FR2711989A1

FR2711989A1 - Nouvelles isoquinoléines, leur préparation et leur utilisation comme médicaments.

Info

Publication number: FR2711989A1
Application number: FR9413108A
Authority: FR
Inventors: Naef Reto
Original assignee: Sandoz AG
Current assignee: Sandoz AG
Priority date: 1993-11-05
Filing date: 1994-10-28
Publication date: 1995-05-12
Anticipated expiration: 2014-10-28
Also published as: NZ264851A; EP0664289A2; GB2283488B; ITRM940706A1; ATA204894A; FI945191A0; ITRM940706A0; GB9322828D0; RU2144027C1; IL111518A0; GB9421985D0; GB2283488A; PL305705A1; CZ269894A3; HU9403184D0; AU7761094A; NO944187L; FI945191A; ZA948738B; NO944187D0

Abstract

L'invention a pour objet les composés de formule I (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle R signifie un groupe éthyle ou n-propyle, et leurs esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables. Lesdits composés sont utiles comme médicaments, par exemple pour le traitement de l'asthme.

Description

La présente invention a pour objet de nouvelles isoquinoléines, leur

procédé de préparation et leur utilisation comme médicaments et les compositions

pharmaceutiques les contenant.

Selon un premier aspect, l'invention concerne un composé de formule I HOCHf-CH2-O R

(:E -0 N

CH3 \HN (I)

3 CH-0 OCH

CH3 II CH3

dans laquelle R signifie un groupe éthyle ou n-propyle, ou un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable de ce

composé, ou un sel d'addition d'acide d'un tel composé ou ester.

Dans la formule I, R signifie de préférence un groupe éthyle.

Par l'expression "ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable", on entend un ester dans lequel le groupe hydroxy du composé de formule I est estérifié et qui est hydrolysable sous des conditions physiologiques pour donner un acide qui est lui-même physiologiquement acceptable aux doses devant être administrées. L'expression doit donc être comprise comme définissant des formes promédicamenteuses normales. Comme exemples de tels esters on peut citer par exemple les acétates et les benzoates des composés de formule I. Les composés de formule I et leurs esters tels que décrits plus haut, existent sous forme libre ou sous forme de sels d'addition d'acides. Les sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables appropriés pour une utilisation comme médicaments selon l'invention, comprennent par exemple le

chlorhydrate, l'hydrogéno-fumarate, l'hydrogéno-maléate et l'hydrogénooxalate.

Les composés, esters et sels de la présente invention sont compris dans la portée de la demande de brevet britannique n 2 213 482 et les brevets et demandes de brevets correspondants. Les composés, esters et sels de la présente invention sont nouveaux et, comparés aux composés, esters et sels décrits spécifiquement dans la demande de brevet indiquée plus haut, possèdent de façon surprenante des propriétés avantageuses, en particulier pour l'utilisation

thérapeutique envisagée, par exemple comme décrit ci-après.

Selon un autre aspect, la présente invention concerne un procédé de préparation d'un composé de formule I tel que défini plus haut ou d'un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable de ce composé ou d'un sel d'addition d'acide d'un tel composé ou ester, procédé selon lequel (a) pour la préparation d'un composé de formule I, on déprotège et/ou on déshydrogène un composé de formule II Ri

XO-(CH2) 2-- R

/N R2

CH30 (II)

(iC3H7) O O (iC3H7) o R a la signification indiquée pour la formule I et X signifie l'hydrogène et R. et R2 signifient une liaison supplémentaire comme indiqué par les pointillés, ou bien X signifie un groupe protecteur du groupe hydroxy et RI et R2 signifient chacun l'hydrogène ou une liaison supplémentaire comme indiqué par les pointillés, (b) pour la préparation d'un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable d'un composé de formule I, on estérifie un composé de formule I, et on récupère le produit de l'étape a) ou b) sous forme libre ou sous forme d'un

sel d'addition d'acide.

La déshydrogénation et/ou l'élimination des groupes protecteurs du groupe hydroxy selon l'étape a) du procédé, peuvent être effectuées selon des méthodes connues dans la technique. Avantageusement, l'étape a) du procédé comprend aussi bien la déprotection que la déshydrogénation, par exemple en utilisant un composé de formule II o X signifie un groupe benzyle protecteur et RI et R2 signifient chacun l'hydrogène, et en effectuant la scission du groupe benzyle et la déshydrogénation selon une réaction en un seul stade, par exemple par traitement avec un catalyseur au palladiunm/charbon à une température élevée, sous atmosphère inerte et dans un solvant ou un diluant inerte, par exemple

comme décrit ci-après à l'exemple 1.

L'estérification selon l'étape b) du procédé peut également être effectuée selon les procédés habituels, par exemple par réaction d'un composé de formule I avec un halogénure ou un anhydride d'acide en présence d'une base, par exemple une amine ou un carbonate de métal alcalin. La réaction est effectuée avantageusement dans un solvant ou un diluant inerte, par exemple à une

température de 0 à 120 C, sous atmosphère inerte.

Les produits de départ pour l'étape a) du procédé ci-dessus, peuvent être préparés selon le schéma réactionnel suivant

HO CHO

C;O X^O <cH2>' 31X O- CHO X o- (CH, ),- Y: xO(I) - CO (TIla) <IIb) (ZTZb) (d) CI3 (IV) X o- CH,) 2; / -CO-R X1 O -<C)-R (V) CEs30 {VI0) (VI) coy3 <VI) I. (f) (iC3H7) 0 0 ( iCH.) (VII) x

X O-(CH2)2-O / CH2 CH R

CH0 CH

X 0 - ( CH,), - < ( IIa()II (iC3H7) O (iC3H,) X O- (CH)- R<g CH30 (lia> ( iC3H7) 0 0 (iC3H7) o X' signifie un gorupe protecteur du groupe hydroxy, par exemple un groupe benzyle, Y' et y2 signifient chacun un groupe éliminable et R a la signification indiquée pour la formule I. Les groupes éliminables appropriés Y' sont par exemple l'iode ou un groupe tosyle, ce dernier étant préféré pour une production à plus grande échelle. y2 signifie avantageusement le chlore. Les étapes (c) à (g) peuvent être effectuées selon les procédés habituels, par exemple comme décrit aux exemples joints. La déprotection des composés de formule ia donne des composés de formule II dans lesquels X signifie l'hydrogène. La déshydrogénation des composés de formule Ia donne des composés de formule II dans lesquels Rl

et R2 signifient ensemble une liaison supplémentaire.

Les composés de formule Ila, HIb et VII sont connus dans la technique et disponibles dans le commerce, ou peuvent être préparés de manière analogue aux composés connus. Ainsi, les composés de formule VII peuvent être préparés à partir du 3,5-dihydroxy-benzoate de méthyle, tout d'abord par alkylation de ce composé avec l'iodure d'isopropyle en présence d'une base telle que K2CO3 en utilisant par exemple la méthyléthylcétone comme solvant, hydrolyse du 3,5-di-isopropoxy-benzoate de méthyle obtenu, par exemple par

traitement par NaOH dans du méthanolet transformation de l'acide 3,5-di-

isopropoxy-benzoique obtenu en halogénure d'acide correspondant, par exemple le

chlorure d'acide, par exemple par réaction avec SOC12.

Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement

en limiter la portée.

Exemple 1:

Préparation de la 1-(3,5-di-isopropoxyphényl)-3-éthyl-6-(2-hydroxyéthoxy)-7-

méthoxy-isoquinoléine (formule I: R = -C2H5) i) Etape (a) du procédéDéprotection et déshydrogénation:

Pendant 5 heures, on agite à 200 C et sous argon 13,5 g de 6-benzyl-

oxyéthoxy- 1 -(3,5-diisopropoxyphényl)-3-éthyl-7-méthoxy-3,4-dihydro-iso-

quinoléine (formule IIa: X' = un groupe benzyle, R = un groupe éthyle), 1,3 g de Pd/C (10%) et 500 ml de décahydronaphtalène. On refroidit le mélange réactionnel à la température ambiante, on le filtre sur Hyflo et on le lave avec de

l'acétate d'éthyle. A 50 , on élimine par distillation sous vide le décahydro-

naphtalène et on purifie le produit obtenu par chromatographie sur gel de silice

( 0,04-0,06 mm), ce qui donne le composé du titre: F de la base libre = 116-

118 C; F du chlorhydrate = 218-2220C; F de l'hydrogéno-fumarate = 82,5 C; F de

l'hydrogéno-oxalate = 106-107 C; F de l'hydrogéno-maléate = 87-96 C.

On peut préparer les produits de départ du procédé ci-dessus, en procédant comme suit: ii) 3-(2-benzyloxyéthoxy)-4-méthoxy-benzaldéhyde (formule IV: X1 = un groupe benzyle) Pendant 12 heures, on agite au reflux 20 g d'isovanilline (formule lifa), 41,3 g d'iodure de 2- benzyloxyéthyle (formule BIb) et 21,8 g de carbonate de potassium dans 200 ml d'éthylméthylcétone. On refroidit la suspension obtenue à la température ambiante, on sépare le précipité par filtration, on lave la solution avec de l'acétone et on l'évapore. On reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on lave la solution avec de l'eau (3 fois) et une solution saturée de chlorure de sodium (1 fois). On sèche la phase organique, on la filtre et on l'évapore, ce qui

donne le composé du titre sous forme d'une huile.

iii) 3-(2-benzyloxyéthoxy)-4-méthoxybenzyl-éthyl-cétone (formule V: X1 = un groupe benzyle, R = un groupe éthyle) A une suspension préparée au préalable de méthylate de sodium dans ml d'éther de tert.-butyle et de méthyle, on ajoute goutte à goutte en l'espace de 50 minutes à 5 C, 24 g du produit de l'étape (ii), 21,5 g de bromobutyrate d'éthyle et 30 ml d'éther de tert.-butyle et de méthyle. On agite le mélange réactionnel pendant 45 minutes à environ 5 C et on l'agite ensuite pendant 12 heures à la température ambiante. On ajuste le pH à 5 par addition d'acide acétique glacial, on dilue la suspension obtenue avec de l'eau et on l'extrait 3 fois avec de l'éther de tert.-butyle et de méthyle. On extrait la phase organique avec du NaHCO3 (1 fois) et une solution saturée de chlorure de sodium (1 fois), et on l'évapore jusqu'à un volume d'environ 100 ml. On ajoute goutte à goutte 13,5 mi de NaOH aqueux à 50%, on agite le mélange pendant 2 heures à 40 C, on le dilue avec 50 ml d'eau et on l'agite pendant encore 30 minutes à la température ambiante. On sépare la phase organique et on ajuste le pH de la phase aqueuse à 1 à une température maximale de 40 C, avec 15 ml d'HCl concentré. On agite le mélange réactionnel à 40 C pendant encore 1 heure et demie, on le refroidit à la température ambiante et on l'extrait avec du toluène. On lave la phase organique avec du NaHCO3 et une solution saturée de chlorure de sodium, on la sèche sur Na2SO4, on la filtre et on l'évapore, ce qui donne le composé du titre sous forme

d'une huile.

iv) 1-[3-(2-benzyloxyéthoxy)-4-méthoxyphényll-2-aminobutane (formule VI: X1 = un groupe benzyle, R = un groupe éthyle) On agite pendant la nuit à la température ambiante et sous atmosphère inerte, 20,6 g du produit de l'étape (iii), 48,4 g d'acétate d'ammonium et 3,9 g de cyanoborohydrure de sodium dans 235 ml de CH3OH en présence de 12,1 g d'un tamis moléculaire de 0,4 mm(4 i). On filtre le mélange réactionnel sur Hyflo et on le lave avec du CH3OH. On concentre le filtrat, on reprend le résidu dans de l'éther éthylique et on l'extrait avec du NaOH à 15%, de l'eau et une solution de chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur Na2SO4, on la filtre et on

l'évapore, ce qui donne le composé du titre sous forme d'une huile.

v) N-(3,5-di-isopropoxybenzoyl)-1-[3-(2-benzyloxyéthoxy)-4méthoxyphényl]-2-

aminobutane (formule VIII: X1 = un groupe benzyle, R = un groupe éthyle) En l'espace de 1 heure et demie, on ajoute goutte à goutte 19,9 g de chlorure de 3,5-di-isopropoxybenzoyle dans 100 ml de CH2C12 à un mélange de

17,0 g du produit de l'étape (iv), de 15,6 g de triéthylamine et de 630 mg de N,N-

diméthylaminopyridine dans 150 ml de CH2CI2 et on agite le mélange réactionnel pendant 12 heures à une température comprise entre environ 0 et la température ambiante. On concentre le mélange obtenu, on reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on l'extrait avec du HC1 IN, une solution à 10% de NaHCO3 et une solution saturée de chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur Na2SO4, on la filtre et on la concentre. On dilue avec de l'éther éthylique le résidu qui commence à cristalliser et on le filtre, ce qui donne le composé du titre. Ce

dernier est utilisé pour la réaction ultérieure sans purification supplémentaire.

vi) 6-benzyloxyéthoxy-1-(3,5-di-isopropoxyphényl)-3-éthyl-7-méthoxy-3,4-

dihydroisoquinoléine Au reflux, on agite pendant 5 heures 15,3 g du produit de l'étape (v) et 12,4 g de POCI3 dans 250 ml d'acétonitrile. On concentre le mélange réactionnel, on reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on l'extrait avec une solution de Na2CO3 et une solution saturée de chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur Na2SO4, on la filtre, on l'évapore et on purifie le résidu par chromatographie sur gel de silice ( 0,04-0,63 mm), ce qui donne le composé du

titre sous forme d'une huile.

Exemple 2:

Préparation de la 1-(3,5-di-isopropoxyphényl)-6-(2-hydroxyéthoxy)-7méthoxy-

3-n.propyl-isoquinoléine (formule I: R = un groupe n-propyle) On prépare le composé du titre en procédant comme décrit à l'exemple 1: la base libre est obtenue sous forme de mousse, l'hydrogéno-oxalate fond à

154-156 C.

Les composés de formule I, leurs esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables et les sels d'addition d'acides

pharmaceutiquement acceptables desdits composés et esters (désignés collective-

ment ci-après les composés de l'invention) exercent une activité pharmacologique et sont indiqués pour l'utilisation comme médicaments, par exemple en thérapie,

pour le traitement de maladies et d'états tels qu'indiqués ci-dessous.

En particulier, les composés de l'invention exercent une activité inhibitrice de l'isoenzyme de la nucléotide phosphodiestérase cyclique (PDE), ladite activité étant sélective pour l'isoenzyme de type IV et présentant de façon surprenante une spécificité plus marquée pour le type IV que les composés connus.

Les composés de l'invention possèdent des propriétés anti-

inflammatoires, d'anti-hyperactivité des voies aériennes et bronchodilatatrices.

Ils possèdent aussi une activité immunosuppressive, une activité d'inhibition de la sécrétion de TNFa et d'autres activités pharmacologiques, qui peuvent être mises en évidence par des méthodes d'essai normalisées, par exemple de la manière suivante: (Toutes les expériences décrites ci-dessous sont avantageusement réalisées avec Ihydrogéno-oxalate du composé étudié, à savoir le composé de l'exemple 1. Dans le cas du composé de l'exemple 1, on peut préparer une solution mère 3OmM stable de 1 'hydrogéno-oxalate avec 10% de Tween dans du C2H5OH absolu à 80%. Pour les expériences pharmacologiques, on doit le diluer au moins au dix millième.)

INHIBITION DE L'ISOENZYME PDE

ESSAI A: Essai d'inhibition de l'isoenzvme PDE humaine Toutes les préparations d'isoenzymes sont dérivées de sources humaines. On obtient des préparations de types III et IV en tirant parti de la prédominance des isoenzymes de type III dans les plaquettes et des isoenzymes de type IV dans les neutrophiles, en employant les techniques suivantes:

Des cellules et des tissus sont homogénéisés sur de la glace dans du Tris-

HCI 10mM, pH 7,4, contenant: du saccharose (250mM), de l'EDTA lmM, du dithiothréitol (1 mM), de la leupeptine et de la pepstatine A (1 plg/ml de chaque) et du fluorure de phénylméthylsulfonyle (PMSF, 0,17 mg/ml, ajouté juste avant l'homogénéisation). Les neutrophiles (type IV) et les plaquettes (types Il et III) sont obtenus à partir de sang humain et soumis à des ultrasons (sonde Branson, 4 x 15 s). Le poumon humain (types I et V) est obtenu auprès de patients opérés et est homogénéisé à l'aide d'un homogénéisateur Polytron (deux salves de 30 s). Préparations d'isoenzymes: les préparations de PDE III et IV (substrat cAMP 1gM) sont constituées respectivement de surnageants, obtenus à faible vitesse, d'homogénéisats de plaquettes et de neutrophiles. Les types I (substrat cAMP 11M, Ca2+ 0,5mM, calmoduline 125nM), Il (cAMP 1001zM) et V (cGMP

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1 iM) sont séparés par chromatographie d'6change d'anions (Q-Sépharose) à l'aide d'un gradient de NaCI dans un tampon d'homogénéisation, sans saccharose et PMSF (NaCI 0 à 0,1M dans 2,5 volumes de colonne, 0,1 à 0, 45M dans 24 volumes de colonne). PDE 1: fractions dans lesquelles l'hydrolyse de cAMP 11M peut être stimulée par Ca2+ + calmoduline (respectivement 0,5mM et nM); élution à NaCI 0,17-0,18M. PDE Il: fractions présentant une activité hydrolytique de cAMP substantielle à 1001M, mais pas à 11M; élution à NaCI 0,31-0,32M. PDE V: fractions hydrolysant sélectivement cGMP 11M par rapport à

cAMP 11gM; élution à NaCI 0,20-0,24M.

L'activité PDE est testée en présence et en l'absence de substance à étudier, à différentes concentrations, par la méthode de la colonne échangeuse d'ions décrite par Thompson et coll., Nucleotide Res., Q10, 69-92 (1979), avec de

l'AMP cyclique tritié 11M comme substrat.

Dans cette méthode d'essai, les composés de l'invention inhibent de façon prédominante les isoenzymes PDE de types III, IV et V, avec relativement peu d'effet sur les types I et Il. Dans le groupe des types III, IV et V, les composés de l'invention présentent une sélectivité notablement accrue pour l'inhibition des isoenzymes PDE de type IV, par comparaison avec d'autres inhibiteurs connus des isoenzymes PDE, et peuvent être caractérisés comme étant spécifiques de l'isoenzyme de type IV. Ainsi, dans un essai, le composé de l'exemple 1 sous forme d 'hydrogéno-oxalate, se révèle avoir une activité au moins 180 fois plus forte à inhiber l'isoenzyme de type IV que d'autres

préparations d'isoenzymes étudiées.

ACTIVITE ANTI-INFLAMMATOIRE

ESSAI B: Inhibition de l'activation éosinoohile par la formyl-MetLeuPhe (fMLP) Des éosinophiles humains purifiés (104/puits dans 0,2 ml de HBSS) sont stimulés avec de la fMLP (11M) en présence de lucigénine (251iM). L'inhibition de la salve d'oxydation (mesurée par les variations de la chimiluminescence) est

déterminée à partir des courbes dose-réponse à l'aide de l'équation logistique.

Les composés de 1 'invention sont actifs dans la méthode d'essai ci-

dessus à des concentrations de l'ordre de 0,001 à 0,51M.

ESSAI C: Inhibition de la sécrétion de TNFax On transfère à la pipette 900!l de cellules THP-1 (0,5.106 cellules avec U de y-interféron/0,9 ml) dans des plaques de culture à 24 puits et on y ajoute 100 g1i de substance à étudier. Au bout de 3 heures à 37'C dans un mélange de 5% de CO2 et de 95% d'air, on ajoute 10 RI de LPS à 5.g/ml et on poursuit l'incubation pendant 40 heures de plus. On inclut aussi des témoins appropriés. Les milieux sont ensuite retirés et clarifiés par centrifugation à 1 000xg pendant 10 minutes. On ajoute aux puits 1,0 ml de digitonine à 0,01% pour lyser les cellules que l'on détache par raclage à l'aide d'une spatule souple et laissées à 4'C pendant 10 min. Les mesures de lactate déshydrogénase sont ensuite réalisées immédiatement et les échantillons sont stockés à -20'C jusqu'à ce que d'autres mesures soient effectuées. Les dosages sont: IL-1 B (milieu), TNF-a (milieu) et ADN (lysats). Les dosages de IL-1 B et de TNF-a sont faits avec

des trousses ELISA du commerce.

On utilise la méthode de Kapuscinski et coll., Anal. Biochem. (fa, 252257 (1977)) pour doser l'ADN. On mélange des échantillons de 300!l de lysat de cellules dans de la digitonine à 0,01% avec 750 RI de tampon Tris-HCI, pH 7,0

(contenant Na2SO4 13,2mM), 300!il de H20 et 150 Il de DAPI (4',6diamidino-

2-phénylindole,2HCI) 2 Ig/ml. On mesure ensuite la fluorescence à 372 nm (excitation) et à 454 nm (émission) en utilisant un fluorimètre de type Perkin Elmer 3000. Les échantillons sont mesurés sur une courbe d'étalonnage d'ADN

de thymus de veau (0,5 à 10 I.g/ml) testé en même temps.

La lactate déshydrogénase est dosée de la manière suivante: on introduit des échantillons de 50 1l (milieu ou lysat de cellules dans 0,01 % de digitonine) à des plaques de microtitration à 96 puits, puis on ajoute 200 I1 de NADH 0,3mM/pyruvate de sodium lmM dans du tampon phosphate de sodium 62mM, pH 7,5. La plaque est mélangée doucement à l'aide d'un agitateur mécanique de plaque de microtitration et placée dans un spectrophotomètre Twinreader (Flow Laboratories). Les valeurs d'extinction à 340 nm sont mesurées automatiquement à intervalles d'une minute durant 11 minutes, et la vitesse enzymatique est calculée automatiquement à l'aide d'un programme informatique. Comme l'activité enzymatique est perdue par congélation et

décongélation, les dosages sont réalisés sur des échantillons frais.

On ajoute aux composés étudiés y-IFN à différentes concentrations, et on

les laisse avec les cellules pendant toute la durée de l'expérience.

Dans la méthode d'essai ci-dessus, les composés de l'invention présentent une inhibition puissante de TNFat à des concentrations de l'ordre de 0,001 à 0,51M. On observe une inhibition de IL-1 B seulement à une

concentration significativement plus élevée.

ESSAI D: Inhibition de la production de SRS-A Des cobayes sont sensibilisés passivement 24 heures avant l'essai par administration i.v. de 1 ml d'antisérum anti-ovalbumine homologue. Avant la provocation antigénique, les animaux d'essai sont prétraités avec 0,32 mg/kg de propanol i.v. (inhibition des catécholamines endogènes), 3,2 mg/kg i.v. de mépyramine (antagonisme des récepteurs H1) et 3,2 mg/kg i.v. d'indométhacine (inhibition de la cyclo-oxygénase). La provocation par l'allergène est effectuée par administration de 32 gg/kg d'ovalbumine i. v. et la réponse constrictive résultante sur la résistance des voies aériennes est utilisée comme mesure fonctionnelle de l'activité SRS-A. Des groupes d'essai séparés reçoivent 10 mg/kg i.v. de FPL 55712 (inhibiteur des récepteurs LTD4), 1 minute avant la provocation, ou la substance à étudier à différentes doses, i.v., par perfusion, à partir de 16 minutes avant la provocation. Les groupes recevant FPL 55712 présentent une abolition de la bronchoconstriction, ce qui confirme l'action de

SRS-A comme médiateur de la réponse.

Dans la méthode d'essai ci-dessus, les composés de 1'invention inhibent la production de SRS-A, comme le montre la réduction de la réponse

constrictive à des doses de l'ordre de 5 à 100 Ig/kg/min, par perfusion i.v.

ESSAI E: Létalité induite oar l'endotoxine bactérienne (LPS) chez le cobaye Des cobayes sont anesthésiés par injection intrapéritonéale de phénobarbitone sodique (100 mg/kg), avec supplément de pentobarbitone sodique (30 mg/kg), et paralysés par injection intramusculaire de gallamine (10 mg/kg). Les animaux sont ventilés (8 ml/kg, 1 Hz) avec un mélange d'air et d'oxygène (40:60 en volume) par une canule trachéale. La ventilation est surveillée au niveau de la trachée par un pneumotachographe raccordé à un capteur de pression différentielle. Les variations de pression coïncidentes dans le thorax sont mesurées par une canule intrathoracique, à l'aide d'un capteur de pression différentielle, pour permettre de mesurer et d'afficher la différence de pression entre la trachée et le thorax. La tension artérielle et la fréquence cardiaque sont enregistrées à partir de l'artère carotide à l'aide d'un capteur de pression et une canule est introduite dans la veine jugulaire droite pour permettre la perfusion intraveineuse de la substance à étudier, à partir d'une pompe à perfusions, avant et en même temps que la perfusion de LPS, à un débit constant (3,0 ml/h pour donner 10 mg/kg/h). On introduit une canule dans la veine jugulaire gauche pour administrer du ( )-propranolol (1 mg/kg) injecté sous forme d'un embol intraveineux. A partir des mesures de débit d'air et de pression transpulmonaire, on calcule à la fois RL et Cdyn après chaque cycle respiratoire, en utilisant un système de surveillance pulmonaire électronique digital qui affiche la tension artérielle, la pression intrathoracique et le débit d'air et calcule en temps réel RL et Cdyn pour les afficher sur une unité d'affichage visuel. Les résultats expérimentaux sont stockés en continu et, à la fin d'une expérience, les points expérimentaux et les données traitées sont portés sur des courbes.

La perfusion de ( )-propranolol assure une sensibilité permanente à LPS.

Chez les animaux anesthésiés prétraités avec le (+)-propranolol, une perfusion de LPS dans le modèle ci-dessus provoque une obstruction progressive des voies aériennes. Il s'ensuit habituellement une mort par choc endotoxinique

dans l'heure qui suit l'arrêt de la perfusion de LPS.

Dans le modèle d'essai ci-dessus, I'administration des composés de 1 itenttoni à des doses de l'ordre de 1 à 500.ig/kg/min, i.v., protège les animaux C.ontre l'obstruction des voies aériennes induite par l'endotoxine (LPS)

au cours de l'expérience, ainsi que la létalité induite par LPS.

ESSAI F: Eczéma de contact irritant induit par l'acide arachidonioue chez la souris Des souris NMRI femelles (d'environ 30 g) sont traitées localement, à la fois sur la face interne et sur la face externe de l'oreille droite, par 10 Rl de mélange de diméthylsulfoxyde, d'acétone et d'éthanol (2:4:4) contenant différentes concentrations de composé à étudier. Au bout de 30 min, l'oreille droite est traitée localement à l'intérieur et à l'extérieur avec 1 mg d'acide arachidonique dans 10 1l d'acétone. Les animaux sont sacrifiés au bout de 30 min, les oreilles sont amputées sur la ligne cartilagineuse et pesées. La différence de poids entre l'oreille gauche et l'oreille droite est calculée et le pourcentage d'inhibition est déterminé par rapport à un groupe témoin recevant

seulement un traitement à l'acide arachidonique.

Les composes de l'invention inhibent l'eczéma de contact dans le modèle d'essai ci-dessus lorsqu'on les applique à une concentration de l'ordre

de 3,0 à 300mM.

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ACTIVITE BRONCHODILATATRICE

ESSAI G: Relâchement des bronches humaines Des échantillons de poumons humains disséqués lors d'une chirurgie de traitement du cancer sont obtenus dans les 3 jours après leur prélèvement. Les petites bronches (diamètre intérieur = 2 à 5 mm) sont excisées, découpées en segments et placées dans des ampoules de stockage dans l'azote liquide de 2 ml remplies de sérum de veau foetal (FCS) contenant du diméthylsulfoxyde 1, 8M (DMSO) et du saccharose 0,1M comme agents cryoprotecteurs. Les ampoules sont placées dans une boîte de polystyrol (1 lxl 1x22 cm) et congelées lentement à une vitesse moyenne de refroidissement de 0, 6'C/min, dans un congélateur maintenu à -70'C. Au bout de 3-15 h, les ampoules sont transférées dans de

l'azote liquide (-196'C), o elles sont stockées jusqu'au moment de l'emploi.

Avant l'emploi, les tissus sont exposés pendant 30-60 min à -70 C avant d'être décongelés en 2,5 min, opération que l'on réalise en plaçant les ampoules au bain-marie à 37'C. Ensuite, les segments bronchiques sont rincés dans un récipient contenant une solution de Krebs-Henseleit (composition mM: NaCI 118, KCI 4,7, MgSO4 1,2, CaCI2 1,2, KH2PO4 1,2, NaHCO3 25, glucose 11, EDTA 0,03) à 37'C, découpés en anneaux et suspendus dans des bains d'organes de

ml pour permettre l'enregistrement de la tension isométrique sous une pré-

charge d'environ 1 g. Les courbes concentration-réponse sont produites par additions cumulées, chaque concentration étant ajoutée lorsque l'effet maximum a été produit par la concentration précédente. On ajoute de la papavérine (3001lM) à la fin de la courbe concentration-réponse pour provoquer le relâchement total des anneaux bronchiques. Cet effet est considéré comme

représentant 100% de relâchement.

Dans le modèle d'essai ci-dessus, les composés de l'invention produisent un relâchement, lié à la concentration, des préparations d'anneaux

de bronches humaines, à des concentrations de 0,001 à 1,01OM.

ESSAI H: SuDpression de la bronchoconstriction induite oar SRS-A Des cobayes (Dunkin-Hartley, mâles, 400-600 g) sont anesthésiés au phénobarbital (100 mg/kg i.p.) et au pentobarbital (30 mg/kg i.p.) etparalysés avec de la gallamine (100 mg/kg i.m.). Les animaux sont ventilés par une canule

trachéale (8 mVkg, 1 Hz) avec un mélange d'air et d'oxygène (45:55 en volume).

La tension artérielle et la fréquence cardiaque sont enregistrées au niveau de l'artère carotide. La ventilation est surveillée à l'aide d'un capteur de débit de type Fleisch en ligne dans le circuit inspiratoire. Pour effectuer les mesures de débit, on surveille directement les variations de pression coïncidentes dans le thorax par un trocart intrathoracique, ce qui permet d'afficher la pression différentielle relativement à la trachée. A partir de cette information, en relation avec le débit et la pression différentielle, on calcule la résistance [RL] et la compliance [Cdyn] en utilisant un analyseur respiratoire numérique pour chaque

cycle respiratoire.

Les animaux d'essai sont sensibilisés passivement 24 h avant l'essai par administration d'antisérum anti-ovalbumine homologue (1 ml, i.v.). Avant la provocation par l'allergène, les animaux sont prétraités au propranolol (0,32 mg/kg i.v.) pour inhiber les effets des catécholamines endogènes, à la mépyramine (3,2 mg/kg i.v.) pour bloquer les récepteurs histaminiques H1 et à l'indométhacine (3,2 mg/kg i.v.) pour inhiber la cyclooxygénase. La provocation par l'allergène est effectuée par administration d'ovalbumine (OA) et la réponse constrictive résultante sur la résistance des voies aériennes est utilisée comme

mesure fonctionnelle de l'activité SRS-A.

On réalise deux expériences: 1) Dans la première, les animaux sont soumis à une provocation par OA (32 mg/kg i.v.) et on étudie les effets de l'inhibiteur des récepteurs D4 des leucotriènes FLP 55712 (10 mg/kg i. v., 1 min avant la provocation par OA) et le composé étudié (1, 10 et 100 mg/kg/min, administré par perfusion i.v.,

en commençant 15 min avant la provocation par OA).

2) Dans la seconde, les animaux sont soumis à une provocation par OA (1,0 ou 1,8 mg/ml, inhalé sur 60 inspirations) et on mesure l'effet du composé étudié, administré à différentes doses, directement dans le poumon par

instillation trachéale.

Dans l'expérience 1, I'effet bronchoconstricteur de OA est aboli à l'issue de l'administration de PLF 55712, ce qui corrobore la médiation de la réponse

par SRS-A. Les composés-l.1:iaventjon présentent une inhibition dose-

dépendante de la réponse bronchoconstrictive.

Dans l'expérience 2), les composés d- i'invention présentent une actiYité--

inhibitrice à des doses de l'ordre de 0,001 à 10 mg/kg/min, par instillation trachéale. ESSAI 1: Suppression de la bronchoconstriction induite par la bombésine Des animaux (cobayes) sont préparés de la manière décrite ci-dessus pour l'essai H. De la bombésine est administrée par perfusion i.v. constante à 100 mg/kg/min, provoquant ainsi un bronchospasme prolongé. La substance à étudier est administrée par i.v. dans du sérum physiologique ou i.d. dans un

mélange d'éthanol et de sérum physiologique (1% vol./poids). L'effet broncho-

dilatateur est mesuré au bout de 1 min et de 3 min après l'administration i.v., ou de 16 min et de 64 min après l'administration i.d., et est exprimé en pourcentage d'inhibition de la réponse initiale, à l'aide de RL comme indice de fonction pulmonaire. Dans le modèle d'essai ci-dessus, les composés de l'invention présentent une activité bronchodilatatrice marquée à des doses de

l'ordre de 0,001 à 0,1 mg/kg i.v. ou de 0,1 à 5,0 mg/kg i.d.

ESSAI J: Suppression de la bronchoconstriction induite oar la méthacholine (MeCH) chez le singe rhésus Des singes rhésus mâles (de poids corporel 10,3-13,2 kg) sont anesthésiés à la cétamine (20 mg/kg i. m., initialement) et maintenus sous thiopental (8 mg/kg/h i.v.) par une sonde à demeure dans la veine saphène gauche, pendant toute la durée de l'expérience. On laisse les animaux respirer spontanément et on les place en position couchée latérale gauche. Le larynx, l'épiglotte et le pharynx sont anesthésiés (xylocaïne en administration topique) pour permettre l'introduction et la mise en place d'une sonde endotrachéal

pédiatrique à ballonnet de 4,5 mm.

On administre du MeCH sous forme d'aérosol (véhicule sérum physiologique; aérosol produit par un nébulisateur fonctionnant sous un débit d'air de 6 litres/min, granulométrie moyenne de 3,5 um), avec une respiration normale exposée pendant 2 minutes. Tous les essais emploient une solution de 0,6 mg/ml ou une solution de 2,5 mg/ml, dans le cas de mauvaises réponses à la MeCH. Les essais de bronchoconstriction à la MeCH sont espacés de 30 min, l'administration de la substance à étudier (dans une suspension à véhicule

lactose, 1 mg/ml, 1 ml administré sous contrôle bronchoscopique, 1 cm au-

dessus de l'éperon trachéal) se faisant 15 min avant la provocation à la MeCH.

La substance à étudier est administrée de façon cumulative. L'activité bronchodilatatrice est estimée en pourcentage d'inhibition de la réponse

bronchoconstrictive à la MeCH sur la résistance.

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Les composés de l'invention sont actifs dans le modèle d'essai ci-

dessus, par administration à des doses de l'ordre de 10 à 500 ng/kg.

SUPPRESSION DE L'HYPERACTIVITE DES VOIES AERIENNES

ESSAI K: Hyperactivité induite oar le comolexe immun chez le cobaye Des cobayes sont anesthésiés et préparés pour l'enregistrement de la fonction pulmonaire comme dans l'essai F ci-dessus. La réaction allergique est induite par administration i.v. de complexes immuns préformés (préparés par addition de 30 ig de y-globuline bovine dans 0, 05 ml de sérum physiologique à de l'anti-sérum de cobaye anti-y- globuline bovine) 3 fois à intervalles de 10 min. Ensuite, une administration i.v. d'histamine (1-3,7 gIg/kg à intervalles de 10 min) permet de définir la sensibilité des voies aériennes avant et après l'administration du complexe immun. L'hyperactivité des voies aériennes est exprimée par la différence appariée pour la valeur maximale RL de la réponse à l'histamine, avant et après l'administration du complexe immun. Les composés étudiés sont administrés par voie intratrachéale (i.t.) à différentes doses, après

l'induction de l'hyperactivité.

Les composés de l'invention sont actifs pour abolir ou restreindre l'hyperactivité des voies aériennes dans la méthode d'essai ci-dessus, par

administration à des doses de l'ordre de 0,5 à 50,0!ig/kg i.t.

ACTIVITE IMMUNOSUPPRESSIVE

ESSAI L: Réaction des lymphocytes mixtes murins Environ 0,5 x 106 lymphocytes de rate de souris Balb/c femelles (8-10 semaines) sont incubés pendant 5 jours dans 0,2 ml de milieu de croissance

cellulaire avec environ 0,5 x 106 lymphocytes de rate de souris CBA femelles (8-

semaines). La substance à étudier est ajoutée au milieu en différentes concentrations. L'activité est dosée par la capacité à freiner la prolifération associée à la synthèse d'ADN, déterminée par l'incorporation de thymidine radio-marquée. Les composés de l'invention. inhibent l'incorporation de la thymidine à

des concentrations de l'ordre de 0,1 à 50,0nM.

On constate également que les composés de l'invention - inhibent les réponses prolifératives in vitro des globules mononucléaires périphériques humains, par exemple à la tuberculine et, en particulier, présentent un effet inhibiteur synergique en conjonction avec les agents à activité immunosuppressive, par exemple les cyclosporines immunosuppressives telles

que la cyclosporine A, et les corticostéroides.

En plus de ce qui précède, des essais pharmacologiques généraux indiquent que les composés -,e 1'invention présentent un profil marqué et étonnamment amélioré en ce qui concerne l'utilisation thérapeutique envisagée, comme on le détaille ci-dessous, par rapport aux composés connus antérieurement, par exemple une influence réduite sur la réponse comportementale et/ou, en particulier, un effet cardio-vasculaire réduit pour ce qui est des paramètres hémodynamiques (influence sur la fréquence cardiaque,

induction de la vasoconstriction, etc.).

On observe ainsi que, dans une série d'expériences à l'aide de l'essai de débit aortique Doppler chez le lapin [J. Pharmacol. Meth. 24, 263-267 (1990)], le

composé de l'exemple 1 sous forme d. 'hydrogéno-

oxalate, ne présente aucun effet secondaire cardio-vasculaire à des doses allant jusqu'à environ 0,3 mg/kg, et seulement une faible diminution de la fréquence

cardiaque (due à une vasoconstriction à des doses de l'ordre de 1 mg/kg).

De même, le même composé, sous forme dl hydrogéno-

oxalate, ne produit que peu ou pas de variations de la tension artérielle moyenne, de la fréquence cardiaque et des concentrations plasmatiques en glucose, par exemple par administration à des chiens conscients de doses allant, par exemple, jusqu'à 0,3 mg/kg i.v., ou 0,6 mg/kg p.o., qui donnent une inhibition substantielle et durable de PDE IV ajouté au

plasma. Toutes les doses sont généralement bien tolérées.

Comme on l'a déjà indiqué, les composés de 1'invention. sont aussi caractérisés par une spécificité marquée et accrue en tant qu'inhibiteurs de l'isoenzyme PDE de type IV. Ils sont aussi caractérisés par une demi-vie de la

durée d'action métabolique notablement plus longue.

En ce qui concerne leur activité anti-inflammatoire, leur influence sur l'hyperactivité des voies aériennes et leur profil en relation avec l'inhibition de l'isoenzyme PDE, en particulier comme inhibiteurs sélectifs du type IV, les composés de 1 ' invention ' sont indiqués pour être utilisés dans le traitement, en particulier le traitement prophylactique, des maladies obstructives ou inflammatoires des voies aériennes, par exemple par administration continue et régulière sur des périodes de temps prolongées, pour conférer une protection accrue contre la récurrence de crises de bronchoconstriction ou d'autres crises symptomatiques consécutives à une maladie obstructive ou inflammatoire des voies aériennes, ou pour contrôler, améliorer ou inverser le statut basai d'une

telle maladie.

En ce qui concerne leur activité bronchodilatatrice, les composés de l'invention sont indiqués pour être utilisés comme bronchodilatateurs, par exemple pour le traitement de bronchoconstriction chronique ou aiguë, par exemple pour le traitement symptomatique des maladies obstructives ou

inflammatoires des voies aériennes.

Les mots "traitement" et "traitant", tels qu'on les emploie ici dans toute la

présente description et les revendications, en ce qui concerne les maladies

obstructives ou inflammatoires des voies aériennes, doivent être compris comme

englobant à la fois les modes de traitement prophylactiques et symptomatiques.

Selon ce qui précède, la présente invention concerne A une méthode a) pour le traitement de l'hyperactivité des voies respiratoires, b) pour l 'obtention de la bronchodilatation ou, en particulier, c) pour le traitement d'une maladie obstructive ou inflammatoire des voies respiratoires, chez un sujet nécessitant un tel traitement, ladite méthode comprenant l'administration audit sujet d'une quantité efficace d'un composé de l'invention. Les maladies obstructives ou inflammatoires des voies aériennes auxquelles se rapporte la présente invention englobent l'asthme, la pneumoconiose, la maladie obstructive chronique des voies aériennes ou la bronchopneumopathie chronique obstructive (COAD ou COPD) et le syndrome de détresse respiratoire aiguë de l'adulte (ARDS), ainsi que l'exacerbation de l'hyperactivité des voies aériennes consécutive à un autre traitement

médicamenteux, par exemple à un traitement par de l'aspirine ou par un B-

stimulant. La présente invention est applicable au traitement de l'asthme, quel que soit son type ou sa genèse, y compris l'asthme intrinsèque et, en particulier, l'asthme extrinsèque. Elle est applicable au traitement de l'asthme allergique (atopique/à médiation IgE). Elle est aussi applicable au traitement de l'asthme non atopique, y compris, par exemple, de l'asthme bronchitique, induit par l'exercice ou dû au travail, de l'asthme induit par une infection bactérienne qui suit et d'autres asthmes non allergiques. Elle est également applicable au traitement du syndrome de la respiration sifflante du nourrisson (asthme infantile naissant). L'invention est applicable au traitement de la pneumoconiose, quel que soit son type ou sa genèse, notamment, par exemple, l'aluminose, I'anthracose, l'amiantose, la chalicose, la ptilose, la sidérose, la silicose, la nicotinose et la byssinose. L'invention est applicable au traitement de COPD ou de COAD, notamment de la bronchite chronique, de l'emphysème pulmonaire ou de la

dyspnée qui y sont associées.

L'invention est aussi applicable au traitement de la bronchite, quel que soit son type ou sa genèse, notamment de la bronchite aiguë, arachidique,

catarrhale, chronique, croupale ou phtinolde.

En ce qui concerne leur activité comme inhibiteurs sélectifs de la libération de TNF-a, les composés de l'invention sont aussi indiqués pour être utilisés dans l'abaissement ou l'inhibition de la libération de TNF-a, par exemple pour le traitement de maladies ou d'états dans lesquels la libération de TNF-a est impliquée ou joue un rôle de médiation, par exemple les maladies ou les états ayant une étiologie mettant en jeu ou comprenant une libération de TNF-a morbide, par exemple indésirable, excessive ou non régulée, en particulier pour le traitement de la cachexie ou du choc endotoxinique et dans le traitement du

SIDA [Cf. Sharief et coll., Mediators of Inflammation, J1, 323-338 (1992)].

La méthode de l'invention est applicable au traitement de la cachexie associée à la libération de TNF-c morbide ou de taux sériques de TNF-a d'origine quelconque, notamment la cachexie consécutive, par exemple, à une infection bactérienne, virale ou parasitaire, ou à une carence ou une détérioration de la fonction humorale ou d'autres fonctions organiques, par exemple de la fonction rénale. Il est, par exemple, applicable au traitement de la cachexie cancéreuse, paludique et vermineuse, de la cachexie résultant d'un dysfonctionnement des glandes pituitaire, thyroïde ou thymique, ainsi que de la cachexie urémique. Il est en particulier applicable au traitement de la cachexie

consécutive ou associée à une infection à HIV.

La méthode' de l'invention est aussi applicable au traitement du choc endotoxinique. A cet égard, il convient de noter que la présente invention fournit une méthode pour le traitement du choc endotoxinique, ainsi que des états consécutifs ou symptomatiques du choc endotoxinique, par exemple l'ARDS

(syndrome de détresse respiratoire aiguë de l'adulte).

La méthod' de l'invention est également applicable au traitement de maladies consécutives à une infection à HIV, par exemple du SIDA, par exemple

pour améliorer ou contrôler la progression de la maladie.

En ce qui concerne leur profil en relation avec l'inhibition des isoenzymes PDE et/ou l'inhibition de la libération de TNFa, ainsi que leur activité immunosuppressive, les composés de l'invention sont également indiqués pour être utilisés comme agents immunosuppresseurs, par exemple pour le traitement de maladies auto-immunes, en particulier pour le traitement de maladies auto-immunes dans lesquelles sont impliqués des processus inflammatoires ou qui mettent en jeu un constituant ou une étiologie inflammatoire, ou bien comme agents anti- inflammatoires pour le traitement de maladies inflammatoires, en particulier pour le traitement de maladies inflammatoires dans lesquelles sont impliquées des réactions auto-immunes ou

qui mettent en jeu un constituant ou une étiologie auto-immune.

Des exemples de ces maladies auxquelles s'applique la présente invention englobent les troubles hématologiques auto-immuns (par exemple l'anémie hémolytique, I'anémie aplasique, I'anémie hypoplastique congénitale et la thrombopénie idiopathique), le lupus érythémateux systémique, la polychondrite, la sclérodermie, la granulomatose de Wegener, la dermatomyosite, I'hépatite chronique active, la myasthénie grave, le syndrome de Steven-Johnson, la sprue idiopathique, les affections intestinales inflammatoires auto-immunes (rectocolite hémorragique, maladie de Crohn), l'ophtalmologie endocrinienne, la maladie de BasedowGraves, la sarcoidose, I'alvéolite, la pneumopathie chronique par hypersensibilité, la sclérose en plaques, la cirrhose biliaire primitive, le diabète juvénile (diabète sucré de type 1), I'uvéite (antérieure et postérieure), la kératoconjonctivite sèche et la kératoconjonctivite vernale, la fibrose pulmonaire interstitielle, le rhumatisme psoriasique et la glomérulonéphrite (avec ou sans syndrome néphrotique, par exemple, notamment, le syndrome néphrotique idiopathique, la néphropathie à lésions glomérulaires minimes), ainsi que les maladies de la peau inflammatoires et/ou hyperprolifératives, telles que l'eczéma psoriasique atopique, le pemphigus et, en particulier, l'eczéma de contact, par exemple

l'eczéma de contact allergique.

Les composés de 'invention - sont particulièrement indiqués pour être utilisés dans le traitement de l'arthrite et d'autres maladies rhumatismales ou

inflammatoires, en particulier pour le traitement de la polyarthrite rhumatoïde.

Comme immunosuppresseurs, les composés de l'invention sont en outre indiqués pour être utilisés dans la prévention du rejet des greffons, par exemple pour le maintien des transplantations d'organes allogéniques ou analogues, par exemple pour ce qui est des transplantations du rein, du foie, du poumon, du coeur, du coeur-poumon, des intestins, de la moelle osseuse, de la

peau ou de la cornée.

En ce qui concerne leur activité anti-inflammatoire, en particulier l'inhibition de l'activation des éosinophiles, les composés de l'invention sont aussi indiqués pour être utilisés dans le traitement des troubles liés aux éosinophiles, par exemple l'éosinophilie, en particulier des troubles des voies aériennes liés aux éosinophiles (impliquant, par exemple, l'infiltration morbide d'éosinophiles dans les tissus pulmonaires), y compris l'hyperéosinophilie, lorsqu'elle affecte les voies aériennes et/ou les poumons, ainsi que, par exemple, les troubles, liés aux éosinophiles, des voies aériennes consécutives ou concomitantes du syndrome de Lôffler, la pneumonie à éosinophiles, I'infestation parasitaire (en particulier métazoaire) (notamment l'éosinophilie tropicale), I'aspergillose bronchopulmonaire, la périartérite noueuse (notamment le syndrome de Churg et Strauss), le granulome éosinophile et les troubles liés aux éosinophiles affectant les voies aériennes, occasionnés par la réaction aux médicaments. En ce qui concerne leur profil en relation à l'inhibition des isoenzymes PDE, en particulier leur profil d'inhibiteurs sélectifs de type IV, les composés de l 'invention. sont également indiqués pour être utilisés comme inhibiteurs de PDE de type IV, par exemple pour le traitement de maladies mettant en jeu une carence en calcium des tissus, en particulier les maladies osseuses et articulaires dégénératives impliquant une carence en calcium, notamment l'ostéoporose. A cet égard, ils sont aussi indiqués pour être utilisés dans le traitement de maladies inflammatoires allergiques telles que la rhinite, la conjonctivite, la dermatite atopique, l'urticaire et les allergies gastro-intestinales; quant aux vasodilatateurs, par exemple pour le traitement de l'angine de poitrine, de l'hypertension, de l'insuffisante cardiaque et de la démence vasculaire; et pour le traitement d'autres états dans lesquels l'inhibition de PDE IV est indiquée, par exemple la dépression, les états et les maladies caractérisés par une altération de la fonction cognitive, notamment la maladie d'Alzheimer, la

maladie de Parkinson et l'attaque cérébrale.

En ce qui concerne leur capacité à interagir de façon synergique avec des médicaments immunosuppresseurs et/ou anti-inflammatoires, les composés de l'invention sont aussi indiqués pour l'utilisation comme agents de co-thérapie à utiliser en association avec ces médicaments, par exemple comme potentialisateurs de l'activité thérapeutique de ces médicaments ou comme moyens de réduire les doses ou les effets secondaires potentiels de ces médicaments. Les substances médicamenteuses avec lesquelles on peut avantageusement co-administrer les composés de l'invention englobent, par exemple, les médicaments immunosuppresseurs ou anti-inflammatoires de type cyclopeptide, cyclopeptolide ou macrolide, par exemple les médicaments appartenant à la famille des cyclosporines, par exemple les cyclosporines A ou G, les médicaments de type tacrolymus (aussi connus sous le nom de FK 506), I'ascomycine et la rapamycine et leurs différents congénères et dérivés connus, ainsi que les glucocorticostéroides. Les maladies auxquelles peut s'appliquer une co- thérapie englobent, par exemple, toute maladie ou état nécessitant une thérapeutique médicamenteuse immunosuppressive ou anti-inflammatoire, par exemple comme celles décrites ci-dessus. En particulier, les composés de l'invention conviennent pour être utilisés en co-,therapie, comme on l'a

dit ci-dessus, par exemple pour des traitements immunosuppresseurs, anti-

inflammatoires ou anti-asthmatiques, par exemple pour assurer un effet d'épargne sur une cyclosporine, par exemple la cyclosporine A, un macrolide ou

un stéroïde.

Selon ce qui précède, la présente invention fournit aussi: B une méthode a) de réduction ou d'inhibition de la libération de TNF-ta, b) d'inhibition de l'activité d'isoenzyme PDE IV, c) d'immunosuppression, d) de traitement d'une maladie inflammatoire, ou e) de traitement de tout état ou maladie particulier indiqué ci-dessus, chez un sujet nécessitant un tel traitement, ce procédé comprenant l'administration audit sujet d'une quantité efficace d'un composés de l'invention.

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La présente invention concerne également: C. un composé de l'invention pour l'utilisation comme médicament, par exemple pour une utilisation dans l'une quelconque des méthodes indiquées ci-dessus ou dans le traitement de n'importe quelle maladie ou état indiqués

plus haut, par exemple comme définis sous A ou B ci-dessus.

Les doses indiquées selon la présente invention dépendront bien entendu de la maladie ou de l'état particuliers à traiter, du composé de l'invention utilisé, du mode d'administration et de la thérapie désirée. En général toutefois, on obtient des résultats satisfaisants par exemple pour le traitement des maladies indiquées plus haut, en administrant par voie orale des doses comprises entre environ 0,01 et 2,0 mg/kg, une dose quotidienne appropriée par voie orale étant donc de l'ordre d'environ 0, 75 à 150 mg, administrée en une seule fois ou en doses fractionnées 2 à 4 fois par jour, ou sous une forme à libération retardée. Les doses unitaires destinées à une administration par voie orale contiennent d'environ 0,2 à 75 ou 150 mg, par exemple d'environ 0,2 ou 2,0 à 50, 75 ou 100 mg de composé de l'invention, en association avec un diluant ou véhicule

pharmaceutiquement acceptable.

Pour l'utilisation dans le traitement des maladies chroniques ou obstructives des voies respiratoires, par exemple l'asthme, on préfèere une administration par inhalation. Les doses utilisées dépendront là encore de la maladie ou de l'état particuliers, de l'agent de l'invention utilisé, du mode d'administration particulier (par exemple sous forme d'inhalation d'une poudre sèche etc...) et de l'effet désiré. En général toutefois, la dose quotidienne inhalée appropriée est comprise entre environ 2,5 et environ 130,0 lg/kg/jour, par exemple de 13,0 à environ 60,0 lgkg/kgjour, une dose quotidienne indiquée pour une administration par inhalation, par exemple pour le traitement de l'asthme, étant d'environ 0,2 à environ 10,0 mg, par exemple d'environ 1 à environ 5 mg, administrée avantageusement en une seule fois ou en 2 ou 3 administrations séparées au cours de la journée. Une dose appropriée sera donc de l'ordre d'environ 200 pg à environ 3,3 mg, jusqu'à 3 fois par jour, sous forme d'une inhalation d'une poudre sèche à partir d'un dispositif de libération et au rythme de

2 à 8 pulvérisations à chaque administration.

Les composés de l'invention peuvent également être administrés sous une autre forme appropriée, par exemple par perfusion, par exemple pour le traitement du choc à l'endotoxine; par voie nasale, par exemple pour le traitement

de la rhinite; par voie occulaire, par exemple pour le traitement de maladies auto-

immunes de l'oeil; par voie dermique, c'est-à-dire par voie topique sur la peau, par exemple pour le traitement de dermatoses ou du psoriasis; ou par voie rectale, par exemple par lavement ou par suppositoires, par exemple pour le traitement des maladies inflammatoires des intestins. Les doses appropriées pour l'une quelconque de ces applications sont de 10 à 100 fois inférieures à celles

nécessaires pour une administration par voie orale.

Les compositions pharmaceutiques contenant les composés de l'invention peuvent être préparées selon les techniques connues en galénique, en utilisant les diluants ou excipients habituels. Comme formes appropriées pour l'administration par voie orale, on peut citer les comprimés, les gélules etc... Pour une application par voie dermique, on peut citer les crèmes, les pommades, les gels ou les systèmes à libération transdermique, par exemple les timbres, qui, outre des diluants ou des véhicules inertes, peuvent également contenir des agents

augmentant la pénétration dans la peau, également connus dans la technique.

Les compositions destinées à l'inhalation comprennent les formulations pour aérosols ou pour pulvérisations ainsi que les poudes sèches inhalables, avec ou sans diluant, pour une administration dans n'importe quel dispositif connu dans la technique pour l'inhalation d'une poudre sèche. Pour la préparation de poudres sèches destinées à l'inhalation, on utilise les composés de formule I ou leurs esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables sous forme d'un sel d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable. Dans le cas du composé de l'exemple 1, le chlorhydrate (F= 218-222 C) est particulièrement approprié. Ledit sel est avantageusement broyé, par exemple dans un broyeur à jet d'air ou en céramique, ce qui donne une poudre inhalable finement divisée, ayant par exemple une dimension moyenne des particules d'environ 2-3 p. Avantageusement, au moins 90% de la substance aura une dimension moyenne des particules inférieure à 7,81a, plus préférablement inférieure à 4,8 p. Pour obtenir un produit particulier ayant la consistance appropriée pour l'inhalation sous

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forme d'une poudre sèche, il peut être préférable d'effectuer le broyage de la substance active, par exemple le chlorhydrate du produit de l'exemple 1, en association avec un véhicule inhalable approprié, par exemple le lactose, et à une

température réduite.

Conformément à ce qui précède, la présente invention concerne également une composition pharmaceutique contenant un composé de l'invention, en association avec un diluant ou véhicule pharmaceutiquement acceptable, par exemple pour l'utilisation dans l'une quelconque des méthodes indiquées plus haut. Les sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables descomposés de l'invention ont le même ordre d'activité et de tolérance que les composés de formule I tels que définis plus haut ou que leurs esters

physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables.

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Claims

REVENDICATIONS

i.Un composé de formule I

HO-CH7C7H2-O R

CH3-0 (iC3H7) -O - (iC3H7) dans laquelle R signifie un groupe éthyle ou n-propyle, ou un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable de ce

composé, ou un sel d'addition d'acide d'un tel composé ou ester.
2. Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R

signifie un groupe éthyle.
3. Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R

signifie un groupe n-propyle.
4. Une composition pharmaceutique comprenant un composé de

formule I tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou un ester

physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable de ce composé ou un sel d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable d'un tel composé ou

ester, en association avec un diluant ou véhicule pharmaceutiquement acceptable.
5. Un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou un

ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable de ce composé ou un sel d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable d'un tel

composé ou ester, pour l'utilisation comme médicament.
6. Un composé, ester ou sel tel que défini à la revendication 5, pour l'utilisation dans le traitement des maladies obstructives ou inflammatoires des

voies respiratoires.
7. Un composé, ester ou sel tel que défini à la revendication 6, pour

l'utilisation dans le traitement de l'asthme.
8. Un procédé de préparation d'un composé, ester ou sel tel que défmi à la revendication 1, caractérisé en ce que

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(a) pour la préparation d'un composé de formule I, on déprotège et/ou on déshydrogène un composé de formule II Ri

XO - (CH2)2 - R

I R2

CH30 (II)

(iC3H7)o 0 O (iC3H7) o R a la signification indiquée pour la formule I et X signifie l'hydrogène et RI et R2 signifient une liaison supplémentaire comme indiqué par les pointillés, ou bien X signifie un groupe protecteur du groupe hydroxy et R1 et R2 signifient chacun l'hydrogène ou une liaison supplémentaire comme indiqué par les pointillés, (b) pour la préparation d'un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable d'un composé de formule I, on estérifie un composé de formule I, et on récupère le produit de l'étape a) ou b) sous forme libre ou sous forme d'un

sel d'addition d'acide.