JPH11116491A - 血清由来の新規な抗腫瘍性物質ｓ３、その製造法及びそれを含む抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 優れた抗腫瘍活性を有し、しかも副作用が少
ない抗腫瘍性物質、その製造法及びそれを含む抗腫瘍剤
を提供すること。 【解決手段】 血清を硫酸アンモニウム50％飽和で処理
してグロブリンを沈殿除去し、上澄みの硫酸アンモニウ
ム濃度を80％飽和とし、更に酢酸でpH 5.0として遠沈し
て得られる沈殿物を、蒸留水で透析、脱塩した後、凍結
乾燥することにより得ることができる粉末であって、分
子量（ＨＰＬＣ法）が約５０，０００以下であり、Ｂ−
１６メラノーマ細胞に対する抗腫瘍性を有する血清由来
抗腫瘍性物質Ｓ３；その製法及びＳ３を有効成分とする
抗腫瘍剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、血清由来の新規な
抗腫瘍性物質Ｓ３、その製造法及びそれを含む抗腫瘍剤
に関する。

【０００２】

【従来の技術及びその問題点】現在、癌の治療法には、
手術によって癌の病巣を取り除いてしまう外科療法、放
射線による放射線療法、抗腫瘍剤や抗癌剤を投与する化
学療法、及び患者自身の身体に備わっている、病気から
回復しようとする力を増強して癌を治療する免疫療法等
がある。癌が早期に発見された場合には、これらの治療
法もある程度の効果を上げてはいるが、抗腫瘍効果が強
ければ強いほど、正常な身体にも避けられない副作用を
与えたりする事もあって、現在知られているこれらの治
療法には、まだまだ改善する余地があり、多くの癌患者
たちが癌治療法の進歩発展を待ち望んでいる状態であ
る。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、優れた抗腫瘍活性を有し、しかも副作用が少ない抗
腫瘍性物質、その製造法及びそれを含む抗腫瘍剤を提供
することである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは十数年来、
癌をはじめ免疫疾患や難治性の疾患に対する治療法とし
て、リンパ球を使用した、免疫療法を行ってきた。この
治療を行うなかで、本発明者らは血清成分中に含まれて
いる物質に注目し研究してきた。その結果、血清に所定
の処理をして得られる物質Ｓ３が、免疫賦活作用を持つ
と同時に、メラノーマ細胞に対して優れた抗腫瘍活性を
有し、しかも副作用が少ないという知見を得た。本発明
はこの知見に基づき完成されたものである。なお、物質
Ｓ３は、血清中の物質の分離精製の途中の段階におい
て、分離されたものであり、その詳細な性質は別項のと
おりである。前記課題を解決するために、本発明は、下
記の血清由来抗腫瘍性物質Ｓ３を提供する。

【０００５】すなわち、該物質Ｓ３は、(a) 血清を硫酸
アンモニウム50％飽和処理してグロブリンを沈殿除去
し、上澄みの硫酸アンモニウム濃度を80％飽和とし、更
に酢酸でpH 5.0として遠沈して得られる沈殿物を、蒸留
水で透析、脱塩した後、液体クロマトグラフィー、濾過
法又は遠心分離法により得られる分画を再び透析、脱塩
し、凍結乾燥することにより得ることができる、糖タン
パク質を含有する粉末であって、分子量分布が約５０，
０００以下であり〔ＳＤＳ−ＰＡＧＥ法（電気泳動
法）〕、かつＢ−１６メラノーマ細胞に対する抗腫瘍性
を有する物質である。本発明はまた、上記Ｓ３を有効成
分とする抗腫瘍剤を提供するものである。なお、本発明
の血清由来抗腫瘍性物質Ｓ３の性質を詳述すると下記の
とおりである。

【０００６】(b) 分子量分布：約５０，０００以下であ
って、約１０，０００〜約５０，０００までに分布を有
するものが好ましい。特に約１０，０００前後、約３
６，０００前後、約４２，０００前後及び約５０，００
０前後に分布を有するものが好ましい。 (c) 呈色反応：アンスロン反応 陽性 （糖） 〔アンスロン反応は、一般的な糖（還元糖）の定性反応である。 「生物工学実験書」培風館−１９９３年版〕 モーリッシュ反応 陽性 （糖） 〔モーリッシュ反応は、糖類の一般的な検出反応の一つで、糖を 含む水溶液にモーリッシュ試薬数滴を加え、さらに濃硫酸を静か に入れると重層（境界）面に赤紫色環を生じる。「生物工学実験 書」培風館−１９９３年版〕 ローリー反応 陽性 （タンパク質） 〔ローリ反応は、タンパク質中のペプチド結合がアルカリ性でＣ ｕ⁺⁺と反応して紫紅色の錯体をつくる性質を利用したビュレット 法とチロシン、トリプトファン、システインの側鎖をと反応する フェノール試薬とを組み合わせた方法でタンパク質と反応すると 深青色を呈することを利用した方法である。「生物化学実験の手 引き−２」化学同人社−１９９０年版〕

【０００７】 吸収： 550nmにおける吸収 （＋）（タンパク質） 〔本吸収は、先の「ローリー反応」の際の発色物が、550nm において 吸収極大を示すことに基づく試験である。〕 (d) pＨ： 5.2 ±0.2 〔Ｓ３を6.3mg とり５mlの蒸留水に溶かして測定した。
（CORNING 社pHメータ215 使用)] (e) アミノ酸組成（重量比）（単位％） アスパラギン酸8.8 、スレオニン5.2 、セリン4.5 、グ
ルタミン酸13.7、グリシン4.8 、アラニン6.6 、バリン
3.8 、メチオニン1.1 、イソロイシン0.3 、ロイシン1
0.8、チロシン3.2 、フェニルアラニン4.2 、リジン0.5
、ヒスチジン3.4 、アルギニン3.9 、プロリン。

【０００８】(f) 元素組成（重量比） Ｈ3.7 ％；Ｃ27.0％；Ｎ1.3 ％ 本発明の「血清由来抗腫瘍性物質Ｓ３」は以下の工程を
含む方法により製造することができる。 （イ）塩析 ウシ、ウマまたはヒトなど哺乳動物の血清を用い、硫酸
アンモニウム50％飽和処理し、静置後、10,000rpm 、30
分間遠心分離を行ない、グロブリンを沈殿除去する。な
お、この工程は出発物質として血液を用いることもでき
る。 （ロ）塩析（続き） さらに、（イ）の上澄液をとり、硫酸アンモニウム80％
飽和とし、酢酸でpH5.0 に調整したのち、10,000rpm 、
４時間遠心分離を行なう。 （ハ）透析（脱塩） 上澄液を除いた沈殿物について、セルロース膜透析チュ
ーブを用いて蒸留水で透析して脱塩を行なう。

【０００９】（ニ）遠心分離．乾燥 上記（ハ）にて、十分脱塩を行なったのち10,000rpm 、
４時間遠心分離を行ない、上澄液を凍結乾燥させ粉末と
する。 （ホ）分画 工程（ニ）によって得られた粉末について液体クロマト
グラフィー法により文画を行ない、分子量約50,000以下
の物質を得る。移動相には例えば20mMリン酸ナトリウム
緩衝液(pH7.0) を用いる。 （ト）上記分画溶液について再び、セルロース膜透析を
用い、蒸留水（または0.04％クエン酸ナトリウム溶液）
にて透析し、脱塩を行なったのち凍結乾燥を行ない、製
品Ｓ３を得る。本発明のＳ３は、種々の動物、例えば、
人、牛、兎、馬等の哺乳動物の血清から分離採取され
る。

【００１０】本発明のＳ３を有効成分として含有する抗
腫瘍剤の投与形態は、主として非経口投与とし、剤型は
注射剤として、あるいは坐剤として投与することができ
る。さらに適宜、剤型あるいは賦型剤等を選ぶことによ
って経口投与若しくは外用剤として用いられる。これら
の製剤は賦型剤．結合剤．防腐剤．等の製剤上容される
添加剤を用いて既知の方法で製造される。また、Ｓ３を
有効成分として含有する抗腫瘍剤の臨床投与量は年齢、
体重、患者の感受性，症状の程度により異なるが、通常
効果的な量は、成人一日、１〜１０ｍｇ程度であり、一
日１回または数回に分けて用いることも可能である。

【００１１】以下、実施例により、本発明を更に詳細に
述べる。

【実施例】

〔Ｓ３の製造〕 （実施例１）ウシの血清を出発材料として用いて、以下
のようにしてＳ３を製造した。 (1) ウシの血清1,000ml をとり、試薬特級硫酸アンモニ
ウムで50％飽和にし、４℃で一夜放置後、10,000rpm 、
３０分間で遠心分離し、グロブリンを除去した。この上
澄液、約700ml をとり硫酸アンモニウム濃度を80％飽和
に上げ、さらに、試薬特級酢酸でpH 5.0に調整し、４℃
で一夜放置後、10,000 rpmで４時間遠心分離を行なっ
た。 (2) この上澄みを除き、沈殿物約200 〜300ml を、セル
ロース膜透析チューブ（Spectrum Medical Industries
社製、Spectra/Por Membranetubing）に分注し、蒸留水
（試薬特級クエン酸ナトリウムを0.０４％になるように
加えた。）にて２４時間×４回透析し、十分脱塩を行な
った。この時４℃に保冷した。

【００１２】(3) 上記の透析物（合計約600ml ）につい
て、10,000rpm で、４時間遠心分離を行なった後、上澄
液を凍結乾燥させ中間体（乾燥物）約30g を得た。 (4) 上記中間体（乾燥物）を、予め20mMリン酸ナトリウ
ム緩衝液を用いて溶解させて約５(W/v) ％溶液としたの
ち、ミリポア．ステリベクスＧＶフィルター（0.22μm
）を用いて除菌ろ過をしたのち、島津ＬＣ−８Ａ分取
システムを用いて２回、分画を行なった。

【００１３】カラム(1) 、Shodex ＧＦＡ-50Pを用い、
移動相は、20mMリン酸ナトリウム緩衝液（流速：５ml／
分）を用いて目的物を分取した。分取液を一旦、凍結乾
燥して次の工程に移した。次に凍結乾燥物について、カ
ラム（２）、Shodex ＧＳ-310P を用い分画を行なっ
た。移動相は、前記同様に20mMリン酸ナトリウム緩衝液
（pH7.0 、流速:5ml/ 分、注入量2ml)を用い、また凍結
乾燥物も予めこのリン酸ナトリウム緩衝液に溶解し約5
(W/V)％として用いた。このときの画分についての溶出
量は約1,100mlであり、その検出溶出位置は、分子量約2
1,000をピークとする小さな凸を示した。また分子量分
布について、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ法（電気泳動法）による
結果、分子量約10,000、約36,000、約42,000及び約50,0
00にＳ３のバンドが形成された。なお、本明細書におけ
るＳＤＳ−ＰＡＧＥ法の展開条件は次のとおりであっ
た。 ゲル組成：12％ SDS- ポリアクリルアミドゲル Ｔris −緩衝液（pH8.8) 通 電：35mA-90V 泳動時間：５時間 Marker ：Protein Marker,Broad Range(*) 染色液 ：ＣＢＢ(Coomassie Brillant Blue) サンプル：0.15mg

【００１４】また使用したプロテインマーカは次のもの
であり、本測定ではいずれもゲル上に明瞭なバンドを形
成した。 プロテインマーカー プロテイン ＭＷ (Da) β- ガラクトンダーゼ 116,351 血清アルブミン 66,409 グルタミンデヒドロゲナーゼ 55,561 ＭＢＰ２² 42,710 乳酸デヒドロゲナーゼＭ 36,487 トリオセフォスフェートイソメラーゼ 26,625 トリプシンインヒビター (20,040-20,167) ライソザイム 14,313 (5) 上記分取液について再び、(2) と同様のセルロース
膜透析チューブを用いて透析を行なった。透析液は0.０
４％リン酸ナトリウム液を用いた。所要時間は、２４時
間×４回であった。 (6) 上記によって脱塩を行なった後、エンドトキシン除
去操作を行なった後、凍結乾燥を行ない製品とした。製
品の収量は約３０ｍｇであった。

【００１５】〔製剤例１〕 （注射・点滴剤） Ｓ３・１０mgを含有するように、粉末ぶどう糖５ｇを加
えてバイアルに無菌的に分配し密封した上、窒素、ヘリ
ウム等の不活性ガスを封入して冷暗所に保存した。使用
前に生理食塩水を添加して静脈内注射剤とし、Ｓ３の濃
度を１mg/ml とした。これを用いて動物実験を行なっ
た。 〔製剤例２〕 （注射・点滴剤） Ｓ３ ２mgを用いて、製剤例１と同様の方法により軽症
用静脈内注射剤とした。これを用いて、一日、１０〜１
００mlを症状に応じて静脈内注射または点滴で投与する
ことができる。 〔製剤例３〕 （顆粒剤） Ｓ３を１ｇ、乳糖９８ｇおよびヒドロキシプロピルセル
ロース１ｇを各々とり、よく混合した後、常法に従って
粒状に成形し、これをよく乾燥して篩別してビン、ヒー
トシール包装などに適した顆粒剤を製造した。一日、 1
00〜1000mgを症状に応じて経口で投与することができ
る。

【００１６】〔Ｂ−１６メラノーマ細胞に対する抗腫瘍
効果〕ＲＰＭＩ １６４０培地（ニッスイ）１0.２ｇを
純水１０００mlに溶解し、オートクレーブ滅菌し、7.５
％ＮａＨＣＯ₃ でpHを7.０に調整した。冷却後、グルタ
ミン0.３ｇを加え、牛胎児血清１００mlを加えて、培地
を作成した。実施例１で製造した精製Ｓ３を(1) で作成
した培地に溶解し、０μｇ／ml、２００μｇ／ml、１０
００μｇ／ml、５０００μｇ／mlの４種類の培地を作成
した。数日前から培養しておいたＢ−１６メラノーマ細
胞を遠沈して集め、トリパンブルー (Trypan Blue)染色
液で染色し、細胞数をカウントした。滅菌済みの９６ウ
ェルマイクロプレートを用意し、１ウェル当たり、生き
た細胞１×１０⁴ 個を分注し、(2) で作成した４種類の
濃度のＳ３の含まれた培地で培養した。

【００１７】培養を開始してから、５時間後、１０時間
後、２４時間後、４８時間後にトリパンブルー染色液で
染色し、生きている細胞と死んでいる細胞をカウント
し、カウントした細胞数から、Ｂ−１６メラノーマ細胞
の生存率を算出した。その結果は表１及び図１に示した
ように、培養開始後、５時間経過した時点で既に、Ｓ３
の抗腫瘍効果が現われている。Ｓ３を含まない、０μｇ
／mlの培地で培養したものは、Ｂ−１６メラノーマ細胞
が１００％生きているのに対して、Ｓ３を、２００μｇ
／ml含むものは９2.３％、１０００μｇ／ml含むものは
８4.１％、５０００μｇ／ml含むものは７9.５％の生存
率であった。４８時間後まで、コントロール（０μｇ／
ml）で培養した細胞が、７9.１％生きていたのに対し
て、１０００μｇ／ml含むものは、２４時間後には４9.
４％の生存率となり、約半数のＢ−１６メラノーマ細胞
が死に、４８時間後には２2.２％が生き残っただけであ
った。さらに効果が見られた５０００μｇ／mlでは、１
０時間後には約半数となり、２４時間後にはほとんどの
細胞が死滅してしまった。

【００１８】

【表１】 表１ B-16メラノーマ細胞に対する抗腫瘍効果 生存率（％） ─────────────────────────────────── 培養時間（時間） ０ ５ 10 24 48 Ｓ３の濃度 0（μｇ／ml） 100 100 92.2 78.7 79.1 200（μｇ／ml） 100 92.3 81.6 53.2 61.0 1000（μｇ／ml） 100 84.1 83.9 49.4 22.2 5000（μｇ／ml） 100 79.5 45.1 0.03 0

【００１９】〔Ｂ−１６メラノーマ細胞に対する抗腫瘍
効果（ＬＤＨ測定）〕プロメガ(Promega) 社の Cytotox
96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kitを用い、
９６ウェルマイクロプレートを用いてＳ３の濃度を０μ
ｇ／ml（コントロール）、２００μｇ／ml、１０００μ
ｇ／ml、５０００μｇ／mlの４濃度とし、Ｓ３によるＢ
−１６メラノーマ細胞に対する抗腫瘍効果実験を行っ
た。

【００２０】（実験方法）培養しておいたＢ−１６メラ
ノーマ細胞を遠沈して集め、１×１０⁴ 個／１００μｌ
／ウェルとなるように Cedarlane Cytotoxicity Medium
（無血清培地）に溶解し、各ウェルに入れた。これに、
先の４種類の濃度となるようにＳ３を調整し、それぞれ
のウェルに１００μｌづつ加えた。同様のプレートを４
群の各群についてそれぞれ５枚作成し、培養１時間、５
時間、１０時間、２４時間、４８時間後に、死んだ細胞
より出てくるＬＤＨ（乳酸脱水素酵素）値を Cytotox 9
6 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kitで、測定し
抗腫瘍効果を測定した。結果を表２及び図２に示す。表
２及び図４に示すように、培養５時間までのＬＤＨの値
は、全ての群に於てほとんど差がみられないが、培養５
時間以降から、Ｓ３濃度に比例してＬＤＨの値が高くな
ることがわかる。２４時間ではかなり差がみられ、０μ
ｇ／ml（コントロール）の値に比べ、濃度２００μｇ／
mlで1.５８倍、１０００μｇ／mlで2.８３倍、５０００
μｇ／mlで4.９２倍となり、Ｓ３がＢ−１６メラノーマ
細胞に対して優れた抗腫瘍効果を有することがわかる。

【００２１】

【表２】 表２ B-16メラノーマ細胞に対する抗腫瘍効果（LDH) (LDH値) ─────────────────────────────────── 培養時間（時間） １ ５ 10 24 48 Ｓ３の濃度 0（μｇ／ml） 0.047 0.063 0.094 0.228 0.218 200（μｇ／ml） 0.047 0.064 0.127 0.361 0.406 1000（μｇ／ml） 0.053 0.069 0.243 0.644 0.634 5000（μｇ／ml） 0.052 0.077 0.523 1.121 1.196

【００２２】〔マウスによる抗腫瘍効果実験〕Ｃ５７Ｂ
Ｌ／６ＮＪｃｌマウス（７週齢）４０匹を使用した。Ｂ
−１６メラノーマ細胞５×１０⁵ 個を皮下注射でマウス
の脇腹に植えた。マウス４０匹を４群に分け、コントロ
ール群に生理食塩水0.１mlを投与し、他の３群には、Ｓ
３をそれぞれ１μｇ、１０μｇ、及び１００μｇ投与し
た。投与量はマウス一匹につき、Ｓ３をそれぞれ生理食
塩水0.１mlに溶解し、毎週２回づつ、尾静脈より静注し
た。結果を表３及び図３に示す。表３及び図３から明ら
かなように、Ｂ−１６メラノーマ細胞移植後、１６日目
に、生理食塩水投与群では生存率が５０％まで落ちてし
まったが、Ｓ３投与群では、７０〜８０％の生存率を示
している。３８日目には、生理食塩水投与群では、全数
のマウスが死亡してしまい、生存率が０％になってしま
ったが、その日、Ｓ３の１μｇ投与群では１０％、１０
μｇ投与群では２０％、１００μｇ投与群では４０％の
生存率で生存していた。さらに、Ｓ３の１００μｇ投与
群のマウスは４５日目の実験終了日まで４０％の生存率
のまま、生き続けていた。

【００２３】

【表３】 表３ マウスによる抗腫瘍効果 生存率（％） ──────────────────────────────────── 日 数 ０ 10 14 16 20 25 28 31 34 38 41 45 投与群 生理食塩水 100 100 80 50 30 30 20 20 20 0 0 0 S3（１μg) 100 100 90 70 40 30 30 10 10 10 10 0 S3（10μg) 100 100 80 80 60 40 30 30 20 20 20 10 S3 (100 μg) 100 100 80 70 60 60 60 50 50 40 40 40 各群ｎ＝10

【００２４】前記のとおり、Ｓ３は、癌細胞の増殖に対
する抑制作用や癌細胞に対する殺作用を直接的に示すと
ともに、癌を移植したマウスを用いた動物実験において
も顕著な癌細胞の増殖抑制作用や癌細胞に対する殺作用
を示す。従って、Ｓ３は、レンチナンのような免疫を増
強する物質と考えられる。Ｂ−１６メラノーマ細胞を用
いて実験した担癌マウスのなかには癌の腫瘍そのものが
崩れて、剥がれ落ちてしまった例や、瘤状の癌の表面に
痂皮が形成され、その内部の癌細胞が壊死してしまった
例も観察された。そして、生理食塩水を静注したコント
ロール群の平均生存日数が１8.７日であったのに対し
て、Ｓ３投与群の平均生存日数は投与量に比例して延長
されている。４５日目に動物実験を終了した時点に於
て、平均生存日数はＳ３の１μｇ投与群が２0.３日、１
０μｇ投与群が２3.４日、１００μｇ投与群が２9.２日
であった。従って、仮に４５日以降も実験を継続した場
合には、１０μｇ投与群の一匹と１００μｇ投与群の四
匹の生存しているマウスが生き続けて、この二つの投与
群の平均生存日数はさらに延長されたものと思われる。

【００２５】なお延命率（ＩＬＳ％）（Increased life
span ）は以下の計算式により算出した。 延命率（ＩＬＳ％）＝〔（Ｔ−Ｃ）／Ｃ〕×１００
（％） Ｔ：検体投与群（Treated)の平均生存日数 Ｃ：対照群（Control)の平均生存日数 上記の式より１００μｇ投与群の延命率（ＩＬＳ％）は
５6.１％となる。この数値は癌細胞移植後、４５日目ま
でで実験を終了した時の数値であるので、実際には５6.
１％よりもかなり延命率が大きくなるものと思われる。

【００２６】Ｂ−１６メラノーマ細胞を移植した担癌マ
ウスの延命率が、ビンデシンスルフェート(Vindesine s
ulfate) 、ビンブラスチンスルフェート(Vinblastine s
ulfate) 、ビンクリスチンスルフェート(Vincristine s
ulfate) では３０％以下であり、殆ど延命効果が無い
（参考文献１）ことを考慮すると、本発明のＳ３の延命
効果が極めて大きいことがわかる。また、ペプレオマイ
シン（Pepleomycin)では移植部位が皮下の場合はＢ−１
６メラノーマ細胞に対して有効であるが、腹腔内の場合
には有効ではないと報告されている（参考文献２）。５
−フルオロウラシル（5-FU）はＢ−１６メラノーマ細胞
に対する延命率が１４０％となっているが（参考文献
３）、これは延命率を、Ｔ／Ｃで計算してあるためであ
る。これを、上記の計算式により算出すると４０％とな
る。アクラシノマイシンＡ（Aclacinomaycin A）では延
命率が４３％である（参考文献４）のに対して、本発明
のＳ３は１００μｇ投与群では５6.１％以上の延命率を
示す。

【００２７】

【本発明の効果】レンチナンのような免疫増強物質は、
免疫増強作用は有るが直接的に癌細胞の増殖を抑制した
り殺してしまう作用は無いのが一般的である。しかし本
発明のＳ３は免疫力を増強する作用と、癌細胞の増殖に
対する直接的な抑制効果や癌細胞を殺してしまう作用の
両方を有している。従って、本発明のＳ３は、癌をはじ
め、その他の免疫疾患や難治性の疾患に対して有効な新
しい物質として、多くの治療困難な疾患を持った患者た
ちに希望を与える物質として充分に期待を持てるもので
ある。

【００２８】参考文献 １）山口健二ほか：基礎と臨床、１７、１２５９、（１
９８３年） ２）犬山征夫：＜新薬の紹介＞ペプレオマイシン：癌と
化学療法、第７巻、第８号、昭和５５年８月 ３）Goldin A.,et al : Eur.J.Cancer,17,129,(1981) ４）Oki, T., et al : Recent Results cancer Res, 7
6, 21, 1980 "New anthracycline antibiotic aclacino
mycin A: Experimental studies and Correlations wit
h clinical trials"

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明のＳ３のＢ−１６メラノーマ細胞に対す
る抗腫瘍効果を示すグラフである。

【図２】本発明のＳ３のＢ−１６メラノーマ細胞に対す
る抗腫瘍効果（ＬＤＨ）を示すグラフである。

【図３】本発明のＳ３のマウス体内におけるＢ−１６メ
ラノーマ細胞に対する抗腫瘍効果を示すグラフである。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記の性質を有する血清由来抗腫瘍性物
   質Ｓ３： (a) 血清を硫酸アンモニウム50％飽和処理してグロブリ
   ンを沈殿除去し、上澄みを分取し、その硫酸アンモニウ
   ム濃度を80％飽和とし、更に酢酸でpH 5.0として遠沈し
   て得られる沈殿物を、蒸留水で透析、脱塩した後、得ら
   れた分画を再び透析、脱塩し、凍結乾燥することにより
   得ることができる、糖タンパク質を含有する粉末であっ
   て、(b) 分子量分布が約５０，０００以下であり、(c)
   Ｂ−１６メラノーマ細胞に対する抗腫瘍性を有する。
2. 【請求項２】 下記の工程を含む請求項１記載の血清由
   来抗腫瘍性物質Ｓ３の製造法： (イ) 血清を硫酸アンモニウム50％飽和にし、10000 rpm
   で、３０分間遠心分離してグロブリンを沈殿させ、除去
   する工程； (ロ) 工程(イ) の上澄みの硫酸アンモニウム濃度を80％飽
   和に上げ、更に酢酸でpH5.0にし10000 rpm で、４時間
   遠心分離する工程； (ハ) 工程(ロ) の沈殿物を、セルロース膜透析、脱塩する
   工程； (ニ) 液体クロマトグラフィー、濾過法又は遠心分離法に
   より分画を得る工程；及び (ホ) 工程(ニ) の画分を脱塩後、凍結乾燥し粉末とする工
   程。
3. 【請求項３】 請求項１の血清由来抗腫瘍性物質Ｓ３を
   有効成分とする抗腫瘍剤。