FI78106C - Foerfarande foer framstaellning av nya antimikrobiella pristinamycin iib-derivat. - Google Patents

Description

1 78106

Menetelmä uusien mikrobinvastaisten pristinamysiini Ilg-johdannaisten valmistamiseksi

Keksinnön kohteena on menetelmä uusien pristina-5 mysiini II -johdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaa-

O

va I

0 Ä O»

10 CH3V } L

" y' O CH, c"yt0Ay_.»X^ 1 CH3 '-0

15 R

isomeereinä ja niiden seoksina, jossa kaavassa R on alkyylitioradikaali, joka on substi-tuoitu yhdellä tai kahdella dialkyyliaminoryhmällä tai 20 yhdellä 1-pyrrolidinyyli-, 2-piperidino- tai 4-metyyli-

1-piperatsinyyliryhmällä, tai R on radikaali, jolla on kaava II

Het-S- II

25 jossa Het on l-metyyli-4-piperidinyyliryhmä, tai R on dialkyyliamino- tai 4-metyyli-l-piperatsinyyli-ryhmä, jolloin alkyyliradikaalit ja -osat sisältävät 1-5 hiiliatomia ja ovat suoraketjuisia tai haarautunei-30 ta, sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happo-additiosuolojen valmistamiseksi.

2 78106

On selvää, että yhdisteet, joilla on kaava I, voivat esiintyä isomeerien muodossa ja että nämä isomeerit sekä niiden seokset kuuluvat tämän keksinnön piiriin.

5 Tämän keksinnön mukaisesti kaavan I mukaiset

yhdisteet voidaan valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava III

R-H III

10 jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava IV,

O

15 Cf,3v J' I

0 CH

I, o L_T

20 eli pristinamysiini II^:n kanssa.

Tavallisesti reaktio tapahtuu ilman liuotinta tai orgaanisessa liuottimessa, kuten alkoholissa, esimerkiksi metanolissa tai etanolissa, tai klooratussa liuot- 25 timessa, kuten metyleenikloridissa, 1,2-dikloorietaanis-sa tai kloroformissa, tai näiden liuottimien seoksessa (esim. metyleenikloridin ja metanolin seoksessa) lämpötilassa 0 - 50°C.

Joskus saattaa olla edullista suorittaa reaktio 30 tertiäärisen amiinin, kuten trietyyliamiinin läsnäollessa tai etanoliamiinin (esim. dimetyylietanoliamiinin) läsnäollessa.

Alan ammattimiehelle on selvää, että koska R tarkoittaa radikaalia, joka käsittää sekundäärisen amii- 35 nifunktion, joka voi häiritä reaktiota, on tämä jälkimmäinen funktio suojattava edeltä käsin ennen kuin kaavan III mukaisen tuotteen annetaan reagoida kaavan IV mukaisen tuotteen kanssa. Tähän tarkoitukseen voidaan käyttää 3 78106 kaikkia niitä tavallisia keinoja, joilla voidaan estää sekundäärisen amiinifunktion toimiminen, joka keino on labiilin muodossa, joka radikaali voidaan poistaa kaavan III mukaisen tuotteen reagoitua kaavan IV mukaisen 5 tuotteen kanssa. Toimimisen estävänä radikaalina on eri tyisen edullista käyttää trifluoroasetyyliradikaalia. Tämän jälkeen se voidaan poistaa alkaalisen bikarbonaa-tin, kuten natrium- tai kaliumkarbonaatin vesiliuoksen avulla.

10 Kaavan I mukaiset uudet tuotteet voidaan puhdis taa tavanomaisilla tunnetuilla menetelmillä, kuten esimerkiksi kiteyttämällä, kromatografisesti tai jatkuvilla mitoilla happamissa ja emäksisissä olosuhteissa. Alan ammattimies, joka tuntee synergistiinien herkkyyden al-15 kaalisessa väliainessa, ymmärtää "emäksisillä olosuhteilla" olosuhteita, jotka ovat juuri riittävän alkaaliset vapauttaakseen emäaineen hapon kanssa muodostuneesta suolastaan; eli olosuhteita, joiden pH eli ylitä arvoa 7,5 - 8.

20 On hyvin tunnettua, että käymisteitse saadut synergistiinit ovat tuotteita, joita lääkärit käyttävät erittäin paljon gram-postiivisten bakteerien (Staphylococcus- ja Streptococcus-lajit, pneumokokit ja enteroko-kit) ja gram-negatiivisten bakteerien (Haemophilus-, 25 gonokokki- ja meningokokki-lajit) aiheuttamien sairauksien hoitoon. Kuitenkin näiden tuotteiden haittana on se, että ne ovat liukenemattomia vettä sisältävissä olosuhteissa, joten niitä ei voida antaa kuin suun kautta; yleensä kapseleiden, pillereiden tai tablettien muodossa. 30 Ottaen huomioon tämä liukenemattomuus, on tähän mennessä tunnettuja synergistiinejä mahdotonta antaa potilaalle, joka on siinä kunnossa, ettei hän kykene nielemään. Näin on asianlaita erityisesti lastentaudeissa ja elvytysta-pauksissa; tällöin näiden tuotteiden toiminnan spektri 35 saisi aikaan arvokkaan vaikutuksen lukuisissa olosuhteissa, kuten esimerkiksi tajuttomuuden aiheuttaneessa veren-myrkytystapauksessa.

4 781 06

Keksinnön mukaisten uusien tuotteiden huomattava etu on se, että niitä voidaan liuottaa veteen (yleensä suoloinaan) lääkinnällisesti hyödyllisinä annoksina, ja se, että ne saavat aikaan synergiailmiön avulla pristina-5 mysiini IA:n , virginiamysiini S:n tai jäljempänä esitetyn kaavan V mukaisten liukoisten synergistiinien johdannaisten bakteereja tappavan vaikutuksen.

Edellä mainittu synergistiinien johdannaisten yleinen kaava on 10 CHa /=\ o «—ff i XSXÄS ' Jf. 0 · jossa Y tarkoittaa vetyatomia tai dimetyyliaminoradikaa-20 lia ja 1) tai --- tarkoittaa yksinkertaista sidosta, Z ja tarkoittavat vetyatomia ja X tarkoittaa radikaalia, jonka kaava on /R2

25 -N. VI

r3 jossa - joko R2 tarkoittaa vetyatomia ja tarkoittaa hydrok-si- tai alkyyliradikaalia, joka on mahdollisesti substi-30 tuoitu karboksi-, alkyylioksikarbonyyli-, hydroksi-, alkyyliamino- tai dialkyyliaminoradikaalilla, jonka alkyy-liradikaalit voivat muodostaa sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet 4 - 7-atomisen heterosyklin, joka kuuluu atsetidinyylin, pyrrolidinyylin, piperidinyy-35 Iin, piperatsinyylin, N-alkyylipiperatsinyylin tai atse- pinyylin joukkoon, tai R^ tarkoittaa 3-7 hiiliatomia käsittävää sykloalkyyliradikaalia tai 4 - 7-atomista tyydyttynyttä heterosykliä, joka kuuluu atsetidiini-, pyrroli- 5 78106 diini-, piperidiini- jaatsepiinisyklien joukkoon, jolloin nämä heterosyklit voivat mahdollisesti olla substi-tuoituja typpiatomistaan alkyyliradikaalilla, - tai R2 tarkoittaa formyyli- tai alkyylikarbonyyliradi- 5 kaalia ja R^ tarkoittaa alkyyliradikaalia, joka on subs- tituoitu karboksialkyyliamino- tai dialkyyliaminoradikaa-lilla, jonka alkyyliradikaalit voivat muodostaa sen typ-piatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet 4 - 7-atomi-sen heterosyklin, joka kuuluu atsetidinyylin, pyrrolidi-10 nyylin, piperidinyylin, piperatsinyylin, N-alkyylipiper- atsinyylin tai atsepinyylin joukkoon, tai R^ tarkoittaa 4 - 7-atomista heterosykliä, joka kuuluu atsetidiini-, pyrrolidiini-, piperidiiniä ja atsepiinisyklien joukkoon, jolloin nämä heterosyklit voivat olla substituoituja typ-15 piatomistaan alkyyliradikaalilla, - tai R2 ja Rjotka ovat identtiset tai erilaiset, tar koittavat alkyyliradikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu karboksi-, alkyylioksikarbonyyli-, hydroksi-, alkyyliamino- tai dialkyyliaminoradikaalilla, jonka 20 alkyyliradikaalit muodostavat mahdollisesti sen typpiato- min kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet 4 - 7-atomisen heterosyklin, joka kuuluu atsetidinyylin, pyrrolidinyy-lin, piperidinyylin, piperatsinyylin, N-alkyylipiperat-sinyylin tai atsepinyylin joukkoon, 25 - tai R2 ja R^ muodostavat sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet 4 - 7-atomisen heterosyklin, joka kuuluu atsetidiini-, pyrrolidiini-, piperidiini-, mortoliini- ja piperatsiinisyklien joukkoon, joka viimeksi mainittu sykli on mahdollisesti substituoitu alkyyliradi- 30 kaalilla, 2) tai --- tarkoittaa kaksoissidosta, X tarkoittaa hap piatomia ja Z tarkoittaa radikaalia, jolla on kaava ra / 4

-CH VII

35 \Rg joka on määritelty seuraavalla tavalla: 6 78106 a) joko R^ ja R2 kumpikin tarkoittaa vetyatomia ja R^ tarkoittaa 3-pyrrolidinyylitio- tai 3- tai 4-piperidyy-litio-radikaalia (radikaalit on mahdollisesti susbtitu-oitu alkyyliradikaalilla), tai R^ tarkoittaa alkyylitio- 5 radikaalia, joka on substituoitu yhdellä tai kahdella hydroksisulfonyyli-, alkyyliamino- tai dialkyyliaminora-dikaalilla (joka on mahdollisesti substituoitu merkapto-tai dialkyyliaminoradikaalilla) tai yhdellä tai kahdella syklillä, joka kuuluu tai jotka kuuluvat piperatsinon 10 (mahdollisesti substituoitu alkyyli- tai merkaptoalkyyli-radikaalilla), morfolinon, tiomorfolinon, piperidinon, 1-pyrrolidinyylin, 2-, 3- tai 4-piperidyylin ja 2- tai 3-pyrrolidinyylin joukkoon (kaksi jälkimmäistä sykliä on mahdollisesti substituoitu typpiatomistaan alkyyliradikaa-15 lilla), b) tai R^ ja R^ muodostavat yhdessä valenssisidoksen ja R4 tarkoittaa 3-pyrrolidinyyliamino-, 3- tai 4-piperidyy-liamino-, 3-pyrrolidinyylioksi-, 3- tai 4-piperidyyliok-si-, 3-pyrrolidinyylitio-, 3- tai 4-piperidyyliradikaalia 20 (radikaalien ollessa mahdollisesti substituoituja syklin typpiatomista alkyyliradikaalilla), tai R^ tarkoittaa alkyyliamino-, alkyylioksi- tai alkyylitioradikaalia, jotka on substituoitu yhdellä tai kahdella hydroksisulfo-nyyli-, alkyyliamino- tai dialkyyliaminoradikaalilla tai 25 -radikaaleilla (viimeksi mainitun ollessa mahdollisesti substituoitu dialkyyliaminoradikaalilla), trialkyyliammo-nio- tai 4- tai 5-imidatsolyyliradikaalilla tai -radikaaleilla, tai yhdellä tai kahdella syklillä, jotka kuuluvat piperatsinon (joka on mahdollisesti substituoitu alkyyli-30 tai merkaptoalkyyliradikaalilla), morfolinon, tiomorfoli non, piperidinon, 1-pyrrolidinyylin, 2-, 3- tai 4-piperidyylin ja 2- tai 3-pyrrolidinyylin joukkoon (kahden viimeksi mainitun syklin ollessa mahdollisesti substituoituja typpiatomistaan alkyyliradikaalilla); jolloin on selvää, 35 että alkyyliradikaalit ja alkyyliosat, jotka viittaavat kaavan V symboleihin, käsittävät 1-5 hiiliatomia ja ovat suorassa tai haaroittuneessa ketjussa.

7 78106

Jotkut kaavan V mukaiset synergistiinien johdannaiset voivat esiintyä isomeerien muodossa. Selvää on, että nämä isomeerimuodot, kuten myöskin niiden seokset, voidaan edullisesti yhdistää kaavan I mukaisiin tuottei-5 siin.

Laboratoriossa kaavan I mukaiset tuotteet saavat kaavan V mukaisten tuotteiden kanssa mikrobeja tappavan synergistisen vaikutuksen aikaan hiirillä ihon alle annettuna, annosten ollessa välillä 5 - 200 mg/kg, erityi-10 sesti Staphylococcus aureus Smith'in aiheuttamassa veren myrkytyksessä, kun niitä sekoitetaan kaavan V mukaisiin tuotteisiin suhteissa, jotka vaihtelevat 10 - 90 %:n ja 90 - 10 %:n välillä.

Kaavan I mukaisten tuotteiden voimakas toksisuus, 15 joka ilmoitetaan LD^Q-arvona, syntyy hiirillä tavallises ti annoksella 300 - 900 mg/kg ihon alle annetuna.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden aktiviteetti yhdistelmänä pristinamysiini I^;n kanssa.

Bakteriostaattinen aktiviteetti in vitro 20 Kahteen sarjaan levyjä, joilla oli tunnettu tila- 3 vuus (20 cm ) sopivaa viljelyväliainetta (Muller-Hilton — agar) lisättiin 1/10 tästä tilavuudesta tutkittavaa tuo tetta geometrisesti kasvavana sarjana laimennettuna (suh- 4 de = 2). Levylle ympättiin tästä 10 pesäkkeitä muodosta-25 via yksiköitä mikro-organismia tryptiini-soijaviljely- väliaineessa, jota mikro-organismia oli inkuboitu 18 tuntia 37°C:ssa ja laimennettu 1/100 samalla väliainella. Ymppäyksen jälkeen levyjä inkuboitiin 24 tuntia 37°C:ssa. Minimiestokonsentraatio (CIM) on alhaisin konsentraatio, 30 jossa mikro-organismin kehittyminen estyy.

Aktiviteetti intraperitoneaalisia infektioita vastaan hiirellä

Hiirille annettiin intraperitoneaalisena ruis- 3 keena 0,5 cm mikro-organismin sopivasti ravistettua 18 35 tunnin ikäistä viljelmää väliaineessa "Brain Heart Infusion" (Difco), joka oli sopivasti laimennettu 5-%:isella karjun musiinilla. Istutus aiheutti kontrollieläimen kuo- 78106 leman 24 - 48 tunnissa. Tutkittavaa yhdistettä annettiin kahdesti 5 tunnin välein istutuspäivänä, jolloin ensimmäinen annos annettiin tunnin kuluttuamikro-organismilla istuttamisen jälkeen. Käytettiin yksikköannoksia tilavuu- 3 5 dessa 50 cm /kg.

50-%:isesti parantava annos (CD5Q) tutkittavaa yhdistettä on annos, jolla puolet eläimistä säilyi hengissä 8 päivää. Tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa .

10 ____

Aktiviteetti Aktiviteetti in vitro in vivo

Yhdistelmä Staphylococ- Staphylococ- Esim. Liukoi suus esim. n:o cus aureus cus aureus n:o . , 3 hydro- 15 PIIB/PI CMI pg/cm DC5Q mg/kg klori- ___s ♦ c.___dina, % 1 4 20 1 2 2 4 20 2 2 3 8 22 3 3,3 20 4 8 27 4 5 5 8 50 5 2 6 4 7 6 5 7 4 22 7 5 8 8 70 8 2 25 9 ja 10 4 15 9 3,3 li 8 26 11 2 12_ 4 _ 12 piä 0,!

Yhdistelmä 30 PIA/PIIA 0,12 noin 15 9 78106

Sellaiset kaavan I mukaiset yhdisteet ovat erityisen mielenkiintoisia niiden pristinamysiini IA:n suhteen hyvästä synergisestä ominaisuudesta johtuen, joissa R on haarautunut alkyylitioradikaali, joka sisältää 1-3 5 hiiliatomia, ja joka on substituoitu dialkyyliaminoradi- kaalilla, tai tarkoittaa 4-metyyli-l-piperatsinyyliryh-mää, jolloin alkyyliradikaalit sisältävät 1 tai 2 hiili-atomia; ja erityisesti seuraavat yhdisteet: (l-dietyyliamino-2-propyyli)-26-tiopristinamysiini IID 10 ja 26-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-pristinamysiini IID.

O

Lääkinnällisessä käytössä keksinnön mukaisia uusia yhdisteitä voidaan käyttää sellaisenaan, eli emäksenä tunnettuihin synergistiineihin yhdistettyinä, mutta 15 koska keksinnön mukaisten tuotteiden pääasiallinen etu on niiden mahdollinen veteen liuottaminen, niin erityisen edullista on käyttää niitä farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen muodossa tunnettuihin synergistiineihin tai kaavan V mukaisiin synergistiineihin yhdistettyinä, 20 jotka synergitiinit itse ovat liuotettuina joko farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen muodossa tai mahdollisesti emäksenä liukoisuuden ollessa riittävä, jotta saadussa liuoksessa olisi sellainen määrä yhdistettä, joka määrä on vähintään yhtä suuri lääkinnällisen annoksen kanssa.

25 Sekä kaavan I mukaisten yhdisteiden, että kaavan V mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävistä suoloista voidaan mainita mineraalihappojen kanssa syntyvät suolat, kuten hydrokloridit, hydrobromidit, sulfaatit, nitraatit ja fosfaatit, tai orgaanisten happojen kanssa 30 syntyvät suolat, kuten asetaatit, propionaatit, sukkinaa-tit, maleaatit, fumaraatit, metaanisulfonaatit, p-toluee-nisulfonaatit ja isotionaatit, tai näiden yhdisteiden substituutiojohdannaiset. Farmaseuttisista suoloista voidaan edelleen mainita alkalimetallien kanssa muodostuneet 35 suolat, kuten natriumin, kaliumin tai litiumin suolat, maa-alkalimetallien kanssa muodostuneet suolat, kuten mag-nesiumsuola ja ammoniumsuola, ja typpipitoisten orgaanisten emästen kanssa syntyneet suolat, kuten etanoliamiini, 10 781 06 dietanoliamiini, trimetyyliamiini, trietyyliamiini, me-tyyliamiini, propyyliamiini, di-isopropyyliamiini, NN-dimetyylietanoliamiini, bentsyyliamiini, dibentsyyliamii-ni, disykloheksyyliamiini, N-bentsyyli-y5-fenetyyliamii-5 ni, NN'-dibentsyylietyleenidiamiini, bentshydryyliamiini, arginiini, leusiini, lysiini tai N-metyyliglukamiini.

Kaavan V, jossa Z tarkoittaa kaavan VII mukaista radikaalia, jossa kaavassa VII tarkoittaa trialkyyli-ammonioradikaalia, mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti 10 hyväksyttävistä suoloista voidaan mainita kvaternäärisen ammoniumin suolat, jotka vastaavat edellä lueteltuja anioneja.

Seuraavat esimerkit (jotka eivät luonteeltaan ole rajoittavia), osoittavat, miten keksintöä voidaan sovel-15 taa käytäntöön.

Yhdisteiden NMR-spektrit, jotka on esitetty näissä esimerkeissä esittävät yleisiä tunnusomaisia piirteitä, jotka ovat yhteisiä kaikille kaavan I mukaisille yhdisteille tai kaavan V mukaisille yhdisteille, ja erityisiä kun-20 kin substituenttina toimivan yhdisteen omia tunnusomaisia piirteitä.

Esimerkissä 1, samoin viite-esimerkeissä 1 ja 16, . . molekyylin kaikkiin protoneihin kiinnitetään huomiota; seuraavissa esimerkeissä tai niissä vastaavissa esimer-25 keissä, joihin viitataan, ei mainita kuin muuttuvista radikaaleista johtuvat erityiset tunnusomaiset piirteet. Kaavan I mukaisten yhdisteiden kaikki protonit on merkitty seuraavassa kaavassa esitetyn numeroinnin mukaisesti: 30 H n II 9 11 13

8 1CT V

CH3^ Il |33 (15 V>T4 ° CH3 N^° CH3\ M /tN.27 JL oi lS Ji7 35 30 >9 °2 A», JzJ** I!_A» 313 R ^5 20 78106

Kaavan V mukaisten synergistiinien kaikki protonit on merkitty kaavassa XXIII esitetyn numeroinnin mukaisesti; tätä numeroimistapaa on suositeltu julkaisussa J. O. Antenius et ai./ Eur. J. Biochem. 58 (1957), 5 sivulla 259.

3f 4CH3 |H3 48 4£.

T 2/4 2γ p | 4<X '-'

° o^\ /¾ y1 XXIII

2NH N|H Υΐψζ o H | ^KRi

15 y iA O

FIH 1NH A. O

ί| ^ .. 0 L Xx

N

20 l’H5 25 Kaikki spektrit on tehty deuterokloroformissa 250 MHzrllä; kemialliset muutokset on ilmoitettu yksiköllä ppm tetrametyylisilaanin signaalin suhteen.

Jatkossa käytetään seuraavia lyhenteitä: s = singletti 30 d = dubletti t = tripletti dt = tripletin dubletti ddd = dubletin dubletin dubletti dddd = dubletin dubletin dubletin dubletti 35 mt = multipletti m = massiivinen dd = dubletin dubletti 12 781 06

Seuraavissa esimerkeissä kutsutaan "flash"-kro-matografiäksi puhdistusmenetelmää, jolle on tunnusomaista, että siinä käytetään lyhyttä kromatografiakolonnia ja että toimitaan keskimääräisessä paineessa (50 kPa), 5 käytettävän silikageelin hiukkaskoon ollessa 40 - 53 pm; ja toimitaan sen menetelmän mukaisesti, joka on esitetty julkaisussa W. C. Still, M. Kahn ja A. Mitra; J. Org.

Chem. 43 (1978), sivulla 2923.

Esimerkki 1 3 10 150 cm :ssa metanolia olevaan 13,1 g:n pristina- 3 mysiini I^-suspensioon lisätään 15 cm :ssa metyleeniklo-ridia oleva 3,7 g dimetyyliamino-etaanitiolin liuos. Saatua liuosta sekoitetaan 18 tunnin ajan lämpötilassa, joka on noin 20°C, jonka jälkeen se kaadetaan 1500 cm"5:iin tis-15 lattua vettä. Saatu seos uutetaan kolmesti yhteensä 1000 emeillä metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja suodatetaan, jonka jälkeen tuote haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-20 kromatografisesti (eluenttina kloroformi/metanoli, tila- vuussuhteessa 90:10). Sen jälkeen kun fraktiot 5 - 23 on ____: haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 12,4 g (2-dietyyliamino-etyyli)-26-tio-pristinamysiini Ilgitä keltaisena jauheena, jonka sulamis-25 piste on noin 105°C.

78106 δ (ppm) Muoto Siirtyminen 8,10 s H 20 6,60 s leveä m 8 6,55 dd H 5 6,15 d H 11 5,80 dd H 6 5,65 ddd H 10 5,50 d H 13 4,95 ddd H 14 10 4,77 dd H 3 4.75 d H 27 4,27 ddd H 24 4.05 ddd H 9 15 3,87 ddd H 9 3,80 s H 17 3,55 ddd H 24 3,40 ddd H 26 3,10 dd] järjestelyi H 15 20 2,9 ddi ABX H 15 2.75 s -S-CH2CH2- 2,74 m H 4 2,60 q -N-(CH2CH3)2 2,15 k 1,85 m H 25, H 29 25 1,70 8 H 33 1.05 m -N(CH2CH3)2+ H 32 0,95 dd H 30+ H 31 _ _ _ ^

Saadaan (2-dietyyliamino-etyyli)-26-pristinamysiinin IIB (tuote 30 BA) 2 %:nen vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää tuotetta BA 0/1 g 0,05 N hydrokloorihappoa 3 cm3 tislattua vettä 5 cm3 (=lopputilavuus) 35 14 78106

Esimerkki 2

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2,7 g pristinamysiiniä IIA ja 0,58 g 3-dimetyyliamino-etaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote 5 on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 11-17 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 1,1 g (2-dimetyyliaminoetyyli)-26-tiopristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 100°C.

10 NMR-spektri: 2,35 (s, 6H : -NiCH^) 2,80 (m, 4H : -S-CH2CH2-N ' ) 3,40 (ddd, 1H : H 26) 15 4,75 (d, 1H : H 27) 8,10 (s, 1H : H 20)

Saadaan (2-dietyyliamino-etyyli)-26-pristinamysiinin 20 IIB (tuote BB) 2 %:nen vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää tuotetta BB 0,1 g 0,1 N hydrokloorihappoa 1,6 cm^ : ; 3 tislattua vettä 5 cm (lopputila- 25 vuus)

Esimerkki 3

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 5,25 g pristinamysiiniä IIA ja 1,3 g 3-dimetyyliamino-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun tuote 30 on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 6-29 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 3,3 g (3-dimetyyliamino-propyyli)-26-tiopristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 100°c.

35 15 NMR-spektri: 78106 1,50 (s, 3H X 0,5 : H 33 1. isomeeri 1.70 (s, 3H x 0,5 : H 33 2. isomeeri 1.80 (m, 2H : -SCHj-CHj-CHjN¢) 5 2,20 (s, 6H x 0,5 : -N(CH3>2 1.isomeeri 2,25 (s, 6H x 0,5 : -N(CH3>2 2.isomeeri

2,40 (m, 2H : -SCHj-CH^CI^N O

2.70 (m, 2H : -SCH.-CH„-CH N O

d. i —2 A

m 3’35) 10 3 45 J : H 26 kustakin isomeeristä 4,60 I (2d, 1H : H 27 kustakin isomeeristä 4.70 ) 7.80 ) (2s, 1H : H 20 kustakin isomeeristä 15 8,10 f

Saadaan (3-dimetyyliamino-propyyli)-26-tiopristinamy-siinin IIB (tuote BC) 3,3 %:nen vesiliuos, joka sisältää: tuotetta BC 0,1 g 3 0,1 N hydrokloorihappoa 1,55 cm tislattua vettä 3 cm3(=lopputilavuus).

Esimerkki 4

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 5,25 g pristinamysiiniä IIA ja 1,7 g 2-(1-pyrrolidinyyli)-etaanitiolia, ja sen jälkeen kun 25 tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformimetanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 19-60 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 3,9 g [2- (1 -pyrrolidinyyli) -etyyli_7-26-tio-pristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 115°C.

NMR-spektri: 78106 16 x-% 1,90 (mt, 4H : -N | ) N2 H2C — 2,50 k 2,80 (tn, 6H : -SCHjCH^^ ) 3,40 (d, 1H : H 26) 4,75 (d, 1H : H 27) 8,10 (s, 1H : H 20) 10 Saadaan /^-(l-pyrrolidinyyli) -1-etyyli_7-26-tiopristina- mysiinin IIB (tuote BD) 5 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta BD 0,1 g 3 0,1 N hydrokloorihappoa 1,5 cm 3 15 tislattua vettä 2 cm (=lopputilavuus).

2-(1-pyrrolidinyyli)-etaanitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa J.W.Haeffele ja R.W. Broge, Proc.Sei.Toilet Goods Assoc. 32, 52(1959) /Chem.Abstr.

54 , 17234e (1960)7· 20 Esimerkki 5

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3,15 g pristinamysiiniä IIA ja 1,1 g 1-(2-merkaptoetyyli)-4-metyyli-piperatsiinia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti 25 (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 14-20 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 1,4 g Cl-(4-metyyli-1-piperatsinyy-li)-etyyli7_26-tiopristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 115°C.

30 NMR-spektri: 2,30 (s, 3H : ^ N-CHj) 2,40 ä 2,80 (m, 12H : -S-CH^CH^ 2 ” } 3,35 (d, 1H : H 26) 35 4,75 (d, 1H : H 27) 8,10 (s, 1H : H 20) 78106

Saadaan [2-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-1-etyyli7~26-tiopristinamysiinin IXB (tuote BE) 2 %:n vesiliuos hydroklori-dina, joka liuos sisältää: tuotetta BE 0,1 g 3 5 0,1 N hydrokloorihappoa 1,46 cm 3 tislattua vettä 5 cm (=lopputilavuus).

1- (2-merkaptoetyyli) -4-metyyli-piperatsiinia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa D.D. Reynolds et ai., J. Org.Chem., 26, 5125 (1961).

10 Esimerkki 6

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3,15 g pristinamysiiniä IIA ja 1,8 g 1-dietyyliamino-2-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: mety-15 leenikloridimetanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 3-5 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 1,4 g (1-dietyyliamino-2-propyyli)-26-tio-pristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 160°C.

20 NMR-spektri: 1 (m, 9H : H 32 + -N(CH2CH3) ) 2,50 (m, 6H : -CH2N(CH CH ) ) 3,30 (m, 1K : H 26) 25 4'70 (d> 1H : H 27) 8»12 (s, 1H : H 20)

Saadaan (1-dietyyliamino-2-propyyli)-26-tiopristinamy-siinin IIB (tuote BF) 5 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka 30 liuos sisältää: tuotetta BF 20 mg 3 0,1 N hydrokloorihappoa 0,3 cm 3 tislattua vettä 0,4 cm (=lopputila- vuus).

18 78106 1-dietyyliamino-2-propaanitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa R.T. Wragg, J.CherruSoc.

(C), 16, 2087 (1969) .

Esimerkki 7 5 Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä taval la, mutta lähtöaineina käytetään 3,15 g pristinamysiiniä IIA ja 1,6 g 1-metyyli-4-piperidiinitiolia, ja reaktioseokseen lisätään 0,6 g trietyyliamiinia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: metyleeniklo- 10 ridi-metanoli, tilavuussuhteessa 92:8) ja kun fraktiot 4-20 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 0,9 g (1-metyyli-4-piperidinyyli)-26-tiopristinamysii-niä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 180°C.

NMR-spektri: CH v 15 2,10 (m, 4H : -S—^ ) ch2_/ 2,25 (s, 3H : -S —^ N-CH3) /— 2,80 (m, 4H : -S —/ N— ) 20 3,55 (m, 1H : H 26) 4,62 (m, 1H : H 27) 7,70 (m, 1H : H 8) 8,10 (s, 1H : H 20) 25

Saadaan 1-metyyli-4-piperidinyyli)-26-tiopristinamysii-nin IIB (tuote BG) 5 %:n vesiliuos hydrokloridna, joka liuos sisältää: 30 tuotetta BG 10 mg 3 hydrokloorihappoa 0,14 cm 3 tislattua vettä 2 cm (=lopputilavuus).

1-metyyli-4-piperidiinitiolia voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa H. Barre ja R.E.Lyle, J.

35 Org.Chem., 27, 641 (1962).

78106 19

Esimerkki 8

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 5,25 g pristinamysiiniä IIA

3 3a 10 cm kaasumaisen dimetyyliamiinin 5 N etanoliliuosta, 5 ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu ,,flash”-kromatografi-sesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 14-24 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 0,8 g 26-dimetyyliamino-pristinamysiini IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste 10 on noin 240°C.

NMR-spektri: 2,35 (s, 6H : -«(CH^) 3,25 (d, 1H : H 26) 15 5,05 (d, 1H : H 27) 8,20 (s, 1H : H 20)

Saadaan 26-dimetyyliamino-pristinamysiinin IIB (tuote BH) 2 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: 20 tuotetta BH 0,1 g 3 0,1 N hydrokloorihappoa 1,73 cm 3 tislattua vettä 5 cm (=lopputilavuus).

Esimerkki 9

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, 25 mutta lähtöaineina käytetään 5,25 g pristinamysiiniä IIA ja 5 g 4-metyyli-piperatsiinia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 20-44 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, 30 saadaan 0,7 g 26-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-pristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 140°C.

NMR-spektri: 20 781 06 2,30 (s, 3H : ^N-CHj) ^CH -CH,v 2.40 ä 2,65 (m, 8H : -M 2 “2 N_)

5 >2-<V

3.40 ä 3,70 (m sisältäen H 26) 5,75 (d, 1H : H 27) 8,10 (s, 1H : H 20)

Saadaan 26-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-pristinamysiinin 10 IIB (tuote Bl) 3,3 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta BI 0,1 g 3 0,1 N hydrokloorihappoa 1,6 cm 3 tislattua vettä 3 cm (=lopputilavuus).

15 Esimerkki 10 20 emossa olevaa 1-metyyli-piperatsiinia olevaa 5,2 g:n pristinamysiini IIA-liuosta sekoitetaan 1 tunnin ja 30 minuutin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen se 3 kaadetaan 600 cm :een tislattua vettä. Saatu emulsio uutetaan 20 kolmasti yhteensä 600 emoilla metyleenikloridia; orgaaniset .. . faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan, jonka jälkeen tuote haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kroma-tografisesti (eluentti: kloroformimetanoli, tilavuussuhteessa 25 90:10); sen jälkeen kun fraktiot 13-30 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa 2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 2,6 g 26-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-pristinamysiiniä IIB vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 140°C.

Tämän tuotteen NMR-spektri on identtinen esimerkissä 30 9 esitetyn tuotteen spektrin kanssa.

Esimerkki 11

Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 12,6 g pristinamysiiniä IIA ja 5,2 g 2,3-bis-dimetyyliamino-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun 35 tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: mety- 21 78106 leenikloridi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10), ja kun fraktiot 29-42 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan (2,3-bis-dimetyyliamino-propyyli)-26-tiopristinamysiiniä IIB keltaisena jauheena, jonka sulamis-5 piste on noin 110°C. CH3 NMR-spektri: 2,30 (m, 12H: -N ) CH3 2,50 (m, 2H: -CH2-N<^ )

2,90 (m, 1H: -^H-nO

10 3,56 (m, 1H: H26) 4,64 (d, 1H: H27) 4,66 (d, 1H: H27) 7,81 (s, 1H: H20)

Saadaan (2,3-bis-dimetyyliamino-propyyli)-26-tiopris- 15 tinamysiinin IIB (tuote BJ) 2 %:nen vesiliuos hydrokloridi-na, joka liuos sisältää: tuotetta BJ 10 mg 3 0,1 N hydrokloorihappoa 0,14 cm tislattua vettä 0,5 cm'* (=lopputilavuus) .

20 2,3-bis-dimetyyliamino-propaanitiolia voidaan valmis taa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa H. Nishimura ja H. Takamatsu, Yakugaku Zasshi, 84, 944 (19864) (Chem.

Abstr. 62, 2750 b (1965).

Esimerkki 12 25 Toimitaan analogisesti esimerkissä 1 esitetyllä taval la, mutta lähtöaineina käytetään 11,8 g pristinamysiini IIA:ta ja 3,58 g 2-piperidinoetaanitiolia ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografoimalla (eluentti: klorofor- • . 3 mi-metanoli, tilavuussuhteessa 85:15) ja otettu talteen 60 cm :n 30 fraktioita ja kun fraktiot 21-23 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 2,5 g 2-piperi-dinoetaani-26-tiopristinamysiini IIB:tä (seos 60 % A:ta ja 40 % B:tä) keltaisena jauheena, joka sulaa noin 134 C:ssa.

NMR-spektri

35 isomeeri A isomeeri B

1,08 (d, -CH3 32):ssa 1,14 (d, -CHj 32):ssa 1,40 ä 1,60 (mt, CH2.a):ssa 1,40 ä 1,60 (mt, CH2 a):ssa 1,60 ä 1,80 (mt, CH2 b):ssä 1,60 ä 1,80 (mt, CH2 b):ssä 1,73 (s, -CH3 33):ssa 1,56 (s, -CH3 33):ssa 22 781 0 6

isomeeri A isomeeri B

2,45 a 2,90 (mt, S-CH -CH.-N^' 2) 2,45 ä 2,90 (mt,

tH2 2 2 CH

3,43 (mt, H26) 1 3,53 (mt, H2g) 2 3,82 (s, CH2 17) 3,74 ä 3,91 (2d, CH2 17) 5 4,71 (s, H27) 4,61 (d, H2?) 5,50 (d, H13) 6,64 (mt, Hg) 6,64 (mt, H5 ja NHg) 7,72 (mt, NHg) 8,13 (s, H20) 7,81 (d, H20)

Viite-esimerkki 1 3 3 10 15 cm :ssa metanolia, joka sisältää 2,4 cm kaasumai- 3 sen hydrokloorihapon 2N metanoliliuosta, olevaan 0,41 cm :n 3-dimetyyliamino-propyyliamiini-liuokseen, jota on pidetty 55°C:ssa, lisätään 0,5 g pristinamysiini IA ja 20 mg natrium-syanoboorihydridiä. Saatu liuos jätetään tämän jälkeen lepää-15 mään noin kahden tunnin ajaksi lämpötilaan, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen se haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu seos lietetään seokseen, jo- 3 3 ka sisältää 50 cm metyleenikloridia 3a 50 cm natriumbikarbonaatin kylläistä vesiliuosta; orgaaninen faasi dekantoidaan ja 3 20 vesifaasi uutetaan 2 kertaa yhteensä 20 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsul- 3 faatilla, suodatetaan 2 kertaa yhteensä 20 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesium-sulfaatilla, suodatetaan, jonka jälkeen faasi haihdutetaan 25 kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro-formi-metanoli, tilavuussuhteessa 80:20). Fraktiot 15-30 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa; saatu jäännös lietetään 5 cm :een etyylieette-30 riä, suodatetaan ja kuivataan alennetussa paineessa (0,027 kPa) 20°C:ssa. Täten saadaan 60 mg 5 ^-desoksi-(3-dimetyyli-amino-propyyli)-5^-amino-pristinamysiiniä IA kerman värisenä jauheena, jonka sulamispiste on noin 160°C.

Täydellinen NMR-spektri esittää seuraavat tunnusomai-35 set piirteet: 78106 ^ (ΡΡπ)_Signaalin muoto Siirtyminen

8.40 d 6 NK

5 8,25 d 1 NH

7,55 dd l'H6 7,05 in 6γ + 6ό + 6ε 7 dd 1 Ή.

4 6,90 dd ΓΗ.

ίο 6»70 d Ί 6.40 d . _[ 46 ^ 4ε

6,50 d 2 NH

5.75 ddd 18 5.45 d 6c 15 5,25 dd 4a 5 s (leveä) 5a 4.75 dd la 4,60 m 2a 4.45 d(leveä) 5ε^ 20 4,40 dd 3a 3,4 dd (leveä) 36^ 3.20 d (leveä) 362 3 s 4 CH3

3 m 5Υ + 4S

1 et 2 25 2,80 s 4 N(CH3), 2,65 t -NCH2- (

2,35 m 5ε + 56 I

2 1 i 2.25 t -?’CK2- (ketju) j

2.20 s -N(CH3) (ketju) I

30 1,60 m -CH?- ( ketju) j

~2Ξ + 3γ I

1.25 d lv ! '' 0,90 c 2y !

0,50 dddd 52η I

35 --1-‘ 24 7 8 1 0 6

Saadaan 5 f-desoksi-(3-dimetyyliamino-propyyli)-5 - amino-pristina-mysiinin IA (tuote A) 10 %:n vesiliuos hydro-kloridina, joka liuos sisältää: tuotetta A 0,1 g 3 5 2N hydrokloorihappoa 0,52 cm 3 tislattua vettä 1 cm (=lopputilavuus).

Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 1 esitetyllä tavalla valmistettaessa seuraavia yleisen kaavan (V) mukaisia synergistiinejä, joita voidaan yhdistää keksinnön mukaisiin 10 tuotteisiin: [Symbolit ---, Z ja R1 on määritelty kuten kohdassa 1) ylei selle kaavalle (V) .]} 78106 25

Viite- γ χ 1) Sulamispiste 5 esimerkki 2 )Liukoisuus 2 -N(DU, -NH(CH-),N(CH,), 1) keltainen jauhe

3 2 ι i il sulamispiste noin 180 C

2) 10 %:n vesiliuos, hydro-kloridina 10 3 -Ν(0Η^)2 ^n-CH ^ valkea jauhe

X y 3 sulamispiste noin 195 C

2) A?dl^l^Öi^OS' 4 _,m(ch ) y*-\ i) vaaleanruskea jauhe

3 2 -NH-^N-CH^ sulamispiste noin 195°C

3,7 %:n vesiliuos 2) hydrokloridina 5 -N(CH-)_ -NH0H 1) valkoinen jauhe

2q > 1 sulamispiste noin 170 C

2) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina

6 -N(CH^)2 -NH(CH2)^0H 1) kermanvärinen jauhe, Q

sulamispiste noin 160c 25 2) 2 %:n vesiliuos ! hydrokloridina 7 -H -NH(CH_),N(CH,)„ 1) vaaleanruskea jauhe j

2 > -5 2 sulamispiste noin 140 C

2) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina 3 0 _: 78106 26

Viite-esimerkki 8 3 25 cm :ssa metanolia olevaan 2 gsn pristinamysiini IA- 3 liuokseen lisätään 2,8 cm :ä dimetyyliamiinin 5N etanoliliuos- 3 ta, ja tämän jälkeen 2 cm :ä kaasumaisen hydrokloorihapon 5N 5 metanoliliuosta. Näin saatuun liuokseen lisätään 75 mg natrium-syaanoboorihydridiä, jonka jälkeen seosta sekoitetaan 48 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla. Tämän jälkeen reaktioseos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännöstä ravistellaan 25 cm^:ä metyleenikloridia 3 10 ja 25 cm :ä natriumbikarbonaatin kylläistä vesiliuosta sisältävän seoksen kanssa; orgaaninen faasi dekantoidaan ja vesifaasi 3 uutetaan 2 kertaa yhteensä 50 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan, jonka jälkeen tuote haihdutetaan kuiviin alenne-15 tussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 92:8).

Fraktiot 5-12 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Täten saadaan 0,7 g 20 5 f-desoksi-5 f-dimetyyliamino-pristinamysiiniä IA vaaleanrus- o . . keana jauheena, jonka sulamispiste on noin 170 C.

NMR-spektri: 0,70 (dc, 1H : 5^) 25 2,10 ä 2,60 (tn, 4H : 55^ 50,,* 55χ+ 5γ) 2,15 (s, 3H x 0,8 : -NtCH^ 1. isomeeri 2,20 (s, 3H x 0,2 : -N(CH3)2 2.isomeeri

Saadaan 5 ^-desoksi-5 ^“-dimetyyliamino-pristinamysiinin 30 IA (tuote B) 2 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää : tuotetta B 0,05 g 0,1 N hydrokloorihappoa 0,56 cm^ 3 tislattua vettä 2,5 cm (=lopputila- 35 vuus).

7 810 6

Viite-esimerkki 9

Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 8 esitetyllä tavalla, jolloin 'saadaan 0,35 g 5 f -desoksi-5f-metyyliamino-pristinamysiiniä IA keltaisena jauheena, jonka sulamispiste 5 on noin 185°C. Saadaan 5 f -desoksi-5 f-metyyliamino-pristina-mysiinin IA %:n vesiliuos hydrokloridina.

Viite-esimerkki 10

Toimittaessa analogisesti viite-esimerkissä 8 esitetyllä tavalla saadaan 1,2 g 5 -desoksi-5 -£N-(2-dime-10 tyyliamino-etyyli)-N-metyyliamino3-pristinamysiiniä IA valkoisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 120°C.

Saadaan 5 f -desoksi-5 f - [^N-(2-dimetyyliamino-etyyli)-N-metyyliamino -pristinamysiinin IA (tuote D) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina.

15 Viite-esimerkki 11 3 75 cm :ssa metanolia olevaan 3 g:n pristinamysiini IA-, 3,3 g:n 4-dietyyliamino-1-metyyli-butyyliamiini-, 0,11 g:n 3 natriumsyanoboorihydridin ja 9 cm :n kaasumaisen hydrokloori-hapon 5N metanoliliuokseen lisätään 5 g molekyylisiivilää, 20 jonka koko on 3 A. Saatua suspensiota sekoitetaan neljän vuorokauden ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen suspensio suodatetaan; suodos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännöstä ravistellaan 3 3 50 cm metyleenikloridia ja 50 cm natriumbikarbonaatin kyl-25 Iäistä vesiliuosta sisältävän seoksen kanssa; orgaaninen faasi 3 dekantoidaan ja vesifaasi uutetaan 2 kertaa yhteensä 50 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan, jonka jälkeen tuote haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jään-30 nös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10). Täten saadaan 0,7 g 5 f -de-soksi-(4-dietyyliamino-1-metyylibutyyli)-5 f -amino-pristinamy-siiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 160°C.

28 781 06 NMR-spektri: 1,10 (nt, 9H : -N(CH,CH,) + -CH-CH, 2~3 2 I —3 vers 1,7 (m, 4H : -ΟΗ^ΟΗ,,-α^-ΝίΟ,,Η^) 2.90 (π, 6H : -CK N(CH CH ) r · 4 J 4 7,70 (mc, 1H x 0,45 : l'H^ 1. isomeeri 7,77 (mt, 1H x 0,55 : 1 Ή 2. isomeeri

Saadaan 5 ^-desoksi-(4-dietyyliamino-1-metyyli-butyyli)-5 f -amino-pristinamysiinin IA (tuote F) 10 %:n vesiliuos hydro-10 kloridina, joka liuos sisältää: tuotetta F 0,1 g 3 0,1N hydrokloorihappoa 1 cm (=lopputilavuus)

Viite-esimerkki 12 3 3 300 cm :ssa metanolia, joka sisältää 10 cm kaasumaisen 15 hydrokloorihapon 2N metanoliliuosta, olevaan 12,5 g:n 5f - desoksi-5^ -hydroksi-imino-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään 0,7 g natriumsyanoboorihydridiä. Saatua liuosta sekoitetaan 2 vuorokauden ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen liuos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa 20 (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännöstä ravistellaan 200 cm^ metylaani- 3 kloridia ja 100 cm natriumbikarbonaatin kylläistä vesiliuosta sisältävän seoksen kanssa; orgaaninen faasi dekantoidaan ja 3 vesifaasi uutetaan 100 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan 25 ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30^C:ssa. Sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5), saadaan 6,8 g 5 £-desoksi-5 f-hydroksiamino-pristinamysiiniä IA valkeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 170°c.

30 NMR-spektri: 0,4 (m, 1H : 5B2) ; 2,45 (d, 1H : 562) ; 3,1 (d : 5γ konplek-sisella massiivilla ; 7,80 (mt, 1H x 0,75 : 11.isomeeri; 7,95 (mt, 1H x 0,25 : 1'2.isomeeri.

29 78106

5 Jf -desoksi-5 ft -hydroksi-imino-pristinamysiiniä IA

3 voidaan saada sekoittamalla 150 cm :ssa metanolia, joka si- 3 sältää 8 cm kaasumaisen hydrokloorihapon 2N metanoliliuosta, olevia 15 g:a pristinamysiiniä 1A ja 7,5 g:a liuoksena olevaa 5 hydroksyyliamiinin hydrokloridia 5 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla. Tämän jälkeen reaktioseos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännöstä 3 3 ravistellaan 100 cm kloroformia ja 100 cm natriumbikarbonaatin kylläistä vesiliuosta sisältävän seoksen kanssa; or-10 gaaninen faasi dekantoidaan ja vesifaasi uutetaan 2 kertaa 3 yhteensä 200 cm :11a kloroformia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Täten saadaan 14 g 5J -desoksi-5 ^-hydroksi-imino-pristinamysiiniä 15 IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 210°C. NMR-spektri: 0,35 (dd, 1H : 5&2) 3,25 (n, 2H : te2+ 55χ) 5.05 (d, 1H : 5a) 20 5.5 (τη, 2H dont 5c^) 7,80 (dd, 1H x 0,40 : 1Ή 1 . isomeeri

O

7,90 (dd, 1H X 0,60 : 1'H^ 2. isomeeri Viite-esimerkki 13 25 Toimittaessa analogisesti viite-esimerkissä 11 esite tyllä tavalla saadaan 0,8 g 5^ -]n-(karboksimetyyli)metyyli-amino 3 “desoksi-pristinamysiiniä IA kermanvärisenä jauheena, jonka sulamispiste on noin 140°C.

Saadaan 5 £- Jn-(karboksimetyyli)metyyliaminoJ -5 f -30 desoksi-pristina-mysiinin IA (tuote K) 2 %:n vesiliuos, joka sisältää: tuotetta K 0,2 g 3 tislattua vettä 10 cm (=lopputilavuus).

78106 30

Viite-esimerkki 14 3 3 0,6 cm trietyyliamiinia sisältävässä 50 cm :ssa kloroformia olevaan 3,2 g:n 5^ -desoksi-(2-dimetyyliamino-etyyli)-5J-amino-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään 0,3 cm^ ase-5 tyylikloridia. Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen seos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro-formi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10), haihduttamalla frak-10 tiot 10-21 kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa saadaan 1,8 g 5 ^ -desoksi-5 jf· - ^N-(2-dimetyyliamino-etyyli)-asetamidoj -pristinamysiiniä IA valkeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 170°C.

NMR-spektri: 15 0,9 (r., 4H : 2γ + 2,05 l 2,15 (ro, 3H : 56^ 562 + 5γ) 2,15 (s, 3K : -C0CH3) 2,45 (s, 6H : -N(CH3> ) 2,35 ä 2,60 (m, 5H :^N-CH -CH -N' +56.) 20 L 1 7,8 (mt, 1H x 0,75 : 1 1 # isomeeri 8,25 (rot, 1H x 0,25 : l'H^ 2. isomeeri

Saadaan 5 -desoksi-5 - £ N-(2-dimetyyliamino-etyyli)-asetamido^j -pristinamysiinin IA (tuote L) 10 %:n vesiliuos 25 hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta L 0,1 g 3 0,2 N hydrokloorihappoa 0,51 cm 3 tislattua vettä 1 cm (=lopputilavuus).

5^ -desoksi-(2-dimetyyliamino-etyyli)-5 £ -amino-pristina-30 mysiiniä IA voidaan valmistaa esimerkissä 5 esitetyllä tavalla. Viite-esimerkki 15

Toimittaessa analogisesti viite-esimerkissä 14 esitetyllä tavalla saadaan 1 ,6 g 5^ -desoksi-5^-|_N-(3-dimetyyliamino- propyyli) -asetamido~| -pristinamysiini IA okran värisenä jauhee-35 na, jonka sulamispiste on 210°C.

78106

Saadaan 5 £ -desoksi-5 jj - I N- (3-dimetyyliamino-propyyli) -asetamido^ -pristinamysiinin IA (tuote M) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina.

Viite-esimerkki 16 3 3 5 25 cm metanolin ja 5 cm kloroformin seoksessa olevaan 3,6 g:n 55-metyleeni-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään 1,95 g 3-dimetyyliamino-propaanitiolia, jonka jälkeen saatua liuosta sekoitetaan 20 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n 3 tienoilla. Tämän jälkeen reaktioseos kaadetaan 250 cm teen 10 tislattua vettä; saatu emulsio uutetaan 3 kertaa yhteensä 3 250 cm :11a metyleenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan,jonka jälkeen tuote haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti 15 (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5); fraktiot 10-38 haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatua jäännöstä ravistellaan 30 cm^ etyyli-eetterin kanssa; saadut kiteet erotetaan suodattamalla, jonka jälkeen ne kuivataan alennetussa paineessa (27 Pa) 20°C:ssa.

20 Täten saadaan 2,4 g (3-dimetyyliaminopropyyli)-5 -tiometyyli-pristinamysiiniä IA valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 2 3 4 °C.

78106 32 NMR-spektri: δ (ppm) Muoto Siirtyminen

11,65 s (leveä) OH

5 3,70 d 6 KH

8,40 d 1 NH

7.80 dd 1Ή,

O

7,45 m 1 Ή. + 1Ή.

4 5 7,27 m -i m ί n ) 6v + 66 + 6ε

10 7,17 ra J

7,05 d L järjestelmä AB 46 + 4ε 6,60 dj

6,47 d 2 NH

5,S7 ddd 18 15 5,83 d 6b 5.24 m 5a + 4c 5,03 ddd 5ε 4,85 dd la 4.80 tn 2a 20 4,53 dd 3a 3,53 ra 3δχ 3’35 dd“l järjestel- _S_CH _ 3,15 ddJ mä ABX -2 2

3.25 s 4 NOH

25 --- 33 7 8 1 06 δ (ppm) Muoto Siirtyminen 3,25 m 3δ2 2.90 s 4 N(CH3)2

2.90 m 4S

5 2·” t 2,50 dd 5e2 2,40 t -CR2SCH2- 2,40 ä 2,20 m 5δ + 5=1 10 2,25 s -CH2N(.CH3)2 2 m 3 S ^ 1,75 m -SCH2CH2CH2- 1,8 ä 1,45 m 2βχ + 2&2 + 3γχ 1,30 d 1Ύ 15 1,25 ä 1,05 ra 3γ2 + 382 0,9 t 2γ 0,60 dd 58£ 2 0

Saadaan (3-dimetyyliamino-propyyli)-55 -tiometyyli-pristinamysiinin IA (tuote AA) 10 %:n vesiliuos, joka sisältää: tuotetta AA 30 mg 3 0,1N hydrokloorihappoa 0,3 cm (=lopputilavuus).

25 5 S -metyleeni-pristinamysiiniä IA voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 3 1,2 cm trifluoroetikkahappoa sisältävässä 230 cm :ssa tetrahydrofuraania olevaan 12 g:n 5 £ -dimetyyliaminometyleeni-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään 0,43 g natriumsyanoboo-30 rihydridiä. Saatua seosta sekoitetaan 4 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen se haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloro-formi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5; fraktiot 4-15 haihdu-35 tetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Täten 34 781 06 saadaan 5,5 g 5<*> -metyleeni-pristinamysiiniä IA valkoisina kiteinä, joiden sulamispiste on 245°C.

NMR-spektri: 0,55 (dd, 1H : 5S2> 5 2,40 (d, 1H : 5Bj) 3,55 (dd, 1H : 5zj ' 5,25 (ro, 2H : 5<* +5ei> 5,30 et 6,10 (2s, 2R : £ ) 1Q 7.85 (dd, 1H : 1'Kg) 5 J -dimetyyliaminometyleeni-pristinamysiiniä IA voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 460 cm :ssa 1,2-dikloorietaania olevaan 46 g:n pristina- 3 mysiini IA-liuokseen lisätään 230 cm tert-butoksi bis(dimetyy-15 liamino)-metaania; saatua liuosta sekoitetaan 18 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla. Reaktioseos laimennetaan 1 litralla metyleenikloridia, jonka jälkeen se pestään 3 kertaa yhteensä 3 litralla ammoniumkloridin 0,4 %:lla vesi-liuosta. Orgaaninen faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla, suo-20 datetaan, jonka jälkeen se kuivataan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatua jäännöstä ravistellaan 600 cm"^ tislatun veden kanssa; seos suodatetaan ja kiinteä tuote kuiva-. . taan alennetussa paineessa (2,7 kPa) 20°C:ssa. Saadaan 41 g raakaa 5 -dimetyyliaminometyleeni-pristinamysiiniä IA vaalean-25 ruskeana jauheena. Laadultaan tämä tuote on riittävää käytettäväksi sellaisenaan myöhemmissä vaiheissa. Se voidaan kuitenkin puhdistaa seuraavalla tavalla: 23,5 g raakaa 5 <X-dimetyyliamino-metyleeni-pristinamysiiniä IA puhdistetaan "flash"-kromatografi-sesti (eluentti: kloroformimetanoli, tilavuussuhteessa 98:2).

30 Fraktiot 16-25 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Täten saadaan 12 g 5 δ-dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 195°C.

78106 35 NMR-spektn: 0,9 (C, 3H : 2Ύ) 1,0 (dd, 1H : 5B2) 2.50 (d, 1H : 5Βχ) 5 3,10 (s, 6K : -K(CH3>2) 3,70 (d, 1H : 5ε2) 5.50 (d, IK : 5ε^ 7,40 (s, 1H : -CHN(CH3)2) 7,75 (dd, 1H : l'H.) 10 6

Viite-esimerkki 17

Toimitetaan analogisesti viite-esimerkissä 16 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 0,9 g 5 (J-metylee-ni-virginiamysiiniä S ja 0,52 g 3-dimetyyliamino-propaanitio-15 lia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatog-rafisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 13-25 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 0,3 g (3-dimetyy-liamino-propyyli)-5 S-tiometyyli-virginiamysiiniä S valkeana 20 jauheena, jonka sulamispiste on noin 142°C.

NMR-spektri: 0,45 (dd, 1K : 5S2) 1,90 (tn, 2K : -SCH CH CH K’C ) pu 2,40 (s, 6H : -CH -N^^3) 25 2

2,60 (tn, 4H : -S-CH^CH^-CH -N’O

3,45 (d, 1H : 5ε2> 4,85 (m, 3Hjossa 5ε^ 5,25 (dd, 1H : 5a) 30 7,78 (dd, 1H : 1’Hg)

Saadaan (3-dimetyyliamino-propyyli)-5<$ -tiometyyli-virginiamysiinin S (tuote AB) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta AB 0,1 g 3 35 hydrokloorihappoa 1 cm (=lopputilavuus).

78106 36 5 <3 -metyleeni-virginiamysiiniä S voidaan valmistaa analogisesti viite-esimerkissä 16 5 δ -metyleeni-pristinamy-siinille IA esitetyllä tavalla/ mutta lähtöaineina käytetään 2 g 5 ä -dimetyyliaminometyleeni-virginiamysiiniä S ja 74 g 5 natriumsyanoboorihydridiä. Sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 98:2) ja kun fraktiot 2-5 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 1 g 5 <5 -metyleeni-virginiamysiiniä S vaaleanruskeana jauheena, jonka 10 sulamispiste on noin 190°C.

NMR-spektri: 0,35 (dd, 1H : 5S2> 2,45 (dd, 1H : 5^) 3,55 (dd, 1H : 5ε£) 1 5 5,25 (dd, 1H : 5εχ) 5,25 (m, 1H : 5a) 5,30 et 6,15 (2s, 2H : =C^— ^ 7,75 (dd, 1H : 1'Hg) 20 5i -dimetyyliaminometyleeni-virginiamysiiniä S voidaan saada toimimalla analogisesti viite-esimerkissä 16 53-dimetyy- liaminometyleeni-pristinamysiinille IA esitetyllä tavalla, mutta 3 käyttäen lähtöaineina 2 g virginiamysiiniä S ja 10 cm bis-dimetyyliamino-tert-butoksimetaania, ja sen jälkeen kun tuote 25 on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 98:2) ja kun fraktiot 9-12 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 0,8 g 5i -dimetyyli-aminometyleeni-virginiamysiiniä S keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 175°C.

30 37 781 06 NMR-spektri: 0,9 (m, 4H : 2γ+ 5S2) 3,05 (s, 6H : »CH-N(CH3)2) 3,65 (d, 1K : 5e2> 5 4,85 Cd, 1H : 5εχ) 5,15 (dd, 1H : 5a) 7,10 k 7,40 (m :aramaatit + =ch-n^) 7,70 (dd, 1H : 1Ή,)

O

Viite-esimerkki 18 10 Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 16 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 6 g 5ö -metyleeni-pris- 3 tinamysiiniä IA ja 4 cm 2-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-etaani-tiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kroma-tografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 15 97:3) ja kun fraktiot 8-20 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 2,6 g {^2-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-etyyli]] -5£ -tiometyyli-pristinamysiiniä IA valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 216°C.

NMR-spektri: 20 0,60 (dd, 1H : 5^^ 2.27 (s, 3H : ^N-CH^ 2,40 ä 2,80 (m, UH : -CH -N ‘ N- + 56 ) 25 “< ~2 5,05 (dd, 1H : 5«^ 5.27 (m, 2H : 5a + 4a) 7,85 (mt, 1H x 0,8 : 1'H^ l.isaneeri 7,95 (mt, 1H x 0,2 : 1'H^ 2.iscmeeri 30

Saadaan [2-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-etyyli2 -5 i-tiometyyli-pristinamysiinin IA (tuote AC) 5 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: 38 7 8 1 06 tuotetta AC 0,1 g 0,1N hydrokloorihappoa 0/96 cm^ 3 tislattua vettä 2 cm (=lopputilavuus).

Viite-esimerkki 19 5

Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 16 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2 g 5 £ -metyleeni-pristi- 3 namysiiniä IA 3a 3 cm 3-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-propaani-tiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kroma-tografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10) ja kun fraktiot 10-25 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 20°C:ssa, saadaan 1,9 g [3-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-propyyli 3-5 h-tiometyyli-pristinamysiiniä IA valkeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 156°C.

NMR-spektri: 15 0,65 (dd, 1H : 5β2) 2,30 (s, 3H : ^N-CH-j) 2,50 (m, 13H : -CH N * +-SCH - + 5β.) nch2ch2^ 2 1 20 5,27 (m, 2H : 5o + 4a) 7,85 (dd, 1H x 0,8 : 1'H& 1. isomeeri 7,95 (dd, 1H X 0,2 : l'H6 2.isomeeri

Saadaan [3- (4-metyyli-1-piperatsinyyli) -propyylij -5 <5 -tiometyyli-pristinamysiinin IA (tuote AD) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta AD 0,1 g 3 0,5N hydrokloorihappoa 0,38 cm tislattua vettä 1 cm^(=lopputilavuus).

Viite-esimerkki 20 30 Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 16 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 4 g 5i-metyleeni-pristi- 3 namysiiniä IA ja 4 cm bis-1,3-dimetyyliamino-2-propaanitiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografi-sesti (elentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhtees 95:5) ja 35 kun fraktiot 20-60 on haihdutettu kuiviin alennetussa painees- 39 7 8 1 06 sa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 0,59 g £bis-1,3-(dimetyyli-amino)-2-propyyli J-5 £-tiometyyli-pristinamysiiniä IA valkeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 170°C.

NMR-spektri: 5 0,63 (dd, 1H : 582) 2,40 (s, 6H : -NiCP^) 2,50 (m, 10H : + -N(CH3)2) 4,97 (s, 1H : 5εχ) 10 5,30 (m, 2H : 5α + 4α) 7,85 (rat, 1H x 0,85 : 11¾ 1 . isomeeri 7,95 (rat, 1H x 0,15 : l'H6 .2. isomeeri

Saadaan bis [1,3-(dimetyyliamino)-2-propyyliJ -55 -15 tiometyyli-pristinamysiinin IA (tuote AE) 7,5 %;n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuoetta AE 0,03 g 0,1N hydrokloorihappoa 0,03 cm^ 3 tislattua vettä 0,4 cm (=lopputilavuus).

20 Viite-esimerkki 21

Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 16 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 3 g 5 ή-metyleeni-pris-tinamysiiniä IA ja 0,97 g 1-metyyli-4-merkapto-piperidiiniä, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografi-25 sesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5) ja kun fraktiot 10-16 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 1,1 g (1-metyyli-4-piperi-dyyli)-5 ό-tiometyyli-pristinamysiiniä IA valkeana jauheena, jonka sulamispiste on 260°C.

30 40 781 0 6 NMR-spektri: 0,6 (dd, 1H : 562) CH,-s 2 (m, 4H : S-/ 1 N-) 5 2,20 (s, 3H :-s—^N-Cji3> 2,35 (to, 1H : 5βχ) ru 10 2,90 (m, 4H : -S-/ “^N-) \—ch2/ 5,30 (m, 2K : 5a + 4e) 7,85 (dd, 1H : ΓΗ6)

Saadaan (1-metyyli-4-piperidyyli)-5 -tiometyyli-15 pristinamysiinin IA (tuote AF) 5 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta AF 0,03 g 3 0,1N hydrokloorihappoa 0,3 cm 3 tislattua vettä 0,6 cm (=lopputilavuus).

20 Viite-esimerkki 22

Toimitaan viite-esimerkissä 16 esitetyllä tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 2 g 5i -metyleeni-pristinamysiiniä IA ja 0,66 g 2-dietyyliamino-etaanotiolia, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-25 metanoli, tilavuussuhteessa 95:5), ja kun fraktiot 9-18 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 0,8 g (2-dietyyliamino-etyyli)-56 -tiometyyli-pristinamy-siiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on 230°C. NMR-spektri: o,65 (dd, 1H : 562)~~ 30 2,38 (d, 1H : 56^ CH _ 2,3 ä 2,8 (m, 8H : -S CH-CH. “2 ) ^ch2- 3,15 (dd, 1H : -Cj^S-) 3,35 (dd, 1H : -CH2S-) 35 5,01 (dd, 1H : 5εχ) 7,81 (dd, 1H x 0,9 ; l'H, 1.isomeeri

O

7,90 (dd, 1H x 0,1 : 1'Hg 2.isomeeri 78106 41

Saadaan (2-dietyyliamino-etyyli)-5 δ -tiometyyli-pris-tinamysiinin IA (tuote AF1) 5 %;n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta AF1 30 mg 3 5 0,1N hydrokloorihappoa 0,29 cm 3 tislattua vettä 0,6 cm (=lopputilavuus).

Viite-esimerkki 23 3 60 cm :ssa etikkahappoa olevaan 5,5 g:n 56 -dimetyyliami-nometyleeni-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään tipottain 5,3 10 g 2-dimetyyli-amino-etyyliamiinia siten, että lämpötila ei kohoa yli 25°C:een. Saatua liuosta sekoitetaan 20 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen seos kaadetaan hitaasti natriumbikarbonaatin kylläiseen vesiliuok- 3 seen; saatu seos uutetaan 2 kertaa yhteensä 750 cm :llä mety-15 leenikloridia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti; kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 90:10)? fraktiot 10-12 haihdutetaan kuiviin alen-20 netussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Täten saadaan 3 g (2-dimetyyliamino-etyyli)-56 -aminometyleeni-pristinamysiiniä vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 180°C.

NMR-spektri: 0,90 (mt, AH : 2γ + 5β2) 25 2,25 (rot, 6H : -N(CK3> ) 2.50 (mt, 3H : - CK N ^ + 53χ) 3,25 (rat, 2H : 3.50 (rat, 2H : 5ε2 + 36^) A,90 (mt, 1H: 5e ) 30 entre 7,15 et 7,4 (m, 1H : *C "„K“ ) 9,90 (mt, 1K (vaihdettava D20): -NH-)

Viite-esimerkki 24

Toimitaan analogisesti viite-esimerkissä 23 esitetyllä 35 tavalla, mutta lähtöaineina käytetään 13,8 g 5-dimetyyliamino- 42 78106 metyleeni-pristinamysiiniä IA ja 3,4 g 4-amino-l-metyyli-piperidiiniä, ja sen jälkeen kun tuote on puhdistettu "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuus-suhteessa 92,5-7,5) ja kun fraktiot 15-20 on haihdutettu kui-5 viin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 4,0 g (1-metyyli-4-piperidyyli)-5-aminometyleeni-pristinamysiiniä IA keltaisen jauheen muodossa, joka jauhe sulaa 208°C:ssa.

NMR-spektri: 0,A0 (m, AK : 2γ + 2^)

10 /H

2,0 (m, AH : «/ N- ) ^ch2_/ 2,35 (s, 3H : >N-CH3) 2,A5 (d, 1H : 56χ) 15 >—CH0 2,90 ( -/ “ N-) >-CH2y 3,20 ( massiivilla, 1H : -CHf^ ^N- ) 20 3,50 (d, 1H : 5e2) A,85 massiivilla, 1H : 5ε 6,65 (d, 1H : -CHNH-) 9,70 (dd, 1H x 0,25 : "CH-NH- 1.isomeeri 10,03 (dd, 1H x 0,85 : * CH-NH- 2.isaneeri 25

Saadaan (1-metyyli-4-piperidyyli)-5-aminometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AT) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: 30 tuotetta AT 0,03 g 3 0,1N hydrokloorihappoa 0,3 cm tislattua vettä 0,3 cm3(=lopputilavuus).

4-amino-1-metyyli-piperidiiniä voidaan valmistaa menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa E.F.Elslager, L.M. Werbel, 35 A.Curry, N. Headen, J. Johnson, J.Med.Chem.17, 99 (1974).

I: 78106 43

Toimien viite-esimerkissä 23 esitetyllä tavalla valmistetaan seuraavat yleisen kaavan (V) mukaiset synergistiinit, jotka voidaan yhdistää keksinnön mukaisiin tuotteisiin.

{Symbolit---, X ja Z on määritelty, kuten kohdassa 2b) 5 yleiselle kaavalle (V), ja Y tarkoittaa dimetyyliaminoradi-kaalia, mikäli toisin ei mainita.]

Viite-esi- R 1) Sulamispiste (sp) merkki 4 2) liukoisuus 44 78106 25 1) Keltainen jauhe

5 sulamispiste noin 150°C

2) 5 %:n vesiliuos, hydrokloridina 26 -NH(CH0)_NH CH, 1) Keltainen jauhe

223 sp = 174°C

2) 1 %:n vesiliuos 10 hydrokloridina 27 -NHiCh^)jN(CH^)2 1) Keltainen jguhe sp noin 155°C '· 2) 6,6 %:n vesiliuos , hydrokloridina ^ 2Θ -NH-CH-Ch^NiCHj^ 1) Keltainen jaghe

I sp. noin 160°C

ru 3 2) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina 29 -NHCH,CH-N(CH,)? 1) Oranssi jauhe

_n I sp noin 175 C

Z\) pu 3 2) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina 30 -NH-CH-iCl·^) 1) Vaaleanruskga jauhe

1 sp noin 160 C

*"H3 2) 1 %:n vesiliuos 25 · hydrokloridina 31 -- 1) Keltainen jauhe

-NH-(CH0)_-N sp = 183 C

2 2 \_ 2)1 %:n vesiliuos hydrokloridina 30 32 -- 1) Keltainen jauhe

-NH(CH0),-n sp = 170 C

2 3 \_ 2)1 %:n vesiliuos 33 .-- 1) Keltainen jauhe

-NI-KCh^^-N \ . sp noin 162°C

_ 2) 1 %;n vesiliuos hydrokloridina

II

Viite-esi- r \) Sulamispiste (sp) merkki ή 2) liukoisuus 45 78106 34 -NH(CH, ),-1^ DVaaleanruskea jauhe

5 22 \_/ sp noin 172 C

2) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina ^ 1) Vaaleanruskga jauhe

N sp noin 160°C

-NH-CH^-/ \ 2)-| %;n vesiliuos 10 hydrokloridina

1) Vaaleanruskea jauhe sp = 177 °C

2H %:n vesiliuos 15 hydrokloridina ch3

Viite-esi- * h 1) Sulamispiste (sp) 20 nerkki___2)Huokoisuus_ .

37 H 1) Vaaleanruskea jauhe

-NH-/^N-CH, (sp noin 195°C

\ / ? 2) 5%:n vesiliuos hydrokloridina 2 5 38 -N(CH )? ._ 1) keltainen jauhe

J -NH(CH„)0-N N-CH, sp = 150 C

2 2 \ / 3 2) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina 39 -N(CH_)„ N 1) Keltainen jauhe

-NH-(CH2)2-/ ^ sp = 138 C

I I 2) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina _l 46 78106

Viite-esimerkki 40 3 40 cm :ssa etikkahappoa olevaan 1,84 g:n 56 -dimetyyli-aminometyleeni-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään 2,1 g 2-dimetyyliamino-etaanitiolia. Saatua liuosta sekoitetaan 20 5 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen liuos kaadetaan hitaasti natriumbikarbonaatin kylläiseen vesiliuokseen; saatu seos uutetaan 3 kertaa yhteensä 3 400 cm :11a metyleeniloridia, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu 10 jäännös puhdistetaan "flashM-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 96:4); fraktiot 5 ja 6 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan "flash"-kroma-tografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuh-15 teessä 96:4); fraktiot 5 ja 6 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Täten saadaan 0,8 g (2-dimetyyliamino-etyyli)-56-tiometyleeni-pristina-mysiiniä IA keltaisena jauheena, jonka sulamispiste on noin 1 5 0°C.

20 NMR-spektri: 0,68 (dd, 1H : 582> 2,32 (s, 6H x 0,85 : -CH^’iCH^)2 1. isomeeri 2,35 (s, 6H X 0,15 : -CR2N(CH3)2 2. isomeeri 2,45 (d, 1H : 5βχ) 25 2,65 (rot, 2H : -SCH^) 3,05 (t, 2H : -CH2N ') 3,43 (dd, 1H : 5e2) 5,15 ( massiivilla : Se^ 7,60 (s leveä; m : «CHS-) 10 7,83 (rot, 1H : l'H& kaksi isomeeriä)

Saadaan (2-dimetyyliamino-etyyli)-5 S-tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AX) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: 35 47 78106 tuotetta ΑΧ 0/1 g 3 0/1N hydrolcloorihappoa 1 cm 3 tislattua vettä 10 cm (=lopputilavuus).

Toimien viite-esimerkissä 40 esitetyllä tavalla valmiste-5 taan seuraavat yleisen kaavan (V) mukaiset synergistiinit, jotka voidaan yhdistää keksinnön mukaisiin tuotteisiin»

Symbolit ---, X ja Z on määritelty kuten kohdassa 2b) yleiselle kaavalle (V)/ ja mikäli toisin ei mainita, Y tarkoittaa dimetyyliaminoradikaalia.

10 ---

Viite-esi- 1) Sulamispiste (sp) nierkki ^ 4 2) Liuckoisuus ,, v - \ v , * Vaaleanruskea jauhe 41 -N(CH3)2 -S-(CH2)2N(C2H5)2 1) gp noln -|g2°c 2) 1 %:n vesiliuos 15 hydrckloridina 42 -N(CH,)2 -S-(CH2)3N(CH3)2 1) Vaaleanruskea jauhe

sp noin 170UC

2) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina 43 -H -S(CH2)-,N(CH 1 l) Vaaleanruskea jauhe

* so noin 140°C

2) 10 %:n vesiliuos hydrckloridina 44 -N(CH,)9 -S CH9-CH-CH9N(CH,)9 1) Vaaleanruskea jauhe

32 2 I 2 32 sp = 234CC

25 ru 3 2)1 %:n vesiliuos hydrokloridina 45 -N(CH,)9 -S-CH9-C-N(CH,)9 1) Vaaleanruskea jauhe 2 ch' Nch 59 noijl 200 c 3 3 2) 1 %:n vesiliuos 3 g hydrokloridina 46 -N(CH,)9 --, 1) Vaaleanruskea jauhe

·* L -S(CH2)2-N sp noin 180°C

^ 2)1 %:n vesiliuos hydrokloridina | 35

Viite-esi- I R 1) Sulamispiste merkki K4 2) Liukoisuus 48 78106 47 CH, 1) Vaaleanruske jauhe

5 | 3 sp noin 215°C

c tpli ^ /\ 2) °'6 %:n vesiliuos \ hydrokloridina 48 . 1) Keltainen jauhe

-5-S TJ-CH, sp noin 170°C

10 \__/ 3 - 2) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina 49 . 1) Vaaleanruskea jauhe

-S-/N, sp noin 175°C

2) 1 %:n vesiliuos 15 \ / hydrokloridina CH2CH3 50 -S-(CH,),N-(CH,)9N(CH,)9 1) Keltainen jauhe

2 2| 22 32 sp noin 160°C

20 0H3 2\ 1 %:n vesiliuos 51 -S-CH[CH_N(CH,)«]9 1) Vaaleanruskea jauhe

2 3 2 2 sp noin 190°C

2) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina 25 52 χ. 1) Vaaleanruskea jaune

-S(CH0),-N N-CH- sp. noin 170°C

2 2 \ / 3 - 2) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina 53 --s 1) Vaaleanruskea jauhe

-S(CH0),-N N-CH, sp noin 190 C

30 2 3 y 3 c 2) 10 %:n vesiliuos .

hydrokloridina «s 7810 6

Viite-esi- ΓΓ _ merkki \ ί Sulamispiste ____'___L> Liukoisuus 54 -S-CH,-CH-CH_-N(CH,), 1) Okranvärinen jauhe

2 | 2 ® 3 3 sp noin 150°C

5 CH1 3 2 M %:n vesiliuos _ hydrokloridina 55 -5(CH,),S0_H 1) Keltainen jauhe

2 2 i sp > 280°C

2)5 %:n vesiliuos 10 Viite-esimerkki 56 3 50 cm ;ssa etanolia, johon on lisätty 0,34 g natrium-metylaattia, olevaan 0,87 g:n 1-(2-merkapto-propyyli)-4-me-tyyli-piperatsiini-liuokseen lisätään 50 cm3:ssa metyleeni-kloridia oleva 5,2 g:n (4-metyyli-fenyyli)-5$ -sulfonyylioksi-15 metyleeni-pristinamysiini IA-liuos, Reaktioseosta sekoitetaan 16 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka 3 jälkeen se laimennetaan 500 cm :11a metyleenikloridia ja 3 100 cm :11a tislattua vettä. Sekoittamisen jälkeen vesifaasi 3 uutetaan 2 kertaa yhteensä 50 cm :11a metyleenikloridia. Orgaa-20 niset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan, jonka jälkeen tuote haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa. Jäännös puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 97,5:2,5). Fraktiot 33-80 yhdistetään ja haih-25 dutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa.

Täten saadaan 1,25 g jjJ-(4-metyyli-1piperatsinyyli)-2-pro-pyyli 1 -5-tiometyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 195°C.

NMR-spektri: 30 0,70 (dd, 1H : 5&2) 1,25 (d, 3H : -CH-CK^ 2,30 (s, 3H : J>N-CH3) 2,50 (m, 10K : -CH_-N ‘ “ N-CK- )

XCH-CH. ^ J

35 · -2 "2 3,40 (dd, 1H : 5e„)

X

7,S5 (dd leveä, 1H : l'H6) 50 7 8 1 06

Saadaan [3-(4-metyyli-1-piperatsinyyli)-2-propyyliJ -5 -tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAN) 10 %:n vesi-liuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta AAN 0,03 g 3 5 0,1N hydrokloorihappoa 0,3 cm 1-(2-merkaptso-propyyli)-4-metyyli-piperatsiiniä valmistetaan kuumentamalla 100°C:ssa 16 tunnin ajan seosta, joka si-3 3 sältää 19 cm propyleenisulfidia ja 29 cm N-metyylipiperat-siinia. Täten saadaan 32 g väritöntä öljyä, joka tislautuu 10 105°C:ssa paineen ollessa 1,3 kPa.

(4-metyyli-fenyyli)-5 «S -sulfonyylioksimetyleeni-pristinamy- siiniä IA voidaan saada seuraavalla tavalla: 3 30 cm :ssa metyleenikloridia olevaan 2,7 g:n 5 $ -hydroksimetyleeni-pristinamysiini IA-liuokseen lisätään 0,42 15 cm3 trietyyliamiinia lämpötilan ollessa -30°C:n tienoilla, ja sen jälkeen 0,57 g p-tolueenisulfonihapon kloridia. Reaktio-seos sekoitetaan tämän jälkeen 2 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, jonka jälkeen seos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa; saatu jäännös 20 puhdistetaan "flash"-kromatografisesti (eluentti: metyleeni-kloridi-metanoli, tilavuussuhteessa 96:4). Sen jälkeen kun fraktiot 4-6 on haihdutettu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa, saadaan 2,2 g (4-metyyli-fenyyli)-5 $-sulfo-nyylioksimetyleeni-pristinamysiiniä IA valkeana jauheena, jonka 25 sulamispiste on noin 265°C.

NMR-spektri: 0,50 (dd, 1H : 58^ 2,35 (s, 3H : ~so2~<^ ^>~% ) 30 3,30 (dd, 1H : 5ε2> 5,25 (d, 1H : 5a) . 5,30 (dd, 1H : 5εχ) 7 35 l 7,90 Cjärjestelmä* ^ SH . ώδ* 4e *

’ AB

35 -so:-<^ZS-CH3 5

: 7,85 (dd, 1H : l’H6) H

si 78106 5 <5 -hydroksimetyleeni-pristinamysiiniä IA voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 3 420 cm :een hydrokloorihapon 0,1N vesiliuokseen lisätään 10,6 g 55 -dimetyyliaminometyleeni-pristinamysiiniä IA sekoit-5 taen. Tämän jälkeen saatua liuosta sekoitetaan 3 tunnin ajan lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla. Sitten lisätään ti - 3 pottain 30 cm natriumbikarbonaatin kylläistä vesiliuosta siten, että pH:ksi saadaan liki 4. Saostuva tuote erotetaan suo- 3 dattamalla, jonka jälkeen se pestään 3 kertaa yhteensä 30 cm :11a 10 tislattua vettä. Sen jälkeen kun tuote on kuivattu alennetussa paineessa (2,7 kPa) lämpötilassa, joka on 20°C:n tienoilla, saadaan 9,5 g 56 -hydroksimetyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena. Laadultaan tämä tuote on riittävää käytettäväksi sellaisenaan myöhemmissä vaiheissa. Se voidaan kui-15 tenkin puhdistaa seuraavasti: 9,5 g raakaa 55-hydroksimetyleeni-pristinamysiiniä IA 3 liuotetaan 50 cm :een etyyliasetaattia; saatu liuos kaadetaan 100 g silikageelin päälle, joka geeli on halkaisijaltaan 2,8 3 cm:n kolonnissa. Ensin eluoidaan 400 cm :11a etyyliasetaattia, 20 jolloin vastaava eluaatti heitetään pois; tämän jälkeen eluoi- 3 daan 1600 cm :11a etyyliasetaattia, ja vastaava eluaatti haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 30°C:ssa.

Täten saadaan 6,3 g 55 -hydroksi-metyleeni-pristinamysiiniä IA valkeina kiteinä, joiden sulamispiste on 220°C.

25 NMR-spektri: 0,69 (dd, 1H : 502) 2,43 (d, 1H : 5βχ) 3,40 (d, 1H : 5c2) 3 q 4,0 ä UJi (m, 3H : 4α + 5ε^ + 5α) 8,15 (s, 1H : =CH-0H) 11,63 (s leveä, 1H : =CH-0H) 52 78106

Viite-esimerkki 57

Toimien analogisesti viite-esimerkissä 56 esitetyllä tavalla saadaan 1 g (3-dimetyyliamino-2^propyyli)56 -tiome-tyleeni-pristinamysiiniä IA keltaisena jauheena, jonka sula-5 mispiste on 172°C. Saadaan (3-dimetyyliamino-2-propyyli)-56 -tiometyleeni-pristinamysiinin IA (tuote AAO) 5 %:n vesiliuos hydrokloridina.

Viite-esimerkki 58

Toimien analogisesti viite-esimerkissä 56 esitetyllä 10 tavalla saadaan 1,32 g (5-dietyyliamino-2-pentyyli)-5 <5 - tiometyleeni-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 185°C.

Saadaan (5-dietyyliamino-2-pentyyli)-5 δ -tiometyleeni-pristinamysiinin (tuote AAP) 10 %:n vesiliuos hydrokloridina.

15 Viite-esimerkki 59 60 cm :ssa tetrahydrofuraania oleva 7,6 g:n 5«5 - £(4-metyyli-fenyyli)-sulfonyylioksimetyleeni3 -pristinamysiini IA-liuos jäähdytetään -10°C:n tienoilla olevaan lämpötilaan.

3 Tähän lisätään hitaasti tämä lämpötila säilyttäen 60 cm :ssa 20 tetrahydrofuraania, johon on lisätty 0,35 g mineraaliöljyssä · olevaa natriumhydridin 50 %:sta dispersiota, oleva 0,65 g:n 2-dimetyyliamino-etanoli-liuos. Lisäyksen lopussa lämpötilan annetaan hitaasti kohota 20°C:n tienoilla. Reaktioseosta sekoitetaan tässä lämpötilassa 24 tunnin ajan, jonka jälkeen se 3 25 laimennetaan 500 cm :11a metyleenikloridia ja pestään 2 kertaa 3 50 cm :11a ammoniumkloridin kylläisellä liuoksella. Orgaaninen faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan, jonka jälkeen se haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40°C:ssa. Saatu jäännös puhdistetaan ”flash"-kromatografisesti 30 (eluentti: kloroformi-metanoli, tilavuussuhteessa 95:5). Fraktiot 12-17 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 25°C:ssa. Täten saadaan 1,5 g 56-(2-dime-tyyliamino-etoksimetyleeni)-pristinamysiiniä IA vaaleanruskeana jauheena, jonka sulamispiste on noin 160°C.

li 53 781 06 NMR-spektri : 0,65 (dd, 1H : 5f*2) 2,3 (s, 6H : -N(CH3)2) 2,65 (m, 2H : -CH2N< ) 5 3,42 (dd, 1H : 5fi2) 4.15 (t, 2H : -OCH2~) 5.15 (d, 1H : 5εχ) 7,45 (aromaateilla, 1H : ^-C=CHO-) 7,80 (dd, 1H : l'Hg) 10

Saadaan 5&-(2-dimetyyliamino-etoksimetyleeni)pristi-namysiinin IA (tuote AAQ) 1 %:n vesiliuos hydrokloridina, joka liuos sisältää: tuotetta AAQ 0,03 g 15 0,1N hydrokloridihappoa 0,3 cm tislattua vettä 3 cm^ (=lopputilavuus).

Claims (4)

1. 54 78106 Patenttivaatimus Menetelmä uusien mikrobinvastaisten pristina-mysiini ΙΙβ-johdannaisten valmistamiseksi, joilla on 5 kaava I O Jk CH3 v J L Λ O CH,
2. 10 Ai? 1 CH -° 3 r/ 15 isomeereinä ja niiden seoksina, jossa kaavassa R on alkyylitioradikaali, joka on substi-tuoitu yhdellä tai kahdella dialkyyliaminoryhmällä tai yhdellä 1-pyrrolidinyyli-, 2-piperidino- tai 4-metyyli-20 1-piperatsinyyliryhmällä, tai R on radikaali, jolla on kaava II Het-S- Il 25 jossa Het on l-metyyli-4-piperidinyyliryhmä, tai R on dialkyyliamino- tai 4-metyyli-l-piperatsinyyli-ryhmä, jolloin alkyyliradikaalit ja -osat sisältävät 1-5 hiiliatomia ja ovat suoraketjuisia tai haarautuneita, 30 sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happo- additiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava III R-H III jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan pristinamysiini IIA:n kanssa, jolla on kaava IV 35 78106 55 O CH3 ίο CHo ^-0 minkä jälkeen isomeerit tarvittaessa erotetaan, ja että 15 saatu yhdiste haluttaessa muutetaan additiosuolaksi farmaseuttisesti hyväksyttävän hapon kanssa. 56 781 06 Förfarande för framställning av nya antimikro-biella pristinamycin Ilg-derivat med formeln I 5 O ^ »H °" ch3^ j il
3. 0 CH.J
4. 10 In o 3 Γ i ε"3νγ ' ^o^N— N y) ch_ y il—o 15. form av isomerer eller deras blandning, i vilken formel R är en alkyltioradikal, vilken är substituerad med en eller tvä dialkylaminogrupper eller en 1-pyrrolidinyl-, 2-piperidino- eller 4-metyl-l-piper-azinylgrupp, 20 eller R är en radikal med formeln II Het-S II väri Het är en l-metyl-4-piperidinylgrupp, 25 eller R är en dialkylamino-eller 4-metyl-l-piperazinyl- grupp, varvid alkylradikalerna och -delarna innehäller 1-5 kolatomer och har en rak eller förgrenad kedja, samt deras farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter, kännetecknat därav, att en förening med 30 formeln III R-H III väri R har ovan angiven betydelse, omsätts med pristinamycin IIA med formeln