SK285688B6 - Inhibítory retrovírusových proteáz na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín a ich použitie - Google Patents

Inhibítory retrovírusových proteáz na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK285688B6
SK285688B6 SK1224-97A SK122497A SK285688B6 SK 285688 B6 SK285688 B6 SK 285688B6 SK 122497 A SK122497 A SK 122497A SK 285688 B6 SK285688 B6 SK 285688B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
amino
phenylmethyl
hydroxy
methylpropyl
propyl
Prior art date
Application number
SK1224-97A
Other languages
English (en)
Other versions
SK122497A3 (en
Inventor
Daniel P. Getman
Gary A. Decrescenzo
John N. Freskos
Michael L. Vazquez
James A. Sikorski
Balekudru Devadas
Srinivasan Nagarajan
David L. Brown
Joseph J. Mcdonald
Original Assignee
G. D. Searle & Co.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by G. D. Searle & Co. filed Critical G. D. Searle & Co.
Publication of SK122497A3 publication Critical patent/SK122497A3/sk
Publication of SK285688B6 publication Critical patent/SK285688B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/62—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/10—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes
    • C07D319/14—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D319/16—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D319/18—Ethylenedioxybenzenes, not substituted on the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D339/00—Heterocyclic compounds containing rings having two sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D339/02—Five-membered rings
    • C07D339/06—Five-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 3, e.g. cyclic dithiocarbonates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C07K5/06069—Ser-amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Vybrané hydroxyetylaminosulfónamidové zlúčeniny aminokyselín všeobecného vzorca (I), ktoré sú účinné ako inhibítory proteáz retrovírusov, osobitne ako inhibítory proteázy vírusu HIV. Sú opísané prípravky ich obsahujúce a spôsoby na potlačenie retrovírusových proteáz, ako je napríklad proteáza vírusu ľudskej imunodeficiencie (HIV), použitie týchto zlúčenín na prípravu liečiva na profylaktickú prevenciu retrovírusovej infekcie alebo šírenia retrovírusu a na liečbu retrovírusovej infekcie.

Description

Oblasť techniky
Predložený vynález sa vzťahuje na inhibítory retrovírusových proteáz a osobitne sa vzťahuje na nové zlúčeniny, prípravky a spôsoby inhibície retrovírusových proteáz, ako je napríklad proteáza vírusu ľudskej imunodeficiencie (HIV). Tento vynález sa osobitne vzťahuje na inhibítory proteáz na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín, na prípravky a spôsoby inhibície retrovírusových proteáz, na profylaktickú prevenciu infekcie retrovírusmi alebo prevenciu šírenia retrovírusu, a na liečbu infekcie retrovírusom, napríklad infekcie retrovírusom HIV. Predmetný vynález sa vzťahuje aj na postupy prípravy takých zlúčenín, ako aj na medziprodukty užitočné pri takých postupoch.
Doterajší stav techniky
Počas replikačného cyklu retrovírusov sa produkty transkripcie génov gag a gag-pol prepisujú ako proteíny. Tieto proteíny sú potom spracovávané proteázou (alebo proteinázou) kódovanou vírusom, výsledkom čoho sú vírusové enzýmy a štruktúrne proteíny vírusového jadra. Býva bežnejšie, žc prekurzorové proteíny génu gag sa spracujú na proteíny vírusového jadra, a prekurzorové proteíny génu pol sa spracujú na vírusové enzýmy, napríklad na reverzné transkriptázy a retrovírusové proteázy. Bolo dokázané, že správne spracovanie prekurzorových proteínov retrovírusovou proteázou je nevyhnutné na zostavenie infekčných viriónov. Bolo napríklad zistené, že posunové mutácie v proteázovej oblasti génu pol vírusu HIV potláčajú spracovanie prekurzorového proteinu gag. Tiež bolo zistené, že cielenou mutagenézou zvyšku kyseliny asparágovej v aktívnom mieste proteázy vírusu HIV sa zabránilo spracovaniu prekurzorového proteinu gag. Takže boli robené pokusy potlačiť replikáciu vírusov potlačením účinku retrovírusových proteáz.
Inhibícia proteáz retrovírusov typicky zahŕňa prechodnú mimetickú zlúčeninu, čím sa retrovírusová proteáza vystaví účinkom mimetickej zlúčeniny, ktorá sa viaže (obvykle reverzibilne) na enzým v kompetícii s proteínmi gag a gag-pol. Tým sa potlačí špecifické spracovanie štruktúrnych proteínov a uvoľnenie samotnej retrovírusovej proteázy. Takto možno účinne potlačiť replikáciu retrovírusových proteáz.
Bolo navrhnutých niekoľko skupín zlúčenín osobitne na inhibíciu proteáz, napríklad na inhibíciu proteázy vírusu HIV. Také zlúčeniny obsahujú izostéry hydroxyetylamínu a redukované izostéry amidov. Pozri napríklad EP 0 346 847; EP 0 342 541; Roberts a spol., „Rational Design of PeptideBased Proteinase Inhibitors“, Scienče, 248, 358 (1990); a Erickson a spol., „Design Activity,“ and 2 8A Crystal Structure of a C2 Symmetric Inhibítor Complexed to HIV-1 Protease“, Science, 249, 527 (1990). Patenty US 5 157 041, WO 94/04491, WO 94/04492, WO 94/04493, WO 94/05639, WO 92/08701 a US patentová prihláška číslo 08/294 468 zaregistrovaná 23. augusta 1994 (všetky sú tu uvedené referenčné v plnom znení) napríklad opisujú izostér hydroxyetylamínu, hydroxyetylmočoviny alebo hydroxyetylsulfonamidu obsahujúce inhibítory retrovírusových proteáz.
Je známych niekoľko skupín zlúčenín, ktoré sú užitočné ako inhibítory proteolytického enzýmu reninu. Pozri napríklad patenty U. S. 4 599 198; U. K. 2 184 730; G. B. 2 209 752; EP 0 264 795; G. B. 2 200 115 a U. S. SIR H725. Z nich v G. B. 2 200 115, GB 2 209 752, EP 0 264 795, U. S. SIR H752 a U. S. 4 599 198 sa uvádzajú inhibítory reninu na báze hydroxyetylamínu obsahujúceho močovinu. EP
468 641 uvádza inhibítory reninu a medziprodukty na prípravu inhibítorov, ktoré zahŕňajú hydroxyetylamínové zlúčeniny s obsahom sulfónamidov, ako je napríklad 3-(t-butoxykarbonyljamino-cyklohexyl-1 -(fenylsulfonyl)amino-2(5)-butanol. Patent G. B. 2 200 115 tiež uvádza inhibítory reninu na báze hydroxyetylamínu obsahujúceho sulfamoyl, a EP 0 264 795 uvádza určité inhibítory reninu na báze hydroxyetylamínu obsahujúceho sulfonamidy. Ale je známe, že hoci renín aj HIV proteázy sú klasifikované ako aspartylproteázy, zlúčeniny, ktoré sú účinnými inhibítormi reninu, všeobecne nemajú predpovednú hodnotu pre účinnú inhibíciu HIV proteáz.
Podstata vynálezu
Predložený vynález sa vzťahuje na vybrané inhibitorové zlúčeniny retrovírusových proteáz, na ich analógy a farmaceutický prijateľné soli a estery. Predmetné zlúčeniny sú charakterizované ako inhibítorové zlúčeniny na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín. Zlúčeniny podľa vynálezu výhodne potláčajú retrovírusové proteázy, ako je napríklad proteáza vírusu ľudskej imunodeficiencie (HIV). Preto tento vynález tiež zahŕňa aj farmaceutické prípravky, spôsoby inhibície retrovírusových proteáz a spôsoby na prípravu liečiv na liečbu alebo profylaxiu retrovírusovej infekcie, ako je napríklad infekcia vírusom HIV. Predmetný vynález sa vzťahuje aj na postupy prípravy takých zlúčenín, ako aj medziproduktov užitočných v takých postupoch.
V súlade s týmto vynálezom, predkladá sa zlúčenina potláčajúca retrovírusové proteázy všeobecného vzorca
(D alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester, kde
R1 predstavuje alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alkenyl s 2 až 5 uhlíkovými arómami, alkinyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, hydroxyalkyl s 1 až 3 uhlíkovými atómami, alkoxyalkyl s 1 až 3 alkyl a 1 až 3 alkoxy uhlíkovými atómami, kyanoalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, imidazolvlmetyl, -CH2CONH2, -CH2CH2CONH2, -CH2S(O)2NH2, -CHjSCHj, -CH2S(O)CH3j -CH2S(O)2CH3, -C(CH3)2SCH3, -C(CH3)2S(O)CH3 alebo -C(CH3)2S(O)2CH3 radikály;
R2 predstavuje radikály alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, aralkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, alkyltioalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, aryltioalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami alebo cykloalkylalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami a 3 až 6 členným kruhom uhlíkových atómov;
R3 predstavuje alkyl radikál s 1 až 5 uhlíkovými atómami, cykloalkyl radikál s 5 až 8 členným kruhom alebo cykloalkylmetyl radikál s 3 až 6 členným kruhom;
R4 predstavuje radikály aryl, benzokondenzovaný 5 až 6 členný heteroarylový radikál alebo benzokondenzovaný 5 až 6 členný heterocykloradikál alebo radikál vzorca
kde A a B nezávisle od seba predstavujú O, S, SO alebo
SO2;
R6 predstavuje deutériový, alkylový s 1 až 5 uhlíkovými atómami, fluoro alebo chlóro radikál;
R7 predstavuje vodíkový, deutériový, metyl, fluoro alebo chlóro radikál; alebo radikál vzorca
O kde Z predstavuje O, S alebo NH; a R9 predstavuje radikál vzorca
kde Y predstavuje O, S alebo NH; X predstavuje väzbu, O alebo NR21;
R20 predstavuje vodík, alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alkenyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, alkinyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, aralkyl s 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, heteroaralkyl s 5 až 6 členným kruhom a 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, heterocykloalkyl s 5 až 6 členným kruhom a 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, aminoalkyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, N-monosubstituovaný alebo Ν,Ν-disubstituovaný aminoalkyl s 2 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, kde uvedené substituenty sú radikály alkyl s 1 až 3 uhlíkovými atómami, aralkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, karboxyalkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alkoxykarbonylalkyl s 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, kyanoalkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alebo hydroxyalkyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami;
R21 predstavuje vodíkový radikál alebo alkyl radikál s 1 až 3 uhlíkovými atómami; alebo radikál vzorca -NR20R21 predstavuje 5 až 6 členný heterocyklo radikál; a
R22 predstavuje alkyl radikál s 1 až 3 uhlíkovými atómami alebo R20R2,N-alkyl radikál s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, a výhodnejšie R22 predstavuje alkyl radikál s 1 až 3 uhlíkovými atómami; a výhodne R4 predstavuje fenyl, 2-naftyl, 4-metoxyfenyl, 4-hydroxyfenyl, 3,4-dimetoxyfenyl, 3-aminofenyl, 4-aminofenyl, benzotiazol-5-yl, benzotiazol-6-yl, 2-amino-benzotiazol-5-y1, 2-(metoxykarbonylamino)benzotiazol-5-yl, 2-aminobenzotiazol-6-yl, 2-(metoxykarbonylamino)benzotiazol-6-yl, 5-benzoxazolyl, 6-benzoxazolyl, 6-benzopyranyl, 3,4-dihydrobenzopyran-6-yl, 7-bcnzopyranyl, 3,4-dihydrobenzopyran-7-yl, 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl, benzofuran-5-yl, l,3-benzodioxol-5-yl, 2-metyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dimetyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dideutero-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-difluór-l,3-benzodioxol-5-yl, 1,4-benzodioxan-6-yl, 5-benzimidazolyl, 2-(metoxykarbonylamino)-benzimidazol-5-yl, 6-chinolyl, 7-chinolyl, 6-izochinolyl alebo 7-izochinolyl radikál; výhodnejšie R4 predstavuje fenyl, 2-naftyl, 4-mctoxyfenyl, 4-hydroxyfenyl, benzotiazol-5-yl, benzotiazol-6-yl, benzoxazol-5-yl, 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl, benzofuran-5-yl, l,3-benzodioxol-5-yl, 2-metyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dimetyl-1,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dideutero-l ,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-difluór-l,3-benzodioxol-5-yl, 1,4-benzodioxan-6-yl, 2-(metoxykarbonylamino)benzotiazol-5-yl, 2-(metoxykarbonylamino)benzotiazol-6-yl alebo 2-(metoxykarbonylamino)benzimidazol-5-yl radikál; a najvýhodnejšie R4 predstavuje fenyl, 4-metoxyfenyl, 4-hydroxyfenyl, benzotiazol-5-yl, benzotiazol-6-yl, 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl, benzofuran-5-yl, 1,3-benzodioxol-5-yl, 2-metyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dimetyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dideutero-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-difluór-l,3-benzodioxol-5-yl, 1,4-benzodioxan-6-yl, 2-(metoxykarbonylamino)benzotiazol-6-yl alebo 2-(metoxykarbonylamino)benzimidazol-5-yl radikál. Výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde farmaceutický prijateľnou soľou je soľ kyse liny chlorovodíkovej, soľ kyseliny sírovej, soľ kyseliny fosforečnej, soľ kyseliny šťaveľovej, soľ kyseliny maleínovej, soľ kyseliny jantárovej, soľ kyseliny citrónovej alebo soľ kyseliny metánsulfónovej. Obzvlášť výhodné sú tie zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde farmaceutický prijateľnou soľou je soľ kyseliny chlorovodíkovej, soľ kyseliny šťaveľovej, soľ kyseliny citrónovej alebo soľ kyseliny metánsulfónovej.
Absolútna stereochémia uhlíkového atómu -CH(OH)skupiny je výhodne (R). Absolútna stereochémia uhlíkového atómu -CH(R')- skupiny je výhodne (S). Absolútna stereochémia uhlíkového atómu -CH(R2)- skupín je výhodne (S).
Skupina zlúčenín ďalšieho záujmu v rámci vzorca (II) sú zlúčeniny obsiahnuté vo vzorci o R1 OH r3 alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo ester, kde R1, R2, R3 a R4 je, ako to bolo definované.
Výhodnejšia skupina zlúčenín v rámci vzorca (III) pozostáva zo zlúčenín alebo ich farmaceutický prijateľnej soli alebo esteru, kde n predstavuje 1;
R1 predstavuje sekundárny butyl, terciámy butyl, izopropyl, 3-propinyl alebo -C(CH3)2S(O)2CH3 radikál;
R2 predstavuje benzyl radikál; 4-fluórfenylmetyl alebo cyklohexylmetyl;
R3 predstavuje propyl, izoamyl, izobutyl, butyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklopentylmetyl alebo cyklohexylmetyl radikál; a
R4 je, ako to bolo definované.
Zaujímavé zlúčeniny zahŕňajú nasledujúce: 2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-1 -yljacetyl] amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[( 1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyI]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid;
2S-[[(pyrolidín-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmctyl)propyl]-4pentínamid;
2S-[[(pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3 -[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid; 2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3-metyl-butánamid;
2S-[[(pyrolidin-ll-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyljpropyl] -3 -metylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl] -3 S-metylpentánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-mctylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4pentínamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3-metylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]arnino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-4pentínamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotíazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4pentínamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amíno]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naflyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid;
2S-[[(pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylj-4-pentínamid;
2S-[[(pyrolidin-1 -yl)acetyl]arnino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l ,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid;
2S-[[(pyroíidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-l S-(fenylmetyl)propyl]-3-metylbutánamid;
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetylJamino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-l S-(fenylmetyl)propyl]-3 S-metylpentánamid; a
2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amíno]-N-[2R-hydroxy-3-[[(1,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-l S-(fenylmetyl)propyl]-4pentínamid.
Ako je to tu používané, výraz „alkyl“, samostatne alebo v kombinácii, znamená alkylový radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom obsahujúci výhodne 1 až 8 uhlíkových atómov, výhodnejšie 1 až 5 uhlíkových atómov, najvýhodnejšie 1 až 3 uhlíkové atómy. Príklady takých radikálov sú metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, izobutyl, sekundárny butyl, terciámy butyl, pentyl, izoamyl, hexyl, oktyl a podobne. Výraz „alkenyl“, samostatne alebo v kombinácii, znamená uhľovodíkový radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom obsahujúci jednu alebo viac dvojitých väzieb a výhodne 2 až 10 uhlíkových atómov, výhodnejšie 2 až 8 uhlíkových atómov, najvýhodnejšie 2 až 5 uhlíkových atómov. Príklady vhodných alkenylových radikálov sú etenyl, propenyl, 2-metylpropenyl, 1,4-butadienyl a podobne. Výraz „alkinyľ, samostatne alebo v kombinácii, znamená uhľovodíkový radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom obsahujúci jednu alebo viac trojitých väzieb a výhodne 2 až 10 uhlíkových atómov, výhodnejšie 2 až 5 uhlíkových atómov. Príklady alkynylových radikálov sú etynyl, propynyl (propargyl), butynyl, a podobne Výraz „alkoxy“, samostatne alebo v kombinácii, znamená alkyléterový radikál, kde výraz alkyl, je ako to bolo definované. Príklady vhodných alkyléterových radikálov sú metoxy, etoxy, n-propoxy, izopropoxy, n-butoxy, izobutoxy, sekundárny butoxy, terciámy butoxy a podobne. Výraz „cykloalkyl“, samostatne alebo v kombinácii, znamená nasýtený alebo čiastočne nasýtený monocyklický, bicyklický alebo tricyklický alkylový radikál, kde každá cyklická časť obsahuje výhodne 3 až 8 členný kruh uhlíkových atómov, výhodnejšie 3 až 7 členný kruh uhlíkových atómov, najvýhodnejšie 5 až 6 členný kruh uhlíkových atómov, a ktorý môže byť voliteľne benzokondenzovaný kruhový systém, ktorý je voliteľne substituovaný, ako to bolo definované v súvislosti s definíciou arylu. Príklady takých cykloalkylových radikálov sú cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, oktahydronaftyl, 2,3-dihydro-lHindenyl, adamantyl a podobne. „Bicyklický“ a „tricyklický“ v tu používanom zmysle zahŕňa tak kondenzované kruhové systémy, ako je naftyl a /3-karbolinyl, ako aj substituované kruhové systémy, ako je bifenyl, fcnylpyridyl, naftyl a difenylpiperazinyl. Výraz „cykloalkylalkyl“ znamená alkylový radikál, ako to bolo definované, ktorý je substituovaný cykloalkylovým radikálom, ako to bolo definované. Príklady takých cykloalkylalkylových radikálov sú cyklopropylmetyl, cyklobutylmetyl, cyklopentylmetyl, cyklohexylmetyl, 1-cyklopentyletyl, 1-cyklohexyletyl, 2-cyklopentyletyl, 2-cyklohcxyletyl, cyklobutylpropyl, cyklopentylpropyl, cyklohexylbutyl a podobne. Výraz „benzo“, samostatne alebo v kombinácii, znamená dvojmocný radikál C6H4= odvodený z benzénu. Výraz „aryl“, samostatne alebo v kombinácii, znamená fenyl alebo naftyl radikál, ktorý je voliteľne substituovaný jedným alebo viacerými substituentmi, ktoré môžu byť alkyl, alkoxy, halogén, hydroxy, amino, nitro, kyano, haloalkyl, karboxy, alkoxykarbonyl, cykloalkyl, hctcrocyklo, alkanoylamino, amido, amidino, alkoxykarbonylamino, N-alkylamidino, alkylamino, dialkylami4 no, N-alkylamido, Ν,Ν-dialkylamido, aralkoxykarbonylamino, alkyltio, alkylsulfmyl, alkylsulfonyl a podobne. Príklady aryl radikálov sú fenyl, p-tolyl, 4-metoxyfenyl, 4-(terc-butoxy)fenyl, 3-metyl-4-metoxyfenyl, 4-fluórfenyl, 4-chlórfenyl, 3-nitrofenyl, 3-aminofenyl, 3-acetamidofenyl, 4-acctamidofenyl, 2-mctyl-3-acetamidofenyl, 4-CF3-fenyl, 2-metyl-3-aminofenyl, 3-metyl-4-aminofenyl, 2-amino-3-metylfenyl, 2,4-dimetyl-3-aminofenyl, 4-hydroxyfenyl, 3-metyl-4-hydroxyfenyl, 1-naftyl, 2-naňyl, 3-amino-l-naftyl, 2-metyl-3-amino-l-naftyl, 6-amino-2-naftyl, 4,6-dimetoxy-2-naftyl, piperazinylfenyl a podobne. Výrazy „aralkyl“ a „aralkoxy“, samostatne alebo v kombinácii, znamená alkyl alebo alkoxy radikál, ako to bolo definované, v ktorom aspoň jeden vodíkový atóm je nahradený arylovým radikálom, ako to bolo definované, ako je napríklad benzyl, benzyloxy, 2-fenyletyl, dibenzylmetyl hydroxyfenylmetyl, metylfenylmetyl, difenylmetyl, difenylmetoxy, 4-metoxyfenylmetoxy a podobne. Výraz „aralkoxykarbonyl“, samostatne alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca aralkylO-C(O)-, v ktorom výraz „aralkyl“ má význam, ako to je uvedené. Príklady aralkoxykarbonylového radikálu sú benzyloxykarbonyl a 4-metoxyfenylmetoxykarbonyl. Výraz „aryloxy“ znamená radikál vzorca aryl-Ο-, v ktorom výraz, aryl má význam, ako to je uvedené. Výraz „alkanoyľ, samostatne alebo v kombinácii, znamená acyl radikál odvodený z alkánkarboxylovej kyseliny, príklady ktorého sú acetyl, propionyl, butyryl, valeryl, 4-metylvaleryl a podobne. Výraz „cykloalkylkarbonyl“ znamená acylový radikál vzorca cykloalkyl-C(O)-, v ktorom výraz „cykloalkyl“ má význam, ako to je uvedené, napríklad cyklopropylkarbonyl, cyklohexylkarbonyl, adamantylkarbonyl, 1,2,3,4-tetrahydro2-naftoyl, 2-acetamido-l,2,3,4-tetrahydro-2-naftoyl, 1-hydroxy-l,2,3,4-tetrahydro-6-naftoyl a podobne. Výraz „aralkanoyl“ znamená acyl radikál odvodený z arylom substituovanej alkánkarboxylovej kyseliny, ako je napríklad fenylacetyl, 3-fenylpropionyl (hydrocinamoyl), 4-fenylbutyryl, (2-naftyl)acetyl, 4-chlórhydrocinamoyl, 4-aminohydrocinamoyl, 4-metoxyhydrocinamoyl a podobne. Výraz „aroyl“ znamená acyl radikál odvodený z arylkarboxylovej kyseliny, „aryl“ má význam, ako to je uvedené. Príklady takých aroyl radikálov sú substituovaný a nesubstituovaný benzoyl alebo naftoyl, ako je napríklad benzoyl, 4-chlórbenzoyl, 4-karboxybenzoyl, 4-(benzyloxykarbonyl)benzoyl, 1-naftoyl, 2-naftoyl, 6-karboxy-2-naftoyl, 6-(benzyloxykarbonyl)-2-naftoyl, 3-benzyloxy-2-naftoyl, 3-hydroxy-2-naftoyl, 3-(benzyloxyformamido)-2-naftoyl a podobne. Výraz „heterocyklo“, samostatne alebo v kombinácii, znamená nasýtený alebo čiastočne nenasýtený monocyklický, bicyklický alebo tricyklický heterocyklický radikál obsahujúci aspoň jeden, výhodne 1 až 4, výhodnejšie 1 až 2 atómy dusíka, kyslíka alebo síry v kruhu a obsahujúci 3 až 8 členov v každom kruhu, výhodnejšie 3 až 7 členov v každom kruhu, a najvýhodnejšie 5 až 6 členov v každom kruhu. „Heterocyklo“ zahŕňa sulfóny, sulfoxidy, N-oxidy terciámych členov dusíkového kruhu, a karbocyklické kondenzované a benzokondenzované kruhové systémy. Také heterocyklo radikály môžu byť voliteľne substituované aspoň na jednom, výhodne na 1 až 4, výhodnejšie na 1 až 2 uhlíkových atómoch radikálmi halogén, alkyl, alkoxy, hydroxy, oxo, aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, amidino, N-alkylamidino, alkoxykarbonylamino, alkylsulfonylamino a podobne, a/alebo na sekundárnom dusíkovom atóme (t. j. -NH-) radikálmi hydroxy, alkyl, aralkoxykarbonyl, alkanoyl, heteroaralkyl, fenyl alebo fenylalkyl, a/alebo na terciámom dusíkovom atóme (t. j. =N-) radikálom oxido. „Heterocykloalkyl“ znamená alkyl radikál, ako to bolo definované, v ktorom aspoň jeden vodíkový atóm je nahradený hetero cyklo radikálom, ako to bolo definované, ako je pyrolidinylmetyl, tetrahydrotienylmetyl, pyridylmetyl a podobne. Výraz „heteroaryl“, samostatne alebo v kombinácii, znamená aromatický heterocyklo radikál, ako to bolo definované, ktorý je voliteľne substituovaný, ako to bolo definované v súvislosti s definovaním radikálov aryl a heterocyklo. Príklady takých heterocyklo a heteroaryl skupín sú pyrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morfolinyl, tiamorfolinyl, pyrolyl, imidazolyl (napr. imidazol 4-yl, 1-benzyloxykarbonylimidazol-4-yl atd’.), pyrazolyl, pyridyl, (napr. 2-(l-piperidinyl)pyridyl a 2-(4-benzylpiperazin-l-yl-l-pyridinyl atd’.), pyrazinyl, pyrimidinyl, furyl, tetrahydrofuryl, tienyl, tetrahydrotienyl a jeho sulfoxidovc a sulfónové deriváty, triazolyl, oxazolyl, tiazolyl, indolyl (napr. 2-indolyl atd’.), chinolinyl (napr. 2-chinolinyl, 3-chinolinyl, l-oxido-2-chinolinyl atd’.), izochinolinyl (napr. 1-izochinolinyl, 3-izochinolinyl atd’.), tetrahydrochinolinyl (napr. 1,2,3,4-tetrahydro-2-chinolyl atd’.), 1,2,3,4-tetrahydro izochinolinyl (napr. 1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo-izochinolinyl atd’.), chinoxalinyl, /3-karbolinyl, 2-benzofuránkarbonyl, 1-, 2-, 4- alebo 5-benzimidazolyl, metyléndioxyfen-4-yl, metyléndioxyfen-5-yl, etyléndioxyfenyl, benzotiazolyl, benzopyranyl, benzofuranyl, 2,3-dihydrobenzofuryl, benzoxazolyl, tiofenyl a podobne. Výraz „cykloalkylalkoxykarbonyl“ znamená acyl skupinu odvodenú z cykloalkylalkoxykarboxylovej kyseliny vzorca cykloalkylalkyl-O-COOH, kde cykloalkylalkyl má význam, ako to je uvedené. Výraz „aryloxyalkanoyl“ znamená acyl radikál vzorca aryl-O-alkanoyl, kde aryl a alkanoyl majú zmysel, ako to je uvedené. Výraz „heterocykloalkoxykarbonyl“ znamená acyl skupinu odvodenú z heterocykloalkyl-O-COOH, kde heterocykloalkyl, je ako to bolo definované. Výraz „heterocykloalkanoyľ je acyl radikál odvodený z heterocykloalkylkarboxylovej kyseliny, kde heterocyklo má význam, ako to je uvedené. Výraz „heterocykloalkoxykarbonyl“ znamená acyl radikál odvodený z heterocykloalkyl-O-COOH, kde heterocyklo má význam, ako to je uvedené. Výraz „heteroaryloxykarbonyl“ znamená acyl radikál odvodený z karboxylovej kyseliny predstavovanej skupinou heteroaryl-O-COOH, kde heteroaryl má význam, ako to je uvedené. Výraz „aminokarbonyl“ samostatne alebo v kombinácii znamená aminosubstituovanú karbonyl (karbamoyl) skupinu, kde aminoskupina môže byť primárna, sekundárna alebo terciáma aminoskupina obsahujúca substituenty, ktorými môže byť alkyl, aryl, aralkyl, cykloalkyl, eykloalkylalkyl radikál a podobne. Výraz „aminoalkanoyl“ znamená acyl skupinu odvodenú z aminosubstituovanej alkylkarboxylovej kyseliny, kde aminoskupina môže byť primárna, sekundárna alebo terciáma aminoskupina obsahujúca substituenty zvolenými spomedzi radikálov alkyl, aryl, aralkyl, cykloalkyl, eykloalkylalkyl a podobne. Výraz „halogén“ znamená fluór, chlór, bróm alebo jód. Výraz „haloalkyľ znamená alkyl radikál s významom, ako to je definované, kde jeden alebo viac vodíkov sa nahradil halogénom. Príklady takých haloalkyl radikálov sú chlórmetyl, 1-brómetyl, fluórmetyl, difluórmetyl, trifluórmetyl, 1,1,1 -trifluóretyl a podobne. Výraz „eliminovaná skupina“ (L alebo W) sa všeobecne vzťahuje na skupiny, ktoré sú ľahko nahraditeľné nukleofilom, ako je napr. amín, tiol alebo alkoholový nukleofil. Také eliminované skupiny sú v tejto problematike známe. Príklady takých eliminovaných skupín sú - ale sa neobmedzujú iba na ne-N-hydroxysukcinimid, N-hydroxybenzotriazol, halidy, trifláty, tosyláty a podobne. Výhodné eliminované skupiny sú tu v prípade potreby vyznačené.
Postupy na prípravu zlúčenín vzorca (I) sú opísané neskôr. Je potrebné si všimnúť, že je uvedený všeobecný postup, pretože sa vzťahuje na prípravu zlúčenín so špecifiko5 vaňou stereochémiou, napríklad, kde absolútna stereochémia hydroxylovej skupiny sa označuje ako (R). Ale také postupy sú vo všeobecnosti použiteľné aj v prípade zlúčenín opačnej konfigurácie, napríklad kde stereochémia hydroxylovej skupiny je (S). Okrem toho, zlúčeniny so stereochémiou (R) možno použiť na prípravu zlúčenín so stereochémiou (S). Napríklad, zlúčeninu so stereochémiou (R) možno invertovať na stereochémiu (S) pomocou známych metód.
Príprava zlúčenín vzorca (I)
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu uvedeného vzorca (I) možno pripraviť pomocou nasledovných všeobecných postupov, ako je to schematicky znázornené v schéme I a II
Schéma I
R4SO2X
X kopulačná reakcia kopulačná reakcia
S—R4 (a) odstránenie ochrany; X · Cl alebo Br.
Schéma II
R2
P1
r3nh2 pl
OH
R3
R2 kopulačná reakcia
R1 OH |3 a
R1 OH n /^^kopulačná reakcia
R2
OR1 r>u 1
OH
R3
X^kopulačná reakcia
OR1 OH R3 (a) odstránenie ochrany; X = Cí alebo Br; L - eliminovaná skupina.
N-Chránený derivát chlórketónu aminokyseliny vzorca R2
Λ' o
kde P predstavuje amino-ochrannú skupinu, a R2 je, ako to bolo definované, sa redukuje na zodpovedajúci alkohol pomocou vhodného redukčného činidla. Vhodné aminoochranné skupiny sú známe v problematike a zahŕňajú kar bobenzoxy, t-butoxykarbonyl a podobne. Výhodná aminoochranná skupina je karbobenzoxy. Výhodný N-chránený chlórketón je N-benzyloxykarbonyl-L-fenylalanín chlórmetylketón. Výhodné redukčné činidlo je hydrid sodno-boritý. Redukčná reakcia prebieha pri teplote medzi -10 °C a približne 25 °C, výhodne približne pri O °C, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je napríklad tetrahydrofurán a podobne. N-chránené chlórketóny sú komerčne dostupné, napríklad od firmy Bachem, Inc., Torrance, Califomia Alebo, chlórketóny možno pripraviť postupom navrhnutým v publikácii S.
J. Fittkau, J. Prakt Chem., 315, 1037 (1973), a s použitím N-ochranných postupov, ktoré sú v tejto problematike známe.
Haloalkohol možno použiť priamo, ako je to opísané, alebo výhodne reaguje, výhodne pri izbovej teplote, s vhodnou zásadou vo vhodnom rozpúšťadle. Produktom reakcie je N-chránený aminoepoxid vzorca
kde P a R2 sú, ako to bolo definované. Vhodné rozpúšťacie systémy na prípravu aminoepoxidu zahŕňajú etanol, metanol, izopropanol, tetrahydrofurán, dioxán a podobne vrátane ich zmesí. Vhodné zásady na prípravu epoxidu z redukovaného chlórketónu zahŕňajú hydroxid draselný, hydroxid sodný, t-butoxid draselný, DBU a podobne. Výhodná zásada je hydroxid draselný.
Alebo, chránený aminoepoxid možno pripraviť, ako je to opísané v PCT patentových prihláškach rovnakých prihlasovateľov, ktoré sú v konaní, čísla PCT/US93/04804 (WO 93/23388) a PCT/US94/1220I, a v US patentovej prihláške (Attomey docket) č. C-2860, z ktorých všetky sú tu referenčne uvedené v plnom znení, kde sa uvádzajú spôsoby prípravy chirálneho epoxidu, chirálneho kyánhydridu, chirálneho aminu a iných chirálnych medziproduktov užitočných v príprave inhibítorov retrovírusových proteáz, začínajúc s DL-, D- alebo L-aminokyselinou, ktorá reaguje s vhodnou amino-ochrannou skupinou vo vhodnom rozpúšťadle, produktom čoho je amino-chráncný ester aminokyseliny. Na ilustráciu, chránená L-aminokyselina nasledovného vzorca sa použije na prípravu inhibítorov tohto vynálezu
kde P3 predstavuje karboxylovú ochrannú skupinu, napríklad metyl, etyl, benzyl, terciámy butyl, 4-metoxyfenylmetyl a podobne; R2 je, ako to bolo definované; a P1 a P' a/alebo P' nezávisle od seba sú volené z amino-ochranných skupín vrátane - ale nielen - aralkyl, substituovaný aralkyl, cykloalkenylalkyl a substituovaný cykloalkenylalkyl, alyl, substituovaný alyl, acyl, alkoxykarbonyl, aralkoxykarbonyl a silyl. Príklady aralkylu zahŕňajú - ale neobmedzujú sa na - benzyl, orto-metylbenzyl, trityl a benzhydryl, ktoré môžu byť voliteľne substituované skupinami halogén, alkyl s C| až C8, alkoxy, hydroxy, nitro, alkylén, amino, alkylamino, acylamino a acyl alebo ich soli, ako napríklad fosfóniové a amónne soli. Príklady aryl skupín zahŕňajú fenyl, naftalenyl, indanyl, antracenyl, durenyl, 9-(9-fenylfluorenyl) a fenantrenyl, cykloalkenylalkyl alebo substituovaný cykloalkylenylalkyl radikály obsahujúce cykloalkyly s C6 až Ci0. Vhodné acyl skupiny zahŕňajú karbobenzoxy, t-butoxykarbonyl, izobutoxykarbonyl, benzoyl, substituovaný benzoyl, butyryl, acetyl, tri-fluóracetyl, tri-chlóracetyl, ftaloyl a podobne. Výhodne P’ a P2 sú nezávisle od seba volené z aralkylu a substituovaného aralkylu. Výhodnejšie, P1 aj P‘je benzyl.
Okrem toho, P1 a/alebo P2 a/alebo P' ochranné skupiny môžu vytvoriť heterocyklický kruh s dusíkom, na ktorý sú naviazané, napríklad 1,2-bis(metylén)benzén, ftalimidyl, sukcinimidyl, maleimidyl a podobne a kde tieto heterocyklické skupiny môžu ďalej zahŕňať susediace aryl a cykloal kyl kruhy. Okrem toho, heterocyklické skupiny môžu byť mono-, di- alebo trisubstituované, napríklad nitroftalimidyl. Výraz silyl sa vzťahuje na kremíkový atóm voliteľne substituovaný jednou alebo viacerými alkyl, aryl a aralkyl skupinami.
Vhodné silyl ochranné skupiny zahŕňajú - ale sa neobmedzujú na ne - trimetylsilyl, trietylsilyl, tri-izopropylsilyl, terciámy butyldimetylsilyl, dimetylfenylsilyl, l,2-bis(dimetylsilyljbenzén, l,2-bis(dimetylsilyl)etán a difenylmetylsilyl. Silylácia amínových funkcií s cieľom získať monoalebo bis-disilylamín môže poskytnúť deriváty aminoalkoholu, aminokyseliny, esterov aminokyselín a amidov aminokyselín. V prípade aminokyselín, esterov aminokyselín a amidov aminokyselín, redukcia karbonylovej funkcie poskytuje požadovaný mono- alebo bis-silyl aminoalkohol. Silylácia aminoalkoholu môže viesť k Ν,Ν,Ο-tri-silyl derivátu. Odstránenie silylovej funkcie zo silyléterovej funkcie sa dá ľahko urobiť reakciou napríklad s hydroxidom kovu alebo s fluoridom amónnym, buď ako samostatný reakčný krok, alebo in situ počas prípravy aminoaldehydu. Vhodné silylačné činidlá sú napríklad trimetylsilylchlorid, terciámy buty-dimetylsilylchlorid, fenyldimetylsilyl chlorid, difenylmetylsilylchlorid alebo ich kombinačné produkty s imidazolom alebo DMF. Spôsoby silylácie amínov a odstránenie silyl-ochranných skupín sú pre osoby oboznámené s touto problematikou známe. Spôsoby prípravy týchto amínových derivátov zo zodpovedajúcich aminokyselín, amidov aminokyselín alebo esterov aminokyselín sú tiež známe odborníkom v organickej chémii vrátane chémie aminokyselín/esterov aminokyselín alebo aminoalkoholov.
Amino-chránený ester L-aminokyseliny sa potom zredukuje na zodpovedajúci alkohol. Napríklad, amino-chránený ester L-aminokyseliny sa môže zredukovať hydridom diizobutylhlinitým pri -78 “C vo vhodnom rozpúšťadle, ako je napríklad toluén. Výhodne redukčné činidlá zahŕňajú hydrid lítno-hlinitý, hydrid lítno-boritý, bóran, hydrid triterc-butoxylhlinitý, komplex bóran/THF. Najvýhodnejšie, redukčné činidlo je hydrid diizobutylhlinitý (DiBAL-H) v toluéne.
Výsledný alkohol sa potom skonvertuje napríklad Swemovou oxidáciou na zodpovedajúci aldehyd vzorca
R2
P2 o kde P1 P2 a R2 sú, ako to bolo definované. Takto sa dichlórmetánový roztok alkoholu pridá do schladeného (-75 až -68 °C) roztoku oxalylchloridu v dichlórmetáne a DMSO v dichlórmetáne a mieša sa 35 minút.
Prijateľné oxidačné činidlá zahŕňajú napríklad komplex oxid sírový-pyridín a DMSO, oxalylchlorid a DMSO, acetylchlorid alebo anhydrid a DMSO, trifluóracetylchlorid alebo anhydrid a DMSO, metánsulfonylchlorid a DMSO alebo tetrahydrotiafén-S-oxid, toluénsulfonylbromid a DMSO, trifluórmetánsulfonyl anhydrid (anhydrid triflový) a DMSO, chlorid fosforečný a DMSO, dimetylfosfbrylchlorid a DMSO a chlórmravčan izobutylnatý a DMSO V oxidačných podmienkach opísaných Reetzom a spol. (Angew. Chem., 99, str. 1186, 1987; Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 26, str. 1141, 1987) bol použitý oxalylchlorid a DMSO pri -78 °C.
Výhodný spôsob oxidácie opísaný v tomto vynáleze je komplex oxidu sírového a pyridínu, trietylamín a DMSO pri izbovej teplote. Tento systém poskytuje výborné výťažky požadovaného chirálneho chráneného aminoaldehydu bez potreby čistenia, t. j. potreba chromatograficky čistiť kilogramy medziproduktov je tým vylúčená a kroky robené vo veľkom sú tak menej riskantné. Reakcia pri izbovej teplote tiež vylúčila potrebu používať nízkoteplotný reaktor, čo je pre tento postup z hľadiska komerčnej prípravy vhodnejšie.
Reakcia môže prebiehať v inertnej atmosfére, ako je napríklad dusík alebo argón, alebo v normálnom alebo suchom vzduchu, za atmosférického tlaku alebo v hermeticky uzavretej nádobe za pozitívneho tlaku. Výhodná je dusíková atmosféra. Alternatívne amínové zásady zahŕňajú napríklad tributylamín, triizopropylamin, N-metylpiperidín, N-metyl morfolín, azabicyklononan, diizopropyletylamín, 2,2,6,6-tetrametylpiperidín, Ν,Ν-dimctylaminopyridín, alebo zmesi týchto zásad. Výhodná zásada je trietylamín. Alternatívy proti čistému DMSO ako rozpúšťadlu zahŕňajú zmesi DMSO s neprotickými alebo halogenovanými rozpúšťadlami, ako je tetrahydrofurán, octan etylnatý, toluén, xylén, dichlórmetán, etyléndichlorid a podobne. Bipoláme aprotické rozpúšťadlá zahŕňajú acetonitril, dimetylformamid, dimetylacetamid, acetamid, tetrametylmočovinu a jej cyklický analóg, N-metylpyrolidon, sulfolan a podobne. Skôr než Ν,Ν-dibenzylfenylalaninol ako prekurzor aldehydu, uvedené deriváty fenylalaninolu môžu byť použité na získanie zodpovedajúceho N-monosubstituovaného [buď P1 alebo P2 = H] alebo Ν,Ν-disubstituovaného aldehydu.
Okrem toho, môže sa uskutočniť hydridová redukcia derivátu amidu alebo esteru zodpovedajúceho benzylu (alebo inej vhodnej ochrannej skupiny) dusíkom chráneného fenylalanínu, substituovaného fenylalanínu alebo cykloalkylového analógu derivátu fenylalanínu, aby sa získali aldehydy. Hydridový prenos jc doplnkovým spôsobom syntézy aldehydov za podmienok, kde je potrebné vyhnúť sa kondenzáciám aldehydov, pozri aj Oppenauerovu oxidáciu.
Aldehydy v tomto procese možno pripraviť aj metódami redukcie chráneného fenylalanínu a fenylalaninových analógov alebo ich amidových alebo esterových derivátov napríklad sodným amalgámom s HCI v etanole alebo lítiom alebo sodíkom alebo draslíkom alebo vápnikom v amoniaku. Reakčná teplota môže byť asi medzi -20 °C až 45 °C, a výhodne medzi asi 5 °C a asi 25 °C. Dva ďalšie spôsoby získania dusíkom chráneného aldehydu zahŕňajú oxidáciu zodpovedajúceho alkoholu s bieliacim činidlom v prítomnosti katalytického množstva voľného radikálu 2,2,6,6-tetrametyl-1 -pyridyloxy. V inej metóde, oxidácia alkoholu na aldehyd sa uskutočňuje katalytickým množstvom rutenistanu tetrapropylamónneho v prítomnosti N-metylmorfolín-N-oxidu.
Alebo, derivát kyslého chloridu chráneného fenylalanínu alebo derivátu fenylalanínu, ako to bolo uvedené, sa môže zredukovať vodíkom a katalyzátorom, ako je Pd nad uhličitanom bámatým alebo síranom bámatým a s ďalším činidlom moderujúcim katalyzátor alebo bez neho, ako je napríklad síra alebo tiol (Rosenmundova redukcia).
Výsledný aldehyd zo Swemovej oxidácie potom reaguje s halometyllítnym činidlom, ktoré vzniká in situ reakciou medzi alkyllítnou alebo aryllitnou zlúčeninou a dihalometánom vzorca X'CH2X2, kde X1 a X2 nezávisle od seba predstavuje I, Br alebo Cl. Napríklad, roztok aldehydu a chlórjódmetánu v THF sa ochladí na -78 °C a pridá sa roztok n-butyllítia v hexáne. Výsledný produkt je zmes diastereomérov zodpovedajúcich amino-chránených epoxidov vzorcov.
Diastereoméry možno odseparovať, napríklad chromatograficky, alebo, ak už zreagovali v ďalších krokoch, diastereoméme produkty možno oddeliť. Namiesto L-aminokyseliny môže byť použitá D-aminokyselina s cieľom pripraviť zlúčeniny so stereochémiou (S) na uhlíku viazanom na R2.
Pridanie chlórmetyllítia alebo brómmetyllítia k chirálnemu aminoaldehydu je vysoko diastereoselektívne. Výhodne, chlórmetyllítium alebo brómmetyllítium vzniká in situ z reakcie dihalometánu a n-butyllítia. Prijateľné metylénujúce halometány zahŕňajú chlórjódmetán, brómchlórmetán, dibrómmetán, dijódmetán, brómfluórmetán a podobne. Sulfonatcstcr adičného produktu, napríklad bromovodíka k formaldehydu, je tiež metylénujúce činidlo. Výhodným rozpúšťadlom je tetrahydrofurán, ale môžu byť použité aj alternatívne rozpúšťadlá, ako je napríklad toluén, dimetoxyetán, etyléndichlorid, metylénchlorid, a to buď ako samostatné rozpúšťadlá alebo ako zmesi. Bipoláme aprotické rozpúšťadlá, ako je napríklad acetonitril, DMF, N-metylpyrolidón, sú užitočné ako rozpúšťadlá alebo ako súčasť zmesi rozpúšťadiel. Reakcia môže prebiehať v inertnej atmosfére, ako je dusík alebo argón. n-Butyllitium môže byť substituované inými organometalickými činidlami, ako jc napríklad metyllítium, tcrc-butyllítium, sek-butyllítium, fenyllítium, fenylsodík a podobne. Reakcia môže prebiehať pri teplotách medzi asi -80 “C až 0 °C, ale výhodne medzi asi -80 °C až -20 °C. Najvýhodnejšie reakčné teploty sú medzi -40 °C až -15 °C. Reagencie možno pridávať jednotlivo, no za určitých podmienok je výhodné pridávať ich hromadne. Výhodný tlak reakcie je tlak atmosférický, ale za určitých podmienok, ako je napríklad prostredie s vysokou vlhkosťou, je vhodný pozitívny tlak.
Alternatívne metódy konverzie na epoxidy tohto vynálezu zahŕňajú substitúciu iných nabitých metylenačných druhov prekurzorov, po ktorej nasleduje úprava zásadou za vzniku analogického aniónu. Príklady týchto druhov zahŕňajú trimetylsulfoxóniumtosylát alebo triflát, tetrametylamóniumhalogenid, metyldifenylsulfoxóniumhalogenid, kde halogenidom je chlorid, bromid alebo jodid.
Konverzia aldehydov tohto vynálezu na ich epoxidový derivát môže prebiehať mnohými krokmi. Napríklad pridanie aniónu tioanizolu pripraveného napríklad z butyl- alebo aryllítiového činidla k chránenému aminoaldehydu, oxidácia výsledného chráneného aminosulfidalkoholu so známymi oxidačnými činidlami, ako je napríklad peroxid vodíka, terc-butylchlóman, bieliace činidlo, jodistan sodný, s produktom sulfoxidu. Alkylácia sulfoxidu napríklad metyljodidom alebo bromidom, metyltosylátom, metylmesylátom, metyltriflátom, etylbromidom, izopropylbromidom, benzylchloridom a podobne v prítomnosti organickej alebo anorganickej zásady. Alebo, chránený aminosulfidalkohol môže byť alkylovaný napríklad uvedenými alkylačnými činidlami, výsledkom čoho sú sulfóniové soli, ktoré sa potom terc-amínom alebo minerálnymi zásadami prekonvertujú na predmetné epoxidy.
Požadované epoxidy vznikli za najvýhodnejších podmienok diastereoselektívne v pomerných množstvách aspoň 85 : 15 (S : R) Produkt možno vyčistiť chromatograficky s výsledkom diastereoméme a enantioméme čistého produktu, aleje pohodlnejšie použiť ho na prípravu inhibítorov retrovírusových proteáz priamo, bez purifikácie. Predchádzajúci proces je použiteľný tak na zmesí optických izomérov, ako aj na rozložené zlúčeniny. Ak sa požaduje nejaký konkrétny optický izomér, môže sa zvoliť voľbou východiskového materiálu, ktorým môže byť napríklad L-fenylalanín, D-fenylalanín, L-fenylalaninol, D-fenylalaninol, D-hexahydrofenylalaninol a podobne, alebo rozlíše9 nie sa môže uskutočniť v intermediámych alebo koncových krokoch. Chirálne pomocné prostriedky, ako je napríklad jeden alebo dva ekvivalenty kyseliny gáforsulfónovej citrónovej, gáfrovej, 2-metoxyfenyloctovej a podobne, môžu byť použité na tvorbu solí, esterov alebo amidov zlúčenín tohto vynálezu. Tieto zlúčeniny alebo deriváty možno vykryštalizovať alebo odseparovať chromatograficky pomocou buď chirálnej alebo nechirálnej kolóny, ako je to pre osoby oboznámené s touto problematikou známe.
Aminoepoxid potom reaguje vo vhodnom rozpúšťadle s rovnakým množstvom, alebo výhodne s nadbytkom, požadovaného amínu vzorca R3NH2, kde R3 je vodík alebo je, ako to bolo definované. Rekcia môže prebiehať za veľkého rozpätia teploty, napríklad pri teplotách asi medzi 10 °C až asi 100 °C, no výhodne, ale nie nevyhnutne, prebieha pri teplote pri ktorej rozpúšťadlo začína refluxovať. Vhodné rozpúšťacie systémy zahŕňajú protické, neprotické a bipoláme aprotické organické rozpúšťadlá, ako sú napríklad tie, kde rozpúšťadlom je alkohol, ako je napríklad metanol, etanol, izopropanol a podobne, étery, ako je napríklad tetrahydroľurán, dioxán a podobne, a toluén, N,N-dimetylformamid, dimetylsulfoxid, a ich zmesi. Výhodným rozpúšťadlom je izopropanol. Výsledný produkt je derivát 3-(N-amino-chránený)-3-(R2)-l-(NHR3)-propan-2-olu (v ďalšom nazývaný ako aminoalkohol) a môže sa vyjadriť vzorcami:
kde P, P1 P2, R2 a R3 je, ako je uvedené. Alebo, namiesto aminoepoxidu sa môže použiť haloalkohol.
Definovaný aminoalkohol potom reaguje vo vhodnom rozpúšťadle so sulfonylchloridom R4SO2C1, sulfonylbromidom R4SO2Br alebo so zodpovedajúcim sulfonylanhydridom, výhodne v prítomnosti kyslého akceptora radikálov. Vhodné rozpúšťadlá, v ktorých reakcia môže prebiehať, zahŕňajú metylénchlorid, tetrahydrofurán a podobne. Vhodné kyslé akceptory radikálov zahŕňajú trietylamín, pyridín a podobne. Výsledný derivát sulfónamidu môže byť vyjadrený v závislosti od použitého epoxidu, vzorcami
kde P, P1, P2, R2, R3 a R4 je, ako to je definované. Tieto medziprodukty sú užitočné pri príprave inhibítorových zlúčenín tohto vynálezu.
Sulfonylhalogenidy vzorca R4SO2X možno pripraviť reakciou vhodného arylu, heteroarylu a benzokondenzovaných heterocyklických Grignardových alebo lítiových činidiel so sulfurylchloridom alebo oxidom siričitým s následnou oxidáciou halogénom, výhodne chlórom. Arylové, heteroarylové a benzokondenzované heterocyklické Grignardové alebo lítiové činidlá možno pripraviť z ich zodpovedajúcich helogenidových (ako napríklad chloro alebo bromo) zlúčenín, ktoré sú komerčne dostupné alebo sa ľahko pripravia z komerčne dostupných východiskových materiálov pomocou metód známych v problematike. Tiež, tioly možno oxidovať na sulfonylchloridy s použitím chlóru v prítomnosti vody za starostlivo kontrolovaných podmienok.
Navyše, sulfónové kyseliny, ako sú napríklad arylsulfónové kyseliny, môžu byť skonvertované na sulfonylhalogenidy s použitím činidiel, ako je PC15, SOC12, C1C(O)C(O)C1 a podobne, a tiež na anhydridy s použitím vhodných dehyd ratačných činidiel. Sulfónové kyseliny možno zase pripraviť pomocou postupov známych v tejto problematike. Niektoré sulfónové kyseliny sú komerčne dostupné. Namiesto sulfonylhalogenidov možno použiť sulfinylhalogenidy (R4SOX) alebo sulfenylhalogenidy (R4SX) na prípravu zlúčenín, kde -SO2- skupina je nahradená skupinou -SO- alebo -S-. Arylsulfónové kyseliny, benzokondenzované heterocyklosulfónové kyseliny alebo heteroarylsulfónové kyseliny možno pripraviť sulfonáciou aromatického jadra metódami známymi v tejto problematike, napríklad reakciou s kyselinou sírovou, SO3, SO3 komplexmi, ako je napríklad DMF(SO3), pyridín(SO3), N,N-dimetylacetamid(SO3) a podobne. Výhodne, arylsulfonylhalogenidy sa pripravujú z aromatických zlúčenín reakciou s DMF(SO3) a SOC12 alebo CIC(O)C(O)C1. Reakcie môžu prebiehať postupne alebo aj vjedinej nádobe.
Arylsulfónové kyseliny, benzokondenzované heterocyklosulfónové kyseliny, heteroarylsulfónové kyseliny, arylmerkaptány, benzokondenzované heterocyklomerkaptány, heteroarylmerkaptány, arylhalogenidy, benzokondenzované heterocyklohalogenidy, heteroarylhalogenidy a podobne sú komerčne dostupné alebo sa môžu ľahko pripraviť z východiskových materiálov komerčne dostupných pomocou štandardných metód známych v tejto problematike. Napríklad mnoho sulfónových kyselín (R4SO3H) vyjadrených vzorcami
kde A, B, Z, R6, R7 a R9 je, ako to bolo definované, pripravili z 1,2-benzénditiolu, 2-merkaptoetanolu, 1,2-benzéndiolu, 2-aminobenzotiazolu, benzotiazolu, 2-aminobenzimidazolu, benzimidazolu a podobne komerčne dostupných zlúčenín Carter, US patent 4 595 407; Ehrenfreund a spol., US patent 4 634 465; Yoder a spol., J. Heterocycl. Chem. 4: 166 - 167 (1967); Cóle a spol., Aust. J. Chem. 33: 675 až 680 (1980); Cabiddu a spol., Synthesis 797 - 798 (1976); Ncube a spol., Tet. Letters 2345 - 2348 (1978); Ncube a spol., Tet. Letters 255 - 256 (1977); Ansink & Cerfontain, Rec. Tráv. Chim. Pays-Bas 108: 395 - 403 (1989); a Kajihara & Tsuchiya, EP 638564A1, z ktorých sú tu všetky zahrnuté v odkaze ako celok. Napríklad 1,2-benzénditiol, 2-merkaptoetanol alebo 1,2-benzéndiol môže reagovať s R6R7C(Ľ)2, kde Ľ je, ako to je definované, výhodne Br alebo 1, v prítomnosti zásady, ako je napríklad hydroxid, alebo R6R7C=O v prítomnosti kyseliny, ako je napríklad kyselina toluénsulfónová, alebo P2O5, na prípravu substituovaného benzokondenzovaného heterocyklu vzorca αχ ktorý sa potom môže sulfonylovať na uvedenú sulfónovú kyselinu. Napríklad CF2Br2 alebo CD2Br2 môže reagovať s 1,2-benzénditiolom, 2-merkaptánfenolom alebo 1,2-benzéndiolom v prítomností zásady, výsledkom čoho sú zlúčeniny (XX (XX.
kde A a B je O alebo S a D je atóm deutéria. Tiež ak A a/alebo B predstavuje S, síra sa môže oxidovať pomocou opísaných metód na sulfónové alebo sulfoxidové deriváty.
Po príprave sulfónamidového derivátu, amino-ochranné skupiny P alebo P1 a P2 sa odstránia za podmienok, ktoré neovplyvnia ostatnú časť molekuly. Tieto metódy sú v tejto problematike známe a zahŕňajú kyslú hydrolýzu, hydrogenolýzu a podobne. Výhodná metóda zahŕňa odstránenie ochrannej skupiny, napríklad odstránenie karbobenzoxyskupiny hydrogenolýzou s použitím paládia na uhlíku vo vhodnom rozpúšťačom systéme, ako je napríklad alkohol, kyselina octová a podobne, alebo ich zmesi. Tam kde ochranná skupina je terc-butoxykarbonylová skupina, môže sa odstrániť pomocou anorganickej alebo organickej kyseliny, napríklad HC1 alebo kyseliny trifluóroctovej, vo vhodnom rozpúšťačom systéme, napríklad v dioxáne alebo metylénchloride. Výsledný produkt je derivát amínovej soli.
Po neutralizácii soli sa potom amín naviaže na DL-, D-, alebo L-aminokyselinu podľa vzorca PNHCH(R’)COOH, kde P a R1 je, ako to bolo definované, potom sa odstráni ochrana aminu, ako to je opísané, a naviaže sa na «-r o
kde W je eliminovaná skupina, ako je napríklad mesylát, bromo alebo chloro, a L je eliminovaná skupina, ako je napríklad halogenid, anhydrid, aktívny ester a podobne. Môže sa použiť brómacetylhalogenid, chlóracetylhalogenid alebo zodpovedajúci anhydrid. Napokon, reakcia uvedeného medziproduktu s cyklickým amínom vzorca
Qmôže produkovať protivírusové zlúčeniny predloženého vynálezu, ktoré majú vzorec
OR2 O O
O R1 OH R3 kde R1, R2 R3 a R4 je, ako to bolo definované. Amíny vzorca
sú komerčne dostupné, ako napríklad pyrolidín, 2-pyrolidínmetanol, 3-pyrolidinol, 2-(metoxymetol)pyrolidín, kyselina kainová, piperidín, 3-hydroxypiperidín, 4-hydroxypiperidín, 2-piperidínmetanol, 2,3-dihydroindol, izoindolín, 1,2,3,4-tetrahydroizochinolín, 1,2,3,4-tctrahydrochinolín a podobne; alebo sa dajú ľahko pripraviť z komerčne dostupných východiskových materiálov pomocou štandardných metód známych v problematike, ako napr. 4-hydroxyprolín, 3-hydroxypiperidín, 4-hydroxypiperidin, 3-pyrolin, kyselina izonipekotinová, 5-hydroxyindol, kyselina 5-hydroxyindol-3-octová, 5,6-dimetoxyindol, izochinolín, chinolín, 5-hydroxyizochinolín, 8-hydroxy-5-nitrochinolín, 6,7-dimetoxy-l,2,3,4-tetrahydroizochinolín a podobne.
Alebo, po neutralizácii soli sa potom amín naviaže na DL-, D-, alebo L-aminokyselinu vzorca PNHCH(R')COOH, kde P a R1 je, ako to bolo definované, potom sa odstráni ochrana aminu, ako to je už opísané, a amín bez ochrany sa naviaže na cyklickú aminokyselinu vzorca
ako je napríklad kyselina pyrolidín-1-yloctová, a podobne, výsledkom čoho sú proti vírusové zlúčeniny tohto vynálezu. Cyklické aminokyseliny sú komerčne dostupné alebo sa dajú ľahko pripraviť z chránenej karboxylovej kyseliny s eliminovanou skupinou W (definovanou skôr) reakciou s cyklickým amínom, ako to je uvedené na schéme III, alebo reakciou cyklického aminu s vhodným substituovaným ketónom v prítomnosti kyanidového aniónu, po ktorej nasleduje hydrolýza kyanoskupiny na zodpovedajúcu karboxylovú kyselinu, ako to je uvedené na schéme IV, kde P3 je definovaný skôr.
SCHÉMA III or
SCHÉMA IV
Ο™ + A. Q-».
/ hydrolýza
Alebo, po neutralizácii soli sa potom amín naviaže na DL-, D-, alebo L-aminokyselinu podľa vzorca QvA kde R1 je definované, čo sa dá pripraviť podobne ako sú metódy opísané vyššie u DL-, D-, alebo L-aminokyseliny vzorca NH2CH(R’)COOP3, kde P3 a R1 je, ako to bolo definované.
DL- D-, alebo L-aminokyseliny vzorca PNHCH(R')COOH alebo NH2CH(R’)COOP3, kde P, P3 a R1 jc, ako to bolo definované, sú komerčne dostupné (Sigma Chemical Co.), alebo sa ľahko pripravia pomocou štandardných metód známych v problematike z ľahko dostupných východiskových materiálov. Výhodne, P je benzyloxykarbonyl alebo terc-butoxykarbonyl radikál a P3 je benzyl alebo terc-butyl radikál. Na zlúčenie aminokyselín a amínov sa môžu použiť štandardné metódy. Skupina karboxylovej kyseliny reaguje za vzniku anhydridu, zmesného anhydridu, kyslého halogenidu, ako je napríklad chlorid alebo bromid, alebo aktívneho esteru, ako sú napríklad estery N-hydroxysukcínimidu, HOBT a podobne, pomocou známych postupov a podmienok. Vhodné rozpúšťacie systémy zahŕňajú tetrahydrofurán, etyléter, metyl-terc-butyléter, metylénchlorid, Ν,Ν-dimctylformamid a podobne vrátane ich zmesí.
Alternatívne, chránený aminoalkohol z otvorenia epoxidu môže byť ďalej chránený na novonaviazanej aminoskupine ochrannou skupinou P', ktorá sa neodstráni pri odstránení amino-ochranných skupín P alebo P1 a P2, napríklad P' sa dá selektívne odstrániť. Odborník v tejto problematike môže zvoliť vhodné kombinácie P', P, P1 a P2. Napríklad, vhodné kombinácie sú P - Cbz a P' = Boe; P' = Cbz a P = Boe; P1 = Cbz, P2 = benzyl a P' = Boe; a P1 = P2 = = benzyl a P' = Boe. Výsledná zlúčenina vyjadrená vzorcom
R2 R2
OH R3 môže pretrvať až do konca syntézy za poskytnutia produktu vzorca
O R1 OH R3 kde P', R1, R2, R3 je definované. Zvyšok syntézy sa môže uskutočniť podľa potreby, a to buď pridaním požadovaných zvyškov alebo skupín po jednom, alebo ako vopred vytvorená molekula zložená z viac ako jedného zvyšku alebo skupiny v jednom kroku. Ten prvý prístup je metóda sekvenčnej syntézy, a ten druhý je metóda konvergentnej syntézy. V tomto štádiu sú možné aj syntetické transformácie. Ochranná skupina P' sa potom selektívne odstráni a výsledný amín reaguje so sulfonylchloridom R4SO2C1, sulfonylbromidom R4SO2Br alebo so zodpovedajúcim sulfonylanhydridom, výhodne v prítomnosti kyslého akceptora radikálov, za vzniku zlúčenín tohto vynálezu vzorca
kde R1, R2, R3, R4 sú definované. Toto selektívne odstránenie ochrany a konverzia na sulíbnamid sa môže uskutočniť buď na konci syntézy, alebo, podľa potreby, na ktoromkoľvek vhodnom medzistupni.
Uvedené chemické reakcie sa všeobecne uvádzajú v zmysle ich najširšieho použitia pri príprave zlúčenín podľa predloženého vynálezu. Môže sa však stať, že reakcie sa nebudú dať použiť podľa potreby pre každú zlúčeninu uvedeného rozsahu. Zlúčeniny, pri ktorých k tomuto dôjde, sa budú dať ľahko zistiť osobami skúsenými v tejto problematike. Vo všetkých takých prípadoch sa ktorákoľvek reakcia bude dať vykonať konvenčnými modifikáciami známymi pre tých, ktorí sa v problematike vyznajú, napríklad vhodnou ochranou interferujúcich skupín, voľbou alternatívnych konvenčných činidiel, rutinnou modifikáciou reakčných podmienok a podobne, alebo iné reakcie tu uvedené, alebo inak konvenčné, sa budú dať použiť na prípravu zodpovedajúcich zlúčenín tohto vynálezu. Vo všetkých preparatívnych metódach sú všetky východiskové materiály známe, alebo sa dajú ľahko pripraviť zo známych východiskových materiálov.
Bez uvádzania ďalších podrobností sa predpokladá, že osoba skúsená v danej problematike môže s použitím predošlého opisu využiť tento vynález v plnom rozsahu. Nasledovné výhodné špecifické uskutočnenia treba preto chápať iba ako ilustráciu a nijakým spôsobom ako obmedzenie vynálezu v akomkoľvek smere.
Všetky činidlá boli použité tak, ako ich dostali, čiže bez purifikácie. Všetky protónové a uhlíkové NMR spektrá sa namerali na spektrometri jadrovej magnetickej rezonancie Varian, buď typ VXR-300 alebo VXR-400.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Nasledovné príklady ilustrujú prípravu inhibítorových zlúčenín tohto vynálezu a medziproduktov vhodných na prípravu inhibítorových zlúčenín tohto vynálezu.
Príklad 1
Príprava 2S-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanolu
Metóda 1: 2S-[Bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanol z DIBAL redukcie fenylmetylesteru N,N-bis(fenylmetyl)-L-fenylalaninu
Krok 1:
Roztok L-fenylalanínu (50,0 g, 0,302 mól), hydroxid sodný (24,2 g, 0,605 mól) a uhličitan draselný (83,6 g, 0,605 mól) vo vode (500 ml) sa ohrial na 97 °C. Potom sa pomaly pridal benzylbromid (108,5 ml, 0,605 mól) (trvanie pridávania 25 min). Zmes sa miešala pri 97 °C 30 minút v dusíkovej atmosfére. Zmes sa ochladila na izbovú teplotu a vyextrahovala sa toluénom (2 x 250 ml). Kombinované organické vrstvy sa premyli vodou a solankou, vysušili sa nad síranom horečnatým, prefiltrovali sa a skoncentrovali do oleja. Totožnosť produktu bola potvrdená nasledovne: Analytická TLC (10 % octan etylnatý/hexán, silikagél) ukázala, že hlavná zložka pri hodnote Rf = 0,32 je požadovaná tribenzylovaná zlúčenina, fenylmetylester N,N-bis(fenyImetyl)-L-fenylalanínu. Táto zlúčenina sa dá vyčistiť stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 15 % octan etylnatý/hexán). Obvykle produkt býva dosť čistý na to, aby sa použil priamo v nasledujúcom kro ku bez ďalšej purifikácie. ’H NMR spektrum bolo v súlade s publikovanou literatúrou. ’H NMR (CDCI3) δ, 3,00 a 3,14 (ABX systém, 2H, Jab = 14,1 Hz, J/c< = 7,3 Hz a JBX = 5,9 Hz), 3,54 a 3,92 (AB systém, 4H, JAB= 13,9 Hz), 3,71 (t, 1H, J = = 7,6 Hz), 5,11a 5,23 (AB systém, 2H, JAB = 12,3 Hz), a 7,18 (m, 20 H) EIMS: m/z 434 (M-l)
Krok 2:
Benzylovaný fenylmetylester fenylalanínu (0,302 mól) z predchádzajúcej reakcie sa rozpustil v toluéne (750 ml) a vychladli sa na -55 °C. 1,5 M roztok DIBAL v toluéne (443,9 ml, 0,666 mól) sa pridal takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala medzi -55 až -50 °C (trvanie pridávania 1 h). Zmes sa miešala 20 min. v dusíkovej atmosfére a potom sa stlmila pri -55 °C pomalým pridávaním metanolu (37 ml). Studený roztok sa potom vylial do studeného (5 °C) roztoku 1,5 N HC1 (1,8 1). Vyzrážaná tuhá látka (približne 138 g) sa odfiltrovala a premyla sa s toluénom. Tuhý materiál sa suspendoval v zmesi toluénu (400 ml) a vody (100 ml). Zmes sa vychladila na 5 °C a vystavila sa účinkom 2,5 N NaOH (186 ml) a potom sa miešala pri izbovej teplote, až kým sa tuhá látka nerozpustila. Toluénová vrstva sa odseparovala od vodnej fázy a premyla sa s vodou a solankou, vysušila sa nad síranom horečnatým, odfiltrovala sa a skoncentrovala do objemu 75 ml (89 g). Ku zvyšku sa pridal octan etylnatý (25 ml) a hexán (25 ml), potom sa požadovaný alkoholový produkt začal kryštalizovať. Po 30 min. sa pridalo ďalších 50 ml hexánu, aby sa podporila ďalšia kryštalizácia. Tuhá látka sa odfiltrovala a premyla s 50 ml hexánu so získaním 34,9 g prvej várky produktu. Druhá várka produktu (5,6 g) sa izolovala opätovnou filtráciou kryštalizačného lúhu. Obe várky sa skombinovali a opätovne sa nechali vykryštalizovať z octanu etylnatého (20 ml) a hexánu (30 ml) s produkciou 40 g /3S-2-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanolu, 40 % výťažok z L-fenylalanínu. Ďalších 7 g (7 %) produktu možno získať rekryštalizáciou skoncentrovaného kryštalizačného lúhu. TLC produktu Rf = 0,23 (10 % octan etylnatý/hexán, silikagél); ’H NMR (CDClj) ô 2,44 (m, 1H), 3,09 (m, 2H), 3,33 (m, 1H), 3,48 a 3,92 (AB systém, 4H, JAB= 13,3 Hz) 3,52 (m, 1H) a 7,23 (m, 15 H); [a]D25 + 42,4 (c 1,45, CH2C12); DSC 77,67 °C; analýza: vypočítané pre C23H25ON: C, 83,34; H 7,60; N, 4,23. Zistené: C, 83,43; H, 7,59; N, 4,22. HPLC na chirálnej stacionárnej fáze: Kolóna Cyclobond 1 SP (250 x 4,6 mm vnútorný priemer), mobilná fáza: pufer metanol/octan trietylamónny pH 4,2 (58 : 42, objem/objem), rýchlosť prietoku 0,5 ml/min., detekcia pomocou detektora pri 230 nm a teplote 0 °C. Čas zadržania: 11,25 min., čas zadržania požadovaného enantioméru: 12,5 min.
Metóda 2: Príprava l0S-2-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanolu z Ν,Ν-dibenzylácie L-fenylalaninolu
L-Fenylalaninol (176,6 g, 1,168 mól) sa pridal k miešanému roztoku uhličitanu draselného (484,6 g, 3,506 mól) v 710 ml vody. Zmes sa ohriata na 65 °C v dusíkovej atmosfére. Roztok benzylbromidu (400 g, 2,339 mól) v 3A etanolu (305 ml) sa pridal rýchlosťou, ktorá udržala teplotu medzi 60 - 68 °C. Dvojfázový roztok sa miešal pri 65 °C 55 min. a potom sa nechal ochladiť na 10 °C za prudkého miešania. Olejovitý produkt stuhol do malých granúl. Produkt sa zriedil s 2,0 1 vodovodnej vody a miešal sa 5 minút, aby sa anorganické produkty rozpustili. Produkt sa vyizoloval filtráciou za zníženého tlaku a premyl sa vodou, kým sa nedosiahlo pH 7. Získaný surový produkt sa vysušil cez noc na vzduchu, výsledkom čoho bola polosuchá tuhá látka (407 g), ktorá sa rekryštalizovala z 1,1 1 octanu etylnatého/heptánu (1 : 10 na objem). Produkt sa odizoloval filtrá ciou (pri -8 °C), premyl sa s 1,6 1 studeného (-10 °C) octanu etylnatého/heptánu (1 : 10 na objem) a bol vysušený na vzduchu, čím sa získalo 339 g (88 % výťažok) i3S-2-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanolu, teplota topenia = 71,5 až 73,0 °C. V prípade potreby možno získať viac produktu z kryštalizačného lúhu. Ostatná analytická charakterizácia bola totožná s hodnotami zlúčeniny pripravenej podľa metódy L
Príklad 2
Príprava 2S-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropánaldehydu
Metóda 1:
2S-[Bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanol (200 g, 0,604 mól) sa rozpustil v trietylamíne (300 ml, 2,15 mól). Zmes sa vychladila na 12 °C a pridala sa roztok oxidu sírového/pyridinového komplexu (380 g, 2,39 mól) v DMSO (1,6 1) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala v rozmedzí medzí 8 - 17 °C (trvanie pridávania 1 h). Roztok sa miešal pri okolitej teplote v dusíkovej atmosfére 1,5 h. Počas tejto doby prebehla celá reakcia (podľa TLC analýzy) (33 % octan etylnatý/hexán, silkagél). Reakčná zmes sa vychladila ľadovou vodou a stlmila sa pomocou 1,6 1 studenej vody (10 - 15 °C) počas 45 minút. Výsledný roztok sa vyextrahoval octanom etylnatým (2,0 1), premyl sa s 5 % kyselinou citrónovou (2,0 1), a solankou (2,2 1), vysušil sa nad MgSO4 (280 g) a prefiltroval sa. Rozpúšťadlo sa odstránilo na rotačnom odpaľovači pri 35 - 40 °C, potom sa vysušilo vo vákuu so získaním 198,8 g 2S-[bis-(fenylmetyl)aminojbenzénpropánaldehydu ako bledožltého oleja (výťažok 99,9 %). Získaný surový produkt bol dosť čistý na to, aby sa použil priamo v ďalšom kroku bez purifikácie. Analytické údaje zlúčeniny boli porovnateľné s publikovanou literatúrou. [a]D25 = -92,9° (c 1,87, CH2C12); ’H NMR (400 MHz, CDC13) δ, 2,94 a 3,15 (ABX systém, 2H, Jab = 13,9 Hz, Jax = = 7,3 Hz a JBX = 6,2 Hz), 3,56 (t, 1H, 7,1 Hz), 3,69 a 3,82 (AB systém, 4H, JAB = 13,7 Hz), 7,25 (m, 15 H) a 9,72 (s, 1H); HRMS vypočítané pre (M+l) C23H24NO 330,450, zistené: 330,1836. Analýza: vypočítané pre C23H23ON: C, 83,86; H, 7,04; N, 4,25. Zistené: C, 83,64; H, 7m42; N, 4,19. HPLC na chirálnej stacionárnej fáze: (S, S) kolóna Pirkle-Whelk-0 1 (250 x 4,6 mm vnútorný priemer), mobilná fáza: hexán/izopropanol (99,5 : 0,5, objem/objem), rýchlosť prietoku: 1,5 ml/min., detekcia pomocou UV detektora pri 210 nm. Čas zadržania požadovaného S-izoméru: 8,75 min., čas zadržania R-enantioméru 10,62 min.
Metóda 2:
Roztok oxalylchloridu (8,4 ml, 0,096 mól v dichlórmetáne (240 ml) sa vychladil na -74 °C. Potom sa pomaly pridal roztok DMSO (12,0 ml, 0,155 mól) v dichlórmetáne (50 ml) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pri -74 °C (trvanie pridávania ~ 1,25 h). Zmes sa miešala 5 min., potom sa pridal roztok /3S-2-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanolu (0,074 mól) v 100 ml dichlórmetánu (trvanie pridávania -20 min., teplota medzi -75 °C a -68 °C). Roztok sa miešal pri -78 °C 35 minút v dusíkovej atmosfére. Potom sa pridal trietylamín (41,2 ml, 0,295 mól) počas 10 min. (teplota medzi -78 °C až -68 °C), čím sa vyzrážala amónna soľ. Studená zmes sa miešala 30 min., potom sa pridala volt da (225 ml). Dichlórmetánová vrstva sa odseparovala od vodnej fázy a premyla sa vodou, solankou, vysušila sa nad síranom horečnatým, prefiltrovala a skoncentrovala sa. Zvyšok sa zriedil octanom etylnatým a hexánom, potom sa prefiltroval, aby sa ďalej odstránila amónna soľ. Filtrát sa skoncentroval za vzniku oS-[bis(fenylmetyl)aminobenzénpropánaldehydu. Aldehyd sa preniesol do ďalšieho kroku bez purifikácie.
Metóda 3:
K zmesi 1,0 g (3,0 mmól) /?S-2-[bis(fenylmetyl)aminojbenzénpropanolu, 0,531 g (4,53 mól) N-metylmorfolínu, 2,27 g molekulového sita (4 A) a 9,1 ml acetonitrilu sa pridalo 53 mg (0,15 mmól) rutenistanu tctrapropylamónneho (TPAP). Zmes sa miešala 40 min. pri izbovej teplote a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa suspendoval v 15 ml octanu etylnatého a prefiltroval sa cez vrstvu silikagélu. Filtrát sa skoncentroval za zníženého tlaku so získaním produktu obsahujúceho asi 50 % oS-2-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropánaldehydu ako bledožltého oleja.
Metóda 4:
K roztoku 1,0 g (3,02 mmól) /?S-2-[bis(fenylmetyl)aminojbenzénpropanolu v 9,0 ml toluénu sa pridalo 4,69 mg (0,03 mmól) 2,2,6,6-tetrametyl-l-piperidinyloxy, voľný radikál (TEMPO), 0,32 g (3,11 mmól) bromidu sodného, 9,0 ml octanu etylnatého a 1,5 ml vody. Zmes sa vychladila na 0 °C a pomaly, počas 25 min. sa pridal vodný roztok 2,87 ml 5 %-ného domáceho bielidla obsahujúceho 0,735 g (8,75 mmól) hydrouhličitanu sodného a 8,53 ml vody. Zmes sa miešala pri 0 °C 60 minút. Bielidlo sa pridalo ešte dvakrát (po 1,44 ml), vždy po pridaní sa zmes miešala 10 minút. Dvojfázová zmes sa nechala odseparovať. Vodná vrstva sa vyextrahovala dvakrát pomocou 20 ml octanu etylnatého. Skombinovaná organická vrstva sa premyla so 4,0 ml roztoku obsahujúceho 25 mg jodidu draselného a vodu (4,0 ml), 20 ml 10 %-ného roztoku vodného tiosíranu sodného a potom so solankou. Organický roztok sa vysušil nad síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval za zníženého tlaku so získaním 1,34 g surového oleja obsahujúceho malé množstvo požadovaného aldehydu, oS-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropánaldehydu.
Metóda 5:
Rovnaký postup, ako bol opísaný v metóde 1 tohto príkladu s výnimkou, že sa použili 3,0 ekvivalenty komplexu oxidu sírového/pyridínu a oS-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropanáldehyd sa izoloval s porovnateľným výťažkom.
Príklad 3
Príprava N,N-dibenzyl-3(S)-amino-l,2-(S)-epoxy-4-fenylbutánu
O7 v
Metóda 1:
Roztok oS-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropánaldehydu (191,7 g, 0,58 mól) a chlórjódmetánu (56,4 ml, 0,77 mól) v tetrahydrofuráne (1,8 1) sa vychladli na -30 až -35 °C (nižšie teploty ako napríklad -70 °C fungovali tiež dobre, no vyššie teploty sa pri operáciách vo veľkom dajú ľahšie do siahnuť) v reaktore z nehrdzavejúcej ocele v dusíkovej atmosfére. Pridal sa potom roztok n-butyllítia v hexáne (1,6 M, 365 ml, 0,58 mól) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Ďalšie adície činidiel sa robili nasledovným spôsobom: (1) pridal sa ďalší chlórjódmetán (17 ml), potom n-butyllitium (110 ml) pri teplote pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Toto sa zopakovalo ešte raz. (2) Pridal sa ďalší chlórjódmetán (8,5 ml, 0,11 mól), potom n-butyllítium (55 ml, 0,088 mól) pri teplote pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 °C až -35 °C 10 minút. Toto sa zopakovalo 5-krát. (3) Pridal sa ďalší chlórjódmetán (8,5 ml, 0,11 mól), potom n-butyllítium (37 ml, 0,059 mól) pri teplote pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Toto sa zopakovalo ešte raz. Vonkajšie chladenie sa prerušilo a zmes sa ohriala na okolitú teplotu počas 4 až 16 hodín, keď TLC (silikagél, 20 % octan etylnatý/hexán) ukázala, že reakcia je dokončená. Reakčná zmes sa vychladila na 10 °C a stlmila sa pomocou 1452 g 16 %-ného roztoku chloridu amónneho (pripraveného rozpustením 232 g chloridu amónneho v 1220 ml vody), udržujúc pritom teplotu pod 23 °C. Zmes sa miešala 10 minút a organická a vodná vrstva sa odseparovali. Vodná fáza sa vyextrahovala octanom etylnatým (2 x 500 ml). Vrstva octanu etylnatého sa skombinovala s vrstvou tetrahydrofuránu. Skombinovaný roztok sa vysušil nad síranom horečnatým (220 g), prefiltroval sa a skoncentroval na rotačnom odparovači pri 65 °C. Hnedý olejový zvyšok sa vysušil pri 70 °C vo vákuu (0,8 bar) 1 h so získaním 222,8 g surového materiálu. (Váha surového produktu bola > 100 %. Pre pomernú nestálosť produktu na silikagéli sa surový produkt obvykle používa priamo v ďalšom kroku bez purifikácie). Diastereomémy pomer surovej zmesi sa stanovil pomocou protónovej NMR: (2S)/(2R): 86 : 14. Menší a väčší epoxidový diastereomér bol charakterizovaný v tejto zmesi TLC analýzou (silikagél, 10 % octan etylnatý/hexán), Rf = 0,29 resp. 0,32. Analytická vzorka každého diastereoméru sa získala purifikáciou pomocou silikagélovej chromatografíe (3 % octan etylnatý/hexán) a bola charakterizovaná nasledovne:
N,N, aS-Tris(fenylmetyl)-2S-oxiránmetánamín 'H NMR (400 MHz, CDCI,) ó 2,49 a 2,51 (AB systém, IH, JAB = 2,82), 2,76 a 2,77 (AB systém, IH, JAB = 4,03), 2,83 (m, 2H), 2,99 a 3,03 (AB systém, IH, JAB = 10,1 Hz), 3,15 (m, IH), 3,73 a 3,84 (AB systém, 4H, JAB = 14,00), 7,21 (m, 15H); l3C NMR (400 MHz, CDCI,) δ 139,55, 129,45, 128,42, 128,14, 128,09, 126,84, 125,97, 60,32, 54,23, 52,13,45,99, 33,76; HRMS vypočítané pre C24H26NO (M + + 1)344,477, zistené 344,2003.
N,N, aS-Tris(fenylmetyl)-2R-oxiránmetánamín ‘H NMR (300 MHz, CDClj) δ 2,20 (m, IH), 2,59 (m, IH), 2,75 (m, 2H), 2,97 (m, 1 H), 3,14 (m, IH), 3,85 (AB systém, 4H), 7,25 (m, 15H). HPLC na chirálnej stacionárnej fáze: kolóna Pirkle-Whelk-0 1 (250 x 4,6 mm vnútorný priemer), mobilná fáza: hexán/izopropanol (99,5 : 0,5, objem/objem), rýchlosť prietoku: 1,5 ml/min., detekcia pomocou UV detektora pri 210 nm. Čas zadržania (8): 9,38 min., čas zadržania enantioméru (4): 13,75 min.
Metóda 2:
Roztok surového aldehydu 0,074 mól a chlórjódmetánu (7,0 ml, 0,096 mól) v tetrahydrofuráne (285 ml) sa vychladli na -78 °C v dusíkovej atmosfére. Potom sa pridalo 1,6 M roztok n-butyllítia v hexáne (25 ml, 0,040 mól) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pri -75 °C (trvanie pridávania
SK 285688 Β6 min.). Po prvom pridaní sa opäť pridal chlóijódmetán (1,6 ml, 0,022 mól), potom n-butyllítium (23 ml, 0,037 mól), udržujúc teplotu pri -75 °C. Zmes sa miešala 15 min. Obe činidlá, chlóijódmetán (0,70 ml, 0,010 mól) a n-butyllítium (5 ml, 0,008 mól) boli pridané ešte 4-krát počas 45 min. pri -75 °C. Chladiaci kúpeľ sa potom odstránil a roztok bol ohriaty na 22 °C počas 1,5 h. Zmes sa vyliala do 300 ml nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho. Vrstva tetrahydrofuránu sa odseparovala. Vodná fáza sa vyextrahovala s octanom etylnatým (1 x 300 ml). Skombinované organické vrstvy sa premyli solankou, vysušili sa nad síranom horečnatým, prefiltrovali sa a skoncentrovali so získaním hnedého oleja (27,4 g). Produkt sa mohol použiť v ďalšom kroku bez purifikácie. Požadovaný diastereomér možno vyčistiť rekryštalizáciou hneď v ďalšom kroku. Produkt sa dal purifikovať aj chromatografícky.
Metóda 3:
Roztok oS-[bis(fenylmetyl)amino]benzénpropánaldehydu (178,84 g, 0,54 mól) a brómchlórmetánu (46 ml, 0,71 mól) v tetrahydrofuráne (1,8 1) sa vychladli na -30 až -35 °C (nižšie teploty ako napríklad -70 °C tiež dobre fungovali, no vyššie teploty sa pri operáciách vo veľkom dajú ľahšie dosiahnuť) v reaktore z nehrdzavejúcej ocele v dusíkovej atmosfére. Potom sa pridal roztok n-butyllítia v hexáne (1,6 M, 340 ml, 0,54 mól) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Ďalšie adície činidiel sa uskutočnili nasledovným spôsobom: (1) pridal sa ďalší brómchlórmetán (14 ml), potom sa pridalo n-butyllítium (102 ml) pri teplote pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Toto sa zopakovalo ešte raz. (2) Pridal sa ďalší brómchlórmetán (7 ml, 0,11 mól), potom n-butyllítium (51 ml, 0,082 mól) pri teplote pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Toto sa zopakovalo ešte 5-krát. (3) Pridal sa ďalší brómchlórmetán (7 ml, 0,11 mól), potom n-butyllítium (51 ml, 0,082 mól) pri teplote pod -25 °C. Po pridaní sa zmes miešala pri -30 až -35 °C 10 minút. Toto sa zopakovalo ešte raz. Vonkajšie chladenie sa prerušilo a zmes sa ohriala na okolitú teplotu počas 4 až 16 hodín, keď TLC (silikagél, 20 % octan etylnatý/hexán) ukázala, že reakcia bola dokončená. Reakčná zmes sa vychladila na 10 °C a stlmila sa s 1452 g 16 % roztoku chloridu amónneho (pripraveného rozpustením 232 g chloridu amónneho v 1220 ml vody), udržujúc teplotu pod 23 °C. Zmes sa miešala 10 minút a organická a vodná fáza sa odseparovala. Vodná fáza sa vyextrahovala octanom etylnatým (2 x 500 ml). Vrstva s octanom etylnatým sa skombinovala s vrstvou tetrahydrofuránu. Skombinovaný roztok sa vysušil nad síranom horečnatým (220 g), prefdtroval sa a skoncentroval na rotačnom odpaľovači pri 65 °C. Hnedý olejovitý zvyšok sa vysušil pri 70 “C vo vákuu (0,8 bar) 1 h so získaním 222,8 g surového materiálu.
Metóda 4:
Rovnaký postup, ako bol opísaný v metóde 3 tohto príkladu s výnimkou, že reakčné teploty boli pri -20 °C. Výsledný N,N, oS-tris(fenylmetyl)-2S-oxiránmetánamín bol diastereomémou zmesou nižšej čistoty, ako bola zmes opísaná v metóde 3.
Metóda 5:
Rovnaký postup, ako bol opísaný v metóde 3 tohto príkladu s výnimkou, že reakčné teploty boli pri -70 až -78 °C. Výsledný N,N, oS-tris(fenylmetyl)-2S-oxiránmetánamín bol diastereomémou zmesou, ktorá bola použitá priamo v ďalších krokoch bez purifikácie.
Metóda 6:
Rovnaký postup, ako bol opísaný v metóde 3 tohto príkladu s výnimkou, že sa použilo priebežné pridávanie brómchlórmetánu a n-butyllítia pri -30 až -35 °C. Po reakcii a postupoch na spracovanie opísaných v metóde 3 tohto príkladu sa požadovaný N,N, oS-tris(fenylmetyl)-2S-oxiránmetánamín vyizoloval s porovnateľným výťažkom a čistotou.
Metóda 7:
Rovnaký postup, ako bol opísaný v metóde 2 tohto príkladu s výnimkou, že namiesto chlórjódmetánu sa použil dibrómmetán. Po reakcii a postupoch na úpravu opísaných v metóde 2 tohto príkladu sa vyizoloval požadovaný N,N, oS-tris(fenylmetyl)-2S-oxiránmetánamm.
Príklad 4
Príprava N-[3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutylamínu
K roztoku surového N,N-dibenzyl-3(S)-amino-l,2(S)-epoxy-4-fenylbutánu (388,5 g, 1,13 mól) v izopropanole (2,7 1) (alebo octane etylnatom) sa pridal izobutylamín (1,7 kg, 23,1 mól) počas 2 min. Teplota stúpla z 25 °C na 30 °C. Roztok sa ohrial na 82 °C a miešal sa na tejto teplote 1,5 h. Teplý roztok sa skoncentroval za zníženého tlaku pri 65 °C. Hnedý olejový zvyšok sa preniesol do trojlitrovej nádoby a vysušil sa vo vákuu (0,8 mm Hg) 16 h so získaním 450 g 3S-[N,N-bis(fenylmetyl)amino-4-fenylbutan-2R-olu ako surového oleja.
Analytická vzorka požadovaného hlavného diastereomémeho produktu sa získala vyčistením malej vzorky surového produktu silikagélovou chromatografiou (40 % octan etylnatý/hexán). TLC analýza: silikagél, 40 % octan etylnatý/hexán; Rf = 0,28; HPLC analýza: ultrasférová ODS kolóna, 25 % trietylamino-/fosfátový pufer pH 3-acetonitril, rýchlosť prietoku 1 ml/min., UV detektor; čas zadržania 7,49 min.; HRMS vypočítané pre C28H27N2O (M + 1) 417,616, zistené 417,2887. Analytická vzorka vedľajšieho diastereomémeho produktu, 3S-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2S-olu sa tiež získala vyčistením malej vzorky surového produktu silikagélovou chromatografiou (40 % octan etylnatý/hexán).
Príklad 5
Príprava N-[3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy4-fenylbutyl]-N-izobutylamínu · soľ kyseliny šťaveľovej
K roztoku kyseliny šťaveľovej (8,08 g, 89,72 mmól) v metanole (76 ml) sa pridal roztok surového 3(S)-[N,N15
-bis(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-olu {39,68 g, ktorý obsahuje asi 25,44 g (61,06 mmól) 3(S), 2(R) izoméru a asi 4,49 g (10,78 mmól) 3(S), 2(S) izoméru} v octane etylnatom (90 ml) počas 15 minút. Zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 2 hodiny. Tuhá látka bola vyizolovaná filtráciou, premyla sa octanom etylnatým (2 x 20 ml) a vysušila vo vákuu počas asi 1 h so získaním 21,86 g (výťažok 70,7 % izoméru) soli s diastereomérnou čistotou 97 % (na základe plochy pod zónou v HPLC) HPLC analýza: Kolóna Vydecpcptid/protcín C18, UV detektor 254 nm, rýchlosť prietoku 2 ml/min., gradient {A = = 0,05 % kyseliny trifluóroctovej vo vode, B = 0,05 % kyseliny trifluóroctovej v acetonitrile, 0 min. 75 % A/25 % B, 30 min. 10 % A/90 % B, 35 min. 10% A/90 % B, 37 min. 75 % A/25 % B)}; čas zadržania 10,68 min. (3(S), 2(R) izomér) a 9,73 min. (3(S), 2(S) izomér). Bod topenia = = 174,99 °C: mikroanalýza: vypočítané: C 71,05 %, H 7,50 %, N 5,53 %; zistené: C 71,71 %, H 7,75 %, N 5,39 %.
Alternatívne, dihydrát kyseliny šťaveľovej (119 g, 0,94 mól) sa pridal do banky s guľatým dnom (objem 5000 ml), do ktorej sa umiestnilo mechanické miešadlo a deliaci lievik. Pridal sa metanol (1000 ml) a zmes sa miešala až do úplného rozpustenia. Pridal sa roztok surového 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-olu v octane etylnatom (1800 ml, 0,212 g aminoalkoholových izomérov/ml, 0,9160 mól) počas 20 minút. Zmes sa miešala 18 hodín a tuhý produkt sa vyizoloval centrifugovaním v šiestich dávkach pri 400 g. Každá dávka sa premyla so 125 ml octanu etylnatého. Soľ sa potom zhromaždila a vysušila cez noc pri 1 torr so získaním 336,3 g produktu (71 % na základe celkového aminoalkoholu) HPLC/MS (elektrosprej) bol v súlade s požadovaným produktom (m/z 417 [M + H]+).
Alternatívne, surový 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-ol (5 g) sa rozpustil v metyl-terc-butyléteri (MTBE) (10 ml) a pridala sa kyselina šťaveľová (1 g) v metanole (4 ml). Zmes sa miešala asi 2 hodiny. Výsledná tuhá látka sa prefiltrovala, premyla so studeným MTBE a vysušila so získaním 2,1 g bielej tuhej látky s diastereomémou čistotou asi 98,9 % (na základe plochy pod zónou v HPLC).
Príklad 6
Príprava N-[3(3)-[N,N-bis(fenylrnetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutyl-amínu · soľ kyseliny octovej
K roztoku surového 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)aminoj-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-olu v metyl-terc-butyléteri (MTBE) (45 ml, 1,1 g aminoalkoholových izomérov/ml) sa po kvapkách pridala kyselina octová (6,9 ml). Zmes sa miešala asi 1 hodinu pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu so získaním hnedého oleja s diastereomémou čistotou asi 85 % (na základe plochy pod zónou v HPLC). Hnedý olej sa kryštalizoval nasledovne: 0,2 g oleja sa rozpustilo v prvom rozpúšťadle za tepla so získaním číreho roztoku, druhé rozpúšťadlo sa pridalo až kým sa roztok nezakalil, roztok sa opäť zahrieval do vyčírenia s obsahom produktu s diastereomémou čistotou asi 99 %, vychladli sa na izbovú teplotu a potom sa uložil na noc do chladničky. Kryštály sa prefiltrovali, premyli s druhým rozpúšťadlom a vysušili sa. Diastereoméma čistota kryštálov sa vypočítala z plochy pod zónou v HPLC. Výsledky sú uvedené v tabuľke 1.
Tabuľka 1
Prvé rozpúšťadlo Druhé rozpúšťadlo Pomer rozpúšťadiel Váha výťažku (K) Diastereoméma čistota (%)
MTBE Heptán 1 10 0,13 98,3
MTBE Hexán 1 10 0,03 99,6
Metanol Voda 1 1,5 0,05 99,5
Toluén Heptán 1 10 0,14 98,7
Toluén Hexán 1 10 0,10 99,7
Alternatívne, surový 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)aminoj-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenyl-butan-2(R)-ol {50,0 g, ktorý obsahuje asi 30,06 g (76,95 mmól) 3(S), 2(R) izoméru a asi 5,66 g (13,58 mmól) 3(S), 2(S) izoméru} sa rozpustil v mctyl-terc-butyléteri (45,0 ml). K tomuto roztoku sa pridala kyselina octová (6,90 ml, 120,6 mmól) počas 10 minút. Zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 1 hodinu a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok sa vyčistil rekryštalizáciou z metyl-terc-butyléteru (32 ml) a heptánu (320 ml). Tuhá látka sa vyizolovala filtráciou, premyla sa studeným heptánom a vysušila sa vo vákuu asi 1 hodinu so získaním 21,34 g (58,2 % výťažku izoméru) soli kyseliny monooctovej s diastereomémou čistotou 96 % (na základe plochy pod zónou v HPLC). Teplota topenia = 105 - 106 °C; mikroanalýza: vypočítané: C 75,53 %, H 8,39 %, N 5,87 %; zistené: C 75,05 %, H 8,75 %, N 5,71 %.
Príklad 7
Príprava N-[3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutyl amínu · soľ kyseliny L-vínnej
Surový 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-1 -(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-ol {10,48 g, ktorý obsahuje asi 6,72 g (16,13 mmól) 3(S), 2(R) izoméru a asi 1,19 g (2,85 mmól) 3(S), 2(S) izoméru} sa rozpustil v tetrahydrofuráne (10,0 ml). K tomuto roztoku sa pridal roztok kyseliny L-vínnej (2,85 g, 19 mmól) v metanole (5,0 ml) počas asi 5 minút. Zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 10 min. a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. K olejovitému zvyšku sa pridal metyl-terc-butyléter (20,0 ml) a zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 1 hodinu. Tuhá látka sa vyizolovala filtráciou so získaním 7,50 g surovej soli. Surová soľ sa vyčistila rekryštalizáciou z octanu etylnatého a heptánu pri izbovej teplote so získaním 4,13 g (výťažok 45,2 % izoméru) soli kyseliny L-vínncj s diastereomémou čistotou 95 % (na základe plochy pod zónou v HPLC). Mikroanalýza: vypočítané: C 67,76 %, H 7,41 %, N 4,94 %; zistené: C 70,06 %, H 7,47 %, N 5,07 %.
Príklad 8
Príprava N-[3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutyl amínu · soľ kyseliny chlorovodíkovej
Surový 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-ol {10,0 g, ktorý obsahuje asi 6,41 g (15,39 mmól) 3(S), 2(R) izoméru a asi 1,13 g (2,72 mmól) 3(S),2(S) izoméru} sa rozpustil v tetrahydrofuráne (20,0 ml). K tomuto roztoku sa pridala kyselina chlorovodíková (20 ml, 6,0 N) počas asi 5 min. Zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 1 hodinu a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa rekryštalizoval z etanolu pri 0 °C so získaním 3,20 g (výťažok 42,7% izomérov) soli kyseliny chlorovodíkovej s diastereomémou čistotou 98 % (na základe plochy pod zónou v HPLC). Mikroanalýza: vypočítané: C 68,64 %, H 7,76 %, N 5,72 %; zistené: C 68,79 %, H 8,07 %, N 5,55 %.
Príklad 9
Príprava N-{3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutyl amínu · soľ kyseliny toluénsulfónovej
Surový 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)ol {5,0 g, ktorý obsahuje asi 3,18 g (7,63 mmól) 3(S), 2(R) izoméru a asi 0,56 g (1,35 mmól) 3(S), 2(S) izoméru) sa rozpustil v metyl-tercbutyléteri (10,0 ml). K tomuto roztoku sa pridal roztok kyseliny toluénsulfónovej (2,28 g, 12 mmól) v metyl-terc-butyléteri (2,0 ml) a metanole (2,0 ml) počas asi 5 minút. Zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 2 hodiny a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa rekryštalizoval z metyl-terc-butyléteru a heptánu pri 0 °C, prefiltroval sa, premyl studeným heptánom a vysušil sa vo vákuu so získaním 1,85 g (výťažok 40,0 % izomérov) soli kyseliny monotoluénsulfónovej s diastereomémou čistotou 97 % (na základe plochy pod zónou v HPLC).
Príklad 10
Príprava N-[3(S)- {N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyll-N-isobutyl amínu · soľ kyseliny metánsulfónovej
Surový 3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2(R)-ol {10,68 g, ktorý obsahuje asi 6,85 g (16,44 mmól) 3(S), 2(R) izoméru a asi 1,21 g (2,90 mmól) 3(S), 2(S) izoméru} sa rozpustil v tetrahydrofuráne (10,0 ml). K tomuto roztoku sa pridala kyselina metánsulfonová (1,25 ml, 19,26 mmól) Zmes sa miešala pri izbovej teplote asi 2 hodiny a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok sa rekryštalizoval z metanolu a vody pri 0 °C, prefiltroval a premyl sa studeným metanolom/vodou (1 : 4) a vysušil sa vo vákuu so získaním 2,40 g (výťažok 28,5 % izomérov) soli kyseliny monometánsulfonovej s diastereomémou čistotou 98 % (na základe plochy pod zónou v HPLC).
Príklad 11
Príprava N-benzyl-L-fenylalaninolu
Metóda 1:
L-Fenylalaninol (89,51 g, 0,592 mól) sa rozpustil v 375 ml metanolu v inertnej atmosfére, pridalo sa 35,52 g (0,592 mól) ľadovej kyseliny octovej a 50 ml metanolu, potom roztok 62,83 g (0,592 mól) benzaldehydu v 100 ml metanolu. Zmes sa vychladila asi na 15 °C a pridal sa roztok 134,6 g (2,14 mól) kyanobórhydridu sodného v 700 ml metanolu asi počas 40 minút, udržujúc teplotu medzi 15 °C a 25 °C. Zmes sa miešala pri izbovej teplote 18 hodín. Zmes sa skoncentrovala za zníženého tlaku a rozdelila sa medzi 1 1 roztoku 2 M hydroxidu amónneho a 2 1 éteru. Eterová vrstva sa premyla s 1 1 roztoku 1 M hydroxidu amónneho, dvakrát s 500 ml vody, 500 ml solanky a vysušila sa nad síranom horečnatým 1 hodinu. Éterová vrstva sa prefiltrovala, skoncentrovala za zníženého tlaku a surový tuhý produkt sa rekryštalizoval zo 110 ml octanu etylnatého a 1,3 1 hexánu so získaním 115 g (výťažok 81 %) N-benzyl-L-fenylalaninolu ako bielej tuhej látky.
Metóda 2:
L-Fenylalaninol (5 g, 33 mmól) a 3,59 g (33,83 mmól) benzaldehydu sa rozpustili v 55 ml 3A etanolu v inertnej atmosfére v Parrovej trepačke a zmes sa zahrievala na 60 °C 2,7 hod. Zmes sa vychladila asi na 25 °C a 0,99 g a pridala sa 5 % platina nad uhlíkom a zmes sa hydrogenizovala pri 60 psi vodíka a 40 °C 10 hodín. Katalyzátor sa odfiltroval, produkt sa skoncentroval za zníženého tlaku a su rový tuhý produkt sa rekryštalizoval zo 150 ml heptánu so získaním 3,83 (výťažok 48 %) N-benzyl-L-fenylalaninolu ako bielej tuhej látky.
Príklad 12
Príprava N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninolu
N-Benzyl-L-fenylalaninol (2,9 g, 12 mmól) sa rozpustil v 3 ml trietylamínu a 27 ml metanolu a pridalo sa 5,25 g (24,1 mmól) di-terc-butylhydrouhličitanu. Zmes sa zahrievala na 60 °C 35 minút a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustil v 150 ml octanu etylnatého, premyl sa dvakrát s 10 ml studenej (0 - 5 °C) zriedenej kyseliny chlorovodíkovej (pH 2,5 až 3), 15 ml vody a 10 ml solanky, vysušil sa nad síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval za zníženého tlaku. Surový produkt (olej) sa vyčistil silikagélovou chromatografiou (octan etylnatý : : hexán, 12 : 3, ako eluent) so získaním 3,98 g (výťažok 97 %) bezfarebného oleja.
Príklad 13
Príprava N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninalu
Metóda 1:
K roztoku 0,32 g (0,94 mmól) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninolu v 2,8 ml toluénu sa pridalo 2,4 mg (0,015 mmól) 2,2,6,6-tetrametyl-l-piperidinyloxy, voľný radikál (TEMPO), 0,1 g (0,97 mmól) bromidu sodného, 2,8 ml octanu etylnatého a 0,34 ml vody. Zmes sa vychladila na 0 °C a pomaly, počas 30 min., sa pridal vodný roztok 4,2 ml 5 % domáceho bielidla obsahujúceho 0,23 g (3,0 ml, 2,738 mmól) hydrouhličitanu sodného. Zmes sa miešala pri 0 °C 10 minút. Potom sa bielidlo pridávalo ešte trikrát (po 0,4 ml), a zmes sa za každým pridaním miešala 10 minút, aby sa spotreboval všetok východiskový materiál. Dvojfázová zmes sa nechala odseparovať. Vodná vrstva sa vyextrahovala dvakrát s 8 ml toluénu. Skombinovaná organická vrstva sa premyla s 1,25 ml roztoku obsahujúceho 0,075 g jodidu draselného, hydrosíranu sodného (0,125 g) a vody (1,1 ml), 1,25 ml 10 % vodného roztoku tiosíranu sodného, 1,25 ml fosfátového pufru, pH 7, a 1,5 ml solanky. Organický roztok sa vysušil nad síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval za zníženého tlaku so získaním 0,32 g (výťažok 100 %) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninalu.
Metóda 2:
K roztoku 2,38 g (6,98 mmól) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninolu v 3,8 ml (27,2 mmól) trietylamínu pri 10 °C sa pridal roztok 4,33 g (27,2 mmól) komplexu oxidu sírového a pyridínu v 17 ml dimetylsulfoxidu. Zmes sa ohriala na izbovú teplotu a miešala sa 1 hodinu. Pridala sa voda (16 ml) a zmes sa vyextrahovala s 20 ml octanu etylnatého. Organická vrstva sa premyla s 20 ml 5 % kyseliny citrónovej, 20 ml vody, 20 ml solanky, vysušila sa nad síranom horečnatým a prefiltrovala sa. Filtrát sa skoncentroval za zníženého tlaku so získaním 2,37 g (výťažok 100 %) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyI-L-fenylalaninalu.
Príklad 14
Príprava 3(S)-[N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzylaminol-1,2-(S)-epoxy-4-fenylbutánu
Metóda 1:
Roztok 2,5 g (7,37 mmól) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninalu a 0,72 ml chlór-jódmetánu v 35 ml THF sa vychladli na -78 °C. Pomaly sa pridalo 4,64 ml roztoku n-butyllítia (1,6 M v hexáne, 7,42 mmól), udržujúc teplotu pod -70 °C. Zmes sa miešala 10 minút medzi -70 až -75 °C. Potom sa za sebou pridali ešte dve dávky 0,22 ml chlórjódmetánu a 1,4 ml n-butyllítia a zmes sa miešala 10 minút medzi -70 až -75 °C po každom pridaní. Potom sa za sebou pridali ďalšie štyri dávky 0,11 ml chlórjódmetánu a 0,7 ml n-butyllítia a zmes sa miešala 10 minút medzi -70 až -75 °C po každom pridaní. Zmes sa zahrievala na izbovú teplotu 3,5 hod. Produkt sa stlmil pri teplote nižšej než 5 °C pomocou 24 ml ľadovej vody. Dvojfázové vrstvy sa odseparovali a vodná vrstva sa vyextrahovala dvakrát s 30 ml octanu etylnatého. Skombinované organické vrstvy sa premyli trikrát s 10 ml vody, potom s 10 ml solanky, vysušili sa nad síranom sodným, prefiltrovali sa a skoncentrovali za zníženého tlaku so získaním 2,8 g žltého surového oleja. Tento surový olej (výťažok > 100 %) je zmesou diastereomcmych epoxidov N, oS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2S-oxiránmetánammu a N, ctS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2R-oxiránmetánamínu. Surová zmes sa používa priamo v ďalšom kroku bez purifikácie.
Metóda 2:
K suspenzii 2,92 g (13,28 mmól) trimetylsulfoxóniumjodidu v 45 ml acetonitrilu sa pridalo 1,49 g (13,28 mmól) t-butoxidu draselného. Pridal sa roztok 3,0 g (8,85 mmól) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninalu v 18 ml acetonitrilu a zmes sa miešala pri izbovej teplote 1 hod. Zmes sa zriedila pomocou 150 ml vody a vyextrahovala sa dvakrát s 200 ml octanu etylnatého. Organické vrstvy sa skombinovali a premyli s 100 ml vody, 50 ml solanky, vysušili sa nad síranom sodným, prefdtrovali sa a skoncentrovali za zníženého tlaku so získaním 3,0 g žltého surového oleja. Surový produkt sa vyčistil silikagélovou chromatografiou (octan etylnatý/hexán, 1 : 8, ako eluent) so získaním 1,02 g (výťažok 32,7 %) zmesi oboch diastereomérov, N, oS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2S-oxíránmetánamínu a N, oS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2R-oxiránmetánamínu.
Metóda 3:
K suspenzii 0,90 g (4,42 mmól) trimetylsulfóniumjodidu v 18 ml acetonitrilu sa pridalo 0,495 g (4,42 mmól) t-butoxidu draselného. Pridal sa roztok 1,0 g (2,95 mmól) N-(t-butoxykarbonyl)-N-benzyl-L-fenylalaninalu v 7 ml acetonitrilu a zmes sa miešala pri izbovej teplote 1 hodinu. Zmes sa zriedila s 80 ml vody a vyextrahovala sa dvakrát s 80 ml octanu etylnatého. Organické vrstvy sa skombinovali a premyli s 100 ml vody, 30 ml solanky, vysušili sa nad síranom sodným, prefiltrovali sa a skoncentrovali za zníženého tlaku so získaním 1,04 g žltého surového oleja. Surový produkt bol zmesou oboch diastereomérov, N, aS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2S-oxiránmetán-amínu a N, aS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2R-oxiránmetánamínu.
Príklad 15
Príprava 3S-[N-(t-butoxykarbonyl)-N-(fenylmetynaminol-1 -(2-metylpropynamino-4-fenyl-butan-2R-olu
K roztoku 500 mg (1,42 mmól) surového epoxidu (zmesi oboch diastereomérov N, aS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2S-oxiranmetánamínu a N, oS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2R-oxiránmetánamínu) v 0,98 ml izopropanolu sa pridalo 0,71 ml (7,14 mmól) izobutylaminu. Zmes sa zahrievala na refluxnú teplotu pri 85 °C až 90 °C počas 1,5 hodiny. Zmes sa skoncentrovala za zníženého tlaku a produkt (olej) sa vyčistil silikagélovou chromatografiou (chloroform : metanol, 100 : 6, ako eluenty) so získaním 330 mg 3S-[N-(t-butoxykarbonyl)-N-(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2R-olu ako bezfarebného oleja (výťažok 54,5 %). Vyizoloval sa aj 3S-[N-(t-butoxykarbonyl)-N-(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2R-ol. Keď ako východiskový materiál sa použil purifikovaný N,oS-bis(fenylmetyl)-N-(t-butoxykarbonyl)-2S-oxiránmetánamín, 3S-[N-(t-butoxykarbonyl)-N-(fenylmetyl)amino]-l-(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2R-ol sa izoloval po chromatografickej purifikácii s výťažkom 86 %.
Príklad 16
Príprava 3 S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-4-fenylbutan-1,2R-diolu
K roztoku 1 g (3,39 mmól) kyseliny 2S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-1 S-hydroxy-3-fenylbutánovej (komerčne dostupnej z firmy Nippon Kayaku, Japonsko) v 50 ml THF pri 0 °C sa pridalo 50 ml komplexu bóran-THF (kvapalina, 1,0 M v THF), udržujúc teplotu pod 5 °C. Reakčná zmes sa ohriala na izbovú teplotu a miešala sa 16 hodín. Zmes sa vychladila na 0 °C a pomaly sa pridalo 20 ml vody, aby sa odstránil nadbytok BH3 a aby sa zmes s produktom stlmila, udržujúc teplotu pod 12 °C. Stlmený roztok sa miešal 20 minút a skoncentroval sa za zníženého tlaku. Zmes s produktom sa vyextrahovala trikrát pomocou 60 ml octanu etylnatého. Organické vrstvy sa skombinovali a premyli s 20 ml vody, 25 ml nasýteného roztoku chloridu sodného a skoncentrovali sa za zníženého tlaku so získaním 1,1 g surového oleja. Surový produkt sa vyčistil silikagélovou chromatografiou (chloroform/metanol, 10:6, ako eluenty) so získaním 900 mg (výťažok 94,4 %) 3S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-4-fenylbutan-l,2R-diolu ako bielej tuhej látkyPríklad 17
Príprava 3S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-2R-hydroxy-4-fenylbut-1 -yl toluénsulfonátu
K roztoku 744,8 mg (2,65 mmól) 3S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-4-fenylbutan-l,2R-diolu v 13 ml pyridinu pri 0 °C sa pridalo 914 mg toluénsulfonylchloridu v jedinej dávke. Zmes sa miešala pri 0 °C až 5 °C 5 hodín. K reakčnej zmesi sa pridala zmes 6,5 ml octanu etylnatého a 15 ml 5 % vodného roztoku hydrouhličitanu sodného a miešala sa 5 minút. Zmes s produktom sa vyextrahovala trikrát s 50 ml octanu etylnatého. Organické vrstvy sa skombinovali a premyli s 15 ml vody, 10 ml nasýteného roztoku chloridu sodného a skoncentrovali sa za zníženého tlaku so získaním asi 1,1 g žltej hrudovitej tuhej látky. Surový produkt sa vyčistil silikagélovou chromatografiou (octan etylnatý/hexán, 1:3, ako eluenty) so získaním 850 mg (výťažok 74 %) 3S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-2R-hydroxy-4-fenylbut-l-yl toluénsulfonátu ako bielej tuhej látky.
Príklad 18
Príprava 3S-[N-(t-butoxykarbonyl)amino-l-(2-metylpropylaminol-4-fenylbutan-2R-olu
K roztoku 90 mg (0,207 mmól) 3S-(N-t-butoxykarbonyl)amino-2R-hydroxy-4-fenylbut-l-yI toluénsulfonátu v 0,143 ml izopropanolu a 0,5 ml toluénu sa pridalo 0,103 ml (1,034 mmól) izobutylamínu. Zmes sa ohriala na 80 až 85 °C a miešala sa 1,5 hod. Zmes s produktom sa skoncentrovala za zníženého tlaku pri 40 až 50 °C vyčistila sa silikagélovou chromatografiou (chloroform/metanol, 10 : 1, ako eluenty) so získaním 54,9 mg (výťažok 76,8 %) 3S-[N-(t-butoxykarbonyl)aminoj-1 -(2-metylpropyl)amino-4-fenylbutan-2R-olu ako bielej tuhej látky.
Príklad 19
Príprava N-[3(S)-benzyloxykarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutylamínu
Časť A:
K roztoku 75,0 g (0,226 mól) N-benzyloxykarbonyl-L-fenylalanín chlórmetylketónu v zmesi 807 ml metanolu a 807 ml tetrahydrofuránu pri -2 CC sa pridalo 13,17 g (0,348 mól, 1,54 ekvivalentu) hydridu sodno-boritého počas viac ako 100 minút. Rozpúšťadlá sa odstránili za zníženého tlaku pri 40 °C a zvyšok sa rozpustil v octane etylnatom (približne 1 1). Roztok sa premyl postupne 1 M roztokom kyslého síranu draselného, nasýteného hydrouhličitanu sodného a potom nasýteného chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranom horečnatým a prefiltrovaní sa roztok odstránil za zníženého tlaku. K výslednému oleju sa pridal hexán (približne 1 1) a zmes sa ohriala na 60 °C za vírenia. Po ochladení na izbovú teplotu sa tuhé látky zhromaždili a premyli s 2 1 hexánu. Výsledná tuhá látka sa rekryštalizovala z horúceho octanu etylnatého a hexánu so získaním 32,3 (výťažok 43 %) N-benzyloxykarbonyl-3(S)-amino-l-chlór4-fenyl-2(S)-butanolu, teplota topenia 150 - 151 °C a M + + Li+ = 340.
Časť B:
K roztoku 6,52 g (0,116 mól, 1,2 ekvivalentu) hydroxidu draselného v 968 ml absolútneho etanolu pri izbovej teplote sa pridalo 32,3 g (0,097 mól) N-CBZ-3(S)-amino-l-chlór-4-fenyl-2(S)-butanolu. Po miešaní 15 minút sa rozpúšťadlo odstránilo za zníženého tlaku a tuhé látky sa rozpustili v dichlórmetáne. Po premytí vodou, vysušení nad síranom horečnatým, prefiltrovaní a oddelení sa získa 27,9 g bielej tuhej látky. Rekryštalizáciou z horúceho octanu etylnatého a hexánu sa získalo 22,3 g (výťažok 77 %) N-benzyloxykarbonyl-3(S)-amino-1,2(S)-epoxy-4-fenylbutánu, teplota topenia 102- 103 °CaMH+298.
Časť C:
Roztok N-benzyloxykrabonyl 3(S)-amino-l,2-(S)-epoxy-4-fenylbutánu (1,00 g, 3,36 mmól) a izobutylamínu (4,90 g, 67,2 mmól, 20 ekvivalentov) v 10 ml izopropylalkoholu sa zahrieval na refluxnú teplotu 1,5 hodiny. Roztok sa ochladil na izbovú teplotu, skoncentroval sa vo vákuu a potom vylial do 100 ml miešaného hexánu, po čom sa produkt z roztoku vykryštalizoval. Produkt sa vyizoloval filtráciou a bol vysušený na vzduchu so získaním 1,18 g, 95 % N-[[3(S)-fenyImetylkarbamoyl)amino-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]N-[(2-metylpropyl)]aminu, C22H30N2O3, teplota topenia 108,0 -109,5 °C, MH+ m/z = 371.
Príklad 20
Príprava fenylmetyl [2R-hydroxy-3-[(3-metylbutyl) (fenyl -sulfonyl)amino]-l S-(fenylmetyl) propyl]karbamátu
Z reakcie N[3(S)-benzyloxykarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl] N-izoamylamínu (1,47 g, 3,8 mmól), trietylaminu (528 gl, 3,8 mmól) a benzénsulfonylchloridu (483 gl, 3,8 mmól) sa získa fenylmetyl [2R-hydroxy-3-[(3-metylbutyl)(fenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]karbamát. Stĺpcovou chromatografiou na silikagéli pomocou chloroformu obsahujúceho 1 % etanol sa získal čistý produkt. Analýza: vypočítané pre C29H36N2O5S: C, 66,39; H, 6,92; N, 5,34. Zistené: C, 66,37; H, 6,93; N, 5,26.
Príklad 21
Príprava 2R-hydroxy-3-[[(4-aminofeny)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylamínu
Časť A:
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(4-nitrofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej
K roztoku 4,0 g (10,8 mmól) N-[3S-benzyloxykarbonylamino-2R-hydroxy-4-fenyl]-N-izobutylamínu v 50 ml bezvodého dichlórmetánu sa pridalo 4,5 ml (3,27 g, 32,4 mmól) trietylamínu. Roztok sa vychladli na 0 °C a pridalo sa 2,63 g (11,9 mmól) 4-nitrobenzénsulfonylchloridu, miešal sa 30 minút pri 0 °C a potom 1 hodinu pri izbovej teplote. Pridal sa octan etylnatý, roztok sa premyl s 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, solankou, vysušil a skoncentroval sa s výťažkom 5,9 g surového materiálu. Tento sa rekryštalizoval z octanu etylnatého/hexánu so získaním 4,7 g čistého fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(4-nitrofenyl)sulfonyl](2-mety)propyl)amino]-lS-(fenylmctyl)propylkarbamidovej, m/e = 556 (M+H).
Časť B:
Príprava 2R-hydroxy-3-[[(4-aminofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu
Roztok 3,0 g (5,4 mmól) fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(4-nitrofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej v 20 ml octanu etylnatého sa hydrogenoval nad 1,5 g 10 % paládia na uhlíku ako katalyzátora pri 35 psig vodíka 3,5 hodiny. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a roztok sa skoncentroval so získaním 2,05 g požadovaného 2R-hydroxy-3-[[(4-aminofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl) propylaminu, m/e = 392 (M+H).
Príklad 22
Príprava 2R-hydroxy-3-[[(3-aminofenynsulfonyl](2-metylpropyl)aminol-lS-(fenylmetyl)propylamínu
Časť A:
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[(3-nitrofenylsulfonyl) (2-metylpropyl)amino]-l S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej
K roztoku 1,1 g (3,0 mmól) N-[3S-benzyloxykarbonylamino-2R-hydroxy-4-fenyl]-N-izobutylamínu v 15 ml bezvodého dichlórmetánu sa pridalo 1,3 ml (0,94 g, 9,3 mmól) trietylamínu. Roztok sa vychladil na 0 °C a pridalo sa 0,67 g (3,0 mmól) 3-nitrobenzénsulfonylchloridu, miešal sa 30 minút pri 0 °C a potom 1 hodinu pri izbovej teplote. Pridal sa octan etylnatý, premyl sa s 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným hydrouhličitanom sodným, solankou, vysušil a skoncentroval sa so získaním 1,74 g surového materiálu. Tento sa rekryštalizoval z octanu etylnatého/hexánu so získaním 1,40 g čistého fenylmetylesteru kyseliny [2R-hydroxy-3-[(3-nitrofenylsulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmctyl) propylkarbamidovej, m/e = 562 (M+Li).
Časť B:
Príprava 2R-hydroxy-3-[[(3-aminofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenyl-metyl)propylamínu
Roztok 1,33 g (2,5 mmól) fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[(3-nitrofenyl sulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovcj 40 ml metanolu/tetrahydrofuránu 1 : 1 sa hydrogenoval nad 0,70 g 10 % paládia na uhlíku ako katalyzátora pri 40 psig vodíka 1,5 hodiny. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a roztok sa skoncentroval so získaním 0,87 g požadovaného 2R-hydroxy-3-[[(3-aminofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl) propylaminu.
Príklad 23
Príprava 2S-[(pyrolidin-1 -yl)acetylamino]-N-[2R-hydroxy-3-[N1-(2-metylpropyl)-N'-(2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid
Časť A:
Príprava hydrochloridu kyseliny pyrolidínoctovej
Roztok 19,6 g (101 mmól) brómoctanu t-butylnatého v 150 ml THF sa vychladli v ľadovom kúpeli a pôsobilo sa naň po kvapkách počas približne viac ako 0,5 hodiny roztokom 14,4 g (202 mmól) pyrolidínu v 75 ml THF, so získaním bielej zrazeniny. Kúpeľ sa odstránil a reakčná suspenzia sa miešala dve hodiny. Tuhá látka sa odstránila filtráciou a filtrát sa skoncentroval za zníženého tlaku s výťažkom čírej kvapaliny nad tuhou látkou oranžovej farby. Kvapalina sa vychladila v ľadovom kúpeli, potom sa na ňu pôsobilo so 40 ml (80 mmól) 4 N HC1 v dioxáne a miešala sa 15 hodín. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, a zvyšok sa rozmiešal s dietyléterom, potom sa prefiltroval so získaním 12,9 g požadovanej kyseliny ako špinavobielej tuhej látky.
Časť B:
Príprava 5-(2,3-dihydrobenzofuranyl)sulfonylchloridu
K roztoku 3,35 g bezvodého N,N-dimetylformamidu pri 0 °C v dusíku sa pridalo 6,18 g sulfurylchloridu, čím vznikla tuhá látka. Po miešaní 15 minút, pridalo sa 4,69 g
2,3-dihydrobenzofuránu, a zmes sa zahrievala na 100 °C 2 hodiny. Reakcia sa vychladila, vyliala sa do ľadovej vody, vyextrahovala metylénchloridom, vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala a surový materiál sa skoncentroval. Tento sa potom rekryštalizoval z octanu etylnatého so získaním 2,45 g 5-(2,3-dihydrobenzofuranyl)sulfonylchloridu.
Časť C:
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(feny lmetyljpropylkarbamidovej
K roztoku 1,11 g (3,0 mmól) N-[3S-benzyloxykarbonylamino-2R-hydroxy-4-fenyl]-N-izobutylamínu v 20 ml bezvodého dichlórmetánu sa pridalo 1,3 ml (0,94 g, 9,3 mmól) trietylamínu. Roztok sa vychladil na 0 °C a pridalo sa 0,66 g 5-(2,3-dihydrobenzofuranyl)sulfonylchloridu, miešal sa 15 minút pri 0 °C, potom 2 hodiny pri izbovej teplote. Pridal sa octan etylnatý, roztok sa premyl 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným hydrouhličitanom sodným, solankou, vysušil sa a skoncentroval s výťažkom 1,62 g surového materiálu. Tento sa rekryštalizoval z dietyléteru so zís20 kaním 1,17 g čistého fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej.
Časť D:
Príprava 2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylamínu
Roztok 2,86 g fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej v 30 ml tetrahydrofuránu sa hydrogenoval pomocou 0,99 g 10 % paládia na uhlíku pri 50 psig vodíka 16 hodín. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a filtrát sa skoncentroval so získaním 1,99 g požadovaného 2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylaminu.
Časť E:
Príprava 2S-[(karbobenzyloxy)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(2,3-dihydrobcnzofuran-5-ylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu
Roztok 5,8 g (22,0 mmól) N-CBZ-L-izoleucínu v 45 ml bezvodého Ν,Ν-dimetylformamidu (DMF) sa vychladli na 0 °C a pridalo sa 3,9 g (28,7 mmól) N-hydroxybenzotriazolu (HOBT) a 4,2 g (22,0 mmól) l-(3-dimetylaminopropyl)3-etylkarbodiimid hydrochloridu (EDC). Ľadový kúpeľ sa odstránil po 20 minútach a roztok sa miešal ďalších 40 minút. K reakčnému roztoku sa potom pridal roztok 8,0 g (19,1 mmól) 2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylamínu a 2,2 g (22,0 mmól) 4-metylmorfolínu v 25 ml bezvodého DMF a miešal sa 15 hodín. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi 300 ml octanu etylnatého a 120 ml 5 % roztoku kyslého síranu draselného. Vrstvy sa odseparovali, a organická vrstva sa premyla vždy so 120 ml nasýteného roztoku hydrouhličitanu sodného, vody a solanky, potom sa vysušila nad bezvodým síranom horečnatým, prefíltrovala sa a skoncentrovala vo vákuu so získaním 16,7 g surového materiálu. Surový materiál sa vykryštalizoval z etanolu s výťažkom 12,0 g (94 %) 2S-[(karbobenzyloxy)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu: m/e = 672 (M+Li).
Časť F:
Príprava 2S-amino-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu
Do Fischer-Porterovej banky vybavenej magnetickým miešadlom sa pridalo 11,9 g (17,9 mmól) 2S-[(karbobenzyloxy)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu a 75 ml tetrahydrofuránu (THF). Roztok sa hydrogenoval v prítomnosti 5 g 10 % paládia na uhlíku ako katalyzátora (50 hmotnostných % vody) pri 50 psig vodíka 4 hodiny pri izbovej teplote. Katalyzátor sa odstránil filtráciou, a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v 300 ml octanu etylnatého a premyl sa vždy so 120 ml nasýteného roztoku hydrouhličitanu sodného a solanky, potom sa vysušil nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval za zníženého tlaku so získaním 8,8 g požadovaného produktu, m/e = 532 (M+H).
Časť G:
Príprava 2S-[(pyrolidin-1 -yl)acetylamino]-N-[2R-hydroxy-3-[N1-(metylpropyl)-N'-(2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu
Roztok 3,7 g (22,1 mmól) hydrochloridu kyseliny pyrolidínoctovej v 45 ml bezvodého DMF sa vychladil na 0 °C a pridalo sa 3,4 g (24,7 mmól) HOBT a 3,6 g (19,0 mmól) EDC. Ľadový kúpeľ sa odstránil po 20 minútach a roztok sa ďalej miešal ešte 40 minút. K reakčnému roztoku sa potom pridal roztok 8,8 g (16,5 mmól) 2S-amino-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu a 4,5 g (44,1 mmól) 4-metylmorfolínu v 25 ml bezvodého DMF a miešal sa 16 hodín. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi 300 ml octanu etylnatého a 120 ml 5 % roztoku hydrosíranu draselného. Vrstvy sa odseparovali, a organická vrstva sa premyla vždy so 120 ml nasýteného roztoku hydrouhličitanu sodného, vody a solanky, potom sa vysušila nad bezvodým síranom horečnatým, prefíltrovala sa a skoncentrovala vo vákuu so získaním 9,9 g surového materiálu. Opäť sa spustila kopulačná reakcia s použitím 2,5 g (15,1 mmól) hydrochloridu kyseliny pyrolidínoctovej, 2,3 g (17,0 mmól) HOBT, 2,45 g (12,8 mmól) EDC, 3,0 g (30,0 mmól) 4-metylmorfolínu, a 9,9 g surového produktu namiesto amínu z časti B. Reakcia sa zopakovala s výťažkom 10,2 g surového produktu. Purifikácia sa uskutočnila pomocou chromatografii Prep 2000 na silikagéli s použitím 70 - 100 % (5 % metanolu/95 % octanu etylnatého)/hexánu s výťažkom požadovaného produktu ako bielej tuhej látky, m/e = 649 (M+Li).
Príprava N-[l,l-dimetyletoxyl)karbonyl]-N-[2-metylpropyl] -3 S-[N '-(fenylmetoxykarbonyl)amino] -2R-hydroxy-4-fenylbutylamínu
K roztoku 7,51 g (20,3 mmól) N-[3S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenylbutyl]-2-metylpropylamínu v 67 ml bezvodého tetrahydrofuránu sa pridalo 2,25 g (22,3 mmól) trietylamínu. Po vychladení na 0 °C sa pridalo 4,4 g (20,3 mmól) di-terc-butylhydrouhličitanu a miešanie pokračovalo pri izbovej teplote 21 hodín. Prchavé látky sa odstránili vo vákuu, pridal sa octan etylnatý, potom sa roztok premyl s 5 % roztokom kyseliny citrónovej, nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, solankou, vysušil sa nad síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval so získaním 9,6 g surového produktu. Po chromatografii na silikagéli s použitím 30 % octanu etylnatého/hexánu sa získalo 8,2 g čistého N-[[3S-(fenylmetylkarbamoyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenyl]-1 -[(2-metylpropyl)amino-2-( 1,1 -dimetyletoxyl)karbonyl]butánu, hmotnostné spektrum m/e = 477 (M+Li).
Príklad 25
Príprava 2S-[[brómacetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[Nl-(3-metyl-butyl)-N1 -(fenylsulfonyl)amino] -1 S-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamidu
Časť A:
K roztoku N-CBZ-L-terc-leucínu (450 mg, 1,7 mmól) a N-hydroxybenzotriazolu (260 mg, 1,7 mmól) v DMF (10 ml) sa pridal EDC (307 mg, 1,6 mmól). Roztok sa miešal 60 minút pri izbovej teplote a potom sa pridal 2R-hydroxy-3-[N-(3 -metylbutyl)-N-(fenylsul fonyljamino] -1 S-(fenylmetyl)propylamín (585 mg, 1,5 mmól) v DMF (2 ml). Reakčná zmes sa miešala 16 hodín pri izbovej teplote, potom sa vyliala do 50 % nasýteného roztoku hydrouhličitanu sodného (200 ml). Vodný roztok sa vyextrahoval trikrát s octanom etylnatým (50 ml). Skombinované vrstvy octanu etylnatého sa premyli vodou (50 ml) a nasýteným roztokom NaCl (50 ml), potom sa vysušili nad síranom horečnatým. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získal olej, ktorý sa chromatografoval na silikagéli (50 g) eluovaním s 20 % octanom etylnatým v hexáne. Získal sa fenylmetyl [lS-[[[2R-hydroxy-3-[(3-mctylbutyl)(fenylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]amino]karbonyl]-2,2-dimetyIpropyl]karbamát ako tuhá látka. Analýza: vypočítané pre C35H47N3O6S: C, 65,91; H, 7,43; N, 6,59. Zistené: C, 65,42; H, 7,24; N, 6,55.
Časť B:
Roztok fenylmetyl [lS-[[[2R-hydroxy-3-[(3-metylbutyl)(fenylsulfonyl)-amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]amino]karbonyl]-2,2-dimetylpropyl]karbamátu (200 mg, 0,31 mmól) v metanole (15 ml) sa hydrogenoval nad 10 % paládia na uhlíku 2 hodiny. Reakčná zmes sa prefiltrovala cez rozsievkovú zeminu a skoncentrovala sa na olej.
Časť C:
Získaný voľný amín z časti B (150 mg, 0,3 mmól) sa skombinoval s diizopropyletylamínom (114 μΐ, 0,33 mmól) v dichlórmetáne (5 ml). K tomu sa po kvapkách pridal brómacetylchlorid (27 μΐ, 0,33 mmól). Reakčná zmes sa miešala 30 minút pri izbovej teplote, potom sa zmes zriedila dichlórmetánom (30 ml) a vyextrahovala pomocou 1 N HCI, vody, a potom nasýteným roztokom NaCl (po 25 ml). Organický roztok sa vysušil nad MgSO4 a skoncentroval sa do tuhej látky. 2S-[[Brómacetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylbutyl)(fenylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetylbutánamid bol dostatočne čistý na použitie v ďalšom kroku. Tento materiál možno pripraviť aj substitúciou brómacetanhydridu za brómacetylchlorid, alebo možno použiť chlóracetylchlorid alebo chlóracetanhydrid.
Príklad 26
Príprava 2S-[chlóracetylammo]-N-[2R-hydroxy-3-[N'-(2-metylbutyl-N'-(fenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentán amidu
Časť A:
K. roztoku 2R-hydroxy-3-[N-(3-metylbutyl)-N-(fenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylaminu (2,79 g, 7,1 mmól) v 27 ml dioxánu sa pridal (2,3 g, 7,1 mmól) N-t-butylkarbonyl-L-izoleucín-N-hydroxysukcínamidester, a reakčná zmes a miešala v dusíkovej atmosfére 16 hodín. Obsah reakčnej zmesi sa skoncentroval vo vákuu, a zvyšok sa rozpustil v octane etylnatom, premyl sa 5 % vodným roztokom hydrosíranu draselného, nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, a nasýteným roztokom chloridu sodného. Organická vrstva sa vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 4,3 g surového materiálu, ktorý sa chromatografoval pomocou octanu etylnatého/hexánu 3 : 1 so získaním 3,05 g, 72 % výťažok, 2S-[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylbutyl)fenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyľ)propyl]-3-metylpentánamidu
Časť B:
(3,05 g, 5,0 mmól) produktu z časti A sa rozpustilo v 20 ml 4 N HCI v dioxáne a miešalo sa v dusíkovej atmosfére 1,5 hodiny. Obsah sa skoncentroval vo vákuu a spláchol sa dietyléterom. Surová hydrochloridová soľ sa úplne vyčerpala pri 1 mm Hg s výťažkom 2,54 g produktu ako hydrochloridovej soli.
Časť C:
(2,54 g, 5,0 mmól) amínhydrochloridu sa rozpustilo v 50 ml tetrahydrofuránu a k tomu sa pridalo (1,01 g, 10 mmól) 4-metyl-morfolínu, keď vzniká zrazenina. K tejto suspenzii sa pridal chlóracetanhydrid (0,865 g, 5,0 mmól) a miešala sa 40 minút. Obsah sa skoncentroval vo vákuu a zvyšok sa rozdelil v octane etylnatom (200 ml) a 5 % KHSO4. Organická vrstva sa premyla nasýteným hydrouhličitanom sodným a nasýteným chloridom sodným, vysušila sa nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala s výťažkom surového produktu. Purifikáciou pomocou silikagélovej chromatografie (octan etylnatý/hexán, 1:1, ako eluenty) sa získalo 1,89 g čistého chlóracetamidu.
Príklad 27
Príprava 2S-[(pyrolidin-l-yl)acetylamino]-N-[2R-hydroxy-3-[N1-(2-metylpropyl-N'-(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3 S-metylpentánamidu
Časť A:
K vychladenému roztoku (2,31 g, 10 mmól) N-t-Boc-L-izoleucínu a (2,00 g, 13,11 mmól) N-hydroxybenzotriazolu v 17 ml Ν,Ν-dimetylformamidu sa pridalo 1,91 g (10 mmól) EDC a miešal sa pri 0 °C jednu hodinu. K tomu sa pridal roztok 4,0 g (10 mmól) 2R-hydroxy-3-[(2-metylpropyl)(4-metoxyfenylsulfonyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propylamínu v 6 ml Ν,Ν-dimetylformamidu a roztok sa miešal 16 hodín. Rozpúšťadlo sa odstránilo rotačným odparením, nahradilo sa octanom etylnatým, a roztok sa premyl nasýteným roz tokom hydrouhličitanu sodného, 5 % kyselinou citrónovou a solankou. Organická zložka sa vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 6,1 g surového produktu, ktorý sa chromatografoval na silikagéli s eluentom v zložení octan etylnatý/hexán 1 : 1 so získaním 5,12 g (výťažok 83 %) 2S-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propy1]-3S-metylpentánamidu.
Časť B:
5,00 g (8,0 mmól) produktu z časti A sa rozpustilo v 20 ml 4 N HCI v dioxáne a roztok sa miešal 20 minút. Z vyzrážaného produktu sa dvakrát odstránil dietyléter so získaním 2S-(amino)-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamid · hydrochloridu, ktorý sa použil v časti C bez ďalšej purifikácie.
Časť C:
Aminhydrochlorid z časti B sa rozpustil v 45 ml metylénchloridu a pridali sa 3 g Ν,Ν-diizopropyletylamínu a potom 1,22 g (7,11 mmól) chlóracetanhydridu. Roztok sa miešal pri izbovej teplote 30 minút. Obsah sa skoncentroval vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi octan etylnatý a vodu. Organická vrstva sa premyla s 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného a solankou. Organická zložka sa vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala vo vákuu so získaním 2S- [(ch lóracetyl)amino]-N- [2R-hydroxy-3 - [(3 -metylpropyl) (4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmctyl)propyl)-3S-metylpentánamidu ako surovej bielej peny, ktorá sa použila v časti D bez ďalšej purifikácie.
Časť D:
4,8 g (8,0 mmól) 2S-[(chlóracetyl)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[(3-metylpropyl)(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentanamidu sa rozpustilo v 15 ml tetrahydrofuránu a tomu sa pridala voda, potom 2,8 ml (40 mmól) pyrolidínu a reakčná zmes sa miešala 1,5 hodiny. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v octane etylnatom. Zmes sa premiešala následne s nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného a solankou, vysušila sa nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala vo vákuu so získaním 5,6 g surového produktu. Po purifikácii silikagélovou chromatografiou s eluentom 1 - 3 % metanolu v dichlórmetáne sa získalo 3,2 g 2S-[(pyrolidín-l-yl)acetylamino]-N-[2R-hydroxy-3-[N1-(2-metylpropyl)-N’-(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3S-metylpentánamidu ako bielej tuhej látky.
karbamidovej (0,30 g, 0,571 mmól) sa pridal k dobre premiešanému prášku bezvodého síranu meďnatého (1,20 g) a rodanidu draselného (1,50 g), potom sa pridal bezvodý metanol (6 ml) a výsledná hnedočiema suspenzia sa zahrievala pri spätnom toku 2 hodiny. Reakčná zmes sa prefiltrovala, filtrát sa zriedil vodou (5 ml) a zahrieval sa pri spätnom toku. K reakčnej zmesi sa pridal etanol, zmes sa vychladila a prefiltrovala. Po skoncentrovaní sa filtráciou získal zvyšok, ktorý sa chromatografoval (octan etylnatý/hexán 80 : 20) so získaním 0,26 g (78 %) požadovanej zlúčeniny ako tuhej látky.
Príklad 29
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)aminol-1 S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej
Metóda 1:
Fenylmetylester kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2-aminobenzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)aminoj-1 S-(fenyl)metylpropylkarbamidovej (0,25 g, 0,429 mmól) sa pridal k roztoku izoamylnitritu (0,116 ml, 0,858 mmól) v dioxáne (5 ml) a zmes sa zahrievala na 85 °C. Po zastavení vyvíjania dusíka sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa vyčistil chromatograficky (hexán/octan etylnatý, 5 : 3) so získaním 0,130 g (53 %) požadovaného produktu ako tuhej látky.
Metóda 2:
Surový benzotiazol-6-sulfonylchlorid v octane etylnatom (100 ml) sa pridal k N-[3S-benzyloxykarbonylamino2R-hydroxy-4-fenyl]-N-izobutylamínu (1,03 g, 2,78 mmól), potom sa pridal N-metylmorfolín (4 ml). Po miešaní pri izbovej teplote 18 hodín sa reakčná zmes zriedila octanom etylnatým (100 ml), premyla sa kyselinou citrónovou (5 %, 100 ml), hydrouhličitanom sodným (nasýtený, 100 ml) a solankou (100 ml), vysušila sa (MgSO4) a skoncentrovala vo vákuu. Zvyšok sa chromatografoval (silikagél, octan etylnatý/hexán 1 : 1) so získaním 0,340 g (23 %) požadovaného produktu.
Príklad 30
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2-aminobenzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej
Fenylmetylester kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(4-aminofenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl-
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2-ammobenzotiazol-5-yl)sulfonyl(2-metylpropyl)amino]-1S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej a fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(2-aminobenzotiazol-7-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl) propylkarbamidovej
Fenylmetylester kyseliny 2R-hydroxy-3-[(3-aminofenylsulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej (0,36 g, 0,685 mmol) sa pridal k dobre premiešanému prášku bezvodého síranu meďnatého (1,44 g) a rodanidu draselného (1,80 g), potom sa pridal bezvodý metanol (10 ml) a výsledná hnedočiema suspenzia sa zahrievala pri spätnom toku 2 hodiny. Reakčná zmes sa prefiltrovala a filtrát sa zriedil vodou (5 ml) a ohrieval sa pri spätnom toku. K reakčnej zmesi sa pridal etanol, zmes sa vychladila a prefiltrovala. Po skoncentrovaní sa filtráciou získal zvyšok, ktorý sa chromatografoval (octan etylnatý : hexán, 1 : 1) so získaním 0,18 g (45 %) 7-izoméru ako tuhej látky. Ďalším eluovaním kolóny octanom etylnatým/hexánom (3 : 2) sa získalo 0,80 g (20 %) 5-izoméru ako tuhej látky.
Príklad 31
Príprava 3 S-amino-1 -[N-(2-metylpropyl)-N-(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-4-fenyl-2R-butanolu
Časť A:
N-Bcnzyloxykarbonyl-3(S)-amino-1 -chlór-4-fenyl-2(S)-butanol
K roztoku N-benzyloxykarbonyl-L-fenylalanin chlórmetylketónu (75 g, 0,2 mól) v zmesi 800 ml metanolu a 800 ml tetrahydrofuránu sa pridal hydrid sodnoboritý (13,17 g, 0,348 mól, 1,54 ekvivalentu) počas 100 minút. Roztok sa miešal pri izbovej teplote 2 hodiny a potom sa skoncentroval vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v 1000 ml octanu etylnatého a premyl sa s 1 N KHSO4, nasýteným vodným roztokom NaHCO3, nasýteným vodným roztokom NaCl, vysušil sa nad bezvodým MgSO4 prefiltroval a skoncentroval sa vo vákuu so získaním oleja. Surový produkt sa rozpustil v 1000 ml hexánov pri 60 °C a nechal sa vychladnúť na izbovú teplotu, keď sa vytvorili kryštály, ktoré sa vyizolovali filtráciou a premyli sa hojným množstvom hexánov. Táto tuhá látka sa potom rekryštalizovala z horúceho octanu etylnatého a hexánov so získaním 32,3 g 43 % N-benzyloxykarbonyl-3(S)-amino-1 -chloro-4-fenyl-2(S)-butanolu, teplota topenia 150 - 151 °C, FAB MS: MLi+ = 340.
Časť B: 3(S)-[N-(Benzyloxykarbonyl)amino]-l,2(S)-epoxy-4-fenylbután
Na roztok hydroxidu draselného (6,52 g, 0,116 mól, 1,2 ekvivalentu) v 970 ml absolútneho etanolu sa pôsobilo s N-benzyloxykarbonyl-3(S)-amino-l-chlór-4-fenyl-2(S)-butanolom (32,3 g, 0,097 mól). Tento roztok sa miešal pri izbovej teplote 15 minút a potom sa skoncentroval vo vákuu so získaním bielej tuhej látky. Tuhá látka sa rozpustila v dichlórmetáne a premyla sa vodou, vysušila sa nad bezvodým
MgSO4, prefiltrovala sa a skoncentrovala vo vákuu so získaním bielej tuhej látky. Tuhá látka sa vykryštalizovala z hexánov a octanu etylnatého so získaním 22,3 g, 77 % 3(S)-[N-benzyloxykarbonyl)amino]-1,2(S)-epoxy-4-fenylbutánu, teplota topenia 102 - 103 °C, FAB MS: MH+ = 298.
Časť C: N-[3(S)-Benzyloxykarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-fenyl]N-izobutylamín
Roztok N-benzylkarbonyl-3(S)-amino-l ,2-(S)-epoxy-4-fenylbutánu (50,0 g, 0,168 mol) a izobutylamínu (246 g, 3,24 mól, 20 ekvivalentov) v 650 ml izopropylalkoholu sa zahrieval na refluxnú teplotu 1,25 hodiny. Roztok sa ochladil na izbovú teplotu, skoncentroval sa vo vákuu a potom sa vylial do 1 1 miešaného hexánu, čím sa produkt z roztoku vykryštalizoval. Produkt sa vyizoloval filtráciou, vysušil na vzduchu so získaním 57,56 g 92 % N[3(S)-benzyloxykarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-fcnyl]-N-izobutylamínu, teplota topenia 108,0- 109,5 °C, MH+m/z = 371.
Časť D:
Fenylmetyl [2(R)-hydroxy-3-[N-(2-metylpropyl)-N-(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]karbamát
Amín z časti C (936,5 mg, 2,53 mmól) a trietylamín (2,88,5 mg, 2,85 mmól) sa rozpustil v 20 ml dichlórmetánu a na roztok sa pôsobilo 4-metoxybenzénsulfonylchloridom (461 mg, 2,61 nnol) Roztok sa miešal pri izbovej teplote 16 hodín a potom sa skoncentroval vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v octane etylnatom a tento roztok sa premyl s 1 N KHSO4, nasýteným vodným roztokom NaHCO3, solankou, vysušil sa nad bezvodým MgSO4, prefiltroval sa a skoncentroval s výťažkom číreho oleja (1,234 g). Olej sa vykryštalizoval zo zmesi éteru a hexánov, 729,3 mg, 56,5 %, teplota topenia 95 - 99 °C, FAB MS: MH+ = 511.
Časť E:
S-Amino-1 -[N-(2-metylpropyl)-N-(4-metoxyfenylsulfonyl)amino]-4-fenyl-2R-butanol
Roztok fenylmetyl 2(R)-hydroxy-3-[N-(2-metylpropyl)-N-(4-metoxyfenylsulfonyl) amino] l-S-(fenylmetyl) propylkarbamátu (671,1 mg, 1,31 mmól) z časti D v 10 ml metanolu sa hydrogenoval nad 50 mg 10 % paládia na uhlíku pri 40 psig pri izbovej teplote 15 hodín. Katalyzátor sa odstránil filtráciou cez rozsievkovú zeminu a filtrát sa skoncentroval so získaním bielej peny, 474,5 mg, 96 %, FAB MS: MH+ = 377.
Príklad 32
Príprava 1,3-benzodioxol-5-sulfonylchloridu
Metóda 1:
K roztoku 4,25 g bezvodého N,N-dimetylformamidu pri 0 °C v dusíku sa pridalo 7,84 g sulfurylchloridu, čím vznikla tuhá látka. Po miešaní 15 minút sa pridalo 6,45 g
1,3-benzodioxolu, a zmes sa zahrievala na 100 °C 2 hodiny. Reakčná zmes sa vychladila, vyliala sa do ľadovej vody, vyextrahovala sa metylénchloridom, vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 7,32 g surového materiálu ako čierneho oleja. Tento sa chromatografoval na silikagéli pomocou 20 % metylén24 chloridu/hexánu so získaním 1,9 g (l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonylchloridu.
Metóda 2:
Do 22-litrovej banky s guľatým dnom vybavenej s mechanickým miešadlom, chladiacim kondenzátorom, ohrievacím plášťom a deliacim lievikom s vyrovnávaním tlaku sa pridal komplex oxidu sírového a DMF (2778 g, 18,1 mól). Potom sa pridal dichlóretán (4 litre) a začalo sa miešanie. Potom sa cez deliaci lievik pridal 1,3-benzodioxol (1905 g, 15,6 mól) počas 5 minút. Teplota sa potom zvýšila na 75 °C a udržiavala sa 22 hodín (NMR ukázala, že reakcia sa ukončila po 9 hodinách). Reakčná zmes sa schladila na 26 °C a pridal sa oxalylchlorid (2290 g, 18,1 mol) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pod 40 °C (1,5 hodiny). Zmes sa zahrievala na 67 °C 5 hodín, potom sa schladila na 16 °C pomocou ľadového kúpeľa. Reakcia sa stlmila pomocou vody (5 1) takou rýchlosťou, ktorá udržala teplotu pod 20 °C. Po úplnom pridaní vody sa zmes miešala 10 minút. Vrstvy sa odseparovali a organická vrstva sa opäť premyla dvakrát vodou (5 1). Organická vrstva sa vysušila síranom horečnatým (500 g) a prefiltrovala sa, aby sa odstránilo vysušovadlo. Rozpúšťadlo s odstránilo vo vákuu pri 50 °C. Výsledná teplá kvapalina sa nechala vychladnúť, keď sa začala vytvárať tuhá látka. Po uplynutí jednej hodiny sa tuhá látka premyla s hexánom (400 ml), prefiltrovala a vysušila so získaním požadovaného sulfonylchloridu (2823 g). Hexánové premytie sa skoncentrovalo a výsledná tuhá látka sa premyla s 400 ml hexánu, aby sa získal ďalší sulfonylchlorid (464 g). Celkový výťažok bol 3287 g (95,5 % na základe 1,3-benzodioxolu).
Metóda 3:
l,4-Benzodioxán-6-sulfonylchlorid sa pripravil podľa postupu opísaného v EP 583960, začleneného sem ako odkaz.
Príklad 33
Príprava l-[N-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl]-N-(2-metylpropyl)amino]-3(S)-[bis(fenylmetyl)amino]-4-fenyl-2(R)-butanolu
Metóda 1:
Do 5000 ml-ovej banky s tromi hrdlami, vybavenej mechanickým miešadlom, sa pridal N-[3(S)-[N,N-bis(fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutylamín · soľ kyseliny šťaveľovej (354,7 g, 0,7 mól) a 1,4-dioxán (2000 ml). Potom sa pridal roztok uhličitanu draselného (241,9 g, 1,75 mól) vo vode (250 ml). Výsledná heterogénna zmes sa miešala 2 hodiny pri izbovej teplote, potom sa pridal l,3-benzodioxol-5-sulfonylchlorid (162,2 g, 0,735 mól) rozpustený v 1,4-dioxáne (250 ml) počas 15 minút. Reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote 18 hodín. Do reaktoru sa pridal octan etylnatý (1000 ml) a voda (500 ml) a zmes sa miešala ďalšiu hodinu. Vodná vrstva sa odseparovala a ďalej extrahovala octanom etylnatým (200 ml). Skombinované vrstvy octanu etylnatého sa premyli s 25 % solankou (500 ml) a vysušili sa nad bezvodým síranom horečnatým. Po prefiltrovaní a premytí síranu horečnatého octanom etylnatým (200 ml), rozpúšťadlo vo filtráte sa odstránilo za zníženého tlaku so získaním požadovaného sulfónamidu ako viskózneho žltého speneného oleja (440,2 g, výťažok 105 %). HPLC/MS (elektrosprej) (m/z 601 [M+H]+).
Príprava l-[N-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl]-N-(2-metylpropyl)amino]-3(S)-amino-4-fenyl-2(R)-butanolu · soľ kyseliny metánsulfónovej
Metóda 1:
Surový l-[N-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl]-N-(2-metylpropyl)amino]-3(S)-[bis(fenylmetyl)amino]-4-fenyl-2(R)-butanol (6,2 g, 0,010 mól) sa rozpustil v metanole (40 ml). K roztoku sa potom pridala kyselina metánsulfónová (0,969 g, 0,010 mól) a voda (5 ml). Zmes sa umiestnila do 500 mlovej Parrovej hydrogenačnej nádoby obsahujúcej 20 % Pd(OH)2 na uhlíku (255 mg, obsah vody 50 %). Nádoba sa umiestnila do hydrogenátora a prefúkala sa 5-krát s dusíkom a 5-krát s vodíkom. Reakcia prebiehala pri 35 °C s tlakom vodíka 63 PSI počas 18 hodín. Pridal sa ďalší katalyzátor (125 mg) a po prefúkaní hydrogenácia prebiehala ďalších 20 hodín. Zmes sa prefiltrovala cez celit, ktorý sa premyl metanolom (2 x 10 ml). Približne jedna tretina metanolu sa odstránila za zníženého tlaku. Zvyšný metanol sa odstránil azeotropickou destiláciou s toluénom pri 80 torr. Toluén sa pridal v 15, 10, 10 a 10 ml dávkach toluénu. Produkt sa zo zmesi vykryštalizoval, prefiltroval a premyl dvakrát s 10 ml dávkami toluénu. Tuhá látka sa vysušila pri izbovej teplote pri 1 torr počas 6 hodín so získaním amínovej soli (4,5 g, 84 %). HPLC/MS (elektrosprej) bol v súlade s požadovaným produktom (m/z 421 [+H]+).
Metóda 2
Časť A:
N-[3(S)-[N,N-bis(Fenylmetyl)amino]-2(R)-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-izobutylamín · soľ kyseliny šťaveľovej (2800 g, 5,53 mól) a THF (4 1) sa pridali do 22-litrovej banky s guľatým dnom vybavenej mechanickým miešadlom. Uhličitan draselný (1921 g, 13,9 mól) sa rozpustil vo vode (2,8 1) a pridal sa k suspenzii s THF. Zmes sa potom miešala jednu hodinu. l,3-Benzodioxol-5-sulfonylchlorid (1281 g, 5,8 mól) sa rozpusti] v THF (1,4 1) a pridal sa k reakčnej zmesi počas 25 minút. Ďalších 200 ml THF sa použilo na prcpláchnutie lievika. Reakčná zmes sa miešala 14 hodín a potom sa pridala voda (4 1). Zmes sa miešala 30 minút a vrstvy sa nechali od seba oddeliť. Vrstvy sa odstránili a vodná vrstva sa dvakrát premyla s THF (500 ml). Skombinované THF vrstvy sa vysušili síranom horečnatým (500 g) 1 hodinu. Tento roztok sa potom prefiltroval, aby sa odstránilo vysušovadlo, a použil sa v ďalších reakciách.
Časť B:
K roztoku THF so surovým l-[N-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl]-N-(2-metylpropyl)amino]-3(S)-[bis(fenylmetyl)amino]-4-fenyl-2(R)-butanolom sa pridala voda (500 ml) a potom kyselina metánsulfónová (531 g, 5,5 mól). Roztok sa miešal, aby sa zabezpečilo dôkladné premiešame, a pridal sa do 5-galónového autoklávu. Do autoklávu sa pridal Pearlmanov katalyzátor (200 g 20 % Pd(OH)2 nad uhlíkom/50 % vody) pomocou THF (500 ml). Reaktor sa štyrikrát prefúkal dusíkom a štyrikrát vodíkom. Reaktor sa potom nabil so 60 psig vodíka a začalo sa miešanie pri 450 obrátkach za minútu. Po 16 hodinách HPLC analýza ukázala, že stále ešte bolo prítomné malé množstvo monobenzyl medziproduktu. Pridal sa ďalší katalyzátor (50 g) a reakcia sa nechala bežať ccz noc. Roztok sa potom prefiltroval cez celit (500 g), aby sa odstránil katalyzátor, a skoncentroval sa vo vákuu v piatich dávkach. Ku každej dávke sa pridal toluén (500 ml), a odstránil sa vo vákuu k azeotropicky odstránenej reziduálnej vode. Výsledná tuhá látka sa rozdelila na tri časti a každá sa premyla metyl r-butyléterom (2 1) a prefiltrovala sa. Výsledné rozpúšťadlo sa odstránilo pri izbovej teplote vo vákuu pri menej než 1 torr so získaním 2714 g požadovanej soli.
V prípade potreby možno produkt ďalej čistiť nasledovným postupom. Celkove 500 ml metanolu a 170 g uvedeného materiálu sa ohrievalo na refluxnú teplotu, až kým sa celkom nerozpustil. Roztok sa vychladil, pridalo sa 200 ml izopropanolu a potom 1000 - 1300 hexánu, čím sa vyzrážala biela tuhá látka. Po vychladení na 0 °C sa táto zrazenina zozbierala a premyla hexánom so získaním 123 g požadovaného materiálu. Počas tohto postupu pôvodný materiál, ktorý bol zmesou (95 : 5) alkoholových diastereomérov, bol väčší než 99 : 1 požadovaného diastereoméru.
Príklad 35
Príprava 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylaminu
Časť A:
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyljpropylkarbamidovej
K roztoku 3,19 g (8,6 mmól) N-[3S-benzyloxykarbonylamino-2R-hydroxy-4-fenyl]-N-izobutylamínu v 40 ml bezvodého dichlórmetánu sa pridalo 0,87 g trietylamínu. Roztok sa vychladil naO °Ca pridalo sa 1,90 g (1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonylchloridu, miešal sa 15 minút pri 0 °C, potom 17 hodín pri izbovej teplote. Pridal sa octan etylnatý, premyl sa s 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným hydrouhlíčitanom sodným, solankou, vysušil sa a skoncentroval so získaním surového materiálu. Tento sa rekryštalizoval z dietyléteru/hexánu so získaním 4,77 g čistého fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl) amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej.
Časť B:
Príprava 2R-hydroxy-3-[[( 1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonylJ(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu
Roztok 4,11 g fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[( 1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylkarbamidovej v 45 ml tetrabydrofu ránu a 25 ml metanolu sa hydrogenoval nad 1,1 g 10 % paládia na uhlíku pri 50 psig vodíka 16 hodín. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a filtrát sa skoncentroval so získaním 1,82 g požadovaného 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl) propylamínu.
Príklad 36
Príprava benzotiazoI-6-sulfonylchloridu
Časť A:
Príprava N-(4-sulfonamidofenyl)tiomočoviny
Zmes sulfanilamidu (86 g, 0,5 mól), rodanidu amónneho (76,0 g, 0,5 mól) a zriedenej kyseliny chlorovodíkovej (1,5 N, 1 1) sa mechanicky miešala a zahrievala na refluxnú teplotu 2 hodiny. Oddestilovalo sa asi 200 ml vody a skoncentrovaním reakčnej zmesi sa získala tuhá látka. Tuhá látka sa prefiltrovala, premyla sa studenou vodou, vysušila na vzduchu so získaním 67,5 g (59 %) požadovaného produktu ako bieleho prášku.
Časť B:
Príprava 2-amino-6-sulfónamidobenzotiazolu
Bróm (43,20 g, 0,27 mól) v chloroforme (200 ml) sa pridal počas 1 h k suspenzii N-(4-sulfonamidofenyl)tiomočoviny (27,72, 0,120 mól) v chloroforme (800 ml). Po pridaní sa reakčná zmes zahrievala na refluxnú teplotu 4,5 h. Chloroform sa odstránil vo vákuu a zvyšok sa opakovane destiloval s ďalšími množstvami chloroformu. Na získanú tuhú látku sa pôsobilo vodou (600 ml), potom hydroxidom amónnym (aby sa pH zmenilo na bázické), potom sa zahrievala na refluxnú teplotu 1 h. Vychladená reakčná zmes sa prefiltrovala, premyla sa vodou a vysušila so získaním 22,0 g (80 %) požadovaného produktu ako bieleho prášku.
Časť C:
Príprava kyseliny benzotiazol-6-sulfónovej
Suspenzia 2-amino-6-sulfónamido-benzotiazolu (10,0 g, 43,67 mmól) v dioxáne (300 ml) sa zahrievala na refluxnú teplotu. K reakčnej zmesi sa pridal izoamylnitrit (24 ml) v dvoch dávkach. Pozoroval sa prudký vývoj plynu (reakcia sa z bezpečnostných dôvodov spúšťala za ochranným štítom) a po 2 hodinách sa v reakčnej nádobe uložila červená zrazenina. Reakčná zmes sa za horúca prefiltrovala, tuhá látka sa premyla dioxánom a vysušila sa. Tuhá látka sa rekryštalizovala z metanolu-vody. Malé množstvo zrazeniny sa vytvorilo po dvoch dňoch. Zrazenina sa odfiltrovala a kryštalizačný lúh sa skoncentroval vo vákuu so získaním bledočervenooranžovej tuhej látky (8,0 g, 85 %) čistého produktu.
Časť D:
Príprava 6-chlórsulfonylbenzotiazolu
Tionylchlorid (4 ml) sa pridal k suspenzii kyseliny benzotiazol-6-sulfónovej (0,60 g, 2,79 mmól) v dichlóretáne (15 ml), reakčná zmes sa ohrievala na refluxnú teplotu a k reakčnej zmesi sa pridal dimetylformamid (5 ml) so získaním číreho roztoku. Po 1,5 h pri refluxe sa rozpúšťadlo vo vákuu odstránilo a nadbytočná HCI a tionylchlorid sa odstránili odparením dichlóretánom.
Príklad 37
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[( 1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-mctylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]2S-[[(pyrolidin-1 -yl)acetyl] amino] -3,3-dimetylbutánami du
Časť A:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu
K roztoku 118,8 g (0,776 mól) N-hydroxybenzotriazolu a 137,1 g (0,52 mól) N-karbobenzyloxykarbonyl-L-terc-leucínu v 750 ml bezvodého DMF pri 0 °C v dusíkovej atmosfére sa pridalo 109,1 g (0,57 mól) EDC. Po miešaní pri 0 °C 2 hodiny sa pridal roztok 273 g (0,53 mól) 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínmetán sulfonátu, predtým zneutralizovaný pomocou 228 ml (210 g, 2,08 mól) 4-metylmorfolínu, v 250 ml bezvodého DMF. Po miešaní pri 0 °C 30 minút sa zmes miešala pri izbovej teplote 18 hodín. Rozpúšťadlá sa odstránili za zníženého tlaku pri 45 °C, pridalo sa 1,5 1 octanu etylnatého, roztok sa premyl s 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným hydrouhličitanom sodným, solankou, vysušil sa nad bezvodým síranom sodným, prefiltroval sa a skoncentroval so získaním 400 g surového materiálu. Tento sa chromatografoval v troch dávkach v chromatograme Prep 2000 na silikagéli s použitím 20 % - 50 % octanu etylnatého/hexánu ako eluentu s výťažkom 320 g purifikovaného materiálu, m/e = 764 (M+Li), 98% podľa HPLC.
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3,3 -dimetylbutánamidu
Roztok 312 g uvedenej Cbz zlúčeniny v 1 1 tetrahydrofuránu sa hydrogenoval v prítomnosti 100 g 4 % paládia na uhlíku ako katalyzátora pri 60 psig vodíka 6 hodín pri izbovej teplote. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a rozpúšťadlá sa odstránili za zníženého tlaku so získaním 240 g požadovanej zlúčeniny.
Časť C
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu
K roztoku 234,3 g (0,439 mól) uvedeného amínu v 1 1 metylénchloridu sa pridalo 80 ml (59,5 g, 0,46 mól) diizopropyletylamínu, potom sa pri izbovej teplote pomaly pridalo 78,8 g (0,46 mól) chlóracetanhydridu, udržujúc teplotu pod 35 °C. Po miešaní ďalšiu hodinu HPLC analýza ukázala, že stále ešte bolo prítomné malé množstvo východiskového materiálu, a pridalo sa 1,5 g chlóracetanhydridu. Po 10 minútach sa rozpúšťadlá odstránili za zníženého tlaku, pridal sa 1 1 octanu etylnatého, roztok sa premyl 5 % kyselinou citrónovou, nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, solankou, vysušil sa nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval s výťažkom 314 g surového materiálu. Tento sa chromatografoval v 3 dávkach chromatograme Prep 2000 na silikagéli s použitím 20 až 50 % octan etylnatý/hexán so získaním 165 g požadovanej zlúčeniny, m/e = 616 (M+Li), 98 % s HPLC.
Časť D:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
K 164,2 g (0,27 mól) uvedenej chlóracetyl zlúčeniny sa pridalo 500 ml tetrahydrofuránu, rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku, aby sa odstráni] všetok octan etylnatý, potom sa pridalo 350 ml tetrahydrofuránu. K tomuto roztoku sa pri 10 °C pridalo 130 ml (1,56 mól) pyrolidínu. Po 1 hodine sa rozpúšťadlá za zníženého tlaku odstránili, pridal sa 1 liter octanu etylnatého, premyl sa nasýteným hydrouhličitanom sodným, solankou, vysušil sa nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval so získaním 185 g surového materiálu, ktorý podľa HPLC analýzy mal čistotu 98,9 %. Tento materiál sa rozdelil do 3 častí a chromatografoval sa na chromatograme Prep 2000 s použitím najprv 50 % octanu etylnatého/hexánu, potom 5 % metanolu/octanu etylnatého so získaním 160 g vyčisteného materiálu (99 % podľa HPLC). Tento sa potom rekryštalizoval zo 460 ml dietyléteru a 70 ml hexánu so získaním 121 g požadovaného produktu (> 99 % podľa HPLC), m/e = 651 (M+Li), teplota topenia = 112- 114°C.
Príklad 38
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidino)acetyl]aminol-3S-metylpentánamidu
Časť A:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-f[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3S-metylpentánamidu
K vychladenému roztoku N-t-Boc-L-izoleucínu 2,02 g (8,74 mmól) a 2,00 g (13,11 mmól) N-hydroxybenzotriazolu v 17 ml Ν,Ν-dimetylformamidu sa pridalo 1,84 g (9,61 mmól) EDC a miešalo sa pri 0 °C jednu hodinu. K tomuto sa pridal roztok 3,67 g (8,74 mmól) 2R-hydroxy-3-[[l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyljpropylamínu v 6 ml Ν,Ν-dimetylformamidu a roztok sa miešal 16 hodín. Rozpúšťadlo sa vo vákuu odstránilo, nahradilo sa octanom etylnatým, a premylo sa nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, 5 % kyseliny citrónovej a solanky. Organické vrstvy sa vysušili nad síranom horečnatým, prefiltrovali sa a skoncentrovali so získaním 6,1 g surového produktu, ktorý bol chromatografovaný na silikagéli s použitím octanu etylnatého/hexánu, 1:1, ako eluentu, so získaním 4,3 g (výťažok 78 %) N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]3S-metylpentanamidu.
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-l S-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3S-metylpentánamid · hydrochloridovej soli
N-[2R-Hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3S-metylpentánamid (4,29 g, 6,77 mmól) sa rozpustil v 20 ml 4 N HCI v dioxáne a miešal sa 20 minút. Vyzrážaný produkt sa zbavil dvakrát dietyléteru a surová hydrochloridová soľ sa použila v ďalších reakciách.
Časť C:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3S-metylpentánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino] -1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3 Smetylpentánamid · hydrochloridová soľ (3,62 g, 6,77 mmól) sa rozpustila v 45 ml metylénchloridu, a k tomuto sa pridalo 1,3 g (10,15 mmól) Ν,Ν-diizopropyletylamínu, aby sa soľ zneutralizovala, a pridalo sa ďalších 0,923 g (7,10 mmól) diizopropyletylamínu a 1,22 g (7,11 mmól) chlóracetanhydridu. Roztok sa miešal pri izbovej teplote 30 minút. Obsah sa skoncentroval na rotačnom odparovači a zvyšok sa rozdelil medzi octan etylnatý a vodu. Organická vrstva sa premyla s 5 % kyselinou citrónovou a potom nasýteným hydrouhličitanom sodným a solankou. Organické vrstvy sa vysušili tiad síranom horečnatým, prefiltrovali sa a skoncentrovali so získaním 4,12 g surového produktu. Rekryštalizáciou z octanu etylnatého/hexánu sa získalo 3,5 g (výťažok 85 %) N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3S-metyl pentánamidu ako bielej tuhej látky; hmotnostné spektrum m/z = 616 (M+Li).
Časť D:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl]-(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidino)acetyl]amino] -3 S-metylpentánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetylamino]-3S-metylpentánamid (5,18 g, 8,49 mmól) sa rozpustil v 15 ml tetrahydrofuránu a k tomuto roztoku sa pridalo 0,5 ml vody, potom 3,62 g (50,9 mmól) pyrolidinu, a reakčná zmes sa miešala 1,5 hodiny. Rozpúšťadlá sa odstránili rotačným odparovaním a nahradili sa octanom etylnatým. Roztok sa postupne premyl nasýteným hydrouhličitanom sodným a solankou, vysušil sa nad síranom horečnatým, prefdtroval sa a skoncentroval so získaním 5,6 g surového produktu. Po purifikácii silíkagélovou chromatografiou s eluentom 1 - 3 % metanolu v dichlórmetáne sa získalo 3,8 g N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)aminoJ-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acctyl]amino]-3S-metylpentánamidu ako bielej tuhej látky.
Príklad 39
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-3-metylbutánamidu
W
Časť A:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)ammo]-lS-(fcnylmctyl)propyl]-2S-[[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3-metylbutánamidu
250 ml-ová banka s guľatým dnom vybavená magnetickým miešadlom sa naplnila N-Cbz-L-valínom (4,22 g, 16,8 mmól) v 20 ml DMF. Roztok sa vychladil na 0 °C a pridal sa HoBt (2,96, 21,9 mmól) a EDC (3,22 g, 16,8 mmól) a miešal sa 1 hodinu. K reakcii sa potom pridal N-metylmorfolín (1,7 g, 16,8 mmól), 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamín (7,55 g, 14,6 mmól) v 30 ml DMF. Reakčná zmes sa miešala cez noc pri izbovej teplote, potom sa skoncentrovala vo vákuu a rozdelila sa medzi octan etylnatý a 5 %-nú kyselinu citrónovú. Skombinované organické vrstvy sa premyli nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného a solankou a vysušili sa nad síranom sodným. Skoncentrovaním vo vákuu sa získalo 10 g surového produktu. Purifikáciou v Prep HPLC (20 - 40 % octan etylnatý/hexán) sa získalo 5,8 g (61 %) požadovaného produktu.
Časť B:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3-metylbutánamidu
300 ml-ová Fischer-Porterova nádoba vybavená magnetickým miešadlom sa naplnila N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3-metylbutánamidom (5,8 g), 2,3 g 10 % Pd-C v 75 ml tetrahydrofuránu. Reakcia sa spustila pri 50 psi H2 a hydrogenovala sa cez noc. Reakčná zmes sa prefiltrovala cez celit a skoncentrovala sa vo vákuu so získaním 4,4 g bielej peny, ktorá sa použila v nasledujúcich reakciách bez ďalšej purifikácie.
Časť C:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyljamino] -3 -metylbutánamidu
250 ml-ová banka s guľatým dnom vybavená magnetickým miešadlom sa naplnila surovým N-[[2R-hydroxy-3-[(1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3S-metylbutánamidom (4,35 g) v 60 ml CH2C12. K reakcii sa pridalo 1,19 g diizopropylamínu a potom 1,5 g chlóracetanhydridu a zmes sa miešala dovtedy, kým podľa TLC neostal nijaký východiskový materiál (asi 1,5 hodiny). Reakcia sa skoncentrovala vo vákuu a rozdelila sa medzi octan etylnatý a nasýtený hydrouhličitan sodný. Skombinované organické vrstvy sa premyli solankou a vysušili sa nad síranom sodným. Skoncentrovaním vo vákuu sa získalo 5,17 g požadovaného produktu, ktorý bol použitý v nasledujúcich reakciách bez ďalšej purifikácie.
Časť D:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-metylbutánamidu
250 ml-ová banka z guľatým dnom vybavená magnetickým miešadlom sa naplnila surovým N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3-metylbutánamidom (4,99 g) a 3,57 g pyrolidínu v 20 ml tetrahydrofuránu a 0,5 ml H2O. Po 45 minútach pri izbovej teplote TLC analýza ukázala zavŕšenú reakciu. Reakcia sa skoncentrovala vo vákuu a rozdelila sa medzi octan etylnatý a nasýtený hydrouhličitan sodný. Skombinované organické vrstvy sa premyli solankou a vysušili sa nad síranom sodným. Skoncentrovaním vo vákuu sa získalo 5,2 g surového produktu. Purifikáciou v Prep HPLC (3 % MeOH/57 % octan etylnatý/40 % hexán) sa získalo 4,3 g čistého N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-metylbutánamidu.
Príklad 40
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-metylbutánamidu
K roztoku 2,4 g N-[[2R-hydroxy-3-[(4-metoxyfenyl)sul fonyl] (2-metylpropy ljamino] -1S -(fenylmetyl)propyl] -2S-[(chlóracetyl)amino]-3-metylbutánamidu v 65 ml THF sa pridalo 0,68 ml (2,0 ekvivalenty) pyrolidínu a reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote cez noc. Reakcia sa skoncentrovala vo vákuu a rozdelila sa medzi octan etylnatý a nasýtený vodný roztok hydrouhličitanu sodného. Skombinované organické vrstvy sa premyli solankou, vysušili sa, a skoncentrovali sa do bielej peny. Rozmiešaním s dietyléterom sa získalo 1,0 g produktu (98 % čistý podľa HPLC).
Príklad 41
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[(fenylsulfonyl)(2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l -yl)acetyl]amino]-3S-metylpentánamidu
Časť A:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[fenylmetoxy)karbonyl]amino]-3S-metylpentánamidu
Roztok 6,0 g (22,6 mmól) N-CBZ-L-izoleucínu v 45 ml bezvodého DMF sa vychladil na 0 °C a pridali sa 4 g (29,5 mmól) HOBT a 4,3 g (22,6 mmól) EDC. Ľadový kúpeľ sa odstránil po 20 minútach a miešanie pokračovalo ďalších 40 minút. K reakčnej zmesi sa potom pridal roztok 7,4 g (19,7 mmól) 2R-hydroxy-3-[(fenylsulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu a 2,3 g (22,6 mmól) 4-metylmorfolínu v 25 ml bezvodého DMF a miešal sa 18 hodín. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi 300 ml octanu etylnatého a 120 ml 5 % roztoku kyslého síranu draselného. Vrstvy sa oddelili, a organická vrstva sa postupne premyla (po 120 ml) nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, vodou a solankou, potom sa vysušila nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala vo vákuu so získaním 13 g surového materiálu. Surový materiál sa vykryštalizoval v etanole. Tuhá látka sa vyizolovala fdtráciou, prepláchla sa jednou 50 ml dávkou hexánu, a vysušila sa na vzduchu so získaním 10,3 g (84 %) požadovaného produktu, m/e = 630 (M+Li).
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propy1]-2S-amino-3 S-metylpentánamidu
Fischer-Porterova nádoba vybavená magnetickým micšadlom sa naplnila 10,2 g (16,4 mmól) produktu z časti A a 75 ml tetrahydrofuránu (THF). Roztok sa hydrogenoval v prítomnosti 4 g katalyzátora (10 % paládia na uhlíku) (50 hmotnostných % vody) pri 50 psig vodíka 3 hodiny pri izbovej teplote. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a rozpúšťadlá sa odstránili za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustil v 200 ml octanu etylnatého a postupne sa premyl (po 120 ml) nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného a solankou, potom sa vysušil nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltroval sa a skoncentroval za zníženého tlaku so získaním 7,4 g požadovaného produktu, m/e = 490 (M+H).
Časť C:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[(fenylsulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyljamino] -3 S-metylpentánamidu
Roztok 3,4 g (20,2 mmól) hydrochloridu kyseliny pyrolidínoctovej v 45 ml bezvodého DMF sa vychladil na 0 °C a pridalo sa 3,1 g (22,7 mmól) HOBT a 3,3 g (17,4 mmól) EDC. Ľadový kúpeľ sa odstránil po 20 minútach a miešanie pokračovalo ďalších 40 minút. K reakčnej zmesi sa potom pridal roztok 7,4 g (16,5 mmól) aminu z časti B a 4,1 g (40,4 mmól) 4-metylmorfolínu v 25 ml bezvodého DMF a miešal sa 17 hodín. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi 300 ml octanu etylnatého a 120 ml 5 % roztok kyslého síranu draselného. Vrstvy sa oddelili a organická vrstva sa postupne premyla (po 120 ml) nasýteným roztokom hydrouhličitanu sodného, vodou a solankou, potom sa vysušili nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 8,7 g surového materiálu. Kopulačná reakcia sa spustila ešte raz s použitím 2,3 g (13,9 mmól) hydrochloridu kyseliny pyrolidinoctovej, 2,1 g (15,5 mmól) HOBT, 2,3 g (12,0 mmól) EDC, 2,8 g (27,3 mmól) 4-metylmorfolínu, a 8,7 g surového produktu namiesto aminu z časti B. Spracovanie reakcie sa zopakovalo a získalo sa 8,3 g surového produktu. Purifikácia sa urobila pomocou chromatografu Prcp 2000 na silikagéli s použitím 40 - 70 % (5 % metanol/95 % octan etylnatý)/he xán a získalo sa 5,2 g (57 %) požadovaného produktu ako bielej tuhej látky, m/e = 607 (M+Li).
Príklad 42
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acctyl]amino]-3-(metylsulfonyl)propánamid · hydrochloridovej soli
Časť A:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[( 1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-(metyltio)propánamidu
N-t-Boc-S-metyl-(L)-cysteín (2,80 g, 11,9 mmól), 1-hydrobenzotriazolhydrát (1,92 g, 12,5 mmól) a l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidhydrochlorid (2,27 g, 11,9 mmól) sa zmiešali v Ν,Ν-dimetylformamide (30,0 ml) pri 0 °C na 10 minút. Pridal sa N-metylmorfolín (3,03 g, 33,0 mmól) a roztok sa miešal ďalších 10 minút pri 0 °C. Pridal sa 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metyIpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamin a roztok sa zahrial na izbovú teplotu a miešal sa 2 hodiny. Reakčná zmes sa vyliala do octanu etylnatého (500 ml) a premyla sa 10 % vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej (3 x 100 ml), nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (3 x 100 ml) a solankou (2 x 100 ml). Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným a precedila sa cez silikagél (50 g). Požadovaný produkt (7,13 g, 11,19 mmól, výťažok 93 %) sa získal ako biela tuhá látka odstránením rozpúšťadla za zníženého tlaku; m/e vypočítané 637; zistené (M+Li) 644.
Časť B:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-l S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[( 1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-(metylsulfonyl)propánamidu
O
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodiozol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[l ,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-(metyltio)propánamid (7,10 g,
11,1 mmól) sa rozpustil v metanole (150 ml). Do roztoku sa po kvapkách pridal roztok oxonu? (20,8 g, 33,9 mmól) vo vode (150 ml) pri izbovej teplote počas 1,5 hodiny. Roztok sa zakalil a počas pridávania sa vytvorila zrazenina. Reakčná zmes sa miešala ďalšiu hodinu a pridal sa tetrahydrofurán (200 ml). Po ďalšej hodine miešania sa roztok vylial do octanu etylnatého (100 ml) a premyl sa vodou (3 x 200 ml), potom solankou (2 x 300 ml). Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Požadovaný produkt (5,75 g, 8,86 mmól, výťažok 79 %) sa získal ako špinavobiela tuhá látka; m/e vypočítané 669; zistené (M+H) 670.
Časť C:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3-(metylsulfonyl)propánamid · hydrochloridovej soli
O
N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyljaminoj-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-(mctylsulfonyl)propánamid (5,5 g, 8,20 mmól) sa rozpustil v dichlórmetáne (100 ml) pri izbovej teplote. Bezvodá kyselina chlorovodíková sa prebublávala cez roztok počas 15 minút. Roztok sa miešal pri izbovej teplote 2 hodiny a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Požadovaný produkt (4,91 g, 8,10 mmól, výťažok 99 %) sa získal ako biela tuhá látka; m/e vypočítané 569; zistené (M+Li) 576.
Časť D:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3-metylsulfonyl)propánamidu
O
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3-(metylsulfonyl)propánamid · hydrochloridová soľ (4,00 g, 6,59 mmól) sa zmiešala pri izbovej teplote s acetonitrilom (40 ml). Pridal sa trietylamín (2,10 g, 21,0 mmól) a chlóracetanhydrid (1,12 g, 6,59 mmól). Roztok sa miešal pri izbovej teplote 16 hodín a vylial sa do octanu etylnatého (250 ml). Roztok sa premyl 10 %-ným vodným roztokom kyseliny octovej (2 x 100 ml), nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (2 x 100 ml) a solankou (2 x 100 ml). Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Produkt (1,20 g, 1,85 mmól, výťažok 28 %) sa získal ako biela tuhá látka kryštalizáciou z octanu etylnatého a hexánov; m/e vypočítané 645; zistené (M+Li) 652.
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3-(metylsulfonyl)propánamid (1,2 g, 1,85 mmól) a pyrolidín (0,79 g, 11,14 mmól) sa miešali v tetrahydrofuráne (12,0 ml) pri izbovej teplote 5 hodín.
Rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustil v octane etylnatom (150 ml). Roztok sa premyl nasýteným hydrouhličitanom sodným (1 x 100 ml), nasýteným chloridom amónnym (1 x 100 ml) a napokon nasýteným hydrouhličitanom sodným (1 x 100 ml). Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Zozbierala sa biela pena. Produkt (653 mg, 0,95 mmól, výťažok 52 %) sa získal ako biela tuhá látka; m/e vypočítané 680; zistené (M+Li) 687.
Časť F:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-3-(metylsulfonyl)propánamidu hydrochloridovej soli
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-(metylsulfonyl)propánamid (300 mg, 0,44 mmól) sa rozpustil v acetonitrile (15,0 ml). Pridala sa koncentrovaná vodná kyselina chlorovodíková (100 μΐ, 1,2 mmól) a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustil v acetonitrile (30 ml) a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustil vo vode (10 ml) a rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Krok s vodným rozpúšťadlom sa zopakoval ešte dvakrát. Výsledná biela pena sa sušila 16 hodín za zníženého tlaku (0,5 mm Hg) pn izbovej teplote, a ďalej sa sušila nad oxidom fosforečným za zníženého tlaku (0,5 mm Hg) ešte 72 hodín. Získala sa soľ kyseliny chlorovodíkovej (313 mg, 0,44 mmól) ako biela pena; m/e vypočítané 680; zistené (M+Li) 687.
Príklad 43 Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropynamino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-metyl-3-(metylsulfonynbutánamid · hydrochloridovej soli
Časť E:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-(metylsulfonyl) propánamidu
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[ 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-metyl-3-(metyltio)butánamidu
N-t-boc-S-Metyl-L-penicilamín dicyklohcxylaminová soľ (4,00 g, 9,00 mmól), 1-hydroxybenzotriazolhydrát (1,69 g, 11,00 mmól) a l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid hydrochlorid (1,71 g, 9,00 mmól) sa zmiešali v dimetylformamide (60,0 ml) pri izbovej teplote. Heterogénna zmes sa miešala 1 hodinu a pridal sa 2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamín (3,78 g, 9,00 mmól), a heterogénna zmes sa miešala 16 hodín. Roztok sa vylial do octanu etylnatého (600 ml) a premyl sa 10 % vodnou kyselinou octovou (2 x 300 ml), nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (2 x 300 ml) a solankou (300 ml). Roztok sa vysušil nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Požadovaný produkt sa vyčistil chromatograficky (0 až 80 % octanu etylnatého/hexánov na silikagéli). Získal sa produkt (5,21 g, 7,83 mmól, výťažok 87 %) ako biela pena; m/e vypočítané 665; zistené (M+Li) 672.
Časť B:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamidu
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(l ,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-metyl-3-(metyltio) butánamid (5,01 g, 7,53 mmól) sa rozpustil v tetrahydroľuráne (250 ml). K roztoku sa po kvapkách pridal oxon® (13,8 g, 22,6 mmól) vo vode (250 ml) pri izbovej teplote počas 2 hodín. Roztok sa zakalil a počas pridávania sa vytvorila zrazenina. Roztok sa vylial do octanu etylnatého (500 ml) a premyl sa vodou (3 x 200 ml), potom solankou (2 x 300 ml). Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Produkt (4,72 g, 6,77 mmól, výťažok 89 %) sa získal ako biela pena; m/e vypočítané 697; zistené (M+Li) 704.
Časť C:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[( 1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamid · hydrochloridovej soli
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl) butánamid (4,51 g, 6,46 mmól) sa rozpustil v dichlórmetáne (200 ml) pri izbovej teplote. Cez roztok sa 30 minút prebublávala bezvodá kyselina chlorovodíková. Roztok sa miešal pri izbovej teplote 1 hodinu a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Produkt (4,02 g, 6,35 mmól, výťažok 99 %) sa získal ako biela tuhá látka; m/e vypočítané 697; zistené (M+Li) 704.
Časť D:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino) -1 S-(fenyl metyl)propyl] -2S-[(chl óracetyl)amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamidu
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamid · hydrochloridová soľ (3,90 g, 6,15 mmól) sa zmiešal pri izbovej teplote v acetonitrile (40 ml). Pridal sa trietylamín (1,86 g, 18,45 mmól) a chlóracetanhydrid (1,05 g, 6,15 mmól). Roztok sa miešal pri izbovej teplote 16 hodín a vylial sa do octanu etylnatého (250 ml). Roztok sa premyl s 10 % vodnou kyselinou octovou (2 x 100 ml), nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (2 x 100 ml), a solankou (2 x 100 ml). Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Získal sa žltý olej (4,3 g) a vyčistil sa chromatograficky (silikagél, 50 - 75 % octan etylnatý v hexánoch). Produkt (2,15 g, 3,18 mmól, výťažok 52 %) sa získal ako biela pena; m/e vypočítané 674; zistené (M+Li) 681.
Časť E:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[( 1,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl)bután
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamid (2,06 g, 3,05 mmól) a pyrolidin (2,16 g, 30,5 mmól) sa zmiešali dohromady v tetrahydroľuráne (30,0 ml) pri izbovej teplote 3 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstránilo za zníženého tlaku. Získal sa svetložltý olej, ktorý sa rozpustil v metanole (20 ml) a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Produkt (2,09 g, 2,95 mmól, výťažok 96 %) sa získal ako žltá pena; m/e vypočítané 708; zistené (M+H) 709.
Časť F:
Príprava N-[[2R-hydroxy-3-[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamid · hydrochloridovej soli
N-[[2R-Hydroxy-3-[(l,3-benzodixol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3-metyl-3-(metylsulfonyl)butánamid (300 mg, 0,42 mmól) sa rozpustil v dichlórmetáne (10 ml). Bezvodá kyselina chlorovodíková sa pridala na 1 minútu a roztok dichlórmetánu sa zredukoval do objemu asi 2 ml. Roztok sa po kvapkách pridal k hexánom (50 ml) a produkt sa vyzrážal. Požadovaná soľ (295 mg, 0,40 mmól) sa zozbierala do Bíichnerovho lievika vákuovou filtráciou ako žltá tuhá látka; m/e vypočítané 708; zistené (M+H) 709.
Príklad 44
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]aminol-3,3-dimetyľbutánamidu
Časť A:
Príprava N-[( 1,1 -dimetyletoxyl)karbonyl]-N-[2-metylpropyl]-3S-[N1-(fenylmetoxykarbonyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenylbutylamínu
Roztok N-[3S-[N'-(benzyloxykarbonyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-(2-metyl propyl)amínu (18,5 g, 50 mmól), BOC-ON (12,35 g, 50 mmól) a trietylamínu (7 ml) v tetrahydrofuráne (400 ml) sa miešal pri izbovej teplote 18 hodín a potom sa skoncentroval vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (1 1) a premyl sa hydroxidom sodným (5 %, 2 x 200 ml) a solankou, vysušil sa (MgSO4), a potom sa skoncentroval vo vákuu so získaním 23,5 g (kvantitatívny výťažok) čistého požadovaného produktu.
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino] -3,3 -dimetylb utánamidu
N-[( 1,1 -Dimetyletoxyl)karbonyl]-N-[2-metylpropyl] -3 S-[N1 -(fenylmctoxykarbonyl)amino] -2R-hydroxy-4-fenylbutylamín v etanole sa hydrogenoval pri 45 psig vodíka v prítomnosti 5 % Pd(C) katalyzátora so získaním N-[(l,l-dimetyletoxyljkarbonylj-N-p-metylpropylj-SS-IjN'-ífenylmetoxykarbonyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenylbutylamínu.
Podľa štandardného spracovania, surový amín (12,24 g, 36,42 mmól) sa pridal k zmesi N-karbobenzyloxykarbonylL-terc-leucínu (9,67 g, 36,42 mmól), HOBT (4,92 g, 36,42 mmól) a EDC (6,98 g, 36,42 mmól) v DMF (300 ml) potom, čo sa zmes miešala pri izbovej teplote 1 hodinu. Zmes sa potom miešala ďalších 18 hodín. DMF sa odstránil vo vákuu, zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (500 ml), premyl sa hydroxidom sodným (5 %, 2 x 200 ml) a solankou (200 ml), vysušil sa a skoncentroval so získaním 21 g (kvantitatívne) požadovaného produktu.
Časť C:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[l,l-dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyI]-2S-amino-3,3-dimetylbutánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamid (20 g, 34,29 mmól) v metanole (250 ml) sa hydrogenoval pri izbovej teplote v prítomnosti Pd/C (10 %, 5 g). Katalyzátor sa odfiltroval a filtrát sa skoncentroval so získaním 13,8 g (90 %) čistého požadovaného produktu.
Časť D:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3 -dimetylbutánamidu
K N -[2R-hydroxy-3 -[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl] (2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl] -2S-amino-3,3 -dimetylbutánamidu (12,45 g, 27,70 mmól) v dichlórmetáne (200 ml) sa pridal chlóracetanhydrid (5,21 g, 30,48 mmól) a reakčná zmes sa miešala 18 hodín. Reakčná zmes sa premyla kyselinou citrónovou (5 %, 100 ml), hydrouhličitanom sodným (nasýteným, 100 ml) a solankou, vysušila sa (MgSO4) a skoncentrovala so získaním 12,0 g (82 %) čistého požadovaného produktu.
Časť E:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[l,l-dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
Zmes N-[2R-hydroxy-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu (10,42 g, 19,82 mmól) v tetrahydrofuráne (100 ml) sa vychladila na 0 °C, a pridal sa pyrolidín (7,1 g, 100 mmól). Reakčná zmes sa miešala 18 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zvyšok sa rozpustil v octane etylnatom (500 ml), premyla sa hydrouhličitanom sodným (nasýteným, 200 ml) a solankou (200 ml), vysušila sa (MgSO4) a skoncentrovala so získaním 11,0 g (kvantitatívne) požadovaného produktu.
Príklad 45
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl) amino]-l S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l -yljacetyljamino]-3,3 -dimetylbutánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid (2 g, 3,57 mmól) v dioxáne/HCl (4 N, 10 ml) sa miešal 2 hodiny pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo sa odstránilo a zvyšok sa vysušil vo vákuu. Zvyšok sa miešal v octane etylnatom (50 ml), potom sa pridal benzénsulfonylchlorid (0,692 g, 3,57 mmól) a trietylamín (1,587 g, 15,71 mmól) a zmes sa miešala 18 hodín pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa zriedila octanom etylnatým (100 ml), premyla sa nasýteným hydrouhličitanom sodným (100 ml) a solankou (100 ml), vysušila sa (MgSO4), a skoncentrovala sa. Zvyšok sa chromatografoval v octane etylnatom so získaním 1,0 g (47 %) požadovaného produktu ako bieleho prášku; m/e = 601 (M+H).
Príklad 45 A
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[l,3-benzodioxol-5-sulfonyl] (2-metylpropyl)aniino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amínoj-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid (2 g, 3,57 mmól) v dioxáne/HCl (4N, 10 ml) sa miešal 2 hodiny pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo sa odstránilo a zvyšok sa vysušil vo vákuu so získaním amínu.
Zvyšok sa miešal v octane etylnatom, potom sa pridal l,3-benzodioxol-5-sulfonylchlorid z príkladu 32, potom trietylamín, a zmes sa miešala pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa zriedila octanom etylnatým, premyla sa nasýteným hydrouhličitanom sodným a solankou, vysušila sa (MgSO4) a skoncentrovala. Rozpúšťadlo sa odstránilo a produkt sa v prípade potreby chromatografoval.
Príklad 46
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid (2 g, 3,57 mmól) v dioxáne/HCl (4 N, 10 ml) sa miešal 2 hodiny pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo sa odstránilo a zvyšok sa vysušil vo vákuu. Zvyšok sa miešal v octane etylnatom (50 ml), potom sa pridal 4-metoxybenzénsuIfonylchlorid (0,737 g, 3,57 mmól) a trietylamín (1,587 g, 15,71 mmól) a zmes sa miešala 18 hodín pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa zriedila octanom etylnatým (100 ml), premyla sa nasýteným hydrouhličitanom sodným (100 ml) a solankou (100 ml), vysušila sa (MgSO4) a skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval v octane etylnatom so získaním 1,0 g (44 %) požadovaného produktu ako bieleho prášku; m/e = 631 (M+H).
Príklad 47
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)aminoj-1 S-(fenylmetyl)propylj-2S-[[pyrolidino)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid (2 g, 3,57 mmól) v dioxáne/HCl (4 N, 10 ml) sa miešal 2 hodiny pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo sa odstránilo a zvyšok sa vysušil vo vákuu. Zvyšok sa miešal v octane etylnatom (50 ml), potom sa pridal 2,3-dihydrobenzofuran-5-ylsulfonyl chlorid (0,737 g, 3,57 mmól) a trietylamín (1,587 g, 15,71 mmól) a zmes sa miešala 18 hodín pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa zriedila octanom etylnatým (100 ml), premyla sa nasýteným hydrouhličitanom sodným (100 ml) a solankou (100 ml), vysušila sa (MgSO4) a skoncentrovala sa. Zvyšok sa chromatografoval v octane etylnatom so získaním požadovaného produktu ako bieleho prášku.
Príklad 48
Príprava fenylmetylesteru kyseliny 2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)aminoj-1 S-(fenylmetyljpropylkarbamidovej
K roztoku N-[3S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-(2-metylpropyl)amínu (0,5 g, 1,35 mmól) v CH2CI2 (5,0 ml) obsahujúceho Et3N (0,35 ml, 2,5 mmól) sa pridal l,4-benzodioxán-6-sulfonylchlorid (0,34 g, 1,45 mmól) a miešal sa pri 0 “C 30 minút. Po miešaní pri izbovej teplote 1 hodinu sa reakčná zmes zriedila s CH2C12 (20 ml), premyla sa so studenou 1 N HCI (3 x 20 ml), vodou (2 x 20 ml), nasýteným NaHCO3 (2 x 20 ml) a vodou (3 x 20 ml), vysušila sa (Na2SO4) a skoncentrovala sa za zníženého tlaku. Výsledný zvyšok sa vyčistil chromatograficky pomocou 35 % EtOAc v hexáne so získaním požadovaného produktu ako bielej amorfnej tuhej látky, ktorá vykryštalizovala z MeOH ako biely prášok (0,65 g, výťažok 84 %); teplota topenia 82 - 84 °C, HRMS-FAB: vypočítané pre C30H37N2O7S 569,2321 (MH+), zistené 569,2323.
Príklad 49
Príprava 2S-[[(-pyrolidino)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fcnylmetyl)propyl]-3-mctylpent-4-ínamidu
Časť A:
Príprava 2S-[[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]pent-4-ínamidu
K vychladenému roztoku N-t-Boc-L-propargylglycínu (5,0 g, 23,4 mmól) a 4,7 g (1,5 ekvivalentu) N-hydroxybenzotiazolu v 40 ml Ν,Ν-dimetylformamidu sa pridalo 4,6 g (23,4 mmól) EDC a roztok sa miešal pri 0 °C jednu hodinu. K tomu sa pridal roztok 12,10 g (23,4 mmól) 2R-hydroxy3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]1 S-(fenylmetyl)propylamínu v 6 ml Ν,Ν-dimetylformamidu a roztok sa miešal 16 hodín. Rozpúšťadlo sa odstránilo rotačným odparovaním, nahradilo sa octanom etylnatým, a premylo sa nasýteným hydrouhličitanom sodným, 5 % kyselinou citrónovou a solankou. Organická zložka sa vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 13,3 g surového produktu, ktorý sa vykryštalizoval z dietyléteru/octanu etylnatého so získaním 6,9 g 2S-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-N-[2R-hydroxy
-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]pent-4-ínamidu.
Časť B:
Príprava 2S-amino-N-[2R-hydroxy-3-[[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]pent-4-ínamidu
H
5,0 g (8,12 mmól) produktu z časti A sa rozpustilo v 20 ml 4 N HCI v dioxáne a miešalo sa 30 minút. Vyzrážaný produkt sa dvakrát zbavil dietyléteru a táto surová hydrochloridová soľ sa použila v časti C.
Časť C:
Príprava 2S-[(chlóracetyl)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l ,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]pent-4-inamidu
H
4,4 g (8,12 mmól) aminohydrochloridu z časti B sa rozpustilo v 60 ml metylénchloridu a k tomu sa pridali 3,0 g (24 mmól) Ν,Ν-diizopropyletylamínu, potom 1,38 g (8,1 mmól) chlóracetanhydridu. Roztok sa miešal cez noc pri izbovej teplote. Obsah sa skoncentroval na rotačnom odpaľovači a zvyšok sa rozdelil medzi octan etylnatý a vodu. Organická vrstva sa premyla s 5 % kyselinou citrónovou a potom nasýteným hydrouhličitanom sodným a solankou. Organická zložka sa vysušila nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 4,3 g surového produktu. Rekryštalizáciou z octanu etylnatého a hexánu sa získalo 3,6 g (výťažok 75 %) 2S-[(chlóracetyl) amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]pent-4-ínamidu ako bielej tuhej látky.
Časť D:
Príprava 2S-[[(pyrolidino)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]pent-4-ínamidu
2S-[(Chlóracetyl)amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]pent-4-ínamid (3,5 g, 6,0 mmól) sa rozpustil v 30 ml tetrahydrofuránu a tomu sa pridalo 2,3 g (5 ekvivalentov) pyrolidínu a reakčná zmes sa miešala 1,5 hodiny. Rozpúšťadlá sa odstránili rotačným odparovaním a nahradili sa octanom etylnatým. Organická zložka sa postupne premyla nasýteným hydrouhličitanom sodným a solankou, vysušila sa nad síranom horečnatým, prefiltrovala sa a skoncentrovala so získaním 3,4 g surového produktu. Purifikáciou kryštalizovaním z dietyléteru sa získali 3,0 g 2S-[[(pyroIidino)acetyI]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]pent-4-inamidu ako bielej tuhej látky.
Príklad 50
Príprava 5-chlórsulfonyl-2-karbometoxyamino-benzimidazolu
NHCO2CH3
H
Roztok 2-karbometoxyamino-bcnzimidazolu (5,0 g, 0,026 mól) v kyseline chlórsulfónovej (35,00 ml) sa miešal pri 0 °C 30 minút a pri izbovej teplote 3 hodiny. Výsledná tmavosfarbená reakčná zmes sa vyliala do zmesi ľadu a vody (200 ml) a miešala sa pri izbovej teplote 30 minút. Výsledná zrazenina sa prefiltrovala a premyla studenou vodou (500 ml). Tuhá látka sa sušila cez noc vo vysokom vákuu v exsikátore nad peletami NaOH so získaním 5-chlórsulfonyI-2-karbometoxyamino-benzimidazolu (5,9 g, 78 %) ako sivého prášku. ’H NMR (DMSO-rf6) d: 3,89 (s, 3H), 7,55 (d, J = 8,4 Hz), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H). (Nemecký patent DE 3826036)
Príklad 51
Príprava fenylmetylesteru kyseliny N-[2R-hydroxy-3-[N’-[(2-karbornetoxyamino-bcnzimidazol-5-yl)sulfonyl]-N'-(2-metylpropyl)aminoJ-1 S-(fenylmetyl)propyl]karbamidovej
K studenému roztoku N-[3S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-2R-hydroxy-4-fenylbutyl]-N-(2-metylpropyl)amínu (5,0 g, 13,5 mmól) v dichlórmetáne (70 ml) sa pridal trietylamín (5,95 g, 54,0 mmól), potom sa pridal 5-chlórsulfonyl-2-karbometoxyamino-benzimidazol (4,29 g, 14,85 mmól) v malých dávkach ako tuhá látka. Reakčná zmes sa miešala pri 0 °C 30 minút a pri izbovej teplote 2,5 hodiny, keď sa reakcia aminoalkoholu ukončila. Zmes sa vychladila a prefiltrovala, filtrát sa skoncentroval. Výsledný zvyšok sa rozpustil v EtOAc (200 ml), postupne sa premyl studenou 5 % kyselinou citrónovou (3 x 50 ml), nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (3 x 50 ml) a vodou (3 x 100 ml), potom sa vysušil (Na2SO4), skoncentroval sa a vysušil vo vákuu. Zvyšok sa rozmiešal s metanolom, vychladil sa, prefiltroval, premyl s MeOH-EtOAc (1:1, objem/objem) a vysušil sa v exsikátore s výťažkom fenylmetylesteru kyseliny N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidzol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)-amino]-lS-(fenylmetyl)propyljkarbamidovej (6,02 g, 72 %) ako svetlohnedého práš ku; FABMS: m/z = 630 (M+Li); HRMS: vypočítané pre C31H38N5O7S (M+H) 624,2492, zistené 624,2488.
Príklad 52
Príprava 2R-hydroxy-3-[[2-amino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metyl-propyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu
Roztok fenylmetylesteru kyseliny N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyaminobenzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]karbamidovej (0,36 g, 0,58 mmól) v 2,5 N metanolového KOH (2,00 ml) sa zahrieval pri 70 °C v dusíkovej atmosfére 3 hodiny. Reakčná zmes sa zriedila vodou (10 ml) a vyextrahovala sa s EtOAc (3x15 ml). Skombinované organické extrakty sa premyli solankou, vysušili (Na2SO4) a skoncentrovali sa.
Výsledný zvyšok sa vyčistil pomocou HPLC s reverznou fázou s použitím 10-90 % CH3CN/H2O gradientu (30 min.) pri prietokovej rýchlosti 70 ml/min. Príslušné frakcie sa skombinovali a lyofilizovali so získaním čistého 2R-hydroxy-3-[[(2-amino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenyl-metyl)propylamínu (0,22 g, 58 %) ako bieleho prášku: FAB-MS m/z = 432 (M+H); HRMS: vypočítané pre C2lH30N5O3S (M+H) 432,2169, zistené 432,2071.
Príklad 53
Príprava fenylmetylesteru kyseliny N-[2R-hydroxy-3-[[(2-amino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)-amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]karbamidovej
K roztoku 2R-hydroxy-3-[[(2-amino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metyl-propyl)-amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu (0,22 g, 0,33 mmól) v THF (3,00 ml) sa pridal trietylamín (0,11 g, 1,1 mmól) a benzyloxykarbonyl sukcínimid (0,09 g, 0,36 mmól), a reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote 16 hodín. Roztok sa skoncentroval a zvyšok sa rozdelil medzi EtOAc (15 ml) a nasýtený vodný hydrouhličitan sodný. Organická fáza sa premyla solankou, vysušila (Na2SO4) a skoncentrovala sa. Výsledný zvyšok sa vyčistil v HPLC s reverznou fázou pomocou 10-90 % CH3CN/H2O gradientu (30 min.) pri prietokovej rýchlosti 70 ml/min. Príslušné frakcie sa skombinovali a lyofilizovali so získaním čistého fenylmetylesteru kyseliny-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-aminobenzimidazol-5-yl)sulfonyl]2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]karbamidovcj (0,12 g, 61 %) ako bieleho prášku: FABMS m/z = 566 (M+H); HRMS: vypočítané pre C29H3f,N5O5S 566,2437 (M+H), zistené 566,2434.
Príklad 54
Príprava 2R-hydroxy-3-[[2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu
Roztok fenylmetylesteru kyseliny N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyaminobenzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)-amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]karbamidovej (2,5 g, 0,4 mmól) v MeOH (10 ml) a THF (50 ml) sa hydrogenoval v prítomnosti 10 % Pd/C (1,2 g) pri izbovej teplote pri 60 psi 16 hodín. Katalyzátor sa odstránil filtráciou, a filtrát sa skoncentroval za zníženého tlaku. Výsledný zvyšok sa rozmiešal s éterom a prefiltroval sa. Takto získaná tuhá látka sa premyla éterom a vysušila sa vo vákuu so získaním čistého 2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyljpropylamínu (1,5 g, 77 %) ako špinavobieleho prášku: R, = 12,8 min.; FAB-MS m/z = 490 (M+H); HRMS: vypočítané pre CLTfyNsOjS 490,2124 (M+H), zistené 490,2142.
Príklad 55
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3,3-dimetylbutánamidu
toxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu: R, = 21,2 min.; FAB-MS m/z = 737 (M+H), HRMS: vypočítané pre C37H49N6O8S 737,3333 (M+H), zistené 737,3334.
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropylamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3,3-dimetylbutánamidu
Roztok N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino] -1 S-(fenylmetyl)propyl-2S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu (4,0 g, 5,4 mmól) v MeOH (15 ml) a THF (65 ml) sa hydrogenoval v prítomnosti 10 % Pd/C (2,0 g) pri izbovej teplote pri 50 psi 16 hodín. Katalyzátor sa odstránil filtráciou, filtrát sa skoncentroval za zníženého tlaku. Výsledný zvyšok sa rozmiešal s éterom a prefiltroval sa. Tuhý zvyšok sa premyl s éterom a vysušil sa vo vákuu so získaním N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-amino-3,3-dimetylbutánamidu (2,9 g, 88 %) ako bledožltého prášku. Časť materiálu sa vyčistila HPLC s reverznou fázou s použitím 10-90 % CH3CN/H2O gradientu (30 min.) pri prietokovej rýchlosti 70 ml/min. Príslušné frakcie sa skombinovali a lyofilizovali so získaním čistého N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl2S-amino-3,3-dimetylbutánamidu ako bieleho prášku: Rt = = 13,9 min.; FAB-MS m/z = 609 (M+Li), 603 (M+H); HRMS: vypočítané pre C29H4jN6O6S 603,2965 (+H), zistené 603,2972.
Príklad 56
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[|N'-(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl]-N1-(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
Časť A:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[N’-[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl]-Nl-(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl-2S-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu
K roztoku N-karbobenzyloxykarbonyl-L-terc-leucínu (0,65 g, 2,45 mmól) v DMF (10 ml) sa pridal HOBt (0,5 g, 3,22 mmól) a EDC (0,49 g, 2,55 mmól), a výsledná zmes sa miešala pri 0 °C 2 hodiny. Potom sa pridal roztok 2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyaminobenzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamínu (1,2 g, 2,45 mmól) v DMF (4 ml) a N-metylmorfolín (0,74 g, 7,3 mmól) a zmes sa miešala pri izbovej teplote 16 hodín. DMF sa potom oddestiloval vo vákuu, a zostávajúci zvyšok sa rozdelil medzi studenú 1 N vodnú HC1 (100 ml) a EtO -Ac (200 ml). Organická fáza sa postupne premyla studenou 1 N HC1 (2 x 50 ml), solankou (2 x 50 ml), 0,25 N NaOH) (3 x 50 ml), solankou, vysušila sa (Na2SO4) a skoncentrovala sa vo vákuu. Výsledný zvyšok sa vyčistil silikagélovou stĺpcovou chromatografiou s použitím EtOAc ako eluentu so získaním 1,5 g (83 %) čistého N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl-2S-[(fenylmeČasť A:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu
nhco2ch3
Zmes kyseliny chlóroctovej (0,32 g, 3,39 mmól), HOBt (0,78 g, 5,0 mmól) a EDC (0,65 g, 3,39 mmól) v DMF (5 ml) sa miešala pri 0 °C 1 hodinu, a potom sa pridala k roztoku N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl], (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl-2S-amino-3,3-dimetylbutánamidu (2,0 g, 3,3 mmól) v DMF (5 ml). Výsledná zmes sa miešala pri 0 °C 2 hodiny, a pri izbovej teplote 1 hodinu, keď sa reakcia ukončila. DMF sa odstránil vo vákuu. Výsledný zvyšok sa rozpustil v EtOAc (50 ml) a postupne sa premyl s nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (3 x 25 ml), solankou, vysušil sa (Na2SO4) a skoncentroval sa za zníženého tlaku. Výsledný materiál sa kryštalizoval z EtOAc so získaním 1,2 g (53 %) čistého N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu ako bieleho prášku: teplota topenia 253 °C (dekomp); Rt 18,1 min.; FAB-MS m/z = 679 (M+H), HRMS: vypočítané pre C3,H44N6O,SC1 679,2681 (M+H), zistené 679,2690.
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]ammo]-3,3-dimetyl-butánamidu
N-[2R-Hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamid (0,5 g, 0,74 mmól) sa rozpustil v TFIF (2,00 ml), pridal sa pyrolídin (0,3 g, 4,2 mmól), a zmes sa miešala pri izbovej teplote 2 hodiny. Reakčná zmes sa skoncentrovala za zníženého tlaku a zvyšok sa vysušil vo vákuu. Výsledný materiál sa rozmiešal s 10 % EtOAc v éteri a prefiltroval sa. Tuhá látka sa premyla s éterom a vysušila sa so získaním 0,42 g surového produktu ako bledožltého prášku. Tento sa vyčistil v HPLC s reverznou fázou s použitím 5 - 70 % CH3CN/H2O gradientu (30 min.) pri prietokovej rýchlosti 70 ml/min. Príslušné frakcie sa skombinovali a lyoftlizovali so získaním čistého N-[2R-hydroxy-3-[[(2-karbometoxyamino-benzimidazol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropylaminoj-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-1 -yljacetyl] amino] -3,3-dimetylbutánamidu (0,41 g 77 %) ako bieleho prášku: R, = 14,8 min.; FAB-MS m/z = 714 (M+H), HRMS: vypočítané pre C35H52N7O7S 714,3649 (M+H), zistené 714,3666.
Príklad 57
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid · dihydrochloridu
Časť A:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid · dihydrochloridu
Roztok kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne (4 N, 10 ml) sa pridal k N-[2R-hydroxy-3-[[(l,l-dimetyletoxy)-karbonyl](2-metylpropyl)aminoj-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin -l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu (2,80 g, 5,0 mmól), a zmes sa miešala 2 hodiny pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo sa odstránilo, a zvyšok sa vysušil vo vákuu so získaním 2,60 g požadovaného dihydrochloridového produktu ako kryštalickej tuhej látky.
Časť B:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid · dihydrochloridu
K roztoku 6-chlórsulfonylbenzotiazolu v dichlórmetáne (100 ml) sa pridal N-[2R-hydroxy-3-[(2-metylpropyl)amino]-lS-(fcnylmetyl)-propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamid · dihydrochlorid (1,00 g, 1,875 mmól) a čistý trietylamín (3 ml). Po miešaní pri izbovej teplote 18 hodín sa reakčná zmes zriedila dichlórmetánom (100 ml), premyla sa s nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným (100 ml), solankou (100 ml), vysušila sa (MgSO4), prefiltrovala a skoncentrovala sa. Výsledný zvyšok sa vyčistil stĺpcovou chromatografiou na silikagéli eluovaním s 5 % metanolom v octane etylnatom so získaním čistého N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(feny1metyl)propyl]-2S-[[(pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu (180 g, 15 %). Tento sa skonvertoval na dihydrochloridovú soľ skoncentrovaním acetonitrilového roztoku s 1 N HC1 (2 ml). Zvyšok sa potom vysušil so získaním požadovanej dihydrochloridovej soli: FAB-MS C33H47N5O5S2: m/z = 657.
Príklad 58
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu
Časť A:
Príprava terc-butylesteru kyseliny [2R-hydroxy-3-[(4-aminofenylsulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)]propylkarbamidovej
Zmes [2R-hydroxy-3-[(4-aminofeny)sulfonyl)(2-metylpropyl)-amino]-lS-(fenylmetyl) propylamínu (3,7 g, 9,45 mmól) a BOC-ON (2,33 g, 9,45 mmól) a trietylamínu (0,954 g, 9,45 mmól) v tetrahydrofuráne (60 ml) sa miešala 16 hodín a skoncentrovala sa vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (200 ml), premyl sa s hydroxidom sodným (I N, 100 ml), kyselinou citrónovou (5 %, 100 ml), vysušil sa (MgSO4) a skoncentroval sa so získaním 1,18 g (94 %) požadovaného produktu ako bielej tuhej látky.
Časť B:
Príprava terc-butylesteru kyseliny [2R-hydroxy-3-[(2-aminobenzotiazol-6-sulfonyl)-(2-metylpropyl)amino]-1S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej
terc-Butylester kyseliny [2R-hydroxy-3-[(4-aminofenylsulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej (1,12 g, 2,279 mmól) sa pridal k dobre premiešanému prášku bezvodého síranu meďnatého (4,48 g) a rodanidu draselného (5,60 g), potom sa pridal bezvodý metanol (35 ml) a výsledná hnedočiema suspenzia sa zahrievala na refluxnú teplotu 2 hodiny. Reakčná zmes zmenila farbu na sivú. Reakčná zmes sa prefiltrovala a filtrát sa zriedil s vodou (50 ml) a zahrial sa na refluxnú teplotu. K reakčnej zmesi sa pridal etanol, zmes sa vychladila a prefiltrovala. Po skoncentrovaní sa z filtrátu získal zvyšok, ktorý sa chromatografoval (octan etylnatý/metanol 90 : 10) so získaním 0,80 g (78 %) zlúčeniny zbavenej ochrany ako tuhej látky. Táto sa priamo reprotektovala nasledovným postupom: (2,25 g 5,005 mmól), BOC-ON (1,24 g) a trietylamín (0,505 g, 5,005 mmól) v tetrahydrofuráne (20 ml) sa miešal pri izbovej teplote 18 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (200 ml), premyl sa s hydroxidom sodným (1 N, 100 ml) a kyselinou citrónovou (5 %, 100 ml), vysušil sa (MgSO4) a skoncentroval so získaním zvyšku, ktorý sa chromatografoval (octan etylnatý/hexán 3 : 1) so získaním 1,8 g (65 %) požadovaného produktu ako tuhej látky.
Časť C: Príprava t-butylesteru kyseliny [2R-hydroxy-3-[(benzotiazol-6-sulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propylkarbamidovej
Produkt z časti B (1,80 g, 3,2755 mmól) sa pridal k roztoku izoamylnitritu (0,88 ml) v dioxáne (20 ml) a zmes sa zahrievala na 85 °C. Po ukončení vývinu dusíka sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa vyčistil chromatograficky (hexán/octan etylnatý 1 1) so získaním 1,25 g (78 %) požadovaného produktu ako tuhej látky.
Časť D:
Príprava [2R-hydroxy-3-[(benzotiazol-6-sulfonyl)(2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propylamín · hydrochloridu
xán/HCl (4 N, 10 ml), zmes sa miešala pri izbovej teplote 2 h a skoncentrovala sa. Nadbytok HC1 sa prepláchol toluénom so získaním 1,0 g (kvantitatívny výťažok) požadovaného produktu ako HC1 soli.
Časť E:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)-amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[[(N-benzyloxy)karbonyl]amino]-3,3-dimetylbutánamidu
Zmes N-benzyloxykarbonyl-í-butylglycínu (2,0 g, 7,538 mmól), HOBT (1,02 g, 7,55 mmól), a EDC (1,45 g, 7,55 mmól) v DMF (20 ml) sa miešala pri izbovej teplote 1 hodinu. Potom sa pridal [2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino] -1 S-(fenylmetyl)propylamín hydrochlorid (3,825 g, 7,54 mmól) a N-metylmorfolín (3,80 g) a miešalo sa ďalších 18 hodin DMF sa odstránil vo vákuu, zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (500 ml) a premyl sa s kyselinou citrónovou (1 N, 100 ml), hydrouhličitanom sodným (100 ml), solankou (200 ml), vysušil sa, prefiltroval a skoncentroval so získaním 4,69 g (91 %) čistého N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[N-(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu.
Časť F:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyljamino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-2S-(amino)-3,3-dimetylbutánamid · dihydrobromidu
Na roztok N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[N-(fenylmetoxykarbonyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu (4,69 g, 6,89 mmól) v dichlóretáne (200 ml) sa pôsobilo s HBr (48 % v kyseline octovej, 7,1 ml), a reakčná zmes sa miešala 2 hodiny pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zvyšok sa premyl niekoľkokrát s dietyléterom. Získalo sa 4,88 g požadovaného dihydrobromidu ako prášku: FAB-MS s vysokým rozlíšením vypočítané pre C27H38N4O4S2: 547,2413, zistené: 547,2429 (M+H).
Časť G:
Príprava N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-[(chlóracetyl)amino]-3,3-dimetylbutánamidu
Zmes N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl] (2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-2S-(amino)-3,3-dimetylbutánamid dihydrobromidu (3,5 g, 4,9388 mmól), chlóracetanhydridu (0,929 g, 5,44 mmól) a trietylamínu (1,097 g, 10,86 mmól) v dichlórmetáne (35 ml) sa miešala pri izbovej teplote 16 hodin. Reakčná zmes sa premyla s kyselinou citrónovou (1 N, 30 ml), hydrouhličitanom sodProdukt z časti C sa zbavil ochrany nasledovným postupom: k produktu (1,25 g, 2,3385 mmól) sa pridal dio39 ným (30 ml), solankou (30 ml), vysušila sa, prefiltrovala a skoncentrovala so získaním 3,0 g požadovaného produktu.
Príklad 59
Podľa postupov z predchádzajúcich príkladov možno pripraviť zlúčeniny uvedené v tabuľkách 2 až 19.
Symbol R3 R4
1 izobutyl 4-aminofenyl
2 izobutyl 3-aminofenyl
3 cyklopentylmetyl fenyl
4 cyklohexylmetyl fenyl
5 cyklopentylmetyl 1,3-benzodioxol-5-yI
6 cyklohexylmetyl 1,3-benzodioxol-5-yl
7 cyklopentylmetyl benzofuran-5-yl
8 cyklohexylmetyl benzofuran-5-yl
9 cyklopentylmetyl 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl
10 cyklohexylmetyl 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl
11 izobutyl 1,3 -benzodioxol-5 -yl
12 izobutyl benzofuran-5-yl
13 izobutyl 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl
14 izobutyl 1,4-benzodioxan-6-yl
15 izoamyl 1,3 -benzodioxol-5 -yl
16 izoamyl 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl
17 izoamyl 1,4-benzodioxan-6-yl
18 izobutyl benzotiazol-6-yl
19 izobutyl 2-amino-benzotiazol-6-yl
20 izobutyl benzoxazol-5-yl
21 cyklopentylmetyl 4-metoxyfenyl
22 cyklohexylmetyl 4-metoxyfenyl
Tabuľka 3 A
SK 285688 Β6
Tabuľka 3B
Tabuľka 4A
R7 (CH3)2CHCH2ch3ch2ch2ch2ch3sch2ch,c6h5ch2(4-CH3OC6H5)CH2(4-FC6H5)CH2(naft-2-yl) CH2CsHnCHr c6h5sch2(naft-2-yl)SCH2-
(CH3)2CHCH2ch3ch2ch2ch2ch,sch2ch2c6h5ch2(4-CH3OCeHj)CH2(4-FC6H5)CH2(naft-2-yl)CH2C6HnCH2c6h5sch2(naft-2-y])SCH2Tabuľka 5 A
Symbol -CH2CH2CH3
-ch2ch2ch2ch3
-CH2CH(CH3)2
-CH2CH2CH(CH3)2 •“O “+Ú /Λ
O 'O
Tabuľka 5B
Symbol_____________
-ch2ch2ch3
-ch2ch2ch2ch3
-CH2CH(CH3)2
-CH2CH2CK(CH3)2
R3
O o
CH, A s N o o
A' o o
Symbol
''ýV°\X <) C H3
Symbol r4
Ό -0 > I 0 „0 's 'ty >
’Ό ''v > I -N '
N S
''ť^r Έ A x '
U 1
% ***\ ** ΓΥ Ό H
0 U- () ch3
^n'' ιΓτ -0 CHj
sŕ^ LA -(3 ch3
X 'Cl Ύ1
s N A_, CI
nhco2ch3
Symbol
Symbol
Symbol
o.
X
X x
0'
CH3 XN ,ch3 ch3 x
x lí .Cl z> N
Xi C1 |j ^-nhco2ch3
H
NHCO2CH3
Symbol
R4
OCHj
OH s
%
CHj
O
O
O O
W//
Symbol
cH’'Sfk //« O o CH’-S
h2n^ >
O o
O O
W//
O O
W//
Symbol
NHCOCHj
O> NHCOCH2CH3 nhconh2
O O
W//
O O
W//
Λ4
Symbol θ^^-MHCOCH, a y- nhcoch2ch3
N
NHCONH2
R*
x.
a\- NHCOCH2 s
y- NHCONHCH2CH3
N
O O
W//
γγί l| I q— nhcochj h l| I nhcoch2ch3
VO-”’“”'2'Ϊ o?
H 'H
VV\ l| I nhcoch2ch2n (CH3) 2 q:
Ο/λ“1
H
H wv i| I NHCONHCH2CH3
H
H M •NHCO2CH2CH2N(CH3) 2
CC^nhXh „ H NH
O XX·^1’
H
I Γ )-nhco2ch2ck2-n^>
H „ M
NHCO2CH2CH2· O ιΓΎΆ NHSO2-N/Ssi H H L S
-rvL | ||Ί^ nhso2ch3 y NHCO2CH2CH2 N
NH
CH3
O O w//
CH3
O O w//
R*
H | I nhconhch2ch3
H
I
Symbol wv
I NHCOCHj a\
NHCOCH2CH3
N
H ~CC^“2 00N H N*
NHCO-AA fY y-NHCO2CH2CH2N(CH3) 2 N L Nv Ai'l j? H . H 0 ^NHCOCH2CH2N(CH3)2 a Ň x H NW 'ťYy »a tjN
NHH
A“1^011’ A'V ^-NHCOiCHzCHrtrM H „A' * /A Ň· 'ti >-^Η!0ΗΓρ /K >H3
0 P w//
NS'R<
1TS' R*
Z>- nhco2ch2ch2-n·
NH
CH3 _
H 'Cc>~-Q l| I nhconhch2ch3
H
CcY—=-(>
H N
Í] Z>— NHCO2CH2CH2N(CH3)2 'Ocv^h H NH o
H a Ň
NHCO2CH2CH2 ‘ « l^O a όλγ2 o
I
Symbol
H ''A'V
II I NHCOCH3 l| | ý— nhcoch2ch3
H
O-λ f 'Ccy-0·'
H ’H
NHCOCH2CH2N (CH3) 2
N (X
H
NHCO2CH2CH2-1
Oz,fflsor,o
Tabuľka 12A
ch3och2ch2o
Tabuľka 12B
Symbol λ
ďn
ΛΝ~γζ ηοιι·Ύ j H
HO^. HO^ ch3o^
δη δη δη
ch3o^
»<η HO* ° HO δη
CH5OCH2CH2O CH3OCH2CH2O
rr on
Tabuľka 13B
^OH
z
x
CH3OCH2CH2O ch3och2ch2o z z ch3o67
χΟΗ
ď' ď f ch>-sA;
// ❖ o o
CH3^s/=
H2N^ f,* o o
Tabuľka 16A
Tabuľka16B
Tabuľka 17A
Symbol R2
(CH3)2CHCH2- (4-FCčH5)CH2-
ch3ch2ch2ch2- (naft-2-y])CH2-
ch3sch2ch2- CeHnCH2-
c6h5ch2- c6h5sch2-
(4-CH3OC6H5)CH2- (naft-2-yl)SCH2-
CsHnCHr
C6H5SCH2(naft-2-y|)SCH2CH3SCH2CH2c6h5ch2(4-CH3OC6H5)CH2Tabuľka 18A
Symbol
-ch2ch2ch3
-ch2ch2ch2ch3
-ch2chích3)2
-ch2ch2ch (ch3)2
«•’-sÄľ //❖ o o
H2N
o o
SK 285688 Β6
Príklad 60
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú účinnými inhibítormi proteázy HIV V enzýmovom teste, ktorý je opísaný, zlúčeniny uvedené v príkladoch potláčali enzým vírusu HIV. Výhodne zlúčeniny tohto predloženého vynálezu a ich hodnoty IC50 (inhibičná koncentrácia 50 %, t. j. koncentrácia, pri ktorej inhibítorová zlúčenina znižuje aktivitu enzýmu o 50 %) sú uvedené v tabuľkách 20 a 21. Enzýmová metóda je opísaná neskôr. Substrát je 2-Ile-Nle-Phc(p-NO2)-Gln-ArgNH2. Pozitívna kontrola je MVT-101 [Miller, M. a spol, Science, 246, 1149(1989)].
Podmienky testu sú nasledovné:
Testovací pufer: 20 mM fosforečnan sodný, pH 6,4 % glycerol mM EDTA 1 mM DTT 0,1 % CHÁP S
Opísaný substrát sa rozpustí v DMSO, potom sa zriedi 10-krát v testovacom pufŕi. Výsledná koncentrácia substrátu v teste je 80 μΜ. Proteáza vírusu HIV sa zriedi v testovacom pufri na výslednú koncentráciu enzýmu 12,3 nanomolámu, na základe molekulovej hmotnosti 10 780.
Výsledná koncentrácia DMSO je 14 % a výsledná koncentrácia glycerolu je 18 %. Testovaná zlúčenina sa rozpustí v DMSO a zriedi sa v DMSO na 10-násobnú koncentráciu testovacej koncentrácie; pridá sa 10 μΐ enzýmového preparátu, materiály sa zmiešajú a zmes sa potom inkubujc pri izbovej teplote 15 minút. Enzymatická reakcia sa spúšťa pridaním 40 μΐ substrátu. Vzostup fluorescencie sa sleduje v 4 časových bodoch (0, 8,16 a 24 minút) pri izbovej teplote. Každý test sa robí v jamkách v dvoch paralelách.
Predchádzajúce príklady môžu byť zopakované s podobným úspechom nahradením genericky alebo špecificky opísaných reagujúcich látok a/alebo reakčných podmienok tohto vynálezu za reaktanty a/alebo podmienky uvedené v predchádzajúcich príkladoch.
Tabuľka 20
Zložka Zlúčenina IC5() (nM)
Príklad 61
Účinnosť rôznych zlúčenín bola stanovená v uvedenom enzýmovom teste a v teste s CEM bunkami. Test na inhibíciu vírusu HIV v akútne infikovaných bunkách je automatický kolorimetrický test založený na tetrazóliu, ako to v podstate opísali Pauwles a spol., J. Virol. Methods. 20, 309 - 321 (1988). Testy sa robili na platničkách s 96 jamkami pre tkanivové kultúry. Bunky CEM, čo je bunková línia s charakteristikou CD4+, sa kultivovali v médiu RPMI-1640 (Gibco) obohatenom o 10 % fetálneho teľacieho séra, potom sa na ne pôsobilo polybrénom (2 gg/ml). 80 μΐ média obsahujúceho 1 x 104 buniek sa rozplnilo do každej jamky kultivačnej platničky. Do každej jamky sa pridalo 100 μΐ testovanej zlúčeniny rozpustenej v kultivačnom médiu (alebo médium bez testovanej zlúčeniny ako kontrola), aby sa dosiahla požadovaná výsledná koncentrácia a bunky sa inkubovali pri 37 °C 1 hodinu. Zmrazená kultúra vírusu HIV-1 sa nariedila v kultivačnom médiu na koncentráciu 5 x 104 TCID50 na ml (TCIDS0 =je dávka vírusu, ktorá infikuje 50 % buniek v tkanivovej kultúre), a do jamiek s testovanou zlúčeninou a do jamiek obsahujúcich iba médium (infikované kontrolné bunky) sa pridalo 20 μΐ vzorky vírusu. Do niekoľkých jamiek sa dalo kultivačné médium bez vírusu (neinfikované kontrolné bunky). Podobne aj vlastná toxicita testovanej zlúčeniny sa stanovila pridaním média bez vírusu do niekoľkých jamiek obsahujúcich testovanú zlúčeninu. Súhrnne, v platničkách boli nasledovné pokusy.
Bunky Látka Vírus
1. + - -
2. + + -
3. + -
4. + +
V pokusoch 2 a 4 výsledná koncentrácia testovanej zlúčeniny bola 1, 10, 100 a 500 gg/ml. Ako pozitívna kontrola sa použil buď azidotymidín (AZT) alebo didezoxyinozín (ddl). Testované zlúčeniny sa rozpustili v DMSO a naricdili sa do kultivačného média tak, aby výsledná koncentrácia DMSO v žiadnom prípade nepresiahla 1,5 %. DMSO sa pridalo do všetkých kontrolných jamiek v príslušnej koncentrácii.
Po pridaní vírusu sa bunky inkubovali pri 37 °C vo vlhčenej atmosfére s obsahom 5 % CO2 počas 7 dni. Testované zlúčeniny sa mohli v prípade potreby pridávať v deň 0, 2 a 5. V deň 7 po nainfikovaní sa bunky z každej jamky resuspendovali a 100 μΐ vzorky z každej bunkovej suspenzie sa vzalo na testy. Ku každej suspenzii (100 μΐ) sa pridalo 20 μΐ roztoku (5 mg/ml) 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazóliumbromidu (MTT) a bunky sa inkubovali 4 hodiny pri 27 °C v prostredí s 5 % CO2. Počas tejto inkubácie živé bunky MTT metabolický redukujú, výsledkom čoho v bunkách vzniká farebný produkt formazán. Ku každej vzorke sa pridalo 100 μ] 10 % dodecylsulfátu sodného v 0,01 N HC1, čim sa bunky lyžovali, a vzorky sa potom inkubovali cez noc. Pre každú vzorku sa stanovila absorbancia pri 590 nm pomocou analyzátora na mikroplatničky fy Molecular Devices. Hodnoty absorbancie pre každú súpravu jamiek sa porovnajú a stanoví sa vírusová kontrolná infekcia, odpoveď neinfikovaných kontrolných buniek, ako aj cytotoxicita a antivírusová účinnosť testovanej zlúčeniny.
Tabuľka 21
Zložka Zlúčenina
IC5(>(nM) ECmGiM)
120
Tabuľka 21 (pokračovanie)
Zložka Zlúčenina
IC50 EC50 (nM) (nM)
Tabuľka 21 (pokračovanie)
Zložka Zlúčenina
IC50 EC50 (nM) (nM)
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú účinné antivirusové zlúčeniny a osobitne sú účinnými retrovírusovými inhibítormi, ako to je uvedené. Takže predmetné zlúčeniny sú účinnými inhibítormi HIV proteázy. Uvažuje sa aj o tom, že predmetné zlúčeniny budú potláčať aj iné retrovírusy, ako sú napríklad iné lentivírusy, osobitne iné kmene HIV, napríklad HIV-2, ľudský vírus leukémie T-buniek, respiračný syncyciálny vírus, vírus opičej imunodeficiencie, vírus mačacej leukémie, vírus mačacej imunodeficiencie, hepadnavírus, cytomegalovírus a pikomavírus.
Predmetné zlúčeniny sú účinné v liečbe, profylaxii retrovírusových infekcií a/alebo prevencií šírenia retrovírusových infekcií.
Predmetné zlúčeniny sú účinné aj v zabránení rastu retrovírusov v roztoku. Kultúry ľudských aj zvieracích buniek, ako sú napríklad kultúry T-lymfocytov, sa používajú na mnohé známe účely, ako je napríklad výskum a diagnostické postupy vrátane kalibrátorov a kontrol. Pred kultiváciou a skladovaním bunkovej kultúry a počas nej možno predmetné zlúčeniny pridať do kultivačného média v účinnej koncentrácii na zabránenie neočakávanej alebo nežiaducej replikácie retrovírusu, ktorý môže byť v bunkovej kultúre prítomný z nepozornosti, nevedomky alebo vedome. Vírus môže byť pôvodne prítomný v bunkovej kultúre, napríklad je známe, že HIV je prítomný v ľudských T-lymfocytoch dlho predtým, ako sa dá zistiť v krvi, alebo vystavením účinkom vírusu. Toto použitie predmetných zlúčenín zabráni náhodnému vystaveniu, alebo vystaveniu z nepozornosti, výskumníka alebo klinika účinkom potenciálne letálneho retrovírusu.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu mať jeden alebo viac asymetrických uhlíkových atómov a sú preto schopné existovať vo forme optických izomérov, ako aj vo forme ich racemických alebo neracemických zmesí. Optické izoméry možno získať rozkladom racemických zmesí podľa konvenčných postupov napríklad vytvorením diastereoizomémych solí napríklad pôsobením s opticky aktívnou kyselinou alebo zásadou. Príklady príslušných kyselín sú kyselina vínna, diacetylvínna, dibenzoylvínna, ditoluoylvínna a gáforsulfónová, a potom odseparovanie zmesi diastereoizomérov kryštalizáciou, po ktorej nasleduje uvoľnenie opticky aktívnych zásad z týchto solí. Iný postup separácie optických izomérov zahŕňa použitie chirálnej chromatografickej kolóny zvolenej optimálne tak, aby sa maximalizovalo odseparovanie enantiomérov. Zase iná dostupná metóda zahŕňa syntézu kovalentných diastereoizomémych molekúl reakciou zlúčenín vzorca (I) s opticky čistou kyselinou v aktivovanej forme alebo s opticky čistým izokyanatanom. Syntetizované diastereoizoméry sa dajú odseparovať konvenčnými prostriedkami, ako je chromatografla, destilácia, kryštalizácia alebo sublimácia, a potom hydrolyzovať, aby sa uvoľnila enantíoméme čistá zlúčenina. Opticky aktívne zlúčeniny vzorca (I) možno získať podobne, s použitím opticky aktívnych východiskových materiálov. Tieto izoméry môžu byť vo forme voľnej kyseliny, voľnej zásady, esteru alebo soli.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu možno použiť vo forme solí odvodených z anorganických alebo organických kyselín. Tieto soli zahŕňajú, ale neobmedzujú sa, na nasledovné: octan, adipan, alginát, citran, asparagan, benzoan, benzénsulfonát, hydrosíran, maslan, gáfran, gáforsulfonát, diglukónan, cyklopentánpropiónan, dodecylsulfát, etánsulfonát, glukoheptanoát, glycerofosforečnan, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, fumaran, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxy-etánsulfonát, mliečnan, maleínan, metánsulfonát, nikotinát, 2-naftalénsulfonát, šťavcľan, palmoát, pektinát, peroxosíran, 3-fenylpropiónan, pikran, pivalan, propiónan, jantáran, vínan, rodanid, tosylát, mesylát a undekanoát. Tak isto, bázické skupiny obsahujúce dusík možno kvartemizovať činidlami, ako sú nižšie alkylhalogenidy, ako je napríklad metyl-, etyl-, propyl- a butylchlorid, bromidy a jodidy; dialkylsulfáty, ako sú napríklad dimetyl-, dietyl-, dibutyl- a diamylsulfáty, halogenidy s dlhými reťazcami, ako sú napríklad decyl-, lauryl-, myristyla stearylchloridy, bromidy a jodidy, aralkylhalogenidy, ako sú benzyl- a fenetylbromidy, a iné. Získajú sa tým produkty dispergovateľné alebo rozpustné vo vode alebo v oleji.
Príklady kyselín, ktoré možno použiť na vytvorenie farmaceutický prijateľných kyslých adičných solí, zahŕňajú anorganické kyseliny, ako je kyselina chlorovodíková, sí rová a fosforečná, a organické kyseliny, ako je kyselina šťaveľová, maleínová, jantárová a citrónová. Iné príklady zahŕňajú soli s alkalickými kovmi alebo alkalickými zeminami, ako je sodík, draslík, vápnik alebo horčík, alebo s organickými zásadami.
Celková denná dávka podávaná hostiteľovi buď v jedinej alebo vo frakcionovaných dávkach môže byť v množstvách napríklad od 0,001 do 10 mg/kg telesnej váhy denne, a obvyklejšie 0,01 až 1 mg. Prípravky s jednotkovými dávkami môžu obsahovať ich podnásobné množstvá, aby vytvorili dohromady dennú dávku.
Množstvo aktívnej zložky, ktorá sa môže skombinovať s nosičmi do jedinej dávkovej formy, bude rôzne v závislosti od liečeného hostiteľa a od konkrétneho spôsobu podávania.
Dávkovací režim na liečbu chorobného stavu zlúčeninami a/alebo prípravkami podľa tohto vynálezu sa volí v súlade s mnohými faktormi vrátane typu, veku, váhy, pohlavia, stravy a zdravotného stavu pacienta, závažnosti ochorenia, cesty podávania liečiva, farmakologických úvah, ako je aktivita, účinnosť, farmakokinetické a toxikologické profily konkrétnej použitej zlúčeniny, či sa použije systém na dodávanie liečiva a či sa liečivo podáva ako súčasť kombinácie liekov. Takže v skutočnosti použitý dávkový režim môže byť veľmi rôzny a preto sa môže odlišovať od výhodného dávkového režimu uvedeného skôr.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu možno podávať ústne, parenterálne, ako inhalačný sprej, rektálne, alebo miestne vo formuláciách s dávkovou jednotkou obsahujúcich konvenčné netoxické farmaceutický prijateľné nosiče, pomocné látky, a vehikulá podľa potreby. Miestne podávanie môže zahŕňať transdermálne podávanie, ako sú transdermálne náplasti alebo iontoforézne zariadenia. Výraz parenterálny v tu používanom zmysle zahŕňa podkožné injekcie, vnútrožilové, vnútrosvalové, intrastemálne injekčné alebo infúzne spôsoby. Injikovateľné prípravky, napríklad sterilné injikovateľné vodné alebo olejnaté suspenzie môžu byť formulované podľa známych postupov s použitím vhodných disperzných alebo zvlhčovacich prostriedkov a suspendujúcich činidiel. Sterilný injikovateľný prípravok môže byť aj sterilný injikovateľný roztok alebo suspenzia v netoxickom, parenterálne prijateľnom riedidle alebo rozpúšťadle, napríklad ako je roztok 1,3-butándiolu. Medzi prijateľnými nosičmi a rozpúšťadlami, ktoré sa môžu použiť, je voda, Ringerov roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Okrem toho sa konvenčné používajú sterilné, nevysychajúce oleje ako rozpúšťadlo alebo ako suspendujúci prostriedok. Na tento účel možno použiť akýkoľvek jemný nevysychajúci olej vrátane syntetických mono- alebo diglyceridov. Navyše, pri príprave injikovateľných liečiv možno použiť mastné kyseliny, ako je napríklad kyselina olejová.
Čapíky na podávanie liečiva cez konečník možno pripraviť zmiešaním liečiva s vhodným nedráždivým excipientom, ako je napríklad kakaové maslo a polyetylénglykoly, ktoré sú pri normálnych teplotách tuhé, ale pri rektálnych teplotách sú kvapalné a preto sa v konečníku roztopia a liečivo uvoľnia.
Tuhé dávkové formy na ústne podávanie môžu zahŕňať kapsuly, tablety, pilulky, prášky a granuly. V takýchto tuhých dávkových formách môže byť aktívna látka primiešaná aspoň s jedným inertným riedidlom, ako je napríklad sacharóza, laktóza alebo škrob. Také dávkové formy môžu zahŕňať, ako to býva v normálnej praxi, aj prídavné látky iné, ako sú inertné riedidlá, napríklad mazacie činidlá, ako je napríklad stearan horečnatý. V prípade kapsúl, tabliet a piluliek, dávkové formy môžu zahŕňať aj pufŕovacie pro striedky. Tablety a pilulky možno dodatočne vybaviť enterickou vrstvou.
Tekuté dávkové formy na ústne podávanie môžu zahŕňať farmaceutický prijateľné emulzie, roztoky, suspenzie, sirupy a elixíry obsahujúce inertné riedidlá bežne používané v tomto odvetví, ako je napríklad voda. Také prípravky môžu obsahovať aj pomocné látky, ako sú napríklad zvlhčovadlá, emulzifikačné a suspendujúce činidlá, a sladidlá, aromatizujúce látky a parfumačné činidlá.
Kým zlúčeniny podľa vynálezu možno podávať ako jediné farmaceutické činidlo, môžu sa použiť aj v kombinácii s jedným alebo s viacerými imunomodulátormi, antivírusovými činidlami alebo inými protiinfekčnými prostriedkami. Napríklad zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť podávané v kombinácii s AZT, DDI, DDC alebo s inhibítormi glukozidázy, ako je napríklad N-butyl-l-dezoxynojirimycín, alebo ich predlieky, na profylaxiu a/alebo liečbu AIDS. Ak sa podávajú v kombinácii, terapeutické prostriedky možno naformulovať ako osobitné prípravky podávané zároveň alebo inokedy, alebo terapeutické prostriedky môžu byť podávané ako jediný prípravok.
Uvedené údaje sú iba na ilustráciu vynálezu a nie sú uvádzané na obmedzenie uvedených zlúčenín. Obmeny a odchýlky, ktoré sú zrejmé pre osoby oboznámené s problematikou, majú byť v rámci rozsahu a povahy vynálezu a sú definované v priložených nárokoch. Z uvedených opisov osoba skúsená v problematike môže ľahko zistiť základnú charakteristiku tohto vynálezu a bez opustenia ducha a rozsahu vynálezu môže urobiť rôzne zmeny a modifikácie s cieľom prispôsobiť ho rôznym potrebám a podmienkam.

Claims (13)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Zlúčenina všeobecného vzorca:
    alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester,
    R1 predstavuje alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alkenyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, alkinyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, hydroxyalkyi s 1 až 3 uhlíkovými atómami, alkoxyalkyl s 1 až 3 alkyl a 1 až 3 alkoxy uhlíkovými atómami, kyanoalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, imidazolylmetyl, -CH2CONH2, -CH2CH2CONH2, -CH2S(O)2NH2, -CHjSCHj, -CH2S(O)CH,, -CH2S(O)CH3i -C(CH3)2SCH3, -C(CHj)2S(O)CH3 alebo -C(CH3)2S(O)2CH3 radikály;
    R2 predstavuje radikály alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, aralkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, alkyltioalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, aryltioalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami alebo cykloalkylalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami a 3 až 6 členným kruhom uhlíkových atómov;
    R3 predstavuje alkyl radikál s 1 až 5 uhlíkovými atómami, cykloalkyl radikál s 5 až 8 členným kruhom alebo cykloalkylmetyl radikál s 3 až 6 členným kruhom;
    R4 predstavuje radikály aryl, benzokondenzovaný 5 až 6 členný heteroarylový radikál alebo benzokondenzovaný 5 až 6 členný heterocyklo radikál alebo radikál vzorca kde A a B nezávisle od seba predstavujú O, S, SO alebo SO2;
    R6 predstavuje deutériový, alkylový s 1 až 5 uhlíkovými atómami, fluóro alebo chlóroradikál;
    R7 predstavuje vodíkový, deutériový, metyl, fluoro alebo chloro radikál; alebo radikál vzorca kde Z predstavuje O, S alebo NH; a R9 predstavuje radikál vzorca *'. JL R« X . V íl x' . g NXr21 debo '*N''SxR«
    5 kde Y predstavuje O, S alebo NH; X predstavuje väzbu, O alebo NR31;
    R20 predstavuje vodík, alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alkenyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, alkinyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, aralkyl s 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, heteroaralkyl s 5 až 6 členným kruhom a 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, heterocykloalkyl s 5 až 6 členným kruhom a 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, aminoalkyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami, N-monosubstituovaný alebo Ν,Ν-disubstituovaný aminoalkyl s 2 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, kde uvedené substituenty sú radikály alkyl s 1 až 3 uhlíkovými atómami, aralkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, karboxyalkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alkoxykarbonylalkyl s 1 až 5 alkyl uhlíkovými atómami, kyanoalkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, alebo hydroxyalkyl s 2 až 5 uhlíkovými atómami;
    R21 predstavuje vodíkový radikál alebo alkyl radikál s 1 až 3 uhlíkovými atómami; alebo radikál vzorca -NR20R21 predstavuje 5 až 6 členný heterocyklo radikál; a
    R22 predstavuje alkyl radikál s 1 až 3 uhlíkovými atómami alebo R20R2,N-alkyl radikál s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami.
  2. 2. Zlúčenina podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester, kde R1 predstavuje alkyl s 1 až 4 uhlíkovými atómami, alkenyl s 2 až 3 uhlíkovými atómami, alkinyl s 3 až 4 uhlíkovými atómami, kyanometyl, imidazolylmetyl, -CH2CONH2, -CH2CH2CONH2, -CH2S(O)2NH2, -CH2SCH3, -CH2S(O)CH3, -CH,S(O)2CH3, -C(CH3)2ŠCH3, -C(CH3)2S(O)CH3 alebo -C(CH3)2S(O)2CII3 radikály; a
    R2 predstavuje radikály alkyl s 3 až 5 uhlíkovými atómami, arylmetyl, alkyltioalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, aryltiometyl alebo cykloalkylmetyl s 5 až 6 členným kruhom uhlíkových atómov;
    R3 predstavuje alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, cykloalkylmetyl s 3 až 6 členným kruhom, cyklohexyl alebo cykloheptyl radikály;
    R4 predstavuje fenyl, 2-naftyl, 4-metoxyfenyl, 4-hydroxyfenyl, 3,4-dimetoxyfenyl, 3-aminofenyl, 4-aminofenyl, 2-amino-benzotiazol-5-yl, 2-amino-benzotiazol-6-yl, benzotiazol-5-yl, benzotiazol-6-yl, benzoxazol-5-yl, 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl, benzofuran5-yl, l,3-benzodioxol-5-yl alebo 1,4-benzodioxan-6-yl radikály; alebo radikál vzorca kde A aj B predstavuje O; R6 predstavuje deutériový, metyl, etyl, propyl, izopropyl alebo fluóro radikál; a R7 predstavuje vodíkový, deutériový, metyl alebo fluóro radikál; alebo radikál vzorca kde Z predstavuje O, S, alebo NH; a R9 predstavuje radikál vzorca
    ... JL rj° x X . °v° ii*' , g mxr21 aJebo ''g^R22 , kde Y predstavuje O, S alebo NH; X predstavuje väzbu, O alebo NR21;
    R20 predstavuje vodík, alkyl s 1 až 5 uhlíkovými atómami, fenylalkyl s 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, heterocykloalkyl s 5 až 6 členným kruhom a 1 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, alebo N-monosubstituovaný alebo N,N-disubstituovaný aminoalkyl s 2 až 3 alkyl uhlíkovými atómami, kde uvedené substituenty sú alkyl radikály s 1 až 3 uhlíkovými atómami; a
    R21 predstavuje vodíkový alebo metyl radikál; alebo radikál vzorca -NR20R21 predstavuje pyrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-benzylpiperazinyl, morfolinyl alebo tiamorfolinyl radikály; a
    R22 predstavuje alkyl radikál s 1 až 3 uhlíkovými atómami.
  3. 3. Zlúčenina podľa nároku 2, alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester, kde
    R1 predstavuje izopropyl, seŕ-butyl, terc-butyl, 3-propynyl, imidazolylmetyl, -CH2CONH2, -CH2SCH3, -CH2S(O)CH3, -CH,S(O)2CH3, -C(CH3)2SCH3, -C(CHj)2S(O)CH3 alebo -C(CHj)2S(O)2CH3 radikály;
    R2 predstavuje izobutyl, n-butyl, CH3SCH2CH2-, fenyltiometyl, (2-naftyltio)metyl, benzyl, 4-metoxyfenylmetyl,
  4. 4- hydroxyfenylmetyl, 4-fluórfenylmetyl alebo cyklohexyl -metyl radikály;
    R3 predstavuje propyl, izoamyl, izobutyl, butyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklopentylmetyl alebo cyklohexylmetyl radikály;
    R4 predstavuje fenyl, 2-naftyl, 4-metoxyfenyl, 4-hydroxyfenyl, benzotiazol-5-yl, benzotiazol-6-yl, benzoxazol-
  5. 5- yl, 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl, benzofuran-5-yl, 1,3-benzodioxol-5-yl, 2-metyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dimetyl-1,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dideutero-l ,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-difluór-l,3-benzodioxol-5-yl alebo 1,4-benzodioxan-6-yl radikály; alebo radikál vzorca
    0$·* kde Z predstavuje O, S alebo NH; a R9 predstavuje radikál vzorca
    ... i RJo Λ°χ . γ g*S g alebo , kde Y predstavuje O, S alebo NH; X predstavuje väzbu, O alebo NR21;
    R20 predstavuje vodík, metyl, etyl, propyl, izopropyl, izobutyl, benzyl, 2-(l-pyrolidinyljetyl, 2-(l -pipcridinyljetyl, 2-(l-piperazinyl)etyl, 2-(4-metylpiperazin-l-yl)etyl, 2-(l-morfolinyl)etyl, 2-(l-tiamorfolinyl)etyl alebo 2-(N,N-dimetylaminojetyl radikál;
    R21 predstavuje vodíkový radikál; a
    R22 predstavuje metyl radikál.
    4. Zlúčenina podľa nároku 3 alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester, kde n predstavuje 1;
    R1 predstavuje seA-butyl, terc-butyl, izopropyl, 3-propinyl alebo -C(CH3)2S(O)2CH3 radikály;
    R2 predstavuje benzyl, 4-fluórfenylmetyl alebo cyklohexylmetyl radikály;
    R4 predstavuje fenyl, 4-metoxyfenyl, 4-hydroxyfenyl, benzotiazol-5-yl, benzotiazol-6-yl, 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl, benzofuran-5-yl, l,3-benzodioxol-5-yl, 2-metyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dimetyl-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-dideutero-l,3-benzodioxol-5-yl, 2,2-diíluór-l,3-benzodioxol-5-yl, l,4-benzodioxan-6-yl, 2-(metoxykarbonylamino)benzotiazol-6-yl alebo 2-(metoxykarbonylamino)benzimidazol-5-yl radikály.
    5. Zlúčenina podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že uvedená farmaceutický prijateľná soľ je soľ kyseliny chlorovodíkovej, soľ kyseliny sírovej, soľ kyseliny fosforečnej, soľ kyseliny šťaveľovej, soľ kyseliny maleínovej, soľ kyseliny jantárovej, soľ kyseliny citrónovej alebo soľ kyseliny metánsulfónovej.
  6. 6. Zlúčenina podľa nároku 5, vyznačujúca sa tým, že uvedená farmaceutický prijateľná soľ je soľ kyseliny chlorovodíkovej, soľ kyseliny šťaveľovej, soľ kyseliny citrónovej alebo soľ kyseliny metánsulfónovej.
  7. 7. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenyl metyl)propyl]-3 S-metyl-pentánamid;
    2S-[[pyrolídin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,3-benzodioxol-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl] -3,3 -dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl] -3 -metyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl ]-3 S-metyl-pentánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[fenylsulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)proPyl] -4-pentínamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyljpropyl] -3,3 -dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino] -1 S-(fenylmetyl)propyl]-3S-metyl-pentánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(4-metoxyfenyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid;
    2S-[[pyrolidin-1 -yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofurán-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-1-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metyl-pentánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metyl-pentánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(benzotiazol-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-1 S-(fenylmetyl)propy IJ-3,3 -dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propy I] -3 -metyl -butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metylpropyl)aminol-1 S-(fenylmetyl)propyl]-3 S-metyl-pentánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(2-naftyl)sulfonyl](2-metyl-propyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amíno]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3,3-dimetyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3-metyl-butánamid;
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-3S-metyl-pentánamid; alebo
    2S-[[pyrolidin-l-yl)acetyl]amino]-N-[2R-hydroxy-3-[[(l,4-benzodioxan-6-yl)sulfonyl](2-metylpropyl)amino]-lS-(fenylmetyl)propyl]-4-pentínamid.
  8. 8. Prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa nároku 1 a farmaceutický prijateľný nosič.
  9. 9. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1 na prípravu liečiva na inhibíciu retrovírusovej proteázy.
  10. 10. Použitie prípravku podľa nároku 8 na prípravu liečiva na liečenie retrovírusovej infekcie.
  11. 11. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1 na prípravu liečiva na prevenciu replikácie retrovirusu.
  12. 12. Spôsob prevencie replikácie retrovirusu in vitro, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa aplikáciu účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1.
  13. 13. Použitie prípravku podľa nároku 8 na prípravu liečiva na liečenie AIDS.
SK1224-97A 1995-03-10 1996-03-07 Inhibítory retrovírusových proteáz na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín a ich použitie SK285688B6 (sk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40228795A 1995-03-10 1995-03-10
US08/474,052 US5756533A (en) 1995-03-10 1995-06-07 Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
PCT/US1996/002684 WO1996028463A1 (en) 1995-03-10 1996-03-07 Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK122497A3 SK122497A3 (en) 1998-03-04
SK285688B6 true SK285688B6 (sk) 2007-06-07

Family

ID=23591303

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1224-97A SK285688B6 (sk) 1995-03-10 1996-03-07 Inhibítory retrovírusových proteáz na báze hydroxyetylaminosulfónamidu aminokyselín a ich použitie

Country Status (23)

Country Link
US (3) US5756533A (sk)
EP (2) EP0813542B1 (sk)
JP (1) JP4091111B2 (sk)
KR (1) KR100377855B1 (sk)
CN (1) CN1204144C (sk)
AT (1) ATE226213T1 (sk)
AU (1) AU705268B2 (sk)
BR (1) BR9607638A (sk)
CA (1) CA2215061A1 (sk)
CZ (1) CZ297719B6 (sk)
DE (1) DE69624346T2 (sk)
DK (1) DK0813542T3 (sk)
EA (1) EA000470B1 (sk)
EE (1) EE04349B1 (sk)
ES (1) ES2187640T3 (sk)
HU (1) HUP9801562A3 (sk)
NO (1) NO974148L (sk)
NZ (1) NZ303861A (sk)
PL (1) PL184748B1 (sk)
PT (1) PT813542E (sk)
SK (1) SK285688B6 (sk)
UA (1) UA56130C2 (sk)
WO (1) WO1996028463A1 (sk)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040122000A1 (en) 1981-01-07 2004-06-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated. Inhibitors of aspartyl protease
US6140505A (en) * 1995-03-10 2000-10-31 G. D. Searle & Co. Synthesis of benzo fused heterocyclic sulfonyl chlorides
US5756533A (en) * 1995-03-10 1998-05-26 G.D. Searle & Co. Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US5776971A (en) * 1995-03-10 1998-07-07 G.D. Searle & Co. Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
PT2336134T (pt) 1998-06-23 2016-10-19 The Board Of Trustees Of The Univ Of Illionis Ensaio de aptidão e métodos para reduzir a resistência do hiv à terapia
AU4828199A (en) * 1998-06-23 2000-01-10 Board Of Trustees Of The University Of Illinois, The Multi-drug resistant retroviral protease inhibitors and associated methods
EP1095022A1 (en) 1998-07-08 2001-05-02 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors
AR031520A1 (es) * 1999-06-11 2003-09-24 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de aspartilo proteasa, una composicion que lo comprende y un metodo para tratar un paciente con dicha composicion
AUPR034000A0 (en) * 2000-09-25 2000-10-19 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Aminoalcohol derivatives
CN100369904C (zh) 2001-02-14 2008-02-20 泰博特克药品有限公司 2-(取代-氨基)-苯并噻唑磺酰胺hiv蛋白酶抑制剂
AR035819A1 (es) * 2001-04-09 2004-07-14 Tibotec Pharm Ltd 2-(amino sustituido)-benzoxazol sulfonamidas, inhibidoras de la proteasa del hiv, composiciones farmaceuticas que comprenden dichos compuestos, metodo in vitro para inhibir la replicacion retroviral y uso de dichos compuestos en la fabricacion de medicamentos
PT1387842E (pt) * 2001-05-11 2009-07-20 Tibotec Pharm Ltd 2-aminobenzoxazolsulfonamidas inibidoras de largo espectro da protease hiv
EP1463502B1 (en) 2001-12-21 2011-07-13 Tibotec Pharmaceuticals Broadspectrum heterocyclic substituted phenyl containing sulfonamide hiv protease inhibitors
ATE362741T1 (de) * 2002-01-31 2007-06-15 Radi Medical Systems Sich auflösender stent
US7157489B2 (en) 2002-03-12 2007-01-02 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois HIV protease inhibitors
MY142238A (en) * 2002-03-12 2010-11-15 Tibotec Pharm Ltd Broadspectrum substituted benzimidazole sulfonamide hiv protease inhibitors
SI1517899T1 (sl) * 2002-05-17 2008-02-29 Tibotec Pharm Ltd Substituirani benzoksazol sulfonamidi sirokega spektra, ki so HIV proteazni inhibitorji
OA12893A (en) * 2002-08-02 2006-10-13 Tibotec Pharm Ltd Broadspectrum 2-Amino-Benzothiazole Sulfonamide HIV Protease Inhibitors.
KR100994759B1 (ko) 2002-08-14 2010-11-16 티보텍 파마슈티컬즈 광역스펙트럼의 치환된 옥신돌 설폰아미드 ｈｉｖ프로테아제 저해제
US6943170B2 (en) * 2002-11-14 2005-09-13 Bristol-Myers Squibb Company N-cycloalkylglycines as HIV protease inhibitors
US20060128634A1 (en) * 2002-11-14 2006-06-15 Carini David J Alpha, alpha-disubstituted benzylglycine derivatives as HIV protease inhibitors
JP4818124B2 (ja) 2003-12-23 2011-11-16 テイボテク・フアーマシユーチカルズ・リミテツド （３Ｒ，３ａＳ，６ａＲ）−ヘキサヒドロフロ〔２，３−ｂ〕フラン−３−イル（１Ｓ，１Ｒ）−３−〔〔（４−アミノフェニル）スルホニル〕（イソブチル）アミノ〕−１−ベンジル−２−ヒドロキシプロピルカルバマートの製造方法
EP1725566B1 (en) 2003-12-23 2009-06-17 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Process for the preparation of (3r,3as,6ar)-hexahydrofuro [2,3-b] furan-3-yl (1s,2r)-3-[[(4-aminophenyl) sulfonyl] (isobutyl) amino]-1-benzyl-2-hydroxypropylcarbamate
WO2005087728A1 (en) 2004-03-11 2005-09-22 Sequoia Pharmaceuticals, Inc. Resistance-repellent retroviral protease inhibitors
AU2007285759B2 (en) * 2006-08-18 2013-11-21 Sequoia Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting cytochrome P450
EP2224923A4 (en) 2007-11-28 2013-05-15 Sequoia Pharmaceuticals Inc COMPOSITIONS AND METHOD FOR INHIBITING ZYTOCHROM P450 2D6
EP2276726A1 (en) * 2008-04-18 2011-01-26 University of Connecticut Compounds for lysosomal modulation and methods of use
WO2011010524A1 (ja) * 2009-07-24 2011-01-27 住友精化株式会社 アルコキシベンゼンスルホニルクロライドの製造方法
ME02624B (me) 2011-12-09 2017-06-20 Chiesi Farm Spa Inhibitori kinaze
CN104387299B (zh) * 2014-10-23 2016-08-17 凯莱英医药集团（天津）股份有限公司 4-氨基-n-[(2r, 3s)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-n-异丁基苯磺酰胺的制备方法
CN111205206B (zh) * 2020-02-13 2021-10-22 中国医学科学院医药生物技术研究所 一种包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5142056A (en) * 1989-05-23 1992-08-25 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
DE3269604D1 (en) * 1981-06-26 1986-04-10 Schering Corp Novel imidazo(1,2-a)pyridines and pyrazines, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US4634465A (en) * 1982-07-16 1987-01-06 Ciba-Geigy Corporation Fused N-phenylsulfonyl-N'-pyrimidinylureas and N-phenylsulfonyl-N'triazinylureas
DE3377497D1 (en) * 1982-09-15 1988-09-01 Haessle Ab Enzyme inhibitors
US4595407A (en) * 1982-11-01 1986-06-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Triazinyl-amino-carbonyl-1,3-benzohetero- or -1,4-benzohetero-sulfonamides
EP0114993B1 (en) * 1982-12-27 1990-05-16 Merck & Co. Inc. Renin inhibitory tripeptides
US4668770A (en) * 1982-12-27 1987-05-26 Merck & Co., Inc. Renin inhibitory tripeptides
EP0316965A3 (en) * 1983-02-07 1989-08-09 Aktiebolaget Hässle Enzyme inhibitors
HU197774B (en) * 1983-02-16 1989-05-29 Laszlo Paszner Organic solvent process for the hydrolytic saccharification of vegetable materials of starch type
JPS59227851A (ja) * 1983-06-09 1984-12-21 Sankyo Co Ltd レニン阻害作用を有するペプチド類
US4514391A (en) * 1983-07-21 1985-04-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Hydroxy substituted peptide compounds
US4477441A (en) * 1983-09-14 1984-10-16 Merck & Co., Inc. Renin inhibitors containing a C-terminal disulfide cycle
US4645759A (en) * 1984-06-22 1987-02-24 Abbott Laboratories Renin inhibiting compounds
US4616088A (en) * 1984-10-29 1986-10-07 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino acid ester and amide renin inhibitor
US4668769A (en) * 1985-08-02 1987-05-26 Hoover Dennis J Oxa- and azahomocyclostatine polypeptides
US4599198A (en) * 1985-08-02 1986-07-08 Pfizer Inc. Intermediates in polypeptide synthesis
CA1282549C (en) * 1985-11-12 1991-04-02 Eric M. Gordon Aminocarbonyl renin inhibitors
CA1297631C (en) * 1985-12-23 1992-03-17 Sesha I. Natarajan Ureido renin inhibitors
US4757050A (en) * 1985-12-23 1988-07-12 E. R. Squibb Sons, Inc. Ureido renin inhibitors
US4880938A (en) * 1986-06-16 1989-11-14 Merck & Co., Inc. Amino acid analogs
DE3635907A1 (de) * 1986-10-22 1988-04-28 Merck Patent Gmbh Hydroxy-aminosaeurederivate
NL8800100A (nl) * 1987-01-21 1988-08-16 Sandoz Ag Nieuwe peptidederivaten en werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze derivaten.
USH725H (en) * 1987-02-26 1990-01-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Ureido amino and imino acids, compositions and methods for use
GB8707412D0 (en) * 1987-03-27 1987-04-29 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptide compounds
DE3830825A1 (de) * 1987-09-15 1989-03-23 Sandoz Ag Hydrophile reninhemmer, ihre herstellung und verwendung
IL89900A0 (en) * 1988-04-12 1989-12-15 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids and pharmaceutical compositions containing them
US4977277A (en) * 1988-05-09 1990-12-11 Abbott Laboratories Functionalized peptidyl aminodiols and -triols 4-amino-5-cyclohexyl-3-hydroxy-1,2-oxopentane and derivatives thereof
IL90218A0 (en) * 1988-05-13 1989-12-15 Abbott Lab Retroviral protease inhibitors
CA1340588C (en) * 1988-06-13 1999-06-08 Balraj Krishan Handa Amino acid derivatives
IL91307A0 (en) * 1988-08-24 1990-03-19 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors and pharmaceutical compositions for the treatment of aids containing them
CA2012306A1 (en) * 1989-03-28 1990-09-28 Werner Neidhart Amino acid derivatives
JP2701932B2 (ja) * 1989-04-10 1998-01-21 サントリー株式会社 タンパク質分解酵素阻害剤
DE3912829A1 (de) * 1989-04-19 1990-10-25 Bayer Ag Verwendung von renininhibitorischen peptiden als mittel gegen retroviren
TW225540B (sk) * 1990-06-28 1994-06-21 Shionogi & Co
US5289728A (en) * 1990-11-08 1994-03-01 Jr Johanson, Inc. Flow-no-flow tester
AU9125191A (en) * 1990-11-19 1992-06-11 Monsanto Company Retroviral protease inhibitors
ZA929869B (en) * 1991-12-20 1994-06-20 Syntex Inc Hiv protease inhibitors
KR100336699B1 (ko) * 1992-08-25 2002-05-13 윌리암스 로저 에이 레트로바이러스 프로테아제 저해제로서 유용한히드록시에틸아미노 술폰아미드
IS2334B (is) * 1992-09-08 2008-02-15 Vertex Pharmaceuticals Inc., (A Massachusetts Corporation) Aspartyl próteasi hemjari af nýjum flokki súlfonamíða
DE69331421T2 (de) * 1992-10-30 2002-08-01 G.D. SEARLE &amp; CO., CHICAGO N-substituierte Hydroxyethylaminosulfamidsäure-Derivate verwendbar als Inhibitoren retroviraler Proteasen
EP0705320A4 (en) * 1993-06-21 1996-06-12 Exxon Research Engineering Co CATALYTIC CRACKING SYSTEM
EP0715618B1 (en) * 1993-08-24 1998-12-16 G.D. Searle & Co. Hydroxyethylamino sulphonamides useful as retroviral protease inhibitors
UA49803C2 (uk) * 1994-06-03 2002-10-15 Дж.Д. Сьорль Енд Ко Спосіб лікування ретровірусних інфекцій
US5756533A (en) * 1995-03-10 1998-05-26 G.D. Searle & Co. Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
KR100377855B1 (ko) 2003-07-23
PL322784A1 (en) 1998-02-16
PT813542E (pt) 2003-01-31
EE9700201A (et) 1998-02-16
HUP9801562A2 (hu) 1998-11-30
CZ282497A3 (cs) 1998-02-18
NZ303861A (en) 1999-02-25
UA56130C2 (uk) 2003-05-15
EP0813542A1 (en) 1997-12-29
NO974148L (no) 1997-10-27
WO1996028463A1 (en) 1996-09-19
AU5029496A (en) 1996-10-02
ES2187640T3 (es) 2003-06-16
ATE226213T1 (de) 2002-11-15
JP4091111B2 (ja) 2008-05-28
HUP9801562A3 (en) 2001-02-28
KR19980702905A (ko) 1998-09-05
US5756533A (en) 1998-05-26
BR9607638A (pt) 1998-05-26
SK122497A3 (en) 1998-03-04
DE69624346D1 (de) 2002-11-21
CN1186499A (zh) 1998-07-01
CZ297719B6 (cs) 2007-03-14
DE69624346T2 (de) 2003-06-26
EP0813542B1 (en) 2002-10-16
CN1204144C (zh) 2005-06-01
CA2215061A1 (en) 1996-09-19
EA199700221A1 (ru) 1998-04-30
JP2001513746A (ja) 2001-09-04
PL184748B1 (pl) 2002-12-31
NO974148D0 (no) 1997-09-09
EE04349B1 (et) 2004-08-16
US5968970A (en) 1999-10-19
DK0813542T3 (da) 2003-02-17
AU705268B2 (en) 1999-05-20
US5965601A (en) 1999-10-12
EP1258491A1 (en) 2002-11-20
EA000470B1 (ru) 1999-08-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0813542B1 (en) Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
EP0813543B1 (en) Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6214861B1 (en) Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
SK282893B6 (sk) Sulfonylalkanoylamino hydroxyetylamino sulfónamidová zlúčenina, jej použitie a kompozícia s jej obsahom
US20060189611A1 (en) Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6172101B1 (en) Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6683210B2 (en) Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6673822B2 (en) Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors