CN103360463B - 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法 - Google Patents

一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103360463B
CN103360463B CN201210105033.3A CN201210105033A CN103360463B CN 103360463 B CN103360463 B CN 103360463B CN 201210105033 A CN201210105033 A CN 201210105033A CN 103360463 B CN103360463 B CN 103360463B
Authority
CN
China
Prior art keywords
dalfopristin
aqueous solution
organic solvent
acidity
volume
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201210105033.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103360463A (zh
Inventor
张福利
赵传猛
尹明星
陈丽娟
肖立
吴建超
杨小虎
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Priority to CN201210105033.3A priority Critical patent/CN103360463B/zh
Priority to PCT/CN2013/073619 priority patent/WO2013152688A1/zh
Publication of CN103360463A publication Critical patent/CN103360463A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103360463B publication Critical patent/CN103360463B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/265—Adsorption chromatography

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及化学领域中一种有机化合物的分离纯化方法，具体来说，本发明涉及一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法。本发明的方法经济高效，对达福普汀或达福普汀中间体粗品中的异构体杂质有非常好的选择性和分离效果，进行一次分离纯化就可得到＞99％纯度的达福普汀或达福普汀中间体产品，且收率高。

Description

一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法
技术领域
本发明涉及化学领域中一种有机化合物的分离纯化方法，具体来说，本发明涉及一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法。
背景技术
达福普汀(Dalfopristin)为链阳菌素普那霉素IIA的半合成衍生物，达福普汀和奎奴普丁(Quinupristin)以70/30(w/w)比例组成的抗生素协同复合制剂于1999年9月首次上市，商品名：主要用于治疗成人致命性耐万古霉素屎肠球菌(VREF)菌血症相关性感染、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及化脓性链球菌引起的皮肤及软组织感染。达福普汀的结构式如式I所示。
达福普汀的制备方法描述在FR2576022、US4866172、GB2206577A、US5347001和EP0135410。所合成的达福普汀，需经分离纯化后，方可达到药用标准的纯度。其分离纯化的方法描述在US4590004、EP0248703A1和EP0135410A1中，使用快速柱色谱装置(flashchromatography)，40-53μm的硅胶填料，流动相使用氯仿/甲醇混合液，对达福普汀进行制备分离，快速柱色谱装置对设备要求高，不宜放大生产，且流动相使用氯仿和甲醇，毒性较大且容易造成环境污染；US5326782中，使用L-DTTA与达福普汀成盐后结晶纯化，但是达福普汀的提取步骤繁琐，且容易造成达福普汀中L-DTTA的残留问题。张雪霞等，大孔吸附树脂分离纯化普那霉素的研究(化学与生物工程，2011，28(6)，40-42)公开了采用大孔吸附树脂分离纯化普那霉素的方法，该方法为“将普那霉素发酵液预处理后，以大孔吸附树脂XAD1600作吸附剂，在吸附流速为2BV/h的条件下进行吸附，再用40％乙醇-60％酸水(含0.1％的乙酸，下同)进行洗脱，去除色素和杂质，最后用90％乙醇-10％酸水以0.5BV/h流速进行洗脱，得到普那霉素”。虽然此方法对纯化普那霉素复方制剂有一定效果，但是普那霉素仅为达福普汀的前期原料，其物理和化学性质与经过化学修饰后的达福普汀有非常大的区别，达福普汀由于增加了酯溶性基团和一个叔胺，其极性大大增加，使其纯化难度也大幅度增加，因此，树脂纯化效率和方式也与普那霉素有非常大的差别；更重要的是，普那霉素为一复方制剂，此方法纯化后的普那霉素中含有30％的普那霉素I(又包括PIA、PIB和PIC)和70％的普那霉素II(又包括PIIA、PIIB和PIIC)，而无法得到高纯度的单一活性物质，而达福普汀则为纯度＞99％单一物质，因此，要想得到高纯度的达福普汀，还需要开发一条更高效和经济的纯化方法。
达福普汀是由达福普汀中间体26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB经过氧化反应所得到，26-(-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB的结构式如式II所示。
达福普汀中间体26-(-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB的制备分离方法描述在EP191662、US4590004中，使用快速柱色谱装置(flashchromatography)，40-53μm的硅胶填料，流动相使用氯仿/甲醇混合液，对26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB进行制备分离。
相比本发明的技术，现有技术有如下缺点：1)使用快速柱色谱装置，设备要求高，操作难度大；2)快速柱色谱装置的成本较高，不宜进行放大生产；3)流动相使用氯仿和甲醇，毒性较大且容易造成环境污染。因此，现有技术在工业生产中成本较高，产生较多的三废，也提高了操作的难度，很难进行大规模的工业生产；所以需要进一步研究适合工业化生产的达福普汀、达福普汀中间体的分离纯化方法和工艺条件。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种达福普汀或达福普汀中间体的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：
1)取达福普汀或达福普汀中间体粗品，采用湿法或干法上样大孔吸附树脂柱。
2)用酸性或中性水溶液冲洗大孔吸附树脂柱，再用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质；或者用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质。
3)用体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液洗脱达福普汀或达福普汀中间体，收集洗脱液，将收集的洗脱液浓缩除去有机溶剂后，用饱和碳酸氢钠调节PH值为6.8～8，再用二氯甲烷萃取，得含达福普汀或达福普汀中间体的二氯甲烷溶液。
4)除去步骤3)中所得的产物中的二氯甲烷，得达福普汀或达福普汀中间体产品。
在优选的实施方案中，其中所述的湿法上样是取达福普汀或达福普汀中间体粗品，溶于酸性或中性水溶液中，上样大孔吸附树脂柱。
在优选的实施方案中，其中达福普汀中间体优选为26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB。
在优选的实施方案中，其中所述的大孔吸附树脂优选自HP系列、H系列、Hz系列，更优选H-60、H-41、HP20SS、Hz832、Hz20SS、Hz818树脂。
在优选的实施方案中，其中所述的酸性或中性水溶液，优选为酸性水溶液。其中所述的酸性水溶液的PH值选自1.0～4.5，优选2.0～3.5。其中所述的酸性水溶液优选自盐酸水溶液、甲磺酸水溶液、醋酸水溶液、三氟醋酸水溶液、硫酸水溶液；更优选甲磺酸水溶液。其中所述的甲磺酸水溶液的PH值优选自1.0～4.5，更优选2.0～3.5。
在优选的实施方案中，其中所述的有机溶剂优选自甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、异丙醇，更优选乙腈、乙醇、丙酮，最优选为乙腈。
在优选的实施方案中，其中所述的体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液优选体积百分比为10％～20％的有机溶剂的酸性或中性水溶液。
在优选的实施方案中，粗品样品量和大孔吸附树脂体积比优选自1∶10～1∶300(克：毫升)，更优选1∶50～1∶150(克：毫升)
本发明的目的在于提供了一种达福普汀或达福普汀中间体的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：
1)取达福普汀或达福普汀中间体粗品，采用湿法或干法上样大孔吸附树脂柱。
2)用酸性或中性水溶液冲洗大孔吸附树脂柱，再用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质；或者用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质。
3)用体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液洗脱达福普汀或达福普汀中间体，收集洗脱液，将收集的洗脱液浓缩除去有机溶剂后，用饱和碳酸氢钠调节PH值为6.8～8，再用二氯甲烷萃取，得含达福普汀或达福普汀中间体的二氯甲烷溶液。
4)将步骤3)中所得的产物去除体积百分比为70％～95％的二氯甲烷后滴加反溶剂，析出固体，过滤得达福普汀或达福普汀中间体产品。
在优选的实施方案中，其中所述的湿法上样是取达福普汀或达福普汀中间体粗品，溶于酸性或中性水溶液中，上样大孔吸附树脂柱。
在优选的实施方案中，其中达福普汀中间体优选为26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB。
在优选的实施方案中，其中所述的大孔吸附树脂优选自HP系列、H系列、Hz系列，更优选H-60、H-41、HP20SS、Hz832、Hz20SS、Hz818树脂。
在优选的实施方案中，其中所述的酸性或中性水溶液，优选为酸性水溶液。其中所述的酸性水溶液的PH值选自1.0～4.5，优选2.0～3.5。其中所述的酸性水溶液优选自盐酸水溶液、甲磺酸水溶液、醋酸水溶液、三氟醋酸水溶液、硫酸水溶液；更优选甲磺酸水溶液。其中所述的甲磺酸水溶液的PH值优选自1.0～4.5，更优选2.0～3.5。
在优选的实施方案中，其中所述的有机溶剂优选自甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、异丙醇，更优选乙腈、乙醇、丙酮，最优选为乙腈。
在优选的实施方案中，其中所述的体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液优选体积百分比为10％～20％的有机溶剂的酸性或中性水溶液。
在优选的实施方案中，粗品样品量和大孔吸附树脂体积比优选自1∶10～1∶300(克：毫升)，更优选1∶50～1∶150(克：毫升)
在优选的实施方案中，其中所述的反溶剂优选自乙醚、环己烷、正己烷、戊烷、庚烷、石油醚、甲苯。
本发明优选的实施方案更详细地包括以下步骤：
1)上样：
将达福普汀或达福普汀中间体粗品溶于酸性或中性水溶液中，上样大孔吸附树脂。
2)洗脱：
杂质的洗脱：用酸性或中性水溶液冲洗树脂柱，再用数倍树脂体积的体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质。酸性或中性水溶液与上样时采用相同配置。
达福普汀或达福普汀中间体的洗脱：
用体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液洗脱达福普汀或达福普汀中间体，酸性或中性水溶液与上样时采用相同配置。
3)收集洗脱液，经处理洗脱液得到达福普汀或达福普汀中间体：
收集洗脱液，经高效液相确认洗脱液纯度，合并符合要求的洗脱液，浓缩除去有机溶剂，用饱和碳酸氢钠调节PH值为6.8～8，再用二氯甲烷萃取，得到的二氯甲烷萃取液干燥后，蒸出体积百分比70％～95％的溶剂，滴加反溶剂，析出固体，过滤得达福普汀或达福普汀中间体产品。
其中在上样步骤中所述的大孔吸附树脂优选自HP系列、H系列、Hz系列等极性或非极性大孔吸附树脂。大孔吸附树脂优选自颗粒度为50目以上，优选H-60、H-41、HP20SS、Hz832、Hz20SS、Hz818树脂。所述的粗品上样质量和大孔吸附树脂体积用量的比优选自1∶10～1∶300(克：毫升)，更优选自1∶50～1∶150(克：毫升)。
其中在上样、洗脱步骤中所述的酸性或中性水溶液，优选为酸性水溶液。其中所述的酸性水溶液的PH值选自1.0～4.5，优选2.0～3.5。其中所述的酸性水溶液优选自盐酸水溶液、甲磺酸水溶液、醋酸水溶液、三氟醋酸水溶液、硫酸水溶液；更优选甲磺酸水溶液。其中所述的甲磺酸水溶液的PH值优选自1.0～4.5，更优选2.0～3.5。
其中在洗脱步骤中所述的有机溶剂优选自甲醇、丙酮、乙腈、乙醇、异丙醇。更优选自乙醇、甲醇、乙腈、丙酮。最优选为乙腈。
其中在达福普汀或达福普汀中间体的洗脱步骤中，所述的体积百分比为10％～50％有机溶剂的酸性或中性水溶液优选体积百分比为10％～20％有机溶剂的酸性或中性水溶液。
本发明中所述的达福普汀中间体粗品可按已知文献EP191662和US4590004描述方法制备。达福普汀粗品可按已知文献US5347001描述方法制备。
本发明的优点在于：
相对于EP191662和US4590004中描述的快速柱色谱纯化方法，本发明采用大孔吸附树脂，操作简单，分离度高，分离所得产品可达到药用标准的纯度，能够方便地同比例放大，易于工业化生产；相对于张雪霞等，大孔吸附树脂分离纯化普那霉素的研究(化学与生物工程，2011，28(6)，40-42)公开的采用大孔吸附树脂分离纯化普那霉素的方法，该方法只能得到普那霉素复合物(含有30％普那霉素I和70％普那霉素II)，而无法得到高纯度的单一活性物质，本发明经济高效，对达福普汀或达福普汀中间体粗品中的异构体杂质有非常好的选择性和分离效果，进行一次分离纯化就可得到＞99％纯度的单一组分的达福普汀或达福普汀中间体产品，且收率高；大孔吸附树脂具有可再生性，经洗涤活化后可不断重复使用，大大降低了环境污染；使用的大部分洗脱溶剂为水，既降低了成本，也减少了对环境的污染；另外大孔吸附树脂所用设备为普通玻璃柱，设备要求低，操作简单，安全而高效。
具体实施方式
下面的实施例将阐明本发明，但不意味着对本发明有任何限制。
下面的实施例中二氯甲烷简称为：DCM。
下面的实施例中，洗脱液中的“％”表示体积百分比。
实施例1：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；再由10％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.43g达福普汀，纯度99.4％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例2：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由10％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.41g达福普汀，纯度99.2％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例3：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；再由20％乙醇的PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；由45％乙醇的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙醇，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.38g达福普汀，纯度99.0％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例4：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；再由20％丙酮的PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；由45％丙酮的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出丙酮，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.42g达福普汀，纯度99.0％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例5：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的盐酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的盐酸水溶液400ml冲洗；再由20％丙酮的PH＝3的盐酸水溶液400ml冲洗；由45％丙酮的PH＝3的盐酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出丙酮，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.42g达福普汀，纯度99.1％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例6：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的硫酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由10％乙腈的PH＝3的硫酸水溶液400ml冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的硫酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.40g达福普汀，纯度98.2％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例7：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的三氟醋酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由10％乙腈的PH＝3的三氟醋酸水溶液400ml冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的三氟醋酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.39g达福普汀，纯度99.1％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例8：
取H-60树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由10％乙腈水溶液800ml冲洗；由35％乙腈水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸至剩余3～5ml，冰浴下加入乙醚，析出白色固体，过滤得0.35g达福普汀，纯度98.1％。
结晶滤液蒸干溶剂后回收套用。
实施例9：
取HP20SS树脂80ml装柱。
取达福普汀粗品(纯度85％)1g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液30ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；再由10％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液400ml冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱达福普汀产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得0.71g达福普汀，纯度99.1％。
实施例10：
按实施例1的方法，采用树脂HP20SS(80ml)对达福普汀粗品(纯度85％，1g)进行纯化，得到0.45g达福普汀，纯度99.4％。
实施例11：
按实施例1的方法，采用树脂HZ20SS(80ml)对达福普汀粗品(纯度85％，1g)进行纯化，得到0.40g达福普汀，纯度98.9％。
实施例12：
按实施例1的方法，采用树脂H-41(80ml)对达福普汀粗品(纯度85％，1g)进行纯化，得到0.37g达福普汀，纯度98.9％。
实施例13：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；再由10％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.6g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度99.1％。
实施例14：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)5g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液150ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液1L冲洗；再由5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液1L冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得3.3g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度98.9％。
实施例15：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由10％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.6g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度99.0％。
实施例16：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；再由15％乙醇的PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；由45％乙醇的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙醇，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.5g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度98.6％。
实施例17：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；再由10％丙酮的PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；由12.5％丙酮的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出丙酮，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.6g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度99.0％。
实施例18：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的盐酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的盐酸水溶液1.2L冲洗；再由10％丙酮的PH＝3的盐酸水溶液1.2L冲洗；由12.5％丙酮的PH＝3的盐酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出丙酮，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.6g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度98.5％。
实施例19：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的三氟醋酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由10％乙腈的PH＝3的三氟醋酸水溶液1.2L冲洗；由12.5％乙腈的PH＝3的三氟醋酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.5g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度99.1％。
实施例20：
取H-60树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由去离子水1.2L冲洗；再由20％乙腈水溶液1.2L冲洗；由45％乙腈水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙腈，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.1g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度98.1％。
实施例21：
取HP20SS树脂300ml装柱。
取26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％)4g，溶于PH＝3的甲磺酸水溶液120ml中。上样树脂柱，流速1BV/h。
由PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；再由15％乙醇的PH＝3的甲磺酸水溶液1.2L冲洗；由45％乙醇的PH＝3的甲磺酸水溶液洗脱26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB产品，合并较纯部分，蒸出乙醇，冰浴下由饱和NaHCO3调节PH值为7.5，由DCM萃取，Na2SO4干燥，过滤，蒸干得2.3g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度98.8％。
实施例22：
按实施例13的方法，采用树脂HP20SS(300ml)对26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％，4g)进行纯化，得到2.7g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度99.1％。
实施例23：
按实施例13的方法，采用树脂HZ20SS(300ml)对26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％，3g)进行纯化，得到1.9g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度98.3％。
实施例24：
按实施例13的方法，采用树脂H-41(300ml)对26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB粗品(纯度75％，3g)进行纯化，得到1.7g26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB，纯度97.9％。

Claims (18)

1.一种达福普汀或达福普汀中间体的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：
1)取达福普汀或达福普汀中间体粗品，采用湿法或干法上样大孔吸附树脂柱；
2)用酸性或中性水溶液冲洗大孔吸附树脂柱，再用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质；或者用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质；
3)用体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液洗脱达福普汀或达福普汀中间体，收集洗脱液，将收集的洗脱液浓缩除去有机溶剂后，用饱和碳酸氢钠调节PH值为6.8～8，再用二氯甲烷萃取，得含达福普汀或达福普汀中间体的二氯甲烷溶液；
4)除去步骤3)中所得的产物中的二氯甲烷，得达福普汀或达福普汀中间体产品；
其中所述的酸性水溶液的PH值选自1.0～4.5。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的湿法上样是取达福普汀或达福普汀中间体粗品，溶于酸性或中性水溶液中，上样大孔吸附树脂柱，其中所述的酸性水溶液的PH值选自1.0～4.5。
3.根据权利要求1、2任一项所述的方法，其中所述的达福普汀中间体为26-(2-二乙氨基乙基)-硫基普那霉素IIB。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述的大孔吸附树脂选自HP系列、H系列、Hz系列。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述的大孔吸附树脂选自H-60、H-41、HP20SS、Hz832、Hz20SS、Hz818树脂。
6.根据权利要求1、2任一项所述的方法，其中所述的酸性或中性水溶液，优选为酸性水溶液，其中所述的酸性水溶液的PH值选自2.0～3.5。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述的酸性水溶液选自盐酸水溶液、甲磺酸水溶液、醋酸水溶液、三氟醋酸水溶液、硫酸水溶液。
8.根据权利要求6所述的方法，其中所述的酸性水溶液为甲磺酸水溶液。
9.根据权利要求7、8任一项所述的方法，其中所述的甲磺酸水溶液的PH值选自1.0～4.5。
10.根据权利要求7、8任一项所述的方法，其中所述的甲磺酸水溶液的PH值选自2.0～3.5。
11.根据权利要求1所述的方法，其中所述的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、异丙醇。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述的有机溶剂选自乙腈、乙醇、丙酮。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述的有机溶剂为乙腈。
14.根据权利要求1所述的方法，其中所述的体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液优选体积百分比为10％～20％的有机溶剂的酸性或中性水溶液。
15.根据权利要求1所述的方法，粗品样品量和大孔吸附树脂体积比选自1∶10～1∶300(克∶毫升)。
16.根据权利要求1所述的方法，粗品样品量和大孔吸附树脂体积比选自1∶50～1∶150(克∶毫升)。
17.一种达福普汀或达福普汀中间体的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：
1)取达福普汀或达福普汀中间体粗品，采用湿法或干法上样大孔吸附树脂柱；
2)用酸性或中性水溶液冲洗大孔吸附树脂柱，再用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质；或者用体积百分比为5％～30％的有机溶剂的酸性或中性水溶液冲洗，除去达福普汀或达福普汀中间体中含有的杂质；
3)用体积百分比为10％～50％的有机溶剂的酸性或中性水溶液洗脱达福普汀或达福普汀中间体，收集洗脱液，将收集的洗脱液浓缩除去有机溶剂后，用饱和碳酸氢钠调节PH值为6.8～8，再用二氯甲烷萃取，得含达福普汀或达福普汀中间体的二氯甲烷溶液；
4)将步骤3)中所得的产物去除体积百分比为70％～95％的二氯甲烷后滴加反溶剂，析出固体，过滤得达福普汀或达福普汀中间体产品；
其中所述的酸性水溶液的PH值选自1.0～4.5。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述的反溶剂选自乙醚、环已烷、正已烷、戊烷、庚烷、石油醚、甲苯。
CN201210105033.3A 2012-04-08 2012-04-08 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法 Active CN103360463B (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210105033.3A CN103360463B (zh) 2012-04-08 2012-04-08 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法
PCT/CN2013/073619 WO2013152688A1 (zh) 2012-04-08 2013-04-02 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210105033.3A CN103360463B (zh) 2012-04-08 2012-04-08 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103360463A CN103360463A (zh) 2013-10-23
CN103360463B true CN103360463B (zh) 2016-06-08

Family

ID=49327093

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210105033.3A Active CN103360463B (zh) 2012-04-08 2012-04-08 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN103360463B (zh)
WO (1) WO2013152688A1 (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4590004A (en) * 1983-07-13 1986-05-20 Rhone-Poulenc Sante Pristinamycin derivatives, their preparation and their use
GB2206577A (en) * 1987-07-07 1989-01-11 May & Baker Ltd New process for the preparation of therapeutically useful pristinamycin IIB sulphone derivatives

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4590004A (en) * 1983-07-13 1986-05-20 Rhone-Poulenc Sante Pristinamycin derivatives, their preparation and their use
GB2206577A (en) * 1987-07-07 1989-01-11 May & Baker Ltd New process for the preparation of therapeutically useful pristinamycin IIB sulphone derivatives

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
大孔吸附树脂分离纯化普那霉素的研究;张雪霞等;《化学与生物工程》;20110630;第28卷(第6期);参见第40-42页，尤其是第41页左栏第1-3段 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2013152688A1 (zh) 2013-10-17
CN103360463A (zh) 2013-10-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106008341B (zh) 一种苯磺酸顺曲库铵的纯化方法
CN102443012B (zh) 一种从发酵液中提纯雷帕霉素的方法
KR20130059455A (ko) 사이클릭 리포펩타이드 화합물 또는 그의 염의 정제방법
CN103664989A (zh) 一种用尼莫克汀发酵液制备莫西克汀的方法
CN108017530B (zh) 一种从菌渣中连续分离辅酶q10的方法
CN109206441A (zh) 一种依维莫司的纯化方法
CN109867663A (zh) 一种用制备色谱分离金黄霉素a和金黄霉素b的方法
CN101987815A (zh) 一种制备高纯度辅酶q10的纯化工艺
CN106478781B (zh) 卡泊芬净的制备方法
RU2014112957A (ru) Способ выделения ингенола
CN104844620A (zh) 一种雷帕霉素的分离纯化方法
CN102070647B (zh) 一种从银杏内酯混合物中分离银杏内酯b的方法
CN102558006B (zh) 一种分离维生素d3和速甾醇t3的方法
CN102304163A (zh) 一种倍他米松上氟合成方法
CN102153616A (zh) 一种环己肽类化合物及其盐的分离纯化方法
CN104628801A (zh) 一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺
CN103360463B (zh) 一种达福普汀及其中间体的分离纯化方法
CN102276570B (zh) 一种提纯表没食子儿茶素没食子酸酯（egcg）的方法
CN116375784A (zh) 一种分离猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸的方法
CN103965156A (zh) 一种用于天然维生素e提纯的柱层析法
CN102633846A (zh) 一种林可霉素纯化方法
CN103508876A (zh) 模拟移动床分离提纯epa的方法
CN113578272A (zh) 具有大孔径和超大孔容的有序zif-8基介孔碳材料及其制备方法和应用
CN105819444A (zh) 复合型活性炭及其在纯化他克莫司中的应用
CN104072504A (zh) 一种从莲叶桐中提取纯化莲叶桐碱的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Zhang Fuli

Inventor after: Zhao Chuanmeng

Inventor after: Zhang Yonggang

Inventor after: Yin Mingxing

Inventor after: Chen Lijuan

Inventor after: Xiao Li

Inventor after: Wu Jianchao

Inventor after: Yang Xiaohu

Inventor before: Zhang Fuli

Inventor before: Zhao Chuanmeng

Inventor before: Yin Mingxing

Inventor before: Chen Lijuan

Inventor before: Xiao Li

Inventor before: Wu Jianchao

Inventor before: Yang Xiaohu

COR Change of bibliographic data