FR2467848A1

FR2467848A1 - Sels d'acides 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxyliques et d'amines steriquement encombrees, leur preparation et leur utilisation therapeutique

Info

Publication number: FR2467848A1
Application number: FR8022412A
Authority: FR
Inventors: Riaz Fazal Abdulla; Donald Clifford Delong
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1979-10-25
Filing date: 1980-10-20
Publication date: 1981-04-30
Also published as: ZA806437B; ES496210A0; PT71939B; YU268880A; FI803294L; EP0029658A1; ES8205207A1; IL61313A0; BE885793A; CA1149381A; GR69994B; DK449780A; IT8025538A0; AU6351280A; PT71939A; US4252954A; IT1134009B; CS212304B2; DD153689A5; PL227421A1

Abstract

L'invention concerne des sels d'acides 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique et d'amines stériquement encombrées de formule :

Description

[ Cette invention concerne de nouveaux sels d'amines

stériquement encombrées de certains acides 6,7-dihalo-2-

quinoxalinecarboxyliques, les procédés de préparation de ces substances actives sur le plan pharmacologique, des compositions pharmaceutiques contenant les sels comme ingrédient actif, et l'utilisation des sels dans la

chimiothérapie des infections virales chez les mammifères.

L'activité antivirale du 1-aminoadamantane (amantidine, 1-adamantylamine) a été décrite pour la première

fois par Davies et al. Science, 144, 862 (1964). La 1-

adamantylamine est la première des amines fortement

encombrées dont on a trouvé qu'elles ont une activité anti-

virale. Il est dit que la 1-adamantylamine est active de façon prophylactique vis-à-vis de la souche A2 du virus de la grippe. Le composé peut également avoir une certaine utilisation dans la prophylaxie des souches de grippe

asiatique apparentées de façon antigénique à la souche A2.

Selon la présente invention, il est fourni un sel

d'amine encombrée d'acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylique de formule I:

R-1 _C00 NHR R-R-

/

n dans laquelle R et R sont indépendamment des atomes

R2 CHR

d'halogène; R est H, CH3 ou C2H5; R, quand il est pris séparément, est H, CH3, C2H5, C2H4OH, CH2C6H5 ou CH2 COOC2H5; R, quand il est pris indépendamment, est un radical ' hydrocarboné encombré du groupe comprenant les groupements

cyclooctyle, norbornyle, Ad et CHR2Ad o Ad est un radical 1-

adamantyle de formule R2 -i a <X\/R2 e ou un radical 2-adamantyle de formule R2

II L -F R2

1f 2 "I,, ou un radical 3-(4-homoiso)twistane de formule T ou un radical tricyclo-undécane de formule i l 2 T - ou de formule o R a la même signification que précédemment, et R et R quand ils sont pris avec l'atome d'azote sur lequel ils sont fixés, forment une adamantylspiropyrrolidine de formule -N/" Cette invention fournit également un procédé de préparation d'un sel de formule I décrite précédemment, qui consiste à faire réagir l'acide libre ou un sel de l'acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique de formule II 1 i X C) II H dans laquelle R et R1 sont tels que définis précédemment, avec la base libre ou un sel de l'amine encombrée de formule

NR2R3 R III

2 3 4

dans laquelle R, R et R sont tels que définis précédemment.

Elle fournit également une composition pharmaceutique contenant comme ingrédient actif un sel

d'amine encombrée d'un acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylique, de formule I définie précédemment,

associé à un support pharmaceutiquement acceptable approprié.

Elle fournit également un sel d'amine encombrée

d'un acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique de formule I telle que définie précédemment, pour l'utilisation dans le traitement d'une maladie virale

chez un mammifère.

La 1-adamantylspiropyrrolidine (spiroamine) est

appelée de façon systématique spiropyrrolidine-3,2'-tricyclo-

[3.3.3.13'7]décane ou adamantane-2-spiro-3'-pyrrolidine.

Des exemples des sels appartenant au domaine de

cette invention comprennent les sels de l'acide 6,7-dibromo-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique et des amines encombrées suivantes: 1-adamantylamine 2-adamantylamine 3,5-diméthyl-1adamantylamine 1-méthylaminoadamantane 3-diméthylaminotricyclo[4.3.3.1. 3'8]undécane dl-cyclo-octane 1-amino-l-(l-adamantyl)éthane, 1-Nméthylaminoadamantane 1-N-éthylaminoadamantane 1-N-benzylaminoadamantane 1-N,N-diméthylaminoadamantane 1-(2-hydroxyéthylamino)adamantane 1-(bis-2hydroxyéthylamino)adamantane 1-(1-pyrrolidinyl)adamantane ester éthylique de la l-N-adamantyl-glycine N-l-adamantylazidine 3-amino-4-homoisotwistane

Les sels de l'acide 6-chloro-7-bromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylique et des amines encombrées suivantes: 1aminonorbornane 2-diméthylaminoadamantane 1-méthyl-2-aminoadamantane 1méthyl-l-méthylaminométhyladamantane

1-adamantylamine -

Les sels de l'acide 6-bromo-7-chloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylique et des amines encombrées suivantes: 1diméthylaminoadamantane 3-aminotricyclo[4.3.3.13'8]undécane 1cyclooctylamine 3-aminométhyltricyclo[4.3.3.13'8]undécane 3-méthyl-1adamantylamine 3,5-diméthyl-1-adamantylamine 1-adamantylamine

Les sels de l'acide 6,7-dichloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylique et des amines encombrées suivantes: 1adamantylamine 1-méthyladamantane-2-spiro-3'-pyrrolidine 3,5-diméthyl-2adamantylamine 3-méthylaminométhyltricyclo[4.3.3.13'8]undécane N-méthyl-2adamantylamine Les sels de l'acide 6,7-difluoro-3,4-dihydro-3-oxo-2quinoxalinecarboxylique avec les amines encombrées suivantes: 1norbornylamine 1-adamantylamine 2-méthylaminoadamantane 1-diméthylamino-3méthyladamantane D-cyclo-octylamine, et

les sels de l'acide 6,7-di-iodo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique avec les amines encombrées suivantes: 1-adamantylamine

1-méthyl-spiropyrrolidine-3,2'-tricyclo-

[3.3.3.13'7] décane Q-norborylamine 1-méthylaminométhyltricyclo[4.3.3. 13'8]undécane 2-diméthylaminométhyladamantane rimantidine Les sels de cette invention ne se comportent pas comme le font les sels classiques comme NaCl, en particulier

dans les solvants moins polaires, c'est-à-dire le diméthyl-

formamide (DMF) aqueux à 66 %, par rapport à l'eau. Par

exemple, le titrage du sel de l'acide 6,7-dibromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique et de la 1-adamantyl-

amine dans le DMF aqueux à 66 % donne un pKa apparent d'environ 3,6 pour le composant acide, mais l'acide libre dans le même solvant a un pKa apparent de 4,2. Le pKa apparent de l'amine est à peu près le même pour le sel ou pour la base libre. Une détermination spectrophotométrique des pKa apparents du composant acide donne 2,7 pour le sel mais 4,0 pour l'acide libre. Un examen des déplacements du spectre ultra-violet lorsque le pH change indique que, dans l'eau, les mêmes espèces ioniques sont présentes pour le composant acide dans le sel ou dans l'acide libre. Cependant, dans le DMF aqueux à 66 %, il y a des différences appréciables dans le profil du pH. Tous les résultats précédents indiquent qu'il existe une certaine interaction complexe (comme une formation de paires d'ions solides) entre les composants ioniques du

sel (au-delà d'une simple neutralisation des charges). -

Certaines des propriétés des sels de cette invention, en particulier celles concernant leur efficacité par voie orale, peuvent être attribuées à une telle interaction complexe. La préparation des sels de cette invention est

illustrée par les exemples particuliers suivants.

Exemple 1

Préparation du sel de 1-adamantylamine de l'acide 6,7-dibromo-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique

On dissout 2 g d'acide 6,7-dibromo-3,4-dihydro-3-

oxo-2-quinoxalinecarboxylique dans 100 ml de N,N-diméthyl-

formamide (DMF) anhydre. On ajoute en agitant 0,87 g de 1-

adamantylamine. Une fois l'addition terminée, on agite le mélange réactionnel à 100 C pendant deux heures, on le refroidit à la température ambiante puis on l'agite à cette température pendant une nuit. On filtre le mélange réactionnel et on sèche le gâteau de filtration à 90 C sous 10 mm de mercure (13,3 millibars) pendant une heure et l'on obtient

0,5 g (17 %). Le sel de 1-adamantylamine d'acide 6,7-dibromo-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique ainsi préparé a les caractéristiques physico-chimiques suivantes: Analyse calculée: C, 45,53; H, 4,63; N, 8,38 trouvée: C, 45,35; H, 4,42; N, 8,57 Spectre de masse: m/e à 346,151 Spectre infrarouge (pâte de Nujol): voir Figure 1 En suivant le mode opératoire précédent, mais en

substituant 350 mg de 3-méthyl-1-adamantylamine à la 1-

adamantylamine, on prépare un sel d'acide 6,7-dibromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique et de 3-méthyl-1-

adamantylamine. On isole le produit cristallin par filtration et on le sèche, on en obtient 450 mg (87 %); p.f. 280-282 C

avec décomposition.

Analyse calculée: C, 46,90; H, 4,33; N, 8,20; Br, 31,20 trouvée: C, 47,20; H, 4,60; N, 7,91; Br, 30,72 Spectre infrarouge (pâte de Nujol): voir la Figure 2 La 3-méthyl-1-adamantylamine de départ a été isolée à partir de son chlorhydrate par dissolution du chlorhydrate dans l'eau, ajustement du pH à environ 12 avec de l'hydroxyde de sodium aqueux 1N et extraction de la base libre dans du dichlorométhane. On sépare la solution de dichlorométhane et

on chasse le solvant pour obtenir la base libre désirée.

En suivant le mode opératoire précédent, on fait

réagir 260 mg d'acide 6,7-dichloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylique avec la 3-méthyl-1-adamantylamine pour obtenir le sel de 3-méthyl-1-adamantylamine de l'acide 6,7-dichloro-3,4-dihydro-3oxo-2-quinoxalinecarboxylique,

320 mg (75 %). Le composé fond à 288 C avec décomposition.

Analyse calculée: C, 56,75; H, 5,24; N, 9,93; Cl, 16,75 trouvée: C, 56,45; H, 5,48; N, 9,99; Cl, 17,01

Spectre infrarouge (pâte de Nujol): voir la Figure 3.

On prépare les sels supplémentaires suivants de

l'acide 6,7-dichloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

(a) sel de cyclo-octylamine, 3,10 g à partir de 2,60 g de substance de départ (83 %), p.f. 242 C avec décomposition Analyse calculée: C, 52,86; H, 5,48; N, 10,88; Cl, 18,36 trouvée: C, 52,64; H, 5,33; N, 10,81; Cl, 18, 62 Spectre IR (Nujol): voir la Figure 4

(b) sel de rimantadine El[1-(1-adamantyl)-l-amino-

éthane], 1,80 g à partir de 1,31 g de substance

de départ (81 %), p.f. 275 C avec décomposition.

Analyse calculée: C, 57,54; H, 5,75; N, 9,59; Cl, 16,18 trouvée: C, 57,26; H, 5,69; N, 9,83; Cl, 16,16 Spectre IR (Nujol): voir la Figure 5

(c) sel de spiroamine (1-méthylspiropyrrolidine-

3,2'-tricyclo[3.3.1.1 3'7]décane), 1,65 g à partir de 1,37 g de substance de départ (71%),

p.f. 228 C avec décomposition.

Analyse calculée: C, 59,49; H, 5,86; N, 9,05; Cl, 15,27 trouvée: C, 59,59; H, 5,60; N, 9,22; C1, 15,06 Spectre IR (Nujol): voir la Figure 6 (d) sel de 1-adamantylamine, 1,45 g à partir de

2,00 g de substance de départ (46 %), p.f.

environ 295 C avec décomposition.

Analyse calculée: C, 55,62; H, 5,16; N, 10,24; Cl, 17,28 trouvée: C, 55, 48; H, 5,17; N, 10,49; Cl, 17,07 Spectre IR (Nujol): voir la Figure 7 On prépare les sels supplémentaires suivants

d'acide 6,7-dibromo-3,4-dihydro-2-oxo-3-quinoxaline-

carboxylique. (a) sel de rimantadine, 1,5 g à partir de 1,75 g de substance de départ (57 %), p.f. 281 C

avec décomposition.

Analyse calculée: C, 47,84; H, 4,78; N, 7,97; Br, 30,31 trouvée: C, 47,58; H. 4,51; N, 8,21; Br, 30,43 Spectre IR: voir la Figure 8 (b) sel de spiroamine, 1,15 g à partir de 1,80 g de substance de départ (42 %), p.f. 225 C avec décomposition. Analyse calculée: C, 49,93; H, 4,92; N, 7,59; Br, 28,88 trouvée: C, 49,67; H, 4,62; N, 7,65; Br, 29,14 Spectre IR: voir la Figure 9 (c) sel de cyclo-octylamine, 4,0 g à partir de

3,4 g de substance de départ (86 %), p.f.

245 C avec décomposition. -

Analyse calculée: C, 42,97; H, 4,45; N, 8,74; Br, 33,63 trouvée: C, 42,70; H, 4,36; N, 8,55; Br, 33,80

Spectre IR (Nujol): voir la Figure 10.

On prépare le sel de 1-adamantylamine de l'acide 6,7-difluoro-3,4-dihydro3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique et l'on en obtient 450 mg à partir de 3,0 g de substance de

départ (89 %).

Point de fusion 286-288 C.

Spectre infrarouge (pâte de Nujol): voir la Figure 11.

Les composants amines encombrées des sels anti-

viraux de cette invention sont des composés connus. Plusieurs

sont disponibles dans le commerce, comprenant le 1-amino-

adamantane (1-adamantylamine ou 1-amino-tricyclo[3.3.3.13'7]-

décane), la dl-cycloLoctylamine et la 2-norbornylamine (2-

amino-bicyclo[2.2.1]heptane), le 1-méthylaminoadamantane et le 1-(1adamantyl)-l-aminoéthane. D'autres amines encombrées

comprenant le 1-éthylaminoadamantane, le 1-diméthylamino-

adamantane, le 1-amino-3,5,7-triméthyladamantane, le 1-amino-

3,5-diméthyladamantane, la 2-adamantane-amine, etc., sont facilement préparables par des modes opératoires disponibles

dans le domaine. Voir par exemple les brevets des E.U.A.

Nos 3.592.934, 3.532.748, 3.152.180, 3.450.761, 3.283.001, 3.310.469 et les références antérieures suivantes: Stettler et al, Ber., 93, 760 (1963) , Gerzon et al. J. Med. Chem., 6,

760 (1963).

On peut préparer les composants acides quinoxalinonecarboxyliques des sels de cette invention en faisant réagir une o-phénylènediamine substituée de façon appropriée avec un 2-cétomalonate de dialkyle (ou mésoxalate de dialkyle). La réaction est effectuée dans un solvant anhydre des deux corps, généralement à la température de reflux du solvant, et est illustrée ci-dessous dans le schéma de réaction suivant: Schéma de réaction I T / OC=C-0O-a I ky I R2e *-H2 - --Oa I0 aky l R- * - COOaIk R -C20a I k base -T i -aTCOH R2-, / /':CO i

R *-O% /R /=0

Nbs IV V Selon le schéma de réaction I, si R1 et R sont le même atome d'halogène c'est-à-dire I, F, Cl ou Br, un seul ester (représenté par II ou par III) sera obtenu et on n'obtiendra donc qu'un seul acide carboxylique (IV ou V). Si l'o-phénylènediamine de départ est substituée de façon asymétrique, c'est-à-dire si R et R2 ne sont pas identiques, on obtiendra alors un mélange d'esters isomères, comme représenté par les formules II et III et un mélange d'acides carboxyliques libres, représenté par les formules IV et V. Dans le schéma de réaction précédent, quand R1 et R2 sont des atomes d'halogène différents, le produit de la réaction de la o-phénylènediamine substituée et du mésoxalate de diéthyle est un mélange de composés représentés par les

formules II et III ci-dessus.

Un mode opératoire permettant la synthèse non équivoque d'un acide quinoxalinone carboxylique donné est illustré dans le schéma de réaction II suivant: Schéma de réaction II

R -N02 R- 0

R1 -l E-NO t O-CO-CH2-CO-CI \ R /-NH2 Toluène, chaleur /R *-NH CC-CH I-CCOEt

VI VII

EtGNa EtOH on

k-

R -1 lo -COOEt PCR *-COOEt R THF R " =o

I I

IX H H

VIII base R>" =0,-co H A

dans lequel R1 et R sont tels que définis précédemment.

Selon le schéma de réaction II, on fait réagir une 2-nitro-aniline 4,5disubstituée de formule (VI) avec le

chlorure d'éthylmalonyle (ou un autre halogénure d'alkyl-

malonyle) pour obtenir le dérivé éthylmalonylamide correspondant sur l'azote de l'aniline (VII). Une cyclisation catalysée par une base en utilisant l'éthylate de sodium à 0eC fournit le quinoxaline-N -oxyde (VIII), dont le

traitement par le trichlorure de phosphore dans le tétra-

hydrofuranne (THF) à la température ambiante donne de façon non ambiguë un 3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle 6,7-disubstitué de formule (IX). L'hydrolyse basique de cet ester donne l'acide carboxylique désiré de formule X. La préparation des composés précédents est illustrée par les exemples spécifiques suivants Préparation 1 6,7-Dichloro-3,4dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle

On prépare une solution de 17,7 g de 4,5-dichloro-

o-phénylènediamine et de 200 ml d'éthanol anhydre. On ajoute à cette solution 17,4 g de 2-céto-malonate de diéthyle et on chauffe le mélange à la température de reflux pendant environ 17 heures. On enlève les constituants volatils par évaporation sous vide. La recristallisation du résidu dans

l'éthanol donne 20 g de 6,7-dichloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylate d'éthyle formé dans la réaction

précédente; p.f. 226-227 C.

Préparation 2 6-Chloro-7-bromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle On dissout 5 g de 2-nitro-4-bromo-5-chloro-aniline dans 150 ml de benzène. On ajoute 5 g du chlorure acide de malonate de monoéthyle en agitant sous atmosphère d'azote. On chauffe le mélange réactionnel à la température de reflux pendant une nuit. Une chromatographie sur couche mince indique que la réaction est pratiquement terminée à ce moment. On refroidit le mélange réactionnel et on chasse le benzène par évaporation sous vide. On recristallise dans l'éthanol anhydre

le résidu contenant la N-éthoxycarbonylacétyl-2-nitro-4-bromo-

-chloro-aniline formée dans la réaction précédente, et l'on

obtient des cristaux jaunes duveteux fondant à 119-121 C.

On prépare de l'éthylate de sodium dans des conditions anhydres à partir de 35 ml d'éthanol anhydre et de 1 g de sodium sous atmosphère d'azote. On agite le mélange jusqu'à dissolution totale du sodium, après quoi on refroidit

le mélange à environ 0 C. On ajoute la N-éthoxycarbonyl-

acétyl-2-nitro-4-bromo-5-chloro-aniline et on agite le mélange résultant à 0 C pendant 3 heures. Puis on arrête la réaction en ajoutant le mélange à 300 ml d'acide chlorhydrique aqueux 1N à 0 C. On agite ce mélange aqeux jusqu'à formation d'un précipité solide. On sépare le précipité par filtration, on le sèche et on recristallise le gâteau de filtration dans

l'éthanol anhydre. Le N-oxyde du 6-chloro-7-bromo-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylate d'éthyle ainsi préparé fond à 219-

221 C; 2 g. -

Analyse calculée: C, 38,01; H, 2,32; N, 8,06 trouvée: C, 37,79; H, 2,35; N, 8,24

On dissout 1 g du N-oxyde de 6-chloro-7-bromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle dans 50 ml de THF. On ajoute 6 ml de trichlorure de phosphore et on chauffe doucement le mélange résultant à la température ambiante pendant une nuit. On verse le mélange réactionnel dans 500 ml d'un mélange d'eau et de glace. On sépare par

filtration un solide comprenant le 6-chloro-7-bromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle formé dans

la réaction précédente; p.f. 203-205 C; 0,6 g.

Préparation 3 6,7-Difluoro-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle On ajoute avec précaution environ 25 ml d'anhydride acétique à 25,8 g de 3,4-difluoroaniline. On agite le mélange pendant une heure une fois l'addition terminée puis on le verse sur de la glace. On sépare par filtration le précipité blanc résultant comprenant le 3,4difluoroacétanilide et on le

sèche. La recristallisation dans un mélange solvant benzene-

acétone donne 30 g de 3,4-difluoroacétanilide fondant à

-126 0C.

Analyse calculée: C, 56,14; H, 4,12; N, 8,12; trouvée: C, 56,28; H, 4,22; N, 8,16 On prépare une solution de 8,5 g de 3,4-difluoro- acétanilide dans 50 ml d'acide sulfurique 18M et on la refroidit à 0 C. On ajoute goutte à goutte 10,5 g de nitrate de propyle. On agite le mélange réactionnel résultant à environ 0 C pendant deux heures puis on le verse sur un mélange de glace et d'eau. On sépare par filtration un précipité jaune pâle comprenant le 4,5-difluoro-2-nitroacétanilide formé dans la réaction précédente. On lave le gâteau de filtration plusieurs fois avec de l'eau puis on le recristallise dans un mélange solvant éthanol-eau (on en obtient 9 g). Le composé

fond à 105-107 C.

Analyse calculée: C, 44,46; H, 2,80; N, 12,96 trouvée: C, 44,24; H, 2,76; N, 12,88 On chauffe à la température de reflux pendant

environ 2 heures un mélange de 6,51 g de 4,5-difluoro-2-nitro-

acetanilide et de 100 ml d'acide chlorhydrique aqueux 6N. Puis on refroidit le mélange réactionnel, on sépare par filtration les cristaux qui se forment, on lave les cristaux séparés avec de l'eau, on les sèche et on les recristallise dans un mélange solvant hexane-dichlorométhane. On obtient 5,0 g de

4,5-difluoro-2-nitroaniline, fondant à 106-108 C.

Analyse calculée: C, 41,39; H, 7,32; N. 16,07 trouvée: C, 41,41; H, 7,35; N, 15,85 On prépare un mélange réactionnel contenant 8,75 g de 4,5difluoro-2-nitroaniline, 200 ml d'éthanol et, comme catalyseur, 1 g de palladium sur charbon à 10 %. On hydrogène le mélange jusqu'à absorption de la quantité théorique d'hydrogène, en utilisant un appareil d'hydrogénation à faible pression. On sépare le catalyseur par filtration avec les précautions habituelles et on fait réagir le produit de la réaction, la 4,5-difluoro-o-phénylènediamine, avec le mésoxalate de diéthyle en suivant le mode opératoire de la préparation 1 sans autre purification. Le produit de cette

réaction, le 6,7-difluoro-3,4-dihydro-3-céto-2-quinoxaline-

carboxylate d'éthyle, fond à 193-195 C.

Préparation 4 Acide 6,7-difluoro-3,4-dihydro-3-oxo-2quinoxalinecarboxylique

A 2,42 g de 6,7-difluoro-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylate d'éthyle, on ajoute 50 ml d'hydroxyde de sodium aqueux 2N. On chauffe le mélange à la température de reflux pendant 3 heures puis on le traite par du charbon, on le refroidit et on le filtre. On acidifie avec de l'acide

chlorhydrique aqueux 12N le filtrat contenant l'acide 6,7-

difluoro-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique formé dans la réaction précédente. L'acide étant insoluble dans le mélange acide aqueux précipite et on sépare le précipité par filtration. On cristallise le gâteau de filtration dans un mélange solvant éthanol-acétone et l'on obtient 1,3 g d'acide 6,7-difluoro-3,4-dihydro-3-oxo-2quinoxalinecarboxylique

fondant à 220-225 C.

Analyse calculée: C, 47,80; H, 1,78; N, 12,39 trouvée: C, 47,73; H, 1,94; N, 12,63 Préparation 5 6,7-Di-iodo-3,4-dihydro-3-oxo-2quinoxalinecarboxylate d'éthyle On prépare un mélange réactionnel contenant 76 g d'oléum à 20 %, 10 g d'iode et 10 g d'o-dinitrobenzène. On agite le mélange réactionnel à une température de 170 à 175 C pendant deux heures puis on le refroidit. On verse le mélange réactionnel refroidi sur de la glace et on le filtre. On dissout dans un litre d'éther le gâteau de filtration comprenant le 1,2-dinitro-4,5-di- iodobenzène formé dans la réaction précédente. On lave la solution éthérée avec du bisulfite aqueux et du bicarbonate de sodium aqueux saturé puis on la sèche. On chasse l'éther sous vide et on cristallise le résidu solide brut dans l'éthanol et l'on

obtient des plaquettes brunâtres consistant en 1,2-dinitro-

4,5-di-iodobenzène fondant à 177-178 C.

On prépare une solution de 3 g de 1,2-dinitro-4,5-

di-iodobenzène dans 150 ml d'éthanol. On fait passer de l'ammoniac dans la solution tout en chauffant à la température de reflux. On poursuit cette opération jusqu'à ce qu'une CCM

indique que toute la substance de départ a réagi (8 heures).

Puis on réduit le volume de la solution à un tiers du

volume initial et on refroidit la solution. La 2-nitro-4,5-

di-iodoaniline formée dans la réaction précédente précipite et on la recueille par filtration; p.f. 196-197 C; 1,70 g. Analyse calculée: C, 18, 48; H, 1,03; N, 7,18 trouvée: C, 18,65; H, 1,08; N, 7,33 On prépare un mélange réactionnel à partir de 1,2 g de 2-nitro-4,5-di-iodoaniline, de 1, 8 g de chlorure stanneux et de 10 ml d'acide chlorhydrique aqueux 12N. On chauffe le mélange réactionnel à une température comprise entre 80 et C en agitant. La couleur jaune foncé initiale de la solution disparaît bientôt. Après deux heures de chauffage et d'agitation, on verse le mélange réactionnel dans un mélange de 100 ml d'eau et de 25 ml d'hydroxyde de sodium aqueux. Il

précipite un solide jaune brun consistant en 4,5-di-iodo-o-

phénylènediamine et on le recueille par filtration; 0,9 g.

On prépare une solution de 0,9 g de 4,5-di-iodo-o-

phénylènediamine et de 25 ml d'éthanol. On ajoute 5 g de cétomalonate de diéthyle et on chauffe le mélange résultant à la température de reflux en agitant pendant une nuit. Puis

on refroidit le mélange réactionnel. Le 6,7-di-iodo-3,4-dihydro-

3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle formé dans la réaction précédente précipite et on le recueille par filtration;

0,8 g; p.f. 275-276 C.

Analyse calculée: C, 28,09; H, 1,70; N, 5,96 trouvée: C, 28,01; H, 1,72; N, 6,07 Preparation 6

Hydrolyse du 6,7-dichloro-3,4-dihydro-2-oxo-3-quinoxaline-

carboxylate d'éthyle

On dissout 1 g de 6,7-dichloro-3,4-dihydro-2-oxo-

3-quinoxalinecarboxylate d'éthyle dans un mélange de 25 ml d'isopropanol et de 75 ml d'eau. On ajoute 5 g d'hydroxyde de potassium et on chauffe le mélange résultant à la température de reflux pendant 5 minutes. On décolore le mélange réactionnel chaud avec du charbon activé et on le filtre. On

acidifie le filtrat avec de l'acide chlorhydrique aqueux 12N.

Des cristaux jaunes de type aiguilles précipitent comprenant l'acide 6,7dichloro-2-oxo-3-quinoxalinecarboxylique formé dans l'hydrolyse précédente. On recueille l'acide par filtration. On hydrolyse de la même manière pour obtenir les acides carboxyliques correspondants les autres esters produits par le mode opératoire des Préparations 1 à5 et 7 à 8. Préparation 7 6,7-Dibromo-2,3-dihydro-3-oxoquinoxalinecarboxylate d'éthyle On mélange 10 g de 3,4-dibromoaniline avec 40 ml d'anhydride acétique. On chauffe le mélange réactionnel résultant à une température de 100 à 105 C pendant une heure,

après quoi on le verse sur un mélange de glace et d'eau.

Après agitation pendant une nuit, le mélange aqueux fournit un précipité blanc sale pesant 11,5 g et fondant à 90-95 C,

consistant en 3,4-dibromoacétanilide.

On mélange 2,5 g de 3,4-dibromoacétanilide avec 8 ml d'acide sulfurique aqueux 18N à 0 C. On ajoute 1,5 g de nitrate de propyle tout en maintenant la température de réaction entre 0 et 2 C. On agite le mélange réactionnel refroidi pendant une heure dans le même intervalle de température puis on le verse sur un mélange de glace et d'eau. Il précipite un solide jaune consistant en 4,5-dibromo-2-nitroacétanilide formé dans la réaction précédente et on le recueille par filtration. La

recristallisation dans l'éthanol donne 1,2 g de 3,4-dibromo-6-

nitroacétanilide fondant à 140-141 C.

On chauffe 1 g de 4,5-dibromo-2-nitroacétanilide à la température de reflux pendant 30 minutes avec 30 ml d'acide chlorhydrique aqueux 6N. Puis on verse le mélange réactionnel sur un mélange de glace et d'eau et on agite. On ajuste le pH de la solution à 12 avec une base. On sépare par filtration le précipité jaune vif résultant, on le lave et on le sèche; on obtient 0,85 g de 4,5-dibromo-2-nitroaniiine

fondant à 204-205 C.

On met 5 g de 4,5-dibromo-2-nitroaniline en suspension dans 200 ml d'éthanol anhydre auxquels on a ajouté 10 g de nickel de Raney. On place le mélange d'hydrogénation dans un appareil d'hydrogénation à basse pression sous une pression d'hydrogène de 3,8 bars. Une prise rapide d'hydrogène se produit qui s'arrêteaprès 25 minutes, moment auquel la couleur jaune foncé initialement présente a disparu, indiquant

une réduction complète du groupement nitro en groupement amine.

On poursuit l'hydrogénation pendant une demi-heure supplémentaire puis on traite le mélange réactionnel en filtrant le catalyseur, en lavant le catalyseur filtré et en évaporant les constituants volatils du filtrat. On obtient

4,1 g de 4,5-dibromo-o-phénylènediamine.

On cyclise la 4,5-dibromo-o-phénylènediamine en l'ester d'acide quinoxalinecarboxylique correspondant par le mode opératoire de la Préparation 1, en utilisant 4,1 g de la diamine et 2,7 g de cétomalonatede diéthyle dans 75 ml

d'éthanol anhydre. Le 6,7-dibromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-

quinoxalinecarboxylate d'éthyle ainsi préparé fond à 235-236 C

(on en obtient 3,9 g).

Préparation 8

6(7)-Chloro-7(6)-bromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylate d'éthyle

On effectue la nitration du 3-chloro-4-bromo-

acétanilide préparé par le mode opératoire de la Préparation 7, dans de l'acide sulfurique aqueux 18 M avec du nitrate de propyle à 0 C selon le mode opératoire de l'Exemple 7. On traite le produit de la réaction en l'ajoutant à un mélange de glace et d'eau en agitant. Il précipite une poudre jaune consistant en 4-bromo-5-chloro-2-nitroacétanilide et on la recueille par filtration. La recristallisation dans l'éthanol

donne des cristaux fondant à 128-130 C; 38 g.

On hydrolyse le 4-bromo-5-chloro-2-nitroacétanilide en amine libre par le mode opératoire de la Préparation 3. La réduction de 5 g de 4-bromo-5chloro-2-nitroaniline ainsi formée, avec du nickel de Raney selon le mode opératoire de

la Préparation 7, donne 3,35 g de 4-bromo-5-chloro-o-

phénylènediamine. On fait réagir 1,66 g de la diamine avec 0,85 g de cétomalonate de diéthyle par chauffage à reflux dans un solvant des deux pendant deux heures et demie. Des cristaux

de type aiguilles consistant en 6(7)-chloro-7(6)-bromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylate d'éthyle précipitent

et on les recueille par filtration; p.f. 185-195 C; 111 g.

Les sels de cette invention sont actifs tant in vitro qu'in vivo contre les souches A et B des virus de la

grippe, Maryland B et Ann Arbor.

L'activité in vivo est déterminée comme suit: on infecte des souris femelles White Swiss (11-13 g) de la souche McAllister avec des dilutions aqueuses de la souche Ann Arbor du virus de la grippe dans un appareil d'injection à air. Des doses progressives du médicament sont injectées par voie intrapéritonéale (IP) ou administrées par voie orale par gavage 24 et 4 heures avant l'infection et 24 et 48 heures après l'infection. Des groupes témoins reçoivent uniquement le milieu d'extension pharmaceutique. Le médicament est administré dans de l'eau contenant 2 % d'un surfactif. On note le jour moyen de mort des souris traitées et non traitées et le nombre de survivants par rapport au nombre total des souris

pour chaque dose. En outre, on calcule un indice de survie.

L'indice de survie est une mesure composite de l'efficacité introduisant le moment de la mort et le nombre de survivants dans une seule variable selon le mode opératoire de Redman et al. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 497 (1966). Pour des commodités d'indication des résultats dans les déterminations in vivo du Tableau 1, une lettre a été attribuée à chacun des 11 sels des exemples particuliers comme suit:

A. sel de 1-adamantylamine de l'acide 6,7-

dibromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique. B. sel de 3-méthyl-1-adamantylamine de l'acide

6,7-dibromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique.

C. sel de 3-méthyl-1-adamantylamine d'acide 6,7-

dichloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique.

D. sel de cyclo-octylamine d'acide 6,7-dichloro-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

E. sel de rimantadine d'acide 6,7-dichloro-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

* P. sel de spiroamine d'acide 6,7-dichloro-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

G. sel de 1-adamantylamine d'acide 6,7-dichloro-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

H. sel de rimantadine d'acide 6,7-dibromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique. J. sel de spiroamine d'acide 6,7dibromo-3,4- dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

K. sel de cyclo-octylamine d'acide 6,7-dibromo-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

L. sel de 1-adamantylamine d'acide 6,7-difluoro-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

M. sel de norbornylamine d'acide 6,7-dibromo-3,4-

dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique. Dans le Tableau 1, la colonne 1 indique la lettre désignant le sel; la colonne 2, la dose en mg/kg; la colonne 3, la voie d'administration; la colonne 4, l'indice de survie (I. S.); la colonne 5, le jour moyen de la mort; et la colonne 6, le nombre de survivants par rapport au nombre total de souris. Les données significatives sur le plan statistique

sont indiquées par un astérisque.

TABLEAU 1

Lettre de désignation du composé B B C C A Témoin Dose mg/kg

Voie d'ad-

ministra-

tion IP Jl Indice de survie

(I.S.)

,0772*

510463*

413056*

1080*

4 9846*

2,5926

Jour moyen de la mort 9,5 9,7 9,5 9,0 9 8 7 8 17 Survivants/ nombre total 16/18 /18 13/18 17/18 16/17 /18 " 0 " 3,2716 8t6 9/18 A 80 " 5U5972* 9f0 17/18 K 20 " 3,1204 8m2 4/18

K 40 " 3,0231 8,3 3/18

K 80 " 4,4722* 8,5 10/1,8

Témoin 0 " 2,4522 716 5/18 _ 0 _" 3,2176 8r2 5/18 M 9n, 93Qq9 9 I 4/1R M M A Témoin il O J g '- _

4,0864

,3765*

7,3472*

2,1250

3,1265

8,3 8,8 9,0 98 O 8,1 8,4 6/18 8/18 17/18 1/18 2/18 O Q' N) 0c coe o4 Co Tableau 1 (suite) Lettre de désignation du composé H F A E, Témoin A L L J J Témoin il G G G G Témoin Dose mg/kg on o o0 ou O

Voie d'ad-

ministra-

tion IP I, Il Il II II II Il il II II II III Indice de survie

(I.S.)

6,8781*

660710*

6,2886*

6r5972*

2,9306

3,1914

7,0772*

2,9288

3,1991

,9830*

6 1559*

1,7037

2,3025

,8333*

7,1096*

7,5417 *

7,6157*

2,4120

2,6559

Jour moyen de la mort 8,3 9,4 9>3 9,3 8,7 8,3 9,3 7,6 7,6 8,5 8,7 7,1 7,4 8,9 8,8 19 0 8,3 8,2 Survivants/ nombre total /18 9/18 12/18 /17 0/18 3/18 9/18 0/18 1/18 /18 3/18 0/18 0/18 8/18 14/18 14/17 14/17 0/18 2/18 1- " Orj o0% co co co Tableau 1 (suite) Lettre de désignation du composé A C G - Témoin If C G A B Témoin fi Dose mg/kg o0 o0 o

Voie d'ad-

ministra-

tion IP I. il t Il orale Il et itl te t Indice de survie

(I.S.)

7,6389*

6,2562*

7,7778*

2,6852

2,3117

4,7635*

6,5095*

,6762*

,1762*

3,1762

3,3770

Jour moyen de la mort 9,7 9,2

101 0O

7,8 7,7 7,9 9,3 9r2 8,6 8,3 7,5 Survivants/ nombre total /18 /18 /18 0/18 0/18 9/18 12/18 6/18 7/18 2/18 1/17 t'.> M 0% -,j Co Co Les résultats du tableau précédent montrent que les sels d'acide quinoxaline-2carboxylique d'amines stériquement encombrées particulières ont une activité in vivo vis-à-vis du virus de la grippe souche A. Les sels de cette invention présentent une activité similaire vis-à-vis de la souche Maryland B du virus de la grippe in vivo. Par exemple, le sel

de 1-aminoadamantane de l'acide 6,7-dibromo-3,4-dihydro-3-

oxo-2-quinoxalinecarboxylique est actif par voie intra-

péritonéale à une dose de 80 mg/kg.

Pour une utilisation in vitro, les composés peuvent être préparés par dissolution dans de l'eau ou un alcanol inférieur, par exemple l'éthanol ou le méthanol. La composition antivirale contenant le sel d'amine d'acide quinoxalinecarboxylique comme ingrédient actif est ensuite appliquée à l'habitat du virus in vitro, de tels habitats comprenant les murs des chambres d'hôpital, les paillasses de laboratoire, la verrerie de laboratoire, etc. Les sels peuvent également être ajoutés à des cultures de tissu pour y supprimer la croissance des virus. Pour une utilisation in vivo, les composés peuvent être administrés par voie parentérale ou orale. Pour l'administration par voie parentérale, comme la voie intrapéritonéale utilisée dans le travail expérimental précédent, le composé est administré sous forme d'une suspension. L'administration par voie orale est évidemment préférée. Pour une telle utilisation, on mélange un sel de quinoxaline avec un ou plusieurs milieux d'extension classiques acceptables sur le plan pharmaceutique comme l'amidon, le saccharose, le lactose, le carbonate de calcium, etc., et on introduit le mélange dans des capsules de gélatine s'emboîtant vides, de sorte que chaque capsule contient une quantité du sel efficace pour supprimer la

croissance du virus de la grippe, soit éventuel soit présent.

En d'autres termes, les sels peuvent être utilisés de façon prophylactique ou en tant qu'agents curatifs. Ou bien, le médicament peut être mélangé avec divers excipients comprenant l'amidon, les agents lubrifiants, les agents mouillants, etc., comme l'acide stéarique, le stéarate de magnésium, etc., et le mélange peut être transformé en comprimés chaque comprimé contenant une quantité du médicament permettant de faire avorter ou de guérir une attaque de grippe. De tels comprimés peuvent être entaillés de façon à fournir des demis ou des quarts de dose quand le comprimé doit être administré à des enfants. Les composés peuvent également

être administrés en suspension aqueuse.

La dose pour les mammifères est de 1 à 50 mg/kg/ jour. La dose chez l'homme est de 100 à 1000 mg une à quatre fois par jour. Commodément, on peut administrer par voie orale une dose de 400 mg du sel de 1adamantylamine de

l'acide 6,7-dibromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique, par exemple, une à quatre fois par jour à des personnes souffrant d'une grippe ou qui ont été exposées à un virus de la grippe, en particulier de la souche A ou B. Les sels de cette invention sont administrés à des mammifères sensibles à l'infection par le virus de la grippe, comprenant les chevaux, les souris, les porcs et l'homme. Pour l'homme, les composés sont administrés par voie prophylactique en particulier aux personnes âgées, aux jeunes enfants, aux infirmières et aux médecins, et à tout autre personnel hospitalier ou sanitaire, quand il y a un risque d'une épidémie de grippe imminente. Les composés peuvent également être administrés à quiconque ayant été en contact avec une personne grippée. C'est un avantage particulier de l'utilisation thérapeutique des composés de cette invention que les sels peuvent être administrés de façon prophylactique ou de façon thérapeutique à des patients, sans qu'il soit nécessaire de déterminer préalablement si le virus à combattre est la souche A ou la souche B du virus de la grippe, car les sels sont efficaces vis-à-vis des deux souches.

Claims

REVENDICATIONS

1. Sel d'amine stériquement encombrée d'un acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3oxo-2-quinoxalinecarboxylique de formule I R o-T i -o NHR -R4

-.\./.1/.=O

H dans laquelle R et R1 sont indépendamment des atomes

2 3

d'halogène; R est H, CH3 ou C2H5; R pris indépendamment est H, CH3, C2H5, C2H4OH, CH2C6H5 ou CH2 COOC2H5; R pris indépendamment est un radical hydrocarboné stériquement encombré du groupe comprenant les groupements cyclo-octyle, norbornyle, Ad et CHR2Ad o Ad est un radical 1-adamantyle de formule ou 2-adamantyle de formule liX _ ou un radical 3-(4-homoiso) twistane de formule E/- ou un radical tricyclo-undécane de formule ou de formule -i T2R2 o R est tel que défini précédemment; et R et R quand ils sont pris avec l'atome d'azote auquel ils sont liés forment une adamantylspiropyrrolidine de formule M\ / t 2. Sel selon la revendication 1, de formule IV: R-t Il /-COO NHAd R- eH H o R et R1 sont indépendamment C1 ou Br et Ad est

o R5 est H ou CH3.

3. Sel selon la revendication 2, caractérisé en

ce qu'il s'agit du sel de 1-adamantylamine de l'acide 6,7-

dibromo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

4. Sel selon la revendication 2, caractérisé en

ce qu'il s'agit du sel de 1-adamantylamine de l'acide 6,7-

dichloro-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

5. Procédé de préparation d'un sel de formule I

selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé

en ce qu'il consiste à faire réagir l'acide libre ou un sel

d'acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxaline-

carboxylique de formule II

RI 9COOH

X J /II

R -./

H

dans laquelle R et R sont tels que définis dans la revendication 1, avec la base libre ou un sel d'une amine encombrée de formule III:

NR2R3R4 III

2 3 4

dans laquelle R, R et R sont tels que définis dans la

revendication 1.

6. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient comme ingrédient actif, un sel d'amine

stériquement encombrée d'un acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-

oxo-2-quinoxalinecarboxylique de formule I selon l'une

quelconque des revendications 1 à 4, associé à un support

approprié acceptable sur le plan pharmaceutique.

7. Composition pharmaceutique selon la revendication 6, caractérisée en ce que ledit ingrédient

actif est le sel de 1-adamantylamine de l'acide 6,7-dibromo-

3,4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinecarboxylique.

8. Sel d'amine stériquement encombrée d'un acide 6,7-dihalo-3,4-dihydro-3-oxo-2quinoxalinecarboxylique de

formule I selon l'une quelconque des revendications 1 à 4,

utilisé dans le traitement d'une maladie virale chez un

mammifère.