HU210351A9 - Glikoproteinek, melyek zabból (Avena sativa) állíthatók elő, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmény Az átmeneti oltalom a(z) 1. és 11. igénypontra vonatkozik. - Google Patents
Glikoproteinek, melyek zabból (Avena sativa) állíthatók elő, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmény Az átmeneti oltalom a(z) 1. és 11. igénypontra vonatkozik. Download PDFInfo
- Publication number
- HU210351A9 HU210351A9 HU9400009P HU9400009P HU210351A9 HU 210351 A9 HU210351 A9 HU 210351A9 HU 9400009 P HU9400009 P HU 9400009P HU 9400009 P HU9400009 P HU 9400009P HU 210351 A9 HU210351 A9 HU 210351A9
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- molecular weight
- glycoproteins
- separating
- constituents
- process according
- Prior art date
Links
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 title claims description 37
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 title claims description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 10
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 title claims description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 5
- 241000209763 Avena sativa Species 0.000 title claims 3
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 7
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 claims description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 3
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PSLCKQYQNVNTQI-BHFSHLQUSA-N (2s)-2-aminobutanedioic acid;(2s)-2-aminopentanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O PSLCKQYQNVNTQI-BHFSHLQUSA-N 0.000 claims description 2
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 claims description 2
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical group N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 claims description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 2
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims 2
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 18
- 235000005781 Avena Nutrition 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 5
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 2
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- -1 glucose (45%) Chemical class 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- FTLYMKDSHNWQKD-UHFFFAOYSA-N (2,4,5-trichlorophenyl)boronic acid Chemical compound OB(O)C1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl FTLYMKDSHNWQKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-LJTCTKOTSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methyl-6-tritiopyrimidine-2,4-dione Chemical compound [3H]C1=C(C)C(=O)NC(=O)N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-LJTCTKOTSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- 150000005168 4-hydroxybenzoic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 229920003084 Avicel® PH-102 Polymers 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 235000015842 Hesperis Nutrition 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 235000012633 Iberis amara Nutrition 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 201000008197 Laryngitis Diseases 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108010046722 Thrombospondin 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100036034 Thrombospondin-1 Human genes 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007766 cera flava Substances 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000004665 defense response Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007897 gelcap Substances 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229940085605 saccharin sodium Drugs 0.000 description 1
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N tetratriacontan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
A találmány az 1. igénypontban meghatározott, 38 kD molekulatömegű vízoldható glikoproteinekre vonatkozik, amelyek a zab (Avena sativa) termésének extraktumából különíthetők el. A találmány tárgyát képezi továbbá a 2-10. igénypontok szerinti eljárás a glikoproteinek előállítására, valamint all. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely hatóanyagként a glikoproteineket tartalmazza.
Az újonnan fellelt glikoproteinek vízben oldódnak, és molekulatömegük 38 kD. A következő aminosavarányokkal rendelkeznek: aszpartát-glutamát 0,97, alanin-valin 1,03, valin-hisztidin 10,6, valin-lizin 2,3 es valin-arginin 3,5. A glikoproteinek molekulatömegét az aminosav- és cukoranalízis eredményeiből határoztuk meg. A találmány szerinti glikoproteinek ezenkívül tartalmaznak semleges hexózokat, nevezetesen glukózt (45%), galaktózt (8%), mannózt (31%) és arabinózt (15%). Ozamin-tartalmuk (glukózamin és galaktózamin) 0,1%-nál kisebb. Az aminosav részek aránya 58,4%, a cukor részeké 41,6%. A meghatározási eredményeket a teljes hidrolízis termékének gázkromatográfás vizsgálatával és aminosav-anab'zisével kaptuk.
A találmány szerinti glikoproteinek tehát polipeptid láncból épülnek fel mely a poliszacharid részhez kapcsolódik.
A találmány szerinti glikoproteinek protein frakciói mintegy 11 mol% aszparaginsavból, 11 mol% glutaminsavból és mintegy 8 mol% treoninból állnak. A glukóz, galaktóz, mannóz és arabinóz aránya előnyösen mintegy 6:1 és 4:2 között van.
A találmány szerinti glikoproteinek a zab (Avena sativa) terméséből vonhatók ki.
Az e célra előnyös eljárás, a találmány szerinti eljárás során az extraktum nagymolekulájú részeit azok további feldolgozására kiszűrjük előnyösen diaszűréssel. Ezután a nagymolekulájú alkotórészeket egy a glikoproteinekhez megfelelő kicsapószerrel, előnyösen ammónium-szulfáttal kicsapjuk. A képződött csapadékot például centrifugálással kinyeijük, vízben oldjuk és dializáljuk, hogy eltávolítsuk belőle a szennyező sókat.
A megtisztított oldatot a tároláshoz előnyösen liofilizáljuk, azután újra oldattá alakítjuk. Ezután választjuk el a komponenseket a molekulatömeg tartományok szerint, és elkülönítjük a 38 kD molekulatömegű tartományt. Ezt az elválasztást előnyösen gélkromatográfiásan végezzük. A fellelt aktív frakciót azután újra betöményíthetjük és adott esetben újra liofilizálhatjuk.
Előnyös lehet, hogy az extraktumot a találmány szerinti eljárás lefolytatása előtt megszabadítsuk a nagymolekulájú kísérőanyagoktól, mint a lipidektől és nukleinsavaktól. E célból végezhetünk egy kicsapást kvaterner ammónium-vegyületekkel, például piridilcetil-ammónium-kloriddal, előnyösen azonban trimetil-cetil-ammónium-bromiddal, azután a kicsapott kísérőanyagok elkülönítésére centrifugálhatjuk az anyagot.
Stabilitási megfontolásokból a kicsapásokat és a centrifugálásokat előnyösen hidegen (mintegy +4 °Con) végezzük.
A diaszűréshez, vagyis egy adott molekulatömeggel azonos vagy annál nagyobb molekulatömegű molekulák visszatartására meghatározott porózus membránokat használunk. Ezek lehetnek hollow-fiber patronok, előnyösen azonban spirál-ultraszűrő modulokat használunk. Előnyösen a Millipore cég membránjait használjuk, amelyek PTGC elnevezéssel vannak kereskedelmi forgalomban. Az egy előre megadott molekulatömeget meghaladó molekulatömegű molekulák szétválasztását természetesen más eljárásokkal, így például egy hidrofil polimerizált gélen való kromatografálással is elvégezhetjük.
A komponensek molekulatömegek szerinti szétválasztásához előnyösen 30 000 Daltont meghaladó kizárási térfogatú hidrofil, polimerizált géleket használunk, amelyeket módosított dextránokból állítottak elő. Éne alkalmasak a „Sephadex G-50” elnevezéssel forgalmazott gélek.
Az első eluált rakétákat egyesítjük, betöményítjük és dializáljuk. Azután szárazra bepároljuk, amit előnyösen fagyasztva szárítással végzünk. A liofilizálást ismert módon fagyasztó szublimáló készülékkel végezzük, melyet a piacon átlagos méretben és kis laboratóriumi készülékként egyaránt beszerezhetünk.
A liofilizátum feloldása után végrehajtjuk a gélszűrést. A szűrendő oldatot előnyösen pufferoluk, és az eluáláshoz ugyanazt a puffért használjuk. Előnyösen 1,1 M ammómium-karbonát puffért használunk. A szűrést klasszikus eljárásokkal követhetjük, különösen UV spektrometriával 280 nm-nél. Az e célra használt gél előnyösen szintén egy módosított dextrán, amely „Sephaciyl S-200 néven van forgalomban.
A találmány szerinti glikoproteinek meglepő farmakológiái sajátságokkal rendelkeznek. Különösen figyelemreméltó immunmoduláló hatásuk, valamint jó elviselhetőségük. E sajátságaik alapozzák meg a bejelentés szerinti glikoproteinek gyógyszerként való alkalmazását. Ezek a gyógyszerek például az ember és az állatok bakteriális, illetve vírusos fertőzésekből való kigyógyítására vagy azokkal szembeni védelmére használhatók.
Számításba jöhet alkalmazásuk akut és krónikus fertőzések esetén. Bakteriális fertőzésekre példaként megemlítjük a bronchitist, az anginát, a gégegyulladást, a fülgyulladást és a sinusitist, a vírusos fertőzésekre azokat, amelyeket a herpeszvírusok, a rhinovírusok, az influenzavírusok, a HÍV vírusok vagy a citomegália-vírusok idéznek elő.
A találmány szerinti glikoproteinek használhatók továbbá a védekezés genetikailag determinált vagy átmeneti meggyengülése miatt bekövetkező fertőződési hajlam gyógyítására. Szokásos dózisuk a kezelendő betegtől és a mindenkori gyógyítandó betegségtől függően változik. így például a humán terápiában orális beadás esetén napi 10 és 200 mg közötti, rektális beadás esetén napi 1 és 15 mg közötti, parenterális beadás esetén napi 2 és 20 mg közötti mennyiséget tehet ki.
A megfelelő gyógyászati kompozíciók lehetnek például szilárd anyagok vagy folyadékok, és lehetnek bármilyen gyógyszerformában, amely a humán gyógyászatban rendesen használatos, így például egyszerű vagy drazsírozott tabletta, gélkapszula, granulátum, ol2
HU 210 351 A9 dat, szirup, kúp, liofilizált vagy nem liofilizált injektálható készítmény, ovula, krém, kenőcs, csepp, szemcsepp, aeroszol alakjában; ezeket a szokásos módszerekkel állíthatjuk elő. A hatóanyagot vagy hatóanyagokat ekkor a szokott módon az ilyen gyógyászati készítményekhez alkalmazott vivőanyagokba vehetjük fel, így talkumba, arabmézgába, laktózba, keményítőbe, magnézium-sztearátba, kakaóvajba, vizes vagy nemvizes hordozóanyagokba, növényi vagy állati eredetű zsírokba, paraffinszármazékokba, glikolokba, különféle nedvesítő-, diszpergáló- vagy emulgeálószerekbe és tartósítószerekbe.
A találmányt az alábbi példákkal világítjuk meg az oltalmi kör korlátozása nélkül.
1. példa
Avena-glikoproteines tabletta
Darabonként 200 mg tömegű, 50 mg glikoproteint tartalmazó tabletták készítéséhez szükséges 50 mg Avena-glikoprotein
129 mg mikrokristályos cellulóz (például ,Avicel ph 102”) mg polivinil-pirrolidon (például „Polyplasdone XL”) mgmagnézium-sztearát
2. példa
300 mg-os Avena-glikoproteines kapszula Egy 300 mg-os kapszulához szükséges 50 mg Avena-glikoprotein 10 mg sárga méhviasz mg szójaolaj
130 mg növényolaj 100 mg kapszulahéj
3. példa
Avena-glikoprotein oldat 100 ml-hez szükséges 500 mg Avena-glikoprotein 10 g szorbit
0,05 g szacharin-nátrium ad 100 ml kétszer desztillált víz
4. példa
Avena-glikoproteines injekciós ampulla Darabonként 2 ml tartalmú injekciós ampullák készítéséhez, melyek 2 mg glikoproteint tartalmaznak, szükséges mg Avena-glikoprotein ad 2,0 ml fiziológiás konyhasó-oldat
5. példa
Avena-glikoproteines infúziós oldat 500 ml infúziós oldathoz szükséges 20 mg Avena-glikoprotein ad 500 ml fiziológiás konyhasó-oldat
6. példa
Avena-glikoproteines kenőcs 100 g kenőcshöz szükséges g Avena-glikoprotein g cetil-sztearil-alkohol, nátrium-cetil-sztearilosulfuricum és emulgeátor (például „Emulgade F”) keveréke g olajsav-decilészter (például „Cetiol V”)
0,5 g p-hidroxi-benzoesavészterek és szorbinsav keveréke (például Nipasorbin)
61,5 g kétszer desztillált víz
Az immunológiai védekező reakciók stimulálására vonatkozó farmakológiai vizsgálatok
Immunmoduláló aktivitás
Az immunmoduláló aktivitást az egér limfocita-antitest képzés stimulálási készség révén mutattuk ki. A szakemberek által ismert Jeme-féle antitest plakk tesztben az Avena-glikoproteinek igen szignifikánsan fokozzák a juh eritrocitákkal szembeni antitestek szintézisét (1. ábra). 15,6 μg/ml koncentrációnál a stimuláció maximális, mintegy nyolcszor nagyobb, mint a kezeletlen kontroll esetén. Egy ismert stimulánssal, az Escherichia coli Iipopoliszachariddal (LPS) összehasonlítható koncentrációknál, 60, illetve 30 pg/ml-nél összevetve a stimulációt kétszer-háromszor nagyobbnak találtuk.
Mitogén aktivitás
Az Avena-glikoproteinek mitogén aktivitását az egér lépsejtjein végzett limfocita transzformációs teszt segítségével határoztuk meg. Mértük a [6-3H)-timidin beépülését a limfocita-DNS-be (2. ábra). A gélszűréssel nyert glikoprotein frakciók 1,25 μg/ml koncentrációban ugyanolyan erős stimulációt idéznek elő, mint egy bakteriális B-sejt-mitogén (LPS) 30 μg/ml koncentrációban. Ugyanilyen koncentrációjú glikoproteinekkel a 125 μg/ml koncentrációjú előtisztított glikoproteinek stimulációjának 50%-át értük el.
Interleukin-1 indukciója
Az interleukin-1 egy immunológiailag nem specifikus citokin, amely a testazonos védekezésben központi közvetítőként működik.
Az interleukin-1 képes a limfocitákat aktiválni, az akut fázisú proteinek expresszióját modulálni és lázat kelteni, mely sajátságainál fogva jelentős szerepet játszik a gyulladásokkal és a fertőzésekkel kapcsolatban. Az interleukin-1 legfontosabb előállítói a monociták, illetve a makrofágok. Ezért a vizsgálatot egy makrofág-vonalon végeztük (3. ábra). Egy 72 órás intervallumban az Avena-glikoproteinek csaknem olyan erős stimulációt idéztek elő, mint egy Escherichia coli lipopoliszacharid, amely tudvalévőén indukálja az interleukin-1 kiürítését. Az előtisztított glikoproteinek koncentrációja 60 μg/ml volt, a lipopoliszacharidé 10 μg/ml. Egy kezeletlen kontrollal ezzel szemben mindössze a beépülési mérték egyharmadát értük el 72 óra alatt.
Claims (11)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Vízoldható glikoproteinek, amelyek aminosavés cukoranalízissel meghatározott molekulatömege 38 kD, melyek a zab (Avena sativa) termésének extraktu3HU 210 351 A9 mából elkülönítve állíthatók elő, és a melyekben az aminosavak arányai aszpartát-glutamát 0,97, alaninvalin 1,03, valin-hisztidin 10,6, valin-lizin 2,3 és valinarginin 3,5, amelyek polipeptid-láncának látszólagos molekulatömege 22,2 kD, alkotórészeik között a semleges hexózok aránya glukóz 45%, galaktóz 8%, mannóz 31% és arabinóz 15%, ozamintartalmuk 0,1%-nál kisebb, és aminosav-részeik aránya 58,4%-ot, cukorrészeik aránya 41,6%-ot tesz ki.
- 2. Az 1. igénypont szerinti glikoproteinek előállítási eljárása, a következő eljárási lépésekkel jellemezve:- a nagymolekulájú alkotórészek kiszűrése további feldolgozásra- a nagymolekulájú alkotórészek kicsapása a glikoproteinekhez megfelelő kicsapószerrel- a csapadék elválasztása és feloldása- a szennyező sók leválasztása dialízissel- a komponensek molekulatömeg tartományonkénti szétválasztása és a 38 kD molekulatömeg tartomány elkülönítése.
- 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a nagymolekulájú alkotórészeket diaszűréssel szűrjük ki.
- 4. A 2. vagy 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kicsapószerként ammónium-szulfátot használunk.
- 5. A 2-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dialízis után liofilizálunk.
- 6. A 2-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a komponensek molekulatömeg tartományonkénti szétválasztását gélkromatográfiával végezzük.
- 7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kromatografáláshoz pufferolt oldatot vezetünk, és az eluálást ugyanazzal a pufferral végezzük.
- 8. A 7. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 0,1 M ammóniumkarbonát puffért használunk.
- 9. A 2-8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a nagymolekulájú alkotórészek szétválasztása előtt a lipideket és a nukleinsavakat kicsapjuk és leválasztjuk.
- 10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kicsapáshoz egy kvaterner ammónium-vegyületet használunk.
- 11. Gyógyászati készítmény, amely hatóanyagként1. igénypont szerinti glikoproteineket tartalmaz.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9400009P HU210351A9 (hu) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | Glikoproteinek, melyek zabból (Avena sativa) állíthatók elő, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmény Az átmeneti oltalom a(z) 1. és 11. igénypontra vonatkozik. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9400009P HU210351A9 (hu) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | Glikoproteinek, melyek zabból (Avena sativa) állíthatók elő, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmény Az átmeneti oltalom a(z) 1. és 11. igénypontra vonatkozik. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU210351A9 true HU210351A9 (hu) | 1995-03-28 |
Family
ID=10984351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9400009P HU210351A9 (hu) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | Glikoproteinek, melyek zabból (Avena sativa) állíthatók elő, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmény Az átmeneti oltalom a(z) 1. és 11. igénypontra vonatkozik. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| HU (1) | HU210351A9 (hu) |
-
1994
- 1994-07-08 HU HU9400009P patent/HU210351A9/hu unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4954622A (en) | Pharmaceutical composition and method containing gamma inulin or derivative thereof | |
| KR100419354B1 (ko) | 알로에베라식물의생물활성팩터 | |
| JPS63500805A (ja) | 可溶性リン酸化グルカン | |
| FI74474C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya, ur klebsiella pneumoniae extraherade glykoproteiner. | |
| JPH0645643B2 (ja) | エキナセアプルプレアまたはエキナセアアングスティフォリアの細胞培養物からの免疫刺激作用性ポリサッカライド、その製造方法及びこれを含む製剤 | |
| JPH09503489A (ja) | リピドａの毒性を中和するためのペプチド | |
| JP2001526629A (ja) | 卵の抗炎症性組成物、単離法および使用 | |
| JP2548822B2 (ja) | マカラスムギ由来の糖タンパク質、その製造法及びそれを含有する免疫調節剤 | |
| JPH01193227A (ja) | 癌免疫療法補助剤 | |
| JP2579771B2 (ja) | 胸腺抽出物、その製造方法及びそれを含む薬剤組成物 | |
| FI74475C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya, ur klebsiella pneumoniae extraherade glykoproteiner. | |
| HU210351A9 (hu) | Glikoproteinek, melyek zabból (Avena sativa) állíthatók elő, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmény Az átmeneti oltalom a(z) 1. és 11. igénypontra vonatkozik. | |
| AU589233B2 (en) | Immunotherapeutic treatment | |
| JPH0341478B2 (hu) | ||
| NO850152L (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av human, endogen cancerregulerende faktor. | |
| EP0178050A1 (en) | Proteinaceous substance | |
| WO2000050087A1 (es) | GLICOCONJUGADOS OBTENIDOS A PARTIR DE CELULAS DE CANDIDA UTILIS Y DE SEMILLAS DE $i(RICINUS COMMUNIS) | |
| JP2623280B2 (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| JPH0322851B2 (hu) | ||
| JPH0251440B2 (hu) | ||
| JP4767382B2 (ja) | ＩｇＥ産生抑制剤 | |
| JPH0899896A (ja) | ウイルス感染防御作用を有するウシ乳清由来の高分子糖蛋白質混合物、その用途及びその製造法 | |
| JPH11116491A (ja) | 血清由来の新規な抗腫瘍性物質ｓ３、その製造法及びそれを含む抗腫瘍剤 | |
| JPH0251439B2 (hu) | ||
| JPS60155137A (ja) | 高濃度ヒトγ型インタ−フエロン水溶液の製造法 |