyag elleni antigén, humán, endogén rntrovirdis eleksfebël «xprôSSZàlô# itógétt vagy hordozóhoz feorgagalî oikotinhaptén. 13. A 12. bekezdés szerimi oltóstsvítg, ahol aja tamorantigén HEE2, MAGÉ, HYdÉSÖk FSA,. CEA vagy EGER variáns formája, bij az ASnhelnîer%;îep^gel kapesolÄs *®ílgén íao- vagy P-atniioiéL: c) az antigén lg:E vagy # a hordozó, amsdybez a nifeotinbapién koniugáiva van, diftér iátoxin: 03T}. 14. Az 3, bekezdés szerinti oltóanyag, ahoi antigén: pepiid. cefeBmbínáns fohéíje, tisztított Äkje, leies elölt pstogén, éld, legyengített viras vagy vmssvektor, élő, legyengített bafeiétlsno: vagy bakkrMy vekföt, poíisz&amp;chariá, haptén vagy piazaád DNS által kódolt amigén. 15. Az 5. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol az antigén hordozóhoz konjugáíí. 16. A 15. bekezdés szedíkídlloa^ag, ahoia hordozó: diRét i^oxÍK(DT) vagy vírnsszerű részecske, ahoi a vííosszerö részecske Q~p RNS-hlg, hepatitisz .» Ibisen i ;tógé:o pRsAg) vagy hepatitisz &amp; „mag* antigén (HbcAg). 1/, Az 5. bekezdés szerinti oltóanyag, amely egy vagy több adjuvánst is htrtsbmtz. 18. A 17. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol az adjováns TLRh-töl kólönbözö Toll-szerü receptor (TÉRJ agonistája. 1:R. A i t. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol az agonista 1ER 3, TLR.4* TLR 5, 1ER 7 vagy TLR8 íigonistíijs. 20. A IR. bekezdés szériáit oifotmyag. sítől a): m lERS-agonisia stabilizált poiíikGk b| a TLR4-agonista lipopoliszaeharid fEFS|:szátiBazéka, e) a ILRáfeagtóstá ilageiim vagy d^a 1ER7- vagy TERfoagonista az Inddazokitroiisok.családjába, tartozó Rismolekeía. :2 b A 2Ó. bekezdés szerinti oltóanyag, ahöl az EES-százmazék MPL vagy ö:LA, 22. A 11, bekezdés szerinti oltóanyag, ahol: az adjováns tósttónssó:, írnnmasttomiáló: komplex (1SCÖM), oiaj-a-vlídjen: vagy víz-az-olajban cmülztö, liposzóma vagy bejmtaió zesdszer, 23. A 22. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol a) az aittóniumsö afoaítóírn*bldiöxid vagy fej a bejuttató rendszer nartoreszecske: vagy tniferarészeeske, 24. Az 3. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol: az kmmmtómd kló oJigonnklootid tartalntaZ: egy vagy több módosított kötést. 25. A 24. bekezdés szer?rét oltóanyag, ahol a) az immonstimaláló oiigoahkleotid tartalmaz egy vagy több foszfortól# fente® vagy b) az temonAímulöi olígöonkleoiid: tartalmaz legalább egy lipoil, szsbsztiiuált nafeleotidarmlógot és pártó-din-pórin dbukleotidot. 26. Az 5. bekezdés szerinti oltóanyag, amely beadásta kiszerelt, 27. Az 5. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol a) az oltóanyag parenterális hton fotlènô beadikra kmerelt, áltól a pafoíRtóbs át mfetóaszkálsAs, szsÄatän, sBÉaséÉsÂts, Âravénâs vagy h) m oltóanyag teplkalis àto» mtM bsMásra kiszerelt, été. a îoptkâis M a Mr, vágy nyálka- hártya-felszín. 28,. A 22. bekezdés szerinti oltóanyag, ahol a nyáiksháit«* M oralis, Intranazálls., Intravagináhs, dírnréktíllis, IntrabiÂâls vagy Mraokolàds. 2¾. Eljárás antlgéospedlkus Itnmno válasz kiváltására arra rászoruló alanyban. amely rosgáhao foglalja antigén és SEQ[: IP MO; I szerinti nnkleotidszekveodát íMáksazó ímrminstimoklió nllgóírokleotid beadáséi az alSpii Mmaagátozktválflsáfc® hatssas mennyiségben:. üfï A 29w: bekezdés szedő# eljárás, ahol m antigén nlkróbiális; pdlgén, saját antigén vagy Máíktlv haté-sá anyag. Û: Glálroibp; a továbbioten a kSvstkezi példákkal alEeloiölf^ök, amelyek mmm^m módon nem tekinthetők koriáiözójdlegönek.
PÉLDÁK /. péhki Összehasosllíöttók a CFG 24555 itmnonsbmoiáíó oligoneukieotid antigénspedftkus immunválaszt növe-Iá képességét a CFö I® ! Ö3~ma! és CPG 7000-éel IstraxoxiaÄdtisas ioyntmizált egéfhsib hepatitisz B íelszM antigént ÇllBsAg) vagy óvaltintnini (PVA) alkalmazva modell antigénként Méfkzemk ës &amp;à$&amp;g&amp;fc ¥aJa8ï8aayl ÖI2hí-öt llôdiiaâb olsgödezodoskleMiÄol fÖPtí) állítottuk -Ä Esvidém m ÄM*# endotoniumentes Iris-MltA, púderben oldóltok ptl S-on jBnmiPnrIO; EM Science,. GiMstosm, M$$ és steril, endntömumeolfes foszfát pufíerélf fiziológiás sööldátbao iFBS) hígitottnk: píf 77,2-0 plgraa Chemical Company, ft, kosuk, HfM stißä a nókroltielis, mini az eodotöxáttértázés megelőzésé «épít aszeptikus fcötS&amp;nények között. A törzsoidatokat 4A2~pß: tároltuk iélhasznáiádg, Á véd Ipse nőstény EÁ.hB/c és CS7BÎ/6 egpeket a Charles· Eáyer Canada IQMbes, Canada) cégtől vásároltuk, A: G57Aad®rő lLF9|ssnyos: egereket a fteomc Farms tenyésztette, majd ígosMányozá^s &amp; Coley Animál Carai Eaeiliíyd«?: száílkbáik őket Az egereket mikroizoiátgr ketrecekben feelÿé^ïïfe: éiíi s Cbilëy f^tarmíí-eei#i«aÉ Öióép Canada Állntbázáhatí, Valamennyi vizsgálatot a Colsÿ Canada ÁllaívéddptiBíZóttságéRak megfelelően, a Szövetség a: iaberátőrínOíi áj latok vizsgálatáért és·. skkmditációjáérí (AAALAC laternÉleaal) és a Kanadai Aiintvédéfci Tanács áimybáÓja;sáerioí végeztük, Azáliamk a vlzsgblai kezdetén mintegy 18-2(1 g sllipak voltak. áz egemé fflepiiäfjisz M0k^t áMígSíi (tlBvAg) BALB/o egetekéi Íb“;lÖ: cssspoxlonkéot) tmmundáUank iotrassaszkolárísaO: |:IM|: a bal m.. dblális amenoeba» I gg HBsAgóíek: áltípas ad (Cbniqa, 4076). ónmagában «agy 10 gg CPG 24S55-td,: CFG IIM03--íKíd vagy CFG: lOdiAééj tebbkiációban. SO id teljes térfogatban. A: primer titán 2 héttel m állaíokiál aotlköSr plánsképt bepajin alkatezáséva! a szubmafidlbul#i?5s véoábáj vért vetlbok, és emdkezlaíSt adíonk ogyaaazt az: ólóaoyag-fbrtnoláí hasgoélya;.: amit az elsődleges ímsaipbaálásköf; A? etnlékeztelá ife 2 héttel az állatoktól kardiáid ponkdőva! véri: vettOnk heparin mini: atttikmgsMos alkaiinazása mellett, cervikáhs dtsziokádovál leíáláoztsk ákst,: és a Mpet aszeptlkos: tnétfoo eltávolitotiok ariílglóspedtkns Clfeákfivltás,. lEN:-y szekréeiá (ieïipsaet IdaiásKéja) és: feólildtokín (IFbi-y, TblPa és 11,-2) szőkretáló €P4 m Ciöé T-sejtek kitnotatésárá szolgáló bmóonvlzsgálaíbóZo Az im%énsp8ctSkös Isps IgG és. IgGI és ígGlc IgC: lzo%ttsok kmmtatásáboz a valamennyi vérvétel ikiporAari kMr&amp;e m>äßiimm .f&amp;P'A}
Vad típusú CSTBi/6 és TLR9-feMnyos (C57BÎ/6 TLR9-Á) egereket (n:: H) csoportonként) immimiziliimk intrantuszkuterisan a bsl m. tíbíalls anteriorban 20 pg OVA-nal (grade 15, Sigma, Ä764 ί} önmagában vagy tö pg C.PG 24555401, CFG H)!03-mal, €Pö 7909 vagy trem-CpG kékkői ÛDN 2137-tel kombinációban, 50 pl tefes térfogatban. Az álatok ngyánází az: oltoanyagAérmulát kapták: eMékezteiöként a primer immmMúM követő ;Í4, és 21. napon,: piát azelsődleges iiomonizációbam, Az utolsó emlékeztető Mm 7 pappal az állatoktól katdiáits punkckivaí vett veítüok kepan® mint antikoaguláns alkalmazása mellett, cervikáíís diszíokádoval feláldoztok őket, és a lépet aszeptikus módon sMvofkoóuk antigénspelfíkus CTÍ^ákíivitás, IFN-y-sxekréeio (tenyészet télölászőiá) es malticiiekin (IFlNi-y, 13P« m ïk~23 szekrsíálő CD4 vs SöS T-sajfck kimütatásám szolgáló immnovlzsgáiatboz. Az «igárspeosikus ie|es M3 és M31 és IgG2c IgG IztRtpstsok kimutatásához plazmát alkídmazbmk. MZmktgémpee^ás eíímmngíigMíer megkaPimmse À ^BsAg^pecîi%p&amp;|»i§-|j9s) vagy ebepanyagokat (telte» igö, IgGt és igG2a/e) hígítást végpont BUSA átéréssé! mutattuk ki és kvantifikáUuk. amelyet az egyes állatok mintáin fnplikámmok íbtBtáiáian vépztiiak. A végpont titetekét a Pét« inmpnizált pkznaa kétszeres aószorbapcta-éríekét íOD 45Ô tsrtt,t eredményező iepagyobb ligiiiÄt kiäpztttk meg, 0,05 küszöbérték melleit. Ezekét „geometrikus esopörtátlag-titer (GMT) * SEMT-ként jelenitetUIk öreg. A €TL~válasz kiértékelése
Az Aisé immunizálás után: 1 héttel (Q¥ AJ vagy 2 ytM llpelet hsszpittmk az '«iktoxikas 'iMiffiibc&amp;a tCTL) válaszok vizsgálatára. A légekéi egysejdsznszpepzmyá homogenizáltok 1Ä magzati szarvasmarha szérummal Pyelone, Lopo, IJTj, psoklIMss^gptotHkrm oldattal (végső koncentráció :mndre ItlOőBAnl és: 1 mginl:; feyhroge®, Burlington, OK), L-gluiaorinoal. (végső koncentráció 2 máit Invrtrogsn, Burlington, ÖM) és 5*KT' M: PMerfoigtoeíaaslal (Îavilrogen, Burlington, OK) kiegészíkáí REAR 1Ö4Ő (llycföne, Logan. ÜT) szövettenyésztő közegben. lIBsAg-speeitlkus Íimloeftákaí restimulálíanfc 5 papig lIpseiGszkszpenzióbíin (3 κ l(f sejl/míî HbsA|4 «xpresszalô besugárzott egér s^tvpaallal (PS157S| IM tés# iskpMlàs itfâu, és OVA-specifikus hmiócitákai restimoMísafc 5 napig lëpsdt-szusægenziôbao (3 z í(¥ pdis/tbl) 0¥A-í «Rpresszátó besugárzott egér sejtvonaiSa! (iG.7|-történő mkabálás ötjén, A réstiHadátáStkövé" i&amp;m a kotl5kíkák:l;lbsAg--t vagy OVA-t espresszâlôi sejreket élé képességét ^Cr-Otszsbadolás lássay sikálntszá-sávalJbaksröApk oteg. Az eredményt speeiitkus iótis: százalékában adjuk, meg kal&amp;nböző ellékíor:céisejt (E::T) arányok nxeliett. IFN*f ZAMzizMßmk kMzMkglsm IMM immosMoidt követé 1, heti (0¥A): és 2. bei: (HBsAg) iépsokeket baszaálttmk: az sntigést-'tMitiidáéiét követé ílK-y szekréció mérésére. Rövidé®, a Sépseit-szoszpesziokat a Gl'L^mérésbez: kasomé mbdöp készitekik, is 5 ;s s«|t/ ml végső téríbgátra egésziteiUik ki 2% normái egérszénsmmai (Cedarlane Laboratories,. Ontario, (knoada), |ataieilimszö:eptdmioin oldattal (végső konceatrádó rendre SOCK) E/ntl és 1 mgéik InilKígeo, Burlington, C>N), i.-glmaodnoal (végső koacestráeiő 2 toki; lovítrogen, Burlington, ON)és 5^ 1Ö';’ M IkpierkaptoetooÜal (imümgeify. <Mj: tóngés^l^t BPM1 1640 (Hycíóbá, kogan, 1#) szö^ vettesyésztő közegben pefas. mdï 1Ő4Ö| A léps^tszaszpepzidt kó^lyukú, U-fenekü szövettéSyésAŐ íémezre öltotoÉ ($0Ô μΐ/iyuk) valamennyi stiranláns 100 ;pl mennyiségével <sAtt8gtolelS ábtatoitetok s;torim) égyóttí: átol a átegféleiő koncetJttóéra MgiáBuak ste|«ü$ FFMI M40~ben, FözSw köatríiSliéHt CöteSOávailttÁA (1® gigtoÉ,: Sigma), negatív kontrollként ossk »y#Ä&amp;aegg«3 ieaf&amp;aÄ sejielcet álkaimuBimk. Balantoimyl lépseibníntái triplikátumban oltottak, ás a sajtok®*: párásítód, 5% CCu Aöbátorbaá: ittksttákttk 3?“C^öá ?2: órán: ËmstâÊ. A tenyészet lelálúszóját m Inknháelás láósz&amp;k vegén fcegpjtôî és vizsgálatig -8ÖÖC tárolok, k tenyészet tolllászápnak ΪΒΝΙγ :npik kereskedettől torgaimnbao kapható méjAkészieíeket (egér ^4EäA; BP í^amáíígea> Míssl^pg^ C^kí^asfáltsök a gyáríé Ömutatdjteak megtolelóen. Ő'VA íeímmsr ρ&amp;ζιΦ €':Β8ψίψΜΜ€Μ Mmtiméglmeg&amp;&amp;táwzíím A ton* tolit módon előállított íégs^sznszpenKiőkaf alkalmaztuk az ÖVA teteme)7 posíto Cök^optoísísO memiyiségi megfeatorozására f ÁCS módszerrel &amp;rx$gpdi l^dtíM sæfettaæ&amp; togs^teket 12to75mm-es, 516gl: toslőpuftott: 1%. magzati (öyclone, Logan, 0¾ ás 0,1 % náírims-sizidot (Sigma) iiar- laknszo DFBS teszfesöuekbé vittük át. A sejtok®? 12Üő rpmtoU I pereig éentolfttgáitak és a Mülászét eMvoiítotttrk. Az ^tecemomkat a sejtek é^CLöó Itiprelg antí-egé)· CBltoCföSS-jtolÁFé btock) (BO l%am*ingen) történő mkabálással blokkolttrk, A sejte kdrtosi&amp;puSfetoí mostuk és 20 petolg: iístottűk 4°€-on i-es osztályú ÖVA-speciflkus ISÍfNfElkU tetemes* (Beefctoaa Çipïker) alkalmazva. A sejtoket íBttppufíerrel mostuk, 500 pl festőptsítorbsn PSSkaszpertoáltik Is BCBIfl áramlási citotttéíertol (Beckam: lemilter) antoizáltok. A tatod €úk-rs, tatod teámkstoe pzitlv sejtokei B\Ctospseifikss CDS I -sejiekkéat azonosítottuk. Áss adatokat COS- és ieimmer-pozitiY sejtek ^ákéttfadfuk még.
Mnifgmspixißkm’ muÎik'itÿMn szekreféíé Τ~$£?:ψιψ&amp;Μ£Ϊβ&amp; meímyMgi megkæMfùzàm
Mindegyik csoportból származó lépspszoszpenzió mintákat itostinmlálunk 24 lyukú szteeleoyésztá lemezes ΙΜΙ' IÄ-ben: (Épions, Lögst, ÖT) 2% normál egérstortímmál (Cedariane Labetalorfes, Äarp Canada), psnleillín-sztreptotecto: oldattal (végső koncentráció rendre IÖÖÖ E/tnl és 1 mgAnl; ínmirggen, Burlington, ÖN), L-g!«^títo^':(«^sö· kötcmtáejó 2 mM; Invitrogen, Burlington, ÖN) és 5 * íto5 MJtosso kapsodstmlla! kiegészített Cteategeg, Burlington, 014) BiMI 1640 (Byolone, Legat-, ÖT) szimstenyétottő Mzegfeen. ÇD4 restitnujalás; >x}0ö sejtet stimuláltunk egy éjszakán ât I ml végső térfogatban, amely 5 gg/mi HbsAg-t larialmazott CDS restlmulálás: -M0* sejtet totealálíntik 5 érán kérésitől 1 tsl végső térfogaiban, atnely 5 ggttnl ílfes péptlttet (ÏPQSLOSWWTBL) taïtahrs ázott
Stimulánsok nélkSB közeget használtunk negatív kontrolIként, pozitív kontrollként 10 ng/ml PMA-t (Sigma) és I pg/mí ionomlcint (SsgnttO (az inkubálás utolsó 4 érájában hozzáadva). Ezért kis# a tesiimnlális utolsó 4 órája során Bré^dén A4 (BD Abanningen) és mottétónf (BD Bharmtogen) adtunk itoxzá. hogy leállt-sok a tobérjettanszpöítst
A restimuláiásÍ követben ii sejtekel fcssopuflerrel mostok és az Fc-recejtfíSökni: ä se=tek 4c'C-on 11) percig snil-egá· CDI0fCD32-vel (Ee bioefe) (BD Fhattnlngén) tötténó: inkubálással blökkeítuk, A sepeket esdán eent-fíiigáilttlt és fésznszíx;rídá|tok vagy 5 pgóol anîi-egér CD-l-ECD-1 (lAyítroges) vagy 5 ugónl antDeger CDS-•ÄIH (IsviSAgen) imtairfeö festópuftorben és 30 percig 4'C-on mkbfeältok- A sejteket festöpufferre! nutststo és BD Fi&amp;Tmn oldatban (B15 1-toírrrnúígen) reszuszpeudáltnk 20 pteig 4-€-en. A sejteket újra mostok,.$p Berni: Wasl oldattal és (BD Fbatmingep) Spg/tni 1L^2-F1TC4: i(BI3 Bharmmaen), 5pg/ml Tbík-AFC-t |BO Bharnxlngen): és óngötil lFN~yrFe€y7-eí (BB Fbatelsgen) íaAáltnazá, 1 x BD Perui B'aát oldáffean |SP
Pharmíngenj reszuszpendàltak ès sxÂÉÉÂs^lëÈeô, fénylő! védve 20 percig inkubáltnk. A sejteket iX BD iNi® Wash. öíásiM liáírcaingehji äi&amp;sÄfc à&amp;--'ïmnéî fest6|is^És^. fessais9$eiidáilfó&amp; M WiSSfâê áramlási elfemêter peckínan: ai!si!ms2ssg¥sl; sisaílMMtík.
Emâmêttyek
Mimmräfisfmmimrn&amp;im
Mmditárom tesztelt CpGGÍM {CPG 24555, ;0!i)3 és 1909) szignifikánsan «mette a IlBsAg- es OVA--specsfifeas tejes Ment :mM szignifikáns különbség a báron* €pö OObl közúti egérbe a HBsAg- vagy OVA-specifäkos teljes IgG növelésének képességében (L ábra) A CPG 24SM CPG !0!03 $ CPG 7« sfe»p|«® m®W képességéi TLR^Ä^os egerekben ÓVA alkalmazásával teszteltük. Az egy héttel az emlékeztető utáni teljes elíenanyag-tlíer valamennyi oltási nmd szerint kevesebb, mist H)0 vast, és egyik CpG ODN sem volt képes sagnifikáasaa növelni az elleiianyag-titerí ÖVA-na! sgémbés az oltóanyag egyedüli vagy a nem-CpG ODN 2137-tel kombinációban történő alkalmazásához képest {Asm ábrázok adat*.
Az ÍgG lÁ^ioszlási egérben széleskör« Alkalmazzák az iamnmváíasz természetének jellemzésére, altok a imagas lgG2a- vagy igG2c-szlnt Tbt fblsrilyi imptmvalssxrs ötal, míg a magas IgGI-titer Th2 túlsúlya Inmmnyáiaszra atal;. Mindhárom CpG ODA: ekssegietfe erős föl titMiyü imitmnváíasz kiváltását >1 4gQ2adgpí és igG2c:%G! arányokkal p, ábra) es sxipÄgnsao megemelkedett ígGlam-titerní! az antigént magában törik» alkalmazásához:képest (P«0,Ö5) (2. ábra).
CeÍiuMrh ímmimváímw&amp;; A THI alapé válaszok teSAéíésések e^ bkkíítmálss ötöép a CTL-aktívitás mérése az antigénprszen-iálö sgítek ellen. AïîASt az a 2. ábrán látható, valamennyi tesztelt CpG OÖM képes votf szigníikánsstn Mezői egérben: az ÓVA ellem ahttgénspedfikos Cl L-választ ahhöz képest, amikor az antigént önmagáim vagy nem--CPG ODN 2137-teí kombinációban adtak (P<0,05; 3. ábra, alsó tábla). Nem volt különbség: a vizsgált CpG ODN-ek között az OVA-spedtlkus CTL indukciójának elősegítésében,; kivéve a 6,25:1 E:T arány esetében, ahol mind a CPG 24355-, mind a CPG 7900-csoportok szignifikánsan magasabb OVA-specifikus G'fL-t nmialigk, mini azok a csoportok, amelyek CPG 10103-at kaptak.
Mind é CPG 24555, mind a 10103 képes volt llösAg-nd együtt szignifikánsán magasabb ASÍÍidb-^Ükos CTL-választ Indukálni, mim aslikför az;aspigént önmagában alkalmaztak (P--0.05; 3. áö3«CÍeM tab-lay Nem vök szignifikáns különbség CPG 24555 és CPG 1Ö103 között egétbea HBsAg-spseÜíktts CTL-vigSg: mdbkájásának elősegítése terén, ILR9~hiányos egerekben petis: ifígyebübk tnég CpG CÍM médiába CTL-válasz fokozást (4 ábra):, ánágémpeei/Mm CÍM T~se}té&amp; MIÍC 1. osztályú H-2Kb -SlíNFEK L speéíiiüs ieSraméreket dkalmaxtonk ÖVA-nál temaoizált egerekben a CD3 T-s4jt válasz mennyiségi meghűl ázdzMrtt, Válamémtyt vizsgált CpG ÖO&amp;t fokozta az antigén-speciükas €D8 T-sejtefcet ábbözÁépéSt,:atbikör az OVA-t önmagában vagy nem-CPG ÖÖW 2Í374el kerstbiPá-eiöbaa adtak (5, ábra), A CPG '70ÍÓ:jöbbáb elősegítette az GVA-spedlbcns CD8 T-sdtek Indukcióját, mint u CPG 24555 és 1.0ÍÖ3 :{F<ÖÄ, Mm volt különbség CPG 24535 és 10103 közölt az OVA-speciíikus CDS Γ--sejtek indökálásanak képességébön: |P>0,05),
CpG mediálta ök-' A-speetltkns. CDS T-sejt fokozást nem figyeltünk meg I'LRO-ltíásyos egerekben (S . ábra).
Amigimpedßkm A «φδχ Immunitás mérésére vizsgáltak m anigénsitmaíáeiőFa válaszként adott inísríerangatmna (íFI4~ -v> szekréciót a vakcináit antigénnel »sékB íépsépek tenyészetének Mslöszőfába»: lévő ekoklnék klmatstár aával, immattassay alkalmazásával BBsÁg-nel vagy ÖV'A-nal és CÄ 2455 SÁei vagy CFG ÍŐlíG-SKál μ» nizàit egerek lépsejtienyészeiéfiisk íáiklfeéla szignsiiánsan magpssbb íFN--pszmtekst; matatok, mM a csak antigénnel immunizált. Ameanyi» Hpsàgpœi a§®tefczt^,: a. CifeSÉSSS szlgtttfikáosa» jóiban segített« aló az antlgénspecifikus IFN^szekréeiót, mi«t a CFG M103 vagy CFG 7909 0L ia, baloldali tábla*. Mmmyi-ben OYA-maí alkalmaztuk. a CPG 24555 antigénspeeitlkos fFM~y~szekréckií elősegítő hatása azonos volt mint a CPG ) OKG-é, de jobb, miit a CPG (ő. ábra, j#öIMí tábla), TLEikőiágyos egerekben hét» llgyekank m$ CpG ODN medláíta atdigyaspeéíStes í!Fé^~s®e:kníeiő feközáslp, ábra),
Aftîigémpseïjîàus mutiMtokm szekr&amp;éM: íf~Si^p&amp;puiádé&amp; Á tegnjabb eredsnésyek szerint a T-sejtek IFbl-y termelése Önmagába» nem pmdíMv &amp;$É^ÂmtigéÉ~ specifikus TAejtek protektiv immunválaszt indukáló képessége tekintetében. Ezért ebben a vizsgálatba» pölikromáziás áramlási eitometrfa alkalmazásával értékelőik az tmEgénspeeífikus CD4 és GD8 T-seJtek lC*2~, f MF ésilFN y déi BtelÓ képességéi.
Mind a € D4, mind a CDS T-ssJfcek eseté« viszonylag sîsessny 1E~2 szekréciós szintet igyelíink meg az lFC~y~ és TtkF-assizekrée toboz képest 0. ábra):, A CD4 Ikssgrek eseté» a CPG 24555 a €M$ Mtffi-boz és ?4íi9~hez képest: nagyobb arányé dnpla eiíokinSermstő 1-sejt mdukálásáí segkette elő (25% CFG 2A5S5de!,mÍg restored és 6 % CPG $0iÖ3-mal és ?PE9-eeíj, ÁiManosan a tóíjla^dk-pÉpa^- HBsAg-^feditos €I2§T~ ^sé)íek: négyes afáesony százalékát: Sgyeltiik t»eg (rendté 2, ö és I % CFG 2455S-íei, I§l83ymal és: TPÖŐ-eélj (SA ábra). Â CDS 'f^fíek esetén tolni a CPG 24555, tntni; a CÉG1009 élôsegiletis dupla cítnkimermeiő T-sejiek magas szintjénék mdíMóját a CPG iŐÍFMmz képest (renáré: 4S és 56 % CFG 24S554et és CFG 79φφΙ míg mméOmm W% CPG lMM-4eaî% A CD4mepekhez basonlOatp tripla eltpfemtetnäels· HBsAg-spmfkns CB§4 Gsejmk napion alacsony sráítyát figyelőik meg (rendre 1. 8 és 0 % CFG 24555-tel, )01Ö3-ntaí és 3F09-eel) (SB ábra). I. téMézírt IBII· yd ss/vagy 11.-24 és/vagy !24F~et-t szekreíáló, egy, kettő vagy három: shefciní termelő, tlBsAg-speeifikus CD4* T-seftek százaléka
2L:Ätaf IFbi-f-t éxAsgy IL-M ésívagy TNF--SA szeki'eisiä, egy, ketiisä v&amp;gy Mrém ciíokiní isrmóló, I IFJsAg-s;>ecifíkus CDS · T-sejtek százaléka
Megmsiás
Vizsgalatokat terveznünk a CFG 24555 atdigénspeciíikös Immunválaszokat fokozó képességének összehasonlítására egérben, 2 minta antigén, HBsAg és ÓVA alkalmazásával. A CFG 24555 às CFG 101Ö3 mikleo-tídszek véneiája azonos, kivéve a CFG 24555-4x3 a F-véghez legközelebb! CG dhmkleotid megfordítását, ami a GpG 2455S4ssít egy CpG-tnotivntn megszüntetését eredményezi. A CFG 299® egy B-etnstáiyá CpG GON, amelynek anpváns aktivitását számos oltóanyag-antigénnel klinikai vizsgálatok Igazolták, A 2’ CpG-motívom eliminálása a: CFG 24555-ben nem voit negatív hatással az ;mdgéospeéiiktiS::ltn-· mpivéíaszokat ibkoza képesség«?«;, és; azonos feiieognyagvalaszok; és andgénspeeiFkas CDS TAajtdk tottamen iesiésset mérve) vagy jtÄ (inóigésspeeiFkíJs; iFNvp-száldéeíó) adaptív intmsmválasz fekozáA mulatett, minta CFG 10103. Hasonlóan, a CFG 24555 ugyanúgy fokozta az antigénspeoilkiiS elienanyagyalaszi;: és a. C7L-- válássá, síid a CFG 299®;.: A CFG: 24555 a JoÄP :S«$®è88· élÜü :Sz antigénspeelÁküi;; ÍFNA* -szekréciót.
Az adíapilv Itwraunválaszok fokozása mmdMrotn tesztelt CpG ekeién Ít,8®-fijggó vök. mivel mm figyeltük meg az; adaptív ímnmmrál&amp;szsk
Antim az az I. táblázatban látható, CPG 24555-teÍ nagyobb arányé IFN-y-t termeld andgenspeciiikys CD4-t T-settet kaptunk. Szintén nagyobb arányú, az IFN-γ, I NF-o. és IL-2 közöl leplább két eiiokmt fazaz mind IFbf-f-t, mind TNF-o-t; mind iFN^y-t, mind íks|d; vagy mind sä# IÍAM, -pgy #áf Tt^*3rA* TNF-o-l és IL-2-f szekretálé tripla termelők) termelő antigénspeclllkus CD4-r T-sejtet kaptunk.
Ami a £ö®+ T-seJleto M p. isblâzst),, nagyobb arányé két clOddst, és különösen ÍPIM-fá és W«4; mináiífM-y-t. :***W TOF-ö4 teraíelő piiimkoíonabs anítgénspseíikus £3P+ T^tet feaptuítk. Összességében ezek az adatok tóMafeijiák, hogy aáj«vá»ské»t alkalmazva aGBöi 2455$ a GEO 10183-•-n# jobban generál ppj&amp;bkeiöaáiis antigénspéetlkas CD8V T-puguléíófcsL Ez -festes lehet, »vet a poliiluAcionálls T-sejtekről feltételezik, különösen a kemokintenneiés (például íPN-γ, TNF-α és IL-2) tekintetében jobb elTektor sejtek, mint az egyetlen citokint termeld T-sejíek.
2«péíM a cm msmcm mwmz^wtm*.
Amziek Ül)N-ek mkk^mdszekvem'iiÿs cm om m(e
CPG Ö.ON 2455S nem-GpG ODH 22ÖB 5< T^G*C:^T;!:ö*C*T:i!T?!!?!í!f m&amp;mC*T*&amp;€*T*Τ*?:*Ι 3‘ pEQ SD NÖ:4) oem-CpG ÖDN 213? s, r^c.*c*T*(>^csT* Γ* Τ'*Τ*0*Τ*0*( '*Τη'*Τ«'Γ·*0¥ΤΗ):ί€*Τ*Τ 3’ (SBQ 1.0 N0:5) * IbsztorotÄ Äst (PS i jelent
A szekvencia aláhúzna résiderai a különbséget a CFG ÖDN 10103 és CPG ODN 24555 kitölt. Optimális CpG-a?ofiviii::i hiunan esetben: GTCGTT PB.MC~hm
Humât; P8MC-e; (SsIOVml) lekubálfunk különböző koaceatrâdêjii CPG Ι8ί03»8ΐ* CFG -24^^Ι" vagy aem-CpG kontroll OO'N 22881-gyei 24 vagy 48 órán keresztül. A sëjji felöfószókái: bs|p||tbibÉ és ciiokis.tsmokàt-szu^é^'iOra teszteltük szokstsas HUSA-készlct aikdmazásával (M és 9B ábra), ïn vhw temtê&amp;iw mmumMs ΜΑ&amp;Μζ egérben; RALE/« egerekæt: (a:“:S csoportonként) ittpktáltaak szuhkután PBS-dsf (placebo kontroll), PPG 24555--M, CPG 10103-ïttal vagy .aéra-CpCs kontroll ÛDiM 2f374el áööpg dózisban, Az injekció után 3 Órával az állatoktól vért vettünk és &amp; plazmát kereskedelmi torgatomban kapható EUSA dkátaszásával vizsgáltuk IP-lÖ-re í ; 0Λ ábra) és íL-12-re ( 1 OB ábra) vagy lL-6-ra ílOC ábra). A bemutatott eredmények csoportátlagök * az átlag staudáttÍÉÍlaja (NS^ nmtsztpiíkáus^
MmmrMs immmïMs m viw BALB/é egerekben
BALBA- egetek«? miranKiszkuíárissm; injektáittmk BBsAg-ud (I CPG ÔDM 2455-¾¾ CPG lölös-mal vagy nem-CpG ko:t;!x<:di ODN 2137-tel egy löt vagy anélkül. Az egereket a 0. és 14. napon tnjektái-tnke A ímramatoiii mÉtoé® « HRaAg-speedtkos leges IgG-ííter az utolsó: «juÂktetô tÄ két béttoli véptod £LiSA-vai mérve 01A ábra), C5?b!/6 egereket IntomszkÄrts» tnjekiáltnnk ÖVA-nai (20 gg) 10 pg CPG ÖDN 2455-iel, CPG föl Oá-rasl vagy nem-GpG koniröt mM 2133Aél együtt; vagy anélkül. Az égemket: a 0., ?. és 21. -m$m injék-táítuk. A bemutatott eredmények az OVA-speeiftkus teljes ígG-titerek egy héttel m utolsó emlékeztető után (H Bábra). BALBA egereket intramusstkuSárisar! Injeklálttmk ï'esas 1 /77,113% ínllnenza A HA (1 pg) + aiurnmal (25 ug AB··} SO jig CFG ODN 2455-tel, CFG FÖiÖ3:~mal vagy nesn-CpG kontroli ODN 2i37-t&amp;i. A bemutatott eredmény a FlA-spedfikus |$Jes IgG; kinetikája az, inmmnizádő* kö-vetA különböző Időpontokban végpont bUSA-vai mérve Π ÍC ábra). T-sefi Mimw&amp;MÆMs egérkm BÂLB/c egereket intramuszkuliman htjekSältank DGsAg-ael (1 gg) i'ô pgCPG GGN 2455401* CFC» iÖiÖ3-mal vagy nem-CpG kontroli OïÜN 2137401: együtt vagy anélkül. Â-z egerekét a 8, és 14, napon Injektál-mh. A bemutatón eredmény a HBsAgsspediiknS CTI. 5SÇîvÉ:kaabadïtiàssa! mérvé az utóké emlékeztető után két héttel {Ι2Λ ábra). C5?bl/6 egerekét íbtzsnmszkulártsan htjektÄmk GVA-nal (2Ő pg) 10 μ§ CFG ODG 245|4ei, CFG 181 Ödémáit vagy mm*Ù0 ifemlrtál OBÉI 1157^ésgyíSt'vagyasÄ$. Az egerekét: a 8., 7. és. 21. napon injektáltak. A bemutatod eredmény m ÖVA-spdÉkas G’fL** Cz-féíszsbadulássat mérve az utolső emlékeztető mái t égy béltől 02B ábra!
jBALB'c InjekÄmk Äs Ag-ost G gg) I6: gg CFG OD:N 24SS-tel, CFG H>]83-mai vagy n«:n-CpG kontroll ODN 2137-tel egyfht vagy anélkül. Az egereket a I). és 14. napon injektáltuk, Az utolsó esrlekexiéiőí kövét® 2.. heti iépsöjtakei: inkubáliuk a megfelelő antigénnel 72 órán keresztül és a tenyészet feSütüszőjét HUSA-vai teszteltük iFK-y-ra {I3 A ábra). €57bl/6 egereket imramuszkukrisar. mjektálnmk ÖVA-nal (M gg) W gg: GFO CíDkí 24SS-tek CFG lOIÔ3>maî vagy nem-CpG kontroli ODN 2137-tel együtt vagy áttélkül. A&amp;ggereksta/i;, % ástál ttspöh tsjek-táiluk. Az uíolsv- emlékeztetőt követő 1. heti iepsejteku inkubálíak a megfelelő antigénnel 72 órán keresztet és:a tenyészet feKHúszöiás EUSA-v&amp;l teszteltük IFN-y-ra i KIBábra).
Ernáménak ét A CFG 10IIP és a CPG24S55 nnkieotidszekveneiáfá mmw%;kivéve a CFG ;l#103¾¾ a 3'’-véghez legközelebbi CG durukkxnid GC-re .fordítását a CFG 24555-ben, ami a CpG 24555-ben egy CpG-motfvam megszüntetését eredményez*. Epréből famdmányokra: alapozva, fígyefeptbe véve az, azortoa szegélyező szekvenciát, a motívum helyzetet és a térközt, a fokozott imaílmstttnaláclöhez kellene, hagy vezessen. A korábbi ismeretekre alapozva az volt várhatók, bogy a CFG 24555 kevésbé lesz inmmnsfíámfá-14 mint a CFG IFI Ö3 és kevésbé batékeay okoaoyag-adjuvánskésC A fenti etædmésyek azonban azt msimják, hogy a CFG 24535 Immorisiimniátó potenciálja G aájuváns aktivitása hasonló vagy nagyobb, mint a CFG lÖHÖ-é. CFG lAI&amp;A CP&amp; MS5S és ÖFG ?9@f §mzekmml.Mm J!0Mm&amp;&amp; Memtiggiutinm Antigén ## aké* Μ%ϊβ$^αά]ίΐΜΜχΜ)ΐ( 8ÆJ&amp;C egërèen MMszemkés anyaguk Nőstény BÂLB/c egereket {iö/esopslj immmtízáltatik intramaszkolárls injekcióval a bak m. tibialis anteríorha, Te-xas 1/77 Influenza A hemagglutininnal (HA), 1130½ ( I pg) a CpG-vel vagy kontroll ÖDN (iö mg) a alumíniummal <25 mg AGh·}., 5ö,ul teljes térfogatban. Az egerektől az immuniztklót követőéit különbősö időközönként vért vettünk a HA-specifikus elienanyag-vátasz vizsga tatához. Az immun tzáelőt kővetően hat héttel csoíxntonként az állatok félét eatasüzáüak a sejlköstvetitefte imsmrsválasz értékeléséhez (CT!.., FIA--specítikus IFN-g-szekréció és T-sejt ckokinszekréciöjának árasnlási clíometríás analízise).
Atábiázal
Etëdmétsyek és megvitatás Λϊ/ΐί-ΗΛ. é tói!?/ az ImmnizéMa atdia M hamfcmzáias után ö héttel mésdük a? aoh~EA mefîsyiségét á SPG 24555 Jobban növelte a HA-•s-pöcifíkus IgG-ι, mint a C PG 10103 és CPG 7909 (M. ábra)
HtmtaggittÍimeiésgáiMsffiM} Wmtk 4 Mdd m MmmmáOd &amp;4M A?, ellenanyagok működőképességét hsmsggbtbsfe-gstSás assay ¢8¾ álkálmágásával .ÄbUk. Amennyiben a. CPG 24555-et .egpáii ai$ovánské!ű Imsimáhak.: jobban növelte. ίΐΜΜ». Äi * €PG lö l 03 (ρ“3},089) ás ögyengjmpta, míint a€PG 7909 (pií:Ö,1) (M ábra). A három lesaíslt €pG sgyfetóR növelte a Bi A-dterefcet, am« nnyibea alemmisíntsíd tesbbsIeiÄaa alkalmaztok MÄ-speeiß&amp;us M'N-f-székéicíd A szekretalt lFM~y kön^enMcí^akHsé^Sk, Amennyiben a CPG 245S5-eí adfnváoskénl egyedül Imznát-&amp;A, jobbao fchozta a llA-sj^pkus IFM^-sasefae&amp;iM (a sepözvetsüs Immunitás markere). mint a CPG 10183 :p&amp;, ábra). Ameattyiben iwUtnii a CPG 24555 jobban Ibfcozía a :HA-
Agecíftkus ibN-y^s^kréclöt, műk a CPG 10#3# G^:^p"CÄ-Äia).. 4, pad« CPG 24SSS és CFG 7989 ősszOm&amp;tádtdm &amp;ψΜΜ$ζ B fdszM mügéi* 0Μ40 alíésttmg- -itáptváftmkéni Mz&amp;mégtá makdAdkaa
Attpitg&amp;kés mMszezek Közönséges mafeákókat (3-5 éves, 2,5-5,5 kg, n«5/esop>>rt, kivéve: n-A a HBsAg * IMX csoportban) íMsanizalínüki ß*i M itgekein a jobb négÿifejü contblzomba J a követezőkkel: 1) Engerix-B (gyermekgyógyászati dózis; IB Wg íIBsAgj 2} Engerix-B 4· CPG 7909 (0,5 mg) 3)Engerlx-B - CPG 24555 (0,5 mg)
Az állatokat Mromsze? immunizáltuk: a 0. héten (primer,!, a 4. héten (1. emlékeztei# és a 8, héten (2. emlékeztető). .Az állatoktól; a:;^«mer'd^:4.h^l:f;^p' 4Ä (4. hét), 2 héttel az I. eml|fceztetőth#etÖen (S. héthAMüei «2 1. emi#:«â«t:SÎSv«Ât:p..Â3f#.:2.iÂél a 2, emlékeztetőt követően <10, hét) vert vettünk. i ) elienaupgAher és -avidités 2) â^csIMMs eîÈôSïîmekpéeîé (ÏL-2. IFN-γ. TSF-«) 3} poiiftmkckmàiss T-sejtek 4} ELiSPOT vizsgálat: 1L2, TMF-α, IFN-y, plà;
Eredméa^^ ê$ msgmfàük fium&amp;rM vélmziik
Lehetséges korábbi Eopaiitis 8 vínts-expozició az állatokban, ebben a vizsgálatban nyilvánvaló voit a Mke-ííiálást «»«geîêzôea· lF4§ss; szintje alapján, Továbbá, egy Ä- tpt a szállítmányból szerológiailag MBV-re pateÉ ami a ITlY-aek való fâptségot valőszpösitl.
Azonban a vizsgálatban szereplő minden állatot negatívnak teszteltünk HBV-re FCR-ral Valamennyi emlékezteti) esetén növekedett az ami-lIbsAg-titer. CpG hozzáadása az Eogerix-R~hez növelte a HbsAg-speciBktis ellenatsyag-tiiert ahhoz képest, amikor az Engerts B t önmagában aíkaitnaztuk (17. ábra). Továbbá, CpG hozzáadása növelte az elienapyag-asldiáp ahhoz Mpssc amikor az Engem-B-t önmagában alkalmaztok fí 8, ábra), A CFG 24555 ngyaaásy növelte mosd az ellenanyagokért, mind az -avidnástv mint a CFG 7909. $*mfivMss&amp; €334 T~síffU’k mirsceíMMrts ckeMmze&amp;réchtyi
CpG hozzáadása az Snggrk'BAtez növelte a CÍM T-sejt médiába IFN-y- és TMF-seszekrécidt, de nem növeite a CD4 T-sejt médiába ÍL-2-szekréckk (I9A ábra, B és €}, általánosan, a CFG 24555 ugyanolyan jói vagy jobban indukálta a CD4-médiáit eitokineket, mim a 7909. ͱs0 p&amp;Îiftmkmtmâïiy C0$· iggl ; §
Az iegyj k#d vagy három eltekint szekretáiö sejtek számát a 18. héten (2, emlékeztetőt követően 2 héttel) mértük, A CFG 24555 egyenértékű voit a CFG 7909-eei az Enger ix-B-specifiktts. egy eltekint szekretáiö CD4-sejtek ttxkkálása terén. Általánosan, három céiâî ekpresszáíé 'Vt»nylag:^ÍP8Wst.^a|ét mutattuk ki, A CFG *4555 több három eisokint expresszáld CD4-sejtet indukált, mint a CPG 7909 vagy az Engem-B önmagában {2ÖA ábra). Továbbá, az Engerix-B ·: CFG 24555-te) ImmontZab áliatokbán s^yöbb vol a Míom miokint termeld I-stjtek aránya az Eagerix-B-vei önmagában vagy Bngerlx-B A CFG 7989A;éi immunizált állatokhoz képest pOB ábra). TGiÿf tsíkíszr €ï>4 T-seßek; mmBsêgi maii0
Az IL-2-t, lEîk-yAés ThlFo-t vagy ezen citokinek kombinációit szekretáiö sejtek számát mértük, A CFG 24555 egyenértékű vagy jobb vélt a CFG ?9Ö9~nél a poiftsnkeiooálls T-sejtek indükáiása terén í(2T A ábra és 21: B ábra). f-sejt válasz: CfM ikcámalMm A három citokint termelő CB4 'Γ-sejtek arányát a 2, emlékeztetőt követő 2. héten médtlk. A bárom eilokint termelő €D4 T-sejtek nggyoiáb arányát figyeltük meg: CTG 245:53, mint: CFG 79# esetén,
MveiÊïtzMémà
Az adatok alapját* a 3· CpG-motlvsmt eltávolítása ti: CFG 24535-ben «est volt: hálással am igénspéeifiktrs Immunválaszt növeld képességére,, és: &amp; CFG 24555 az adaptiv immunválasz egyenéétékd tagy jobb aupténiÁ· dóját őmiatta, mini a: CFG IÖTG3 és a CPG 7999, A CFG 2455.5 egerekben több antigén esetén látott adjutáns aktivitását nép htmtáa főemlősben is ntégtartotla; a CFG 24555 azonos GipnoräMs ímmanitás) vagy jobb (Ag--speditkns poiitokdonális T-sejtek) adjuváos aktivitást müveik &amp; Bettii?, B; ||!gisi ssiÉl!gëp; közönséges makákéban. mim a CFG 7909.
S&amp;SKVgKCXAOlSï’A <1Í5> Pfizer Ino-,
Davis, leather Oere: na, Msiai
<i2ö> IMMOOST IHöLALÓ OLOCOOOOTOOK <130 PC33856Ä <14:0> Még ne!» h >:?:»,:· ren.goi:: <Ml> 2000-11-04 <;15ü> 63 /Ibi, ΌΟ <151> /::09- C 5 - 2 B <150 01/121,S/2 <1S1> /000-12-00 <1SÚ> 5 <170 S/abadMiOí« 0.5 verzió <210 1 <211 > 21 <212> DM3 <213> Mastseségés sseOerteía <220> <223> 2/1 etet liés oligaaíiOeotid <400 1 tegteg': i t: t toggfcgcttt i 2:1 <2IOC 2 <211> 21 <210 223 <210 Mesterséges s seavene la <220 > <223> S/iaietikus oil gonaMeetid <4 9ö> 2 tegtegtttt: í:eggtest tt t 21
<215/ 0 <2:11:> 24 <2:12> DMS <2:1 3 > Mesi:ers;ág«s szekwBcia <22:0.> <223 > EsinÍMítlk:us oligoeukleot iá <400 < 3 tegtggittt: gtcgttttgt cgtfc 2:4
<210· 4 <211> 21 <210 DOS <213> Mesterséges ssekvegcia <22 δ> <223> Ssintetlkue gligarsaMeotM <4ÖÖ> 4 tgetgcfcttt tggefcgcttt t 22 <21,ö> 5
< 2 ? i .·· 24 <£12> DMS <213> Mesterséges ssekesaola <223> <2:23> Szintetikus öli guruik le ötét < 4 Q 0 5 tgetgcfcttt gtgettttgt gctt 24

Claims (4)

  1. Szabadak«« igéiiypittttök l„ Amigán és immuBsiímuláló oligondkieotid, aroeh íaítdnmzza az 5'' f i'SBQ III) NOri! Hukleoiids/ekverjÄ,. aéra rászoruló alanyba» áöíigéáspseiílkus mím»*éfász klvé&amp;tó szolgáló eljárásban történd alkalmazásra, ahoi az ebáras főágában: iogIa§3 az aoogési és az imioaostimuláló oMgouokteodd beadásaiiazalanynak aodgenspeeirikas iníasaeválasa kívákásárabatástss dózisban,
  2. 2. Az I. igénypont szerinti antigén: és limpunsíbnatáiö eiigoiujkîeotid ss ott meghatározod aikahnazásra, ahol az antigén .m&amp;rofeiálh antigén, saját antigén vagy addiktiv hatású anyag. 4· &amp; 2. igénypont szénád: antigén és ||^Siil^»Âiôîji^88kIéoftd as ott megkatározott alkalmazásra, alsd a/ídikrobiális anlígéö bakteriális aotigea, yírusaptjgés: vagy parazitasntigén. 4, A 3. Igènypoæî szériád aMigáo és ifmmmstiomlátó oligonakieoiid az ott meghatározott alkalmazásra, ahol. g bakteriális: antigén Siapbyloeocsös aureus-szal kapcsolatos, togsziívasodást okozó baktériummal kapcsolatos vagy perieddníátls 'betegséget okosó baktériummal kapcsolatos. 4 A l< Igésypsatt szerinti ästigen ás immnostlmttiálö oiigosakldodd az ott meghatározott sdkatmazásrs,; ahol 8: saját : antigén ttsm>raötígón.: Atzheóner-heíagság$él kapcsolatos .amigétt/hamáa ellenanyag ellesi aorigéa vsgÿ Immáo, endogén reírovfeábs elemekből expresszálódö antigén. é. Az 5, igénypont szerinti antigén .éa:.|»dÂfeôlâié'dl^i^^*à m ott tnegbatájrozoit atkalisozässa, ahol a ttimoraatigéo HER2, MAioíi,; W-ÉIP, FSA; GiA vagy EGFR variáns tonnája. ?. As 5. igénypont szerinti antigén és isnounstinimáló oiigoímkieetid az ott rneghatározott alkalmazásra, ahol az A izlvenoer-betegséggel kapcsolatos antigén tag- vagy p-amiloki.
  3. 8. Az 1, igénypont szerinti antigén és Irnnmostimuláló oligoMjkfeetld: as ott meghatározott alkalmazásra, ahol az antigén IgE, 4 Az I. tgéayppát szerinti aaíigéó: és ilfittttaitsatmoiátó ottgornAIeoiid: az ott meghatározóit atkalr«»®äsng ahol az ami gén hordozóhoz konjugáit nikotínhaptén. I&amp;: A 9. igénypont szerintii ästiges és intmdpstfaalálö oligonakleotid1 az ott megfeáiárózott alkalmazásra, ahol a hordozó, amelyhez a mkoíiahaptén Ipigagálya: vas, dlMriatoxm (DT), Ili. Az 1. igénypont szerinti antigén: és mmmottinníiáló oligonoideotid az ott megbatámzstt: alkalmazásra, ahol as antigén pepiid, rekomoinána tehéné, tisztított, fehérje,, teljes elölt patogéa, 0¾ legyengített: vires vagy vlrasvsfeíór, éló, legyengített Imltérium: vagy bakteriális: vektor, pohxzaehsrid:, haptéo vagy plazmld IMS :áiíali kódolt antigén.
  4. 42, Az I, igénypont szerinti antigén és mmsmathnnláJö oiigosmkleotid az ott meghatározott ialkaintazás-m, ahol az antigén fesÄzÄtz Itapgált, Ο. A i'2. igénypont szerinti antigén és imsmmstiîmjlâlô ©ligonokleotid az ott meghatározott aíkaimazás-ra5 ahol a hordozó virusszerü részecske. 1.4 â O. iféfívpeíst szerinti antigén ás jmmatómalálá oigoralrisorid m ott oteghatárózóö alkalmazásba* atelka vírásszsíi részecske Q-jí RlNS-fág, hepatitisz B: fekskó: mügén (HôsÂg) vágj? hpptisz B wotag,! antigén ífficAgp 15. áz |. igénypont szerinti antigén és azíat meghatártízott alkalmazás ra, ahol a?, immunst Imoláié oiigonukieoiid tartalmaz egy vagy több módositott kötést. lé. M&amp; !.. igénypont szerinti antigén ès ImnmnsthnaÄ ©%oo«kfedtid :m>- sÉsfaz :$mxmsäi®äMM óiígtamkleoiid tartatoz ;egy «agy trifeh fószfarotíöát kötést, 37, M: % igénypont szerinti antigén és nsiíknn^itaiatiió plipitakieotid az M -m0^Êt<^cÀi sikalmazás·-p éhei m fekgpot.il; ko- tdban· #*ö valamennyit inpaakfetid ;1§. Az; I, igénypont: szerinti ardigésa és immaosrimaidldi oligosakfeetidi az ©ti meglatárezott: iSlkalippri m, atel m antigén; Pvagy az: hmmmsrimtÄ ;oltganakle<ttiiipareidetSi:is: étén tórtésé b&amp;ariásra kistereit. ii a pstenteréiis. M teramnszknláris,, szabteítte, iuimriermális,: pravéiSés vagy mtsaoptoneáilis. It?. Az !. igénypont szerint; antigén és innntmstimulaki oiígoouk leadd az ott meghatározott alkalmazásra, sifeól m .antigént: és m Ímnípnstirnyiáió oigsmnkleoti dot «gyStl.. azhsaltâ® yagy Plon adlak fee, 2®. Az 1. igénypssní szerinti antigén és -ÄalHÄS*· nr. ahol az alany ember.
HUE14161886A 2008-12-09 2009-12-01 Immunstimuláló oligonukleotidok HUE027823T2 (hu)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12102208P 2008-12-09 2008-12-09
US18179909P 2009-05-28 2009-05-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HUE027823T2 true HUE027823T2 (hu) 2016-11-28

Family

ID=41716468

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HUE14161886A HUE027823T2 (hu) 2008-12-09 2009-12-01 Immunstimuláló oligonukleotidok

Country Status (27)

Country Link
US (1) US9453059B2 (hu)
EP (2) EP2759306B1 (hu)
JP (1) JP5016733B2 (hu)
KR (1) KR101329374B1 (hu)
CN (1) CN102333538B (hu)
AR (1) AR074501A1 (hu)
AU (1) AU2009325926B2 (hu)
BR (1) BRPI0923341B8 (hu)
CA (1) CA2745096C (hu)
CO (1) CO6382137A2 (hu)
DK (2) DK2376107T3 (hu)
ES (2) ES2572563T3 (hu)
HK (1) HK1165325A1 (hu)
HU (1) HUE027823T2 (hu)
IL (1) IL213162A (hu)
MX (1) MX2011006088A (hu)
MY (2) MY160201A (hu)
NZ (1) NZ593220A (hu)
PE (1) PE20110998A1 (hu)
PL (2) PL2376107T3 (hu)
PT (1) PT2376107E (hu)
RU (2) RU2477753C2 (hu)
SG (1) SG171829A1 (hu)
SI (2) SI2376107T1 (hu)
TW (1) TWI370740B (hu)
WO (1) WO2010067262A1 (hu)
ZA (1) ZA201104048B (hu)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY160201A (en) * 2008-12-09 2017-02-28 Coley Pharm Group Inc Immunostimulatory oligonucleotides
SG10201602668VA (en) 2011-04-22 2016-05-30 Wyeth Llc Compositions relating to a mutant clostridium difficile toxin and methods thereof
IN2014MN02492A (hu) 2012-06-08 2015-07-17 Aduro Biotech
BR122016023101B1 (pt) 2012-10-21 2022-03-22 Pfizer Inc Polipeptídeo, composição imunogênica que o compreende, bem como célula recombinante derivada de clostridium difficile
AU2013358892B2 (en) * 2012-12-13 2018-06-21 Aduro Biotech, Inc. Compositions comprising cyclic purine dinucleotides having defined stereochemistries and methods for their preparation and use
AP2015008733A0 (en) 2013-03-14 2015-09-30 Takeda Vaccines Inc Compositions and methods for live, attenuated alphavirus formulations
SG10201708821RA (en) 2013-04-29 2017-12-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Compositions and methods for altering second messenger signaling
WO2014179760A1 (en) 2013-05-03 2014-11-06 The Regents Of The University Of California Cyclic di-nucleotide induction of type i interferon
US9549944B2 (en) 2013-05-18 2017-01-24 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for inhibiting “stimulator of interferon gene”—dependent signalling
AP2015008700A0 (en) 2013-05-18 2015-08-31 Univ California Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene"-dependent signalling
CN105579582A (zh) 2013-07-25 2016-05-11 埃克西奎雷股份有限公司 用于预防和治疗用途的作为免疫刺激剂的基于球形核酸的构建体
AR097029A1 (es) * 2013-07-26 2016-02-17 Intervet Int Bv Aceleración de la respuesta inmune inducida por virus vectorial en aves, composición, uso, método para la vacunación y método para acelerar la respuesta inmune
EP3027227A4 (en) 2013-07-31 2018-05-23 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Sting crystals and modulators
PL3048170T3 (pl) 2013-09-20 2020-01-31 National Institutes Of Biomedical Innovation, Health And Nutrition Kompleks zawierający oligonukleotyd mający aktywność immunostymulującą i jego zastosowanie
CN105925583B (zh) * 2013-11-08 2019-05-17 上海交通大学 被修饰的含CpG序列单元的寡聚脱氧核苷酸分子及其用途
EP3164113B1 (en) 2014-06-04 2019-03-27 Exicure, Inc. Multivalent delivery of immune modulators by liposomal spherical nucleic acids for prophylactic or therapeutic applications
JP2017537619A (ja) 2014-11-21 2017-12-21 ノースウェスタン ユニバーシティ 球状核酸ナノ粒子複合体の配列特異的細胞内取込
KR102230325B1 (ko) * 2015-09-30 2021-03-19 시오노기 앤드 컴파니, 리미티드 면역 부활 활성을 갖는 핵산 유도체
MX2018014857A (es) * 2016-06-02 2019-03-07 Zoetis Services Llc Vacuna contra la bronquitis infecciosa.
JP2019520339A (ja) * 2016-06-03 2019-07-18 ウェイブ ライフ サイエンシズ リミテッドＷａｖｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｌｔｄ． オリゴヌクレオチド、その組成物および方法
US11364304B2 (en) 2016-08-25 2022-06-21 Northwestern University Crosslinked micellar spherical nucleic acids
KR101875055B1 (ko) * 2016-10-19 2018-07-06 연세대학교 원주산학협력단 융합 단백질 및 그의 용도
KR102007203B1 (ko) * 2016-10-20 2019-08-05 연세대학교 원주산학협력단 융합 단백질 및 그의 용도
WO2018209270A1 (en) 2017-05-11 2018-11-15 Northwestern University Adoptive cell therapy using spherical nucleic acids (snas)
KR20200047524A (ko) * 2017-08-10 2020-05-07 이쉥 바이오파마(싱가포르)피티이 리미티드 B형 간염 바이러스 감염을 치료 및/또는 예방하기 위한 조성물 및 이의 용도
BR112020005631A2 (pt) 2017-09-28 2020-12-29 Pfizer Inc. Composições e métodos para eliciar uma resposta imune contra o clostridium difficile
WO2020201985A1 (en) 2019-04-01 2020-10-08 Pfizer Inc. Compositions and methods for eliciting an immune response against clostridium difficile
CA3161638A1 (en) * 2019-12-13 2021-06-17 Jun Ge Pharmaceutical composition and use thereof
EP4168032A2 (en) 2020-06-19 2023-04-26 Pfizer Inc. Immunogenic compositions against clostridioides (clostridium) difficile and methods thereof
CN112877275B (zh) * 2021-02-04 2023-03-31 中国农业科学院兰州兽医研究所 Hdac2基因敲除的bhk-21细胞系及其构建方法和应用
CN115252772A (zh) * 2021-04-30 2022-11-01 华普生物技术(江苏)股份有限公司 人工合成的含CpG单链脱氧寡核苷酸在疫苗中的应用
TWI802177B (zh) * 2021-12-27 2023-05-11 景岳生物科技股份有限公司 副乾酪乳桿菌gmnl-32之核苷酸用於製備調節免疫能力之醫藥組合物的用途
US20240189410A1 (en) 2022-12-13 2024-06-13 Pfizer Inc. Immunogenic compositions and methods for eliciting an immune response against clostridioides (clostridium) difficile

Family Cites Families (86)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
JP2547714B2 (ja) 1981-10-23 1996-10-23 モルキユラ− バイオシステムズ インコ−ポレテツド オリゴヌクレオチド治療剤及びその製法
US5023243A (en) 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
DE4321946A1 (de) 1993-07-01 1995-01-12 Hoechst Ag Methylphosphonsäureester, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US5658738A (en) 1994-05-31 1997-08-19 Becton Dickinson And Company Bi-directional oligonucleotides that bind thrombin
US7935675B1 (en) 1994-07-15 2011-05-03 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
ATE420171T1 (de) 1994-07-15 2009-01-15 Univ Iowa Res Found Immunomodulatorische oligonukleotide
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6429199B1 (en) 1994-07-15 2002-08-06 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules for activating dendritic cells
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US20030026782A1 (en) 1995-02-07 2003-02-06 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
US6406705B1 (en) 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
EP1003531B1 (en) 1997-05-20 2007-08-22 Ottawa Health Research Institute Processes for preparing nucleic acid constructs
WO1999013676A2 (en) 1997-09-12 1999-03-18 Williams Wireless, Inc. Wide area telemetry network
US7393630B2 (en) 1997-12-16 2008-07-01 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Use of microparticles combined with submicron oil-in-water emulsions
AU760549B2 (en) 1998-04-03 2003-05-15 University Of Iowa Research Foundation, The Methods and products for stimulating the immune system using immunotherapeutic oligonucleotides and cytokines
DE69932717T2 (de) * 1998-05-22 2007-08-09 Ottawa Health Research Institute, Ottawa Methoden und produkte zur induzierung mukosaler immunität
SE9801923D0 (sv) * 1998-05-29 1998-05-29 Independent Pharmaceutical Ab Nicotine vaccine
US6232082B1 (en) 1998-12-01 2001-05-15 Nabi Hapten-carrier conjugates for treating and preventing nicotine addiction
EP1176966B1 (en) 1999-04-12 2013-04-03 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
US6977245B2 (en) 1999-04-12 2005-12-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
DE60022665T2 (de) 1999-09-25 2006-06-22 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunstimulierende nukeinsäuren
US6949520B1 (en) 1999-09-27 2005-09-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
AU2001227889A1 (en) 2000-01-14 2001-07-24 The United States of America, represented by The Secretary, Department of Health & Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
US20030129251A1 (en) 2000-03-10 2003-07-10 Gary Van Nest Biodegradable immunomodulatory formulations and methods for use thereof
KR100870486B1 (ko) * 2000-09-01 2008-12-11 에피제노믹스 아게 게놈 디엔에이 시료의 서열 콘택스트 5'-씨피쥐-3'에서 특정 시토신의 메틸화 정도 측정방법
GB0031079D0 (en) * 2000-12-20 2001-01-31 Smithkline Beecham Plc Vaccine
EP1404873B1 (en) 2001-06-21 2013-05-22 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same
US7785610B2 (en) 2001-06-21 2010-08-31 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III
US7354909B2 (en) 2001-08-14 2008-04-08 The United States Of America As Represented By Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method for rapid generation of mature dendritic cells
CN1599623B (zh) * 2001-09-14 2011-05-11 赛托斯生物技术公司 免疫刺激物向病毒样颗粒内的包装:制备方法与用途
WO2003027313A2 (en) 2001-09-24 2003-04-03 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services SUPPRESSORS OF CpG OLIGONUCLEOTIDES AND METHODS OF USE
US7615227B2 (en) 2001-12-20 2009-11-10 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Use of CpG oligodeoxynucleotides to induce angiogenesis
US20050089524A1 (en) * 2002-03-01 2005-04-28 Sanderson Sam D. Compositions and compounds for use as molecular adjuvant for a nicotine vaccine
US7605138B2 (en) 2002-07-03 2009-10-20 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7569553B2 (en) 2002-07-03 2009-08-04 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US20040053880A1 (en) 2002-07-03 2004-03-18 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
US7807803B2 (en) 2002-07-03 2010-10-05 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid compositions for stimulating immune responses
EP1575504A4 (en) 2002-08-01 2009-11-04 Us Gov Health & Human Serv METHOD FOR THE TREATMENT OF INFLAMMATORY ARTHROPATHIES WITH SUPPRESSORS OF THE CPG OLIGONUCLEOTIDES
KR20050052467A (ko) 2002-08-12 2005-06-02 다이나박스 테크놀로지 코퍼레이션 면역조절 조성물, 이의 제조방법 및 이의 이용방법
US8043622B2 (en) 2002-10-08 2011-10-25 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method of treating inflammatory lung disease with suppressors of CpG oligonucleotides
EP1556077A2 (en) 2002-10-29 2005-07-27 Coley Pharmaceutical Group, Ltd Use of cpg oligonucleotides in the treatment of hepatitis c virus infection
CA2504493C (en) 2002-11-01 2015-12-29 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method of preventing infections from bioterrorism agents with immunostimulatory cpg oligonucleotides
AU2003300919A1 (en) 2002-12-11 2004-06-30 Coley Pharmaceutical Gmbh 5' cpg nucleic acids and methods of use
JP2006512391A (ja) 2002-12-30 2006-04-13 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 組み合わせ免疫賦活薬
US20040235770A1 (en) 2003-04-02 2004-11-25 Coley Pharmaceutical Group, Ltd. Immunostimulatory nucleic acid oil-in-water formulations and related methods of use
BRPI0414045A (pt) 2003-09-05 2006-10-24 Anadys Pharmaceuticals Inc administração de ligantes de tlr7 e pró-medicamentos dos mesmos para tratamento de infecção por vìrus de hepatite c
GB0321615D0 (en) 2003-09-15 2003-10-15 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
CA2536139A1 (en) 2003-09-25 2005-04-07 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Nucleic acid-lipophilic conjugates
SG122973A1 (en) * 2003-10-30 2006-06-29 Coley Pharm Gmbh C-class oligonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory potency
AU2004304770B2 (en) * 2003-12-08 2010-05-06 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties by small oligonucleotide-based compounds
EP1776105A2 (en) 2004-07-18 2007-04-25 Coley Pharmaceutical Group, Ltd Methods and compositions for inducing innate immune responses
MY159370A (en) 2004-10-20 2016-12-30 Coley Pharm Group Inc Semi-soft-class immunostimulatory oligonucleotides
US20060111271A1 (en) * 2004-11-24 2006-05-25 Cerny Erich H Active and passive immunization against pharmacologically active hapten molecules using a synthetic carrier compound composed of similar elements
EP2351577A1 (en) 2004-12-29 2011-08-03 Mannkind Corporation Methods to trigger, maintain and manipulate immune responses by targeted administration of biological response modifiers into lymphoid organs
RS20070422A (en) * 2005-04-08 2009-01-22 Sanofi-Aventis U.S. Llc., Methods for treating infectious disease exacerbated asthma
EP1929014B1 (en) 2005-08-31 2014-08-13 The Government of the United States of America as represented by the Secretary of the Department of Health and Human Services Methods of altering an immune response induced by d-type cpg oligodeoxynucleotides
WO2007064478A2 (en) 2005-11-28 2007-06-07 Nabi Biopharmaceuticals Method for making nicotine hapten
EP2589654A1 (en) 2006-05-03 2013-05-08 The Regents of the University of Colorado, a body corporate CD40 agonist antibody/type1 interferon synergistic adjuvant combination, conjugates containing and use thereof as a therapeutic to enhance cellular immunity
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
EP2468300B1 (en) 2006-09-26 2017-12-20 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
CN101600728A (zh) 2006-12-04 2009-12-09 伊利诺斯大学理事会 使用铜氧还蛋白和富含CpG的DNA治疗癌症的组合物和方法
AU2008314647B2 (en) * 2007-10-12 2013-03-21 Massachusetts Institute Of Technology Vaccine nanotechnology
AU2009221419B2 (en) * 2008-02-01 2013-09-26 Alpha-O Peptides Ag Self-assembling peptide nanoparticles useful as vaccines
US20110086063A1 (en) * 2008-06-04 2011-04-14 Cornell University Vaccines for prevention and treatment of addiction
WO2009155332A1 (en) 2008-06-17 2009-12-23 Cedars-Sinai Medical Center Use of toll-like receptor ligands as adjuvants to vaccination therapy for brain tumors
NZ602945A (en) * 2008-06-27 2014-05-30 Zoetis Llc Novel adjuvant compositions
US8343498B2 (en) * 2008-10-12 2013-01-01 Massachusetts Institute Of Technology Adjuvant incorporation in immunonanotherapeutics
US8591905B2 (en) * 2008-10-12 2013-11-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nicotine immunonanotherapeutics
US8053422B2 (en) 2008-12-04 2011-11-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Anti-cancer oligodeoxynucleotides
MY160201A (en) * 2008-12-09 2017-02-28 Coley Pharm Group Inc Immunostimulatory oligonucleotides
EP2865389A1 (en) 2008-12-09 2015-04-29 Pfizer Vaccines LLC IgE CH3 peptide vaccine
US8552165B2 (en) * 2008-12-09 2013-10-08 Heather Davis Immunostimulatory oligonucleotides
WO2010125480A1 (en) 2009-04-30 2010-11-04 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pneumococcal vaccine and uses thereof
JP6297776B2 (ja) * 2009-05-27 2018-03-20 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッドＳｅｌｅｃｔａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． 免疫調節薬−高分子化合物
KR20130127547A (ko) 2009-07-30 2013-11-22 화이자 백신스 엘엘씨 항원성 타우 펩타이드 및 이의 용도
WO2011014679A1 (en) * 2009-07-31 2011-02-03 Nabi Biopharmaceuticals Method and kit for treating nicotine addiction
ES2670576T3 (es) 2009-09-03 2018-05-31 Pfizer Vaccines Llc Vacuna de PCSK9
JP2011092108A (ja) 2009-10-30 2011-05-12 Rikkyo Gakuin シアニジウム類由来のプロトンａｔｐアーゼ遺伝子を用いた耐性植物体の作出方法及び該遺伝子の用途
EP2575876B1 (en) * 2010-05-26 2017-12-06 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
CA2800158C (en) * 2010-05-28 2020-07-21 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Vaccines comprising cholesterol and cpg as sole adjuvant-carrier molecules
TWI578997B (zh) * 2010-06-04 2017-04-21 輝瑞疫苗有限責任公司 用於預防或治療菸鹼成癮之共軛體
EP2942061A3 (en) * 2010-06-07 2016-01-13 Pfizer Vaccines LLC Ige ch3 peptide vaccine
SG10201602668VA (en) * 2011-04-22 2016-05-30 Wyeth Llc Compositions relating to a mutant clostridium difficile toxin and methods thereof
AU2012335208B2 (en) * 2011-11-07 2017-08-31 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
US20150017201A1 (en) * 2013-03-15 2015-01-15 Regents Of The University Of Minnesota Novel nicotine dna vaccines

Also Published As

Publication number Publication date
KR20110102424A (ko) 2011-09-16
IL213162A (en) 2016-08-31
BRPI0923341B1 (pt) 2021-04-06
ZA201104048B (en) 2012-02-29
WO2010067262A1 (en) 2010-06-17
PE20110998A1 (es) 2012-02-10
CA2745096C (en) 2013-11-05
AR074501A1 (es) 2011-01-19
RU2011122418A (ru) 2013-01-20
RU2012150453A (ru) 2014-06-10
HK1165325A1 (en) 2012-10-05
BRPI0923341A2 (pt) 2018-05-29
IL213162A0 (en) 2011-07-31
US9453059B2 (en) 2016-09-27
BRPI0923341B8 (pt) 2021-05-25
ES2572563T3 (es) 2016-06-01
PL2759306T3 (pl) 2016-09-30
DK2759306T3 (en) 2016-05-09
CN102333538B (zh) 2014-01-15
DK2376107T3 (da) 2014-07-07
EP2376107B1 (en) 2014-05-21
EP2376107A1 (en) 2011-10-19
JP2012511321A (ja) 2012-05-24
EP2759306B1 (en) 2016-04-06
AU2009325926A1 (en) 2011-06-30
CA2745096A1 (en) 2010-06-17
RU2610690C2 (ru) 2017-02-14
PL2376107T3 (pl) 2014-09-30
PT2376107E (pt) 2014-07-25
MX2011006088A (es) 2011-06-21
NZ593220A (en) 2012-10-26
RU2477753C2 (ru) 2013-03-20
TWI370740B (en) 2012-08-21
SI2759306T1 (sl) 2016-05-31
SG171829A1 (en) 2011-07-28
AU2009325926B2 (en) 2013-05-16
ES2481040T3 (es) 2014-07-29
US20150086610A1 (en) 2015-03-26
MY172421A (en) 2019-11-25
SI2376107T1 (sl) 2014-07-31
KR101329374B1 (ko) 2013-11-14
JP5016733B2 (ja) 2012-09-05
MY160201A (en) 2017-02-28
TW201026323A (en) 2010-07-16
EP2759306A1 (en) 2014-07-30
CN102333538A (zh) 2012-01-25
CO6382137A2 (es) 2012-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUE027823T2 (hu) Immunstimuláló oligonukleotidok
CN102245204B (zh) α-半乳糖基神经酰胺类似物以及它们作为免疫疗法、佐剂和抗病毒剂、抗细菌剂和抗癌剂的应用
US20230081530A1 (en) Methods and compositions for treating cancer using mrna therapeutics
JP6670244B2 (ja) 免疫調節組成物及びその使用法
TW200911274A (en) Alpha-galatosyl ceramide analogs and their use as immunotherapies
CN110381994A (zh) 用于诱导针对寨卡病毒的免疫应答的核苷修饰的rna
JP2022115999A (ja) 浮遊病原体および刺激物に対して防御するための組成物および方法
US8609824B2 (en) Methods of treatment using thymus-derived compositions
HUE026089T2 (hu) NGF elleni antitestek és eljárás alkalmazásukra
EP1846029A2 (de) Impf-adjuvanzien pam3cys, poly(i:c), imiquimod, loxoribine, r-848 und cpg-dna zusammen mit mhc i oder mhc ii epitopen
CN107074879A (zh) 应用于细胞结合分子‑药物共轭体的新型细胞毒性分子
HU229968B1 (hu) Sztreptokokkusz oltóanyag
TW200902060A (en) Stimulation of an immune response by cationic lipids
HU229282B1 (en) Hiv vaccine compositions
TW200307557A (en) Stabilized synthetic immunogen delivery systems
HUE033072T2 (hu) Staphylococcus aureus antigének immunogén készítményei
US20230142621A1 (en) Exosomal nucleic acid vaccine modularly configured to harness multiple antigen presentation mechanisms
CN1678188B (zh) 调节免疫反应的核酸成份
CN107921113A (zh) 免疫调节组合物及其使用方法
CN106458869A (zh) 具有免疫疾病治疗效果的新型化合物及其应用
World Health Organization Yellow fever fact sheet:(revised in December 2009)
JP2005528373A (ja) 免疫プロトコルにＦｌｔ３リガンドを用いる方法
Manganaro et al. Oral immunization: turning fantasy into reality
TW201100098A (en) Globo H and related anti-cancer vaccines with novel glycolipid adjuvants
JP2007509854A (ja) 治療の組成物と方法