HU198626B

HU198626B - Process for producing pharmaceutical compositions comprising somatostatin analogues as active ingredient

Info

Publication number: HU198626B
Application number: HU872150A
Authority: HU
Inventors: Jacky Vonderscher; Joachim Franz; Michel Steiger; Karl Hornung
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1986-05-27
Filing date: 1987-05-13
Publication date: 1989-11-28
Also published as: IL82645A0; FI872313A0; HUT43956A; AU601740B2; FR2630916A1; DE3716437A1; NO872174L; FR2630916B1; SE8702188L; US5393738A; MY101233A; AU7336487A; BE1000722A4; CA1299495C; SE8702188D0; NO872174D0; NL8701143A; FI872313A; LU86901A1; GB2190838B

Description

A találmány tárgya eljárás hatóanyagként szomatosztatin-analógokat tartalmazó, bélrendszerben jól felszívódó, rektális és különösen orális adagolási! gyógyszerkészítmények előállítására.

A polipeptidekkel végzett gyógyászati kezelések igen sok nehézséget rejtenek magukban. A polipeptidek ugyanis igen gyorsan dipeptidekké, ill. aminosavakká bomlanak a testfolyadékokban és általában rosszul szívódnak fel a bélfalakon keresztül orális vagy rektális adagolás esetén. Az alacsony biohozzáférhetöséget, amely gyakran nem több, mint 0,1-1,0%, nagyobb dózisok alkalmazásával nemigen lehet fokozni, mivel a nagyobb adagok gyakran nagy változékonysághoz (intersubject variability) vezetnek, például az AUC görbe alatti terület esetében vagy a maximális hatóanyag koncentrációban (Cp. max). A fenti hatóanyagokat általában a kívánt hatás elérése érdekében parenterálisan adagolják, általában injekció formájában. Ezek beadagolása azonban fájdalmas és különösen ismételt adagolás esetén jelent fájdalmat a betegnek.

A fentiek miatt évek óta folytatnak kísérleteket a polipeptid hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítményekkel kapcsolatban, hogy annak adagolhatóságát megkönnyítsék és a biohozzáférhetóségét (biohasznosithatóságot) javítsák. A vonatkozó szakirodalomban számos szabadalmat és publikációt ismertetnek különböző készítményekre, amelyek fokozottabban képesek a gyomor-bél-traktusban felszívódni.

A 2 092 002 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban például rektális adagolásra alkalmas kúp- és oldat-készítményeket ismertetnek, amelyek a hatóanyag mellett (pl. altatószerek, antibiotikumok, peptid hormonok, Így pl· szomatosztatin) vizoldható anyagokat tartalmaznak olyan koncentrációban hogy az oldat szomatikus nyomása a fiziológiás sóoldaténál nagyobb (pl. vízoldható szacharinok, pl. szacharóz, mannit), kelát-képző tulajdonságú vízoldható vegyületekkel (pl. vizoldható, uronsavat tartalmazó poliszacharidok, vízoldható cellulóz-anyagok) együtt.

Mostanáig azonban még nem sikerült olyan rendszert kifejleszteni, amely alkalmas a szomatosztatinok megfelelő felszívódásét elősegíteni.

Azt tapasztaltuk, hogy a monoszaccharidok és 1 vagy cukor-alkoholok és/vagy poli(alkilén-oxi)-éterek alkalmas adalékanyagok a gyógyszerkészítmények gyomor-bél-traktusban való felszívódásának elősegítésére rektális és különösen orális adagolás esetén. Ezek az adalékanyagok, azonban nem csupán a felszívódást segítik elő a bélfalakon keresztül, hanem kisebb változékonyságot is biztosítanak a felszívódási paraméterekben.

A fentiek alapján találmányunk tárgya eljárás hatóanyagként szomatosztatin peptideket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására, amely gyógyszerkészítmények felszívódása a gyomor-bél-rendszerben jó és a hatóanyag biohozzáférhetősége a vér plazmában legalább 160% az önmagában adagolt polipept.id hatóanyag 100%-os értékéhez viszonyítva.

A relatív biohozzáférhetóség akár 300, még inkább 350 vagy akár 1000% is lehet az orálisan vagy rektálisan önmagában, igy például a közismert készítmények formájában adagolt polipeptidhez viszonyítva. Ezt a tényt a következőkben az elvégzett biológiai vizsgálatokkal igazoljuk.

A CV-t (változási koefficiens), amely a felszívódásban bekövetkező változékonyság jellemzője, ismert módon százalékban kifejezve határozzuk meg oly módon, hogy az átlag AUC értékek standard eltérését ng. óra/ml-ber kifejezeve elosztjuk a ng. óra/ml-ben kifejezett átlagos AUC értékkel vagy hasonló módon a Cp max (ng/ml) alapján is meghatározhatjuk.

Embereken és kutyákon elvégzett kísérletek azt mutatják, hogy az ismert gyógyszerkészítmények, pld. vizes oldatok esetében a CV értéke 100% körüli érték.

A találmány szerinti eljárással előállított készítmények jellemzője, hogy azok CV értéke gyomor-bélrendszerbe való adagoláskor kevesebb, mint 70%.

A biológi vizsgálatok során a CV értékek meghatározásánál legkevesebb 8 kísérleti állatot alkalmazhatunk.

A biohozzáférhetőséget a 3-7-12 órán át felvett görbe alatti területtel (Area under Cuive) jellemeztük.

A kontroll vizsgálatokhoz, orális adagolás esetén, azonos tömegű sóoldattal (0,9 t%-os nátrium-klorid oldat) elkevert szomatosztat'n peptidet, míg rektális adagolás esetén azonos tömegű, ismert kúpkészitmény alapanyaggal, igy például trigliceriddel elkevert szc matosztatin peptidet alkalmaztunk.

A találmány szerinti készítményeket előnyösen egységdózisok formájában állítjuk elő.

Előnyösek a kúpkészitmények, amelyeket ismert módon, például olvasztással vagy Bajtolással állítunk elő, de készíthetők a hatóanyagot szilárd vagy folyékony formában tartalmazó rektális kapszulák formájában vagy kívánt esetben üreges formában is.

A találmány szerinti eljárással nyert orális készítmények lehetnek tabletták vagy kapszulák, amely utóbbiak a hatóanyagot szilárd, cseppfolyós vagy, ha a polipeptid megfelelően stabil, oldat formájában tartalmazzák.

A találmány szerinti eljárással készült készítményekből a szomatosztatin hatóanyag gyorsan oldatba megy, például a gyomornedvben, így például 20 percen belül több nrnt 80%-a nagy koncentrációban felszabadul a rektumban vagy más megfelelő abszorpciós helyen.

HU 198626 Β

A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítmények adalék- és töltőanyagként monoszaccharidokat/cukor-alkoholokat és poli(etilén-oxi)-étereket vagy ezeknek megfelelő anyagokat, tovább adott eset- 5 ben diszpergálószereket, így például kolloidális szilicium-dioxidot és egyéb higitószereket, így például laktózt is tartalmazhatnak.

Az orális adagolásit készítményeket előnyösen kapszulázott porok formájában állít- K) juk elő, amelyekben a por szemcseátmérője 100-400, előnyösen 200 mg körüli érték.

A kúpkészitmények hordozóanyaga általában kakaóvaj, de előnyösen alkalmazhatók különböző szintetikus vagy félszintetikus 15 hordozóanyagok, így például vízben oldhatatlan zsírok, így például mono-, di- vagy trigliceridek vagy zsírsavak, igy például földimogyoró- vagy pálmamagolajból előállított anyagok. 20

A zsirsav-gliceridek közül előnyösek az egyenesláncú 1-18 szénatomos telített vegyületek, így például a következő márkaneveken ismert anyagok: Witepsol, pl. Witepsol H (Dynamit Nobel, NSZK), Suppocire, pl. Suppocire 25 AM vagy AS2 (Gattefosse, Franciaország).

A készítmények más adalékanyagot is tartalmazhatnak.

A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítmények biohozzáférhetőségét 30 ismert eljárásokkal, a következőképpen határozzuk meg.

A módszer (orális adagolásnál, kutyák eseté- 35 ben)

Kb. 10 kg tömegű, 20 órán át éheztetett 8 beagle kutyából ólló kísérleti csoportnak találmány szerinti eljárással előállított 40 gyógyszerkészítményt (kapszula) és összehasonlításul ismert kiszerelésű, például a szomatosztatin peptidet vizes oldat formájában tartalmazó készítményt, majd a készítmények beadagolása után azonnal 20 ml 0,9%-os izo- 45 tóniás vizes nátrium-klorid oldatot (a továbbiakban izotóniás oldatot) adagoltunk.

A vizsgálatokhoz szükséges vérmintákat a véna saphena-ból vettük közvetlenül az adagolás előtt, valamint 20, 40, 60, 90 perc- 50 cél, 3,5 és 7 órával utána. A vérmintákat centrifugáltuk és radioiinmun-vizsgálattal ismert módon meghatároztuk a szomatosztamin tartalmat.

A relatív biohozzáférhetőséget a görbe 55 alatti terület (AUC 0 és 7 óra között) alapján határoztuk meg.

B módszer (rektális adagolásnál, nyulak ese- f;o tében)

A kísérleti nyulaknak (New Zealand, albínó) találmány szerinti eljárással előállított kb. 1,5 g-os kúpkészitményt és kontrollként ifmert kúpkészitményt adagoltunk rektálisan.

A vizsgálatokhoz szükséges vérmintákat a füli vénából vettük közvetlenül az adagolás, valamint 15, 30 perccel, és 1, 2, 3, 4, 5, 6 és 7 órával a kezelés után. A polipeptid-tartalmat ismert módon, radioimmun vizsgálattal határoztuk meg.

A relatív biohozzáférhetóséget az A módszernél leírtak szerint határoztuk meg.

C módszer (rektális adagolásnál, kutyák esetében)

A B módszert alkalmazzuk beagel kutyák esetében.

D módszer (orális adagolásnál, patkányok esetében)

300 g testtömegű Wistar patkányokat 12 órán át éheztetünk, majd uretánnal (2 x 0,7 mg/kg, i. p.) elaltatjuk őket, és a hasukat felnyitottuk, hogy a gyomor-bél traktushoz, különösen a jejunumhoz hozzáférjünk, ahova beinjekcióztuk a találmány szerinti eljárással előállított készítményt és a kontroll készítményt.

A vizsgálatokhoz szükséges vérmintákat (kb. 1 ml) 20 perccel, 2 és 3 órával vettük a véna cava-ból és a plazmában a polipeptid tartalmat centrifugálás után radioimmun-vizsgálat segítségével határoztuk meg. A relatív biohozzáférhetóséget az A módszernél leirtak szerint határoztuk meg.

E módszer (klinikai vizsgálat)

A vizsgálat során önkéntesen vállalkozó egészséges embereknek adagoltuk a találmány szerinti eljárással előállított, valamint a kontroll készítményt reggel, majd utána 12 órán át vettük a vizsgálatokhoz szükséges vérmintákat, amelyeket radioimmun-vizsgálatokkal analizáltunk.

A találmány szerinti eljárással előállított készítményekben hatóanyagként alkalmazott szomatosztatin a következő szekvenciának felel meg:

I

H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe1 2 3 4 5 6 7

-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH 8 9 10 11 12 13 14

A szomatosztatin analóg kifejezés alatt bármely olyan oligopeptidet értünk, amely szomatosztatinnal megfelelő hatású. A szerkezet olyan természetes előfordulási tetradekapeptidek szerkezetének felel meg, amely leg-35

HU 198626 Β alább egy eltérő és/vagy kevesebb aminosav-maradékot tartalmaz, mint maga a szomatosztatin és amely egy vagy több, a szomatosztatinban előforduló rész-szekvenciát tartalmaz, adott esetben származékainak formájában.

Előnyösen alkalmazható szomatosztatin analógokat írnak le a 29 579 számú európai és a 4 395 403 számú egyesült óllamok-beli szabadalmi leírásokban.

Előnyős polipeptid az octreotid (a továbbiakban SMS), amely a következő szekvenciának felel meg:

H-(D)-Phe-Cys-Phe-(D)-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

A fenti polipeptid előállítását az előző hivatkozásokban ismertetik.

A szomatosztatin analógok másik csoportját képezik a 4 435 385 számú egyesült államokbeli szabadalmi leírás 1-20. példájában ismertetett következő szekvenciának megfelelő vegyületek:

CH3-(CHz)8-CO-(D)-Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol továbbá a 3 328 952 számú NSZK-beli nyilvánosságra hozatali iratban ismertetett (1-8 példák) vegyületek, valamint a következő szekvenciáknak megfelelő vegyületek:

1. H-Cys-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-OH [Vale és mtársai. Metabolism, 27, Supp. 1, 139, (1978)].

2. | Asn-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Tht—Phe-Gaba [ (1295 sz. európai közzétételi irat és 78 100 994.9 sz. európai szabadalmi bejelentés).

3. [ MeAla-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Phe | (Veber és mtársai. Life Sciences, 34, 1371-1378 (1984), a 70 021 számú európai közzétételi irat ciklo-(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe) néven is ismert).

4. MePhe-HS-Trp-Lys-Val-Ala [R. F. Nutt és mtársai. Kiin. Wochenschr. (1986) 64 (Suppl. VII) 71-73].

Hacsak másképpen nem említjük, a fenti képletekben szereplő aminosavak L-konfigurációjuak, a -Thr-ol-csoport jelentése az alábbi képletnek megfelelő L-treonil-csoport;

NHz

CH3-CH(OH)CH^(L) ⁵ CHz-OH

-MeAla jelentése N-metil-alanil-csoport, MePhe jelentése N-fenil-alaníl-csoport.

A szomatosztatin és analógjai alkalmasak számos, a niegnövekedett növekedési hormonkiválasztással összefüggő megbetegedések, diabetes meilitus, acroraegália, továbbá különböző gyomor-bél-rendszeri megbetegedések, igy például gyomor- vagy bél-vérzés, tumorok kezelésére, alkalmasak továbbá pso•iasis, aggkori elmebaj vagy migrén kezelésére.

A parenterális injekciókészitmények napi lözisa 2-10 mg, amelyet 2-4 részletben 0,5-5 mg-os, igy például 50-200 jug-os részletekben adagolunk, előnyösen szubkután.

A szomatosztatin peptidek szabad bázis, komplex vagy gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik formájában egyaránt alkal‘ rnazhatók. A komplexek és sók hatása és elviselhetősége általában azonos a szabad bázisokéval.

Előnyös savaddíciós sók a hidrokloridok és acetátok, de a polipeptideket hidrátjaik formájában is alkalmazhatjuk.

Az SMS biológiai hatásáról igen kevés publikáció ismert. Általában ismert, hogy a gyomornedvben igen stabil. Kísérleteink so, rán azt tapasztaltuk, hogy az SMS-nek jelentéktelen az első kiürítési hatása (first pass effect). Patkányok esetében például főleg változatlan formában választódik ki a gyógyszer 80%-a az epében, 20%-a a vizeletben. Az abszorpció túlnyomó részt a béltraktus alsó végén, így például a doodenumban és a jejunumban megy végbe. Az SMS-nek ily módon rövid a tranzit ideje az abszorpció helyét követően. Úgy találtuk, hogy előnyös az SMS orális adagolása olyan készítmények ‘^1j formájában, amelyekből az SMS gyorsan felszabadul a gyomorban és ily módon nagy helyi koncentrációt biztosít.

A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítmények, amelyek a) monoszaccharidokat és/vagy cukor-alkoholokat és/vagy b) poli(alkilén-oxi)~étereket tartalmaznak, képesek a bél-gyomor- traktusban fokozottan felszívódni.

Monoszaccharidként például a kővetkező *’ anyagokat alkalmazhatjuk: tetrózok, pentózok, hexózok, heptózok, októzok, nonozok, különösen például eritróz, treóz, arabinóz, lixóz, xilóz, ribóz, ramnóz, fukóz, digitalóz, kinovóz, apióz, glükóz, mannóz, galaktóz, fruktóz, szorbóz, gülóz, talóz, allóz, altróz, időz vagy glükoheptulóz, továbbá ezek dezoxi-származékai, igy például dezoxi-glükóz, továbbá amino-vegyűletei, így például glükóz-amin vagy éter-származékaik, pl. 3-0-metiI⁽'·* -glükóz vagy 3-O-butil-glükóz. Előnyösen 5

HU 198626 Β glükózt, früktózt vagy 'xilózt, még előnyösebben glükózt és legelőnyösebben xilózt alkalmazunk.

Cukor-alkoholként előnyösen redukált monoszaccharidokat, így például mannitolt vagy szorbitolt, előnyösen mannitolt alkalmazunk.

A poli(alkilén-oxi)-éler vegyületek alkohol komponensként előnyösen a kővetkező, (A) általános képletű vegyületeket alkalmazunk:

amely képletben RO jelentése hosszüszénláncú alkohol-csoport, különösen hosszúszénláncú alkanol vagy alkil-fenol, igy például lauril- vagy cetil-alkohol vagy szterolcsoport, különösen lanoszterol, dihidrokoleszterol vagy koleszterol-csoport vagy ezen csopm tok keveréke.

A találmány szerinti eljárással előállított készítményekben előnyösen (poli(etilén-oxi)vagy poli(propilén-oxi)-étereket (a fenti általános képletben n értéke 2 vagy 3), különösen poli(etilén-oxi)-, lauril-, cetil- vagy koleszteril-étereket vagy ezek keverékét alkalmazzuk.

Az említet éterek alkilén-végcsoportján lévő hidroxilcsoport részlegesen vagy teljesen acilezve lehet, így például alifás karbonsavakkal, például ecetsavval.

A találmány szerinti eljárásnál előnyösen alkalmazható éterek hidrofil-liofil mérlege (HLB csoportszám) 10-20, előnyösen 12-16 közötti szóm.

Különösen alkalmas éterek azok, amelyekben az ismétlődő csoportok száma (a fenti képletben x) 4-75, előnyösen 8-30, különösen 16-26.

Az étervegyületeket ismert eljárásokkal állítjuk elő, és széles választékuk kapható a kereskedelemben, igy például: a különböző Solular^) (Amerchol gyártni.), Ernáiéi) Brij© és Lauretlí© (KAO Soap, ICI. és Atias gyórtm.), valamint Cetomacrogo® (Croda gyártm.) márkanevű termékek.

A következőkben felsorolunk néhány, a találmány szerinti eljárással előállított készítményekben előnyösen alkalmazható poli(alkilén-oxi)-éter terméket [a rövidítések a következőket jelentik: POE = poli(etilén-oxi)-éter; POP = poli(propilén-oxi)-éter; x a PEO, ill. POP részben ismétlődő egységek száma):

1. Koleszteril-éterek:

1.1 Solulai© C-24 - POE, x = 24.

Lanolin-alkoholok éterek

2.1 Solular® 16 - POE, x = 16.

2.2 Solular© 25 - POE, x = 25.

2 Solular® 75 - POE, x = 75.

2.4 Solular© PB-10 - PPE, x = 10.

2.5 Solulan© 98 - POE, x = 10 - részle

gesen acelizett

2.6 SolularíS? 197 - POE, x = 9 - teljesen acelizett

3. Lauril-éterek:

3.1 EmaleÁS) 709/Lauretl© 9 - POE, x = 9.

3.2 Lauretl® 4/Brij£) 30 - POE, x = 4.

3-3 Laure ti© 23/Bri© 35 - POE, x = 23.

4. Cetli-éterek:

4.1 Cetomacrogoí© - POE, x = 20 to 24.

A lanolin-alkoholok szintén ismertek mint gyapjúzsir-alkoholok és koleszterol, díhidrokoleszterol és lanoszterol keverékéből állnak.

A találmány szerinti eljárással előállított készítményekben előnyösen poli(etilén-oxi)koleszterol-étert alkalmazunk, azaz olyan vegyületet, amelyben a fentiek szerinti (A) általános képletben n = 2 és RO jelentése koleszterol-csoport és amely vegyületben a poli(etilén-oxi)-részben az ismétlődő csoportok száma 16-26, előnyösen 24 körüli érték.

Különösen előnyösek azok a fenti éterek, amelyek szennyezéseket nem tartalmaznak és különösen mentesek más egyéb poli(etilén-oxi)-étertől és legalább 75%, előnyösen 85% és különösen előnyösen 95X poli(etilén-oxi)-koleszti-iOl-étert tartalmaznak,

A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítményeket azokban az esetekben alkalmazzuk, amely esetekben a szomatosztatin-hatóanyagot egyébként alkalmaztuk.

A hatóanyagot, monoszacharidokat vagy cukor-alkoholokat és poli(alkilén-oxi)-étereket tartalmazó gyógyszerkészítmények szüksége adagját ismert biohozzáférhetÖBégi vizsgalatok alapján határozzuk meg, igy például a fentiekben az állatokra vagy klinikai vizsgálatra leírt módszerekkel. Kivánt esetben a vizsgálatot ismételt adagolásnál is elvégezhetjük, így például állandósult állaapotban vagy vizsgálhatjuk az ételekkel való kölcsönhatást is. A vérben megjelenő hatóanyag koncentrációt ismert módon, például radioiniinun-vizsgálattal határozzuk meg.

HU 198626 Β

A találmány szerinti eljárással nyert készítményeket naponta 2-4 alkalommal adagoljuk, általában az étkezést megelőzően egy órával.

A találmány szerinti eljárással előállított készítményekben a monoszacharid vagy cukor-alkohol komponens mennyisége széles határok között változhat, általában egységdózis esetében 50-100 mg mennyiségben vannak jelen.

A poli(alkilén-oxi)-éterek mennyisége ugyancsak széles határok között változhat, általában 5-200 mg mennyiségben alkalmazzuk. Orális adagolás esetén az előnyös menynyiség 20-200 mg és rektális adagolás esetén előnyösen 40-60 mg egység dózisonként.

Ha a találmány szerinti készítményben mind a monoszacharid vagy cukor-alkohol, mind poli(alkilén-oxi)-éter komponens jelen van, a monoszacharid vagy cukor-alkohol mennyisége szilárd készítmény esetében 10-500 mg, előnyösen 400 mg, folyékony készítmény esetében 10 g-10 g 20 ml-ben, és a poli(alkilén-oxi)-éter mennyisége 5-200 mg, előnyösen 100 mg szilárd készítményben és 5-500 mg 20 ml-ben folyékony készítmény esetében.

A hatóanyag mennyisége szintén széles határok között változhat, a mennyiség általában 2-10 mg közötti érték. SMS esetében előnyösen 100 pg-35 mg, előnyösen 2-8 mg egység dózisonként.

Különösen előnyösek azok a találmányok szerinti eljárással előállított készítmények, melyek xilözt és poli(etilén-oxi)-étert tartalmaznak. E készítmények jellemzője az alacsony CV (coefficient of variadon, változási koefficiens) érték.

E készítményekben a xilóz és polifetilén-oxi)-éter tömeg aránya előnyösen 2:1 és 1:2 közötti érték. Egységdózis esetében előnyösen a poli(etilén-oxi)-éter tartalom 50-100 mg. A készítmények előállítását ismert módon végezzük.

A korlátozás szándéka nélkük megemlítjük, hogy feltételezésünk szerint a találmány szerinti eljárással előállított készítményekben a hatóanyag, így például az SMS és a monoszacharidok vagy cukor-alkoholok és politalkilén-oxi)-éterek között laza adduktumok képződnek és ennek köszönhető a megnövekedett felszívódás.

A találmány szerinti eljárásnál úgy járunk el, hogy a hatóanyagot és a monoszacharidokat vagy cukor-alkoholokat és a poli(alkilén-oxi)-étereket jól összekeverjük és adagolásra alkalmas készítménnyé alakítjuk.

A kővetkező példákban az alábbi rövidítéseket alkalmaztuk:

AUC (Area under the Curve; görbe alatti terület): átlagértéket jelent (hacsak másképp nem jelöljük), ng. hr/ml-ben kifejezve és az adagolás utáni 0-7 órára vonatkozik, ha másképp nincs jelölve.

Cp max: ng/ml (hacsak másképp nem jelöljük),

SEM : átlagérték standard hibája, n : kísérleti állatok száma,

CV : változási koefficiens,

A relatív és abszolút biohozzáférhetőségi értéket a referencia százalékában fejezzük ki. SMS ac: SMS acetát,

2,3 π g SMS acetát megfelel 2 mg tiszta SMS-nek,

5,8 mg SMS acetát megfelel 5 mg tiszta SMS-nek,

POECE: poli(etilén-oxi)-koleszterol-éter.

POEGE (A) legalább 92% szteroid tartalmú koleszlerolt tartalmaz és az etilén-oxi ismétlődő egységek száma 24.

POECE (B) kb. 60% poli(etilén-oxi)-étert tartalmaz, amelynek fő komponense koleszterol és az ismétlődő etilén-oxi egységek száma kb. 24. A fentmaradó rész hasonlóképpen etoxilezett hosszúszénláncú alkohol, főleg hexil-iekanol (gyártó: Amerchol, Edison, New Jersey, USA).

Sóoldat.· 0,9% NaCI tartalommal, kétszer desztillélt vizzel készítve.

Az alkalmazott adalékok további részletesebb leírása, így például a Solulan C24-re voratkozóan, a következő helyen található: H. P. Piedler, Lexikon dér Hilfsstoffe, 2. kiadás, Cantor, Aulendorf.

A görbéken a plazma szinteket (ng/ml) ábrázoltuk az idő függvényében (T).

1. Példa

SMS biohozzáférhetősége kűpkészitményekben

1.1. 1,5 g-os trigliceriddel (Witepsol*) készült, 5,8 mg SMS ac-t tartalmazó készítményt vizsgáltunk az előzőekben ismertetett B módszer szerint. Összehasonlító kész ítmény ként 0,58 mg SMS acetátot tartalmazó i. v, injekció készítményt alkalmaztunk. A kapott eredményeket az 1. Táblázatban foglaljuk össze.

1. Táblázat

	AUC í S.E.M.	Absz. hozzáférhetőség (%)
SMS ac-t önmagában tartalmazó kúp (olvasztott)	968 ± 219	22 (n = 6)

POECE (A) ;50 mg) + Mannitol (90 mg, tartalmú kúp (olvasztott) 2263 ± 504 (n = 6)

-611

HU 198626 Β

1.2. Az 1.1 pont szerinti készítményeket beagle kutyáknak adagoltuk és a kapott eredményeket a 2. Táblázatban foglaljuk ösz- sze.
2.	Táblázat
	AUC ± S.E.M.	Absz. biohozzáférhetőség (X)
SMC ac-t önmagában tartalmazó kúp (üreges)	2 ± 3	1 (n = 3)
POECE (A) (40 mg) + Mannitol (50 mg) tartalmú kúp (üreges)	64 ± 14	28 (n = 4)

Rektális adagolásnál a biohozzáférhetöség 1000% fölé emelkedik.

2. Példa

SMS biohozzáférhetösége orális adagolásnál

Az A módszert alkalmaztuk, a vizsgálatot 7 órán át végeztük. A hatóanyagot SMS acetát formájában adagoltuk.

2.1. Szilárd és folyékony készítmény (vizes oldat) hatásának összehasonlítása:

3. Táblázat

4. Táblázat

Készítmény	n	AUC ± S.E.M.	Relatív biohoz- záfér- hetóség (X)
2.2.1 2.3 mg SMS + 100 mg	8	4.3 + 0.9	100
2.2.2 2.3 mg SMS + 10 mg POECE (B)	4	5.2 ± 1.9	121
2.2.3 2.3 mg SMS + 20 mg POECE (B)	4	16.3 ± 5.2	379
2.2.4 2.3 mg SMS + 50 mg POECE (B)	8	14.0 ± 3.3	326
2.2.5 2.3 mg SMS + 100 mg POECE (B)	8	13.8 ± 3.0	321

Kimutathatóság határa (RIA-módszer) 1 ng/ml

A táblázat adataiból látható, hogy orális adagolásnál a relatív biohozzéférhetöség 120%, sőt 300% fölé emelkedik, ha a POECE.'SMS arányt 8:1 fölé emeljük.

A fenti vizsgálatoknál kapott plazma szinteket az 1. ábrán grafikusan ábrázoltuk.

2.3. Glükóz hatása vizes oldatokban

Készítmény

n

AUC ± S.E.M.

Relatív biohozzáférhetőség {%)

2.3 mg SMS izotóniás oldatban

(kontroll) 4	6.6 ± 1.1	100
2.3 mg SMS
+ 100 mg
(laktóz) 4	6.5 ± 1.8	100
Kimutathatóság	határa	(RIA-módszer)

0,25 ng/ml

5. Táblázat

	Készítmény n	AUC ± S.E.M. Relatív biohozzáférhető ség (X)
2.1.1	Referencia 4	6.6 í 1.1 100
2.3.1	2.3 mg SMS 20 ml glükóz oldatban (10 g glükóz 20 ml desz-
	tille.lt víz) 4	19.9 ± 1.4 302

Kimutathatóság határa RIA-módszerrel: 0,25 ng/ml

A 2.1.1. és 2.3.1. vizsgálatoknál mért plazma szinteket a 2. ábrán mutatjuk be.

-713

HU 198626 Β

8. Táblázat

2.4. Glükóz hatása kemény zselatin kapszulák esetében

3.1. POECE hatása

6. Táblázat

2.2.1	Referencia	8	4.3	í 0.9	100
2.4.1	2.3 mg SMS + 400 mg Glükóz	4	13.1	± 7.1	305

Kimutathatóság határa RIA-vizsgálattal: 1 ng/ml

2.5. Glükóz és POECE (B) kombináció hatása kemény zselatin kapszulák esetében

7. Táblázat

	Készítmény	n	AUC	± S.E.M.	Relatív biohozzáférhe tőség (%)
2.2.1	Referencia (2.3 mg SMS)	8	4.3	+ 0.9	100
2.2.5	+ 100 mg POECE (B) (2.3. mg SMS)	8	13.8	± 3.0	321
2.4.1	+ 400 mg glükóz (2.3 mg SMS)	4	13.1	+ 7.1	305
2.5.1	2.3 mg SMS + 100 mg POECE (B) + 400 mg glükóz	4	48.8	± 17.9	1135

Kimutathatóság határa (RIA): 1 ng/ml

A 2.2.1., a 2.2.5., a 2.4.1. és a 2.5.1.

vizsgálatoknál mért plazma szinteket a 3. ábrán mutatjuk be.

A POECE és glükóz szinergetikus hatását a táblázatban bemutatott adatok világosan mutálják.

3. példa

SMS biohozzáférhetősége a jejunumban lokálisan alkalmazva

A D vizsgálati módszert alkalmaztuk és a biohozzáférhetősége (AUC) 3 órán át mértük. Az SMS hatóanyagot acetát formájában alkalmaztuk.

	Készítmény	n	AUC ± SEM	Relatív biohozzáférhetőség (%)
3.1.1	50 jug SMS 0,5 ml izo- tóniás oldatban	9	2.0 ± 1.2	100%
3.1.2	Mint 3.1.1. + + 7.2 mg POECE (B)	6	125.4 ± 42.3	6270%
3.2 Glákóz és xilóz hatása vizes oldatban
	9.	Táblázat
	Készítmény	n	AUC (0-3) ± SEM	Relatív biohozzáférhetőség (%)
3.2.1	50 ng SMS 0.5 ml izotóniás sóoldatban	6	0.5 ± 0.4	100%
3.2,2	50 ng SMS + + 27.5 mg glükóz 0.5 ml 2x desztillált vízben*	6	3.8 ± 0.6	760
3.2.3	50 ng SMS + + 100 mg glükóz 0.5 ml 2 x desztillált vízben**	6	2.6 ± 0.4	520%
3.2.4	50 ng SMS + + 250 mg glükóz 0.5 ml 2 x desztillált vízben**	6	26.2 ± 7.2	5240%

-815

HU 198526 Β

9. Táblázat

	Készítmény	n	AUC (0-3) ± SEM	Relatív biohozzáférhetőség (%)
3.2.5	50 pg SMS + 23 mg	+
	xilóz; 0.5 ml 2 x desztillált vízben**	6	6.6 1 2.0	1320%
*	izotóniás
	hipertóniás
	9. Táblázat	(folytatás)
3.2.6	50 Mg SMS + 85 mg xilóz	+
	0.5 ml 2 x desztillált vízben**	6	6.1 ± 0.6	1220%
3.2.7	50 Mg SMS + 210 mg xilóz	+
	0.5 ml 2 x desztillált vízben**	6	46.2 ± 7.8	9240%

Kimutathatóség határa (RIA): 0,2 mg/ml

Azonos mennyiségben alkalmazva a reszorpció xilóz esetén jobban nö, mint glükóz esetében.

4. Példa

CV (változási koefficiens) meghatározása ¹⁰

Eljárás: A módszer, biohozzáférhetőség orális adagolásnál

2,3 mg SMS-acetátot, 100 mg POECE (A) jr, kompozíciót és 100 mg xilózt tartalmazó kemény kapszula készítményt vizsgáltunk, összehasonlító készítményt: 2,3 mg SMS 20 ml sóoldatban beagle kutyáknak adagolva.

A kapott eredményeket (AUC, átlag, kö2(~ zép és CPmax átlag és közép, CV) a következő 10. Táblázatban foglaljuk össze.

10.

Tá.b lázat

	Készítmény	AUC Átlag	AUC Közepes	CV %	Cpmax Átlag	Cpmax Közepes	CV %
4.1.1	Referencia (1. adagolás)	24.8	12.5	112	6.8	3.8	100
4.1.2.	Referencia (2. adagolás)	25.4	14.3	112	6.5	4.3	98
4.2.1.	A készítmény(1. adagolás)	48.2	46.8	49	21.7	25.3	38
4.2.2.	A készítmny (2. adagolás)	39.6	34.7	46	14.9	13.5	41

-917

HU 198626 Β

A táblázatban közölt AUC és Cp max közepes értékek azt mutatják, hogy a találmány szerinti készítmények esetében a CV érték jellemzően csökken. Az AUC és Cp max átlag értékek közelebb vannak a közepes értékekhez.

A CV értékek továbbá az egyes vizsgálatoknál közel azonosak, ami azt mutatja, hogy az egyedeken belüli változékonyság kicsi.

A találmány szerinti eljárással előállított készítmények esetében az AUC középértékek a kontroll értékek 2-3-szorosát, a Cp max középértékek a kontroll értékek legalább 3-szorosát teszik ki.

5. Példa

Változási koefficiens (CV)

Különböző mennyiségű POECE kompozíciók hatása oldatban vagy porban. Biohozzáférhetőség meghatározása: A módszer

2,3 mg SMS acetátot tartalmazó oldatokat és porokat beagle kutyáknak adagoltuk és a ⁴⁰ biohozzáférhetőséget a 4. példában leírtak szerint határoztuk meg. A kapott eredményeket a 11. Táblázatban foglaljuk össze. A táblázatban HGC jelentése: kemény zselatin kapszula.

11. Táblázat

Készítmény (2.3 mg SMS	+ )	AUC Átlag	AUC Közepes	CV %	Cpmax Átlag	Cpmax Közepes	CV %
5.1.1	Referencia 20 ml sóoldatban	15.79	9.60	86.35	4.54	3.98	73.69
5.1.2.	100 mg POECE 20 ml sóoldatban	46.38	44.60	38.43	30.47	24.47	60.69
5.1.3.	100 mg xilöz 20 ml sóoldatban	15.85	11.15	67.48	5.47	5.14	51.71

A közölt adatok azt mutatják, hogy oldatok esetében a CV értékek csökkenek (lásd az 5.1.2., az 5.1.3., az 5.1.4. vizsgálatokat az 5.1.1-hez viszonyítva). Ezzel egyidóben az AUC és Cp max értékek nőnek.

Szilárd készítmények esetében az AUC és Cp max értékek növekedése figyelhető meg (lásd 5.2.1 és 5.2.2. vizsgálatok az 5,1.1hez viszonyítva).

6. példa

Az 1. példában leírtak szerint különböző típusú, így például üreges, olvasztott, sajtolt,

5,8 Tig SMS-acetátot tartalmazó kúpkészitményeket vizsgáltunk. A kapott eredményeket a

12. Táblázatban foglaljuk össze.

12. Táblázat

	*	n	AUC +	SEM	T max óra	Biohozzáférhetőség (%)
6.1.1	Referencia 0.58 mg SMS-acetát	6	4128 ±	522	0.14	100
6.1.2	50 mg POECE (A) + + 50 mg glükóz üreges típus	12	2406 ±	394	0.83	58
6.1.3	Olvasztott típusú 50 mg POECE (A)	6	2263 ±	504	1.08	55
6.1.4.	Mint a 6.1.2. 100 mg glükózt tartalmazó kapszula formájában		2263 ±	599	0.75	55

-1019

HU 198626 Β

7. Példa

Az 1.1. példában leírtak szerint

2,3 mg SMS-t adagoltunk rektális kapszula készítmény, ill· sajtolt kúp formájában. A 5 kapott eredményeket a 13. Táblázatban foglaljuk össze.

13. Táblázat 10

Készítmény	n	Biohozzáférhetőség* %	15
7.1	Kapszula: 96 mg xilóz ί- ι POECE (B)		6	59	20
7.2	Sajtolt típus: 7.1 szerint		5	52.5
7.3	Sajtolt típus: + 96 mg mannitol		6	2.0	25
7.4	Mint a 7.3,
(B)	+ 50 mg POECE (B)	y	6	17.7	30
7.5	Kapszula + 96 mg xilóz	g	6	3.8
7.6	Kapszula + 200 mg laktóz		6	2.4	.15
7.7	Kapszula 200 mg laktóz + + 50 mg POECE (B)		6	45.7	10
* i.v.	injekciókészítményekhez	hasonlítva	45

Készítmények előállítása
1. Kemény zselatin	kapszula
Összetevők:		tömeg
SMS-acetát POECE	(A)	2.3 mg*
POECE (A)		100 mg
Xilóz		100 mg
Kolloidális¹		2.5-3,3 mg
szilícium-dioxid

* megfelel 2 mg SMS-nek HO * Brand Aerosil 200

A fenti komponenseket homogenizáljuk (az SMS-t 5%-ban feleslegben alkalmazzuk a gyártásnál fellépő veszteségek kompenzálására), mujd a kapott keveréket 200 mikronos szitán átszitáljuk és kemény zselatin kapszulákban töltjük. A kapott kapszula oldhatósága (Rotating Paddle-módszer, 0,1 n HCl) legalább 85,5% 20 perc után.

A fentiek szerint eljárva állíthatunk elő bármely más összetételű, igy pl. 8 mg SMS-t, 100 mg POECE (A)-t és 100 mg xilózt tartalmazó készítményt. A készítményekben a megfelelő SMS hatóanyag helyett azonos mennyiségű salmon cacitonint is alkalmazhatunk.

8. Példa

Klinikai vizsgálatok

A klinikai vizsgálatokat 8 mg SMS-t tartalmazó vizes oldat (A kompozíció) és 2 mg SMS-t tartalmazó kemény zselatin kapszula [100 mg xilózt és 100 mg POECE (B)-t tartalmazó B kompozíció] esetében végeztük.

A készítményeket reggel adagoltuk és a vérmintákat ezt követően 12 órán át vettük. A kapott eredményeket (8 mg-os egységdózisra beállítva) a következő 14. Táblázatban foglaljuk össze.

14. Táblázat

Készít- mény	AUC (köze- pes)	CV (%)	Cp max (közepes)	CV (%)
A	1.24	128	0.32	132
B	31.29	71	8.72	66
A	közölt adatok	azt	mutatják, hogy a

találmány szerinti eljárással nyert készítmények esetében a CV érték jelentősen csökken és a biohozzáférhetőség jelentősen nő a vizsgált vizes oldat-készitményhez viszonyítva.

A B kompozíció Cp max értéke jelentősen felülmúlja a 100 pg SMS-t tartalmazó, se. adagolt készítmény esetében mért 3,2 ng/ml-es értéket.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás hatóanyagként szomatosztatin analógokat tartalmazó, fokozottan felszívódni képes gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy a hatóanyagot monoszacharidokkal és/vagy cukor-alkoholokat és/vagy poli(alkilén-oxi)-éterekkel összekeverjük és a gyomor-bél-trak tusba adagolható készítménnyé alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti készítmény, azzal jellemezve, hogy a hatóanyagként oktreotidot alkalmazunk.