FI85019C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara (e)-4-oktendioylbis (oxitrimetylen) bis (1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoxi-2-metyl-1-(3,4,5-trimetoxibensyl) isokinolinium) foereningar. - Google Patents

Description

1 85019

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten (E)-4-okteeni-dioyylibis(oksitrimetyleeni)bis(1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli~l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokino-liniumyhdisteiden valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää uusien yhdisteiden valmistamiseksi, joita yhdisteitä voidaan käyttää ihmis-ja eläinlääketieteessä lyhytvaikutteisina neuromuskulaari-sesti salpaavina aineina.

10 Anestesiassa käytetään neuromuskulaarisesti salpaa- via aineita luurankolihasten relaksaation aikaansaamiseksi leikkauksen ja henkitorven intubaation aikana. Neuromusku-laarisia salpaajia käytetään käytännöllisesti katsoen kaikilla kirurgian alueilla.

15 Yleisesti ottaen käytössä on kahden tyyppisiä neu romuskulaarisesti salpaavia aineita, depolaroimattomia ja depolaroivia.

Depolaroimattomiin aineisiin kuuluvat pitkävaikutteiset aineet d-tubokurariini, pankuronium, gallamiini, 20 diallyylitoksiferiini ja vaikutusajaltaan keskinkertaiset aineet atrakurium ja vecuronium.

Depolaroiviin aineisiin kuuluvat sukkinyylikoliini ja dekametonium. Kaikilla tavanomaisilla depolaroimatto-milla aineilla kä.ytettyinä kirurgiassa luurankolihasten 25 relaksaation aikaansaamiseen on pitkä vaikutusaika, esim. 60-180 minuuttia ihmisillä. Tavanomaiset depolaroivat aineet sitä vastoin aikaansaavat lihasrelaksaation ja niillä on lyhyempi vaikutusaika kuin depolaroimattomilla aineilla. Esimerkiksi sukkinyylikoliini aiheuttaa ihmisille 30 lyhytaikaisen, noin 5-15 minuuttia kestävän lihasrelaksaation.

Pitkävaikutteisiin depolaroimattomiin aineisiin liittyy luonnostaan sivuvaikutuksia. Esimerkiksi gallamiini ja pankuronium voivat aiheuttaa sydämen tiheälyönti-35 syyttä ja d-tubokurariini ja diallyylitoksiferiini voivat 2 85019 aiheuttaa liian alhaisen verenpaineen. Pitkän ja keskipitkän vaikutusalan omaavilla depolaroimattomilla aineilla ei päästä nopeaan neuromuskulaarisen lamaantumisen alkamiseen.

5 Vaikkakin näille depolaroimattomille aineille voi daan käyttää farmakologisina vastavaikuttavina antikoli-nesteraaseja, tämä voi aiheuttaa sen, että tarvitaan toinen lääkeaine, jolla puolestaan voi olla omat sivuvaikutuksensa, esim. sydämen harvalyöntisyys, suolen kouristuk-10 siä ja runsaseritteistä keuhkoputkentulehdusta. Antikoli-nesteraasiaineiden yllä mainittujen sivuvaikutusten ehkäisemiseksi voi siten olla tarpeen antaa vielä kolmatta lääkeainetta, antikolinergista ainetta, esim. antropiinia.

Ainoa lyhytvaikutteinen aine, joka on nykyään saa-15 tavissa terapeuttiseen käyttöön, on depolaroiva aine, suk-kinyylikoliini. Tämän hakemuksen hakijoiden tietämyksen mukaan depolaroiville aineille ei ole olemassa farmakologisia antagonisteja eikä niitä vastaan sen vuoksi voida vaikuttaa potilaissa, joilla ilmenee vaikeuksia tai mikäli 20 halutaan nopeampi palautuminen. Vaikkakaan useimmissa tapauksissa ei ole tarpeen vaikuttaa käänteisesti depolaroi-vien aineiden vaikutukseen, joillakin potilailla sukki-nyylikoliinin vaikutukset jatkuvat paljon pitempään aineen epänormaalin metabolisoitumisen vuoksi tällaisessa poti-25 laassa.

Vaikutustapansa vuoksi depolaroivat aineet aiheuttavat myös aluksi luurankolihasten supistumista ja sileiden lihasten stimulaatiota ja myös seuraavia sivuvaikutuksia tietyissä tapauksissa: silmänsisäisen paineen 30 kohoamista ja ruoansulatuskanavan jännittymistä, sydämen rytmihäiriöitä, kaliumin vapautumista ja lihaskipuja.

Depolaroimattomat aineet eivät aiheuta näitä pola-roivien aineiden aiheuttamia sivuvaikutuksia. Sen vuoksi on täysin ilmeistä, kuten myös lääkärit ovat tiedostaneet 35 yli 25 vuoden ajan, että neuromuskulaarisesti salpaava 3 85019 aine, jossa olisi yhdistettyinä depolaroivien aineiden lyhyt vaikutusaika ja depolaroimattomien aineiden vähäiset sivuvaikutukset ja farmakologinen käänteisvaikutusmahdol-lisuus, olisi edullinen.

5 Nyt on havaittu, että uudet kaavan (1) mukaiset yhdisteet ovat tehokkaita neuromuskulaarisesti salpaavia aineita, joilla on suhteellisen lyhyt vaikutusaika, esim. apinoissa noin 10 minuuttia. Näillä yhdisteillä on depo-laroimaton vaikutusmekanismi, ne ovat farmakologisesti pa-10 lautuvia ja niiden vaikutus alkaa suhteellisen nopeasti, ominaisuus, joka on hyvin tärkeä kirurgisissa hätätapauksissa.

Keksinnön mukaisesti aikaansaadaan siten yhdisteitä, joilla on kaava (1): 15 CH3°vYii:r'V'<Ssl λ n

n n CHX<XX

CH3° [ ^(CH2)30CCH2CH2CH=CHCH2CH2C0(CH2)' J 0CH3 x2 Zz

20 XX ·2 X- XX

CHgO'^Y^^DCHj CH30^ Y"^^0CH3 och3 och3 (1) 25 jossa X' on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni.

Kaavan (1) mukaisissa yhdisteissä on isokinolinium-runkojen asemissa C(l) ja C(1') kiraalisuuskeskukset; keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on näiden kummankin keskuksen kohdalla R-konfiguraatio. R-konfigu-30 raatio on rakenne, joka saadaan käytettäessä (-)-5'-metok-silaudanosiinia, joka identifioidaan myös (R)—(-)-5'-meto-ksilaudanosiinina, jonka valmistus on kuvattu esimerkki-osassa. Kaavan (1) mukaisilta yhdisteiltä, joilla on näissä kummassakin kiraalisuuskeskuksessa R-konfiguraatio, 35 puuttuvat käytännöllisesti katsoen kaikki merkittävät si- 4 85019 vuvaikutukset kun niitä käytetään annoksina, joita voidaan olettaa käytettävän kliinisesti, kun taas vastaavat enan-tiomeeriset yhdisteet, so. yhdisteet, joiden kummassakin kiraalisuuskeskuksessa on S-konfiguraatio, luultavasti 5 aiheuttavat haitallisia sydänverisuonivaikutuksia, kuten histamiinin vapautumiseen liittyviä vaikutuksia, kun niitä käytetään kliinisesti kysymykseen tulevina annoksina.

Kaavan (1) mukaisissa yhdisteissä on myös alkeeni-nen kaksoissidos ja niillä saattaisi sen vuoksi olla joko 10 E tai Z-konfiguraatio. Keksintö koskee vain E-konfiguraa-tion omaavien yhdisteiden valmistusta. Lisäksi kummankin kvaternäärisen typpiatomin substituentit voivat olla joko R- tai S-konfiguraatiossa. Tästä on seurauksena, että kaavan (1) mukaisissa yhdisteissä, joissa C(l)- ja C(l')-hii-15 liatomeissa on R-konfiguraatio, on E-isomeeriä kohti kolme diastereomeeriä, RR-RR, RS-RS ja RR-RS. RS-RR-diastereo-meeri on sama kuin RR-RS. Tämä keksintö käsittää menetelmän näiden kuuden diastereomeerin valmistamiseksi erikseen ja seoksina.

20 Kaikista diastereomeeriyhdistelmistä ovat tehok kaimpia ne, joiden konfiguraatiot ovat RS-RS ja RS-RR ja ne ovat yllättävästi tehokkaampia kuin RR-RR-diastereomee-rit. Tehon ja tuotantokustannusten suhteen kaavan (1) piiriin kuuluva edullinen sovellutusmuoto on kuitenkin yksit-25 täisen diastereomeerin sijasta kaikkien kolmen diastereomeerin seos. Tällaisista seoksista on edullinen sellainen, josta RS-RS- ja RR-RS-diastereomeerit yhdessä muodostavat suuremman osan, erityisesti yli 70 % tai jopa 80 % tai 90 % (painoprosentteja). Vielä edullisempaa on itse asiassa, 30 että seos sisältää 1-15 paino-% RR-RR-diastereomeeriä, 38-50 paino-% RR-RS-diastereomeeriä ja 40-56 paino-% RS-RS-diastereomeeriä.

Koska keksinnön mukaisten yhdisteiden farmakologinen teho perustuu niiden di-kationiin, anionin X- luonne 35 on muuten melko merkityksetön, mutta terapeuttista käyttöä 5 85019 varten sen tulee olla farmaseuttisesti hyväksyttävä yhdisteiden saajalle. Esimerkkejä farmaseuttisesti hyväksyttävistä anioneista ovat jodidi, mesylaatti, tosylaatti, bromidi, kloridi, vetysulfaatti, sulfaatti/2, fosfaatti/3, 5 vetyfosfaatti/2, asetaatti, bentseenisulfonaatti, hemisuk-kinaatti, sukkinaatti/2, maleaatti, naftaleenisulfonaatti ja propionaatti. Farmakologisesti hyväksyttäviä suoloja samoin kuin suoloja, jotka eivät ole tällä tavoin hyväksyttäviä, voidaan käyttää kaavan I mukaisten yhdisteiden 10 eristyksessä ja puhdistamisessa, ja suolat, jotka eivät ole hyväksyttäviä, ovat käyttökelpoisia myös sikäli, että ne voidaan muuttaa hyväksyttäviksi suoloiksi alalla hyvin tunnetuilla menetelmillä.

Kaavan (1) mukaisia yhdisteitä käytetään neuromus-15 kulaarisina salpaajina kirurgian yhteydessä tai henkitor-ven intubaatiota varten tavanomaisella parenteraalisella antotavalla, esim. antamalla niitä liuoksena lihakseen tai laskimoon. Lihasrelaksaation aikaansaamiseksi nisäkkäissä, niille annetaan neuromuskulaarisesti salpaava tehokas an-20 nos kaavan (1) mukaista yhdistettä. Kullekin kohdetyypille annettava annos vaihtelee lajin erityisominaisuuksista riippuen. Nisäkkäiden lihaslamaantumisen aikaansaamiseksi sopiva laskimonsisäisesti annettava määrä eli annos olisi kuitenkin 0,01 - 0,50 mg/kg kehonpainoa ja edullisimmin 25 0,025 0,3 mg/kg kehonpainoa, jolloin nämä määrät on las kettu aktiivisena aineosana olevan dikationin painon perusteella. Lihakseen tapahtuvana antona käytettävät annokset ovat 2-4-kertaiset verrattuna laskimonsisäiseen annokseen. Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden vaikutus 30 on palautuva käytettäessä tavanomaisia antikolinesteraasi- aineita, kuten neostigmiiniä ja edrofoniumia on ilmennyt, että niiden avulla vältetään sivuvaikutukset, jotka liittyvät tavanomaisiin depolaroimattomiin aineisiin.

Kaavan (1) mukaiset yhdisteet ovat siten käyttökel-35 poisia aiheutettaessa lyhytkestoinen neuromuskulaarinen 6 85019 salpausvaikutus ihmisessä samoin kuin muissa nisäkkäissä, Jolloin nisäkkäälle annetaan laskimoruiskeena näitä yhdisteitä annos 0,01 - 0,50 mg/kg. On ymmärrettävä, että neu-romuskulaarisen salpausvaikutuksen profiili nisäkkäässä, 5 kuten esimerkiksi apinassa, on samankaltainen kuin ihmisessä ja kaavan (1) mukaiset yhdisteet katsotaan lyhytvaikutteisiksi aineiksi apinoilla.

Vaikkakin on mahdollista käyttää kaavan (1) mukaisia yhdisteitä aktiivisten kemikaalien pääosana, on edul-10 lista käyttää niitä farmaseuttisena valmistemuotona, varsinkin parenteraaliseen antoon tarkoitettuna farmaseuttisena valmistemuotona, joka sisältää kaavan (1) mukaista yhdistettä ja farmaseuttisesti hyväksyttävää kantajaa.

Edullisessa tapauksessa, jossa on kysymyksessä far-15 maseuttinen valmistemuoto parenteraaliseen käyttöön, valmistemuoto voi olla vesipitoinen tai vedetön liuos tai emulsio farmaseuttisesti hyväksyttävässä nesteessä tai nesteseoksessa, joka voi sisältää bakteriostaattisia aineita, antioksidantteja, puskureita, sakeuttimia tai muita 20 farmaseuttisesti hyväksyttäviä lisäaineita. Vaihtoehtoisesti yhdisteet voivat olla lyofilisoituina kiinteinä aineina, jotka saatetaan käyttömuotoon (ruiskeiksi) veden tai dekstroosi- tai suolaliuoksen kanssa. Tällaiset valmistemuodot ovat tavallisesti yksittäisannosmuotoina, ku-25 ten ampulleina tai kertakäyttöruiskelaitteina tai monian-nosmuotoina, kuten pullossa, josta voidaan ottaa sopiva annos; kaikkien tällaisten valmistemuotojen tulisi olla steriilejä.

Sopiva yksittäisannos neuromuskulaarisen salpaus-30 vaikutuksen aikaansaamiseksi aikuisessa ihmisessä (noin 70 kg), on 0,5 - 30 mg ja edullisimmmin 3,5 - 15 mg.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan haluttaessa käyttää yhdessä depolaroivien aineiden kanssa, joita on lueteltu edellä.

35 Siten sopiva farmaseuttinen parenteraalisesti käy- 7 85019 tettävä valmiste käytettäväksi ihmisille sisältää edullisesti 0,1-5 mg/ml kaavan (1) mukaisia yhdisteitä liuoksessa tai sen kerrannaisia moniannospulloissa.

Yksinkertainen ja edullinen valmistemuoto on kaavan 5 (1) mukaisen yhdisteen liuos vedessä tai dekstroosiliuok- sessa; tällainen liuos voidaan valmistaa yksinkertaisesti liuottamalla yhdiste pyrogeenittömään veteen tai dekstroo-sia sisältävään veteen, joka voi sisältää tai olla sisältämättä säilöntäainetta ja steriloimalla liuos tai liuot-10 tamalla steriili yhdiste pyrogeenittömään steriiliin ve teen tai steriiliin dekstroosiliuokseen aseptisissa olosuhteissa.

Kaavan (1) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös dekstroosiliuos- tai suolaliuosinfuusiona, esim. Ringerin 15 liuoksessa tiputuksena.

Yhdisteitä voidaan käyttää myös muissa liuottimissa (tavallisesti veden kanssa seosliuottimena), kuten alkoholissa, polyetyleeniglykolissa ja dimetyylisulfoksidissa. Niitä voidaan antaa myös lihakseen (haluttaessa tiputuk-20 sena) suspensiona tai liuoksena.

Kaavan (1) mukaisia yhdisteitä valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että liitetään yhteen yhdiste, jolla on kaava (2) CH* (2) x 30 CH30^r^OCH3 OCHj jossa X* on edellä määritelty ja Y on hydroksi, kloori, bromi, jodi tai tosyylioksi ja (E)-konfiguraatiossa oleva 35 yhdiste, jolla on kaava (3) 8 85019 Z0CCH2CH2CH=CHCH2CH2C0Z ( 3 ) jossa Z on hydroksi, kloori, bromi tai C1.4-alkyylikarbonyy-5 lioksi, jolloin ainakin toinen ryhmistä Y ja Z on aina hydroksi, ja haluttaessa erotetaan diastereomeerit saadusta seoksesta. Kaavassa (3) Z on edullisesti kloori.

Kaavojen (2) ja (3) mukaisten yhdisteiden liitty-misreaktio voidaan saattaa tapahtumaan tavanomaiseen ta-10 paan, esimerkiksi sekoittamalla yhdisteiden liuosta, jossa kaavan (2) mukaista yhdistettä on ylimäärin, liuottimessa, kuten 1,2-dikloorietaanissa, huoneen lämmössä tai korotetussa lämpötilassa.

Kaavojen (2) ja (3) mukaisten yhdisteiden liit-15 tymisreaktiossa muodostuneen kaavan (1) mukaisen yhdisteen geometrinen konfiguraatio vastaa kaavan (3) mukaisen yhdisteen geometristä konfiguraatiota. Siten keksinnön mukaisessa menetelmässä on käytettävä kaavan (3) mukaista yhdistettä, jolla on E-konfiguraatio.

20 Kaavojen (2) ja (3) mukaisten yhdisteiden välisen liittymisreaktion tuloksena saatu kaavan (1) mukainen yhdiste on tavallisesti optisten isomeerien seos, josta suurimman osan muodostavat RS-RS- ja RR-RS-optiset isomeerit yhdessä. Haluttaessa yksi tai useampia diastereo-25 meereistä voidaan erottaa seoksesta tavanomaisella tavalla esimerkiksi käyttäen kromatografisia menetelmiä.

Kaavan (2) mukainen yhdiste voidaan valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (4) 30 h3c-NY^^och3 (4)

X

OCHj 9 85019 reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava (5) X - (CH2)3 - OH (5) 5 jossa X vastaa edellä määriteltyä anionia X'; ja mahdollisesti muuttamalla muodostuneen, kaavan (2) mukaisen yhdisteen anioni X" toiseksi anioniksi.

Kaavojen (4) ja (5) mukaisten yhdisteiden välinen reaktio saatetaan tapahtumaan tavanomaisella tavalla, esi-10 merkiksi refluksoimalla liuottimessa, kuten 2-butanonissa emäksen, kuten natriumkarbonaatin läsnä ollessa.

Edullisesti X kaavan (5) mukaisessa yhdisteessä on jodi ja yhdiste muodostetaan in situ vastaavasta kaavan (5) mukaisesta yhdisteestä, jossa X on kloori, ja natrium-15 jodidista.

Siinä edullisessa tapauksessa, että X kaavan (5) mukaisessa yhdisteessä on jodi, kaavojen (4) ja (5) mukaisten yhdisteiden välisestä reaktiosta peräisin oleva anioni X' kaavan (2) mukaisessa yhdisteessä on jodidianio-20 ni. Tässä tapauksessa on edullista tämän jälkeen muuttaa muodostuneen, kaavan (2) mukaisen yhdisteen jodidianioni farmaseuttisesti hyväksyttäväksi anioniksi, kuten klori-dianioniksi tavanomaisilla menetelmillä.

Kaavojen (3), (4) ja (5) mukaiset yhdisteet ovat 25 kaupallisesti saatavia tai niitä voidaan valmistaa niiden valmistusta kuvaavalla julkaistulla menetelmällä tai menetelmällä, joka on julkaistu rakenteellisesti analogisten yhdisteiden valmistamiseksi.

Kaavan (2) mukaiset yhdisteet ovat ennestään tun-30 nettuja [ks. Chemical Abstracts voi. 98 (1983) 54257f ja FI-patenttihakemukset 782363 ja 790214].

FI-patenttihakemuksissa 790214 ja 782 363 sekä US-patentissa kuvataan yhdisteitä, jotka rakenteeltaan muistuttavat kaavan (1) mukaisia yhdisteitä. Näissä tunne-35 tuissa yhdisteissä on kuitenkin isokinoliniumryhmiä yhteen 10 8 501 9 liittävänä ryhmänä fenyleeni, kun taas kaavan (1) mukaisissa yhdisteissä yhteenliittävänä ryhmänä on alkenyleeni. Viimeksi mainitun ryhmän kaksoissidos estää siihen liittyneiden ryhmien vapaan kiertymisen; fenyleeniryhmän ympä-5 ri ryhmät sen sijaan voivat kiertyä vapaasti. Tällä seikalla on oleellinen vaikutus yhdisteiden farmakologisiin ominaisuuksiin. FI-patenttijulkaisussa 61845 ja EP-hake-musjulkaisussa 80682 on kuvattu yhdisteitä, joissa yhteenliittävänä ryhmänä on alkyleeniryhmä, näissäkin vapaa 10 kiertyminen on kaksoissidoksen puuttumisen vuoksi mahdollinen. EP-hakemusjulkaisussa 80682 kuvatut yhdisteet ovat keskipitkän ja pitkän vaikutusajan omaavia neuromuskulaa-risia saalpaavia aineita, ja vertailukokeissa, joiden tulokset on esitetty jäljempänä taulukossa III, on osoittau-15 tunut, että keksinnön mukaisesti valmistettu kaavan (1) mukainen yhdiste (esimerkissä 2c valmistettu yhdiste G) on tehokkaampi sekä lyhyemmän vaikutusajan ja merkittävästi paremman terapeuttisen indeksin omaava yhdiste kuin rakenteeltaan läheisin EP-hakemusjulkaisusta 80682 tunnettu 20 yhdiste. Kaavan (1) mukaisen yhdisteen vaikutusaika on vain 12-16 min. ja terapeuttinen indeksi 20; tunnetulla yhdisteellä vaikutusika on 38-50 min, terapeuttinen indeksi 6,7.

Keksintöä kuvataan seuraavassa sen erityisten so-25 vellutusmuotojen avulla.

Kaikki käytetyt liuottimet ja reagenssit olivat puhtaudeltaan reagenssilaatua ja niitä käytettiin ilman lisäpuhdistusta. Analyyttinen HPLC suoritettiin, mikäli toisin ei ole mainittu, (25 cm x 4,6 mm: n) Whatman 30 Partisil 10 w -kolonnissa käyttäen 20 μ1:η näytekoteloa. Liikkuvana faasina käytettiin seosta metanoli/etyyliase-taatti/ trifluorietikkahappo/rikkihappo suhteessa 61,1:38,5:0,3:0,1 virtausnopeudella 2 ml/min. Ilmaisu tapahtui 280 nm:ssä. Vaikkakin retentioajat vaihtelevat 35 lukuisista tekijöistä riippuen, eluoitumisjärjestys on: 11 8 501 9

Yhdiste RT

(E)-(1R,2R)-2-[3-[(7-karboksiheptanoyyliJoksi]-propyyli]-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyy-li)isokinoliniumkloridi 150 s 5 (E)-(1R,2S)-2-[3-[(7-karboksiheptanoyyli Joksi]- propyyli]-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyy-liJisokinoliniumkloridi 203 s cis-1,2,3,4-tetrahydro-2-(3-hydroksipropyyli)- 6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksi-10 bentsyyliJisokinoliniumkloridi 250 s trans-1,2,3,4-tetrahydro-2-(3-hydroksipropyy-li J-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetok-sibentsyyliJisokinoliniumkloridi 315 s 2,2'- [ (E)-4-okteenidioyylibis(oksitrimetylee-15 ni)]bist1R,2R-1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetok- si-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli Jiso-kinolinium]dikloridi 357 s (E)-(1R,1'R,2R,2'S)-2,2'-[4-okteenidioyylibis-(oksitrimetyleeni)]bis[l,2,3,4-tetrahydro-6,7-20 dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyy- liJisokinolinium]dikloridi 519 s 2,2'-[(E)-4-okteenidioyylibis(oksitrimetyleeni )]bis[(1R,2S(-l,2,3,4-tetrahydro-6,7-di-metoksi-2-metyyli-l-(3,4,5+trimetoksibentsyy-25 liJisokinolinium]dikloridi 751 s

Kaikki diesterit kuivattiin vakiopainoon 0,1 mmHg:n paineessa ja huoneen lämmössä. Kiertokyvyt on laskettu haihtumattomia aineita sisältämättömille tuotteille. Esimerkki 1 30 2,2' - [ (E) -4-okteenidioyylibis (oksitrimetyleeni) ] - bis[(trans)-l,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyliJisokinolinium]dikloridi a. Yhdiste A: trans-1,2,3,4-tetrahydro-2-(3-hydroksipropyyli ) - 6,7-dimetoksi-2-metyyli-l - (3,4,5-trimetoksi-35 bentsyyliJisokinoliniumkloridi (kvaternaarinen trans-klo- i2 8 501 9 ridi ) 5'-metoksilaudanosiinia (4,6 g), 3-klooripropanolia (2,2 g), natriumjodidia (3,5 g) ja natriumkarbonaattia (0,3 g) refluksoitiin 2-butanonissa (45 ml) 24 tuntia.

5 Valkoinen suspensio suodatettiin kuumana ja liuotin poistettiin alipaineessa. Muodostunutta kumimaista tuotetta trituroitiin dietyylieetterin kanssa 3-jodipropanoliyli-määrän poistamiseksi. Jäljellä oleva liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin amorfinen kiinteä aine, joka 10 tutkittiin HPLC:llä ja todettiin 6,3/1-suhteiseksi kvater-naariseksi trans/cis-jodidisuolaksi. Tämä aine liuotettiin veteen (45 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen ja suodatettiin saostuneen cis-isomeerin poistamiseksi. Muuttaminen klori-disuolaksi suoritettiin ajamalla trans-muodon suhteen ri-15 kastuneet liuokset kolonnin läpi, jonka täytteenä oli

Dowex®l-X8-ioninvaihtohartsi (35 g). Eluantti väkevöitiin alipaineessa. Öljymäisen jäännöksen asetonitriturointi antoi kloridisuolan valkeana kiinteänä aineena. Liettä-mällä kiinteitä aineita kuivassa N,N-dimetyyliformamidissa 20 (20 ml) 80 °C:ssa 10 minuuttia, poistettiin viimeiset rip peet cis-isomeeriä. Tuote lietettiin kuumaan asetoniin jäljellä olevan N,N-dimetyyliformamidin poistamiseksi ja suodatettiin, jolloin saatiin 4,8 g (84 %) kvaternaarista kloridia, joka todettiin HPLC-tutkimuksella 100-%:iseksi 25 trans-isomeeriksi; sp. 212-213 °C.

trans-konfiguraatio varmistettiin yhdisteen A per-kloraattisuolan röntgensädekidemuotoanalyysillä, esitetty julkaisussa J. Chem. Soc. Perkin Trans I, 2067 (1982). Yhdiste C25H36N06C1: 30 Laskettu:C 62,30 H 7,53 N 2,90 Cl 7,36

Saatu: C 62,35 H 7,52 N 2,91 Cl 7,32 b.Yhdiste B: cis-1,2,3,4-tetrahydro-2-(3-hydroksi-propyyli )-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-( 3,4,5-trimetoksibent-syyli)isokinoliniumjodidi (kvaternaarinen cis-jodidi) 35 5'-metoksilaudanosiinia (47 g) ja 3-jodipropanolia i3 8501 9 (45 g) refluksoitiin asetonitriilissä (500 ml) 18 tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa. Saatua kumimaista tuotetta trituroitiin dietyylieetterillä 3-jodipropanoliyli-määrän poistamiseksi. Jäljellä oleva liuotin poistettiin 5 alipaineessa, jolloin saatiin oranssi öljy, joka todettiin HPLC:llä 3/1-suhteiseksi kvaternaariseksi trans/cis-jodi-disuolaksi. Öljy liuotettiin asetoniin (200 ml) ja jäähdytettiin -5 °C:ssa 18 tuntia. Kiinteä aine suodatettiin ja kuivattiin kaksi tuntia 50 °C:ssa, jolloin saatiin 37,1 g 10 kvaternaarista jodidiseosta (trans/cis 3:1 HPLC:llä). Kiinteää ainetta trituroitiin vedellä (200 ml) ja suodatettiin, jolloin saatiin 10,5 g puhdistettua kvaternaarista cis-jodidia. Uudelleenkiteytys asetonitriilistä antoi 7,7 g (11 %) valkoista kiteistä kiinteää tuotetta; sula-15 mispiste 142-144 °C.

cis-konfiguraatio varmistettiin yhdisteen B rönt-gensädekiderakenneanalyysillä ja raportoitiin edellä mainitussa julkaisussa J. Chem. Soc.

Yhdiste C25H36N06I H20: 20 Laskettu: C 50,80 H 6,42 N 2,36

Saatu: C 50,74 H 6,51 N 2,34 c. Yhdiste C: [(E)-4-okteenidioyylibis(oksitrime-tyleeni) ]bis[ (trans)-l, 2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokinolinium]diklo-25 ridi trans-N-3-hydroksipropyyli-5' -metoksilaudanosinium-kloridia (100 % trans-muotoa HPLC:llä, 5,9 g) suspendoi-tiin 80 ml:aan 1,2-dikloorietaania n. 70 °C:ssa. Lisättiin (E)-4-okteeni-l,8-dihappokloridia (1,2 g) (K. Sisido, 30 K. Sei, H. Nozaki; J. Org. Chem., 27 (1962), s. 2681) ja seosta sekoitettiin huoneen lämmössä 72 tuntia. Reaktio-seos suodatettiin ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin amorfinen kiinteä aine, joka suspendoitiin natriumkloridin l-%:iseen vesiliuokseen. Suspension pH 35 säädettiin arvoon 8,0 l-%:isella natriumhydroksidilla ja i4 8 5 01 9 uutettiin kloroformilla (3 x 200 ml). Yhdistetyt klorofor-miuutteet haihdutettiin kuiviin. Jäännös suspendoitiin uudelleen natriumkloridin l-%:iseen vesiliuokseen ja neutralointi -uutto-menettely toistettiin, kuten edellä. Yhdis-5 tetyt kloroformierät kuivattiin vedettömällä kalsiumklo-ridilla ja suodatettiin. Suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 100 ml:aan etanolia ja haihdutettiin vaahdoksi, joka haihdutettiin edelleen vakiopainoon suur-tyhjiössä (0,5 mmHg). Valkean kiinteän aineen (2,8 g, 41 10 %) todettiin olevan 95-%risesti puhdasta HPLC:llä.

Yhdiste C58H80N2014C12 5,1 H20:

Laskettu: C 58,44 H 7,63 N 2,21 Cl 5,95 Saatu: C 58,17 H 7,34 N 2,35 Cl 6,07

Esimerkki 2 15 (E)-(1R, 1 'R)-2,2' -[4-okteenidioyylibis( oksitrime- tyleeni)]bis-[1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-1-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokinolinium]dikloridi (yhdiste G) a. Yhdiste E: (R)-(-)-5'-metoksilaudanosiini 20 (+)-5'-metoksilaudanosiiniin (46,4 g) metanolissa (240 ml) lisättiin ( - )-dibentsoyyliviinihapon monohydraat-tia (45,2 g). Seos kuumennettiin kiehuvaksi, jäähdytettiin 5 °C:ssa 16 tuntia ja (S)-(-)-5'-metoksilaudanosiniumdi-bentsoyylitartraattisuola (35,6 g, 80 %) suodatettiin ja 25 heitettiin pois. Emäliuos tehtiin emäksiseksi väkevällä NaOHrn vesiliuoksella ja haihdutettiin tyhjiössä. Kiinteä jäännös jakouutettiin vedellä (200 ml) ja dietyylieette-rillä (2 x 150 ml). Eetterifaasi kuivattiin ja haihdutettiin öljyksi (24,9 g). Metanolissa (128 ml) olevaan öljyyn 30 lisättiin (+)-dibentsoyyliviinihapon monohydraattia (26,6 g). Seos kuumennettiin kiehuvaksi ja jäähdytettiin 5 °C:ssa 16 tuntia. Kiteet otettiin talteen ja uudelleen-kiteytettiin metanolissa, kunnes saatiin vakio ominais-kiertokyky [a]20„ = +17,7 0 (1 % EtOH). (R)-( + )-5'-metoksi-35 laudanosiniumdibentsoyylitartraatin saanto valkoisina is 8 501 9 kiteinä oli 29,4 g (66 %). Erä (15,0 g) tätä suolaa meta-nolissa (200 ml) tehtiin emäksiseksi väkevällä NaOH:n vesiliuoksella. Seos haihdutettiin tyhjiössä ja jäännös ja-kouutettiin veteen (200 ml) ja dietyylieetteriin (2 x 200 5 ml). Yhdistetyt eetterikerrokset kuivattiin ja haihdutettiin tyhjiössä, jolloin saatiin 7,2 g (92 %) (R)-(-)5'-metoksilaudanosiinia öljynä.

b. Yhdiste F; (R)-(-)-5'-metoksilaudanosiinia (7,2 g), 3-klooripropanolia (3,5 g), natriumjodidia (5,6 g) ja 10 natriumkarbonaattia (0,5 g) refluksoitiin 2-butanonissa (125 ml) 16 tuntia. Valkea suspensio suodatettiin kuumana ja liuotin poistettiin suodoksesta tyhjiössä. Kumimaista jäännöstä trituroitiin kuumalla etyyliasetaatilla 3-jodi-propanoliylimäärän poistamiseksi, liuotettiin 200 ml:aan 15 metanolia ja ajettiin kolonnin läpi, jossa oli täytteenä Dowex Θ l-X8-ioninvaihtohartsi (60 g, kloridimuodossa). Eluantista poistettiin liuotin tyhjiössä, jolloin saatiin kvaternaarinen kloridisuola (8,4 g) amorfisena kiinteänä aineena. Tämä tuote todettiin HPLC:llä 2,3/1-suhteiseksi 20 trans/cis-diastereomeeriseokseksi.

c. Yhdiste G: N-3-hydroksipropyyli-l-(R)-5'-metok-silaudanosiniumkloridi (2,3/1, trans/cis HPLC:llä, 2,5 g) liuotettiin 60 ml:aan 1,2-dikloorietaania noin 70 °C:ssa. (E)-4-okteeni-l,8-dihappokloridia (0,5 g) (K. Sisido, K.

25 Sei ja H. Nozaki, J. Org. Chem. 27 (1962), s. 2681) lisättiin ja seosta sekoitettiin huoneen lämmössä 19 tuntia. Liuotin poistettiin tyhjiössä, jolloin saatiin amorfinen kiinteä aine, joka liuotettiin kloroformiin (25 ml) ja pestiin 5-%:isella natriumkloridin vesiliuoksella (3 x 35 30 ml) reagoimattomien kvaternaaristen suolojen poistamiseksi. Kloroformikerros kuivattiin ja haihdutettiin tyhjiössä, jolloin saatiin amorfinen kiinteä aine. Happoeste-riepäpuhtaudet poistettiin käytännöllisesti katsoen kaikki pesemällä kuumalla 2-butanonilla. Jäljellä oleva liuotin 35 haihdutettiin tyhjiössä ja saatu amorfinen kiinteä aine ie 8501 9 liuotettiin metanoliin, suodatettiin ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin 1,9 g (E)-(1R,1'R)-2,2'-[4-okteenidioyyli-bis(oksitrimetyleeni)]bis[1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetok-si-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokinolinium]-5 dikloridia, yhdiste G, jonka todettiin HPLC:llä sisältävän 44,6 % RS-RS-trans-trans)-diesteriä, 42,4 % RR-RS-(cis-trans)-diesteriä, 7,5 % RR-RR-(cis-cis)-diesteriä, 4,0 % RS-(trans-)-happoesteriä ja 1,5 % RR-(cis)-happoesteriä. [a]20D = -62,7 ° (1,9 % H20:ssa).

10 Yhdiste C58H80N20144.2C1.4H20:

Laskettu: C 59,44 H 7,57 N 2,39 Cl 6,05 Saatu: C 59,36 H 7,60 N 2,36 Cl 5,99

Esimerkki 3

Yhdisteen G yksittäisten komponenttien kromatogra-15 finen erottaminen a. Tässä erotuksessa käytettiin Waters HPLC/System 500 A:ta (Waters Associates, Milford, MA 01757), joka oli varustettu kahdella peräkkäisellä silikägeelikolonnilla. Kolonnit tasapainotettiin ensin liikkuvalla faasilla (eta- 20 noli/metanoli/tetrametyyliammoniumkloridi, 600:400:1) ja diesteriseos (yhdiste G, 5 g) etanolissa (25 ml) syötettiin kolonniin. Systeemi eluoitiin 13,2 1:11a liikkuvaa faasia, joka kerättiin 66 fraktiona (200 ml). Fraktiot analysoitiin analyyttisellä HPLC:llä ja yhdistettiin seu-25 raavasti: b. Yhdiste H: (E)-(lR,l'R,2R,2'R)-2,2,-[4-okteeni-dioyylibis(oksitrimetyleeni ) ]bis[ 1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokino-linium]dikloridi 30 Fraktiot 26-30 yhdistettiin ja haihdutettiin ali paineessa. Saatua jäännöstä trituroitiin kloroformilla (200 ml) ja suodatettiin. Suodos pestiin 5-%:isella nat-riumkloridin vesiliuoksella ja väkevöitiin alipaineessa öljyksi, öljy liuotettiin etanoliin (50 ml) ja haihdutet-35 tiin vaahdoksi (0,4 g): [a]20D = -33,6 ° (1,5 % H20:ssa) 17 8 5 01 9 "H NMR (CDC13) TMS: stä: σ 6,64 (s, H5, 2H), 6,27 (s, H2' ja 6',4H), 5,75 (s, H8, 1H).

Yhdisteelle C58H80N2014C12, 3,7 H20, 0,9 C2H5OH, 0,3 (CH3 )4N*C1': 5 Laskettu: C 59,02 H 7,88 N 2,62 Cl 6,61

Saatu: C 59,03 H 7,83 N 2,60 Cl 6,57

Yhdistettä H (10 mg) l-%:isessa fosforihapon vesi-liuoksessa (10 ml) kuumennettiin 18 tuntia 60-70 °C:ssa ja analysoitiin HPLC:llä. Kvaternaarinen cis-suola havaittiin 10 ilman kvaternaarista trans-suolaa. Tämä varmistettiin rin- nakkaissyöttöinä yhdisteen A ja yhdisteen B kanssa.

c. Yhdiste I: (E)-(lR,l,R,2R,2'S)-2,2,-[4-okteeni-dioyylibis(oksitrimetyleeni )]bis[l, 2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokino- 15 linium]dikloridi

Fraktiot 34-46 yhdistettiin ja tuote eristettiin yhdisteen H eristämiselle analogisella tavalla. Tällöin saatiin 2,0 g valkoista vaahtoa: [a]20D = -54,0 0 (1,5 % H20: ssa); 1H NMR (CDC13) TMS:stä: σ 6,64 (s, H5, 2H), 20 6,42 ja 6,25 (2s, H2' ja 6',4H), 5,75 (s, H8, 2H).

Yhdisteelle C58H80014C12, 1,5 H20, 1,3 C2H5OH:

Laskettu: C 61,28 H 7,76 N 2,36 Cl 6,01 Saatu: C 61,32 H 7,71 N 2,36 Cl 5,97

Yhdistettä I (10 mg) l-%:isessa fosforihapon vesi-25 liuoksessa (10 ml) kuumennettiin 60-70 °C:ssa 18 tuntia ja analysoitiin HPLC:llä. Todettiin yhtä suuret määrät kva-ternaarisia cis- ja trans-suoloja. Tämä varmistettiin rin-nakkaissyötöillä yhdisteen A ja yhdisteen B kanssa.

d. Yhdiste J: (E )-(1R,1'R,2S,2'S)-2,2'-[4-okteeni- 30 dioyylibis(oksitrimetyleeni ) ]bis[l, 2,3,4-tetrahydro-6,7- dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokino-linium]dikloridi

Fraktiot 56-66 yhdistettiin ja tuote eristettiin analogisesti yhdisteen H kanssa. Tästä eristettiin 0,9 g 35 luonnonvalkoista vaahtoa: [a]20D = -76,7 0 (1,5 % H20:ssa); !8 8 5 01 9 *H NMR (CDC13) TMS:stä: σ 6,64 (s, H5, 2H), 6,42 (s, H2· ja 6’,4H), 5,76 (s, H8, 2H).

Yhdisteelle C58H8002014C12, 3,3 H20, 1,7 C2H5OH, 0,4 (CH3 )4NC1: 5 Laskettu: C 59,02 H 7,99 N 2,63 Cl 6,63

Saatu: C 59,02 H 7,99 N 2,62 Cl 6,64

Yhdistettä J (10 mg) l-%:isessa fosforihapon vesi-liuoksessa kuumennettiin 60-70 °C:ssa 18 tuntia ja analysoitiin HPLC:llä. Kvaternaariset trans-suolat todettiin 10 kvaternaaristen cis-suolojen puuttuessa. Tä.mä varmistettiin rinnakkaissyötöillä yhdisteen A ja yhdisteen B kanssa.

Esimerkki 4

Biologinen aktiivisuus 15 Tässä käytetyt kokeet on kuvattu julkaisussa J.J.

Savarese, Anesthesia and Analgesia, voi. 52. nro 6, marras-joulukuu 1973. Kissat nukutettiin alfa-kloraloosilla (80 mg/kg) ja pentobarbitaalilla (10 mg/kg) i.p. Apinoille annettiin tiopentaalia (35-40 mg/kg) i.m. ja sen jälkeen 20 halotaania (0,5 - 19 % hengitettynä), typpioksidia (60 %) ja happea (40 %) järjestelmässä, jossa takaisinhengitys ei ollut mahdollinen. Kaikilla eläimillä intuboitiin henki-torvi ja ventilaatio säädettiin arvoon 12-15 ral/kg, 18-24 hengitystä minuutissa. Eläimet, jotka eivät saaneet si-25 säänhengityksen mukana anesteetteja, ventiloitiin huoneilmalla. Vasen reisilaskimo ja -valtimo katetroitiin lää-keantoa varten ja vastaavasti valtimopaineen mittaamista varten. Pohjehermoon annettiin neliöaaltoärsykkeitä supra-maksimijännitteellä taajuudella 0,15 Hz ja niiden aiheut-30 tamat säären etulihaksen (tibialis anterior -lihas) kouristukset mitattiin. Lihasten ja eläinten lämpötila pidettiin alueella 35-38 eC. Kaikki tulostukset tehtiin Grass Polygraf recorder -laitteella. Näiden kokeiden tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa 1 ja taulukossa II sekä 35 taulukossa III, jossa esitetyt tulokset on saatu vertailu- 19 8501 9 kokeissa, joissa käytettiin keksinnön mukaisesti valmistettua yhdistettä G (valmistettu esimerkissä 3c) ja EP-hakemusjulkaisusta 80 682 tunnettua yhdistettä, (trans-trans )-2,2 ' - [heksametyleenibis(karbonyylioksitrimetylee-5 ni]bis(1,2,3,4-tetrahydro-6,7,8-trimetoksi-2-metyyli-l-(3,4, 5-trimetoksibentsyyli )isokinoliniumkloriditosylaat-tia.

Taulukko I

Yhdisteen G (diastereomeerien seos) ja yhdisteen I 10 (yhdisteen G RS-RS-diastereomeeri) suora vertailu kissoissa ja rhesusapinoissa yhdiste _Kissa3_ Rhesusapina3_ 15 Annosc Sai- .Kesto13 Annos Sai- Kestob (mg/kg i.v.) Paus % (min) (mg/kg/ i.v.) paus % (min) G (Esimerkki 3c) 0,04 56+12 10+2 0,02 27 6 0,05 78+10 13+1 0,0« 99 12 I (Esimerkki 4d) 0,0« 79+« 12+2 0,02 83 11 20 0,05 96+3 12+3 0,03 100 13 “n = 3 kissoille ja n = 1 apinoille b Aika laskimoruiskeen antamisesta 95-%:iseen palautumiseen 25 c Laskimonsisäisesti annettu annos, joka aiheutti 95-%:isen neuromuskulaarisen lamaantumisen säären etulihaksen kouristukseen, ekstrapoloitiin annos-vaste-käyristä. Neuro-muskulaarisesti salpaava ED50-annos määritetään siksi, että se vastaa lihasrelaksaatioastetta, joka on tarpeen nopean 30 ja helpon intuboinnin turvalliseksi suorittamiseksi, kun neuromuskulaarisesti salpaavia aineita käytetään — terapeuttisesti.

20 8 5 01 9

Taulukko II

ED95-arvot kissoilla (laskimonsisäisesti) 5 Yhdiste Eläinten lukum. ED95 tng/kg^3 C 15 0,093 * 0,005 G 12 0,057 + 0,005 H 5 >0,40 10 I 12 0,054 + 0,004 J 15 0,054 + 0,005 15 b Aika laskimoruiskeen antamisesta 95-%:iseen palautumiseen Taulukosta I nähdään, että yhdisteellä G ja yhdisteellä I on kissassa ja rhesusapinassa sama neuromuskulaa-rinen salpausvaikutusprofiili, paitsi että yhdiste I on 20 kummassakin lajissa ainakin 20-25 0 tehokkaampi kuin yhdiste G.

Taulukossa II on lueteltu edellä esimerkein valaistujen, kaavan (1) mukaisten yhdisteiden annokset, jotka tarvitaan 95-%risen neuromuskulaarisen salpautumisen ai-• - 25 kaansaamiseksi (ED95) koeryhmien eläimissä.

2i 8501 9

Taulukko III

Yhdisteen G (valmistettu esimerkissä 2c) ja EP-ha-kemusjulkaisusta 80682 tunnetun yhdisteen neuromuskulaari-nen salpausaktiivisuus 5 _

Yhdiste Kina _Rhasussplna EDgjj Kesto ed95 Kesto Terap.

(mg/kg)a (mln)b (mg/kg)a (mln)b Indeksi 0 0.04-0.06 12-16 0.03-0.04 9-13 20 ® Tunnettu Julk.

EP-A-80682 0.06-0,08 38-50 0.06 17 6.7 “Laskimonsisäisesti annettu annos, joka aiheutti 95-%:isen 15 neuromuskulaarisen lamaantumisen säären etulihaksen kou ristukseen, ekstrapoloituna annos-vaste-käyristä. bAika laskimoruiskeen antamisesta 95-%:iseen palautumiseen cTerapeuttinen suhde on haitallisia kardiovaskulaarisia vaikutuksia aiheuttava annos (yhdisteelle G 0,8 mg/kg, 20 tunnetulle yhdisteelle 0,4 mg/kg) jaettuna ED95-annoksella.

Mitä suurempi tämä suhde on, sitä suurempi on turvallinen annostustaso.

22 8501 9

Esimerkki 5 Myrky11isyys

Kolmea neljän beagle-koiran muodostamaa ryhmää käsiteltiin kahdesti viikossa kolmen viikon ajan käyttäen 5 kantoainetta, yhdistettä G annoksena 5 x ED100 ja yhdistettä G annoksena 15 x ED100. Jokainen käsittelyjakso sisälsi aluksi ruiskeen, jota seurasi infuusio kahden tunnin ajan. Kaikki koirat olivat käsittelyjaksojen aikana nukutettuja pentobarbitaalilla ja ne ventiloitiin keinotekoisesti. 10 Kaikki koirat jäivät eloon eikä mitään vahingollisia vaikutuksia havaittu.

Valmistemuoto Ruiske, 5 ml:aa kohti:

Yhdistettä G 11,0 mg 15 HC1, määrä, jolla saadaan pH:ksi 4,8

Vettä (ruiskeisiin) määrään 5 ml

Aktiivinen aineosa, so. yhdiste G, liuotetaan 4,8 ml:aan vettä (ruiskeita varten), lisätään HCl:n vesi-liuosta oikean pH:n saamiseksi ja lisätään vettä, kunnes 20 kokonaistilavuus on 5 ml. Saatu liuos suodatetaan 2,2 mikrometrin kalvon läpi ja suljetaan lääkepulloihin tai ampulleihin steriilisti. Edullisesti valmistemuotoa säilytetään käyttöön saakka jääkaapissa (5-10 °C). Mahdollisesti voidaan lisätä säilöntäainetta käyttöiän pidentämisek-25 si.

Claims (5)

23 8501 9

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen kaavan (1) mukaisen (E)-(1R,1'R,2S,2'S)-, (E)-(1R,1'R,2R,2'S)- 5 tai (E)-(1R,1'R,2R,2'R)-4-okteenidioyylibis(oksitrimety-leeni)bis(1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)isokinoliniumyhdisteen valmistamiseksi

10 I! Il CH3° f iCH2,3°CCH2CH2CH*CHCH2CH2CO(CH2)^ y^^N)CH3 A ·- A CH3°'TVOCH3 CHj0'JVAOCH 15 0CH3 0CH3 O) jossa X' on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni, tunnettu siitä, että liitetään yhteen yhdiste, jolla on 20 kaava (2) f2 (2) •25 x" jOl CH3O^Y^OCH3 och3 jossa X" on edellä määritelty ja Y on hydroksi, kloori, 30 bromi, jodi tai tosyylioksi ja (E)-konfiguraatiossa oleva yhdiste, jolla on kaava (3) ZOCCH2CH2CH = CHCH2CH2COZ (3) 35 jossa Z on hydroksi, kloori, bromi tai C1.4-alkyylikarbonyy-lioksi, jolloin ainakin toinen ryhmistä Y ja Z on aina 24 8 5 0 1 9 nyylioksi, jolloin ainakin toinen ryhmistä Y ja Z on aina hydroksi, ja haluttaessa erotetaan diastereomeerit saadusta seoksesta.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että kaavan (1) mukainen yhdiste on (1R,1'R,2S,2'S) tai (1R,1'R,2R,2'S)-diastereoisomeeri.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan (1) mukainen yhdiste on (1R,1'R,2S,2'S)-diastereoisomeeri.

4. Minkä tahansa edellä olevan patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että X on kloridi.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (E)-(1R,1'R)-15 2,2'-[4-okteenidioyylibis(oksitrimetyleeni )]bis[l, 2,3,4- tetrahydro-6,7-dimetoksi-2-metyyli-l-(3,4,5-trimetoksi-bentsyyli)isokinolinium]dikloridi. 25 8 5 0 1 9