FI95693B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappojohdannaisten va lmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappojohdannaisten va lmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI95693B
FI95693B FI892881A FI892881A FI95693B FI 95693 B FI95693 B FI 95693B FI 892881 A FI892881 A FI 892881A FI 892881 A FI892881 A FI 892881A FI 95693 B FI95693 B FI 95693B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
hydroxy
tert
alkyl
butyl
amino
Prior art date
Application number
FI892881A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI95693C (fi
FI892881A (fi
FI892881A0 (fi
Inventor
Sally Redshaw
Joseph Armstrong Martin
Gareth John Thomas
Balraj Krishan Handa
Peter James Machin
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB888813940A external-priority patent/GB8813940D0/en
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of FI892881A0 publication Critical patent/FI892881A0/fi
Publication of FI892881A publication Critical patent/FI892881A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI95693B publication Critical patent/FI95693B/fi
Publication of FI95693C publication Critical patent/FI95693C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/52—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring condensed with a ring other than six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/04—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/04—1,3-Thiazines; Hydrogenated 1,3-thiazines
    • C07D279/06—1,3-Thiazines; Hydrogenated 1,3-thiazines not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/021—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)n-C(=0)-, n being 5 or 6; for n > 6, classification in C07K5/06 - C07K5/10, according to the moiety having normal peptide bonds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

1 · 95693
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappojohdannaisten valmistamiseksi
Keksintö koskee menetelmää aminohappojohdannaisten 5 valmistamiseksi, joilla on kaava ? ] if)^R7 R1—N CO CH CHj-N R8 10 (1)
>3 S^V* U
RJ R R R
jossa n on 0 tai 1, R1 on C1.4-alkoksikarbonyyli, fenyyli-C^-alkoksikarbonyyli, C^-^lkanoyyli, sykloalkyylikarbo-15 nyyli, joka on adamantyylik rbonyyli tai tetrahydronaftyy- likarbonyyli, joka on subst ;uoitu C2_5-alkanoyyliaminolla, naftyyli-C1.4-alkyylikarbony2li, fenyyli-C1.4-alkyylikarbo-nyyli, fenyyli-C1.4-alkyylikarbonyyli, joka on substituoitu C1.4-alkoksilla, halogeenillä tai aminolla, naftoyyli, naf-20 toyyli, joka on substituoitu bentsyylioksiformamidolla, bentsyylioksilla tai hydroksilla, bentsoyyli, bentsoyyli, joka on substituoitu bentsoyylioksikarbonyylillä tai kar-boksilla, heterosyklyylikarbonyyli, joka on kinolyylikar-bonyyli, jonka typpiatomi voi olla substituoitu C2_5-alkano-25 yyliaminolla, isokinolyylikarbonyyli, indolyylikarbonyyli, pyrasinyylikarbonyyli, 1-oksoisokinolyylikarbonyyli tai 1-oksidokinolyylikarbonyyli, tolyylisulfonyyli, fenyyli-C1.4-alkyylikarbamoyyli, C^-alkoksifenyyli-C1.4-alkyylikar-bamoyyli, kinnamoyyli, nitrokinnamoyyli tai a-fenyyli-30 C1_4-alkoksikarbonyyliamino-C2_6-alkanoyyli, R2 on vety tai R1 ja R2 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, muodostavat syklisen imidiryhmän, jolla on kaava 0 Λ
35 | N
N—
V
0 2 . 95693 jossa P ja Q yhdessä ovat naftyyli, R3 on C^-alkyyli, C3_6-sykloalkyyli, fenyyli, C1.4-alkoksifenyyli, fenyyli-C1.4-alkyyli, imidatsolyyli-C1.4-alkyyli, N-bentsyylioksi-imidatsoli-C^-alkyyli, syaani-C^-alkyyli, C1.4-alkyylisul-5 finyyli-C1.4-alkyyli, karbamoyyli-C1.4-alkyyli tai C^-alkok-sikarbonyyli-C^-alkyyli, tai kun n on nolla, R3 voi myös olla C1.4-alkyylitio-C1.4-alkyyli, tai kun n on yksi, R3 voi myös olla C1.4-alkyylisulfonyyli-C1_4-alkyyli, R4 on C1.4-al-kyyli, C3.6-sykloalkyyli-C1.4-alkyyli, naftyyli, fenyyli-10 C1.4-alkyyli tai fenyyli-Cx_4-alkyyli, jonka fenyylirengas on substituoitu halogeenilla, Cx_4-alkoksilla tai hydroksilla, R5 on vety ja R6 on hydroksi tai R5 ja R6 yhdessä ovat okso, R7 ja R8 yhdessä ovat trimetyleeni- tai tetrametyleeniryh-mä, joka on mahdollisesti substituoitu hydroksilla, Cx_4-15 alkoksikarbonyyliaminolla tai Cx_4-alkyylikarbonyyliaminolla tai jonka yksi -CH2-ryhmä on korvattu ryhmällä -NH, -N( Cx_4-alkoksikarbonyyli)-, -N( Cx_4-alkyylikarbonyyli)- tai -S- tai johon fuusioitunut C3.6-sykloalkaani-, bentseeni-tai indolirengas, ja R9 on Cx_4-alkoksikarbonyyli, mono-20 C1.6-alkyylikarbamoyyli, monofenyyli-Cx_4-alkyylikarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, joka on substituoitu hydroksilla, tai ryhmä, jonka kaava on
NH .CO
25 / \ / \ 11 —CO Oi NH-R11 (b) l10 30 jossa R10 ja R1 kumpikin ovat Cx_4-alkyyli, tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi .
Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat ovat uusia yhdis-35 teitä ja niillä on arvokkaita farmakologisia ominaisuuk- 3 -95693 siä. Ne pystyvät varsinkin ehkäisemään virusperäisiä pro-teaaseja ja ovat siten käyttökelpoisia virusinfektioiden hoidossa, varsinkin HIV-virusten ja muiden retrovirusten aiheuttamien infektioiden hoidossa.
5 Keksintö koskee myös kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistukseen käyttökelpoisia välituotteita.
Tässä käytettynä ilmaisulla "alkyyli" yksin tai yhdistelmissä tarkoitetaan suora- tai haaraketjuista al-kyyliryhmää, jossa on korkeintaan 8, edullisesti korkein-10 taan 4 hiiliatomia; esimerkkejä ovat metyyli, etyyli, n-propyyli, iso-propyyli, n-butyyli, isobutyyli, sek-butyy-li, tert-butyyli, pentyyli, heksyyli ym. Ilmaisulla "al-koksi" yksin tai yhdistelmissä tarkoitetaan alkyylieette-riryhmää, jossa "alkyyli" tarkoittaa edellä määriteltyä; 15 esimerkkejä ovat metoksi, etoksi, n-propoksi, isopropoksi, n-butoksi, isobutoksi, sek-butoksi, tert-butoksi ym. Ilmaisulla "sykloalkyylialkyyli" tarkoitetaan edellä määriteltyä alkyyliryhmää, joka on substituoitu 3-8 hiiliatomia, edullisesti 3-6 hiiliatomia sisältävällä sykloal-20 kyyliryhmällä, kuten ovat syklopropyyli-, syklobutyyli-, syklopentyyli-, sykloheksyyli- ym. ryhmällä. Ilmaisulla "alkanoyyli" yksin tai yhdistelmissä tarkoitetaan alkaanikarboksyylihaposta johdettuaasyyliryhmää; esimerkkejä ovat asetyyli, propionyyli, butyryyli, valeryyli, 4-25 metyylivaleryyli ym. Ilmaisulla "sykloalkyylikarbonyyli" tarkoitetaan monosyklisestä tai silta-sykloalkaanikarbok-syylihaposta johdettua asyyliryhmää; esimerkkejä ovat syk-lopropaanikarbonyyli, sykloheksaanikarbonyyli, adamantaa-nikarbonyyli jne.; tai se tarkoittaa bentsofuusioituneesta 30 monosyklisestä sykloalkaanikarboksyylihaposta (joka on mahdollisesti substituoitu esim. alkanoyyliaminoryhmällä) johdettua asyyliryhmää; esimerkkejä ovat 1,2,3,4-tetrahyd-ro-2-naftoyyli, 2-asetamido-l,2,3,4-tetrahydro-2-naftoyy- li. Heterosyklyylikarbonyyli- tai heterosyklyylialkyyli-35 ryhmän heterosyklyyliosa on tyydyttynyt, osittain tyydyt- 4 - 95693 tymätön tai aromaattinen monosyklinen, bisyklinen tai tri-syklinen heterosykli, jossa yksi tai useampia heteroato-meja, so. typpi-, happi- tai rikkiatomeja, ja joka on valinnaisesti substituoitu yhteen tai useampaan hiiliatomiin 5 halogeeni-, alkyyli-, alkoksi-, okso- tai muulla ryhmällä ja/tai sekundaariseen typpiatomiin (so. -NH-) alkyyli-, aralkoksikarbonyyli-, alkanoyyli-, fenyyli- tai fenyyli-alkyyliryhmällä tai tertiaariseen typpiatomiin (so. =NH-) oksidoryhmällä ja joka liittyy hiiliatomin välityksellä. 10 Esimerkkejä tällaisista heterosyklyyliryhmistä ovat pyr-rolidinyyli, piperidinyyli, piperatsinyyli, morfolinyyli, tiamorfolinyyli, pyrrolyyli, imidatsolyyli (esim. imidat-sol-4-yyli, l-bentsyylioksikarbonyyli-imidatsol-4-yyli jne.), pyratsolyyli, pyridyyli, pyratsinyyli, pyrimidyyli, 15 furyyli, tienyyli, triatsolyyli, oksatsolyyli, tiatsolyy-li, indolyyli (esim. 2-indolyyli jne.), kinolyyli (esim.
2-kinolyyli, 3-kinolyyli, l-oksido-2-kinolyyli jne.), iso-kinolyyli (esim. 1-isokinolyyli, 3-isokinolyyli jne.), tetrahydrokinolyyli (esim. 1,2,3,4-tetrahydro-2-kinolyyli 20 jne.), 1,2,3,4-tetrahydroisokinolyyli (esim. 1,2,3,4-tet-rahydrol-oksoisokinoliini jne.), kinoksalinyyli, β-karbo-linyyli ym. Ilmaisulla halogeeni tarkoitetaan fluoria, klooria, bromia tai jodia.
Kuten edellä mainittiin R7:n ja R8:n yhdessä muo-25 dostama trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmä on valinnaisesti substituoitu hydroksiryhmällä tai alkoksikarbonyyli-aminoryhmällä (esim. tert-butoksikarbonyyliamino) tai al-kyylikarbonyyliaminoryhmällä. Vaihtoehtoisesti trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmän yksi -CH2-ryhmä voi olla kor-30 vattu -NH-ryhmällä, -N-(alkoksikarbonyyli)-ryhmällä, esimerkiksi -N-(tert-butoksikarbonyyli)-ryhmällä, -N-(alkyy-likarbonyyli)-ryhmällä tai -S-ryhmällä. Kun R7:n ja R8:n yhdessä muodostamaan trimetyleeni- tai tetrametyleeniryh-mään on fuusioituneena sykloalkaani-rengas, niin tämä voi 35 olla esimerkiksi fuusioitunut sykloalkaanirengas, jossa on 5 - 95693 3-6 hiiliatomia, kuten fuusioitunut syklopentaani, syk-loheksaani tai muu sellainen rengas. Siten -N(R7)CH(R8)(R9) voi olla esimerkiksi jokin seuraavista ryhmistä: 5 r12 rh, . f—\ „13 .
/ \ > 'm \ / «9 / 10 R9 (c) (d) ~1 —1 15 ' i, J) l9 (e) (f) 20 Π f/ \ rV - w · l» i9 25 (g) (h) ---Il
XX XJ rV
^ --------- ja I
30 Js H ''XX
a) *9 (ii joissa R9 merkitsee samaa kuin edellä, R12 on vety, hydrok-si, alkoksikarbonyyliamino tai asyyliamino, R13 on vety, 35 alkoksikarbonyyli tai asyyli, m on 1 tai 2 ja p on 1 tai 2.
6 - 95693
Kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat ovat epäorgaanisten happojen kanssa muodostettuja suoloja, esimerkiksi halogeeni-vetyhappojen, kuten kloorivetyhapon tai bromivetyhapon, 5 rikkihapon, typpihapon, fosforihapon ym. kanssa muodostettuja, tai orgaanisten happojen kanssa muodostettuja suoloja, esimerkiksi etikkahapon, sitruunahapon, maleiinihapon, fumaarihapon, viinihapon, metaanisulfonihapon, p-tolueeni-sulfonihapon kanssa muodostettuja suoloja.
10 Kaavan I mukaisissa yhdisteissä on vähintään 3 asymmetristä hiiliatomia, ja siten ne voivat olla optisesti puhtaina diastereoisomeereina, diastereoisomeerien seoksina, diastereoisomeerisina rasemaatteina tai diaste-reoisomeeristen rasemaattien seoksina. Kaikki nämä muodot 15 kuuluvat keksinnön piiriin.
Eräs erityinen kaavan I mukaisten yhdisteiden ryhmä käsittää sellaiset, joissa n on 0, R3 on C^-alkyyli, C3_6-sykloalkyyli, fenyyli, C1.4-alkoksifenyyli, fenyyli-C^-alkyyli, imidatsolyyli-C1.4-alkyyli, N-bentsyylioksi-imidat-20 soli-C1.4-alkyyli, syaani-C1.4-alkyyli, C1.4-alkyylitio-C1.4- alkyyli, karbamoyyli-C1_4-alkyyli tai Cj^-alkoksikarbonyyli-C1.4-alkyyli ja R7 ja R8 merkitsevät yhdessä trimetyleeni-tai tetrametyleeniryhmää, jossa yksi -CH2-ryhmä voi olla korvattu -NH- tai -S-ryhmällä tai johon voi olla fuusioi-25 tuneena C3.6-sykloalkaani-, bentseeni- tai indolirengas.
Erityisen edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat sellaiset, joissa R1 on bentsyylioksikarbonyyli, 2-naftoyyli, l-hydroksi-2-naftoyyli, 3-hydroksi-2-naftoyyli, 3-bentsyylioksi-2-naftoyyli, 2-kinolyylikarbonyyli tai 3-30 kinolyylikarbonyyli ja R2 on vety, R3 on syaanimetyyli, metyylitiometyyli tai karbamoyylimetyyli, R4 on bentsyyli, R5 on vety ja R6 on hydroksi ja -N(R7)-CH(R8(R9) on edellä esitetty kaavan (c) mukainen ryhmä, jossa R12 on vety ja m on 2, tai R12 on tert-butoksikarbonyyliamino ja m on 1, 35 edellä esitetty kaavan (d) mukainen ryhmä, jossa R13 on 95693 7 tert-butoksikarbonyyli, edellä esitetty kaavan (e) mukainen ryhmä, jossa m on 1, edellä esitetty kaavan (f) mukainen ryhmä, jossa m ja p ovat molemmat 1, tai edellä esitetty kaavan (g), (i) tai (j) mukainen ryhmä ja R9 on 5 tert-butoksikarbonyyli, isobutyylikarbamoyyli, tert-butyy- likarbamoyyli tai kaavan (b) mukainen ryhmä, jossa R10 on sek-butyyli ja R11 on isobutyyli.
Erityisen edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat: 10 N2-[3 (S) - [[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi- nyyli]amino]-2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidi, N2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli]amino]-2-(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-15 isobutyyli-L-prolinamidi, N2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-bu-tyyli-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidi, N-tert-butyyli-l-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[ [N-20 ( 2-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]- 2(S)-piperidiinikarboksamidi, l-[3(S)-[[ N-bentsyylioksikarbonyyli) -L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-oktahydro-(3aS,6aS)-syklopenta[b]pyrroli-2(S)-karboksami-25 di, 1- [3( S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli ] amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-bu-tyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidi, 2- [3(S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi- 30 nyyli] amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyy- li-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-1-karboksamidi, N-tert-butyyli-3-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(2-naf-toyyli)-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidi, 8 - 95693 N1-tert-butyyli~N2- [2 (R) -hydroksi-4-f enyyli-3 (S) -[[N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-L-pro-linamidi-N2-oksidi, l-[3(S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-3-syaani-L-5 alanyyli]amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-bu- tyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidi, l-[3(S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-bu-toksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R tai S)-piperatsiini-10 karboksamidi, 1- [3( S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-3-syaani-L-alanyyliamino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R tai S)piperatsiini-karboksamidi, 15 N2-[3(S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi nyyli] amino] -2( R )-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4(R)-(tert-butoksif ormamido) -N1-tert-butyyli-L-prolinamidi, l-[3(S)-[[N-bentsyylioksi-2-naftoyyli)-L-asparagi-nyyli ] amino] -2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli ] -N-tert-butyy-20 li-2(S)-piperidiinikarboksamidi, N-tert-butyyli-1-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli ) -L-asparaginyyli]amino]butyy-li]-2-piperidiinikarboksamidi-l-oksidi, N-tert-butyyli-1-[3(S)-[ [N-(3-hydroksi-2-naftoyy-25 li)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyy- li]-2(S)-piperidiinikarboksamidi, trans-2- [3(S) - [ [N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyylidekahydro-( 4aR, 8aS)-isokinoliini-3( S)-karboksamidi, 30 4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-1-[2(R)- hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino]butyyli]-2(R tai S)-piperatsiinikarboks-amidi, N-tert-butyyli-1- [2- ( R ) -hydroksi-3( S ) - [ [N- (1-hyd-35 roksi-2-naftoyyli)-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyy- li]-2(S)-piperidiinikarboksamidi, - 95693 9 trans-N-tert-butyylidekahydro-2- [ 2 (R) -hydroksi-4-fenyyli-3(S)- [ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli] -amino]butyyli]-(4aR,8aS)-isokinoliini-3(S)-karboksamidi ja 5 N-tert-butyyli-1- [2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[ [N- (2-kinolyylikarbonyyli) -L-kysteinyyli ] amino] butyyli ] -2 (S) -piperidiinikarboksamidi.
Kaikkein edullisimpia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat: 10 N-tert-butyyli-l-[2-(R)-hydroksi-3( S )- [ [N-( 2-naf- toyyli)-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-2(S)-pi-peridiinikarboksamidi, N-tert-butyyli-oktahydro-1-[2(R)-hydroksi-4-fenyy-li-3(S)-[ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli]ami-15 no]butyyli] -(3aS, 6aS)-syklopenta[b] pyrroli-2(S) -karboks- amidi j a N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydro-2-[2(R)-hydroksi- 4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyy-li]amino]butyyli]pyrido[3,4-b]indoli-l(R tai S)-karboks-20 amidi.
Esillä olevan keksinnön mukaan kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä hap-poadditiosuoloja valmistetaan seuraavasti: (a) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis-25 tamiseksi, jossa 0, yhdiste, jonka yleinen kaava on f ^ .
CH CH--N R
30 h n^ (II) ’ ^ \* l’ 35 jossa R4, R5, R6, R7, R8 ja R9 merkitsevät samaa kuin edellä, 10 - 95693 saatetaan reagoimaan hapon kanssa, jonka yleinen kaava on R2
R1—N
5 \ CH-COOH (III) l· jossa R1, R2 ja R3 merktisevät samaa kuin edellä, tai kaavan III mukaisen hapon reaktiivisen johdannaisen kanssa, tai 10 (b) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmista miseksi, jossa n on 0, R5 on vety ja R6 on hydroksi, pelkistetään kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 0 ja R5 ja R6 ovat yhdessä oksoryhmä, tai (c) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmista-15 miseksi, jossa n on 0 ja R1 on C2_6-alkanoyyli, sykloalkyy-likarbonyyli, joka on adamantyylikarbonyyli tai tetrahyd-ronaftyylikarbanoyyli, joka on substituoitu C2_5-alkanoyyli-aminolla, naftyyli-C^-alkyylikarbonyyli, fenyyli-C1.4-al-kyylikarbonyyli, fenyyli-C^-alkyylikarbonyyli, joka on 20 substituoitu C^-alkoksilla, halogeenillä tai aminolla, naftoyyli, naftoyyli, joka on substituoitu bentsyylioksi-formamidolla, bentsyylioksilla tai hydroksilla, bentsoyy-li, bentsoyyli, joka on substituoitu bentsoyylioksikarbo-nyylillä tai karboksilla, heterosyklyylikarbonyyli, joka 25 on kinolyylikarbonyyli, jonka typpiatomi voi olla substituoitu C2_5-alkanoyyliaminolla, isokinolyylikarbonyyli, in-dolyylikarbonyyli, pyratsinyylikarbonyyli, 1-oksoisokino-lyylikarbonyyli tai 1-oksidokinolyylikarbonyyli, tolyyli-sulfonyyli, kinnamoyyli tai a-fenyyli-C^-alkoksikarbonyy-30 liamino-C2.6-alkanoyyli, R2 on vety tai R1 ja R2 yhdessä typ-piatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, muodostavat tässä edellä esitetyn kaavan (a) mukaisen syklisen imidi-ryhmän, yhdiste, jonka yleinen kaava on 35 il . ΙΙΙΛ Hill l:t ntt : : : 11 · 95693 f4 R? h2n\ ^co\ /'h\/«2-^ y 5 I , / \ fH (IV) R R5 R6 l9 jossa R3, R4, R5, R6, R7, R8 ja R9 merkitsevät samaa kuin 10 edellä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, josta saadaan substituenttia R1 vastaava ryhmä, tai yhdisteen kanssa, joka muodostaa tässä edellä esitetyn kaavan (a) mukaisen syklisen imidiryhmän, tai (d) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis-15 tamiseksi, jossa n on 0 ja R1 on fenyyli-C^-alkyylikarba-moyyli tai C^-alkoksifenyyli-C^-alkyylikarbamoyyli ja R2 on vety, tässä edellä esitetyn kaavan IV mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on 20 R1' -N=C=0 (V) jossa R1' on fenyyli-C1.4-alkyyli tai C^-alkoksifenyyli-C1.4-alkyyli, tai 25 (e) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis tamiseksi, jossa R3 on C1.4-alkyylisulfinyyli-C1.4-alkyyli ja n on 0, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R3 on C1.4-alkyylitio-Ci.4-alkyyli ja n on 0, tai (f) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis-30 tamiseksi, jossa n on 1, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 0, tai (g) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa n on 1 ja R1 on 1-oksidokinolyylikarbonyy-li ja R2 on vety, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, 35 jossa n on 1 ja R1 on kinolyylikarbonyyliryhmä ja R2 on vety, tai 12 - 95693 (h) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa n on 1 ja R3 on C^-alkyylisulfonyyli-C1.4-alkyyli, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 1 ja R3 on C^-alkyylisulfinyyli-C^-alkyyli, tai 5 (i) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis tamiseksi, jossa R1 on karboksisubstituoitu bentsoyyli, hydroksisubstituoitu naftoyyli tai hydrokinnamoyyli ja R2 on vety, katalyyttisesti hydrataan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on bentsyylioksikarbonyylisubstituoitu 10 bentsoyyli, bentsyylioksisubstituoitu naftoyyli tai kin-namoyyli ja R2 on vety, tai (j) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R3 on imidatsol-4-yyli ja/tai R4 on hydroksisubstituoitu fenyyli-C^-alkyyli ja/tai R7 ja R8 mer- 15 kitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, jossa yksi CH2-ryhmä on korvattu -NH-ryhmällä, kaavan I . mukaista yhdistettä, jossa R3 on l-(bentsyylioksikarbonyy-li)imidatsol-4-yyli ja/tai R4 on tert-butoksisubstituoitu fenyyli-C1.4-alkyyli ja/tai R7 ja R8 merkitsevät yhdessä 20 trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, jossa yksi -CH2-ryhmä on korvattu -N-(tert-butoksikarbonyyli)ryhmällä, käsitellään vahvalla hapolla, tai (k) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R7 ja R8 merkitsevät trimetyleeni- tai tet- 25 rametyleeniryhmää, joka on substituoitu C^-alkyylikarbo-nyyliaminoryhmällä, tai jossa yksi -CH2-ryhmä on korvattu -N( Ci.g-alkyylikarbonyyli )ryhmällä, asyloidaan yhdiste, jonka yleinen kaava on 30 * i I ‘tV7’ r1-n\ /co\ /ch\ y*—v y XCHX NH X XCiK (VI) i3 5^\6 I 9 RJ R R K* 35 95693 13 jossa n, R1, R2, R3, R4, R5, R ja R9 merkitsevät samaa kuin edellä ja R7 ja R8 merkitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, joka on substituoitu aminoryhmällä tai jossa yksi -CH2-ryhmä on korvattu -NH-ryhmällä, ja/tai 5 (1) haluttaessa diastereomeeristen rasemaattien seos jaetaan diastereomeerisiksi rasemaateiksi tai optisesti puhtaiksi diastereomeereiksi, ja/tai (m) haluttaessa diastereomeerien seos jaetaan optisesti puhtaiksi diastereomeereiksi, ja/tai 10 (n) haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditio-suolaksi.
Kaavan II mukaisen yhdisteen reaktio kaavan III mukaisen hapon kanssa menetelmän toteutusmuodon (a) mu-15 kaisesti voidaan suorittaa sinänsä tunnetuin peptidikemian menetelmin. Kun käytetään kaavan III mukaista happoa, reaktio suoritetaan edullisesti kondensointiaineen, kuten hydroksibentsotriatsolin tai disykloheksyylikarbodi-imidin läsnäollessa. Tämä reaktio suoritetaan sopivasti inertissä 20 orgaanisessa liuottimessa, kuten eetterissä (esim. dietyy-lieetterissä, tetrahydrofuraanissa jne.) tai dimetyylifor-mamidissa, alhaisessa lämpötilassa, sopivasti noin 10 °C -+5 °C:ssa ja varsinkin noin 0 eC:ssa. Käytettäviksi sopivia kaavan III mukaisia reaktiivisia johdannaisia ovat 25 esimerkiksi vastaavat happohalogenidit (esim. happoklori-dit), happoanhydridit, seka-anhydridit, aktivoidut esterit jne. Kun käytetään reaktiivista johdannaista, niin reaktio suoritetaan sopivasti inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten halogenoidussa hiilivedyssä (esim. dikloorimetaanis-30 sa jne.) tai eetterissä (esim. dietyylieetterissä, tetrahydrofuraanissa jne. ) ja tarvittaessa orgaanisen emäksen (esim. N-metyylimorfoliinin, di-isopropyylietyyliamiinin jne.) läsnäollessa, alhaisessa lämpötilassa, sopivasti noin -10 °C - +5 °C:ssa ja varsinkin noin 0 °C:ssa.
14 - 95693
Menetelmän toteutusmuodon (b) mukainen sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen pelkistys, jossa R5 ja R6 ovat yhdessä oksoryhmä, voidaan suorittaa sinänsä tunnetuin pelkistysmenetelmin, joita käytetään karbonyyliryhmän pel-5 kestämiseksi hydroksiryhmäksi. Pelkistys voidaan esimerkiksi suorittaa käyttäen kompleksista metallihydridiä, kuten alkalimetalliboorihydridiä, varsinkin natriumboori-hydridiä, sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten alka-nolissa (esim. metanolissa, etanolissa, propanolissa, iso-10 propanolissa jne.,). Pelkistys suoritetaan sopivasti noin huoneen lämpötilassa.
Keksinnön toteutusmuodossa (c) käytettäviksi sopivia aineita, joista saadaan substituenttia R1 vastaava ryhmä, ovat vastaavat hapot tai niiden reaktiiviset johdan-15 naiset, kuten vastaavat happohalogenidit (esim. happoklo-ridit), happoanhydridit, seka-anhydridit, aktivoidut esterit jne., ja sopivia aineita, jotka muodostavat edellä esitetyn kaavan (a) mukaisen syklisen imidiryhmän, ovat kaavan HOOC-P-Q-COO-aralkyyli mukaiset yhdisteet, joissa P 20 ja Q merkitsevät edellä määriteltyä. Kaavan IV mukaisen yhdisteen reaktio edellä mainittujen yhdisteiden kanssa suoritetaan samalla tavalla kuin edellä kuvattiin menetelmän toteutusmuodon (a) yhteydessä. Kaavan IV mukaisen yhdisteen ja kaavan HOOC-P-Q-COO-aralkyyli mukaisen yhdis-25 teen reaktiossa aluksi muodostuneesta reaktiotuotteesta lohkeaa itsestään aralkanolimolekyyli (HO-aralkyyli), jolloin muodostuu syklinen imidiryhmä.
Keksinnön toteutusmuodon (d) mukainen reaktio kaavan IV ja kaavan V mukaisen yhdisteen kesken voidaan suo-30 rittaa sinänsä tunnetulla tavalla. Reaktio suoritetaan sopivasti inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten halo-genoidussa alifaattisessa hiilivedyssä (esim. dikloorime-taanissa jne.), lämpötilassa 0 °C:n ja huoneen lämpötilan välillä, edullisesti huoneen lämpötilassa.
is · 95693
Menetelmän toteutusmuotojen (e), (f), (g) ja (h) mukainen hapetus voidaan suorittaa tunnetuin menetelmin. Hapetus suoritetaan edullisesti käyttäen perhappoa, kuten peretikkahappoa, perbentsoehappoa, halogeeniperbentsoehap-5 poa (kuten m-klooriperbentsoehappoa), perftaalihappoa jne., vaikka se voidaan suorittaa myös vetyperoksidilla. Hapetus suoritetaan sopivasti sellaisen orgaanisen liuottimen läsnäollessa, joka on inertti reaktio-olosuhteissa, esimerkiksi alkanolin kuten metanolin, etanolin jne., ha-10 logenoidun hiilivedyn kuten metyleenikloridin jne. läsnäollessa. Hapetus voidaan suorittaa laajalla lämpötila-alueella, esimerkiksi -70 °C:n ja noin huoneen lämpötilan välillä.
Menetelmän toteutusmuodon (i) mukainen katalyytti-15 nen hydraus voidaan suorittaa tunnetulla tavalla. Sopivasti katalyyttiseen hydraukseen käytetään jalometallikata-lysaattoria, edullisesti palladiumkatalysaattoria, kuten Pd/C-katalysaattoria, inertissä orgaanisessa liuottimessa (esim. alkanolissa, kuten etanolissa, isopropanolissa 20 jne.) huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. Kun tämän toteutusmuodon mukaisesti hydrataan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on nitrosubstituoitu kinnamoyyli ja R2 on vety, niin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on aminosubstituoitu hydrokinnamoyyli ja R2 on vety.
25 Menetelmän toteutusmuoto (j) voidaan suorittaa käyttämällä vahvaa epäorgaanista happoa, esimerkiksi halo-geenivetyhappoa, kuten kloorivetyhappoa tai bromivetyhap-poa, tai vahvaa orgaanista happoa, esimerkiksi halogenoi-tua alkaanikarboksyylihappoa, kuten trifluorietikkahappoa 30 ym. Tämä toteutusmuoto voidaan suorittaa tunnetuin mene telmin, esimerkiksi inertissä orgaanisessa liuottimessa (esim. alkaanikarboksyylihappoesterissä kuten etyyliasetaatissa) tai ilman liuotinta lämpötilassa noin 0 eC:n ja huoneen lämpötilan välillä, edullisesti noin huoneen läm-35 pötilassa.
ie -95693
Menetelmän toteutusmuodon (k) mukainen asylointi voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla. Asylointi suoritetaan sopivasti käyttäen asyylihalogenidia, kuten asyylikloridia tai -bromidia inertissä liuottimessa, kuten 5 dimetyyliformamidissa jne. ja lämpötilassa noin 0 °C:n ja huoneen lämpötilan välillä. Happohalogenidin sijasta voidaan tietenkin käyttää muuta reaktiivista happojohdannais-ta, kuten happoanhydridiä jne.
Menetelmän valinnaisesti suoritettavat toteutusmuo-10 dot (1) ja (m) voidaan suorittaa tavanomaisella tavalla, esimerkiksi pyiväskromatografiällä, ohutkerroskromatogra-fialla, suurpainenestekromatografiällä jne.
Kaavan I mukainen yhdiste voidaan muuttaa menetelmän toteutusmuodon (n) mukaisesti farmaseuttisesti hyväk-15 syttäväksi happoadditiosuolaksi tavanomaisella tavalla epäorgaanisella hapolla, esimerkiksi halogeenivetyhapolla, kuten kloorivetyhapolla tai bromivetyhapolla, rikkihapolla, typpihapolla, fosforihapolla jne, tai orgaanisella hapolla, kuten etikkahapolla, sitruunahapolla, maleiini-20 hapolla, fumaarihapolla, viinihapolla, metaanisulfoniha-polla, p-tolueenisulfonihapolla.
Menetelmän toteutusmuodossa (a) käytetyt kaavan II mukaiset yhdisteet ovat uusia ja muodostavat siten myös keksinnön erään kohteen.
25 Kaavan II mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa esimerkiksi saattamalla yhdiste jonka yleinen kaava on R4 /C" /Ο,,-Χ 30 ΙΓ -HN C (VII) 0 jossa R4 merkitsee samaa kuin edellä, R14 on aminosuojaryhmä (esim. tert-butoksikarbonyyli tai bentsyylioksikarbonyyli) 35 ja X on kloori- tai bromiatomi, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on · ' iu » mu i.i » ω . .
” 95693 K7 HN^ R8
Vili l· 7 8 9 jossa R , R ja R merkitsevät samaa kuin edellä, ja joko 14 lohkaisemalla ryhmä R saadusta yhdisteestä, jonka ylei-10 nen kaava on f 15 14 /H\/CH2 \ch/
Xt) R -HN c , Ix
Il Is
o R
20 jossa R4, R^, R®, R^ ja R14 merkitsevät samaa kuin edellä, jolloin saadaan kaavan II mukainen yhdiste, jossa R® ja
R® ovat yhdessä oksoryhmä, tai pelkistämällä kaavan IX
mukainen yhdiste Ja lohkaisemalla ryhmä R^4 saadusta yhdisteestä, jonka yleinen kaava on 25 R4 7 CH CH2-H R8 R14 h/ ,
30 R -HN A
/ \ p9
H OH R
jossa R4, R^, R®, R^ ja R*4 merkitsevät samaa kuin edellä, 35 jolloin saadaan kaavan II mukainen yhdiste, jossa R® on vety ja R® on hydroksi.
18 - 95693
Kaavan VII mukaisen yhdisteen (edullisesti sellai-14 nen, jossa R on bentsyylioksikarbonyyli) reaktio kaavan VIII mukaisen yhdisteen kanssa voidaan suorittaa tunnetulla tavalla, esimerkiksi inertissä liuottimessa, kuten ha-5 logenoidussa alifaattisessa hiilivedyssä (esim. dikloori-metaanissa jne.) emäksen (esim. trialkyyliamiinin kuten trietyyliamiinin jne.) läsnäollessa, sopivasti noin huoneen lämpötilassa.
14
Ryhmän R lohkaisu kaavan IX mukaisesta yhdistees-10 tä voidaan suorittaa tunnetulla tavalla, esimerkiksi käyttäen vahvaa epäorgaanista happoa, kuten halogeenivetyhap-poa-, tai vahvaa orgaanista happoa (esim. trifluorietik-kahappoa jne.), sopivasti lämpötilassa noin 0 °C:sta noin huoneen lämpötilaan. Vaihtoehtoisesti hydrogenolyyttisesti 14 15 lohkeava aminosuojaryhmä R voidaan lohkaista käyttäen vetyä ja jalometallikatalysaattoria (esim. palladiumkata-lysaattori kuten Pd/C-katalysaattoria) orgaanisessa liuottimessa tai liuotinseoksessa, joka on inertti reaktio-olosuhteissa (esim. alkanolissa, kuten etanolissa, isopropa-20 nolissa jne., alkaanikarboksyylihappoesterissä, kuten etyyliasetaatissa jne.), ja sopivasti noin huoneen lämpötilassa .
Kaavan IX mukaisen yhdisteen pelkistys kaavan X
mukaiseksi yhdisteeksi voidaan suorittaa siten kuin aikai- 25 semmin kuvattu sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen pel- 5 6 kistys, jossa n on 0 ja R ja R ovat yhdessä oksoryhmä, so. keksinnön menetelmän toteutusmuodon (b) mukaisesti.
14
Ryhmän R lohkaisu kaavan X mukaisesta yhdisteestä 14
voidaan suorittaa analogisesti aikaisemmin kuvatun R
30 ryhmän lohkaisun kanssa kaavan IX mukaisesta yhdisteestä.
Eräs toinen menetelmä sellaisen kaavan II mukaisen 5 6 yhdisteen valmistamiseksi, jossa R on vety ja R on hyd-roksi, suoritetaan saattamalla ensin yhdiste, jonka yleinen kaava on 19 95693 R4 CH CH- M / \ / 2 RA —HN CH (XI) 5 \ jossa R4 ja R14 merkitsevät samaa kuin edellä, reagoimaan edellä esitetyn kaavan VIII mukaisen yhdisteen kanssa, 10 sopivasti inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten alka-nolissa (esim. metanolissa jne.), dimetyyliformamidissa ym., korotetussa lämpötilassa, sopivasti noin 60 -120 °C:ssa, ja sitten lohkaisemalla ryhmän R14 reaktio-tuotteesta (edellä kuvattu kaavan X mukainen yhdiste) ai-15 kaisemmin kuvatulla tavalla.
Menetelmän toteutusmuodoissa (c) ja (d) lähtöaineina käytetyt kaavan IV mukaiset yhdisteet ovat uusia ja ovat siten myös eräänä keksinnön kohteena.
Kaavan IV mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa 20 esimerkiksi lohkaisemalla bentsyylioksikarbonyyli- tai tert-butoksikarbonyyliryhmä R1 kaavan I mukaisesta yhdisteestä, jossa n on 0, R1 on bentsyylioksikarbonyyli tai tert-butoksikarbonyyli ja R2 on vety. Tämä lohkaisu suoritetaan analogisesti siten kuin aikaisemmin kuvattiin R14-25 ryhmän lohkaisemiseksi kaavan IX mukaisesta yhdisteestä.
Menetelmän toteutusmuodossa (k) lähtöaineina käytetyt kaavan VI mukaiset yhdisteet, joissa R7 ja R8 merkitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, jossa yksi -CH2-ryhmä on korvattu -NH-ryhmällä, ovat kaa-30 van I mukaisten yhdisteiden alaryhmä. Menetelmän toteutusmuodon (k) lähtöaineina käytetyt kaavan VI mukaiset yhdisteet, joissa R7 ja R8 yhdessä merkitsevät trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, jossa on aminosubsti-tuentti, ovat uusia yhdisteitä. Niitä voidaan valmistaa 35 esimerkiksi lohkaisemalla alkoksikarbonyyliryhmä sellai sesta kaavan I mukaisesta yhdisteestä, jossa R7 ja R8 yh- 20 - 95693 dessä merkitsevät trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, joka on substituoitu alkoksikarbonyyliaminoryhmällä. Lohkaisit voidaan suorittaa tavanomaisin menetelmin, esimerkiksi käsittelemällä hapolla, kuten halogeenivetyhapolla 5 (esim. kloorivetyhapolla) inertissä orgaanisessa liuotti-messa (esim. alkaanikarboksyylihappoesterissä kuten etyyliasetaatissa jne.).
Kaavan V mukaisen yhdisteen sekä myös kaavojen VII, VIII ja XI mukaisten yhdisteiden lähtöaineina käytetyt 10 kaavan III mukaiset yhdisteet ja niiden reaktiiviset johdannaiset, mikäli ne eivät ole tunnettuja yhdisteitä tai niiden analogeja, voidaan valmistaa samalla tavalla kuin tunnetut yhdisteet tai jäljempänä olevissa esimerkeissä kuvatuin menetelmin tai analogisesti niiden kanssa. Lisäk-15 si menetelmän toteutusmuodossa (c) käytetyt yhdisteet ovat yleensä tunnettuja yhdisteitä.
Kuten aikaisemmin mainittiin, kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät happo-additiosuolat ehkäisevät virusperäistä proteaasia ja ovat 20 siten käyttökelpoisia virusinfektioiden hoitoon ja ennal taehkäisyyn, erityisesti HIV ja muiden retrovirusten aiheuttamien infektioiden hoitoon ja ennaltaehkäisyyn.
Esillä olevan keksinnön mukaisesti saatu HIV-pro-teaasin ehkäisy in vitro voidaan osoittaa seuraavalla ko-25 keella: HIV-proteaasi ilmaistiin E. coli -bakteeriin ja puhdistettiin osittain bakteerin liukoisista uutteista ammoniumsulfaattifraktioinnilla (0 - 30 %). Proteaasiak-tiivisuus määritettiin käyttäen substraattina sukkinyyli-30 Ser-Leu-Asn-Tyr-Pro-Ile-isobutyyliamidiheksapeptidiä.
Substraatin lohkaisu saatiin kvatitatiivisesti mittaamalla H-Pro-Ile-isobutyyliamidi N-terminaaliproliinin spektro-fotometrisessa määrityksessä.
1,25 mM substraattia liuotettiin sitraattipuskuriin 35 (125 mM, pH 5,5), joka sisälsi 0,125 mg/ml Tween 20. 10 μΐ koeyhdisteen liuosta erilaisina konsentraatioina (liuotet- 2] . 95693 tu metanoliin tai dimetyylisulfoksidiin ja laimennettu vedellä, joka sisälsi 0,1 % Tween 20) ja 10 μΐ proteaa-sia/80 μΐ substraattia lisättiin tähän puskuroituun substraattiin. Näytteitä inkuboitiin 37 eC:ssa määrätty aika 5 ja sulatusreaktion päättämiseksi lisättiin 1 ml värirea-genssia (30 pg/ml isatiinia ja 1,5 mg/ml 2-(4-klooribent-soyyli)bentsoehappoa asetonietanoliseoksessa 10:90 vol/-vol). Liuosta kuumennettiin vesihauteella ja sitten värjäytyneet jäännökset liuotettiin 1 ml:aan l-%:ista pyro-10 galloliliuosta 33-%:isessa vesi-asetoniseoksessa (p/vol/-vol). Liuoksen optinen tiheys mitattiin spektrofotometril-lä aaltopituudella 599 nm. Muodostuneen H-Pro-Ile-isobu-tyyliamidin määrää koeyhdisteessä verrattiin kontrolleihin ja koeyhdisteen konsentraatio, joka tarvittiin 50-%:isen 15 inhibition (*50) saamiseksi, määritettiin käytetyn koeyhdisteen erilaisilla konsentraatioilla saadusta graafisesta kuvaajasta.
Edustavilla kaavan I mukaisilla yhdisteillä edellä kuvatussa kokeessa saadut tulokset on koottu seuraavaan 20 taulukkoon.
Taulukko
Yhdiste Ιςη (μΜ) 25 ___ A 0,87 B 0,15 C 0,3 D 0,13 30 E 0,75 F 0,75 G 0,08 H 0,01 I 0,085 35 ________ • 95693
Yhdiste A: N-[N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L- asparaginyyli] -L-fenyylialanyyli]metyyli] -L-proliini-tert-butyyliesteri.
Yhdiste B: N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)- 5 L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L- proliini-tert-butyyliesteri.
Yhdiste C: N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)- L-asparaginyyli]amino]-2(S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri.
10 Yhdiste D: N^-[N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyy li ) -L-asparaginyyli] amino] -2 (R ja S)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-L-prolyyli]-N -isobutyy)i-L-isoleusiamidi (isomeeri 1, esimerkki 13).
Yhdiste E: N^-[N-[3(S)-[[N-[N-(bentsyylioksikarbo-15 nyyli)-L-leusyyli]-L-asparaginyyli]amino]-2(R ja S)-hyd- roksi-4-fenyylibutyyli] -L-prolyyli] -N^-isobutyyli-L-iso-leusinamidi (isomeeri 1, esimerkki 14).
Yhdiste F: N^-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyy-20 li]-N^-isopentyyli-L-prolinamidi (isomeeri 2, esimerkki 17).
2
Yhdiste G: N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R tai S )-hydroksi-4-fenyylibutyy-li]-I^-isobutyyli-L-prolinamidi (isomeeri 2, esimerkki 25 21).
Yhdiste H: N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(2-naftoyyli)-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri.
Yhdiste I: 2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)- 30 L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N- tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydro-3(R,S)-isokinoliinikar-boksamidi.
Kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja voidaan käyttää 35 lääkkeinä (esim. farmaseuttisten valmisteiden muodossa).
Farmaseuttisia valmisteita voidaan antaa lääkkeeksi ente- 23 - 95693 raalisesti, kuten oraalisesti (esim. tablettien, päällystettyjen tablettien, drageiden, kova- ja pehmeägelatiini-kapselien, liuosten, emulsioiden tai suspensioiden muodossa). nenän kautta (esim. nasaalisuihkeina) tai peräsuolen 5 kautta (esim. peräpuikkoina). Lääkeanto voi kuitenkin tapahtua myös parenteraalisesti, kuten lihaksensisäisesti tai suonensisäisesti (esim. injektioliuoksen muodossa).
Tablettien, päällystettyjen tablettien, drageiden ja kova- ja pehmeägelatiinikapselien valmistamiseksi kaa-10 van I mukaisiin yhdisteisiin ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviin happoadditiosuoloihin voidaan lisätä farmaseuttisesti inerttejä epäorgaanisia tai orgaanisia lai-mennusaineita. Esimerkiksi tabletteihin, drageihin ja ko-vagelatiinikapseleihin voidaan laimennusaineiksi lisätä 15 laktoosia, maissitärkkelystä tai sen johdannaisia, talkkia, steariinihappoa tai sen suoloja jne.
Sopivia laimennusaineita pehmeägelatiinikapseleihin ovat esimerkiksi kasviöljyt, vahat, rasvat, puolikiinteät ja nestemäiset polyolit jne.
20 Sopivia laimennusaineita liuosten ja siirappien valmistukseen ovat esimerkiksi vesi, polyolit, sakkaroosi, inverttisokeri, glukoosi jne.
Sopivia laimennusaineita injektioliuoksiin ovat esimerkiksi vesi, alkoholit, polyolit, glyseroli, kasvi-25 öljyt jne.
Sopivia laimennusaineita peräpuikkoihin ovat esi merkiksi luonnon öljyt tai kovetetut öljyt, vahat, rasvat, puolijuoksevat tai nestemäiset polyolit jne.
Lisäksi farmaseuttiset valmisteet voivat sisältää 30 säilytysaineita, liuotusaineita, viskositeettia lisääviä aineita, stabilointiaineita, kostutusaineita, (emulgoin-tiaineita, makeutusaineita, värejä, makuaineita, suoloja osmoottisen paineen säätämiseksi, puskureita, päällystys-aineita tai antioksidantteja. Ne voivat myös sisältää mui-35 ta terapeuttisesti arvokkaita aineita.
24 - 95693
Kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja voidaan käyttää virusinfektioiden, varsinkin retroviruksen aiheuttamien infektioiden hoitoon tai ennaltaehkäisyyn. Annos voi vaih-5 della laajoissa rajoissa ja se voidaan tietenkin kussakin tapauksessa sopeuttaa yksilöllisten tarpeiden mukaan. Yleensä oraalisesti lääkettä annettaessa riittävä vuorokausiannos on esimerkiksi noin 3 mg - noin 3 g, edullisesti noin 10 mg - noin 1 g (esim. noin 300 mg henkeä kohti) 10 edullisesti jaettuna 1-3 osaannokseksi, jotka voivat esimerkiksi vastata yhteensä samaa määrää. On kuitenkin huomattava, että edellä ilmoitettu yläraja voidaan ylittää, kun taudin laatu sitä vaatii.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Niissä 15 käytetyt liuotinsysteemit ovat seuraavat:
Systeemi A: 5 % metanolia kloroformissa
Systeemi B: 10 % metanolia kloroformissa
Systeemi C: kloroformi:metanoli:etikkahappo:vesi (120:15:3:2) 20 Systeemi D: kloroformi:metanoli:etikkahappo:vesi (90:15:3:2)
Systeemi E: kloroformi:metanoli:etikkahappo:vesi (60:18:2:3)
Systeemi F: kloroformi:metanoli:etikkahappo:vesi 25 (240:24:3:2)
Systeemi G: dikloorimetaani:metanoli:etikkahap-po:vesi (120:15:3:2)
Systeemi H: dietyylieetteri:n-heksaani:metanoli (47,5:47,5:5) 30 Systeemi I: dikloorimetaani:metanoli:etikkahap- po:vesi (60:18:2:3)
Systeemi J: dikloorimetaani:metanoli:etikkahap-po:vesi (120:15:2:3).
Esimerkki 1 35 0,5 g (1,07 mmol) N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)- L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä 25 - 95693 liuotettiin isopropanolin (50 ml) ja etyyliasetaatin (5 ml) seokseen ja hydrattiin 5 tuntia tolueeni-4-sulfoni-hapon (0,406 g, 2,14 mmol) ja 5-%:isen Pd/C-katalysaatto-rin (50 mg) läsnäollessa. Katalysaattori suodatettiin pois 5 ja suodos haihdutettiin. Jäännökseen lisättiin 5 ml di-kloorimetaania ja 5 ml dimetyyliformamidia. Jää/suolahau-teessa jäähdyttäen lisättiin sitten 0,285 g (1,07 mmol) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinia 25 ml:ssa dimetyyliformamidia ja sen jälkeen 0,145 g (1,07 mmol) hydrok-10 sibentsotriatsolia, 0,221 g (1,07 mmol) disykloheksyyli-karbodi-imidiä ja 0,246 g (2,14 mmol) N-etyylimorfoliinia. Seosta sekoitettiin yön yli, erottunut disykloheksyyliurea suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Saatu tummanruskea kumi jaettiin etyyliasetaattiin ja ve-15 teen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin peräkkäin 5-%:isella natriumbikarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella ja kuivattiin sitten natriumsul-faatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin 5 % 20 isopropanolia sisältävää etyyliasetaattia. Näin saatiin 0,125 g vaaleankeltaista kiinteätä N-[N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä.
Analyysi kaavalle: C3iH4qN4°7 [580,69].
25 Laskettu: C 63,18 H 6,94 N 9,65 %
Saatu: C 63,18 H 6,79 N 9,8 %, tuhka 1,2 %
Tuhkavapaa: C 63,91 H 6,87 N 9,92 % Lähtöaineena käytetty N- [ [N- (bentsyylioksikarbonyyli )-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyylies-30 teri valmistettiin sekoittamalla [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-fenyylialanyyli]metyylibromidia (0,77 g), L-proliini-tert-butyyliesteriä (0,35 g) ja trietyyliamiinia (0,203 g) 15 ml:ssa dikloorimetaania huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin haihdutettiin ja raakatuote kromatogra-35 foitiin silikageelillä käyttäen eluointiin kloroformia, jolloin saatiin 0,65 g kiinteätä N-[[N-(bentsyylioksikar- 26 -.9 5 6 9 3 bonyyli )-L-fenyylialanyyli]metyyli] -L-proliini-tert-butyy-liesteriä, sp. 98 - 99 °C.
Esimerkki 2 1.5 g (3,22 mmol) N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-5 L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä hydrattiin etyyliasetaatin (10 ml) ja isopropanolin (5 ml) seoksessa 5-%:isen Pd/C-katalysaattorin (0,15 g) ja to-lueeni-4-sulfonihapon (1,223 g, 6,44 mmol) läsnäollessa ja tuote liitettiin N-[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-leu-10 syyli]-L-asparagiiniin (1,24 g, 3,27 mmol) hydroksibentso-triatsolin (0,442 g, 3,27 mmol), disykloheksyylikarbodi-imidin (0,675 g, 3,27 mmol) ja N-etyylimorfoliinin (0,735 g, 6,55 mmol) läsnäollessa noudattaen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää. Reaktioseoksen jatkokäsittelyn jäl-15 keen saatiin 0,34 g kiinteätä ainetta, joka kromatografoi-tiin silikageelillä käyttäen eluointiin 5 % isopropanolia sisältävää dikloorimetaania. Näin saatiin 310 mg N-[[N-[N-[ N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-leusyyli] -L-asparaginyyli] -L-fenyylialanyyli] metyyli] - L-proliini-tert-butyyliesteriä; 20 MS: m/e 694 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty N-[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-leusyyli]-L-asparagiini valmistettiin seuraavasti: 4.5 g (12,4 mmol) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-leusiinisukkinimidiesteriä liuotettiin 40 ml:aan dimetyy- 25 liformamidia ja liuos jäähdytettiin jää/suolahauteessa. Sitten lisättiin L-asparagiinin (1,64 g, 12,4 mmol) liuos 4-m NaOH-liuoksessa (3,1 ml;: 12,4 mmol) ja sen jälkeen natriumbikarnaattia (2 g, 24,8 mmol). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Liuotin poistettiin haih-30 duttamalla ja jäännös liuotettiin veteen (100 ml). Liuoksen pH-arvo säädettiin 2-m NaOH-liuoksella noin 9,5:ksi ja seos uutettiin dietyylieetterillä (2 x 25 ml). Vesi-liuoksen pH säädettiin 3-m kloorivetyhapolla 2,5:ksi. Liuoksesta erottunut kiinteä kiteinen tuote suodatettiin, 35 pestiin dietyylieetterillä ja kuivattiin. Saatiin 3,5 g N- [ N- (bent syy 1 ioks ikar bonyyli) -L- leusyy 1 i ] -L-asparagi inia.
27 - 95693
Analyysikaavalle: ^is^25N3®6 (379,42).
Laskettu: C 56,98 H 6,64 N 11,07 %
Saatu: C 56,76 H 6,62 N 11,05 %.
Esimerkki 3 5 0,71 g (1,52 mmol) N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)- L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä hydrattiin tolueeni-4-sulfonihapon (0,58 g, 3,05 mmol) ja 5-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa ja tuote liitettiin N-(4-metyylivaleryyli)-L-asparagiiniin (0,35 g, 10 1,52 mmol) noudattaen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää.
Raakatuote puhdistettiin kromatografoimalla silikageelillä käyttäen eluointiin isopropanolia etyyliasetaatissa (5-8 %:n gradientti). Näin saatiin 0,23 g kiinteätä N-[[N-[N-(4-metyylivaleryyli)-L-asparaginyyli]-L-fenyylialanyyli]-15 metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä; MS: m/e 545 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty N-(4-metyylivaleryyli)-L-as-paragiini valmistettiin seuraavasti: 5,35 g (25 mmol) 4-metyylivaleriaanahapposukkin-20 imidiesteriä liuotettiin 40 ml:aan dimetyyliformamidia ja liuos lisättiin L-asparagiinin (3,3 g, 25 mmol) jäillä jäähdytettyyn liuokseen 4-m NaOH-liuoksen (6,25 ml, 25 mmol) ja dimetyyliformamidin (5 ml) seoksessa. Sitten lisättiin 5,5 g (65 mmol) natriumbikarbonaattia ja seosta 25 sekoitettiin huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja jäännös liuotettiin veteen. pH-arvo säädettiin 4-m kloorivetyhapolla 3:ksi. Sitten liuotin haihdutettiin ja jäännökseen lisättiin metanolia. Liukenematon aines suodatettiin pois ja liuotin haihdutet-30 tiin. Raakatuote kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä D. Näin saatiin 900 mg kiinteätä N-(4-metyylivaleryyli)-L-asparagiinia; Rf (systeemi D): 0,25.
Esimerkki 4 35 Analogisesti esimerkin 1 kanssa käyttäen N-(tert- butoksikarbonyyli)-L-asparagiinia N-(bentsyylioksikarbo- 28 - 95693 nyyli)-L-asparagiinin sijasta saatiin kiinteänä tuotteena N- [N- [ [N- (tert-butoksikarbonyyli )-L-asparaginyyli] -L-fe-nyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä; MS: m/e 546 [M]+.
5 Esimerkki 5 1,3 g (2,79 mmol) N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä hydrattiin etyyliasetaatin (10 ml) ja isopropyylialkoholin (10 ml) seoksessa 5-%:isen Pd/C-katalysaattorin (0,39 g) 10 ja tolueeni-4-sulfonihapon (1,06 g, 5,58 mmol) läsnäollessa ja tuote liitettiin N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-ala-niiniin (0,62 g, 2,78 mmol) disykloheksyylikarbodi-imidin (0,572 g, 2,78 mmol), hydroksibentsotriatsolin (0,375 g, 2,78 mmol) ja N-etyylimorfoliinin (0,64 g, 5,57 mmol) läs-15 näollessa analogisesti esimerkissä 1 kuvatun menetelmän kanssa. Reaktioseoksen jatkokäsittelyn ja kromatografoin-nin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin 3 % isopropanolia sisältävää dikloorimetaania saatiin kiinteänä tuotteena 0,55 g N-[[N-[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-ala-20 nyyli] -L-fenyylialanyyli]metyyli] -L-proliini-tert-butyyliesteriä; MS: m/e 538 [M+H]+.
Esimerkki 6
Analogisesti esimerkin 1 menetelmän kanssa saatiin N- [ [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-fenyylialanyyli]metyy-25 li]-L-proliini-tert-butyyliesteristä ja N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-glutamiinista N-[[N-[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-glutaminyy li ] -L-f enyylialanyyli] metyyli ] -L-pro-liini-tert-butyyliesteri; MS: m/e 595 [M+H]+.
Esimerkki 7 30 0,45 g (0,77 mmol) N-[N-[[N-(bentsyylioksikarbonyy li )-L-asparaginyyli]-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-prolii-ni-tert-butyyliesteriä (valmistettu esimerkissä 1 kuvatulla tavalla) liuotettiin 10 ml:aan isopropanolia ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 45 minuuttia natriumboo-35 rihydridin (0,075 g, 1,98 mmol) kanssa. Liuotin haihdutettiin ja jäännös liuotettiin 50 ml:aan etyyliasetaattia, 29 - 95693 liuos pestiin peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella. Liuos kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin, kiinteä jäännös (0,43 g) kromatografoitiin si-likageelillä käyttäen eluointiin 2 % metanolia sisältävää 5 dikloorimetaania. Saatiin 80 mg kiinteätä N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli ) -L-asparaginyyli] amino] -2(S) -hyd-roksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä Rf (systeemi B); 0,38; MS: m/e 583 [M+H]+.
Edelleen eluoimalla kolonnia 5-% metanolia sisäl-10 tävällä dikloorimetaanilla saatiin kiinteätä 70 mg N-13( S ) - [ [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli] amino] -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -L-proliini-tert-butyy-liesteriä; Rf (systeemi B): 0,23; MS: m/e 583 [M+H]+.
Esimerkki 8 15 0,3 g (0,45 mmol) N-[[N-[N-[N-(bentsyylioksikarbo nyyli )-L-leusyyli]-L-asparaginyyli]-L-fenyylialanyyli]metyyli] -L-proliini-tert-butyyliesteriä (valmistettu esimerkissä 2 kuvatulla tavalla) 10 ml:ssa isopropanolia käsiteltiin huoneen lämpötilassa natriumboorihydridillä 20 (40 mg, 1,06 mmol). Tunnin kuluttua reaktioseosta käsitel tiin esimerkissä 7 kuvatulla tavalla. Näin saatiin 0,32 g kiinteätä ainetta, joka kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin 3 % metanolia sisältävää dikloorimetaania. Saatiin 90 mg kiinteätä N-[3(S)-[[N-[N-(bentsyy-25 lioksikarbonyyli )-L-leusyyli] -L-asparaginyyli]amino] -2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä (isomeeri 1): Rf (systeemi A): 0,26; MS: m/e 696 [M+H]+.
Edelleen eluoimalla kolonnia 5 % metanolia sisäl-30 tävällä dikloorimetaanilla saatiin 70 mg kiinteätä N-[3(S)-[[N- [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-leusyyli] -L-aspa-raginyyli]amino]-2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä (isomeeri 2); Rf (systeemi A): 0,19; MS: m/e 696 [M+H]+.
30 95693
Esimerkki 9 0,18 g (0,33 mmol) N-[[N-[N-(4-metyylivaleryyli)-L-asparaginyyli]-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä (valmistettu esimerkissä 3 kuvatulla 5 tavalla) pelkistettiin natriumboorihydridillä (30 mg, 0,80 mmol) 10 ml:ssa isopropanolia esimerkissä 7 kuvatulla tavalla. Saadut kaksi isomeeriä N-[2(R tai S)-hydroksi-3(S)-[[N-(4-metyylivaleryyli)-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterit erotettiin 10 kromatografoimalla silikageelillä käyttäen eluointiin me-tanolia sisältävää kloroformia (5 - 8 % gradientti). Näin saatiin 35 mg isomeeriä 1 kiinteänä aineena; Rf (systeemi B): 0,2; MS: m/e 547 [M+H]+, ja 27 mg isomeeriä 2 kiinteänä aineen; Rf (systeemi B): 0,15; MS: m/e 547 [M+H]+.
15 Esimerkki 10 0,6 g (1,1 mmol) N-[N-[[N-(tert-butoksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä (valmistettu esimerkissä 4 kuvatulla tavalla) pelkistettiin natriumboorihydridillä (0,1 g, 20 2,65 mmol) 10 ml:ssa isopropanolia esimerkissä 7 kuvatulla tavalla. Saadut kaksi isomeeriä erotettiin kromatografoimalla silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä C. Näin saatiin N-[3(S)-[[N-(tert-butoksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino]-2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-pro-25 liini-tert-butyyliesterin isomeeriä 1 (115 mg) kiinteänä tuotteena; Rf (systeemi D): 0,23; MS: m/e 549 [M+H]+, ja isomeeriä 2 (100 mg) kiinteänä tuotteena; Rf (systeemi D): 0,15; MS: m/e 549 [M+H]+.
Esimerkki 11 30 0,45 g (0,84 mmol) N-[[N-[N-bentsyylioksikarbonyy- li ) -L-alanyyli] -L-fenyylialanyyli] metyyli] -L-proliini-tert-butyyliesteriä (valmistettu esimerkissä 5 kuvatulla tavalla) pelkistettiin natriumboorihydridillä (80 mg) 15 ml:ssa isopropanolia esimerkissä 7 kuvatulla tavalla. 35 Reaktioseoksen jatkokäsittelyn jälkeen saadut kaksi isomeeriä erotettiin kromatografoimalla silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä A. Näin saatiin N-[3(S)-[[N- > : ·Η:ι ill Ai | i 3i 95693 (bentsyylioksikarbonyyli)-L-alanyyli]amino]-2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibirtyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin isomeeriä 1 (70 mg) kumimaisena tuotteena; Rf (systeemi A): 0,38; MS: m/e 540 [M+H]+, ja isomeeriä 2 (50 mg) kumi-5 maisena tuotteena; Rf (systeemi A): 0,21; MS: m/e 540 [M+H]+.
Esimerkki 12 0,55 g (0,93 mmol) N-[ [N-[N-ibentsyylioksikarbonyy-li )-L-glutaminyyli]-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-10 tert-butyyliesteriä (valmistettu esimerkissä 6 kuvatulla tavalla) pelkistettiin natriumboorihydridillä (90 mg) 15 ml:ssa isopropanolia esimerkissä 7 kuvatulla tavalla. Reaktioseoksen jatkokäsittelyllä saatu tuote kromatogra-foitiin silikageelillä käyttäen eluointiin 2 % metanolia 15 sisältävää kloroformia. Näin saatiin N-[3(S)-[ [N-(bentsyy-lioksikarbonyyli )-L-glutaminyyli]amino]-2(R tai S)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin isomeeri 1 (60 mg) kiinteänä tuotteena; Rf (systeemi B): 0,37; MS: m/e 597 [M+H]+, ja isomeeri 2 (65 mg) kiinteänä 20 tuotteena; Rf (systeemi B): 0,25; MS m/e 597 [M+H]+.
Esimerkki 13 2 3 g (5,2 mmol) N -[N-[3(S)-(bentsyylioksiformami-do )-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-prolyyli]-N'1-isobutyyli-L-isoleusinamidia liuotettiin etyyliasetaatin 25 (25 ml) ja isopropanolin (10 ml) seokseen ja hydrattiin 5-%:isen Pd/C-katalysaattorin (0,3 g) ja tolueeni-4-sul-fonihapon (1,97 g, 10,36 mmol) läsnäollessa. Katalysaattori suodatettiin ja suodos haihdutettiin. Saatu kiinteä aine kuivattiin fosforipentoksidin yllä suurvakuumissa ja 30 liitettiin sitten N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagii- niin (1,48 g, 5,57 mmol) esimerkissä 1 kuvatulla tavalla.
2 Näin saatu 3,3 g epäpuhdasta N -[N-3(S)-[[N-(bentsyyliok-sikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R ja S)-hydroksi- 4-fenyylibutyyli]-L-prolyyli-N^-isobutyyli-L-isoleusin-35 amidia kiinteänä aineena. Kaksi isomeeriä erotettiin kro-matografoimalla silikageelillä käyttäen eluointiin systee- 32 - 9 5 6 9 3 miä F. Näin saatiin 90 mg isomeeriä 1 kiinteänä aineena;
Rf (systeemi F): 0,23; MS: m/e 695 [M+H]+, ja 0,55 g isomeeriä 2 kiinteänä aineena; RF (systeemi F): 0,11; MS: m/e 695 [M+H]+.
5 Lähtöaineena käytetty N^-[N-[3(S)-(bentsyylioksi- formamido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-prolyy-li]-N^-isobutyyli-L-isoleusinamidi valmistettiin seuraavasti: (i ) N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-isoleusiinin 10 (20,0 g) ja N-etyylimorfoliinin (9,6 ml) liuos tetrahyd- rofuraanissa (400 ml) jäähdytettiin -20 eC:seen ja liuokseen lisättiin tipottain 9,8 ml isobutyyliklooriformiaat-tia. Seosta sekoitettiin 5 minuuttia ja sitten lisättiin tipottain 5,52 g isobutyyliamiinia. Seosta sekoitettiin-15 15 °C:ssa 20 minuuttia, sitten seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. Lisättiin 20 ml vettä ja liuos haihdutettiin kuiviin. Jäännös jaettiin veteen (200 ml) ja etyyliasetaattiin (800 ml) liukeneviin osiin, orgaaninen liuos pestiin 5-%:isella sitruunahappoliuoksella (200 ml), 20 kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella (200 ml) ja vedellä (200 ml), kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hierrettiin dietyylieetteris- 2 1 sä, jolloin saatiin 18,2 N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N - isobutyyli-L-isoleusinamidia, jota käytettiin seuraavassa 25 vaiheessa ilman enempään puhdistusta.
(ii) Edellä saadun tuotteen (18,0 g) liuosta etanolissa (200 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (1,0 g) läsnäollessa 5 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 30 9,8 g N1-isobutyyli-L-isoleusinamidia värittömänä öljynä, jota käytettiin suoraan seuraavassa vaiheessa.
(iii ) N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-proliinisukkin-imidiesterin (17,3 g) ja N1-isobutyyli-L-isoleusinamidin (9,35 g) liuosta tetrahydrofuraanissa (120 ml) sekoitet-35 tiin huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin (200 ml) ja 5- 33 . 95693 %:iseen sitruunahappoliuokseen (250 ml) liukeneviin osiin. Orgaaninen liuos kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatil-la ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kiteytettiin etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 13,6 g 2 1 5 N -[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-prolyyli]-N -isobutyyli- L-isoleusinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 87- 88 °C.
(iv) Edellä saadun tuotteen (13,6 g) liuosta etanolissa (500 ml) hydrattiin 10-%risen Pd/C-katalysaattorin 10 läsnäollessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois 2 ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 9,10 g N -L-pro-lyyli-N^-isobutyyli-L-isoleusinamidia värittömänä öljynä, jota käytettiin ilman enempää puhdistusta.
(v) [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyy- 2 1 15 lijmetyylibromidin (8,86 g), N -L-prolyyli-N -isobutyyli- L-isoleusinamidin (6,71 g) ja trietyyliamiinin (2,60 g) liuosta dikloorimetaanissa (400 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja raakatuote kromatografoitiin silikageelillä käyttäen 20 eluointiin etyyliasetaattia. Saatua tuotetta hierrettiin petrolieetterin (kp. 40 - 60 °C) ja etyyliasetaatin seok- 2 sessa, jolloin saatiin 8,70 g N -[N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-prolyyli]-N -isobu-tyyli-L-isoleusinamidia lähes valkeana kiinteänä aineena, 25 sp. 80 - 81 °C.
2 (vi) N -[N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyy- lialanyyli]metyyli]-L-prolyyli]-N1-isobutyyli-L-isoleu- sinamidin (3,5 g) liuosta etanolissa (200 ml) käsiteltiin natriumboorihydridillä (1,0 g) esimerkissä 7 kuvatulla 2 30 tavalla, jolloin saatiin 7,1 g N -[N-[3(S)-(bentsyyliok-siformamido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-prolyyli ]-N -isobutyyli-L-isoleusinamidia.
Analyysi kaavalle: CggH^gN^Og.0,51^0.
Laskettu: C 67,21 H 8,37 N 9,50 % 35 Saatu: C 67,29 H 8,31 N 9,47 %.
34 95693
Esimerkki 14 0,78 g (1,34 mmol) N2-[N-[3(S)-(bentsylioksiform- amido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-prolyyli]- N^-isobutyyli-L-isoleusinamidia hydrattiin ja tuote lii- 5 tettiin N-[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-leusyyli]-L-aspa- ragiiniin (0,53 g, 1,39 mmol) esimerkissä 1 kuvatulla ta- 2 valla. Saatiin kiinteänä raakatuotteena 1,1 g N -[N-[3(S)-[ [N- [N- (bentsyylioksikarbonyyli )-L-leusyyli] -L-asparagi-nyyli]amino]-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-pro-10 lyyli]-N^-isobutyyli-L-isoleusinamidia. Molemmat isomeerit erotettiin kromatografoimalla käyttäen eluointiin systeemiä F. Näin saatiin 60 mg isomeeriä 1 kiinteänä aineena;Rf (systeemi F): 0,34; MS: m/e 808 [M]+, ja 50 mg isomeeriä 2 kiinteänä aineena; Rf (systeemi C): 0,24; MS: m/e 808 15 [M]+.
Esimerkki 15 0,275 g (0,473 mmol) N-[3(S-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli ) -L-asparaginyy li ] amino] -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä liuotettiin 20 10 ml:aan isopropanolia ja hydrattiin 18 tuntia 5-%:isen
Pd/C-katalysaattorin (50 mg) ja tolueeni-4-sulfonihapon (0,18 g, 0,94 mmol) läsnäollessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Saatu kiinteä aine liuotettiin dikloorimetaaniin (10 ml) ja liuos jäähdytet-25 tiin jäähauteessa. Liuokseen lisättiin 50 mg (0,49 mmol) etikkahappoanhydridiä ja sitten 0,10 g (0,99 mmol) tri-etyyliamiinia ja 0,2 ml pyridiiniä. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukene-30 viin osiin. Orgaaninen faasi pestiin 5-%:isella natrium-bikarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridi-liuoksella ja kuivattiin sitten vedettömällä natriumsul-faatilla. Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 35 mg N-[3( S)- [ (N-asetyyli-L-asparaginyyli )amino] -2(R)-hydroksi-35 4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä; Rf (systeemi E): 0,28; MS: m/e 491 [M+H]+.
i <n i itiin i i t n 35 95693
Esimerkki 16 1 g (2,14 mmol)/ N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)- 2-(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-bu-tyyliesteriä liuotettiin metanoliin (25 ml) ja hydrattiin 5 5-%:isen Pd/C-katalysaattorin (250 mg) ja tolueeni-4-sul-fonihapon (0,81 g, 4,26 mmol) läsnäollessa 3 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Saatu kiinteä aine kuivattiin fosforipentoksidin yllä suurvakuumissa ja liuotettiin sitten tetrahydrofuraaniin 10 (5 ml).
0,566 g (2,134 mmol) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-leusiinia liuotettiin tetrahydrofuraaniin (15 ml) ja liuos jäähdytettiin -15 °C:seen. Sitten lisättiin 0,245 g (2,134 mmol) N-etyylimorfoliinia ja 0,291 g (2,134 mmol) 15 isobutyyliklooriformiaattia. 5 minuuttia kuluttua lisättiin edellisessä kappaleessa valmistettu tetrahydrofuraa-niliuos ja sitten 0,451 g 84,27 mmol) N-etyylimorfoliinia. Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 10 tuntia, liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja 20 veteen liukeneviin osiin. Etyyliasetaattiliuos pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella ja kuivattiin sitten vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin vakuumis-sa, jolloin saatiin 1,5 g öljymäistä raakatuotetta N-25 [3(S)- [ [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-leusyyli]amino] -2- (R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyy-liesteriä. Molemmat isomeerit erotettiin kromatografoimal-la silikageelillä käyttäen eluointiin n-heksaanin ja etyyliasetaatin seosta 1:1. Näin saatiin N-[3(S)-[[N-(bentsyy-30 lioksikarbonyyli)-L-leusyyli]amino]-2(R tai S)-hydroksi- 4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin isomeeri 1 (180 mg) kiteisenä aineena; Rf (systeemi A): 0,34; MS: m/e 582 [M+H]+, ja isomeeri 2 (70 mg) kiteisenä aineena; Rf (systeemi A): 0,28; MS: m/e 582 [M+H]+.
35 Lähtöaineena käytetty N-[3(S)-(bentsyylioksiform- • r - 95693 3 6 amido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri valmistettiin seuraavasti: 2 g (4,3 mmol) N-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyyli]metyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä 5 (valmistettu esimerkissä 1 kuvatulla tavalla) liuotettiin isopropanolin (25 ml), etanolin (25 ml) ja metanolin (25 ml) seokseen ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4 tuntia natriumboorihydridin (0,4 g, 10,7 mmol) kanssa. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyli-10 asetaattiin (50 ml) ja veteen (25 ml) liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin kyllästetyllä natriumkloridi-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin kirkas kumimainen N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fe-15 nyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri (2 g); Rf (systeemi C): 0,58 ja 0,57.
Esimerkki 17 2 1,5 g (3,12 mmol) N -[3(S)-(bentsyylioksiformami-do)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-isopentyyli-20 L-prolinamidia hydrattiin metanolissa (25 ml) tolueeni-4-sulfonihapon (1,19 g, 6,24 mmol) ja 5-%:isen Pd/C-kataly-saattorin (0,25 g) läsnäollessa. 3 tunnin kuluttua katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 2,1 g kiinteätä jäännöstä. Se kuivattiin fos-25 foripentoksidin yllä suurvakuumissa ja liitettiin sitten N-( bentsyylioksikarbonyyli)-1-asparagiiniin (0,8 g, 3,12 mmol) esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Näin saatiin 2 1,45 g N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli]amino]-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-iso-30 pentyyli-L-prolinamidia raakatuotteena, joka kromatogra-foitiin silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä C. Saatiin 60 mg isomeeriä 1 kiinteänä tuotteena; Rf (systeemi E): 0,58; MS: 596 [M+H]+, ja 0,25 g isomeeriä 2 kiinteänä tuotteena, Rf (systeemi E): 0,41; MS: m/e 596 35 [M+H]+.
tU > 111« I:f ia - i 37 9 5 6 9 3 2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-(bentsyylioksiform-amido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-isopentyy-li-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-proliinisukkin-5 imidiesterin (15,0 g) ja isopentyyliamiinin (4,15 g) liuosta tetrahydrofuraanissa (100 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin haihdutettiin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin (250 ml). Liuos pestiin 5-%:isella sitruunahapolla (250 ml), kyllästetyllä natrium-10 kloridiliuoksella (2 x 250 ml), kyllästetyllä natriumbi-karbonaattiliuoksella (2 x 250 ml) ja kyllästetyllä nat-riumkloridiliuoksella (150 ml), kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kiteytettiin etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta, jol- 2 1 15 loin saatiin 11,1 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N -iso-pentyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 110 - 112 °C.
2 1 (ii) N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N -isopentyyli- L-prolinamidin (5,73 g) liuos 600 ml:ssa etanolia hydrat-20 tiin 10-%risen Pd/C-katalysaattorin (0,8 g) läsnäollessa 3,75 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 3,4 g N^-isopentyy-li-L-prolinamidi öljynä, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
25 (iii) N^-isopentyyli-L-prolinamidin (3,4 g), [N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyyli]metyylibromi- din (6,76 g) ja trietyyliamiinin (2,0 g) liuosta dikloori- metaanissa (360 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli. Raakatuote eristettiin esimerkissä 1 kuvatulla taval- 30 la ja kiteytettiin etyyliasetaatin ja n-heksaanin seokses- 2 ta, jolloin saatiin 3,3 g N -[[N-bentsyylioksikarbonyyli)- L-fenyylialanyyli]metyyli] -N^-isopentyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 82 - 84 °C.
2 (iv) N -[ [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-fenyyliala-35 nyyli] me tyyli] -N^-isopentyyli-L-prolinamidin (0,96 g) liuosta etanolissa (40 ml) käsiteltiin natriumboorihydri- 38 95693 dillä (0,17 g) esimerkissä 2 kuvatulla tavalla. Raakatuote kiteytettiin dietyylieetterin ja n-heksaanin seoksesta, 2 jolloin saatiin 0,65 g N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-isopentyyli-L-pro-5 linamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 73 - 82 eC. Esimerkki 18 2 0,58 g (1,24 mmol) N -[3(S)-(bentsyylioksiformami-do)-2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia liuotettiin 25 ml:aan metanolia ja hydrat-10 tiin 5 tuntia huoneen lämpötilassa tolueeni-4-sulfonihapon (0,472 g, 2,48 mmol) ja 5-%:;isen Pd/C-katalysaattorin (0,1 g) läsnäollessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Saatiin 0,82 g kiinteätä tuotetta, joka kuivattiin fosforipentoksidin yllä suurvakuumissa ja 15 liitettiin sitten N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagii- niin (0,322 g, 1,21 mmol) dimetyyliformamidissa esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Reaktioseosta käsiteltiin esimerkissä 10 kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 0,6 g raaka- tuotetta, joka kromatografoitiin silikageelillä käyttäen 2 20 eluointiin systeemiä C. Näin saatiin 225 mg N -[3(S)-[[N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R tai S )-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinami- dia kiinteänä aineena; MS: m/e 582 [M+H]+.
2 Lähtöaineena käytetty N —[3(S)-(bentsyylioksiform-25 amido)-2(R tai S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-bu-tyyli-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 5,2 g (15 mmol) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-proliinisukkinimidiesteriä ja 1,63 g (22,3 mmol) tert-bu-tyyliamiinia lisättiin dikloorimetaaniin (50 ml) ja seosta 30 sekoitettiin -8 °C:ssa tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Sitten liuos pestiin 5-%:isella sit-ruunahappoliuoksella, kyllästetyllä natriumbikarbonaatti-liuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haih- 35 dutettiin ja kiinteä jäännös kiteytettiin etyyliasetaatin 2 ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 3 g N -(bentsyy- 39 95693 lioksikarbonyyliJ-h^-tert-butyyli-L-prolinamidia; MS: m/e 305 [M+H]+.
2 (ii) 2,5 g (8,22 mmol) N -(bentsyylioksikarbonyy-li)-N*-tert-butyyli-L-prolinamidia 25 ml:ssa metanolia 5 hydrattiin 5 tuntia 5-%:isen Pd/C-katalysaattorin (0,5 g) läsnäollessa. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 1,4 g öljyä, joka kiteytyi seisotettaessa jääkaapissa useiden tuntien ajan. 0,35 g (2,05 mmol) tätä kiinteätä ainetta lisättiin [N-10 (bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyyli]metyylibromi-din (0,77 g, 2,05 mmol) liuokseen dikloorimetaanissa (15 ml) ja seokseen lisättiin sitten 0,207 g (2,05 mmol) trietyyliamiinia. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännökseen lisättiin 15 25 ml etyyliasetaattia. Kiinteä aine suodatettiin ja hy lättiin. Emäliuos pestiin vedellä, kyllästetyllä natrium-bikarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridi-liuoksella ja kuivattiin sitten vedettömällä natriumsul-faatilla. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kiteytettiin 20 eetterin ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 0,65 g 2 N -[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyyli]metyyli] -N1 -tert-butyyli-L-prolinamidia kiinteänä aineena; MS: m/e 466 [M+H]+.
(iii) 1,25 g (2,7 mmol) N^-[[N-(bentsyylioksikar-25 bonyyli )-L-fenyylialanyyli]metyyli] -N^-tert-butyyli-L-pro- linamidia liuotettiin 25 ml:aan isopropanolia ja sekoitettiin 4 tuntia huoneen lämpötilassa natriumboorihydridin (0,255 g, 6,7 mmol) läsnäollessa. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukene-30 viin osiin. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä nat- riumkloridiliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsul- 2 faatilla ja haihdutettiin. Saatiin 1,2 g N -[3(S)-(bent-syylioksiformamido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia, joka kromatografoitiin 35 silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä F. Saatiin 15 mg kumimaista isomeeriä 1; Rf (systeemi F): 0,38; MS: 4„ 95693 m/e 468 [M+H]+, ja 0,225 g kumimaista isomeeriä 2; Rf (systeemi F): 0,27; MS: m/e 468 [M+H]+.
Esimerkki 19 N- [ 3 (S) - (bentsyylioksif ormamido) -4-sykloheksyyli-5 2(R tai S)-hydroksibutyyli-L-proliini-tert-butyyliesterin (474 mg) liuosta 100 ml:ssa etanolia hydrattiin 3 tuntia 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 380 mg öljyä. Se liitettiin N-(bentsyylioksikar-10 bonyyli)-L-asparagiiniin (285 mg) esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Raakatuote kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin 7 % metanolia sisältävää dikloorimetaania, jolloin saatiin 30 mg valkeata kiinteätä N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-4-syklo-15 heksyyli-2(R tai S)-hydroksibutyyli]-L-proliini-tert-bu- tyyliesteriä, sp. 135 - 136 °C (isomeeri 1).
Samalla tavalla N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)- 4-sykloheksyyli-2(R tai S)-hydroksibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin toinen isomeeri (474 mg) hydrattiin 20 ja liitettiin N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiiniin (285 mg), jolloin saatiin 90 mg isomeeriä 2; MS: m/e 589 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty N-[3(S)-(bentsyylioksiform-amido)-4-sykloheksyyli-2(R ja S)-hydroksibutyyli]-L-pro-25 liini-tert-butyyliesteri valmistettiin seuraavasti: (i) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-sykloheksyyli-L-alaniinin (19,6 g) liuos 60 ml:ssa tetrahydrofuraania jäähdytettiin -10 °C:seen ja siihen lisättiin 8,9 ml N-etyylimorfoliinia. Sitten lisättiin tipottain 11,6 ml iso-30 butyyliklooriformiaattia ja seosta sekoitettiin -10 °C:ssa vielä 15 minuuttia. Sitten lisättiin 250 ml dietyylieet-teriä ja seos suodatettiin. Suodos lisättiin diatsometaa-nin kylmään dietyylieetteriliuokseen (valmistettu 21,5 g:sta N-metyyli-N-nitro-4-tolueenisulfonamidia) ja 35 seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia. Seos pestiin sitten vedellä (2 x 200 ml) ja kyllästetyllä nat- 41 - 95693 riumbikarbonaattiliuoksella (200 ml), kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 6,6 g keltaista öljymäistä bentsyyli-[2-sykloheksyyli-1(S)-(2-diatsoasetyyli)etyyli]karbamaattia, jota käytet-5 tiin ilman enempää puhdistamista.
(ii) Edellä saadun tuotteen (6,6 g) liuosta dietyy-lieetterissä (60 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa samalla johtaen kloorivetyä liuoksen lävitse 30 minuutin ajan. Liuotin haihdutettiin ja saatu öljy kiteytettiin 10 dietyylieetterin ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 5,8 g [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-sykloheksyyli-L-ala-nyyli]metyylikloridia, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
(iii) Edellä saadun tuotteen (4,4 g) liuos tetra-15 hydrofuraanin (90 ml) ja veden (10 ml) seoksessa jäähdytettiin 0 °C:seen ja siihen lisättiin 0,75 g natriumboori-hydridiä. Seosta sekoitettiin 0 eC:ssa tunnin ajan, sitten seos haihdutettiin kuiviin. Jäännökseen lisättiin 100 ml dikloorimetaania ja 100 ml vettä, vesikerroksen pH säädet- 20 tiin väkevällä kloorivetyhapolla 3:ksi ja orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Jäännöstä hierrettiin kuumassa n-heksaa-nissa (200 ml), seos suodatettiin, jolloin saatiin 2,65 g valkeata kiinteätä 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l-kloori-25 4-sykloheksyyli-2(R ja S)-butanolia; MS: 339, 341 [M]+.
(iv) Edellä saadun tuotteen (2,65 g) liuokseen etanolissa (60 ml) lisättiin 14 ml 0,71-m KOH-etanoliliuosta. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan, sitten seos haihdutettiin kuiviin. Jäännös jaettiin dikloori- 30 metaaniin (100 ml) ja veteen (100 ml) liukeneviin osiin ja orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin sili-kageelillä käyttäen eluointiin 3 % metanolia sisältävää dikloorimetaania. Saatiin 1,84 g 3(S)-(bentsyylioksiform-35 amido)-4-sykloheksyyli-l,2(R ja S)-epoksibutaania öljynä; MS: m/e 303 [M]+.
42 . 95693 (v) Edellä saadun tuotteen (1,84 g) ja L-proliini-tert-butyyliesterin (1,21 g) liuosta metanolissa (65 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 24 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin ja raakatuote kromatografioitiin silika- 5 geelillä käyttäen eluointiin 5 % metanolia sisältävää di- 2 kloorimetaania. Saatiin 0,41 g N —[3(S)-(bentsyylioksi-formamido)-4-sykloheksyyli-2(R tai S)-hydroksibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä (isomeeri 1) värittömänä öljynä; NMR (CDC13, 250 MHz) δ 0,78 - 1,0 (2H, m), 1,1 - 1,4 10 (5H, m), 1,43 (9H, s), 1,55 - 1,7 (5H, m) 1,8 - 1,95 (4H, m), 2,03 - 2,15 (1H, m), 2,3 - 2,4 (1H, m), 2,5 (1H, dd), 2,66 (1H, t), 3,16 - 3,26 (2H, m) 3,553- 3,7 (2H, m), 4,08 (1H, leveä s), 5,02 - 5,15 (3H, m), 7,25 - 7,4 (5H, m).
Edelleen eluoimalla samalla liuotinsysteemillä saa-15 tiin 1,18 g isomeeriä 2 värittömänä öljynä; NMR (CDCl^, 300 MHz) δ 0,75 - 0,85 (1H, m), 0,9 - 1,0 (1H, m), 1,1- 1,4 (5H, m), 1,43 (9H, s), 1,58 - 1,70 (5H, m), 1,75 - 1,9 (5H, m), 2,05 - 2,18 (1H, m), 2,54 - 2,75 (3H, m), 3,05-3,15 (2H, m), 3,45 - 3,52 (1H, m), 3,73- 3,8 (1H, m), 20 4,96 - 5,15 (3H, m), 7,3 - 7,38 (5H, m).
Esimerkki 20 0,663 g (1,42 mmol) N^-[3(S)-(bentsyylioksiform- amido)-2(R ja S )-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-isobutyyli- L-prolinamidia hydrattiin 30 ml:ssa metanolia tolueeni-4- 25 sulfonihapon (0,539 g, 2,84 mmol) ja 5-%:isen Pd/C-kataly- saattorin (0,1 g) läsnäollessa ja tuote liitettiin N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiiniin (0,378 g, 1,42 mmol) esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Esimerkin 1 mukaisella jatkokäsittelyllä saatu raakatuote flash-kroma- 30 tografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä 2 F, jolloin saatiin 80 mg N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikar-bonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R tai S)-hydroksi-4-fe-nyylibutyyli]-N1-isobutyyli-L-prolinamidia (isomeeri 1) kiinteänä aineena; Rf (systeemi E); MS; m/e 582 [M+H]+.
35 Sitten pylväs eluoitiin systeemillä C, jolloin saa- 43 9 5 6 9 3 tiin 70 mg isomeeriä 2 kiinteänä aineena; Rf (systeemi E) 0,33; MS; m/e 582 [M+H]+.
2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-(bentsyylioksiform-amido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-isobutyyli-5 L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) N^-isobutyyli-L-prolinamidi valmistettiin esimerkissä 17 (i) kuvatulla tavalla käyttäen isobutyyliamii-nia isopentyyliamiinin sijasta.
(ii) [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyy-10 li]metyylibromidin (1,5 g, 3,98 mmol), N^-isobutyyli-L- prolinamidin (0,678 g, 3,98 mmol) ja trietyyliamiinin (0,402 g, 3,98 mmol) liuosta dikloorimetaanissa (30 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännökseen lisättiin 50 ml etyyliasetaattia. 15 Muodostunut kiinteä aine poistettiin suodattamalla ja hylättiin. Suodos pestiin vedellä, natriumbikarbonaatti-liuoksella ja kuivattiin sitten vedettömällä natriumsul-faatilla. Liuotin haihdutettiin ja raakatuote kromatogra- foitiin silikageelillä käyttäen eluointiin kloroformia, 2 20 jolloin saatiin 1,6 g N -[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L- f enyylialanyyli]metyyli]-N1-isobutyyli-L-prolinamidia kiinteänä tuotteena; MS: m/e 466 [M+H]+.
2 (iii) N -[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyyli-alanyyli]metyyli]-N-isobutyyli-L-prolinamidin (0,7 g, 25 1,5 mmol) liuosta 20 ml:ssa etanolia käsiteltiin huoneen lämpötilassa natriumboorihydridillä (0,143 g, 3,75 mmol) 2 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Etyyliasetaat-tifaasi pestiin kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella, 30 kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutet- 2 tiin, jolloin saatiin 0,67 g N -[3(S)-(bentsyylioksiform-amido)-2(R ja S)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-isobutyyli-L-prolinamidia kiinteänä aineena; Rf (systeemi A) 0,39 ja 0,33; MS: m/e [M]+.
44 - 9 5 6 9 3
Esimerkki 21 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin (249 mg), 2-naftoyylikloridin (106 mg) ja di-isopropyylietyyliamii-5 nin (62 mg) liuosta vedettömässä dikloorimetaanissa (10 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa 20 tuntia. Hyytelömäinen reaktioseos jaettiin dikloorimetaaniin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi haihdutettiin ja jäännöksenä saatu öljy kiteytettiin etyyliasetaatin ja n-heksaanin 10 seoksesta, jolloin saatiin 215 mg N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[ [N- ( 2-naftoyyli ) -L-asparaginyyli] amino] -4-fenyylibutyy-li]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 603 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)-15 amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri valmistettiin seuraavasti: N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] -2 ( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin (1,75 g) liuosta etanolissa (100 ml) 20 hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 64 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Jäännöksenä saatu kumi jaettiin etyyliasetaattiin ja 2-m kloorivetyhappoon liukeneviin osiin. Vesifaasi tehtiin emäksiseksi laimealla NaOH-liuoksella ja uutettiin 25 etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuute haihdutettiin, jolloin saatiin 1,14 g N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä vaahtona; MS: m/e 449 [M+H]+.
Esimerkki 22 30 Analogisesti esimerkissä 21 kuvatun kanssa saatiin N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli-butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteristä (223 mg), to-lueeni-4-sulfonyylikloridista (95 mg) ja di-isopropyyli-etyyliamiinista (65 mg) 170 mg N-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-35 3(S)-[[N-(p-tolueenisulfonyyli)-L-asparaginyyli]amino]bu- tyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä 45 - 95693 aineena (kiteytys etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta); MS; m/e 603 [M+H]+.
Esimerkki 23
Analogisesti esimerkissä 21 kuvatun kanssa saatiin 5 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli- butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteristä (223 mg), fenyy-liasetyylikloridista (77 mg) ja di-isopropyylietyyliamii-nista (65 mg) 190 mg N-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-( fenyyliasetyyli )-L-asparaginyyli] amino]butyyli] -L-prolii-10 ni-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena (kiteytys etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta; MS: m/e 567 [M+H]+.
Esimerkki 24
Analogisesti esimerkissä 21 kuvatun kanssa saatiin 15 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli- butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteristä (249 mg), hydro-kinnamoyylikloridista (94 mg) ja di-isopropyylietyyliamiinista (72 mg) 214 mg N-[3(S)-[(N-hydrokinnamoyyli-L-aspa-raginyy 1 i ) amino] -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -L-prolii -20 ni-tert-butyyliesteriä kiinteänä valkeana aineena (kiteytys etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta); MS: m/e 581 [M+H]+.
Esimerkki 25
Analogisesti esimerkissä 21 kuvatun kanssa saatiin 25 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli-butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteristä (270 mg), 1-naf-toyylikloridista (114 mg) ja di-isopropyyliamiinista (77 mg) kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania 30 130 mg N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[ [N-( 1-naftoyyli)-L-asparagi- nyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyylies-teriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 603 [M+H]+.
Esimerkki 26
Analogisesti esimerkissä 21 kuvatun kanssa saatiin 35 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli- butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteristä (270 mg), kin- 46 95693 namoyylikloridista (100 mg) ja di-isopropyylietyyliamii-nista (77 mg) kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorime-taania 99 mg N-[3(S)-[(N-kinnamoyyli-L-asparaginyyli)ami-5 no]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyy-liesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 579 [M+H]+.
Esimerkki 27 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin (270 mg) 10 ja 4-fenyylivoihapon (98 mg) liuos vedettömässä tetrahyd-rofuraanissa (10 ml) jäähdytettiin jää/suolaseoksessa. Lisättiin 81 mg hydroksibentsotriatsolia, 69 mg N-etyyli-morfoliinia ja 136 mg disykloheksyylikarbodi-imidia ja seosta sekoitettiin 64 tuntia. Sitten seos laimennettiin 15 etyyliasetaatilla ja suodatettiin. Suodos pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridiliuoksella. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G, jolloin saatiin 79 mg N-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(4-fenyylibuty-20 ryyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-L-proliini-tert-bu-tyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 595 [M+H]+.
Esimerkki 28
Analogisesti esimerkissä 27 kuvatun kanssa N-[3(S)-25 [(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]- L-proliini-tert-butyyliesteristä (249 mg), 2-naftyylietik-kahaposta (104 mg), hydroksibentsotriatsolista (75 mg), N-etyylimorfoliinista (64 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (126 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen sili-30 kageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania 62 mg N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(2-naf-tyyli)asetyyli]-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 617 [M+H]+.
’ ' i» * *»*» ilta 47 95693
Esimerkki 29
Analogisesti esimerkissä 27 kuvatun kanssa N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteristä (270 mg), 4-metoksihyd-5 rokaneelihaposta (108 mg), hydroksibentsotriatsolista (81 mg), N-etyylimorfoliinista (69 mg) ja disykloheksyy-likarbodi-imidistä (136 mg) kromatografoinnin jälkeen si-likageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G saatiin 113 mg N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[ [N-(4-metoksihydrokinnamoyy-10 li )-L-asparaginyyli] amino] -4-fenyylibutyyli] -L-proliini- tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS; m/e 611 [M+H]+.
Esimerkki 30 0,179 g disykloheksyylikarbodi-imidiä, 0,016 g hyd-15 roksibentsotriatsolia ja 0,09 g N-etyylimorfoliinia lisättiin 0 °C:ssa sekoittaen N-[3(S)-amino-2(R tai S)-hydrok-si-5-metyyliheksyyli]-L-proiiini-tert-butyyliesterin (0,238 g) ja N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinin (0,210 g) liuokseen tetrahydrofuraanissa (10 ml). Seosta 20 sekoitettiin 16 tuntia ja sitten seos suodatettiin. Suodos jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin ja orgaaninen faasi pestiin natriumbikarbonaattiliuoksella ja natriumkloridiliuoksella. Orgaaninen faasi haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen 25 eluointiin etyyliasetaattimetanoliseosta (9:1), jolloin kiteytyksen jälkeen etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta saatiin 0,13 g N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyy-li)-L-asparaginyyli]amino]-2(R tai S)-hydroksi-5-metyyli-heksyyli)]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiin-30 teänä aineena; MS: m/e 549 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty [N-[3(S)-amino-2(R tai S)-hydroksi-5-metyyliheksyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri valmistettiin seuraavasti: (i) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(R tai S)-35 epoksi-5-metyyliheksaanin (1,31 g) ja proliini-tert-butyy- liesterin (0,855 g) liuosta dimetyyliformamidissa (10 ml) sekoitettiin 100 °C:ssa 16 tuntia, sitten liuotin haihdu- 48 9 5 6 9 3 tettiin. Jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin natriumkloridi-liuoksella ja haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin etyyliasetaatti-etik-5 kahappo-etanoliseosta (4:1:1). Materiaali, jonka Rf oli noin 0,24 kromatografoitiin uudelleen silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä H, jolloin saatiin 0,358 g N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R tai S)-hydroksi-5-me-tyyliheksyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä värittömänä 10 öljynä; MS: m/e 435 [M+H]+.
(ii) N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R tai S)-hydroksi-5-metyyliheksyyli)]-L-proliini-tert-butyylieste-rin (0,35 g) liuosta etanolissa (20 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 16 tuntia. Kata-15 lysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 0,238 g N-[3(S)-amino-2(R tai S)-hydroksi-5-metyyliheksyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä värittömänä kumina; MS: m/e 301 [M+H]+.
Esimerkki 31 20 N-[3(S )- [ (L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4- fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin (0,28 g) ja bentsyyli-isosyanaatin (0,083 g) liuosta dikloorimetaa-nissa (5 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa 20 tuntia. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja jäännöstä hierrettiin 25 dietyylieetterissä, jolloin saatiin 0,174 f N-[3(S)-[[N-(bentsyylikarbamoyyli )-L-asparaginyyli]amino] -2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 582 [M+H]+.
Esimerkki 32 30 N-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino] -2(R)-hydroksi-4- fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin (0,28 g), 1-adamantaanikarbonyylikloridin (0,124 g) ja di-isopropyy-lietyyliamiini (0,081 g) liuosta dikloorimetaanissa (5 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa 8 tuntia. Lisättiin vielä 0,124 g 35 1-adamantaanikarbonyylikloridia ja 0,081 g di-isopropyyli-etyyliamiinia ja sekoittamista jatkettiin 20 °C:ssa 16 a »Il ilii l i I lii « 95693 tuntia. Liuos laimennettiin dikloorimetaanilla (20 ml) ja pestiin peräkkäin vedellä, natriumkarbonaattiliuoksella, kaliumbisulfaattiliuoksella ja natriumkloridiliuoksella. Orgaaninen liuos haihdutettiin ja jäännöstä hierrettiin 5 dietyylieetterissä, jolloin saatiin 0,2 g N-[3(S)-[[N-(1-adamantyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] -2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 611 [M+H]+.
Esimerkki 33 10 0,208 g disykloheksyylikarbodi-imidiä, 0,124 g hyd- roksibentsotriatsolia ja 0,106 g N-etyylimorfoliinia li- 2 sättiin sekoittaen 0 °C:ssa N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi- 4-fenyylibutyyli]-N*-fenyyli-L-prolinamidin (0,315 g) ja N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinin (0,244 g) 15 liuokseen tetrahydrofuraanissa (10 ml). Seosta sekoitettiin 16 tuntia, sitten seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja suodatettiin. Suodos pestiin natriumbikarbonaatti-liuoksella ja natriumkloridiliuoksella ja liuotin haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen 20 eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1), jolloin saatiin 0,22 g N2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] -2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^"-fenyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 169 - 171 °C (metanolista).
2 25 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi- 4-fenyylibutyyli]-N^-fenyyli-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 3,5 g natriumboorihydridiä lisättiin sekoittaen jäillä jäähdytettyyn [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyy-30 lialanyyli]metyylikloridin (21 g) liuokseen 500 ml:ssa vesipitoista tetrahydrofuraania. Sekoittamista jatkettiin 0,5 tuntia, sitten liuotin haihdutettiin. Jäännökseen lisättiin dikloorimetaania ja vettä ja sitten varovasti väkevää kloorivetyhappoa happamen reaktion saamiseksi, faa-35 sit erotettiin ja orgaanisesta faasista saatiin eristettyä valkea kiinteä aine, jolla saatiin kaksi täplää: Rf 0,4 95693
O U
ja 0,5 (5-%:inen metanoli kloroformissa). Kiinteä aine uutettiin kiehuvalla heksaanilla kunnes korkeammalla oleva komponentti oli uutettu. Yhdistetyt n-heksaaniuutteet haihdutettiin ja jäännös uutettiin uudelleen kiehuvalla 5 n-heksaanilla alempana olevan komponentin vähäisen määrän (0,5 g) poistamiseksi. Tällä tavalla saatiin 11,5 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido) -l-kloori-4-fenyyli-2( S ) -butano-lia, sp. 151 - 153 °C (kiteytys etyyliasetaatin ja n-hek-saanin seoksesta).
10 (ii) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l-kloori-4-fe- nyyli-2(S)-butanolin (11,4 g) liuos etanolissa (300 ml), joka sisälsi 2,24 g kaliumhydroksidia, jätettiin seisomaan 15 minuutiksi. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin veteen ja dikloorimetaaniin liukeneviin osiin. Jatkokäsit- 15 telyllä saatiin 10,1 g lähes valkeata raakatuotetta 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
(iii) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi- 4-fenyylibutaanin (0,594 g) ja N^-fenyyli-L-prolinamidin 20 (0,38 g) liuosta dimetyyliformamidissa (5 ml) kuumennet tiin 90 °C:ssa 16 tuntia ja sitten 120 °C:ssa 8 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silika-geelillä käyttäen eluointiin dietyylieetteri-metanoliseos-ta (96:4), jolloin saatiin 0,48 g N^-[3(S)-(bentsyyliok- 25 siformamido) -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-fenyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 133- 135 °C (dietyylieetteristä).
2 (iv) N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli]-N^-fenyyli-L-prolinamidin (0,45 g) 30 liuosta 20 ml:ssa etanolia hydrattiin 10-%risen Pd/C-kata-lysaattorin läsnäollessa 4 tuntia, jolloin saatiin 0,315 g N^ - [3 (S) -amino-2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-fenyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 354 [M+H]+.
Il : Ittt lii K I ( i st: 51 - 95693
Esimerkki 34
Esimerkissä 33 kuvatulla tavalla 2-[3(S)-(bentsyy-lif ormamido) -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyy-li-1,2,3,4-tetrahydro-3 (R, S) -isokinoliinikarboksamidista 5 (0,987 g), N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinista (0,665 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä (566 mg), hyd-roksibentsotriatsolista (0,377 g) ja N-etyylimorfoliinista (0,287 g) saatiin 0,5 g 2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-10 tyyli] -N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydro-3(R, S )-isokino- liinikarboksamidia vaaleankermanvärisenä vaahtona; MS: m/e 644 [M+H]+.
Esimerkki 35
Esimerkissä 33 kuvatulla tavalla disykloheksyyli-15 karbodi-imidistä (0,225 g), hydroksibentsotriatsolista (0,135 g), N-etyylimorfoliinista (0,115 g), N^-[3(S)-ami-no-2(R)-hydroksi-4-fenyrolinamidista (0,38 g) ja N-(bent-syylioksikarbonyyli)-L-asparagiinista (0,266 g) saatiin 0,056 g N^-bentsyyli-N^-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyy-20 li)-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli- L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 616 [M+H]+.
Esimerkki 36 N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-4-(4-fluorifenyy-25 li )-2( R)-hydroksibutyyli ] -L-proliini-tert-butyyliesterin (270 mg) liuosta etanolissa (50 ml) hydrattiin 2 tuntia 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (30 mg) läsnäollessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, ja saatu öljy liitettiin N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-aspa-30 ragiiniin (158 mg) esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Raaka-tuote kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania. Saatiin 120 mg N- [3(S)- [ [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] -4-(4-fluorifenyyli)-2(R)-hydroksibutyyli]-L-proliini-35 tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena, sp. 163- 164 °C.
52 9 5 6 9 3 Lähtöaineena käytetty N-[3(S)-(bentsyylioksiform-amido)-4-(4-fluorifenyyli )-2(R)-hydroksibutyyli]-L-prolii-ni-tert-butyyliesteri valmistettiin seuraavasti: (i) Esimerkissä 19(i) kuvatulla tavalla N-(bentsyy-5 lioksikarbonyyli )-3-(4-fluorifenyyli)-DL-alaniinia (7,70 g) käsiteltiin isobutyyliklooriformiaatilla ja saatettiin sitten reagoimaan diatsometaanin kanssa, jolloin 7,15 g bentsyyli-[2-(4-fluorifenyyli)-l(RS) -(2-diatsoase-tyyli)etyyli]karbamaattia keltaisena kiinteänä aineena, 10 sp. 97 °C.
(ii) Käsittelemällä edellä saatua tuotetta kloori-vedyllä esimerkissä 19(ii) kuvatulla tavalla saatiin 6,70 g [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-(4-fluorifenyyli)~ DL-alanyyli]metyylikloridia, jota käytettiin ilman enempää 15 puhdistamista.
(iii) Pelkistämällä edellä saatu tuote (6,30 g) natriumboorihydridillä esimerkissä 19(iii) kuvatulla tavalla saatiin 5,83 g alkoholien seosta, tämä seos kroma-tografoitiin silikageelipylväässä käyttäen eluointiin 2 % 20 metanolia sisältävää dikloorimetaania, jolloin saatiin 0,95 g treo-3-(bentsyylioksiformamido)-l-kloori-4-( 4-f luorifenyyli )-2-butanolia valkeana kiinteänä aineena. Edelleen eluoimalla samalla liuotinsysteemissä saatiin 3,25 g erytro-3-(bentsyylioksiformamido)-l-kloori-4-(4-fluorife- 25 nyyli)-2-butanolia valkeana kiinteänä aineena, sp. 148-149 °C.
(iv) Käsittelemällä erytro-3-( bentsyylioksiformami-do)-l-kloori-4-(4-fluorifenyyli)-2-butanolia (3,20 g) K0H-etanoliliuoksella esimerkissä 19(iv) kuvatulla tavalla 30 saatiin 2,03 g erytro-3-(bentsyylioksiformamido)-l,2-epok-si-4-(4-fluorifenyyli)butaania valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 315 [M]+.
(v) Edellä saatua tuotetta (0,63 g) käsiteltiin L-proliini-tert-butyyliesterillä esimerkissä 19(v) kuvatulla 35 tavalla. Raakatuote kromatografoitiin silikageelipylväässä käyttäen eluointiin 5 % metanolia sisältävää dikloorime- 53 95693 taania. Saatiin 0,26 g N-[3(R)-(bentsyylioksiformamido)- 4-( 4-fluorifenyyli ) — 2(S )-hydroksibutyyli] -L-proliini-tert-butyyliesteriä värittömänä öljynä; NMR (CDCl^, 300 MHz) δ 1,47 (9H, s), 1,75 - 1,95 (4H, m), 2,05 - 2,15 (1H, m), 5 2,25 - 2,35 (1H, m), 2,50 -3,00 (4H, m), 3,20 (2h, m), 3,58 (1H, m), 3,85 (1H, m), 4,88 (1H, d), 5,00 (2H, dd), 6,94 (2H, t), 7,13 - 7,37 (7H, m).
Edelleen eluoimalla samalla liuotinsysteemillä saatiin 0,275 g N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-4-(4-fluori-10 fenyyli)-2(R)-hydroksibutyyli]-L-proliini-tert-butyylies-teriä värittömänä öljynä;
Edelleen eluoimalla samalla liuotinsysteemillä saatiin 0,275 g N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-4-(4-fluorifenyyli )-2( R)-hydroksibutyyli-L-proliini-tert-butyylieste-15 riä värittömänä öljynä;
Esimerkki 37 N-[3( S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-(4-metoksifenyyli)butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesterin (730 mg) liuosta etanolissa (20 ml) hydrattiin 10-%risen 20 Pd/C-katalysaattorin (50 mg) läsnäollessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin Öljy, joka liitettiin N-(bentsyylioksikarbo-nyyli)-L-asparagiiniin (340 mg) esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Raakatuote kromatografoitiin silikageelipylväässä 25 käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorime-taania. Saatiin 82 mg N-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyy-li) -L-asparaginyyli ] amino] 2 (R) -hydroksi-4- (4-metoksifenyyli )butyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 613 [M+H]+.
30 Lähtöaineena käytetty N-[3(S)-(bentsyylioksiform- amido) -2 (R) -hydroksi-4- (4-metoksifenyyli )butyyli] -L-pro-liini-tert-butyyliesteri valmistettiin seuraavasti: (i) Esimerkissä 19(i) kuvatulla tavalla N-(bentsyy-lioksikarbonyyli)-3-(4-metoksifenyyli)-L-alaniinia 35 (3,10 g) käsiteltiin isobutyyliklooriformiaatilla ja saa tettiin sitten reagoimaan diatsometaanin kanssa, jolloin 54 9 5 6 9 3 saatiin 2,83 g bentsyyli-[2-(4-metoksifenyyli)-l(S)-(2-diatsoasetyyli )etyyli]karbamaattia vaaleankeltaisena kiinteänä aineena, sp. 88 - 90 °C.
(ii) Edellä saatua tuotetta (2,80 g) käsiteltiin 5 kloorivedyllä esimerkissä 19(ii) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 2,85 g [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-(4-me-toksifenyyli )-l-alanyyli]metyylikloridia valkeana kiinteänä aineena, sp. 107 °C.
(iii) Edellä saatua tuotetta käsiteltiin natrium-10 boorihydridillä esimerkissä 19(iii) kuvatulla tavalla.
Raakatuotetta hierrettiin 5 % metanolia sisältävässä dik-loorimetaanissa (30 ml), jolloin saatiin 1,15 g 3(S)-( bentsyylioksiformamido)-l-kloori-4-(4-metoksifenyyli)-2(S)-butanolia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 363, 15 365 [M] + .
(iv) Edellä saatua tuotetta käsiteltiin KOH-etano-liliuoksella esimerkissä 19(iv) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 0,86 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epok-si-4-(4-metoksifenyyli)butaania valkeana kiinteänä ainee- 20 na, sp. 86 - 87 °C.
(v) Edellä saatua tuotetta (0,51 g) käsiteltiin L-proliini-tert-butyylieetterillä esimerkissä 19(v) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 0,63 g N-[3(S)-(bentsyylioksiformamido )-2(R)-hydroksi-4-(4-metoksifenyyli)butyyli]- 25 L-proliini-tert-butyyliesteriä värittömänä öljynä; MS: m/e 498 [M]+.
Esimerkki 38 2 N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-4-(4-tert-butok-sifenyyli)-2(R)-hydroksibutyyli] -N -tert-butyyli-L-prolin-30 amidin (1,58 g) liuosta etanolissa (200 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (100 mg) läsnäollessa 4 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin, saatu öljy liitettiin N-(bentsyylioksikar-bonyyli)-L-asparagiinin (0,74 g) esimerkissä 1 kuvatulla 35 tavalla. Raakatuote kromatografoitiin silikageelipylväässä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorime- 55 9 5 6 9 3 2 taania. Saatiin 0,59 g N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbo-nyyli )-L-asparaginyyli] amino] -4-( 4-tert-butoksifenyyli )-2(R)-hydroksibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 654 [M+H]+.
2 5 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-(bentsyylioksifor- mamido )-4- (4-tert-butoksifenyyli )-2(R)-hydroksibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) Esimerkissä 19(i) kuvatulla tavalla N-(bentsyy-lioksikarbonyyli)-3-(4-tert-butoksifenyyli)-L-alaniinia 10 (valmistettu 7,45 g:sta disykloheksyyliammoniumsuolasta) käsiteltiin isobutyyliklooriformiaatilla ja saatettiin sitten reagoimaan diatsometaanin kanssa, jolloin saatiin 3,58 g bentsyyli-[2-(4-tert-butoksifenyyli)-l(S)-(2-diat-soasetyyli )etyyli]karbamaattia keltaisena kiinteänä ainee- 15 na, sp. 80 - 82 °C.
(ii) Käsittelemällä edellä saatua karbamaattia kloorivedyllä esimerkissä 19(ii) kuvatulla tavalla saatiin 3,6 g [N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-(4-tert-butoksifenyy-li)-L-alanyyli]metyylikloridia, jota käytettiin ilman 20 enempää puhdistamista.
(iii) Pelkistämällä edellä saatu kloridi natrium-boorihydridillä esimerkiksi 19(iii) kuvatulla tavalla saatiin alkoholien seos, jota hierrettiin kuumassa n-heksaa-nissa, jolloin saatiin 3,14 g valkeata kiinteätä ainetta.
25 Se kiteytettiin etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 1,88 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-4-(4-tert-butoksifenyyli )-l-kloori-2(S)-butanolia valkeana kiinteänä aineena; (iv) Edellä saatua tuotetta (5,52 g) käsiteltiin 30 KOH-etanoliliuoksella esimerkissä 19(iv) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 4,98 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido)- 4- (4-tert-butoksifenyyli ) -1,2(S)-epoksibutaania värittömänä kumina; NMR (CDClg, 250 MHz) δ 1,36 (9H, s), 2,75- 3,05 (5H, m), 3,76 (1H, m), 4,73 (1H, d), 5,07 (2H, s), 35 6,95 (2H, d), 7,10 (2H, d), 7,25 - 7,40 (5H, m).
95693 56 (v) Edellä saatua tuotetta (2,50 g) käsiteltiin N1- tert-butyyli-L-prolinamidilla esimerkissä 19(v) kuvatulla 2 tavalla, jolloin saatiin 1,58 g N -[3(S)-(bentsyylioksi- f ormamido)-4-(4-tert-butoksifenyyli)-2(R)-hydroksibu- 5 tyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia värittömänä öljynä; MS; m/e 539 [M]+.
Esimerkki 39 2 N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli]amino] -4-(4-tert-butoksifenyyli )-2(R)-hydroksibutyy-10 li]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidin (200 mg) liuosta tri-fluorietikkahapossa (5 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 tuntia. Liuos kaadettiin ylimäärään kyllästettyä natriumvetykarbonaattia liuosta ja seos uutettiin dikloo-rimetaanilla (3 x 30 ml) ja etyyliasetaatilla (3 x 30 ml). 15 Yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömällä natriumsulfaa-tilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 100 mg väritöntä kumia. Se kromatografoitiin silikageelipylväässä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania, jolloin saatiin 42 mg lasimaista kiinteätä ainetta. Sitä 20 hierrettiin dietyylieetterin (1 ml) ja n-heksaanin (3 ml) 2 seoksessa, jolloin saatiin 28 mg N -[3(S)-[[N-(bentsyyli-oksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino-2(R)-hydroksi-4-(4-hydroksifenyyli)butyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidi-trifluoriasetaattia lasimaisena kiinteänä aineena; Ms: m/e 25 598 [M-CF3C02]+.
Esimerkki 40 2
Esimerkissä 1 kuvatulla tavalla N -[3(S)-(bentsyy- lioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert- butyyli-L-prolinamidista ja N-(bentsyylioksikarbonyyli)- 2 30 L-asparagiinihappo-4-metyyliesteristä saatiin N -[3(S)-[ [N- (bentsyylioksikarbonyyli )-4-0-metyyli-L-asparaginyy-li] amino] -2 (R) - hydroksi-4-f enyylibutyyli ] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidi lasimaisena kiinteänä aineena, sp. 55-60 eC; MS: m/e 597 [M+H]+.
35 Esimerkki 41 2
Esimerkissä 1 kuvatulla tavalla N -[3(S)-(bentsyy- 1 s» "U.l Niili I i I et lioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N -tert- 57 9 5 6 9 3 biityyli-L-prolinamidista ja N-(bentsyylioksikarbonyyli)- 2 L-metioniinista saatiin N -[3(S)-f[[N-(bentsyylioksikar-bonyyli ) -L-metionyyli] amino] -2(R )-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N1-tert-butyyli-L-prolinamidi valkeana kiinteänä 5 aineena, sp. 132 - 133 °C.
Esimerkki 42 N^-[3(S)-[[N,3-bis(bentsyylioksikarbonyyli)-L-his- tidyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert- 2 butyyli-L-prolinamidi valmistettiin N -[3(S)-(bentsyyliok-10 sif ormamido) -2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli] -N^-tert-bu- tyyli-L-prolinamidista ja N,3-bis(bentsyylioksikarbonyyli )-L-histidiinistä esimerkissä 1 kuvatulla tavalla; se saatiin värittömänä lasina; MS: m/e 739 [M+H]+.
Esimerkki 43 15 N^-[3(S)—[[N,3-bis(bentsyylioksikarbonyyli)-L-his- tidyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert- butyyli-L-prolinamidin (30 mg) liuosta 2-m kloorivetyha- possa (6 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli.
Seos neutraloitiin lisäämällä 2-m natriumhydroksidiliuosta 20 ja uutettiin dikloorimetaanilla (2 x 10 ml). Yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Raakatuotetta hierrettiin dietyylieetteris- 2 sä, jolloin saatiin 14 mg N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-l-histidyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyy-25 li]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 100 °C (hajoaa); MS: m/e 604 [M]+.
Esimerkki 44
Esimerkissä 21 kuvatulla tavalla N-[3(S)-[[L-aspa-raginyyli]amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -L-prolii-30 ni-tert-butyyliesteristä (224 mg), bentsoyylikloridista (70 mg) ja di-isopropyylietyyliamiinista (65 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluent-tina 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania 20 mg N-[3 (S)- [ (N-bentsoyyli-L-asparaginyyli) amino]-2(R)-hydroksi- 58 95693 4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteri valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanoli-dietyylieetteriseok-sesta); MS: m/e 553 [M+H]+.
Esimerkki 45 5 Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N-[3(S)-[(L-aspa- raginyyli )amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-prolii-ni-tert-butyyliesteristä (224 mg), 1-naftyylietikkahaposta (93 mg), hydroksibentsotriatsolista (68 mg), N-metyylimor-foliinista (58 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä 10 (113 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorime-taania 106 mg N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-[2-(l-naftyyli)~ asetyyli]-L-asparaginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-L-pro-liini-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena (ki-15 teytys metanoli-dietyylieetteriseoksesta); MS: m/e 617 [M+H]+.
Esimerkki 46
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N-[3(S)-[(L-aspa-raginyyuli )amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-pro-20 liini-tert-butyyliesteristä (493 mg), kinaldiinihaposta (190 mg), hydroksibentsotriatsolista (149 mg), N-etyyli-morfoliinista (127 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (249 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorime-25 taania 167 mg N-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kino-lyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-L-prolii-ni-tert-butyyliesteriä valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanoli-dietyylieetteriseoksesta); MS: m/e 604 [M+H]+.
30 Esimerkki 47
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N-[3(S)-[(L-asparaginyyli )amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -L-prolii-ni-tert-butyyliesteristä (234 mg), 4-kloori-hydrokaneeli-haposta (96 mg), hydroksibentsotriatsolista (70 mg), N-35 etyylimorfoliinista (60 mg) ja disykloheksyylikarbodi-im-idistä (118 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silika- 59 9 5 6 9 3 geelillä käyttäen eluointiin systeemiä G 171 mg N-[3(S)-[[N- ( 4-kloorihydrokinnamoyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2 (R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-proliini-tert-butyyli-esteriä valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 615 [M+H]+.
5 Esimerkki 48
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N-[3(S)-[(L-asparaginyyli )amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-L-prolii-ni-tert-butyyliesteristä (234 mg), 1-isokinoliinikarbok-syylihaposta (90 mg), hydroksibentsotriatsolista (70 mg), 10 N-etyylimorfoliinista (60 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (118 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen sili-kageelillä käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania 146 mg N-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(1-iso-kinolyylikarbonyyli ) -L-asparaginyyli] amino] -4-fenyylibu-15 tyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä vaaleankermanväri-senä kiinteänä aineena (kiteytys etyyliasetaatin ja n-hek-saanin seoksesta); MS: m/e 604 [M+H]+.
Esimerkki 49 2
Esimerkissä 21 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-aspa-20 raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (209 mg), 2-naftoyylikloridista (89 mg) ja di-isopropyylietyyliamiinista (61 mg) saatiin 191 mg N^-tert-butyyli-N^-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(2-naf-toyyli) -L-asparaginyyli] amino] -4-f enyylibutyyli] -L-prolin- 25 amidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 602 [M+H]+.
2 Lähtöaine valmistettiin hydraamalla N -[3(S)-[[n-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] -2(R)-hyd-roksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidi; MS: m/e 582 [M+H]+. Viimeksi mainittu yhdiste saatiin esimer-30 kissä 33 kuvatulla tavalla käyttäen kuitenkin vaiheessa (iii) N^-tert-butyyli-L-prolinamidia N^-fenyyli-L-prolin-amidin sijasta.
Esimerkki 50 1-[3( S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-35 tert-butyyli-oktahydro-syklopenta[b]pyrroli-2-karboksami-din (4 diastereoisomeeria) (2,798 g) ja N-(bentsyylioksi- 60 9 5 6 9 3 karbonyyli)-L-asparagiinisukkinimidiesterin (2,72 g) liuosta dimetoksietaanissa (50 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa 2 tuntia, sitten liuotin haihdutettiin. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja liuos pestiin natriumkarbonaatin 5 vesiliuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella. Orgaaninen liuos haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin sili-kageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G. Saatiin 434 g 1- [ 3(S)- [ [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli-N-tert-butyylioktahyd-10 ro-(3aS,6aS)-syklopenta[b]pyrroli-2(S)-karboksamidia valkeana kiinteänä aineena (etyyliasetaatista); MS: m/e 622 [M+H]+; Rf 0,22.
Lähtöaineena käytetty l-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-oktahydro-syklopenta[b]-15 pyrroli-2-karboksamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 3(S)-(bentsyylioksiformamido-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaanin (2,98 g) ja N-tert-butyylioktahydrosyklo-penta[b]pyrroli-2-karboksamidin (2,1 g) liuosta etanolissa (50 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 10 tuntia, sit- 20 ten liuotin haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin sili-kageelillä käyttäen systeemiä H, jolloin saatiin 4,7 g 1-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-N-tert-butyyli-oktahydro-syklopenta[b]pyrroli-2-karboksamidia neljän diastereoisomeerin seoksena, MS: m/e 25 508 [M+H]+.
(ii) 1-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyylioktahydro-syklopenta-[b]pyrroli-2-karboksamidin (4 diastereoisomeeria) (4,6 g) liuosta etanolissa (90 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-kata- 30 lysaattorin läsnäollessa 20 eC:ssa normaalipaineessa 72 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 2,958 g 1-[3(S)-amino-2(R)-hyd-roksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-oktahydro-syklopen-ta[b]pyrroli-2-karboksamidia (4 diastereoisomeeria) rus-35 kehtavana öljynä; MS: m/e 374 [M+H]+.
< + + a»l< I l 4 JU . i 6i 95693
Esimerkki 51
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla 1-[3(S)-[(L-aspa-raginyyli ) amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-oktahydro- (3aS, 6aS) -syklopenta [b] pyrroli-2 (S) -kar-5 boksamidista (310 mg), kinladiinihaposta (111 mg), hydrok-sibentsotriatsolista (86 mg), N-etyylimorfoliinista (74 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (132 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 200 mg N-10 tert-butyyli-oktahydro-1-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[ [N- ( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino]butyy-li]-(3aS,6aS)-syklopenta[b]pyrroli-2(S)-karboksamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 643 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 1-[3(S)-[(L-asparaginyyli)-15 amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-ok-tahydro- (3aS, 6aS) -syklopenta [b]pyrroli-2( S )-karboksamidi valmistettiin seuraavasti: l-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyy-20 li-oktahydro-( 3aS, 6aS )-syklopenta [b]pyrroli-2( S )-karbok- samidin (397 mg) liuosta etanolissa (20 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 4 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 312 mg 1-[3(S)-[(L-25 asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-oktahydro-(3aS,6aS)-syklopenta[b]pyrroli-2(S)-karboksamidi vaaleankeltaisena kumina; MS: m/e 488 [M+H]+.
Esimerkki 52 2 30 Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N —[3(S)-[(L-aspa
raginyyli )amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (295 mg), 6-(bentsyylioksikarbo-nyyli)-2-naftoehaposta 8204 mg), hydroksibentsotriatsolis-ta (20 mg), N-etyylimorfoliinista (77 mg) ja disyklohek-35 syylikarbodi-imidistä (151 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G
62 95693 340 mg N-[3(S )-[ [N-6-( bentsyylioksikarbonyyli )-2-naftoyl] -L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia lähes valkeana kiinteänä aineena (kiteytys etyyliasetaatin ja n-heksaanin seokses-5 ta); MS: m/e 736 [M+H]+.
Esimerkki 53 294 mg N^-[3(S)-[[N-[6-(bentsyylioksikarbonyyli)- 2-naftoyyli]-L-asparaginyyli]-amino] -2(R)-hydroksi-4-fe-nyylibutyyli]-L-prolinamidia hydrattiin isopropanolissa 10 (100 ml) 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 145 mg N^-[3(S)-[[N-(6-karboksi-2-2-naftoyyli)-L-asparaginyyli ] amino] - 2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-15 tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanolietyyliasetaattiseoksesta); MS: m/e 646 [M+H]+.
Esimerkki 54 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-aspa- 20 raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N*-tert- butyyli-L-prolinamidista (295 mg), 4-(bentsyylioksikarbo- nyyli)bentsoehaposta (171 mg), hydroksibentsotriatsolista (90 mg), N-etyylimorfoliinista (77 mg) ja disykloheksyy- likarbodi-imidistä (151 mg) saatiin kromatografoinnin jäl- 25 keen silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G 390 mg 2 N -[3(S)-[[N-4-(bentsyylioksikarbonyyli)bentsoyyli]-L-as-paraginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia lähes valkeana kiinteänä aineena (kiteytys etyyliasetaatin ja n-heksaanin seokses-30 ta); MS: m/e 686 [M+H]+.
Esimerkki 55 2 274 mg N -[3(S)-[[N-[4-(bentsyylioksikarbonyyli)-bentsoyyli]-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyy-libutyyli]-N -tert-butyyli-L-prolinamidia hydrattiin iso-35 propanolissa (100 ml) 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läs näollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Kataly- 63 9 5 6 9 3 saattori poistettiin suodattamalla ja jäännös haihdutet- 2 tiin, jolloin saatiin 193 mg N -[3(S)-[[N-(4-karboksibent-soyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä 5 aineena (metanolietyyliasetaatista); MS: m/e 596 [M+H]+.
Esimerkki 56 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-aspa-raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (228 mg), 4-nitrokaneelihapsta 10 (98 mg), hydroksibentsotriatsolista (69 mg), N-etyylimor- foliinista (59 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (116 g) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 68 mg N^-tert-butyyli-N^- [2(R)-hydroksi-3(S)-[ [N-(4-nitro-15 kinnamoyyli )-L-asparaginyyli] amino] -4-fenyylibutyyli]-L-prolinamidia valkeana kiteisenä aineena (kiteytys metano-lidietyylieetteriseoksesta); MS: m/e 623 [M+H]+.
Esimerkki 57 N1-tert-butyyli-N^-[2(R) -hydroksi-3(S"]-[[N-(4-nit- 20 rokinnamoyyli )-L-asparaginyyli]amino] -4-fenyylibutyyli]- L-prolinamidin 8200 mg) liuosta etanolissa (20 ml) hydrat- tiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 eC:ssa normaalipaineessa 5 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin. Jäännös kromatogra- 25 foitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaa- 2 ni-metanoliseosta (9:1), jolloin saatiin 40 mg N -[3(S)~ [ [N-(4-aminohydrokinnamoyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena (metanolietyyliasetaattiseok-30 sesta); MS: m/e 595 [M+H]+.
Esimerkki 58 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N [3(S)-[(L-asparaginyyli )amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (418 mg), 1-asetyyli-l,2,3,4-tet-35 rahydro-2(R,S)-kinoliinikarboksyylihaposta (205 mg), hydroksibentsotriatsolista (127 mg), N-etyylimorfoliinista 64 95693 (108 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (212 mg) saatiin puhdistamisen jälkeen kromatografoimalla silikagee-lillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 220 mg N^-[3(S)~[[N-[(1-asetyyli-l,2,3,4-tetrahydro-5 2( RS )-kinolyyli )karbonyyli] -L-asparaginyyli]amino] -2(R)- hydroksi-4-fenyylibutyyli-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia (2 diastereomeeria) valkeana kiinteänä aineena (kiteytys dikloorimetaanidietyylieetteriseoksesta); MS: m/e 649 [M+H]+.
10 Esimerkki 59 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-asparaginyyli )amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (418 mg), 1,2,3,4-tetrahydro-l-okso-3(R,S)-isokinoliinikarboksyylihaposta (179 mg), hyd-15 roksibentsotriatsolista (127 mg), N-etyylimorfoliinista (108 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (212 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen 1 2 eluointiin systeemiä I 132 mg N -tert-butyyli-N -[3(S)-[[N-[(1,2,3,4-tetrahydro-l-okso-3(R tai S)isokinolyyli)-20 karbonyyli]-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyy-libutyyli]-L-prolinamidia (diastereomeeri A) valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanolidietyylieetteristä); MS: m/e 621 [M+H] + , ja 66 mg N^-tert-butyyli-N^-[3(S)-[[N-[(1,2,3,4-tetrahydro-l-okso-3(R tai S)isokinolyyli)karbo-25 nyyli] -L-asparaginyyli]amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-L-prolinamidia (diastereomeeri B) valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanolidietyylieetteriseoksesta); MS: m/e 621 [M+H]+.
Esimerkki 60 2 30 Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-aspa raginyyli ) amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidista (418 mg), 2-asetamido-l,2,3,4-tetrahydro-2-naftoehaposta (218 mg), hydroksibentsotriat-solista (127 mg), N-etyylimorfoliinista (108 mg) ja disyk-35 loheksyylikarbodi-imidistä (212 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloo- 65 9 5 6 9 3
rimetaani-metanoliseosta (9:1) 142 mg N2-[3(S)-[[N-[2(R
tai S)-asetamido-l, 2,3,4-tetrahydro-2-naftoyyli]-L-aspara-ginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia (diastereomeeri A) valkeana kiin-5 teänä aineena; MS: m/e 663 [M+H]+, ja 80 mg N2-[3(S)-[[N-[2(R tai S)-asetamido-l,2,3,4-tetrahydro-2-naftoyyli]-L-asparaginyyli] amino] -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N1-tert-butyyli-L-prolinamidia (diastereomeeri B) valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 663 [M+H]+.
10 Esimerkki 61 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-aspa-raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-L-prolinamidista (209 mg), kinaldiinihaposta (81 mg), hydroksibentsotriatsolista (63 mg) N-etyylimor-15 foliinista (54 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (106 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 88 mg N2-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N—(2-kinolyyli-karbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-N^-tert-butyy-20 li-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 603 [M+H]+.
Esimerkki 62 1-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidin (844 mg) ja N-25 (bentsyylioksikarbonyyli)-l-asparagiinisukkinimidiesterin (882 mg) liuosta tetrahydrofuraanissa (25 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa 16 tuntia, sitten seos haihdutettiin. Jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin (50 ml) ja orgaaninen liuos pestiin kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella ja vedellä. 30 Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1). Saatiin 461 mg 1-[3(S)-[[N—(bentsyylioksikarbonyyli )-1-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidia vaa-35 leankermanvärisenä kiinteänä aineena; MS: m/e 596 [M+H]+.
66 95693 Lähtöaineena käytetty l-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2( S )-piperidiinikarbok-samidi valmistettiin seuraavasti: (i ) N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidia 5 (2,576 g) ja 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-1,2( S)-epoksi- 4-fenyylibutaania (4,158 g) kuumennettiin palautusjäähdyttäen etanolissa (70 ml) 16 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös liuotettiin dietyylieetteriin (100 ml), liuosta käsiteltiin aktivoidulla magnesiumsilikaatilla (10 g). 10 Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 6,16 g 1-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidia värittömänä lasina; MS: m/e 482 [M+H]+.
(ii) 1-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydrok-15 si-4-f enyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2( S )-piperidiinikar- boksamidin (1,25 g) liuosta etanolissa (80 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 0,844 g 1-[3(S)-20 amino-2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2(S )-piperidiinikarboksamidia vaaleankeltaisena kumina; MS: m/e 348 [M+H]+.
Esimerkki 63
Esimerkissä 21 kuvatulla tavalla l-[3(S)-[(L-aspa-25 raginyyli )amino]-2( R )-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert- butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidista (226 mg), 2-naf-toyylikloridista (93 mg) ja di-isopropyylietyyliamiinista saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 76 mg N-30 tert-butyyli-l-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(-naftoyyli)-L-as-paraginyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]-2(S)-piperidiinikarboksamidia valkeana kiinteänä aineena: MS: m/e 616 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 1-[3(S)-[(L-asparaginyyli)-amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-35 2(S)-piperidiinikarboksamidi valmistettiin hydraamalla 1- < · . <.i«j l i « iti 67 95693 [3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyy-li-2(S)-piperidiinikarboksamidi.
Esimerkki 64
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla 1-[3(S)-[(L-aspa-5 raginyyli )amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert- butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidista (226 mg), kinal-diinihaposta (85 mg), N-etyylimorfoliinista (56 mg), hyd-roksibentsotriatsolista (66 mg) ja disyklokarbodi-imidistä (111 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä 10 käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 100 mg N-tert-butyyli-l-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kinolyylikarbonyyli ) -L-asparaginyyli] -amino]butyyli]-2(S)-piperidiinikarboksamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 617 [M+H]+.
15 Esimerkki 65 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N —[3(S)-[(L-asparaginyyli )amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (228 mg), 3-isokinoliinikarbok-syylihaposta (88 mg), hydroksibentsotriatsolista (69 mg), 20 N-etyylimorfoliinista (59 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (116 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 88 mg N1-tert-butyyli-N^-[2(R)-hydroksi-3(S)-[ [N-( 3-isokinolyylikarbonyyli )- L-asparaginyyli]amino] -4-25 fenyylibutyyli]-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 603 [M+H]+.
Esimerkki 66 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-asparaginyyli )amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-30 butyyli-L-prolinamidista (228 mg) 3-kinoliinikarboksyyli- haposta (88 mg), hydroksibentsotriatsolista (69 mg), N-etyylimorfoliinistä (59 mg) ja disykloheksyylikarbodi-im-idistä (116 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseos-35 ta (9:1) 86 mg N^-tert-butyyli-N^-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(3-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-L- 68 9 5 6 9 3 prolinamidi valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 603 [M+H]+.
Esimerkki 67 2
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N -[3(S)-[(L-aspa-5 raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidista (295 mg), 3-(bentsyylioksiform-amido)-2-naftoehaposta (214 mg), hydroksibentsotriatsolis-ta (90 mg), N-etyylimorfoliinista (77 mg) ja disyklohek-syylikarbodi-imidistä (151 mg) saatiin kromatografoinnin 10 jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G 380 mg N^-[3(S)-[ [N-[S-ibentsyylioksiformamidcO^-naftoyy-li] -L-asparaginyyli] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N*-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanolista), MS: m/e 651 [M+H]+.
15 Esimerkki 68 1-13 ( S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2(R tai S)-karboksami-din (diastereomeeri A) (216 mg), N-(bentsyylioksikarbonyy-li)-L-asparagiinin (151 mg), hydroksibentsotriatsolin 20 (76 mg), N-etyylimorfoliinin (65 mg) ja disykloheksyyli- karbodi-imidin (128 mg) liuosta tetrahydrofuraanissa (10 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa 16 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (92:8). 25 Saatiin 70 mg 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-as-paraginyyli] amino] -2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2(R tai S)-karboksamidia (diastereomeeri A) vaaleankermanvärisenä kiinteänä aineena; MS: m/e 630 [M+H]+.
30 Lähtöaineena käytetty l-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi- 4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2 (R tai S)-karboksamidi valmistettiin seuraavasti: (i) N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2(R tai S)-karboksamidin (891 mg) ja 3(S)-(bentsyylioksiform-35 amido)-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaanin (654 mg) liuosta dimetyyliformamido)-!,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaanin 69 9 5 6 9 3 (654 mg) liuosta dimetyyliformamidissa (5 ml) kuumennettiin 140 °C:ssa 40 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dietyylieetterin ja n-heksaanin seosta (2:1). Saatiin 5 300 mg l-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4- fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2 (R tai S)-karboksamidia (diastereomeeri A) vaaleankeltaisena öljynä; MS: m/e 516 [M+H]+, ja 290 mg l-[3(S)-(bentsyyli-oksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-bu-10 tyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2(R tai S)-karboksamidia (diastereomeeri b) vaaleankeltaisena öljynä; MS: m/e 516 [M+H]+.
(ii) l-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-15 2(R tai S)-karboksamidin (diastereomeeri A) (300 mg) liuosta etanolissa (20 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-kata-lysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 216 mg l-[3(S)-amino-2(R)-20 hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2(R tai S)-karboksamidia ruskehtavana öljynä.
Esimerkki 69
Esimerkissä 68 kuvatulla tavalla 1-[3—(S)-amino-2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]N-tert-butyyli-2,3-dihydro-25 lH-indoli-2(R tai S)-karboksamidista (diastereomeeri B) (223 mg), N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinista (151 mg), hydroksibentsotriatsolista (76 mg), N-etyylimor-foliinista (65 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (128 mg) saatiin 210 mg 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbo-30 myyli )-L-asparaginyyli]amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-NB-tert-butyyli-2,3-dihydro-lH-indoli-2(R tai S)-karboksamidia (diastereomeeri B) vaaleankermanvärisenä kiinteänä aineena; MS: m/e 630 [M+H]+.
Esimerkki 70 35 N^-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kinolyyli- karbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-N1-tert-butyy- 70 95693 li-L-prolinamidin (0,422 g) ja 3-klooriperbentsoehapon (142 mg) liuosta dikloorimetaanissa (10 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa tunnin ajan. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen 5 eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1), jolloin 1 2 saatiin 289 mg N -tert-butyyli-N -[2(R)-hydroksi-4-fenyy- li-3( S )- [ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli]ami- 2 no]butyyli]-L-prolinamidi-N -oksidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 619 [M+H]+.
10 Esimerkki 71 N^-tert-butyyli-N^-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)- [ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli] amino]butyy- 2 li]-L-prolinamidi-N -oksidin (0,123 mg) ja 3-klooriperbentsoehapon (35 mg) liuosta dikloorimetaanissa (5 ml) 15 sekoitettiin 25 °C:ssa 24 tuntia. Lisättiin vielä 70 mg 3-klooriperbentsoehappoa ja seosta sekoitettiin 20 °C:ssa 48 tuntia. Liuos pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella ja liuotin haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyt-20 täen eluointiin systeemiä J, jolloin saatiin 70 mg N-tert-butyyli-N^-[2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(l-oksido-2-kino- lyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] -4-fenyylibutyyli] - 2 L-prolinamidi-N -oksidia lähes valkoisena kiinteänä aineena (kiteytys etyyliasetaatista); MS: m/e 635 [M+H]+.
25 Esimerkki 72 3 - [ 3( S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-4( R )-tiatsolidiini-karboksamidi-dihydrobromi-din (98 mg) liuosta vedettömässä dimetyyliformamidissa (0,5 ml) sekoitettiin jäähdytettynä jääsuolahauteessa-30 10 °C:seen, kun siihen lisättiin 44 mg N-etyylimorfoliinia ja sitten 76 mg N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiini-sukkinimidiesteriä. Seos sai lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin sitten yön yli. dimetyyliformamidi poistettiin haihduttamalla alennetussa paineessa ja jään-35 nös liuotettiin kloroformiin. Liuos pestiin vedellä, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Jäännöksenä 71 95693 saatu kumi puhdistettiin flash-kromatografialla silikagee-lillä käyttäen eluointiin 4 % metanolia sisältävää dikloo-rimetaania. Saatiin 66 mg 3-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikar-bonyyli )-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-5 tyyli]-N-tert-butyyli-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidia värittömänä vaahtona. Analyyttisen puhdas tuote saatiin kiteyttämällä etyyliasetaatista; MS: m/e 600 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 3-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi- 4- f enyylibutyyli ] -N-tert-butyyli-4 (R) -tiatsolidiinikarbok-10 samidi-dihydrobromidi valmistettiin seuraavasti: (i) N-bentsyylioksikarbonyyli-4(R)-tiatsolidiini-karboksyylihapon (2,67 g) liuosta vedettömässä tetrahydro-furaanissa (42 ml) sekoitettiin samalla jäähdyttäen jää/-suolahauteessa -15 °C:isena, kun siihen lisättiin 1,15 g 15 N-etyylimorfoliinia ja 2 minuutin kuluttua 1,87 g isobu-tyyliklooriformiaattia. Edelleen 3 minuutin kuluttua seokseen lisättiin tipottain 0,73 g tert-butyyliamiinia, sitten seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin yön yli. Tetrahydrofuraani poistettiin haih-20 duttamalla alennetussa paineessa ja jäännös liuotettiin dikloorimetaanin. Liuos pestiin peräkkäin vedellä, 10-%:isella sitruunahappoliuoksella, vedellä, kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella ja vedellä, kuivattiin sitten vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haih-25 dutettiin, jolloin saatiin 2,85 g 3-(bentsyylioksikarbo-nyyli)-N-tert-butyyli-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidia kiinteänä aineena, sp. 96 - 98 °C (kiteytys eetterin ja n-heksaanin seoksesta).
(ii ) 3-(bentsyylioksikarbonyyli)-N-tert-butyyli- 30 4(R)-tiatsolidiinikarboksamidin (3,2 g) ja 32-%:isen (p/p) bromivedyn jääetikkaliuoksen (10 ml) seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia. Saatu liuos kaadettiin di-etyylieetteriin ja saostunut tuotteen hydrobromidisuola suodatettiin, pestiin dietyylieetterillä ja liuotettiin 35 sitten veteen. Liuos tehtiin emäksiseksi lisäämällä 1-m NaOH-liuosta ja uutettiin 2 kertaa dikloorimetaanilla.
72 95693
Yhdistetyt dikloorimetaaniuutteet pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,57 g N-tert-butyyli-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidia kiteisenä kiinteänä aineena, 5 sp. 68 - 71 °C.
(ii) N-tert-butyyli-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidin (3,2 g) ja 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaanin (5,0 g) liuosta isopropanolissa (130 ml) sekoitettiin argonkehässä kuumentaen palautusjäähdyttäen 10 90 °C:ssa 3 vrk. Liuos haihdutettiin alennetussa paineessa ja jäännös puhdistettiin flash-kromatografiällä silikagee-lillä käyttäen eluointiin dietyylietyyli-n-heksaaniseosta (2:1). Saatiin 3,47 g 3-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-4(R)-tiat-15 solidiinikarboksamidia. Kiteyttämällä etyyliasetaatista saatiin analyyttisen puhdas tuote, sp. 62 - 65 °C.
(iv) 3-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-4(R)-tiatsolidiinikar-boksamidin (2 g) ja 32-%:isen (p/p) HBr-jääetikkaliuoksen 20 (4,1 ml) seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Saatu liuos laimennettiin vedettömällä dietyylieet-terillä, saostunut tuote suodatettiin nopeasti ja pestiin tuoreella erällä dietyylieetteriä. Saatiin 2,01 g 3-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-f enyylibutyyli] -N-tert-butyyli-4(R)-25 tiatsolidiinikarboksamidi-dihydrobromidia valkeana kiin teänä aineena; 1H NMR (300 MHz): δ (D20) 1,37 (9H, s), 3,0 (2H, m), 3,09 (2H, dq), 3,29 (2H, d), 3,85 (2H, m), 4,16 (1H, m), 4,3 (2H, 1) ja 7,42 (5H, m) ppm.
Esimerkki 73 30 Esimerkissä 21 kuvatulla tavalla 3-[3(S)-[(L-aspa- raginyyli ) amino] - 2( R )-hydroksi-4-f enyylibutyyli] -N-tert-butyyli-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidista (110 mg), 2-naf-toyylikloridista (46 mg) ja di-isopropyylietyyliamiinista (31 mg) saatiin flash-kromatografoinnin jälkeen silikagee-35 Iillä käyttäen eluointiin 2 % metanolia sisältävää dikloo-rimetaania 834 mg N-tert-butyyli-3-[2(R)-hydroksi-3(S)- · · · ΛΙ*Ι I l I St 73 95693 t [N- ( 2-naftoyyli )-L-asparaginyyli] amino] -4-fenyylibutyy-li]-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidia; MS: m/e 620 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 3-[3(S)-[(L-asparaginyyli)-amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-5 4(R)-tiatsolidiinikarboksamidi valmistettiin seuraavasti: 3-[3 (S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] - 2(R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyy-li-4(R)-tiatsolidiinikarboksamidin (170 mg) ja 32-%:isen (p/p) HBr-jääetikkaliuoksen (0,3 ml) seosta sekoitettiin 10 huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Liuos laimennettiin di-etyylieetterillä ja saostunut kiinteä aine suodatettiin nopeasti, pestiin dietyylieetterillä ja liuotettiin veteen. Liuos tehtiin alkaliseksi lisäämällä kaliumkarbonaattia ja uutettiin 3 annoksella kloroformia. Yhdistetyt 15 kloroformiuutteet kuivattiin vedettömällä natriumsulfaa-tilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 110 mg 3-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli ] -N-tert-butyyli-4( R)-tiatsolidiinikarbok-samidia; MS: m/e 466 [M+H]+.
20 Esimerkki 74 2 N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli] amino] -4- (4-tert-butoksifenyyli )-2( R)-hydroksibutyy-li]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidin (330 mg) liuosta etanolissa (30 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin 25 (50 mg) läsnäollessa 3 tuntia. Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin. Jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin, liuosta käsiteltiin di-isopropyyliamii- nilla (72 mg) ja 2-naftoyylikloridilla (106 mg) esimerkis- 2 sä 21 kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 165 mg N -[4-(4-30 tert-butoksifenyyli )-2(R)-hydroksi-3(S)-[ [N-( 2-naftoyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli] -N1-tert-butyyli-L-prolin-amidia lähes valkeana kiinteänä aineena.
Esimerkki 75 N^-[4-(4-tert-butoksifenyyli )-2(R)-hydroksi-3(S)-35 [[N-(2-naftoyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-N1-tert- butyyli-L-prolinamidin (90 mg) liuosta 3,5-m HC1-etyyli- 74 95693 asetaattiliuoksessa (40 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja jäännöstä hierrettiin dietyylieetterissä, jolloin saatiin 80 mg N^-[2(R)-hydroksi-4-(4-hydroksifenyyli)-3(S)-[[N-(2-5 naftoyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-N*-tert-butyyli-L-prolinamidi-hydrokloridia valkeana kiinteänä aineena, sp. 171 - 174 °C.
Esimerkki 76 2- [ 3( S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-10 tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l-kar-boksamidin (isomeeri A) (59 mg) ja N-(bentsyylioksikarbo-nyyli)-L-asparagiini-sukkinimidiesterin (71 mg) liuosta vedettömässä tetrahydrofuraanissa (3 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 tuntia, sitten seos haihdutettiin. 15 Jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin ja liuos pestiin 2 kertaa vedellä ja 2 kertaa kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin 103 mg raakatuotetta. 32 mg tästä tuotteesta puhdistettiin käänteisfaasi-suurpainenes-20 tekromatografialla käyttäen eluointiin 0,05-m ammoniumfor-miaatti-asetonitriiliseosta (55:45). Saatiin 9,9 mg 2-[ 3 ( S ) — [ [ N— (bent syy lioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli] amino] -2 ( R ) -hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli- l,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l(R tai S)-karboks-25 amidia (isomeeri A) värittömän öljynä; MS: m/e 683 [M+H]+.
2-[3( S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi-nyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-1, 2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l-karboksamidi 30 (isomeeri B) valmistettiin 2-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli-N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido-[3,4-b]indoli-l(R tai S)-karboksamidista (isomeeri B) samalla tavalla kuin edellä isomeeri A ja se puhdistettiin samalla tavalla; saatiin väritön Öljy; MS: m/e 683 [M+H]+. 35 Lähtöaineina käytetyt 2-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi- ™ 95693 4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido-[3,4-b]indoli-l-karboksamidit valmistettiin seuraavasti: (i) 1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l-karbok-syylihapon (3,0 g) jäillä jäähdytettyyn liuokseen 2-m nat-5 riumhydroksiliuoksen (7 ml), veden (17 ml) ja dioksaanin (17 ml) seoksessa lisättiin vuorotellen annoksittain 12,5 ml 2-m natriumhydroksidiliuosta ja 3,6 ml bentsyyli-klooriformiaatin (3,6 ml) liuosta 9 ml:ssa dioksaania. Lisäysten päätyttyä seosta sekoitettiin huoneen lämpöti-10 lassa yön yli, sitten dioksaani haihdutettiin alennetussa paineessa. Saatu liuos laimennettiin vedellä, pestiin 2 kertaa dietyylieetterillä, tehtiin happameksi 1-m rikkihapolla (25 ml) ja uutettiin 3 kertaa etyyliasetaatilla. Orgaanisen uutteet yhdistettiin, pestiin 2 kertaa vedellä, 15 kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 4,54 g 2-bentsyylioksikarbonyyli- 1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]-indoli-1-karboksyylihap-poa; MS: m/e 351 [M+H)+, jota käytettiin ilman puhdistamista.
20 (ii) 2-bentsyylioksikarbonyyli-l, 2,3,4-tetrahydro- pyrido[3,4-b]indoli-1-karboksyylihapon (4,54 g) liuos vedettömässä tetrahydrofuraanissa jäähdytettiin jää/asetoni-hauteessa ja suojattiin kuivausputkella. Liuokseen lisättiin 1,82 ml N-etyylimorfoliinia ja 1,82 ml isobutyylik-25 looriformiaattia, seosta sekoitettiin 10 minuuttia ja sitten lisättiin 2,1 ml tert-butyyliamiinia. Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 40 minuuttia ja huoneen lämpötilassa 45 minuuttia, sitten laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin 2 kertaa vedellä, 2 kertaa 0,5-m natriumhydroksidiliuok-30 sella ja jälleen vedellä. Liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kiteyttämällä etyyliasetaatista ja n-heksaanista saatiin 1,21 g tert-butyyli-2-bentsyylioksikarbonyyli-l, 2,3,4-tetrahydro[3,4-b] indoli-1-karboksamidia; MS: m/e 406 [M+H]+. Toinen erä samaa ma-35 teriaalia saatiin kromatografioimalla emäliuokset silika- 76 9 5 6 9 3 geelillä käyttäen eluointiin etyyliasetaatti-n-heksaani-seosta (1:1).
(iii) 1,62 g tert-butyyli-2-bentsyylioksikarbonyy-li-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-1-karboksamidia 5 liuotettiin 10 ml:aan 45-%:ista HBr-etikkahappoliuosta. 30 minuutin kuluttua liuos haihdutettiin ja jäännökseen lisättiin vettä. Seos suodatettiin, suodos pestiin 3 kertaa dietyylieetterillä ja neutraloitiin sitten lisäämällä kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesiliuosta. Tuote 10 uutettiin sameaksi muuttuneesta vesiliuoksesta etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 0,84 g tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-1-karboksamidia valkeana kiteisenä aineena, sp. 15 144 °C.
(iv) Tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]-indoli-l-karboksamidin (0,60 g) ja 3(S)-(bentsyylioksifor-mamido)-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaanin (0,66 g) liuosta metanolissa (20 ml) kuumennettiin argonkehässä palautus- 20 jäähdyttäen 16 tuntia ja haihdutettiin sitten kuiviin, jolloin saatiin kirkas öljy. Molemmat diastereomeerit erotettiin toisistaan flash-kromatografiällä silikageelillä käyttäen eluenttina n-heksaani-etyyliasetaattiseosta (3:1). Saatiin 268 mg 2-[3<(S)-(bentsyylioksiformamido)-25 2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-1,2,3,4- tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l-karboksamidin isomeeriä A; MS: m/e 569 [M+H]+, ja 65 mg saman yhdisteen isomeeriä B; MS: m/e 596 [M+H]+.
(v) 2-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-30 4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido- [3,4-b]indoli-l-karboksamidin (isomeeri A) (150 mg) liuosta etanolissa (5 ml) hydrattiin 3,4 atm paineessa 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa 16 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutet-35 tiin, jolloin saatiin 210 mg 2-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido-
Il IB» 1114 M i SI
77 95693 [3,4-b]indoli-l-karboksamidia (isomeeri A); MS: m/e 435 [M+H]+.
2-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l-kar-5 boksamidi (isomeeri B); MS: m/e 435 [M+H]+, valmistettiin analogisesti 2-(3(S)-(bentsyyliformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido-[3,4-b]indoli-l-karboksamidista (isomeeri B).
Esimerkki 77 10 Esimerkissä 70 kuvatulla tavalla N-tert-butyyli-1- [2(R)-hydroksi-3(S)-[[N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-aspara-ginyyli] amino] -4-fenyylibutyyli]-2(S)-piperidiinikarbok-samidista (154 mg) ja 3-klooriperbentsoehaposta (51 mg) saatiin 114 mg N-tert-butyyli-1-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-15 3(S) — [ [N-(2-kinolyylikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] - butyyli]-2-piperidiinikarboksamidi-l-oksidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 633 [M+H]+.
Esimerkki 78
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla 1-[3(S)-[(L-aspa-20 raginyyli )amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert- butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidista (230 mg), 3-bent-syylioksi-2-naftoehaposta (139 mg), disykloheksyylikarbo-di-imidistä (113 mg), hydroksibentsotriatsolista (68 mg) ja N-etyylimorfoliinista (58 mg) saatiin kromatografoinnin 25 jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G 242 mg 1-[3( S)-[[N-(3-bentsyylioksi-2-naftoyyli)-L-aspara-ginyyli] amino] -2(R)-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidia vaahtona; MS: m/e 722 [M+H]+.
Esimerkki 79 30 1-[3(S)-[[N-(3-bentsyylioksi-2-naftoyyli)-L-aspar- ginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-bu-tyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidin (181 mg) liuosta etanolissa (5 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Kata-35 lysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin. Jäännöstä hierrettiin dietyylieetterissä, jolloin saatiin 78 9 5 6 9 3 110 mg N-tert-butyyli-l-[3(S)-[[N-(3-hydroksi-2-naftoyy-li ) -L-asparaginyyli ] amino] -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyy-li]-2(S)-piperidiinikarboksamidia vaaleankeltaisena kiinteänä aineena; MS: m/e 632 [M+H]+.
5 Esimerkki 80
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla cis-1-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidista (400 mg), N-bentsyy-lioksikarbonyyli)-L-asparagiinista (266 mg), disyklohek-10 syylikarbodi-imidistä (226 mg), hydroksibentsotriatsolista (135 mg) ja N-etyylimorfoliinista (115 mg) saatiin kroma-tografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (94:6) 225 mg cis-l-[3(S)-[ [N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-15 hydroksi-4-fenyylibutyyli]-n-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 650 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty cis-l-[3(S)-amino-2(R)-hyd-roksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai 20 S)-kinoliinikarboksamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaanin (2,376 g) ja cis-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R, S )-kinoliinikarboksamidin (1,904 g) liuosta etanolissa (32 ml) sekoitettiin 80 °C:ssa 24 tuntia. Sitten lisättiin 25 vielä 0,474 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania kahtena annoksena ja sekoittamista jatkettiin 80 °C:ssa vielä 5 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (97,5:2,5), jol-30 loin saatiin 1,17 g cis-l-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidia (isomeeri A) valkeana kiinteänä aineena (kiteytys dietyylieetteri-n-heksaani-seoksesta); MS: m/e 536 [M+H]+ ja 1,146 g cis-l-[3(S)- 35 (bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]- 79 9 5 6 9 3 N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidia (isomeeri B) vaaleankeltaisena kumina; MS: m/e 536 [M+H]+.
(ii) Cis-1-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hyd-roksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai 5 S)-kinoliinikarboksamidin (isomeeri B) liuosta etanolissa (25 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 400 mg cis-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-10 tyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikar- boksamidia värittömänä kumina.
Esimerkki 81
Trans-2- [3(S )-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyy-li]-N-tert-butyyli-dekahydro-(4aR,8aS)-isokinoliini-3(S)-15 karboksamidin (561 mg) ja N-bentsyylioksikarbonyyli)-L- asparagiinin (372 mg) liuos vedettömässä tetrahydrofuraanissa jäähdytettiin jää/suolahauteessa. Liuokseen lisättiin 189 mg hydroksibentsotriatsolia, 161 mg N-etyylimor-foliinia ja 317 mg disykloheksyylikarbodi-imidiä ja seosta 20 sekoitettiin 16 tuntia. Sitten seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja suodatettiin. Suodos pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin sili-kageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoli-25 seosta (9:1), jolloin saatiin 434 mg trans-2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] -2(R) -hyd-roksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-(4aR,8aS)-isokinoliini-3(S)-karboksamidia valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanolidietyylieetteriseoksesta); 30 MS: m/e 650 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty trans-2-[3(S)-amino-2(R)-hyd-roksi-4-fenyy1ibutyy1i]-N-tert-butyyli-dekahydro-( 4aR, 8aS)-isokinoliini-3(S)-karboksiamidi valmistettiin seuraavasti: 35 (i) Trans-N-tert-butyyli-dekahydro-( 4aR, 8aS )-isoki- noliini-3(S)-karboksamidin (440 mg) ja 3(S)-(bentsyyliok- so 95693 siformamido)-1,2( S )-epoksi-4-fenyylibutaanin (594 mg) liuosta etanolissa (6 ml) sekoitettiin 60 °C:ssa 7 tuntia. Lisättiin vielä 54 mg 3(S)-(bentsyylioksiformamido)- 1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania ja sekoittamista jatket-5 tiin 20 °C:ssa 16 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä H, jolloin saatiin 771 mg trans-2-[3(S)-(bentsyyli-oksif ormamido) -2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli-N-tert-bu-tyyli-dekahydro-(4aR,8aS)-isokinoliini-3(S)-karboksamidia 10 valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 536 [M+H]+.
(ii) Trans-2-[3(S)-(bentsylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli-N-tert-butyyli-dekahydro-( 4aR, 8aS)-isokinoliini-3(S)-karboksamidin (747 mg) liuosta etanolissa (40 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin 15 läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 5 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 561 mg trans-2-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-(4aR,8aS)-isoki-noliini-3(S)-karboksamidia nahanruskeana kiinteänä ainee-20 na.
Esimerkki 82
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla l-[3(S)-[(L-aspa-raginyyli )amino] - 2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidista (276 mg), 1-bent-25 syylioksi-2-naftoehaposta (167 mg), hydroksibentsotriat-solista (81 mg), N-etyylimorfoliinista (69 mg) ja disyk-loheksyylikarbodi-imidistä (136 mg) saatiin kromatogra-foinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloo-rimetaani-metanoliseosta (9:1) 97 mg l-[3(S)-[[N-(1-bent-30 syylioksi-2-naftoyyli )-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikar-boksamidia valkeana kiinteänä aineena (kiteytys metanoli-dietyylieetteriseoksesta); MS: m/e 722 [M+H]+.
Esimerkki 83 35 Esimerkissä 79 kuvatulla tavalla 1-[3(S)-[[N-(1- bentsyylioksi-2-naftoyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)- '1* iM i *i*. mnl si 95693 hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidii-nikarboksamidista (119 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen aktivoidulla magnesiumsilikaatilla käyttäen eluoin-tiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1) 67 mg N-tert- 5 butyyli-1-[2(H)-hydroksi-3(S )-[[N-(l-hydroksi-2-naftoyy- li)-L-asparaginyyli]amino-4-fenyylibutyyli]-2(S)-piperi-diinikarboksamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 631 [M+H]+.
Esimerkki 84 10 Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla 1-[3(S )-[(L-aspa raginyyli )amino]-2(R)-hv aroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidista (276 mg), 3-(bent-syylioksikarbonyyli)-2-naftoehaposta (183 mg), hydroksi-bentsotriatsolista (81 mg), N-etyylimorfoliinista (138 mg) 15 ja disykloheksyylikarbodi-imidistä (136 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä J 98 mg N-tert-butyyli-l-[3(S)-[l(S)-(2,3-dihyd-ro-1,3-diokso-lH-bents [ f ] isoindol-2-yyli )-3-karbamoyyli-propionamido] - 2( R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli] -2 (S) -piperi-20 diinikarboksamidia; MS: m/e 642 [M+H]+.
Esimerkki 85 2 1 N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N - tert-butyyli-L-prolinamidin (650 mg) ja N-(bentsyylioksi- karbonyyli)-S-metyyli-L-kysteiinin (538 mg) liuos vedet- 25 tömässä tetrahydrofuraanissa (20 ml) jäähdytettiin jää/- suolahauteessa. Liuokseen lisättiin 270 mg hydroksibentso- triatsolia, 230 mg N-etyylimorfoliinia ja 412 mg disyklo- heksyylikarbodi-imidiä ja seosta sekoitettiin 16 tuntia.
Seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja suodatettiin. Suo- 30 dos pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja nat- riumkloridin vesiliuoksella. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluoin- 2 tiin systeemiä G, jolloin saatiin 800 mg N -[3(S)-[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-S-metyyli-L-kysteinyyli]amino]-35 2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolin- amidia; MS: m/e 585 [M+H]+.
82 95693 2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidi valmistettiin samalla tavalla kuin esimerkin 33 lähtöaine käyttäen kuitenkin vaiheessa (iii) N^-tert-butyyli-L-prolinamidia 5 N'^-fenyyli-L-prolinamidin sijasta.
Esimerkki 86 N^-[3(S)-[[N- (bentsyylioksikarbonyyli)-S-metyyli-L-kysteinyyli]amino] -2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidin (193 mg) liuos metanolissa 10 (2 ml) jäähdytettiin -70 eC:seen. Liuokseen lisättiin 62 mg 3-klooriperbentsoehappoa 5 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin -70 eC:ssa 30 minuuttia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyt- 2 täen eluointiin systeemiä G, jolloin saatiin 62 mg N -15 [3(S)-([N-(bentsyylioksikarbonyyli )-3-(metyylisulfinyyli)- L-alanyyli] amino] - 2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidia diastereomeerien 1:1 -seoksena; MS: m/e 601 [M+H]+.
Esimerkki 87 20 N^-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-S-metyyli- L-kysteinyyli] amino] -2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N1-tert-butyyli-L-prolinamidin (450 mg) liuos metanolissa (4 ml) jäähdytettiin -70 °C:seen ja liuokseen lisättiin annoksittain 10 minuutin aikana 166 mg 3-klooriperbentsoe-25 happoa, sitten seosta sekoitettiin -70 °C:ssa 15 minuuttia ja sen annettiin sitten lämmetä 20 °C:seen. Liuos jäähdytettiin jälleen -70 °C:seen ja siihen lisättiin vielä 33 mg 3-klooriperbentsoehappoa ja seosta sekoitettiin 70 °C:ssa 30 minuuttia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös 30 jaettiin dikloorimetaaniin ja 2-m natriumhydroksidiliuok-seen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin systeemiä G, jolloin saatiin 100 mg N^-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-(metyylisulfinyyli)-L-alanyy- 35 li]amino]-2(R) -hy d roksi-4-f enyy 1 i bu tyy 1 i ] -N^ -1 er t -bu tyy 1 i - 2 L-prolinamidi-N -oksidia (diastereomeeri A); MS: m/e 617 83 95693 [M+H]+, ja 154 mg N2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)- 3- (metyylisulf inyyli )-L-alanyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4- 1 2 fenyylibutyyli]-N -tert-butyyli-L-prolinamidi-N -oksidia (diastereomeeri B); MS: m/e 617 [M+H]+.
5 Esimerkki 88 N2-[3(S)-[[N—(bentsyylioksikarbonyyli)-3-(metyyli- sulfinyyli )-L-alanyyli]amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibu- 1 2 tyyli]-N -tert-butyyli-L-prolinamidi-N -oksidin (2 diaste- reomeeria) (154 mg) liuosta metanolissa (5 ml) käsiteltiin 10 3-klooriperbentsoehapolla (84 mg) ja liuosta sekoitettiin 20 °C:ssa 16 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja 2-m natriumhydroksiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi haihdutettiin ja jäännös kiteytettiin etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta, 2 15 jolloin saatiin 28 mg N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyy- li )-3- (metyylisulfonyyli )-L-alanyyli]amino] -2(R)-hydroksi- 1 2 4- fenyylibutyyli]-N -tert-butyyli-L-prolinamidi-N -oksidi- monohydraattia; MS: m/e 633 [M+H]+.
Esimerkki 89 20 Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla cis-l-[3(S)-amino- 2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidista (400 mg), N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparagiinista (266 mg), disyklohek-syylikarbodi-imidistä (226 mg), hydroksibentsotriatsolista 25 (135 mg) ja N-etyylimorfoliinista (115 mg) saatiin kroma- tografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (94:6) 225 mg cis-l-[3(S)-[ [N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R 30 tai S)-kinoliinikarboksiamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 650 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty cis-1-[3(S)-amino-2(R)-hyd-roksi-4-fenyy1ibutyy1i]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidi valmistettiin seuraavasti: 35 (i) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4- fenyylibutaanin (2,376 g) ja cis-N-tert-butyyli-dekahydro- „ 95693 2(R,S)-kinoliinikarboksamidin (1,904 g) liuosta etanolissa (32 ml) sekoitettiin 80 °C:ssa 24 tuntia. Sitten lisättiin vielä kahtena annoksena 0,474 g 3(S)-(bentsyylioksiform-amido)-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania ja seosta sekoitet-5 tiin 80 °C:ssa vielä 5 minuuttia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (97,5:2,5), jolloin saatiin 1,17 g cis-l-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)~ 2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-dekahydro-2(R tai S)-kino-10 liinikarboksamidia (isomeeri A) valkeana kiinteänä aineena (kiteytys dietyylieetteri-n-heksaaniseoksesta); MS: m/e 536 [M+H]+, ja 1,146 g cis-l-[3(S)-(bentsyylioksiformami-do )-2( R )-hydroksi-4-fenyylibutyyli) -N-tert-butyyli-deka-hydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidia (isomeeri B) vaa-15 leankeltaisena kumina; MS: m/e 536 [M+H]+.
(ii) cis-1-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hyd-roksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kinoliinikarboksamidin (isomeeri B) (0,535 g) liuosta etanolissa (25 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaat-20 torin läsnäollessa 20 °C:ssa normaalipaineessa 16 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 400 mg cis-l-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-dekahydro-2(R tai S)-kino-liinikarboksamidia värittömänä kumina.
25 Esimerkki 90
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla N-[3(S)-[(L-aspa-raginyyli) amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -L-prolii-ni-tert-butyyliesteristä (27 mg) ja 2-indolikarboksyyli-haposta (11,3 mg) saatiin 15 mg N-[3(S)-[[N-(2-indolyyli-30 karbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyy-libutyyli]-L-proliini-tert-butyyliesteriä; MS: m/e 592 [M+H]+.
Esimerkki 91
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla 3-[3(S)-amino-35 2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-tetrahydro- 2H-1,3-tiatsiini-4(R ja S)-karboksamidista (240 mg) ja N- 85 95693 (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinisukkinimidieste-ristä (234 mg) saatiin 162 mg 3-[3-(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fe-nyylibutyyli]-N-tert-butyyli-tetrahydro-2H-l,3-tiatsiini-5 4(R ja S)-karboksamidia kahden diastereomeerin seoksena.
Flash-kromatografoimalla silikageelillä käyttäen eluoin-tiin 3 % metanolia sisältävää dikloorimetaania saatiin 20 mg vähemmän poolista diastereomeeria (isomeeri A); MS: m/e 614 [M+H]+, ja käyttäen eluointiin 5 % metanolia si-10 sältävää dikloorimetaania saatiin 32 mg poolisempaa diastereomeeria (isomeeri B); MS: m/e 614 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 3-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-tetrahydro-2H-l, 3-tiat-siini-4(R ja S)-karboksamidi valmistettiin tunnetusta tet-15 rahydro-2H-l,3-tiatsiini-4(R ja S)-karboksyylihaposta N-bentsyylioksikarbonyloimalla tunnetulla tavalla ja sitten suorittamalla esimerkin 72 (i) - (iv) mukaiset reaktiot ja tekemällä saatu dihydrobromidi emäksiseksi natriumbi-karbonaattiliuoksella.
20 Esimerkki 92 0,122 g N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-syaani-L-ala- niinia liuotettiin 2 ml: aan vedetöntä dimetyyliformamidia.
Liuosta sekoitettiin ja jäähdytettiin jää/suolahauteessa ja siihen lisättiin 0,066 g hydroksibentsotriatsolia ja 25 0,1 g disykloheksyylikarbodi-imidiä. Seosta sekoitettiin 2 5 minuuttia, sitten lisättiin 0,163 g N ~[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia 2,5 ml:ssa vedetöntä dikloorimetaania. Seos sai lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin yön yli. Muodos-30 tunut disykloheksyyliurea suodatettiin ja pestiin metylee-nikloridilla. Yhdistetyt suodos ja pesuneste haihdutettiin 40 °C:ssa vakuumissa ja jäännöksenä saatu öljy jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin peräkkäin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin 35 vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin sitten natriumsulfaatilla. Liuotin S6 95693 haihdutettiin ja saatu öljy kromatografoitiin silikagee-lillä käyttäen eluointiin 14 % metanolia sisältävää dik-loorimetaania. Saatiin 50 mg tuotetta, joka kiteytettiin dietyylieetteri-n-heksaaniseoksesta, jolloin saatiin 2 5 0,045 g N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-syaani- L-alanyyli] amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-prolinamidihemihydraattia kiinteänä aineena, sp. 65 - 70 °C (pehmeni).
2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-10 4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaaniin (0,425 g) ja L-proliini-tert-butyyliami-din (0,244 g) liuosta vedettömässä isopropanolissa (10 ml) 15 kuumennettiin 80 °C:ssa 20 tuntia. Liuotin haihdutettiin vakuumissa ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin 5 % metanolia sisältävää dikloorime- 2 taama. Saatiin 0,44 g N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolin- 20 amidia valkeana vaahtona.
2 (ii) N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydrok-si-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidin (0,46 g) liuosta etanolissa (40 ml) hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (40 mg) läsnäollessa huoneen lämpöti- 25 lassa normaalipaineessa 1,5 tuntia, jolloin saatiin 0,33 g N^-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia kumina, joka seisotettaessa kiteytyi.
Esimerkki 93 30 0,167 g N^-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibu- tyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia liuotettiin 10 ml:aan vedetöntä dimetyyliformamidia, liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa ja siihen lisättiin 0,191 g kiinteätä N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyyliglysiinisukkinimidies-35 teriä. Saatua liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa tunnin ajan, sitten liuoksen annettiin seistä 4 °C:ssa yön yli. Liuos
; ' la.i lilli i > i SI
87 95693 haihdutettiin vakuumissa ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja sitten kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. 5 Vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin, saatu kumikromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin asetoni-dikloorimetaaniseosta (1:1). Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin, jään-10 nöksenä saatu kumi haihdutettiin dietyylieetteristä, jolloin saatiin 0,127 g kiinteätä ainetta. Se uutettiin dik-loorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet haihdutettiin ja saatua kiinteätä jäännöstä hierrettiin dietyyli- 2 eetterissä. Näin saatiin 0,05 g N -[3(S)-[[N-(bentsyyliok-15 sikarbonyyli)-L-fenyyliglysyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4- fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia kiinteänä aineena, sp. 101 - 103 °C.
Esimerkki 94
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsyylioksi- 20 karbonyyli)-L-fenyylialaniinista (0,15 g), hydroksibentso- triatsolista (0,066 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä 2 (0,1 g) ja N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]- N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (0,166 g) saatiin 0,1 g 2 N -[3(S)-[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyylialanyyli]-25 amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 78 - 80 °C. Esimerkki 95
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsyylioksi- karbonyyli)-3-sykloheksyyli-L-alaniinista (0,152 g), hyd- 30 roksibentsotriatsolista (0,066 g), disykloheksyylikarbodi- 2 imidistä (0,1 g) ja N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyy- libutyylij-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (0,166 g) saa- ' 2 tiin 0,1 g N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-syk- loheksyyli -L-alanyyli ] amino] -2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyy- 35 li]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia, sp. 71 - 75 °C.
ss 95693
Esimerkki 96
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsoyylikar-bonyyli)-L-asparagiinista (0,1 g), hydroksibentsotriatso-lista (0,05 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä (0,078 g) 5 ja l-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R ja S)-piperatsiini-karboksamidista (0,17 g) saatiin 0,11 g valkeata kiinteätä ainetta (hierrettiin dietyylieetterissä). Se puhdistettiin flash-kromatografialla silikageelillä käyttäen eluointiin 10 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania. Ensin eluoitui (isomeeri A) 0,043 g 1-[3(S)-[[N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R tai S)-piperi-diinikarboksamidia; MS: m/e 697 [M+H]+. Sitten eluoitui 15 (isomeeri B) oli 0,007 g 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbo-nyyli )-L-asparaginyyli] amino] - 2( R)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R tai S)-piperatsiinikarboksamidia; MS: m/e 697 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 1-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-20 4-fenyylibutyyli ] -4- (tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyy- li-2(R ja S)-piperatsiinikarboksamidi valmistettiin seuraavasti : (i) 0,65 g 2-piperatsiinikarboksyylihappoa liuotettiin veden 85 ml) ja dioksaanin (5 ml) seokseen, liuokseen 25 lisättiin 0,42 g natriumbikarbonaattia. 5 minuutin sekoittamisen jälkeen lisättiin 1,09 g di(tert-butyyli)dikarbo-naattia ja seosta sekoitettiin yön yli. Seos haihdutettiin ja jäännös uutettiin perusteellisesti etyyliasetaatilla. Menettely toistettiin pH-arvossa 6 ja pH-arvossa 4. Vesi-30 kerros (pH 4) uutettiin sitten n-butanolilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin vedettömällä natriumsulfaa-tilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 0,34 g 4-(tert-butoksikarbonyyli )-2-piperatsiinikarboksyylihappoa kerman-värisenä kiinteänä aineena, sp. 2263- 229 °C.
35 (ii) 0,1 g 4-(tert-butoksikarbonyyli)piperatsiini- 2-karboksyylihappoa liuotettiin 0 °C:seen jäähdytettyyn 89 95693 1-m natriumhydroksidiliuokseen (10 ml) ja liuokseen lisättiin 0,2 g bentsyyliklooriformiaattia. Seos sai lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin yön yli. Seos uutettiin dietyylieetterillä. Vesifaasi tehtiin sitten 5 happameksi pH-arvoon 4 2-m kloorivetyhapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 0,06 g 1-(bentsyyliok-sikarbonyyli )-4-( tert-butoksikarbonyyli)-2-piperatsiinkar-boksyylihappoa valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 365 [M+H]+.
10 (ii) 0,285 g 1-(bentsyylioksikarbonyyli)-4-(tert- butoksikarbonyyli )-2-piperatsiinikarboksyylihappoa liuotettiin 10 ml:aan vedetöntä tetrahydrofuraania ja liuos jäähdytettiin -15 °C:seen samalla sekoittaen. Sitten lisättiin 0,09 g N-etyylimorfoliinia ja välittömästi sen 15 jälkeen 0,107 g isobutyyliklooriformiaattia. Seosta sekoitettiin 5 minuuttia, sitten lisättiin tipottain 0,2 g tert-butyyliamiinia. Sekoittamista jatkettiin yön yli, jona aikana seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. Liuotin haihdutettiin ja saatu nahanruskea öljy jaettiin 20 etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin peräkkäin 10-%:isella sitruunahappoliuoksel-la, natriumbikarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä nat-riumkloridiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 25 0,185 g l-(bentsyylioksikarbonyyli)-4-(tert-butoksikarbo nyyli )-N-tert-butyyli-2-piperatsiinikarboksamidia vaaleanruskeana öljynä; MS: m/e 420 [M+H]+.
(iv) 1,1 g l-(bentsyylioksikarbonyyli)-4-(tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-2-piperatsiinikarboksami-30 dia liuotettiin 40 ml:aan etanolia. Liuokseen lisättiin 0,1 g 10-%:ista Pd/C-katalysaattoria ja seosta hydrattiin huoneen lämpötilassa normaalipaineessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois. Suodos haihdutettiin, ja saatu raakatuote (0,74 g) puhdistettiin flash-kromatografiällä 35 silikageelillä käyttäen eluointiin 5 % metanolia sisältävää dikloorimetaania. Liuottimet haihdutettiin, jolloin 90 95693 saatiin 0,44 g 4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2-piperatsiinikarboksamidia öljynä; MS: m/e 286 [M+H]+.
(v) 0,395 g 4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-bu-tyyli-2-piperatsiinikarboksamidia liuotettiin 50 ml:aan 5 vedetöntä isopropanolia ja liuokseen lisättiin 0,413 g 3 (S) - (bentsyylioksif ormamido) -1,2( S) -epoksi-4-fenyylibu-taania. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 72 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja saatu ruskea puolikiinteä aine puhdistettiin flash-kromatografiällä silikageelillä 10 käyttäen eluointiin 5 % metanolia sisältävää dikloorime-taania. Saatiin 0,234 g l-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2 (R) -hydroksi-4- f enyylibutyyli ] -4- (tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-2(R tai S)-piperatsiinikarboksamidia diastereomeerien seoksena.
15 (vi) 0,234 g l-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)- hydroksi-4-fenyylibutyyli] -4- (tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-2(R ja S)-piperatsiinikarboksamidia liuotettiin 20 ml:aan etanolia ja liuokseen lisättiin 100 mg 10-%:ista Pd/C-katalysaattoria. Seosta hydrattiin huoneen 20 lämpötilassa normaalipaineessa 2,5 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 0,17 g 1-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R ja S)-piperat-siinikarboksamidia, jota käytettiin ilman enempää puhdis-25 tamista.
Esimerkki 97 0,035 g 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L- asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2(R tai S)-piper-30 atsiinikarboksamidia (isomeeri A) liuotettiin 5 ml:aan etyyliasetaattia ja liuokseen tiputettiin 5 tippaa kyllästettyä HCl-etyyliasetaattiliuosta. Seos sai seistä huoneen lämpötilassa tunnin ajan, sitten reaktioseosta käsiteltiin tavallisella tavalla ja tuote kiteytettiin etanoli-dietyy-35 lieetteriseoksesta, jolloin saatiin 0,024 g 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli )-L-asparaginyyli]amino] -2( R)-hyd- 9i 95693 roksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2-(R tai S)-piper-atsiinikarboksamidihydrokloridia (isomeeri A), sp. 175-180 °C.
Esimerkki 98 5 l-[3(S)-[[N-( bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi- nyyli] amino] - 2( R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -4-(tert-bu-toksikarbonyyli)-N-tert-butyyli-2 (R tai S)-piperatsiini-karboksamidia (isomeeri B) (0,01 g) käsiteltiin HCl-etyy-liasetaatilla esimerkissä 97 kuvatulla tavalla, jolloin 10 saatiin 0,007 g l-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(R tai S)-piperatsiinikarboksamidihydroklo-ridia erittäin hygroskooppisena kiinteänä aineena; MS: m/e 597 [M+H]+.
15 Esimerkki 99
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsyylioksikarbonyyli )-3-syaani-L-alaniinista (0,091 g), hydroksi-bentsotriatsolista (0,05 g), disykloheksyylikarbodi-imi-distä (0,076 g) ja l-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyyli-20 butyyli] -4-( tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-2(R, S)- piperatsiinikarboksamidista (0,164 g) saatiin 0,075 g 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-syaani-L-alanyyli]-amino] -2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli] -4- (tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-2-piperatsiinikarboksamidin dia-25 stereomeeriseosta (60:40) nahanruskean kiinteänä aineena, sp. 80 - 85 eC.
Esimerkki 100
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla 3-syaani-N-(2-naf-toyyli)-L-alaniinista (0,108 g), hydroksibentsotriatsolis-30 ta (0,054 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä (0,083 g) ja 1-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-2(R,S)-piperatsiinikarboksamidista (0,18 g) saatiin 0,015 g 4-(tert-butoksikarbonyyli )-N-tert-butyyli-1-[3(S ) — [[3-syaani-N-(2-naftoyy-35 li)-L-alanyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]- 92 9 5 6 9 3 2(R,S)-piperatsiinikarboksamidia isomeerien seoksena (1:1:1:1); kiinteä aine, MS: m/e 699 [M+H] + .
Lähtöaineena käytetty 3-syaani-N-(2-naftoyyli)-L-alaniini valmistettiin seuraavasti: 5 3-syaani-L-alaniinin (0,114 g) liuosta 1-m natrium- hydroksidiliuoksessa (5 ml) käsiteltiin 0 °C:ssa 2-nafto-yylikloridilla (0,285 g). Reaktioseos tehtiin happameksi 2-m kloorivetyhapolla, tuote flash-kromatografoitiin sili-kageelillä käyttäen eluointiin 25 % metanolia sisältävää 10 dikloorimetaania, jolloin saatiin 0,049 g 3-syaani-N-(2-naftoyyli)-L-alaniinia, sp. 95 - 100 °C.
Esimerkki 101
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla l-[3(S)-[(L-aspa-raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-(tert-15 butoksikarbonyyli)-4-tert-butyyli-2(R ja S)-piperatsiini-karboksamidista (0,048 g), kinaldiinihaposta (0,015 g), hydroksibentsotriatsolista (0,012 g) ja disykloheksyyli-karbodi-imidistä (0,018 g) saatiin perusteellisen flash-kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluoin-20 tiin 10 % metanolia sisältävää dikloorimetaania 0,004 g puhdasta erillistä isomeeriä A, 4-(tert-butoksikarbonyy-li )-N-tert-butyyli-l- [2( R )-hydroksi-4-fenyyli-3( S) - [ [N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-2(R tai S)-piperatsiinikarboksamidia; MS: m/e 718 [M+H]+, ja 25 0,003 g erillistä isomeeriä B, 4-(tert-butoksikarbonyyli)- N-tert-butyyli-l-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-ki-nolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-2(R tai S)-piperatsiinikarboksamidia; MS: m/e 718 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty l-[3(S)-[(L-asparaginyyli)-30 amino] -2( R )-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -4-( tert-butoksikar-bonyyli )-4-tert-butyyli-2( R ja S )-piperatsiinikarboksamidi valmistettiin seuraavasti: 0,06 g 1-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-as-paraginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4-35 (tert-butoksikarbonyyli ) -N-tert-butyyli-2( R, S) -piperatsii- nikarboksamidia (so. esimerkin 96 tuote ennen isomeerien 95693 93 A ja B erottamista) liuotettiin etanoliin (20 ml). Liuokseen lisättiin 0,03 g Pd/C-katalysaattoria ja seosta hyd-rattiin huoneen lämpötilassa normaalipaineessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, 5 jolloin saatiin 0,048 g 1-[3(S)-[(L-asparaginyyli)amino]-2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli ] -4- (tert-butoksikarbonyy-li)-4-tert-butyyli-2-piperatsiinikarboksamidia, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
Esimerkki 102 10 Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsyylioksi- karbonyyli )-3-syaani-L-alaniinista (0,151 g), hydroksi-bentsotriatsolista (0,082 g), disykloheksyylikarbodi-im-idistä (0,126 g) ja 1-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-2(S)-piperatsiinikarboksamidista 15 (0,212 g) saatiin (kiteytys dietyylieetterin ja n-heksaa- nin seoksesta) 0,085 g l-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbo-nyyli )-3-syaani-L-alanyyli]amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyy-libutyyli] -N-tert-butyyli-2( S)-piperatsiinikarboksamidia valkeana kiinteänä aineena, sp. 74 - 77 °C.
20 Esimerkki 103
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsyylikar-bonyyli)-L-asparagiinihaposta (0,372 g), hydroksibentso-triatsolista (0,189 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä (0,288 g) ja N^-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-(2-naftyyli)-25 butyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (0,54 g) saatiin (kiteytys isopropanolin ja n-heksaanin 1:4 seoksesta) 2 0,105 g N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagi- nyyli ] amino] -2 (R) -hydroksi-4- (2-naf tyyli )butyyli] -N^-tert- butyyli-L-prolinamidia, sp. 149 - 151 eC.
2 30 Lähtöaineena käytetty N - [3( s)-amino-2(R)-hydroksi- 4-(2-naftyyli)butyyli]-N -tert-butyyli-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 3-(2-naftyyli)-L-alaniinin (5 g), natriumhyd-roksidin (0,93 g) ja veden (12 ml) seos jäähdytettiin 35 0 "C^seen ja siihen lisättiin sekoittaen 10 minuutin aika na samanaikaisesti natriumhydroksidin (1,4 g) liuosta ve- 94 95693 dessä (9 ml) ja bentsyyliklooriformiaattia (5 ml). Sekoittamista jatkettiin 2 tuntia, sitten seos sai lämmetä huoneen lämpötilaan. Seos laimennettiin vedellä ja uutettiin dietyylieetterillä. Vesikerros tehtiin happameksi väkeväl-5 lä kloorivetyhapolla (4 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuutteet pestiin vedellä. Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin, haihdutettiin ja jäännöstä hierrettiin petroli-eetterissä (kp. 40 - 60 °C), jolloin saatiin 7,5 g N- 10 (bentsyylioksikarbonyyli)-3-(2-naftyyli)-L-alaniinia, sp. 109 - 111 °C.
(ii) N-(bentsyylioksikarbonyyli)-3-(2-naftyyli)-L-alaniinin (7,5 g) liuosta vedettömässä tetrahydrofuraanissa (20 ml) sekoitettiin -8 °C:ssa samalla lisäten tipot-15 tain 10 minuutin aikana N-etyylimorfoliinia (3,5 ml) ja sitten isobutyyliklooriformiaattia (4 ml). Seosta sekoitettiin -8 °C:ssa vielä 20 minuuttia ja siihen lisättiin kylmää (0 °C) vedetöntä dietyylieetteriä. Saatu valkea sakka suodatettiin pois ja kylmä suodos lisättiin tipot-20 tain ja sekoittaen 100 ml:aan kylmään (-8 eC) diatsometaa-nin dietyylieetteriliuokseen. Jäähdytyshaude poistettiin ja liuosta sekoitettiin 3 tuntia, sitten lisättiin sekoittaen vettä. Orgaaninen faasi pestiin peräkkäin vedellä, natriumbikarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä natrium-25 kloridiliuoksella ja kuivattiin sitten natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin ja saatu keltainen öljy haihdutettiin petrolieetterin (kp. 40 - 60 °C) kanssa, jolloin saatiin 9,4 g kiinteätä ainetta. Sitä hierrettiin dietyyli-eetterissä ja jäähdytettiin sitten 4 °C:ssa yön yli, jol-30 loin saatiin 3,2 g bentsyyli[3-diatso-l(S)-[(2-naftyyli )-metyyli]-2-oksopropyyli]karbamaattia.
( iii ) 3,13 g bentsyyli[3-diatso-l(S)-[(2-naftyyli)~ metyyli]-2-oksopropyyli]karbamaattia liuotettiin 200 ml:aan vedetöntä dietyylieetteriä, liuosta sekoitettiin 35 ja siihen johdettiin HCl-kaasua. Tunnin kuluttua aluksi syntynyt sakka muuttui rakeisemmaksi ja seokseen johdet- ί· . »a.i Ull l:l t «t . . ! 95 95693 tiin ylimäärin kloorivetyä. Sitten liuotin haihdutettiin huoneen lämpötilassa ja saatua valkeata kiinteätä ainetta kuivattiin vakuumissa natriumhydroksidin yllä samalla poistaen kloorivetyä. Saatua bentsyyli- [3-kloori-l( S)- [ (2-5 naftyyli)metyyli]-2-oksopropyyli]karbamaattia käytettiin välittömästi seuraavassa vaiheessa.
(iv) Edellä saatu bentsyyli-[3-kloori-l(S)-[(2-naf-tyyli)metyyli]-2-oksopropyyli]karbamaatti liuotettiin 10-%:ia vettä sisältävään tetrahydrofuraaniin (100 ml), liuos 10 jäähdytettiin 0 °C:seen ja siihen lisättiin varovasti kiinteätä natriumboorihydridiä (0,456 g). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa yön yli. Seos haihdutettiin ja jäännökseen lisättiin dik-loorimetaania ja vettä. Seosta sekoitettiin ja siihen li-15 sättiin väkevää kloorivetyhappoa pH-arvoon 1. Faasit erotettiin ja vesifaasi uutettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 4,325 g raa-katuotetta (sp. 155 - 160 °C). Tämä raakatuote uutettiin 20 kiehuvalla n-heksaanilla. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kiteytettiin etyyliasetaatti-n-heksaaniseoksesta, jolloin saatiin 1,046 g puhdasta bentsyyli-[3-kloori-2(S)-hydrok-si-1 ( S)-[(2-naftyyli)metyyli)propyyli]karbamaattia, sp. 173 - 174 °C.
25 (v) Bentsyyli-[3-kloori-2(S)-hydroksipropyyli-l( S)- [(2-naftyyli)metyyli]propyyli]karbamaattia (1,02 g) sekoitettiin etanolin (40 ml) ja 0,7-m KOH-etanoliliuoksen (4 ml) seoksessa 0,75 tuntia. Liuotin haihdutettiin ja jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja veteen liukeneviin 30 osiin. Orgaaninen faasi kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla ja haihdutettiin, saatu valkea kiinteä aine kiteytettiin etyyliasetaatti-n-heksaaniseoksesta. Saatiin 0,897 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4-(2-naftyyli)butaania valkeana kiinteänä aineena, sp. 115-35 116 eC.
96 9 5 6 9 3 (vi) 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-1,2(S)-epoksi-4-(2-naftyyli)butaania (0,465 g) ja L-proliini-tert-butyy-liamidia (0,251 g) kuumennettiin vedettömässä isopropano-lissa (10 ml) 80 eC:ssa 23 tuntia, sitten seosta käsitel- 5 tiin esimerkissä 92(i) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 2 0,483 g N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-(2-naftyyli )butyyli]-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana vaahtona, sp. noin 75 - 85 °C: 2 (vii) N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hyd-10 roksi-4-(2-naftyyli)butyyli]-N^-tert-butyyli-L-prolinami- din (0,725 g) liuosta etanolissa 825 ml) hydrattiin 10-%risen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa 20 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 15 0,54 g N^-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-L-(2-naftyyli)butyy- li]-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia valkeana vaahtona, jota käytettiin ilman puhdistamista.
Esimerkki 104
Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla N-(bentsyylioksi-20 karbonyyli)-L-asparagiinista (0,133 g), hydroksibentso- triatsolista (0,068 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä 2 (0,103 g) ja N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyy-1 i ] -N^ - tert-butyyli - 4 ( R ) - hydroksi-L-prolinamidista (0,16 g) saatiin, käyttäen kuitenkin dikloorimetaania 25 etyyliasetaatin sijasta orgaanisen ja vesifaasin erottamiseen ja 20 % metanolia sisältävää dikloorimetaania kro- matografoinnissa ja suorittamalla uudelleenhaihdutus di- 2 etyylieetterin kanssa, 0,1 g N -[3(S)-[N-(bentsyylioksi-karbonyyli ) -L-asparaginyyliamino] -2( R)-hydroksi-4-fenyy-30 libutyyli] -N^-tert-butyyli-4 (R) -hydroksi-L-prolinamidia, sp. 115 °C.
2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-4(R)-hydroksi-L-prolin-amidi valmistettiin seuraavasti: 35 (i) 2,65 g N-(bentsyylioksikarbonyyli)-4(R)-hydrok- si-L-proliinia liuotettiin vedettömään tetrahydrofuraaniin « ia ia i uin rt t ti 97 9 5 6 9 3 (10 ml) ja liuos jäähdytettiin -10 °C:seen samalla sekoittaen magneettisekoittajalla. Liuokseen lisättiin 1,15 g N-etyylimorfoliinia välittömästi sen jälkeen 1,36 g isobu-tyyliklooriformiaattia. Seosta sekoitettiin -10 °C:ssa 30 5 minuuttia ja sitten lisättiin 2,19 g tert-butyyliamiinia. Sekoittamista -10 °C:ssa jatkettiin tunnin ajan, seos sai . lämmetä huoneen lämpötilaan 2 tunnin aikana ja jätettiin sitten seisomaan tunniksi. Liuotin haihdutettiin vakuumis-sa ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liuke- 10 neviin osiin. Orgaaninen kerros pestiin 10-%:isella sit-ruunahappoliuoksella ja natriumbikarbonaattiliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, saatua kiinteätä jäännöstä hierrettiin dietyylieetterissä ja seos suodatettiin. Saatiin 2,23 g raakatuotetta, joka ki- 15 teytettiin etyyliasetaatti-dietyylieetteriseoksesta, jol- 2 1 loin saatiin 1,57 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N -tert- butyyli-4(R)-hydroksi-L-prolinamidia, sp. 128 - 130 °C.
(ii) 0,224 g N^-(bentsyylioksikarbonyyliJ-N^-tert-butyyli-4(R)-hydroksi-L-prolinamidia liuotettiin 20 ml:aan 20 etanolia ja hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (50 mg) läsnäollessa huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suo-dos haihdutettiin, jolloin saatiin 0,13 g N -tert-butyyli-4(R)-hydroksi-L-prolinamidia, jota käytettiin seuraavassa 25 vaiheessa ilman enempää puhdistamista.
(iii) N-tert-butyyli-4(R)-hydroksi-L-prolinamidia (0,13 g) ja 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania (0,208 g) kuumennettiin vedettömässä isopropanolissa (10 ml) 80 °C:ssa 24 tuntia. Seoksen jat- 30 kokäsittely tapahtui esimerkissä 33(iii) kuvatulla tavalla, jolloin dietyylieetterissä suoritetun hiertämisen jäl- 2 keen saatiin 0,236 g N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-4(R)-hyd-roksi-L-prolinamidia valkeana hyytelönä, sp. 135 eC.
35 (iv) 0,226 g N^-[3(S)-(bentsyylioksiformamido)- 2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-4(R)-hyd- « s» 9 5693 roksi-L-prolinamidia liuotettiin 20 ml:aan etanolia ja hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (40 mg) läsnäollessa huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa 2 tuntia.
Katalysaattori poistettiin suodattamalla ja suodos haih- 2 5 dutettiin, jolloin saatiin 0,16 g N -[3(S)-amino-2(R)-hyd-roksi-4-f enyylibutyyli] -N1 -tert-butyyli-4(R)-hydroksi-L-prolinamidia kumina, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
Esimerkki 105 10 Esimerkki 92 kuvatulla tavalla, käyttäen kuitenkin dikloorimetaania etyyliasetaatin sijasta orgaanisen ja vesifaasin erottamiseen, käyttäen 20 % metanolia sisältävää dikloorimetaania kromatografoinnissa ja suorittamalla uudelleenhaihdutus dietyylieetterin kanssa, saatiin N-15 (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinista (0,067 g), hyd-roksibentsotriatsolista (0,034 g), disykloheksyylikarbodi-imidistä (0,052 g) ja N^-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fe-nyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-4 (S) -hydroksi-L-prolinami-dista (0,08 g) 0,03 g N^-[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyy-20 li )-L-asparaginyyli] amino] -2( R )-hydroksi-4-fenyylibutyy-li]-N*-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinamidia kerman- värisenä kiinteänä aineena, sp. 140 °C.
2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-4(S)-L-prolinamidi val-25 niistettiin seuraavasti: (i) 1,7 g N-(bentsyylioksikarbonyyli)-4(S)-hydrok-si-L-proliinia liuotettiin 15 ml:aan vedetöntä dimetyyli-formamidia samalla sekoittaen ja liuos jäähdytettiin 0 °C:seen. Siihen lisättiin 0,817 g N-hydroksisukkinimi-30 diä, seosta sekoitettiin ja lämpötilan annettiin kohota 20 °C:seen. Seosta sekoitettiin yön yli huoneen lämpötilassa. Muodostunut disykloheksyyliurea suodatettiin pois ja suodos jäähdytettiin -10 °C:seen. Sitten lisättiin sekoittaen 2 ml tert-butyyliamiinia. Seoksen annettiin läm-35 metä huoneen lämpötilaan koko ajan sekoittaen ja sekoittamista jatkettiin vielä yön yli. Erottunut kiinteä aine >· ·»» . «-··· ·->·« • 99 9 5 6 9 3 suodatettiin ja suodos haihdutettiin vakuumissa, saatu kumi jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros pestiin 10-%:isella sitruunahap-poliuoksella ja sitten kyllästetyllä natriumbikarbonaat-5 tiliuoksella. Vesifaasit uutettiin 2 kertaa etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin, ja saatu kiinteä aine puhdistettiin flash-kromatografialla silikageelillä käyttäen eluointiin 5 % metanolia sisältävää dikloorime-10 taania. Saatiin 1,36 g raakatuotetta, joka kiteytettiin etyyliasetaatti-dietyylieetteri-petroolieetteri (kp. 40- 60 °C) -seoksesta (1:4:4) ja pidettiin sitten 4 °C:ssa 2 jääkaapissa yön yli. Näin saatiin 1,127 g N -(bentsyyliok-sikarbonyyli )-N^-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinami- 15 dia, sp. 131 - 132 °C.
2 1 (ii) N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N -tert-butyyli- 4(S)-hydroksi-L-prolinamidi 80,224 g) hydrattiin 0,135 g N^-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinamidia kumimaisena kiinteänä aineena, jota käytettiin seuraavassa vaiheessa 20 puhdistamatta.
(iii) 0,135 g N*-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-pro-linamidia ja 0,208 g 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-l,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania vedettömässä etanolissa (10 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4 vrk. Seoksen jatkokä- 25 sittely suoritettiin esimerkissä 92(i) kuvatulla tavalla käyttäen kuitenkin kromatografoinnissa eluointiin 10 % 2 metanolia sisältävää dikloorimetaania. Saatiin 0,11 g N -13(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibu-tyyli]-N^-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinamidia vaah-30 tona.
2 (iv) 0,ll g N -[3(S)-(bentsyylioksiformamido)-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N^-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinamidia liuotettiin etanoliin ja hydrattiin 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin (20 mg) läsnäollessa huoneen 35 lämpötilassa normaalipaineessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 95693 0,08 g N^-[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N1-tert-butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinamidia kumina, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
Esimerkki 106 5 Esimerkissä 92 kuvatulla tavalla, käyttäen kuiten kin dikloorimetaania etyyliasetaatin sijasta orgaanisen ja vesifaasin erotuksessa, suorittaen kromatografointi käyttäen eluointiin 20 % metanolia sisältävää dikloorimetaania ja suorittaen uudelleenhaihdutus dietyylieetterin 10 kanssa, saatiin N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagii- nista (0,105 g), hydroksibentsotriatsolista (0,054 g), 2 disykloheksyylikarbodi-imidistä (0,082 g) ja N -[3(S)-ami- no-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4(R)-(tert-butoksifor- mamidoJ-N^-tert-butyyli-L-prolinamidista (0,17 g) 0,045 g 2 15 N -[3(S)-N-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino] -2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -4(R)-(tert-butoksifor-mamido )-N -tert-butyyli-L-prolinamidia lähes valkeana kiinteänä aineena, sp. 170 - 175 °C.
2 Lähtöaineena käytetty N -[3(S)-amino-2(R)-hydroksi-20 4-fenyylibutyyli]-4(R)-(tert-butoksiformamido)-N^-tert- butyyli-L-prolinamidi valmistettiin seuraavasti: (i) 0,32 g N^-(bentsyylioksikarbonyyliJ-N^-tert- butyyli-4(S)-hydroksi-L-prolinamidia liuotettiin sekoittaen vedettömään pyridiniin (5 ml), liuos jäähdytettiin 25 0 °C:seen ja siihen lisättiin tipottain 0,82 ml metaani- sulfonyylikloridia. Liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa vielä 2 tuntia. Seos kaadettiin jää/vesiseokseen ja uutettiin sitten etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 2-m kloorivetyhapolla ja sitten kyllästetyllä nat-30 riumbikarbonaattiliuoksella, kuivattiin vedettömällä nat- riumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 0,5 g 2 1 N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N -tert-butyyli-4(S)-(metaa- nisulfonyylioksi)-L-prolinamidia öljynä, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
2 1 35 (ii) 0,5 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-N -tert- butyyli-4(S)-(metaanisulfonyylioksi)-L-prolinamidia liuo- I m I lilt; I t t-t ιοί 95693 tettiin vedettömään dimetyyliformamidiin (10 ml) ja liuokseen lisättiin 0,330 g natriumatsidia. Heterogeenista seosta sekoitettiin 75 eC:ssa 18 tuntia. Seos haihdutettiin öljypumppuvakuumissa ja saatu kiinteä jäännös jaet-5 tiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Etyy-liasetaattifaasi pestiin kyllästetyllä natriumkloridi- liuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla.
2
Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 0,345 g N -(bent-syylioksikarbonyyli) -4 (R) -atsido-N1-tert-butyyli-L-prolin-10 amidia kumina.
2 (iii) 0,345 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-4(R)-atsido-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia liuotettiin vedettömään tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja liuos haihdutettiin. Jäännöksenä saatu kumi liuotettiin vedettömään tetrahyd- 15 rofuraaniin (10 ml) ja liuosta käsiteltiin typpikehässä trifenyylifosfiinilla (0,262 g). Saatu liuos sai seistä typpikehässä huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Siihen lisättiin 0,027 g vettä ja se jätettiin huoneen lämpötilaan 24 tunniksi. Liuotin haihdutettiin ja jäännöksenä saatu kumi 20 jaettiin veteen ja dietyylieetteriin liukeneviin osiin.
Vesifaasi uutettiin dietyylieetterillä ja haihdutettiin, 2 jolloin saatiin 0,09 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-4(R)- amino-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia kumina. Yön yli sei- sotuksen jälkeen dietyylieetteriuutteet yhdistettiin ja 25 haihdutettiin ja saatu öljy (0,7 g) kromatografoitiin käyttäen eluointiin 10 % metanolia sisältävää dikloorime- 2 taania, jolloin saatiin vielä 0,16 g N -(bentsyylioksikarbonyyli )-4(R)-amino-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia kumina.
2 (iv) 0,21 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-4(R)-ami-30 no-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia liuotettiin dioksaanin (5 ml) ja veden (5 ml) seokseen. Liuokseen lisättiin 0,056 g natriumbikarbonaattia ja saatuun liuokseen lisättiin 0,144 g di(tert-butyyli)dikarbonaattia. saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli. Liuottimet 35 haihdutettiin ja jäännös jaettiin veteen ja dietyylieetteriin liukeneviin osiin. Vesikerros uutettiin dietyyli- !02 9 5 6 9 3 eetterillä ja sitten etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin kyllästetyllä natriumkloridiliuok-sella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Kuivatut uutteet yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saa-2 5 tiin0,27 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-4(R)-(tert-butok-siformamidoJ-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia lähes valkeana vaahtona.
2 (v) 0,25 g N -(bentsyylioksikarbonyyli)-4(R)-(tert-butoksiformamido)-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia liuotet- 10 tiin etanoliin ja hydraattiin 10-%risen Pd/C-katalysaat- torin (0,1 g) läsnäollessa huoneen lämpötilassa normaali- paineessa 4 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois ja g suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 0,17 g 4(R -(tert-butoksiformamido)-N -tert-butyyli-L-prolinamidia lasimai-15 sena tuotteena, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
(vi) 4(R)-(tert-butoksiformamido)-N*-tert-butyyli- L-prolinamidia (0,17 g) ja 3(S)-(bentsyylioksiformamido)-1,2(S)-epoksi-4-fenyylibutaania (0,178 g) sekoitettiin 20 15 mlrssa vedetöntä etanolia ja saatu liuos sai seistä huoneen lämpötilassa 4,5 vrk. Sitten liuosta kuumennettiin 40 °C:ssa 96 tuntia. Jatkokäsittely suoritettiin esimerkissä 92(i) kuvatulla tavalla, jolloin kromatografoitaessa eluointiin käytettiin kuitenkin 10 % metanolia sisältävää 2 25 dikloorimetaania. saatiin 0,230 g N -[3(S)-(bentsyyliok-si f ormamido) - 2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] - 4( R) - (tert-butoksif ormamido )-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia kumina.
(vii) 0,22 g N^-(3(S)-(bentsyylioksiformamido)- 2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4(R)-(tert-butoksiform- 30 amido)-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia liuotettiin 10 ml:aan etanolia ja hydrattiin 10-%risen Pd/C-kataly-saattorin (0,05 g) läsnäollessa huoneen lämpötilassa normaalipaineessa 2 tuntia. Katalysaattori suodatettiin pois 2 ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 0,17 g N -[3(S)~ 35 amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-4(R)-(tert-butoksi- 103 95693 formamido)-N1-tert-butyyli-L-prolinamidia kumina, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista.
Esimerkki 107
Esimerkissä 27 kuvatulla tavalla 2-[[3(S)-[(L-aspa-5 raginyyli)amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli]butyyli]-N-tert-butyyli-l,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l(R tai S)-karboksamidista (isomeeri B) (162 mg), kinaldiinihaposta (55 mg), 1-hydroksibentsotriatsolista (43 mg), N-etyyli-morfoliinista (0,04 ml) ja disykloheksyylikarbodi-imidistä 10 (66 mg) saatiin kromatografoinnin jälkeen silikageelillä käyttäen eluointiin 3 % metanolia sisältävää etyyliasetaattia 95 mg N-tert-butyyli-l,2,3,4-tetrahydro-2-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-as-paraginyyli]amino]butyyli]pyrido[3,4-b]indoli-l(R tai S)-15 karboksamidia; MS: m/e 707 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 2-[[3(S)-[(L-asparaginyyl)-amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyyli]butyyli]-N-tert-butyyli- 1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l(R tai S)karboks-amidi valmistettiin hydraamalla 2-[3(S)-[[N-(bentsyyliok-20 sikarbonyyli )-L-asparaginyyli] amino] -2(R)-hydroksi-4-fe- nyylibutyyli] -N-tert-butyyli-1,2,3,4-tetrahydropyrido[3,4-b]indoli-l(R tai S)karboksamidi.
Esimerkki 108
Trans-2- [3( S) - [ (L-asparaginyyli )amino] -2(R)-hydrok-25 si-4-fenyylibutyyli] -N-tert-butyyli-dekahydro-( 4aR, 8aS )- isokinoliini-3(S)karboksamidin (154 mg) ja kinaldiinihapon (52 mg) liuos vedettömässä tetrahydrofuraanissa (6 ml) jäähdytettiin jää/suolahauteessa. Liuokseen lisättiin 41 mg hydroksibentsotriatsolia, 35 mg N-etyylimorfoliinia 30 ja 68 mg disykloheksyylikarbodi-imidiä ja seosta sekoitet tiin 64 tuntia. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja suodatettiin. Suodos pestiin natriumbikarbonaatin vesi-liuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella ja haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen 35 eluointiin dikloorimetaani-metanoliseosta (9:1), jolloin saatiin 50 mg trans-N-tert-butyyli-dekahydro-2-[2(R)-hyd- 104 95693 roksi-4-fenyyli-3( S) - [ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-aspara-ginyyli] amino] butyyli] -(4aR, 8aS)isokinoliini-3( S )karbok-samidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 671 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty trans-2-[3(S)-[(L-asparagi-5 nyyli )amino]-2( R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyy- li-dekahydro-(4aR,8aS)isokinoliini-3(S)karboksamidi valmistettiin hydraamalla trans-2-[3(S)-[[N-(bentsyylioksi-karbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyy-libutyyli] -N-tert-butyyli-dekahydro-( 4aR, 8aS )isokinoliini-10 3(S)karboksamidi.
Esimerkki 109 1-[3( S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidin (1,02 g) ja N-(tert-butoksikarbonyyli)-S-metyyli-L-kysteiinin (685 mg) 15 liuos vedettömässä tetrahydrofuraanissa (7 ml) jäähdytettiin jää/suolahauteessa. Liuokseen lisättiin 335 mg N-etyylimorfoliinia ja 661 mg disykloheksyylikarbodi-imidiä ja seosta sekoitettiin 3 tuntia. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja suodatettiin. Suodos pestiin natriumbi-20 karbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella. liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaani-metano-liseosta (96:4), jolloin saatiin 630 mg l-[3(S)-[[N-tert-butoksikarbonyyli ) -L-kysteinyyli] amino] -2( R) -hydroksi-4-25 fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2( S)-piperidiinikarboks- amidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 565 [M+H]+.
Esimerkki 110 N-tert-butyyli-1- [3( S ) — [ ( L-kysteinyyli )amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli] -2( S )-piperidiinikarboksamidin 30 (650 mg) ja kinaldiinihapon (242 mg) liuos jäähdytettiin jää/suolahauteessa. Liuokseen lisättiin 189 mg hydroksi-bentsotriatsolia, 161 mg N-etyylimorfoliinia ja 317 mg disykloheksyylikarbodi-imidiä ja seosta sekoitettiin 64 tuntia. Seos laimennettiin ja suodatettiin ja suodos haih-35 dutettiin. Jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja natriumbikarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen 105 95693 faasi pestiin natriumkloridiliuoksella ja haihdutettiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluoin-tiin dikloorimetaani-metanoiiseosta (19:1), jolloin saatiin 350 mg N-tert-butyyli-l-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-5 3(S) - [ [N-( 2-kinolyylikarbonyyli )-L-kysteinyyli]amino]bu- tyyli]-2(S)-piperidiinikarboksamidia valkeana kiinteänä aineena; MS: m/e 620 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty N-tert-butyyli-l-[3(S)-[(L-kysteinyyli )amino] -2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-2(S)-10 piperidiinikarboksamidi valmistettiin seuraavasti: l-[3(S)-[[N-( tert-butoksikarbonyyli) -L-kysteinyy-li]amino]-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-N-tert-butyyli-2(S)-piperidiinikarboksamidin (930 mg) liuosta trifluori-etikkahapossa (7 ml) sekoitettiin 20 °C:ssa tunnin ajan. 15 Seos haihdutettiin kuiviin ja jäännös jaettiin dikloori-metaaniin ja natriumbikarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi haihdutettiin, jolloin saatiin 650 mg N-tert-butyyli-l-[3(S)-[(L-kysteinyyli)amino]-2( R )-hydroksi-4-fenyylibutyyli]-2(S)-piperidiinikarboks-20 amidia värittömänä kumina; MS: m/e [M+H]+.
Esimerkki 111 15 mg vastatislattua asetyylikloridia lisättiin 2 sekoittaen 4(R)-amino-N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbo-nyyli )-L-asparaginyyli]amino]-2(R )-hydroksi-4-fenyylibu-25 tyyli]-N-tert-butyyli-L-prolinamidihydrokloridin (12 mg) ja natriumbikarbonaatin (21 mg) 0 °C:seen jäähdytettyyn liuokseen veden (0,5 ml) ja dimetyyliformamidin (0,25 ml) seoksessa. Seosta sekoitettiin voimakkaasti 0 °C:ssa 5 tuntia, sitten seos sai seistä huoneen lämpötilassa yön 30 yli. Seos laimennettiin vedellä ja uutettiin dikloorime-taanilla. Yhdistetyt dikloorimetaaniuutteet haihdutettiin, ja jäännöksenä saatu kumi puhdistettiin flash-kromatogra-fialla silikageelillä käyttäen eluointiin 20 % metanolia sisältävää dikloorimetaania. Saatiin 2 mg puolikiinteätä 2 35 4(R)-asetyyliamino-N -[3(S)-[[N-(bentsyylioksikarbonyyli)~ 106 95693 L-asparaginyy 1 i ] amino ] - 2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N* - tert-butyyli-L-prolinamidia; MS: m/e 639 [M+H]+.
Lähtöaineena käytetty 4(R)-amino-N^-[3(S)-[[N- (bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparaginyyli]-amino]-2(R)- 5 hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N'^-tert-butyyli-L-prolinamidi- hydrokloridi valmistettiin seuraavasti: 29 mg N^-[3(S)-[[N^-(bentsyylioksikarbonyyli)-L- asparaginyyli ] amino] -2 (R) -hydroksi-4-f enyylibutyyli ]-4(R)- (tert-butoksiformamido)-N^-tert-butyyli-L-prolinamidia 10 liuotettiin 0,5 ml:aan kyllästettyä HCl-etyyliasetaatti- liuosta ja seoksen annettiin seistä huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Liuos haihdutettiin ja jäännöstä hierrettiin dietyylieetterissä, ja seosta pidettiin yön yli 4 °C:ssa.
Erottunut kiinteä aine suodatettiin ja pestiin dietyyli- 2 15 eetterillä, jolloin saatiin 19 mg kiinteätä 4(R)-amino-N -[ 3 ( S ) - [ [ N- ( bentsyylioksikarbonyyli ) -L-asparaginyyli] amino] -2 (R) -hydroksi-4-fenyylibutyyli] -N^-tert-butyyli-L-pro-linamidihydrokloridia. Sp. 206 - 210 eC.
Seuraava esimerkki valaisee sellaisen farmaseutti-20 sen valmisteen valmistusta, joka sisältää aktiivisena aineosana kaavan I mukaista yhdistettä tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää happoadditiosuolaa:
Esimerkki A
Aktiivisen aineosan vesiliuos suodatetaan sterii-25 liksi ja sekoitetaan lämmittäen steriiliin gelatiiniliuok-seen, joka sisältää säilytysaineena fenolia käyttäen eri aineosia sellaiset määrät, että 1,00 ml saatua liuosta sisältää 3,0 mg aktiivista aineosaa, 150,0 mg gelatiinia, 4,7 mg fenolia ja tislattua vettä tilavuuteen 1,0 ml. Seos 30 täytetään aseptisesti 1,0 ml:n lääkepulloihin.
I ! U;i Bill» lii i S M 1

Claims (13)

107 95693
1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten yhdisteiden valmistamiseksi, joiden yleinen kaava on 5 R2 R4 (0) r7 I I f *—x /c°x /ch\ /ch2_v y ^NH (1)
10 J3 R5 \« i9 jossa n on 0 tai 1, R1 on C^-alkoksikarbonyyli, fenyyli-C^-alkoksikarbonyyli, C2.6-alkanoyyli, sykloalkyylikarbo-15 nyyli, joka on adamantyylikarbonyyli tai tetrahydronaftyy-likarbonyyli, joka on substituoitu C2_5-alkanoyyliaminolla, naftyyli-CV4-alkyylikarbonyyli, fenyyli-C^-alkyylikarbo-nyyli, fenyyli-C^-alkyylikarbonyyli, joka on substituoitu C^-alkoksilla, halogeenillä tai aminolla, naftoyyli, naf-20 toyyli, joka on substituoitu bentsyylioksiformamidolla, bentsyylioksilla tai hydroksilla, bentsoyyli, bentsoyyli, joka on substituoitu bentsoyylioksikarbonyylillä tai kar-boksilla, heterosyklyylikarbonyyli, joka on kinolyylikar-bonyyli, jonka typpiatomi voi olla substituoitu C2.5-alka-25 noyyliaminolla, isokinolyylikarbonyyli, indolyylikarbonyy- li, pyratsinyylikarbonyyli, 1-oksoisokinolyylikarbonyyli tai 1-oksidokinolyylikarbonyyli, tolyylisulfonyyli, fenyy-li-C1.4-alkyylikarbamoyyli, C^-alkoksifenyyli-C^-alkyy-likarbamoyyli, kinnamoyyli, nitrokinnamoyyli tai a-fenyy-3 0 li-C^-alkoksikarbonyyliamino-C^-alkanoyyli, R2 on vety tai R1 ja R2 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, muodostavat syklisen imidiryhmän, jolla on kaava 95693 108 O Λ 1 /- W » QV o jossa P ja Q yhdessä ovat naftyyli, R3 on C1.4-alkyyli, C3_6-sykloalkyyli, fenyyli, C^-alkoksifenyyli, fenyyli-10 C1.4-alkyyli, imidatsolyyli-C^-alkyyli, N-bentsyylioksi-imidatsoli-C^-alkyyli, syaani-C^-alkyyli, C^-alkyylisul-f inyyli-C^-alkyyli, karbamoyyli-C^-alkyyli tai C.,_4-alkok-sikarbonyyli-C^-alkyyli, tai kun n on nolla, R3 voi myös olla C1.4-alkyylitio-C1.4-alkyyli, tai kun n on yksi, R3 voi 15 myös olla C1.4-alkyylisulfonyyli-C1.4-alkyyli, R4 on C1.4-al-kyyli, C3.6-sykloalkyyli-C1.4-alkyyli, naftyyli, fenyyli-C1.4-alkyyli tai fenyyli-C1.4-alkyyli, jonka fenyylirengas on substituoitu halogeenilla, C1.4-alkoksilla tai hydroksilla, R5 on vety ja R6 on hyd-roksi tai R5 ja R6 yhdessä ovat ok-2 0 so, R7 ja R8 yhdessä ovat trimetyleeni- tai tetrametyleeni-ryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu hydroksilla, C1.4-alkoksikarbonyyliaminolla tai C1.4-alkyylikarbonyyliami-nolla tai jonka yksi -CH2-ryhmä on korvattu ryhmällä -NH, -N (C1.4-alkoksikarbonyyli) -, -N(C1.4-alkyylikarbonyyli) - tai 25 -S- tai johon on fuusioitunut C3.6-sykloalkaani-, bentseeni- tai indolirengas, ja R9 on C1.4-alkoksikarbonyyli, mono-C1.6-alkyylikarbamoyyli, monofenyyli-C1.4-alkyylikarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, joka on substituoitu hydroksilla, tai ryhmä, jonka kaava on 30 NH CO —NH-R11 (b) i10 35 •a mi a iti rt-ι if» ' - t » · 109 95693 jossa R10 ja R1 kumpikin ovat C^-alkyyli, tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (a) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis-5 tamiseksi, jossa n on 0, yhdiste, jonka yleinen kaava on f 10 /C\/CH2 Vck/ (II) R5 V " jossa R4, R5, R6, R7, R® ja R9 merkitsevät samaa kuin edellä, 15 saatetaan reagoimaan hapon kanssa, jonka yleinen kaava on R2
2. R1—jj ^CH-COOH (III) 25 jossa R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä, tai kaavan III mukaisen hapon reaktiivisen johdannaisen kanssa, tai (b) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa n on 0, R5 on vety ja R6 on hydroksi, pel- 30 kistetään kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 0 ja R5 ja R6 ovat yhdessä oksoryhmä, tai c) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa n on 0 ja R1 on C2_6-alkanoyyli, sykloalkyy-likarbonyyli, joka on adamantyylikarbonyyli tai tetrahyd- 3. ronaftyylikarbonyyli, joka on substituoitu C2_5-alkanoyyli- no 95693 aminolla, naftyyli-C1,4-alkyylikarbonyyli, fenyyli-C1.4-al-kyylikarbonyyli, fenyyli-C1.4-alkyylikarbonyyli, joka on substituoitu C^-alkoksilla, halogeenillä tai aminolla, naftoyyli, naftoyyli, joka on substituoitu bentsyylioksi-5 formamidolla, bentsyylioksilla tai hydroksilla, bentsoyy- li, bentsoyyli, joka on substituoitu bentsoyylioksikarbo-nyylillä tai karboksilla, hete-rosyklyylikarbonyyli, joka on kinolyylikärbonyyli, jonka typpiatomi voi olla substituoitu C2_5-alkanoyyliaminolla, isokinolyylikarbonyyli, in-10 dolyylikarbonyyli, pyratsinyylikarbonyyli, 1-oksoisokino- lyylikarbonyyli tai 1-oksidokinolyylikarbonyyli, tolyyli-sulfonyyli, kinnamoyyli tai a-fenyyli-C1.4-alkoksikarbonyy-liamino-C2_6-alkanoyyli, R2 on vety tai R1 ja R2 yhdessä typ-piatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, muodostavat 15 tässä edellä esitetyn kaavan (a) mukaisen syklisen imidi-ryhmän, yhdiste, jonka yleinen kaava on K4 7
20 I H2N\ /C<\ /CH CH —h'' r8 > - X X (IV) A3 *5 \« J.» 25 jossa R3, R4, R5, R6, R7, R8 ja R9 merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, josta saadaan substituenttia R1 vastaava ryhmä, tai yhdisteen kans-30 sa, joka muodostaa tässä edellä esitetyn kaavan (a) mukaisen syklisen imidiryhmän, tai (d) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa n on 0 ja R1 on fenyyli-C1.4-alkyylikarba-moyyli tai C^-alkoksifenyyli-C^-alkyylikarbamoyyli ja R2 35 on vety, tässä edellä esitetyn kaavan IV mukainen yhdiste 1 I · - H-t KiH lii i β , ! i in 95693 saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka yleinen kaava on R1' -N=C=0 (V) 5 jossa R1' on fenyyli-C^-alkyyli tai C^-alkoksifenyyli-C^-alkyyli, tai (e) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R3 on C^-alkyylisulfinyyli-C^-alkyyli 10 ja n on 0, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R3 on C1.4-alkyylitio-C1.4-alkyyli ja n on 0, tai (f) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa n on 1, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 0, tai 15 (g) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis tamiseksi, jossa n on 1 ja R1 on 1-oksidokinolyylikarbonyy-li ja R2 on vety, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 1 ja R1 on kinolyylikarbonyyliryhmä ja R2 on vety, tai 20 (h) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis tamiseksi, jossa n on 1 ja R3 on C1.4-alkyylisulfonyyli-C1.4-alkyyli, hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa n on 1 ja R3 on C^-alkyylisulfinyyli-C^-alkyyli, tai (i) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmis- 25 tamiseksi, jossa R1 on karboksisubstituoitu bentsoyyli, hydroksisubstituoitu naftoyyli tai hydrokinnamoyyli ja R2 on vety, katalyyttisesti hydrataan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on bentsyylioksikarbonyylisubstituoitu bentsoyyli, bentsyylioksisubstituoitu naftoyyli tai kin- 30 namoyyli ja R2 on vety, tai (j) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R3 on imidatsol-4-yyli ja/tai R4 on hydroksisubstituoitu fenyyli-C^-alkyyli ja/tai R7 ja R8 merkitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, 35 jossa yksi CH2-ryhmä on korvattu -NH-ryhmällä, kaavan I 112 95693 mukaista yhdistettä, jossa R3 on l-(bentsyylioksikarbonyy-li)imidatsol-4-yyli ja/ tai R4 on tert-butoksisubstituoitu fenyyli-C^-alkyyli ja/tai R7 ja R8 merkitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, jossa yksi -CH2-5 ryhmä on korvattu -N-(tert-butoksikarbonyyli)-ryhmällä, käsitellään vahvalla hapolla, tai (k) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R7 ja R8 merkitsevät trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, joka on substituoitu C^-alkyylikar-10 bonyyliaminoryhmällä, tai jossa yksi -CH2- ryhmä on korvattu -N(C^-alkyylikarbonyyli)-ryhmällä, asyloidaan yhdiste, jonka yleinen kaava on
15 R2 ** <°>n R7' I I T s · r1~V /C°\ /C"\ /CH2—V XCHX NH (VI) l· \e I, 20 jossa n, R1, R2, R3, R4, R5, R6 ja R9 merkitsevät samaa kuin edellä ja R7' ja R8' merkitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, joka on substituoitu aminoryhmällä tai jossa yksi -CH2-ryhmä on korvattu -NH-ryhmällä, ja/tai 25 (1) haluttaessa diastereomeeristen rasemaattien seos jaetaan diastereomeerisiksi rasemaateiksi tai optisesti puhtaiksi diastereomeereiksi, ja/tai (m) haluttaessa diastereomeerien seos jaetaan optisesti puhtaiksi diastereomeereiksi, ja/tai 30 (n) haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditio-suolaksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukai-35 siä yhdisteitä, joissa n on 0, R3 on C1.4-alkyyli, C3_6-syk- 113 95693 loalkyyli, fenyyli, C^-alkoksifenyyli, f enyyli-C^-alkyy-li, imidatsolyyli-C1.4-alkyyli, N-bentsyylioksi-imidatsoli-C1.4-alkyyli, syaani-C1.4-alkyyli, C1.4-alkyylitio-C1.4-alkyy-li, karbamoyyli-C1.4-alkyyli tai C1.4-alkoksikarbonyyli-C1.4-5 alkyyli ja R7 ja R8 merkitsevät yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmää, jossa yksi -CH2- ryhmä voi olla korvattu -NH- tai -S- ryhmällä tai johon voi olla fuusioituneena C3_6-sykloalkaani-, bentseeni- tai indolirengas, tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja 10 menetelmävaihtoehdoilla (a), (b), (c), (d) ja/tai (n) .
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-tert-butyyli-1-2 (R) -hydroksi-4-fenyyli-3 (S) -[ [N-(2-kinolyylikarbonyy-li) -L-asparaginyyli]amino]butyyli]-2(S)-piperidiinikar- 15 boksamidi.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-tert-butyyli-oktahydro-1-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S) -[[N-(2-kinolyy-likarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]-(3aS,6aS)- 20 syklopenta[b]pyrroli-2(S)-karboksamidi.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-tert-butyyli- 1,2,3,4-tetrahydro-2-[2(R)-hydroksi-4-fenyyli-3(S)-[[N-(2-kinolyylikarbonyyli)-L-asparaginyyli]amino]butyyli]- 25 pyrido[3,4-b]indoli-1(R tai S)-karboksamidi.
6. Yhdiste, jonka yleinen kaava on f4 R7 30 ^ j,* R R R 35 jossa R on vety tai ryhmä, jonka kaava on • I 114 95693 h2Vch/cox 5 i3 jossa R3 on C^-alkyyli, C3_6-sykloalkyyli, fenyyli, CV4-alkoksifenyyli, fenyyli-C.,_4-alkyyli, imidatsolyyli-C^-al-kyyli, N-bentsyylioksi-imidatsoli-C.,_4-alkyyli, syaani-C,. 10 4-alkyyli, C^-alkyylitio-C^-alkyyli, C^-alkyylisulf i-nyyli-C^-alkyyli, karbamoyyli-C1.4-alkyyli tai C^-alkok-sikarbonyyli-C^-alkyyli; R4 on C^-alkyyli, C3.6-sykloal-kyyli-C^-alkyyli, naftyyli tai fenyyli-C^-alkyyli tai fenyyli-C^-alkyyli, jonka fenyylirengas on substituoitu 15 halogeenilla, C.,_4-alkoksilla tai hydroksilla; R5 on vety ja R6 on hy dr oksi tai R5 ja R6 ovat yhdessä okso; R7 ja R8 yhdessä ovat trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu hydroksilla, C1.4-alkoksikarbo-nyyliaminolla tai C1.4-alkyylikarbonyyliaminolla tai jonka 20 yksi -CH2-ryhmä on korvattu ryhmällä -NH-, -N(C1.4-alkoksi-karbonyyli)-, -N(C1.4-alkyylikarbonyyli) - tai -S- tai johon on fuusioitunut C3_6-sykloalkaani-, bentseeni- tai indoli-rengas; ja R9 on C,.4-alkoksikarbonyyli, mono-C1.6-alkyyli-karbamoyyli, monofenyyli-C1.4-alkyylikarbamoyyli, monofenyy-25 likarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, joka on substituoitu hydroksilla, tai ryhmä, jonka kaava on NH .C0V 30 / \ / \ 11 —CO CH NH-R'L"L l10 4 115 95693
7. Yhdiste, jonka yleinen kaava on *2 ** (2}n R7' CH NH C CH (VI) I? 5 \ 6 19 RJ R3 R k 10 jossa n on 0 tai 1; R1 on C1.4-alkoksikarbonyyli, fenyyli-C^-alkoksikarbonyyli, Cz.6-alkanoyyli, sykloalkyylikarbo-nyyli, joka on adamantyylikarbonyyli tai tetrahydronaftyy-likarbonyyli, joka on substituoitu C2.5-alkanoyyliaminolla, naftyyli-C^-alkyylikarbonyyli, fenyyli-C,_4-alkyylikarbo-15 nyyli, fenyyli-C^-alkyylikarbonyyli, joka on substituoitu C1.4-alkoksilla, halogeenillä tai aminolla, naftoyyli, naf-toyyli, joka on substituoitu bentsyylioksiformamidolla, bentsyylioksilla tai hydroksilla, bentsoyyli, bentsoyyli, joka on substituoitu bentsoyylioksikarbonyylillä tai kar-20 boksilla, heterosyklyylikarbonyyli, joka on kinolyylikar- bonyyli, jonka typpiatomi voi olla substituoitu C2_5-alka-noyyliaminolla, isokinolyylikarbonyyli, indolyylikarbonyy-li, pyratsinyylikarbonyyli, 1-oksoisokinolyylikarbonyyli tai 1-oksidokinolyylikarbonyyli, tolyylisulfonyyli, fenyy-25 li-C1.4-alkyylikarbamoyyli, C1.4-alkoksifenyyli-C1.4-alkyy- likarbamoyyli, kinnamoyyli, nitrokinnamoyyli tai a-fenyy-li-C1.4-alkoksikarbonyyliamino-C2.6-alkanoyyli ja R2 on vety tai R1 ja R2 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, muodostavat syklisen imidiryhmän, jolla on 30 kaava 0 ρΛ I N- (a) w
35 O “« 95693 jossa P ja Q yhdessä ovat naftyyli; R3 on C,_4-alkyyli, C3_ 6-sykloalkyyli, fenyyli, C^-alkoksifenyyli, fenyyli-C,^-alkyyli, imidatsolyyli-C^-alkyyli, N-bentsyylioksi-imidat-soli-C^-alkyyli, syaani-C1.4-alkyyli, C1.4-alkyylisulfinyy-5 li-C1.4-alkyyli, karbamoyyli-C1.4-alkyyli tai C1.4-alkoksikar- bonyyli-C1.4-alkyyli tai, kun n on 0, R3 voi olla myös C1.4-alkyylitio-C^-alkyyli, tai, kun n on 1, R3 voi olla myös C1.4-alkyylisulfonyyli-C1.4-alkyyli; R4 on C1.4-alkyyli, C3.6-sykloalkyyli-C1.4-alkyyli, naftyyli tai fenyyli-C1.4-alkyyli 10 tai fenyyli-C,,_4-alkyyli, jonka fenyylirengas on substituoi- tu halogeenilla, C1.4-alkoksilla tai hydroksilla; R5 on vety ja R6 on hydroksi tai R5 ja R6 ovat yhdessä okso; R7' ja R8' ovat yhdessä trimetyleeni- tai tetrametyleeniryhmä, joka on aminosubstituoitu; ja R9 on C1.4-alkoksikarbonyyli, mono-15 c1.6~alkyylikarbamoyyli, monofenyyli-C1.4-alkyylikarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, monofenyylikarbamoyyli, joka on substituoitu hydroksilla, tai ryhmä, jonka kaava on 20 NH /C°\ —Cc/ CH NH R11 (b) i10 25 jossa R10 ja R11 kumpikin ovat C1.4-alkyyliryhmiä. 117 95693
FI892881A 1988-06-13 1989-06-13 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappojohdannaisten va lmistamiseksi FI95693C (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB8813940 1988-06-13
GB888813940A GB8813940D0 (en) 1988-06-13 1988-06-13 Amino acid derivatives
GB898908035A GB8908035D0 (en) 1988-06-13 1989-04-10 Amino acid derivatives
GB8908035 1989-04-10

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI892881A0 FI892881A0 (fi) 1989-06-13
FI892881A FI892881A (fi) 1989-12-14
FI95693B true FI95693B (fi) 1995-11-30
FI95693C FI95693C (fi) 1996-03-11

Family

ID=26294009

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI892881A FI95693C (fi) 1988-06-13 1989-06-13 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappojohdannaisten va lmistamiseksi

Country Status (18)

Country Link
US (5) US5157041A (fi)
EP (1) EP0346847B1 (fi)
JP (1) JP2515019B2 (fi)
AU (1) AU624144B2 (fi)
CA (1) CA1340588C (fi)
DE (1) DE68915207T2 (fi)
DK (1) DK172747B1 (fi)
ES (1) ES2052815T3 (fi)
FI (1) FI95693C (fi)
HU (1) HU205898B (fi)
IE (1) IE64495B1 (fi)
IL (1) IL90550A (fi)
MC (1) MC2040A1 (fi)
NO (1) NO175715C (fi)
NZ (1) NZ229480A (fi)
PH (1) PH26082A (fi)
PT (1) PT90836B (fi)
YU (1) YU48068B (fi)

Families Citing this family (152)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5142056A (en) * 1989-05-23 1992-08-25 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
US20040122000A1 (en) 1981-01-07 2004-06-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated. Inhibitors of aspartyl protease
US6878728B1 (en) 1999-06-11 2005-04-12 Vertex Pharmaceutical Incorporated Inhibitors of aspartyl protease
US5614533A (en) * 1987-03-13 1997-03-25 Bio-Mega/Boehringer Ingelheim Research, Inc. Substituted pipecolinic acid derivatives as HIV protease inhibitors
CA1340588C (en) * 1988-06-13 1999-06-08 Balraj Krishan Handa Amino acid derivatives
EP0361341A3 (en) * 1988-09-28 1991-07-03 Miles Inc. Therapeutics for aids based on inhibitors of hiv protease
US5696270A (en) * 1989-05-23 1997-12-09 Abbott Laboratories Intermediate for making retroviral protease inhibiting compounds
US5120859A (en) * 1989-09-22 1992-06-09 Genentech, Inc. Chimeric amino acid analogues
WO1991008221A1 (en) * 1989-12-04 1991-06-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Peptide inhibitors of hiv protease
GB8927915D0 (en) * 1989-12-11 1990-02-14 Hoffmann La Roche Novel alcohols
GB8927913D0 (en) * 1989-12-11 1990-02-14 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
YU47871B (sh) * 1989-12-11 1996-02-19 F. Hoffman La Roche Ag. Derivati aminokiselina
DE4026614A1 (de) * 1990-08-23 1992-02-27 Bayer Ag Phosphonopyrrolidin- und piperidin-haltige pseudopeptide vom statintyp, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel gegen retroviren
ES2151618T3 (es) 1990-11-19 2001-01-01 Monsanto Co Inhibidores de proteasas retrovirales.
US5475013A (en) * 1990-11-19 1995-12-12 Monsanto Company Retroviral protease inhibitors
US5648511A (en) * 1990-11-19 1997-07-15 G.D. Searle & Co. Method for making intermediates useful in the synthesis of retroviral protease inhibitors
US5475027A (en) * 1990-11-19 1995-12-12 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors
US5510378A (en) * 1990-11-19 1996-04-23 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors
US5583238A (en) * 1990-11-19 1996-12-10 G. D. Searle & Co. Method for making intermediates useful in synthesis of retroviral protease inhibitors
US5482947A (en) * 1990-11-19 1996-01-09 Talley; John J. Retroviral protease inhibitors
US5614522A (en) * 1990-11-19 1997-03-25 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors
IE920414A1 (en) * 1991-02-08 1992-08-12 Sankyo Co New beta-amino-alpha-hydroxycarboxylic acids and their use
US5430041A (en) * 1991-05-10 1995-07-04 Hoffmann-La Roche Inc. Amino acid derivatives having antiviral activity
AU1745092A (en) * 1991-05-10 1992-12-30 Glaxo Group Limited Thiazolidine derivatives and their use in therapy
WO1993001174A1 (en) * 1991-07-08 1993-01-21 Glaxo Group Limited Thiazolidine derivatives and their use as anti-viral compounds
CN1071930A (zh) * 1991-07-10 1993-05-12 伊莱利利公司 用作治疗艾滋病的人免疫缺陷病毒蛋白酶的抑制剂
US5508407A (en) * 1991-07-10 1996-04-16 Eli Lilly And Company Retroviral protease inhibitors
US5554728A (en) * 1991-07-23 1996-09-10 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Lipid conjugates of therapeutic peptides and protease inhibitors
DE4126485A1 (de) * 1991-08-10 1993-02-11 Bayer Ag Trifluormethyl-haltige pseudopeptide
US5516784A (en) * 1991-08-13 1996-05-14 Schering Corporation Anti-HIV (AIDS) agents
US5491149A (en) * 1991-09-16 1996-02-13 The Du Pont Merck Pharmaceutical Company Dihydroxypropylamine containing retroviral protease inhibitors
WO1993008184A1 (en) * 1991-10-23 1993-04-29 Merck & Co., Inc. Hiv protease inhibitors
AU3278293A (en) * 1991-12-20 1993-07-28 Syntex (U.S.A.) Inc. Cyclic amides of 3-amino-2-hydroxy-carboxylic acids as hiv-protease inhibitors
CA2130754C (en) 1992-03-11 2005-02-08 Damian W. Grobelny Amine derivatives of oxo- and hydroxy-substituted hydrocarbons
US5888992A (en) 1992-03-11 1999-03-30 Narhex Limited Polar substituted hydrocarbons
US6071895A (en) 1992-03-11 2000-06-06 Narhex Limited Polar-substituted hydrocarbons
DK0560268T3 (da) * 1992-03-13 1995-06-12 Bio Mega Boehringer Ingelheim Substituerede pipecolinsyrederivater som HIV-proteasehæmmere
ZA931777B (en) * 1992-03-13 1993-09-23 Bio Mega Boehringer Ingelheim Substituted pyrrolidine derivatives as HIV protease inhibitors.
EP0641325B1 (en) * 1992-05-21 2001-03-07 Monsanto Company Retroviral protease inhibitors
CZ113393A3 (en) * 1992-06-19 1994-03-16 Lilly Co Eli Hiv protease inhibitor, useful for aids treatment, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which said inhibitor is comprised
US5559256A (en) * 1992-07-20 1996-09-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Aminediol protease inhibitors
ATE154800T1 (de) * 1992-08-25 1997-07-15 Searle & Co N-(alkanoylamino-2-hydroxypropyl)-sulfonamide verwendbar als retrovirale proteaseninhibitoren
US6046190A (en) * 1992-08-25 2000-04-04 G.D. Searle & Co. Hydroxyethylamino sulphonamides useful as retroviral protease inhibitors
US5760076A (en) * 1992-08-25 1998-06-02 G.D Searle & Co. Succinoylamino hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
KR100336699B1 (ko) 1992-08-25 2002-05-13 윌리암스 로저 에이 레트로바이러스 프로테아제 저해제로서 유용한히드록시에틸아미노 술폰아미드
US7141609B2 (en) 1992-08-25 2006-11-28 G.D. Searle & Co. α- and β-amino acid hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
RU2146668C1 (ru) * 1992-08-25 2000-03-20 Джи Ди Сирл энд Компани Сульфонилалканоиламино-гидроксиэтиламино-сульфонамидное соединение, фармацевтические композиции и способы лечения и ингибирования ретровирусных протеаз
US6022994A (en) * 1992-08-25 2000-02-08 G. D. Searle &. Co. Succinoylamino hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
US5968942A (en) 1992-08-25 1999-10-19 G. D. Searle & Co. α- and β-amino acid hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
US6743929B1 (en) 1992-08-25 2004-06-01 G. D. Searle & Co. Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
US5830897A (en) * 1992-08-27 1998-11-03 G. D. Searle & Co. α- and β-amino acid hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
US5723490A (en) * 1992-09-08 1998-03-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated THF-containing sulfonamide inhibitors of aspartyl protease
US5783701A (en) 1992-09-08 1998-07-21 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Sulfonamide inhibitors of aspartyl protease
IS2334B (is) 1992-09-08 2008-02-15 Vertex Pharmaceuticals Inc., (A Massachusetts Corporation) Aspartyl próteasi hemjari af nýjum flokki súlfonamíða
WO1994010134A1 (en) * 1992-10-30 1994-05-11 G.D. Searle & Co. Hydroxyethylamino sulfamic acid derivatives useful as retroviral protease inhibitors
US5756498A (en) * 1992-10-30 1998-05-26 G.D. Searle & Co. Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonyl urea derivatives useful as retroviral protease inhibitors
US6337398B1 (en) 1992-10-30 2002-01-08 G.D. Searle & Co. Succinoylamino hydroxyethylamino sulfonyl urea derivatives useful as retroviral protease inhibitors
CA2143191A1 (en) * 1992-10-30 1994-05-11 Michael L. Vazquez Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfamic acids useful as retroviral protease inhibitors
US5578606A (en) * 1992-10-30 1996-11-26 G. D. Searle & Co. α- and β-amino acid hydroxyethylamino sulfonyl urea derivatives useful as retroviral protease inhibitors
US5475136A (en) * 1992-12-22 1995-12-12 Eli Lilly And Company Inhibitors of HIV protease useful for the treatment of AIDS
MX9308016A (es) 1992-12-22 1994-08-31 Lilly Co Eli Compuestos inhibidores de la proteasa del virus de la inmunodeficiencia humana, procedimiento para su preparacion y formulacion farmaceutica que los contiene.
US5846993A (en) * 1992-12-22 1998-12-08 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
US5484926A (en) * 1993-10-07 1996-01-16 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
US5434265A (en) * 1992-12-22 1995-07-18 Eli Lilly And Company Inhibitors of HIV protease
US5491166A (en) * 1992-12-22 1996-02-13 Eli Lilly And Company Inhibitors of HIV protease useful for the treatment of AIDS
US5733906A (en) * 1993-10-12 1998-03-31 Eli Lilly And Company Inhibitors of HIV Protease useful for the treatment of Aids
US5554653A (en) * 1992-12-22 1996-09-10 Eli Lilly And Company Inhibitors of HIV protease useful for the treatment of AIDS
ES2150933T3 (es) * 1992-12-22 2000-12-16 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa vih utiles para el tratamiento del sida.
US5514801A (en) 1992-12-29 1996-05-07 Monsanto Company Cyclic sulfone containing retroviral protease inhibitors
ATE143262T1 (de) * 1992-12-29 1996-10-15 Abbott Lab Inhibitoren der retroviralen protease
US5693815A (en) * 1993-01-17 1997-12-02 Schering Corporation Peptides
AU6135294A (en) * 1993-02-12 1994-08-29 Merck & Co., Inc. Piperazine derivatives as hiv protease inhibitors
US5939430A (en) * 1993-02-22 1999-08-17 Merrell Pharmaceuticals Inc. Combinations of retroviral inhibitors
US5455353A (en) * 1993-03-24 1995-10-03 Hoffmann-La Roche Inc. 4-(benzyl-2-oxo-oxazolidin-5 ylmethyl)N tertbutyl-decahydroisoquinoline-3-carboxamides
DE4311835A1 (de) * 1993-04-07 1994-10-13 Boehringer Ingelheim Int Verfahren zur Inhibierung der Transkription von Genen
US5830888A (en) * 1993-04-16 1998-11-03 Monsanto Company Macrocyclic retroviral protease inhibitors
DE69422399T2 (de) * 1993-04-22 2000-05-11 Yugen Kaisha Libo, Tokio/Tokyo Methode und vorrichtung zur herstellung von brenngas
AU6828894A (en) * 1993-05-14 1994-12-12 Merck & Co., Inc. Hiv protease inhibitors
IL110255A (en) * 1993-07-16 1998-12-06 Merck & Co Inc Creation and resolution of 2 tert-butylcarboxamidopiprazine
US5750648A (en) * 1993-08-20 1998-05-12 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors and combinations thereof
US5602119A (en) * 1993-10-29 1997-02-11 Vazquez; Michael L. Succinoylamino hydroxyethylamino sulfamic acid derivatives useful as retroviral protease inhibitors
KR0125117B1 (ko) 1994-06-15 1997-12-05 성재갑 항 에이즈(aids)효과를 갖는 신규한 인간 면역 결핍 바이러스(hiv)프로테아제 억제 화합물 및 그의 제조방법
EP0657446B1 (en) * 1993-12-06 1998-05-13 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Process for producing optically active erythro-3-amino-1,2-epoxy compound
US6133444A (en) * 1993-12-22 2000-10-17 Perseptive Biosystems, Inc. Synthons for the synthesis and deprotection of peptide nucleic acids under mild conditions
US5480887A (en) * 1994-02-02 1996-01-02 Eli Lilly And Company Protease inhibitors
ATE198985T1 (de) * 1994-02-02 2001-02-15 Lilly Co Eli Hiv-protease inhibitoren und zwischenprodukte
TW472047B (en) * 1994-02-04 2002-01-11 Merck & Co Inc Process for making HIV protease inhibitors
EP0749421B1 (en) * 1994-03-07 1999-09-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Sulphonamide derivatives as aspartyl protease inhibitors
US5527829A (en) * 1994-05-23 1996-06-18 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
UA49803C2 (uk) * 1994-06-03 2002-10-15 Дж.Д. Сьорль Енд Ко Спосіб лікування ретровірусних інфекцій
US20030207813A1 (en) * 1996-12-09 2003-11-06 G.D. Searle Retroviral protease inhibitor combinations
GB2292146A (en) * 1994-08-11 1996-02-14 Merck & Co Inc HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
IL114808A (en) * 1994-08-11 1999-10-28 Merck & Co Inc Combinations of protease inhibitors for the treatment of hiv infection and aids
US5591885A (en) * 1994-09-23 1997-01-07 Hoffman-La Roche Inc. Process for the preparation of halogenated α-aminoketone compounds
US5523463A (en) * 1994-09-23 1996-06-04 Hoffmann-La Roche Inc. Method of producing halogenated and alpha-aminoalchohols
US5481011A (en) * 1994-12-13 1996-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing N-protected amino acid α-halomethyl ketones and alcohols from N-protected amino acid esters
DE19500122A1 (de) * 1995-01-04 1996-07-11 Bayer Ag Neue Pseudopeptide mit trifluormethyl-substituierten 2-Azabicyclooctan
DE19500120A1 (de) * 1995-01-04 1996-07-11 Bayer Ag Neue acylierte Pseudopeptide mit trifluormethyl-subsstituiertem 2-Azabicyclooctan
US5831117A (en) 1995-01-20 1998-11-03 G. D. Searle & Co. Method of preparing retroviral protease inhibitor intermediates
CA2210889C (en) 1995-01-20 2007-08-28 G.D. Searle & Co. Bis-sulfonamide hydroxyethylamino retroviral protease inhibitors
US5756533A (en) * 1995-03-10 1998-05-26 G.D. Searle & Co. Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6140505A (en) 1995-03-10 2000-10-31 G. D. Searle & Co. Synthesis of benzo fused heterocyclic sulfonyl chlorides
US6169085B1 (en) 1995-03-10 2001-01-02 G. D. Searle & Company Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US5985870A (en) * 1995-03-10 1999-11-16 G.D. Searle & Co. Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US5705500A (en) * 1995-03-10 1998-01-06 G.D. Searle & Co. Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6150556A (en) 1995-03-10 2000-11-21 G. D. Dearle & Co. Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6667307B2 (en) 1997-12-19 2003-12-23 G.D. Searle & Co. Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
PL184771B1 (pl) 1995-03-10 2002-12-31 Searle & Co Związek stanowiący hydroksyetyloaminosulfonamid pirolidynokarbonyloaminokwasu, kompozycja zawierająca ten związek, jego zastosowanie do wytwarzania kompozycji do leczenia infekcji retrowirusowej i sposób zapobiegania replikacji retrowirusa in vitro
US7339078B2 (en) 1995-03-10 2008-03-04 G.D. Searle Llc Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
EP1188766A1 (en) 1995-03-10 2002-03-20 G.D. Searle & Co. Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US5776971A (en) 1995-03-10 1998-07-07 G.D. Searle & Co. Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6407134B1 (en) 1995-03-10 2002-06-18 G. D. Searle & Co. Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6861539B1 (en) 1995-03-10 2005-03-01 G. D. Searle & Co. Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US5691372A (en) * 1995-04-19 1997-11-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Oxygenated-Heterocycle containing sulfonamide inhibitors of aspartyl protease
US5693847A (en) * 1995-04-19 1997-12-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroatom functionalized α-methyl ketones
US6008228A (en) * 1995-06-06 1999-12-28 Hoffman-La Roche Inc. Pharmaceutical compositions containing proteinase inhibitors
US6004957A (en) * 1995-06-07 1999-12-21 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Sulfonamide inhibitors of aspartyl protease
JP3529904B2 (ja) * 1995-06-19 2004-05-24 鐘淵化学工業株式会社 光学活性１−ハロ−３−アミノ−４−フェニル−２−ブタノール誘導体の製造法
DE19531685A1 (de) * 1995-08-29 1997-03-06 Bayer Ag Neue heterocyclisch substituierte Pseudopeptide
AU7722296A (en) * 1995-11-15 1997-06-05 G.D. Searle & Co. Substituted sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
CA2190570C (en) 1995-11-17 2005-05-03 Yutaka Honda Process for producing 3-amino-2-oxo-1-halogenopropane derivatives
AU728373B2 (en) * 1995-12-07 2001-01-11 Scripps Research Institute, The HIV protease inhibitors
US5587481A (en) * 1996-02-20 1996-12-24 The Monsanto Company Preparation of (S)-decahydroisoquinoline-3-carboxylic acid t-butylamide
AU3146997A (en) * 1996-06-03 1998-01-05 Merck & Co., Inc. Pediatric formulation for hiv protease inhibitors
US5914404A (en) * 1996-08-09 1999-06-22 Hoffmann-La Roche Inc. Process for the preparation of quinargine
US5962725A (en) 1996-09-05 1999-10-05 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Intermediate compounds useful for making HIV protease inhibitors such as nelfinavir
US5925759A (en) 1996-09-05 1999-07-20 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Methods of making HIV-protease inhibitors and intermediates for making HIV-protease inhibitors
US5705647A (en) * 1996-09-05 1998-01-06 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Intermediates for making HIV-protease inhibitors
DK0847994T3 (da) 1996-12-11 2003-07-28 Hoffmann La Roche Fremgangsmåde til fremstilling af blandede anhydrider
CA2249747A1 (en) * 1996-12-27 1998-07-09 Tsutomu Mimoto Novel tripeptide compounds and anti-aids drugs
US5846979A (en) * 1997-02-28 1998-12-08 Gpi Nil Holdings, Inc. N-oxides of heterocyclic esters, amides, thioesters, and ketones
US6001851A (en) * 1997-03-13 1999-12-14 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
WO1999007677A1 (en) 1997-08-06 1999-02-18 Eli Lilly And Company 2-acylaminopropanamines as tachykinin receptor antagonists
PL338456A1 (en) * 1997-08-06 2000-11-06 Lilly Co Eli 2-acylaminopropanoamines as antagonists of the tachykinin receptor
US6084107A (en) * 1997-09-05 2000-07-04 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Intermediates for making HIV-protease inhibitors
EP1039886A4 (en) * 1997-12-08 2001-05-16 Scripps Research Inst A SMALL P3 REMAINING HIV / FIV PROTEASE INHIBITOR
US6803466B1 (en) * 1997-12-08 2004-10-12 The Scripps Research Institute HIV/FIV protease inhibitors having a small P3 residue
US6436989B1 (en) 1997-12-24 2002-08-20 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Prodrugs of aspartyl protease inhibitors
US6251906B1 (en) 1998-05-15 2001-06-26 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
WO1999065870A2 (en) 1998-06-19 1999-12-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Sulfonamide inhibitors of aspartyl protease
WO2000002862A1 (en) 1998-07-08 2000-01-20 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors
US6455734B1 (en) * 2000-08-09 2002-09-24 Magnesium Diagnostics, Inc. Antagonists of the magnesium binding defect as therapeutic agents and methods for treatment of abnormal physiological states
CN101979093B (zh) * 2001-01-17 2013-04-24 罗伯特·H·齐默尔 含有肽原料药和其它不易吸收的活性成分的组合物及其应用
WO2002088298A1 (en) 2001-04-27 2002-11-07 The Procter & Gamble Company Compounds, compositions, and methods for controlling biofilms
US7697966B2 (en) * 2002-03-08 2010-04-13 Sensys Medical, Inc. Noninvasive targeting system method and apparatus
EP1697348B1 (en) * 2003-12-11 2011-12-28 Abbott Laboratories Hiv protease inhibiting compounds
ATE539074T1 (de) * 2003-12-11 2012-01-15 Abbott Lab Die hiv-protease hemmende verbindungen
US7834043B2 (en) 2003-12-11 2010-11-16 Abbott Laboratories HIV protease inhibiting compounds
EP1604662A1 (en) * 2004-06-08 2005-12-14 Santhera Pharmaceuticals (Deutschland) Aktiengesellschaft 1-[(3R)-Amino-4-(2-fluoro-phenyl)-butyl]-pyrrolidine-(2R)-carboxylic acid benzyl amine derivatives and related compounds as dipeptidyl peptidase IV (DPP-IV) inhibitors for the treatment of type 2 diabetes mellitus
EP1702916A1 (en) * 2005-03-18 2006-09-20 Santhera Pharmaceuticals (Schweiz) GmbH DPP-IV inhibitors
US20070143561A1 (en) * 2005-12-21 2007-06-21 Gorobets Sergey A Methods for adaptive file data handling in non-volatile memories with a directly mapped file storage system
EP2725029A1 (en) 2012-10-29 2014-04-30 Laboratoire Biodim New antibacterial compounds and biological applications thereof

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4402969A (en) * 1981-03-23 1983-09-06 Merck & Co., Inc. Antihypertensive proline derivatives
US4470973A (en) * 1982-07-19 1984-09-11 E. R. Squibb & Sons, Inc. Substituted peptide compounds
US4621092A (en) * 1982-07-22 1986-11-04 E. R. Squibb & Sons, Inc. Substituted proline compounds, composition and method of use
US4575503A (en) * 1983-02-10 1986-03-11 Ciba-Geigy Corporation 3-Amino-[1]-benzazepin-2-one-1-alkanoic acids
US4812442A (en) * 1984-05-29 1989-03-14 Merck & Co., Inc. Tripeptide renin inhibitors
FR2575753B1 (fr) * 1985-01-07 1987-02-20 Adir Nouveaux derives peptidiques a structure polycyclique azotee, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
DK34086A (da) * 1985-01-23 1986-07-24 Abbott Lab Peptidylaminodioler
US4638010A (en) * 1985-02-28 1987-01-20 E. R. Squibb & Sons, Inc. Ester substituted aminoalkanoylureido amino and imino acid and ester compounds
US4636522A (en) * 1985-03-22 1987-01-13 E. R. Squibb & Sons, Inc. Acylaminoalkanoyl urethanes or thiourethanes
DE3529960A1 (de) * 1985-08-22 1987-03-05 Boehringer Ingelheim Kg Aminosaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung
AT383762B (de) * 1985-12-23 1987-08-25 Plansee Metallwerk Verfahren zur herstellung mehrkomponentiger, kongruent erschmelzender lotmaterialien
CA1286989C (en) * 1985-12-26 1991-07-30 A. Arthur Gottlieb Immunoamplifiers and related compositions
IL81234A (en) * 1986-01-16 1992-09-06 Abbott Lab Peptidylaminodiols,process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
NZ218937A (en) * 1986-01-16 1990-03-27 Abbott Lab Functionalised peptidyl aminodiols and -triols as renin inhibitors and pharmaceutical compositions
WO1988000939A1 (en) * 1986-07-25 1988-02-11 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Optically active amino alcohol derivatives and process for their preparation
EP0264106B1 (en) * 1986-10-14 1994-03-16 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. 5-Substituted amino-4-hydroxy-pentanoic acid derivatives and their use
US4863905A (en) * 1987-02-04 1989-09-05 Warner-Lambert Company Renin inhibitors II
FR2610934B1 (fr) * 1987-02-13 1989-05-05 Adir Nouveaux derives peptidiques a structure polycyclique azotee, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
DE3717631A1 (de) * 1987-05-26 1988-12-15 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
DE3733296A1 (de) * 1987-10-02 1989-04-20 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
IL89900A0 (en) * 1988-04-12 1989-12-15 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids and pharmaceutical compositions containing them
IL90218A0 (en) * 1988-05-13 1989-12-15 Abbott Lab Retroviral protease inhibitors
CA1340588C (en) * 1988-06-13 1999-06-08 Balraj Krishan Handa Amino acid derivatives
GB8927913D0 (en) * 1989-12-11 1990-02-14 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
GB8927915D0 (en) * 1989-12-11 1990-02-14 Hoffmann La Roche Novel alcohols

Also Published As

Publication number Publication date
PT90836A (pt) 1989-12-29
NO892407L (no) 1989-12-14
EP0346847A3 (en) 1991-10-23
EP0346847A2 (en) 1989-12-20
DE68915207D1 (de) 1994-06-16
FI95693C (fi) 1996-03-11
IE891879L (en) 1989-12-13
FI892881A (fi) 1989-12-14
AU3613089A (en) 1989-12-14
HU205898B (en) 1992-07-28
US5652369A (en) 1997-07-29
CA1340588C (en) 1999-06-08
PH26082A (en) 1992-02-06
JPH0242048A (ja) 1990-02-13
US5446161A (en) 1995-08-29
US5157041A (en) 1992-10-20
JP2515019B2 (ja) 1996-07-10
YU48068B (sh) 1996-10-18
FI892881A0 (fi) 1989-06-13
DK286389A (da) 1989-12-14
IL90550A (en) 1994-01-25
MC2040A1 (fr) 1990-05-30
EP0346847B1 (en) 1994-05-11
PT90836B (pt) 1994-11-30
ES2052815T3 (es) 1994-07-16
HUT51254A (en) 1990-04-28
YU120189A (en) 1991-10-31
NO175715B (no) 1994-08-15
IL90550A0 (en) 1990-01-18
DK172747B1 (da) 1999-06-28
US5554756A (en) 1996-09-10
NO892407D0 (no) 1989-06-12
AU624144B2 (en) 1992-06-04
US5620987A (en) 1997-04-15
NZ229480A (en) 1993-03-26
IE64495B1 (en) 1995-08-09
DK286389D0 (da) 1989-06-12
DE68915207T2 (de) 1994-08-18
NO175715C (no) 1994-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI95693B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappojohdannaisten va lmistamiseksi
US5196438A (en) Amino acid derivatives
US6265583B1 (en) Cyclic sulfone containing retroviral protease inhibitors
US6506759B1 (en) Retroviral protease inhibitors
PT99554A (pt) Processo para a preparacao de compostos hidroxilamina inibidores de protease retroviral
SK285688B6 (sk) Inhibítory retrovírusových proteáz na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín a ich použitie
US6022994A (en) Succinoylamino hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
EP0550924A1 (en) 2-Pyrrolidinone derivatives as HIV protease inhibitors
FI110938B (fi) Menetelmä virusperäisten proteaasien inhiboimiseksi käyttökelpoisten karboksiamidijohdannaisten valmistamiseksi ja menetelmässä käytettäviä välituotteita
US6538006B1 (en) Retroviral protease inhibitors
SI8911201A (sl) Derivati aminokislin
KR970005905B1 (ko) 아미노산 유도체, 이를 함유하는 약제 및 이의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application
FG Patent granted

Owner name: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG