HU223880B1 - Növekedési faktort tartalmazó gélkészítmény - Google Patents

Növekedési faktort tartalmazó gélkészítmény Download PDF

Info

Publication number
HU223880B1
HU223880B1 HU9803002A HUP9803002A HU223880B1 HU 223880 B1 HU223880 B1 HU 223880B1 HU 9803002 A HU9803002 A HU 9803002A HU P9803002 A HUP9803002 A HU P9803002A HU 223880 B1 HU223880 B1 HU 223880B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
pdgf
gel
cmc
viscosity
composition
Prior art date
Application number
HU9803002A
Other languages
English (en)
Inventor
John Cini
Amy Finkenur
Original Assignee
Ethicon, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ethicon, Inc. filed Critical Ethicon, Inc.
Publication of HUP9803002A2 publication Critical patent/HUP9803002A2/hu
Publication of HUP9803002A3 publication Critical patent/HUP9803002A3/hu
Publication of HU223880B1 publication Critical patent/HU223880B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1808—Epidermal growth factor [EGF] urogastrone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1858—Platelet-derived growth factor [PDGF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Colloid Chemistry (AREA)

Abstract

A találmány tárgya gyógyszerkészítmény, amely a következőkettartalmazza: a) sebgyógyításra hatásos mennyiségű vérlemezke-eredetűnövekedési faktor (PDGF); b) gyógyszerészetileg elfogadhatócellulózpolimer; és c) gyógyszerészetileg elfogadható, töltésselrendelkező kémiai anyag a következők közül: pozitív töltésűaminosavak, így lizin, arginin, hisztidin, aszparaginsav, glutaminsav,alanin, metionin, prolin, szerin, aszparagin, cisztein, pozitívtöltésű poliaminosavak, protamin, aminoguanidin és cink- vagymagnéziumionok, amely készítmény egy vizes gél, amelynek aviszkozitása 100–500 000 mPa·s közötti érték szobahőmérsékleten. ŕ

Description

A találmány növekedési faktort, közelebbről humán mitogén vagy angiogén hatású polipeptid növekedési faktort tartalmazó gélkészítményekre vonatkozik.
A következő találmányi leírás során minden megadott hivatkozás, irodalmi hely, szabadalom vagy szabadalmi bejelentés teljes egészében a technika állásának mind szélesebb körű ismertetését szolgálja.
A humán polipeptid növekedési faktorok olyan molekulák, amelyek szabályozzák a normál emberi sejt növekedését. Számos humán polipeptid növekedési faktort azonosítottak, és meghatározták kémiai szerkezetét. Ilyenek például a következők: epidermális növekedési faktor (EGF), savas és bázikus fibroblaszt növekedési faktor (FGF), vérlemezke-irányított növekedési faktor (PDGF), transzformáló növekedési faktor-alfa, (TGF-alfa), transzformáló növekedési faktor-béta (TFG-béta), inzulinszerű növekedési faktor (IGF-I és IGF-II), valamint idegnövekedési faktor (NGF). Azon képességűk alapján, hogy stimulálják a sejtek növekedését, a humán polipeptid növekedési faktorról leírták, hogy alkalmasak a sebgyógyulási folyamatok stimulálására.
Mostanáig nem állt rendelkezésre alkalmas szállítórendszer bármelyik növekedési faktorra, amelyet sebkezelésnél alkalmaznak. Különösen kívánatos az olyan szállítórendszer, amely szabályozza a növekedési faktor felszabadulását a sebnél, és magához a sebhez képes kötődni vagy megmaradni hosszú időn át annak érdekében, hogy növelje a növekedési faktor és a seb érintkezési idejét. A találmány szerinti megoldás egy ilyen szállítórendszert biztosít a növekedési faktorokat tartalmazó gél formájában. Biokompatibilis gélanyagokat lehet alkalmazni a növekedési faktor sebhez történő szállítására, és ez azzal az előnnyel jár, hogy egy szabályozott szállítási profilt és a seb környékében egy nedves környezetet eredményez.
A találmány tehát egy vizes gélkészítményre vagy egy viszkózus oldatra vonatkozik, amely szabályozottan képes szállítani a növekedési faktorokat a seb helyéhez. Maga az adott készítmény, amelyet felhasználunk, függ a kívánt adagolás típusától. Három különböző adagolást különböztetünk meg, nevezetesen a topikális vagy a vágott sebek kezelésére szolgáló géleket, a szem elülső kamrájában lévő sebek kezelésére alkalmas gélek, valamint a kis viszkozitású, vizes készítményeket olyan alkalmazáshoz, amelyeknél több folyadékra van szükség, ezek a készítmények magasabb víztartalmúak.
A topikális alkalmazású vagy a vágott sebek gyógyítására alkalmas vizes gélkészítmények a humán mitogén vagy angiogén aktivitású polipeptid növekedési faktor hatásos mennyiségét tartalmazzák. Továbbá, ezek a készítmények tartalmaznak még vízben oldható, gyógyszerészetileg elfogadható polimer anyagot a viszkozitás beállítására, ezek viszkozitása 1000-12 000 000 mPas (cps) közötti érték. A viszkozitást általában vagy szobahőmérsékleten, vagy emelt hőmérsékleten végezzük. A szem elülső kamrájában lévő sebek gyógyítására alkalmas vizes gélkészítmény vízoldható ophthalmikusan kompatibilis polimer anyagot tartalmaz, amely szobahőmérsékleten 1000-100 000 mPa-s közötti viszkozitást biztosít. A kis viszkozitású vizes készítmények vízoldható, gyógyszerészetileg vagy ophthalmikusan kompatibilis polimer anyagokat tartalmaznak a szobahőmérsékleten 1-5000 mPas értékű viszkozitás biztosítására. A kis viszkozitású készítményeket előnyösen ophthalmikus sebek gyógyítására alkalmazzuk. Alkalmazhatók ezek azonban más egyéb típusú sebek kezelésére is, különösen a sebekre helyezendő bandázsok áztatására.
A találmány szerinti gélkészítmények előnye, hogy tapadnak a sebhez és igazodnak, megegyeznek a test vagy a seb szabálytalan kontúrjaihoz. A géleket felvihetjük közvetlenül a sebre, vagy egy megfelelő porózus vagy mikroporózus szubsztrátum alkalmazásával, így például egy bevonat formájában. A géleknek megvan az a további előnyük, hogy igen nagy a víztartalmuk (ez a sebet nedvesen tartja), továbbá képesek abszorbeálni a sebváladékot, könnyen felvihetők a sebre és onnan mosással könnyen eltávolíthatók. A gél felvitelkor hűvös érzetet kelt a seben, és így növeli a beteg komfortérzetét és a készítmény elfogadását, különösen érzékeny sebek esetén.
A találmány szerinti gélkészítmények továbbá a növekedési faktor szabályozott szállítását biztosítják a sebhelyhez. A szabályozott szállítás a hatóanyag felszabadulására utal, amellyel fenntartható a terápiás szint hosszabb időn át, akár 24 órán át vagy még tovább. A növekedési faktor és a seb megnövelt érintkezési ideje szükséges a sebgyógyulás szignifikáns mértékű növeléséhez. A találmány szerinti gélkészítmények növelik a növekedési faktor érintkezési idejét a sebbel, és egy nyújtott felszabadulásit készítményt biztosítanak. Ez egy igen fontos előny, mivel lehetővé teszi a készítmény ritkább alkalmazását a seben, és így csökkenti a seb és annak celluláris komponenseinek zavarását, különösen a mitosis különböző fázisaiban.
A találmány szerinti vizes gélek különböző viszkozitásúak lehetnek, függően a gél kívánt felhasználásától. A viszkozitás a folyadék folyással szembeni ellenállásának mértéke, a nyíróerő és nyírás mértékének arányaként definiáljuk. A nyíróerő a folyadék ellenállása a folyással szemben egy alkalmazott erő hatására, azaz a testen belüli molekuláris ellenállás egy külső erővel szemben. A nyíróerőt mind az erő és a nyírásnak kitett terület arányaként definiáljuk. Ha a folyadékot nyírásnak tesszük ki lamináris folyást feltételezve, a folyadék rétegei különböző mértékben mozdulnak el. A rétegek mozgásának relatív aránya a nyírás mértékének csak egyik faktora. A másik a távolság vagy a nyírófelületek közötti szabad terület. így a nyírás mértékét a gél sebessége és a szabd tér közötti arányként definiáljuk. A viszkozitás dimenziója din/mp/cm2. Ez a dimenzió a poise. A következőkben a megadott viszkozitásértékek dimenziója, hacsak másképp nem jelöljük mPa s Brookfield-viszkoziméterrel meghatározva. Minden viszkozitásértéket szobahőmérsékleten, azaz 22-25 °C hőmérsékleten határoztunk meg, hacsak másképp nem jelöljük.
HU 223 880 Β1
A polipeptid növekedési faktorok humán mitogén vagy angiogén aktivitásúak, és lehetnek például a következők: EGF, savas FGF, bázikus FGF, PDGF, TGFalfa, TGF-béta, angiogenin, NGF, IGF-I, IGF-II vagy ezek keveréke. Nyilvánvaló, hogy ezen növekedési faktorok biológiailag aktív fragmenseit, vagy kémiailag szintetizált származékait is alkalmazhatjuk a teljes, természetben előforduló molekula helyett. A mitogén aktivitásuk mellett az EGF, FGF faktorok és TGF faktorok, valamint az angiogenin még angiogén aktivitással is rendelkezik. Előnyösek a rekombináns DNSeljárásokkal előállított növekedési faktorok.
A találmány értelmében a humán EGF olyan EGF-re utal, amelynek polipeptidszekvenciája, vagy bármilyen lényeges része a következő irodalmi helyen van ismertetve: Urdea, M. S. és mtársai, Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 80.7461-7465 (1983). A humán EGF ugyancsak utal bármilyen természetben előforduló humán EGF variánsára, ilyen például a gamma-urogasztron. Az epidermális növekedési faktor, a humán epidermális növekedési faktor és más növekedési faktorok természetes forrásokból izolálhatok, előállíthatok rekombináns DNS-eljárásokkal vagy kémiai szintézissel.
A találmány szerinti alkalmazásnál az EGF magában foglal olyan polipeptidosztályokat, amelyeknek biológiai aktivitása hasonló a természetes humán EGF polipeptidekéhez, amely hatást biovizsgálatokkal határozunk meg, ilyen vizsgálat például az EGF receptorkötési vizsgálat, amelyet az US 4717717 számú szabadalmi leírásban ismertetnek, és amely polipeptid tartalmaz bizonyos meghatározott aminosavcsoportokat és a diszulfidkötések szokásos elhelyezkedését, mint azt Carpenter és munkatársai ismertetik: Epidermal Growth Factor, its receptor, and related proteins, Experimental Cell Research, 164:10-10 (1986). így az EGF magában foglalja a rekombináns DNStechnikákkal előállított EGF-et, az egerek állkapocs alatti mirigyéből izolált egér-EGF-et, patkány-EGF-et, valamint a természetes humán epidermális növekedési faktort, amely emberi vizeletből izolálható, valamint mindezek bioaktív származékait és rokon polipeptidjeit, beleértve a prekurzorokat, amelyek aktív epidermális növekedési faktorrá vannak transzformálva in situ proteolitikus eljárással.
A PDGF egy fő mitogén a szérumban, amely elősegíti az embrionális kötőszövet-eredetű sejtek, így például fibroblasztok, gliasejtek és simaizomsejtek in vitro proliferációját. Az aminosavadatokkal kimutatták, hogy a PDGF két különálló, de homológ polipeptidláncból épül fel, nevezetesen az A láncból és B láncból. Ez a két lánc a PDGF-AA, PDGF-B és PDGF-AB dimerjei. A PDGF A és B láncainak, valamint a B lánc aminosav szekvenciáit meghatározták és a következő irodalmi helyen van ismertetve: Johnson A. és mtársai, 1984, EMBO J., 3: 921-928. A találmányi leírás során az „rhPDGF-B” kifejezés a humán PDGF B-B homodimert jelenti, amely rekombináns DNSeljárással van előállítva.
A találmány szerinti alkalmazásnál a polipeptid növekedési faktor sebgyógyításhoz 0,01-1000 pg/ml közötti érték, előnyösen ez az érték 1-500 pg/ml, még előnyösebben 1-100 pg/ml. A találmány szerinti gélek képesek a polipeptid növekedési faktor felszabadulását nyújtani.
A találmány szerinti gélképző anyagok lehetnek vízoldható polimerek, amelyek viszkózus vizes oldatot vagy nemvizes oldatot alkotnak, lehetnek vízben duzzadó polimerek (például kollagén), amelyek szintén viszkózus oldatot képeznek. A duzzadóképes polimerek azok, amelyek inkább abszorbeálják a vizet, mint hogy vízben oldódnának. Az itt ismertetésre kerülő polimerek térhálós formái nem lehetnek vízoldhatók, de vízben duzzadhatnak. Ezért a polimerek térhálósított formái is a találmány oltalmi körébe tartoznak. A térhálós kifejezés olyan polimereket jelent, amelynél a láncokat kovalens kötéssel egy kétértékű reagenssel, így például glutáraldehiddel kötik össze. A szakterületen jártas szakember számára ismert, hogy bizonyos polimerek só formában, vagy részlegesen semlegesített formában is alkalmazhatók azért, hogy vízoldhatók legyenek. így például a hialuronsavat előnyösen nátrium-hialuronát formájában alkalmazzuk a megfelelő vízoldhatóság biztosítására.
A találmány szerinti topikális vagy vágott sebek kezelésére történő alkalmazású vizes gélkészítményekben a polimer lehet például valamely következő polimer: vinilpolimerek, poli(etilén-oxi)-poli(propilén-oxi) kopolimerek, poliszacharidok, proteinek, poli(etilénoxid), akrilamidpolimerek és ezek származékai vagy sói. Nyilvánvaló, hogy a poli(etilén-oxid) magában foglalja a polietilénglikolt. A szem elülső kamrájában lévő sebek gyógyítására alkalmazott gélkészítményekben a polimerek ugyanezek lehetnek, kivéve, hogy nem előnyös a poli(etilén-oxi)-poli(propilén-oxi) kopolimerek vagy poli(etilén-oxid) alkalmazása. Ugyancsak a szem elülső kamrájában történő alkalmazásnál az alkalmazott polimer előnyösen biodegradálható polimer, azaz amely képes nem káros alkotókká lebontani, amely elvezethető az elülső kamrából, vagy ott metabolizálható. A kis viszkozitású vizes készítményekben, amelyeket az ophthalmikus sebek kezelésére alkalmazunk, a gélképző polimer ugyanaz lehet, mint a topikális vagy vágott sebek kezelésénél alkalmazott polimerek, kivéve, hogy a poli(etilén-oxid) nem előnyös.
A találmány szerinti felhasználásra alkalmas vinilpolimerek (szubsztituált polietilénként is ismertek) lehetnek például a következők: poliakrilsav, polimetakrilsav, poli(vinil-pirrolidon) és poli(vinil-alkohol). A poliszacharidok lehetnek például a következők: cellulóz vagy cellulózszármazékok, glükóz-amino-glikánok, agar, pektin, alginsav, dextrán, keményítő és kitozán. Előnyös a még jobban vízoldható α-amilóz. A glükózamino-glikánokként alkalmazhatjuk például a következőket: hialuronsav, kondroitin, kondroitin-4-szulfát, kondroitin-6-szulfát, dermatán-szulfát, keratán-szulfát, heparin-szulfát és heparin. A glükóz-amino-glükánok alkalmazhatók a sebgyógyítás fokozására más egyéb gélképző polimerrel kombinációban is. A találmány szerinti megoldásnál alkalmas polimerek közé tartozik például a kollagén, zselatin és fibronektin. Akrilamidpo3
HU 223 880 Β1 limerként alkalmazhatunk például diakrilamidot vagy polimetakrilamid polimereket. Előnyösek a biokompatibilis poliakrilamid polimerek.
A találmány szerinti topikális vagy vágott seb gyógyítására alkalmas gélkészítmények viszkozitása szobahőmérsékleten általában 1000-12 000 000 mPas közötti érték, előnyösen 1000-2 000 000, még előnyösebben 1000-500 000 mPa s közötti érték. A különösen előnyös viszkozitásérték 1000-150 000 mPa s között van. A találmány egy előnyös kiviteli formájánál a topikális gélkészítmény 0,1-5 tömeg%-a karboximetil-cellulózt (CMC) vagy nátrium-karboxi-metilcellulózt (NaCMC) tartalmaz, amelyek molekulatömege 450 000-4 000 000 között van. Egy még előnyösebb kiviteli formánál a CMC mennyisége 1,5-4 tömeg% és a molekulatömege 450 000-4 000 000 közötti érték. A CMC-gél pH-értéke 4,5-8, előnyösen 5-7 közötti érték kell hogy legyen.
Egy másik kiviteli formánál a találmány szerinti topikális vagy vágott seb kezelésére alkalmas gél 15-60 tömeg% poli(etilén-oxi)-, poli(propilén-oxi)-blokkkopolimert tartalmaz, amelynek molekulatömege 500-50 000 közötti érték. Egy előnyös kiviteli formánál a blokk-kopolimer mennyisége 15-40 tömeg%, molekulatömege 1000-15 000 közötti érték. A találmány szerinti megoldásnál felhasználásra kerülő blokkkopolimerek ismertek például Pluronic néven. Előnyös Pluronic termékek a Pluronic F88 és F127.
Egy további kiviteli módnál a találmány szerinti topikális vagy vágott seb kezelésére alkalmas gél 0,5-10 tömeg% hialuronsavat tartalmaz, amelynek molekulatömege 500 000-8 000 000 közötti érték, egy előnyös kiviteli formában a hialuronsav mennyisége 1,5-6 tömeg0/), a molekulatömege nagyobb mint 1 000 000.
Az akrilamidpolimerek alkalmazhatók az összes típusú seb kezelésére, különösen a szem elülső kamrájában lévő sebek esetén. Egy abszorpcióképes akrilamidpolimer, így például a poliakrilamid jól helyettesítheti a jelenleg a szemészeti, ophthalmikus felhasználásnál alkalmazott hordozórendszereket, így például a hialuronsavat. Az akrilamidpolimerek molekulatömege 1-13 000 000, előnyösen 4-6 000 000 közötti érték lehet. Az akrilamidpolimer mennyisége a gélben 2-5%, előnyösen 3,5-4,5%. A szubsztituált akrilamidpolimerek, így például a metil- és alkil-szubsztituált polimerek szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak.
A szem elülső kamrájában történő felhasználáshoz az akrilamidgél-rendszer a következő jellemzőkkel rendelkezik. A szállítómátrix bármelyik oldási vagy degradációs terméke sem toxikus, és nem tömi el a trabecularis hálószerkezetet; a gél optikailag átlátszó; a gél az elülső kamrában hagyható anélkül, hogy hátrányos klinikai hatásokat, így például a szemnyomás nem elfogadható mértékű növekedését okozná.
A szakterületen jártas szakember számára nyilvánvaló, hogy a kívánt viszkozitásértéket a készítményben lévő polimer százalékos mennyiségével és molekulatömegével lehet változtatni. így például egy kis viszkozitású gélt nyerünk, ha kis molekulatömegű polimert, vagy kis mennyiségű polimert, vagy a kettő kombinációját alkalmazzuk. Nagy viszkozitású gélt tudunk előállítani nagy molekulatömegű polimer és nagy százalékos koncentráció alkalmazásával. Közepes viszkozitást érhetünk el a molekulatömeg és a százalékos koncentráció megfelelő változtatásával.
Olyan gélkészítményeknél, amelyeknél kisebb viszkozitás szükséges, mint a topikális alkalmazású vagy vágott sebnél alkalmazásra kerülő géleknél, nevezetesen a szem elülső kamrájában lévő sebek kezelésére alkalmas géleknél és az ophthalmikus sebek kezelésére alkalmas kis viszkozitású oldatoknál, a polimer százalékos mennyisége és molekulatömege változtatásával tudjuk a kívánt viszkozitást beállítani. így például az elülső kamrában történő alkalmazáshoz a gél tartalmazhat cellulózpolimert 1-20 tömeg%-ban, amelynek a molekulatömege 80 000-240 000 közötti érték. Az előnyös koncentrációtartomány 1-3 tömeg%. Az elülső kamrában alkalmazható gélek egy másik kiviteli formájánál a gél 0,5-5 tömeg% hialuronsavat tartalmaz, amelynek a molekulatömege 500 000-8 000 000 közötti érték. Előnyös, ha a hialuronsav mennyisége 0,5-2 tömeg% és molekulatömege 2 000 000-4 000 000 közötti érték. Az előnyös viszkozitástartomány az elülső kamrában alkalmazásra kerülő géleknél az 1000-100 000 mPa s közötti érték.
A kis viszkozitású oldat tartalmazhat 0,1-2 tömeg% poliakrilsavat, amelynek a molekulatömege 100 000-4 000 000 közötti érték. Egy előnyös kiviteli formánál a polimer mennyisége 0,05-0,5 tömeg%. Egy másik kiviteli formánál ez a híg viszkózus oldat 2-40 tömeg% poli(etílén-oxi)-poli(propilén-oxi) kopolimert tartalmaz, amelynek átlagos molekulatömege 500-500 000 közötti érték. Előnyösen a koncentráció 2-20 tömeg%, és a molekulatömeg 1000-15 000 közötti érték. Egy másik formánál a híg, viszkózus oldat 1-20 tömeg% cellulózpolimert tartalmaz, amelynek molekulatömege 80-240 000. Előnyös, ha a koncentráció 1-10% közötti érték. Egy másik kiviteli formánál a híg, viszkózus oldat 0,5-5 tömeg% hialuronsavat tartalmaz, amelynek molekulatömege 500 000-8 000 000 közötti érték. Előnyösen a koncentráció 0,5-2 tömeg% és a molekulatömeg 1 000 000-6 000 000 közötti érték. Ha a híg, viszkózus oldatot szemcseppként kell alkalmazni, előnyös, ha a viszkozitása 1-1000 mPa s közötti érték. Ha más adagolású formában alkalmazzuk, így például bandázsok átitatására, akkor a viszkozitás értéke 1-5000 között van.
A találmány szerinti gélekben alkalmazott cellulózpolimerek képesek a polipeptid növekedési faktorokat stabilizálni, hogy biológiai aktivitásukat vizes oldatban megtartsák. A cellulózpolimerek EGF-stabilizálására a biológiai aktivitás megtartása érdekében az USP 4 717 717 számú szabadalmi leírásban ismertetik. A találmány szerinti megoldásnál felhasználásra kerülő cellulózpolimerek vízoldható éterezett cellulózpolimerek, így alkilcellulózok, hidroxi-alkil-cellulózok, valamint alkil-hidroxi-alkil-cellulózok, így például metilcellulóz, hidroxi-alkil-cellulóz, karboxi-metil-cellulóz, hidroxi-porpil-metil-cellulóz és hidroxi-propil-cellulóz. Előnyösek a metilcellulóz és a hidroxi-alkil-cellulóz4
HU 223 880 Β1 származékok, így a karboxi-metil-cellulóz, hidroxipropil-cellulóz, hidroxi-etil-cellulóz és hidroxi-propilmetil-cellulóz.
Egy PDGF cellulózpolimer gélkészítmény stabilitását nagymértékben fokozhatjuk, ha a készítménybe töltéssel rendelkező vegyi anyagot, így például töltéssel rendelkező aminosavat vagy egy fémiont foglalunk be. Alkalmas aminosavak közé tartozik például a lizin, arginin, hisztidin, aszparaginsav, glutaminsav, alanin, metionin, prolin, szerin, aszparagin és cisztein. Aminoguanidint és protamint szintén alkalmazhatunk. Az alkalmas fémionok közé tartozik például a cink és magnézium. Az aminosavat alkalmazhatjuk szabad sav vagy sója, így például hidrokloridsója formájában. A „stabilitás kifejezés a PDGF-mitogén-aktivitás csökkenésének megakadályozására utal a gélkészítményben, vagy a gélből felszabaduló PDGF-protein mennyiségének növekedésére. így a találmány szerinti PDGF-gélkészítmények alkalmasak sebek kezelésére.
A PDGF stabilitása a CMC-gélekben úgy végezhető, hogy minimalizáljuk a PDGF közötti kölcsönhatásokat vagy minimalizáljuk a CMC redukálóvégeivel való kölcsönhatást úgy, hogy egy kiegészítő pozitív vagy negatív töltésű elleniont adagolunk. Előnyösen konzerválószert is adagolunk a készítményhez a készítés során, hogy sterilizáljuk a kapott készítményt, így például szűréssel vagy hő alkalmazásával, például 122 °C hőmérsékleten több percen át nyomás alatti maximum 1 bar alatti hőkezeléssel.
A találmány szerinti gélkészítmények alkalmazhatók egy abszorbens géz rostjainak bevonására is, így egy sebkezelésre alkalmas kötszert, tapaszt alakítunk ki, amelyet a sebre lehet helyezni. Erre a célra előnyösek a kis viszkozitású készítmények. A sebgyógyító tapaszokat úgy állíthatjuk elő, hogy a gézt átitatjuk a vizes géloldattal, amely a mitogén aktivitású humán polipeptid növekedési faktor tartalmazza. A tapaszt ezután felvisszük a sebre úgy, hogy a géz bevonatos szálai érintkezzenek a sebbel, és a sejtnövekedés szimulálásával elősegítsék a seb gyógyulását.
A találmány szerinti gélek felhasználhatók szemcseppkészítményekben, szemészeti irrigálóoldatokban, seb gyógyítására alkalmas kenőcsökben stb. A találmány szerinti készítményekkel gyógyítható sebek közé tartoznak például a következők; balesetből származó vagy orvosi sebek, amelyek epitheliás kárt, így például ophthalmikus sebeket okoznak, ilyenek például a szaruhártyafekélyből származó, radiokerototomiás, szaruhártya-transzplantátumokból, epikeratophakiás és más egyéb sebészeti eredetű sebek a szemben; továbbá bőrön előforduló sebek, így például égési sebek, vágott sebek, a bőrtranszplantátumokból származó donoroldali sebek, továbbá fekélyek (bőrön jelentkező, felfekvéses, vénás pangásból és diabéteszből eredőek). A találmány értelmében az ophthalmikus sebgyógyítás magában foglalja az elülső kamra sebeinek gyógyítását, valamint a kötőhártya alatti sebek gyógyítását. A találmány szerinti gélkészítmények alkalmazhatók belső vágások, valamint belső sebek, így például gyomorfekély gyógyítására is.
Olyan alkalmazásoknál, amikor a gélt belső vagy vágott sebre visszük fel, előnyös, ha a gélképző polimer lebomlani képes polimer. A természetben előforduló polimerek általában lebomlani képesek. Ilyenek például a kollagén, a glükóz-amino-glikánok, zselatin és keményítő. A cellulózok nem lebomlani képes polimerek. A szintetikus polimerek, így például a vinilpolimerek szintén nem lebomlani képesek. Az itt ismertetett polimerek biodegradálósága a szakterületen jártas szakember számára ismert.
A következő példákkal a találmány szerinti megoldást kívánjuk korlátozás nélkül közelebbről bemutatni.
1. példa
Karboxi-metil-cellulóz-gélek
Karboxi-metil-cellulóz-géleket (CMC vagy NaCMC) állítunk elő. Előnyösek azok a nátrium-karboxi-metilcellulózok, amelyek gyógyszerészeti minőségűek, ezeket CMC (NaCMC) 7H3SFPH-ként jelöljük. 226,2 kg injekció céljára alkalmas vízhez (WFI) a következő alkotókat adagoljuk 80 °C hőmérsékleten: 1946,3 g nátrium-klorid és 1203,5 g L-lizin-hidroklorid egy 305 Ies Fryma keverőedénybe. Ezután egy belső homogenizálót bekapcsolunk (kb. 2850 f/perc) és beadagolunk 5776,8 g NaCMC-t kevesebb mint 5 perc alatt. 10 perc elteltével a homogenizálót kikapcsoljuk. A keveréket 44 f/p fordulattal keverjük és lehűtjük 25 °C-ra. Amikor a 25 °C hőmérsékletet elértük, a keveréket -0,8 bar értékre vákuumozzuk. A keveréket ezután 122 °C-on 20 percen át sterilizáljuk.
Sterilizálás után a keveréket 25 °C-ra hűtjük, és a következő összetevőket elkeverjük: 11,712 I WFI, 377,9 g nátrium-acetát-dihidrát és 15,6 g ecetsav. Ezeket az anyagokat aszeptikusán a gélhez adagoljuk egy sterilizálószűrőn át történő szűréssel. A kapott keveréket 30 percen át keverjük. 2500 ml WFI-ben oldott 25 g rhPDGF-B anyagot ezután aszeptikusán a gélhez adagolunk szűréssel keverés közben. Ezután 250 ml WFIvel öblítünk. A gélt 2 órán át keverjük, majd aszeptikusán egy rozsdamentes acél szállítótartályba visszük. A gélt egy töltőberendezés segítségével a megfelelő, lezárható tartályokba töltjük. A gél viszkozitása 37 °C hőmérsékleten 2883 cps.
2. példa
Karboxi-metil-cellulóz-gél
Karboxi-metil-cellulóz-gélt állítunk elő a következők szerint.
1900 g nagy tisztaságú vizet felmelegítünk 70-80 °C-ra, hozzáadunk 3,24 g metil-parabent és 0,36 g propil-parabent és a szemmel látható teljes oldódásig keverjük. Miután a parabenek feloldódtak, beadagolunk 3,14 g nátrium-acetátot és 8,086 g nátriumkloridot és a hőforrást eltávolítjuk. Miután az anyagok feloldódtak, az oldatot 15-30 °C-ra lehűtjük, hozzáadunk 136 μΙ ecetsavat és 1,74 ml m-krezolt. Elegendő keverés után a puffer pH-ját megmérjük (pH=5,63), majd vízzel a végső térfogatra (kb. 2 I) hígítjuk. A puffer végső pH-ja 5,60. 585,6 g pufferhez egy 1 literes polikarbonát edényben 3 g L-lizin-monohidrokloridot ada5
HU 223 880 Β1 gólunk és a kapott keveréket a látható oldódásig keverjük. Ezután egy Lightning Labmaster keverőben 1300 f/perc keverés mellett 14,4 g Aqualon CMC-t, 7H3SFPH típus, adagolunk 30 mp alatt a pufferhez egy módosított tölcsér segítségével, majd a gélt összesen 90 percig keverjük, így 2,4%-os CMC-gélt nyerünk.
A gélt 100 pg/g rhPDGF-B/gm tartalommal alakítottuk ki, ezt az rhPDGF-B hatóanyag optikai sűrűsége (OD @ 280 nm) alapján határoztuk meg és a következőképpen jártunk el: a 2,4%-os CMC-gélhez 6 g rhPDGF-B hatóanyagot adagoltunk (OD=10 mg/ml) egy fecskendő segítségével és a hatóanyagot a gél különböző helyeire injektáltuk. A gélt ezután kézzel néhány percig kevertük, majd a keverést Heidolph keverővei 300 f/perc értékkel 1 órán át folytattuk 0,2 pm-es szűrőn szűrt nitrogénben. A gélt ezután egy hengeres malomban 1 órán át forgattuk alacsony sebességgel. A kapott rhPDGF-B/CMC gélt 15 g-os mennyiségekben Teledyne laminált tubusokba töltöttük (kb. 10 g/tubus), majd a tubusokat Kalix típusú berendezéssel melegen lezártuk. 55 tubust nyertünk.
3. példa
Karboxi-metil-cellulóz-gél
Karboxi-metil-cellulóz (CMC vagy NaCMC)-géleket állítottunk elő. A nátrium-karboxi-metil-cellulóz előnyös tisztasága a gyógyszerészeti CMC (NaCMC) 7H3SFPH típus. 48,6 g metil-parabent és 5,4 g propilparabent elkeverünk 28,4 kg vízzel egy 50 literes Frayma keverőtartályban, 80 °C-ra melegítjük és ezen a hőmérsékleten tartjuk 1 órán át. A keveréket ezután 30 °C-ra lehűtjük és 16 f/perc fordulattal végzett keverés közben a következőket adagoljuk hozzá: 47,1 g nátrium-acetát, 242,6 g nátrium-klorid és 150 g Llizin-hidroklorid és 2 g jégecet. A motor forgórészét ezután kikapcsoljuk, a sebességet 1300 és 1600 f/perc közötti értékre beállítjuk és hozzáadunk 720 g CMCport kevesebb mint 1 perc alatt. Miután a CMC-t beadagoltuk, a motorforgórészt ismét bekapcsoljuk és a kapott keveréket 1 órán át keverjük. A kioldótárcsát 6 perc után kapcsoljuk ki.
órás keverés után a keveréket 122 °C-on 20 percen át sterilizáljuk. A sterilizálás után a keveréket szobahőmérsékletre lehűtjük. Beadagolunk 27 g m-krezolt és a kapott keveréket 1 órán át keverjük. A PDGFanyagot a sterilizált gélhez adjuk aszeptikus módon. A kapott gélt ezután további 1 órán át keverjük. A gél viszkozitása 8200 cps 32 °C-on.
4. példa
Karboxi-metil-cellulóz gél
Karboxi-metil-cellulóz (CMC vagy NaCMC)-géleket állítunk elő. Gyógyszerészeti minőségű nátriumkarboxi-metil-cellulózt (7H3SFPH) alkalmazunk a készítményekhez. Egy 350 literes Turbo Emulsifier keverőbe beadagolunk 247,4 kg tisztított vizet. Egy belső homogenizáló maximális beállításával (1400 f/perc) a következőket adagoljuk a keverőtartályba: 405 g metil-paraben és 45 g propil-paraben. A keveréket 5 percen át homogenizáljuk, majd 16 f/perc értéknél folytatjuk a keverést, miközben a hőmérsékletet 60 °C-ra emeljük. Amikor ezt az értéket elérjük, az oldatot további 1 órán át keverjük. Az oldatot ezután 30 °C-ra lehűtjük, majd hozzáadagoljuk a kapott oldathoz a következő alkotókat: 2020 g nátrium-klorid, 392 g nátrium-acetát-dihidrát, 1250 g L-lizinhidroklorid, 16,25 g ecetsav és 225 g m-krezol. A kapott keveréket 15 percen át keverjük. Az így kapott oldatot egy 600 literes tartályba visszük át és a Flashbend homogenizáló garatán keresztül 6000 g nátrium-karboxi-metil-cellulózt adagolunk. A folyadékot visszaszivattyúzzuk Turbo Emulsifier berendezésbe a Flashblend homogenizálón keresztül és a CMC-t a folyékony pufferoldathoz adagoljuk.
A kapott gélt 2 órán át keverjük, majd 2631 g vízben oldott 26,05 g rhPDGF-B hatóanyagot adagolunk és 100 g vízzel átöblítjük. A gélt ezután további 2 órán át keverjük. A keverőtartályt vákuum alá helyezzük, majd a vákuumot nitrogéngázzal megszüntetjük.
A kapott gélt 15 g-os tubusokba töltjük. A végső viszkozitás 75 812 cps 37 °C-on meghatározva.
5. példa
Poliakrilsa vgélek
Popliakrilsavgéleket (Carbopol) állítunk elő. Előnyösen Carbopol 934 P és 940 típusú poliakrilsavat alkalmazunk 0,02-1,5% koncentrációban. Ennél nagyobb poliakrilsavkoncentráció csökkenti az EGF felszabadulásának mértékét. A poliakrilsav viszkozitása általában stabil, pH=6-10, előnyösen 6,5-7,5 közötti tartományban.
A következő összetevőket egyesítjük egy 4 literes tartályban. 6,3 g metil-paraben, 0,7 g propil-paraben és 177,5 g mannit 3500 ml vízben. Az oldatot egy lapátos keverővei addig keverjük, amíg a szilárd anyagok feloldódnak. Ezután 17,5 g poliakrilsavat (Carbopol 940, BF Goodrich) szűrünk be egy 40 mesh sűrűségű -0,044 mm lyukbőségű szitával az oldatba, miközben 1000 f/perc sebességgel keverést végzünk. Ezúton a poliakrilsavrészecskék jól diszpergálódnak és duzzadnak. Az oldatot ezután pH=7 értékig semlegesítjük 7,6 g szilárd NaOH 10%-os oldatával. Az így kapott gélből 900 g-ot kiveszünk és autoklávozzuk a steril gél céljából. A folyamat további részét 100 osztály típusú területen végezzük. Az EGF-törzsoldatot, amelynek koncentrációja 1,18 mg/ml (12 ml) egy 0,22 pm-es szűrőn a steril tubusba szűrjük, majd a szűrőt 5 ml vízzel átmossuk ugyanabba a tubusba. A tubus tartalmát ezután a gélhez adagoljuk egy fecskendő segítségével. A gélt alaposan elkeverjük egy lapátos keverővei az EGF egyenletes diszpergálására. A gélt ezután egy autoklávozható nyomás alatti tartályba visszük. Nitrogéngázzal a gélt átnyomatjuk a nyomástartályon keresztül egy 10 ml-es fiolába egy steril csövön keresztül. A mintát aktivitásra vizsgáljuk, és kimutatjuk, hogy 15,6 pg EGF/ml a koncentráció. A minta mentes mikroorganizmusoktól a 10 g-os mintában. A gél viszkozitása 490 000-520 000 mPa s közötti érték. Ezt a gélkészítményt alkalmazzuk sertéseknél és tengerimalacoknál egy részleges vastagságú bőrbevágási modellben, és
HU 223 880 Β1 kimutatjuk, hogy a gél fokozza a sebgyógyulás mértékét és minőségét a kísérleti állatoknál.
6. példa
Pluornicgél-készítmény
A poli(etilén-oxid)-poli(propilén-oxi) blokkkopolimerek (Pluronic termékek) nagy hatásúak a topikális hatóanyag-szállító rendszerekben, mivel fordított termikus gélesedési tulajdonságai vannak, igen jók a hatóanyag-felszabadulási jellemzők és alacsony a toxicitás értéke. A kis molekulatömegű Pluronic poliolok nem mutatnak gélesedét semmilyen koncentrációban vízben. A Pluronic F-88 50-60%-os minimumkoncentrációnál alkot gélt szobahőmérsékleten. A Pluronic F-68 40%-os koncentrációban gélesedik szobahőmérsékleten, míg a Pluronic-108 30% koncentrációban. A Pluronic F-127 csupán 20% koncentrációban alkot gélt 25 °C-on vízben. A Pluronic F-68, F-88, F-108 és F-127 gélek alkalmazhatók az EGF szabályozott szállítására égési sebeknél és más egyéb donoroldali készítményekben. A gélnek izotóniásnak kell lenni és előnyös, ha a pH-értéke 6-8, előnyösen 6,5-7,5 közötti érték.
A Pluronic gélek egy fontos tulajdonsága azon képességük, hogy a hőmérséklet és a polimerkoncentráció függvényében gélesednek. Gél képződik, ha a Pluronic oldatot melegítjük. így, ha a gél alacsony viszkozitású oldat szobahőmérsékleten, de ha az az emberi testtel érintkezik és a testhőmérsékletre melegedik, a viszkozitása megnő és az oldat gélesedik. Az EGF-et kombinálhatjuk a Pluronic-kal folyékony állapotban és így visszük fel a sebre. Ennél a pontnál gélesedés képződhet, ami hatásosan csökkenti az EGF sebbe való felszabadulásának mértékét. Ez lehetővé teszi a nyújtott érintkezési időt az EGF és a seb epitheliuma között. A gélt felvihetjük folyadék formájában vagy egy sebkötözővel kombinációban (a folyadékkal átitatva), így egy mechanikai hordozót biztosítunk. A Pluronic gélek előnyei közé tartozik, hogy a gélek szűréssel stabilizálhatok, és hogy a seb megnyújtott időn át érintkezik az EGF-fel.
Egy EGF-tartalmú Pluronic F-127 gélt a következők elkeverésével állítunk elő: 1,8 g nátrium-foszfátmonohidrát, 5,48 g dinátrium-foszfát-heptahidrát és 40,90 g mannit 1000 ml desztillált vízzel. Az oldat pH-ját 7-re beállítjuk, majd lehűtjük 4 °C-ra. A lehűtött oldathoz fokozatosan Pluronic F-127 anyagot (200 g, BASF) adagolunk egy lapátos keverővei való állandó keverés közben. Az oldatot kb. 30 percen át keverjük, majd 4 °C-on tartjuk 1 éjszakán át. Az így kapott vizes oldathoz az EGF-et adagolhatjuk mielőtt gélt alakítunk ki, vagy bekeverhető azután, hogy a Pluronic 127-et oldottuk az oldatban. 100 pg/ml koncentrációjú EGF biztosítására 1,812 ml EGF oldatot (1,38 mg/ml) adagolunk 23,188 g 20%-os Pluronic F-127 gélhez. A kapott oldat igen folyadékszerű. Az oldat viszkozitása 35 °C-ra való melegítéskor növekszik, mint az a következő 1. táblázatból kitűnik.
1. táblázat
Hőmérséklet (°C) Viszkozitás (mPa s, 0,5 f/perc)
0-16 nem kimutatható
18 4 000
19 250 000
21 500 000
28 655 000
30 685 000
37 6 560 000
További Pluronic készítményeket állítottunk még elő 1 000 000-12 000 000 közötti viszkozitásértékekkel. Vizsgáltuk a készítmények (11,5*106 mPa-s) felszabadulási jellemzőit és megállapítottuk, hogy a készítményekből 1 óra alatt az EGF 85%-a felszabadul.
7. példa
HPMC-gél-készitmények
Különböző HPMC-gél-készítményt állítunk elő. A géleket igen kis molekulatömegűtől egészen a nagy molekulatömegű HPMC alkalmazásával készítjük. A molekulatömeg értéke előnyösen 80 000-240 000 közötti érték. Az igen alacsony molekulatömegű polimerekből (Methocel E15LV) 15-20% HPMC szükséges a gél kialakulásához. Igen nagy molekulatömegű polimerekből (Methocel K100M) 1-3% koncentrációval nyerünk géleket. Géleket állítunk elő különböző fajtákból és különböző koncentrációkkal a felszabadulási kinetika tanulmányozására, a pH-értékét mindegyikénél 7,2-re állítjuk be. Az EGF felszabadulásának mértéke arányos az oldható gél viszkozitásával.
Egy 1500 ml-es lombikba bemérünk 0,83 g nátrium-foszfát-monohidrátot, 7,24 g dinátriumfoszfát-heptahidrátot, 6,22 g NaCI-ot és 500 ml steril, irrigáció céljára alkalmas vizet. A keveréket mágneses keverővei a szilárd anyagok feloldódásáig keverjük, majd a pH-értékét 7,7-re beállítjuk. Az oldatot ezután 80 °C-ra melegítjük keverés közben, majd hozzáadunk 30 g HPMC-t (Methocel K100M; Dow) egy 40 mesh sűrűségű szitán keresztül. Ezután a melegítést megszüntetjük és még 10 percen át keverjük az oldatot. A visszamaradó 500 g vizet jég formájában adagoljuk. A keverést kézzel végezzük, mivel a keverék igen viszkózussá válik. Hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, majd 1 éjszakán át 4 °C hőmérsékleten tartjuk. Az anyagból 130 g-ot eltávolítunk, elkeverjük 13,4 ml 1,12 mg/ml steril EGF oldattal egy lapátos keverővei, így nyerjük a 100 pg/ml koncentrációjú EGF anyagot.
A kapott gél viszkozitása 54 000-950 000 mPas szobahőmérsékleten. A különböző HPMC-gélkészítményekből az EGF felszabadulását a következő
2. táblázatban mutatjuk be.
HU 223 880 Β1
2. táblázat
Minta Brokfield-viszkozitás (mPas) EGF-felszabadulás
25 °C 37 °C
2085-91-1 E4M 4% 112*103 102*103 75% 5 órán belül
2085-92-2 E4M 5% 274*103 300*103 75% 5 órán belül
2085-92-2 E4M 6% 652*103 946*103 50% 5 órán belül
2085-91-2 F4M 4% 112*103 286*103 75% 5 órán belül
2085-93 K15M 3% 102*103 70*103 75% 5 órán belül
2085-91-3 K4M 4% 92*103 54* 103 75% 5 órán belül
8. példa
Hialuronsavgél-készítmények A hialuronsav (HA) egyike a mukopoliszacharidoknak, ezek hosszú láncszerkezetűek és N-acetilglükózamin és glükoronsav-diszacharid egységek ismétlődésével épülnek fel. A HA a természetben is előfordul mikroorganizmusokban és az emberi és más egyéb, állati bőrkötőszövetekben. A HA molekulatömege 50 000-8 000 000 közötti érték, függően az előfordulási helyétől, az előállítási eljárástól és a meghatározás módjától. A nagy viszkozitású HA-oldatok kenőtulajdonságúak és kiváló nedvesítőhatással rendelkeznek. Előfordul a kötőízületi nedvekben, a szemgolyó üvegtestében, a köldökzsinórban, a bőrben, véredényekben, és porcokban. Mint kenőanyag és ütést abszorbeáló szer működik, és ez valószínűleg a vízvisszatartó képességének tudható be, valamint annak, hogy képes bizonyos specifikus proteinekhez kötődni. Egy igen biztonságos molekulának tekinthető az emberi testen belül történő felhasználásnál. így belső sebgyógyításra, így például az ízületek gyógyítására vagy a szem elülső kamrájának gyógyítására alkalmazható. 1%-os nátrium-hialuronát (molekulatömeg 4 000 000, MedChem) oldatot készítettünk, amely 100 pg/ml EGF-tartalmú. Az 1%-os HAoldat viszkozitása 44 000 cps. A találmány szerinti HA/EGF készítményről kimutattuk, hogy stimulálja a szem elülső kamrájának reendotelializálódását.
9. példa
EGF felszabadulásának kinetikája dózisegységekből
Az EGF-dózisegységek nyújtott felszabadulásának hatásosságát vizsgáltuk in vitro diffúziós sejtrendszerekben és meghatároztuk a T25 és értékeket. Az EGF felszabadulása az EGF gélből való diffúziójával és a gélmátrixnak az oldódásával megy végbe. Ha ezt a két eljárást vesszük a legvalószínűbb mechanizmusnak, amellyel az EGF in vivő biohozzáférhető, a HPMC nyújtja meg az EGF felszabadulását a legnagyobb mértékben, itt a T25 és Tgo értéke 1,2, illetve 5,9. Az eredmények azt mutatják, hogy a polimer molekulaszerkezete sokkal fontosabb, mint a polimer koncentrációja a T értékek megnyújtásában. A sómentes közegben (desztillált víz) előállított gélek, amelyeket állandó körülmények között vizsgáltunk, alacsony T értéket eredményeznek. Ez következhet a sómentes gélek gyors oldódása és kis viszkozitási értékéből. Ezért előnyös, ha a találmány szerinti gélek nem sómentesek. Kimutattuk, hogy a találmány szerinti gélek T értékét növelhetjük, ha módosítjuk a polimert például hidrofób vagy hidrofil oldalláncok, ionpárcsoportok, fémionok, térhálósító szerek, az EGF-hez affinitással rendelkező csoportok bevitelével, és így szabályozzuk az EGF felszabadulását a kapott termékből.
A 3. táblázatban összefoglaljuk az EGF dózisegységekből való felszabadulásának kinetikus adatait. A táblázatban a HPMC után megadott különböző betűk a polimer százalékos szubsztitúciójára utalnak. így például K=2208 22% metilezett és 8% hidroxi-propilezett szubsztitúciót jelent; F=2906 és E=2910. A betűt követő számérték (például 100 a K után) a viszkozitásra utal 2%-os vizes oldatban 1000 cps-ben megadva. Az AQ jelentése, hogy a gél sómentes oldat. Mindegyik gélt foszfáttal pufferolt sóoldatban (PBS) állítottuk elő, kb. pH=7 értéknél. A T értékeket órában adjuk meg.
3. táblázat
EGF dózisegységekből való felszabadulásának kinetikus adatai
Polimer Viszkozitás (mPas) ^25 T50
HPMC K100M (mw 240 000) 1% - 0,0854 1,000
2% 287*103 0,4687 1,9172
3,5% 116*10® 1,2270 5,8528
4,0% - 0,8336 4,1386
5,0% 3,07*10« 0,8807 3,5808
HPMC K-15M (mw 120 000) 3% 122*103 0,857 2,0635
4AQ% 331*103 0,2727 1,6900
HU 223 880 Β1
3. táblázat (folytatás)
I Polimer Viszkozitás (mPas) T25 T*50
HPMC K-4M (mw 86 000) 4% 96*103 1,0476 2,6349
HPMC F-4M 4% 122*103 0,7619 1,8730
HPMC E-4M (mw 86 000) 4% 128*103 1,0159 2,2657
5% 312*203 0,8615 1,8462
HPMC E-4M (mw 86 000) 5AQ% 240x103 0,3211 1,6044
6AQ% 680x103 0,6944 3,0040
Carbopol 934P (mw 3*106) 0,5% 494x103 0,2727 0,7300
Pluronic F-127 (mw 12 000) 20% 1,1χ106 0,1936 0,3548
10. példa
Poliakrilamidgél-készltmények
Poliakrilamid/EGF gélkészítményeket állítunk elő, poliakrilamidként Cyanamer N-300 és Cyanamer 20 N-300 LMW (mindkettő American Cyanamid termék) felhasználásával. A Cyanamer N-300 molekulatömege 5-6 000 000 és a Cyanamer N-300 LMW molekulatömege 13 000 000.
A következő összetételnek megfelelő poliakrilamid- 25 géleket állítjuk elő úgy, hogy a poliakrilamidpolimert az előre elkevert sóoldathoz adagoljuk. Ezeket a géleket vizsgáljuk azután az EGF felszabadulására.
4. táblázat
Összetétel Koncentráció (tömeg%)
2085-140A 2085-140B
Cyanamer N-300 4,0 -
Cyanamer N-300 LMW - 4,0
Nátrium-klorid 0,049 0,049
Kálium-klorid 0,075 0,075
Kalcium-klorid 0,048 0,048
Magnézium-klorid 0,080 0,080
Nátrium-acetát 0,890 0,890
Nátrium-citrát-dehidrát 0,170 0,170
Steril víz 94,688 94,688
Viszkozitás, mPa s 552x103 132x103
1,809 g Cyanamer N-300 (2085-140A) poliakrilamidgélhez 72,4 μΙ 125l-EGF-ből és EGF-ből álló keveréket adagolunk és két 3 ml-es fecskendőben összeke- 50 verjük. 300-400 mg így kapott gélt ezután egy Franz diffúziós cella donoroldatába helyezzük. Meghatározott időintervallumokban 50 μΙ aliquot részt veszünk ki a felfogó pufferból és gamma-számlálóval megszámoljuk, a puffer összetétele a következő: 3,5 ml PBS, pH=7,2, 55 plusz 0,4% BSA (szarvasmarha-szérumalbumin) és 0,02% nátrium-azid. Hasonlóképpen 1,11 g Cyanamer N-300 LMW (2085-140B) poliakrilamidgélhez 44,5 μΙ 125l-EGF-ből és EGF-ből álló keveréket adagolunk és vizsgáljuk az EGF felszabadulását. 60
További poliakrilamidgélt (2085-138C) állítunk elő, ennek összetétele a következő.
5. táblázat
Összetétel 2085-138C
Cyanamer N-300 7,0 g
Thimerosal 0,2 g
Steril víz 192,8 g
Viszkozitás 258*103
pH 7,54
A 2085-138C gélt alkalmazzuk 10 μο/ml EGFtartalmú gél előállításához. Bemérünk 5 g 2085-138C gélt egy 87 ml-es szérumfiolába és hozzáadunk 50 μg 1 mg/ml EGF-et (proteinvizsgálat 1,41 mg/ml).
Az EGF-et egy sebkötöző gézre visszük fel, és igen kedvező felszabadulási jellemzőket nyerünk. A sebkötöző géz egy gélfilm, amelyet poliakrilamid/agar keverékből állítunk elő (Geliperm, Geistlich-Pharma, Wolhusen, Svájc). A kötszert EGF-fel bevonjuk úgy, hogy EGF vizes oldatával átitatjuk. 24 óra alatt az EGF kb. 70%-a felszabadul.
Stabilizált PDGF cellulózpolimer gélkészítmény
Karboxi-metil-cellulóz (CMC)-gélt állítunk elő. A kísérletnél felhasznált CMC gyógyszerészeti minőségű nátrium-karboxi-metil-cellulóz (Aqualon Co., Wilmington, DE), koncentrációja 2,4%, molekulatömege 900 000-2 000 000 dalton közötti érték. A CMCgéleket rhPDGF-BB anyaggal (Chiron Corporation, Emeryville, California) állítjuk elő. Azt találtuk, hogy a PDGF cellulózpolimer gélkészítmények polimerstabilitása nagymértékben növekszik, ha a készítménybe töltéssel rendelkező kémiai anyagot, így például töltéssel rendelkező aminosavat vagy fémiont adagolunk. A „stabilitás” kifejezés a PDGF mitogénaktivitásának veszteségét jelenti, vagy a gélből felszabadult PDGF-fehérje mennyiségének növekedésére utal. Ezek a PDGF-gél-készítmények alkalmasak sebgyógyításra.
A készítményeket in vivő vizsgáltuk sebgyógyitó hatásukra vonatkozóan tengerimalacokon a részleges vastagságú bőrbevágási modellben.
HU 223 880 Β1
A tengerimalac részleges vastagságú bőrbevágási sebgyógyítási modellnél két részleges vastagságú sebet ejtünk tengerimalacokon (4-8 kísérleti állatcsoportonként) egy bőrkés alkalmazásával. A 3*1 cm méretű sebeket (általában 0,4-0,8 mm mély) naponta egyszer az első 5 napon át (0-4 napok) 0,3 ml géllel kezeltük, majd steril abszorptív hatású gézzel befedtük. A gézeket minden kezelésnél egy záróhatású kötszerrel lefedtük és védőbandázzsal beburkoltuk. A sebeket a 7. napon értékeltük. A granulációs szövetágy átlagos vastagságát úgy határoztuk meg, hogy a Gomori-féle trikrómfestett szövettani lemezeket a komputerizált digitalizáló planiméterre vetítettük 50-szeres nagyításban. A vastagságot úgy kaptuk meg, hogy meghatároztuk egy standard hosszúságú granulációs szövet területét a sebágyban, majd elosztottuk a hosszúsággal. Minden seb esetében három szövetszekciót vizsgáltunk, és tengerimalaconként két sebet átlagoltuk, és így kaptunk egy értéket egy állatra vonatkozóan.
Ennél a modellnél a PDGF koncentrációja 10-300 pg/g a CMC-készítményben, ez konzisztensen 2-3-szoros (vagy nagyobb) növekedést eredményezett a sebeknél a granulációs szövetágy vastagságában. A granulációs szövet egy újonnan képződött kötőszövet és véredény, és főkomponense a sebgyógyulásnak. A granulációs szövet fizikailag kitölti a sebhelyeket. Továbbá, a granulációs szövet gazdag vérellátást biztosít az epidermis számára azért, hogy az benője a sebfelületet. így a granulációs szövet egy igen lényeges komponense a sebgyógyulásnak.
A következő táblázatban összefoglaljuk 1. a PDGF hatásosságát a CMC-gélben, 2. a lizin hiányának hatását a PDGF hatásosságára (6. táblázat), 3. a hatásosság megmaradását 30 hónapon át (2-8 °C-on való tárolásnál) a lizinnel stabilizált készítményre vonatkoztatva (7. táblázat), és 4. a PDGF hatásosságának megmaradását steril, nem konzervált CMC-készítményben (lizinnel) (8. táblázat).
6. táblázat
PDGF és lizin hatása a granulációs szövetvastagságra tengerimalacoknál a részleges vastagságú sebmodellnél
Kezelés Granulációs szövetvastagság (mm) (átlag ±S.E.M.) N (állatok száma)
Eredeti CMC 63,3±15,9 7
PDGF (30 pg/g) CMC-ben 161,9±25,4* 7
CMC+0,1% lizin 64,4±8,9 7
PDGF (30 pg/g) CMC-ben + 0,1% lizin 162,6±23,5* 8
CMC+0,5% lizin 59,9±5,6 8
PDGF (30 pg/g) CMC-ben + 0,5% lizin 144,6±21,8* 7
* Szignifikáns mértekben különbözik a hordozós kontrolitól (p<0,05)
A táblázat adataiból kitűnik, hogy a rekombináns humán vérlemezke-eredetű növekedési faktor BB CMCben igen hatásos a granulációs szövet mennyiségének növelésében a kísérleti tengerimalacok sebe esetén (itt a faktor 2,5-szeres). Az adatokból kitűnik továbbá, hogy a 0,5%-ig terjedő lizinmennyiség nem befolyásolja a PDGF hatásosságát a CMC-készítményben.
7. táblázat
Tárolt PDGF hatása lizinnel stabilizált CMC-készítményben a granulációs szövetvastagságra tengerimalacoknál részleges vastagságú sebmodell esetén
Kezelés Granulációs szövetvastagság (átlag ±S.E.M) N (kísérleti állatok száma)
CMC* 81,4±15,5 6
PDGF (30 pg/g) CMCben 30 hónap után 311,3±32,4“ 6
PDGF (30 pg/g) CMCben friss készítmény 217,3±22,3‘* 6
* Mindegyik készítmény 0,5% lizint tartalmaz.
** Különbözik a hordozós kontrolitól (p<0,05).
Az adatokból kitűnik, hogy a 0,5% lizint tartalmazó készítmény megtartja a hatásosságát a granulációs szövetképződés elősegítésére a kísérleti sebeknél legalább 30 hónapon át.
8. táblázat
PDGF hatása steril, nem konzervált CMC-készítményekben a granulációs szövetvastagságra tengerimalacoknál részleges vastagságú sebmodellnél
Kezelés Granulációs szövetvastagság (átlag ±S.E.M) N (kísérleti állatok száma)
Steril CMC** nem konzervált 150,1+48,5 4
PDGF (100 pg/g) steril CMC-ben nem konzervált 652,5+58,6*** 4
PDGF (100 pg/g) steril CMC-ben konzervált 635,1 ±73,5*** 4
PDGF (100 pg/g) nem steril CMC-ben konzervált 752,2±79,5*** 4
* Ezt a vizsgálatot a lizines vizsgálattól eltérő laboratóriumban, lényegesen mélyebb sebbel végeztük úgy, hogy a hordozós kontroll bázisvonala a granulációs szövetvastagság mérésénél magasabb volt.
** Mindegyik készítmény 0,5% lizint tartalmaz.
*** Különbözik a hordozós kontrolitól (p<0,05).
A fenti adatokból kitűnik, hogy a steril, nem konzervált PDGF/CMC készítmény (0,5% lizin) hatásos a sebeknél a granulációs szövetvastagság kialakulásának elősegítésében.
HU 223 880 Β1
Az a mechanizmus, amely révén egy töltéssel rendelkező kémiai anyag stabilizálja a PDGF/cellulózpolimer készítményt, nem ismert. Anélkül, hogy bármilyen elmélethez kötődnénk, a stabilizálóhatás valószínűleg a töltéssel rendelkező anyag és a PDGF-lizinek közötti versengés eredménye a cellulózpolimer végcsoportjainak redukálására vonatkozóan, és/vagy a cellulózpolimer szabad karboxilcsoportjai és a PDGF-lizinek közötti töltés kölcsönhatás csökkenésének eredménye. A PDGF és cellulózpolimerek közötti töltés kölcsönhatásokat például CMC esetén kimutattuk a laboratóriumunkban. A pozitív és negatív töltésekkel versengeni képes töltéssel rendelkező kémiai anyagok képesek csökkenteni a PDGF és cellulózpolimer közötti töltés kölcsönhatásokat, így növelik a PDGF stabilitását. Pozitív töltésű ellenionokat vizsgáltuk azon képességükre vonatkozóan, hogy fokozzák a CMC-gélekből a PDGFvisszanyerést.
A PDGF-CMC stabilitás kérdésében először azt kell megértenünk, hogy hogyan veszítheti el a PDGF az aktivitását CMC jelenlétében. Az egyik lehetséges mechanizmus az aktivitás csökkenésével kapcsolatban, hogy a CMC adszorbeálja és magában foglalja a PDGF-et. Ezen adszorpció során az erősen pozitív töltésű PDGF-B homodimer (22 arginincsoportot és 14 lizincsoportot tartalmaz) beburkolásra kerül a negatív töltésű CMC-mátrixba, amely nagy mennyiségű szabad karboxilcsoportot tartalmaz. A PDGF/CMC-re vonatkozó vizsgálatainkkal kimutattuk a mitogénaktivitás csökkenését és a felszabadult protein mennyiségének csökkenését akkor, ha kevés ellenion vagy egyáltalán nincs ellenion jelen ezen töltés kölcsönhatás ellentételezésére.
A PDGF stabilitásának fokozására a CMC-gélben csökkenhetjük a PDGF közötti töltés kölcsönhatást, vagy minimalizálhatjuk a CMC redukálóvégeivel való kölcsönhatást egy kompetitív pozitív vagy negatív töltésű ellenion adagolásával. Az egyik kísérletnél a lizin (0,51%) több mint 50%-kal növelte meg a PDGF stabilitását CMC-ben. Bármilyen vegyület, amely képes csökkenteni vagy versengeni a PDGF-CMC töltés kölcsönhatással, vagy a CMC redukálóvégeivel kölcsönhatásba lépni, fokozhatja a PDGF stabilitását CMCben. A töltéssel rendelkező kémiai anyagokat a találmány szerinti készítményekhez kezdetben adagoljuk só formában. A sók ezután a gél vizes környezetében disszociálnak, és így a megfelelő töltéssel rendelkező anyagot eredményezik. A „töltéssel rendelkező kémiai anyag” kifejezés magában foglalja például a következő, gyógyszerészetileg elfogadható változatokat: sók, így például cink- és magnézium-klorid; pufferek, így például mono/dietanol-amin, fumársav, almasav, kálium-citrát és nátrium-glükonát; aminosavak, így például lizin, arginin, hisztidin, aszparaginsav, glutaminsav, alanin, metionin, prolin, szerin, aszparagin, cisztein, aminoguanidin és protamin; ionos felületaktív anyagok, így például olajsav és olet-5; továbbá szintetikus poli-kationos vagy ionos polimerek, így például poliaminosavak. A „gyógyszerészetileg elfogadható” kifejezés azt jelenti, hogy az említett anyagok alkalmasak emberek vagy egyéb emlősök kezelésénél, anélkül, hogy káros hatások, így például toxicitás, hólyagosodás vagy a nyálkahártya, vagy a bőrszövetek fehéredése következne be.
Az alábbiakban ismertetésre kerülő kísérleteken túlmenően a 0,5% aminoguanidin fokozta a cellulózpolimer gélből a PDGF visszanyerését. Az aminoguanidin egy jobb kompetitor mint a lizin a proteinek nemenzimatikus glükozilálásában, mivel egy erős nukleofil anyag.
A találmány magában foglalja azokat a készítményeket, amelyek bizonyos cellulózpolimereket vagy egyéb polimereket tartalmaznak potenciális redukálóvégekkel, gyógyszerészetileg elfogadható nukleofil ellenionokkal együtt, így például lizinnel vagy aminoguanidinnal együtt.
1. kísérlet
Mintaként a következőket használtuk: rhPDGF-B elkeverve CMC-placebóval, 0,5 órás és rhPDGF-BB CMC-ben 60 napos, 4 °C hőmérsékleten. A 9. táblázatban összefoglaljuk a Zn++ koncentrációjának hatását a PDGF visszanyerésre (mennyiségére). A 0 napos minta nagyobb százalékos visszanyerést mutat mint a 60 napos ugyanolyan Zn++-koncentráció mellett. Ezen adatokból kitűnik, hogy a PDGF ionosán kötődik a CMC-hez, és hogy az idő folyamán ez a kötés feltehetően térhálósítja a CMC-t úgy, hogy több Zn++ szükséges a PDGF-felszabaduláshoz.
A PDGF mennyiségét fordított fázisú HPLC-vel határoztuk meg C4 300 A makrogyöngytöltetű oszlopon 10-70% acetonitrilgradiens + 0,1% TFA alkalmazásával.
9. táblázat rhPDGF %-os visszanyerése
Molaritás, Zn 0. nap 60. nap
0,075 84 71
0,15 88 81
0,3 97 90
A 10. táblázatban összefoglaljuk más, töltéssel rendelkező vegyület hatását a PDGF visszanyerésére CMC-gélből. 0,5 g 60 napos PDGF-mintát feloldottunk 10 ml H2O-ban 0,01% BSA jelenlétében (ezt használtuk kontrollként) és az alábbiakban felsorolt vegyületeket adagoltuk mindegyik mintához.
10. táblázat
Minta % PDGF
A kontroll 50
B 0,2 M NaCl (mono+) 42
C 0,2 M ZnCI2 (di++) 64
D 0,2 M CaCI2 (di++) 63
E 0,2 M MgCI2 (di++) 69
F 0,5% lizin (+, ikerion) 64
G 0,5% glicin (ikerion) 50
HU 223 880 Β1
A fenti adatokból kitűnik, hogy az erősebb pozitív töltésű Zn, Ca, Mg és lizin minimalizálni tudja a PDGFCMC töltés kölcsönhatást. Sugalmazzák továbbá, hogy a PDGF erőteljesebben összecsavarodottá vagy beburkolttá válik a CMC-matricákba.
2. kísérlet
Ennél a kísérletnél különböző aminosavakat vizsgáltunk a PDGF CMC-ből való visszanyerésére. A következő mintákat vizsgáltuk: 100 pG PDGF per gramm CMC, pH 6, puffer 0,13 mól NaCI plusz 0,5% valamely aminosav. A mintákat 46 °C-on 2 napon át inkubáltuk polipropiléncsövekben, majd az előzőkre vizsgáltuk RP-HPLC-vel.
Az összehasonlító vizsgálatokból származó adatokat, amelyek a nempoláros és poláros aminosavak PDGF visszanyerésére kifejtett hatását mutatják, a következő 11. táblázatban foglaljuk össze. A nagyobb töltésű aminosavakat tartalmazó készítmények (lizin, aszpartinsav és glutaminsav) mutatják a legnagyobb PDGF-visszanyerést. Mindegyik aminosav ikerionos pH=7 környezetében. Ily módon mindegyik fokozza a visszanyerést függően az R csoport töltésétől. A nagyobb töltésű R csoport (például lizin) nagyobb stabilizáló hatású.
11. táblázat
Különböző aminosavak hatása a PDGF visszanyerésre CMC-ben
Minták % visszanyerés viszonyítva a nulla időpont kontrolihoz
Kontroll, nulla időpont 100,0
CMC aminosav nélkül 37,3
Nempoláros oldalláncok
Glicin 43,4
Alanin 37,5
Metionin 40,8
Prolin 40,2
Töltéssel nem rendelkező poláros oldalláncok
Szerin 48,7
Aszpargin 39,9
Tirozin 45,5
Cisztein 42,0
Töltéssel rendelkező poláros oldalláncok
Lizin pk9 64,0
Aszpartinsav pk4 70,4
Glutaminsav pk4 58,2
Vizsgáltuk további, különböző töltéssel rendelkező vegyületek hatását az PDGF visszanyerésre CMC-ben, ezeket az adatokat a 12. táblázatban foglaljuk össze. A kíséreltnél 100 pg PDGF-et alkalmaztunk 1 g CMCben. Az adatokból kitűnik, hogy ha a NaCI-koncentrációt 0 M-ról 1,13 M-ra emeljük, a PDGF-visszanyerés százalékos értéke 32%-ról 96%-ra nő. Az Mg++ 0,1 mól koncentrációnál 94,8%-os visszanyerést biztosít.
12. táblázat
Különböző töltéssel rendelkező vegyületek hatása a PDGF visszanyerésre CMC-ben
Minták % visszanyerés a nulla időponthoz viszonyítva
Kontroll, nulla időpont 100,0
CMC+0,0 M NaCI (csak víz) 32,1
CMC+0,0 M NaCI (csak puffer) 27,6
CMC+0,13 M NaCI 65,9
CMC+0,33 M NaCI 82,8
CMC+0,63 M NaCI 90,7
CMC+0,94 M NaCI 93,8
CMC+1,13 M NaCI 96,8
CMC+0,0 M NaCI+MgCI2 0,1M 94,8
CMC+0,13 M NaCI+Gly 0,5% 76,7
CMC+0,13 M NaCI+Lys 0,5% 85,5
3. kísérlet rhPDGF mitogénstabilitását vizsgáltuk 1 hónapos időtartamban lizin jelenlétében és lizin nélkül, a kapott eredményeket a 13. táblázatban foglaljuk össze. Az adatokat a fibroplast timidinfelvételi módszerrel határoztuk meg és rhPDGF-tartalomban adjuk meg. Az adatokból kitűnik, hogy a lizin jelenléte a készítményekben fokozza a készítmény mitogénaktivitását.
13. táblázat rhPDGF pg/g
Lizin nélkül (n=10) Lizinnel (n=4)
25 °C 16,8±4 31,2±7
30 °C 10,4±2 27,0±0,5
rhPDGF-BB cellulózpolimer készítmények
Az rhPDGF-BB tartalmú cellulózpolimer gélkészítményeket az általánosan ismert készítmény-előállítási eljárások szerint állíthatjuk elő. Általában úgy járunk el, hogy a kívánt alkotókat bensőségesen elkeverjük. A „bensőséges elkeverés” kifejezés azt jelenti, hogy a készítményeket lényegében egyenletes keverékké alakítjuk úgy, hogy egyik alkotó sem dúsulhat fel helyileg.
A találmány szerinti készítményekben a PDGF mennyisége „sebgyógyításra hatásos mennyiség”, amely olyan mennyiséget jelent, amely kielégítő mértékben képes fokozni a sebgyógyulás mértékét. Az orvosi területen ismert, hogy egy gyógyászati anyag hatásos mennyisége változik magától az adott szertől, a kezelés körülményeitől, valamint a kezelt személytől. Ennek következtében a hatásos mennyiséget nem le12
HU 223 880 Β1 hét meghatározni minden szer esetén. így a PDGF sebgyógyításra hatásos mennyisége az a mennyiség, amely a készítményben jelen van ahhoz, hogy elegendő hatást tudjon kifejteni a kezelni kívánt egyén testén a meghatározott ideig, és ez a mennyiség általában kevesebb, mint az általánosan szokásos. 1 g találmány szerinti készítmény általában 1 pg-100 pg PDGFhatóanyag tartalmaz. Előnyösen a készítmények PDGF-tartalma 1 pg-300 pg közötti érték.
A találmány szerinti készítmények tartalmazhatnak még további összetevőket is, így például puffereket, konzerválószereket, tonicitást beállító szereket, antioxidánsokat, további polimereket (például a viszkozitás beállítására vagy szaporítás céljára). Az ilyen anyagok közé tartoznak például a következők: foszfát-, citrátvagy borátpufferek; timerozál, szorbinsav, metilparaben vagy propil-paraben, m-krezol és klór-butanol konzerválószerek; nátrium-klorid és/vagy cukrok a tonicitás beállítására; polimerek, így például poli(vinilalkohol), poliakrilsav és poli(vinil-pirrolidon); vivőanyagok, így például mannit, laktóz, szacharóz, etiléndiamin-tetraecetsav stb.
A következő 14. táblázatban összefoglalunk néhány cellulózpolimer gélkészítményt, amely rhPDGFBB hatóanyagot tartalmaz. A készítmény viszkozitása 1000-150 000 cps közötti érték szobahőmérsékleten.
14. táblázat
Összetevők Koncentrációin- tervallum
rhPDGF-BB 1,0-1000 mg/g gél t%
Cellulózpolimer 1,5-3,0% t%
Töltéssel rendelkező kémiai anyag 0,1-3,0% t%
Konzerválószer(ek) 0,15-0,25% t%
A következő 15., 16., 17. táblázatokban összefoglalunk néhány konkrét készítményt, amelyek rhPDGF-B hatóanyagot tartalmaznak.
15. táblázat
összetevő Mennyiség t%
Tisztított víz 100g 96,02
Mennyiség/100 g tisztított víz
Metil-paraben 0,1620 g 0,16
Propil-paraben 0,0180 g 0,02
Nátrium-acetát-trihidrát 0,1570 g 0,15
Lizin-hidroklorid 0,5000 g 0,48
Nátrium-klorid 0,8086 g 0,78
m-Krezol 0,0900 g 0,09
Jégecet 0,0065 g 0,01
összetevő Mennyiség t%
Tisztított víz 100g 96,02
Mennyiség/100 g tisztított víz
Nátrium-karboxi-metil- cellulóz 2,4000 g 2,30
g/100 g gél
rhPDGF-BB (raktártörzskészlet) 0,0036 g
16. táblázat
Összetevők Mennyiség/250 kg Mennyiség/g gél
Ecetsav 15,6 g 0,06 mg
Nátrium-klorid 1946,3 g 7,70 mg
Nátrium-acetát-trihidrát 377,9 g 1,51 mg
L-lizin-monohidroklorid 1203,5 g 4,81 mg
Injekció céljára alkalmas víz 240700,0 g* 962,80 mg
Nátrium-CMC 5776,8 g 23,11 mg
rhPDGF-BB (raktártörzskészlet) 25,0 g 0,10 mg
*Az össz-WFI mennyisége 2500 g a folyékony hatóanyagban.
17. táblázat
Összetevők g/100ggél
rhPDGF-BB 0,01
Nátrium-karboxi-metil-cellulóz 2,40
Nátrium-klorid 0,8086
N átri u m-acetát-tri h id rát 0,1570
Jégecet 0,0065
Metil-paraben 0,1620
Propil-paraben 0,0180
m-Krezol 0,0900
L-lizin-hidroklorid 0,5000
Injekció céljára alkalmas víz 100,00
(az alkotókat g/100 g vízre számolva adjuk meg, kivéve az rhPDGF-B hatóanyagot, amely g/100 g gélre vonatkozik).
A találmányt az előnyös kiviteli formákon keresztül mutattuk be közelebbről. Nyilvánvaló azonban, hogy ezek szakember számára nyilvánvaló változatai is az oltalmi körbe tartoznak. A szakember különösen változtatni képes a molekulatömegét és a százalékos mennyiségét a különböző polimereknek a kívánt viszkozitásértékek eléréséhez. Ugyancsak képes a szakember más egyéb polimereket vagy növekedési faktorokat alkalmazni, mint amelyeket megemlítettünk. Ebből következik, hogy a találmányt a példák nem korlátozzák, az oltalmi kört az igénypontok határozzák meg.

Claims (12)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Gyógyszerkészítmény, amely a következőket tartalmazza:
    a) sebgyógyításra hatásos mennyiségű vérlemezke-eredetű növekedési faktor (PDGF);
    b) gyógyszerészetileg elfogadható cellulózpolimer; és
    c) gyógyszerészetileg elfogadható, töltéssel rendelkező kémiai anyag a következők közül: pozitív töltésű aminosavak, így lizin, arginin, hisztidin, aszparaginsav, glutaminsav, alanin, metionin, prolin, szerin, aszparagin, cisztein, pozitív töltésű poliaminosavak, protamin, aminoguanidin és cink- vagy magnéziumionok, amely készítmény egy vizes gél, amelynek a viszkozitása 1000-500 000 mPa s közötti érték szobahőmérsékleten.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti készítmény, amelyben a PDGF PDGF-B homodimer.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti készítmény, amelyben a PDGF mennyisége 1 pg és 1000 pg közötti érték 1 g készítményben.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, amelyben a cellulózpolimer valamely következő anyag: karboxi-metil-cellulóz, hidroxi-propil-metilcellulóz vagy metilcellulóz.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, amelyben a cellulózpolimer mennyisége 1,5-3 tömeg% és a polimer molekulatömege 450 000-4 000 000 közötti érték.
  6. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, amelyben a töltéssel rendelkező anyag mennyisége 0,1-3 tömeg%.
  7. 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, amelynek viszkozitása 50 000-150 000 közötti érték.
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti készítmény, amely még egy vagy több konzerválóanyagot is tartalmaz a következők közül: metil-paraben, propil-paraben vagy m-krezol.
  9. 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti készítmény, amelyen a PDGF humán PDGF-B homodimer, a cellulózpolimer karboxi-metil-cellulóz (CMC) és a töltéssel rendelkező anyag lizin.
  10. 10. Gyógyszerkészítmény, amely a következőket tartalmazza (g/100 g gél): 0,01 g rhPDGF-B, 2,40 g nátrium-karboxi-metil-cellulóz; 0,81 g nátrium-klorid, 0,157 g nátrium-acetát)-trihidrát, 0,0065 g jégecet, 0,162 g metil-paraben, 0,018 g propil-paraben, 0,09 g m-krezol, 0,5 g l-lizin-hidroklorid; továbbá 100 g injekció céljára alkalmas víz, és a viszkozitása 20 000-200 000 mPa-s közötti érték 37 °C-on.
  11. 11. Gyógyszerkészítmény, amely a következőket tartalmazza: 0,1 g rhPDGF-B, 23,1034 g nátrium-karboximetil-cellulóz; 7,784 g nátrium-klorid, 1,511 g nátriumacetát-trihidrát, 0,0624 g jégecet, 4,813 g l-lizinhidroklorid; valamint 962,63 g víz, és amely készítmény viszkozitása 1000-15 000 mPas közötti érték 37 °C-on.
  12. 12. Az 1-11. igénypontok bármelyike szerinti készítmény sebgyógyításnál, a sebbel érintkeztetéssel történő alkalmazásra.
HU9803002A 1995-10-06 1996-09-24 Növekedési faktort tartalmazó gélkészítmény HU223880B1 (hu)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/539,898 US5705485A (en) 1987-09-18 1995-10-06 Gel formulations containing growth factors
PCT/US1996/015288 WO1997012601A2 (en) 1995-10-06 1996-09-24 Gel formulations containing growth factors

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP9803002A2 HUP9803002A2 (hu) 1999-04-28
HUP9803002A3 HUP9803002A3 (en) 2001-08-28
HU223880B1 true HU223880B1 (hu) 2005-02-28

Family

ID=24153118

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9803002A HU223880B1 (hu) 1995-10-06 1996-09-24 Növekedési faktort tartalmazó gélkészítmény

Country Status (19)

Country Link
US (1) US5705485A (hu)
EP (1) EP0859596B1 (hu)
JP (1) JP4001382B2 (hu)
KR (1) KR100444417B1 (hu)
CN (1) CN1142791C (hu)
AT (1) ATE209900T1 (hu)
AU (1) AU706806B2 (hu)
BR (1) BR9610790A (hu)
CA (1) CA2234235C (hu)
CZ (1) CZ294676B6 (hu)
DE (1) DE69617723T2 (hu)
DK (1) DK0859596T3 (hu)
ES (1) ES2167611T3 (hu)
HU (1) HU223880B1 (hu)
NO (1) NO981539L (hu)
PL (1) PL187174B1 (hu)
PT (1) PT859596E (hu)
WO (1) WO1997012601A2 (hu)
ZA (1) ZA968398B (hu)

Families Citing this family (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2202362C2 (ru) * 1998-03-07 2003-04-20 Даевунг Фармасьютикал Ко., Лтд. Композиция для местного применения, содержащая фактор роста эпидермиса человека
US20030147860A1 (en) * 2002-02-07 2003-08-07 Marchosky J. Alexander Compositions and methods for forming and strengthening bone
DK1107791T3 (da) * 1998-09-04 2007-09-03 Scios Inc Hydrogelpræparater til controlled release-administration af vækstfaktorer
US6057280A (en) 1998-11-19 2000-05-02 Huish Detergents, Inc. Compositions containing α-sulfofatty acid esters and methods of making and using the same
DE19925519A1 (de) 1999-06-04 2000-12-07 Lohmann Therapie Syst Lts Wundauflage zur gesteuerten Abgabe von Wirkstoff an Wunden und Verfahren zu ihrer Herstellung
WO2000078357A2 (en) * 1999-06-18 2000-12-28 The Collaborative Group, Ltd. Hyaluronic acid film and matrix for sustained gene transfer
US8188043B2 (en) * 1999-07-28 2012-05-29 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Jr. University Nicotine in therapeutic angiogenesis and vasculogenesis
KR20020062301A (ko) 1999-11-09 2002-07-25 덴끼 가가꾸 고교 가부시키가이샤 수난용성화된 가용성 셀룰로오스 유도체의 용도 및 그제조방법
DE10048260A1 (de) * 2000-09-29 2002-04-11 Beiersdorf Ag Kosmetische oder dermatologische Zubereitungen mit einem Gehalt an Aminoguanidin und/oder dessen Derivaten und Strukturanaloga zur Hautaufhellung von Altersflecken und/oder zur Verhinderung der Hautbräunung, insbesondere der durch UV-Strahlung hervorgerufenen Hautbräunung
US6703039B2 (en) * 2000-12-06 2004-03-09 Bausch & Lomb Incorporated Reversible gelling system for ocular drug delivery
AU2002247007B2 (en) * 2001-01-26 2006-12-07 Genetix Pharmaceuticals, Inc. Use of compositions containing PDGF-BB for promoting angiogenesis
DE10140623A1 (de) * 2001-08-18 2003-03-06 Nawa Heilmittel Gmbh Pharmazeutisches Präparat zur Behandlung von Wunden
US6835536B2 (en) 2001-08-21 2004-12-28 Micrologix Biotech Inc. Antimicrobial cationic peptides and formulations thereof
US7037504B2 (en) * 2001-10-23 2006-05-02 Waratah Pharmaceuticals, Inc. Epidermal growth factor protein and gene, and methods of use therefor
US20080086792A1 (en) 2006-10-13 2008-04-17 Thomas Charles Kuracina Method and apparatus for diverting sweat, liquid, moisture or the like from an eye
US7303814B2 (en) 2002-02-21 2007-12-04 Encelle, Inc. Immobilized bioactive hydrogel matrices as surface coatings
US20030220632A1 (en) * 2002-05-23 2003-11-27 Wolfgang Strasser Method of using gel sheets for laser treatment
DK1545587T3 (da) * 2002-09-16 2011-05-09 Agennix Inc Lactoferrinsammensætninger og fremgangsmåder til behandling af diabetiske sår
EP1654002B2 (en) * 2003-08-07 2014-01-29 Allergan, Inc. Compositions for delivery of therapeutics into the eyes
WO2005060550A2 (en) 2003-12-11 2005-07-07 Teikoku Pharma Usa, Inc. Methods and compositions for treating skin wounds
CN100411615C (zh) * 2003-12-12 2008-08-20 上海第二医科大学附属瑞金医院 氨基胍对难愈创面的防治作用
WO2005077402A1 (en) * 2004-02-11 2005-08-25 Virchow Biotech Private Limited Honey based gel formulations
WO2006015302A1 (en) * 2004-07-29 2006-02-09 X-Sten, Corp. Spinal ligament modification devices
US9012506B2 (en) 2004-09-28 2015-04-21 Atrium Medical Corporation Cross-linked fatty acid-based biomaterials
US8795703B2 (en) 2004-09-28 2014-08-05 Atrium Medical Corporation Stand-alone film and methods for making the same
US9000040B2 (en) 2004-09-28 2015-04-07 Atrium Medical Corporation Cross-linked fatty acid-based biomaterials
MX2007015943A (es) * 2005-06-17 2008-03-07 Genentech Inc Curacion de heridas.
WO2007013100A1 (en) * 2005-07-26 2007-02-01 Virchow Biotech Private Limited Gel formulation comprising platelet derived growth factor
WO2007016684A2 (en) * 2005-07-29 2007-02-08 X-Sten, Corp. Tools for percutaneous spinal ligament decompression and device for supporting same
ATE495701T1 (de) * 2005-07-29 2011-02-15 Vertos Medical Inc Perkutane gewebeexzisionsvorrichtungen
FR2891149B1 (fr) * 2005-09-26 2007-11-30 Biodex Sarl Composition pharmaceutique a action cicatrisante comprenant un derive de dextrane soluble et un facteur de croissance derive des plaquettes.
US9278161B2 (en) * 2005-09-28 2016-03-08 Atrium Medical Corporation Tissue-separating fatty acid adhesion barrier
US9427423B2 (en) 2009-03-10 2016-08-30 Atrium Medical Corporation Fatty-acid based particles
US20070077302A1 (en) * 2005-09-30 2007-04-05 Azaam Alli Methods for stabilizing ophthalmic compositions
DE102005055275A1 (de) * 2005-11-17 2007-05-24 Ursapharm Arzneimittel Gmbh & Co. Kg Phosphatfreie pharmazeutische Zusammensetzung sowie deren Verwendung
KR100687281B1 (ko) * 2005-11-30 2007-02-27 한국과학기술연구원 생리 활성 물질이 결합된 조직 재생용 주입형 온도 감응성플루로닉 유도체 하이드로겔 및 이의 제조 방법
KR100742313B1 (ko) * 2006-03-21 2007-07-24 퓨리메드 주식회사 신규한 혈소판 유래 성장 인자(ｐｄｇｆ) ｂ 폴리펩타이드및 이의 유전자
US7942830B2 (en) 2006-05-09 2011-05-17 Vertos Medical, Inc. Ipsilateral approach to minimally invasive ligament decompression procedure
KR100784134B1 (ko) * 2006-10-09 2007-12-12 주식회사 대웅 상피세포성장인자를 함유하는 안정한 구내염 치료용 액상조성물
RU2445950C2 (ru) * 2006-10-26 2012-03-27 Сэндзю Фармасьютикал Ко., Лтд. Жидкая водная глазная композиция
US8343536B2 (en) 2007-01-25 2013-01-01 Cook Biotech Incorporated Biofilm-inhibiting medical products
EP2114268A4 (en) * 2007-02-12 2010-03-03 Vertos Medical Inc TISSUE EXTRACTION DEVICES AND METHODS
US20090118709A1 (en) * 2007-11-06 2009-05-07 Vertos Medical, Inc. A Delaware Corporation Tissue Excision Tool, Kits and Methods of Using the Same
JP5582711B2 (ja) * 2008-09-25 2014-09-03 株式会社エー・アイ・システムプロダクト ローション状の塗薬
USD611146S1 (en) 2008-10-23 2010-03-02 Vertos Medical, Inc. Tissue modification device
USD621939S1 (en) 2008-10-23 2010-08-17 Vertos Medical, Inc. Tissue modification device
USD619252S1 (en) 2008-10-23 2010-07-06 Vertos Medical, Inc. Tissue modification device
USD619253S1 (en) 2008-10-23 2010-07-06 Vertos Medical, Inc. Tissue modification device
USD610259S1 (en) 2008-10-23 2010-02-16 Vertos Medical, Inc. Tissue modification device
US20110038910A1 (en) 2009-08-11 2011-02-17 Atrium Medical Corporation Anti-infective antimicrobial-containing biomaterials
CA2775317C (en) * 2009-09-22 2014-10-28 Vlife Sciences Technologies Pvt. Ltd. Topical formulation for diabetic foot ulcers
WO2012009707A2 (en) 2010-07-16 2012-01-19 Atrium Medical Corporation Composition and methods for altering the rate of hydrolysis of cured oil-based materials
EP2729219A4 (en) * 2011-07-06 2015-04-01 Orf Líftaekni Hf METHOD OF USING NON-VEGETABLE GROWTH FACTOR STABILIZED FOR SKIN CARE
BR112014010542A2 (pt) 2011-11-02 2017-04-18 Halscion Inc métodos e composições para tratamento de ferimento
US9867880B2 (en) 2012-06-13 2018-01-16 Atrium Medical Corporation Cured oil-hydrogel biomaterial compositions for controlled drug delivery
US9422497B2 (en) 2012-09-21 2016-08-23 Exxonmobil Research And Engineering Company Synthetic lubricant basestocks and methods of preparation thereof
BR112015023140A8 (pt) 2013-03-15 2018-01-23 Genentech Inc proteínas de fusão, método para a fabricação da proteína de fusão, composições, ácido nucleico,vetor, célula hospedeira, métodos de produção de uma proteína de fusão, de tratamento da doença inflamatória intestinal, de inibição da infecção microbiana, de tratamento da lesão renal, para acelerar ou melhorar a cicatrização, para a prevenção ou tratamento de uma condição cardiovascular, para tratamento da síndrome metabólica e para tratamento da endotoxemia.
WO2014152511A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 The Jackson Laboratory Methods for promoting wound healing and hair growth
US9675537B2 (en) 2014-06-30 2017-06-13 Johnson & Johnson Consumer Inc. Hair growth composition and method
CA2962954A1 (en) 2014-10-14 2016-04-21 Samuel Lynch Compositions for treating wounds
WO2017035280A1 (en) * 2015-08-24 2017-03-02 Nugene, Inc. Skin damage healing aids and dressings
CA3015400A1 (en) * 2016-02-23 2017-08-31 Matripharm International Inc. Dual-rate release formulation with high drug loading
US20220088274A1 (en) * 2017-05-18 2022-03-24 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Targeted in Situ Therapeutic Delivery of Secreted Factors from Stem Cells for Treatment of Damaged Tissue
PE20212075A1 (es) 2018-01-26 2021-10-26 Genentech Inc PROTEINAS DE FUSION Fc IL-22 Y METODOS DE USO
PT3743088T (pt) 2018-01-26 2022-12-05 Hoffmann La Roche Composições il-22 fc e métodos de utilização
CN111757751A (zh) 2018-02-21 2020-10-09 豪夫迈·罗氏有限公司 用于使用IL-22 Fc融合蛋白的治疗的剂量方案
CN114601959A (zh) * 2020-11-23 2022-06-10 山东融元康医疗科技有限公司 一种医用皮肤护理敷料及其制备方法和应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1190361B (it) * 1985-05-30 1988-02-16 Zambon Spa Composizione farmaceutica in crema per uso dermale ed oftalmico
US4717717A (en) * 1986-11-05 1988-01-05 Ethicon, Inc. Stabilized compositions containing epidermal growth factor
NZ222413A (en) * 1986-11-05 1991-06-25 Ethicon Inc Compositions containing a polypeptide growth factor and a water-soluble cellulose polymer stabiliser
US5124316A (en) * 1986-11-14 1992-06-23 President And Fellows Of Harvard College Method for periodontal regeneration
NZ226171A (en) * 1987-09-18 1990-06-26 Ethicon Inc Gel formulation containing polypeptide growth factor
US5457093A (en) * 1987-09-18 1995-10-10 Ethicon, Inc. Gel formulations containing growth factors
WO1993000050A1 (en) * 1991-06-21 1993-01-07 Genetics Institute, Inc. Pharmaceutical formulations of osteogenic proteins
HUT67319A (en) * 1991-08-30 1995-03-28 Life Medical Sciences Inc Compositions for treating wounds
WO1993008825A1 (en) * 1991-11-04 1993-05-13 Zymogenetics, Inc. Pdgf gel formulation
JP3102655B2 (ja) * 1991-12-27 2000-10-23 住友製薬株式会社 超音波制御による薬物放出製剤

Also Published As

Publication number Publication date
AU7370796A (en) 1997-04-28
DK0859596T3 (da) 2002-03-04
CA2234235C (en) 2002-05-14
NO981539L (no) 1998-06-02
CA2234235A1 (en) 1997-04-10
EP0859596B1 (en) 2001-12-05
KR100444417B1 (ko) 2004-11-03
DE69617723T2 (de) 2002-05-08
CZ102498A3 (cs) 1999-08-11
HUP9803002A3 (en) 2001-08-28
PL326064A1 (en) 1998-08-17
KR19990064041A (ko) 1999-07-26
ES2167611T3 (es) 2002-05-16
ZA968398B (en) 1998-04-06
PL187174B1 (pl) 2004-05-31
NO981539D0 (no) 1998-04-03
WO1997012601A2 (en) 1997-04-10
BR9610790A (pt) 1999-07-13
JP4001382B2 (ja) 2007-10-31
HUP9803002A2 (hu) 1999-04-28
US5705485A (en) 1998-01-06
PT859596E (pt) 2002-05-31
CZ294676B6 (cs) 2005-02-16
AU706806B2 (en) 1999-06-24
CN1211191A (zh) 1999-03-17
DE69617723D1 (de) 2002-01-17
WO1997012601A3 (en) 1997-05-01
CN1142791C (zh) 2004-03-24
EP0859596A2 (en) 1998-08-26
JPH11512740A (ja) 1999-11-02
ATE209900T1 (de) 2001-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU223880B1 (hu) Növekedési faktort tartalmazó gélkészítmény
US5457093A (en) Gel formulations containing growth factors
US5427778A (en) Gel formulations containing growth factors and acrylamide polymer
Panduranga Rao Recent developments of collagen-based materials for medical applications and drug delivery systems
EP0591392B1 (en) Pharmaceutical formulations of osteogenic proteins
EP1499361B1 (en) Novel biomaterials, their preparation and use
EP1545587B1 (en) Lactoferrin compositions and methods of diabetic ulcer treatment
ES2711416T3 (es) Material sellante seco de acción rápida y métodos para su uso y fabricación
A˚ gren Four alginate dressings in the treatment of partial thickness wounds: a comparative experimental study
EP0338813A2 (en) Hyaluronic acid-containing aqueous solution or aqueous dispersion of collagen
KR101708622B1 (ko) 주사용 바이오물질
Chak et al. A review on collagen based drug delivery systems
EP0747067A2 (en) Moldable collagen compositions for hard tissue repair and augmentation
JPH07196704A (ja) 軟組織の増強および薬剤送達のための、イオン的に架橋したグリコサミノグリカンゲル
AU2001278943A1 (en) Hydrogel films and methods of making and using therefor
EP3620186A1 (en) Biomaterial devices and topical compositions for guided tissue regeneration
US20020015734A1 (en) Thermoreversible polymers for delivery and retention of osteoinductive proteins
Kasoju et al. Exploiting the potential of collagen as a natural biomaterial in drug delivery
CN107362352B (zh) 一种蛋白或多肽组合物及其制备方法和用途
RU2695343C2 (ru) Состав fgf-18 в ксилоглюкановых гелях
Pamfil et al. Collagen‐Based Materials for Pharmaceutical Applications

Legal Events

Date Code Title Description
HFG4 Patent granted, date of granting

Effective date: 20050119

MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees